CZ228496A3 - Elongated multilayer reacting testing strip - Google Patents
Elongated multilayer reacting testing strip Download PDFInfo
- Publication number
- CZ228496A3 CZ228496A3 CZ962284A CZ228496A CZ228496A3 CZ 228496 A3 CZ228496 A3 CZ 228496A3 CZ 962284 A CZ962284 A CZ 962284A CZ 228496 A CZ228496 A CZ 228496A CZ 228496 A3 CZ228496 A3 CZ 228496A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- sample
- test strip
- reagent
- test
- membrane
- Prior art date
Links
- 238000012360 testing method Methods 0.000 title claims abstract description 187
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 92
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 80
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 73
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 72
- 230000008859 change Effects 0.000 claims abstract description 52
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 35
- 239000012491 analyte Substances 0.000 claims abstract description 32
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 28
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 28
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 66
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 59
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 claims description 43
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 claims description 43
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 22
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims description 21
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 claims description 21
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 claims description 14
- 239000000975 dye Substances 0.000 claims description 11
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 claims description 10
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 claims description 10
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims description 10
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims description 10
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 claims description 10
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 claims description 10
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 claims description 9
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 claims description 9
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 9
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims description 8
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 claims description 6
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 5
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 claims description 4
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 claims description 4
- 229920002492 poly(sulfone) Polymers 0.000 claims description 4
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 claims description 4
- 238000010186 staining Methods 0.000 claims description 4
- 229920001169 thermoplastic Polymers 0.000 claims description 4
- 239000004416 thermosoftening plastic Substances 0.000 claims description 4
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 3
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 claims description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 3
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 claims description 2
- 239000011888 foil Substances 0.000 claims description 2
- 229920000172 poly(styrenesulfonic acid) Polymers 0.000 claims description 2
- 239000004584 polyacrylic acid Substances 0.000 claims description 2
- 229940005642 polystyrene sulfonic acid Drugs 0.000 claims description 2
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 claims description 2
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 claims description 2
- FJKIXWOMBXYWOQ-UHFFFAOYSA-N ethenoxyethane Chemical compound CCOC=C FJKIXWOMBXYWOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 claims 1
- JGEMYUOFGVHXKV-UPHRSURJSA-N malealdehyde Chemical compound O=C\C=C/C=O JGEMYUOFGVHXKV-UPHRSURJSA-N 0.000 claims 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 claims 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 24
- 238000003556 assay Methods 0.000 abstract description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 abstract description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 69
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 57
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 38
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 11
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 11
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 7
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 7
- 239000011247 coating layer Substances 0.000 description 7
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 6
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 6
- RUDINRUXCKIXAJ-UHFFFAOYSA-N 2,2,3,3,4,4,5,5,6,6,7,7,8,8,9,9,10,10,11,11,12,12,13,13,14,14,14-heptacosafluorotetradecanoic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F RUDINRUXCKIXAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 5
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 5
- RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N 4-aminoantipyrine Chemical compound CN1C(C)=C(N)C(=O)N1C1=CC=CC=C1 RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 4
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 4
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- OEZPVSPULCMUQB-VRTOBVRTSA-N hydron;(e)-(3-methyl-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazine;chloride Chemical compound Cl.C1=CC=C2S\C(=N\N)N(C)C2=C1 OEZPVSPULCMUQB-VRTOBVRTSA-N 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 229960003330 pentetic acid Drugs 0.000 description 3
- -1 phenylaianine Proteins 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- KUQNCHZOCSYKOR-UHFFFAOYSA-N 1,1-dioxospiro[2,1$l^{6}-benzoxathiole-3,9'-xanthene]-3',4',5',6'-tetrol Chemical compound O1S(=O)(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C(O)=C1OC1=C(O)C(O)=CC=C21 KUQNCHZOCSYKOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BRRSNXCXLSVPFC-UHFFFAOYSA-N 2,3,4-Trihydroxybenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(O)C(O)=C1O BRRSNXCXLSVPFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VMNDRLYLEVCGAG-UHFFFAOYSA-N 2-[n-(2-hydroxyethyl)-3-methylanilino]ethanol Chemical compound CC1=CC=CC(N(CCO)CCO)=C1 VMNDRLYLEVCGAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IBGBGRVKPALMCQ-UHFFFAOYSA-N 3,4-dihydroxybenzaldehyde Chemical compound OC1=CC=C(C=O)C=C1O IBGBGRVKPALMCQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NEGFNJRAUMCZMY-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)benzoic acid Chemical compound CN(C)C1=CC=CC(C(O)=O)=C1 NEGFNJRAUMCZMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 2
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 2
- 239000012790 adhesive layer Substances 0.000 description 2
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 description 2
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 2
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 2
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 2
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- FPAYXBWMYIMERV-UHFFFAOYSA-L disodium;5-methyl-2-[[4-(4-methyl-2-sulfonatoanilino)-9,10-dioxoanthracen-1-yl]amino]benzenesulfonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)(=O)C1=CC(C)=CC=C1NC(C=1C(=O)C2=CC=CC=C2C(=O)C=11)=CC=C1NC1=CC=C(C)C=C1S([O-])(=O)=O FPAYXBWMYIMERV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N gallic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 2
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 2
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 2
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 2
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 238000009827 uniform distribution Methods 0.000 description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 2
- RPAJSBKBKSSMLJ-DFWYDOINSA-N (2s)-2-aminopentanedioic acid;hydrochloride Chemical class Cl.OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O RPAJSBKBKSSMLJ-DFWYDOINSA-N 0.000 description 1
- 239000001124 (E)-prop-1-ene-1,2,3-tricarboxylic acid Substances 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- PHOLIFLKGONSGY-CSKARUKUSA-N (e)-(3-methyl-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazine Chemical compound C1=CC=C2S\C(=N\N)N(C)C2=C1 PHOLIFLKGONSGY-CSKARUKUSA-N 0.000 description 1
- PCYGLFXKCBFGPC-UHFFFAOYSA-N 3,4-Dihydroxy hydroxymethyl benzene Natural products OCC1=CC=C(O)C(O)=C1 PCYGLFXKCBFGPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LWKJNIMGNUTZOO-UHFFFAOYSA-N 3,5-dichloro-2-hydroxybenzenesulfonic acid Chemical compound OC1=C(Cl)C=C(Cl)C=C1S(O)(=O)=O LWKJNIMGNUTZOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BOTGCZBEERTTDQ-UHFFFAOYSA-N 4-Methoxy-1-naphthol Chemical compound C1=CC=C2C(OC)=CC=C(O)C2=C1 BOTGCZBEERTTDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BBTNLADSUVOPPN-UHFFFAOYSA-N 5,6-diaminouracil Chemical compound NC=1NC(=O)NC(=O)C=1N BBTNLADSUVOPPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWEOQOXTVHGIFQ-UHFFFAOYSA-N 8-anilinonaphthalene-1-sulfonic acid Chemical compound C=12C(S(=O)(=O)O)=CC=CC2=CC=CC=1NC1=CC=CC=C1 FWEOQOXTVHGIFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IPBNQYLKHUNLQE-UHFFFAOYSA-N 8-anilinonaphthalene-1-sulfonic acid;azane Chemical compound [NH4+].C=12C(S(=O)(=O)[O-])=CC=CC2=CC=CC=1NC1=CC=CC=C1 IPBNQYLKHUNLQE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000004569 Blindness Diseases 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- PHOQVHQSTUBQQK-SQOUGZDYSA-N D-glucono-1,5-lactone Chemical compound OC[C@H]1OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O PHOQVHQSTUBQQK-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 1
- CIWBSHSKHKDKBQ-DUZGATOHSA-N D-isoascorbic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-DUZGATOHSA-N 0.000 description 1
- 239000003109 Disodium ethylene diamine tetraacetate Substances 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- IMQLKJBTEOYOSI-GPIVLXJGSA-N Inositol-hexakisphosphate Chemical compound OP(O)(=O)O[C@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H]1OP(O)(O)=O IMQLKJBTEOYOSI-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- RRZGPZPQGGABGZ-UHFFFAOYSA-N OC(=O)C=C(O)C1=CC=C(O)C=C1 Chemical compound OC(=O)C=C(O)C1=CC=C(O)C=C1 RRZGPZPQGGABGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- IMQLKJBTEOYOSI-UHFFFAOYSA-N Phytic acid Natural products OP(O)(=O)OC1C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C1OP(O)(O)=O IMQLKJBTEOYOSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 1
- CPOBTYJRKAJERX-KWNZBJHBSA-N S/1C2=CC=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1SC2=CC=CC=C2N1CC Chemical compound S/1C2=CC=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1SC2=CC=CC=C2N1CC CPOBTYJRKAJERX-KWNZBJHBSA-N 0.000 description 1
- XSTXAVWGXDQKEL-UHFFFAOYSA-N Trichloroethylene Chemical compound ClC=C(Cl)Cl XSTXAVWGXDQKEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N Uric Acid Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1NC(=O)N2 LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N Uric acid Natural products N1C(=O)NC(=O)C2NC(=O)NC21 TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 229940091181 aconitic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- MVIOINXPSFUJEN-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonic acid;hydrate Chemical compound O.OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 MVIOINXPSFUJEN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 238000005266 casting Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- NEHMKBQYUWJMIP-NJFSPNSNSA-N chloro(114C)methane Chemical compound [14CH3]Cl NEHMKBQYUWJMIP-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- GTZCVFVGUGFEME-IWQZZHSRSA-N cis-aconitic acid Chemical compound OC(=O)C\C(C(O)=O)=C\C(O)=O GTZCVFVGUGFEME-IWQZZHSRSA-N 0.000 description 1
- 150000001860 citric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 235000019301 disodium ethylene diamine tetraacetate Nutrition 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 1
- 235000010350 erythorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 238000005188 flotation Methods 0.000 description 1
- 150000004675 formic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- UPBDXRPQPOWRKR-UHFFFAOYSA-N furan-2,5-dione;methoxyethene Chemical compound COC=C.O=C1OC(=O)C=C1 UPBDXRPQPOWRKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940074391 gallic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000004515 gallic acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000012209 glucono delta-lactone Nutrition 0.000 description 1
- 229960003681 gluconolactone Drugs 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000005534 hematocrit Methods 0.000 description 1
- BTIJJDXEELBZFS-UHFFFAOYSA-K hemin Chemical compound [Cl-].[Fe+3].[N-]1C(C=C2C(=C(C)C(C=C3C(=C(C)C(=C4)[N-]3)C=C)=N2)C=C)=C(C)C(CCC(O)=O)=C1C=C1C(CCC(O)=O)=C(C)C4=N1 BTIJJDXEELBZFS-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- BTIJJDXEELBZFS-QDUVMHSLSA-K hemin Chemical compound CC1=C(CCC(O)=O)C(C=C2C(CCC(O)=O)=C(C)\C(N2[Fe](Cl)N23)=C\4)=N\C1=C/C2=C(C)C(C=C)=C3\C=C/1C(C)=C(C=C)C/4=N\1 BTIJJDXEELBZFS-QDUVMHSLSA-K 0.000 description 1
- 229940025294 hemin Drugs 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000007373 indentation Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 229940026239 isoascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- FPYJFEHAWHCUMM-UHFFFAOYSA-N maleic anhydride Chemical compound O=C1OC(=O)C=C1 FPYJFEHAWHCUMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000000873 masking effect Effects 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- XJRBAMWJDBPFIM-UHFFFAOYSA-N methyl vinyl ether Chemical compound COC=C XJRBAMWJDBPFIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 230000036963 noncompetitive effect Effects 0.000 description 1
- 239000004745 nonwoven fabric Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- GNURASXBKKXAOM-JGWLITMVSA-N oxido-[(2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexylidene]oxidanium Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=[O+][O-] GNURASXBKKXAOM-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 238000005502 peroxidation Methods 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940068041 phytic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000000467 phytic acid Substances 0.000 description 1
- 235000002949 phytic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 1
- 150000003138 primary alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000002250 progressing effect Effects 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 238000012113 quantitative test Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000009877 rendering Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000009738 saturating Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- GTZCVFVGUGFEME-UHFFFAOYSA-N trans-aconitic acid Natural products OC(=O)CC(C(O)=O)=CC(O)=O GTZCVFVGUGFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 229940116269 uric acid Drugs 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 230000004393 visual impairment Effects 0.000 description 1
- 239000011800 void material Substances 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/54—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving glucose or galactose
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
- G01N33/525—Multi-layer analytical elements
- G01N33/526—Multi-layer analytical elements the element being adapted for a specific analyte
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/66—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood sugars, e.g. galactose
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
P-ř-4-nw odeěitotolný· reagenční testovací proužek
Oblast techniky
Vynález se týká suchého testovacího proužku určeného pro měřeni koncentrace analytu v biologické kapalině, zejména testovacího proužku měřícího koncentraci přímo bez potřeby měřícího zařízení.
Známý stav techniky
Pro měření koncentrace určitých analytu v biologických kapalinách byla vyvinuta celá rada vizuálních testovacích zařízení, tato zařízení měří například glukózu, cholesterol proteiny, ketony, fenylaianin nebo enzymy v krvi, moči nebo slinách.
V Klinických laboratořích, lékařských ordinacích, nemocnicích a domácnostech se používají v hojné míře ke stanovení koncentrace glukózy v biologických tekutinách suché reagenční proužky, které jsou napuštěny kompozicemi na bázi enzymů. Ve skutečnosti se tyto reagenční proužky staly pro mnoho z několika miliónů diabetiků každodenní nezbytností. Vzhledem k tomu, že diabetes může způsobit závazné anomálie týkající se chemie krve, může přispívat ke ztrátě zraku, poruchám ledvin, a může mít další vážné zdravotní následky. Aby se minimalizovala možnost vzniku těchto následků, musí se většina diabetiků pravidelně testovat a v souladu s výsledky testů následně upravit koncentraci glukosy v. tele například pomocí diety a/nebo aplikaci inzulínových injekcí. Někteří pacienti musí provádět kontrolu koncentrace glukózy v krvi častěji než jednou denně, například čtyřikrát a častěji.
Pro diabetiky, kteří musí řídit svou dietu tak, aby regulovali přísun cukru a/nebo pro diabetiky, kteří jsou nuceni užívat inzulínové injekce a je třeba u nich provádět v tomto ohledu časté testy koncentrace glukózy v krvi, je zvláště důležité mít levné a přesné reagenční proužky na stanovení glukózy.
Jsou známé reagenční proužky, které obsahuji indikátor, jenž mění barevný odstín v závislosti na koncentraci glukózy v biologické tekutině, která se aplikuje na uvedený proužek. Ačkoliv některé tyto proužky využívají chemii v redukované míře, obecně se dá říci, že tyto proužky obsahuji oxidovatelné barvivo nebo dvojici barviv. Některé proužky obsahují enzym, například glukosooxidasu, který je schopen oxidovat glukosu na kyselinu gíukonovou a peroxid vodíku. Rovněž obsahují oxidovatelné barvivo a substanci mající peroxidačni účinnost, která je schopna selektivně katalyzovat oxidaci oxidovatelného barviva v přítomnosti peroxidu vodíku, (viz například patent US 5,306,623, vydaný 26 dubna,
1994, (Kiser a kol.)).
Patent US 3,964,871, vydaný 22 června, 1976 (Hochstrasser) popisuje jednorázové použitelný indikační proužek pro přímé měření koncentraci látek , například glukózy, v tělních tekutinách. Tento indikátor registruje koncentraci látky jak pomoci, indikační reagenční látky, která se zoxiduje a změní svou barvu, pokud zreaguje s uvedenou látkou, tak pomocí „antagonisty“, který určitým způsobem brání akumulaci zoxidovaného indikátoru do okamžiku, kdy je zcela spotřebován.
Palmer a kol. popisuje „digitální“ kvantitativní testovací systém pro určování glukózy a dalších určovaných látek v evropské patentové přihlášce č. 0 317 070, publikované 24 května 1939 (viz rovněž US patent 5,036,000, vydaný 30 července 1991). Tento systém měří koncentraci organické sloučeniny v biologické tekutině nejprve zoxidováním této sloučeniny specifickým oxidasovým enzymem za vzniku peroxidu vodíku. Tento systém zahrnuje chromogen, který je redukčním činidlem peroxidu vodíku a redukčním činidlem na vzduchu stabilního peroxidu vodíku, které má větší redukční-potenciál. Větší redukční potenciál zdrží veškeré de tekova tel né barevné změny chromogeny do té doby, dokud se ^nes:pottebu-je^pr-yn:í^na^vzd;uhih:u=.-sta,bi!níi^i:r=ed:u=kč:n=i^č,i.n.id:ko^p;e:rio.x:i;d;u: vodíku. Z toho vyplývá, že k žádné barevné změně nedojde, dokud není koncentrace měřeného peroxidu, vodíku menší než předem stanovená koncentrace odpovídající koncentraci na vzduchu stabilnímu redukčnímu činidlu peroxidu. To má za následek; že tento systém měří koncentraci sledované látky kvantitativně, nezávisle na barevné intenzitě.
Englemann popisuje v patentu US 4,738,823 vydaném 19 dubna 1988 testovací proužek pro určování stanovované látky, který má nosný člen mající absorbční materiál, který odstraňuje - přebytek- vzorku ... aplikovaný na uv.edený .proužek,. .Tento proužek může rovněž zahrnovat - obal s otvory, :skrze . které. může ..být příslušný vzorek zaveden.
Burkhardt a kol. popisuje v patentu US 4,810,470 vydaném 7 března 1989 zařízení pro měření koncentrací-anaiytu v kapalných vzorcích. Toto zařízeni zahrnuje jednu nebo více savých matric pokrytých kapalinu nepropouštějícím pbvlakem^fvbfěným-’fólii. Vzorek je uložen na část savé matrice a měřen chromaíograficky. uvedený vzorek se vzlínánim pohybuje do testovací oblasti, ve které je obsaženo testovací činidlo pro příslušný analyt.
Dařfern a kol. popisuje v patentu US 4,994,238, vydaném 19 února 1991, chemické analytické testovací zařízeni, které obsahuje absorpční vrstvu, vodovzdornou bariérovou vrstvu a reagenčni vrstvu, která má určující objem. Vzorek se aplikuje na reagenční vrstvu skrze vyrovnané otvory v překrývajících se absorpční a bariérové vrstvě.
Pokud se test provádí doma, lékařské ordinaci, na klinice nebo v nemocnici jsou přesnost a opakovatelnost stanovení glukózy maximálně důležité. V případě barevné indikujícího reagenčníkvo proužku, je žádoucí, aby byla barevná změna výrazná, zřetelná *a intenzivní při změnách jiných složek biologické tekutiny než glukózy. V případě vizuálního červeného reagenčního proužku je zvláště důležité, aby diabetici, kteří mohou mít zhoršené vidění, měly proužek, který vykazuje výraznou barevnou změnu v závislosti na koncentraci glukózy, přestože barevná změna, kterou vykázal tím, že došlo ke zrněné absorbance při dané vlnové délce je pro přesné měřící a odečítací proužky rovněž důležité.
Protože barevné změny .zahrnuji celou řadu chemických reakcí, nelze získat naměřené hodnoty okamžitě, takže uživatel musí určitou dobu čekat, zpravidla maximálně minutu, než uvedené reakce proběhnou. Poklid měřící zařízení odečte uvedený proužek, může časový obvod dát signál označující, že reakce již byly ukončeny. Nicméně, pokud je proužek odečítán vizuálně bez měřícího zařízení, může člověk podcenit dobu potřebnou pro proběhnutí výše uvedených reakci a přečíst uvedený proužek předčasně, čímž se výsledek stává nepřesným. Nebo muže uživatel naopak čekat s přečtením proužku zbytečné dlouho, aby si byl skutečně jist, že všechny reakce již proběhly, a ztrácet tím zbytečně svůj čas. z výše uvedeného vyplývá, že je žádoucí vyvinout „chemický časový měřič, tj. prvek na proužku, který bude měnit barvu bez ohledu na koncentraci glukózy (nebo dalšího sledovaného analytu) ve vzorku, po určité době dostatečné pro proběhnuti všech potřebných chemických reakcí mezi testovaným vzorkem a testovacím proužkem.
Podstata vynálezu
Vynález poskytuje protáhlý vícevrstvý reagerTčrTí testovač·}™' proužek pro měření koncentrace analytu ve vzorku biologické tekutiny, která se na tento vzorek aplikuje, přičemž uvedený proužek zahrnuje
a) spodní vrstvu s otvorem pro příjem vzorku;
b) membránovou vrstvu mající vzorkovou stranu orientovanou k uvedené spodní vrstvě a testovací stranu opačným směrem, tj. protilehle k této straně, a obsahující reagenční činindlo, které, může reagovat . s anaíytem za-vzniku barevné změny, přičemž reakční činindlo obsahuje
i) první složku, která vzájemně reaguje s anaíytem za vzniku peroxidu vodíku;
ii) druhou, složku, která vzájemně reaguje s peroxidem vodíku , což vede k její barevné změně; a iii) třetí složku, která inhibuje barevnou změnu druhé složky;
c) mezilehlou vrstvu mezi spodní a membránovou vrstvou; a ................. .......-.....-........................ ................
d) měřicí prostředek pro distribuováni vzorku podél proužku, který zahrnuje
i) nesavou oblast membránové vrstvy; a ii) tekutinu-přepravující kanál provedený v mezilehlé vrstvě určený k vedení vzorku přes povrch nesavě oblasti do množiny diskrétních savých testovacích oblastí uspořádaných podél délky membránové vrstvy;
přičemž koncentrace inhibitoru roste předem stanoveným způsobem v určité vzdálenosti od prvního konce proužku, takže ve vzorku musí být obsažen analyt v. odpovídajícím způsobem zvýšené koncentraci pokud má dojít k barevné změně. Jakmile se vzorek aplikuje , na proužek , může změnit barvu jedna nebo několik testovacích oblastí a barvu-měnící oblast, která je nejvzdálenější od prvního konce indikuje koncentraci analytu. ve vzorku.
.1
Při provozu, způsob měřeni koncentrace analytu ve vzorku biologické tekutiny zahrnuje následující kroky:
(a) aplikování vzorku na reagenční testovací proužek, který obsahuje:
(i) množinu savých oblastí, z nichž každá/ mění barvu pokud se dostane do kontaktu s tekutinou obsahující alespoň předem stanovené množství analytu, větší než množství analytu, které způsobí barevnou změnu testovacích barvuměnících oblastí, které se nacházejí blíže k prvnímu konci ινηπ^ιι a .. . .......... ... -..... ...
ρ, i v w *. a μ ca (ii) měřící prostředek pro distribuování vzorku po předem stanovené nesavé dráze ke každé z testovacích barvuměnicích oblasti a (b) pozorování testovací oblasti, která změní barvu a která je nejvzdálenější od prvního konce uvedeného proužku.
U proužku podle vynálezu se jedná o proužek, který poskytuje viditelnou indikaci koncentrace sledované látky, která je obsažena v biologické tekutině aplikované na „vzorkovou stranu proužku. Viditelná indikace se objeví na protilehlé (neboli testovací straně) proužku.
testovacího proužku závisí samozřejmě na látky a biologické tekutiny, které mají být proužky mohou být navrženy tak, aby jakými jsou například glukosa, alkohol, ketony, kyselina močová, fenylalanin, nebo
Chemické složení kombinaci sledované měřeny. Testovací detekovaly analyty, cholesterol, proteiny, en z y my ,v, biolog tc ký_c h ..tekutin á c j._a k ý m i _. j s o u _ n apΐ i k I á d' ~' k r e v, mo a sliny, rovněž tak ve vodě. V zájmu přehlednosti a zpřístupnění budou reagenční testované- proužky podle vynálezu podrobněji popsány jako reagenční proužky pro detekci glukosy v krvi. Odborník v daném oboru může snadno přizpůsobit informaci získanou v následující popisné části pro detekování dalších kombinaci analytů a biologických kapalin.
Testovací proužek podle vynálezu poskytuje relativně jednoduchý a rychlý způsob stanovení koncentrace glukosy v neodměřeném vzorku krve. Uvedený proužek obsahuje spodní vrstvu s otvorem, skrze který může být testovaný vzorek zaveden na vzorkovou stranu porézní matrice, zatímco- protilehlá strana matrice je testovací stranou. Matricí je zpravidla ’ membrána, přičemž v následující specifikaci budou použity oba tyto zaměnitelné výrazy. Testovací reagenční činidlo se aplikuje na matrici a ve větším či menším rozsahu se impregnuje do pórů této matrice. Pro zjednodušeni bude v následujícím popisu a v pti I ože'nýc h pa ten to vých~ná rocích reagenční-činidlo -na-m-atr-ici-někdy-- — -.....
označeno jako „povlak“.
ř-t
Mezi spodní vrstvou a matricí leží mezilehlá vrstva. Úkolem vybrání neboli výřezu v meziiehlé vrstvě zarovnaného s nesavými plochami membrány je vést vzorek k sérii savých nebolí středné absorpčních testovacích ploch, které jsou uspořádány podél uvedeného proužku. Série zářezů v mezilehlé vrstvě obklopuje prostor okolo testovacích oblasti za účelem vhánění proudu vzorku do těchto oblastí.
Pevný objem červené krvinky a membrány v každé
L, 1 í — I. - -xDl LI .
mohou ztěžovat detekování vzorku, zpravidla celkové krve obsahující glukózu, se zavede na vzorkovou stranu ze série testovacích oblasti. Výhodně má spodní vrstva: otvory neboli průduchy zarovnané s testovacími oblastmi membrány čímž se usnadní rovnoměrné rozloženi objemu vzorku. Poréznost matrice umožni tekutině protéci ze vzorkové strany k testovací straně, například pomocí kapilárního jevů',
Testovací reagenční činidlo může tedy reagovat s glukosou v krvi a způsobit tak barevnou změnu na testovací straně nebo v její k tomu, že silně zbarvené červené krvinky barevné změny, je uvedená matrice výhodně anizotropní, přičemž velikost pórů se postupné směrem k testovací-. straně zmenšuje, diky čemuž dojde k zachyceni červených krvinek ještě mimo testovací stranu matrice. Pro různé komponenty testovacího proužku a časového1 měřiče lze použít různých materiálů. Některé z-· těch to materiálů jsou popsány-v patentu US 5 306 623 a 5 418 142 vydaných 26 dubna 1994 a 23 května 1995 Kíserem a kol.
Vzhledem
Testovací reagenčni činidlo obsahuje složku, která převede glukosu na peroxid vodíku, například glukosooxidásu, jednu nebo více složek pro detekování peroxidu vodíku získaného převedením glukosy přítomné ve vzorku a inhibitor, Složkou pro detekování peroxidu vodíku může být peroxidasa, výhodně
Mezi spodní vrstvou a matricí leží mezilehlá vrstva. Úkolem vybráni neboli výřezu v mezilehlé vrstvě zarovnaného s nesavými plochami membrány je vést vzorek k sérii savých neboli středné absorpčních testovacích ploch, které jsou uspořádány podél uvedeného proužku. Série Zářezu v mezilehlé vrstvě obklopuje prostor okolo testovacích oblasti za účelem vhánění proudu vzorku do těchto oblastí.
Pevný objem červené krvinky a membrány v každé vzorku, zpravidla celkové krve obsahující glukózu, se zavede na vzorkovou stranu ze série- testovacích oblastí. Výhodně má spodní vrstva otvory neboli průduchy zarovnané s testovacími oblastmi membrány čímž se usnadní rovnoměrné rozložení objemu vzorku. Pořéznost matrice umožní tekutině protéci* ze vzorkové strany k testovací straně, například pomocí kapilárního jevu.
Testovací reagenční činidlo muže tedy reagovat s glukosou v krvi a způsobit tak barevnou změnu na testovací straně nebo v její blízkosti. Vzhledem k tomu, že silně zbarvené červená krvinky mohou ztěžovat detekování barevně změny, je uvedená matrice výhodně anizotropni, přičemž velikost pórů se postupně směrem k testovací straně zmenšuje, díky čemuž dojde k zachycení červených krvinek ještě mimo testovací’ stranu matrice. Pro různé komponenty testovacího proužku a časového měřiče lze použit různých materiálů. Některé z těchto materiálů jsou popsány v patentu US 5 306 623 a 5 418 142 vydaných 26 dubna 1994 a 23 května 1995 Kiserem a kol.
Testovací reagenční činidlo obsahuje složku, která převede giukosu na peroxid vodíku, například glukosooxidásu, jednu nebo pro detekování peroxidu vodíku získaného glukosy přítomné ve vzorku a inhibitor. Složkou pro více složek převedením detekování peroxidu vodíku muže 'být peroxidasa, výhodně peroxidasa křenu selského, spolu s „indikátorem“ který v důsledku probíhající reakce mění barvu. Indikátorem muže být oxidovateiné barvivo nebo pár barviv. Peroxidasa katalyzuje oxidaci indikátoru v přítomnosti peroxidu vodíku. Konečným prvkem reagenčního činidla je inhibitor, který retarduje barvu-měníci oxidaci indikátoru.
Proužek je podél své délky rozčleněn na jednotlivé segmenty tak ,že sousedící membránové segmenty mají rozdílnou koncentraci inhibitoru. Každý segment má savou testovací oblast, která jako. jediná mění barvu jakmile se dostane do kontaktu s dostatečným množstvím glukózy za prvé pro vyčerpání veškerého ‘ 'inhibitoru'a“nástedně * pro 'oxidací indikátoru, která -má- za -následek charakteristickou změnu barvy. Barevná změna v pří sl ušně~oblast? tedy svědčí o tom, že je v.původním vzorku krve určitá mezní koncentrace glukosy. Podél proužku v příslušném směru má potom každý následující segment krokově zvýšenou koncentraci inhibitoru, což odpovídá skokovému zvýšení 1 mezní koncentrace glukosy. Koncentrace indikátoru je pro všechny segmenty stejná. V principu je rovněž možná i další změna rovnováhy inhibitoru a indikátoru.
Pokud mají jednotlivé segmenty koncentrace inhibitoru ve ' vhodném rozmezí pró příslušný testovací vzorek ·, způsobí- reakce· sousedících testovacích oblasti s analytěm ’ to, že sé jedna oblast zbarví a druhá nikoliv.'Tento výsledek naznačuje; že koncentrace glukosy ve vzorku je pří nejmenším shodná s mezní koncentrací požadovanou pro změnu barvy první zbarvené oblasti, ale není tak vysoká, aby vyvolala změnu barvy sousedící oblasti.
...--------------------P-r-o-monitorováni______kte-vni. .g.l.u.ko_s„y. lz_e_připadne zařadit mezi prvky indikačního proužku i čas měřící segmentovou potahovou
1U vrstvu, tj. porézní matrice má na sobe navrstveno kromě testovacího reagenčního činidla rovněž glukózu. V suchém stavu není chemie reagenčního činidla glukosou aktivována, ale jakmile se na proužek aplikuje vzorek, potom se čas-měřicí potahová vrstva hydratuje a glukosa v potahové vrstvě způsobí po uplynutí určité předem stanovené doby barevnou změnu indikátoru. Výhodně je glukosa v časovém prvku přítomna v množství větším než je potřebné pro překonání inhibitoru. V takovém. případě, je potřebný čas delší nebo kratší v závislosti na tom, zdali je přítomno více či méně inhibitoru. Barevné změny v proužku a v časovém prvku lze pozorovat bud přímo okem nebo pomocí optického přístroje, který detekuje změny odraznosti.
Stručný popis obrázků ' Obr, 1 znázorňuje perspektivní pohled na matrici přímo odečitatelného reagenčního testovacího proužku podle vynálezu;
obr. 2 znázorňuje rovinný spodní pohled, částečně v řezu, na vzorkovou, stranu přímo odečitatelného reagenčního testovacího proužku podle vynálezu;
obr, 3 znázorňuje zvětšený perspektivní pohled, částečně v řezu, na část vnitřku testovacího proužku z obr. 2;.
obr. 4 znázorňuje řez proužkem z obrázku 2 vedený rovinou
4-4;
obr. 5 znázorňuje spodní rovinný pohled na testovací proužek podle vynálezu;
1 obr. 6 znázorňuje horní rovinný pohled ukazující testovací stranu testovacího proužku z obr. 5;
obr. 7 znázorňuje testovací proužek z obr. 6 po aplikaci testovaného vzorku na tento proužek.
Předmětem vynálezu je přímo odečitatelný reagenční testovací proužek pro měření koncentrace analytu v biologické tekutině.
------Klíčovým — prv ke m-tak ové ho-testovacího proužku. . je porézn Lmatrice, ’^^^Tž'^oLrč^1^j(ei^t^ovací^^a3Třfcsřn^čT^sď1’ó7sj^ž^p’b,yTě,h^Sab-atévin-é·4* změně v důsledku aplikace analytu ve vzorku biologické tekutina na uvedený proužek.
Matrice může mít uniformní kompozici nebo- může být tvořena potaženým substrátem a může být buď izotropní nebo anizotropni. Má vzorkovou stranu, na kterou se aplikuje vzorek a testovací stranu, na které se pozoruje barevná změna. Výhodně je matrice provedena jako anizotropni membrána, výhodněji jako anizotropni membrána, mající široký rozsah velikostí pórů. Gradient velikostí pórů může například při průchodu skrze - membránu představovat . 0,1 mikrometru až) přibližně 1 SO mikrometrů. Na vzorkové straně, tj. straně s většími póry, leží velikost pórů výhodně- v rozmezí přibližně . od 30 mikrometrů do přibližně 40 mikrometrů. Na testovací straně membrány, tj. straně s nejmensími póry, je prázdný objem relativně malý a materiál membrány je obecně dost hustý, přičemž tato vrstva může zpravidla tvořit až 20% tloušťky membrány. V této vrstvě se velikost _pórů_pohybuje výhodně v rozmezí přibližně od 0,1 přibližně do 0,8 mikrometrů přičemž nominální velikost póru je
2 výhodně ě přibližné 0,3 mikrometrů. Pokud se biologická tekutina aplikuje na vzorkovou stranu, vzorek se střetává při průniku uvedenou membránou stále více s menší póry. Eventuálně, pevné částice, jakými jsou například červené krvinky, dosáhnou v uvedené membráně pouze pozice, do které mohou proniknou vzhledem k průměru pórů a dál se jíž nedostanou. Vzorek, stále, ještě obsahujícího rozpuštěnou glukosu, proniká skrze membránu na testovací stranu. Anizotropni povaha membrány a/nebo použití separacní složky (bude diskutována později) umožní relativně rychlé proudění membránou, i navzdory tomu, že dochází k filtraci pevných částic.
Společně s tím, jak vzorek prochází skrze matrici, způsobí reakce s. reagenčním činidlem vytvoření ,nebo rozložení lehce absorbujícího barviva ve volném prostoru v blízkosti testovací) strany, čímž značně ovlivní obraznost od matrice.
matriční· materiály lze zařadit polysulfony polyamidy (nylony). Rovněž mohou být použity i další materiály mající srovnatelné vlastnosti. Tyto polymery mohou být modifikovány za účelem zavedeni dalších funkčních skupin, které poskytnou struktury s nábojem, takže povrchy uvedené matrice mohou být neutrální, pozitivní nebo negativní.
Výhodným způsobem přípravy porézního materiálu, který tvoří matrici ie. lití polymeru bez . nosného jádra. Takovou matrici je například anizotropni polyšulfonová membrána dostupná od společnosti Memtec, lne., Timonium, MD. Zpravidla se používá matrice, jejiž tloušťka je méně než 200 mikrometrů, přičemž výhodné se pohybuje přibližné v rozmezí od 115 do 155 mikrometrů.
nejvýhodnější je tloušťka přibližné 130 až 140 mikrometrů, zejména pokud je tato matrice z nylonu nebo anizotropního polysulfonu.
Výše uvedená membrána může být ošetřena testovacím reagenčním činidlem ponořením této membrány do směsi příslušných složek, čímž dojde k nasycení membrány těmito složkami, výhodně se alespoň některé složky aplikují na membránu postupně, přebytečné reagenční činidlo lze odstranit mechanicky, například pneumatickým nožem, skalpelem nebo skleněnou tyčí. Membrána se následně vysuší, reakční činidlo má tendenci se koncentrovat v blízkosti testovací strany membrány, tj. strana-s-malými -póry. · - - - - - -------· --·
Testovací reagenční činidlo obsahuje (i) složku pro převedení glukosy na peroxid vodíku, (ii) složku pro detekování peroxidu vodíku a (iii) složku pro inhibování složky, která detekuje peroxid vodíku. Reagenční činidlo může případně dále obsahovat separačni složku, která způsobuje, že pevné částice, například červené krvinky, které se zachytí v matrici, se účinně odstraní z biologické tekutiny. Dále může reagenční činidlo obsahovat složky, které budou popsány v následující části a v příkladech.
Výhodnými složkami pro převedení - glukosy na-peroxid vodíku 'jsou';například, glúkosáoxldasa,enzym','který, se zpravidla získává z mastňáku Aspergilla nebo - Penicill-ia. Gíukosaoxidasa reaguje s glukosou á oxidem za vzniku glukonolaktonu a peroxidu vodíku. Optimální koncentrace glukosaoxidasy závisí na složení indikačního systému. Pokud je například indikačním systémem systém MBTHSB-ANS (který bude popsán níže),potom se __konce n t r a c e glukosa o x iíd a s y vhod né pohybuje _v_r_o z mez]_____při b liž n ě____ od 500 do 10 000 U./ml, výhodněji přibližně od 700 do 2000 U./ml a nejvýhodnějí přibližně 1000 U./ml. Obecná, vysoké koncentrace glukosaoxidasy způsobují, že reakce proběhne rychleji a nižší koncentrace způsobí, že proběhne méně rychie.
Takto vzniklý peroxid vodíku reaguje se složkou určenou pro detekci peroxidu vodíku, která obsahuje peroxidasu, která selektivně katalyzuje reakci mezi peroxidem vodíku a indikátorem. Peroxidasa používá peroxid vodíku jako oxidační činidlo, které je schopno odstranit atomy vodíku z různých substrátů. Vhodná peroxidasa může obsahovat ferriprotoporfyrin, červený hemin získaný z rostlin. Rovněž jsou vhodné peroxi.dasy i získané ze zvířat, například z jejich štítné žlázy, peroxidasa z křenu selského (HRPO) je zvláště výhodná jako hlavní součást složky pro detekování peroxidu vodíku. .
' If w , Peroxid vodíku, výhodně katalyzovaný peroxidasou, reaguje bucf přímo nebo nepřímo za vzniku nebo rozkladu indikačního barviva, které absorbuje světlo v předem definovaném rozmezí vlnových délek. Indikační barvivo výhodně absorbuje- světlo silně při vlnové délce odlišné od vlnové délky, pří které silně absorbuje testovací reagenční. činidlo, Zoxidovanou formou, indikátoru může být zbarvený, slabě zbarvený nebo odbarvený konečný produkt , který dosvědčuje barevnou změnu testovací strany matrice, jinými slovy lze říci, že testovací reagenční činidlo může indikovat přítomnost analytu ve vzorku tak, že zbarvená oblast vybledne, nebo alternativňě’ se bezbarvá oblast zbarvi.
Mezi indikátory, které lze použit v rámci vynálezu je možné zařadit (a) 3-methyl-2-benzothiazolinonhydrazonhydrochlorid (MBTH) zkombinovaný s kyselinou 3-dimethylaminobenzoovou (DMAB); (b) MBTH zkombinovaný s kyselinou 3,5-d ich I oro-215 hydroxybenzensulřonovou (DCHBS); (c) 4-aminoantipyren (4-AAP) a kyselina 5-oxo-1 -(p-su Ifof enyl)-2-pyrazolin-3-karboxylová (OPSP); (d) 4-AAP a N-(m-tolyl)-diethanolamin (NDA); (e) kyselina 2,2’-azinodi(3-ethylbenzthiazolin) suífonová (ABTS); (f) 4-AAP a 4methoxynaftol; (g) pyrogallolová červeň (PGR); (h) bromopyrogallolová červeň (BPR);(i) kyselá zeleň 25 (AG); nebo (j) [3-methy1-2-benzothiazolinonhydrazon] N-sulronylbenzensulfonát sodný (MBTHSB) zkombinovaný s kyselinou amonium 8-anilino-1naftalensulfonovou (ANS), MBTHSB-ANS je výhodná kombinace. Další informace týkající se této kombinace indikátorů lze nalézt v související patentové přihlášce US č. 302,575, podané 8 září 1994.
Inhibiční složka retarduje uvedenou reakci mezi peroxidem vodíku a indikátorem, například redukcí peroxidu - vodíku nebo. recíu^cfiL- - '-.'-.jbttor mu*·· v principu působil podle několik různých schémat. Za prvé může inhibitor - konkurovat indikátoru a tím zpomalovat rychlost barevné změny indikátoru. Za druhé by nemohl inhibitor konkurovat a byl by tedy vpodstatě všechen vypotřebován před tím, než by došio k podstatné změně indikátoru. Další způsoby působení inhibitoru jsou rovnéž možné. Výhodnějsou inhibitory podle vynálezu nekonkurenční.
‘ Mezi vhodné inhibitory patří kyselina 2,3,4-trÍhydroxybenzoová; propylgatlát; kyselina 3,.4-dihydroxy-3-fenyJ-2-prppenoyá; 3,4dihydroxybenzaldehyd; kyselina galová, 5,6-diaminourac'il, kyselina askorbová a kyselina isoaskorbová. Výhodným inhibitorem je kyselina askorbová, nicméně kyselina askorbová v roztoku oxiduje a musí být stabilizována, aby se umožnilo naneseni reagenčniho činidla na matrici. Výhodnými stabilizátory jsou primární alkoholy, například et h'a n ol 7 m eth a ri 01 ’ neb o p rop a no I. Z v láš t ě “ 'výhodný m -“stabili z á torem“ je ethylalkohol v částečně koncentrovaných roztocích, tj. roztoky nejméně 50% ethanolu.
Ačkoliv anizotropni membrána, která je výhodnou matricí odfiltrovává červené krvinky a drzí je mimo testovací stranu, může uvedené testovací reagenční činidlo případné obsahovat separační složku. Tato separační složka by méla bát schopna produkovat z tekutiny obsahující červené krvinky, například z kompletní krve, maskováním červených krvinek v matrici relativně čistou bezbarvou tekutinu. Separační složky použitelné v rámci tohoto vynálezu zahrnují například polyethylenglykol, p o ly (methyl viny (ether/ anhydrid kyseliny maleinové, póly pro py lengly kol, kyselina polystyrénsulfonová, kyselina polyakrylová, polyvinylakohol a kyselina. polyvtnylsulfonová při pH přibližně mezi 4,0 až 8,0. Takové separační složky jsou přítomný v matrici v množství, které se bude měnit v závislosti na jejich náboji a molekulární hmotnosti, dalších složkách, zapouzdřených v matrici, pH matrice a velikosti póru, a zbytkové vlhkosti.matrice po vysušení. Tyto parametry jsou pro odborníka v daném oboru snadno stanovitelné. Pokud je například v matrici zapouzdřen jako separační vložka polypropylenglykol (například PPG-410 od BASF, Wyandotte, MI) je výhodně přítomna. přibližně 2 až 30 hm.% na objem (hm./obj) a výhodněji 8 až 10% hm./obj. Ostatní separační složky mohou být rovněž použity v koncentraci přibližně 2 až 30% hm./obj. Polymerni separační složky mohou být napuštěny nebo zapouzdřeny v matrici nebo zality do membrány v průběhu její výroby.
Separaci krve mohou rovněž ovlivňovat určité vodou rozpustné soli. mezi tyto vhodné soli separujicí krevní složky patří například citráty, mravenčany a sulfáty, stejné jako určité kyseliny, ':.a jako například aminokyseliny, kyselina citrónová, kyselina fytová a kyselina jablečná, (viz například patent US 3 552 928 vydaný 5 ledna 1971, M.C.Fetter). Výhodou zaváděni separační složky je to, že pevné látky, jako například červené krvinky, se v podstatě odstraní z biologické tekutiny, čímž se na testovacím místě vytvoří pozadí s menší barevností, které umožní lepší pozorování barevně změny produkované testovacím činidlem.
Do matrice mohou být zapouzdřeny rovněž další složky za účelem zlepšení barevnosti a odečítatelnosti reagenčních proužků a za účelem udržení rovnoměrností a integrity matrice. Testovací reagenční činidlo může..například ~ zahrnovat soli a/nebo pufry, které TraTTóTňirKáýi^pTi^šepaT sťcr^fraŤ viv a-^mWtei—^Pa-k·© vé^p:U=f=ry^mOhOU^ obsahovat například citrát přítomný v roztoku přibližně 0,01M až 1,0M a výhodně přibližné 0,TM. Rovněž lze použít, i další pufry.
Rovněž lze použít složky, které činí matrici hydrofilní nebo sloučeniny, které působí jako stabilizátory, například hydrolizované proteiny.Tyto sloučeniny zahrnuji · například hovězí sérum albumin, polypeptidy a protein s nízkou molekulovou hmotností dostupný jako Crotein SPA (CRODA, Imc. New York, N.Y.). Tyto sloučeniny se používají při koncentracích například přibližné·.. 1 mg/ml- až 100 mg/ml, V případě „Croteinu se používá výhodné koncentrace přibližně 30 mg/ml·- - - .....Do potahové vrstvy, která má -být nanesena na matrici lze .. rovněž zabudovat další stabilizátory a konzervační činidla. Například lze použit kyselinu ethylendiamintetraoctovou (EDTA), kyselinu diethylentriaminpentaoctovou (DTPA) a· příbuzné sloučeniny, například v koncentraci , přibližné 0,01 mg/ml až přibližně 10 mg/ml. jedním z citu konzervačních činidel je pomocí stabilizovat inhibitor.
Některé indikátory (například BPR) mají nežádoucí tendence migrovat do matrice. Pokud se takový indikátor použije, je třeba použít činidlo tvořící iontový pár, které by zabránilo takové migraci. K tomuto účelu lze použit například deriváty polyethyIenglykolu komerčně dostupné pod označením Polyquart (H) (Henkel, lne., Ambler, Patent Application), které jsou schopny usnadnit tvorbu iontových párů mezi indikátorem a dalšími složkami matrice.
Pokud je přítomnost analytu indikována vznikem barvy (například . MBTHSB-ANS), lze k reagenčnímu činidlu přidat povrchově aktivní činidla, která zjasní barvu a zvětší kontrast mezi barvou a bezbarvým okolím.
. _V praxi mohou.K.být u. testovacích, proužku .podle vynálezu rovněž použita organická rozpouštědla, která lze zahrnout do složení testovacího reagenčního činidla pro uvedenou matrici, samozřejmě za předpokladu, že jsou slučitelná se složením matrice a testovacího reagenčního činidla. Potencionálně vhodnými organickými rozpouštědly jsou chloroform, aceton, alkoholy, methylchlorid, di ethyl eth er a petrolether, acetonitrily a jejich, směsi. V praxi se u testovacího proužku podle vynálezu používá zejména 70% roztok ethanolu. ve vodě. . _ ..................... ......
Reagenční testovací činidlo, které se' nanese na matrici nebo napustí do matrice není na celém povrchu testovacího proužku, rozmístěno rovnoměrné. Výhodně se reagenční činidlo aplikuje na matrici v sérii paralelních proužků neboli „segmentů“, které
probíhají přes užší rozměr proužku, v každém následujícím segmentu se vždy skokově zvýší koncentrace inhibitoru. Každý segment má savou testovací oblast, testovací oblasti jsou oblasti, . ve kterých testovací reagenční činidlo reaguje s veškerou glukózou v krvi v důsledku, čehož dochází k barevné změně za předpokladu, že koncentrace glukózy je větší než koncentrace inhibitoru v uvedené testovací oblasti. Takže každá následná testovací oblast vyžaduje k tomu, aby došlo k barevně změně uvedené testovací oblasti, skokově zvýšení koncentrace glukózy ve vzorku.
Případně se jedna z testovacích oblastí přizpůsobí tak, aby sloužila'jako - časový - měřič- který-označí uplynutí, do sta tečně..dlouhé doby pro proběhnuti reakce mězrt^Watliin^á^ňÝňlŤn^čimiTdfé-m-^5^ glukosou ve všech testovacích oblastech. Tento Čas-odměřující prvek je nanesen na matrici nebo napuštěn do matrice spolu s ' kompozicí obsahující testovací činidlo a navíc ještě glukosu.. Protože cílem testovacího reagenčniho činidla je měnit barvu v odezvě na reakci s glukosou, vyžaduje sloučení těchto dvou složek bez barevné změny určitou opatrnost. V čas odměřujícím prvku musí být tedy dostatečné množství inhibitoru, které bude kompenzovat právě tento efekt . Hlídá se rychlost, kterou.se čas odměřující prvek, vysouší po aplikování roztoku , obsahujícího glukosu. V praxi se membrána nejprve - potáhne - roztokem '-obsahujícím pufry, . stabilizátory a* enzymy a táto potahová vrstva~se vysuší za vzniku první vrstvy. Následně' se aplikuje - druhá pOtahová vrstva jakoroztok indikátoru, inhibitoru a glukosy. Parametry, jakými jsou rychlost nanášení, teplota pece a prouděni vzduchu a množství roztoku nanášeného na membránu se stanoví předem a vhodným nastavením se dosáhne požadovaných koncentrací inhibitoru a/nebo ______gl.uko.s.y...Allejnatiyně_____L2®._nijsto_ př[mé aplikace druhé potahové vrstvy na matrici vytvořit samostatný pás druhé potahové vrstvy a tu následné umístit na první vrstvu, nicméně tento způsob není tak výhodný.
Pokud se vzorek aplikuje na testovací proužek, umožni hydratace čas odměřujícího prvku, aby mohla proběhnout barvutvořící reakce. Čas pro čas-odměřujicí prvek, tj. doba, po které tento prvek změní svou barvu, se následně určí na základě teploty a vlastností testovacího reagenčního činidla,zejména na základě koncentrace inhibitoru a množství glukosy a hydratační rychlosti a rychlosti difúze kyslíku.
čas, za kterou dojde k barevné změně čas-odměřujíciho prvku lze učinit závislým na koncentraci glukózy ve vzorku, nebo alternativně nezávislým na této koncentrací. „Zabudováním velkého přebytku glukosy do časového měřiče, se stane výše uvedený čas t A v podstatě nezávislý na koncentraci, glukosy ve vzorku. .
Ζ'/'ί ' J ’·λ' . ' časového měřiče, se stane tento ca* koncentrací glukosy ve vzorku závislý, například « ...
časový měřič změní barvu rychleji v případě, že bude koncentrace ·, / glukosy ve vzorku větší. Výhodně je koncentrace glukosy v časovém ; měřiči větší než přibližně 1500 mg/dl, což je koncentrace, která činí časový měřič v podstatě nezávislý na koncentraci glukosy ve vzorku pohybující se v rozmezí přibližně od 40 do 400 mg/ml.
Složení Čas-odměřujíctho prvku zahrnuje nadbytečné množství složky (například glukosaoxidasa), která se převede glukosu na peroxid vodíku a glukosu. Složení časového měřiče by mělo _ následně zahrnovat přinejmenším tolik inhibitoru, kolik má poslední prvek testovacího reagenčního proužku s nejvyšší koncentrací inhibitoru (prvek, který odpovídá odečtení nejvyšší koncentrace glukosy).
Z1
Časový měřič má rovněž důležitou funkci, co se týče kontroly kvality, tím, že se zviditelní v případě, že byl testovací proužek vystaven vlhkostí a tím byla ohrožena jeho spolehlivost. Testovací proužek musí zůstat suchý az do svého použití, protože složky, které převádí glukosu na peroxid vodíku ( zpravidla enzymy) mají tendenci ve vlhku degradovat. Takže pokud je uvedený proužek před použitím vystaven vlhkosti, stává se nespolehlivým. Poškození testovacího proužku, které není pro uživatele zřejmé, může tedy vést následně k chybným výsledkům při jeho použití. Nicméně pokud testovací proužek zahrnuje časodméřující prvek, dojde u něj v případě, že je vystaven vlhkosti, k -barevné změně-tohoto- časového ..měřiče., což, upozorní uživatele na :T1wtFč7i^7lže^r^ž’ek*'je^žrn^^bdňď'čeň^á^ně:méHbý^být^pěůžit^^^
Kromě matrice obsahující reagenční činidlo, testovací proužek podle vynálezu dále zahrnuje spodní vrstvu, která nese uvedenou matrici. Spodní vrstva je výhodné tvořena termoplastickou fólií, výhodněji polyesterem a má v sobě proveden otvor, skrze který lze vzorek aplikovat na vzorkovou stranu matrice. 2 tohoto otvoru pro vzorek se vzorek krve distribuuje ' po délce uvedené matrice. Pokud je spodní vrstva neprůhledná, potom v ní mohou být ve vhodné vzdálenosti1 od vstupního· otvoru provedena transparentní okénka neboli průzory, přičemž ťo, že se vzorek objeví v okénku-(okénkách)-- potvrdí, že se na testovací proužek aplikovalo.odpovídající množství vzorku.
Distribuce krve od otvoru k testovacím plochám se realizuje pomocí mezilehlé vrstvy, která leží mezi spodní vrstvou a membránou a případně je slepen s oběma těmito vrstvami. Tato mezilehlá_vrstva je výhodně tvořena termoplastickou vrstvou, výhodněji polyesterem. V této vrstvě jsou provedeny výřezy, které dá vedou vzorek podélně skrze uvedený proužek po nesavých drahách na membráně a směrují ho k jednotlivým testovacím plochám. Výřezy v mezilehlé vrstvě zarovnané s testovacími plochami tak, že každá testovací plocha je v podstatě obklopena stěnami mezilehlé vrstvy.
Výhodnou strukturu nesavých drah na membráně tvoří zhroucení membránové porézní struktury. Toho lze dosáhnout zahřátim, bud přímým nebo za použiti laseru , popřípadě ultrazvuku, výhodně doplněné stlačením. Nicméně výhodným způsobem pro dosažení této struktury je drcení neboli mačkání. Uvedená membrána se tedy zmáčkne, čímž se učiní nesavou (ale stále hydr.ofiíní s výjimkou testovaných ploch. U výhodných membrán podle vynálezu,, se mačkání provádí tak, že se. na piochy membrány, které mají být zmáčknuty aplikuje vysoký flak, alespoň 80 000 kPa, a případně teplo, alespoň 110°C. Výhodné tlaky a teploty závisí samozřejmě na lisovacím mechanizmu a na době stlačení., stejně jako na parametrech membrány.· Optimální hodnoty lze stanovit pomocí běžných experimentů.
Pro přesnost měřeni je důležité, aby byl objem krve zavedený do jednotlivých testovacích ploch reprodukovatelný. Pokud uvedené výřezy zcela obklopují testované oblasti, potom je zřejmé, že díky kapalinotěsnému spojí vytvořenému mezi mezivrstvou a spodní vrstvou a slisovanou membránou, je každá testovacf plocha spojena s uzavřeným (válcovitým objemem, jehož stěny jsou tvořeny mezilehlou vrstvou a jehož konce jsou tvořeny membránou a spodní vrstvou. Nicméně, distribuční kanálek probíhá podél testovacího proužku a dodává vzorek, do......každé z.testovacích oblastí. Vysoká přesnost vyžaduje, aby distribuční kanálek poskytoval do každé testovací plochy vždy stejný pevně stanovený objem vzorku, ale Vzhledem k tomu, že se výchozí aplikovaný objem vzorku liší, je výhodné, pokud je na obou koncích membrány absorpční vrstva, která odvádí přebytek vzorku z konců distribučního kanálku. Absorpční vrstvy na koncích uvedeného kanálku rovněž zlepšuji vzlínáni vzorku po délce testovacího proužku. Výhodné lze jako absorpční vrstvy použít v oboru dobře známé netkané textilie.
Barevná změna, kterou způsobuje glukosa v testovacím vzorku se objeví na testovací straně uvedené membrány. Je běžné překrýt tuto stranu membrány horní vrstvou mající otvory ~ zarovnané*—s testovacími oblastmi. Tyto otvory činí.......barevné. změny viditelnými a rovněž umožnTTjí reakčnich míst. Uvedená horní vrstva může být přichycena k membráně například pomoci adheziva. Výhodné je omezit adhezivo pouze na nesavé - oblasti membrány, pro případ, že by 1 · interferovalo s glukosu-měřícími reakcemi. Nicméně pokud uvedené adhezivo neinterřeruje s těmito reakcemi, je možné umístit ho i na savé plochy.
Vzhledem k tomu, že testovací plochy, pokud obsahují výhodné reagenční činidlo, pozvolna podléhají barevné změně, v případě, že' se'vystaví - světlu nebo - kyslíku, a vzhledem k-tomu, , že je případný časový měřič citlivý na vlhkost; jsou testovací proužky výhodné zabaleny do ‘neprůhledného kyslík a vlhkost nepropouštějícího obalu, například zataveni do fólie. Pokud jsou proužky zabaleny jednotlivě, může uvedený proužek během použiti zůstat ve sloupnutím otevřené fólií.
______________Vy.ná.l.ez..b_u.de_.nynl.„ . dá[e .popsán_s ohledejn na_obrázek 1, který znázorňuje matrici 10 pro měření množství analýtu v biologické tekutině. Ačkoliv je tato matrice znázorněna v obloukovitě poloze, je matrice 10 pružná a při použiti zpravidla rovná deska. Matrice zahrnuje vzorkovou stranu 12. na niž se aplikuje vzorek biologické tekutiny a testovací stranu 14 na niž, nebo v jejíž blízkosti indikuje barevná změna přítomnost uvedeného anaiytu. Barevná změna je výsledkem reakce mezi analytem a reagenčním činidlem napuštěným v pórech 16 uvedené matrice 10. Výhodné máji póry 15 matrice 10 pro měření koncentrace glukosy v krvi v blízkosti vzorkové strany 12 relativně veliký průměr, který se směrem k testovací straně 14 zmenšuje. Gradient velikosti pórů umožňuje zachycení červených krvinek v blízkosti vzorkové strany 12, takže jejich barva . neovlivňuje nežádoucím způsobem viditelnost barevné změny indikující přítomnost uvedeného anaiytu..
, f , Na obrázku jsou znázorněny tři paralelní segmenty a, b a c. Každý následující segment má skokově vyšší koncentraci inhibitoru než segment předcházející. Ú výhodného provedeni, se po aplikaci reagenčního činidla na membránu v paralelních segmentech uvedená membrána zmáčkne všude, mimo testovacích ploch, ve kterých dojde reakcím mezi ·· analytem .a .:reagenčním. činidlem. Toto rozmístění savých testovacích ploch, tj. v každém z paralelních segmentů je umístěna vždy jedna testovací plocha, a nesavých ploch je znázorněno v rovinném pohledu na obrázku 2 a1 ve zvětšení na perspektivním pohledu na část testovacího proužku na obrázku 3.
Obrázek 2 znázorňuje spodní rovinný pohled, částečně v řezu, na vzorkovou stranu 12 membrány 10 a absorpčních vrstev 20 a 22, které překrývají mezilehlou vrstvu 24 a spodní vrstvu 26. Membrána 10 a absorpční vrstvy 20 a 22 jsou výhodně neseny horní vrstvou, není znázorněna. Absorpční vrstvy 20 a 22 jsou výhodně umístěny na koncích uvedené membrány ( za přerušovanými čárami A a B) aby zde absorbovaly vzorek krve, který přebývá nad objemem potřebným pro uvedené měření. Tento objem musí být dostatečný, aby poskytl vzorek každé z testovacích ploch-a stejné tak ploše časového měřiče, pokud je přítomen.
Zpravidla proužek, který má jen několik testovacích ploch nevyžaduje sice tolik vzorku, ale umožňuje zjištění menšího rozmezí hodnot koncentrace glukózy a/nebo zjištěni s nižší přesností. Obrázek 2 znázorňuje 9 savých ploch, představujících 8 4 testovacích ploch (očíslovaných 1 až 8) a časový měřič . (T), který poskytuje odpo^ídajjcR ^zmezi měřených Jhodnot.a. přesnost.. měření a současně · nevyžaduje nadměrně velký objem vzorku. Mezilehlá vrstva 24 má výřezy 28. které jsou zarovnané s otvorem 30 pro zavádění vzorku ve spodní vrstvě 26. Vzorek se zavede tímto otvorem 30 a je veden díky vzlínání středovým kanálkem 32. mezilehlé vrstvy 24 do každé z testovacích ploch a do časodměřující plochy, přičemž veškerý přebytečný vzorek absorbují absorpční vrstvy 20 a 22. Pozorování vzorku skrze možné čiré okenní průzory 34 35 potvrzuje, že pro měřeny bylo poskytnuto dostatečné množství vzorku. Mezilehlá vrstva 24 výhodně tvoří spoj se vzorkovou stranou 12. uvedené membrány, takže vzorek nemůže proudit mezí sousedícími testovacími plochami přímo.
, Obrázek 3 znázorňuje zvětšený perspektivní pohled na část testovacího pproužku znázorněného na obr. 2. Na obrázku 3 jsou znázorněny testovací plochy 6, 7 a 8, patrné skrze spodní vrstvu 26. a separované prsty mezilehlé vrstvy 24 a membránou 10.
Případné adhezivní vrstvy 24A spojují mezilehlou vrstvu 24 se
-----------s-pod ní-vrstvou — 26-a membránou -1O.-Qtvorv -4Q-provedené-ve -vrstvě------------26 usnadňují proudění vzorku do uvedeného proužku. Otvory, ζό.
například 38, v horní vrstvě 36 jsou vyrovnány se savými plochami, čímž činí viditelnou jakoukoliv barevnou změnu v uvedené savé ploše a rovněž umožňuji přístup kyslíku, který je potřebný pro barvu-měnící reakci. Případná adhezivní vrstva 36A spojuje horní vrstvu 36 s testovací stranou membrány 10.
Obrázek 4 znázorňuje řez vedený rovinou 4-4 znázorněnou na obrázku 2, který ukazuje kromě vrstev znázorněných na obrázku 2 rovněž horní vrstvu 36. Otvory ve spodní vrstvě 26. jakým je například otvor. 40. jsou zarovnána s testovacími plochami a s čas-odměřujicí plochou a usnadňují naplnění objemu obklopujícího tyto jednotlivé oblasti vzorkem. Objemy, které mají být naplněny jsou spojeny pomocí membrány 10, mezilehlé vrstvy 24 a spodní vrstvy 26. Je. třeba, uvést, že odstup mezi vrcholem testovací oblasti 3 a spodní vrstvou 26 je pouze přibližné 12 mikrometrů, nicméně pro přehlednost byl tento rozestup znázorněn zvětšeně.
_ . Obrázek 5.znázorňuje spodní rovinný-pohled na proužek podle vynálezu, který zobrazuje otvor 300 pro zavedení vzorku a .gr-a.f-ik-u-.-k-t-e-r-á-i-ns-t-r-u-uj-e-u-živatele-o-tom·;—_a_by_zavedT vzorek fímto otvorem. Pokud lze vzorek vidět skrze čiré okenní průzory 34 a 35, je potvrzeno, že se na testovací proužek aplikovalo odpovídající množství vzorku.
Obrázek 6 znázorňuje rovinný pohled na horní vrstvu 36 testovacího proužku, který je kalibrován na měření koncentrace bílkoviny v krvi.
Obrázek 7 znázorňuje testovací proužek z obrázku 6 po aplikování vzorku krve da otvoru 30 (obr. 2), kdy se vzorek rozšířil středovým kanálkem 32 a glukosa ve vzorku zreagovala v testovacích oblastech. Vzhledem k tomu, že spodní testovací oblast má nejméně inhibitoru, došlo unik barevné změně jako první. Následně se zbarvila druhá a třetí testovací oblast. Daiší testovací oblasti se nezbarvily, protože ve vzorku nebylo dostatečné množství glukosy. Protože uplynula dostatečné dlouhá doba a došlo k barevné změně oblasti 42 časového měřiče, může být uvedený testovací proužek odečten. Výsledek znázorněný na obrázku 7 tedy ukazuje, že vzorek krve obsahuje glukosu v koncentraci nejméně 120 mg/dl a nejvýše 150 mg/dl. Odečtení se může provést potom, co dojde k barevné změně oblasti 42 časového spínače, kdykoliv. J-e třeba uvést, že na obrázku 7 reakce s glukosou způsobila barevnou změnu......- z - -bílé-na- - barevnou.- Nicméně-uvedený-systém_může alternativně pracovat ťaT<7^že se glukosou indukované oxidace a testovací oblasti.
Pro lepší pochopení vyn; vynálezu přiblížena pomocí př tyto příklady provedení vynalezl nikterak neomezují rozsah vyná přiloženými patentovými nároky.
Příklady provedení vynálezu'
Příklad 1- BPR indikátor
Připravil se následující roztok; Destilovaná voda 83,5 g
1_% (h m /h m) EDTA N a ____23,8 j
Kyselina akonitová 6,0 g j n ďfka č n ΓΒ é rv i vo roTío ζΓν 'ďŮéTéWů dojde k odbarvení barevné ílezu budou některá provedení Ikladů. Nicméně je třeba uvést, že i mají pouze ilustrativní charakter a lezu, který je jednoznačně vymezen.
Enzymatický roztok 0,2M kyselina akonitová 27,0 g Glukosaoxtdasa 165000 U
HRPO 340000 U
| NaOH(pevný) | 2,2 g | ||
| Crotein SPA | 4,2 g | ||
| Imidazol | 0,6 g | ||
| M a η π i to I | 3,0 g | ||
| 5%(hm/hm) Surfaktol | Q1 3,0 g | ||
| nastavit pH na 4,80 | |||
| Ethylalkohol | 40,0 g | ||
| PPG-410 | 5,6 g | ||
| Enzymatický roztok | 28,0 g | ||
| Membrána Memtec | BTSH 55 se ponořila do tohoto roztoku a po | ||
| vytažení se přebytek | roztoku setřel skleněnými | tyčemi. Potažená | |
| membrána se vysušila | ve flotačním sušáku při'teplotě 92,5eC za | 4 | |
| mírného - proudění | vzduchu, takže pás byl v | podstatě suchý | |
| během 20 sekund. Tento pás se navinul,na cívku | při přípravě na | «i 1 | |
| potažení druhou potahovou vrstvou. | |||
| Přinravitv ca náelarluií | r- í r λ λ. 1 /1 « < ·— | % | |
| • s i w v i i j w HWUivvi wj 1 VI 1 vt LVPiJ . | |||
| zásobní roztok Askorbátu (inhibitoru) | Ředidlo | A Cí | |
| Uestílovana voda | Τ9Ό g | 370 g | |
| 1%EDTANa2 | 55 g | 107 g. . | |
| BPR | 0,36 g | 0,71 g | |
| PolyQuart H | 6g | 11,8 g | |
| PPG-410 | 14,2 g | 27,8 g | |
| kyselina askorbová | 1,37 g | ” “ r | |
| Ethylalkohol | 243 g | 477 g |
Roztok časového měřiče
Ředidlo (výše uvedené) .120 g
Kyselina askorbová 0,885 g
Roztok glukosy* 17,25 g * Roztok glukosy je Roztok 1,0 g glukosy v decilitru vody nechaný mutarotovat po dobu 24 hodin a uložený v chladu.
Dále se provedlo následující naředéní zásobního roztoku: 0,0405:1, 0,108:1, 0,236:1, 0,369:1, 0,569:1, 1,260:1. Toto krokové zvýšení koncentrace inhibitoru odpovídá krokovému zvýšení koncentrace glukózy, které indikují jednotlivé testovací plochy. Tyto roztoky se spolu s roztokem časového měřiče nanesly vedle sebe na stranu enzymem napuštěné membrány s velkými póry, takže se uložilo přibližně 1,2 x 10’4 ml/mm2 membrány. Membrána se máčela přibližně patnáct sekund a následně se sušila za podmínek popsaných v~~sotjvišlósťí'“ s nanášením enzymatické “ potahové vrstvy. Výsledky ukázaly, že časový měřič reaguje přibližně 70 sekund, přičemž 95% výsledku se dosáhlo mezi 64 a 79 sekundami.
Příklad 2 - MBTHSB-ANS indikátor
Připravil se následující roztok:
HPLC voda 1500 ml
Kyselina citrónová 16,92 g Citrát sodný 20,88 g
Mannitol 15 g
EDTA disodná 1,26 g
Gantrez S95 6,75 g
Crotein SPA 36 g
Glukosaoxidasa 1,69 M.U
HRPO 1,5 MU
Carbopol 910* 75 ml
Citrát- d i sodný*-*------2-25 ml ~ -----ου *11% roztok aceton i tri lu ** 0,1M, pH 5,0
Membrána Memtec BTS 35 se poíahla tak, že se povrch s velký mipóry kontaktoval s výše uvedeným potahovacím roztokem, přičemž přebytek roztoku se odstranil jako v předcházejícím příkladu pomoci skleněných tyčí. Membrána se vysušila a stočila jako v příkladu 1.
Potom se připravily následující roztoky:
Roztok A (indikátor)
70% (hm/hm) ethanol 2819 ml
MBTHSB 2,98 g (ΝΗλ)ΑΝ5 25,83 g
Roztok B 2005 ml
2%’DTPA 51,25 ml
Roztok B (smáčecí Činidlo) Maphos 60A 41 g
70% (hm/hm) ethanol 205 mlř
Roztok C (zásobní askorbát) Roztok D (časový měřič)
| A/.o.da Kyselina askorbová | 11-5-ml- 4,58 g | Vo'da^ Kyselina askorbová | 53 ml 8,75 g |
| Ethanol | 267 ml | Ethanol | 123 mí |
| objem se doleje na | 175 ml | ||
| 70% EtOH | |||
| Roztok glukosy | 40,5 ml |
Pro každý inhibiční roztok se odměřil fixní objem roztoku A, což bylo 263 ml. Pro jednotlivé testovací oblasti se měnil poměr 70% EtOH : roztoku C od 58,9 do 0,2, tak aby objem 70% EtOH a roztoku C přidaný do roztoku A byl 87,5 ml pro všechny inhibiční roztoky. Tak se v každém roztoku účinně změnila pouze koncentrace inhibitoru, Roztoky obsahující skokově se zvyšující koncentraci inhibitoru a roztok časového měřiče (roztok D) se nenašly vedlo . .L_ .._ _____ _______L.i.., . .Jkými póry. Rychlost nanášení se nastavila tak ,aby se dosáhlo 3 χ 10'5 ml inhibitoru na čtverečný milimetr membrány. Membrána se sušila výše popsaným způsobem, s výjimkou toho, že doba prodlevy mezi potahováním a sušením byla přibližně 1,6 minut. Výsledky ukázaly, že časový měřič reaguje přibližně 60 sekund s malým účinkem od 30 až 55% krevního hematokritu neboli od 78 až 420 mg glukosy na decilitr krve.
Claims (25)
1. Protáhlý vícevrstvý reagenčni. testovací proužek pro měření koncentrace anaiytu ve vzorku biologické tekutiny, která se na tento vzorek aplikuje, vyznačený tím , že zahrnuje t a) spodní vrstvu s otvorem pro příjem vzorku;
b) membránovou vrstvu . mající, vzorkovou stranu orientovanou k uvedené spodní vrstvě a protilehlou testovací stranu a obsahující reagenčni činindío, které může reagovat s analytem za vzniku barevné změny, přičemž reakční Čin.indio obsahuje -. .. , _ ; '
í) první složku, která vzájemné reaguje s analytem za vzniku peroxidu vodíku;
2. Protáhlý vícevrstvý reagenční testovací proužek podle nároku 1, vyzná če. ný tím , že uvedeným analytem je glukosa.
3. Protáhlý vícevrstvý reagenční testovací proužek podle nároku 1, vyznačený tím , že uvedenou biologickou tekutinou je krev.
4. Protáhlý vícevrstvý reagenční testovací proužek podle nároku 1, vyznačený tím ,že spodní vrstva je tvořena termoplastickou fólii.
5. Protáhlý vícevrstvý reagenční testovací proužek podle nároku 4, v y z n a-č e n ý t-í-m , že -spodní vrstva je tvořena polyesterem.
6. Protáhlý vícevrstvý reagenční testovací proužek podle nájoku 1,_v_y z načený tím , že spodní vrstva dále obsahuje množinu otvorů zarovnaných s testovacími oblastmi.
transparentní vzdálenosti
7. Protáhlý vícevrstvý reagenční testovací proužek podle nároku 1, vyznačený tím , že spodní vrstva má sekci, která se nachází od otvoru pro příjem v předem stanovené vzorku, pro zajištění odpovídajícího množství vzorku.
7 ii) druhou složku, která vzájemně reaguje s peroxidem vodíku a v důsledku toho mění· svou barvu; a? iii)-třetí složku, která inhibuje barevnou změnu -d.r-uh-é-slož-k-y-^—-----—
c) mezilehlou vrstvu mezi spodní a membránovou vrstvou; a
d) měřící prostředek pro distribuování vzorku podél proužku, který zahrnuje
i) nesavou oblast- membránové vrstvy; a ii) tekutinu přepravující kanálek provedený v mezilehlé vrstvě určený k vedení vzorku přes povrch nesavé oblastí do množiny diskrétních savých testovacích oblastí uspořádaných podél délky membránové vrstvy;
přičemž koncentrace inhibitoru roste předem stanoveným způsobem v určité vzdálenosti od prvního konce testovacího proužku, takže ve vzorku musí být obsažen analyt v odpovídajícím způsobem zvýšené koncentraci, pokud má dojít k barevné změně, přičemž jakmile se na testovací proužek aplikuje vzorek muže jedna nebo několik testovacích oblastí změnit barvu a barvu-měnící oblast, která je nejvzdálenějši od prvního konce indikuje koncentraci analytu ve vzorku.
8. Protáhlý vícevrstvý reagenční testovací proužek podle nároku 1,vyznačený tím , že membránová vrstva je tvořena anizotropní porézní membránou majícíc póry, které jsou v * blízkosti vzorkové strany větší a v blízkosti testovací strany menši.
9. Protáhlý vícevrstvý - reagenční testovací proužek podle nároku 8, vyznačený tím , že velikost pórů v matrici je rozdělena tak, aby zachycovaly červené krviny z krevního vzorku.
10. Protáhlý vícevrstvý reagenční testovací proužek podle ňařoku 8, vyznačený tím , že uvedená, membrána je tvořena polysulfonem.
11. Protáhlý vícevrstvý reagenční testovací proužek podle nároku 1, vyzná, čený tím , první složku představuje glukosaoxidasa.
i
12. Protáhlý vícevrstvý reagenční testovací proužek podle nároku 1,vyznačený tím ,že druhou složku tvoří peroxidasa a indikační barvivo nebo pár barviv, které mění barvu, jakmile zoxidují.
13. Protáhlý vícevrstvý reagenčni testovací proužek podle nároku 12, v y z n a č e n ý tím , že uvedenou peroxidásou je peroxidasa z křenu selského.
14. Protáhlý vícevrstvý reagenčni testovací proužek podle nároku 12, vyznačený tím , že uvedeným indikačním Íba:rvÍÍVO.m^nOhO..ba.rev.ný.m -P.á.rem;j:e....,MBTHŠ_B-ANS._. , ... .
15. Protáhlý vícevrstvý reagenční nároku 1, vyznačený tím , že kyselina askorbová.
testovací proužek podle uvedenou třetí složkou je
16. Protáhlý vícevrstvý reagenční testovací proužek podle nároku 1, v y z n a č e n ý tím , že reagenčni činidlo dále zahrnuje separační složku zvolenou ze skupiny zahrnující polyethylenglykol, po ly(m ethyl viny I eth er/a n hyd rid kýseliný' maleinové), '.p.olypropylengjykol., polystyrensulfonovou kyselinu, p.olyakrylovou kyselinu, polyvtnylalkohol a polyvinylsulfonovou kyselinu.
17. Protáhlý vícevrstvý reagenční testovací proužek podle nároku 1 /v ý ž’iváce ný'' tTm tž® uvedená -mezilehlá v-r-stva-je- —......
tvořena termoplastickou fólií.
□ o
18. Protáhlý vícevrstvý reagenčni testovací proužek podle nároku l.vyznaéený tím , že je uvedená mezilehlá vrstva tvořena polyesterem.
19. Protáhlý vícevrstvý reagenčni testovací proužek podle nároku 1, vyznačený tím , že uvedené savé a nesavé oblasti jsou tvořeny nestlačenými resp. stlačenými oblastmi membránové vrstvy.
20. Protáhlý vícevrstvý reagenčni testovací proužek podle nároku l.vyznačený tl m , že dále zahrnuje horní vrstvu, která je kontinuální s. horním povrchem membránové vrstvy a má otvory, které jsou zarovnané s testovacími oblastmi.
í
....,.=
21. Protáhlý...vícevrstvý 5reagenční -.testovací proužek podle nároku 20, vyznačený tím ,že membránová vrstva je spoj-en-a-s-hor-n-í-v-r-s-tv-ou--
22. Protáhlý vícevrstvý reagenčni testovací proužek podle nároku 21,vyznačený tím , že uvedená membránová vrstva je spojena s horní vrstvou pomocí adheziva, jehož nanesení je omezeno pouze na nesavé oblasti membránové vrstvy.
23. Protáhlý vícevrstvý reagenčni testovací proužek podle nároku 1,vyznačený tím , že dále obsahuje absorpční vrstvy, které kontaktuji jednotlivé konce membrány.
24. Protáhlý vícevrstvý reagenčni testovací proužek podle nároku 1, vyznačený tím , že dále obsahuje čas-měřící prvek, který je tvořen testovací oblasti obsahující kromě reagenčniho činidla rovněž takové množství glukosy, které způsobí po uplynutí předem stanovené časové periody od naneseni vzorku na testovací proužek barevnou změnu uvedené oblasti.
I s '/Lf.
·*-'25. Způsob měření koncentrace analytu ve vzorku biologické tekutiny, vyznačený tím ,že zahrnuje následujícíc kroky:
(a) aplikování - vzorku na reagenční testovací proužek, který obsahuje:
(i) množinu savých oblastí, z nichž každá mění barvu pokud se dostane do kontaktu s tekutinou obsahující alespoň předem stanovené množství analytu, větší než množství i analytu, které způsobí barevnou změnu testovacích barvuměnících oblastí, nacházejících se blíže k prvnímu konci proužku a (ii) měřící prostředek pro distribuování vzorku po předem stanovené nesavé dráze ke každé z testovacích barvuměnících oblastí a
. . - (b) pozorování testovací oblasti, která změní barvu a která je nejvzdálenější ód prvního konce uvedeného proužku:
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US52851195A | 1995-08-03 | 1995-08-03 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ228496A3 true CZ228496A3 (en) | 1997-03-12 |
Family
ID=24105976
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ962284A CZ228496A3 (en) | 1995-08-03 | 1996-08-01 | Elongated multilayer reacting testing strip |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0759555A3 (cs) |
| JP (1) | JPH09163999A (cs) |
| KR (1) | KR970011840A (cs) |
| AR (1) | AR003180A1 (cs) |
| AU (1) | AU712285B2 (cs) |
| BR (1) | BR9603273A (cs) |
| CA (1) | CA2182545A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ228496A3 (cs) |
| HU (1) | HU215904B (cs) |
| IL (1) | IL118988A0 (cs) |
| NO (1) | NO963207L (cs) |
| NZ (1) | NZ299104A (cs) |
| PL (1) | PL315493A1 (cs) |
| RU (1) | RU2178564C2 (cs) |
| SG (1) | SG47165A1 (cs) |
| TR (1) | TR199600640A1 (cs) |
| ZA (1) | ZA966614B (cs) |
Families Citing this family (26)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6395227B1 (en) | 1989-08-28 | 2002-05-28 | Lifescan, Inc. | Test strip for measuring analyte concentration over a broad range of sample volume |
| US5843691A (en) * | 1993-05-15 | 1998-12-01 | Lifescan, Inc. | Visually-readable reagent test strip |
| US5719034A (en) * | 1995-03-27 | 1998-02-17 | Lifescan, Inc. | Chemical timer for a visual test strip |
| AU722471B2 (en) * | 1995-10-17 | 2000-08-03 | Lifescan, Inc. | Blood glucose strip having reduced sensitivity to hematocrit |
| EP1579814A3 (en) | 1996-05-17 | 2006-06-14 | Roche Diagnostics Operations, Inc. | Methods and apparatus for sampling and analyzing body fluid |
| US20020010406A1 (en) | 1996-05-17 | 2002-01-24 | Douglas Joel S. | Methods and apparatus for expressing body fluid from an incision |
| WO1998019159A1 (en) | 1996-10-30 | 1998-05-07 | Mercury Diagnostics, Inc. | Synchronized analyte testing system |
| US5948695A (en) | 1997-06-17 | 1999-09-07 | Mercury Diagnostics, Inc. | Device for determination of an analyte in a body fluid |
| JP2001527216A (ja) * | 1997-12-19 | 2001-12-25 | アミラ メディカル | エンボス加工されたテストストリップシステム |
| US6458326B1 (en) | 1999-11-24 | 2002-10-01 | Home Diagnostics, Inc. | Protective test strip platform |
| JP3621617B2 (ja) * | 2000-01-21 | 2005-02-16 | ブラザー工業株式会社 | グルコース濃度測定用のキャピラリー装置、グルコース濃度の非侵襲的モニター方法及び血糖値の非侵襲的モニター方法 |
| US6583722B2 (en) | 2000-12-12 | 2003-06-24 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Wetness signaling device |
| US6603403B2 (en) * | 2000-12-12 | 2003-08-05 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Remote, wetness signaling system |
| US6541266B2 (en) | 2001-02-28 | 2003-04-01 | Home Diagnostics, Inc. | Method for determining concentration of an analyte in a test strip |
| US6525330B2 (en) | 2001-02-28 | 2003-02-25 | Home Diagnostics, Inc. | Method of strip insertion detection |
| US6562625B2 (en) | 2001-02-28 | 2003-05-13 | Home Diagnostics, Inc. | Distinguishing test types through spectral analysis |
| JP2005526953A (ja) * | 2001-09-17 | 2005-09-08 | エフ ホフマン−ラ ロッシュ アクチェン ゲゼルシャフト | エンボス加工されたテストストリップシステム |
| US20030113227A1 (en) * | 2001-09-26 | 2003-06-19 | Eyster Curt R. | Colorimetric test device with reduced error |
| AP2006003811A0 (en) * | 2004-05-04 | 2006-12-31 | Metrika Inc | Mechanical cartridge with test strip fluid controlfeatures for use in a fluid analyte meter |
| US7803319B2 (en) | 2005-04-29 | 2010-09-28 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Metering technique for lateral flow assay devices |
| US7807473B2 (en) * | 2005-10-26 | 2010-10-05 | General Electric Company | Material compositions for sensors for determination of chemical species at trace concentrations and method of using sensors |
| US9103796B2 (en) | 2007-12-14 | 2015-08-11 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Multi-layered devices for analyte detection |
| RU2641234C2 (ru) * | 2011-11-20 | 2018-01-16 | Эф-Ай-Оу Корпорейшн | Способ, система и устройство контроля качества с использованием датчиков для применения с устройствами для проведения биологических/экологических диагностических экспресс-тестов |
| BR112015007673A2 (pt) * | 2012-10-08 | 2017-07-04 | Univ Colorado State Res Found | equipamentos para análise quantitativa à base de capilaridade de analito dissolvido em líquido |
| US10145854B2 (en) | 2013-03-11 | 2018-12-04 | Polymer Technology Systems, Inc. | Systems and methods for test strips with extended dynamic ranges |
| JP6950956B2 (ja) * | 2017-12-28 | 2021-10-13 | 国立研究開発法人産業技術総合研究所 | アッセイ装置 |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3964871A (en) * | 1974-12-18 | 1976-06-22 | Becton, Dickinson And Company | Method and device for detecting glucose |
| US4810470A (en) * | 1987-06-19 | 1989-03-07 | Miles Inc. | Volume independent diagnostic device |
| IT1216742B (it) * | 1988-02-08 | 1990-03-08 | Beli Raffaele Lecce | Dispositivo e procedimento per la realizzazione estemporanea di testdiagnostici quantitativi sul sangue intero. |
| US4994238A (en) * | 1988-06-09 | 1991-02-19 | Daffern George M | Constant volume chemical analysis test device |
| US5156954A (en) * | 1989-03-08 | 1992-10-20 | Cholestech Corporation | Assay device and method using a signal-modulating compound |
| DE3922495A1 (de) * | 1989-07-08 | 1991-01-17 | Miles Inc | Analyseverfahren fuer substanzen aus biologischen fluessigkeiten, insbesondere vollblut |
| US5306623A (en) * | 1989-08-28 | 1994-04-26 | Lifescan, Inc. | Visual blood glucose concentration test strip |
| GB9002274D0 (en) * | 1990-02-01 | 1990-03-28 | Cranfield Biotech Ltd | Colorimetric analysis |
| AU706456B2 (en) * | 1995-03-27 | 1999-06-17 | Lifescan, Inc. | Chemical timer for a direct-reading reagent test strip |
| AU722471B2 (en) * | 1995-10-17 | 2000-08-03 | Lifescan, Inc. | Blood glucose strip having reduced sensitivity to hematocrit |
-
1996
- 1996-07-31 NZ NZ299104A patent/NZ299104A/en not_active IP Right Cessation
- 1996-07-31 SG SG1996010389A patent/SG47165A1/en unknown
- 1996-07-31 NO NO963207A patent/NO963207L/no unknown
- 1996-07-31 IL IL11898896A patent/IL118988A0/xx unknown
- 1996-08-01 CZ CZ962284A patent/CZ228496A3/cs unknown
- 1996-08-01 AU AU60859/96A patent/AU712285B2/en not_active Ceased
- 1996-08-01 CA CA002182545A patent/CA2182545A1/en not_active Abandoned
- 1996-08-02 JP JP8219060A patent/JPH09163999A/ja active Pending
- 1996-08-02 BR BR9603273A patent/BR9603273A/pt not_active Application Discontinuation
- 1996-08-02 EP EP96305720A patent/EP0759555A3/en not_active Withdrawn
- 1996-08-02 AR ARP960103867A patent/AR003180A1/es unknown
- 1996-08-02 TR TR96/00640A patent/TR199600640A1/xx unknown
- 1996-08-02 PL PL96315493A patent/PL315493A1/xx unknown
- 1996-08-02 HU HU9602138A patent/HU215904B/hu not_active IP Right Cessation
- 1996-08-02 KR KR1019960032808A patent/KR970011840A/ko not_active Ceased
- 1996-08-02 RU RU96115372/14A patent/RU2178564C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1996-08-02 ZA ZA9606614A patent/ZA966614B/xx unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NO963207L (no) | 1997-02-04 |
| HUP9602138A2 (en) | 1997-04-28 |
| PL315493A1 (en) | 1997-02-17 |
| MX9603192A (es) | 1997-07-31 |
| AU712285B2 (en) | 1999-11-04 |
| TR199600640A1 (tr) | 1997-03-21 |
| RU2178564C2 (ru) | 2002-01-20 |
| NO963207D0 (no) | 1996-07-31 |
| AR003180A1 (es) | 1998-07-08 |
| JPH09163999A (ja) | 1997-06-24 |
| BR9603273A (pt) | 1998-05-12 |
| HUP9602138A3 (en) | 1997-10-28 |
| HU215904B (hu) | 1999-03-29 |
| AU6085996A (en) | 1997-02-06 |
| HU9602138D0 (en) | 1996-09-30 |
| IL118988A0 (en) | 1996-10-31 |
| CA2182545A1 (en) | 1997-02-04 |
| EP0759555A2 (en) | 1997-02-26 |
| SG47165A1 (en) | 1998-03-20 |
| ZA966614B (en) | 1998-02-02 |
| KR970011840A (ko) | 1997-03-27 |
| NZ299104A (en) | 1998-04-27 |
| EP0759555A3 (en) | 1998-07-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ228496A3 (en) | Elongated multilayer reacting testing strip | |
| EP0852336B1 (en) | Visually-readable Reagent test strip | |
| AU714671B2 (en) | Chemical timer for a visual test strip | |
| EP0735369B1 (en) | Chemical timer for a direct-reading reagent test strip | |
| US5306623A (en) | Visual blood glucose concentration test strip | |
| JP2001518622A (ja) | 毛細管試薬キャリアーを用いた分析装置 | |
| CA2050677C (en) | Visual blood glucose concentration test strip | |
| JPS61500152A (ja) | 流動体迅速定量分析用装置 | |
| US8202490B2 (en) | Membranes and methods for coating membranes | |
| HK1002596A (en) | Direct-reading reagent test strip | |
| HK1009180B (en) | Visually-readable reagent test strip | |
| US20070249037A1 (en) | Monitoring of Vitamin K Nutritional Status | |
| MXPA96003192A (en) | Reading reading reagent strips dire | |
| MXPA97009995A (en) | Reactive test strip that can be read visual | |
| MXPA97006716A (en) | Chemical time regulator for pru reagent visual strip |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic |