CZ20033165A3

CZ20033165A3 - Tri@ a tetraazaacenaftylenové deriváty jako antagonisté receptoru CRF

Info

Publication number: CZ20033165A3
Application number: CZ20033165A
Authority: CZ
Inventors: Diáfabioáromano; Gentileágabriella; Haddachámustapha; St@Denisáyves; Williamsájohnápatrick
Original assignee: Neurocrineáinc; Sbápharmcoápuertoáricoáinc
Priority date: 2001-05-21
Filing date: 2002-05-21
Publication date: 2004-10-13
Also published as: IL158806A0; EP1392689B1; HUP0400854A2; CN1529705A; NO20035148D0; CA2450535A1; ATE343578T1; ES2274972T3; NZ529471A; JP2004530702A; DE60215637D1; MXPA03010635A; BR0209947A; WO2002094826A1; EP1392689A1; AU2002257939B2; ZA200308810B; PL367771A1; DE60215637T2; KR20040018260A

Description

TRI- A , TETRAAZAACENAFTYLENOVÉ RECEPTORU] CRF ‘

DERIVÁTY JAKO ANTAGONISTÉ

Oblast techniky

A

Tento vynález se týká antagonistů CRF receptoru a léčení chorobných stavů podáváním těchto antagonistů teplokrevnému živočichovi, který tuto léčbu potřebuje.

<5?

Dosavadní stav techniky

První faktor uvolňující kortikotropin (corticotropin releasing factor -¹ CRF) 'byl' izolován z ovčích hypothalamů a byl identifikován jako peptid se 41 aminokyselinami (Vale et al., Science, 213: 1394-1397, ^: 1981). Pak byly izolovány

Sekvence humánního CRF a CRF laboratorního potkana a bylo zjištěno, že jsou identické, ale v 7 ze 41 aminokyselinových zbytků od ovčího CRF' odlišné (Rivier et al., Proč. Nati. Acad Sci. USA, 80: 4851, 1983, Shibahara et al., EMBO J., 2: 775,

1983) , ¹

Bylo zjištěno, že CRF vyvolává hluboké změny ve funkcích .endokrinního, nervového a imunitního systému. CRF se považuje > Γ L. ... i. ) :

za hlavní fyziologický regulátor bazální hladiny a stresového uvolňování adrenokortiko-tropního hormonu (ACTH), β-endorfinu a dalších peptidů předního laloku hypofýzy pocházejících z pro-opiomelanokortinu (POMC) (Vale et al., Science, 213: 1394-1397, 1981). Stručně, předpokládá se, že CRF zahajuje své biologické působení vazbou k receptoru v plazmatické membráně, o kterém bylo zjištěno, že se vyskytuje v mozku (DeSouza et al., Science, 224: 1449-1451, 1984), hypofýze (DeSouza et al., • · · · ·

Methods Enzymol., 124: 560, 1986, Wynn et al., Biochem.

Biophys. Res. Comm., 110: 602-608, 1983), nadledvinkách (Udelsman et al., Nátuře, 319: 147-150, 1986) a slezině (Webster, E.L. a E.B. DeSouza, Endocrinology, 122: 609-617, 1988) . CRF receptpr se , spojuje s GTP vazebným proteinem (Perrin et al., Endocrinology, 118: 1171-1179, 1986), který zprostředkovává zvýšení intracelulární produkce cAMP stimulované CRF (Bilezikjian, L.M., a W.W Vale, Endocrinology, 113: 657-662, 1983). Nyní byl receptor pro CRF klonován z mozku laboratorního potkana (Perrin et al., Endo, 133(6): 3058-3061, 1993) a mozku člověka (Chen et al., PNAS, 90(19): 8967-8971, 1993, Vita et al., FEBS, 335(1): 1-5, 1993). Tento receptor je protein se 415 aminokyselinami obsahující sedm domén vnořených do membrány. Při srovnání identity mezi

I sekvencemi laboratorního potkana a člověka byl prokázán vysoký stupeň homologie (97%) na úrovni aminokyselin.

Kromě své úlohy ve stimulaci produkce ACTH a POMC, CRF je také považován za koordinátora mnoha endokrinních, autonomních a behaviorálních reakcí na stres a může být zapojen do patofyziologie afektivních poruch. Kromě toho je CRF považován za klíčového prostředníka v komunikaci mezi imunitním systémem, centrálním nervovým systémem, endokrinním a kardiovaskulárním systémem (Crofford et al., J. Clin. Invest., 90: 2555-2564, 1992, Sapojsky et al., Science, 238: 522-524, '*1987, Tilders et al., Regul. Peptides, 5: 77-84, 1982).

Souhrnem, ukazuje se, že CRF je jeden z rozhodujících í

neurotransmiterů centrálního nervového systému a má velmi důležitou úlohu při integraci celkové reakce organismu na f stres.

Podávání CRF přímo do mozku vyvolává behaviorální, fyziologické a endokrinní reakce, které jsou totožné s reakcemi pozorovanými ú zvířat vystavených stresujícímu prostředí. Například“ intracerebroventrikulární injekce CRF má za následek behaviorální aktivaci (Sutton et al., Nátuře, 297: 331, 1982), trvalou’ aktivaci elektroencefalogramu (Ehlers et al., Brain Res., 278: 332, 1983), stimulaci sympatoadrenálni dráhy (Brown et aí., Endbcrinology, 110: 928, 1982), zvýšeni a krevního tlaku (Fisher et al., 2222, 1982),

Life Sciences srdeční frekvence^!Endocrinology, 110: (Brown et al., zvýšení spotřeby kyslíku 30: 207, 1982), změnu

Si gastrointestinální aktivity (Williams et al., Am.J. Physiol., 253: G582, 1987), utlumení příjmu potravin (Levine et al., Neuropharmacology, 22: 337, 1983), modifikaci sexuálního chování (Sirinathsinghji et al., Nátuře, 305: 232, 1983), zhoršení imunitních funkcí (Irwin et al., Am. J. Physiol., 255: 8744, 1988) .

Kromě toho klinická data svědčí pro to, že CRF může být v mozku nadměrně sekretován u deprese, úzkostných stavů a anorexia nervosa. (DěSouzaj Ann. Reports in Med. Chem., 25: 215-223, 1990) . V souladu s tím klinická data svědčí pro to, že antagonisté CRF receptoru mohou představovat nové antidepresivní a/nebo anxiolytické léky, které mohou být použitelné v léčbě neuropsychiatrických chorobných stavů, při kterých se manifestuje hypprsekrece CRF.

První antagonisté CRF receptoru byly peptidy (viz např.

¹

Rivier et al., patent Spojených Států č. 4 605 642, Rivier et al., Science, 224: 889, 1984). I když tyto peptidy prokázaly, že antagonisté CRF receptoru mohou zmírnit farmakologické ¹ * i L' reakce na CRF, peptidoví antagonisté CRF receptoru trpí obvyklými nevýhodami peptidových léčiv včetně nedostatku stability a omezené aktivity při perorálním podávání. Nověji byly publikovány články o antagonistech CRF receptoru s malými molekulami. Jako antagonisté CRF receptoru byly například popsány substituované 4-thio-5-oxo-3-pyrazolinové deriváty • · ··

(Abreu et al., patent Spojených Států č. 5 063 245) a substituované 2-aminothiazolové deriváty (Courtemanche et al., australský patent č. AU-A-41399/93) . Bylo zjištěno, že tyto konkrétní deriváty jsou účinné při inhibici vazby CRF ke svému receptoru v rozsahu 1 až 10 μΜ a rozsahu 0,1 až 10 μΜ, v daném pořadí.

Díky fyziologickému významu CRF zůstává žádoucím cílem vývoj biologicky aktivních malých molekul majících významnou vazebnou aktivitu pro CRF receptor a schopnost antagonizovat ^l<-· CRF receptor. Takoví antagonisté CRF receptoru by byli použitelní v léčbě endokrinních, psychiatrických a . ¹ 'i I ;

neurologických chorobných i,stavů nebo nemocí, včetně chorobných stavů spojených se stresem obecně.

I když byly učiněny významné kroky k dosažení CRF regulace prostřednictvím podávání (antagonistů CRF receptoru, _r v oboru zůstává potřeba účinnýchj antagonistů CRF receptoru s malou molekulou. Existuje ' také potřeba farmaceutických přípravků obsahujících takové antagonisty CRF receptoru, a také způsobů týkajících se jejich použití k léčení chorobných stavů spojených se stresem. Předkládaný vynález naplňuje tyto potřeby a poskytuje další související výhody.

Podstata vynálezu »

Ve stručnosti, tento vynález se obecně týká antagonistů *’ CRF receptoru a konkrétněji antagonistů CRF receptoru majících následující obecnou strukturu (I):

I '· ‘t '

včetně jejich stereoizomerů, předléčiv a farmaceuticky přijatelných solí, kde Ri, R₂, R4, R5, R, A, X a Y jsou, jak je definováno níže.

Antagonisté CRF receptorů podle tohoto vynálezu jsou použitelné v širokém rozsahu terapeutických aplikací a mohou být použity k léčení celé řady chorobných stavů nebo nemocí, včetně chorobných stavů spojených se stresem. Takové metody zahrnují podávání účinného množství antagonisty CRF receptorů podle tohoto vynálezu, výhodně ve formě farmaceutického přípravku, živočichovi, který tuto léčbu potřebuje. V souladu ;'í ! .1 s tím, v dalším provedení jsou popsány farmaceutické přípravky obsahující jeden nebo více antagonistů CRF receptorů podle tohoto vynálezu v kombinaci s farmaceuticky přijatelným nosičem a/nebo ředidlem.

i

Tyto a další aspekty. vynálezu budou zjevné po odkazu na ' ^; V Ί <

následující podrobný popis'. Za tímto účelem jsou v tomto textu uvedeny různé literární odkazy, které detailněji popisují í určité postupy, sloučeniny a/nebo přípravky, a jsou tímto ve své úplnosti zahrnutý formou odkazu.

• ·

Podrobný popis vynálezu

Předkládaný vynález se obecně týká sloučenin použitelných jako 'antagonisté receptoru pro faktor uvolňující kortikotropin (CRF) .

V prvním provedení antagonisté CRF receptoru podle tohoto vynálezu mají následující strukturu (I) :

^!. (r?

včetně jejich sťereoizpmerů, předléčiv přijatelných solí, kde:

a farmaceuticky

A je vazba nebo skupina C=i(Z) ,

X je atom dusíku nebo skupina CR3,

Y je skupina -N=, s,kupipa j-N (R₇)-, skupina -C(R₈)= nebo skupina -0-,

Z je atom 0, atom S nebo skupina NRg,

Ri je alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina nebo substituovaná heteroarylová skupina,

R₂ je atom vodíku, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, alkoxyskupina, thioalkylová skupina, atom halogenu, kyanoskupina, halogenalkylová skupina,

R3 je atom vodíku, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, atom halogenu nebo halogenalkylová skupina,

Ί

Ί ;

R₄ je atom vodíku, ‘alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, skupina C(O)Ri, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heterocyklus nebo substituovaný heterocyklus, *

R₅ je atom vodíku, . atom halogenu, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, arylová skupina, substituovaná arylová skupina,, heteroarylová skupina, substituovaná heteroarylová skupina, alkoxyskupina, thioalkylová skupina, skupina C(O)Ri, skupina NRioRn nebo kyanoskupina, <3 ,····.

R₆ je atom vodíku, i... atom halogenu, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina, substituovaná heteroarylová skupina, alkoxyskupina, thioalkylová skupina, skupina C(O)Ri, skupina NRioRn nebo kyanoskupina,

R₇ je atom vodíku, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, skupina C(O)R_lz arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina nebo substituovaná heteroarylová skupina,

Re je atom vodíku, atom halogenu, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, _ti heterparylová skupina, substituovaná heteroarylová skupina, alkoxyskupina, thioalkylová skupina, C(0)alkylová skupina, skupina NRioRn npbo kyanoskupina,

Rg je atom vodíku, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina \ -nebo substituovaná heteroarylová skupina, a

Rio, Riiz jsou stejné-nebo ócllišné a jsou nezávisle atom vodíku, alkylová skupina, (substituovaná alkylová skupina, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina, substituovaná heteróarylóvá skupina.

;l’ v • · · ·

9 9 9999 ^U<? V ·',!'!

Jak se v tomto, textu používá, výše uvedené termíny mají následující význam:, ' \

Termín alkylová skupina znamená necyklický nebo cyklický, nesaturovaný nebo saturovaný alifatický uhlovodík s přímým řetězcem nebo rozvětvený, obsahující 1 až 10 atomů uhlíku, zatímco termín nižší alkylová skupina má stejný význam jako alkylová skupina, ale obsahuje 1 až 6 atomů uhlíku. Příklady saturovaných alkylových skupin s přímým řetězcem jsou methylová skupina, ethylová skupina, n-propylová skupina, n-butylová -skupina, n-pentylová skupina, n-hexylová skupina, apod., zatímco saturované rozvětvené alkylové skupiny jsou isopropylová skupina, sek-butylová skupina, isobutylová skupina, terc-butylová skupina, isopentylová skupina, apod. Příklady saturovaných cyklických alkylových . skupin jsou cyklopropylová skupina, cyklobutylová skupina, cyklopentylová skupina, cyklohexylová skupina, -CH₂cyklopropýlová skupina, -CH₂cyklobuťylová ^; skupina, -CH₂cyklopentylová skupina, -CH₂cyklohexylová skupina,·apod., zatímco nesaturované cyklické alkylové skupiny ‘ jsou cyklopentenylová skupina cyklohexenylová skupina, apod. Cyklické alkylové skupiny, také nazývané jako hoippcykli^ké kruhy, zahrnují ,di- a polyhomocyklické kruhy, jako <je například dekalin a adamantylová skupina. Nesaturované alkylové skupiny obsahují alespoň jednu dvojitou nebo trojnou vazbu mezi přilehlými atomy uhlíku (nazývané jako alkenylová skupina nebo alkynylová skupina, v daném pořadí). Příklady alkenylových skupin s přímým řetězcem a rozvětvených skupin jsou ethylenylová skupina, propylenylová skupina, 1-butenylová skupina, ,2-butenylová skupina, isobůtylenylová skupina, 1-pentenylová skupina, 2pentenylová skupina, G-methyl-l-butenylová skupina, 2-methyl2-butenylová skupina, 2,3-dimethyl-2-butenylová skupina, apod., zatímco příklady alkynylových skupin s přímým řetězcem • · · · · furylová skupina, indolylová a rozvětvených skup_;in jsou; acetylenylová skupina, propynylová skupina, 1-butynylová skupina, 2-butynylová skupina, 1pentynylová skupina, 2-pentynylová skupina, 3-methyl-lbutynylová skupina,¹apod.

Termín „arýlová skupina znamená aromatickou

-i;'i , , karbocyklickou skupinu, jako je například fenylová skupina nebo naftylová skupina.

ϊΐ ΐ

Termín „arylalkylová skupina znamená alkylovou skupinu mající alespoň jeden atom vodíku alkylové skupiny nahrazený arylovou skupinou^ jako je například benzylová skupina, skupina -CH₂-(1- nebo2-naftyl) , - (CH₂) ₂fenylová skupina,

- (CH₂) ₃fenylová skupina, .skupina -CH (fenyl) ₂, apod.

Termín „heteroarylová skupina znamená aromatický heterocyklický kruh s 5 až 10 členy a mající alespoň jeden heteroatom vybraný ze skupiny, kterou tvoří atom dusíku, atom kyslíku a atom síry a obsahující alespoň 1 atom uhlíku, včetně jak monocyklických tak bicyklických

Příklady heteroarylových skupin jsou skupina, benzofuranylová benzothiofenylová skupina, skupina, . isoindolylová kruhových systémů, (ale bez omezení) skupina, thiofenylová pyrrolylová skupina, skupina, azaindolylová skupina, pyridylová skupina, chinoliňylová skupina, isochinolinylová skupina, oxazolylová skupina, isooxazolylová skupina, benzoxazolylová skupina, pyrazolylová skupina, imidazolylová skupina, benzimidazolylová skupina, thiazolylová skupina, benzothiazglylová skupina, isothiazolylová skupina, :íj pyridazinylová skupina, pýrimidinylová skupina, pyrazinylová skupina, triazinylová Skupina, cinnolinylová skupina, ftalazinylová skupina,a chinazolinylová skupina.

Termín „heteroarylallcylová skupina znamená alkylovou skupinu mající alespoň jeden atom vodíku alkylové skupiny • · · • · · · • · · · ·« • · · • · · · · · nahrazen heteroarylovou skupinou, jako je například -CH₂pyridinylová skupina, -CH₂pyrimidinylová skupina, apod.

Termín „heterocyklus (v tomto textu také nazýván heterocyklický kruh) znamená 5- až 7-členný monocyklický nebo 7- až 14-členný polycyklický, heterocyklický kruh, který je buď saturovaný, nesaturovaný nebo aromatický a který obsahuje 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoři atom dusíku, atom kyslíku a atom síry a kde heteroatomy dusíku a síry mohou být volitelně oxidovány a heteroatoin dusíku může být volitelně kvartérnizován, včetně bicyklických kruhů, ve kterých kterýkoliv výše iuvedený heterocyklus je kondenzován k benzenovému kruhu, také tricyklickému (a mu) heterocyklickému kruhu. Heterocyklus může být připojen prostřednictvím kteréhokoliv heteroatomů nebo atomu uhlíku. Heterocykly zahrnují heteroarylové skupiny, jak byly definovány výše. Kromě aromatických heteroarylových skupin,, uvedených výše, heterocykly tedy také zahrnují tyto skupiny (ale pyrrolidinonylová piperidinylová morfolinylová pyrrolidinylová hydantoinylová skupina, skupina, skupina, oxetanylová bez omezení) skupina, : skupina, valerolaktamylová skupina> oxiranylová skupina, skupina, tetrahydrofuranylová skupina, tetrahydropyranylová skupina, tetrahý^řopýrřdinylová 'skupina, tetrahydropyrimidinylová skupina, tetrahydrothiofenylová skupina, tetrahydrothiopyranylová skupina, tetrahydropyrimidinylová skupina, tetrahydrothiofenylová skupina, tetrahydrothiopyranylová skupina, apod.

Termín „heterocykloalkylová skupina znamená alkylovou skupinu mající alespoň jeden atom vodíku alkylové skupiny nahrazený heterocyklem, jako je například -CH₂morfolinylová skupina, apod.

·«·· ·· • · · · · ·

Termín „cykloalkylová skupina znamená saturovaný nebo nesaturovaný (ale ne aromatický) karbocyklický kruh obsahující až 8 atomů uhlíku, jako je například cyklopentanová skupina, cyklohexanová skupina, cykloheptanová skupina, cyklohexenová skupina apod.

Termín „cykloalkylcykloalkylová skupina znamená cykloalkylový kruh íkondenzovaný k cykloalkylovému kruhu, jako je například dekaliriJ,· y

Termín „cykloalkylarylová skupina znamená cykloalkylový kruh kondenzovaný k arylové skupině, jako je například tetralin.

Termín „cykloalkylheterocyklická skupina znamená cykloalkylový kruh kondenzovaný k heterocyklickému kruhu.

alkylová skupina, arylová heteroarylová skupina, substituovaná substituovaná skupina,

Termín substituovaná, jak se v tomto textu používá, znamená kteroukoliv zvýše uvedených skupin (jako je např.

skupina, arylalkylová skupina, heteroarylalkylová skupina, heterocyklus, heterocykloalkylová skupina, apod.), kde alespoň jeden atom vodíku je nahrazen substituentem. V případě, kde je substituentem ketoskupina (-C(=0-) jsou nahrazeny dva atomy vodíku. Když je skupina substituovaná, termín substituent v kontextu tohoto vynálezu je atom halogenu, hydroxyskupina, kyanoskupina, nitroskupina, aminoskupina, alkylaminoskupina, •I · | dialkylaminoskupina,' alkylova skupina, alkoxyskupina, alkylthioskupina, halogenalkylová skupina, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, arylalkylová skupina, arylalkylová skupina, heteroarylová skupina, heteroarylová skupina, heteroarylalkylová substituovaná; heteroarylalkylová skupina, heterocyklus, substituovaný heterocyklus, heterocykloalkylová skupina, substituovaná heterocykloalkylová/ skupina, skupina

NR_aR_b, skupina -NR_aC (=0) R_b, skupina -NR_aC (=0) NR_aR_b, skupina i»?· ’Ν·· · <;

·· ···· <ý

-NR_aC (=0) 0R_b, skupina -NR_aS0₂Rb, -0R_a, skupina -C(=0)R_a, skupina -C(=0)OR_a, skupina -C (=0) NR_aRb, skupina -0C (=0) NR_aR_b, skupina -SH, skupina -SR_a,_ť. skupina -SOR_a, skupina -S(=0)₂R_a, skupina -OS(=O)₂R_a, skupina -S(=O)₂OR_a, kde R_a a R_b jsou stejné nebo odlišné a nezávisle jsou atom vodíku, alkylová skupina, halogenalkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, arylalkylová skupina, substituovaná arylalkylová skupina, heteroarylová skupina, substituovaná heteroarylová skupina, heteroarylalkylová skupina, substituovaná heteroarylalkylová skupina, heterocyklus, substituovaný heterocyklus, heterocykloalkylová skupina nebo substituovaná heterocykloalkylová skupina.

Termín „halogen znamená atom fluoru, atom chloru, atom d <

bromu a atom jodu. ’ ' ^:

Termín „halogenalkylová skupina znamená alkylovou skupinu mající alespoň jeden atom vodíku nahrazen atomem halogenu, jako je například trifluormethylové skupina apod.

I. ú ·,'

Termín „alkoxyskupina znamená alkylovou skupinu připojenou prostřednictvím' kyslíkového můstku (tj. -0-alkylová skupina), jako je, například methoxyskupina, ethoxyskupina, apod. ' .

Termín „alkylthioskupina znamená alkylovou skupinu připojenou prostřednictvím' sírového můstku (tj . -S-alkylová skupina), jako · je' například methylthioskupina, ethylthioskupina, apod.

Termín „alkylsulfonylová skupina znamená alkylovou skupinu připojenou prostřednictvím sulfonylového můstku (tj. -S0₂-alkylová skupina), jako je například methylsulfonylová skupina, ethylsulfonylová skupina, apod.

···· fcfc ·· ···· 49 9

9 9 9 9 9 9 9 9

9 4 4 4 4 9 4 4 4

4 4 4 9 4 9 9 9 9 449 4

9 4 4 4 4 4 4 4 9

99 94 4 94 ·

Termín „alkylaminoskupina a dialkylaminoskupina znamenají jednu nebo dvě alkylové skupiny připojené prostřednictvím atomu dusíku (tj. N-alkylová skupina), jako je například methylaminoskupina, ethylaminoskupina, dimethylaminoskupina, diethýlaminoskupina, apod.

Termín „hydroxyalkylová skupina znamená alkylovou skupinu substituovanou alespoň jednou hydroxylovou skupinou.

Termín „mono- nebo di(cykloalkyl)methylová skupina představuje methylovou skupinu substituovanou jednou nebo

V: ’ ·.

dvěma cykloalkylovými · skupinami, jako je například cyklopropylmethyloyá _t skupina, dicyklopropylmethylová skupina, apod.

Termín „alkylkarbonylalkylová skupina představuje alkylovou skupinu substituovanou -C (=0) alkylovou skupinou.

Termín „alkylkarbonyloxyalkylová skupina představuje alkylovou skupinu substituovanou -C(=0)0-alkylovou skupinou nebo -0C(=0)alkylovou skupinou.

Termín „alkyloxyalkylová skupina představuje alkylovou skupinu substituovanou -0-alkylovou skupinou.

Termín „alkylthióalkylová skupina představuje alkylovou skupinu substituovanou S-alkylovou skupinou.

Termín „mono- nebo di(alkyl)aminoskupina představuje aminoskupinu substituovanou jednou alkylovou skupinou nebo dvěma alkylovými skupinami,.v daném pořadí.

i . I

Termín „mono- nebo di(alkyl)aminoalkylová skupina představuje alkylovou skupinu substituovanou mono- nebo di(alkyl)aminoskupinou.

ί

4444

V závislosti na subštituentech A, sloučeniny podle tohoto vynálezu struktury (II) až (XII):

X, Y, reprezentativní zahrnují následující

Ve specifických provedeních tohoto vynálezu reprezentativní Ri skupiny podle tohoto vynálezu jsou např.

(ale bez omezení) 2,4-dichlorfenylová skupina, 2,4-dimethylfenylová skupina, 2-chlor-4-methylfenylová skupina, 2-methyl4-chlorfenylová skupina, 2,4,β-trimethylfenylová skupina, ···· ···· ·· • · · • · · • · · • · · · • fe ·· • fe • · • · • · · • · ·· ·· · • · · • · · fe • · ···· • · · *· ·

2-chlor-4-methoxyfenylová skupina, 2-methyl-4-methoxyfenylová skupina, 2,4-dimethoxyfenylová skupina, 2-trifluormethyl-4chlorfenylová skupina, 3-methoxy-4-chlorfenylová skupina,

2,5-dimethoxy-4-chlorfenylová skupina, 2-methoxy-4-trichlormethylfenylová skupina, 2-methoxy-4-isopropylfenylová skupina,

2- methoxy-4-trifluormethylfenylová skupina, 2-methoxy-4isopropylfenylová skupina,' 2-methoxy-4-methylfenylová skupina, 4-methyl-6-dimethylaminopyridin-3-ylová skupina, 4-dimethylamino-6-methylpyridin-3-ylová skupina, 6-dimethylaminopyridin3- ylová skupina a 4-dimethylamino-pyridin-3-ylová skupina.

Podobně, reprezentativní R₂ skupiny zahrnují atom vodíku ' ^;· i!

a alkylovou skupinu, jako je například methylová skupina a ethylová skupina, zatímco reprezentativní R₃ skupiny zahrnují atom vodíku, atom halogenu, jako je například atom chloru, atom fluoru a atom bromu, alkylovou skupinu, jako je například methylová skupina :a ethylová skupina, nebo halogenalkylovou skupinu, jako je například'trifluormethylová skupina.

Výhodné sloučeniny podle vynálezu jsou:

7-methyl-l-(1-propylbutyl)-5-[4-(1,1,2-trifluorethyl)-2trifluormethylfenyl]1,2,2a,3,4,5-exahydro-l, 5, 6, 8tetraazaacenaftylen (5-1-1),

3- methyl-4-[7-methyl-l-(1-propylbutyl)-3,4-dihydro-lH-l,5,6,8tetraazaacenaftylen-5-yl]benzonitril (5-1-2),

4- [1-(1-ethylpropyl)-7-methyl-3,4-dihydro-lH-l, 5, 6, 8tetraazaacenaftylen-5-yl]-3-methylbenzonitril (5-1-3),

3-chlor-4-[7-methyl-Í-(1-propylbutyl)-3,4-dihydro-lH-l, 5, 6, 8tetraazaacenaftylen-5-i-yl] benzonitril (5-1-4) ,

3-chlor-4-[1-(1-ethylpropyl)-7-methyl-3,4-dihydro-lH-l, 5,6,8tetraazaacenaftylen-5-yl]benzonitril (5-1-5),

5-(2,4-bis-trifluormethylfenyl)-1-(1-ethylpropyl)-7-methyl⁴ 'j1.3.4.5- tetrahydro-l,5,6,8-tětraazaacenaftylen (5-1-6) , ' d ¹ 1

5-(2,4-bis-trifluormethylfenyl)-7-methyl-l-(1-propylbutyl)1.3.4.5- tetrahydro-l,5,6-triaza-acenaftylen (6-1-1).

Sloučeniny podle,,,., předkládaného vynálezu mohou obecně být použity jako volné báze. Alternativně, sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou být použity’ ve formě kyselých adičních solí. Kyselé adiční soli aminosloučenin jako volných bází podle předkládaného vynálezu, mohou být připraveny metodami v oboru dobře známými a mohou být vytvořeny z organických a anorganických kyselin.

Vhodné organické kyseliny jsou maleinová, jablečná, fumarová, benzoová, askorbová, jantarová, methansulfonové, p-toluensulfonové, octová, šťavelová, propionová, vinná,, salicylová, citrónová, glukonová, mléčná, mandlová, skořicová, asparagová, stearová, palmitová, glykolová, glutamová a benzensulfonová kyselina. Vhodné anorganické kyseliny jsou chlorovodíková, .bromovodíková, sírová, fosforečná a dusičná kyselina. Termín farmaceuticky přijatelná sůl struktury (I) tedy zahrnuje kteroukoliv a všechny přijatelné formy solí.

Obecně mohou být 'sloučeniny struktury (I) vytvořeny podle technik organické sýňtézý, které jsou odborníkům v oboru známy, a také reprezentativními metodami uvedenými v příkladech.

Konkrétně, sloučeniny vzorce (Xla) mohou být připraveny

I podle následujícího,,^schématg 1, počínaje sloučeninami (XIII), ve kterých je hydroxyskupina příhodně chráněna vhodnou chránící skupinou (Pg), jejichž příprava je popsána v následujících příkladech:

<·

Schéma 1

- kde :............................. ........_.........

krok a označuje oxidační štěpení dvojné vazby například ozonizací, následované redukčním zpracováním, lijj·' í:,i’ !,.... .

krok b označuje konveřzi hydroxyskupiny na odstupující skupinu, jako je například mesylát, krok c označuje alkylaci vhodným anilínovým derivátem

RiNH₂ v silných bazických podmínkách, následovanou in šitu intramolekulární cyklizaci, krok d označuje odstranění skupiny chránící hydroxyskupinu (např. Et₃N - 3HF v DMF při teplotě místnosti přes noc), krok e označuje konverzi hydroxyskupiny na odstupující skupinu, jako je například mesylát, krok f označuje, reakci, s vhodným aminem R4NH2 zahříváním,, krok g označuje dehydrogenaci oxidací vhodným oxidačním' činidlem (např. DDQ) 1 i 1 • ·

• 18

Výchozí sloučeniny (XIII) mohou být vhodně připraveny podle následujícího schématu 2:

Schéma 2

(ΧΠΙ) kde:

krok a' označuje reakci s vhodným amidinem a intramolékulární cyklizaci v bazických podmínkách (tj. MeONá, zahřívání k varu pod zpětným chladičem v toluenu), krok b' označuje chloraci (podobně, jak byla popsána v práci Wayne G. C. et al., J. Prakt. Chem., 342(5),504-7,:2000) , γ· ¹ ,γ · »S krok c' označuje allylaci allyljodidem v 0 C v bazických podmínkách (např. LiHMDS)

krok ď označuj e redukčním podmínkách redukci činidlem (CH₂C1₂, esterové skupiny vhodným , např. DIBA1-H, v obvyklých 0°C až teplota místnosti), krok e* označuje ochranu hydroxyskupiny, výhodně s t-BuPh₂SiCl (TBP), v DMF s DMAP jako katalyzátorem (0°C až teplota místnosti).

Sloučeniny vzorce (Xlb) mohou být vhodně připraveny podle &. následujícího schématu 3, počínaje sloučeninami vzorce (XXV) :

Schéma 3

pcooj) pro>>

kde:

krok, a označuje homologaci atomu uhlíku Wittigovou reakcí s vhodným ylidem v přítomnosti vhodné organické báze, jako je například n-BuLi. Reakce byla

prováděn ^! v aprotickém například acetonitril například tetrahydrofuran, rozpouštědle, jako je nebo ether, jako je krok b označuje obvyklou hydrolýzu v kyselých podmínkách ! ·!( krok c' (např. HCl ; v THF) enoletheru (XXVI), li lj - ‘i označuje redukci aldehydové skupiny redukčním činidlem (např. NaBH₄) , vhodným krok d označuje ochranu hydroxyskupiny, výhodně s t-BuMe₂SiCl (TBS) , v DMF s imidazolem a DMAP jako ka tály zátopem (0°C až teplota místnosti), krok e označuje Buchwaldovu reakci s vhodným anilínovým derivátem R1NH2 prováděnou za použití mikrovln, krok f označuje odstranění skupiny chránící

.......hydroxyskupinu.....(např. Et₃N - 3HF v DMF při teplotě místnosti přes noc), krok g označuje konverzi hydroxyskupiny na odstupující skupinu, jako je například mesylát, krok h označuje intramolekulární cyklizaci podmínkách.

v bazických

Alternativně, konečné sloučeniny (Xlb) mohou být získány ze sloučenin (XXXI) intramolekulární cyklizaci, například mesylací hydroxyskupiny v bazických podmínkách (tj. Et₃N) následovanou in šitu (cyklizaci (krok i).

/..Mř _:

Ve výhodném provedení; vynálezu sloučenin (Xla) a (Xlb), R₃, R₅, R₆ a R₈ jsou atom vodíku.

Příklady vhodných skupin chránících zahrnují trihydrokarbylsilylethery, jako hydroxyskupinu je například trimethylsilylnebo ^;.-É‘ ť-butyldimethylsilylether. Skupiny chránící hydroxylovou skupinu mohou být odstraněny známými

standardními postupy jako/,, jsou například postupy popsané v práci Protective Groups in Organic Chemistry, stránky 46119, vydavatel J. . F. W. McOmie, Plenům Press, 1973) . Například, když Rb je t-butyldimethylsilylová skupina, může být odstraněna působením trihydrofluoridu triethylaminu.

Předkládaný vynález také zahrnuje izotopově značené sloučeniny, které jsou totožné se sloučeninami vyjmenovanými u vzorců I a následujících, ale s výjimkou, že jeden nebo více atomů je nahrazeno atomy, které mají atomovou hmotnost nebo hmotnostní číslo odlišné od atomové hmotnosti nebo hmotnostního čísla obvykle zjišťovaných v přírodě. Příklady izotopů, které mohou být zavedeny do sloučenin podle vynálezu, zahrnují izotopy vodíku, uhlíku, dusíku, kyslíku, fosforu, fluoru, jodu a chloru, jako jsou například ³H, ⁿC, ¹⁴C, ¹⁸F, ¹²³I a ¹²⁵I. ....... -- --....._____

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu a farmaceutický přijatelné soli sloučenin, ;které obsahují výše uvedené izotopy a/nebo další izotopy 'jiných atomů, jsou v rozsahu předkládaného vynálezu. Izotopově značené sloučeniny podle předkládaného vynálezu, například sloučeniny, do kterých jsou zavedeny radioaktivní izotopy, jako je například ³H, ¹⁴C, jsou použitelné v testech tkáňové distribuce léčiva a/nebo substrátu. ^v--^j---------~ 4-- ³t

14,

Izotopy značené; tritiem, tj . H, a uhlíkem 14, tj . obzvláště výhodné pro svou snadnost přípravy a

C, jsou schopnost detekce. Izotopy ^X1C a ⁸F jsou obzvláště užitečné v metodě PET (pozitronová emisní tomografie) a izotop ¹²⁵I je obzvláště použitelný v metodě SPÉCT (jednofotonová emisní počítačová tomografie), všechny použitelné při zobrazování mozku. Dále, substituce, těžšími izotopy, jako je například deuterium, t j. ²H, může umožnit určité terapeutické výhody, které jsou výsledkem větší metabolické stability, například prodlouženého poločasu in vivo nebo snížených požadavků na • 9

9999 dávku, a proto mohou být za určitých okolností výhodné.

Izotopově značené sloučeniny vzorce I a následujících, podle tohoto vynálezu, mohou obecně být připraveny prováděním postupů popsaných ve schématech a/nebo v příkladech uvedených níže substitucí neizotopově značeného činidla snadno dostupným izotopově značeným činidlem.

í ; . „ ~ , ,

Účinek sloučeniny·; jako, antagonisty CRF receptoru muže být určen různými testovacími ' metodami. Vhodní antagonisté CRF podle tohoto vynálezu jsou schopni inhibovat specifickou vazbu CRF ke svému receptoru a antagonizovat aktivity spojené s CRF. Sloučenina struktury (I) může být hodnocena na aktivitu jako

CRF antagonista jedhím nebo více testy obecně uznávanými pro .4'·,.;' · jí, tento účel, včetně (ale bez omezení) testů popsaných autory Desouza et al. (J; Neuroscience, 7: 88, 1987) a Battaglia et al. (Synapse, 1: 572, 1987). Jak uvedeno výše, vhodní CRF antagonisté zahrnují sloučeniny, které vykazují afinitu k CRF receptoru. Afinita k CRF receptoru může být určena vazebnými studiemi, které měří schopnost sloučeniny inhibovat vazbu radioaktivně značeného CRF (např. [¹²⁵I] tyrosin-CFR) ke svému receptoru (např. receptorům připraveným z membrán buněk mozkové kůry laboratorního potkana). Vazebný test s radioligandem popsaný autory DeSouza et al. (viz výše, 1987) poskytuje test pro určování afinity sloučeniny k CRF receptoru. Taková aktivita je typicky vypočítána z IC₅₀ jako koncentrace sloučeniny nutná pro odstranění 50 % radioaktivně značeného ligandu z receptoru a je uváděna jako hodnota Ki vypočtená následující rovnicí:

Ki= ic₅₀

1⁺L/K_O :

i • · kde L = radioligandj a K_D = afinita radioligandu pro receptor (Cheng a _i Prusoff, Biochem. Pharmacol., 22: 3099, ¹ i

1973). AT

Kromě inhibice vazby ,k CRF receptoru, aktivita sloučeniny jako antagonisty CRF receptoru může být potvrzena schopností sloučeniny antagonizovat aktivitu spojenou s CRF. Například je známo, že CRF stimuluje různé biochemické procesy, včetně adenylátcyklázové aktivity. Sloučeniny mohou být tedy vyhodnoceny jako CRF antagonisté podle své schopnosti antagonizovat CRF stimulovanou adenylátcyklázovou aktivitu například měřením hladiny cAMP. Test adenylátcyklázové aktivity stimulované CRF popsaný autory Battaglia et al. (viz výše, 1987) poskytuje test pro určování schopnosti sloučeniny antagonizovat CRF aktivitu. V souladu s tím může být aktivita 'í » antagonisty CRF receptoru určována testovacími technikami, které obecně zahrnují počáteční vazebný test (jakoje například test popsaný DeSouza (viz výše, 1987)) následovaný protokolem screeningu cAMP (jako je například popsaný f · .Battaglia (viza výše, .1987).) .

' I. ¹ i li -

Pokud jde o vazebnou afinitu k CRF receptoru, antagonisté CRF receptoru podle ^! tohoto vynálezu mají K± menší než 10 μΜ. Ve výhodném provedení tohoto vynálezu má antagonista CRF receptoru K± menší než 1 μΜ a výhodněji menší než 0,25 μΜ (tj. 250 nM) . Jak ^:?je uvedeno detailněji níže, hodnoty K± reprezentativních sloučenin podle tohoto vynálezu mohou být testovány metodami uvedenými v příkladu 7.

Antagonisté CRF receptoru podle předkládaného vynálezu vykazují aktivitu v místě CRF receptoru a mohou být použity jako terapeutická agens pro léčbu celé řady chorobných stavů nebo nemocí včetně endokrinních, psychiatrických a neurologických chorobných stavů nebo nemocí. Konkrétně mohou být antagonisté CRF receptoru podle předkládaného vynálezu

J • · • ·· · · použitelní při léčení poruch fyziologického stavu nebo chorobách, které vznikají při hypersekreci CRF. Protože se předpokládá, že CRF je rozhodující neurotransmiter, který aktivuje a koordinuje endokrinní, behaviorální a automatické reakce na stres, antagoniste CRF receptoru podle předkládaného vynálezu mohou být, použity k léčení neuropsychiatrických chorobných stavů. Neuropsychiatrické chorobné stavy, které mohou být léčitelné antagonisty CRF receptoru podle tohoto vynálezu, zahrnují ¹ _;.afektivní poruchy, jako je například deprese, úzkostné stavy, jako je například generalizovaný úzkostný stav, panická porucha, obsedantně kompulzivní porucha, abnormální agrese, kardiovaskulární chorobné stavy, jako je například nestabilní angína a reaktivní hypertenze a poruchy příjmu potravy, jako je například anorexia nervosa, bulimie a syndrom dráždivého tračníku (IBS). Antagonisté CRF mohou také být použitelní při léčení stresem indukované suprese imunity sdružené s různými chorobnými stavy, a také mozkové mrtvice. Další použití antagonistů CRF podle tohoto vynálezu zahrnuje léčení zánětlivých stavů (jako je například revmatoidní artritida, uveitida, astma, zánětlivá střevní onemocnění (IBD) a gastrointestinální motilita), Cushingova choroba, dětské křečovité stavy, epilepsie a další záchvatové stavy jak u dětí tak u dospělých a abusus různých látek a abstinenční syndrom (včetně alkoholismu).

V dalším provedení vynálezu jsou popsány farmaceutické přípravky obsahující jeden nebo více antagonistů CRF receptoru. Pro účely podávání mohou být sloučeniny podle předkládaného vynálezu formulovány jako přípravky. Farmaceutické přípravky podle farmaceutické předkládaného vynálezu obsahují. antagonistů

CRF receptoru předkládaného vynálezu (fj. sloučeninu struktury podle (I) ) a farmaceuticky přijatelný nosič a/nebo ředidlo. Antagonista CRF • · • ····

receptoru je přítomný v přípravku v množství, které je účinné pro léčení konkrétního chorobného stavu, což je v množství dostatečném dosáhnout aktivitu antagonisty CRF receptoru a výhodně s toxicitou pro pacienta přijatelnou. Výhodně farmaceutické přípravky '«podle předkládaného vynálezu mohou obsahovat antagonistu CRF receptoru v množství od 0,1 mg do 250 mg na dávku v závislosti na způsobu podávání a výhodněji od 1 mg do 60 mg. Vhodné koncentrace a dávky mohou být snadno určeny odborníky v oboru.

Farmaceuticky přijatelné nosiče a/nebo ředidla jsou odborníkům v oboru známy. Co se týče přípravků formulovaných jako tekuté roztoky, přijatelné nosiče a/nebo ředidla zahrnují fyziologický roztok , a sterilní vodu a mohou volitelně zahrnovat antioxidanty, pufry, bakteriostatika a další běžná aditiva. Přípravky mohou také být formulovány jako pilulky, tobolky, granule nebo tablety, které obsahují kromě antagonisty CRF receptoru ředidla, dispergační a povrchově aktivní látky, pojivá a lubrikanty. Odborník v tomto oboru může dále formulovat antagonistu CRF receptoru vhodným způsobem a podle zavedené praxe, jak je například popsáno v práci Remington' s; 'íRharmaceutical Sciences, Gennaro, vyd.

,· IJ 1

Mack Publishing Co.,'Éastorí, PA 1996.

Kromě toho jsou do kontextu tohoto vynálezu také zahrnuta předléčiva. Předléčiva jsou kterékoliv kovalentně vázané nosiče, které uvolňují sloučeninu struktury (I) in vivo, když ' ', í je takové předléčivc,· podáváno pacientovi. Předléčiva jsou obecně připravována modifikací funkčních skupin takovým způsobem, že modifikace je buď rutinní manipulací nebo in vivo odštěpena za vzniku základní sloučeniny.

Co se týče stereóizomerů, sloučeniny struktury (I) mohou mít chirální centra a mohou se vyskytovat jako racemáty, racemické směsi a jako individuální enantiomery nebo ·

> · • · ·

diastereoizomery. Všechny takové isomerní formy jsou zahrnuty v předkládaném vynálezu včetně jejich směsi. Kromě toho některé krystalické formy sloučenin struktury (I) mohou existovat jako polymorfní formy, které jsou zahrnuty v předkládaném vynálezu. Navíc některé ze sloučenin struktury (I) mohou také tvořit solváty s vodou nebo jinými organickými rozpouštědly. Takové solváty jsou podobně zahrnuty do rozsahu tohoto vynálezu.

V dalším provedení předkládaný vynález poskytuje léčení celé řady chorobných stavů nebo nemocí, včetně endokrinních, i · psychiatrických a neurologických chorobných stavů nebo nemocí. Tyto způsoby zahrnují podávání sloučeniny podle předkládaného vynálezu teplokrevnému živočichovi v množství dostatečném léčit chorobný stav nebo nemoc. Takové metody zahrnují systémové podávání ‘ antagonisty CRF receptorů podle tohoto vynálezu výhodně ve formě farmaceutického přípravku. Jak se v tomto textu používá, systémové podávání zahrnuje perorální a parenterální způsoby podávání. Pro perorální podávání vhodné farmaceutické přípravky antagonistů CRF receptorů zahrnují prášky, granule, pilulky, tablety a tobolky, a také tekutiny, sirupy, suspenze a emulze. Tyto přípravky mohou také zahrnovat příchutě, konzervační činidla, suspendující činidla, zahušťovadla a emulgátory a další farmaceuticky přijatelná aditiva. Pro parentální podávání mohou být sloučeniny podle předkládaného vynálezu připraveny ve vodných injekčních roztocích, které mohou obsahovat kromě antagonisty CRF receptorů pufry, antioxidanty, bakteriostatika a další aditiva obecně používaná v takových₍roztocích.

Jak bylo uvedeno výše, podávání sloučenin podle předkládaného vynálezu může být použito k léčení celé řady chorobných stavů nebo nemocí. Konkrétně, sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou být podávány teplokrevnému ·· «··· živočichovi pro l'épbu deprese, úzkostného stavu, panické poruchy, obsedantnš kompulzivní poruchy, abnormální agrese, nestabilní angíny, reaktivní hypertenze, anorexia nervosa, bulimie, syndromu dráždivého tračníku (IBS), zánětlivých střevních onemocnění (IBD), stresem indukované suprese imunity, mozkové mrtvice, zánětů, Cushingovy choroby, dětských křečovitých stavů,'¹ 'epilepsie a· abusu omamných látek nebo abstinenčního syndromu.

Následující příklady jsou poskytnuty pro účely objasnění vynálezu, ne jeho omezení.

Příklady provedení vynálezu

Antagonisté CRF receptoru podle tohoto vynálezu mohou být připraveni metodami popsanými v příkladech 1 až 6. Příklad 7 uvádí metodu určovaní vazebné aktivity (říj k receptoru a příklad 8 popisuje test pro screening sloučenin podle tohoto vynálezu na adenylátcyklázovou aktivitu stimulovanou CRF.

Není-li uvedeno jinak, v popisech meziproduktů a v příkladech platí:

Teploty tání (tt) byly^: určovány na Gallenkampově přístroji pro teplotu tání a jsou nekorigovány. Všechny teploty jsou vyjádřeny v °C. Infračervená spektra byla měřena na přístroji i i pro FT-IR. Spektra protonové magnetické resonance (¹H-NMR) byla zaznamenávána ve 400 MHz,' chemické posuny jsou uváděny v ppm pod (d) Me₄Si, používaného jako vnitřní standard a jsou označeny jako singlety (s), dublety (d), dublety dubletů (dd), triplety (t) , kvarteta (q) nebo multiplety (m) . Sloupcová t · ·.···<

»··· *· . · · · • · · • · · • · · · '·· ·· »· ···· chromatografie byla· prováděna Darmstaadt, Německo). V textu na silikagelu (Merck AG jsou použity následující zkratky: EtOAc = ethylacetát, cHex = cyklohexan, CH2CI2 = dichlormethan, Et₂O = dietylether, DDQ = 2,3-dichlor-5>6dikyano-1,4-benzochinon, DMF = N,N-dimethylformamid, DIPEA = N,N-diisopropylethylamin, MeOH = methanol, Et₃N = triethylamin, TBS = terc-butyldimethylsilyl, TBP = terc-butyldifenylsilyl,

TFA = trifluoroctová kyselina, THF = tetrahydrofuran, DIBA1-H •1· = diisobutylaluminiumhydrid, DMAP = dimethylaminopyridin, LHMDS = hexamethyldisilazan lithný, Tle označuje chromatografii na tenké vrstvě na destičkách s oxidem křemičitým a usušený se vztahuje k roztoku sušenému nad bezvodým sulfátem spďným, teplota místnosti (RT) se vztahuje k teplotě místnosti.· .· i

Příklad 1

Syntéza reprezentativního pyridinového meziproduktu

Sloučenina 2

Chlorpyridin 1 byl rozpuštěn v THF a přidán k míchané suspenzi LAH v THF v -78 °C. Směs byla míchána po dobu 6 hodin v této teplotě a po' dobu 1 hodiny v -30 °C. Směs pak byla opatrně podrobena působení vody, 15% vodného NaOH a vody za důkladného míchání. Směs byla zahřáta na teplotu místnosti a i

• fcfc· * • ♦ • · • · • · · ·· 4 · !

filtrována. Bílý precipitát byl promyt v hojném množství ethylacetátu. Spojené organické části byly usušeny (MgSO₄) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace velmi rychlou chromatografií poskytla požadovaný produkt 2.

Sloučenina 3 f* í* ekvivalentů DMSO bylo přidáno k míchanému roztoku 3 ekvivalentů oxalylchloridu v dichlormethanu v -70 °C. Po 15 minutách byl přidán 1 ekvivalent alkoholu 2 v dichlormethanu, '! i následován triethylaminem. Směs byla ponechána zahřát .se na teplotu místnosti a míchána po dobu 1 hodiny. Směs byla promyta 75 ml vodného hydrouhličitanu sodného, usušena (MgSO₄) a koncentrována ve vakuu. Purifikace velmi rychlou chromatografií poskytla požadovaný produkt 3.

' ’ 1 1.

Sloučenina 4 ¹ ’ l

ekvivalent alkenylmagnesiumbromidu v THF byl přidán k míchanému roztoku 1 ekvivalentu aldehydu 3 v THF v -78 °C.

' i !

Směs byla míchána v. této teplotě po dobu 30 minut, zahřáta na teplotu místnosti a zastavena vodným hydrouhličitanem sodným. Směs pak byla extrahována ethylacetátem a spojené extrakty byly usušeny (MgSO₄) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace velmi rychlou chromatografií poskytla požadovaný produkt 4.

i.

i >

···· ·· • · • · • · • · · <· ···· « 9 • 99 • ··*·

Příklad 2

Syntéza reprezentativního pyrimidinového meziproduktu

Λ.Ύ* !,·.· . Λ

Sloučenina 2

Chlorpyrimidin 1 byl rozpuštěn v THF a přidán k míchané suspenzi LAH v THF v -78 °C. Směs byla míchána po dobu 6 hodin v této teplotě a po dobu 1 hodiny v -30 °C. Směs pak byla opatrně 'podrobena působení vody, 15% vodného NaOH a vody za důkladného míchání. Směs byla zahřáta na teplotu místnosti a filtrována. Bílý precipitát byl promyt v hojném množství ethylacetátu. Spojené organické části byly usušeny (MgSO₄) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace velmi rychlou chromatografií poskytla požadovaný produkt 2.

Sloučenina 3 i * 6 ekvivalentů DMSO bylo přidáno k míchanému roztoku ekvivalentů oxalylchloridu v dichlormethanu v -70 °C. Pó <« ¹ minutách byl ' -přidán 1 ekvivalent alkoholu 2 v dichlormethanu, následován triethylaminem. Směs byla ponechána zahřát se na teplotu místnosti a míchána po dobu 1 hodiny. Směs byla promyta 75 ml vodného hydrouhličitanu sodného, usušena (MgSO₄) a koncentrována ve vakuu. Purifikace velmi rychlou chromatografií poskytla požadovaný produkt 3.

• · · )

Sloučenina 4 ekvivalent alkenylmagnesiumbromidu v THF byl přidán k míchanému roztoku 1 ekvivalentu aldehydu 3 v THF v -78 °C. Směs byla míchána v této teplotě po dobu 30 minut, zahřáta na teplotu místnosti a zastavena vodným hydrouhličitanem sodným. Směs byla extrahována ethylacetátem a spojené extrakty byly usušeny (MgSO₄) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace velmi rychlou chromatografií poskytla požadovaný produkt 4.

Příklad 3

Syntéza reprezentativních sloučenin struktury (I)

·4

Sloučenina 2:

4,26 mmol enonu 1 (sloučenina 4 z příkladů 1 a 2 výše), 4,3 mmol R1NH2 a 4,3 mmol monohydrátu toluensulfonové kyseliny ve 20 ml ethanolu bylo zahříváno v 60 °C po dobu 16 hodin. Směs byla koncentrována, nabrána do 50 ml ethylacetátu, promyta 20 ml vodného NaHCCb, usušena (MgSO₄) a koncentrována ve vakuu. Zbytek byl purifikován na koloně se silikagelem (eluce 25% ethylacetátem v hexanu) za vzniku sloučeniny 2.

Sloučenina 4:

0,83 ml (0,325 M, 0,27 mmol) LDA v THF bylo přidáno k míchanému roztoku 66 mg (0,27 mmol) fosfinoxidu ve 2 ml THF v 25 °C. Po 15 minutách bylo přidáno 11 mg (0, 034 mmol) sloučeniny 2 v 1 ml) THF a směs byla míchána po dobu 15 minut. Bylo přidáno 30 mg NáH, směs byla zahřáta na teplotu místnosti a míchána po dobu 16 hodin. Směs byla naředěna 15 ml vody a extrahována 4 x 10 ml EtOAc. Spojené extrakty byly usušeny (MgSO₄) , koncentrovány ve vakuu a zbytek byl purifikován preparativní TLC (eluci 30 % EtOAc/hexan) za vzniku oleje,

Z? 7 i který pak byl podroben působení 4,2 mg (0,022 mmol) TsOH'H₂O a 0,085 mmol R₄NH_2: ve 130- °C po dobu 16 hodin. Směs byla ochlazena na· teplotu místnosti, naředěna 2 ml vodného NaHCO₃ a extrahována. 4 x 2 ml EtOAc. Spojené extrakty byly usušeny. (MgSO₄) , koncentrovány ve vakuu a zbytek byl purifikován preparativní TLC za vzniku sloučeniny 4.

Sloučenina 3:

mg (0,23 mmol) sloučeniny 2 a 0,35 mmol R₄HNNH₂ bylo zahříváno ve 14 0 °C po dobu 5 hodin. Směs byla ochlazena na teplotu místnosti, naředěna 2 ml vodného NáHCO₃ a extrahována 4 i

x 2 ml EtOAc. Spojené extrakty byly usušeny (MgSO₄) , koncentrovány ve vakuu a zbytek byl purifikován preparativní TLC (eluce 30% EtOAc/hexan) za vzniku sloučeniny 3.

i t •ú?

._li>

• · 9 β · 9 9 ·

Příklad 4 í ϊ' ’ ·, , í

Syntéza reprezentativních,sloučenin struktury (I)

Κ,ΝΗ, ’ >

: 4aZ=O,Y=O

Ϋ=Ο 5^:

-4pŽ^Y=NR^ 4dZ=S, Y—NR/

i 5cZ=S

Sloučenina 2:

4,26 mmol enonu 1 (sloučenina 4 z příkladů 1 a 2), 4,3 mmol RiNH₂ a 4,3 mmol monohydrátu toluensulfonové kyseliny ve 20 ml ethanolu ’bylo zahříváno v 60 °C po dobu 16 hodin. Směs byla . koncentrována,, nabrána do 50 ml ethylacetátu, promyta 20 ml vodného NaHCO₃, usušena (MgSO₄) a koncentrována ve vakuu zbytek byl purifikován na koloně se silikagelem (eluce 25% ethylacetátem v hexanu) za vzniku 2.

Sloučenina 3:

0,16 mmol ketonu 2 , 30 mg (0,16 mmol) monohydrátu p-toluerisulfonové kyseliny a 0,18 mmol R₄NH₂ bylo rozpuštěno t

• · v 0,5 ml ethanolu a zahříváno v 80 °C v uzavřené zkumavce po dobu 20 hodin. Směs byla ochlazena na teplotu místnosti, naředěna 2 ml vodného NaHCO₃ a extrahována 4 x 2 ml z T i i ethylacetátu. Spojene organické extrakty byly usušeny (MgSO₄) , koncentrovány ve vakuu a zbytek byl purifikován preparativní TLC za vzniku 3. ¹ d >

ř·

Sloučenina 4a: (Z=O, Y=O) ' í- 0, 095 mmol ketonu 3 bylo rozpuštěno v 1 ml methanolu a podrobeno působení 25 mg (0,66 mmol) borohydridu sodného. Směs byla míchána po dobu 4 hodin, naředěn 2 ml vodného NaHCO₃a extrahována 4 x 2 ml ethylacetátu. Spojené organické extrakty byly usušeny¹ (MgSO₄) , koncentrovány ve vakuu a zbytek byl nabrán do 1 ml toluenu a podroben působení 0,1 ml 20% roztoku fosgenu......v toluenu. Po ~ 16 hodinách byl - roztok koncentrován ve vakuu a zbytek byl purifikován preparativní TLC za vzniku 32 mg (75%) uhličitanu 4a jako žlutého oleje.

Sloučenina 4b: (Z=S, Y=O)

0,095 mmol ketonu 3 bylo rozpuštěno v 1 ml methanolu a podrobeno působení 25 mg (0,66 mmol) borohydridu sodného. Směs byla míchána po dobu 4 hodin, naředěna 2 ml vodného NaHCO₃i- a extrahována 4 x 2 ml ethylacetátu. Spojené organické extrakty byly usušehy (MgSO₄) , koncentrovány ve vakuu a zbytek ^l’ byl nabrán do 1 ml toluenu a podroben působení 0,1 ml 20% roztoku thiofosgenu v toluenu. Po 16 hodinách byl roztok koncentrován ve vakuu a zbytek byl purifikován preparativní

TLC za vzniku 25 mg (55%) sloučeniny 7b jako žlutého oleje.

•‘ή’ ·,./ ·’·.γ · *11 ^J 1 • ·

Sloučenina 4c: (Z=0, Y=NR₇)

0,095 mmol keton 3 a 0,20 ml aminu bylo rozpuštěno v 1 ml acetonitrilu a bylb podrobeno působení 25 mg kyanoborohydridu sodného. Byla přidána 1 kapka kyseliny octové a směs byla míchána po dobu 4 hodin, naředěna 2 ml vodného NaHCCb a extrahována 4 x 2 ml ethylacetátu. Spojené organické extrakty byly usušeny (MgSO₄) , koncentrovány ve vakuu a zbytek byl nabrán do 1 ml toluenu a podroben působení 0,1 ml 20% roztoku fosgenu v toluenu. Po 18 hodinách byl roztok koncentrován ve vakuu a zbytek byl purifikován preparativní TLC za vzniku urey 4c.

Sloučenina 4d: (Z=S, Y= NR₇)

0, 095 mmol ketonu3 a 0,,20 ml aminu bylo rozpuštěno v 1 ml acetonitrilu a bylo podrobeno působení 25 mg kyanoborohydridu sodného. Byla přidána 1 kapka kyseliny octové a směs byla míchána po dobu 4 hodin, naředěna 2 ml vodného NaHCC>3 a extrahována 4 X₍ 2 ml ethylacetátu. Spojené organické extrakty byly usušeny; (MgS,O₄) , koncentrovány ve vakuu a zbytek byl nabrán do 1 ml toluenu a podroben působení 0, 1 ml 20% roztoku thiofosgenu v toluenu. Po 18 hodinách byl roztok koncentrován ve vakuu a zbytek byl purifikován preparativní TLC za vzniku thiomočoviny,4d.

'1' Y a.- 'V- ·

Sloučenina 5a: (Z=O)

0,16 mmol ketonu 3 ,30 mg urey a 25 mg ZnCl₂ byly zahřívány ve 200 °C po dobu 5 hodin. Směs byla ochlazena na teplotu místnosti, naředěna 2 ml vodného NaHCO₃ a extrahována 4 x 2 ml ethylacetátu. Spojené organické extrakty byly usušeny (MgSO₄) , koncentrovány ve vakuu a zbytek byl purifikován preparativní TLC za vzniku urey 5a.

' ·9 9

Sloučenina 5b: (Z=NRg)

0,070 mmol urey 5a z výše uvedeného postupu a 15 mg (0,070 mmol) PC1₅ bylo zahříváno v toluenu v 90 °C po dobu 3 hodin, během této doby vznikla bílá pevná látka. Směs byla ochlazena na teplotu místnosti a byla podrobena působení 0,10 ml aminu.

Míchání pokračovalo po dobu 30 minut. Směs byla naředěna 2 ml vodného NaHCCh a extrahována 4 x 2 ml ethylacetátu. Spojené i · organické extrakty byly usušeny (MgSO₄) , koncentrovány ve vakuu a zbytek byl purifikován preparativní TLC za vzniku guanidinu 5b.

Sloučenina 5c: (Z = S)

0, 070 mmol urey 5a z^: výše uvedeného postupu a 50 mg . P4S10 bylo zahříváno v .toluenu v 90 °C po dobu 20 hodin. Směs byla ochlazena na teplotu místnosti, naředěna 2 ml vodného NaHCO₃ a extrahována 4 x 2 ml ethylacetátu. Spojené organické extrakty byly usušeny (MgSO₄) , koncentrovány ve vakuu a zbytek byl purifikován preparativní TLC za vzniku thiomočoviny 5c.

Příklad 5

Syntéza reprezentativních sloučenin struktury (Xla)

(Xla) • ·

Meziprodukt 1

Methylester (4,6-dichlor-2-^methylpyrimidin-5-yl) octové kyseliny

1,74 g (3 ekví) sodíku bylo přidáno po částech k 60 ml bezvodého MeOH, v 0°C, v;dusíkové atmosféře. Po spotřebování kovového sodíku bylo přidáno 7,06 g (3 ekv.) hydrochloridu acetamidinu. Po 20 minutách míchání byl odfiltrován precipitovaný NaCl. Roztok 6,04 g (24,5 mmol) diethylesteru 2-ethoxykarbonyljantarové kyseliny ve 20 ml bezvodého MeOH byl přidán k roztoku volného acetamidinu a směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 2 dnů. Reakční směs byla koncentrována do sucha ve vakuu a 8,69 g získané žluté pěny pak bylo mícháno se 70 ml POC1₃ a zahříváno k varu pod zpětným chladičem po dobu 3,5 hodiny. Výsledný roztok byl ochlazen na teplotu místnosti a nalit pomalu do 600 ml směsi ledu a vody a 50 ml NH₄OH za důkladného míchání. Produkt byl extrahován3 x 50 ml EtOAc a 3 x 20_; ml Et2O. Spojené organické extrakty byly promyty 60 ml H2O a 40 ml solanky, usušeny nad Na₂SO₄, filtrovány a koncentrovány ve vakuu. Surový olej byl purifikován velmi rychlou chromatografií (silikagel, cHex/AcOEt 9:1). Meziprodukt 1 byl získán jako 4,27 g (73 %) žluté pevné látky. ;

NMR (^lH, CDCI3) : δ 5,85 (m, 1H) , 5,15 (dq, 1H) , 5,11 (dq, 1H) ,

3,61 (dt, 2H), 2,67 (s, 3H).

MS* (m/z) : 202 [M]⁺, 2C1, 167 [MH-C1]⁺, 1C1.

‘ ‘ ί¹*}“ v’ ^,-Í '·*' ‘ *í *í '

Meziprodukt 2

Methylester’ 2-(4,6-dichlor-2-methylpyrimidin-5-yl) pent-4-enové kyseliny

K roztoku 3 g (1 ekv.) meziproduktu 1 v 60 ml bezvodého

THF, v -78 °C, v dusíkové atmosféře, bylo po kapkách přidáváno · ; · · · esa© ·: :··;·

00* · * *

16,03 ml (1,25 ekv.) LiHMDS, ÍM v THF. Reakční směs byla ochlazena v 0 °C a míchána podobu 30 minut. Reakční směs byla ochlazena v 78 °C a 1,58 ml (1,35 ekv.) allyljodidu bylo po kapkách přidáváno během 1,5 hodiny. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 3 hodin. Pak bylo přidáno 30 ml vody a reakční směs byla extrahována 3 x 60 ml EtOAc. Organické vrstvy bylý spojény a promyty 1 x 20 ml saturovaného vodného NaCl a usušeny nad bezvodým Na₂SO₄. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo evaporováno za vzniku surového produktu, který byl purifikován velmi rychlou chromatografií (silikagel, 5% EtOAq/cyklohexan). Meziprodukt 2 byl získán

jako 2,4	g (8,76 mmol’,	68 ₄%)	1 bílé	pevné látky.
NMR (^XH,	CDC1₃) : δ	5, 77	(m,	ÍH) ,	5,03 (m, 2H)	, 4,43 (dd, 1H),
3,76 (s,	3H) , 3,12	(m,	ÍH) ,	2,78	(m, 1Ή), 2,73	(s, 3H).
MS (m/z):	275 [MH]⁺	1	¹ '

i'0 ''A · ý

Meziprodukt 3

2-(4,6-dichlor-2-methylpyrimidin-5-yl)pent-4-en-l-ol

K roztoku 257 mg (0,937 mmol) meziproduktu 2 v 9,3 ml bezvodého CH₂C1₂, v -78°C, v dusíkové atmosféře, bylo přidáno 5,6 ml (6 ekv.) DIBA1-H, ÍM roztok v hexanu. Po přidání DIBAl-H byla reakční směs míchána v -78°C po dobu 1 hodiny a 2 hodiny v 0°C. Reakční směs byla nalita do roztok 20 ml

0,5N HC1 na ledu	a extrahována 3 x	10	ml CH₂C1₂.	Spojené
organické extrakty	byly usušeny nad	Na₂SO₄, filtrovány a
koncentrovány ve vakuu. Bylo získáno	200	mg meziproduktu 3
jako bezbarvý olej	(výtěžek ¹(86 %) .
NMR (^ΧΗ, CDC1₃) : δ	5,76 (m, ÍH), 5,12	(m,	ÍH), 5,01	(m, ÍH),
4,16 (m, ÍH) , 4,06	(m, ÍH) , 3,91 (m,	ÍH)	, 2,8-2,6	(m, 2H) ,

2,70 (s, 3H),1,50 (t, ÍH).

j ’í ···· ♦ ♦ • 0

MS (m/z): 247 [M]⁺,/2Cl

Meziprodukt 4

5-[1-(terc-butyldifenylsilanyloxymethyl)but-3-enyl]-4,6dichlor-2-methylpyrimidin

·.«· ·_ν, ¹·.! · 'j <

K roztoku 152 mg (0,61 mmol) meziproduktu 3 ve 4 mi bezvodého DMF v 0°C, v dusíkové atmosféře, bylo přidáno 3,8 mg (0,05 ekv.) 4-DMAP, 420 mg (10 ekv.) imidazolu a 0,32 ml, (2 ekv.) Ph₂tBuSiCl. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 2 hodin. K tomuto roztoku bylo přidáno 5 ml saturovaného vodného NH₄C1 ve vodě a směs byla extrahována 2 x 15 ml Et₂O. Spojené organické extrakty byly promyty jednou vodou, jednou solankou a usušeny nad Na₂SO₄. Pevné látky byly filtrovány, rozpouštědlo bylo evaporováno a surový žlutý olej byl purifikován velmi rychlou, chromatografií (silikagel, cHex/EtOAc 95:5). Meziprodukt 4 byl získán jako 270 mg (0,55 mmol, 90 %) bezbarvého oleje.

NMR	(*Η,	CDCI3) : δ	7,65	(dd, 2H),	7,56	(dd, 2H),	7,	49-7,36 (m.
6H) ,	5, 67	(m, 1H),	5,03	(dd, 1H),	4,94	(dd, 1H),	4,	17 (m, 1H) ,
4,00	(m,	2H), 2,70	(s,	3H) , 2,69	(m,	1H) , 2,55	(m	, 1H), 0,98

(S, 9H) . í .

MS (m/z): 485 [MH]⁺, 2C1.

Meziprodukt 5

4-(terc-butyldifenylsilanyloxy)-3-(4,6-dichlor-2methylpyrimidin-5-yÍ'j-l-ol roztokem 1>52 g (3,14 mmol) meziproduktu 4 v 50 ml bezvodé směsi CH₂C1₂ a MeOH (4/1 objem/objem) , v -7 8 °C, O₃ byl probubláván po dobu 15 minut za míchání. Reakční směs byla naředěna 10 ml bezvodého MeOH a bylo přidáno 475 mg (4 ekv.) ····

·'· · ·

NaBH₄, v -78 °C. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 3 hodin, pak byla zastaven 15 ml saturovaného vodného NH₄C1 a produkt byl extrahován 3 x 60 ml EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty 1 x 20 ml saturovaného vodného NaCl a usušeny nad bezvodým Na₂SO₄. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo evaporováno za vzniku surového produktu, který byl purifikován velmi rychlou chromatografií (silikagel, cHex/EtOAc 8:2). Meziprodukt 5 byl získán jako 1,14 g (2,34 mmol, 74 %) žlutého oleje.

'1

NMR ^H, DMSO): δ 7,55-7,33 (m, 10H) , 4,46 (t, ÍH) , 4,09,397,2,92 (m, 3H) , 3,40-3,20 (m, 2H) , 2,00-1, 76 (m, 2H) , 2,56 (s, 3H), 0,84 (s, 9H).

MS (m/z): 489 [MH]⁺.·

Meziprodukt 6

4-(terc-butyldifenylsilanyloxy)-3-(4,6-dichlor-2methylpyrimidin-5-yl)butylester methansulfonové kyseliny

K roztoku 1, 14't g -^ř (2^!, 33 mmol) meziproduktu 5 v 46 ml bezvodého CH₂C1₂, v 0 °C, bylo přidáno 1,6 ml, (5 ekv.) Et₃N a 378 μΐ (2,1 ekv.) MsCl. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 30 minut. Pak bylo přidáno 15 ml vody a reakční směs byla extrahována 3 x 60 ml CH₂C1₂. Spojené organické vrstvy byly promyty 1 x 20 ml saturovaného vodného NaCl a usušeny nad bezvodým Na₂SO₄. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo evaporováno za vzniku surového produktu, který byl purifikován velmi rychlou chromatografií (silikagel, cHex/EtOAc 8:2). Meziprodukt 6 byl získán jako 1,28 g (2,26 mmol, 97 %) žlutého oleje.

NMR ^Η, DMSO) : δ 7,6,0-7,30 (m, 10H) , 4,20,4,10-3, 90 (m,m, 5H) ,

3,07 (s, 3H), 2,57 (s, 3H), 2,34-2,06 (m, 2H), 0,84 (s, 9H).

<»· • · ί

MS (m/z): 567 [MH]⁺.

Meziprodukt 7 - , ••i

5-(terc-butyldifenylsilanyloxymethyl)-4-chlor-2-methyl-8-[4(1,1,2-trifluorethyl)-2-trifluormethylfenyl]-5, 6, 7,8tetrahydropyrido[2,3-d]pyrimidin

K roztoku 15,6 mg (1 ekv.) 2,4-bis(trifluormethyl)anilinu v 1 ml bezvodého DMF; v 0 °C, bylo přidáno 4,5 mg (2,2 ekv.) 80% NaH v oleji. Reakční směs byla míchána v 0 °C po dobu 15 minut, pak při teplotě místnosti po dobu 15 minut. Reakční směs byla ochlazena v 0 °C a byl přidán roztok 38,7 mg (0,068 mmol) meziproduktu 6 v 0,3 ml bezvodého DMF. Reakční směs byla .míchána při teplotě místnosti po dobu 1,5 hodiny. Pak byly přidány 2 ml vody a reakční směs byla extrahována 3 x 7 ml EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty 1 x 10 ml saturovaného vodného NaCl a usušeny nad bezvodým Na₂SO4. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo evaporováno za vzniku surového produktu, který byl purifikován velmi rychlou chromatografií (silikagel, cHex/EtOAc 9:1). Meziprodukt 7 byl získán jako 19,4 mg /(0,029 mmol, 43 %) žlutého oleje.

NMR (^XH, CDC1₃) : δ 7,98, 7,94 (d, d, IH) , 7,88, 7,80 (dd, dd, IH), 7,77-7,58, 7,44-7,32 (m, m, 3H) , 7,35, 7,14 (d, d, IH) , 3,98, 3,94 (dd, dd, IH), 3,73, 3,55 (tm, IH), 3,63, 3,59 (m,m, IH) , 3,44-3, 36 (m, 2H) , 3,38-3,30 (m, 2H) , 2-55, 2, 40 (m, m,

IH) , 2,17, 2,15 (s/š, IH) , 2,04, 1,90 (m, m, IH) , 0,98 (s,

9H) .

MS (m/z) : 664 [MH]⁺.' ·· ····

Meziprodukt 8

·) .

{4-chlor-2-methyl-8-[4-(1,1,2-trifluorethyl)-2-trifluormethylfenyl]-5,6,7,8-tetrahydropyrido[2,3-d]pyrimidin-5-yl}methanol

K roztoku 52 mg (0,078 mmol) meziproduktu 7 v 1 ml bezvodého DMF, při teplotě místnosti, v dusíkové atmosféře, bylo přidáno 102 μΐ (8 ekv.) Et3N*3HF a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Pak byla naředěna 2 ml vody a extrahována 3 x 5 ml Et₂O. Spojené organické vrstvy byly promyty 1 x 7 ml saturovaného vodného NaCl a usušeny nad bezvodým Na₂SO₄. Pevné ,látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo evaporováno., Surový produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií (silikagel, cHex/EtOAc 6:4). Meziprodukt 8 byl získán jako 27 mg (0,063 mmol, 81 %) čirého oleje.

NMR	(²h,	DMSO)	: δ 8,26-8,12 (m, 2H), ' i t ' -	7,90-7,80	(d, 1H), 5,08-
4,98	(t,	1H) ,	3,90-3,60 (2H), 3,70-3,	30 (2H),	3,24-3,10 (1H),
2,30	(m,	1H) ,	2,09 ₍(.s, 3H) , 2,00-1,80	(m, 1H) .
MS (m/z):	425	[MH] ⁺ . ^;

Meziprodukt 9 '

4-chlor-2-methyl-8-[4-(1,1;2-trifluorethyl)-2-trifluormethylfenyl]-5,6,7,8-tetrahydropyrido[2,3-d]pyrimidin-5-ylmethylester methansulfonové kyseliny

K roztoku 130 mg (0,306 mmol) meziproduktu 8 ve 4 ml bezvodého CH₂C1₂, v 0 °C, bylo přidáno 213 μΐ (5 ekv.) Et₃N a 50 μΐ (2,1 ekv.) MsCl. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 3 hodin. Pak bylo přidáno 5 ml vody a reakční směs byla extrahována 3 x 20 ml CH₂C1₂. Spojené organické vrstvy byly promyty 1 x 10 ml saturovaného vodného NaCl a usušeny nad bezvodým Na₂'SO₄. Pevné látky byly filtrovány •i a rozpouštědlo bylo evaporováno za vzniku surového produktu, ·* · · · '· · • · • '9 9 · · ·

9 9999 který byl purifikován velmi rychlou chromatografií (silikagel, cHex/EtOAc 65/35). Meziprodukt 9 byl získán jako 138 mg (0,274 mmol, 90 %) čirého oleje.

NMR (^XH, DMSO): 6 8,30-8,14 (m, 2H) , 7,95-7,80 (d, d, 1H) , 4,56-4,20 (2H), 3,9-3,4 (m, 3H) , 3,25 (s, 3H) , 2,11 (s, 3H) , 2,2-1,9 (m, 2H).

MS (m/z): 425 [MH]⁺.

Meziprodukt 10

7-methyl-l-(1-propylbutyl)-5-[4-(1,1,2-trifluorethyl)-2trifluormethylfenyl]-1,2,2a,3,4,5-hexahydro-l,5,6,8-tetraazaacenaftylen

Směs 135 mg (0/27 mmol) meziproduktu 9 a 0,5 ml (12 ekv. ) heptyl-4-aminu bylá zahřívána ve 130 °C (lahvička se šroubovacím uzávěrem, písková lázeň) po dobu 3 hodin. Reakční směs pak byla ochlazena na teplotu místnosti a naředěna 3 ml CH2CI2. Rozpouštědlo bylo evaporováno a surový produkt byl purifikován velmi, rychlou chromatografií (silikagel, cHex/EtOAc 9:1). Meziprodukt 10 byl získán jako 29,4 mg (0,06 mmol, 23 %) žluté peyné látky.

NMR (^XH, CDC1₃) : δ 7,99 (s, ÍH) , 7,83 (d, ÍH) , 7,48 (d, ÍH) ,

4,06-3,24 (bm, 5H) , 2,23-2,2 (bm, 4H) , 1,74-1,1 (bm, 10H) ,

0,97 (t, 3H), 0,91 (t, 3H).

MS (m/z): 487 [MH]⁺.

Meziprodukt 11

4-[5-(terc-butyldifenylsilanyloxymethyl)-4-chlor-2-methyl-6, 7dihydro-5H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-8-yl]-3-methylbenzonitril ) ' ···· ·· '· · ·· ·99·

K roztoku 14 mg (0,106 mmol) 4-amino-3-methylbenzonitrilu v 3,5 ml DMF, v 0 °C, v dusíkové atmosféře, bylo přidáno

4,5 mg (0,112 mmol) 80% NaH v oleji. Po 30 minutách bylo přidáno 60 mg (0,106 mmol) meziproduktu 6 a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 2 hodin. Pak byla ochlazena na teplotu místnosti a naředěna 20 ml vody. Produkt byl extrahován 3 x 25 ml EtOAc. Spojené organické extrakty byly promyty 2 x 20 ml saturovaného vodného NaCl a usušeny nad bezvodým Na₂SO₄. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo evaporováno. Surový produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií (silikagel^ cyklohexan/EtOAc 80%). Meziprodukt 11 byl získán jako 28 mg (0,52 mmol, výtěžek = 47 %) čirého olej e.

NMR (¹H,	CDC1₃) : δ	7, 65	(s, 1H),	7,55 (m, 4H)	, 7,35	(m, 6H),
7,10 (d,	1H), 6,95	(d,	1H), 3,92	(m, 1H), 3,8	(m, 2H)	, 3,5-3,3
(m, 2H),	2,21 (m,	1H) ,	2,44 (s,	3H), 2,10 (s	, 3H) ,	1,61 (m,
1H), 1,10	(s, 9H).
MS (m/z):	567 [MH]⁺

Meziprodukt 12

4-(4-chlor-5-hydroxymethyl-2-methyl-6, 7-dihydro-5Hpyrido[2,3-d]pyrimidih-8-yl)-3-methylbenzonitril

K roztoku 28 mg (0,05 mmol) meziproduktu 11 v 2,5 ml bezvodého DMF, při teplotě místnosti, v dusíkové atmosféře, i bylo přidáno 44 μΐ (0,290 mmol) Et₃N’3HF a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 12 hodin. Směs byla naředěna 20 ml vody a produkt byl extrahován 3 x 25 ml EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty 2 x 20 ml saturovaného vodného NaCl a usušeny nad bezvodým Na₂SO₄. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo evaporováno. Surový produkt byl

Λ' Ϊ < ¹ purifikován velmi rychlou chromatografií (silikagel, ·· »··· ·· ·

cHex/EtOAc 6:4). Meziprodukt	12	byl	získán jako 22	mg (0,08
mmol, 75	%) čirého oleje.,,
NMR (^XH,	CDC1₃) : δ 7,61-7,58	(m,	2H) ,	7,27 (m, 1H) ,	3,92-3,81
(m, 3H),	3, 50-3, 35 (m, 2H) ,	2,4	(m,	1H) , 2,26 (s,	3H), 2,19
(S, 3H),	1,8 (m, 1H).
MS (m/z):	329 [MH]⁺.

Meziprodukt 13

4-[1-(1-ethylpropyl)-7-methyl-2,2a,3,4-tetrahydro-lH-l, 5, 6, 8tetraazaacenaftylen-5-yl]-3-methylbenzonitril !

K roztoku 43 mg (0,131 mmol) meziproduktu 12 ve 2,5 ml bezvodého CH₂C1₂, v 0°C, v dusíkové atmosféře, bylo přidáno 13 μΐ (0,328 mmol) MsCl a 87 μΐ (0, 655 mmol) Et₃N. reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 1 hodiny, a pak naředěna 20 ml vody.^vReakční směs byla extrahována 3 x 25 ml EtOAc. Spojené organické' vrstvy byly promyty 2 x 20 ml saturovaného vodného NaCl ‘a usušeny nad bezvodým Na₂SO₄. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo evaporováno. Surový produkt byl rozpuštěn ve’ 143 μΐ (1,23 mmol) 3-aminopentanu a reakční směs bylá zahřívána ve 100 °C (lahvička se y‘ -i * šroubovacím uzávěrem, písková lázeň) po dobu 16 hodin. Pak byla ochlazena na teplotu místnosti a reakční směs byla purifikována velmi rychlou chromatografií (silikagel, cHex/EtOAc 75:25) . Meziprodukt 13 byl získán jako 23 mg (0,074 mmol, 50 %) bílé pevné látky.

NMR (^XH, CDC1₃) : δ 7,50 (d, 1H) , 7,30 (dd, 1H) , 7,55 (d, 1H) ,

3,86 (m, 1H), 3,70-3,23 (t+t, 2H), 3,43 (m, 1H), 3,63 (m, 2H),

2,27 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,18 (m, 1H), 1,74 (m, 1H), 1,591,45 (m, 4H), 0,99-0,78 (t+t, 6H).

MS (m/z): 362 [MH] »··· ·» • · « ·· ····

Meziprodukt 14 ι ,

3-methyl-4-[7-methyl-l-(1-propylbutyl)-2,2a,3,4-tetrahydro-lH1,5,6, 8-tetraazaacenaftylen-5-yl]benzonitril

K roztoku 14 mg (0,043 mmol) meziproduktu 12 v 1,5 ml bezvodého CH₂C1₂, v <^;0°C, i v dusíkové atmosféře, byly přidány 4 μΐ (0,109 mmol) MŠC1 a 28 μΐ (0,216 mmol) ΕΪ3Ν. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 1 hodiny, a pak naředěna 20 ml vody. Produkt byl extrahován 3 x 25 ml EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty 2 x 20 ml saturovaného vodného NaCl a usušeny nad bezvodým Na₂SO₄. Pevné látky byly ¹ J v' ' '' ' ’j í ‘ filtrovány a rozpouštědlo 'bylo evaporováno. Surový produkt byl rozpuštěn v 50 μΐ (0,349* mmol) 4-heptylaminu a reakční směs byla zahřívána ve 100 °C (lahvička se šroubovacím uzávěrem, písková lázeň) po dobu 16 hodin. Pak byla ochlazena na teplotu místnosti a reakční směs byla purifikována velmi rychlou chromatografií (silikagel, cHex/EtOAc 75:25). Meziprodukt 14 byl získán jako 5,0 mg (0,020 mmol, 40 %) bílé pevné látky.

NMR	(Y,	CDCI3) : δ 7,73	(s,	1H) ,	7,65	(dd,	1H), 7,41 (d,	1H)
3, 95	(m,	1H) ,	3,78-3,6	(m,	2H) ,	3, 5-	3,24	(t, 2H), 2,27	(m,
1H) ,	2, 18	(s,	3H), 2,10	(s,	3H), 1,65	(m,	1H), 1,55-1,40	(m,
4H) ,	1,38-	-1,10	(m, 4H), 0	,95-	•0,88 (t+t,	6H) .

MS (m/z): 389 [MH]⁺.

Meziprodukt 15

4-[5-(terc-butyldifenylsilanyloxymethyl)-4-chlor-2-methyl-6,7¹ dihydro-5H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-8-yl]-3-chlorbenzonitril

K roztoku 86 mg (0,566 mmol) 4-amino-3-chlorbenzonitrilu v 3,5 ml DMF v 0°C, v dusíkové atmosféře, bylo přidáno 17 mg (0,566 mmol) 80% NaH v oleji. Po 30 minutách bylo přidáno ·; ⁵ν ί» ···· ·· « · · • 9 · • · · • · · · ·· · · ···· ·« Λ • · * • * · · • · ···· • · · ^·· *

308 mg (0,546 mmol) meziproduktu 6 a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po ,dobu 2 hodin. Pak byla ochlazena na teplotu místnosti ·. ’a náředěna 30 ml vody. Produkt byl extrahován 3 x 45 ml EtOAc. Spojené organické extrakty byly promyty 2 x 20 ml. saturovaného vodného NaCl a usušeny nad bezvodým Na₂SO₄. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo evaporováno. Surový produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií (silikagel, cHex/EtOAc 8:2). Meziprodukt 15 byl

získán jako 110 mg	(0,184 mmol, 35 %) čirého oleje.
NMR /η, CDC1₃) : δ	7,65 (s, ÍH), 7,55 (m, 4H) , 7,35	(m, 6H),
7,10 (d, ÍH), 6,95	(d, ÍH) , 3,92 (m, ÍH) , 3,8 (m, 2H)	, 3,5-3,3
(m, 2H) , 2,21 (m,	ÍH) , 2,10 (s, 3H) , 1,61 (m, ÍH) ,	1,10 (s,

9H) .

MS (m/z): 587 [MH]⁺.’

Meziprodukt 16

3-chlor-4- (4-chlor-5’-hydroxymethyl-2-methyl-6, 7-dihydro-5Hpyrido[2,3-d]pyrimidih-8-yl)benzonitril

K roztoku 110 mg (0,19 mmol) meziproduktu 15 ve 2,5 ml bezvodého DMF, při teplotě místnosti, v dusíkové atmosféře, bylo přidáno 260 μΐ (1, 91' mmol) Et₃N-3HF a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 12 hodin. Byla naředěna > 20 ml vody a produkt byl extrahován 3 x 20 ml EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty 2 x 20 ml saturovaného vodného NaCl a usušeny nad bezvodým Na₂SO₄. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo evaporováno. Surový produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií (silikagel, cHex/EtOAc 6:4). Meziprodukt 16 byl získán jako 53 mg (0,15 mmol, 81 %) čirého oleje.

• I • · · · ·

3,9 (m, 1H) , (s, 3H), 1,8

NMR (^XH, CDC1₃) : δ 7,95-8,8 (m, 2H) , 7,3 (d, 1H) ,

3, (m, 2H), 3,5-3,3 (m, 2H) , 2,2 (m, 1H) , 2,15 (m, 1H) .

MS (m/z): 349 [MH]⁺J

Meziprodukt 17

3-chlor-4-[7-methyl-l-(1-propylbutyl)-2,2a,3,4-tetrahydro-lH1,5,6,8-tetraazaacenaftylen-5-yl)benzonitril

K roztoku 52 mg (0,149 mmol) meziproduktu 16 v 1,5 ml bezvodého CH2CI2, v 0°C, 1, v dusíkové atmosféře, bylo přidáno 16 μΐ (0,373 mmol) MsCl a ι90 μΐ (0,745 mmol) Et₃N. Reakční směs byla míchána pří teplotě místnosti po dobu 1 hodiny, a pak naředěna 20 ml vody·.’’ Produkt byl extrahován 3 x 25 ml EtOAc. Spojené organické vrstvy _;byly promyty 2 x 20 ml saturovaného vodného NaCl a usušeny nad bezvodým Na2SO4. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo evaporováno. Surový produkt byl rozpuštěn ve 188 μΐ (1,49 mmol) 4-heptylaminu a reakční směs byla zahřívána ve 100 °C (lahvička se šroubovacím uzávěrem, písková lázeň) po dobu 16 hodin. Pak byla ochlazena na teplotu místnosti a reakční směs byla purifikována velmi rychlou chromatografii (silikagel, cHex/EtOAc 8:2). Meziprodukt 17 byl získán jako 36,0 mg (0,084 mmol, 60 %) bílé pevné látky.

NMR (^XH, CDC1₃) : δ 7,74 (d, 1H) , 7,56 (dd, 1H) , 7,49 .(d, 1H) , 4,05 (m, 1H), 3,78-3,6 (m, 2H) , 3,5-3,24 (t, 2H) , 2,27 (s, 3H) , 2,18 (m, 1H), 1,55-1,40 (m, 4H), 1,38-1,10 (m, 4H), 0,950,88 (t+t, 6H) .

MS (m/z): 410 [MH]⁺.

Meziprodukt 18

3-chlor-4-[1-(1-ethylpropyl)-7-methyl-2,2a,3,4-tetrahydro-lH1,5,6,8-tetraazaacenaftylen-5-yl]benzonitril

K roztoku 35 mg (0/112 mmol) meziproduktu 16 v 1,5 ml bezvodého CH2CI2, v 0°C, v dusíkové atmosféře, bylo přidáno 12 μΐ (0,277 mmol) MsCl a 68 μΐ (0,560 mmol) Et₃N a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 1 hodiny, a pak naředěna 20 ml vody. Produkt byl extrahován 3 x 25 ml EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty 2 x 20 mi saturovaného vodného NaCl a usušeny nad bezvodým Na2SO₄. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo evaporováno. Surový produkt byl rozpuštěn ve 158 μΐ (1,12 mmol) 3-aminopentanu a reakční směs byla zahřívána ve 100 °C (lahvička se šroubovacím uzávěrem, písková lázeň) po dobu 16 hodin. Pak. byla ochlazena na teplotu místnosti a reakční směs byla purifikována velmi rychlou chromatografií (silikagel, cHex/EtOAc 75:25). Meziprodukt 18 byl získán jako 18,0 mg (0,084 mmol, 53 %) bílé pevné látky.

NMR ^Η, CDC1₃) : δ 7,74 (d, 1H) , 7,55 (dd, 1H) , 7,50 (dd, 1H) , 3,95 (m, 1H) , 3, 78-3,.65 (m, 2H) , 3,45 (m, 1H) , 3, 69-3, 23 (t+t, 2H) , 2,28 (s, 3H) , 2,18 (m, 1H), 1,55-1, 46 (m, 4H), 0,97-0,78 (t+t, 6H).

MS (m/z): 382 [MH]⁺. ·

Meziprodukt 19

5- (2,4-bis-trifluormethylfenyl)-1-(1-ethylpropyl)-7-methyl1,2,2a,3,4,5-hexahydro-l,5,6,8-tetraazaacenaftylen

K roztoku 45 mg (0,106 mmol) meziproduktu 8 ve 2,5 ml bezvodého CH2CI2, v 0°C, v dusíkové atmosféře, bylo přidáno μΐ (0,265 mmol) MsCl a 70 μΐ (0,530 mmol) Et₃N a reakční • · · ·

směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 1 hodiny, a pak naředěna 20 ml vody. Produkt byl extrahován 3 x 25 ml EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty 2 x 20 ml saturovaného vodného NaCl· a usušeny nad bezvodým Na₂SO₄. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo evaporováno. Surový produkt byl rozpuštěn ve 184 μΐ (0,992 mmol) 3-aminopentanu a reakčni směs byla zahřívána ve . 100 °C (lahvička se šroubovacím uzávěrem, písková lázeň) po dobu 16 hodin. Pak byla ochlazena na teplotu místnosti a reakčni směs byla purifikována velmi rychlou chromatografií (silikagel, cHex/EtOAc 75:25). Meziprodukt 19 byl získán jako 28,0 mg (0,064 mmol, 60 %) bílé pevné látky.

NMR (^ΧΗ, CDC1₃) : δ 7,98 (d, 1H) , 7,83 (dd, 1H) , 7,49 (d, 1H) ,

3,87 (m, 1H) , 3,70-3,23 (t+t, 2H) , 3,44 (m, 1H) , 3,63 (m, 2H) ,, 2,23 (s, 3H) , 2,18 (m, 1H), 1,55-1, 47 (m, 4H) , 0, 99-0, 88 (t+t,

6H) .

MS (m/z)

458 [MH]⁺.

Příklad 5-1-1

7-methyl-l-(1-propylbutyl)-5-[4-(1,1,2-trifluorethyl)-2trifluormethýlfenyl]-1,2,2a,3,4,5-exahydro-l,5, 6, 8tetraazaacenaftylen

K roztoku 21 mg (0,043 mmol) meziproduktu 10 v 1,0 ml bezvodého CH2CI2, bylo přidáno 9,7 mg (1 ekv.) DDQ. Reakčni směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 3,5 hodiny. Rozpouštědlo bylo evaporováno a surový produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií (silikagel, cHex/EtOAc 9:1).

Příklad 5-1-1 byl získán jako 14 mg (0,028 mmol, 67 %) čirého oleje. ·

Příklad 5-1-2

3-methyl-4-[7-methyl-l-(1-propylbutyl)-3,4-dihydro-lH-l,5,6,8tetraazaacenaftylěn-5-yl]benzonitril

K roztoku 15 mg (0,038 mmol) meziproduktu 14 v 1,5 ml CH₂C1₂, bylo přidáno 9,6 mg (0,042 mmol) DDQ. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 3 hodin. Rozpouštědlo bylo evaporováno a surový produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií (silikagel, cyklohexan/EtOAc 7:3). Příklad 5-1-2 byl získán jako 8 mg (0,021 mmol, 56 %) bílé pevné látky.

i

Příklad 5-1-3

- [ 1- (1-ethylpropyl)-7-methyl-3,4-dihydro-lH-l, 5,6,8I tetraazaacenaftylen-5-yl]-3-methylbenzonitril

K roztoku 18 mg (0,049 mmol) meziproduktu 13 v 1,5 ml CH2CI2, bylo přidáno 14,5 mg (0,064 mmol) DDQ. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 3 hodin. Rozpouštědlo bylo evaporováno a surový'produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií (silikagel, cHex/EtOAc 7:3). Příklad 5-1-3 byl získán jako 10 mg (0, 029 mmol, 60 %) bílé pevné látky.

Příklad 5-1-4

3-chlor-4-[7-methyl-l-(1-propylbutyl)-3,4-dihydro-lH-l,5,6,8tetraazaacenaftylen-5,-yl] benzonitril

K roztoku 15 mg (0,04 mmol) meziproduktu 17 v 1,05 ml bezvodého CH₂C1₂, bylo přidáno 14,5 mg (0, 064 mmol) DDQ. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 3 hodin. Rozpouštědlo bylo evaporováno a surový produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií (silikagel, cHex/EtOAc 7:3). Příklad 5-1-4 byl získán jako 8,0 mg (0,02 mmol, 56 %) bíle pevné látky.

Příklad 5-1-5

3-chlor-4- [1- (l-ethylpropyl_:) -7-methyl-3, 4-dihydro-lH-l, 5,6, 8tetraazaacenaftylen-5-yl]benzonitril

K roztoku 12 mg (0,032 mmol) meziproduktu 18 v 1,0 ml bezvodého CH₂C1₂, bylo přidáno 10,5 mg (0,042 mmol) DDQ. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 3 hodin. Rozpouštědlo bylo evaporováno a surový produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií (silikagel, cHex/EtOAc 7:3). Příklad 5-1-5 byl získán jako 8,0 mg (0,02 mmol, 60 %) bílé pevné látky.

Příklad 5-1-6

5-(2,4-bis-trifluormethylfenyl)-1-(1-ethylpropyl)-7-methyl1,3,4,5-tetrahydro-l,5,6,8-tetraazaacenaftylen

K roztoku 20 mg (0,044 mmol) meziproduktu 19 v 1,5 ml bezvodého CH₂C1₂, bylo přidáno 12,5. mg (0,053 mmol) DDQ. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 3 hodin. Rozpouštědlo bylo evaporováno a surový produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií (silikagel, cHex/EtOAc 7:3). Příklad 5-1-6 byl získán jako 11 mg (0,024 mmol, 60 %) bílé pevné látky.

Všechna analytická data jsou uvedená v následující tabulce

1.

(Xb)

Tabulka 1

	Slouč č.	Ri		Rr	RsjRsí Rr	Analytická data
	5-1-1	2,4-bistrifluor- methylfenylová skupina	ch₃		H	NMR (’H, CDCI₃): δ 8.05 felH), 7.89 (d, lH), 7.65 (d, 1H), 63S (s, IH), 4.62 (ta, 1H), 3.78 (ta, 2H), 3.40-3.00 (ta, 2H), 2.49 (s, 3H), 1.80 (m, 8H), 1.30-1.10, 0.88 (rn/, 8H). MS (m/z): 485 [MH1⁺.
	5-1-2	2-methyl-4• kyanofenylová skupina	ch₃		H... • r- * · ·	NMR (*H, CDCls): δ 759(d, 1H), 7.56 (ά, IH), 7.40 (dd,-lHX 6.S9 (s, IH), 4.65 (pa, IH), 3.84 fe 2HX 3.14 fe 2H), 252 fe.3H), 228 fe 3H), 1.79 (ta, 4H),1.25(m, 4H), 0.84 fe 6H). . MS(m/z):.388\|MH]TÚ.
-	5-1-3	2-methyl-4- kyanofenylová skupina	ch₃		H	NMR (^0003): 2 7.70 (0,1¾ . 7.56(4 Hfe 7.43 (<M, JU), 460 fe IH), 454 (m, IH), 3.91 fe 2H), 3.16 fe 2H), 253 fe 3H),
		1				2.29 (s, 3H), 1.79 (m, 4H), 0.84 fe6H). MS (m/z): 360ΙΜΗΓ.
	5-1-4	2-chIor-4- 1 kyanofenylová \| skupina i	CH₃		H	NMR (Ή, CDClj): δ 7.80 (d, IH), 7.73 (4 1H), 7.63 (dd, 1H), 6.62 fe IH), 451 (to, IH), 3.92 fe 2H), 3.18 fe 2H), 255 (s, 3H), 1.79 (^,4^.125..(^411)^.88 feóH)- MS (m/z): 408[MHf.
	5-1-5	2-chlor-4- kyanofenylová skupina ί	ch₃	A	H	NMR (’H, CDC1₃): δ 7.80 (4 IH), 7.73 (d, IH), 7.63 (dd, IH), 6.62 fe IH), 451 (ta, IH), 3.92 fe 2H), 3.18 fe 2H), 255 fe 3H), 1.79 (ro,4H), 0.88 fe6H). MS (m/z): 380fMH]⁺.
	5-1-6	2,4-bistrifluor- metbylfenylová skupina	CHs		H *·--.. ..........	NMR (Ή, CDClj): S 9.92 (d, IH), 8.03 (d, IH), 7.69 (dd, IH), 6.62 fe IH), 458 (τη, IH), 3.8] fe 2H), 3.18 fe 2H), 251 fe 3H), 1.92 fejj 4B^0u83ífe--6B);s>^MS (míz): 457[MH1⁺.

Příklad 6

Syntéza reprezentativních sloučenin struktury (Xlb)

Meziprodukt 20 ' ·

4-chlor-3-(2-methoxyvinyl)-6-methyl-l-(1-propylbutyl)-1Hpyrrolo[3,2-c]pyridin

K roztoku 70 mg (5 ekv.) (methoxymethyl)trifenylfosf oniumchloridu v 1 ml bezvodého THF, v 0 °C, v dusíkové atmosféře, bylo po kapkách přidáváno 128 μΐ (5 ekv.) BuLi, 1,6M v THF. Výsledná červená reakční směs byla míchána v 0 °C po dobu 10 minut a dále 20 minut při teplotě místnosti. Pak byla reakční směs ochlazena v 0 °C a po kapkách byl přidáván roztok 20 mg (0,068 mmol) 4-chlor-6-methyl-l-(1-propylbutyl)-1HΊ !

pyrrolo[3,2-c]pyridin-3-karbaldehydu (připravený podle postupů publikovaných v J. Heterocyclic Chem., 1996, 33, 303, J. Heterocyclic Chem., 1992, 29, 359, Heterocycles, 2000, 53, 11, 2415, Tetrahedron, 1985, 41, 10, 1945, analytická data: NMR (^τΗ, DMSO): δ 8,49 (s., 1H) , 7,70 (s, 1H) , 10,4 (s, 1H) , 2,53 l

(s, 3H), 4,57 (m, ÍH) , 1/92/1,79 (m/m, 4H) , 1,70/0,90 (m/m, 4H) , 0,77 (t, 6H) , MS (m/z): 293 [MH]⁺) v 1 ml bezvodého THF.

Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu hodiny. Pak byly přidány 3 ml vody a produkt byl extrahován

3x 5 ml EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty 1 x 5. ml.

saturovaného vodného NaCl a usušeny nad bezvodým Na2SO₄. Pevné

ΦΦ φ φ ·· • φφφ φ φ φ φ · φ · • Φ Φ· látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo evaporováno za vzniku surového produktu,· který byl purifikován velmi rychlou chromatografií (silikagel, cHex/EtOAc 95:05). Meziprodukt 20

byl	získán jako 15 mg (0,046 mmol,	70 %) žlutého	oleje.
NMR	(% CDC1₃) : δ (trans) 6,98 (s, 1H) , 2,59	(s, 3H), 6,69,
(s,	1H) , 6,81 (d, 1H) , 6,40 (d,	1H), 4,21 (m,	1H), 1,82 (m,
4H) ,	1,53 (m, 4H) , 0, 85 (dt, 6H),	3,83 (s, 3H),	(cis) 6,94 (s,
1H) ,	2,59 (s, 3H), 7,62 (s, 1H) ,	4,21 (m, 1H),	1,82 (m, 4H) ,
1, 53	(m, 4H), 0,85 (dt, 6H) , 6,19	(d, 1H), 6,30	(d, 1H), 3,72
(s,	3H) ,
MS (m/z): 321 [MH]⁺.

Meziprodukt 21 [4-chlor-6-methyl-1-(1-propylbutyl)-lH-pyrrolo[3, 2-c]pyridin3-yl]acetaldehyd . ·

K roztoku 85 mg (0/26 mmol) meziproduktu 20 ve 2 ml bezvodého THF v 0 °C, v dusíkové atmosféře, byly po kapkách přidávány 2 ml 2N HCl. Výsledná žlutá reakční směs byla míchána v 70 °C po dobu 1,5 hodiny. Pak byl přidán 1 ml saturovaného vodného_; NaHCOg a produkt byl extrahován 3 x 5 ml EtOAc. Spojené organické' vrstvy byly promyty 1 x 5 ml saturovaného vodného NaCl -a usušeny nad bezvodým Na₂SO₄. Pevné látky byly. filtrovány a rozpouštědlo bylo evaporováno za vzniku surového produktu, který byl purifikován velmi rychlou chromatografií (silikagel, cHex/EtOAc 8:2). Meziprodukt 21 byl získán jako 55 mg (0,179 mmol, 70 %) žlutého oleje.

NMR (^XH,	CDCI3	3: δ	9, 85	(s,	1H), 7,07	(s, 1H), 7,01,	(s, 1H),
4,21 (m,	1H) ,	4,04	(s,	2H) ,	2,60 (s,	3H) , 1,82 (m,	4H) , 1,16
(m, 4H),	0,85	(dt,	6H) .
MS (m/z):	: 307	[MH] ⁺

·· · · * · ·· · *· *

Meziprodukt 22 · 1 ; .

[4-chlor-6-methyl-l-(1-propylbutyl)-lH-pyrrolo[3, 2-c]pyridin3-yl]ethanol

K roztoku 53 mg (0,173 mmol) meziproduktu 21 ve 4 ml bezvodého MeOH v 0 °C, _; v dusíkové atmosféře, bylo přidáno 13,1 mg (2 ekv.) NáBH₄. Reakční směs byla míchána v 0 °C po dobu 1 hodiny. Pák byl' přidán 1 ml vody a produkt byl extrahován 3 x 5 (ml EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty 1 x 5 ml·: saturovaného vodného NaCl a usušeny nad bezvodým Na₂SO4. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo evaporováno zá vzniku surového produktu, který byl purifikován velmi rychlou chromatografií (silikagel, cHex/EtOAc 7:3). Meziprodukt 22 byl získán jako 49,8 mg (0,161 mmol, 93 %) žlutého oleje. ~ .......

NMR (¹H, DMSO): δ 7,37 (s, IH) , 7,33, (s, IH) , 4,63 (t, IH) , 3,64 (t, 2H) , 3,01 (t, 2H) , 2,44 (s, 3H) , 1,77 (m, 4H) , 0,891,79 (m, 4H) ,_: 0,77 (t, 6H) .

MS (m/z): 309 [MH]⁺.

•I ·

Meziprodukt 23 .·(

3-[2-(terc-butyldimethylsilanyloxyethyl]-4-chlor-6-methyl-l(1-propylbutyl)-IH- pyrrolo[3,2-c]pyridin

K roztoku 49,8 mg (0,173 mmol) meziproduktu 22 ve 2 ml bezvodého DMF v 0 °C, v dusíkové atmosféře, bylo přidáno f

110 mg (10 ekv.) imidazolů, 67 mg (2,8 ekv.) TBSC1, 2 mg (0,1 ekv.) DMAP. Reakční směs byla přes noc míchána při teplotě místnosti. Pak byl přidán 1 ml vody a produkt byl extrahován 3 x 5 ml Et₂O. Spojené organické vrstvy byly promyty

1x5 ml saturovaného vodného NaCl a usušeny nad bezvodým

·· · • ·

Na₂SO₄. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo evaporováno za vzniku surového produktu, který byl purifikován velmi rychlou chromatografií (silikagel, cHex/EtOAc 9:1).

Meziprodukt 23 byl získán jako 65 mg (0,154 mmol, 95 %) žlutého oleje.

tt » · • · · • · · * · · • · · · «···

NMR	(^, DMSO)	: δ 6	/95	(s/s, 1/1H)	, 4,17 (m,	ÍH), 3,91 (t,	2H) ,
3, 16	(t, 2H),	2,58	(s,	3H), 1,80	(m, 4H), 1,	14-1,05 (m/m,	4H) ,
0,88	(s, 9H),	0,85	(t,	6H), 0,00	(s, 6H).

MS (m/z): 423 [MH]⁺.

Meziprodukt 24 (2,4-bis-trifluormethylfenyl)-[3-[2-(tercbutyldimethylsilanyloxyethyl]-6-methyl-l-(1-propylbutyl)-1-1Hpyrrolo[3,2-c]pyridin-4-yl]amin

Ke směsi 3,7 mg (0,1 ekv.) tris(dibenzylidenaceton)palladia(0), 4,4 mg (0,3 ekv.) 2-(dicyklohexylfosfin)2-methylbifenylu, 23 ^; mg (2,8 ekv.) K₃PO₄ byl přidán roztok 17 mg (0,04 mmol)' 'meziproduktu 23 a 18 mg (2 ekv.) 2,4-bis(trifluormethyl)anilinu v 1 ml bezvodého DME při teplotě místnosti, v dusíkové atmosféře(lahvička se zatlačovacím víčkem pro '· práci v mikrovlnách). Reakční směs byla ozářena v systému pro mikrovlnnou syntézu „CEM Focused Microwave Synthesis System (Model Discovery), ve 100 °C,

150 W, 413 kPa (60 psi) po dobu 20 minut (při chlazení) . Pak byl přidán 1 ml vody a produkt byl extrahován 3 x 5 ml Et₂O. Spojené organické vrstvy byly promyty 1 x 5 ml saturovaného vodného NaCl a usušeny nad bezvodým Na₂SO₄. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo evaporováno za vzniku surového produktu,, který byl purifikován velmi rychlou chromatografií (silikagel, cHex/EtOAc 95:05). Meziprodukt 24 byl získán jako 21,5 mg (0,035 mmol, 88 %) žlutého oleje.

• •00 00 ·· ···· ·· 0 • ♦ 0 0 ♦ 9 · · ♦

0 0 >·· 0 0 · _ · · ·»·-·' 0 0 0 0 0

0 ·» · · « · *

NMR	(^XH, DMSO) : δ	7, 83	(d,	ÍH),
8,23	(s, 1), 7,22	(s,	ÍH) ,	7,16
(m,	ÍH), 3,77 (t,	2H) ,	2, 94	(t,

(m/m, 4Η) , 0,79 (t, < 6Η) , 0,68 (s,

7,79	(dd, ÍH), 8,16 (d,	ÍH) ,
(s,	ÍH), 2,43 (s, 3H),	4,35
2H) ,	1,8 (m, 4H), 1,15,	0, 95
9H),	-0,31 (s, 6H).

MS (m/z): 616 [MH]⁺.

Meziprodukt 25 s

2-[4-(2,4-bis-trifluormethylfenyl)-6-methyl-l-(1-propylbutyl)lH-pyrrolo[3,2-c]pyridin-3-yl]ethanol

K roztoku 60 mg (0, 097 mmol) meziproduktu 24 v 5 ml suchého DMF při teplotě místnosti bylo přidáno 133,6 μΐ (8,4 ekv.) Et3N-3HF.· Reakční směs byla přes noc míchána při teplotě místnosti. Pák býíy přidány 2 ml vody a produkt byl

extrahován 3	X	5 ml	Et.OAc.	Spojené organické	vrstvy byly
promyty 1 x	5 ml saturovaného vodného NaCl a	usušeny nad
bezvodým Na2SO₄.	Pevné	látky	byly filtrovány a	rozpouštědlo
bylo evaporováno	za	vzniku	surového produktu,	který byl
.purifikován	velmi	rychlou	chromatografií	(silikagel,
cHex/EtOAc 9:	1) .	Meziprodukt	25 byl získán jako 24,4 mg

(0,048 mmol, 50 %) bílé pevné látky.

NMR (^XH, DMSO): δ 9,01	(sa,	ÍH) ,	8,07 (d, ÍH),	7,81	(s, ÍH),
7,76 (dd, ÍH), 7,19 (s,	ÍH) ,	7,10	(s, ÍH), 5,19	(sa,	ÍH), 4,35
(m, ÍH) , 3,63 (m, 2H) ,	2,88	(m,	2H), 2,38 (s,	3H) ,	1,85-1,65
(m, 4H) , 1,20, 0, 90 i(m,	4H) ,	0, 80	(m, 6H) .
MS (m/z): 502 [MH]⁺.

1/.

Příklad 6-1-1

5- (2,4-bis-trifluormethylfenyl)-7-methyl-l-(1-propylbutyl)1,3,4,5-tetrahydro-i;'5, 6-triaza-acenaftylen

K roztoku 23,4 mg (0,04 mmol) meziproduktu 25 ve 2 ml suchéhoý CH₂C1₂ při .teplotě místnosti bylo přidáno 13,5 μΐ (2 ekv. ) Et₃N a 6,16 μΐ (2 ekv.) MsCl. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 2 hodin. Pak byly přidány 2 ml vody a produkt byl extrahován 3 x 5 ml CH₂C1₂. Spojené organické vrstvy byly promyty 1 x 5 ml saturovaného vodného NaCl a usušeny nad bezvodým Na₂SO₄. Pevné látky byly á?iú.l^©váňy^a=^u?©-zpiou^:š^:t-ědí-o⁼⁼á5ýl-ó^=L-e!^:vapoTovánO^—za^vzrřrku šuřovefib' produktu, který byl purifikován velmi rychlou chromatografií (silikagel, cHex/EtÓAc 9:1). Příklad 6-1-1 byl získán jako 6 mg (0,012 mmol, 31 %) žlutého oleje.

Všechna analytická data jsou uvedena v následující tabulce

2.

(Xlb) 'Β··· # · ·«') ··>· ·* • · ♦ 9 9 9 9 ·

Tabulka 2

	Slouč. č.	^R1	r₂	R4-	RejR}, Rs, Re-	Analytická data
	6-1-1	2,4-bistrifluor- methylfenylová skupina	ch₃ 1 i		H	NMR (’H, DMSO): δ 8.08 (dd, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.81 (d, ÍH), 6.87 (s, ÍH), 6.61 (s> ÍH), 4.19 (m, ÍH), 3.72 (t, 2H), 3.02 (ζ 2H), 2.19 (s, 3H), 1.80-1.70 (m, 4H), ' í.3<F'r:iO (m, 4H), 0.79 fo MS(w/2):483 [ΜΗΓ.

Příklad 7

Vazebná aktivita k CRF receptoru

Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou být hodnoceny na vazebnou aktivitu k CRF receptoru standardním vazebným test s radioligandem, jak byl obecně popsán autory DeSouza et al. (J. Neurosci, 7: 88-100, 1987). Použitím různých radioaktivně značených CRF ligandů, test může být použit pro vyhodnocení vazebné aktivity sloučenin podle předkládaného vynálezu s kterýmkoliv podtypem CRF receptoru. Ve stručnosti, vazebný test zahrnuje odstranění radioaktivně značeného CRF ligandů z CRF receptoru.

Konkrétně je vazebný test prováděn ve zkumavkách eppendorf o objemu 1,5 ml _tls, použitím buněk trvale transfekovaných humánními CRF receptory v množství přibližně 1 x 10⁶ buněk na zkumavku. Do každé zkumavky se přidá přibližně 0,1 ml testovacího pufru (např. Dulbeccův fyziologický roztok pufrovaný fosfáty, 10 mM chlorid hořečnatý, 20 μΜ bacitracin) s neznačeným sauvaginem nebo bez něj, urotensin I nebo CRF ···· ·.« · 0' '···-· 99, · • 9 9 9 9 '9 · ·

9 '9 9 9 ^f9 9 9 '9 9

9 ,9 .9· 9 9 9 · 9 '9,9 999 • 9 9 áfe 1~.·'9 '« '^;® s « »·'· M ·-«► » ·· 9, (konečná koncentrace, 1 μΜ) pro určení nespecifické vazby,

0,1 ml [¹²⁵I] tyrosin-ovčí CRF (konečná koncentrace -200 pM nebo přibližně K_D, při určování Scatchardovou analýzou) a 0,1 ml suspenze membrán z buněk obsahujících CRF receptor. Směs byla inkubován po dobu 2 hodin ve 22 °C, pak následovala separace navázaného a volného i_rradioligandu , centrifugací. Po dvou promytích peletu byly zkumavky odříznuty těsně nad peletem a v γ počítači byla monitorována radioaktivita s přibližně 80% účinností. Všechna data o vazbě radioligandu mohou být analyzována s použitím programu LIGAND pro nelineární regresi křivky metodou nejmenších čtverců autorů Munson a Rodbard (Anal. Biochem., 107:220, 1990).

Příklad 8 '(· * 1

Adenylátcyklázová aktivita stimulovaná CRF

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou také být hodnoceny různými (funkčními testy. Na sloučeninách podle předkládaného vynález,u může být například prováděn screening na adenylátcyklázovou aktivitu stimulovanou CRF. Test na stanovení adenylátcyklázové aktivity stimulované CRF může být prováděn tak, jak, bylo obecně popsáno v článku autorů Battaglia et al. (Synapse,' 1: 572, 1987), s modifikacemi pro přizpůsobení testu riatprěpářáty z celých buněk.

Konkrétněji směs pro. provádění standardního testu může obsahovat následující reagencie v konečném objemu 0,5 ml:

mM L-glutamin, 20 mM HEPES a 1 mM IMBX v pufru DMEM.

Ve stimulačních studiích jsou celé buňky s transfekovanými CRF ‘•'000 »-· '·» ’♦·«· 00 0 • · 0 '0 0 <· 0 0 '0 • « · '0 0 /0 · 0 0 0 0 0 0 '· ’· 0 0 0 · · 000

40 0 f» 0 . .0 0 .....0 0 0 receptory naneseny na 24 jamkové destičky a inkubovány po dobu 1 hodiny ve 37 °C s různými koncentracemi peptidů příbuzných a nepříbuzných k CRF, aby se stanovil farmakologický „rank-order profil konkrétního receptorového podtypu. Po inkubaci byla média odsáta, jamky byly promyty jednou jemně čerstvým médiem a médium bylo odsáto. Aby se určilo množství intracelulárního cAMP, bylo do každé jamky přidáno 300 μΐ roztoku 95% ethanolu a 20 mM vodné chlorovodíkové kyseliny a výsledné suspenze byly inkubovány ve 20 °C po dobu 16 až 18 hodin. Roztok byl odstraněn do eppendorfových zkumavek o objemu 1,5 ml a jamky byly promyty dalšími 200 μΐ směsi ethanolu a vodné chlorovodíkové kyseliny a sloučeny s první frakcí. Vzorky byly .lyof ilizovány a pak resuspendovány v 500 μΐ pufru acetátu sodného. Měření cAMP ve vzorkách bylo prováděno ti' s použitím soupravy s jednou protilátkou od firmy Biomedical Technologies lne. JStoughton, MA) . Pro funkční vyhodnocení sloučenin byla inkubována jedna koncentrace CRF nebo příbuzných peptidů, -“která'(způsobí 80% ‘stimulaci produkce cAMP, spolu s různými koncentracemi kompetujících sloučenin (IO^-12 až 10~⁶ M) .

Rozumí se, že, i když byla v tomto textu pro účely ilustrace popsána specifická provedení vynálezu, mohou být vytvořeny různé modifikace bez odchýlení se od vynálezecké myšlenky a rozsahu předkládaného vynálezu.

V souladu s tím vynález není nijak omezen kromě připojených patentových nároků.

Claims

1. Sloučenina mající následující strukturu:

nebo její přijatelná nebo farmaceuticky sůl, kde:

A je vazba nebo skupina C=(Z),

X je atom dusíku nebo skupina CR₃,

Y je skupina -N=, skupina -N(R₇)-, skupina -C(R₈)= nebo skupina -0-,

Z je atom O, atom S nebo skupina NRg,

R₂ je atom vodíku,) alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, alkoxyskupina, thioalkylová skupina, atom halogenu, kyanoskupina, halogenalkylová skupina,

R₃ je atom vodíku, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, atom halogenu nebo halogenalkylová skupina,

I

R₄ je atom vodíku, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, skupina C(O)Ri, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heterocyklus nebo· substituovaný heterocyklus,

9 · · ·♦

R₅ je atom vodíku, atom halogenu, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heteroarylové skupina, substituovaná heteroarylové skupina, alkoxyskupina, thioalkylová skupina, skupina C(O)Ri, skupina NRi₀Rn nebo kyanoskupina,

R₆ je atom vodíku, atom halogenu, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heteroarylové skupina, substituovaná heteroarylové skupina, alkoxyskupina, thioalkylová skupina, skupina C(O)Ri, skupina NRioRn nebo kyanoskupina,

R₇ je atom vodíku, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, skupina C(O)Ri, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heteroarylové skupina nebo substituovaná heteroarylové skupina, ·· 'jl :! ·

R₈ je atomvodíku, atom halogenu, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heteroarylové skupina, substituovaná heteroarylové skupina, alkoxyskupina, thioalkylová skupina, C(O)alkylová skupina, skupina NRi₀Rn nebo kyanoskupina,

R₉ je atom vodíku, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heteroarylové skupina nebo substituovaná heteroarylové skupina, a

Rio, Riiz jsou stejné nebo odlišné a jsou nezávisle atom vodíku, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heteroarylové skupina, substituovaná heteroarylové skupina.

2. Sloučenina podle nároku 1, kde X je skupina CR₃.

• 000.

'···· 0 0 0 0 00·· '00 0 0 0 0 0 '0 0 0 0 0 0 10 0 * ,0 0 * • 0 0 0 '0 0 » 0 0 0

0 '0 » 0 '0 0 6 '0· · »0 00 <0 0 9 ·.· »

3. Sloučenina podle nároku 1, kde X je atom dusíku.

4. Sloučenina podle nároku 1 mající následující strukturu:

kde

Ri je alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina nebo substituovaná heteroarylová skupina, ...... ...... ...

R₃ je atom vodíku, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, atom halogenu nebo halogenalkylová skupina, ‘l· .. ¹ í

R4 je atom vodíku, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, skupina C(O)R_X, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heterocyklus nebo substituovaný heterocyklus,

Rs je atom vodíku, atom halogenu, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina, substituovaná heteroarylová skupina, alkoxyskupina, thioalkylová skupina, skupina C(O)R_X, skupina NRióRn nebo kyanoskupina,

R₆ je .atom vodíku, atom halogenu, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, arylová skupina, substituovaná

4 4*4 4 4 '·« '·«·· 4 4 · • 4 4 4 4 '< 4 · 4

4 4 4 4 4 0 4 0 4 4 _ · 4 4 '4 '4 4 4 '4 4 4 4 4 4 4

4 4 4 9 ^r4 β 4 4 · · ·· 4« ·4· 4 4 4 4 arylová skupina, ¹ heteroarylová skupina, substituovaná heteroarylová skupina, alkoxyskupina, thioalkylová skupina, skupina C(O)Ri, skupina NRi₀Rn nebo kyanoskupina,

R7 je atom vodíku, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, skupina C(O)Ri, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina nebo substituovaná heteroarylová skupina, « R₈ je atom vodíku, atom halogenu, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina, substituovaná heteroarylová skupina, alkoxyskupina, thioalkylová skupina, C(0)alkylová skupiná, skupina NR10R11 nebo kyanoskupina, a

R10, R11, jsou stejné nebo odlišné a jsou nezávisle atom vodíku, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina, i .

substituovaná heteroarylová skupina.

5. Sloučenina podle nároku 1 mající následující strukturu:

(30b) kde:

I b

• •00 ’«· '0 0 »··'· '0 0 · • 0 9 ·'· 0 '0 0 · 0

0 0 0 0 0 0 0 · 0 · *_·. · 0 '9 ^ír· 0 · ^f9 0 i 9 0 0 '0· 0· *♦ 0 «.· 0

R₂ je atom vodíku, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, alkoxyskupůna, thioalkylová skupina, atom halogenu, kyanoskupina, halogenalkylová skupina,

R₄ je atom vodíku,: ^alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, skupina C(O)Ri, arylová skupina, substituovaná arylová < skupina, heterocyklus nebo substituovaný heterocyklus,

Rs je atom vodíku, atom halogenu, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina, substituovaná heteroarylová skupina, alkoxyskupina, thioalkylová skupina, skupina C(O)Ri, skupina NR.10R11 nebo kyanoskupina,

R6 je atom vodíku, atom halogenu, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina, substituovaná heteroarylová skupina, alkoxyskupina, thioalkylová skupina, skupina C(O)R_lz skupina NR10R11 nebo kyanoskupina,

R₈ je atom vodíku, atom halogenu, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina, substituovaná heteroarylová skupina, alkoxyskupina, thioalkylová skupina,

C(0) alkylová skupina'¹, skupina NR10R11 nebo kyanoskupina, a ?R10, Rn, jsou stejné nebo odlišné a jsou nezávisle atom vodíku,

6 alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina, substituovaná heteroarylová skupina.

'0 0-0 0 0«

0 0 0

0' ·· 0 0

0 0 0 0 «

0 '· 0 0 0 0 ,· 0 '0 0 * 000«

0 0 *·

6. Sloučenina podle nároku 1 vybraná ze skupiny, která se skládá z:

iáV¹ Φ '·' ,.v '7 ý

7-methyl-l-(1-propylbutyl)-5-[4-(1,1,2-trifluorethyl)-2trifluormethylfenyl]-1,2,2a,3,4,5-exahydro-l,5,6,8tetraazaacenaftylen,

3- methyl-4-[7-methyl-l-(1-propylbutyl)-3,4-dihydro-lH-l,5,6,8tetraazaacenaftylen-5-yl]- benzonitril,

4- [1-(1-ethylpropyl)-7-methyl-3,4-dihydro-lH-l, 5, 6, 8tetraazaacenaftylen-5-yl]-3-methylbenzonitril,

3-chlor-4-[7-methyl-l-(1-propylbutyl)-3,4-dihydro-lH-l,5,6,8tetraazaacenaftylen-5-yl]benzonitril,

3-chlor-4-[1-(1-ethylpropyl)-7-methyl-3,4-dihydro-lH-l,5,6,8tetraazaacenaftylen-5-yl]benzonitril,

5- (2,4-bis-trifluormethylfenyl)-(1-ethylpropyl)-7-methyl1.3.4.5- tetrahydro-l,5,6,8-tetraazaacenaftylen,

5-(2,4-bis-trifluormethylfenyl)-7-methyl-l-(1-propylbutyl)i <

1.3.4.5- tetrahydro-l,5,6-triaza-acenaftylen.

71 Přípravek vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu podle nároku 1 v kombinaci: s farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem. ' ⁵

8. Způsob léčení chorobného stavu, při kterém se manifestuje hypersekrece CRF u teplokrevných živočichů, vyznačující se tím, že obsahuje podávání účinného množství farmaceutického přípravku podle nároku 4 živočichovi.

9. Způsob podle nároku 5 vyznačující se tím, že chorobný stav je mozková mrtvice.

10. Způsob podle ^!nároku ' 5 vyznačující se tím, že chorobný stav je deprese.

11. Způsob podle nároku 5 vyznačující se tím, že chorobný stav je úzkost. /,

12. Způsob podle nároku 5 vyznačující se tím, že chorobný stav je syndrom dráždivého tračníku (IBS).

í 'V '·:· · -N t

13. Způsob podle nároku' 5 vyznačující se tím, že chorobný stav je zánětlivé střevní onemocnění (IBD).