CZ2001905A3

CZ2001905A3 - Kombinace acetyldinalinu s gemcitabinem, capecitabinem nebo cisplatinou pro chemoterapii nádorů

Info

Publication number: CZ2001905A3
Application number: CZ2001905A
Authority: CZ
Inventors: William Richard Grove; Wayne Daniel Klohs; Ronald Lynn Merriman
Original assignee: Warner-Lambert Company
Priority date: 1998-09-25
Filing date: 1999-07-08
Publication date: 2001-08-15
Also published as: AU5092199A; SK3602001A3; AU762079B2; EP1115391A1; ES2185378T3; ZA200102233B; OA11659A; CA2342981A1; NO20011493L; BR9913952A; HUP0103640A3; IL141951A0; WO2000018393A1; HK1040190A1; NZ510504A; YU22401A; DE69903458T2; EP1115391B1; EA200100369A1; IS5888A

Description

Chometerapie--nédo-rů--poraoeí acetyldinalinu v--kerabirLaxii s gemcitabinem, capecitabinem nebo cisplatinou

Oblast techniky

Vynález se týká způsobu léčby nádorů za využití kombinace známých onkolytických látek. Společné použití látek poskytuje neočekávaně velkou účinnost než při použití jednotlivých látek samotných.

Dosavadní stav techniky

Chemoterapie nádorových onemocnění v posledních letech dramaticky pokročila. Mnoho nádorů může být efektivně léčeno za pomocí sloučenin, které jsou buď přirozeně se vyskytujícími produkty, nebo syntetickými látkami. V chemoterapii nádorových onemocnění se často používá kombinace látek obecně jako prostředků k poskytnutí větších terapeutických účinků a ke snížení toxických účinků, které se často vyskytují při použití jednotlivých látek, jsou-li používány samostatně.

Nyní jsme objevili jedinečnou kombinaci známých onkolytických látek, které vykazují dramatický synergistický efekt. Kombinace využívá látky acetyldinalinu spolu s buďto gemcitabinem, capecitabinem nebo cisplatinou. Kombinace je obzvláště účinná v léčbě pacientů se solidními nádory, zejména nemalobuněčnými nádory plic a dalšími pokročilými solidními nádory.

Acetyldinalin je 4-acetylamino-N-(2'- aminofenyl)-benzamid. Je také znám jako CI-994 . Je popsán v patentu US Patent č. 5137918, který je tímto začleněn jako reference k přípravě acetyldinalinu, jeho formulace do dávkovačích forem, a jak ho používat k léčbě nádorů jako jsou nádory tlustého střeva a adenokarcinomy. Je také popsán v patentu US Patent č. 5795909 jako možný konjugát pro léčbu nádorů.

• ·

Gemcitabin je generický název přiřazený 2'-deoxy-2',2 ' difluorocytidinu. Je komerčně dostupný jako monohydrochloridová sůl a jako β-izomer. Je také chemicky znám jako 1-(4-amino-2-oxo-lH-pyrimidin-l-yl)-2-desoxy-2,2difluororibosa. Gemcitabin je uváděn v patentech US Patents č. 4808614 a 5464826, které jsou tímto začleněny jako reference k tomu, jak syntetizovat, formulovat a používat gemcitabin v léčbě citlivých novotvarů. Komerční preparát gemcitabin hydrochlorid je indikován jako léčba první volby u pacientů lokálně pokročilými (neresekovatelnými nádory ve stádiu II nebo III), nebo metastatickými (stádium IV) adenokarcinomy pankreatu, a je běžně používán u pacientů dříve léčenými 5fluorouracilem.

Capecitabin je fluoroparimidin karbamát s antineoplastickou aktivitou. Je to perorálně podávaný systémový prolék 5'-deoxy5-fluorouridin (5-'DFUR), který je přeměněn na 5-fluorouracil. Chemický název capecitabinu je 5'-deoxy-5-fluoro-N[ (pentyloxy)karbonyl]-cytidin. Ve Spojených státech je na trhu pod názvem Xeloda^(tm> (Roche Laboratories) . Je indikován k léčbě pacientů s metastatickým nádorovým onemocněním prsu a kolorektálními nádory. Je obecně podáván po dobu 14 dnů, s následným 7-denním klidovým obdobím během každého 21-denního cyklu. Capecitabin je popsán v patentu US patent č. 5472949.

Cisplatina je generickým názvem pro cis-diaminodichloroplatinu a je popsána v patentu US patent č. 5562925, který je tímto začleněn jako reference. Cisplatina je komerčně dostupná a je indikována pro metastatické testikulární a ovariální nádory, stejně tak jako pokročilé nádory močového měchýře.

Cílem tohoto vynálezu je poskytnout způsob léčby nádorových onemocnění, obzvláště pokročilých solidních nádorů, pomocí kombinace obsahující acetyldinalin spolu s buďto gemcitabinem, capecitabinem nebo cisplatinou. Dalším cílem je poskytnout preparát obsahující synergistická množství acetyldiaminu a gemcitabinu, synergistická množství acetyldiaminu a capecitabinu, a synergistická množství acetyldiaminu a cisplatiny.

Popis vynálezu

Vynález se týká látek a způsobu synergistické léčby nádorů kombinace zahrnuj ící antineoplastických podání kombinace.

specifičtěj i

Vynález složku acetyldinalin, poskytuje preparát obsahující jako první capecitabin, nebo a jako druhou složku buďto cisplatinu.

gemcitabin,

Gemcitabin je používán přednostně jako farmaceuticky přijatelná kyselá adiční sůl.

Preparáty podle tohoto vynálezu jsou v principu složeny z výše uvedených aktivních složek, nebo jejich vhodných solí, spolu s běžnými excipientními látkami, ředícími látkami a nosiči.

Přednostní preparát obsahuje acetyldinalin, spolu s gemcitabin hydrochloridem. Další přednostní kombinací je acetyldinalin a cisplatina.

V další formě vynálezu poskytujeme způsob léčby nádorového onemocnění zahrnující podání účinného množství kombinace acetyldinalinu a buďto cisplatiny, nebo gemcitabinu, přednostně jako sůl, jako například hydrochlorid, živočichovi potřebujícímu tuto léčbu.

Přednostní způsob zahrnuje léčbu solidních nádorů.

Další přednostní způsob používá protinádorové množství acetyldinalinu a účinné množství gemcitabin hydrochloridu, capecitabinu, nebo cisplatiny k léčbě citlivých nádorů, zahrnujících nemalobuněčný nádor plic (NSCLC), nádor prsu, nádor vaječníků, nádor hlavy a krku, myelomy, nádory prostaty a slinivky břišní.

Další formou vynálezu je souprava obsahující v jednom oddíle dávku acetyldinalinu a v druhém oddíle dávku gemcitabinu, nebo jejich farmaceuticky přijatelnou sůl. Další formou vynálezu je souprava obsahující v jednom oddíle dávku acetyldinalinu a v druhém oddíle dávku capecitabinu nebo cisplatiny.

Popis obrázků

Na Obrázku	1	je	uvedeno
nádorů u myší	po	různých
(Cl-994).
Na Obrázku	2	je	uvedeno

zpomalení růstu transplantovaných perorálních dávkách acetyldinalinu zpomalení růstu transplantovaných intraperitoneálních injekcích nádorů u myši po různých gemcitabin hydrochloridu.

Na Obrázku 3 je uvedeno zpomalení růstu transplantovaných nádorů u myší po různé dávce kombinací acetyldinalinu a gemcitabin hydrochloridu (obě látky podané ve stejný čas).

Na Obrázku 4 je uvedeno zpomalení růstu transplantovaných nádorů u myší po různé dávce kombinací acetyldinalinu a gemcitabin hydrochloridu (gemcitabin je podán první následnou dávkou Cl-994).

Na Obrázku 5 je uvedena synergie mezi Cl-994 a gemcitabinem vůči buňkám lidského ovariálního karcinomu.

Detailní popis vynálezu

Sloučeniny využívané ve způsobu tohoto vynálezu budou podávány v dávkách běžně klinicky používaných. Takové dávky budou vypočítány normálním způsobem, např.

podle velikosti tělního povrchu.

Ácetyldinalin bude podáván například v dávkách od zhruba 1,0 mg/m² do zhruba 50 mg/m², přednostně od zhruba 2,0 mg/m² do zhruba 10,0 mg/m². Ácetyldinalin bude ideálně podáván v dávce, která vede k jeho plazmatickým hladinám od zhruba 5 do zhruba 100 ug/ml. Ácetyldinalin je typicky podáván perorálně, například jako kapsle obsahující aktivní kapsli v množství 2,5, 5,

5 mg na kapsli.

Ácetyldinalin bude podáván denně ve zhruba stejné dávce v průběhu léčebného období, typicky po dobu až dnů.

Léčebná období mohou být opakována podle posouzení ošetřujícím lékařem a podle konkrétního pacienta a onemocnění, které má být léčeno.

Gemcitabin bude podobně podáván v dávkách srovnatelných s dávkami rutinně klinicky používanými. Například úvodní dávka gemcitabinu, typicky ve formě hydrochloridové soli, bude zhruba 1000 mg/m² plochy povrchu těla. Tento produkt je rutinně formulován jako sterilní roztok a je podáván intravenózni infúzí, obecně po dobu zhruba 30 minut, podávány jsou zhruba 2 až 4 dávky týdně, s cykly opakovanými každých 28 až 30 dnů. Dávka 1000 mg/m² může být podávána podle tohoto léčebného režimu po dobu do zhruba 7 týdnů, nebo do zpozorováni nežádoucích vedlejších účinků. Mohou být použity i další formy soli, pokud je to požadováno, snadno lze připravit například hydrobromid, monofosfát, sulfát, malonát, citrát a sukcinát.

Capecitabin pro monoterapii je obecně podáván perorálně v dávce okolo 2500 mg/m² denně po dobu 2 týdnů s následným jednotýdenním obdobím bez léčby. Produkt je komerčně dodáván ve 150 mg a 500 mg tabletách. Tablety jsou během léčebného období podávány zhruba 1 až 4 krát denně. Denní dávky capecitabinu se pohybují od zhruba 1000 mg/m² do zhruba 3500 mg/m² za den v kombinačních schématech tohoto vynálezu.

Cisplatina je obecně formulována jako sterilní roztok pro injekce a je rutinně podávána v dávkách zhruba 10 až 100 mg/m²intravenózně každý den po dobu zhruba 5 až 6 dnů. Alternativně může být cisplatina podávána v jedné dávce zhruba 50 až 100 mg/m². Tento cyklus může být opakován zhruba každých 4 až 8 týdnů.

Kombinace poskytnuté tímto vynálezem budou hodnoceny pomoci.

několika posuzovacích systémů za využití standardních a údaje mohou být analyzovány programů pro kvantifikaci synergistických, aditivních a antagonistických účinků mezi protinádorovými program popsaný látkami. Přednostně autory Chou a Talalay v in Developmental Cancer Chemotherapy, používaný publikaci

Academie program je “New Avenues

Press, 1987,

Kapitola 2.

Metody jsou založeny na principu mediánového efektu zákona o množství a účinku za použití enzymového kinetického systému jako modelu. Rovnice je jednoduchá a popisuje vztahy mezi dávkou a účinkem bez ohledu na tvar křivky dávka-účinek. Dvě základní rovnice tvoří pilíře této metodiky. Aby bylo možné uvést vztah mezi účinkem pro jeden lék co nejjednodušeji, je rovnice pro mediánový efekt odvozená Chouem vyjádřena následovně:

f_a/f_u = (D/D_m)^m

D = D_m [ f a/ ( 1-f _a) ] ^1/m kde pravá strana reprezentuje dávku a levá strana reprezentuje účinek, a kde f_a a f_u jsou frakce ovlivněné a respektive neovlivněné, D je dávka, D_m dávka mediánového efektu vyjadřující účinnost a m je koeficient vyjadřující tvar křivky dávka-účinek. Z této rovnice Chou a Talalay odvodili obecnou rovnici pro dva a více léků:

« ·· · · · ··

Φ · · · · · · · · · • 4« ···· · · • · · · · ·····«· ·

Ί = (^p) + (^p\ = «(D)(DÍ (Dj (OJ (D.HDj, • ·· · · ·· · a * ···

[(túl	l/m	[(Ul
.(tú.		[(uj

+α (U(U .(fj (f.x l/m kde m = 1 je pro kinetiku typu Michaelis-Mentenové prvního řádu a m větší než 1 (nebo m menší než 1) je pro vyšší řád (nebo nižší řád) kinetiky Hillova typu. Pokud je alfa = 0, třetí termín na pravé straně zmizí a pokud je alfa = 1, je třetí’ termín zachován. Hodnota alfa = 0 je používána pro vzájemně exkluzivní léky a alfa = 1 je používána pro léky vzájemně neexkluzivní. Pro léky, které mají stejné nebo podobné způsoby účinku, jsou účinky obou léků vzájemně exkluzivní. Pro léky, které mají odlišné způsoby účinku nebo účinkují nezávisle, jsou účinky obou léků vzájemně neexkluzivní.

Graf frakce ovlivněné (Fa) versus kombinační index (Cl) je nazýván graf F_a-CI.

Tento graf vyjadřuje synergistický, aditivní, nebo antagonistický efekt dvou léků s různými účinky ve směsi, která je sériově naředěna. Pokud je vytvořeno několik směsí, je možné odhadnout optimální kombinační poměr pro maximální synergii. Různé účinky obvykle dávají různé stupně synergistických, aditivních, nebo antagonistických účinků. Hodnoty Cl pod 1 ukazují na synergistický účinek, hodnoty Cl nad 1 ukazují na antagonismus a hodnoty Cl 1 nebo okolo 1 ukazuji na aditivní efekt. Pro protinádorové látky je synergistický účinek při vysoce účinných hladinách (F_a) klinicky relevantnější než synergistický účinek při nízkých hladinách F_a.

Gemcitabin jako monohydrochlorid je rutinně používán klinicky a je dobře vyhovující pro monoterapii při zahájení léčby pacientů s pokročilým nádorem pankreatu nebo NSCLC. Je také rutinně používán v kombinaci s dalšími známými antineoplastickými látkami, zejména s cisplatinou. Avšak žádné synergistické kombinace nebyly doposud zaznamenány.

Ačkoli acetyldinalin (Cl-994) nebyl schválen pro klinické použití, byl nicméně zkoumán v několika klinických studiích. V jedné takové studii byli pacienti léčeni za použití schématu se zvyšujícími se dávkami, jak co se týká denní dávky, tak co se týká trvání léčby. Většina pacientů byla před touto léčbou léčena extenzivní chemoterapií. Maximální tolerovaná dávka (MTD) byla 15 mg/m²/den při trvání léčby 14 po sobě jdoucích dnů. Aby bylo možno léčit delší dobu, byly studovány nižší dávky. Za použití 8 týdenní kontinuální denní léčby s následujícími 2 týdny bez léčby, byla MTD 8 mg/m²/den. Mezi dávku omezující toxické účinky patřila trombocytémie nebo neutropénie, která se obvykle objevila 1 měsíc po zahájení léčby. Krevní obraz měl tendenci se stabilizovat dokonce i při kontinuální léčbě a rychle se zlepšil po zastavení léčby. Nebyly žádné známky kumulativní toxicity po opakovaných cyklech a prodloužené expozici CI-994. Další toxické účinky zahrnují nauseu, zvracení, anorexii, únavu, mukositidu, bolesti hlavy, dehydrataci a elevaci jaterních a ledvinných testů. Odpověď na léčbu zahrnovala jednu parciální odpověď u intenzivně chemoterapií předléčeného pacienta s NSCLC a menší odpověď u jednoho pacienta s nádorem z ledvinných buněk a s NSCLC.

U pacientů s relapsující akutní leukémií nebo s jinými hematologickými malignitami byla provedena další studie ve Fázi I, a to za použití dávkovacího schématu s podáváním vysoké dávky po dobu 5 dnů. MTD byla 135 mg/m²/den. Mezi dávku • « · • · omezující toxické účinky patřily akutní toxické účinky na CNS, které se manifestovaly jako útlum a somnolence. Další nežádoucí účinky zahrnovaly nauseu, zvracení, hypotenzi jako důsledek dehydratace, hypokalcémii, bolesti hlavy a u jednoho pacienta akutní pankreatitidu, pyramidový syndrom charakterizovaný hyperreflexií a bilaterálními Babinského reflexy, a sepsí. Hematologické toxické účinky nemohou být v této populaci posuzovány. U dvou pacientů s AML došlo k rozvoji syndromu z rozpadu nádorových buněk (tumor lysis syndrom) s následným úmrtím pacienta. Bylo zaznamenáno přechodné snížení počtu periferních leukocytů.

Program ve Fázi 2 s CI-994 používaným v monoterapii v současnosti probíhá. Dávkovači režim je 8 mg/m² podávaných denně perorálním způsobem. Bylo léčeno přes 100 pacientů, včetně pacientů s nemalobuněčným plicním nádorem, nádorem z ledvinných buněk, nádorem pankreatu, hlavy a krku, ovariálnim nádorem, myelomem, nádorem prostaty a nádorem prsu. Někteří pacienti tolerovali zvýšení dávky na 10 mg/m², zatímco jiní pacienti museli léčbu přerušit kvůli trombocytopénii, a poté musela být léčba s CI-994 znovu zahájena s nižšími dávkami. Nežádoucí účinky byly podobné nežádoucím účinkům pozorovaným při chronickém dávkování v protokolu Fáze 1. Dávku omezujícím nežádoucím účinkem byla trombocytopénie. Méně časté neurologické nežádoucí účinky zahrnovaly parestézie, zmatení a halucinace. Objektivní odpověď na léčbu byla patrná u pacientů nemalobuněčným plicním nádorovým onemocněním. Klinické zlepšeni bylo zaznamenáno u pacientů s nádorem z ledvinných buněk.

Ve studii Fáze 1 zaměřené na pevné nádory byly perorálně podávány dávky CI-994 po období hladovění a krevní vzorky byly nabírány pro farmakokinetické analýzy. Předběžné výsledky ukazuji, že maximální koncentrace v krvi je dosažena • ·· · * · ·· · • · · ♦ « · · · · · · • « · · · 9 · · · ' · • · · · · · ···» · · · · «····· · · · • · · 9 · · · · · · ··· přibližně 1 až 2 hodiny po požití a konečný eliminační poločas Cl-994 je přibližně 15 hodin. Maximální dosažené plazmatické koncentrace Cl-994 při zvyšující se dávce byly nižší, než by odpovídalo zvyšující se dávce. Terminální eliminační poločas a zjevná clearance byly nezávislé na podané dávce.

Jedním z dalších cílů této studie bylo určit, zdali užívání Cl-994 s potravou ovlivňuje jeho rychlost nebo stupeň absorpce. Dvanácti hladovějícím pacientům byla podána jedna dávka Cl-994, 8 mg/m². O týden později byla stejným pacientům podána stejná Cl-994 s normálním jídlem. Analýza farmakokinetických údajů odhalila, že Cl-994 může být podáván bez ohledu na jídlo.

Studie zaměřené na hmotovou rovnováhu a způsob eliminace nebyly u člověka provedeny. Studie na zvířatech ukazují, že hlavním způsobem eliminace je vylučování ledvinami s objevením se 80% a 62% radionuklidem značeného léku v moči opic a respektive potkanů během 24 hodin.

Následující detailní příklady dále dokazují synergii mezi Cl994 a buďto gemcitabinem, capecitabinem nebo cisplatinou.

Příklady provedeni vynálezu

Příklad 1

Ve studiích zaměřených na standardní chemoterapii byly hodnoceny synergistické kombinace poskytnuté tímto vynálezem, a to za použití myší BALB/C vážících 18 až 20 gramů. V den O testu byl každé myši implantován chirurgicky (subkutánně) fragment LC-12 dlaždicobuněčného plicního karcinomu vážící přibližně 30 mg.

Myši byly váženy každý velikost nádoru (šířka a délka v mm) byly měřeny třikrát týdně za zvířete vypočítána podle vzorce:

použití standardních kalipérů. Nádorová hmota byla u každého hmota = (a x b²) /2 , kde a je šířka nádoru v mm, b je délka v mm. Zhodnoceni protinádorové aktivity bylo provedeno pomocí vzorce T-C, kde T a C jsou medián doby (ve dnech) vyžadovaný pro léčené a respektive kontrolní nádory k dosažení předem určené velikosti 750 mg (hodnotící velikost). Ácetyldinalin byl rozpuštěn v 0,5% vodné metylcelulóze a podáván perorálně v různých dávkách v 0,5 ml objemech. Gemcitabin hydrochlorid byl rozpuštěn v 5% vodném fyziologickém roztoku a podán intraperitoneálně v různých dávkách v 0,5 ml injekcích.

Zvířata byla rozdělena do 4 skupin. Jedna skupina sloužila jako kontrolní skupina a nebyla lékem léčena. Jedna skupina (Obrázek 1) byla dále rozdělena do čtyřech podskupin, z nichž v každé byly aplikovány dávky acetyldinalinu o specifické koncentraci aktivního léku (15 mg/kg, 30 mg/kg, 45 mg/kg a 60 mg/kg). Ácetyldinalin byl podáván denně ve dnech 10-14 (kdy den 0 je den implantace nádoru), 17-21 a 24-28. Na Obrázku 1 je ukázáno, že ácetyldinalin zpomaluje ve srovnáni s neléčenými kontrolami růst implantovaného nádoru ve všech dávkách. Nádory u neléčených kontrol vykazovaly významný růst od desátého dne. V dávkách 30 a 45 mg/kg acetyldinalinu nedošlo k významnému růstu nádoru až do 24. dne. V dávce 60 mg/kg byl růst zpomalen na dobu 33 dnů.

Na Obrázku 2 jsou ukázány účinky gemcitabin hydrochloridu v dávce 40 a 80 mg/kg podaného intraperitoneálně ve dnech 10, 13, 16 a 19. Růst nádoru byl významně inhibován po dobu 25 dnů při dávce 40 mg/kg a po dobu 32 dnů při dávce 80 mg/kg. (Kontroly vykázaly významný růst od 10. dne.)

Φ

Na Obrázku 3 jsou uvedeny účinky kombinaci φ

« · ·		Φ ·	Φ	• Φ
φφφ	Φ	Φ	•	φ ·	φ φ
Φ · ·	Φ	•	φ ·	φ φ
• Φ	Φ 1	•	• Φφφ	• · ·
• φ φ ·		* Φ	φ	φ ·	φ φ

různých dávek acetyldinalinu acetyldinalinu

30/40, 30/80 a gemcitabin s 40 mg/kg

45/20).

hydrochloridu (např. 15 mg/kg

15/80, gemcitabin hydrochloridu;

Testovaným zvířatům byl implantován dlaždicobuněčný plicni karcinom LC12 a zvířata byla rozdělena do 4 podskupin, kdy každá podskupina byla léčena odlišnou dávkou kombinační léčby. Acetyldinalin uvedených dávkách a 24-28. Gemcitabin hydrochlorid byl podáván intraperitoneálně ve dnech 10, 13, 16 a 19. Výsledky na Obrázku 3 ukazují dramatické a synergistické snížení růstu nádoru pro všechny kombinační dávky léků. Při kombinaci 15 mg/kg acetyldinalinu a 40 mg/kg gemcitabinu nedošlo k významnému růstu implantovaného nádoru až do 28. dne (nádory u kontrolních zvířat začaly významně růst 10. den). Při kombinačních dávkách 15/80, 30/40, 30/80 a 45/20 (acetyldinalin/gemcitabin) došlo k významné inhibici růstu nádoru po celé 60-denní testované období.

Na Obrázku 4 jsou uvedeny výsledky kombinační studie prováděné po dobu 75 dnů. Všem testovaným zvířatům byl implantován dlaždicobuněčný plicni karcinom LC12. Zvířata vybrána k léčbě testovanými léky byla rozdělena do čtyřech podskupin. Jedna podskupina byla léčena 15 mg/kg acetyldinalinu v kombinaci s 80 mg/kg gemcitabinu. Druhá podskupina byla léčena kombinací v dávce 15 mg/kg/160 mg/kg. Třetí skupina byla léčena kombinací v dávce acetyldinalinu s 80 mg/kg gemcitabinu. Čtvrtá podskupina byla léčena kombinací 45 mg/kg/80 mg/kg.

Acetyldinalin byl podáván perorálně v každé testované s kupině ve dnech 26-30,

33-37

40-44.

Gemcitabin byl podáván intraperitoneálně ve dnech

10,

13, 16 a 19.

Na Obrázku 4 je uvedeno, že nádory u neléčených kontrolních zvířat začaly růst do 11. dne po implantaci a dosáhly 750 mg (hodnotící velikost) 18. dne. Na rozdíl od toho nádory léčené 15 mg/kg acetyldinalinu a 80 mg/kg gemcitabinu rostly velmi zvolna až do 35. dne a nedosáhly hodnotící velikosti až do 42. dne. Nádory u zvířat léčených kombinací 30 mg/kg/80 mg/kg začaly růst 35. den, ale nedosáhly hodnotící velikosti až do 52. dne. Nádory u zvířat léčených kombinací 15 mg/kg/160 mg/kg, stejně tak jako kombinací 45 mg/kg/80 mg/kg nerostly dokonce ani 75. den, kdy byl test ukončen.

Údaje uvedené na Obrázcích 2 a 4 ukazují, že kombinace acetyldinalinu a gemcitabinu je překvapivě aktivní s ohledem na snížení rychlosti růstu nádorů u zvířat. Schopnost těchto látek, jsou-li použity dohromady, ukazuje na synergistické působení této kombinace jako protinádorové látky.

Příklad 2

Protože synergistické účinky pozorované u kombinace acetyldinalinu a gemcitabinu (ukázáno na Obrázcích 2 a 4) byly tak překvapivě dramatické, byl výše popsaný experiment v Přikladu 1 zopakován s dalšími dávkami acetyldinalinu. Tabulka 1 uvedená níže ukazuje aktivitu CI-994 a gemcitabinu samotných nebo v kombinaci na modelu myšího nádoru plic LC-12, po testování podle postupu z Příkladu 1.

X »—I £3 X (0

X i—I

I o X

M

O 73 '05

C

O

X Ή

C o •H r—I

CL o

XI Ή ><0 g

O —1

Φ

O g £3 a

•H Λ

X •H u g Φ

Cr>

•=r O σ>

I H O o u aJ

C •H X!

g O

X

Φ £3 Ή >U '>Ί > O £-1

O 73 '05 £3 •H X

O £4

Oj

Protinádorový účinek |

O <—4 tTN, O r-d X H •H X « <D Z

CN i—1 1

1^τ-

1 -1,3 1

00 o 1

1 0,5 1

CN j—1

0,4

1 0,5 1

1 s'i 1

toxický 1

0, 6

CTb o

více než 5, 0

toxický 1

Φ o 1 H

2,4

o

CO «—1

co Γ

*tT lO <—1

1 24,0 I

23,5

CO m CN

1 37,0 J

toxický 1

25, 6

39,8 1

>N £ CO Φ CN O 00 Ή

toxický 1

73 cd CU

0/6

1 9/0 1

1 0/6

1 1/6 1

0/6

1 1/6

co o

toxický

9/0

i 1/6 |

1/6

toxický |

u cd O

1/6

0/6 1

1 9/0

1 3/6

1 1/6

CO o

2/6

CO CN

co LO

toxický

3/6

CO

1 5/6

toxický |

í>t £ ><D e £ N '01 > CÍP

xr +

O «—1 +

í—1 +

<3h 1

i—1 +

co 1

+ 8

Γ +

co 4-

00 1

CO 1

cn 1

co 1

1

Toxická úmrtí

0/6

I 9/0

0/6 1

CO \ O

9/° 1

1 0/6 i

9/0

9/0 I

co \ o

1 3/6 I

9/0

9/0 |

9/0

1 9/0

Gemcitabin |

Rozpis i

1

O CN rt—1 r-1 t^-í <—l

11, 14,17,20

11,14,17,20

r0 44 > 'íÚ Q

o

o co

160 |

O co

1 80 |

o co

[ 80 |

160

160 |

160

160 |

I CI-994 I

Rozpis

11-15, 18- 22, 25-29

1

11-15, 18- 22, 25-29

rn (Ό Λί > 'Oj Q

Lf)

LD «—1

30

1 60 I

o

LO Γ

LO <—1

o co

O CD

LO

ID r-1

30

O co

	✓O
	Λ
	>O		•		*
	'Φ		Φ
	X		Ή
			73
	Ή		£3
	o		44
	£3	•	CO
	o	Φ
	44	•H	g
		73	Φ
	05	£3	X
	C	44	>Φ
		co	X
	05
	X	H	Φ
	'05	O	O	tn
	>	a	Ή	g
		o	>
	Φ	44		o
			0	X
		05	X	r~
		c	Φ
	x		£3	.Ή	•
	'05	c		£3	^>Ί
	>	'05	o\°	Φ	-P
		>	O	>N	0
	44	O	X	Φ	p
	Φ	44		CO	Ό
	44	Φ	O	0	0
	W	44		73	X
	«£3	Φ	<—1		O
	£4	73	Ή	O
	Ή		>C0	X	1
		44	£3		H
	a	'3^	Φ		N
		X	g	O
	• V		N	O
		I--------1		73	P
	XI	X	Φ	'05	'íÚ
	>o	o	CO	£3	-P
	'Φ	g			Ή
	i—1	Φ	'3ί	,—	>O
		c	£4	O	0
	g		Φ		GU
	Φ	'3ί	X
	x	Cl	X	Ή	>
	>φ	Φ		£3	i—1
	X	44	«.	r—1
		44	£4	O
			0	S4	Xi
	£		X	X	X
	M	£4	'05	£3
	44	O	£3	0	>φ
	05	73		X	P
	CL	'05	Φ		p
		£3	•Γ—1	05	Xi
	44		£3		X
	Φ	Φ	>	.—.
	44	n	05	H	o
	>1	£3	X	—-
	X	>	CO		>
	X	Φ	73	'Φ	0
		44	Φ	£3	P
	Ή	co	>C\|	Φ	o
	c	73	CL	>U	Ό
	<—1	Φ		'Φ	'íO
	NÚ	>£4	__.	i—4	P
β	g	CL	Dd
φ	•H		Qj	O	Ή
73	X	.—.	-—	£4	P
\	05	Od		CL	Φ
CD	g	O	75		0
44		—-	>Φ	X	P
	Φ		>	O	£
tP	n	73	O	Φ	co
g		>Φ	CL	£3	P
	3ί	>	73	73
>	X	O	O		<—1
	'05	CL		Φ	tn
Φ	>	73	'05	>	O
•i—1		0	£3		r—1
	44		>O	f—1
05	Φ	'05	Φ		'X
44	44	c	X	73	X
>	3ί	r—1	U1	N	CO
'05	X!	CL	'05	O	•H
73	Ό	'33	>O	Dd	>o
n)	Λ	υ		a>	M-l

Φ φφ φφφ φφ · φφφ φ φ φφ φ φφφ φ φφ φφφφ φφ φ •Φ φφφ φ φφφφ φ φ · · φφφ φφ φ φ φ φ φφφ φφ φφ φ φφ φφφ

Příklad 3

Postup z Příkladu 1 byl použit ke zhodnocení protinádorové aktivity kombinaci CI-994 a cisplatiny ve srovnáni s těmito látkami samotnými. Výsledky jsou uvedeny v Tabulce 2. Tabulka ukazuje, že léčba 60 mg/kg/den CI-994 způsobila dvě úplné odpovědi z 10 testovaných zvířat, zatímco cisplatina samotná v dávce 2 mg/kg/den nezpůsobila úplnou odpověď. Kombinace však způsobila 70% úplnou odpověď, zejména úplné odpovědi u 7 z 10 léčených zvířat. T-C efekt byl dokonce dramatičtější, od 8,7 a 2,4 pro monoterapii do 84,2 pro kombinační léčbu.

CN fO i—J

A rO

H

Cil !-----1

I o Dl

L4

O 75 '(0 c o X Ή

C O

H i—I

CL

O x Ή >OT

5*1 e

I--------i

Φ o

£

C

5*1 c

Ή

A <—I

CL co

Ή

O <c σι σ>

i

I—I O

Φ

O c H A £

O Al

A!

Φ

C •H >0 '3 '>i >

O

SH o

'CO c •H

4-)

O

M CL

Protinádorový účinek |

O ύ\_Ί0 h H-l r~{ •H p ÍD d) Z

1

o

O

00 o 1

LO O 1

t—1 o 1

i—1 o 1

-0,9

1 -0,6 1

Γ· O 1

-0,3 |

-0, 5

t—1 o 1

Ol o

co co

(1) O 1 H

1

tr i—1 1

Γ -L9

ΓΌ

1 8/7 i

10 CN

1 2,4 1

2,0

1 8,2 Π

Γ- 10

12,7 1

O o t—1

o ΟΙ—1

20,6 1

Ol rr co

Ό Cb

o i—1 o

0/10

o |-----1 \ O

o t—I o

O rH O

O i—1 O

O t—1 o

0/10

O c—1 o

2/10 j

| 01/1

0/10

o t—1 o

O t—1 <—1

o rH CQ

Cd o

o t------1 o

o i—1 \ o

o Γ—I \ O

o t—1 o

! 2/10 1

O rH \ O

o t—1 o

o «—1 o

o i—1 \ t—1

1 4/10 |

1 7/10 |

1/10

3/10 |

1 5/10 1

7/10 |

I>T ^c %. >(D >, 6 N 'JO o\«

+ 15

cn +

<—1 i—1 +

1 +ii 1

rH t—1 H-

I +13 I

+ 12 |

+

H-

1 +3 i

CN +

+ 1

Ol 1

«—1 1

•ςΤ rH 1

Toxická úmrtí

O t—1 o

0/10

O i—1 o

O rH \ O

o <—1 o

O i—1 o

0/10

o rH \ O

O c—1 \ O

1 o/io j

0/10

o i—1 o

o t—1 O

1 oi/o

Gemcitabin |

Rozpis

1

1 Sl-ττ 1

11-15

Dávka³

o

i—1

CN

i—1

t—1

i—1

rH

OJ

Ol

I CI-994 |

Rozpi s

1

11-15, 18- 22, 25-29

1

11-15, 18- 22, 25-29

<0 rO > '<O Q

o

LO Γ-

1 15

I 30

o

O

o

LO o-

LO rH

o co

09 1

LO Γ

1 15 I

o ro

o co

	Α*Ί
	Xi
	>u		•
	'CD		Φ
	1—1		H
			75
	•H		3
	u		A
	c	•	co
	o	CD
	A!	•H	E
		75	Φ
	05	3	X
	C	4-J	>φ
		ω	X
	05
	X	Ή	Φ	•
	'05	O	o	tn
	>	X	Ή	S
		0	>
	Φ	A		o
	•m		o	LD
		05	A	[~~
	5*i	C	Φ
	X		C	Ή	•
	'05	X		C	>1
	>	'05	o\o	Φ	-P
		>	O	>N	o
	A	O	lO	05	c
	CD	A		CO	Ό
	A	CD	O	O	0
	CO	A		75	rC
	»3	CD	i—1
	D	75	Ή	O	O
	Ή		>C0	75	1
	>M	A	c		E-í
	Q<	'5*i	Φ	5*i
		X)	£	C4	N
	•		N	0
	>Ί	i—1		75	C
	Xi	X	Φ	'05	'05
	>U	o	m	C	4->
	'CD	£			Ή
	Η	CD	'5*i	,—	>(J
		C	C4	U	0
	£		Φ		On
	CD	'5*i	A
	x	C4	A	Ή	>
	>CD	CD		C
	X	A		I------1	1--------1
		A	M	o
	'5*1		O	C4	£3
	c		75	A
	L4	D	'05	c
	A	O	C	o	>(L)
	05	75		A	C
	CL	'05	Φ
		C	Γ—1	05	£
	A		3
	Φ	Φ	>	_r—.	£
	A		05	Eh	O
	5*i	3	A		'aQ
	X!	>	CO		>'
	'3	05	75	'Φ	0
		A	Φ	c	P
	Ή	co	>M	Φ	0
	C	75	CL >υ	Ό
	1--------[	Φ		'Φ	'ffl
	'03	>A	.—.	<—1	£
c	6	CL	oč
Φ	•Γ-1		CL	o	Ή
75	X	.—.	-—·	P	c
	05	PC		CL	<D
tn	£	O	Ť5		O
A		—-	>φ	X	P
\	CD		>	O	£
Cr>	•r->	75	O	Φ	co
£		>Φ	CL	X	P
	5*i	>	75	75
>	X	0	O		r—1
	'05	CL		Φ	tn
CD	>	75	'05	>	0
•i—>		0			i—1
	A		>U	r-4
05	CD	'0!	Φ	Ή	'5*i
A!	4-1	Č	A	75	A
>	Xi	i—1	CO	N	CO
'05	Λ	CL	'05	O	•H
75	O	O >o	Ct	>o
<D	a	0		<u	4-1

Tabulka 3

Protinádorový účinek kombinace CI-994 a preparátu Xeloda na modelu nádoru tlustého střeva myši C26: Účinek léčby preparátem Xeloda s následnou léčbou CI-994 na časné stádium nádoru

>1

>φ
£
N	'<0

2/10	3/10
CM	00
<K	' v
O	o
CO	r-
	·<
cn	o
«—1	OÚ
g	g
-CD □	-0) 5
£ -H	£ -H
ω T)	m Ό
fO 'f0	Oj 'CO
>U P	>U P
U)	cn
g	g
'0) P	'φ P
C Ή	β ·Η
w Ό	m Ό
rtJ '<0	<ΰ '<ϋ
>G> P	>0 P
V)	tú
CM	co
O 1	<—1 1
o	o
<—1	<—1
	\
o	i—1

i—1
o
i—1

Γ-
ro
o	o
o	LO
LO
1	1
o	o

• ·« ·· · ·· ·· · · ··· · · • ·· ···· ·· • · · · · · ··«« 0 0 fe • · · · · « · ·

0 0· ·· · ··

4-> to	Φ U
•H U c	Ή >
0	O
Pí	Λ Φ
c	C o\O
c	O
OJ >	LO
o	O
Φ	1--------1
-P	Ή
Φ 75	>w c Φ
4-> Ό	£ N
H	Φ
Λ O	to
£	S>1
φ >	P
C β	Φ
'(ϋ	-P
-p	Pí
P Ή
tL) >U
P 0	P
Λ! Oj	o
>i 75
< >	oj
P	C
O Ck
75 O	Φ
'Π5	•i—1
	>
φ X	f0

(1)	>	75	<n	'CO	>	P -m	O	£
•ΓΊ		0					P	l—1	Ό
	P4		£	>u	4-1	i—1	>
Π3	Φ	Ό	'Φ	φ	to	Ή	cú	'^Ί	O
	•P	C	P	-P	Φ	75	4->	4J	c
>	>1	l--------1	(0	tn	P	N	to	to	75
Π3	X)	a		'CO		O	75	-H	Φ
TJ	O	o	>u	>o	<—1	Dd	Φ >P	>O	•o
ctí	a	u	>	•σ		<D	CPw	tn

9

9999

Příklad 4

Obecný postup z Příkladu 1 byl použit ke zhodnoceni účinku CI994 a capecitabinu samotných nebo v kombinaci proti nádoru tlustého střeva. Stanovení bylo provedeno stejným způsobem, jak je popsáno v Příkladu 1, s výjimkou toho, že fragment nádoru tlustého střeva C26 byl chirurgicky implantován myším místo plicního nádoru LC-12, který byl použit v předcházejících příkladech. V Tabulce 3 jsou uvedeny výsledky monoterapie specifických dávek CI-994 a capecitabinu (Xeloda™) , a kombinační léčby, kdy byla zvířata nejprve léčena capecitabinem (ve dnech 3-7 a 10-14) s následnou dávkou CI-994 (ve dnech 17-21, 24-28 a 31-35). Údaje v Tabulce 3 ukazují, že žádné ze zvířat léčených samotným CI-994 nebylo na konci studie bez přítomnosti nádoru, že 30% (3 z 10) zvířat léčených capecitabinem samotným bylo na konci studie bez přítomnosti nádoru, a že 70% (7 z 10) zvířat léčených kombinací CI-994 plus capecitabin bylo na konci studie bez přítomnosti nádoru.

V Tabulce 4 jsou uvedeny výsledky stejné studie, s výjimkou toho, že kombinační látky CI-994 a capecitabin byly podány současně ve dnech 3-7 a 10-14. V podávání CI-994 bylo pokračováno ve dnech 17-21, zatímco terapie capecitabinem byla ukončena 14. den.

Tabulka 4

Protinádorový účinek kombinace CI-994 a preparátu Xeloda na modelu nádoru tlustého střeva myši C26: Účinek současné léčby preparátem CI-994 a Xeloda na časné stádium nádoru_________

| Protinádorový účinek I

% bez nádoru

0/10

0/9

6/0

0/10

01/1

0/10

οτ/τ

0/10

• • · A· r-d rd

• )·

• o

• · • ·· g Cx]

♦ · · £ o

• · Φ · |·· o

Ο M RI r—1 •H +·> « Φ z

-2,2

-2, 3

CO t—1 1

CO i—1 1

to o

co «—1

-0,4

-0,5

O O

0, 2

-0,2

»—1 o 1

-0,2

Ό (U Φ o 1 H

to t—1

O <—1

to •RT

co

15,2

20,4

15,4 (16,8)

14,5 (16,2)

14,2 (19,8)

18,1 (20,0)

r-Η O CTl <N rd C\j

cn «št r-l rd CN

o θ' LO rd Cxl

16, 4 (25,2)

0-1

časné stádium

časné ; stádium

časné stádium

¹ časné stádium

časné stádium

O Cd O

časné stádium

časné stádium ;

časné stádium

i časné stádium

časné stádium

C -o >>< ^e -s N '<0 ·> O\o

+ 5

co 1

1-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ; ττ-

-12

+2

-12

9 +

ττ-

co 1

-11

1

1—1 1

-18

Toxická úmrtí

0/10 i

6/0

1/9

6/0

0/10

O t—1 o

0/10

O i—1 o

0/10

ξ 0/10

i 0/10 i

o t—1 o

; 0/10

1/10

Xeloda |

Rozpis

1

3-7, 10-14

’ΝΓ i—1 1 o t—1 r- 1 co

3-7, 10-14

(0 fO > 'CO Q

o

500

o in Γ·

500

! 500

750

| CI-994 I

Rozpis

3-7, 10- 14, 17-21

1

3-7, 10- 14, 17-21

rO cO > Q

LO

15

30

09

o

LO

15

30

60

tn r-*

LO ,—|

30

60

• ·

Ρ m Φ P

5*1 X! >U 'Φ «—I •H

U a o <0 c

<0 *(ΰ >

φ •m

5*ι 'Φ >

Φ

Ρ (Λ «Ρ

Ρ Ή >Ρ

Ο.

>1 X ο ρ ο Η

Φ Η ρ Ρ

OT •Η υ β ο

Φ β β *Φ >

Ο

Φ Ρ

Φ

Ρ *>.

ΟΦ ρυ οΡ

ΗΟ > .'φ φΝ

Η

Ρ Ρ ω φ

>Φ X) >

5*ι

Ρ Ο β

Ο

ΦCD υe

Ή >ο m

οΓ43

C' ^cβ φ

ο\°>Ν ο (ΰ5*ι ιΓ) ϋ)-Ρ ο Ο

Ο 73β r-Η °2 •Η73 *φ £ £

	£
	φ	'5*ι
		Ρ
	>φ	Φ
	42 '5*1	Ρ 44
	β	*
	Ρ	Ρ
	Ρ	0
	Φ	τ3
	(3ι 44	'Φ β
	Φ	φ
	Ρ	•ι—1
	5*ι	Ρ
	43	>
	'Ρ	φ Ρ
	Ή	OT
	β	73
	1—1	Φ
	'Φ	>Ρ
β	£
φ	-Η
73	X	.—
	Φ	Ptí
	£	U
44		*—
\	φ	73
CD	•ΓΊ
£		>Φ
	5*1	>
>	43	Ο
	'φ	Οι
Φ	>	73
·ι—1	44	0
φ	Φ	*Φ
44	Ρ	β
>	>1	γΗ
'Φ	43	&Ι
73	Ο	ο

<τ> Ό υ ^ω >υ £ '2 β ^ω Ο 'Φ

	\>Ί	Q, '> Ρ
5*1 Ο	>	Ή
5*1	Ρ	>	—*	ο	>υ
β	φ			Ρ	ο
*Φ	Ρ	CÍ	*ι—1	ο	ϋ
Ρ	44	CU	β	73	5*ι
Ή				'Φ	>
>υ		Ρ	ο	β
ο	Ρ	'5*1	Ρ	-Η	ι—1
CL	Ο	43	Ρ	Ρ	5*ι
5*ι 73		β	Ο	42
>	'ίΰ	5*ι	ο	Ρ
		1------1	44	Οι 44
(X		43			>Φ
Ο	Q)	0	ίΤΐ	Ή	β
		£	’U	β	Ρ
Ρ		Φ		>	43
^χί>Ί		β	—'	Ή
43	r’ frt		Η	Ρ	43
	'U ι )	Ο		Η	<3
	(/}	Ρ		73	'5*1
γ—\|		ο	'Φ	Φ	>
43	φ	Ρ	β		0
Ο	>$_\|	ίλ	Φ	Ο	Ρ
£			>υ	Ρ	ο
φ	Μ-<		Ό	ίλ 73
β		β	I--------1		'φ
		Η		5*ι	β
ο	CÚ	73	ο	Ρ
Ρ	CU	'Φ		Ο	Ή
ο		Ρ		β	β
Ρ		ω		73	Φ
73			Ο	υ
	>φ	£	4-<	43	Ρ
	>	*Φ	Ο		£
Ρ	ο	β	Φ	Ο	ω
-Η	Λ	W	Ch	1	Ρ
73	73	Φ	Τ5	Η
*φ	Ο	>υ			ο
Ρ			φ	Ή	σ
ω	'Φ	>	>	η	ο
	β			Ρ	rp
£	>υ	Ρ	<—1	>
'Φ	φ	W	Ή	Φ	'5>ι
β	Ρ	φ	Ό	Ρ	ρ
tn	co	Ρ	Ν	(Ω
Φ	'Φ		0	73	•γΗ
>υ	>ο	<—1	(X	Φ	>ο
		5*1		>Ρ
>	•ο	43	Φ	ÍXh

·· 99 999

9 9 9 9 9 9 99

9 9 9999 99

9 9 9 9 99999999

9 9 9 9 9 99

9 99 9 9 99 9 9

Přiklad 5

Kombinace CI-994 plus gemcitabin a CI-994 plus cisplatina byly hodnoceny na buňkách lidského ovariálního karcinomu a údaje byly analyzovány podle programu autorů Chou a Talalay, který prokázal obě kombinace jako synergistické.

Lidské ovariální buňky Ovcar-4

Lidské buňky ovariálního karcinomu Ovcar-4 byly umístěny do 96-jamkových kultivačních destiček v kultivačním médiu RPMI 1640 suplementovaném 20% fetálním telecím sérem a 10 ug/ml insulinu. Různé koncentrace CI-994 a buďto cisplatiny nebo gemcitabinu byly přidány dohromady 24 hodin poté, co byly buňky umístěny

Účinek CI-994, do kultivačních destiček, kde byly přichyceny.

gemcitabinu nebo cisplatiny samotné nebo v kombinaci na proliferaci buněk Ovcar-4 byl určen po 96hodinové inkubaci při teplotě 37°C za použití

SRB stanovení, jak bylo popsáno dříve (Skehan P.,

Stoneng R,

Scudiero D, et al. New colorimetric . cytotoxicity assay for anticancer-drug screening.

J.

Nati. Cancer

Inst.

1990;82:1107-1112). Údaje kombinační chemoterapie byly analyzovány za použití programu

Biosoft Dose Effect Analysis with Microcomputers for IBM PC, který je standardním programem pro kvantifikaci synergistických, protinádorových aditivních látek a je efektu zákona hmbty-účinku antagonistických účinků založen na principu mediánového za použití modelu enzymového kinetického systému popsaného autory Chou a Talalay. Grafy frakcí ovlivněných (Fa) versus kombinační index (Cl) jsou nazývány Fa-CI grafy. Tyto grafy ukazují synergistické, aditivní a antagonistické účinky 2 léků o různých koncentracích ve směsi, která je sériově naředěna.

Pokud je vytvořeno několik směsí, je možné odhadnout poměr optimální kombinace pro maximální synergii. Různé koncentrace obvykle vedou k různým stupňům synergistických, aditivních a antagonistických účinků. Cl hodnoty pod 1 ukazují na synergistické účinky, Cl hodnoty nad 1 ukazují na antagonistické účinky a hodnoty okolo 1 ukazují na aditivní účinek. Obrázky 5 a 6 ukazují reprezentativní Fa-CÍ grafy pro CI-994 plus gemcitabin (Obrázek 5) a CI-994 plus cisplatina (Obrázek 6) . V obou grafech přes celé rozmezí Fa jsou hodnoty Cl menší než 1, což ukazuje na synergii lékových kombinací.

Klinické hodnocení kombinační léčby

Toto je multicentrická, otevřená studie ve Fázi 1 zaměřená na léčbu pacientů s pokročilými solidními nádory pomocí CI-994 v kombinaci s gemcitabinem.

Cílem této studie je určit (1) maximální tolerovanou dávku (MTD), (2) doporučenou dávku pro Fázi 2, (3) farmakokinetiku, (4) bezpečnostní profil, a (5) pozorovat protinádorovou aktivitu CI-994, pokud je tento lék podáván v kombinaci s gemcitabinem pacientům s pevnými nádory. Primárním parametrem účinnosti je získání buďto částečné odpovědi (PR) nebo kompletní odpovědi (CR) . Sekundární parametry zahrnují čas do PR nebo CR, trvání PR nebo CR a přežívání.

Gemcitabin je podáván jako 30 minutová intravenózní infúze ve dnech 1, 8 a 15 z 28-denního léčebného protokolu při použití původní dávky 1000 mg/m². CI-994 je podáván perorálně v denní dávce po dobu 21 dnů z 28-denního cyklu a začíná se s léčbou první den. Pacienti mohou být léčeni následnými cykly v závislosti na individuální toleranci a odpovědi na léčbu. U pacientů, jejichž onemocněni neodpovídá na léčbu, nebo u kterých se vyvíjejí netolerovatelné nežádoucí účinky, je léčba přerušena.

Původní dávka CI-994 je 4 mg/m². V každé dávce budou léčeni minimálně 3 pacienti. Dávka se zvyšuje o 2 mg/m² až do dosažení

MTD. Deset dalších pacientů je určeno k léčbě dávkou doporučovanou pro Fázi 2, u které je očekáváno, že bude MTD, nebo dávkou pod MTD.

Jakmile pacient zahájí léčbu v rámci studie, znemožní přidání další nádorové léčby posouzení bezpečnosti a účinnosti a proto není tato další léčba dovolena. Toto omezení se vztahuje na systémové cytotoxické, hormonální, imunologické, nebo další biologické látky, je-li pacient v léčebné fázi tohoto protokolu. Pacienti, kteří vyžadují paliativní radioterapii v průběhu studie jsou obecně považováni, že mají progresivní onemocnění a ledaže existuje závazná informace opačného charakteru, je u nich léčba v rámci studie přerušena. Pacienti, u nichž se vyvinou nové metastázy v mozku mohou mít léčbu přerušenu, aby mohl být proveden cyklus kraniální iradiace. Poté může být léčba v rámci studie znovu zahájena po obdobím určeném k zotavení a trvajícím alespoň 1 týden.

Antiemetika mohou být použita podle uvážení výzkumného pracovníka pro prevenci a/nebo léčbu nausey nebo zvracení. Mělo by být vyvinuto úsilí k zabránění nausey a zvracení, protože tyto komplikace mohou pacientovi zabránit v užívání nebo v absorpci perorálnich dávek CI-994. Tento faktor je obzvláště relevantní 1., 8. a 15. den, kdy je podáván také gemcitabin. Protože CI-994 způsobuje sedací a somnolenci ve vyšších dávkách programu Fáze I, měla by být použita antiemetika, které nejméně pravděpodobně způsobují tyto nežádoucí účinky.

K léčbě epizod těžké myelosuprese, které jsou komplikovány infekcí mohou být podle uvážení výzkumného pracovníka použity kolonie stimulující faktory, ale tyto látky by neměly být jinak používány k podpoře nízkého počtu bílých krvinek nebo k udržení intenzity dávky.

Pokud jsou splněna kritéria pro kompletní odpověď (CR) podejte další léčebné cykly po potvrzení CR a poté kompletně znovu posuďte stav onemocnění u pacienta.

Pokud je u pacienta shledáno, že je v tomto čase klinicky bez příznaků, přerušte léčbu gemcitabinem a pokračujte v podávání CI-994 po dobu dalších 3 měsíců za použití stejné dávky a léčby/1 týden bez léčby). V tomto čase znovu stav onemocnění pacienta. Pokud je pacient rozpisu kompletně posuďte stále v CR, musí výzkumný pracovník zhodnotit rizika a potenciální prospěch pokračování léčby pomocí CI-994.

Léčebné cykly

Léčebný cyklus se skládá z gemcitabinu podaného intravenózně 1., 8. a 15. den 28-denního cyklu plus CI-994 podávaného denně perorálně při zahájení léčby 1. den a probíhající po dobu 21 dnů z 28-denního cyklu. Cykly by měly být opakovány 29. den, pokud proběhlo adekvátní zotaveni z nežádoucích účinků a myelosuprese, definovaných jako nehematologické parametry Stupně rovného nebo menšího než 1, počtu destiček nad 100000/ul a absolutního počtu neutrofilů nad 1500/ul. Následné cykly mohou být zpožděny o týdenní intervaly do celkového počtu 3 týdnů. Pokud nedošlo k zotavení do 50. dne, je u pacienta přerušena léčba v rámci studie.

Dávkování gemcitabinu

Úvodní dávka gemcitabinu v každém cyklu je 1000 mg/m² podávané v 30-minutové intravenózní infúzi. Během léčebného cyklu může být vyžadována úprava dávky. Řiďte se doporučeními výrobce týkajících se přípravy a podávání.

Dávkování CI-994

Dávky CI-994 jsou vypočítány na podkladě plochy tělního povrchu (BSA) a musí být poté zaokrouhleny na nejbližší • ·· dostupnou silu kapsle. CI-994 je dostupný v silách kapsli 2,5, 5 a 25 mg. Dávky mohou být užívány bez ohledu na jídlo.

Úvodní dávka CI-994 je 4 mg/m². Následné dávky se.zvyšují (nebo snižují, pokud je to nezbytné) fixním nárůstem 2 mg/m² až do určení MTD. Individuální pacienti nemusí být léčeni zvyšujícími se dávkami gemcitabinu nebo CI-994 v 'následných cyklech. Pacientům může být podávána nižší dávka CI-994 v následném cyklu, pokud došlo k objevení se toxických účinků omezujících dávku.

Tři noví pacienti budou posuzováni při každé nové dávce. Minimální doba, po kterou musí být tito pacienti sledováni, je 4 týdny před podáním nové dávky (ledaže by léčba byla přerušena dříve a pacient se zotavuje z nežádoucích účinků. Pokud se u žádného z těchto 3 pacientů neobjeví toxické účinky omezující dávkování, může být přistoupeno k vyšší dávce. Pokud se u pacienta objeví toxické účinky omezující dávku, budou do studie v této dávce zařazeni 3 další pacienti. Pokud dojde u 2 nebo více pacientů ze šesti k rozvoji toxických účinků omezujících dávku při stejné dávce, je tato dávka považována za MTD.

Pacient, který může být posuzován, je definován jako ten, který byl léčen 3 týdenními dávkami gemcitabinu plus alespoň 80% dávek CI-994 (17 nebo více dávek), nebo pacient, jehož léčebný cyklus byl přerušen časně nebo v důsledku rozvoje nežádoucích účinků vzniklých v důsledku léčby (méně než 17 dávek. Pacient, který užíval méně než 17 dávek CI-994 nebo neukončil léčebný cyklus z důvodů nesouvisejících s léčbou (například zmeškané kontroly, doužívání CI-994, rozvoj doprovodného onemocnění, které znemožnilo nemocnému polykat kapsle, rozvoj rychle progredujícího onemocnění), není považován za pacienta, který by mohl být hodnocen na toleranci vůči této dávce.

Pacienti by měli užívat dávku CI-994 v přibližně stejný čas každý den. Povolena je však variace 12 hodin na každou stranu pro jakoukoli z dávek, raději než ji neužít vůbec. Pokud pacient neužije dávku vůbec, musí být poučen, aby se nesnažil užit tuto dávku další den navíc. Pokud pacient zvrací kdykoli po podání dávky CI-994, musí být poučen, aby se nesnažil užít tuto dávku další den navíc, ale pokračovat následnou dávkou druhý den, jak je předepsáno.

1., 8. a 15. den by měla být podána dávka CI-994 2 hodiny před dávkou gemcitabinu, aby se zajistila maximální absorpce pro případ zvracení po dávce gemcitabinu.

Pokud je určena MTD, bude léčeno dalších 10 pacientů dávkou Fáze 2, u které je očekáváno, že je MTD nebo dávkou pod MTD.

Úprava léčby během cyklu

Pokračování gemcitabinu a CI-994 během cyklu je závislé na toleranci pacienta a hematologických parametrech. Snížené dávky gemcitabinu mohou být vyžadovány 8. a 15. den, jak je vyžadováno výrobcem a uvedeno v tabulce níže. Dávka CI-994 by neměla být zvýšena nebo snížena během léčebného cyklu, ačkoli časné ukončení může být vyžadováno, jak je popsáno níže. Pokud musí být obě léčby v rámci studie zastaveny před ukončením cyklu, neukončujte tento cyklus, ale místo toho sledujte pacienta do zotaveni a poté znovu zahajte cyklus za použití snížené dávky CI-994.

« ·

Parametr	Úprava dávky během léčebného cyklu
% plné dávky gemcitabinu	% plné dávky CI-994
Absolutní počet neutrofilů/ul
nad 1000	100	100
500 až 999	75	100
pod 500	100	0
nebo počet destiček/ul
nad 100000	100	100
50000 až 99000	75	100
pod 50000	0	0
nebo s léčbou spojená nehematologická toxicita
Stupeň 0-2	100	100
Stupeň 3 nebo 4	0	0

Úprava dávkováni gemcitabinu uvedená výše je založena na výsledcích z téhož dne. Například odeberte 8. den krev na krevní obraz a zkontrolujte výsledky. Určete, zdali má být pokračováno v léčbě stejnou dávkou. Pokud ano, pacient i nadále užívá dávku CI-994. 0 dvě hodiny později podejte dávku gemcitabinu, která, je-li to nezbytné, může být snížena.

Rozhodnutí přerušit léčbu dávkou CI-994 během cyklu je založeno na nežádoucích účincích nebo výsledcích hematologie.

Příklad. Pacient má počet destiček 11. den 45000/ul. Poučte pacienta, aby zastavil užívání kapslí CI-994 (a vrátil všechny lahvičky od léků podávaných v rámci studie). Naberte krev na další krevní obraz 15. den. Pokud je počet destiček 15. den mezi 50000 a 99000/ul, podejte 75% vypočítané dávky gemcitabinu, destiček 15.

ale nepodávejte dávku CI-994. Pokud je počet den pod 50000/ul, nepodávejte znovu gemcitabin.

Zvažte ukončení cyklu a sledujte pacienta do zotavení. V každém případě může být pacientovi podán následný léčebný cyklus za použití stejné úvodní dávky gemcitabinu (1000 mg/m²) a dávky CI-994, která byla snížena o 2 mg/m².

Formulace léku a jeho stabilita

Gemcitabin je získán z komerčních zdrojů. Sledujte doporučení výrobce týkající se podmínek přípravy, podávání, stability a skladování.

Cl-994 je formulován do identicky vypadajících želatinových kapslí obsahujících 2,5, 5, nebo 25 mg léku v rámci studie, plus inaktivní složku jako je laktóza, kukuřičný škrob a talek nebo polyetylén glykol 6000. Skladujte při kontrolované pokojové teplotě.

Uvedená data ukazují neočekávaně příznivou interakci mezi acetyldinalinem a gemcitabinem a mezi acetyldinalinem a cisplatinou. Tento novotvarů vynález proto poskytuje způsob léčby citlivých zahrnující podání acetyldinalinu v režimu spolu s gemcitabinem, jeho farmaceuticky přijatelnou solí, nebo s zabalení interakci mohou být cisplatinou. Kombinace obecně zahrnuje oddělené každé aktivní složky, čímž vylučuje jakoukoli mezi látkami před podáním. Pokud je požadováno, individuálně zabalené léky umístěny do jedné krabice jako souprava, čož je pohodlné pro ošetřujícího lékaře nebo zdravotnického pracovníka. Citlivé novotvary, které mají být léčeny podle tohoto vynálezu zahrnují solidní nádory, zejména pokročilé solidní nádory a nemalobuněčný nádor, plic, stejně tak jako nádor z buněk ledvin, nádor pankreatu, nádor hlavy a krku, ovariální nádor, myelom, nádor prostaty a nádor prsu.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

Kombinace protinádorových látek obsahující protinádorové množství acetyldinalinu a protinádorové množství gemcitabinu, . jeho farmaceuticky přijatelnou sůl, capecitabin nebo cisplatinu.

Kombinace podle patentového nároku 1 obsahující acetyldinalin formulovaná jako kapsle.

Kombinace podle patentového nároku 1 obsahující gemcitabin nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl formulovaná jako sterilní roztok pro intravenózní infúze.

Kombinace podle patentového nároku 3 obsahující gemcitabin monohydrochlorid.

Kombinace podle patentového nároku 3 obsahující gemcitabin monohydrobromid.

Kombinace podle patentového nároku 2 obsahující cisplatinu.

Kombinace podle patentového nároku 2 obsahující capecitabin.

Způsob léčby nádorového onemocnění zahrnující podání protinádorového množství kombinace podle patentového nároku 1 živočichovi potřebujícímu tuto léčbu.

Způsob patentového nároku 8, kde léčeným nádorovým onemocněním je nemalobuněčný nádor plic.

Způsob patentového nároku 9 zahrnující podání acetyldinalinu v kombinaci s gemcitabin monohydrochloridem.

Způsob patentového nároku 9 zahrnující podání acetyldinalinu v kombinaci s cisplatinou.

Způsob patentového nároku 9 zahrnující podání acetyldinalinu v kombinaci s capecitabinem.

Způsob patentového nároku 8, kde léčeným nádorovým onemocněním je nádor prostaty.

Způsob patentového . nároku 13 zahrnující podání acetyldinalinu v kombinaci s gemcitabin monohydrochloridem.

9 ·

15. Způsob patentového nároku 13 zahrnující podáni acetyldinalinu v kombinaci s cisplatinou.

16. Způsob patentového nároku 13 zahrnující podání acetyldinalinu v kombinaci s capecitabinem.

17. Způsob patentového nároku 8, kde léčeným nádorovým onemocněním je lokálně pokročilý (neresekovatelný Stádium II nebo Stádium III), nebo metastatický (Stádium IV) adenokarcinom pankreatu.

18. Souprava obsahující acetyldinalin v jednom oddíle a gemcitabin nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl v druhém oddíle.

19. Souprava obsahující acetyldinalin v jednom oddíle a cisplatinu v druhém oddíle.

20. Souprava obsahující acetyldinalin v jednom oddíle a capecitabin v druhém oddíle.