CZ2003792A3 - Imidazochinolinaminy jako adjuvanty v DNA vakcinaci - Google Patents

Imidazochinolinaminy jako adjuvanty v DNA vakcinaci Download PDF

Info

Publication number
CZ2003792A3
CZ2003792A3 CZ2003792A CZ2003792A CZ2003792A3 CZ 2003792 A3 CZ2003792 A3 CZ 2003792A3 CZ 2003792 A CZ2003792 A CZ 2003792A CZ 2003792 A CZ2003792 A CZ 2003792A CZ 2003792 A3 CZ2003792 A3 CZ 2003792A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
carbon atoms
group
alkyl
phenyl
straight
Prior art date
Application number
CZ2003792A
Other languages
English (en)
Inventor
Lindy Louise Thomsen
John Philip Tite
Peter Topley
Original Assignee
Glaxo Group Limited
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=9899764&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CZ2003792(A3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Glaxo Group Limited filed Critical Glaxo Group Limited
Publication of CZ2003792A3 publication Critical patent/CZ2003792A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D215/00—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C07D215/02—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D215/16—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D215/20—Oxygen atoms
    • C07D215/22—Oxygen atoms attached in position 2 or 4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D215/00—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C07D215/02—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D215/16—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D215/38—Nitrogen atoms
    • C07D215/42—Nitrogen atoms attached in position 4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Oblast, -techniky
Vynález se týká zlepšení DNA vakcinace a zvláště, nikoliv však výhradně, vakcinačních prostředkfl, zpflsobfl vakcinace savců proti chorobným stavům a použití určitých sloučenin ve výrobě léčiv.
Dosavadní stav techniky
Po mnoho let jsou známy tradiční vakcinační způsoby, při kterých se zavádí do živočišného systému antigen, který mflže vyvolat u živočicha imunitní odezvu a tím živočicha ochránit před infekcí. Následně, po objevu na začátku devadesátýcz let, že plasmid DNA by mohl přímo transfektovat živočišné buňky in vivo, byly podniknuty významné vývojové práce k vyvinutí vakcinačních způsobů založených na použití DNA plasmidů k vyvolání imunitní odezvy přímým zavedením do živočichů DNA, která kóduje antigenové peptidy. Takových způsobů, známých pod označením “DNA imunizace nebo DNA vakcinace, bylo nyní použito k vyvolání ochranné protilátky Chumoralální) a buňkami zprostředkuvané Cbuněčné) imunitní odezvy v široké paletě předklinických modelů pro virová, bakteriální a parazitická onemocnění. V současnosti probíhá výzkum v závislosti na použití DNA vakcinačních technik k léčení a ochraně proti rakovině, alergiím a autoimunitním chorobám.
Obvykle sestávají DNA vakciny z bakteriálního plasmidového vektoru, do kterého je inzertován silný promotor, příslušný gen, který kóduje antigenový peptid a polyadenylační/transkripční ukončovací sekvenci- Imunogenem, který příslušný gen kóduje, může být úplný protein nebo jednoduše antigenová pep2 tidává sekvence týkající se patogenu, nádoru nebo jiného činitele, proti kterému má se ocrana provádí. Plasmid se může pěstovat v bakterii, jako je například E.coli, a může se izolovat a připravovat ve vhodném prostředí v závislosti na zamýšlené cestě podání, před podáním hostiteli.
Účinnou základní informaci, týkající se DNft vakcinmace, je podává Donnelly, J. a kol. Cftnnual Rev.Immunol 15, str. 61? až 648, 1997 >.
Oproti tradičním vakcinačním způsobům má DNft vakcinace radu předností. Předně se předpokládá, že struktura nebo uspořádání proteinu budou podobné nativnímu proteinu souvisejícímu s chorobným stavem, jelikož proteiny, které jsou kódovány sekvencí DNft, jsou syntetizovány v hostiteli. Je také pravděpodobné, že DNft vakcinace poskytne ochranu proti různým kmenům viru, generováním cytotoxické T lymfocytové odezvy, která rozezná epitopy z konzervovaných proteinů. Kromě toho může být vyvolána dlouhotrvající imunitní odezva, jelikož jsou plasmidy zavedeny přímo do hostitelských buněk, kde se může antigenový protein produkovat. Způsob také poskytuje možnost kombinace různých imunogenů do jediného prostředku k usnadnění současné imunizace různých chorobných stavů.
Přes četné přednosti spojené s DNft vakcinaci oproti tradičním vakcinačním terapiím, existuje nicméně potřeba vyvinout adjuvantové sloučeniny, které poslouží ke zvýšení imunitní odezvy vyvolané proteinem, který je kódován plasmidem DNft podaným živočichům.
DNA vakcinace je někdy spojena s nevhodnou odchylkou od imunitní odezvy z odezvy Thi až Th2, obzvláště, je-li DNft podávána přímo do epidermu <Fuller a Haynes, Hum. Retrovir. 10, str. 1433 až 1441, 1994}>. Má se zato, že imunitní profil, požadovaný od vakciny nukleové kyseliny, závisí na cílené nemo• · 9 9 9 4 9« 99999 • 4 *99 999
9999 9 99 999 99 9 ci. Přednostní stimulace odezvy Thl má pravděpodobně poskytnout účinnost vakcin pro četná virová onemocnění a rakoviny a dominantní odezvy typu Th2 mohou být účinné v omezení alergie a zánětu spojených některými autoimunitními nemocemi. Proto se považuje za užitečné kvantitativně zvýšit imunitní odezvy nebo posunout t.yp odezvy ve směru k největší účinnosti pro indikovanou chorobu.
Úkolem vynálezu tedy je poskytnout adjuvační sloučeniny, kterých je možno použít ve spojení s procesem DNA vakcinace. Vynález se také týká prostředků, včetně příslušných adjuvantfl, a způsobů zlepšené DNA vakcinace, zahrnující takové adjuvanty. Další cíle, kterých se vynález týká, vyplynou z následujícího podrobného popisu. V současné době však dosažení takových cílů se ukázalo jako obtížné vlivem mechanistických rozdílů spojených s DNA vakcinací, ve srovnání s tradičními technikami vakcinace- Také není nasnadě identifikace vhodných sloučenin; bylo vyzkoušeno množství známých činidel posilujících imunitu v kombinaci se způsoby DNA vakcinace s omezenými nebo v nejlepším případě se smíšenými úspěchy. Například společné podávání genů pro IFN-gama a glykoproteinu viru vztekliny mělo inhibiční účinek jak na odezvu pomocných T-buněk, tak na protilátkovou odezvu (Xiang a Ertl).
Proto nejvíce překvapuje, že tento vynález přináší adjuvantní sloučeniny, které jsou účinné k podpoře zlepšené imunitní odezvy, zejména zlepšené buněčné imunitní odezvy, při použití jako adjuvantů v DNA vakcinaci. Deriváty imidazochinolinaminu jsou induktory cytokinů, včetně IFN-<z,IL-6 a TNF-a (například Reiter a kol., J. Leukocyte Biology 55, str. 234 až 240, 1994). Tyto sloučeniny a způsoby jejich přípravy jsou popsány ve zveřejněné světové přihlášce vynálezu číslo WO 94/ 17043. Vynález se týká skutečnosti, že se těchto derivátů může účinně používat jako adjuvantů v DNA vakcinaci4
Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu je vakcinační prostředek obsahující Ci) adjuvantní složku obsahující derivát IH-imidazot4,5-clChino 1 in-4-aminu a (ii) imunogenovou složku obsahující nukleotidovou sekvenci kódující antigenový peptid nebo protein související s chorobným stavem, přičemž adjuvantní složka zvyšuje imunitní odezvy u. savců na antigenový peptid nebo protein.
Vynález se týká způsobu zvyšování imunitní odezvy na antigen, přičemž způsob spočívá v podávání postupně nebo současně nukleové kyseliny kódující antigen. a derivátu imidazo£4,5-c]chinolin-4-aminu.
Vynález se týká použití derivátu imidazoC4,5-clchinolin-4-aminu ve výrobě léčiv pro posílení imunitní odezvy na antigen kódovaný nukleotidovou sekvencí, přičež se neukleotidová sekvence podává odděleně nebo současně s uvedeným derivátem.
Vynález se dále týká farmaceutického prostředku obsahujícího derivát imidazo£4„5-clchinolin-4-aminu k posílení imunitní odezvy na antigen kódovaný sekvencí nukleové kyseliny.
S výhodou je derivátem IH-imidazo[4,5-c]chinolin-4-aminu sloučenina obecných vzorce I až VI- Výhodněji je to sloučenina obecného vzorce VI. Obzvlášť výhodné je, když je derivátem 1H-imidazot4,5-c]chinolin-4-aminu sloučenina obecného vzorce VI, volená ze souboru zahrnujícího:
l-C2-methylpropy1)-lH-imidazoC4,5-c]chinolin-4-amin; l-C2-hydroxy-2-methylpiOpyl)-2-methyl-lH-imidazot4,5-clchino1in-4-amin;
1-C2-hydroxy-2-methylpropy1)-lH-imidazol4,5-clchinolin-4-amin; l-C2-hydroxy-2-methylpropy15-2-ethoxymethyl-lH-imidazol4,5-cl• · · 4 • · • 9 4 • 9 9 9 • 9 4 · 4 9 , • 9 9 • 9 9 chinolin-4-amiη.
Vynález se týká také způsobu zvyšování imunitní odezvy savců proti chrobnému stavu, při kterém se podává uvedeným savcům uvnitř vhodného vektoru nukleotidové sekvence kódující antigenový peptid související s chorobným stavem; přídavné se podává uvedeným savcům jako vakcinový adjuvant derivát IH-imidazo[4,5-c]chinolin-4-aminu ke zvýšení imunitní odezvy. Dále se vynález týká způsobu zvyšování imunitní odezvy savců na imunogen, při kterém se podává takovým savcům uvnitř vhodného vektoru nukleidová sekvence kódující uvedený imunogen v množství účinném k posílení imunitní odezvy; přídavné se podává uvedeným savcům jako vakcinový adjuvant derivát IH-imidazo[4,5-c]chinolin-4-aittinu ke zvýšení imunitní odezvy. Při tomto způsobu je výhodným derivátem lH-imidazo[4,5-clchinolin-4-arain obecného vzorce VI.
Vynález se týká také použití derivátu lH-imidazo[4,5-c]chinolin-4-aminu ve výrobě léčiv ke zvyšování imunitní odezvy iniciované antigenovým peptidem nebo proteinem, přičemž pi’otein/peptid jsou expresovány jako výsledek podávání savcům nukleotidové sekvence kódující uvedený peptid.
Přehled obrázků na výkresech
Obr.l.
Imiquimod zvyšuje odezvu cytotoxických T-buněk po vakcinaci plasmidem kódujícím nukleoprotein z chřipkového viru
CpVACl-PR.). pVACl je kontrolní vektor.
Na ose x jsou různé viry, na ose y jsou počty skvrn IFN-gama na milion buněk, vehicle = nosič • · · · · · • ·
Obr.2.
ímiquimod zvyšuje klonální expansi buněk CD4 T in vivo po vakcinaci plasmidem kódujícím ovalbůminový protein, měřeno zvětšenou proliferací CD4+T buněk.
Na ose x jsou různě viry, na ose y je ccpm-ccpm pozadí.
vehicle = nosič
Obr.3.
ímiquimod zvětšuje počet aktivovaných CD4 T buněk in vivo po vakcinaci plasmidem kódujícím ovalbůminový protein, měřeno zvětšenou produkcí IFN-gama a IL-4 buněk.
Na ose x jsou různé viry, na ose y jsou počty skvrn IFN-gama na milion buněk, veh i c1e — nos ič
Obr.4, ímiquimod zvětšuje odezvy jak TH1, tak TH2 buněk in vivo po vakcinaci plasmidem kódujícím ovalbůminový protein, měřeno zvětšením IFN-gama a IL-4 produkujících buněk.
Na ose x jsou různé viry» na ose y jsou počty skvrn IFN-gama a IL-4 na milion buněk. veh i c1e = nos i č
Obr.5.
ímiquimod zvyšuje odezvu cytotoxických T-buněk po vakcinaci plasmidem kódujícím antigenovýy HIV Gag a Nef CVRG7O77.Gag/Nef> VRG7O77 je kontrolní vektor.
Na ose x jsou různé viry, na ose y jsou počty skvrn na milion splenocytů. Plný sloupec je restiraulace in vitro Gag peptidem, šrafováný sloupec je restimulace Nef peptidem vehicle' = nosič; in vitro restimulation with Gag peptide = in vitro restimulace Gag peptidem; in vitro restimulation with Nef peptide = in vitro restimulace Nef peptidem.
• to to to to to · · to to· to ·· to ··«· to · to ·· ·· to · · to to to · ··· ···· «·« « · ··· ··· ···« · ·· ··« ·· *
Obr.&.
Resiquimod (l-(2-hydroxy-2-methy1propyl)-2-ethoxymethyl-l-Himidazo[4,5-c]chinolin-4-amin), analog imiquimodu zvětšuje počet aktivovaných CD4 T buněk in vivo po vakcinaci plasmidem kódujícím ovalbůminový protein, měřeno zvětšením IFN-gama a IL-4 produkujících buněk (obr. 6A a 6B).
Na ose x je resquimod v mg/kg, na ose y je počet skvrn na milion buněk lymafatických uzlin vehicle = nosič
Obr.7.
Dva analogy imiquimodu (l-(2-hydroxy-2-methylpropyl)-2-methyll-H-imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin a (l-(2-hydroxy-2-methylpropyl)-l-H-imidazoE4,5-c]chinolin-4-amin zvyšují počet aktivovaných CD4 T buněk in vivo po vakcinaci plasmidem kódujícím ovalbuminový protein, měřeno zvětšením IFN-gama a IL-4 produkujících buněk (7A a 7B).
Na ose x jsou analogy imiquimodu a na ose y je počet skvrn na milion buněk lymafatických uzlin, vehicle = nosič
Obr.8.
Topická aplikace imiquimodu zvětšuje odezvu cytotoxických T-buněk po vakcinaci plasmidem kódujícím antigenovýy HIV Gag (obr. 8Ά) a Nef (obr. 8B) (VRG7077,Gag/Nef)- WRG7077 je kontrolni vektor.
Na ose x jsou různé vakcíny a na ose y jsou skvrny IFN-gama ELISPOT pro peptidy Gag (plné sloupce) a pro Nef peptid (šrafované sloupce).
vehicle = nosič
Obr.9.
Imiquimod zpomaluje růst nádorů u živočichů v porovnání s ovalbumin expresujícími EG?.OVA nádorovými buňkami po imunizaci plasmidem kódujícím ovalabumin.
- 8 ·· 0 40 0 • 0 00 · 0 0
0 0 0 0 0 0 «0 0 0 0« 000«
4 0 · · 0
000 «0 *
Na ose x jsou dnjí po implantaci nádoru, na ose y jsou objemy nádorů v mm3.
Čtverce jsou pro pVACl + nosič, kroužky jsou pro pVACl + imiquimod, trojúhelníky jsou pro pVACl.OVA + nosič a obrácení trojúhelníky jsou pro pVACl.OVA + Imiquimod.
□br.10.
Imiquimod snižuje tumorgenicitu ovalbunim expresujících EG7.0VA nádorových buněk implantovaných do živočichů předem imunizovaných plasmidem kódujícím ovalbumin. Skupina % tumorgenicity (56 dní po implantaci!
pVACl +· nosič 41 pVACl + imiquimod 58 pVACl.OVA + nosič 41 pVACl.OVA + imiquimod 25
Vynález blíže objasňuje následující podrobný popis.
Výrazem obsahuje a zahrnuje nebo variacemi těchto výrazů se zde vždy, že jsou zahrnuty ještě další nespecificky vyyjádřené celky nebo podílyJak shora uvedeno, týká se vynález imunogenových prostředků, jako jsou vakcinační prostředky, způsobů vakcinace a zlepšení způsobů vakcinace, přičemž se do savců zavádějí nukleotidové sekvence, které kódují imunogen, kterým je antigenový protein nebo peptid tak, že protein nebo peptid je expresován uvnitř savčího těla k vyvolání imunitní odezvy v savci proti antigenovému proteinu nebo peptidu. Takové způsoby vakcinace jsou dobře známy a podrobně je popsal Donnelly a kol. ((Annual Rev.Immunol 15, str. 617 až 648, 1997).
Výrazem vakcinační prostředek” se zde vždy míní kombinace imunogenní složky obsahující nukleidovou sekvenci kódující imunogen a adjuvantové složky obsahující derivát lH-imidazo[4,5-c]chinolin-4-aminu. Kombinace je například ve formě směsi dvou složek v jednom farmaceuticky přijatelném prostředku nebo ve formě samostatných, individuálních složek, například ve formě kitu obsahujícího imunogenní složku zahrnující nukleotidovou sekvenci kódující imunogen a adjuvantovou složku zahrnující lH-imidazoC4,5-c]chinolin-4-amin, přičemž jsou obě složky určeny k oddělenému, postupnému nebo současnému podání. S výhodou je podání obou složek v podstatě současné.
Derivátem lH-imidazoE4,5-c]chinolin-4-aminu je podle vynálezu s výhodou sloučenina obecného vzorce I až VIsloučenina obecného vzorce I
kde znamená
R11 skupinu alkylovou s přímým nebo s rozvětveným řetězcem, hydroxya1kylovou, acyloxyalkýlovou, benzylovou, CfenylMethylovou a fenylovou, přičemž skupina benzylová, <fenylMethylová nebo fenylová je případně substituovaná na benzenovém cyklu jednou nebo dvěma skupinami na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího skupinu alkylovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku a atom halogenu, a je-li benzenový cyklus substituován dvěma těmito skupinami, neobsahují tyto skupiny více než 6 atomů uhlíku, ♦ · · · · · ·
R21 atom vodíku, skupinu alkylovou s 1 až 8 atomy uhlíku, benzy lovou, CfenylMethylovou a fenylovou, přičemž skupina benzylová, (feny1 Methylová nebo fenylová je případně substituovaná na benzenovém cyklu jednou nebo dvěma skupinami na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího skupinu alkylovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku a atom halogenu, a je-li benzenový cyklus substituován dvěma těmito skupinami, neobsahují tyto skupiny více než 6 atomů uhlíku,
R1 na sobě nezávisle atom vodíku, alkoxyskupin s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, atom halogenu, skupinu alkylovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku a n je celé číslo O až 2, a znamená-lí n 2, skupiny R11 neobsahují dohromady více než 6 atomů uhlíku;
sloučenina obecného vzorce II
NH.
(IIM kde znamená
R12 alkenylovou skupinu s přímým nebo rozvětveným řetězcem se 2 až přibližně 10 atomy uhlíku popřípadě substituovanou alkylovou skupinou s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku a cykloalkylovou skupinou se 3 až přibližně 6 atomů uhlíku, která je sama popřípadě substituovaná alkylovou skupinou s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku;
φφφφ • · φ φ φ φ φ · · · • · · a φ φφφφ • # φφ φ φ φ · φφφφφ φ φ φφφ φφφ φφφφ φ ·® φφφ φφ ·
R22 atom vodíku, alkylovou skupinu s přímým nebo rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 8 atomů uhlíku, skupinu benzylovou, Cfeny1)ethyl a fenyl, přičemž skupina benzylová, (feny 1 > ethy 1 ová nebo fenylová ie popřípadě substituovaná na benzenovém cyklu jednou nebo nebo dvěma skupinami na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího skupinu alkylovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku a atom halogenu, a je-li benzenový cyklus substituován dvěma těmito skupinami, neobsahují tyto skupiny více než 6 atomů uhlíku,
R2 na sobě nezávisle alkoxyskupinu s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, atom halogenu a alkylovou skupinu s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 áž přibližně 4 atomy uhlíku a n je číslo O až 2, a znamená-li n 2, pak skupiny R2 neobsahují více než 6 atomů uhlíku;
sloučenina obecného vzorce III
kde znamená
R23 atom vodíku, alkylovou skupinu s přímým, nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 8 atomů uhlíku, skupinu benzylovou, Cfenyl>ethylovou a fenylovou, přičemž skupina benzylová, (feny1)ethylová nebo fenylová je případně substituovaná na benzenovém cyklu jednou nebo dvěiaa skupinami na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího skupinu ·· ···· alkylovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku a atom halogenu, a je-li benzenový cyklus substituován dvěma těmito skupinami, neobsahují tyto skupiny více než 6 atomů uhlíku,
R3 každý na sobě nezávisle alkoxyskupinu s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, atom halogenu a alkylovou skupinu s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku a n je číslo 0 až 2, a znamená-li n 2, pak skupiny R3 neobsahují více než 6 atomů uhlíku;
CIV) kde znamená
R1<4 skupinu -CHRARS, kde znamená RB atom vodíku nebo vazbu uhlík-uhlík a znamená-li RB atom vodíku, znamená RA alkoxyskupinu s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, hydroxya1koxy skupinu s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, skupinu l-alkiny~ lovou skupinu se 2 až přibližně 10 atomy uhlíku, tetrahydropyranylovou, alkoxyalkýlovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku v alkoxypodílu as 1 až přibližně 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, skupinu 2-, 3-, nebo 4-pyridylovou, a·» s další podmínkou, že znamená-li RB vazbu uhlík-uhlík, tvoří RB a RA dohromady skupinu tetrahydrofuranylovou popřípadě substituovanou jedním nebo několika substituenty volenými ze souboru zahrnujícího na sobě nezávisle skupinu ·
9 9 hydroxy1ovou nebo hydroxya1ky1ovou my uhlíku, s 1 až přibližně 4 atoR24 atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku nebo skupinu fenylovou popřípadě substituovanou skupinou alkylovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku nebo alkoxyskupinou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku nebo atomem ha1ogenu,
R4 atom vodíku, alkoxyskupinu s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku nebo skupinu alkylovou skupinu s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, sloučenina obecného vzorce V
kde znamená
Rlf5 atom vodíku, alkylovou skupinu s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 10 atomy uhlíku popřípadě substituovanou skupinou cykloalkylovou se 3 až přibližně 6 atomy uhlíku, která je sama popřípadě substitovaná skupinou alkylovou s přímým nebo s rozvětveným řetězcen s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, dále znamená skupinu alkenylovou s 2 až přibližně 10 atomy uhlíku popřípadě substituovanou skupinou cykloalkylovou se 3 až přibližně & atomy uhlíku, která je sama popřípadě substitovaná skupinou alkylovou s přímým nebo s rozvětveným řetězcen s 1 až přibližně 4 aΦ«·Φ ·· « Β ♦ *
Β · Β • · 9 9 · Β
9 9 9
99 9
19 9
9 9 9 9
9 9 9 99 9
19 9
999 99 9 torny uhlíku, dále znamená skupinu hydroxyalkýlovou s 1 až 6 atomy uhlíku, skupinu alkoxyalkýlovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku v alkoxypodílu asi až přibližně 6 atomy uhlíku v alkylovém podílu, acyloxyalkýlovou skupinu, kde acyloxypodílem je alkanoyloxyskupina se 2 až přibližně 4 atomy uhlíku nebo benzoyloxyskupina a 1 až přibližně 6 atomy uhlíku v alkylovém podílu, dále znamená skupinu benzyl ovou, Ctěny1 Methylovou a fenylovou, přičemž skupina benzylová, CfenylMethylová nebo fenylová je případně substituovaná na benzenovém cyklu jednou nebo dvěma skupinami na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího skupinu alkylovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku a atom halogenu, a je-li benzenový cyklus substituován dvěma těmito skupinami, neobsahují tyto skupiny více než 6 atomů uhlíku,
R25 skupinu vzorce
Rx kde znamená
Rx a Ry na sobě nezávisle atom vodíku, skupinu alkylovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, skupinu fenylovou popřípadě substituovanou skupinou alkylovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku a a torném halogenu;
X alkoxyskupinu s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, skupinu alkoxyalkylovou skupinu s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku v alkoxypodílu a s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, skupinu halogenalkýlovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, alkylamidoskupinu s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, aminoskupinu popřípadě, substituovanou skupinou alkylovou nebo hydroxyalkýlovou vždy s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, azidoskupinou, alkylthioskupinou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku a
R5 atom vodíku, alkoxyskupinu s přímým nebo s rozvětveným řetězcem obsahující 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, atom halogenu a alkylovou skupinu s přímým nebo rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.
Výhodnými alkylovým i skupinami s 1. až 4 atomy uhlíku jsou například skupina methylová, ethylová, propylová, 2-methylpropylová a butylová skupina. Nejvhodnějšími alkylovými skupinami jsou skupina methylová, ethylová a 2-methylpropylová. Výhodnými alkoxyskupinami jsou methoxy, ethoxy a ethoxymethylová.
Uvedené sloučeniny a způsoby jejich přípravy jsou popsány ve zveřejněné přihlášce vynálezu PCT jako světový patentový spis číslo WO 94/17043.
V případech kde n znamená číslo 0, 1 nebo 2, je n s výhodou O nebo 1.
Substituenty Ri a Rb se obecně označují jako benzosubstituenty. Výhodným benzosubstituentem je vodík.
Substituenty Ru a R15 jsou zde označovány 1-substituenty”. Výhodným 1-substituentem je skupina 2-methylpropylová nebo 2-hydroxy-2-methylpropylová.
Substituenty R21 až R25 jsou zde obecně označovány jako 2-substituenty . Výhodnými 2-substituent.y jsou atom vodíku,
• · · • · · • · · · • · ···
9 9 • 9 9 skupina alkylová s 1 až 6 atomy uhlíku, skupina alkoxyalkylová s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku v alkoxy podílu a 1 až přibližně 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu. Neivýhodnějším 2-substituentem Je atom vodíku, skupina methylová nebo ethoxymethy1ová.
Obzvlášt výhodné Je, když sloučeninou 1H-imidazol[4,5-c3chinolin-4-amin je sloučenina obecného vzorce VI
Rt kde znamená
RC atom vodíku, alkoxyskupinu s přímým nebo s rozvětveným řetězcem 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, atom halogenu a skupinu alkylovou, s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku;
Ru skupinu 2-methylpropylovou nebo 2-hydroxy-2-methylpropylovou a
Rv atom vodíku, skupinu alkylovou s 1 až přibližně 6 atomy uhlíku nebo a1koxya1ky1ovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku v alkoxypodílu asi až přibližně 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, nebo její fyziologicky přijatelné soli.
V obecném vzorci VI znamená R-t s výhodou atom vodíku, Ru s výhodou skupinu 2-methylpropylovou nebo 2-hydroxy-2-methy1propylovou a Rv s výhodou atom vodíku, skupinu methylovou nebo
• · ♦ · 0
0 0 0 0 0 0 ethoxymethylovou.
Jako výhodné lH-imidazo[4,5-c]chinolin-4-aminy se uvádějí: 1-(2-methylpropyl)-lH-imidazol4,5-c]chinolin-4-amin,
Csloučenina obecného vzorce VI, kde znamená Rt atom vodíku, Ru skupinu 2-methylpropylovou a Rv atom vodíku),
1-C2-hydroxy-2-methylpropyl)-2-methyl-1H-imidazol4,5-c]chinolin-4-amin, (sloučenina obecného vzorce VI, kde znamená Rt atom vodíku a Ru skupinu 2-hydroxy-2-methylpropylovou a Rv skupinua methylovou) , l-C2-hydroxy-2-raethylpropyl)-lH-imidazo[4,5-c]chinolín-4-amin, Csloučenina obecného vzorce VI, kde znamená Rt atom vodíku a Ru skupinu 2-hydroxy-2-methylpropylovou a Rv atom vodíku),
1-C2-hydroxy-2-methylpropyl)-2-ethoxymethyl-lH~imidazoC4,5-c]chinolin-4-amin,
Csloučenina obecného vzorce VI, kde znamená Rt znamená atom vodíku a Ru skupinu 2-hydroxy-2-methylpropylovou a Rv skupinu ethoxymethylovou), nebo jejich fyziologicky přijatelné soli.
Je možné přizpůsobit způsoby vakcinace a prostředky podle vynálezu k ochraně a k léčení savců proti řadě chorobných stavů, například proti virovým, bakteriálním nebo parazitickým infekcím, rakovině, alergiím a autimunitním poruchám. Jakožto několik specifických příkladů poruch nebo chorobných stavů, proti kterým lze chránit způsoby a prostředky podle vynálezu, se příkladně uvádějí:
Virové infekce
Hepatitidové virózy A, B, C, D a E, HIV, herpes virózy 1, 2, 6 ·· ΦΦΦΦ φφ φ φ φφφ φ φ · φ φ φ φφφ φ φ φ φ
ΦΦΦΦ φ φφ • φ φφφ φ ΦΦΦΦ a 7, cytomegalovirus, varicella zástěr, papilloma virus, Epstein Barr vir, vir chřipky, para-chřipkové viry, adenoviry, coxsakie viry, picornaviry, rotaviry, dýchací syncytiální viry, viry neštovic, viry x'ýmy, vir* zarděnek, papovírus, vir příušnic, vix’ spalniček.
Bakteriální infekce
Myobakterie způsobující TB a leprózu;
pneumocci, aerobní gram negativní bacily, mykoplasma, stafylokoková infekce, streptokoková infekce, salmonela, chlamydie; Parazitická infekce;
malárie, leishmaniasis, trypanosomiasis, toxoplasmosis, shistosomiasis, filariasis.
Rakovina
Rakovina prsu, tlustého střeva, konečníku, rakovina hlavy a krku, rakovina ledvin, malignantní melanomy, laryngeální rakovina rakovina vaječníku, rakovina cervixu, rakovina prostaty.
ft1erg i e
Rýma způsobena domácím prachem, senná rýma a jinými alergeny prostřed i.
Auto imun i tni nemoc i
Systemická lupus erythematosis
Způsobů nebo prostředků podle vynálezu se používá k ochraně před virovými chorobami nebo k léčení virových chorob ze souboru zahrnujícího hepatitidu B, hepatitidu C, lidský papilloma vir, lidský vir imunitní nedostatečnosti, nebo vir herpes simplex; bakteriálních nemoci TB; rakoviny prsu, tlustého střeva, vaječníku, cervixu a prostaty; nebo autoimunitních nemocí jako je astma, reumatoidní artritida a Alzheimerova nemocTyto vyjmenované chorobné stavy jsou míněny toliko jako
·
9999 • 9 9 • 9 9· * 9 9 9999 · 9
9 příklady a nikoliv jako jakékoliv omezení vynálezu.
Nukleové sekvence uváděné podle vynálezu, které mají být expresovány uvnitř savčího systému k vyvolání antigenové odezvy, mohou kódovat celý protein nebo pouze kratší peptidovou sekvenci, která je schopná iniciovat anigenovou odezvu- Výrazem antígenový peptid nebo imunogen se zde vždy míní veškeré peptidové nebo proteinové sekvence, které jsou schopné vyvolat imunitní odezvu v příslušném živočichovi- Výhodněji však nukleová sekvence má kódovat celý protein, který souvisí s chorobným stavem, jelikož exprese celých proteinů uvnitř živočišného systému pravděpodobněji znázorňuje přirozenou přítomnost antigenu a tím vyvolává plnou imunitní odezvu. Několik neomezujících příkladů známých antigenových peptidů ve vztahu ke specifickým chorobným stavům je voleno ze souboru zahrnujícího: antigeny schopné vyvolávat imunitní odezvu vůči lidským patogenům, jejichž antigen nebo antigenová sloučenina jsou odvozeny od HIV-1 Cjako jsou tat, nef, gpl20, gpl&O nebo gp40, p24, gag, env, vif, vpr, vpu, rev), lidské viry herpes, jako jsou gH, gL, gM, gB, gC, gK, gE nebo gD nebo jejich deriváty nebo bezprostřední Early protein, jako jsou ICP 27, ICP 47, ICP 4, od ICP36 od HSV1 nebo HSV2, cytomegalovir, obzvláště lidský Cjako jsou gB nebo jeho deriváty), Epstein Bari vir (jako je gp350 nebo jeho deriváty), Varicella Zoster Vir Cjako jou gpl, II, III a IE63) nebo vir hepatitidy jako je vir hepatitidy B Cnapřiklad Hepatitis B povrchový antigen nebo Hepatitis jádrový antigen nebo pol), antigen hepatitis C viru a hepatitis E viru nebo od jiné virové pathogeny, jako jsou paramyxoviry: Respirátory Syncytial vir Cjako F a G proteiny nebo jejich deriváty), nebo antigeny z viru parachripky, spalniček, příušnic, lidského papilomu Cnapříklad HPV6, 11,16,18, eg LI, L2, El, E2, E3, E4, E5, E6, E7), flaviviry Cnapříklad vir žluté horečky, dengue vir, vir klíšfatové encefalitidy, vir japonské encefalitidy) nebo buňky chřipkového viru, jako proteiny HA, NP, NA nebo M nebo jejich kombinace nebo antigeny
- 20 »· ·«·· • · • · · • ··· odvozené z bakteriálních patogenů, jako jsou Neisseria spp., včetně N. gonorrhea a N. meningitidis (například transferrin vázající proteiny, lactoferrin vázající proteiny, PilC, adhesiny); S. pyogeny (například M proteiny nebo jejich fragmenty, C5A proteáza, S agalactiae, S mutanty; H- ducreyi; Moraxella spp., včetně M catarhallfl, také známých jako Branhamella catarrhalis (například adhesiny a invasiny vysoké nebo nízké molekulové hmotnosti}; Bordetella spp., včetně B. pertussis (například pertactin, pertussis toxin nebo jejich deriváty, filanentosní hemagglutinin, adenylate cyclase, fimbriae), B. parapertussis a B. bronchiseptlca; Mycobacterium spp., včetně M. tufoerculosis (například ESAT6, Antigen 85Am-B nebo -C, MPT 44, MPT59, MPT45, HSP10, HSP65, HSP70, HSP75, HSP9D, PPD 19kDa [Rv37633, PPD 38kDa [Rv09343, M. bovis, M. leprae, M. avium, M- paratuberculosis, M. smegmatis, Legionella spp., včetně L. pneumophila; Escherichia spp., včetně enterotoxické E. coli (například kolonizačni faktory, tepelně labilní toxin nebo jeho deriváty, tepelně stálý toxin nebo jeho deriváty, enterohemorragická E. coli, enteropathogenická E. coli (například shiga toxinu podobný toxin nebo jeho deriváty; Vibrio spp., včetně V. cholera (například cholera toxin nebo jeho deriváty; Shigella spp., včetně S. sonnei, S. dysenteriae, S. flexnerii; Yersinia spp., včetně Y. enterocolitica (například Yop protein), Y. pestis, Y. pseudotuberculosis; Campylobacter spp., včetně C. jejími (například toxiny adhesiny a invasiny) a C. coli; Salmonella spp., včetně S. typhi, S. paratyphi, S. choleraesuis, S. enteritidis; Listeria spp., včetně L.monocytogenes; Helicobacter spp., včetně H. pylori (například ureáza, kataláza, vacuolační toxin); Pseudomonas spp., včetně P. aeruginosa; Staphylococcus spp., včetně S. aureus, S. epidermidis; Enterococcus spp., včetně E. faeealis, E- faecium; Clostridium spp., včetně C. tetani (například tetanový toxin a jeho deriváty), C. botulinum, (například botulinura toxin a jeho deriváty), C. difficile (například clostridium toxiny A nebo B a jejich deriváty); Bacillus spp., včetně B. anthracis (například
ΦΦΦΦ φφ φ · φφφφ φ φφ ·· · φ · · φ φφφ • · φ ···· • · · φ ·· φ botulinum toxin a jeho deriváty), Corynebacterium spp., včetně C. diphterie (například diphteria toxin a jeho deriváty); Borrelia spp. včetně B.burgdorferi (například OspA, OspC, DbpA, DbpB), B. garinii (například OspA, OspC, DbpA, DbpB), B. afzelii (například OspA, OspC, DbpA, DbpB), B. andersonii (například OspA, OspC, DbpA, DbpB), B. hermsii, Ehrlichia spp. včetně E. equi a činidlo lidské granulocytické Ehrlichiosis; Riskettsia spp., včetně R. riskettsii; Chlamydia spp., včetně C.traehomatis (například MOMP, heparin-vázající proteiny),C. pneumoniae (například MOMP, heparin-vázající proteiny), C. psittaci; Leptospira spp., včetně L. interrogans; Treponema spp., včetně T. pallidům (například vzácné vnější membránové proteiny), T.denticola, T.hyodisenteriae; nebo pocházející od parazitů, jako je Plasmodium spp., včetně P. falciparum; Toxoplasraa spp., včetně T. gondii (například SAG2,SAG3,Tg34); Entanoeba spp., včetně E.histolytica; Babesia spp., včetně Bmicroti; Trypanosoma spp.,včetně T.cruzi; Giardia spp., včetně G. lamblia; Leshmania spp., včetně L. major; Pneumocystis spp., včetně P- carinii; Trichomonas spp., včetně T- vaginalis; Schisostoma spp., včetně S. tiansoni, nebo odvozené od kvasnic jako je Candida spp., včetně C.albicans; Cryptococcus spp., včetně C.neoformans.
Jinými výhodnými specifickými antigeny pro M. tuberculosis jsou například Rv2557, Rv2558, RPFs Rv0837c, Rvl8S4c,
Rv2389c, Rv2450, Rvl009, aceA (Rv0467), PstSl, (Rv0932), SodA (Rv384G), Rv2031c l&kDal., Tb Ral2, Tb H9, Tb Ra35, Tb38-1, Erd 14, DPV, NTI, MSL, mTTC2 a hTCCl (VO 99/51748). Proteiny pro M. tuberculosis zahrnují také fúzní proteiny a jejich varianty, kde jsou fúzovány alespoň dva, s výhodou tři polypeptidy M. tuberculosis do většího proteinu. Jakožto výhodné fúzní proteiny se uvádějí Ral2-TbH9-Ra35, Erdl4-DPV-NTI, DPV-MTI-MSL, Erdl4-DPV-MTI-MSL-mTCC2, Erd14-DPV-MTI-MSL, DPV-MTI-MSL-mTCC2, TbH9-DPV-MTI (světový patentový spis číslo VO 99/ 51748)• · · · · · • · · • · · · • · · ····
Jako výhodné antigeny pro Chlamydie se uvádějí příkladně protein s vysokou molekulovou hmotností (HWMP), (světový patentový spis číslo WO 99/17741), 0RF3 (evropský patentový spis číslo EP 366 412) a domělé membránové proteiny Pmps). Jiné Chlamydiové antigenovýové vakcinové prostředky je možno volit ze souboru popsaného ve světovém patentovém spisu číslo WO 99/ 28475.
Výhodné bakteriální vakciny obsahují antigenovýy odvozené od Streptococcus spp. včetně S. pneumoniae PsaA, PspA, streptolysin, cholin-vázající proteiny) a proteinový antigenový Pneumolysin (Biochem Biophys Acta 67, str. 1007 1989; Rubins a kol. Microbial Pathogenesis 25, str. 337 až 342, 1989) a jeho mutantové detoxifikované deriváty (světový patentový spis číslo WO 90/06951 a WO 99/03884). K jiným výhodným bakterálním vakcinám, odvozeným z Haemophilus spp. včetně H.influezae typu B (například PRP a jeho konjugáty), netypovatelné H.influenzae, například 0MP26, adhesiny s vysokou molekulovou hmotností, P5, P6, protein D a lipoprotein D a fibrin a z fibrinu odvozené peptidy (americký patentový spis číslo US 5 843464) nebo četné kopivarianty nebo jejich fúzní proteiny.
Antigeny, použitelné podle vynálezu, mohou dále zahrnovat antigeny odvozené od parazitů, kteří způsobují malarii. Například vhodnými antigeny od Plasmodia falciparum jsou RTS a TRAP. RTS je hybridový protein obsahující v podstatě celou Cterminálovou část circumsporozoitního (CS) proteinu P. falciparum vázanou prostřednictvím čtyř aminokyslin části preS2 povrchového antigenu Hepatitis B na povrch (S) antigenu viru hepatitis B- Jeho úplná struktura je uvedena v mezinárodní přihlášce vynálezu číslo PCT/EP92/02591, zveřejněné jako světový patentový spis číslo W0 93/10152 a uplatňující prioritu z americké přihlášky vynálezu číslo 9124390.7. Je-li expresován v kvasnicích, je RTS produkován jako 1ipoproteinová částice a je-li společně expresován se S antigenem z HBV produkuje smí23 • · · · • ·· · · ft · · * · · · · ·· ···· • · · · φ · · šené částice známé jako RTS,S. TRAP antigeny jsou popsány v mezinárodní přihlášce vynálezu číslo PCT/GB89/00895 zveřejnění jako světový patentový spis číslo VO 90/01496. Výhodným provedením vynálzu je vakcína malárie, kde antigenový prostředek obsahuje kombinaci antigenovýů RTS, S a TRAP- Jinými plasmodiovými antigeny, které jsou pravděpodobnými kandidáty složek několikastupňové vakciny malárie, jsou P. faciparum MSP1, AMA1, MSP3, EBA, GLURP, RAPI, RAP2, Seguestrin, PfEMPl, Pf332, LSA1, LSA3, STARP, SALSA, PfEXP1, Pfs25, Pfs28, Pfs27/ 25, Pfsl6, Pfs48/45, Pfs230 a jejich analogy v Plasmodium spp.
Vynález se také týká použití protinádorového antigenu k použití pro imunoterapeutické léčení rakoviny například protinádorových antigenů jako u rakovin prostaty, prsu, tlustého střeva a konečníku, plic, pankreau, ledvin nebo melanomu. Jakožto příklady antigenů se uvádějí MÁGE 1, 3a MÁGE 4 nebo jiné antigeny MÁGE, jako jsou antigeny uvedené ve V099/40188, PRÁME, BAGE, Lage (známé také jako NY Eos 1) SAGE a HAGE CVO 99/53061) nebo GAGE (Robbins a Kavakami, Current Opinions in Immunology 8, str. 628 až 636, 1996; Vanden Eynde a kol., International Journal of Clinical & Laboratory Research (podáno 1997); Correale a kol., Journal of the National Canper Institute 89, str. 293, 1997). Tyto antigeny jsou skutečně expresovány ve velké řadě typů nádorů, jako je melanom, plicní karcinom, sarkom a karcinom měchýře.
MÁGE antigeny pro použití podle vynálezu mohou být expresovány jako fúzní protein s expresním zesilovačem nebo s imunologickým fdzním partnerem. Obzvláště může být Máge protein fúzován na protein D z heamophilus influenzae B. Obzvláště může fúzní partner obsahovat první třetinu proteinu D- Takové konstrukty jsou popsány ve světovém patentovém spise číslo V0 99/40188. Jinými příklady fúzních proteinů, které mohou obsahovat epitopy specifické pro rakovinu jsou bcr/abl fúzní prote i ny.
Ve výhodném provedení se používá prostatových antigenů, jako je pro prostatu specifický antigen (PSA), PAP, PSCA(PNAS 95/4) 1735-1740 1998), PSMA nebo antigen známý jako Prostáza.
Prostáza je pro prostatu-specifická serinová proteáza (po-
propeptidovou sekvencí, naznačující potenciální sekretovou funkci (P. Nelson, Lu Gan, C- Ferguson, P.Moss, R. Gelinas, L. Hood, a K. Vand, Molecular cloning and Characterisation of prostase, an androgen-regulated serine protease with prostatě restricted expresion, Pro. Nati. Acad. Sci. USA 96, str- 3114 až 3119, 1999). Je popsáno domnělé místo glykosylace. Předpověděná struktura je velmi podobná ostatním známým serinovým proteázám, což ukazuje, že zralý polypeptid se svinuje do jediné domény. Zralý protein je délky 224 aminokyselin s jedním přírodně zpracovaným epitopem A2.
Proteázová nukleotidová sekvence a odvozená polypeptidová sekvence a homology popsal Ferguson a kol- (Proč. Nat. Acad. Sci. USA 96, str. 3114 až 3119, 1999) a jsou popsány v patentové literatuře (světová přihláška vynálezu číslo TO 98/12302 a odpovídající americký patentový spis číslo US 5 955 306; VO 98/20117 a odpovídající americký patentový spis číslo US 5 840871 a US 5 786148) (kallikrein specifický pro prostatu) a V0 00/04149 (P7O3P).
Vynález se týká antigenů obsahujících prostázové proteinové fúze na bázi prostázového proteinu a fragmentů a jejich homologů (“derivátů)- Takové deriváty jsou vhodné k použití v terapeutických vakcinových formulacích, které jsou vhodné k léčení nádorů prostaty. Obykle obsahuje fragment alespoň 20, s výhodou 50, výhodněji 100 přilehlých aminokyselin jak je uvedeno ve shora zmíněné patentové literatuře25
-·· · · · ·
Další výhodný prostatový antigen je znám jako P501S, sekvence ID č. 113 (světový patentový spis číslo VO 98/37814). Imunogeriní fragmenty a části kódované jejich genem, zahrnující alespoň 20, výhodně 50 a výhodněji 100 přilehlých aminokyselin, uvedených ve shora zmíněné patentové literatuře, jsou uvažovány. Určitým fragmentem je PS108 (světový patentový spis číslo V0 98/50567).
Jiné pro prostatu specifické antigeny jsou známy ze světového patentového spisu číslo V0 98/37418 a V000/4149. Jiným je STEAP PNAS 96 14523 14528 7-12 1999.
Jakožto další s nádory související antigeny, vhodné podle vynálezu, se uvádějí: Plu-1 (J. Biol. Chem. 274(22) str. 15633 až 15645, 19999), HASH-1, HasH-2, Cripto (Salomon a kol., Bioassays 199, str. 2161 až 2170, americký patentový spis číslo US 5 654140), Criptin (americký patentový spis čísloUS 5981215). Kromě toho antigenovy obzvblášt závažné pro vakciny v léčení rakoviny obsahují také tyrosinázu a survivin.
Vynález je také užitečný v kombinaci s antigeny rakoviny prsu jako Muc-1, Muc-2, EpCAM, her 2/Weu, mammaglobin (americký patentový spis číslo US 5 668267; nebo popsanými ve světovém patentovém spisu číslo V0 00/52165, V0 99/33869, V0 99/ 19479, V0 98/45328. Her 2 neu antigeny jsou popsány v patentové literatuře (například americký patentový spis číslo US 5 801005). S výhodou obsahuje Her 2 neu celou extracelulární doménu (obsahující přibližně aminokyselinu 1 až 645) nebo její fragmenty a alespoň jednu imunogenovou porci celé extracelulární domény nebo celou extracelulární doménu přibližně C koncových 580 aminokyselin. Zvláště extracelulární doména zahrnuje fosforylační doménu nebo její fragmenty. Takové konstrukty jsou popsány ve světovém patentovém spise číslo TO 00/44899. Zvláště výhodný konstrukt je znám jako ECI) PD, jiný je znám jako ECD DPD (světový patentový spis číslo WO 00/44899).
·· · · · ·
Her 2 neu podle vynálezu je odvozen z krys, z myší nebo z lidí.
Vakcina může také obsahovat antigeny spojené s nádorovým nosným mechanizmem (například angiogeneze, nádorová invaze), například tie 2, VEGF.
Vakcina podle vynálezu se může také může používat pro profylaxi nebo terapii chronických poruch přídavných k alergii, k rakovině nebo k infekčním nemocem. Takovými chronickými poruchami jsou nemoci jako astma, ateroskleróza, Alzheimerova nemoc a jiné autoimunitní nemoci. Může se také uvažovat o použití vakcín jako antikoncepce.
Antigeny související s profylaxí nebo s terapií lidí náchylných nebo trpících Alzheimerovou nemocí jsou zvláště N koncový 39-43 aminokys1 inový fragment (ABthe amyloidní prekursorový protein) a menší fragmenty. Tento antigen je popsán ve světovém patentovém spise číslo WO 99/27944 (Athéna Neurosciences).
Potenciální autoantigeny, které mohou být. začleněny jako vakcíny pro autoimunní poruchy nebo jako antikoncepční vakcíny zahrnují: cytokiny, hormony, růstové faktory nebo extracelulární proteiny, výhodněji čtyršroubovicový cytokin, nejvýhodněji IL13- Jakožto cytokiny se příkladně uvádějí IL1, IL2, IL3, IL4, IL5, IL6, IL7, IL8, IL9, IL10, IL11, IL12, IL13, IL14, IL15, IL16, IL17, IL18, IL20, IL21, TNF, TGF, GMCSF, MCSF a OSM. Jakožto čtyršroubovicový cytokiny se uvádějí IL2, IL3, IL4, IL5, IL13, GMCSF a NCSF. Jakožto hormony se uvádějí příkladně luteinizující hormon (LH), folikuly stimulující hormon (FSH), chorionový gonadotropin (CG), VGF, GHrelin, agouti, agouti odvozený protein a neuropeptid Y. Růstové faktory obsahují například VEGF.
• · · ·
9 9 • · ·
9 · 9 • 9 9999
Vakcíny podle vynálezu jsou obzvláště vhodné pro imunoterapeutické léčení chorob, jako jsou chronické stavy a rakoviny, avšak také k léčení přetrvávajících infekcí. Vakciny podle vynálezu jsou tedy obzvláště vhodné pro imunoterapii infekčních chorob, jako je tuberkulóza (TB) , infekce HIV, jako je AIDS a virových infekcí jako je hepatitida B (HepB).
Podle obzvláště výhodného provedení kóduje nukleová kyselina jeden nebo několik následujících antigenů:
HBV - PreSl PreS2 a povrchové env proteiny, core a pol
HIV - gpl20, gp40, gpl60, p24, gag, pol, env, vif, vpr, vpu, tat, rev, nef
Papílloma - El, E2, E3, E4, E5, E6, E7, E8, LI, L2
HSV - gL, gH, gM, gB, gC, gK, gE, gD, ICP47, ICP36, 1CP4 Chřipka - haemaggluttin, nucleoprotein
TB - mykobakteriální super oxid dismutaza, 85A, 85B, MPT44, MPT59, MPT45,. HSP10, HSP65, HSP70, HSP90, PPD 19kDaAg, PPD38DaAg.
Nukleotidovou sekvencí může být RNA nebo DNA zahrnující genomovou DNA, syntetickou DNA nebo cDNA. S výhodou je nukleotidovou sekvencí sekvence DNA a nejvýhodněji sekvence cDNA. K získání exprese antigenového peptidu uvnitř savčích buněk je nutno, aby byly nukleotidové sekvence kódující antigenový peptid uspořádány ve vhodném vektorovém systému. Výrazem vhodný vektor se zde míní jakýkoli vektor, který umožní, aby byl antigenový peptid expresován uvnitř savce v dostatečném množství k vyvolání imunitní odezvy
Nnapříklad může vybraný vektor zahrnovat plasraid, promotor a polyadenylační/transkripční koncovou sekvenci uspořádanou ve správném pořadí k získání exprese antigenovýeh peptidů. Konstrukce vektorů, která obsahuje tyto složky a popřípadě další složky, jako posilovače, místa restrikčního enzymu a se• · · · • · lekční geny, jako jsou antibiotické resistanční geny, je pracovníkům v oboru dobře známa a podrobně ji popsal Maniatis a kol. (Molecular Cloning. A Laboratory Manual“ Cold Spring Harbour Laboratory, Cold Spring Harbour Press, sv. 1-3, 2. vydání 1989MJelikož je výhodné předejít replikaci plasmidů uvnitř savčího hostitele a integrovat uvnitř chromosomální DNA živočicha, vytváří se plasmid výhodně bez počátku replikace, která je funkční v eukaryotických buňkách Způsobů a prostředků podle vynálezu je možno použít v závislosti na procesu profylaktického ošetřování všch savců včetně, avšak bez omezení, například domácích zvířat, laboratorních zvířat, chovných zvířat, odchycených divokých zvířat, živočichat, nejvýhodněji lidíPodle vynálezu jsou-li deriváty lH-imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin.u použity jako adjuvanty ve vakcinaci DNA, jsou schopné podpořit cytokinové profily jak Thl, tak Th2. Použitým výrazem adjuvant nebo adjuvantová složka se zde vždy míní, že deriváty nebo složky obsahující deriváty mají působí k posílení a/nebo ke změně odezvy těla na imunogen žádoucím způsobem. Tak například může být adjuvantu použito k posunutí imunitní odezvy k převážně Thl odezvě nebo ke zvýšení odezvy obou typů.
Výhodný vyvolávač imunitní odezvy typu Thl umožňuje vytvoření buňkami zprostředkované odezvy. Vysoká hladina cytokinů typu Thl směřuje k podpoře vyvolání imunitní odezvy zprostředkované buňkami na daný antigen, zatím co vysoké hladiny cytokinů typu Th2 směřují k podpoře vyvolání huraorálních imunitních odezev na antigen.
Rozlišení imunitní odezvy typu Thl a Th2 není však absolutní- Ve skutečnosti jedinec podporuje imunitní odezvu, která • ·
II»· se popisuje jako převážně Thl nebo převážně Th2. Ve skutečnosti je však často vhodné označovat rodiny cytokinů výrazy, které popsali Mosmann a Coffman u myších buněčných klonů CD4 +ve T buněk (Mosmann T.R. Coffman, R.L, TH1 adn TH2 cellsdifferent patterns of lymphokine secretion lead to different functional properties”, [Thl a Th2 buňky: odlišné lymfokinové sekrece vedou k různým funkčním vlastnostem], Annual Reviev of Immunology 7, str. 145 až 173, 1989). Tradičně jsou odezvy typu Thl spojovány s produkcí INF-gama a IL-2 cytokinů T-lymfocyty. Ostatní cytokiny, často přímo spojované s vyvoláním imunitních odezev typu Thl, nejsou produkovány T-buňkami, jako jsou IL-12. Na rozdíl od toho jsou odezvy typu Th2 spojovány se sekrecí IL-4, IL-5, IL-6, IL10.
Imunogenní složka obsahující vektor, který zahrnuje nukleotidovou sekvenci kódující ant-igenový peptid, může být podávána různými způsoby. Je možné, aby byl vektor podáván v holé podobě (tedy v holé nukleotidové sekvenci nikoli ve spojení s 1iposomálními formulacemi, s virovými vektory nebo s proteiny usnadňujícími transfekci), začleněný ve vhodném prostředí, například v roztoku pufrované solanky jako je PBS a pak injektován intramuskulárně, subkutánně, intraperitoneálně nebo intravenózně, ačkoli některé dřívější údaje naznačují, že intramuskulární nebo subkutánní injekce je výhodnější (Brohm a kol., Vaccine 16, Č.9/10, str. 949 až 945, 1998). Je dále možné, aby byl vektor zapouzdřen například liposomy nebo polyaktidovými koglykolidovými částicemi (PLG) (25) k podání orální, nasální nebo pulmonární cestou vedle shora popsaných cest.
Je také možné, podle výhodného provedení vynálezu, k intradermálnímu podání Imunogenní složky s výhodou použít způsobů podání pomocí genového děla (bombardováním jednotlivými částicemi). Takové způsoby představují nanesení imunogenní složky na zlaté kuličky, které se pak podávají pod vysokým tlakem do epidermu (například Haynes a kol., J. Biotechnology • 4 « · · 4 • ♦ · 4 * · · 4 4 4 • · * · * 9 9 9 9 ♦ * · * * · «· 4444« ♦ * · 4 ♦ «44 • ·44 4 »4 444 44 ♦
44, str. 37 až 42, 19965.
Vektory, které obsahují neukleotidové sekvence kódující antigenové peptidy, se podávají v takovém množství, aby byly profylakticky nebo terapeuticky účinné- Podávané množství na dávku je obecně v rozmezí 1 pikogramu až 1 miligramům, s výhodou v rozmezí 1 pikogramu až 10 mikrogramů při podávání formou částic a v rozmezí 10 mikrogramů až 1 miligram pro ostatní způsoby podání nukleotidu. Podávané množství může značně kolísat v závislosti na faktorech, jako jsou druh a hmotnost imunizovaného savce, cesta podání, mocnost a dávka derivátu lH-imidazoE4,5-clchinolin-4-aminu, povaha léčeného nebo před chorobou chráněného stavu, kapacita imunitního systému jedince k vytváření imunitní odezvy a požadovaný stupen ochrany nebo terapeutické účinnosti- Na základě těchto proměnných faktorů je lékař nebo veterinář schopen určit vhodnou velikost dávek.
Je táké možné, aby imunogenní složka, obsahující nukleotidovou sekvenci kódující antigenový peptid, byla podávána jednou nebo opakovaně, například 1 až 7 krát, s výhodou 1 a 4 krát v přibližně jednodenních a přibližně 18 měsíčních intervalech- Opět vsak se léčebný režim významně mění v závislosti na faktorech, jako jsou velikost ošetřovaných živočichů, cesta podání, povaha léčeného nebo před chorobou chráněného stavu, množství podávané nukleotidové sekvence, mocnost a dávka zvolených derivátů 1H-lmidazoE4,5-c]chinolin-4-arainu a ostatní faktory známé zkušenému lékaři nebo veterináři.
Specifikovaná adjuvantová složka podle vynálezu může být podobně podávána například orálně, nasálně, pulmonárně, intrarauskulárně, subkutánně, intradermálně nebo topicky. S výhodou se složka podává intradermálně nebo topicky. Podávat lze 14 dní před až přibližně 14 dní po podání nukleotidové sekvence, s výhodou přibližně 1 dnem před a přibližně 3 dny po podání nukleotidové sekvence. Nejvýhodnější je, když se adjuvantová
4 4 4 « ·· I složka podává v podstatě současně s podáním nukleotidově sekvence. Označením v podstatě současně se míní, že se adjuvantový prostředek podává s výhodou zároveň s nukleotidovou sekvencí, nebo alespoň během několika hodin po každém podání nukleotidové sekvence. Podle neivýhodnějšího ošetřování se adjuvantový prostředek podává v podstatě současně s podáním nukleotidové sekvence- Tento pxOtokol se mflže měnit podle potřeby v souvislosti s typem shora popsaných faktorů.
V závislosti na takových faktorech se mění také dávka podávaného derivátu, avšak může se být například v rozmezí přibližně 0,1 mg/kg až přibližně 1OO mg/kg, kde se výrazem /kg“ míní tělesná hmotnost ošetřovaného savce. Toto podání derivátu lH-imidazo[4,5-c]chinolin-4-aminu se s výhodou opakuje s každým následným nebo podpůrným podáním nukleotidově sekvence. Nejvýhodněji se podává dávka v rozmezí přibližně 1 až přibližně 50 mg/kg.
I když Je možné, aby adjuvantová složka obsahovala pouze deriváty 1H-imidazo[4,5-c]chinolin-4-aminu Jako takové, Je pro podání výhodné, Je-11 ve formě farmaceutického prostředku. To znamená, že adjuvantová složka s výhodou obsahuje IH-imidazoC4,5-c]chinolin-4-amin v kombinaci s alespoň jedním farmaceuticky nebo veterinálně přijatelným nosičem a pořípadě s dalšími terapeutickými přísadami- Nosič nebo nosiče musejí být přijatelné v tom smyslu, že jsou kompatibilní s ostatními složkami prostředku a nikoli škodlivé pro recipienta. Povaha prostředků se přirozeně mění podle zamýšlené cesty podání a prostředek se může připravovat způsoby dobře známými ve farmaceutickém oboru. Každý způsob zahrnuje uvedení do styku derivátu 1H-Imidazo[4,5-c]chinolin-4-aminu s alespoň jedním vhodným nosičem. Obecně se prostředek připravuje rovnoměrným a důkladným promísením derivátu s tekutými nosiči a/nebo s jemně rozptýlenými pevnými . nosiči a popřípadě se produkt vytvaruje na žádaný prostředek- Prostředek podle vynálezu pro orální po32 • · • · to •
• 9 9» ► · to • to dání může být. v oddělených jednotkách, jako jsou kapsle, sáčky nebo tablety, z nichž každá obsahuje předem určené množství účinné látky v podobě prášku nebo granulí; jako roztok nebo suspenze ve vodné kapalině nebo v nevodné kapalině; nebo jako tekutá emulze olej ve vodě nebo emulze voda v oleji. Účinná látka mít také formu bolusu, lektvaru nebo pasty.
Tablety se mohou lisovat tlakem nebo se mohou razit, popřípadě s alespoň jednou pomocnou složkou. Lisované tablety se připravují stlačováním ve vhodném stroji účinné látky ve volně tekuté formě jako prášku nebo granulí, popřípadě ve směsi s pojidlem, s mazadlem, s inertním ředidlem, s činidly povrchově aktivními nebo dispergačními. Lisované tablety se mohou lisovat ve vhodném stroji jako směs práškově složky navlhčené inertním tekutým ředidlem.
Tablety mohou být popřípadě povlečeny a mohou být formulovány k dosažení pomalého nebo řízeného uvolňování účinné 1átky.
Prostředky například k intramuskulárnímu, intraperitoneálnímu nebo subkutánnímu injektování zahrnují vodné a nevodné sterilní injekční roztoky, které mohou obsahovat antioxidanty, pufry, bakteriostaty a činidla k dosažení isotonicity s krví příjemce; zahrnují dále vodné a nevodné sterilní suspenze, které mohou obsahovat suspenzační činidla a zahuštovadla. Prostředky mohou být v jednodávkových nebo vícedávkových nádobách, například v zatavených ampulích a v lékovkách a mohou se skladovat ve stavu lyofi 1izovaném Cpo sušení vymrazováním), vyžadujícím pouze bezprostředně před použitím přísadu sterilního tekutého nosiče, například vody pro injektování. Injekční roztoky a suspenze pro použití se nohou připravovat ze sterilních prášků, granulí a tablet předem předepsaného druhu. Prostředky vhodné pro pulmonární podání cestou ústní nebo nosní dutiny jsou částice obsahující účinnou látku, mající s výhodou ·· ···· · · průměr v rozmezí 0,5 až 7 pm a vnášejí se do dýchacího traktu příjemce. Takové prostředky mohou být ve formě jemně rozmělněných prášků, které mohou být ve formě prorazitelné kapsle, vhodně například želatinové kapsle, pro použití v inhalátoru, nebo alternativně jako samočinně vypuzované prostředky obsahující účinnou látku, vhodný tekutý hnací prostředek a popřípadě další složky jako povrchově aktivní činidla a/nebo pevné ředidlo. Používat lze také prostředky s hnacím plynem, kde je účinná látka dispergována ve formě kapiček roztoku nebo suspenze. Takové prostředky jsou obdobou v oboru známých prostředků a mohou se připravovat o sobě známými způsoby. Vhodně jsou opatřeny ručně ovládaným nebo automatickým ventilkem s žádanou charakteristikou spreje, s výhodou je ventilek dávkovač ího typu, dodávající odměřený objem, například v rozmezí 50 až 1OO μΐ při každém stisknutí.
Další možností je, že složka adjuvantu je ve formě roztoku pro použití v rozprašovači, kde je použito proudu stlačeného vzduchu nebo ultrazvukového míchání k vytváření jemných kapiček mlhy pro inhalaci.
Pprostředky p:co intranasální podání mají obdobné složení jako pro shora popsané pulmonární podání, se u takových prostředků se však dává přednost velikosti částic v rozmezí přibližně 10 až přibližně 200 jjm k umožnění zachycení v nosní dutině. Toho se může dosáhnout vhodně použitím prášku o vhodné velikosti částic nebo volbou vhodného ventilku. Jinými vhodnými prostředky jsou hrubé prášky s velikostí částic v rozmezí přibližně 20 až přibližně 500 μιπ pro podání rychlou inhalací nosním kanálem z kontejneru drženého těsně u nosu a nosní kapky obsahující hmotnostně 0,2 až 5 % účinné látky ve vodných nebo v olejových roztocích. Podle jednoho provední vynálezu je možné, že vektor, obsahující nukleotidovou sekvenci kódující antigenový peptid, je podáván prostředkem pbsashujíeím rovněž derivát lH-im.idazo[4,5-cl chinol in-4-amlnu. V tomto provedení
• · 9 • 9 9 • 9 9 9
9 999 jsou tedy imunogenní a adjuvantová složka uvnitř stejného prostředku .
Podle výhodného provedení se adjuvavtová složka připravuje ve formě vhodné pro podávání genovým dělem a podává se v podstatě současně s nukleotidovou sekvencí. Pro přípravu prostředků vhodných pro použití tímto způsobem může být nutné, aby by derivát 1H-imidazo[4,5-c]chinolin-4-aminu lyofilizován a aby byl nanesen například na zlaté kuličky vhodné k podáváni í genovým dě1em.
V alternativním provedení může být adjuvantová složka podávána jako suchý prášek s tlakovým hnacím plynem, a to s výhodou v podstatě současně s podáním neukleotidové sekvence.
I když nejsou obě složky v jednom prostředku, může být vhodné podávat aduvantní složku do stejného nebo přibližně stejného místa jako nukleotidovou sekvenci.
Literatura Cnapříklad Remingto s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, Pensy .1 vania, 1985) uvádí další podrobnosti o výrobě farmaceutických prostředků.
Vynález blíže objasňují, nijak však neomezují, následující příklady praktického provedení.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Imiquimod zvyšuje velikost cytotoxické odezvy T buněk na vakcinu nukleové kyseliny
Konstrukce plasmidu a příprava DNA *9 9 9 9
9 9 9 · 9 9 9 ··
9t 4
9 9
9 9 · • 9 999
Použité plasmidy jsou založeny na pVACl (obchodní produkt společnosti Michelle Young Glaxo Wellcome, UK) a na modifikaci savčího expresního vektoru, pCl, (Promega), kde několikanásobné klonovací místo od EcoRI po Bst ZI, je nahrazeno sekvencí EMCV IRES lemovanou 5 jedinečnými Nhe I, Rsr II a Xho I a 3 jedinečnými PacI, AscI a Not I restrikčními enzymovými místy.
Chřipkový nukleoproteinový expresní plasmid, pVACl.PR se konstruuje ligací PCR zesílené cDNA kódující nukleoprotein chřipky A virového kmene PR/8/34 od pAR501 (dar Dr. D. Kilossise, NIMR, London, UK) do expresního vektoru pVACl.
Plasmid DNA se množí v E. coli a připravuje za použití plasmidových čisticích kitfl (QIAGEN Ltd.,Cravley,UK) a ukládá se
Ό při teplotě -20 C jako přibližně 1 mg plasmidu DNA/ml v 10 mM pufru Tris/EDTA.
Příprava patron pro imunizaci DNA
Patrony pro Accel1 genové transferové zařízení se připravují známým způsobem (Eisenbraun a kol-, DNA and Cell Biology sv, 12 č. 9, str. 791 až 797, 1993; Pertener a kol.). Plasmidem DNA se povléknou 2 nm zlaté částice (DeGussa Corp., South Plainfield, N-J. USA) a vnesou se do trubiček Tefcel, které se nařežou na kousky o délce 12,7 mra, aby sloužily jako patrony a o
uloží se vysušené při teplotě 4 C až do použití. Při typické vakcinaci obsahuje každá patrona 0,5 mg zlata povlečeného přibližně 0,05 ng pVACl.PR s pouhým vektorem (pVACl) přidaným k doplnění na celkem 0,5 ng DNA/patrona.
Imunizace
K vyzkoušení, zda imiquimod zvýší cytotoxickou odezvu T buněk, generovanou vakcinací nukleové kyseliny, se pVACl.PR podává částicemi zprostředkujícími genový transfer (0,05 ng/ • 9 ΦΦΦΦ • * Φ · Φ · Φφφ
9· · · 9 Φφφφ • · ΦΦ» Φφφ» ··· • · φφφ φφφ patrona) do myší kůže. Plasmid se vnáší do oholené cílové místa břišní kůže myší C57BI/6 (obchodní produkt společnosti Charles River United Kingdom Ltd. , Margate, UK) ze dvou patron za použití genového trandsferového zařízení Accell při 0,35154 kg/mm2 (500 liber na čtvereční palec) (McCabe, světový patentový spis číslo VO 95/19799). Bezprostředně po vakcinaci se podává imiquimod (připravený jako suspense v nosiči obsahující 0,3 % [hmotnost/objem] methylcelulozy a objemově 0,1 % Tveenu ve sterilní vodě) jedinou subkutánní injekcí (0,05 ml/10 g tělesné hmotnosti formulované k zajištění dávky 30 mg/kg) do imunizačního místa. Plasmidovými a imiquimodovými kontrolami jsou pouhý vektor (pVACl) a nosič.
Cytotoxické T buněčné odezvy
Cytotoxická T buněčná odezva se posuzuje testem CD8+Tcell-restricted IFN-gama ELISPOT splenocytů shromážděných týden později- Myši se usmrtí mozkovou dislokací a sleziny se shromáždí v ledově studené PBS. Splenocyty se vyjmou do fosfátem pufrované solanky (PBS) a buňky červených krvinek se lyžují (1 minuta v pufru sestávajícím z 155 mM chloridu amonného, 10 mM hydrogeňuhličitanu draselného a 0,1 mM ethylendiarainheraoetové kyseliny). Po dvojím promytí v PBS k odstranění částic se suspenze jediné buňky po částech vnese do destiček ELISPOT předem povléknutých zachycenou protilátkou IFN-gama a stimulovaných CDS-omezeným příbuzným peptidem. Po kultivaci pores noc se buňky produkující IFN-gama zviditelní aplikací protimyším IFN-gama biotinem značené protilátky (Pharmigen) a alkalickou fosfatázou konjugovanou se strptavidinem a kvantifikují se analýzou obrazu.
Výsledky tohoto testu (obr. 1) ukazují, že počet cytotoxických T-buněk ve slezinách myší ošetřených kombinací pVACl.PR a imiquoimodu je trojnásobně větší než při pVACl.PR + nosič samotný. Nepozoruje se žádný rozdíl mezi skupinami kontrolní ·· *·· · plasmid (pVACl) + imiquimod nebo nosič, což znamená, že účinek imiquimodu je antigenově restrikční. Tyto výsledky zřetelně dokládají, že imiquimod je mocným adjuvantem pro vakcinaci nuk1eové kyše1 i ny.
Příklad 2
Imiquimod zvětšuje míru odezvy CD4.+T buněk na vakcinu nukleové kyseliny
Příprava plasmidů, DNA a patron
Kuřečí ovalbuminový expresní plasmid pVACl.OVA se konstituuje ligací PCR zesílené cDNA kódující kuřecí owalbumín z pUGUOVA (dar Dr. F. Carbona) do expresního vektoru pVACl a připraví se patrony (jak popsáno shora v příkladu 1).
Myši a imunizace
Samčí a samičí transgenické myši DO.11-10 (staré 6 až 10 týdnů) se chovají v chovné stanici pathogenů prostých živočichů na farmě Bury Green Farm. Transgen, který tyto myši expresují, je receptor T-buněk (TCR) specifický pro residua kuřecího ovalbůminového peptidu (residua 323-339; OVA peptid) vázaná na MHC-II molekulu (I-Ad). Monoklonální protilátka, KJ1-26, která specificky rozeznává tento receptor TCR, se používá k 1dentifikaci TCR-transgenových T-buněk. Zkoumání řady těchto myší ukázalo, že velký podíl (40 až 65 %) CD4+ T-buněk jsou KJ1-26* ačkoli je obsažena také malá populace CD4~CD8+ KJ1.26+ T-buněk (Pape a kol., Immunological Revievs 156, str.67 až 78, 1997).
Myši Balb/c jsou obchodní produkt společnosti Charles River United Kingdom Ltd. (Margate, UK).
Φφ ··♦· Φ· • φ φφφ φ φ φ φ φ φ · φ φ φ φ φ φ φφφφ φ ··
- 38 φφ φ φ φ φ φ φφφ φ φφφφ φφφ φφ φ
Odezva na CD4+T-buňky se zkoumá za použití adoptivního transferového modelu, který zvětšuje citlivost měřených imunitních parametrů. T-Bňky, které specificky rozeznávají pepti dovou sekvenci z ovalbůminového proteinu, se adoptivně přenesly z transgenových do naivních myší přírodního typu před imunizací. Adoptivně se přenesly 24 hodin před imunizací splenocyty do 6 až 8 týdnů starých myší Balb/c. Splenocyty se připraví jako ve shora uvedeném příkladě 1. Buňky se adoptivně přenesou do vnější ocasní žíly 100 μΐ injekcí (tedy 25xl06 splenocytů/myš).
Myši se imunizují částicemi zprostředkovaným genovým přenosem s plasmid kódujícím ovalbuminem (pVACl.OVA;O,5 pg/patrona) a imlquimodem (30 mg/kg) nebo kontrolním plasmidem nebo nosičem, jako v příkladu 1.
CD4 T-buněčné odezvy
Myši se usmrtí mozkovou dislokací, shromáždí se tříselné a periaortové lymfatické uzliny a upraveví se stejně jako splenocyty (popsaných v příkladu 1) s tou výjimkou, že se vynechá stupen lyse červených krvinek.
Ke změření klonální expanse CD4 T-buněk po imunizaci se hodnotí proliferace ovalbůminových specifických T-buněk po vyvolání odezvy in vitro příbuzným ovalbuminovým peptidem v preparátech lymfatických uzlin shromážděných tři dny po imunizaci- Proliferace hodnocená absorpcí tritiovaného thymidinu prolif eračními buňkami je více než dvojnásobná s kombinací pVACl.OVA+Ímiquimod v porovnání s pVACl.OVA+nosič (obr. 2). Nepozoruje se žádný rozdíl mezi kontrolním plasmidem (pVACl)+ ímiquimod nebo nosičovými skupinami, což znamená, že účinek imiquimodu je antigen-restrikční.
Podstatný nárůst aktivace CD4 T-buněk, hodnocený testem ·· ··« ·
IL2 ELISPOT (příklad 1) u buněk lymfatických uzlin, shromážděných G dní po imunizaci (obr. 3), byl zjištěn u kombinace pVftCl-OVA+imiquimod v porovnání s pVftCl.OVft samotné (70% nárůst) Tyto výsledky dokládají, že adjuvantový účinek imiquimodu in vivo zasahuje do obou populací T--buněk (tedy CD8-+cyt.otoxických a CD4+pomocjiých). Potvrzují také mocnost adjuvantového účinku imiquimodu na vakcinaci nukleové kyseliny.
Příklad 3
Imiquimod vyvolává odezvy jak Thl tak Th2 buněk na vakcinu nukleové kyseliny
CD4+podskupíny se hodnotí použitím adoptivního transferového modelu (příklad 2). IFN-gama produkující buňky (Thl) a IL-4 produkující buňky (Th2) se testují testem ELISPOT (příklad 1). Imiquimod vyvolává nárůst v obou cytokiny produkujících buňkách, ačkoli nárůst je podstatnější u INF-gama ve srovnání s IL-4 (obr. 4). V kontrolách, imunizovaných pouhým vektorem, nebyly zjištěny žádné buňky produkující cytokiny. Sklon k IFN-gama produkujícím buňkám naznačuje, že imiquimod působí nejen jako adjuvant pro vakcinaci nukleovou kyselinou, ale také přednostně indukuje odezvu typu Thl, což bylo doloženo příkladem 1Príklad 4
Působení imiquimodu na humorální imunitní odezvy
K prozkoumání, zda imiquimod zvyšuje humorální odezvu, generovanou vakcinaci nukleovou kyselinou, se podává plasmid kódující antigen (například nukleoproteín z chřipkového viru) způsobem PMGT do myší kůže. Primární imunizace se sleduje jed- 40
·« * • · · • · · · • · ···· • · · nou nebo několika podpůrnými imunizacemi s alespoň 4 týdny mezi každou imunizací- Před každou a/nebo těsně po každé imunizaci se podává imiquimod jedinou subkutánní injekcí v irnunizačním místě. Plasmidové a imiquimodově kontroly jsou pouhým vektorem (tedy bez antigenu) a nosičem. Z ocasní žíly se odebírají vzorky krve ve 1 až 3 denních intervalech před imunizao cí a po ní. Sérum se oddělí a uloží při teplotě -25 C pro následnou analýzu proti látky.
Humorální odezva se posuzuje měřením hladin pro antigen specifické plné IgG protilátkY (například nukleoproteinu z viru chřipky) ve vzorcích séra odebraných po primární a podpůrné imunizaci. Mikrotitrační destičky (Nunc Immunoplate F96 maxisorp, Lifet Technologies) se povléknou 10 pg/ml antigenem inOr kubací přes noc při teplotě 4 Ca opláchnou se 4x omývacím pufrem (PBS obsahujícím 5 % Tveenu 20 a 0,1¾ azidu sodného).
o
Následuje jednohodinová inkubace při teplotě 20 C se vzorky séra sériově zředěnými blokujícím pufrem. Po dalších čtyřech opláchnutích (jako shora) k odstraněné nevázané protilátky se destičky inkubují jednu hodinu s peroxidázou konjugovanou anti-myší protilátkou IgG (Southern Biotechnology) zředěnou ve blokovacím pufru. Množství vázané protilátky se stanoví po dalších čtyřech opláchnutích (jako shora) následovaných přísadou roztoku TMB substrátu (T-8540-Sigma). Po 30 minutách při teplotě 20 C s ochranou proti světlu se reakce ukončí IM kyselinou sírovou a absorbance se odečte při 450 nm. Titry se definují jako nejvyšší zředění k dosažení OD 0,2- Nárůst hladiny protilátek v imunizovaných myších ošetřených imiquimodem oproti myším imunizovaným bez imiquimodu znamená zesilující liči nek imiquimodu na humorální odezvu.
Příkla 5
Imiquimod zvětšuje imunitní odezvu na HIV antigeny »· ·«··
Plasmidy, DNA a příprava patron
Plasmid expresující Gag a Nef antigeny (tedy VRG7077Gag/ Nef) sé kontruuje na bázi VRG7077. Výchozí plasmid VRG7077 se zkonstruuje náhradou beta-laktamázového genu obsahujícího Eamll051 - Pstl fragment pUUC19 (obchodní produkt společnosti Amersham Pharmacia Biotech UK Ltd., Amersham Plače, Little Chalfont, Bucks, HP7 9NA) s EcoRl fragmentem pUC4K (Amersham-Pharmmacia) obsahujícím gen odolávající kanamycinu následující po tupém ukončení obou fragmentů za použití T4 DNA polymerázy. Intron A, lidský Cytomegalovir IE1 promotor/zesilovač/ transkripce, je odvozen od plasmidu JV4303 získaného od Dr. Harriet Robinsona (University of Massachussets) a inzerován do Sall místa pUC19 jako fragment Xhol-Sall, začleňující růstový hormonální polyadenylační signál- Fúze Gag-Nef se generuje PCR bodnutím zkomoleného Nef se 195bp detovaného od 5 -konce genu odstraňujícího prvních 65 aminokyselin, odvozených od HIV-1 kmene 248A (Genbank Acc. No. L15518 dar od G- Thompsona) a pl7p24 (Gag) od plasmidu pHXBdeltaPr (Maschera a kol., 1995), obsahujícího HIV-1 krytý B kmen HXB2 (Genbank Acc. No.K03455). Výsledná Gag-Nef fúze se následně liguje do VRG7077 jako Notl-Bam-HI fragment. Příprava plasmidu DNA a patrony je stejná jako v příkladu 1.
Myši a imunizace
Imunizují se myši Bal/c a imiquimod se připravuje a podává stejně jako v příkladu 1. Myši dostávají první imunizaci následovanou podpůrnou imunizací 42 dní později, Imiquimod (100 mg/kg) se podává pouze při podpůrné imunizaci.
Odezvy cytotoxických T-buněk
ELISPOT testy IFN-gama se provádějí jako v příkladu 1 s použitím CD8 omezených příbuzných peptidů pro antiogeny Gag *9 9999 •9 9 9 9
9 9 9 • 9 9 9 9 • 9 9 9
9 · ··9 9
9« a Nef ke stimulaci splenocytů shromážděných pět dní po podpůrně imunizaci.
Pozoruje se podstatný nárůst cytotoxických T-buněk při společném podáváni imiquimodu v porovnání se skupinou, která dostávala samotný plasmid s nosičem (lOx pro Gag a lOOx pro Nef) (obr. 5). Tyto poznatky naznačují, že adjuvantní účinek imiquimodu není antigenově specifický a ukazují účinnost s virovými antigeny, nejvíce specificky pro HIV.
Příklad 6
Analogy imiquimodu jsou účinnými adjuvanty pro vakcinaci nukleovou kyselinou
Patrony se připravují za použití plasmidu pVACl.OVA, imunizace a odezvy T-buněk jsou popsány v příkladu 2. Analogy testovaného imiquimodu jsou l-(2-hydroxy-2-methylpropyl)-2-ethoxymethy1-IH-imidazo[4,5-c3chinolin-4-amin (tedy resiquimod), l-(2-hydroxy-2-methylpropy1)-2-methy1-1H-imidazoC4,5-c3chino 1in-4-amin a l-(2-hydroxy-2-methylpropyl)-lH-imidazol4,5-c3 chinolin-4-amin.
Resiquimod se testuje v širokém rozmezí dávek, přičemž 1 mg/kg se jeví jako optimální- Analýza buněk lymfatických uzlin, shromážděných 5 dní po imunizaci, vykazuje 6-násobný nárůst IFN-gama, produkujících CD4 T-buňky, s pouze mírným účinkem na IL-4 produkující CD4 T-buňky (obr. 6), což dále podporuje Thl předpojatý účinek pozorovaný v příkladu 3.
Účinek na T-buňky pět dní po imunizaci se zkoumá pro další dva analogy podávané v jediné dávce 30 mg/kg. Dvojnásobný nárůst jak IFN-gama tak IL-4 produkujících CD4 T-buňky je vyvolán l-(2-hydroxy-2-methy1propy1)-2-methy1-lH-imidazo[4,5-c]chinolin-4-aminem. Podobný účinek se pozorován pro l-(2-hyd• 0 0 0 0 0 0 • · · 0000 000» * · 0 0 0 0 ·· 0000 roxy-2-methylpropyl)-lH-imidazo[4,5-c] chinolin-4-amin (obr. 7) .
Výsledky podle tohoto příkladu dokládají, že adjuvantové účinky nejsou omezeny na imiquimod samotný, nýbrž zasahují do širšího oboru sloučenin v této chemické třídě.
Příklad 7
Topická aplikace je účinnou cestou podání imiquimodu s vakcinací aminokyselinou
Patrony se připraví s použitím plasmidu VRG7077Gag/Nef, PMID imunizace a odezvy T-buněk jsou stejné jako popsáno v příkladu 5. Imiqulmod se v tomto případě podává subkutánne v dávce 30 mg/kg. Zavádí se dodatečná skupina, kde se imiquimod podává aplikací 20 μΐ 5 % (hmotnostZobjem) krémového prostředku (ftldara), nanášeného topicky na PMID místo bezprostředně po imunizaci. Sleziny se shromáždí pro analýzu 6 až 11 dní po podpůrné imunizací.
Ppozoruje se podstatný nárůast cytotoxických T-buněk při podávání imiquimodu společně bud* jako subkutánní injekce nebo topicky, ve srovnání se skupinou, která dostávala plasmid se samotným s.c. nosičem (přibližně 2-násobný 11 dní po podpůrné imunizaci) (obr. 8). Tato čísla dokládají že topicky aplikovaný imiquimod je účinným adjuvantem pro PMID a že subkutánní injekce je závažnou náhradní cestou pro topickou aplikaci ve výzkumech adjuvantů kombinovaných s PMID.
Příklad 8
Imiquimod je účinným adjuvantem pro prevenci růstu nádoru
Patrony se připraví s použitím plasmidu pVňCl.OVA, (jak je popsáno v příkladu 2). Skupina 12 myší se imunizuje použi-
• · · ·· · tím PMID, jak je popsáno v příkladu 5, s tou vájímkou, že patrona obsahuje 0,1 jug DNA a imiquimod se podá subkutánně dávkou 30 mg/kg.
Porovnání nádorů
Dva týdny po podpůrné imunizaci se buňky EG?-OVA implantují injektováním jehlou podkutánně do boku každé myši C1OOOOO buněk/myš) a sleduje se růst nádoru. Buňky E.G7-0VA jsou původ-ně generovány F.Carbonem /Moore M.V. , Carbone F.R. a Bevan M.J., Cell 54, str. 777 až 785, 19885, transfektováním myších aseitů lymphomu lymphoblastové buněčné linie EL4 ke stabilní expresi kuřecího ovalbůminu.
Výskyt pohmatem zjštovaných nádorů byl nejvíce opožděn u myší imunizovaných pVACl.OVA ·+· imiquimod ve srovnání s pVACl OVA samotným Cobr.95. Pohmatem zjištěné nádory se vyskytovaly dříve a rostly rychleji u kontrolních skupin myší Ctedy myší imunizovaných systémem pouhý vektor ± imiquimod. Nástup nádorů byl 25% pro myši imunizované systémem pVACl.OVA + imiquimod. Na rozdíl od toho genicita nádoru byla větší o 40 % u všech ostatních skupin Cobr.105. Tyto výsledky ukazují, že imiquimod může zlepšovat protinádorový efekt PMID a má se zato, že imiquimod bude účinným adjuvantem s nukleovou kyselinou k ošetřování nemoci.
Průmyslová využitelnost
Adjuvantní složka obsahující derivát lH-imidazo[4,5-clchinolin-4-aminu a imunogenová složka obsahující nukleotidovou sekvenci kódující antigenový peptid nebo protein související s chorobným stavem pro výrobu vakcinového prostředku k podpoře imunitní odezvy savců na antigenový peptid nebo protein.

Claims (24)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1- Vakcinový prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje
    Ci) adjuvantní složku obsahující derivát 1H-imidazo[4,5-c]ehinol in-4-a.minu a
    Cii) imunogenovou složku obsahující nukleotidovou sekvenci kódující antigenový peptid nebo protein související s chorobným stavem
  2. 2- Kit,vyznačující se tím, že obsahuje
    Ci) adjuvantní složku obsahující derivát 1H-imidazoE4,5-clchinol in-4-aminu a
    Cil) imunogenovou složku obsahující nukleotidovou sekvenci kódující antigenový peptid nebo protein související s chorobným stavem.
  3. 3. Prostředek podle nároku 2, vyznačující se tím, že obě složky jsou určeny v podstatě pro současné podání.
  4. 4. Prostředek podle nároku 1,vyznačující se tím, že obě složky jsou ve formě jednoho farmaceuticky přijatelného prostředku.
  5. 5. Prostředek podle nároku 1,vyznačující se tím, že derivátem 1H-imidazo[4,5-c]chinolin-4-aminu je sloučenina obecného vzorce I až VI, sloučenina obecného vzorce I 'n
    Cl) kde znamená
    R11 skupinu alkylovou s přímým nebo s rozvětveným řetězcem, hydroxyalkylovou, acyloxyalkýlovou, benzylovou, Cfenyl)ethylovou a fenylovou, přičemž skupina benzylová, (fenyl)ethylová nebo fenylová je případně substituovaná na benzenovém cyklu jednou nebo dvěma skupinami na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího skupinu alkylovou s 1 až ^přibližně.4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až přibližně 4 í atomy uhlíku a atom halogenu, a je-li benzenový cyklus substituován dvěma těmito skupinami, neobsahují tyto skupiny více než 6 atomů uhlíku,
    R21 atom vodíku, skupinu alkylovou s 1 až 8 atomy uhlíku, benzylovou, (fenyl)ethylovou a fenylovou, přičemž skupina benzylová, (feny1)ethylová nebo fenylová je případně substituovaná na benzenovém cyklu jednou nebo dvěma skupinami na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího skupinu alkylovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku a atom halogenu, a je-li benzenový cyklus substituován dvěma těmito skupinami, neobsahují tyto skupiny více než 6 atomů uhlíku,
    R1 na sobě nezávisle atom vodíku, alkoxyskupin s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, atom halogenu, skupinu alkylovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku a n je celé číslo O až 2, a znamená-li n 2, skupiny R11 neobsahují dohromady více než 6 atomů uhlíku;
    sloučenina obecného vzorce II (II) • · kde znamená
    R12 alkenylovou skupinu s přímým nebo rozvětveným řetězcem se 2 až přibližně 10 atomy uhlíku popřípadě substituovanou alkylovou skupinou s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku a cykloalkylovou skupinou se 3 až přibližně 6 atomů uhlíku, která je sama popřípadě substituovaná alkylovou skupinou s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku;
    R22 atom vodíku, alkylovou skupinu s přímým nebo rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 8 atomů uhlíku, skupinu benzylovou, Cfenyl)ethyl a fenyl, přičemž skupina benzylová, Cfenyl )ethylová nebo fenylová je popřípadě substituovaná na benzenovém cyklu jednou nebo hebo dvěma skupinami na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího skupinu alkylovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku a atom halogenu, a je-li benzenový cyklus substituován dvěma těmito skupinami, neobsahují tyto skupiny více než 6 atomů uhlíku,
    R2 na sobě nezávisle alkoxyskupinu s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, atom halogenu a alkylovou skupinu s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku a n je číslo O až 2, a znamená-li n 2, pak skupiny R2 neobsahují více než 6 atomů uhlíku;
    sloučenina obecného vzorce III ‘23
    Clil) • · · · kde znamená
    R23 atom vodíku, alkylovou skupinu s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 8 atomů uhlíku, skupinu benzylovou, Cfeny1 Methylovou a fenylovou, přičemž skupina benzylová, (feny1 Methylová nebo fenylová je případně substituovaná na benzenovém cyklu jednou nebo dvěma skupinami na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího skupinu alkylovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku a atom halogenu, a je-li benzenový cyklus substituován dvěma těmito skupinami, neobsahují tyto skupiny více než 6 atomů uhlíku,
    R3 každý na sobě nezávisle alkoxyskupinu s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, atom halogenu a alkylovou skupinu s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku a n je číslo O až 2, a znamená-li n 2, pak skupiny R3 neobsahují více než 6 atomů uhlíku;
    CIVM kde znamená
    R14 skupinu -CHRARB, kde znamená RB atom vodíku nebo vazbu uhlík-uhlík a znamená-11 RB atom vodíku, znamená RA alkoxyskupinu s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, hydroxyalkoxy skupinu s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, skupinu 1-alkinylovou skupinu se 2 až přibližně 10 atomy uhlíku, tetrahyd49
    9 4449 ropyranylovou, aIkoxyalkýlovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku v alkoxypodílu as 1 až přibližně 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, skupinu 2-, 3-, nebo 4-pyridylovou, s další podmínkou, že znamená-li Rs vazbu uhlík-uhlík, tvoří RB a RA dohromady skupinu tetrahydrofuranylovou popřípadě substituovanou jedním nebo několika substituenty volenými ze souboru zahrnujícího na sobě nezávisle skupinu hydroxylovou nebo hydroxyalkýlovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku,
    R24 atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku nebo skupinu fenylovou popřípadě substituovanou skupinou alkylovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku nebo alkoxyskupinou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku nebo atomem ha1ogenu,
    R4 atom vodíku, alkoxyskupinu s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku nebo skupinu alkylovou skupinu s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, sloučenina obecného vzorce V kde znamená
    R15 atom vodíku, alkylovou skupinu s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 10 atomy uhlíku popřípadě substituovanou skupinou cykloalkylovou se 3 až přibližně 6 • · · · • ·
    0 · ···· • · · atomy uhlíku, která je sama popřípadě substitovaná skupinou alkylovou s přímým nebo s rozvětveným řetězcen s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, dále znamená skupinu alkenylovou s 2 až přibližně 10 atomy uhlíku popřípadě substituovanou skupinou cykloalkylovou se 3 až přibližně 6 atomy uhlíku, která je sama popřípadě substitovaná skupinou alkylovou s přímým nebo s rozvětveným řetězcen s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, dále znamená skupinu hydroxya1ky1ovou s 1 až 6 atomy uhlíku, skupinu alkoxyalkýlovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku v alkoxypodílu asi až přibližně 6 atomy uhlíku v alkylovém podílu, acyloxyalkýlovou skupinu, kde acyloxypodílem je alkanctyloxyskupina se 2 až přibližně 4 atomy uhlíku nebo benzoyloxyskupina a 1 až přibližně 6 atomy uhlíku v alkylovém pod i 1u, dále znamená skup i nu benzylovou, (feny1)ethylovou a fenylovou, přičemž skupina benzylová, (feny1)ethylová nebo fenylová je případně substituovaná na benzenovém cyklu jednou nebo dvěma skupinami na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího skupinu alkylovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku a atom halogenu, a je-li benzenový cyklus substituován dvěma těmito skupinami, neobsahují tyto skupiny více než 6 atomů uhlíku,
    R25 skupinu vzorce Rx kde znamená
    Rx a Ry na sobě nezávisle atom vodíku, skupinu alkylovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, skupinu fenylovou popřípadě substituovanou skupinou alkylovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku a • · · • · · · · atomem ha1ogenu;
    X alkoxyskupinu s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, skupinu alkoxyal kýlovou skupinu s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku v alkoxypodílu a s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, skupinu halogenalkylovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, alkylamídoskupinu s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku v alkylovem podílu, aminoskupinu popřípadě, substituovanou skupinou alkylovou nebo hydroxyalkylovou vždy s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, azidoskupinou, alkylthioskupinou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku a
    Rs atom vodíku, alkoxyskupinu s přímým nebo s rozvětveným řetězcem obsahující 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, atom halogenu a alkylovou skupinu s přímým nebo rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, sloučenina obecného vzorce VI kde znamená
    R+ atom vodíku, alkoxyskupinu s přímým nebo s rozvětveným řetězcem 1 až přibližně 4 atomy uhlíku, atom halogenu a skupinu alkylovou, s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku;
    Ru skupinu 2-methylpropylovou nebo 2-hydroxy-2-methylpropylovou a • · · · • · · • · · · • · ····<
    Rv atom vodíku, skupinu alkylovou s 1 až přibližně 6 atomy uhlíku nebo alkoxyalkylovou s 1 až přibližně 4 atomy uhlíku v alkoxypodílu asi až přibližně 4 atomy uhlíku v alky lovem podílu, nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.
  6. 6. Prostředek podle nároku 4,v yznačuj ící se tím, že derivátem 1H-imidazo[4,5-c]chinolin-4-aminu je sloučenina obecného vzorce VI.
  7. 7. Prostředek podle nároku 5,vyznačující se tím, že znamená Rt. atom vodíku.
  8. 8. Prostředek podle nároku 6,vyznačující se tím, že znamená Ru skupinu 2-methylpropylovou nebo 2-hydroxy-2-methylpropylovou a Rv atom vodíku, skupina methylovou nebo ethoxymethy1ovou.
  9. 9. Prostředek podle nároku 7,vyznačující se tím, že sloučenina obecného vzorce 1 je volena ze souboru zahrnuj íc ího l-C2-methylpropyl)-lH-imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin, l-(2-hydroxy-2-methyIpropyl)-lH-imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin,
    1-C 2-hydroxy-2-methy1propy1)-2-methyl-lH-imidazoE4,5-c]chinolin-4-amin a l-C2-hydroxy-2-methylpropy1)-2-ethoxymethyl-lH-imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin
  10. 10. Vakeinový prostředek podle nároku laž9, vyznačující se tí m, že každá složka je vhodná k podání orálnímu, nasálnínu, topickému, pulmonárnímu, intramuskulárnímu, subkutánnímu nebo intradermálnímu.
  11. 11.
    Vakeinový prostředek podle nároku 10, vyznač u jící se t í m, že imugenová složka je ve fox-mě vhodné k podání s použitím částic upravených způsobem genového transf eru
  12. 12. Vakeinový prostředek podle nároku 11, vyznačující se tím, že adjuvant je ve formě vhodné k podání s použitím částic upravených způsobem genového transferu.
  13. 13. Způsob zvyšování imunitní odezvy na antigen, vyznáčující se tím, že se podává postupně nebo současně do nukleové kyseliny zakódovaný antigen a derivát imidazo[4,5-c]chino1in-4-aminu.
  14. 14. Způsob zvyšování imunitní odezvy savců na imunogen, vyznačující se t í m, že se podává savci vakcinový prostředek podlá nároku 1 až 12.
  15. 15. Způsob podle nároku 13 nebo 14, vyznač u j íc í se t í m , že se adjuvantová složka podává jednou až sedmkrát přibližně 7 dnů před až přibližně 7 dnů po podání imugenového prostředku.
  16. 16. Způsob podle nároku 15,vyznač ující se tím, že se adjuvantová složka podává v podstatě současně s podáním imugenové složky.
  17. 17- Způsob podle nároku 13 až 14, vyznačující se t í m , že se derivát lH-imidazo[4,5-clchinolin-4-aminu podává v dávce v rozmezí 1 až 50 mg/kg.
  18. 18. Použití derivátu lH-imidazo[4,5-c3chinolin-4-aminu k výrobě léčiv k zesílení imunitní odezvy iniciované antigenovým peptidem expresovaným v důsledku podání savci nukleotidové sekvence kódu j íc í tento pept i d.
    ·· ·
  19. 19. Použití podle nároku 18 derivátu 1H-imidazo[4,5-c]chinol in-4-aminu podle nároku 5.
  20. 20. Použití podle nároku 19 derivátu lH-imidazo[4,5-c]chinol in-4-aminu podle nároku 6.
  21. 21. Použití podle nároku 18 až 20, přičemž se derivát lH-imidazo[4,5-c]ehinolin-4-aminu se podává v dávce v rozmezí 1 až 50 mg/kg.
  22. 22. Kombinace složek k oddělenému, postupnému nebo současnému podání při použití ve vakcinaci DNA, vyznaču j íc í se tím, že obsahuje nukleotIdovou sekvenci kódující imunogen, kterým je ant-igenový peptid. a derivát lH-imidazo[4,5-c]chinolin-4-aminu, který zesiluje imunitní odezvu iniciovanou antigenovým peptidem.
  23. 23. Kombinace podle nároku 21,vyznačující se tím, že obsahuje derivát lH-imidazo[4,5-c]chinolin-4-aminu podle nároku 5.
  24. 24. Kombinace podle nároku 21,vyznaču jící se t í m, že obsahuje derivát 1H-imidazo[4,5-c]chinolin-4-aminu podle nároku 6.
CZ2003792A 2000-09-20 2001-09-20 Imidazochinolinaminy jako adjuvanty v DNA vakcinaci CZ2003792A3 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB0023008.6A GB0023008D0 (en) 2000-09-20 2000-09-20 Improvements in vaccination

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ2003792A3 true CZ2003792A3 (cs) 2004-12-15

Family

ID=9899764

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ2003792A CZ2003792A3 (cs) 2000-09-20 2001-09-20 Imidazochinolinaminy jako adjuvanty v DNA vakcinaci

Country Status (24)

Country Link
US (3) US20040076633A1 (cs)
EP (1) EP1318835B1 (cs)
JP (1) JP2004509150A (cs)
KR (1) KR100876263B1 (cs)
CN (1) CN1197620C (cs)
AR (1) AR035586A1 (cs)
AT (1) ATE401097T1 (cs)
AU (2) AU8790801A (cs)
BR (1) BR0113982A (cs)
CA (1) CA2422863A1 (cs)
CZ (1) CZ2003792A3 (cs)
DE (1) DE60134866D1 (cs)
ES (1) ES2309086T3 (cs)
GB (1) GB0023008D0 (cs)
HU (1) HUP0301180A3 (cs)
IL (1) IL154947A0 (cs)
MX (1) MXPA03002453A (cs)
MY (1) MY138978A (cs)
NO (1) NO20031274L (cs)
NZ (1) NZ524792A (cs)
PL (1) PL360895A1 (cs)
TW (1) TWI287453B (cs)
WO (1) WO2002024225A1 (cs)
ZA (1) ZA200302231B (cs)

Families Citing this family (75)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6207646B1 (en) 1994-07-15 2001-03-27 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules
SI1077722T1 (sl) 1998-05-22 2007-02-28 Ottawa Health Research Inst Metode in produkti za induciranje sluznicne imunosti
US6677347B2 (en) * 2000-12-08 2004-01-13 3M Innovative Properties Company Sulfonamido ether substituted imidazoquinolines
GB0206461D0 (en) * 2002-03-19 2002-05-01 Glaxo Group Ltd Improvements in vaccination
DK1487485T3 (da) * 2002-03-19 2011-03-14 Powderject Res Ltd Imidazoquinolinadjuvanser til DNA-vacciner
CA2484044A1 (en) * 2002-03-19 2003-10-02 Powdermed Limited Imidazoquinolineamines as adjuvants in hiv dna vaccination
DK1545597T3 (da) * 2002-08-15 2011-01-31 3M Innovative Properties Co Immunstimulerende sammensætninger og fremgangsmåde til stimulering af en immunrespons
CA2510375A1 (en) 2002-12-20 2004-07-15 3M Innovative Properties Company Aryl / hetaryl substituted imidazoquinolines
US7731967B2 (en) 2003-04-30 2010-06-08 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Compositions for inducing immune responses
BRPI0413558A (pt) * 2003-08-12 2006-10-17 3M Innovative Properties Co compostos contendo imidazo substituìdo por hidroxilamina
JP2007504145A (ja) * 2003-08-25 2007-03-01 スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー 免疫刺激性の組み合わせおよび治療
US8961477B2 (en) * 2003-08-25 2015-02-24 3M Innovative Properties Company Delivery of immune response modifier compounds
AU2004268625B2 (en) 2003-08-27 2011-03-31 3M Innovative Properties Company Aryloxy and arylalkyleneoxy substituted imidazoquinolines
AU2004270201A1 (en) * 2003-09-05 2005-03-17 3M Innovative Properties Company Treatment for CD5+ B cell lymphoma
AR046046A1 (es) 2003-10-03 2005-11-23 3M Innovative Properties Co Imidazoquinolinas alcoxi sustituidas. composiciones farmaceuticas.
US7544697B2 (en) 2003-10-03 2009-06-09 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Pyrazolopyridines and analogs thereof
US20090075980A1 (en) * 2003-10-03 2009-03-19 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Pyrazolopyridines and Analogs Thereof
EP1685129A4 (en) 2003-11-14 2008-10-22 3M Innovative Properties Co OXIMSUBSTITUTED IMIDAZORING CONNECTIONS
CA2545825A1 (en) * 2003-11-14 2005-06-02 3M Innovative Properties Company Hydroxylamine substituted imidazo ring compounds
CA2547020C (en) 2003-11-25 2014-03-25 3M Innovative Properties Company 1h-imidazo[4,5-c]pyridine-4-amine derivatives as immune response modifier
JP2007517035A (ja) * 2003-12-29 2007-06-28 スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー アリールアルケニルおよびアリールアルキニル置換されたイミダゾキノリン
EP1699788A2 (en) * 2003-12-30 2006-09-13 3M Innovative Properties Company Imidazoquinolinyl, imidazopyridinyl and imidazonaphthyridinyl sulfonamides
WO2005094531A2 (en) * 2004-03-24 2005-10-13 3M Innovative Properties Company Amide substituted imidazopyridines, imidazoquinolines, and imidazonaphthyridines
US8017779B2 (en) * 2004-06-15 2011-09-13 3M Innovative Properties Company Nitrogen containing heterocyclyl substituted imidazoquinolines and imidazonaphthyridines
US8026366B2 (en) * 2004-06-18 2011-09-27 3M Innovative Properties Company Aryloxy and arylalkyleneoxy substituted thiazoloquinolines and thiazolonaphthyridines
US20070259881A1 (en) * 2004-06-18 2007-11-08 Dellaria Joseph F Jr Substituted Imidazo Ring Systems and Methods
WO2006065280A2 (en) * 2004-06-18 2006-06-22 3M Innovative Properties Company Isoxazole, dihydroisoxazole, and oxadiazole substituted imidazo ring compounds and methods
WO2006038923A2 (en) * 2004-06-18 2006-04-13 3M Innovative Properties Company Aryl substituted imidazonaphthyridines
US20090270443A1 (en) * 2004-09-02 2009-10-29 Doris Stoermer 1-amino imidazo-containing compounds and methods
EP1804583A4 (en) * 2004-10-08 2009-05-20 3M Innovative Properties Co ADJUVANT FOR DNA VACCINE
DE102004049223A1 (de) 2004-10-08 2006-04-20 Johannes-Gutenberg-Universität Mainz Zubereitung zum Impfen, Impfverfahren und Verwendung einer Impf-Zubereitung
EP1819364A4 (en) * 2004-12-08 2010-12-29 3M Innovative Properties Co COMPOSITIONS, IMMUNOMODULATORY COMBINATIONS AND ASSOCIATED METHODS
PL1830876T3 (pl) * 2004-12-30 2015-09-30 Meda Ab Zastosowanie imikwimodu do leczenia przerzutów do skóry wywodzących się od guza stanowiącego raka piersi
JP5543068B2 (ja) * 2004-12-30 2014-07-09 スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー キラル縮合［１，２］イミダゾ［４，５−ｃ］環状化合物
EP1831221B1 (en) 2004-12-30 2012-08-08 3M Innovative Properties Company Substituted chiral fused 1,2 imidazo 4,5-c ring compounds
AU2006210392A1 (en) 2005-02-04 2006-08-10 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Aqueous gel formulations containing immune response modifiers
AU2006213746A1 (en) 2005-02-11 2006-08-17 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Oxime and hydroxylamine substituted imidazo(4,5-c) ring compounds and methods
EP1869043A2 (en) 2005-04-01 2007-12-26 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Pyrazolopyridine-1,4-diamines and analogs thereof
AU2006232375A1 (en) 2005-04-01 2006-10-12 Coley Pharmaceutical Group, Inc. 1-substituted pyrazolo (3,4-c) ring compounds as modulators of cytokine biosynthesis for the treatment of viral infections and neoplastic diseases
CN101304748A (zh) 2005-08-22 2008-11-12 加利福尼亚大学董事会 Tlr激动剂
ZA200803029B (en) * 2005-09-09 2009-02-25 Coley Pharm Group Inc Amide and carbamate derivatives of alkyl substituted /V-[4-(4-amino-1H-imidazo[4,5-c] quinolin-1-yl)butyl] methane-sulfonamides and methods
EA200800782A1 (ru) * 2005-09-09 2008-08-29 Коли Фармасьютикал Груп, Инк. ПРОИЗВОДНЫЕ АМИДА И КАРБАМАТА N-{2-[4-АМИНО-2-(ЭТОКСИМЕТИЛ)-1Н-ИМИДАЗОЛО[4,5-c]ХИНОЛИН-1-IL]-1,1-ДИМЕТИЛЭТИЛ}МЕТАНСУЛЬФОНАМИДА И СПОСОБЫ
KR20080083270A (ko) 2005-11-04 2008-09-17 콜레이 파마시티컬 그룹, 인코포레이티드 하이드록시 및 알콕시 치환된 1에이치 이미다조퀴놀린 및방법
EP1988896A4 (en) 2006-02-22 2011-07-27 3M Innovative Properties Co CONJUGATES TO MODIFY IMMUNE REACTIONS
US8088788B2 (en) 2006-03-15 2012-01-03 3M Innovative Properties Company Substituted fused[1,2] imidazo[4,5-c] ring compounds and methods
US8329721B2 (en) * 2006-03-15 2012-12-11 3M Innovative Properties Company Hydroxy and alkoxy substituted 1H-imidazonaphthyridines and methods
CA2645832A1 (en) * 2006-04-25 2007-11-01 Intercell Ag Hcv vaccinations
US20090060928A1 (en) * 2006-05-26 2009-03-05 Jean-Claude Bystryn Topical Toll Like Receptor Ligands as Vaccine Adjuvants
EP2700638A1 (en) 2006-05-31 2014-02-26 The Regents Of the University of California Purine analogs
MX2008016036A (es) * 2006-06-20 2009-04-07 Transgene Sa Vacuna viral recombinante.
ES2444695T3 (es) 2006-06-23 2014-02-26 Alethia Biotherapeutics Inc. Polinucleótidos y polipéptidos implicados en el cáncer
US7906506B2 (en) * 2006-07-12 2011-03-15 3M Innovative Properties Company Substituted chiral fused [1,2] imidazo [4,5-c] ring compounds and methods
CN100450484C (zh) * 2006-10-11 2009-01-14 北京科信必成医药科技发展有限公司 一种咪喹莫特混悬溶液及其凝胶剂
CN101790380B (zh) 2007-02-07 2013-07-10 加利福尼亚大学董事会 合成tlr激动剂的缀合物及其应用
CN103736086A (zh) * 2007-02-15 2014-04-23 曼康公司 用于增强t细胞应答的方法
US8709445B2 (en) 2007-07-31 2014-04-29 Los Angeles Biomedical Research Institute At Harbor-Ucla Medical Center Vaccination with killed but metabolically active (KBMA) protozoans with toll-like receptor agonists
EP3067048B1 (en) 2007-12-07 2018-02-14 GlaxoSmithKline Biologicals SA Compositions for inducing immune responses
CA2740900C (en) 2008-11-03 2019-09-24 Alethia Biotherapeutics Inc. Antibodies that specifically block the biological activity of a tumor antigen
WO2010088924A1 (en) 2009-02-06 2010-08-12 Telormedix Sa Pharmaceutical compositions comprising imidazoquinolin(amines) and derivatives thereof suitable for local administration
EP2508190B1 (en) * 2009-12-03 2021-06-02 Aureo Co., Ltd. Macrophage phagocytosis-activating composition and/or composition promoting cytokine production in macrophages
CN101850117B (zh) * 2010-06-03 2012-05-30 国家兽用生物制品工程技术研究中心 一种复方免疫佐剂及疫苗
US9242980B2 (en) 2010-08-17 2016-01-26 3M Innovative Properties Company Lipidated immune response modifier compound compositions, formulations, and methods
SI3173427T1 (sl) 2011-03-31 2019-08-30 ADC Therapeutics SA, Protitelesa proti antigenu 1, povezanemu z ledvicami, in antigen vezavni fragmenti le-tega
JP6460789B2 (ja) 2011-06-03 2019-01-30 スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー ポリエチレングリコールセグメントを有するヘテロ２官能性リンカー及び該リンカーから調製された免疫反応調節複合体
BR112013031039B1 (pt) 2011-06-03 2020-04-28 3M Innovative Properties Co compostos de hidrazino 1h-imidazoquinolina-4-aminas, conjugados feitos destes compostos, composição e composição farmacêutica compreendendo ditos compostos e conjugados, usos dos mesmos e método de fabricação do conjugado
KR102102239B1 (ko) 2012-01-09 2020-04-21 에이디씨 테라퓨틱스 에스에이 유방암을 치료하기 위한 방법
GB201310578D0 (en) 2013-06-13 2013-07-31 Univ Nottingham Trent Electroactive actuators
WO2015023649A2 (en) 2013-08-12 2015-02-19 3M Innovative Properties Company Peptides for enhancing transdermal delivery
JP7145757B2 (ja) 2015-10-12 2022-10-03 リフロー メディカル インコーポレイテッド 突出する薬剤送達フィーチャーを有するステント、ならびに、関連のシステムおよび方法
US10533007B2 (en) 2016-04-19 2020-01-14 Innate Tumor Immunity, Inc. NLRP3 modulators
KR20180134395A (ko) 2016-04-19 2018-12-18 인네이트 튜머 이뮤니티, 인코포레이티드 Nlrp3 조정제
US11697851B2 (en) 2016-05-24 2023-07-11 The Regents Of The University Of California Early ovarian cancer detection diagnostic test based on mRNA isoforms
TWI674261B (zh) 2017-02-17 2019-10-11 美商英能腫瘤免疫股份有限公司 Nlrp3 調節劑
WO2018217897A1 (en) * 2017-05-23 2018-11-29 David Weiner Compositions and method for inducing an immune response
US11524069B2 (en) 2017-09-13 2022-12-13 Sanofi Pasteur Human cytomegalovirus immunogenic composition

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL73534A (en) * 1983-11-18 1990-12-23 Riker Laboratories Inc 1h-imidazo(4,5-c)quinoline-4-amines,their preparation and pharmaceutical compositions containing certain such compounds
IL105325A (en) * 1992-04-16 1996-11-14 Minnesota Mining & Mfg Immunogen/vaccine adjuvant composition
KR100564268B1 (ko) * 1996-10-23 2006-03-27 와이어쓰 백신
GB9818627D0 (en) * 1998-08-26 1998-10-21 Glaxo Group Ltd Improvements in dva vaccination

Also Published As

Publication number Publication date
GB0023008D0 (en) 2000-11-01
ZA200302231B (en) 2004-05-05
US20070248614A1 (en) 2007-10-25
NO20031274D0 (no) 2003-03-19
EP1318835A1 (en) 2003-06-18
HK1057700A1 (en) 2004-04-16
IL154947A0 (en) 2003-10-31
WO2002024225A1 (en) 2002-03-28
BR0113982A (pt) 2003-08-19
MY138978A (en) 2009-08-28
ES2309086T3 (es) 2008-12-16
DE60134866D1 (de) 2008-08-28
CN1473051A (zh) 2004-02-04
AU2001287908B2 (en) 2005-06-30
EP1318835B1 (en) 2008-07-16
MXPA03002453A (es) 2003-06-19
US20110002953A1 (en) 2011-01-06
JP2004509150A (ja) 2004-03-25
KR20040023566A (ko) 2004-03-18
CN1197620C (zh) 2005-04-20
NZ524792A (en) 2004-09-24
KR100876263B1 (ko) 2008-12-26
NO20031274L (no) 2003-05-19
AR035586A1 (es) 2004-06-16
TWI287453B (en) 2007-10-01
PL360895A1 (en) 2004-09-20
AU8790801A (en) 2002-04-02
US20040076633A1 (en) 2004-04-22
ATE401097T1 (de) 2008-08-15
HUP0301180A2 (hu) 2004-03-01
CA2422863A1 (en) 2002-03-28
HUP0301180A3 (en) 2005-11-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP1318835B1 (en) Use of imidazoquinolinamines as adjuvants in dna vaccination
AU2001287908A1 (en) Use of immidazoquinolinamines as adjuvants in DNA vaccination
US20080145375A1 (en) Vaccination
US20080188469A1 (en) Vaccination
US20090130126A1 (en) Dna expression vectors
US20050054726A1 (en) Vaccine
HK1057700B (en) Use of imidazoquinolinamines as adjuvants in dna vaccination
US20090092623A1 (en) Promoter