CZ2009117A3 - Zpusob biotechnologické výroby bovinního hemoderivátu a použití bovinního homoderivátu - Google Patents
Zpusob biotechnologické výroby bovinního hemoderivátu a použití bovinního homoderivátu Download PDFInfo
- Publication number
- CZ2009117A3 CZ2009117A3 CZ20090117A CZ2009117A CZ2009117A3 CZ 2009117 A3 CZ2009117 A3 CZ 2009117A3 CZ 20090117 A CZ20090117 A CZ 20090117A CZ 2009117 A CZ2009117 A CZ 2009117A CZ 2009117 A3 CZ2009117 A3 CZ 2009117A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- blood
- fermentate
- bovine
- ethanol
- extract
- Prior art date
Links
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 title claims abstract description 63
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 31
- 150000005851 haem O derivatives Chemical class 0.000 title 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 138
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 138
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 65
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 54
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims abstract description 48
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 34
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 34
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 31
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 21
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 claims abstract description 20
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 claims abstract description 20
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 15
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 claims abstract description 12
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 claims abstract description 10
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000013452 biotechnological production Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims abstract description 7
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 claims abstract description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 105
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 95
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 24
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 19
- 239000012467 final product Substances 0.000 claims description 13
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 8
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 8
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 5
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 claims description 5
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 claims description 4
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 claims description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims description 3
- 239000013049 sediment Substances 0.000 claims description 3
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000000469 ethanolic extract Substances 0.000 claims description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 claims description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 2
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 claims 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 abstract description 6
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 abstract description 6
- PSLIMVZEAPALCD-UHFFFAOYSA-N ethanol;ethoxyethane Chemical compound CCO.CCOCC PSLIMVZEAPALCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 230000008719 thickening Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 39
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 7
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 7
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000009471 action Effects 0.000 description 5
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 5
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 238000002481 ethanol extraction Methods 0.000 description 4
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 4
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 2
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 238000002803 maceration Methods 0.000 description 2
- 238000009928 pasteurization Methods 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000007738 vacuum evaporation Methods 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241001676573 Minium Species 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- -1 aliphatic alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 238000010411 cooking Methods 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 1
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 description 1
- 230000006862 enzymatic digestion Effects 0.000 description 1
- 238000004880 explosion Methods 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000005188 flotation Methods 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 238000000643 oven drying Methods 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009993 protective function Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000010414 supernatant solution Substances 0.000 description 1
- 230000008646 thermal stress Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
- A23J1/06—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from blood
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/16—Blood plasma; Blood serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Virology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Electrotherapy Devices (AREA)
Abstract
Zpusob biotechnologické výroby bovinního hemoderivátu, zahrnující tyto kroky v casové návazné souslednosti: 1) Fermentace krve v nekolika fázích, napr. ve 2 fázích, 2) Sušení krevního fermentátu, 3) Rozdružení krevního fermentátu, 4) Etanolická extrakce krevního fermentátu v nekolika fázích, napr. ve 4 fázích výhodne v ochranné inertní atmosfére, 5) Stabilizace získaného extraktu krevního fermentátu oddelením krevních solí, 6) Vakuové zahuštování extraktu krevního fermentátu s následnou stabilizací extraktu oddelení krevních solí výhodne v ochranné inertní atmosfére, 7) Étericko-etanolická preparace zahušteného extraktu v nekolika fázích, napr. ve 3 fázích z duvodu odstranení fosfolipidu, 8) Stabilizace sraženiny bovinního hemoderivátu oddelením éterického roztoku, 9) Vakuové zahuštování získaného etanolicko-éterického roztoku bovinního hemoderivátu, výhodne v ochranné inertní atmosfére, 10) Rozpouštení odparku bovinního hemoderivátu v destilované vode, 11) Standardizace finálního produktu bovinního hemoderivátu.
Description
[0001] Vynález se týká způsobu biotechnologické výroby bovinního hemoderivátu. Cerstve odebraná zvířecí krevní hmota, a to čerstvá hovězí krev, se nejprve fermentuje v několika fázích, obvykle ve dvou fázích, za zvýšeny teploty topného vzduchu. Získaný krevní fermentát se suší, obvykle při teplotách od 30 do 100 0 C. Sušený krevní fermentát se 10 rozdruží. Následně se provádí etanolická extrakce krevního fermentátu v několika fázích.
Extrakt krevního fermentátu se podrobí jednomu vakuovému zahušťování, obvykle na výslednou koncentraci cca 20-krát vyšší než původní, s následným odstraněním nežádoucích látek. Získaný zahuštěný extrakt se podrobí jedné étencké preparaci, ρπ mz se zahuštěný krevní fermentát podrobí srážením dietyléterem, a ziskana sraženina se oddělí 15 od roztoku nežádoucích fosfolipidů rozpuštěných v éteru. Provádí se standardizace finálního produktu.
[0002] Vynález se týká též použiti bovinního hemoderivátu.
Dosavadní stav techniky
[0003] V českém A.O. č. 228 038 je popsán způsob výroby tkáňového preparátu z rostlinné nebo živočišné tkáně extrakcí těchto tkání etanolem. Na tkáň se působí etanolem vícestupňové v rozmezí 3 až 100 dnů za teploty od 10 do 100 °C, s výhodou od 70 do 85 °C.
Získaný extrakt se zkoncentruje na 5 až 50 % původního objemu, vysráží se éterem nebo jiným rozpouštědlem. Sraženina se promyje éterem, usuší se a vysušena sraženina se rozpustí.
[0004] Přednosti vynálezu je užiti získaného preparátu pro léčbu a regeneraci buněk v 30 živých organizmech. Extrakčni proces se provádí tak. že se extrahuje extrahovadlem.
[00051 Nevýhodou takto prováděné extrakce je umístění extrahované látky mimo prostor vařáku, čímž dochází k větším energetickým ztrátám s negativním dopadem na snížení teploty extrakčniho procesu. Nevýhodou je také přítomnost oxidační atmosféry při této 35 extrakci, negativné ovlivňující chemickou stabilitu extraktu. Další nevýhodou tohoto vynálezu je nízká selektivita jednostupňové éterické preparace, tj. fyzikální nepřlstupnost nežádoucích látek ve sraženině pro působeni éteru. Sraženina je kompaktní olejovitou fázt.
Ve vynálezu je popsán postup, že sraženina účinných látek se vyčistí od nežádoucích fosfolipidních látek dalším přídavkem éteru, čímž poměrně obtížně vzniká emulze, tedy mikročástic sraženiny, zadržující fosfilipidy. Tudíž vyčištění sraženiny od fosfolipidů je obtížné, nedochází ke kvantitativnímu odstranění fosfolipidů ze sraženiny, ale pouze k částečnému odstranění fosfolipidů. Navíc, tento způsob vyžaduje po éterické preparaci zahuštěného etanolického extraktu krevního fermentátu sušení pro odstranění éteru. Vzniká určité nebezpečí výbuchu a úniku éteru do okolí, čímž může dojít k zatížení životního prostředí. Odparek bez přítomnosti éteru se stává mikrobiálně náchylný a je vystaven oxidační atmosféře, takže může dojít k nekontrolovatelnému štěpení odparku vlivem kyslíku.
[0006] V českém patentu č. 279 147 je popsán způsob biotechnologické výroby prostředku, stimulující obranyschopnost organizmu, extrakci krevní zvířecí hmoty. Za čerstva odebraná zvířecí krevní hmota se podrobí enzymatickému štěpení ve 2 fázích. Nejprve při teplotě v rozmezí 80 - 85 °C po dobu 3 hodin, ve druhé fázi při teplotě při teplotě 70-75 °C po dobu 48 hodin. Potom se získaná hmota suší při teplotě 75-80 °C a maximální vlhkosti 35 % po dobu 120- 160 hodin, dezintegruje se na velikost zrn 500 pm. Potom se provede extrakční flotace ve vznosu krevní hmoty cirkulací extrakčního činidla, kterým jsou alifatické alkoholy do 4 atomů uhlíků s maximálním obsahem vody do 5 % za jeho současného ohřívání na teplotu 50 - 55 °C. Trvalý kontakt extrahovaného média s extrakčním činidlem se zajišťuje udržováním např. dezintegrovaného fermentátu ve vznosu. Z takto získaného extraktu se odstraní preparací lipidické podíly. Standardizace konečného produktu je provedena pouze úpravou koncentrace účinných látek ve vodném roztoku, není řešena mikrobiologická stabilita konečného produktu.
[0007] Výhodou tohoto vynálezu je nízká energetická náročnost v oblasti etanolické extrakce, protože z procesu je významně vyloučeno kondenzační teplo extrahovadla. Při řízené fermentaci zřejmě dochází k vyšší produkci účinných látek, než u vynálezu předchozího.
[0008] Nevýhodou tohoto vynálezu je, že extrakční proces se provádí maceračním způsobem, při němž se vyextrahované krevní soli nevylučují na topném registru, ale prochází celým technologickým procesem až do finálního produktu. Nežádoucí krevní sole se nevylučují z důvodu použité nízké koncentrace extraktu, což je způsobeno použitím vysokého přebytku extrahovadla - etanolu vzhledem k extrahované látce - fermentované krvi. Toto negativum patent řeší vychlazovacím procesem, který však není dostatečné ucmný z hlediska odstraňování nežádoucích krevních solí. Jedná se o krátký proces pn nízké teplotě, takže se dá předpokládat, že vlastni proces vylučování nežádoucích látek probíhá s nízkou účinností. Navíc, po éterické preparaci, se sraženina rozpouští v destilované vodě, takže jsou přítomny celkem tři rozpouštědla, stopově etanol, významně dietyléter a dominantně destilovaná voda. Po následném vakuovém odpaření éteru, případně i etanolu vznikne převážně vodný roztok, který je náchylný k mikrobiálnímu rozvoji. I v tomto případě jednostupňová éterická preparace je nedostačující ve smyslu získávání čistého finálního produktu. Další nevýhodou je, že fermentace ve druhé fázi probíhá po relativně dlouhou dobu, cca 48 hodin při teplotě kolem 70-75 °C, což má zřetelný vliv na ekonomiku procesu fermentace. Rozdruženi krevního fermentátu na velikost částic do 0,5 mm je nutné pro následující proces extrakce, prováděný macerací ve vznosu. Konečný produkt vykazuje vizuálně krystalickou strukturu, díky postupu výroby podle tohoto vynálezu, vzhledem k vysokému zastoupení krevních solí jako nežádoucího
[0009] Společnou nevýhodou obou uvedených vynálezů, založených na bovinním fermentu je přítomnost nežádoucích látek, které ředí koncentraci účinné látky, a některé z nich mohou podléhat oxidaci případně žluknutí konečného produktu.
Podstata vynálezu
[0010] Uvedené nevýhody se odstraní nebo podstatně omezí způsobem biotechnologické výroby bovinního hemoderivátu podle tohoto vynálezu. Čerstvě odebraná zvířecí krevní hmota se nejprve fermentuje v několika fázích, získaný krevní fermentát se suší, sušený krevní fermentát se rozdruží, následně se provádí etanolická extrakce krevního fermentátu v několika fázích, krevní fermentát se podrobí jednomu vakuovému zahuštování s následnou stabilizací pro odstranění nežádoucích látek. Zahuštěný extrakt se podrobí éterické preparaci, při niž se zahuštěný krevní fermentát podrobí srážením éterem, a ziskana sraženina se oddělí od roztoku nežádoucích látek rozpuštěných v éteru.
[0011] Podstata tohoto vynálezu spočívá vtom, že při fermentaci, bezprostředně získaná zvířecí krevní hmota, přednostně hovězí krev, se vloží do vaniček s výškou hladiny krevní hmoty 2,5 - 3 cm, a zahřívá se postupně až dosáhne ve své hmotě teploty 55 - 65 °C, s výhodou 60 °C, poté nastává druhá fáze fermentace, při níž se teplota okolního topného vzduchu sníží, z teploty kolem 80 °C v první fázi fermentace, na 65 - 75 °C, s výhodou °C. Po dosažení této teploty probíhá druhá fáze fermentace, při níž se udržuje konstantní teplotní rozdíl 5 °C mezi topným vzduchem a teplotou krevní hmoty, po dobu 5-20 hodin, s výhodou 12 hodin, při ní probíhá autoenzymatické štěpení krevní hmoty. Během druhé fáze fermentace se změní veškerá krevní hmota na gumovitou konzistenci, čímž je druhá fáze fermentace ukončena.
[0012] Definovaná výška hladiny krevní hmoty je optimální pro efektivní průběh enzymatických procesů. Výška hladiny byla stanovena experimentálně. Pokud by byla výška hladiny vyšší, mělo by to pozitivnější vliv na enzymatické procesy, ale přestup tepla v první fázi fermentace by byl nedostačující pro rychlé docíleni pasterizačni teploty. Při nižší hladině by docházelo ke zkráceni fermentačniho procesu, a tudíž i k nižšímu využití vkládaného materiálu.
[0013] Fermentace podle tohoto vynálezu je časově poměrně krátká, tudíž i ekonomicky výhodná vzhledem ke stávajícímu stavu techniky. Definování optimální hodnoty teploty ve 10 hmotě řeší rychlý nástup pasterizační teploty, tj. vyloučení mikrobiálního znečištěni a nastartování autoenzymatického štěpení krevní hmoty ve druhé fázi fermentace. Když by tato teplota byla vyšší, zkrátil by se neúměrně fermentačni čas druhé fáze. Pokud by tato teplota byla nižší, probíhala by druhá fáze fermentace s nižší účinnosti a s vysokou pravděpodobností nežádoucího mikrobiálního rozvoje. Definované časové intervaly obou 15 fází fermentace byly získány dlouhodobými provozními zkouškami.
[0014] Získaný krevní fermentát se suší při řízeném větrání dle sušicí křivky pri teplote
- 80 °C po dobu 120 - 160 hodin, s výhodou při teplotě 70 °C a době 140 hodin, az na konečný obsah vlhkosti do 10 %, svýhodou 2-3 % vlhkosti. Řízené větráni po ukončené 20 druhé fázi fermentace se optimalizuje s ohledem na ekonomiku provozu, ph zachovaní kvality získaného fermentátu. Definované teploty i časy sušení jsou výsledkem dlouhodobých experimentálních zkoušek. Definovaná vlhkost je optimální z hlediska minimálního zavádění vody do technologického procesu následné extrakce.
[0015] Vysušený krevní fermentát se následně rozdruži na velikost částic 1-10 mm, s výhodou 2 - 4 mm. Nárokovaná velikost částic je optimální pro následný extrakční proces s ideálními reologickými vlastnostmi, tj aby odpor vrstvy částic byl malý vůči průtoku extrahovadla v procesu následné extrakce, ale zároveň aby se neprodlužovala doba extrakce, která by nastala s částicemi o velikosti větší než 4 mm.
30
[0016] Rozdružený krevní fermentát se podrobí kontinuální extrakci v několika fázích, s výhodou ve 4 fázích, permanentně čistým etanolem vextraktoru Soxhletova typu, s celkovou extrakční dobou 200-400 hodin, s výhodou 240 hodin, při teplotě 70 - 78 °C, během opakované extrakce se extrakty krevních fermentátu spojuji. Extrakce krevního 35 fermentátu v několika fázích podle tohoto vynálezu je výhodná k získávání stálé čistého extrakčniho činidla, jehož působeni na krevní fermentát při teplotě blízké teplotě varu umožni snížit množství použitého etanolu v procesu a využít koncentrováni získávaného extraktu v prostoru vařáku, a to s průběžným oddělováním vylučovaných nežádoucích krevních solí. Pro tento způsob je extraktor Sohletova typu s ohřevem extrahovaného fermentátu ideální. Z každé extrakce se získá extrakt, který se soustřeďuje v jedné jímací nádobě. Počet extrakcí v počtu 4 je výhodný a odzkoušený jako dostačující pro získání co nejvyššího množství vyextrahovaných látek. Definovaný rozsah teplot je optimální pro rychlost extrakcí a použitá doba je nutná z pohledu širokého spektra extrahovaných žádoucích látek.
[0017] Spojené extrakty krevního fermentátu se podrobí jeho stabilizaci oddělením od krevních solí, a to při teplotě okolí po dobu 24- 120 hodin, s výhodou 72 hodin, přičemž celková doba stabilizace se míní od počátku získáni posledního extraktu krevního fermentátu. Stabilizace má za účel odstranit nežádoucí krevní sole, které se v průběhu času vylučují během jednotlivých technologických operací.
[0018] Po následném vakuovém zahuštění se stabilizovaný zahuštěný extrakt krevního fermentátu podrobí éterické preparaci v několika fázích pro získání sraženiny bovinniho homoderivátu, přičemž každá takto vzniklá sraženina se podrobí rozpouštění v etanolu v množství, až dojde ke kvantitativnímu rozpuštění sraženiny bovinniho hemoderivátu do vzniku pravého roztoku bovinniho hemoderivátu k následné éterické preparaci, a roztok nad dekantovanou sraženinou, obsahující nežádoucí fosfolipidy rozpustné v diethyletheru, se odděluje. Lipidy, které jsou uzavřeny v olejovité sraženině bovinniho hemoderivátu jsou rozpuštěním v etanolu zpřístupněny na další působení éteru.
[0019] Po opakované preparaci se získaná sraženina bovinniho hemoderivátu stabilizuje za účelem oddělení zbytkového nežádoucího éteru od této sraženiny.
[0020] Stabilizovaná sraženina bovinniho hemoderivátu se nejdříve rozpustí v etanolu do pravého roztoku, který se následně vakuově zahušťuje při teplotě 25 - 40 °C, s výhodou při teplotě 28 °C, do získání destilátu prostého éteru. Rozpouštění v etanolu je výhodné oproti rozpouštěni ve vodě, tím, že se vytváří roztok mikrobiálně stabilní, a to až do konečné fáze. t.j. do technologického kroku standardizace. Při daných teplotách se snadno odpařuje z etanolického roztoku již nežádoucí éter.
[0021] Získaný odparek bovinniho hemoderivátu se rozpustí v destilované vodě na koncentraci 50 - 500 g na 1 litr roztoku. Získaný vodně-etanolický roztok se odstředí na chlazené centrifuze pro odstranění nerozpuštěných látek, a vzniklý supernatant po oddělení sedimentu nerozpuštěných látek se standardizuje na koncentraci bovinniho hemoderivátu 50-500 g na 1 litr roztoku a na požadovanou koncentraci etanolu v rozmezí 16 - 19 %
6-- · hmotn. Teprve v tomto technologickém kroku se poprvé využije jako rozpouštědlo destilovaná voda, a to z toho důvodu, že konečná koncentrace etanolu musí být na úrovni deklarovaných 16-19 % hmotn, které zabezpečují mikrobiální stabilitu roztoku. Zároveň případně vzniklé nerozpustné látky v tomto vodně-alkoholickém prostředí se odstraní výhodně odstředěním na chlazené odstředivce. Chlazení odstředivky se používá z hlediska nebezpečí zahřátí bovinního hemoderivátu při odtřeďování, což by mohlo vést k jeho termické degradaci.
[0022] Hlavní výhodou tohoto vynálezu je získání velmi kvalitního, mikrobiálně a chemicky stabilního produktu, s vysokým obsahem bovinního hemoderivátu a s minimálním nebo žádným obsahem nežádoucích fosfolipidů a krevních solí, a to postupem, který od fáze étanolické extrakce je vždy chráněn před mikrobiálním znečištěním a oxidačním působením vzduchu. Je vyloučen jakýkoliv proces výskytu pouze vodného roztoku, tedy vody jakožto rozpouštědla, který je v případě výskytu biologických látek vysoce citlivý na mikrobiální rozvoj. Vlivem stále dodávaného čerstvého rozpouštědla při procesu extrakce se získává extrakt o vyšší koncentraci s nesporným pozitivním vlivem na následné postupné vylučování nežádoucích organických solí. Opakovaná éterická preparace založená na periodickém vzniku a rozpouštění sraženiny bovinního derivátu do pravého roztoku umožňuje téměř kvantitativní odstranění lipidních látek. Vzhledem ke stávajícím technikám získání bovinního hemoderivátu je způsob podle tohoto vynálezu rychlejší, a ekologicky šetrnější.
[0023] Etanolická extrakce krevního fermentátu a/nebo vakuové zahušťování extraktu krevního fermentátu, a/nebo vakuové zahušťování etanolicko-éterického bovinního hemoderivátu, může s výhodou probíhat v ochranné např. dusíkové atmosféře. Vstup dusíku do zařízení extraktoru nebo do vakuové cirkulační odparky, v průběhu procesu extrakce nebo vakuového cirkulačního zahušťování, vytváří v etanolu respektive v extraktu, proud bublin, které promíchávají kapalinu a zamezují výskytu utajeného varu extraktu popřípadě čistého etanolu. Atmosféra nad hladinou extraktu či nad hladinou roztokem bovinního hemoderivátu při vakuovém zahušťování zároveň plní ochrannou funkci inertního plynu před oxidačním působením kyslíku.
[0024] Podle tohoto vynálezu je použití bovinního hemoderivátu ve vodně-etanolickém roztoku, s obsahem 50 - 500 g bovinního hemoderivátu na 1 litr vodně-etanolického roztoku, obsahujícího 16-19 % hmotn. etanolu, vhodné pro přípravu dietetického prostředku pro zvýšení imunity organizmu pro humánní a veterinární účely. Humánní účelem se rozumí nejen dietetické přípravky či léčiva, též kosmetika.
Příklady provedení
Příklad 1
[0025] Způsob biotechnologické výroby bovinního hemoderivátu, je uveden pro přehlednost v následujícím přehledu, který shrnuje celý postup jednotlivých technologických operací v časové návazné souslednosti:
Příklad 2
[0026] Konkrétní příkladné provedení je dále popsáno po jednotlivých technologických operacích, navazujících na sebe.
Fermentace hovězí krve ve dvou fázích
[0027] Surová hovězí krev se v přepravní nádobě vysokoobrátkovým míchadlem rozdruží na částice o maximální velikosti 30 mm. Rozdružená krev se rozlije do nerezových vaniček tak, aby výška hladiny hmoty byla 2,5 - 3 cm.
[0028] Dále následuje fermentace ve dvou fázích, t.j. autoenzymatické štěpení za působení tepla, času a enzymů obsažených v surové krvi.
[0029] Fermentace v první fázi probíhá následovně. Vaničky s krevní hmotou se vloží do sušárny, přičemž výchozí teplota krevní hmoty by měla být minimálně 30 °C. Do vybrané vaničky se ponoří registrační teploměr, sušárna se uzavře, nastaví se teplota ohřevu vnitřního prostoru sušárny na hodnotu kolem 75 - 85 °C, s výhodou 80 °C, po dobu 2 - 2,5 hodiny. Sušárna se zapne s režimem vnitřní cirkulace vzduchu.
[0030] Druhá fáze fermentace nastává v době, kdy teplota v krevní hmotě dosáhne teploty v rozsahu 55 - 65 °C , s výhodou 60 °C. Od této chvíle se teplota topného vzduchu řídí tak, aby rozdíl mezi teplotou krevní hmoty a topného vzduchu byl po celou dobu fermentace konstantní s diferencí 5 0 V této druhé fázi fermentace se krevní hmota přemění v gumovitou konzistenci, čímž je ukončena druhá fáze fermentace.
Sušeni krevního fermentátu
[0031] Získaná fermentovaná krevní hmota se za tepla rozřeže na díly např. 10 x 10 cm. Následně se získaný krevní fermentát podrobí sušení v sušárně při teplotě 60 - 80 °C, s výhodou 70 °C . Sušení rozřezaných dílků krevního fermentátu se tak provádí v sušárně při řízeném větrání.
[0032] Míra odvětráváni vnitřní atmosféry sušárny se řídi sušicí křivkou, jejíž průběh je ukončen po 120 - 160 hodin, s výhodou po 132 - 156 hodinách na konečný obsah vlhkosti do 1 -10 % v krevním fermentátu, s výhodou 2 - 3 % vlhkosti.
Rozdružení krevního fermentátu
[0033] Vysušený krevní fermentát se následně rozdruži na velikost optimální částic 1-10 mm, s výhodou 2-4 mm, nejvhodnější pro následné technologické procesy.
Etanolická extrakce krevního fermentátu ve čtyřech fázích
[0034] Kontinuální extrakce takto získaného vysušeného krevního fermentátu se provádí stále čistým etanolem, v extraktoru Soxhletova typu, při teplotě 60 - 78 °C, s výhodou blíže k horní hranici 78 °C, v 96 % etanolu. Při vyšší teplotě se vysušený krevní fermentát lépe extrahuje.
[0035] Do extrakčního koše, s perforovaným dnem a přepadem nad úrovní extrahované látky, se vloží fermentovaná krev. Ke krevnímu fermentátu se přidá minimálně 1/3 hmotnosti 96 % etanolu, aby proběhla žádaná extrakce. Čím víc se přidá etanolu, tím rychleji a účinněji proběhne extrakce, ale s příliš velkým přebytkem etanolu se zhoršuje ekonomika extrakce a může nastat situace velkého přebytku etanolu, který se potom musí obtížně odstraňovat. Takže vysušený krevní fermentát se převrství 96 % etanolu s tím, že z celkového etanolu se cca 35 % nachází v prostoru vařáku, zbytek v extrakčním koši.
[0036] První extrakce probíhá tak, že po prvních 3-40 hodinách, s výhodou 24 hodinách extrakce se získaný první extrakt z vařáku vypustí do zásobníku extraktu, nacházející se mimo extraktor. Prostor vařáku extraktoru se poté vyčistí teplou vodou od vyloučených solí.
[0037] Do vařáku extraktoru se znovu nalije 96% etanol. Druhá a další dvě extrakce dosud nevyextrahovaného krevního fermentátu pokračuji. Extrakční proces je přerušen po 20 60 hodinách,s výhodou ve 48. hodině pro ukončeni druhé fáze extrakce, kdy se získá druhý extrakt krevního fermentátu, a dalších 50 - 90 hodinách, s výhodou ve 72. hodině pro ukončení třetí fáze extrakce, při němž se získá třetí extrakt krevního fermentátu. Při druhé i třetí extrakci se provádí stejné operace jako v první fázi extrakce, ukončené po 24 hodinách provozu extraktoru. T. j. i množství přidávaného etanolu ve třetí fázi extrakce je shodné jako u druhé fáze.
[0038] Získaný druhý i třetí extrakt krevního fermentátu se vždy po ukončení příslušné extrakce vypustí do zásobníku extraktu.
[0039] Poslední čtvrtá extrakce je ukončena ve 150 - 400 hodinách, s výhodou ve 240 hodině. Po této poslední čtvrté extrakci se poslední čtvrtý extrakt vypustí do zásobníku extraktu. Tedy, po čtyřech extrakcích se takto získají čtyři spojené extrakty krevního fermentátu v zásobníku extraktu.
[0040] Zvolené časy extrakce jsou voleny tak, aby byly optimální z hlediska získávání extraktu. Při nízkých časech jednotlivých fází extrakcí je nebezpečí nižší výtěžnosti extraktu krevního fermentátu. Při delších časech jednotlivých fází extrakcí jsou zbytečně termicky zatěžovány již vyextrahované podíly extrakce, které se musí udržovat ve vařáku extraktoru při bodu varu, aby se získaly čisté etanolové páry pro následnou extrakci.
[0041] Ideální hmotnostní poměr vložené fermentované krve k přidávanému 96 % etanolu je 1/3 - 20/1 pro všechny čtyři fáze extrakce.
[0042] Takto provedenou etanolovou extrakci se získá poměrně koncentrovaný spojený extrakt krevního fermentátu, který, např. ve srovnání s postupem dle CS 228 038 a 279 147, je 7 až 8x koncentrovanější, při stejném množství vloženého krevního fermentátu.
[0043] Tato etanolická extrakce se může provádět v ochranné inertní např. dusíkové atmosféře, čímž se vyloučí výskyt utajeného varu etanolu, popř. vzniklého extraktu, a současně se projeví kladné účinky inertní atmosféry na zejména chemickou stabilitu vyextrahovaných látek.
Stabilizace extraktu krevního fermentátu oddělením krevních solí
[0044] Takto získaný spojený extrakt krevního fermentátu se v zásobníku extraktu stabilizuje po dobu 24 hodin až 120 hodin, s výhodou 72 hodin, při teplotě okolí, z důvodu oddělení nežádoucích krevních soli, např. kyanoželeznatanů atp. Čím déle stabilizace probíhá, tím je účinnější. Stabilizace může probíhat třeba i rok, avšak je to ekonomicky nevýhodné. Nežádoucí krevní soli se následně odfiltruji nebo se odčerpá vyčeřený roztok extraktu krevního fermentátu do jiného zásobníku.
Vakuové zahuštění extraktu krevního fermentátu
[0045] Ze zásobníku extraktu se odčerpá přefiltrovaný extrakt krevního fermentátu postupně do vakuové cirkulační odparky. Zde se z extraktu odpařuje přebytečný etanol při teplotě 40 - 70 °C, s výhodou 50 - 60 °C.
...... ...... .. ..
[0046] Zahuštění se provede v poměru 1:5 -1:40, s výhodou v poměru 1:20, a to v poměru konečného zahuštěného koncentrovaného extraktu ku vloženému extraktu, tj. jedná se např.o výhodné 20 násobné zkoncentrováni extraktu krevního fermentátu. Bezprostředně po ukončení odpařování se takto zahuštěný extrakt za tepla vypustí z varného prostoru odparky do předlohy, kde se podrobí stabilizaci.
[0047] Vakuové zahušťování extraktu krevního fermentu se může provádět v ochranné inertní např. dusíkové atmosféře. Zamezí se tak vzniku utajeného varu extraktu. Inertní atmosféra podporuje zejména chemickou stabilitu vyextrahovaných látek.
Stabilizace zahuštěného extraktu krevního fermentátu oddělením krevních solí
[0048] Stabilizace získaného zahuštěného extraktu krevního fermentátu se provádí po dobu 24 - 120 hodin, s výhodou 72 hodin, při teplotě okolí. Tato stabilizace se provádí též za účelem odstranění zbylých nežádoucích podílů krevních solí, které klesnou na dno či se vylučují na stěnách stabilizační nádoby. Při stabilizaci dochází k vykrystalizování zbylých nežádoucích podílů krevních solí na dně či stěnách stabilizační nádoby. Nežádoucí krevní soli se odstraní filtrací nebo odčerpáním vyčeřeného roztoku extraktu krevního fermentátu.
Étericko - etanolická preparace zahuštěného extraktu krevního fermentátu ve třech fázích
[0049] Tento zahuštěný a stabilizovaný extrakt krevního fermentátu se následně zfíltruje od nežádoucích vyloučených krevních solí. Získaný etanolický filtrát extraktu krevního fermentátu se nalije do nádoby s vrtulovým míchadlem pro prováděni separace fosfolipidů. Preparace se provádí několikanásobným srážením extraktu krevního fermentátu 100 % diethyléterem, a vznikne sraženina obsahující bovinní hemoderivát, a roztok nad sraženinou, obsahující nežádoucí fosfolipidy, rozpustné v diethyléteru, které se od sraženiny v každé fázi preparace oddělí. Sraženina bovinní ho hemoderivátu se rozpouští v etanolu.
[0050] Podrobněji : První fáze preparace extraktu krevního fermentátu se provádí působením dietyléteru tak, že za stálého míchání se přidává po částech diethyléter, a to v poměru objemového množství 1:1 — 20:1 k zahuštěného extraktu krevního fermentátu , s výhodou v poměru dvojnásobku. Touto první fází éterické preparace extraktu krevního fermentátu se získá vyloučená sraženina bovinního hemoderivátu, který se ponechá volně sedimentovat, etanolicko-éterický roztok nad sraženinou se od sraženiny oddělí.
[0051] Druhá fáze preparace sraženiny bovinního hemoderivátu se provádí působením etanolu, která probíhá tak, že sraženina bovinního hemoderivátu z první fáze se rozpustí v 96 % etanolu, a to v takovém množství etanolu, až dojde ke kvantitativnímu rozpuštění sraženiny bovinního hemoderivátu do pravého roztoku. Vzniklý roztok se opět sráží dietyléterem do vzniku sraženiny bovinního hemoderivátu. Takto vzniklý roztok nad sraženinou se oddělí.
[0052] Ve třetí fázi preparace se použije sraženina ze druhé fáze, ta se rozpustí v 96 % etanolu, opět v množství až dojde ke vzniku roztoku a vzniklý roztok se opět sráží dietyléterem. Vzniklý roztok nad sraženinou se oddělí.
Stabilizace sraženiny bovinního hemoderivátu oddělením éterického roztoku
[0053] Takto vzniklá sraženina se stabilizuje po dobu 10-40 hodin, s výhodou 24 hodin, při teplotě 10-40 °C, s výhodou 20 - 30 °C, za účelem maximálního oddělení sraženiny bovinního hemoderivátu od dietyletheru, který obsahuje poslední podíly nežádoucích fosfolipidů. Může se stát, že předchozí operace preparace proběhla téměř kvantitativně, a žádný roztok nad sraženinou bovinního hemoderivátu ani nevznikne. Většinou však obvykle roztok dietyléteru vzniká. Případně vzniklý roztok, oddělený od sraženiny se odčerpá, a takto získaná sraženina bovinního hemoderivátu se dále zpracovává následným postupem. Ideální poměr hmotnostní vložené fermentované krve k přidávanému 96 % etanolu je 1/3 - 20/1 pro všechny čtyři fáze extrakce, v závislosti na kvalitativní variabilitě vstupní surové krve.
Vakuové zahuštění etanolicko-éterického roztoku bovinního hemoderivátu
[0054] Získaná sraženina se rozpustí v 96 % etanolu, a to v takovém množství aby vznikl roztok. Tento roztok se vloží do vakuové rotační odparky, a následně se vytěsní vzduch z odparky kombinací podtlaku a přívodem ochranné atmosféry, např. dusíkem. Na vakuové rotační odparce se ze získaného roztoku odpaří směs zbytkového dietyléteru a s částí etanolu při teplotě 25 - 40 °C, s výhodou 28 °C. Cílem tohoto odpařování je dosažení maximálního odpaření dietyléteru a minima odpařeného etanolu. Odpaření je ukončeno při nulovém obsahu diethyletheru v parách nad odpařovaným roztokem. Tento postup vlivem vysoké koncentrace etanolu v roztoku zajišťuje mikrobiální stabilitu. Zároveň prováděné odpařováni při vakuu ochraňuje účinnou látku, bovinni hemoderivát, před oxidačním vlivem vzduchu.
(00551 Takto provedené vakuové odpařování je výhodné nejen pro odstranění dietyleteru, ale současně i ochraňuje bovinni hemoderivát před termickým namáhánmt a oxidačním působením vzduchu. Vakuová atmosféra ve vakuové odparce snižuje teplotu varu odpařovaného roztoku bovinniho derivátu. Využití případné mertn. atmosféry napr.
dusíkové atmosféry v odparce zabraňuje oxidačnímu působeni kyslíku na bovm hemoderivát.
^nnnáténi odnarku bovinniho hemnderiválu v destilované vodě ,0 [0056] Získaný odparek obsahující částečné etanol se zanalyzuje na obsah etanolu a stanoví se jeho sušma, respektive stanoví se obsah sušiny bovinniho hemodenvatu. Podle tohoto obsahu sušiny se odparek zředí sterilní destilovanou vodou na roztok vo ne etanolický. Množství vody se volí tak. aby vznikla požadovaná koncentrace bovm o hemoderivátu. jako konečného výrobku, obvykie v intervalu 50 - 500 g bov.nn.ho hemoderivátu na 1 litr roztoku.
Standardizace finálního prod^Jktubg^^ (00571 Po té se takto získaný roztok ochladí na 2 -15 X. s výhodou 4 - 8 X, a odstred, se na chlazené centrifuze při 3 - 20 G, s výhodou 15 G. po dobu 30 - 90 minut, s výhodou 60 min Tím se odstraní veškeré nežádoucí nerozpuštěné látky, které vytvoř, sedrment. který se odstraní. Supernatant, roztek nad sedimentem, který obsahu,e bovm hemoderivát, se upraví roztokem etanolu jednak na koncentraci bovinniho hemodemratu r. , litr roztoku a jednak na koncentraci etano.u, obvykle v Hekalu 16-19 hmot . rmz se Získá finální výrobek. Daný obsah etanolu z^uje mikrobi stabi.itu f.natn.bo produktu.
(0058] Konečný produkt bovinniho hemoderivátu vykazuje vizuálně amorfní strukturu, diky postupu výroby podíe tohoto vynálezu, pn němž se obsah nežádoucích pr.mes. odstraň.
nebo podstatně omezí na minium.
Vedlejší operace
[0059] Lihoéterický roztok s obsahem lipidu se rektifikuje za účelem obnovy rozpouštědel.
[0060] Vyextrahovaná fermentovaná krev se vakuově vysouší též z důvodu obnovy rozpouštědla etanolu.
i > r · »<·»·♦· * * · ’
Použití bovinního hemoderivátu
[0061] Způsob výroby bovinního hemoderivátu je určen pro přípravu přírodního dietetického prostředku, jakožto doplňku stravy případně léčivo, pro zvýšeni obranyschpnosti organizmů, pro humánní a veterinární účely. Humánní oblastí se rozumí oblast výživy a farmaceutická oblast, a též oblast kosmetická. Bovinní hemoderivát může být využit v různých formách, od roztoku např. pro použití per os, injekční formou, nebo ve formě tablet, kapslí, případně ve formě krémů a pěn.
PATENTOVÉ NÁROKY
1. Způsob biotechnologické výroby bovinniho hemoderivátu,
Claims (4)
1. Způsob biotechnologické výroby bovinniho hemoderivátu,
- při němž se čerstvě odebraná zvířecí krevní hmota, a to čerstvá hovězí krev, nejprve fermentuje v několika fázích, obvykle ve dvou fázích, za zvýšené teploty topného vzduchu,
- získaný krevní fermentát se suší,
- sušený krevní fermentát se rozdruží,
- následně se provádí etanolická extrakce krevního fermentátu v několika fázích, - krevní fermentát se podrobí jednomu vakuovému zahuštování, obvykle na výslednou - koncentraci cca 20 krát vyšší než původní, s následným odstraněním nežádoucích látek,
- získaný zahuštěný extrakt se podrobí jedné éterické-preparaci, při níž se zahuštěný krevní fermentát podrobí srážením éterem, a získaná sraženina se oddělí od
- roztoku nežádoucích látek rozpuštěných v éteru,
- nakonec se provádí standardizace konečného produktu na koncentraci bovinniho hemoderivátu vévodě, vyznačující se tím, že
- při fermentaci, bezprostředně získaná zvířecí krevní hmota, přednostně hovězí krev, se vloží do vaniček s výškou hladiny krevní hmoty 2,5 - 3 cm, krevní hmota se zahřívá postupně, až dosáhne zahřívaná krev ve své hmotě teploty 55 - 65 C, s výhodou 60 °C, poté nastává druhá fáze fermentace, při níž se teplota okolního topného vzduchu sníží, z teploty kolem 80 °C v první fázi fermentace, na 65 - 75 °C, s výhodou 70 °C, a po dosaženi této teploty probíhá druhá fáze fermentace, při níž se udržuje konstantní teplotní rozdíl 5 °C mezi topným vzduchem a teplotou krevní hmoty, při ní probíhá autoenzymatické štěpení krevní, až veškerá krevní hmota přejde do gumovité konzistence krevního fermentátu,
- získaný krevní fermentát se suší při řízeném větrání dle sušicí křivky při teplotě 60 - 80 °C po dobu 120 - 160 hodin, s výhodou při teplotě 70 QC a době 140 hodin, na konečný obsah vlhkosti do 10 %, s výhodou 2-3 %, vysušený krevní fermentát se následně rozdruží na velikost částic 1 - 10 mm s výhodou 2-4 mm, rozdružený krevní fermentát se podrobí kontinuální extrakci v několika fázích, s výhodou ve 4 fázích, permanentně čistým etanolem v extraktoru Soxhletova typu, s celkovou extrakčni dobou 150 - 400 hodin, s výhodou 240 hodin, při teplotě 70 78 °C, během opakované extrakce se extrakty krevních fermentátů spojuji,
- takto získané spojené extrakty krevního fermentátu se podrobí stabilizaci tohoto fermentátu oddělením nežádoucích krevních solí, při teplotě okolí po dobu 24-120 hodin, s výhodou 72 hodin, přičemž celková doba stabilizace se míní od počátku získání posledního extraktu krevního fermentátu,
- po následném vakuovém zahuštění se stabilizovaný zahuštěný extrakt krevního fermentátu podrobí éterické preparaci v několika fázích pro získání sraženiny bovinniho homoderivátu, přičemž každá takto vzniklá sraženina se podrobí rozpouštění v etanolu v množství, až dojde ke kvantitativnímu rozpuštění bovinniho hemoderivátu do vzniku pravého roztoku bovinniho henrtoderivátu k následné éterické preparaci, a roztok nad dekantovanou sraženinou, obsahující nežádoucí fosfolipidy rozpustné v etheru, se odděluje,
- po této opakované preparaci se získaná sraženina bovinniho hemoderivátu stabilizuje za účelem odděleni zbytkového nežádoucího éteru od této sraženiny,
- takto stabilizovaná sraženina bovinniho hemoderivátu se nejdříve rozpustí v etanolu do pravého roztoku, který se následně vakuově zahušťuje při teplotě 25 - 40 °C, s výhodou při teplotě 28 °C, do získáni destilátu prostého éteru, načež se provede standardizace konečného produktu..
2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že při standardizaci konečného produktu se získaný odparek bovinniho hemoderivátu se rozpustí v destilované vodě na požadovanou koncentraci 50 - 500 g na 1 litr roztoku, získaný vodně-etanolický roztok se odstředí na chlazené centrifuze pro odstranění nerozpuštěných látek, a vzniklý supernatant po odděleni sedimentu nerozpuštěných látek se standardizuje na koncentraci bovinniho hemoderivátu 50-500 g na 1 litr roztoku a na koncentraci etanolu v rozmezí 16 - 19 % hmotn.
3. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že etanolická extrakce krevního fermentátu a/nebo vakuové zahušťování extraktu krevního fermentátu, a/nebo vakuové zahušťování etanolicko-éterického bovinního hemoderivátu probíhá v ochranné inertní atmosféře, např. dusíkové atmosféře.
4. Použití bovinního hemoderivátu ve vodnoetanolovém roztoku, s obsahem 50 - 500 g bovinního hemoderivátu na 1 litr vodnoetanolového roztoku, obsahujícího 16-19 % hmotn. etanolu, pro přípravu dietetického prostředku pro zvýšení imunity organizmu pro humánní a veterinární účely.
Priority Applications (9)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20090117A CZ303161B6 (cs) | 2009-02-26 | 2009-02-26 | Zpusob biotechnologické výroby bovinního hemoderivátu |
| PCT/CZ2010/000021 WO2010097060A2 (en) | 2009-02-26 | 2010-02-26 | A method of biotechnological production of bovine hemoderivative and use of bovine hemoderivative |
| CA2753098A CA2753098C (en) | 2009-02-26 | 2010-02-26 | A method of biotechnological production of bovine hemoderivative |
| EP10721633.5A EP2400857B1 (en) | 2009-02-26 | 2010-02-26 | A method of biotechnological production of bovine hemoderivative |
| HUE10721633A HUE029568T2 (en) | 2009-02-26 | 2010-02-26 | Process for the production of bovine blood derivatives by biotechnology |
| UAA201111307A UA106882C2 (uk) | 2009-02-26 | 2010-02-26 | Спосіб біотехнологічного одержання гемодеривату з телячої крові |
| PL10721633.5T PL2400857T3 (pl) | 2009-02-26 | 2010-02-26 | Sposób biotechnologicznego wytwarzania bydlęcej substancji krwiopochodnej |
| EA201171078A EA021229B1 (ru) | 2009-02-26 | 2010-02-26 | Биотехнологический способ получения гемодеривата из телячьей крови |
| US13/138,484 US9029079B2 (en) | 2009-02-26 | 2010-02-26 | Method of biotechnological production of bovine hemoderivative |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20090117A CZ303161B6 (cs) | 2009-02-26 | 2009-02-26 | Zpusob biotechnologické výroby bovinního hemoderivátu |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ2009117A3 true CZ2009117A3 (cs) | 2010-09-08 |
| CZ303161B6 CZ303161B6 (cs) | 2012-05-09 |
Family
ID=42470638
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20090117A CZ303161B6 (cs) | 2009-02-26 | 2009-02-26 | Zpusob biotechnologické výroby bovinního hemoderivátu |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US9029079B2 (cs) |
| EP (1) | EP2400857B1 (cs) |
| CA (1) | CA2753098C (cs) |
| CZ (1) | CZ303161B6 (cs) |
| EA (1) | EA021229B1 (cs) |
| HU (1) | HUE029568T2 (cs) |
| PL (1) | PL2400857T3 (cs) |
| UA (1) | UA106882C2 (cs) |
| WO (1) | WO2010097060A2 (cs) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2601932B2 (es) * | 2017-01-11 | 2017-05-25 | Universidade De Santiago De Compostela | Dispositivo y procedimiento para la obtención de un producto desecado a partir de sangre o derivados |
| CN118324589B (zh) * | 2024-05-22 | 2024-08-16 | 云南马龙三福科技产业有限公司 | 一种基于牛血组分的农用生物制剂及其制备方法 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE324132C (de) * | 1917-08-05 | 1920-08-20 | Georg Eichelbaum Dr | Verfahren zur Gewinnung eines geruch- und geschmacklosen Blutpulvers |
| CS228038B1 (en) * | 1981-07-10 | 1984-05-14 | Bedrich Mudr Dolezel | Production of tissue preparation |
| CZ279147B6 (cs) * | 1989-12-15 | 1995-01-18 | František Ing. Andrs | Způsob biotechnologické výroby prostředku pro harmonizaci fyzio logických procesů v organismu |
| CZ278455B6 (en) * | 1991-06-12 | 1994-01-19 | Dolezel Bedrich | Preventive, tonic and anti-sclerotic composition and process for preparing an active component thereof |
| BR0206870A (pt) * | 2001-01-30 | 2005-04-26 | Lauridsen Group Inc | Método de modulação de resposta imune de um animal, e, suplemento dietético |
| RU2301676C1 (ru) * | 2005-12-09 | 2007-06-27 | Валерий Андреевич Юрьев | Способ лечения суставных осложнений ревматических заболеваний |
-
2009
- 2009-02-26 CZ CZ20090117A patent/CZ303161B6/cs unknown
-
2010
- 2010-02-26 PL PL10721633.5T patent/PL2400857T3/pl unknown
- 2010-02-26 HU HUE10721633A patent/HUE029568T2/en unknown
- 2010-02-26 WO PCT/CZ2010/000021 patent/WO2010097060A2/en not_active Ceased
- 2010-02-26 US US13/138,484 patent/US9029079B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2010-02-26 CA CA2753098A patent/CA2753098C/en not_active Expired - Fee Related
- 2010-02-26 EA EA201171078A patent/EA021229B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2010-02-26 EP EP10721633.5A patent/EP2400857B1/en active Active
- 2010-02-26 UA UAA201111307A patent/UA106882C2/uk unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CZ303161B6 (cs) | 2012-05-09 |
| EA201171078A1 (ru) | 2012-12-28 |
| EP2400857A2 (en) | 2012-01-04 |
| PL2400857T3 (pl) | 2016-09-30 |
| US9029079B2 (en) | 2015-05-12 |
| EA021229B1 (ru) | 2015-05-29 |
| HUE029568T2 (en) | 2017-03-28 |
| EP2400857B1 (en) | 2016-03-23 |
| WO2010097060A2 (en) | 2010-09-02 |
| WO2010097060A3 (en) | 2010-10-14 |
| CA2753098A1 (en) | 2010-09-02 |
| CA2753098C (en) | 2018-01-16 |
| UA106882C2 (uk) | 2014-10-27 |
| US20120070463A1 (en) | 2012-03-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102492538A (zh) | 一种从南极磷虾中提取高磷脂含量磷虾油的方法 | |
| CN103960475A (zh) | 一种家畜抗热应激中草药添加剂 | |
| CN113088487B (zh) | 一种间充质干细胞成脂转化抑制剂 | |
| CZ2009117A3 (cs) | Zpusob biotechnologické výroby bovinního hemoderivátu a použití bovinního homoderivátu | |
| CN106070863A (zh) | 一种白及花茶及其制备方法 | |
| CN108485669A (zh) | 海藻活性提取物及其用途 | |
| KR101053640B1 (ko) | 난드롤론 생산방법 | |
| RU2739625C1 (ru) | Способ получения сухого экстракта левзеи сафроловидной для сельскохозяйственных животных и птицы (варианты) | |
| RU2767057C1 (ru) | Способ получения сухого экстракта хлореллы для сельскохозяйственных животных и птицы (варианты) | |
| CN110606899A (zh) | 一种绣球菌多糖酶解提取的方法 | |
| RU2816272C1 (ru) | Способ получения сухого экстракта пижмы обыкновенной для сельскохозяйственных животных и птиц | |
| RU2753887C1 (ru) | Способ получения сухого экстракта шлемника байкальского для сельскохозяйственных животных и птицы (варианты) | |
| RU2827223C1 (ru) | Способ получения сухого экстракта канареечника тростниковидного для сельскохозяйственных животных и птиц | |
| RU2819683C1 (ru) | Способ получения сухого экстракта гребенника обыкновенного для сельскохозяйственных животных и птиц | |
| RU2755219C1 (ru) | Способ получения сухого экстракта чабреца для сельскохозяйственных животных и птицы (варианты) | |
| RU2819676C1 (ru) | Способ получения сухого экстракта люпина узколистного для сельскохозяйственных животных и птиц | |
| CN104189262A (zh) | 溶剂法萃取茶多酚的新工艺 | |
| US2799618A (en) | Glycosidal material having activity on the heart and vascular vessels and its preparation from plant sources | |
| RU2756240C1 (ru) | Способ получения сухого экстракта солодки для сельскохозяйственных животных и птицы (варианты) | |
| RU2785166C1 (ru) | Способ получения сухого экстракта череды трехраздельной для сельскохозяйственных животных и птицы | |
| RU2753886C1 (ru) | Способ получения сухого экстракта рябины обыкновенной для сельскохозяйственных животных и птицы (варианты) | |
| RU2755220C1 (ru) | Способ получения сухого экстракта расторопши пятнистой для сельскохозяйственных животных и птицы (варианты) | |
| RU2756239C1 (ru) | Способ получения сухого экстракта шиповника для сельскохозяйственных животных и птицы (варианты) | |
| RU2753885C1 (ru) | Способ получения сухого экстракта родиолы розовой для сельскохозяйственных животных и птицы (варианты) | |
| KR101335788B1 (ko) | 해동드립을 이용한 생천마 발효추출물을 제조하는 방법 |