CZ200624A3 - Zpusob implantace bunek - Google Patents
Zpusob implantace bunek Download PDFInfo
- Publication number
- CZ200624A3 CZ200624A3 CZ20060024A CZ200624A CZ200624A3 CZ 200624 A3 CZ200624 A3 CZ 200624A3 CZ 20060024 A CZ20060024 A CZ 20060024A CZ 200624 A CZ200624 A CZ 200624A CZ 200624 A3 CZ200624 A3 CZ 200624A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- cells
- carrier material
- defect
- kit
- fluid
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 109
- 238000002513 implantation Methods 0.000 title claims abstract description 33
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 219
- 230000007547 defect Effects 0.000 claims abstract description 107
- 239000012876 carrier material Substances 0.000 claims abstract description 104
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 claims abstract description 59
- 210000001612 chondrocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 56
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims abstract description 49
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 41
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 claims abstract description 23
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 14
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 claims abstract description 12
- 210000004409 osteocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 12
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 claims description 37
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 claims description 31
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims description 26
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims description 26
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 26
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims description 26
- 230000001112 coagulating effect Effects 0.000 claims description 24
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 21
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 claims description 20
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 claims description 20
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 claims description 17
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 17
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 13
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 13
- 238000007711 solidification Methods 0.000 claims description 12
- 230000008023 solidification Effects 0.000 claims description 12
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 claims description 11
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 claims description 11
- 239000000701 coagulant Substances 0.000 claims description 10
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 9
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 claims description 8
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 8
- 230000002345 thrombinlike Effects 0.000 claims description 8
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 7
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims description 7
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims description 7
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 238000012800 visualization Methods 0.000 claims description 6
- 239000002318 adhesion promoter Substances 0.000 claims description 5
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 4
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 4
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims description 3
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 claims description 3
- FBPFZTCFMRRESA-ZXXMMSQZSA-N D-iditol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-ZXXMMSQZSA-N 0.000 claims description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 claims description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 claims 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 abstract 1
- 108010080379 Fibrin Tissue Adhesive Proteins 0.000 description 33
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 24
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 22
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 22
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 21
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 20
- 229940033618 tisseel Drugs 0.000 description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 17
- 210000003127 knee Anatomy 0.000 description 16
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 14
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 12
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 12
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 11
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 11
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 11
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 10
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 9
- 230000002787 reinforcement Effects 0.000 description 9
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 9
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 8
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 8
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 8
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 8
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 8
- 201000009859 Osteochondrosis Diseases 0.000 description 6
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 6
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 6
- 210000000629 knee joint Anatomy 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 102000001187 Collagen Type III Human genes 0.000 description 5
- 108010069502 Collagen Type III Proteins 0.000 description 5
- 230000002648 chondrogenic effect Effects 0.000 description 5
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 5
- 230000000399 orthopedic effect Effects 0.000 description 5
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 5
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 5
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 4
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 4
- 238000005452 bending Methods 0.000 description 4
- 244000309466 calf Species 0.000 description 4
- 238000000326 densiometry Methods 0.000 description 4
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 4
- 230000001744 histochemical effect Effects 0.000 description 4
- 238000002991 immunohistochemical analysis Methods 0.000 description 4
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 4
- 210000005009 osteogenic cell Anatomy 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 4
- 108010039627 Aprotinin Proteins 0.000 description 3
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 description 3
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 description 3
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 description 3
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 3
- 229960004405 aprotinin Drugs 0.000 description 3
- 210000001188 articular cartilage Anatomy 0.000 description 3
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 3
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 3
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 239000000565 sealant Substances 0.000 description 3
- 239000003566 sealing material Substances 0.000 description 3
- 102000000503 Collagen Type II Human genes 0.000 description 2
- 108010041390 Collagen Type II Proteins 0.000 description 2
- 102000000641 Non-Fibrillar Collagens Human genes 0.000 description 2
- 108010002466 Non-Fibrillar Collagens Proteins 0.000 description 2
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 2
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 2
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 239000011247 coating layer Substances 0.000 description 2
- 239000000512 collagen gel Substances 0.000 description 2
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 2
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003349 osteoarthritic effect Effects 0.000 description 2
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 230000003014 reinforcing effect Effects 0.000 description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 206010061762 Chondropathy Diseases 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 description 1
- 102000004218 Insulin-Like Growth Factor I Human genes 0.000 description 1
- 208000002804 Osteochondritis Diseases 0.000 description 1
- -1 Tisseel® Chemical compound 0.000 description 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 1
- 210000001264 anterior cruciate ligament Anatomy 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000010836 blood and blood product Substances 0.000 description 1
- 229940125691 blood product Drugs 0.000 description 1
- 208000015100 cartilage disease Diseases 0.000 description 1
- 201000005043 chondromalacia Diseases 0.000 description 1
- 229940096422 collagen type i Drugs 0.000 description 1
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000001839 endoscopy Methods 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000001879 gelation Methods 0.000 description 1
- 230000002439 hemostatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 210000003041 ligament Anatomy 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 239000013307 optical fiber Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 210000005065 subchondral bone plate Anatomy 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000009827 uniform distribution Methods 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
- A61L27/38—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells
- A61L27/3804—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells characterised by specific cells or progenitors thereof, e.g. fibroblasts, connective tissue cells, kidney cells
- A61L27/3821—Bone-forming cells, e.g. osteoblasts, osteocytes, osteoprogenitor cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/32—Bones; Osteocytes; Osteoblasts; Tendons; Tenocytes; Teeth; Odontoblasts; Cartilage; Chondrocytes; Synovial membrane
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
- A61L27/38—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells
- A61L27/3804—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells characterised by specific cells or progenitors thereof, e.g. fibroblasts, connective tissue cells, kidney cells
- A61L27/3817—Cartilage-forming cells, e.g. pre-chondrocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
- A61L27/38—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells
- A61L27/3839—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells characterised by the site of application in the body
- A61L27/3843—Connective tissue
- A61L27/3847—Bones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
- A61L27/38—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells
- A61L27/3839—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells characterised by the site of application in the body
- A61L27/3843—Connective tissue
- A61L27/3852—Cartilage, e.g. meniscus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
- A61L27/54—Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
- C12N5/0655—Chondrocytes; Cartilage
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
- A61B17/00—Surgical instruments, devices or methods
- A61B17/00491—Surgical glue applicators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/40—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
- A61L2300/412—Tissue-regenerating or healing or proliferative agents
- A61L2300/414—Growth factors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/40—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
- A61L2300/418—Agents promoting blood coagulation, blood-clotting agents, embolising agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2533/00—Supports or coatings for cell culture, characterised by material
- C12N2533/50—Proteins
- C12N2533/54—Collagen; Gelatin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2533/00—Supports or coatings for cell culture, characterised by material
- C12N2533/50—Proteins
- C12N2533/56—Fibrin; Thrombin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Botany (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Virology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Endoskopická metoda osetrování defektu chrupavky nebo kosti zivocichu, zahrnují kroky: (i) identifikace polohy defektu, (ii) aplikaci bunek vybranýchze skupiny sestávající z chondrocytu, chondroblastu, osteocytu a osteoblastu a jejich kombinací do defektu chrupavky nebo kosti. Vynález se týká zejména zpusobu artroskopiclé nebo endoskopické implantace homologních nebo autologních bunek do defektuzivocisného tela, zahrnujícího krok i) artroskopické nebo endoskopické aplikace tekutiny do dutiny nebo na povrch obsahující defekt a kroky ii) aplikace bunek na defekt v podstate soucasne s nosným materiálem, pricemz aplikace se provádí na defektu pokrytém tekutinou, (iii) smísení bunek a nosného materiálu, (iv) tuhnutí nosného materiálu tak, ze defekt je pokrýván smesí bunek a nosného materiálubez významného mnozství tekutiny a (v) poprípade odstranení tekutiny z dutiny nebo povrchu drenází nebo odsátím.
Description
(57) Anotace:
Endoskopická metoda ošetřování defektů chrupavky nebo kosti živočichů, zahrnují kroky: (i) identifikace polohy defektu, (ii) aplikaci buněk vybraných ze skupiny sestávající z chondrocytů, chondroblastů, osteocytů a osteoblastů ajejich kombinací do defektu chrupavky nebo kosti. Vynález se týká zejména způsobu artroskopiclé nebo endoskopické implantace homologních nebo autologních buněk do defektu živočišného těla, zahrnujícího krok i) artroskopické nebo endoskopické aplikace tekutiny do dutiny nebo na povrch obsahující defekt a kroky ii) aplikace buněk na defekt v podstatě současně s nosným materiálem, přičemž aplikace se provádí na defektu pokrytém tekutinou, (iii) smísení buněk a nosného materiálu, (iv) tuhnutí nosného materiálu tak, že defekt je pokrýván směsí buněk a nosného materiálu bez významného množství tekutiny a (v) popřípadě odstranění tekutiny z dutiny nebo povrchu drenáží nebo odsátím.
CQ <
Tř
CM
CO o
o
CM
N
O
ZPŮSOB IMPLANTACE BUNĚK
Oblast techniky
Předložený vynález se týká způsobu implantace nebo transplantace buněk zahrnující použití artroskopu nebo endoskopu. Způsob dává možnost artroskopické a/nebo endoskopické implantace buněk a je snadnou, bezpečnou a levnou metodou.
Dosavadní stav techniky
Mats Brittberg a spol. ukázali, že fibrinové adhezivum jako Tisseel®, spolu s růstovým hormonem nebo bez něho, nemá chondrogenní efekt na nevyzrálé chondrocyty, a proto není vhodné jako výztuž pro podporu reparování chondrálních nebo osteochondrálních defektů (Brittberg M., Sjógren-Jansson, Lindahl A., Peterson L.: The influence of fibrin sealant on Osteochondral Defect Repair in the Rabbit Knee; z disertační práce Matse Brittberga: Cartilage Repair. On cartilaginous tissue engineering with the emphasis on chondrocyte transplantation, Department of Orthopedics, Institute of Surgical Science and Department of Clinical Chemistry, Institute of Laboratory Medicine, Goteborg University, Švédsko, 1996).
Lazovic a Messner [Lazovic D. a spol., Acta Ortop. Scand. 64, 583-586 (1993)] zkoumali využití fibrinového adheziva (Tisseel®) při pokusu zlepšit léčení přetnutého předního křížového vazu u psů a zjistili, že vazy, které byly reparovány za použití adheziva, vykazovaly nízký stupeň vývoje kolagenu oproti pouhému sešití vazu, které ve skutečnosti poskytovalo mnohem vyšší obsah kolagenu. Předpokládali, že fibrinové adhezivum chemicky zvyšuje proliferaci buněk, avšak utvořená reparovaná tkáň měla nízkou kvalitu. Při experimentech podle Brittberga a spol., kteří používali Tisseel® pro reparování osteochondrálních defektů u králíků, zjistili, že ve skupině, kde byl aplikován Tisseel®, bylo reparované tkáně méně, avšak reparovaná tkáň byla stejné fibrózně-fibrokartilaginní kvality bez ohledu na to, zda Tisseel® byl anebo nebyl použit. Dospěli k přesvědčení, že Tisseel® nezlepšuje nápravu osteochondrálního defektu, zatímco autologní nebo homologní sraženina fibrinu použitá jako výztuž, jak * · se zdá, vykazovala blahodárný efekt, dostačující, aby si zasloužil další zkoušení in vivo.
Brittberg a spol. zjistili dále, že experimenty, kde byly spolu s Tisseelem® aplikovány chondrocyty, žádnou toxickou reakci nevykazovaly, ale chondrocyty narůstaly pouze na povrchu sraženiny Tisseelu®, což ukazuje, že Tisseel® by mohl být použit jako bariéra, například při utěsňování obvodu překryvu, jako je například periostální štěp, používaný u ACI. Avšak experimenty zahrnující homologní fibrinové sraženiny prokázaly plné „zarůstání“ jak králičích tak lidských chondrocytů, což ukazuje, že tento typ sraženiny účinkuje na buňky ve smyslu „vedení výztuže“.
Při experimentech s Tisseelem® spolu s injekcí růstového hormonu (GH) vůbec nebyl zesílen výztužný efekt, ale došlo spíše k efektu hemostatické bariéry, přičemž se zdálo, že homologní (a autologní) fibrin podporuje infiltraci a růst chondrocytů do sraženiny fibrinu což naznačuje, že tento typ fibrinu může projevovat výztužný efekt. Proto je možné, že homologní (nebo autologní) fibrin může projevovat na chondrocyty efekt podporující růst a zvýšenou migraci do fibrinu.
Vyvinutí vhodné artroskopické metody pro implantaci chondrocytů, konkrétně autologní implantaci chondrocytů, stejně jako pro metody implantace buněk - kromě oprav chondrálních lézl - teoreticky použitelné k nápravě osteochondritidy, osteoartritidy, nazývané také osteoartróza, a chondromalacie kolenní čéšky atd., by významně snížilo náklady v porovnání s ACI (Autologous Chondrocyte Implantation), některými autory nazývanou také ACT (Autologous Chondrocyte Transplantation), prováděnou během chirurgie na otevřeném koleně. Implantace chondrocytů a implantace dalších buněk by učinila technologii ACI, jakož i jiné technologie implantace buněk v oboru ortopedie, přístupnější - kromě kolenních kloubů - i u jiných kloubů. Dále by v podstatě každá ortopedická klinika, která provádí artroskopické intervence, získala přístup k využívání ACI technologie a tím by mohlo být více pacientů ošetřováno pomocí ACI při nápravě defektů chrupavky (a později, až se implantace buněk stane dostupná pro jiná ortopedická onemocnění, staly by se i tyto techniky předmětem rozvíjení artroskopicky řízených ošetření).
• · • ·
Existuje tedy potřeba pro rozvíjení artroskopické metody pro umožnění plnějšího využívání technologie implantace buněk v oboru ortopedické chirurgie.
Metody využívající výztužných technologií v různých formách, kde výztuž (spolu s buňkami rostoucími ve výztuži nebo bez nich) se vkládá do defektu, trpěly nesnázemi při provádění procedury implantace buněk vedené pouze artroskopií.
Podstata vynálezu
Účelem vynálezu je poskytnout způsob artroskopického ACI ošetření kloubové chrupavky, kostních defektů nebo kombinace chrupavky a kosti (osteoartritis) v různých kloubech lidského těla nebo u zvířat. Metoda poskytuje techniku, při níž je přes portál („klíčovou dírku“) aplikována suspenze buněk do kloubového spoje, jež vede k sedimentaci kultivovaných buněk a adhezi buněk k subchondrální kosti a/nebo chrupavce. Předložený vynález se tedy týká endoskopického způsobu ošetřování defektů chrupavky nebo kosti subjektu, přičemž tento způsob zahrnuje kroky:
(í) Identifikace polohy defektu, (ii) aplikace buněk vybraných ze skupiny sestávající z chondrocytů, chondroblastů, osteocytů a osteoblastů a jejich kombinací, do defektu chrupavky nebo kosti.
Je-li k identifikaci polohy defektu v kroku (i) použit artroskop a je použit k řízení injekce kultivovaných autologních nebo homologních buněk v kroku (ii) nazývá se způsob artroskopickou ACI.
V kontextu předkládané přihlášky a vynálezu platí následující definice:
Artroskopické autologní implantace buněk (artroskopické ACI) je lékařský postup pro ošetřování defektů chrupavky nebo kosti, pomocí něhož jsou kultivované buňky implantovány do defektu jehlou, jako je například jehla s tupým hrotem nebo katétr. Tento implantační postup se vizualizuje a řídí artroskopem.
• 4 * · ·· ·
Suspenze se vytváří, když je v rozpouštědle dispergována nerozpustná složka. V tomto konkrétním vynálezu vzniká suspenze, když se buňky, které mají být aplikovány na defekt, smísí s vodným prostředím. Suspenze se pak aplikuje na defekt. Termínem „oblast defektu“ nebo „dutina defektu“ se myslí poškozená kloubní chrupavka, defekt kloubní chrupavky až na kost a/nebo zahrnující kost (osteoartritis), kombinace defektu chrupavky a kosti, nebo kost, která je obklopena normální chrupavkou nebo kostí.
Endoskop je zařízení, které může být použito k náhledu na povrch kosti nebo chrupavčité tkáně, aniž by bylo zapotřebí chirurgického otevření (tj. skrze portál v kůži subjektu). Artroskop je speciální druh endoskopu, který se používá při vyšetřování kloubů.
Artroskop podle předloženého vynálezu je instrument (druh endoskopu), který je vkládán do kloubu kvůli vizuálnímu vyšetření. Artroskop obvykle obsahuje artroskop trubici obsahující optická vlákna, čočku a světelný zdroj a umožňuje vyšetřovat klouby bez chirurgického otevření.
Termínem „portál“ je míněna malá operační procedura, při níž se do kůže vytváří menší otvor, aby se do kloubového spoje dal zavést artroskop, jakož i artroskopická zařízení.
Termínem „explantát chrupavky“ se míní část savčí kloubní chrupavky, která byla explantována ze savce za pomoci vhodného nástroje. Explantát může obsahovat více než jeden druh tkáně, např. při explantaci tkáně z kolena může explantát obsahovat tkáň chrupavky stejně jako tkáň kosti.
V konkrétním provedení vychází předložený vynález vstříc shora zmíněným požadavkům poskytnutím způsobu artroskopické nebo endoskopické implantace homologních nebo autologních buněk do defektu v těle živočichů, přičemž tento způsob zahrnuje ·
9
9 · · • 9 9·· • 9 9 9 I
9 9 «
9 9 9 (i) aplikaci tekutiny do dutiny nebo povrchu obsahujícího defekt pomocí artroskopu nebo endoskopu k lokalizování oblasti defektu, který má být reparován, nebo zacílení oblasti pro transplantaci buněk, (ii) aplikaci buněk na defekt v podstatě současně s nosným materiálem působícím jako vazebná výztuž, koagulační výztuž nebo gelující výztuž, (iii) smísení buněk a nosného materiálu, (iv) ztuhnutí nosného materiálu tak, že defekt nebo cílová oblast jsou pokryty směsí buněk a nosného materiálu a (v) popřípadě odstranění tekutiny z dutiny nebo povrchu drenáží nebo odsátím.
Tekutinou používanou v kroku (i) může být kapalina, jako je fysiologicky vhodný roztok chloridu sodného, Ringerova soluce, medium buněčné kultivace nebo podobné, anebo to může být plyn, jako např. sterilní vzduch obsahující CO2 v koncentraci, která je kompatibilní s tkání, o kterou se jedná (kloub nebo orgán živočišného těla; jako je např. tělo savce jako člověka). Vhodná koncentrace CO2 je normálně kolem 5 %. Takové tekutiny jsou normálně používány během artroskopie a endoskopie a jsou odborníkům známy. V konkrétním provedení vynálezu je tekutinou kapalina. Důvodem použití tekutiny (např. kapaliny) je rozšířit defekt, aby se umožnila jeho vizualizace artroskopem. Vzhledem k tomu nesmí samotná tekutina obsahovat buňky, které jsou do defektu implantovány. Nadto dále v defektu přítomná tekutina umožňuje aplikovat buňky pod horní hladinu tekutiny (tj. vedením jehly nebo katétru dolů do nejnižšího místa defektu a injekcí do defektu takovým způsobem, že okamžité gelovatění nebo koagulace defekt přímo zasáhne), to prováděno pod tekutinou. Navíc, jak se níže popisuje, je tekutina vhodným prostředím pro míšení dvou požadovaných směsí totiž (i) buňky, např. ve formě suspenze buněk a (ii) nosného materiálu, např. ve formě směsi obsahující nosný materiál. Jak se popisuje níže, míšení buněk s nosným materiálem je důležité, aby in šitu imobilizovalo buňky v defektu. Jakmile jsou naneseny, musí být nosný materiál a buňky v podstatě homogenně promíseny předtím, než nosný materiál ztuhne nebo gelovatí, a tak udrží buňky v nosném materiálu.
» 9
-- · · • 9 · · · · · • · · · 4
V předloženém kontextu je termín „tkáň“ užíván v širokém slova smyslu, aby pokrýval měkkou tkáň (orgány atd.) stejně jako tvrdou tkáň (kosti, klouby atd.).
Jakmile je defekt vizualizován, je možné aplikovat buňky. Buňkami jsou homologní nebo autologní buňky a jsou typu vhodného pro použití k reparaci defektu, o který se jedná. V předloženém kontextu je termín „homologní buňky“ míněn tak, že buňky jsou kompatibilní stkáni, do které jsou aplikovány. Termín „autologní buňky“ značí, že buňky pocházejí od téhož subjektu, kterému jsou buňky aplikovány. V dalším je diskutováno např. použití chondrocytů a/nebo osteoblastů (osteocytů). Aplikované buňky se normálně vyskytují v suspenzi, tj. buňky jsou suspendovány ve vhodném mediu, jako je např. Dulbeccovo minimální Eaglovo médium/F12, DMEM/F12, obsahující případně sérum (např. fetální telecí sérum nebo homologní nebo autologní sérum) a/nebo růstové faktory, a dobu aplikace, smíseny s nosným materiálem. Suspenze buněk může být uchovávána pouze se samotným mediem a pak míšena se složkami, které budou tvořit sraženinu, z dalšího injekčního systému; nebo může být suspenze buněk spolu s jednou nebo více složkami umístěna do zásobníku, kde se nesráží buňky v zásobníku samotném, ale po smísení se složkou/složkami, vyvolávajícími gelovatění nebo koagulaci, přicházejícími z druhého zásobníku dvojité injekční stříkačky, přičemž směšování začíná potom, co jsou oba zásobníky například pomocí „Y“ nástavce spojeny do jednoho vedení, kde se iniciuje proces gelovatění a koagulace za účasti buněk a složek, a sice, když procházejí injekční jehlou nebo katétrem. Následující tabulka uvádí příklady některých složek, které mohou být použity, ale není to na ně omezeno.
• 9 • 9
9 4
9 • * 9 9 • 9 · •·99 9 9 ·
Obsah v zásobníku 1 a v zásobníku 2 dvojité injekční stříkačky (nebo jakékoliv jiné vhodné soupravy pro použití při způsobu podle vynálezu)
| Kombinace | Rozmezí složek v zásobníku 1 | Buňky obsažené v zásobníku 1 | Buňky obsažené v zásobníku 2 | Rozmezí složek v zásobníku 2 |
| Kolagen III plus jiné kolageny s krátkým řetězcem | Kolagen III: 0,5-20 mg/ml; s krátkým řetězcem: 0,520 mg/ml plus | 2x105-6x106 buněk na ml | Bez buněk | 'Trombin (jakéhokoliv původu) 0,5 až 1000 lU/ml a CaCI2 |
| Kolagen III plus jiné kolageny s krátkým řetězcem | Kolagen III: 0,5-20 mg/ml; s krátkým řetězcem: 0,520 mg/ml plus | Bez buněk | 2x105-6x 106 buněk na ml | Trombin (jakéhokoliv původu) 0,5 až 1000 lU/mla CaCI2 |
| Fibrinogen, jakéhokoliv typu nebo druhu a v některých případech aprotinin | Fibrinogen: 1-20 mg/ml | 2x105-6x106 buněk na ml | Bez buněk | Trombin (jakéhokoliv původu) 0,5 až 1000 lU/ml a CaCI2 |
| Fibrinogen, jakéhokoliv typu nebo druhu a v některých případech aprotinin | Fibrinogen: 1-20 mg/ml | Bez buněk | 2x105-6x 106 buněk na ml | Trombin (jakéhokoliv původu) 0,5 až 1000 lU/ml a CaCI2 |
| Fibrinogen, komerčně dostupný | Ve stupni koncentrace odpovídajícím množství užívanému u komerčních produktů fibrinogenu | 2x105-6x 106 buněk na ml | Bez buněk | ‘Trombin (jakéhokoliv původu) 0,5 až 1000 lU/mla CaCI2 |
| Fibrinogen, komerčně dostupný | Ve stupni koncentrace odpovídajícímu množství užívanému u komerčních produktů fibrinogenu | Bez buněk | 2x105-6x 106 buněk na ml | ‘Trombin (jakéhokoliv původu) 0,5 až 1000lU/ml a CaCI2 |
*Trombin jakéhokoliv původu může být od jakéhokoliv živočišného druhu, rekombinantní nebo připravený jako peptid z trombinu, který má schopnost indukovat ·· ·· • ♦ • · koagulaci nebo gelovatění; v některých případech se přidává aprotinin jako v komerčních kombinacích, například odpovídajících Tisseel nebo v Beriplast. Přidává se kalcium chlorid v množství používaném například v komerčních kombinacích. Koncentrace použitého trombinu je normálně od asi 0,5 do asi 10 IU, i když v některých komerčních soupravách je koncentrace trombinu 1 000 IU nebo více.
Jak je shora zmíněno, buňky jsou do defektu aplikovány v podstatě současně, přednostně současně, s nosným materiálem. Aplikace takového nosného materiálu je nezbytná, protože buňky, aplikované např. v kapalině, jak je popsáno shora, nemohou přilnout k povrchu defektu, a proto mohou být opatřeny jiné prostředky, aby se zajistilo, že buňky se uvedou ve styk nebo budou udržovány v blízkosti defektu. Nosným materiálem je materiál, který je po aplikaci na defekt schopen koagulovat nebo tuhnout. Ve výhodném provedení se koagulace, tuhnutí nebo tvorba gelu vyvolá kontaktem nosného materiálu s trombinem nebo s materiálem podobným trombinu, popřípadě v přítomnosti iontů jako např. iontů vápníku nebo hořčíku. Nosný materiál, poté co ztuhnul in šitu, by tedy měl fungoval jako těsnící obal vyplňující defekt, který přiléhá k defektu nebo cílové oblasti, a měl by umožnit, aby byly buňky udržovány v defektu nebo v cílové oblasti. Buňky jsou tudíž přítomny nejen na povrchu defektu, ale v celém ztuhlém nebo koagulovaném nosném materiálu, tj. buňky existují v oblasti defektu ve více vrstvách. Proto je možné aplikovat množství buněk, které je podstatně větší, než kdyby měl být povrch defektu pokryt jen jednou vrstvou buněk. Navíc má obal dále funkci ochrany ošetřovaného defektu nebo cílové oblasti před vlivem lokálního prostředí. Jak je popisováno v některých příkladech níže, mohly by nad promísenými koagulovanými, sraženými (adherentními) a/nebo gelujícími buňkami/nosným materiálem být další obalovou vrstvou také i komerčně dostupné fibrinové těsnící materiály jako například Tisseel (Baxter) a/nebo Beriplast (AventisBehring), aby nad koagulovanými buňkami s nosným materiálem vytvářely ještě jeden utěsňující obal, který pokryje a vyplní celý defekt.
Nosným materiálem, ve kterém jsou buňky promíseny nebo dispergovány, je obecně koagulující, adherentní, vázající, gelující/nebo těsnící produkt. Před aplikací do defektu nebo cílové oblasti pomocí vhodného zařízení může být nosný materiál • · · • · · to 9 9 9 • · · 999999 9 9 ředěn vhodným mediem. Směs obsahující nosný materiál může obsahovat vhodné materiály jako např. fibrin, kolagen typu I, III, II apod., například společně s inzulínovým růstovým faktorem (IGF) a/nebo jinými růstovými faktory. Směsi používané jako kolagenová výplň, které mohou být v současnosti podávány jako roztok, jsou směsi, které na trhu existují jako želatina, kolagen typu III, kolagen typu I, kolagen typu II (ve vývoji u Fibrinogen, California), jakož i kolageny s krátkým řetězcem (některé z nich jsou komerčně dostupné). Koagulaci indukující látkou by bal, jak už bylo dříve v souvislosti s horní tabulkou popsáno, trombin v té či oné formě. V oblasti krevních produktů pro koagulaci by to byl jakýkoliv fibrinogen (jakýkoli druh, ale přednostně lidský v té čí oné formě), čistý nebo nečištěný (obsahující jiné proteiny jako například proteiny, které jsou součástí kryoprecipitátu); trombin nebo jakýkoliv derivát s trombinu podobným efektem vyvolávajícím koagulaci nebo gelovatění. Všechny tyto látky, používané pro tento účel, musejí být pro buňky netoxické.
Je důležité, aby se obě rozdílné kapaliny [tj. i) medium s buňkami a ii) směs obsahující nosný materiál] aplikovaly v podstatě současně. Tekutost nosného materiálu umožňuje potřebné promísení buněk a nosného materiálu v defektu nebo v cílové oblasti a zajišťuje stejnoměrnou distribuci buněk v nosném materiálu předtím, než ztuhne nebo koaguluje. Alternativně nebo dodatečně může být místo toho aplikován přítok, tekutiny nebo plynu (např. také pomocí artroskopu).
Vynález zahrnuje využití buď implantace buněk současně s nosným materiálem, do něhož se buňky vmísí během aplikace - v první části vynálezu -, prováděné buď pod ochranou tekutiny, za použití obecné aplikace artroskopu, kde se používá tekutina, aby se kloub pro vizualizaci udržoval otevřený, nebo, jako druhá část vynálezu, také v kombinaci s artroskopem, který zajišťuje určitý tlak uváděného sterilního vzduchu nebo mírný přetlak napomáhající chirurgovi zviditelnit ošetřovanou oblast, tak jak se například používá u jiných endoskopů, například při břišních vyšetřeních atd., kde je vzduch dodáván pod určitým tlakem, tak jako například kombinace atmosférického vzduchu spolu s CO2, v koncentraci dobře snášené smíšenými buňkami a koagulujícím nosným materiálem. V této druhé části vynálezu • · • · • · · ·· I • · • · · ·· je použit „obal“, pod který může být směs buňky/koagulující nosný materiál umístěna pod vzduchovým polštářem, a kde může být tlak kolem 20 až 30 mm Hg.
Třetí část vynálezu se týká vrstvy koagulující substance (nosného materiálu), který je aplikován buď pod tekutinou nebo pod nafukovaným vzduchem. Tento nosný materiál je sám o sobě prostý buněk, je však s buňkami smíchán in šitu předtím, než ztuhne.
Tloušťka ztuhlé vrstvy závisí na velikosti defektu a konkrétním živočišném druhu. U člověka je tloušťka obvykle 2 až 6 mm.
Tato první část vynálezu se týká využití přítomnosti tekutiny, možnosti změny tlaku tekutiny v kloubu (a popřípadě tlaku sterilního vzduchu) během artroskopicky nebo endoskopicky vedené procedury, spojené s kontrolováním implantace kapalné substance, smísené s buňkami, jako jsou například chondrocyty pro reparování defektů chrupavky, využitím tlaku k udržení nosného materiálu, například smíšeného s buňkami, v místě, například na spodku defektu chrupavky nebo jiných cílových oblastí, zatímco materiál smísený s buňkami - nebo v nejhorším případě bez buněk, když je přes buňky/nosný materiál uložena další vrstva krycího fibrinu nebo jiného těsniva neobsahujícího buňky - koaguluje, sráží se nebo gelovatí. Tato metoda využívá rozdílu v rozpustnosti nosného materiálu ve dvou různých prostředích, totiž i) tekutině aplikované do defektu pro vizualizaci defektu (obalová tekutina) a ii) mediu užitého pro aplikaci nosného materiálu pomocí artroskopu. Nosný materiál se volí takový, že tuhne nebo koaguluje a přilne na defekt navzdory přítomnosti tekutiny použité jako kapalný obal.
Aplikace tlaku ovládá lokalizaci směsi obsahující nosný materiál bez míšení s kapalným obalem. Jinými slovy, nosný materiál nebo směs obsahující nosný materiál jsou nerozpustné v sousedící tekutině přítomné v kloubu během aplikace, tj.nosný materiál bude udržován v oblasti aplikace (např. spodku kloubu), kde tuhne a přilne na oblast aplikace. Současná aplikace buněk umožňuje, aby se nosný materiál zabudoval nebo obalil buňky tak, že buňky jsou rovněž udržovány v oblasti aplikace. Buňky začnou v příštích 48 hodinách nebo později produkovat matrici samy a tato • ·
• · 999 • · · 9 • 9 · · • · ·9 matrice nakonec jak napomůže přilnutí, tak později bude adherentní matricí chrupavky a nosný materiál nakonec velmi pravděpodobně po kratší nebo delší době absorbován.
Tento způsob spojující přítomnost tekutiny nebo zvýšeného tlaku, alternativně jako přetlaku (vůči tlaku v kloubu), poskytuje chirurgovi dostatečnou vizualizací pro provádění aplikace buněk/nosného materiálu, fibrinového těsnicího materiálu (například komerčního produktu), neobsahujícího buňky, avšak překrývajícího buňky/nosný materiál a tak bránícího, aby aplikovaný materiál unikl do kloubu, pokles tlaku a/nebo odstranění tlaku, když je tuhnutí a přilnavost dostatečná, aby udržela implantát v místě defektu, je novou technologií, když aplikuje substanci spolu s buňkami nebo bez nich a měnění tlaku tekutiny (nebo je-li používán plynný vzduch, měnění tlaku plynu) podle potřeby, bez překročení tlaku, který by ohrozil implantované buňky. Schopnost určitých fibrinů umožňovat proliferaci a migraci chondrocytů popisuje Mats Brittberg, jak uvedeno výše. Avšak tato procedura uváděná Brittbergem není prováděna jako dvoufázový systém např. za použití tekutiny nebo plynu pro vizualizaci.
Jiným aspektem vynálezu je, že popsaný způsob, zahrnující umístění buněk smíšených s nosným materiálem pod tekutinu nebo pod tlak vzduchu, může být použit také pro aplikaci více než jednoho druhu buněk, například chondrogenních buněk (chondrocytů/chondroblastů nebo jiných chondrogenních buněk) a osteogenních buněk, jako jsou osteoblasty, osteocyty, nebo jiných buněk, atd., aby umožnil dvoustupňovou proceduru, kde se například spodní část osteoartritické léze nejprve ošetří směsí osteogenních buněk a nosného materiálu, což se provádí pod tekutinou a/nebo tlakem vzduchu, a na to se přes první buňky/nosný materiál (vrstva 1) pod tekutinou nebo tlakem vzduchu převrství směs chondrogenních buněk a nosného materiálu.
Dalším aspektem vynálezu je dodat do kloubu granulát hydroxyapatitu (např. Bio-Oss, Geistlich Biomaterials, Wolhusen, Švýcarsko), obsahující buď kultivované osteogenní buňky nebo dodávaný spolu s osteogenními buňkami, vše ve směsi aplikované okamžitě společně s nosným materiálem pod tekutinou nebo tlakem ♦ · • · • ·« • 4 vzduchu do defektu, jako je osteoartritický defekt v kloubu. Potom se na spodní vrstvu tvořenou granulátem hydroxyapatitu převrství vrstva směsi chondrogenních buněk/nosného materiálu .
V každé ze shora popisovaných částí vynálezu, v nichž je umísťována směs buněk a vhodného nosného materiálu, nebo buněk, hydroxyapatitu a nosného materiálu, například během nebo pomocí artroskopického zásahu, se bude nanášet obalová vrstva, kterou je vrstva fibrinu bez buněk, jako například biologické lepidlo Tisseel® (do kterého například nebudou migrovat chondrocyty, které v tomto případě budou koagulovat s malým počtem nebo žádnými buňkami v horní obalující vrstvě). Jak během přítomnosti přetlaku v kloubu, tak bez přetlaku, pokud má chirurg zásadný přehled po oblasti, kde těsnící prostředek aplikuje.
Obalová vrstva buď fibrinu, jako je kompozit Tisseel®, může být míšena s jiným proteinem (např. kolagenem (jako je kolagen typu I)) jako rozpustná substance smísená s fibrinem, nebo s Tisseelem®, k zesílení obalu, který bude obrácen k povrchu kloubu tangenciálně k obklopující zdravé chrupavce. To může být učiněno během artroskopíe například pod tlakem kapaliny nebo vzduchu.
Obalem může být též membrána vyříznutá do velikosti defektu (např. membrána z kolagenu typu l/lll) se stranou, která bude obrácena k buňkám/koagulujícímu nosnému materiálu, pokrytou čerstvým, vysoce koncentrovaným homologním nebo nosným materiálem nebo čerstvým Tisseelem®, aby se zabránilo, aby z buněk/koagulujícího nosného materiálu unikaly buňky do obalu, a aby se současně buňky/koagulující nosný materiál upevnily. Membrána může také sama o sobě přilnout k buňkám/koagulujícímu nosnému materiálu.
Jestliže se použije artroskopické metody, je tedy nezbytné, aby byla dána možnost uskutečnit aplikaci chondrocytů, jako například autologních chondrocytů, spolu s nosným materiálem, kde je možno kontrolovat aplikaci chondrocytů v nosném materiálu, který bude vytrvávat (ulpívat) v oblasti, ve které mají být buňky udržovány, navzdory přítomnosti (sterilního) fysiologického solného roztoku nebo • · • · 4 4 • 4 4
4 4 výživného media v kloubu, kvůli použití artroskopu jako vedení pro provedení implantace autologních chondrocytů.
Metoda vyvinutá přítomným vynálezcem je považována za novou díky novému pojetí umísťování substance obsahující chondrocyty do kontrolované oblasti například v defektu chrupavky, jako je chondrální defekt, osteochondrální defekt, nebo také, jestliže se aplikují buňky jako osteoblasty/osteocyty v substanci, např. jako je hydroxyapatit, jako tenká spodní vrstva do kloubu trpícího osteoartritidou a pak je možno aplikovat druhou vrstvu chondrocytů/substance, stejně jako když se aplikují buňky prostřednictvím endoskopické procedury do cílového orgánu nebo cílové oblasti, jako například jater, srdce atd. Substance má být toho druhu, že současně je vůči buňkám netoxická a v případě chondrocytů, substance aplikovaná pod tekutinou nemá být toxická vůči chondrocytům nebo může i podporovat chondrocyty ve stadiu růstu a/nebo zrání, ve kterém buňky produkují i strukturu matrice, která končí vznikem nové chrupavky.
Součástí tohoto vynálezu jsou různé hladiny koncentrace vhodného nosného materiálu použitého pro směs a obměny koagulace, adheze a/nebo doby gelovatění, stejně jako obměny objemu a koncentrace buněk, které mají být míšeny s nosným materiálem. Navíc mohou být buňky a/nebo nosný materiál míšeny s adekvátními růstovými faktory, jako například IGF-1, který může napomáhat k udržování diferencované morfologie chondrocytů ve fibrinu [Fortier, LA a spol., Am. J. Vet. Res. 63(2), 301-305 (2002)].
Jak je shora popsáno, integrální součástí vynálezu také je vytvořit shora popisovaný obal buď jako povlak z fibrinu nebo Tisseel®, nebo jednoho z těchto činidel aplikovaných spolu s jiným proteinem, který může vytvořit hladký povrch s poměrně silnější pevností v tahu (jako je například rozpustný kolagen), nebo případně smíšeným s různými složkami, jako je například rozpustný kolagen, a s jinými substancemi poskytujícími hladký povrch reparované oblasti chrupavky atd., vytvořením prodlouženého výstupu, který při použití umožní chirurgovi aplikovat fibrin na konvexní nebo konkávní povrch kloubu, ve kterém se defekt nalézá, jak je ukázáno na následujícím obrázku. Během artroskopie může být napnutím přes • · • 9 • ··· • · · • · 9 povrch chrupavky umístěna dočasná perforovaná membrána potahující a omezující směs fibrinu a buněk a obalu zfibrinu, když se injektuje pod kapalinou nebo tlakem vzduchu. Membrána musí být snadno propustná pro použitou tekutinu (nebo vháněný vzduch) během artroskopie. Potom se membrána zjednoho ze vpichů odstraní, když směs fibrinu a buněk a fibrinový obal v místě koagulují.
Ostatní aspekty vynálezu se jeví z následujících bodů a přiložených patentových nároků. Vždy když jsou relevantní, týkají se zde popisované detaily a jednotlivosti mutatis mutandis těchto aspektů.
Konkrétněji se vynález vztahuje na tyto body:
1. Endoskopický způsob ošetřování defektů chrupavky nebo kosti u živočichů, přičemž způsob zahrnuje kroky:
(í) identifikace polohy defektu, (ii) aplikace buněk vybraných ze skupiny sestávající z chondrocytů, chondroblastů, osteocytů a osteoblastů a jejich kombinaci do defektu chrupavky nebo kosti.
2. Způsob podle bodu 1 pro artroskopickou nebo endoskopickou implantaci homologních nebo autologních buněk do defektu živočišného těla, přičemž způsob zahrnuje krok (i) artroskopické nebo endoskopické aplikace tekutiny do dutiny nebo na povrch obsahující defekt a kroky (ii) aplikace buněk na defekt v podstatě současně s nosným materiálem, přičemž aplikace je prováděna na defektu pokrytém tekutinou, (iii) smísení buněk a nosného materiálu, (iv) ztuhnutí nosného materiálu tak, že defekt je pokryt směsí buněk a nosného materiálu bez významného množství tekutiny, a • ··· • · 1 • · 4 ► ·* • · • ···· (v) popřípadě odstranění tekutiny z dutiny nebo povrchu drenáží nebo odsáváním.
3. Způsob podle bodu 2, ve kterém krok i) předchází krokům íi) až v).
4. Způsob podle bodu 2, ve kterém aplikace tekutiny v kroku i) je v podstatě současná s aplikací buněk v kroku ii) a nosného media v kroku iii).
5. Způsob podle bodu 4, ve kterém tekutinou je plyn.
6. Způsob podle kteréhokoli z předcházejících bodů, ve kterém je živočichem savec, jako například člověk.
7. Způsob podle kteréhokoli z předcházejících bodů, ve kterém defektem je defekt kloubu nebo kosti.
8. Způsob podle bodu 8, ve kterém defektem je defekt chrupavky.
9. Způsob podle kteréhokoli z předcházejících bodů, ve kterém buňky jsou původu vhodného pro cílení do vhodné tkáně, kde se vizualizace provádí endoskopem.
10. Způsob podle kteréhokoli z předcházejících bodů, ve kterém buňkami jsou chondrocyty, osteocyty nebo osteoblasty.
11. Způsob podle bodu 10, ve kterém buňkami jsou chondrocyty.
12. Způsob podle kteréhokoli z předcházejících bodů, ve kterém buňkami jsou homologní a/nebo autologní chondrocyty.
13. Způsob podle kteréhokoli z bodů 2, 3, 5 až 12, ve kterém tekutinou v kroku i) je kapalina.
·· • · • · ·· ·« • · • · · 9 • · · • · · • · ··
14. Způsob podle bodu 13, ve kterém kapalinou je fysiologicky přijatelné vodné medium vybrané ze skupiny, kterou tvoří roztok chloridu sodného, Ringerova soluce, medium pro kultivaci buněk, pro buňky příznivá kapalina a podobně.
15. Způsob podle kteréhokoli z bodů 2 až 14, ve kterém nosný materiál v kroku ii) je volen ze skupiny, kterou tvoří rozpustné kolageny, fibrinogeny a aprotininy.
16. Způsob podle bodu 15, ve kterém je nosný materiál aplikován ve formě vodné směsi.
17. Způsob podle bodu 16, ve kterém vodná směs dále obsahuje jedno nebo více adhezi podporujících činidel a/nebo jeden nebo více fysiologicky přijatelných iontů, například iontů vápníku nebo hořčíku.
18. Způsob podle kteréhokoli z předcházejících bodů, ve kterém jsou buňky v kroku ii) aplikovány ve formě buněčné suspenze.
19. Způsob podle bodu 18, ve kterém jsou buňky suspendovány ve vhodném mediu jako např. vhodném mediu pro růst, popřípadě obsahujícím jeden nebo více růstových faktorů.
20. Způsob podle bodu 18 nebo 19, ve kterém buněčná suspenze dále obsahuje jednu nebo více koagulujících složek, které iniciují tuhnutí nosného materiálu po kontaktu nosného materiálu a koagulující složky.
21. Způsob podle kteréhokoli z bodů 18 až 20, ve kterém buněčná suspenze dále obsahuje jedno nebo více adhezi podporujících činidel a/nebo jeden nebo více fysiologicky přijatelných iontů, například iontů vápníku nebo hořčíku.
22. Způsob podle bodu 20 nebo 21, ve kterém koagulující složkou je trombin nebo složka podobná trombinu.
• 4 » · ··« » · 4 » · · • 9 94
23. Způsob podle kteréhokoli z bodů 2 až 22, ve kterém tuhnutí nosného materiálu je výsledkem interakce mezi nosným materiálem a trombinem nebo složkou podobnou trombinu a tuhnutí obaluje buňky ve ztuhlém materiálu.
24. Způsob podle bodu 18 nebo 19, ve kterém buněčná suspenze zahrnuje nosný materiál, přičemž způsob dále zahrnuje krok aplikace roztoku obsahujícího koagulující činidlo.
25. Způsob podle kteréhokoli z bodů 2 až 23, ve kterém míšení buněk s nosným materiálem v kroku iii) se provádí aplikováním nosného materiálu a/nebo buněk pod přetlakem.
26. Způsob podle bodu 24, ve kterém suspenze obsahující buňky a nosný materiál se mísí s koagulujícím činidlem aplikováním roztoku obsahujícího koagulující činidlo pod přetlakem.
27. Souprava pro použití při způsobu definovaném v kterémkoli z předcházejících bodů, zahrnující dvě oddělené nádoby, přičemž první nádoba zahrnuje buňky a druhá nádoba zahrnuje nosný materiál.
28. Způsob podle bodu 27, ve kterém buňky v první nádobě jsou ve formě buněčné suspenze.
29. Souprava podle bodu 28, ve které jsou buňky suspendovány ve vhodném mediu jako např. vhodném mediu pro růst, obsahujícím popřípadě jeden nebo více růstových faktorů.
30. Souprava podle bodu 28 nebo 29, ve které buněčná suspenze dále zahrnuje jednu nebo více koagulujících složek, které iniciují tuhnutí nosného materiálu po kontaktu mezi nosným materiálem a koagulující složkou.
·· ·· ·· •
ΦΦ φ φ
Φ φ • · ·*· ···· • ·
ΦΦ • ΦΦ • ··· • 9 · • Φ Φ
ΦΦ
31. Souprava podle kteréhokoli z bodů 28 až 30, ve které buněčná suspenze dále zahrnuje jedno nebo více adhezi podporujících činidel a/nebo jeden nebo více fysiologicky přijatelných iontů, například iontů vápníku nebo hořčíku.
32. Souprava podle bodu 30 nebo 31, ve které koagulující složkou je trombin nebo složka podobná trombinu.
33. Souprava podle kteréhokoli z bodů 27 až 32, dále zahrnující třetí nádobu, zahrnující koagulující složku.
34. Souprava pro použití při způsobu definovaném v kterémkoli z předcházejících bodů, zahrnující dvě oddělené nádoby, přičemž první nádoba zahrnuje buňky a druhá nádoba zahrnuje koagulující činidlo.
35. Souprava podle bodu 34, ve které první nádoba zahrnuje nosný materiál.
36. Souprava podle bodu 34 nebo 35, dále zahrnující třetí nádobu, zahrnující nosný materiál.
37. Souprava podle kteréhokoli z bodů 27 až 36, ve které je souprava ve formě injekční stříkačky obsahující dvě oddělené komory, přičemž první komora obsahuje buňky a druhá komora obsahuje nosný materiál nebo koagulující činidlo.
38. Souprava podle bodu 37, ve které injekční stříkačkou je dvojitá injekční stříkačka nebo podobně.
39. Souprava podle kteréhokoli z bodů 27 až 38, dále zahrnující návod k použití soupravy.
40. Způsob podle kteréhokoli z bodů 1 až 26, dále zahrnující aplikaci hydroxyapatitu např. ve formě granulátu hydroxyapatitu.
• ·
41. Použití hydroxyapatitu jako kultivačního media pro buňky, jako jsou osteoblasty/osteocyty.
42. Použití roztoků kolagenu jako kultivačního media pro buňky, které mají být artroskopicky transplantovány.
43. Použití roztoků kolagenu jako kultivačního media pro buňky, které mají být endoskopicky transplantovány.
Příklady provedení vynálezu
Následující příklady jsou míněny pro osvětlení vynálezu, aniž by měly za účel jej nějakým způsobem omezovat.
Příklad 1
Kloub pocházející od zvířete, například kolenní kloub od vepře nebo koně anebo jiných zvířat, se podrobí artroskopii a vyplní se tekutinou, jako je 0,9% sterilní solný roztok, nebo plynem, aby byla vizualizována oblast vybraná za cíl artroskopického reparování oblasti, jako je defekt chrupavky, pro umožnění aplikace nosného materiálu smíšeného s buňkami takovým způsobem, že buňky/nosný materiál se nesmísí s tekutinou nebo plynem aplikovaným prostřednictvím artroskopu a schopnost adheze k cílové oblasti zůstává zachována.
Eventuelně mohou být buňky anebo buňky smísené nebo kultivované v suspenzi hydroxyapatitu (např. Bio-Oss) dodány injekční stříkačkou a míšeny u výstupu z injekční stříkačky do oblasti, která má být ošetřena.
Příklad 2
V tomto příkladu může být před implantací buněk umístěn nosný materiál pod tlakem jiné kapaliny. V tomto případě může být nosný materiál umísťován pod tuto kapalinu, například udržovanou v místě pod tlakem vyvíjeným pomocí artroskopu až do ztuhnutí. Buňky se potom vpraví kdykoliv po umístění kapalné substance, nebo
poté, když nastalo tuhnutí, jednoduchým injektováním buněk do nosného materiálu udržovaného v místě tlakem kapaliny.
Příklad 3
Artroskopická implantace autologních chondrocytů, preklinická, kombinovaná s druhým utěsněním fibrinem
První chirurgický artroskopicky zákrok
K preklinickému pokusu se použije pěti koz. Kozy se podrobí dvěma (2) chirurgickým zákrokům. Prvním chirurgickým zákrokem je artroskopické nabrání biopsie chrupavky z kolena koz. Kozy se chovají na licencované živočišné farmě vAalborg Sygehus Syd, Dánsko. Po anestezii se pomocí malé incize provede artroskopie buď antero-mediálním nebo antero-laterálním vstupem. Dvě další incize se preparují na mediální a laterální straně kolena. Za použití elevátoru se ostrým elevátorem odejme 50 až 200 mg chrupavky a asepticky přenese do transportní zkumavky obsahující sterilní Dulbeccovo MEM/12 a telecí plodové sérum. Za použití perforovacího nástroje se vytvoří v celé tloušťce chrupavky kruhová léze o průměru 0,6 cm, která se o 3 až 5 týdnů později použije k implantaci buněk. Biopsie se transportuje do laboratoře pro výzkum buněk Interface Biotech A/S a podrobí se kultivaci z explantátů.
Druhý chirurgický artroskopický zákrok
Když se kultura chondrocytů rozroste do rozsahu 4 až 10 milionů buněk, což normálně trvá 3 až 5 týdnů, vrátí se buňky zpět na živočišnou farmu, naplněné v dvojité injekční stříkačce spolu s roztokem lidského rekombinantního kolagenu typu lila látkou, jako je například přídavek krátkých kolagenových vláken do jedné komory dvojité injekční stříkačky (krátká kolagenová vlákna, která nemají zhoubný účinek na proliferaci, a která po smísení s gely kolagenu vykázala permeability, jež byly 100 až 10OOkrát větší v porovnání s tím, když je složkou pouze kolagen typu III (bez krátkých kolagenových vláken) [Gentleman E., Nauman E.A., Dee K. C. a Livesay G. A., Tissue Eng., 10(3-4), 421-427 (2004)], a která tudíž omezují jakoukoliv možnou kontrakci působenou rekombinantním kolagenem (po konečném smíšení s buňkami plus trombinem (a chloridem vápenatým z druhé komory dvojité injekční stříkačky).
Druhá komora dvojité injekční stříkačky obsahuje trombin (a CaCI2) s koncentrací buněk v rozsahu 1 až 10 milionů buněk. Vedení z konce jedné komory stříkačky se spojuje s dalším vedením z druhé komory stříkačky. Tupá jehla/katétr o velikosti 18 gg je připojena k oběma vedením tak, že směs obsahující kolagenovou směs se mísí strombinem a buňkami, když jehlou/katétrem prochází. Tupý konec jehly/katétru je veden - pomocí artroskopu skrze jednu z incizí vytvořených pro chirurgickou manipulaci - do defektu chrupavky o průměru 0,6 cm, vytvořeného perforací. Perforací předtím vytvořený defekt chrupavky o průměru 0,6 cm je vyplněn směsí kolagenu - směsí trombin/buňky, která koaguluje do 30 až 180 sekund, zcela v závislosti na relativní koncentraci složek zúčastněných na koagulaci.
Za použití jiné dvojité injekční stříkačky se buněk prosté fibrinové lepidlo nebo fibrinový těsnící materiál buď jako Tisseel (Baxter, Rakousko) nebo jako Beriplast buď ve formě Pantaject® nebo ve formě sprejové sady (Berijet®), obojí od Aventis Behring, bezprostředně po aplikaci buněčné směsi aplikuje důkladným pokrytím koagulující směsi buněk v defektu. Těsnící materiál se potom nechá koagulovat a incize uzavřít. Po kompletaci druhého chirurgického zásahu se koza (postoperativně) bandážuje, aby se zabránilo odtržení chrupavkového transplantátu (implantátu) maximálním ohnutím kolenního kloubu.
Koza se potom podrobí artroskopické kontrole reparovaného defektu chrupavky po 1 až 2 měsících po posledním artroskopickém ošetření. Po 6 měsících po artroskopickém ošetření se zvíře anestetizuje a koleno reparuje artroskopickou implantací chondrocytů. Lézi prohlédne ortoped, sejmou se fotografie a videa, provedou se denzitometrická měření a „ošetřená“ oblast se odebere a podrobí histologické, histochemické a imunohistochemické analýze.
··· ···· *e ··· ·· ··
Příklad 4
Artroskopická implantace autologních chondrocytů, preklinická, bez druhého utěsnění fibrinem
První chirurgický artroskopický zákrok
K preklinickému pokusu se použije pěti koz. Kozy se podrobí dvěma (2) chirurgickým zákrokům. Prvním chirurgickým zákrokem je artroskopické nabrání biopsie chrupavky z kolena koz. Kozy se chovají na licencované živočišné farmě vAalborg Sygehus Syd, Dánsko. Po anestezii se pomocí malé incize provede artroskopie buď antero-mediálním nebo antero-laterálním vstupem. Dvě další incize se preparují na mediální a laterální straně kolena. Za použití elevátoru se ostrým elevátorem odejme 50 až 200 mg chrupavky a asepticky přenese do transportní zkumavky obsahující sterilní Dulbeccovo MEM/12 a telecí plodové sérum. Za použití perforovacího nástroje se vytvoří v celé tloušťce chrupavky okrouhlá léze o průměru 0,6 cm, která se o 3 až 5 týdnů později použije k implantaci buněk. Biopsie se transportuje do laboratoře pro výzkum buněk Interface Biotech A/S a podrobí se kultivaci z explantátů.
Druhý chirurgický artroskopický zákrok
Když se kultura chondrocytů rozroste do rozsahu 4 až 10 milionů buněk, což normálně trvá 3 až 5 týdnů, vrátí se buňky zpět na živočišnou farmu naplněné v dvojité injekční stříkačce spolu s roztokem lidského rekombinantního kolagenu typu III plus látkou, jako je například přídavek krátkých kolagenových vláken do jedné komory dvojité injekční stříkačky (krátká kolagenová vlákna, která nemají zhoubný účinek na proliferaci buněk, a která, když jsou smíchána s gely kolagenu, prokázala permeability 100 až 1000krát větší ve srovnání s tím, když je složkou pouze kolagen typu III (bez krátkých kolagenových vláken) [Gentleman E., Nauman E.A., Dee K. C. a Livesay G. A., Tissue Eng., 10(3-4), 421-427 (2004)], a která tudíž omezují jakoukoliv možnou kontrakci působenou rekombinantním kolagenem (při konečném smísení s buňkami plus trombinem (a chloridem vápenatým z druhé komory dvojité injekční stříkačky). Druhá komora dvojité injekční stříkačky obsahuje trombin (a CaCE) s koncentrací buněk v rozsahu 1 až 10 milionů buněk. Vedení z konce jedné komory stříkačky se spojuje s dalším vedením z druhé komory stříkačky. Tupá jehla/katétr o velikosti 18 gg je připojena k oběma vedením tak, že směs obsahující kolagenovou směs se mísí strombinem a buňkami, když jehlou/katétrem prochází. Tupý konec jehly/katétru je veden - pomocí artroskopu skrze jednu z incizí vytvořených pro chirurgickou manipulaci - do defektu chrupavky o průměru 0,6 cm, vytvořeného perforací.
Perforací předtím vytvořený defekt chrupavky o průměru 0,6 cm je vyplněn směsí kolagenu - směsí trombin/buňky, která koaguluje za 30 až 180 sekund, zcela v závislosti na relativní koncentraci komponent zúčastněných na koagulaci. Nepoužije se žádný druhý těsnící materiál.
Po dokončení druhého chirurgického zásahu se koza (postoperativně) bandážuje, aby se zabránilo odtržení chrupavkového transplantátu (implantátu) maximálním ohnutím kolenního kloubu.
Koza se potom podrobí artroskopické kontrole reparovaného defektu chrupavky po 1 až 2 měsících po posledním artroskopickém ošetření. Po 6 měsících po artroskopickém ošetření se zvíře anestetizuje a koleno reparuje artroskopickou implantací chondrocytů. Lézi prohlédne ortoped, sejmou se fotografie a videa, provedou se denzitometrická měření a „ošetřená“ oblast se odebere a podrobí histologické, histochemické a imunohistochemické analýze.
Příklad 5
Artroskopická implantace autologních chondrocytů, při použití přístupu fibrinogen-trombin, preklinický pokus, kombinovaná s druhým fibrinovým utěsněním
První chirurgický artroskopický zákrok
K preklinickému pokusu se použije pěti koz. Kozy se podrobí dvěma (2) chirurgickým zákrokům. Prvním chirurgickým zákrokem je artroskopické nabrání biopsie chrupavky z kolena koz. Kozy se chovají na licencované živočišné farmě vAalborg Sygehus Syd, Dánsko. Po anestezii se pomocí malé incize provede artroskopie buď antero-mediálním nebo antero-laterálním vstupem. Dvě další incize
se preparují na mediální a laterální straně kolena. Za použití elevátoru se ostrým elevátorem odejme 50 až 200 mg chrupavky a asepticky přenese do transportní zkumavky obsahující sterilní Dulbeccovo MEM/12 a telecí plodové sérum. Za použití perforovacího nástroje se vytvoří v celé tloušťce chrupavky okrouhlá léze o průměru 0,6 cm, která se o 3 až 5 týdnů později použije k transplantaci buněk (implantaci buněk). Biopsie se transportuje do laboratoře pro výzkum buněk Interface Biotech A/S a podrobí se kultivaci z explantátů.
Druhý chirurgický artroskopický zákrok
Když se kultura chondrocytů rozroste do rozsahu 1 až 10 milionů buněk, což normálně trvá 3 až 5 týdnů, vrátí se buňky zpět na živočišnou farmu naplněné v dvojité injekční stříkačce, spolu s roztokem fibrinogenu v jedné komoře s koncentrací buněk 1 až 10 milionů buněk v 0,5 ml v roztoku fibrinogenu. Druhá komora dvojité injekční stříkačky obsahuje trombin (a CaCb). Alternativně je roztok fibrinogenu v první komoře a buňky mohou být kombinovány s trombinem a chloridem vápenatým v druhé komoře. Vedení z konce jedné komory stříkačky se spojuje s dalším vedením z druhé komory stříkačky. Jehla/katétr o velikosti 18 gg je připojena k oběma vedením tak, že směs obsahující buňky a fibrinogen se mísí s trombinem, když jehlou/katétrem prochází. Tupý konec jehly/katétru je veden - pomocí artroskopu skrze jednu z incizí vytvořených pro chirurgickou manipulaci - do defektu chrupavky o průměru 0,6 cm, vytvořeného perforací.
Perforací předtím vytvořený defekt chrupavky o průměru 0,6 cm je vyplněn směsí buňky-fibrinogen - trombin, nebo alternativně směsí fibrinogen trombin/buňky, která koaguluje během 30 až 180 sekund.
Za použití jiné dvojité injekční stříkačky se bezprostředně po aplikaci směsi buněk aplikuje fibrinové lepidlo neobsahující buňky nebo fibrinový těsnící materiál buď jako Tisseel (Baxter, Rakousko) nebo jako Beriplast buď ve formě Pantaject® nebo ve formě sprejové sady (Berijet®) obojí od Aventis Behring, důkladným pokrytím koagulující směsi buněk v defektu. Těsnící materiál se potom nechá koagulovat a incize uzavřít. Po kompletaci druhého chirurgického zásahu se koza (postoperativně) • 99 • a • « • 9 bandážuje, aby se zabránilo odtržení chrupavkového transplantátu (implantátu) maximálním ohnutím kolenního kloubu.
Koza se potom podrobí artroskopické kontrole reparovaného defektu chrupavky po 1 až 2 měsících po posledním artroskopickém ošetření. Po 6 měsících po artroskopickém ošetření se zvíře anestetizuje a koleno reparuje artroskopickou implantací chondrocytů. Lézi prohlédne ortoped, sejmou se fotografie a videa, provedou se denzitometrická měření a „ošetřená“ oblast se odebere a podrobí histologické, histochemické a imunohistochemické analýze.
Příklad 6
Artroskopické implantace autologních chondrocytů, při použití přístupu fibrinogen-trombin, prekiinický pokus, bez druhého fibrinového utěsnění
První chirurgický artroskopický zákrok
K preklinickému pokusu se použije pěti koz. Kozy se podrobí dvěma (2) chirurgickým zákrokům. Prvním chirurgickým zákrokem je artroskopické nabrání biopsie chrupavky z kolena koz. Kozy se chovají na licencované živočišné farmě vAalborg Sygehus Syd, Dánsko. Po anestezii se pomocí malé incize provede artroskopie buď antero-mediálním nebo antero-laterálním vstupem. Dvě další incize se preparují na mediální a laterální straně kolena. Za použití elevátoru se ostrým elevátorem odejme 50 až 200 mg chrupavky a asepticky přenese do transportní zkumavky obsahující sterilní Dulbeccovo MEM/12 a telecí plodové sérum. Za použití perforovacího nástroje se vytvoří v celé tloušťce chrupavky okrouhlá léze o průměru 0,6 cm, která se o 3 až 5 týdnů později použije k transplantaci buněk (implantaci buněk). Biopsie se transportuje do laboratoře pro výzkum buněk Interface Biotech A/S a podrobí se kultivaci z explantátů.
Druhý chirurgický artroskopický zákrok
Když se kultura chondrocytů rozroste do rozsahu 1 až 10 milionů buněk, což normálně trvá 3 až 5 týdnů, vrátí se buňky zpět na živočišnou farmu naplněné v dvojité injekční stříkačce, spolu s roztokem fibrinogenu v jedné komoře s koncentrací buněk 1 až 10 milionů buněk v 0,5 ml v roztoku fibrinogenu. Druhá
komora dvojité injekční stříkačky obsahuje trombin (a CaCb). Alternativně je roztok fibrinogenu v první komoře a buňky mohou být kombinovány s trombinem a chloridem vápenatým v druhé komoře. Vedení z konce jedné komory stříkačky se spojuje s dalším vedením z druhé komory stříkačky. Jehla/katétr o velikosti 18 gg je připojena k oběma vedením tak, že směs obsahující buňky a fibrinogen se mísí s trombinem, když jehlou/katétrem prochází. Tupý konec jehly/katétru je veden - pomocí artroskopu skrze jednu z incizí vytvořených pro chirurgickou manipulaci - do defektu chrupavky o průměru 0,6 cm, vytvořeného perforací.
Perforací předtím vytvořený defekt chrupavky o průměru 0,6 cm je vyplněn směsí buňky-fibrinogen - trombin, nebo alternativně směsí fibrinogen trombin/buňky, která koaguluje během 30 až 180 sekund, v závislosti na koncentraci jednotlivých složek.
Po kompletaci druhého chirurgického zásahu se koza (postoperativně) bandážuje, aby se zabránilo odtržení chrupavkového transplantátu (implantátu) maximálním ohnutím kolenního kloubu
Koza se potom podrobí artroskopické kontrole reparovaného defektu chrupavky po 1 až 2 měsících po posledním artroskopickém ošetření. Po 6 měsících po artroskopickém ošetření se zvíře anestetizuje a koleno reparuje artroskopickou implantací chondrocytů. Lézi prohlédne ortoped, sejmou se fotografie a videa, provedou se denzitometrická měření a „ošetřená“ oblast se odebere a podrobí histologické, histochemické a imunohistochemické analýze.
• ·· ·· · ·· ·9 • · · · · · · Φ · · · • Φ · · · ····«
Φ ΦΦΦΦ ΦΦΦΦΦΦ
Φ * · · · · · · ·
ΦΦΦ ΦΦ·® «Φ ··· ·· ··
AÍ-/ý
PATENTOVÉ NÁROKY
Claims (42)
1. Endoskopický způsob ošetřování defektů chrupavky nebo kosti u živočichů, vyznačující se tím, že tento způsob zahrnuje kroky:
(i) identifikace polohy defektu, (íi) aplikace buněk vybraných ze skupiny sestávající z chondrocytů, chondroblastů, osteocytů a osteoblastů a jejich kombinací do defektu chrupavky nebo kosti.
2. Způsob podle nároku 1 pro artroskopickou nebo endoskopickou implantaci homologních nebo autologních buněk do defektu živočišného těla, vyznačující se tím, že zahrnuje krok (i) artroskopické nebo endoskopické aplikace tekutiny do dutiny nebo na povrch obsahující defekt a kroky (ii) aplikace buněk na defekt v podstatě současně s nosným materiálem, přičemž aplikace je prováděna na defektu pokrytém tekutinou, (iii) smísení buněk a nosného materiálu, (iv) ztuhnutí nosného materiálu tak, že defekt je pokryt směsí buněk a nosného materiálu bez významného množství tekutiny, a (v) popřípadě odstranění tekutiny z dutiny nebo povrchu drenáží nebo odsáváním.
3. Způsob podle nároku 2, vyznačující se tím, že krok (i) předchází krokům (ii) až (v).
4. Způsob podle nároku 2, vyznačující se tím, že aplikace tekutiny v kroku (i) je v podstatě současná s aplikací buněk v kroku (ii) a nosného media v kroku (iii).
5. Způsob podle nároku 4, vyznačující se tím, že tekutinou je plyn.
6. Způsob podle kteréhokoli z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že je živočichem savec, jako je člověk.
7. Způsob podle kteréhokoli z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že defektem je defekt kloubu nebo kosti.
8. Způsob podle nároku 7, vyznačující se tím, že defektem je defekt chrupavky.
9. Způsob podle kteréhokoli z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že buňky jsou původu vhodného pro zacílení na vhodnou tkáň, kde se vizualizace provádí endoskopem.
10. Způsob podle kteréhokoli z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že buňkami jsou chondrocyty, osteocyty nebo osteoblasty.
11. Způsob podle nároku 10, vyznačující se tím, že buňkami jsou chondrocyty.
12. Způsob podle kteréhokoli z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že buňkami jsou homologní a/nebo autologní chondrocyty.
13. Způsob podle kteréhokoli z nároků 2, 3 a 5 až 12, vyznačující se tím, že tekutinou v kroku (i) je tekutinou kapalina.
14. Způsob podle nároku 13, vyznačující se tím, že kapalinou je fysiologicky přijatelné vodné medium vybrané ze skupiny, kterou tvoří roztok chloridu sodného, Ringerova soluce, medium pro kultivaci buněk, pro buňky příznivá kapalná látka a podobně.
9 9
9 9 9 9 • 9 «
9 9 «
15. Způsob podle kteréhokoli z nároků 2 až 14, vyznačující se tím, že nosný materiál v kroku (ii) je volen ze skupiny, kterou tvoří rozpustné kolageny, fibrinogeny a aprotininy.
16. Způsob podle nároku 15, vyznačující se tím, že nosný materiál se aplikuje ve formě vodné směsi.
17. Způsob podle nároku 16, vyznačující se tím, že vodná směs dále zahrnuje jedno nebo více adhezi podporujících činidel a/nebo jeden nebo více fysiologicky přijatelných iontů, jako jsou ionty vápníku nebo hořčíku.
18. Způsob podle kteréhokoli z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že buňky v kroku (ii) se aplikují ve formě buněčné suspenze.
19. Způsob podle nároku 18, vyznačující se tím, že buňky jsou suspendovány ve vhodném mediu, jako je například vhodné medium pro růst, popřípadě obsahující jeden nebo více růstových faktorů.
20. Způsob podle nároku 18 nebo 19, vyznačující se tím, že buněčná suspenze dále zahrnuje jednu nebo více koagulujících složek, které iniciují tuhnutí nosného materiálu po kontaktu mezi nosným materiálem a koagulující složkou.
21. Způsob podle kteréhokoli z nároků 18 až 20, vyznačující se tím, že buněčná suspenze dále zahrnuje jedno nebo více adhezi podporujících činidel a/nebo jeden nebo více fysiologicky přijatelných iontů, jako jsou ionty vápníku nebo hořčíku.
22. Způsob podle nároku 20 nebo 21, vyznačující se tím, že koagulující složkou je trombin nebo složka podobná trombinu.
23. Způsob podle kteréhokoli z nároků 2 až 22, vyznačující se tím, že tuhnutí nosného materiálu je výsledkem interakce mezi nosným materiálem a trombinem nebo složkou podobnou trombinu a tuhnutí obaluje buňky ve ztuhlém materiálu.
24. Způsob podle nároku 18 nebo 19, vyznačující se tím, že buněčná suspenze zahrnuje nosný materiál, přičemž způsob dále zahrnuje krok aplikace roztoku obsahujícího koagulující činidlo.
25. Způsob podle kteréhokoli z nároků 2 až 23, vyznačující se tím, že míšení buněk s nosným materiálem v kroku (iii) se provádí aplikováním nosného materiálu a/nebo buněk pod přetlakem.
26. Způsob podle nároku 24, vyznačující se tím, že suspenze zahrnující buňky a nosný materiál se mísí s koagulujícím činidlem aplikováním roztoku obsahujícího koagulující činidlo pod přetlakem.
27. Souprava pro použití při způsobu podle kteréhokoli z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že souprava zahrnuje dvě oddělené nádoby, přičemž první nádoba zahrnuje buňky a druhá nádoba zahrnuje nosný materiál.
28. Způsob podle nároku 27, vyznačující se tím, že buňky v první nádobě jsou ve formě buněčné suspenze.
29. Souprava podle nároku 28, vyznačující se tím, že buňky jsou suspendovány ve vhodném mediu, jako je například vhodné růstové medium, popřípadě zahrnující jeden nebo více růstových faktorů.
30. Souprava podle nároku 28 nebo 29, vyznačující se tím, že buněčná suspenze dále zahrnuje jednu nebo více koagulujících složek, které iniciují tuhnutí nosného materiálu po kontaktu mezi nosným materiálem a koagulující složkou.
31. Souprava podle kteréhokoli z nároků 28 až 30, vyznačující se tím, že buněčná suspenze dále zahrnuje jedno nebo více adhezi podporujících činidel
4« • 4 • 444 •·· 4 4 4« a/nebo jeden nebo více fysiologicky přijatelných iontů, jako jsou ionty vápníku nebo hořčíku.
32. Souprava podle nároku 30 nebo 31, vyznačující se tím, že koagulující složkou je trombin nebo složka podobná trombinu.
33. Souprava podle kteréhokoli z nároků 27 až 32, vyznačující se tím, že dále zahrnuje třetí nádobu, zahrnující koagulující složku.
34. Souprava pro použití při způsobu podle kteréhokoli z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že zahrnuje dvě oddělené nádoby, přičemž první nádoba zahrnuje buňky a druhá nádoba zahrnuje koagulující činidlo.
35. Souprava podle nároku 34, vyznačující se tím, že první nádoba zahrnuje nosný materiál.
36. Souprava podle nároku 34 nebo 35, vyznačující se tím, že dále zahrnuje třetí nádobu, zahrnující nosný materiál.
37. Souprava podle kteréhokoli z nároků 27 až 36, vyznačující se tím, že souprava je ve formě injekční stříkačky obsahující dvě oddělené komory, přičemž první komora obsahuje buňky a druhá komora obsahuje nosný materiál nebo koagulující činidlo.
38. Souprava podle nároku 37, vyznačující se tím, že injekční stříkačkou je dvojitá injekční stříkačka nebo podobně.
39. Souprava podle kteréhokoli z nároků 27 až 38, vyznačující se tím, že dále zahrnuje návod k použití soupravy.
40. Způsob podle kteréhokoli z nároků 1 až 26, vyznačující se tím, že dále zahrnuje aplikaci hydroxyapatitu, například ve formě granulátu hydroxyapatitu.
• · ·· ·· · • · · · · · • · · · • · · · · • · · · ·· ·· ·· ···
41. Použití hydroxyapatitu jako kultivačního media pro buňky, jako jsou osteoblasty/osteocyty.
42. Použití roztoků kolagenu jako kultivačního media pro buňky, které mají
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DKPA200300871 | 2003-06-12 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ200624A3 true CZ200624A3 (cs) | 2006-05-17 |
Family
ID=33547530
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20060024A CZ200624A3 (cs) | 2003-06-12 | 2004-06-11 | Zpusob implantace bunek |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20070077236A1 (cs) |
| EP (1) | EP1635887A2 (cs) |
| JP (1) | JP2006527032A (cs) |
| AU (1) | AU2004246749A1 (cs) |
| CA (1) | CA2528399A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ200624A3 (cs) |
| NO (1) | NO20056222L (cs) |
| WO (1) | WO2004110512A2 (cs) |
| ZA (1) | ZA200509983B (cs) |
Families Citing this family (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE69714035T2 (de) * | 1997-08-14 | 2003-03-06 | Sulzer Innotec Ag, Winterthur | Zusammensetzung und Vorrichtung zur Reparatur von Knorpelgewebe in vivo bestehend aus Nanokapseln mit osteoinduktiven und/oder chondroinduktiven Faktoren |
| US7622562B2 (en) * | 2002-06-26 | 2009-11-24 | Zimmer Orthobiologics, Inc. | Rapid isolation of osteoinductive protein mixtures from mammalian bone tissue |
| EP2338441B1 (en) | 2003-12-11 | 2013-01-23 | Isto Technologies Inc. | Particulate cartilage system |
| KR100531922B1 (ko) * | 2003-12-23 | 2005-11-29 | 주식회사 셀론텍 | 연골치료제 조성물 및 그 사용방법 |
| WO2005079881A1 (en) * | 2004-02-19 | 2005-09-01 | Interface Biotech A/S | Arthroscopic method for cell implantation in mammals |
| KR100702250B1 (ko) * | 2005-06-13 | 2007-04-03 | 세원셀론텍(주) | 피브린 혼합형 골절 유합용 반고형성 뼈세포 조성물 및이의 제조방법 |
| KR100751690B1 (ko) * | 2005-06-13 | 2007-08-23 | 세원셀론텍(주) | 조골 세포와 생체 기질 성분의 혼합물을 이용한 골 생성용조성물 및 그 제조방법 |
| EP1916964A4 (en) | 2005-08-26 | 2015-11-04 | Zimmer Inc | IMPLANTS AND METHODS FOR THE REPAIR, REPLACEMENT AND TREATMENT OF JOINT DISEASES |
| CN101291586A (zh) * | 2005-09-02 | 2008-10-22 | 英特菲思生物技术公司 | 用于细胞植入的方法 |
| EP1764117A1 (en) * | 2005-09-20 | 2007-03-21 | Zimmer GmbH | Implant for the repair of a cartilage defect and method for manufacturing the implant |
| US20080154233A1 (en) * | 2006-12-20 | 2008-06-26 | Zimmer Orthobiologics, Inc. | Apparatus for delivering a biocompatible material to a surgical site and method of using same |
| US8163549B2 (en) | 2006-12-20 | 2012-04-24 | Zimmer Orthobiologics, Inc. | Method of obtaining viable small tissue particles and use for tissue repair |
| CA2684040C (en) | 2007-04-12 | 2016-12-06 | Isto Technologies, Inc. | Method of forming an implant using a mold that mimics the shape of the tissue defect site and implant formed therefrom |
| CA2713118A1 (en) * | 2008-02-29 | 2009-09-03 | Interface Biotech A/S | Biosynthetic cartilaginous matrix and methods for their production |
| CN102123745A (zh) | 2008-02-29 | 2011-07-13 | 科洛普拉斯特公司 | 用于受试者中活组织的增加和再生的组合物和方法 |
| KR101114773B1 (ko) * | 2009-10-23 | 2012-03-05 | 세원셀론텍(주) | 연골조직 수복용 조성물의 제조방법 |
| CN103857352A (zh) * | 2011-10-13 | 2014-06-11 | 凯希特许有限公司 | 使用减压治疗刺激软骨形成 |
| KR101279812B1 (ko) * | 2012-05-16 | 2013-06-28 | 세원셀론텍(주) | 연골조직 수복용 조성물의 제조방법 |
| US20140178343A1 (en) | 2012-12-21 | 2014-06-26 | Jian Q. Yao | Supports and methods for promoting integration of cartilage tissue explants |
| WO2019155434A1 (en) | 2018-02-09 | 2019-08-15 | Stemmatters, Biotecnologia e Medicina Regenerativa, S.A. | Medical device for the delivery of therapeutic formulations and methods of use thereof |
| US11759582B2 (en) * | 2018-05-14 | 2023-09-19 | Cannuflow, Inc. | Method of using sealants in a gas arthroscopy procedure |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5736372A (en) * | 1986-11-20 | 1998-04-07 | Massachusetts Institute Of Technology | Biodegradable synthetic polymeric fibrous matrix containing chondrocyte for in vivo production of a cartilaginous structure |
| JP2694372B2 (ja) * | 1988-12-12 | 1997-12-24 | ウロプラスティ，インコーポレイテッド | 微小移植物質 |
| DK288590D0 (da) * | 1990-12-04 | 1990-12-04 | Michael Morris | Blandings/oploesnings-sproejte til cytostatika for medicinsk behandling af cancer patienter |
| DE19540487A1 (de) * | 1995-10-20 | 1997-04-24 | Olaf Schultz | Zellinteraktionssystem zur Induktion künstlicher Gewebe |
| US5989269A (en) * | 1996-08-30 | 1999-11-23 | Vts Holdings L.L.C. | Method, instruments and kit for autologous transplantation |
| US6886568B2 (en) * | 1998-04-08 | 2005-05-03 | The Johns Hopkins University | Method for fabricating cell-containing implants |
| US6662805B2 (en) * | 1999-03-24 | 2003-12-16 | The Johns Hopkins University | Method for composite cell-based implants |
| EP1206225B1 (en) * | 1999-07-28 | 2005-03-09 | Interface Biotech A/S | In vitro repair of bone and/or cartilage defects |
| DE10013223C2 (de) * | 2000-03-13 | 2002-07-18 | Co Don Ag | Verfahren zur in vitro-Herstellung von dreidimensionalem, vitalem Knorpel- oder Knochengewebe und dessen Verwendung als Transplantationsmaterial |
| JP2004513848A (ja) * | 2000-10-31 | 2004-05-13 | スミス アンド ネフュー インコーポレーテッド | 骨移植粒子の包装・配送システム |
| DE10054857B4 (de) * | 2000-11-06 | 2005-02-17 | Bohmann, Anton, Dr.med., Dipl.-Ing. (FH) | System zur Herstellung von individuell formbarem Knochenersatz |
-
2004
- 2004-06-11 CZ CZ20060024A patent/CZ200624A3/cs unknown
- 2004-06-11 US US10/560,308 patent/US20070077236A1/en not_active Abandoned
- 2004-06-11 EP EP04736630A patent/EP1635887A2/en not_active Withdrawn
- 2004-06-11 CA CA002528399A patent/CA2528399A1/en not_active Abandoned
- 2004-06-11 WO PCT/DK2004/000408 patent/WO2004110512A2/en not_active Ceased
- 2004-06-11 AU AU2004246749A patent/AU2004246749A1/en not_active Abandoned
- 2004-06-11 JP JP2006515712A patent/JP2006527032A/ja active Pending
-
2005
- 2005-12-08 ZA ZA200509983A patent/ZA200509983B/en unknown
- 2005-12-28 NO NO20056222A patent/NO20056222L/no not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2004110512A2 (en) | 2004-12-23 |
| JP2006527032A (ja) | 2006-11-30 |
| AU2004246749A1 (en) | 2004-12-23 |
| WO2004110512A3 (en) | 2005-05-06 |
| CA2528399A1 (en) | 2004-12-23 |
| US20070077236A1 (en) | 2007-04-05 |
| ZA200509983B (en) | 2006-09-27 |
| EP1635887A2 (en) | 2006-03-22 |
| NO20056222L (no) | 2005-12-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ200624A3 (cs) | Zpusob implantace bunek | |
| CN1200656C (zh) | 一种修复关节软骨缺陷的软骨修复构造物 | |
| CN1612715A (zh) | 自体移植的方法,器械和试剂盒 | |
| AU2018201871B2 (en) | Composition for repairing cartilage tissue, method for producing same, and use thereof | |
| JP2008521502A (ja) | 半月板損傷の生体内治療及び修復方法 | |
| MXPA01001460A (es) | Metodos, instrumentos y materiales para el transplante de celulas condrociticas. | |
| EP1932536B1 (en) | Use of collagenase for the repair of meniscal cartilage | |
| US20180272032A1 (en) | Materials and methods for repair of cartilage defects | |
| JP2009501605A (ja) | 軟骨細胞の自家移植用の注射できる軟骨細胞の簡易な移植方法 | |
| Mayr et al. | Treatment of large chondral lesions with an autologous minced cartilage technique and synovial flap leads to superior results compared to matrix associated autologous chondrocyte transplantation technique after 24 months: A controlled clinical trial | |
| RU2244521C2 (ru) | Способы, инструменты и материалы для трансплантации зрелых клеток хрящевой ткани | |
| RU2351020C1 (ru) | Способ лечения полнослойных дефектов хряща коленного сустава с использованием культуры аутологичных мезенхимальных стволовых клеток | |
| Lazishvili et al. | Experimental assessment of biological potential of collagen membranes in reconstruction of full-thickness hyaline cartilage defects | |
| CN120813392A (zh) | 用于治疗受损结缔组织的方法和套件 | |
| HK1025035B (en) | A cartilage repair structure for repair of a defect in articular cartilage |