CZ2016119A3 - Fotoaktivovatelná nanočástice pro fotodynamické aplikace, způsob její přípravy, farmaceutická kompozice ji obsahující a jejich použití - Google Patents
Fotoaktivovatelná nanočástice pro fotodynamické aplikace, způsob její přípravy, farmaceutická kompozice ji obsahující a jejich použití Download PDFInfo
- Publication number
- CZ2016119A3 CZ2016119A3 CZ2016-119A CZ2016119A CZ2016119A3 CZ 2016119 A3 CZ2016119 A3 CZ 2016119A3 CZ 2016119 A CZ2016119 A CZ 2016119A CZ 2016119 A3 CZ2016119 A3 CZ 2016119A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- nanoparticle
- photoactivatable
- temoporfin
- photosensitizer
- fatty alcohol
- Prior art date
Links
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 title claims abstract description 60
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 12
- 239000003504 photosensitizing agent Substances 0.000 claims abstract description 45
- 150000002191 fatty alcohols Chemical class 0.000 claims abstract description 23
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 claims abstract description 17
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims abstract description 16
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims abstract description 15
- -1 poly(ethylene oxide) Polymers 0.000 claims abstract description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 66
- LYPFDBRUNKHDGX-SOGSVHMOSA-N N1C2=CC=C1\C(=C1\C=CC(=N1)\C(=C1\C=C/C(/N1)=C(/C1=N/C(/CC1)=C2/C1=CC(O)=CC=C1)C1=CC(O)=CC=C1)\C1=CC(O)=CC=C1)C1=CC(O)=CC=C1 Chemical group N1C2=CC=C1\C(=C1\C=CC(=N1)\C(=C1\C=C/C(/N1)=C(/C1=N/C(/CC1)=C2/C1=CC(O)=CC=C1)C1=CC(O)=CC=C1)\C1=CC(O)=CC=C1)C1=CC(O)=CC=C1 LYPFDBRUNKHDGX-SOGSVHMOSA-N 0.000 claims description 57
- 229960002197 temoporfin Drugs 0.000 claims description 57
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 claims description 20
- 238000002428 photodynamic therapy Methods 0.000 claims description 18
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 17
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 9
- 238000002844 melting Methods 0.000 claims description 9
- 230000008018 melting Effects 0.000 claims description 9
- 238000000113 differential scanning calorimetry Methods 0.000 claims description 7
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 7
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims description 6
- LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N Dimethyl ether Chemical class COC LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 150000004032 porphyrins Chemical class 0.000 claims description 5
- 238000000576 coating method Methods 0.000 claims description 4
- 239000000374 eutectic mixture Substances 0.000 claims description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000002902 bimodal effect Effects 0.000 claims description 3
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 claims description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 3
- 229910001873 dinitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- PHOKTTKFQUYZPI-UHFFFAOYSA-N hypericin Natural products Cc1cc(O)c2c3C(=O)C(=Cc4c(O)c5c(O)cc(O)c6c7C(=O)C(=Cc8c(C)c1c2c(c78)c(c34)c56)O)O PHOKTTKFQUYZPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- BTXNYTINYBABQR-UHFFFAOYSA-N hypericin Chemical compound C12=C(O)C=C(O)C(C(C=3C(O)=CC(C)=C4C=33)=O)=C2C3=C2C3=C4C(C)=CC(O)=C3C(=O)C3=C(O)C=C(O)C1=C32 BTXNYTINYBABQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229940005608 hypericin Drugs 0.000 claims description 3
- 229910052738 indium Inorganic materials 0.000 claims description 3
- APFVFJFRJDLVQX-UHFFFAOYSA-N indium atom Chemical compound [In] APFVFJFRJDLVQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- SSKVDVBQSWQEGJ-UHFFFAOYSA-N pseudohypericin Natural products C12=C(O)C=C(O)C(C(C=3C(O)=CC(O)=C4C=33)=O)=C2C3=C2C3=C4C(C)=CC(O)=C3C(=O)C3=C(O)C=C(O)C1=C32 SSKVDVBQSWQEGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000010926 purge Methods 0.000 claims description 3
- 238000001757 thermogravimetry curve Methods 0.000 claims description 3
- ZQFGRJWRSLZCSQ-ZSFNYQMMSA-N verteporfin Chemical compound C=1C([C@@]2([C@H](C(=O)OC)C(=CC=C22)C(=O)OC)C)=NC2=CC(C(=C2C=C)C)=NC2=CC(C(=C2CCC(O)=O)C)=NC2=CC2=NC=1C(C)=C2CCC(=O)OC ZQFGRJWRSLZCSQ-ZSFNYQMMSA-N 0.000 claims description 3
- 229960003895 verteporfin Drugs 0.000 claims description 3
- PYKYMHQGRFAEBM-UHFFFAOYSA-N anthraquinone Natural products CCC(=O)c1c(O)c2C(=O)C3C(C=CC=C3O)C(=O)c2cc1CC(=O)OC PYKYMHQGRFAEBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000004056 anthraquinones Chemical class 0.000 claims description 2
- 230000000181 anti-adherent effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000003086 colorant Substances 0.000 claims description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 claims description 2
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 claims description 2
- WIQKYZYFTAEWBF-UHFFFAOYSA-L motexafin lutetium hydrate Chemical compound O.[Lu+3].CC([O-])=O.CC([O-])=O.C1=C([N-]2)C(CC)=C(CC)C2=CC(C(=C2C)CCCO)=NC2=CN=C2C=C(OCCOCCOCCOC)C(OCCOCCOCCOC)=CC2=NC=C2C(C)=C(CCCO)C1=N2 WIQKYZYFTAEWBF-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 2
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 claims description 2
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 claims description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 claims description 2
- 229920001610 polycaprolactone Polymers 0.000 abstract description 14
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 abstract description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 42
- 239000002047 solid lipid nanoparticle Substances 0.000 description 39
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 26
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 25
- HLZKNKRTKFSKGZ-UHFFFAOYSA-N tetradecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCO HLZKNKRTKFSKGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 18
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 13
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 12
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 12
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 12
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 11
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 9
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 9
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 9
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 7
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 7
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 6
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 6
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 5
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 5
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 5
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 5
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 5
- PAPBSGBWRJIAAV-UHFFFAOYSA-N ε-Caprolactone Chemical compound O=C1CCCCCO1 PAPBSGBWRJIAAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 4
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 4
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 4
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 4
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 4
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 4
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003917 TEM image Methods 0.000 description 3
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 3
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 3
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 3
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 3
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 3
- 230000004960 subcellular localization Effects 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 3
- RUVJFMSQTCEAAB-UHFFFAOYSA-M 2-[3-[5,6-dichloro-1,3-bis[[4-(chloromethyl)phenyl]methyl]benzimidazol-2-ylidene]prop-1-enyl]-3-methyl-1,3-benzoxazol-3-ium;chloride Chemical compound [Cl-].O1C2=CC=CC=C2[N+](C)=C1C=CC=C(N(C1=CC(Cl)=C(Cl)C=C11)CC=2C=CC(CCl)=CC=2)N1CC1=CC=C(CCl)C=C1 RUVJFMSQTCEAAB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 2
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 2
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 235000017168 chlorine Nutrition 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 238000001938 differential scanning calorimetry curve Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 2
- 230000002977 hyperthermial effect Effects 0.000 description 2
- 239000006207 intravenous dosage form Substances 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 2
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 239000000155 melt Substances 0.000 description 2
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 1-Octanol Chemical compound CCCCCCCCO KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HMUNWXXNJPVALC-UHFFFAOYSA-N 1-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]-2-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)N1CCN(CC1)C(CN1CC2=C(CC1)NN=N2)=O HMUNWXXNJPVALC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PZNPLUBHRSSFHT-RRHRGVEJSA-N 1-hexadecanoyl-2-octadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[C@@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PZNPLUBHRSSFHT-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- VYYZMIPOAWOHAI-UHFFFAOYSA-N 5-amino-2-methoxybenzenesulfonamide Chemical compound COC1=CC=C(N)C=C1S(N)(=O)=O VYYZMIPOAWOHAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IWHLYPDWHHPVAA-UHFFFAOYSA-N 6-hydroxyhexanoic acid Chemical compound OCCCCCC(O)=O IWHLYPDWHHPVAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007592 Apolipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010071619 Apolipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- CKDZWMVGDHGMFR-UHFFFAOYSA-N Buttersaeure-cholesterylester Natural products C12CCC3(C)C(C(C)CCCC(C)C)CCC3C2CC=C2C1(C)CCC(OC(=O)CCC)C2 CKDZWMVGDHGMFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035484 Cellulite Diseases 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 206010020843 Hyperthermia Diseases 0.000 description 1
- YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N Ketamine Chemical compound C=1C=CC=C(Cl)C=1C1(NC)CCCCC1=O YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 102000000853 LDL receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010001831 LDL receptors Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- ZFMITUMMTDLWHR-UHFFFAOYSA-N Minoxidil Chemical compound NC1=[N+]([O-])C(N)=CC(N2CCCCC2)=N1 ZFMITUMMTDLWHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CCORPVHYPHHRKB-NXUCFJMCSA-N O-Propionyl-cholesterin Natural products C([C@@H]12)C[C@]3(C)[C@@H]([C@H](C)CCCC(C)C)CC[C@H]3[C@@H]1CC=C1[C@]2(C)CC[C@H](OC(=O)CC)C1 CCORPVHYPHHRKB-NXUCFJMCSA-N 0.000 description 1
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010049752 Peau d'orange Diseases 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 206010040914 Skin reaction Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000000102 Squamous Cell Carcinoma of Head and Neck Diseases 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 1
- CKDZWMVGDHGMFR-GTPODGLVSA-N [(3s,8s,9s,10r,13r,14s,17r)-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl] butanoate Chemical compound C([C@@H]12)C[C@]3(C)[C@@H]([C@H](C)CCCC(C)C)CC[C@H]3[C@@H]1CC=C1[C@]2(C)CC[C@H](OC(=O)CCC)C1 CKDZWMVGDHGMFR-GTPODGLVSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 238000012382 advanced drug delivery Methods 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 201000008274 breast adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 238000000423 cell based assay Methods 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000007248 cellular mechanism Effects 0.000 description 1
- 210000003850 cellular structure Anatomy 0.000 description 1
- 230000036232 cellulite Effects 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008045 co-localization Effects 0.000 description 1
- 238000005354 coacervation Methods 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 229940097362 cyclodextrins Drugs 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 238000012631 diagnostic technique Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 239000013583 drug formulation Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000007306 functionalization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 201000000459 head and neck squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000036031 hyperthermia Effects 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229960003299 ketamine Drugs 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 239000002960 lipid emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000004973 liquid crystal related substance Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- OHSVLFRHMCKCQY-UHFFFAOYSA-N lutetium atom Chemical compound [Lu] OHSVLFRHMCKCQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012792 lyophilization process Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 1
- 229940057917 medium chain triglycerides Drugs 0.000 description 1
- 238000011034 membrane dialysis Methods 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 229960003632 minoxidil Drugs 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 239000006186 oral dosage form Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000006320 pegylation Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 description 1
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- 150000008105 phosphatidylcholines Chemical class 0.000 description 1
- 230000000258 photobiological effect Effects 0.000 description 1
- 208000017983 photosensitivity disease Diseases 0.000 description 1
- 231100000434 photosensitization Toxicity 0.000 description 1
- 231100000760 phototoxic Toxicity 0.000 description 1
- 229920000058 polyacrylate Polymers 0.000 description 1
- 229920002721 polycyanoacrylate Polymers 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 208000023958 prostate neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 208000020016 psychiatric disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 238000007151 ring opening polymerisation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007142 ring opening reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 230000035483 skin reaction Effects 0.000 description 1
- 231100000430 skin reaction Toxicity 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008347 soybean phospholipid Substances 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 239000012798 spherical particle Substances 0.000 description 1
- 238000010972 statistical evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002110 toxicologic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 239000006163 transport media Substances 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 229910052724 xenon Inorganic materials 0.000 description 1
- FHNFHKCVQCLJFQ-UHFFFAOYSA-N xenon atom Chemical compound [Xe] FHNFHKCVQCLJFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
- A61K41/0057—Photodynamic therapy with a photosensitizer, i.e. agent able to produce reactive oxygen species upon exposure to light or radiation, e.g. UV or visible light; photocleavage of nucleic acids with an agent
- A61K41/0071—PDT with porphyrins having exactly 20 ring atoms, i.e. based on the non-expanded tetrapyrrolic ring system, e.g. bacteriochlorin, chlorin-e6, or phthalocyanines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
- A61K41/0057—Photodynamic therapy with a photosensitizer, i.e. agent able to produce reactive oxygen species upon exposure to light or radiation, e.g. UV or visible light; photocleavage of nucleic acids with an agent
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
- A61K41/0057—Photodynamic therapy with a photosensitizer, i.e. agent able to produce reactive oxygen species upon exposure to light or radiation, e.g. UV or visible light; photocleavage of nucleic acids with an agent
- A61K41/0076—PDT with expanded (metallo)porphyrins, i.e. having more than 20 ring atoms, e.g. texaphyrins, sapphyrins, hexaphyrins, pentaphyrins, porphocyanines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
- A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
- A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/5123—Organic compounds, e.g. fats, sugars
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
- A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
- A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/513—Organic macromolecular compounds; Dendrimers
- A61K9/5146—Organic macromolecular compounds; Dendrimers obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, polyamines, polyanhydrides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Dermatology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Description
Fotoaktivovatelná nanočástice pro fotodynamické aplikace, způsob její přípravy, farmaceutická kompozice ji obsahující a jejich použití
Oblast techniky
Předkládaný vynález se týká fotoaktivovatelných nanočástic pro fotodynamické aplikace, způsobu jejich přípravy, farmaceutické kompozice je obsahující a jejich použití jako léčiva při fotodynamické terapii.
Dosavadní stav techniky
Fotodynamická terapie (photodynamic therapy, PDT) je relativně novou metodou léčby různých onemocnění, zaměřenou zejména na léčbu nádorů, např. spinocelulámího karcinomu hlavy a krku. PDT spočívá v kombinaci fotosenzibilizátoru (photosensitizer, PS), molekuly kyslíku a následného laserového ozáření nádorových lézí. Po laserovém ozáření nádoru absorbují molekuly fotosenzibilizátoru fotony světla a následně excitují kyslík za vzniku singletového kyslíku, který je vysoce destruktivní kvůli poškození buněčných struktur, jako jsou DNA nebo membrány v blízkém okolí. Účinnost PDT z větší části závisí na fotochemických, fotobiologických a fototerapeutických vlastnostech PS. Kritickým faktorem je formulace PS, která zajišťuje, že účinek je selektivně zaměřen na cílovou nádorovou tkáň. PDT je výhodným způsobem léčby nejen v nádorových, i v mnoha nenádorových aplikacích, např. v kosmetice, kde se fotosenzibilizátor kombinuje s biologickým výplňovým materiálem (zahrnujícím kolagen, kyselinu hyaluronovou a další syntetické nebo přírodní produkty) a formulace se následně vstřikuje do ošetřovaného místa (US20110021973 AI). PDT se využívá i jako způsob ošetření nežádoucí celulitidy (US8414880 B2) či při prevenci a léčení vaskulárních nebo zánětlivých chorob (US20090306032 AI), kde autoři popisují pevné lipidické nanočástice získané mikroemulzifikací za tepla, obsahující cholesteryl-propionát a/nebo cholesteryl butyrát.
Nanomedicína je rychle se rozvíjející oblastí lékařského výzkumu, která je zaměřena zejména na vývoj nanočástic (nanoparticles, NPs) pro profylaktické, diagnostické a terapeutické aplikace. V oblasti farmacie je obecně velikost nanočástic obvykle definována v rozsahu 1 nm až 1000 nm. Nanomedicína funguje na stejném principu jako mnoho biologických procesů a buněčných mechanismů. Fotosenzibilizátory inkorporované v nanočásticích poskytují velice slibný přístup v řešení jak problému biodostupnosti, tak cíleného transportu do nádorové tkáně. Metody a postupy pro syntézu, funkcionalizaci a použití NPs jsou dnes široce studovány a představují nové strategie pro molekulární cílení, individuální terapii a minimálně invazivní diagnostické techniky.
Obecně jsou PS podávány pacientovi různými cestami, např., topicky (US20090081281 AI), perorálně (US20100273803 AI) nebo intravenózně, přičemž každá má své výhody a nevýhody. Zejména intravenózní podání je problematické, protože mnoho PS jsou hydrofóbní nebo amfifilní látky obvykle nerozpustné ve vodě. V některých případech jsou PS (zejména temoporfin) podávány v alkoholickém roztoku (ethanol, propylenglykol). Pro PDT byly testovány zejména porfyriny a chloriny. Temoporfin (Biolitec Pharma, Skotsko, Spojené království) byl v EU schválen pro paliativní nádory hlavy a krku, nádory prostaty a pankreatu (US20060040912 AI).
Povrchově stabilizované pevné lipidické nanočástice (solid lipid nanoparticles, SLNP) s nekovalentně vázaným léčivem představují nový typ formulace léčiv. V krevním řečišti tyto SLNP po adhezi na apolipoproteiny napodobují lipoproteiny s nízkou hustotou (low-densitylipoprotein, LDL), přepravující lipidy do tkání. Receptory LDL jsou nadměrně exprimovány na povrchu mnoha nádorových buněk (Kretzer, lara F., Durvanei A. Maria, and Raul C. Maranhao. 2012. Cellular Oncology 35 (6): 451-60; Huntosova, Veronika, Diana Buzova, Dana Petrovajova, Peter Kasak, Zuzana Nadova, Daniel Jancura, Franck Sureau, and Pavol Miskovsky. 2012. International Journal of Pharmaceutics 436 (1-2): 463-71), což vede k cílenému doručení léčiva do nádoru. Pro specifické doručení PS co možná nejblíže k nádorové tkáni je potřebné potlačit mechanizmy omezující účinnost PDT. Z důvodu akumulace PS vedoucí k nežádoucí fotosenzibilizaci celého povrchu těla pacientů je kůže rozhodujícím orgánem (Moore, Caroline M., Mark Emberton, and Stephen G. Bown. 2011. Lasers in Surgery and Medicine. 3:768-75). SLNP jsou tedy účinným systémem podávání léčiv zlepšujících biologickou dostupnost i pro látky špatně rozpustné ve vodě. Formulace na bázi SLNP poskytují obecně vyšší biodostupnost a vyšší terapeutický efekt in vitro a in vivo v porovnání s komerčními formulacemi, zejména pro použití pro intravenózní lékovou aplikační formu.
US5250236 popisuje pevné lipidické sférické částice, které mají průměr menší než jeden mikrometr. Lipidové částice byly získány přidáním zahřátých lipidů (nad bodem tání) do směsi složené z vody, surfaktantu a kosurfatantu.
Patentová přihláška WO 1993005768 AI popisuje systém dopravy léčiv založený na pevných částicích lipidických materiálů nebo jejich směsí, s průměrem od 10 nm do 10 μιη. Poskytují delší dobu řízeného uvolňování účinné látky a umožňují inkorporaci hydrofilních léčiv do pevného jádra částice.
US20080090803 AI popisuje kovalentní konjugáty mastných alkoholů a farmaceutických nosičů pro léčbu nádorových a virových onemocnění a psychiatrických poruch.
US20060127471 AI popisuje přípravu lipozomálních formulací, obsahujících hydrofobní fotosenzibilizátor (temoporfin) a jejich použití v terapii, zejména za použití intravenózní aplikace. Fosfolipidy jsou modifikovány PEGylací (obsahují polyethylenoxid jako nedílnou součást). Vzniklé PEGylované liposomy obsahují hydrofobní fotosenzibilizátor uvnitř membrány. Tento mechanismus dopraví fotosenzibilizátor do buněčné membrány systému přímo do místa působení.
US7354599 B2 popisuje farmaceutické liposomální formulace pro PDT, které obsahují hydrofobní fotosenzibilizátor porfyrinového typu (temoporfin), monosacharid (fruktózu a glukózu) a jeden nebo více syntetických fosfolipidů. Díky lyofilizačnímu procesu jsou vzniklé formulace při skladování stabilní a vhodné pro intravenózní podání.
US8709449 B2 popisuje formulaci zvyšující účinnost PDT a snižující fototoxické reakce pokožky zapříčiněné PDT. Lipidová emulze obsahuje sójový olej, triglyceridy se středně dlouhým řetězcem a fosfolipidy z vajec jako hydrofobní složky. PS je vybrán ze skupiny porfyrinů, ftalocyaninů, metalografitových derivátů, barviv a syntetických fotosenzibilizátorů.
US20080311214 AI popisuje modifikované lipidické nano/ mikročástice, které na svém povrchu obsahují molekulu nebo ligand zaměřující se na specifické vazebné místo a jejich použití pro perorální podání léčiv a antigenů.
Patentová přihláška WO 2006069985 A2 popisuje metody přípravy nanočástic na bázi lipidů pomocí homogenizace za účelem inkorporace sloučeniny do už předem připravených nanočástic pomocí duální asymetrické odstředivky.
Patentová přihláška WO 2010112749A1 popisuje způsob přípravy a složení suspenzí pevných lipidických nanočástic ve vodné fázi, obsahujících minoxidil v lipidové matrici (mono-, di- a triglyceridy neobsahující kyselinu stearovou). SLNP obsahují alespoň jednu amfifilní sloučeninu vybranou z fosfolipidů (sojový lecitin, složený převážně z fosfatidylcholinů). SLNP obsahují zejména fosfatidylcholin, lecitin a jeden nebo více surfaktantů (vybraných z esterů mastných kyselin se sorbitany) a vodnou fázi (obsahující vodu, propylenglykol a popřípadě ethanol). Autoři se zaměřují na kosmetické a farmaceutické využití.
Patentová přihláška WO 2011116963 A2 popisuje systém dopravy léčiv pomocí SLNP, které jako lipidické nosiče obsahují alespoň jednu účinnou látku a jsou potaženy polymery. Účinná látka je vybrána ze skupiny kosmetických, farmaceutických a/ nebo alimentárních účinných látek a/nebo pomocných látek. Polymery (připravené jednoduchou nebo komplexní koacervací) jsou vybrány ze skupiny proteinů, polysacharidů, polyesterů, polyakrylátů, polykyanoakrylátů a/nebo jejich směsí.
US5785976 A popisuje přípravu koloidních suspenzí pevných lipidických částic anizometrických tvarů s lipidovou matricí, která je ve stabilní polymorfní modifikaci. Dále obsahují suspenzi mikro- a submikronových částic bioaktivních látek. Tyto suspenze byly připraveny především pro parenterální podání, které je velmi výhodné pro bioaktivní látky špatně rozpustné ve vodě, zejména léčiva, a jejich použití v kosmetickém, potravinářském a zemědělském průmyslu.
US4880634 A popisuje lipidické nano-pelety obsahující farmakologicky účinné látky, jejichž velikost je v rozmezí od 50 do 1000 nm, a mohou být použity jako pomocné látky v systému dopravy léčiv pro perorální podání.
Pro výběr vhodného typu nanočástic jako transportního média umožňujícího cílenou aplikaci příslušné aktivní farmaceutické ingredience je nutné zvážit i všechny nevýhody a omezení příslušného systému. V případě liposomů použití vysokoenergetického ultrazvuku při přípravě často způsobuje oxidaci a degradaci fosfolipidů (T. P. Chelvi and R. Ralhan, International Journal of Hyperthermia, vol. 11, no. 5, pp. 685-695, 1995; S. Batzri and E. D. Korn, Biochimica et Biophysica Acta-Biomembranes, vol. 298, no. 4, pp. 1015-1019, 1973; J. J. Escobar-Chavez, Skin, vol. 19, p. 22, 2012; M. R. Mozafari, Cellular and Molecular Biology Letters, vol. 10, no. 4, pp. 711-719, 2005). U micel a liposomů je dále např. riziko rozpadu transportního systému ihned po podání kvůli nedostatečné stabilitě (M. Malmsten, Soft Matter, vol. 2, no. 9, pp. 760-769, 2006). Pro systémy využívající enkapsulaci do cyklodextrinů byla prokázána dráždivost a tím obavy o bezpečnost a omezení jejich použití pro parenterální podávání (R. A. Rajewski and V. J. Stella, Journal of Pharmaceutical Sciences, vol. 85, no. 11, pp. 1142-1169, 1996; A. F. Soares, R. D. A. Carvalho, and F. Veiga, Nanomedicine, vol. 2, no. 2, pp. 183-202, 2007). U tekutých krystalů jsou kvůli jejich vysoké viskozitě problémy s přípravou a podáním a dále vykazují toxicitu kvůli vysokému obsahu surfaktantů (M. Malmsten, Soft Matter, vol. 2, no. 9, pp. 760-769, 2006; P. S. Prestes, M. Chorilli, L. A. Chiavacci, Μ. V. Scarpa, and G. R. Leonardi, Journal of Dispersion Science and Technology, vol. 31, no. 1, pp. 117-123, 2009; M. Ruckert and G. Otting, Journal of the American Chemical Society, vol. 122, no. 32, pp. 7793-7797, 2000). Pro různé typy nanočástic mohou být stěžejní i jiné charakteristiky, např. způsob podání léčiva, koloidní stabilita a interakce s krevními bílkovinami, biodegradabilita nosiče, nízká inkorporace a adsorpce léčivé látky, složitý vývoj metodik pro kontrolu kvality transportního systému, problémy se stabilitou po dobu skladování, toxikologické testy některých typů nanočástic nejsou zcela ukončeny a často je potřeba zvýšení efektivity výroby (W. Mehnert and K. Mader, Advanced Drug Delivery Reviews, vol. 47, no. 23, pp. 165-196, 2001; E. B. Souto, P. Severino, Μ. H. A. Santana, and S. C. Pinho, Quimica
Nova, vol. 34, no. 10, pp. 1762-1769, 2011).
Podstata vynálezu
Předkládaný vynález poskytuje plně biologicky odbouratelnou formulaci fotoaktivovatelných nanočástic pro fotodynamické aplikace s minimálními vedlejšími účinky. Je založen na pevných lipidických nanočásticích (SLNP) fotosenzibilizátoru a mastných alkoholů, přičemž povrch těchto pevných lipidických nanočástic je stabilizován netoxickým povrchově aktivním polymerem, například kopolymerem polyethylenoxid monomethyléter-ů/oc£-poly(ekaprolaktonem), který zabraňuje zachycování SNLP do retikuloendoteliálního systému. Mastné alkoholy jsou potom při metabolizaci plně odbouratelné β-oxidací, zatímco povrchově aktivní kopolymer je také sám o sobě biologicky odbouratelný na kyselinu 6-hydroxyhexanovou a polyethylenoxid a na základě relativně nízké molekulové hmotnosti jsou oba typy fragmentů odstranitelné ledvinami. SLNP jsou při skladovací teplotě 4 °C pevné, stabilní a nepodléhají agregaci. Teplota tání jádra je 39 °C, což umožňuje uvolňování fotosenzibilizátoru v nádoru kontrolovaným způsobem v důsledku intenzivního hypertermického metabolismu.
Předmětem předkládaného vynálezu je fotoaktivovatelná nanočástice pro fotodynamické aplikace, obsahující jádro a obal, jejíž jádro obsahuje 1 až 50 hmotu. % fotosenzibilizátoru, vztaženo na celkovou sušinu nanočástice, s výhodou 1 až 4 hmotn. % fotosenzibilizátoru, vztaženo na celkovou sušinu nanočástice, a dále 1 až 80 hmotn. % (C8 až C22) mastných alkoholů, vztaženo na celkovou sušinu nanočástice, s výhodou 12 až 72 hmotn. % (C8 až C22) mastných alkoholů, vztaženo na celkovou sušinu nanočástice; a obal obsahuje 1 až 80 hmotn. % polymemího surfaktantu, s výhodou polyethylenoxid monomethyléter-WocA:-poly(ekaprolaktonu), vztaženo na celkovou sušinu nanočástice, s výhodou obal obsahuje 14 až 72 hmotn. % polymemího surfaktantu, vztaženo na celkovou sušinu nanočástice; přičemž velikost nanočástice je v rozmezí od 1 do 1000 nm, s výhodou v rozmezí od 11 do 760 nm, nej výhodněji v rozmezí od 11 do 30 nm, a přičemž jádro nanočástice je při 4 °C pevné a při 39 °C kapalné, stanoveno diferenční skenovací kalorimetrií s proplachováním plynným dusíkem o objemu 50 cm3/min za použití india jako standardu v teplotních cyklech: ohřev - chlazení - ohřev, při 5 °C/min, a odečet teplot tání byl proveden z první křivky ohřevu diferenční skenovací kalorimetrie, kdy výsledkem byl bimodální termogram se dvěma endotermami, jednou pro eutektickou směs fotosenzibilizátoru a mastného alkoholu a druhou pro mastný alkohol.
Začlenění temoporfinu do lipidové matrice má vede k teplotě tání kolem 26 °C, kdy taje eutektická směs fotosenzibilizátoru a (C8 až C22) mastného alkoholu, a mezi 35 a 39 °C, s výhodou mezi 37 a 39 °C, nejvýhodněji kolem 39 °C, kdy taje samotný PS. Znamená to, že v lipidovém jádře existují dvě fáze, obsahující fotosenzibilizátor a (C8 až C22) mastný alkohol. Toto složení umožňuje stabilitu pevných lipidických nanočástic při skladování při teplotě 4 °C a zároveň teplotu tání jádra při 39 °C.
Ve výhodném provedení je fotosenzibilizátor vybraný z derivátů chlorinu a/nebo porfyrinu a/nebo antrachinonu, výhodněji je fotosenzibilizátor vybraný ze skupiny zahrnující temoporfin, verteporfin, lutecium texafyrin, hypericin a porficen.
V jednom provedení vynálezu obsahuje jádro fotoaktivovatelné nanočástice jeden typ (C8 až C22) mastného alkoholu, s výhodou je mastným alkoholem (Cm) mastný alkohol.
V jiném provedení vynálezu obsahuje jádro fotoaktivovatelné nanočástice kombinaci (C8 až C22) mastných alkoholů.
V jednom provedení vynálezu je polymemím surfaktantem polyethylenoxid monomethyléterů/ock-poly(s-kaprolakton), s výhodou o polymerizačním stupni polyethylenoxidového bloku 10 až 100 a o polymerizačním stupni poly(E-kaprolaktonového) bloku 3 až 60, výhodněji je polymerizační stupeň polyethylenoxidového bloku 20 až 50 a poly(E-kaprolaktonového) bloku 3 až 20, nejvýhodněji je polymerizační stupeň polyethylenoxidového bloku 45 a poly(skaprolaktonového) bloku 7.
Předmětem předkládaného vynálezu je rovněž způsob přípravy fotoaktivovatelné nanočástice podle předkládaného vynálezu, kdy:
- fotosenzibilizátor se rozpustí v rozpouštědle, s výhodou v dichlormethanu, a přidá se k (C8 až C22) mastnému alkoholu zahřátému na 45 °C za vzniku první fáze;
- polymerní surfaktant se rozpustí v organickém rozpouštědle, s výhodou v dichlormethanu, přidá se voda a směs se zahřeje na 45 °C za vzniku druhé fáze;
- obě zahřáté fáze se smíchají a homogenizují, s výhodou po dobu 2 min při 8000 otáčkách/min;
- výsledná emulze se podrobí působení ultrazvuku;
- výsledná emulze se ochladí na laboratorní teplotu.
Působení ultrazvuku lze provádět například při laboratorní teplotě a amplitudě ultrazvuku mezi 50 % a 75 %, s výhodou při amplitudě ultrazvuku 50 % po dobu 35 min a potom při amplitudě ultrazvuku 70 % po dobu 5 min.
Předmětem předkládaného vynálezu je rovněž farmaceutická kompozice, která obsahuje fotoaktivovatelnou nanočástici podle předkládaného vynálezu, a dále obsahuje farmaceuticky přijatelné přísady, vybrané ze skupiny zahrnující antiadheziva, pojivá, potahovací látky, barviva, bobtnadla, ochucovadla, maziva, konzervanty, sladidla, sorbenty.
Předmětem předkládaného vynálezu je rovněž fotoaktivovatelná nanočástice podle předkládaného vynálezu a/nebo farmaceutická kompozice podle předkládaného vynálezu pro použití jako léčivo.
Předmětem předkládaného vynálezu je rovněž fotoaktivovatelná nanočástice podle předkládaného vynálezu a/nebo farmaceutická kompozice podle předkládaného vynálezu pro použití jako léčivo pro intravenózní aplikaci. Intravenózní aplikací se rozumí vpravení tekuté formy léčiva přímo do žíly nebo tepny pacienta.
Předmětem předkládaného vynálezu je rovněž fotoaktivovatelná nanočástice podle předkládaného vynálezu a/nebo farmaceutická kompozice podle předkládaného vynálezu pro použití při fotodynamické terapii a/nebo fotodynamické diagnostice.
Předkládaný vynález systému pevných lipidických nanočástic poskytuje řešení k překonání všech výše zmíněných omezení ze stavu techniky, jako je např. jednoduchá příprava, stabilita po dobu skladování, jádro nanočástice je při skladovací teplotě (4 °C) pevné, stabilní a nepodléhá agregaci při fyziologickém pH (pH ~ 7,4), přičemž teplota tání jádra 39 °C umožňuje uvolňování fotosenzibilizátoru v nádoru kontrolovaným způsobem v důsledku intenzivního hypertermického metabolismu. Nanosystém o jedinečném složení je plně biodegradovatelný a poskytuje zvýšení biodostupnosti a terapeutického efektu in vitro a in vivo (porovnaní s komerční formulací). Použití nanoformulace je jak pro perorální, tak intravenózní lékovou aplikační formu.
Stručný popis obrázků
Obrázek 1: ’H-NMR spektrum kopolymeru polyethylenoxid-6/ock-poly(c-kaprolakton), (PEO-ůPCL). Intenzity protonových signálů označených: a (δ = 3,63 ppm, odpovídá PEO bloku) a c (δ = 1,64 ppm, odpovídá bloku PCL) v *H-NMR spektru.
Obrázek 2: Termogramy DSC analýzy vzorků bez obsahu temoporfinu (označeny jako SLNP s příslušným PEOxPCLy), s inkorporovaným temoporfinem (připraveny dle Příkladů 1, 2 a 3) a čistý temoporfin (10 až 20 mg).
Obrázek 3: Transmisní elektronové mikrografy vzorků pevných lipidických nanočástic s inkorporovaným temoporfinem, připravených dle Příkladů 1, 2 a 3.
Obrázek 4: Časový profil in vitro uvolňování temoporfinu (%) z pevných lipidických nanočástic připravených dle Příkladů 1, 2 a 3, při pH 7,4. Data jsou vyjádřena jako průměr ± SD (n = 3).
Obrázek 5: Vliv „one-shot“ PDT na růst lidského karcinomu prsu linie MDA-MB-231. Skupině Nu/Nu myší (n=5) byly intravenózně aplikovány formulace pevných lipidických nanočástic s inkorporovaným temoporfinem připravených dle Příkladů 1, 2, 3 (dávka temoporfinu 0,8 mg/kg myš, i.v.), které jsou ve srovnání s neléčenou skupinou myší (v grafech jako kontrolní skupina) a v porovnání s komerční formulací (Originátor, 4 mg temoporfinu, 376 mg ethanolu a 560 mg propylenglykolu). Tři hodiny po podání byly nádorové oblasti ozářeny (100 J/cm2) a následně byly v pravidelných intervalech měřeny velikosti nádoru.
Obrázek 6: Křivka inhibice růstu nádoru - TGI % (tumor growth inhibition) jako funkce času po intravenózní aplikaci (i.v.) testovaných formulací pevných lipidických nanočástic s inkorporovaným temoporfinem připravených dle Příkladů 1, 2, 3 (dávka temoporfinu 0,8 mg/kg myš) v porovnání s komerční formulací (Originátor, 4 mg temoporfinu, 376 mg ethanolu a 560 mg propylenglykolu). Graf znázorňuje inhibici růstu lidského karcinomu prsu linie MDAMB-231 ve skupině Nu/Nu myší (n=5).
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Syntéza kopolymeru polyethylenoxid-ů/oc&-poly(a -kaprolaktonu) (PEO-ů-PCL) je založena na polymerizaci s otevíráním kruhu ε-kaprolaktonu bez přítomnosti katalyzátoru, iniciovaná pomocí polyethylenoxid monomethyleteru (MPEO). Do 50 ml odměmé baňky s magnetickým míchadlem byly vloženy 3 g (1,49 mmol) MPEO. Systém byl odplyněn v 5 cyklech vakuum argon. V atmosféře argonu bylo přidáno 3,4 g (30 mmol) ε-kaprolaktonu. Následně byl systém ochlazen suchým ledem/ethanol, evakuován a zahřát na 185 °C. Polymerizace s otevíráním kruhu trvala 33 hodin. Po polymeraci byl systém naplněn argonem a vychlazen na laboratorní teplotu. Pevné látky v baňce byly rozpuštěny v 10 ml dichlormethanu a vysráženy do 350 ml diethyletheru. Po vysušení byl polymer suspendován ve vodě a dialyzován proti vodě v dialyzační membráně MWCO 2 kDa. Příklad 'H-NMR spektra kopolymeru PEO-ů-PCL je zobrazen na Obrázku 1. Poměr monomemích jednotek jednotlivých produktů byl vypočten za použití intenzit protonových signálů označených a (δ = 3,63 ppm, odpovídá PEO bloku) a c (δ = 1,64 ppm, odpovídá bloku PCL) v !H-NMR spektru podle rovnice (1):
DP(PCL) = DP(PEO) (1) kde DP(PCL) je stupeň polymerizace poly(s-kaprolaktonového) bloku, DP(PEO) je stupeň polymerizace polyethylenoxidového bloku a c a a jsou integrální intenzity signálů příslušných protonů (viz Obrázek 1).
Délka bloku PEO makroiniciátoru v kopolymeru se stupněm polymerace byla DP = 45 monomemích jednotek. Délka bloku PCL se stupněm polymerace DP = 7 monomerních jednotek. Výsledný kopolymer (polymerní surfaktant) má průměrný vzorec: PEO45PCL7.
Pevné lipidické nanočástice s inkorporovaným fotosenzibilizátorem temoporfinem byly připraveny pomocí vysokovýkonné homogenizační a ultrazvukové metody. Lipidická fáze složená z 1 -tetradekanolu (10 mg/ml) byla vložena do skleněné lahvičky a zahřáta na 45 °C. Temoporfin (10 mg/ml) byl rozpuštěn v 1 ml dichlormetanu a přidán k lipidové fázi pro získání směsi lipid-léčivo po odpaření dichlormetanu. Vodná fáze byla získána rozpuštěním kopolymeru PEO45PCL7 (50 mg/ml) v 1 ml dichlormetanu, následným přidáním 5 ml H2O a zahřátím na 45 °C. Horká lipidová fáze byla přidána k horké vodné fázi a následně byla směs homogenizovaná po dobu 2 min při 8000 otáčkách/min. Výsledná emulze byla ultrazvukovaná za použití standardního ultrazvukového hrotu (T25 digital Ultra-Turrax, IKA, Schoeller instruments, s.r.o., Czech Republic). Amplituda ultrazvuku byla nastavena na 50 % po dobu 35 min a na 70 % po dobu 5 min. Vzniklá emulze byla okamžitě ochlazená na laboratorní teplotu.
Pro měření velikosti částic (hydrodynamický poloměr, RH), indexu polydisperzity (PDI) a zeta potenciálu (ZP) testovaných pevných lipidických nanoformulací s inkorporovaným temoporfinem byl použit Zetasizer (Zen 3600, Malvem Instruments Ltd.) pomocí dynamického rozptylu světla (DLS). Pro dosažení vhodné koncentrace před samotným měřením byly vzorky zředěny redestilovanou vodou (pH~5 výsledného roztoku). Veškerá měření probíhala při teplotě °C. K reprezentaci dat distribuce velikosti NPs byla použita intenzitně vážená distribuce. Výsledky jsou uvedeny v Tabulce 1.
Pro analýzu pomocí diferenční skenovací kalorimetrie (DSC) byl použit kalorimetr (Q2000, V24.ll Build 124, TA Instruments) s proplachováním plynným dusíkem (50 cm3/min.). Přístroj byl kalibrován pro měření teploty a tepelného toku za použití india jako standardu. Analyzované byly vzorky jednak bez obsahu temoporfmu (označeny jako SLNP s příslušným PEOxPCLy), tak s inkorporovaným temoporfinem (připraveny dle Příkladu 1, 2, 3) a samotný temoporfin (pevná látka, 10 až 20 mg), (viz Obrázek 2). Nanoformulace byly umístěny do T-zero hermetických hliníkových pánviček a analýza probíhala v teplotních cyklech: ohřev - chlazení ohřev, od 10 °C do 50 °C, při 5 °C/min. Teploty tání těchto vzorků byly odečteny z 1. DSCkřivky ohřevu. Začlenění temoporfmu do lipidové matrice má za výsledek bimodální termogram se dvěma endotermami: kolem 26 °C (eutektická směs temoporfmu a 1-tetradekanolu) a kolem 39 °C (1-tetradekanol). To znamená, že v lipidovém jádře existují dvě fáze, obsahující temoporfin a 1-tetradekanol. Toto složení umožňuje stabilitu pevných lipidických nanočástic při skladování při teplotě 4 °C a zároveň teplotu tání jádra při 39 °C.
Testované nanoformulace byly ve skleněných lahvičkách skladovány v chladničce při teplotě 4 8 °C, po dobu 1 měsíce. V den 1, 14 a 30 byla pomocí DLS měřena velikost částic (Rh, nm), PDI a ZP (mV) a to při pH ~ 5 a 7,4. Na základě statistické analýzy rozptylu jednoduchého třídění (one-way ANOVA) nebyl během skladování (den 1, 14, 30) zjištěn žádný významný rozdíl. Hodnota a=0,05 byla použita jako prahová hodnota statistické významnosti.
Obsah temoporfmu v lipidové matrici byl stanoven pomocí UV-VIS spektrometrie (Evolution 220, Thermo Scientific™) následovně: Vzorky nanoformulací (Ιμΐ) byly rozpuštěny v methanolu (0,999 ml) a analyzovány při 652 nm. Koncentrace temoporfmu byla vypočtena použitím Lambert-Beerova zákona, Amax = 652 nm, ε652 = 22 400 M'1cm’1(2). Účinnost enkapsulace temoporfmu (EE %) a obsah temoporfmu v systému nanočástic (DL %) byly vypočteny podle rovnic (3) a (4) a výsledky jsou zobrazeny v Tabulce 2,
A = ελ. c. I (2)
EE (%) — WlétivovSLNP x 100 % (3) wtotal
DL (%) = -------W'ÍÍI ,SL'w------X 100 % (4) wléčivo v SLNP + W lipid + ''*surfai<tarlt (1) A ^absorbance; εχ =molámí absorpční koeficient při vlnové délce λ (652 nm); c =molámí koncentrace absorpční složky v mol/L; 1 =délka absorpční vrstvy. (2) EE (%) =účinnost enkapsulace; wiéčivo v slnp ^hmotnost temoporfinu v pevných lipidických nanočásticích; wtotai = celková hmotnost temoporfinu použitá při přípravě testovaných nanoformulací; (3) DL (%) = obsah temoporfinu v nanočásticovém systému (drug loading); wiiPid =hmotnost 1-tetradekanolu; Wsurfaktant =hmotnOSt PEO45PCL7.
Testované vzorky byly analyzovány a vizualizovány pomocí transmisního elektronového mikroskopu (TEM) (Tecnai G2 Spirit Twin 12, FEI). Vzorek (2 μΐ) byl nakapán na dírkovanou, uhlíkem potaženou mřížku a přebytek roztoku byl odsát dotykem úzkého pruhu filtračního papíru (1 min). Nanočástice byly při laboratorní teplotě ponechány zcela oschnout a následně byly pozorovány pomocí TEM mikroskopu (zobrazení ve světlém poli, urychlovací napětí 120 kV). Částice jsou zobrazeny jako černé skvrny na šedém pozadí (pozitivní kontrast), mají kulovitý tvar a velikost korelující s hydrodynamickým poloměrem, měřeným pomocí DLS, jakje znázorněno na Obrázku 3.
Pro studium in vitro uvolňování temoporfinu z testovaných formulací byla použita metoda dialýzy přes dialyzační membránu (viz Obrázek 4). Dialyzační membrána (3,5 kDa) byla na 20 min ponořena do destilované vody. Alikvotní objem formulace (2 ml) byl nejprve zředěn 2 ml 2 x koncentrovanějšího PBS. Tato směs byla přemístněna do dialyzačních membrán a následně vložena do předehřátého (37 °C) roztoku PBS o pH ~ 7,4 (200 ml) a ponechána míchat na magnetické míchačce (200 otáček za minutu). Alikvotní podíly (0,1 ml) vzorků byly v časových intervalech 0,5; 1; 2; 4; 6; 8; 24 a 72 hodin odebrané z vnitřního prostoru dialyzační membrány a analyzovány pomocí UV-VIS spektrometrie (po vhodném zředění methanolem). Následně byl vypočten procentuální obsah uvolněného temoporfinu a to na základě rozdílu jeho koncentrace použité pro přípravu roztoku SLNP (10 mg/ml) a stanové koncentrace pomocí UV-VIS spektrometrie v odebraném roztoku vzorku z vnitřku dialyzační membrány.
Buňky nádorové linie 4T1 (karcinom mléčné žlázy myší) a MDA-MB-231 (lidský adenokarcinom prsu) byly udržovány v exponenciální fázi růstu za sterilních podmínek v mediu RPMI 1640 obohaceném o 10% bovinního fetálního séra (FCS), penicilinu (100 jednotek/ml), streptomycinu (0,1 mg/ml) a L-glutaminu (2 mmol). Inkubovány byly při 37 °C v atmosféře z 95% vzduchu a 5% CO2. Buněčné linie byly pasážovany každý druhý nebo třetí den.
Pro analýzu in vitro cytotoxicity testovaných formulací byly buňky 4T1 (2 χ 105) nasazeny na Petriho misky (35 mm) a inkubovány přes noc při 37°C. K buňkám pak byly přidány testované formulace tak, aby finální koncentrace temoporfinu byly v rozmezí 0,25 - 2 uM a následně byly dále 16 hodin inkubovány. Koncentrace temoporfinu v SLNP byla zvolena tak, aby sama o sobě nezpůsobila více než 10% mortalitu buněk. Testovací misky s buňkami byly propláchnuty médiem bez fenolové červeně (FČ) a po přidání kultivačního media bez FČ byly 30 min ozařovány pomocí halogenové lampy (75 W) vybavené filtrem pro vlnové délky 620 až 680 nm (Andover, Salem, NH). Maximum excitace temoporfinu odpovídá λ6Χ = 652 nm. Intenzita ozařování buněk byla 3,7 mW/cm s celkovou dávkou ozáření 6,6 J/cm . V Bůrkerově komůrce byl 24 hodin po ozáření stanoven pomocí vstřebávání trypanové modři poměr živých a mrtvých buněk (%, buňky/ml) a tím byly získány křivky dávka - účinek, z kterých byly číselně vyhodnoceny hodnoty IC 50. Hodnota IC 50 představuje koncentraci temoporfinu, která je potřebná k usmrcení 50 % buněk a byla vypočtena pro každou křivku (Tabulka 3). V kontrolních experimentech byl hodnocen jejich toxický efekt bez ozáření (tzv. „dark toxicity”, toxicita bez fotodynamického efektu) a taktéž toxicita formulací SLNP bez obsahu temoporfinu (prázdných, tj. 1-tetradekanol a ΡΕΟχΡΤΧγ) při stejných koncentračních podmínkách. Byla zjištěna velmi nízká toxicita bez ozáření stejně jako u SPLP bez temoporfinu (pod 10 % v celém koncentračním rozsahu).
Subcelulámí lokalizace fotosenzibilizátoru temoporfinu byla zkoumána pomocí fluorescenční mikroskopie v porovnání s formulací originátora (komerční, 4 mg temoporfinu, 376 mg ethanolu a 560 mg propylenglykolu). Nádorové buňky 4T1 nasazené na krycí sklíčka, umístněné v Petriho miskách (průměr 35 mm) byly inkubovány s formulacemi temoporfinu o konečné koncentraci 2 μΜ (1 h nebo 4 h inkubace) nebo 1 μΜ (16 hod inkubace) v kultivačním médiu při 37 °C. Po inkubaci byly misky s buňkami promyty třikrát PBS, zality bezbarvým médiem bez FČ a zkoumány pod mikroskopem (DM IRB, Leica) vybaveným fotoaparátem (DFC 480) při použití objektivu s 63x olejovou imerzí a filtrační kostkou (N2.1, Leica), excitace: BP 515-560 nm, emise: LP 590 nm). Fluorescence formulací fotosenzibilizátoru temoporfinu v nádorových 4T1 buňkách byla měřena 1, 4 a 16 hodin po přidání formulace do kultivačního media. Testovaná nanoformulace, v porovnání s formulací originátora, vykazovala významně rychlejší kinetiku nárůstu fluorescence (po 4 h).
Pro sledování subcelulámí kolokalizace byly buňky inkubovány s testovanou nanoformulací temoporfinu a k buňkám byl postupně přidán na 30 min 100 nM MitoTracker Green (pro značení mitochondrií) nebo 250 nM ER-Tracker Blue pro značení endoplazmatického retikula (ER). Pro označení lysozomů byl do kultivačního média (1 h) přidán 500 nM LysoTracker Green. Filtrační kostka typu A (Leica, excitace: BP 340-380 nm a emise: LP 400 nm) byla použita pro analýzu
ER Tracker Blue; filtrační kostka 13 (Leica, excitace: BP 450-490 a emise: LP 515) byla použita pro MitoTracker Green a LysoTracker Green. Testovaná nanormulace byla lokalizována především v ER.
Terapeutická účinnost pro cílený transport léčiva s PDT aplikací byla testována na nádorovém modelu Nu/Nu myší in vivo a byla srovnaná s originální formulací (komeční, označena jako •7 originátor). Buňky lidského karcinomu prsu linie MDA-MB-231 (1x10 buněk) byly suspendovány v 0,1 ml PBS a 0,1 ml Matrigelu a následně subkutánně (s.c.) injikovány do zadních boků myší. Když hmotnost tumoru dosáhla objemu 200 až 300 mm (7 až 10 dnů po transplantaci), testována formulace byla v objemu 0,1 ml na 20 g myši intravenózně (i.v.) injikována do ocasní žíly v dávce temoporfinu 0,8 mg/kg myši. Po třech hodinách byla plocha nádoru (2 cm ) ozářená pomocí xenonové lampy, (500-700 nm, λ6χ. 652 nm), o celkové maximální dávce světla 100 J/cm a intenzitě ozáření 200 mW/cm . Kontrolní skupina myší byla za stejných podmínek ozářená, ale bez působení léčiva (viz Obrázek 5). Každá experimentální skupina se skládala z 5 myší. Čtyřicet dva dnů po podání testovaných nanoformulací byly myši usmrceny předávkováním ketaminem a nádory byly histologicky vyhodnocené. Všechny aspekty zvířecích experimentů a chovu byly prováděny v souladu s národními a evropskými předpisy a byly schváleny ústavním výborem (Bříza, Tomáš, Jarmila Králová, Petr Cígler, Zdeněk Kejík, Pavla Poučková, Petr Vašek, Irena Moserová, Pavel Martásek, and Vladimír Král. 2012. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 22 (1): 82-84; Králová, Jarmila, Tomáš Bríza, Irena Moserová, Bohumil Dolenský, Petr Vašek, Pavla Poučková, Zdenek Kejík, et al. 2008. Journal of Medicinal Chemistry 51 (19): 5964-73). Získaná data pro každou testovanou skupinu jsou vyjádřena jako aritmetický průměr (n=5), chyba měření byla vypočtena jako směrodatná odchylka (± SD) a zobrazena jako funkce času. Zmenšení objemu nádoru bylo ve srovnání s neošetřenou kontrolnou skupinou statisticky významné na hladině významnosti a=0.01 (Tabulka
4)·
Inhibice růstu nádoru (tumor growth inhibition, % TGI) jako měřítko účinnosti terapie byla srovnaná s komerční formulací (4 mg temoporfinu, 376 mg ethanolu a 560 mg propylenglykolu), (viz Obrázek 6). Vypočtena byla podle rovnice (5), kde V je střední objem nádoru konkrétní testované skupiny v daném časovém bodě, Vo je střední objem nádoru konkrétní testované skupiny na začátku experimentu, Vk je střední objem nádoru kontrolní skupiny (s aplikací fyziologického roztoku) v daném časovém bodě a Vk0 je střední objem nádoru kontrolní skupiny na začátku experimentu:
TGI (%) = 100 - x 1001 (5)
Příklad 2
Formulace byla analogická Příkladu 1, obměna spočívala v jiném složení (stupeň polymerace poly(E-kaprolaktonového) bloku) použitého kopolymeru (PEO45PCL17). Výsledky zDLS analýzy (RH, PDI, ZP) uvedeny v Tabulce 1. Výsledky z DSC jsou uvedeny na Obrázku 2. Výsledky pro účinnost enkapsulace temoporfmu (%) a obsah temoporfmu (%) v SLNP jsou uvedeny v Tabulce 2. Transmisní elektronové mikrografy testovaných vzorků jsou zobrazeny na Obrázku 3. Časový profil in vitro uvolňování temoporfmu (%) z nanoformulací je zobrazen na Obrázku 4. Analýza in vitro cytotoxicity probíhala dle Příkladu 1, obměna spočívala v použití finálních koncentrací temoporfmu inkorporovanýho v testovaných SLNP, které byly v rozmezí 1 - 20 uM. Výsledky z mortality buněk (%), IC 50 (μΜ) jsou uvedeny v Tabulce 3. Postup subcelulámí lokalizace fotosenzibilizátoru temoporfmu pomocí fluorescenční mikroskopie proběhl dle Příkladu 1. Postup stanovení subcelulámí kolokalizace nanoformulací pomocí fluorescenční mikroskopie proběhl dle Příkladu 1, obměna spočívala v její lokalizaci - především v lysozomech. Výsledky terapeutické účinnosti pro cílený transport temoporfmu s PDT aplikací in vivo jsou zobrazeny na Obrázku 5 a jejich statistické vyhodnocení je uvedeno v Tabulce 4. Graf znázorňující inhibici růstu nádoru je zobrazen na Obrázku 6.
Příklad 3
Formulace dle Příkladu 1, obměna spočívala v jiném složení (stupeň polymerace poly(skaprolaktonového) bloku) použitého kopolymeru (PEO45PCL34). Výsledky z DLS analýzy (RH, PDI, ZP) uvedeny v Tabulce 1. Výsledky z DSC jsou uvedeny na Obrázku 2. Výsledky pro účinnost enkapsulace temoporfmu (%) a obsah temoporfmu (%) v SLNP jsou uvedeny v Tabulce
2. Transmisní elektronové mikrografy testovaných vzorků jsou zobrazeny na Obrázku 3. Časový profil in vitro uvolňování temoporfmu (%) z nanoformulací je zobrazen na Obrázku 4. Analýza in vitro cytotoxicity dle Příkladu 1, obměna spočívala v použití finálních koncentrací temoporfmu inkorporovanýho v testovaných SLNP, které byly v rozmezí 1-20 uM. Výsledky z mortality buněk (%), IC 50 (μΜ) jsou uvedeny v Tabulce 3. Postup subcelulámí lokalizace fotosenzibilizátoru temoporfmu pomocí fluorescenční mikroskopie dle Příkladu 1. Výsledky terapeutické účinnosti pro cílený transport temoporfmu s PDT aplikací in vivo jsou zobrazeny na
Obrázku 5, obměna spočívala ve statistické analýze dat, kde zmenšení objemu nádoru bylo ve srovnání s neošetřenou kontrolnou skupinou statisticky nevýznamné na hladině významnosti a=0.01, jak je uvedeno v Tabulce 4. Graf znázorňující inhibici růstu nádoru je zobrazen na
Obrázku 6.
Příklad 4
Formulace dle Příkladu 1, obměna spočívala v hmotnostím složení lipidické fáze, kde navážka 1tetradekanolu byla 50 mg/ml a ve hmotnostím složení vodné fáze, kde navážka PEO45PCL7 byla 10 mg/ml. Výsledky z DLS analýzy (Rh, PDI, ZP) uvedeny v Tabulce 1. Výsledky pro účinnost enkapsulace temoporfmu (%) a obsah temoporfinu (%) v SLNP jsou uvedeny v Tabulce 2.
Příklad 5
Formulace dle Příkladu 1, obměna spočívala v hmotnostím složení lipidické fáze, kde navážka 1tetradekanolu byla 50 mg/ml a ve hmotnostím složení vodné fáze, kde navážka PEO45PCLi7byla 10 mg/ml. Obměna dále spočívala dále v jiném složení (stupeň polymerace poly(Ekaprolaktonového) bloku) použitého kopolymeru (PEO45PCL17). Výsledky z DLS analýzy (RH, PDI, ZP) uvedeny v Tabulce 1. Výsledky pro účinnost enkapsulace temoporfmu (%) a obsah temoporfmu (%) v SLNP jsou uvedeny v Tabulce 2.
Příklad 6
Formulace dle Příkladu 1, obměna spočívala v hmotnostím složení lipidické fáze, kde navážka 1tetradekanolu byla 50 mg/ml a ve hmotnostím složení vodné fáze, kde navážka PEO45PCL34 byla 10 mg/ml. Obměna dále spočívala v jiném složení (stupeň polymerace poly(s-kaprolaktonového) bloku) použitého kopolymeru (PEO45PCL34). Výsledky z DLS analýzy (RH, PDI, ZP) uvedeny v Tabulce 1. Výsledky pro účinnost enkapsulace temoporfmu (%) a obsah temoporfinu (%) v SLNP jsou uvedeny v Tabulce 2.
Příklad 7
Formulace dle Příkladu 1, obměna spočívala v navážce temoporfmu použité při přípravě testovaných nanoformulací, která byla 20 mg/ml. Výsledky z DLS analýzy (RH, PDI, ZP) uvedeny v Tabulce 1. Výsledky pro účinnost enkapsulace temoporfmu (%) a obsah temoporfinu (%) v SLNP jsou uvedeny v Tabulce 2.
r* · ·
Příklad 8
Formulace dle Příkladu 1, obměna spočívala v navážce temoporfinu použité při přípravě testovaných nanoformulací, která byla 20 mg/ml. Další obměna spočívala v jiném složení (stupeň polymerace poly(s-kaprolaktonového) bloku) použitého kopolymeru (PEO45PCL17).Výsledky zDLS analýzy (Rh, PDI, ZP) uvedeny v Tabulce 1. Výsledky pro účinnost enkapsulace temoporfinu (%) a obsah temoporfinu (%) v SLNP jsou uvedeny v Tabulce
2.
Příklad 9
Formulace dle Příkladu 1, obměna spočívala v navážce temoporfinu použité při přípravě testovaných nanoformulací, která byla 20 mg/ml. Další obměna spočívala v jiném složení (stupeň polymerace poly(s-kaprolaktonového) bloku) použitého kopolymeru (PEO45PCL34). Výsledky zDLS analýzy (RH, PDI, ZP) uvedeny v Tabulce 1. Výsledky pro účinnost enkapsulace temoporfinu (%) a obsah temoporfinu (%) v SLNP jsou uvedeny v Tabulce
2.
Tabulka 1: Velikost částic (Rh, nm), index polydisperzity (PDI), zeta potenciál (ZP, mV) vzorků pevných lipidických nanoformulací inkorporovaným temoporfinem (průměr ± SD, n = 3), při pH~5.
| ZP (mV) ± SD | -8,2 ± 1,7 -17,8 ±3,2 -13,1 ±0,5 | -9,2 ± 1,6 -7,5 ± 1,3 -6,5 ± 1,3 | -9,2 ± 1,3 -4,5 ± 1.6 -14,6 ± 1,2 | |
| PDI± SD | cn CN (N o' o o ± ± ± ι> o o o' | 0,9 ±0,01 0,6 ± 0,01 0,9 ±0,01 | 0,8 ± 0,02 0,9 ± 0,003 0,5 ± 0,01 | |
| Q CZ) -H ΐ X | 13,3 ±0,8 7.8 ± 2,3 8.9 ± 1,1 | 316.2 ±22,5 349.2 ± 15,1 353.2 ±25,3 | 6,3 ± 0,4 10,4 ± 1,6 20,6 ± 1,4 | |
| Hmotnostní procenta (obsah látky v sušině systému) | U CU X O w CU | 71,4 | 14,3 | 62,5 |
| 1 -tetradekanol | 14,3 | 12,5 | ||
| Koncentrace (mg / ml) | temoporfm | o r-H | o 1—^ | 20 |
| U Cu X O W CU | 50 | o 1—-H | 50 | |
| 1 -tetradekanol | o ▼—4 | 50 | o r—4 | |
| Formulace | Příklad 1 Příklad 2 Příklad 3 | Příklad 4 Příklad 5 Příklad 6 | Příklad 7 Příklad 8 Příklad 9 |
Tabulka 2: Účinnosti enkapsulace temoporfinu (EE %) a obsah temoporfinu (DL %) v testovaných pevných lipických nanočástic s inkorporovaným temoporfinem (průměr ± SD, n =
3).
| Formulace | DL (%) ± SD | EE (%) ± SD |
| Příklad 1 | 3,92 ± 0,06 | 22,22 ± 0,3 |
| Příklad 2 | 3,93 ± 0,09 | 22,65 ± 0,1 |
| Příklad 3 | 3,96 ± 0,08 | 23,06 ± 0,4 |
| Příklad 4 | 2,98 ±0,11 | 14,83 ± 0,6 |
| Příklad 5 | 3,08 ± 0,05 | 17,02 ± 1,1 |
| Příklad 6 | 3,12 ±0,08 | 18,13 ±0,8 |
| Příklad 7 | 1,70 ±0,34 | 5,26 ± 0,3 |
| Příklad 8 | 1,82 ±0,12 | 7,15 ±0,4 |
| Příklad 9 | 1,90 ±0,02 | 9,12 ±0,3 |
Tabulka 3: Mortalita buněk (%) a IC 50 (μΜ) po podání pevných lipidických nanočástic s inkorporovaným temoporfinem připravených dle Příkladů 1, 2 a 3 (průměr ± SD, n = 5).
| Formulace | Koncentrace (μΜ) (temoporfinu) | Mortalita buněk (%) (mean ± SD) | IC 50 (μΜ) (temoporfin) |
| Příklad 1 | 0,25 0,5 1 2 | 24 ± 6,8 67 ± 24,7 88 ± 0,9 93 ± 2,4 | 0,39 |
| Příklad 2 | 1 2,5 10 20 | 47 ± 12,9 44 ± 4,2 66 ± 7,7 61 ± 11,5 | 2,41 |
| Příklad 3 | 1 2,5 10 20 | 21 ± 1,6 22 ± 7,6 26 ± 15,7 29 ± 9.7 | >20 |
Tabulka 4: Statistická analýza in vivo dat („one-shot“ PDT) za použití statistické analýzy rozptylu jednoduchého třídění (one-way ANOVA) z programu Origin 9 (OriginLab software), při prahových hodnotách hladiny významnosti a = 0,05 a 0,01.
| Kontrola | Originátor | Příklad 1 | Příklad 2 | Příklad 3 | |
| Kontrola | + + | + + | + + | + | |
| Originátor | + + | 0 | 0 | 0 | |
| Příklad 1 | + + | 0 | 0 | + + | |
| Příklad 2 | + + | 0 | 0 | + | |
| Příklad 3 | + | 0 | + + | + |
<y významné rozdíly mezi skupinami, a = 0.05.
Žádné statistic
Statisticky významné rozdíly mezi skupinami, a = 0.05. Statisticky významné rozdíly mezi skupinami, a = 0.01.
Příklad 10
Formulace dle Příkladu 1, s tím, že fotosenzibilizátor byl verteporfín.
Příklad 11
Formulace dle Příkladu 1, s tím, že fotosenzibilizátor byl lutecium texafyrin.
Příklad 12
Formulace dle Příkladu 1, s tím, že fotosenzibilizátor byl hypericin.
Příklad 13
Formulace dle Příkladu 1, s tím, že fotosenzibilizátor byl porficen.
Claims (10)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Fotoaktivovatelná nanočástice pro fotodynamické aplikace, obsahující jádro a obal, vyznačená tím, že jádro obsahuje 1 až 50 hmotn. % fotosenzibilizátorů, vztaženo na celkovou sušinu nanočástice, s výhodou 1 až 4 hmotn. % fotosenzibilizátorů, vztaženo na celkovou sušinu nanočástice, a dále 1 až 80 hmotn. % (Cg až C22) mastných alkoholů, vztaženo na celkovou sušinu nanočástice, s výhodou 12 až 72 hmotn. % (C8 až C22) mastných alkoholů, vztaženo na celkovou sušinu nanočástice; a obal obsahuje 1 až 80 hmotn. % polymerního surfaktantu, s výhodou polyethylenoxid monomethyléter-ů/ncA-poly(s-karoplaktonu), vztaženo na celkovou sušinu nanočástice, s výhodou obal obsahuje 14 až 72 hmotn. % polymerního surfaktantu, vztaženo na celkovou sušinu nanočástice; přičemž velikost nanočástice jev rozmezí od 1 do 1000 nm, s výhodou v rozmezí od 11 do 760 nm, nejvýhodněji v rozmezí od 11 do 30 nm, a přičemž jádro nanočástice je při 4 °C pevné a při 39 °C kapalné, stanoveno diferenční skenovací kalorimetrií s proplachováním plynným dusíkem o objemu 50 cm3/min za použití india jako standardu v teplotních cyklech: ohřev - chlazení - ohřev, při 5 °C/min, a odečet teplot tání byl proveden z první křivky ohřevu diferenční skenovací kalorimetrie, kdy výsledkem byl bimodální termogram se dvěma endotermami, jednou pro eutektickou směs fotosenzibilizátorů a mastného alkoholu a druhou pro mastný alkohol.
- 2. Fotoaktivovatelná nanočástice podle nároku 1, vyznačená tím, že fotosenzibilizátor je vybraný z derivátů chlorinu a/nebo porfyrinů a/nebo antrachinonu, s výhodou je fotosenzibilizátor vybraný ze skupiny zahrnující temoporfin, verteporfin, lutecium texafyrin, hypericin a porfícen.
- 3. Fotoaktivovatelná nanočástice podle nároku 1 nebo 2, vyznačená tím, že jádro obsahuje jeden typ (Cg až C22) mastného alkoholu, s výhodou je mastným alkoholem (Cu) mastný alkohol.
- 4. Fotoaktivovatelná nanočástice podle nároku 1 nebo 2, vyznačená tím, že jádro obsahuje kombinaci (Cg až C22) mastných alkoholů.
- 5. Fotoaktivovatelná nanočástice podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, vyznačená tím, že polymerního surfaktant je polyethylenoxid monomethyléter-ů/oc£-poly(E-karoplakton), s výhodou o polymerizačním stupni polyethylenoxidového bloku 10 až 100 a o polymerizačním stupni poly (ε -karoplaktonového) bloku 3 až 60, výhodněji je polymerizační stupeň polyethylenoxidového bloku 20 až 50 a póly (ε -karoplaktonového) bloku 3 až 20, nejvýhodněji je polymerizační stupeň polyethylenoxidového bloku 45 a póly (ε -karoplaktonového) bloku 7.
- 6. Způsob přípravy fotoaktivovatelné nanočástice podle kteréhokoliv z předchozích nároků, vyznačený tím, že:- fotosenzibilizátor se rozpustí v rozpouštědle, s výhodou v dichlormethanu, a přidá se k (C8 až C22) mastnému alkoholu zahřátému na 45 °C za vzniku první fáze;- polymerní surfaktant se rozpustí v organickém rozpouštědle, s výhodou v dichlormethanu, přidá se voda a směs se zahřeje na 45 °C za vzniku druhé fáze;- obě zahřáté fáze se smíchají a homogenizují, s výhodou po dobu 2 min při 8000 otáčkách/min;- výsledná emulze se podrobí působení ultrazvuku;- výsledná emulze se ochladí na laboratorní teplotu.
- 7. Farmaceutická kompozice, vyznačená tím, že obsahuje fotoaktivovatelnou nanočástici podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5 a dále obsahuje farmaceuticky přijatelné přísady, vybrané ze skupiny zahrnující antiaheziva, pojivá, potahovací látky, barviva, bobtnadla, ochucovadla, maziva, konzervanty, sladidla, sorbenty.
- 8. Fotoaktivovatelné nanočástice podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5 a/nebo farmaceutická kompozice podle nároku 7 pro použití jako léčivo.
- 9. Fotoaktivovatelné nanočástice podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5 a/nebo farmaceutická kompozice podle nároku 7 pro použití jako léčivo pro intravenózní aplikaci.
- 10. Fotoaktivovatelná nanočástice podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5 a/nebo farmaceutická kompozice podle nároku 7 pro použití při fotodynamické terapii a/nebo fotodynamické diagnostice.
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2016-119A CZ307681B6 (cs) | 2016-02-29 | 2016-02-29 | Fotoaktivovatelná nanočástice pro fotodynamické aplikace, způsob její přípravy, farmaceutická kompozice ji obsahující a jejich použití |
| PCT/CZ2017/050008 WO2017148454A1 (en) | 2016-02-29 | 2017-02-24 | Photoactivatable nanoparticles for photodynamic applications, method of preparation thereof, pharmaceutical compositions containing them, and use thereof |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2016-119A CZ307681B6 (cs) | 2016-02-29 | 2016-02-29 | Fotoaktivovatelná nanočástice pro fotodynamické aplikace, způsob její přípravy, farmaceutická kompozice ji obsahující a jejich použití |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ2016119A3 true CZ2016119A3 (cs) | 2017-09-13 |
| CZ307681B6 CZ307681B6 (cs) | 2019-02-13 |
Family
ID=58358331
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ2016-119A CZ307681B6 (cs) | 2016-02-29 | 2016-02-29 | Fotoaktivovatelná nanočástice pro fotodynamické aplikace, způsob její přípravy, farmaceutická kompozice ji obsahující a jejich použití |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| CZ (1) | CZ307681B6 (cs) |
| WO (1) | WO2017148454A1 (cs) |
Family Cites Families (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3421468A1 (de) | 1984-06-08 | 1985-12-19 | Dr. Rentschler Arzneimittel Gmbh & Co, 7958 Laupheim | Lipidnanopellets als traegersystem fuer arzneimittel zur peroralen anwendung |
| US5250236A (en) | 1991-08-05 | 1993-10-05 | Gasco Maria R | Method for producing solid lipid microspheres having a narrow size distribution |
| DE4131562A1 (de) | 1991-09-18 | 1993-03-25 | Medac Klinische Spezialpraep | Arzneistofftraeger aus festen lipidteilchen-feste lipidnanosphaeren (sln) |
| US5785976A (en) | 1993-03-05 | 1998-07-28 | Pharmacia & Upjohn Ab | Solid lipid particles, particles of bioactive agents and methods for the manufacture and use thereof |
| GB0005855D0 (en) | 2000-03-10 | 2000-05-03 | Scotia Holdings Plc | Compounds for pdt |
| ES2387562T3 (es) | 2001-03-23 | 2012-09-26 | Luitpold Pharmaceuticals, Inc. | Conjugados alcohol graso-medicamento |
| US8986731B2 (en) | 2003-08-26 | 2015-03-24 | Biolitec Pharma Marketing Ltd | Pegylated liposomal formulations of hydrophobic photosensitizers for photodynamic therapy |
| US20050048109A1 (en) | 2003-08-26 | 2005-03-03 | Ceramoptec Industries, Inc. | Non-polar photosensitizer formulations for photodynamic therapy |
| US8709449B2 (en) | 2004-02-12 | 2014-04-29 | Biolitec Pharma Marketing Ltd | Methods and compositions for improving photodynamic therapy through administration of lipids |
| EP1674081A1 (de) | 2004-12-23 | 2006-06-28 | KTB Tumorforschungsgesellschaft mbH | Herstellung von lipidbasierten Nanopartikeln unter Einsatz einer dualen asymmetrischen Zentrifuge |
| ITMI20051024A1 (it) | 2005-06-01 | 2006-12-02 | Maria Rosa Gasco | Nuovo uso di nanoparticelle lipidiche solide |
| US20070031482A1 (en) | 2005-08-02 | 2007-02-08 | Ceramoptec Industries, Ind. | PDT treatment method for cellulites and cosmetic use |
| US20070237826A1 (en) | 2006-04-05 | 2007-10-11 | Rao Kollipara K | Polymerized solid lipid nanoparticles for oral or mucosal delivery of therapeutic proteins and peptides |
| US20090081281A1 (en) | 2006-05-10 | 2009-03-26 | Gerard Farmer | Photosensitizer Formulation for Topical Applications |
| US20080214460A1 (en) | 2007-01-18 | 2008-09-04 | Ceramoptec Industries, Inc. | Formulations for cosmetic and wound care treatments with photosensitizers as fluorescent markers |
| FR2943545B1 (fr) | 2009-03-31 | 2011-06-03 | Univ Claude Bernard Lyon | Nanoparticules lipidiques solides encapsulant du minoxidil et suspension aqueuse les contenant. |
| US8815931B2 (en) | 2009-04-28 | 2014-08-26 | Biolitec Pharma Marketing Ltd | Oral formulations for tetrapyrrole derivatives |
| ES2384060B1 (es) | 2010-03-24 | 2013-09-23 | Lipotec S.A. | Cápsulas de nanopartículas lipídicas. |
| EP2688560A2 (en) * | 2011-03-24 | 2014-01-29 | Leo Pharma A/S | A composition comprising lipid nanoparticles and a corticosteroid or vitamin d derivative |
| KR20150111705A (ko) * | 2014-03-26 | 2015-10-06 | 한국과학기술연구원 | 생체영상 및 광역학 치료를 위한 메틸렌 블루 나노 입자 및 이의 용도 |
-
2016
- 2016-02-29 CZ CZ2016-119A patent/CZ307681B6/cs not_active IP Right Cessation
-
2017
- 2017-02-24 WO PCT/CZ2017/050008 patent/WO2017148454A1/en not_active Ceased
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2017148454A1 (en) | 2017-09-08 |
| CZ307681B6 (cs) | 2019-02-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Luo et al. | GSH-sensitive polymeric prodrug: synthesis and loading with photosensitizers as nanoscale chemo-photodynamic anti-cancer nanomedicine | |
| Hou et al. | Fenton reaction-assisted photodynamic therapy for cancer with multifunctional magnetic nanoparticles | |
| Kirchherr et al. | Stabilization of indocyanine green by encapsulation within micellar systems | |
| Zhang et al. | Carrier-free, chemophotodynamic dual nanodrugs via self-assembly for synergistic antitumor therapy | |
| Pei et al. | Light-activatable red blood cell membrane-camouflaged dimeric prodrug nanoparticles for synergistic photodynamic/chemotherapy | |
| Wang et al. | Cascade-promoted photo-chemotherapy against resistant cancers by enzyme-responsive polyprodrug nanoplatforms | |
| Zhu et al. | Dually pH/reduction-responsive vesicles for ultrahigh-contrast fluorescence imaging and thermo-chemotherapy-synergized tumor ablation | |
| Jia et al. | Plasma membrane activatable polymeric nanotheranostics with self-enhanced light-triggered photosensitizer cellular influx for photodynamic cancer therapy | |
| Kraft et al. | Interactions of indocyanine green and lipid in enhancing near-infrared fluorescence properties: the basis for near-infrared imaging in vivo | |
| Zheng et al. | Indocyanine green-containing nanostructure as near infrared dual-functional targeting probes for optical imaging and photothermal therapy | |
| Jia et al. | Plasma membrane-anchorable photosensitizing nanomicelles for lipid raft-responsive and light-controllable intracellular drug delivery | |
| Wang et al. | Multifunctional biodegradable polyacrylamide nanocarriers for cancer theranostics A “see and treat” strategy | |
| Thakur et al. | Co-administration of zinc phthalocyanine and quercetin via hybrid nanoparticles for augmented photodynamic therapy | |
| Bazylińska et al. | Hybrid theranostic cubosomes for efficient NIR-induced photodynamic therapy | |
| Wei et al. | Construction of surface-modified polydopamine nanoparticles for sequential drug release and combined chemo-photothermal cancer therapy | |
| Zagami et al. | Folate-decorated amphiphilic cyclodextrins as cell-targeted nanophototherapeutics | |
| Thanasekaran et al. | Lipid-wrapped upconversion nanoconstruct/photosensitizer complex for near-infrared light-mediated photodynamic therapy | |
| Yang et al. | Photosensitizer-loaded branched polyethylenimine-PEGylated ceria nanoparticles for imaging-guided synchronous photochemotherapy | |
| Zhang et al. | Cisplatin and quantum dots encapsulated in liposomes as multifunctional nanocarriers for theranostic use in brain and skin | |
| Zlotver et al. | Glucosylated hybrid TiO2/polymer nanomaterials for actively targeted sonodynamic therapy of cancer | |
| Demazeau et al. | Rational design of block copolymer self-assemblies in photodynamic therapy | |
| Liu et al. | Photolytic removal of red blood cell membranes camouflaged on nanoparticles for enhanced cellular uptake and combined chemo-photodynamic inhibition of cancer cells | |
| Ma et al. | Porphyrin Centered Paclitaxel Tetrameric Prodrug Nanoassemblies as Tumor‐Selective Theranostics for Synergized Breast Cancer Therapy | |
| Chi et al. | Loading drugs in natural phospholipid bilayers of cell membrane shells to construct biomimetic nanocomposites for enhanced tumor therapy | |
| Xu et al. | pH-Responsive nanomicelles for breast cancer near-infrared fluorescence imaging and chemo/photothermal therapy |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20220228 |