CZ281393A3

CZ281393A3 - Hiv protease inhibitor, suitable for aids treatment, process of its preparation and pharmaceutical preparation in which it is comprised

Info

Publication number: CZ281393A3
Application number: CZ932813A
Authority: CZ
Inventors: Bruce Anthony Dressman; Marlys Hammond; Stephen Warren Kaldor
Original assignee: Lilly Co Eli
Priority date: 1992-12-22
Filing date: 1993-12-17
Publication date: 1994-07-13
Also published as: CN1092410A; NO934721D0; CO4180513A1; NO934721L; AU5252993A; EP0609625A1; JPH06256277A; KR940014336A; BR9305161A; CA2112052A1; HUT69703A; IL108098A0; PL301578A1; FI935780A7; HU9303677D0; FI935780A0; MX9308025A

Description

který ho obsahu je

Oblast techniky

nosti imunity CHIV) typu 1 <HIV-1) nebo typu 2 <HIV-2).Tyto slou-

HIV a pro ošetřování nebo prevenci následného získaného syndromu nedostatečnosti imunity (AIDS). Sloučeniny podle vynálezu, jejich farmaceuticky vhodné soli a farmaceutické prostředky, které je obsahují, se mohou používat samotné nebo ve směsi s jinými protivirovými činidly, s modulátory imunity, s antibiotiky nebo s vakcinami. Vynález se tedy týká ošetřování nebo prevence AIDS, způsobu ošetřování nebo prevence infekcí HIV a způsobu inhibice replikace viru HIV.

Dosavadní stav techniky

Retrovirus, označovaný jakožto vir lidské nedostatečnosti imunity, je příčinou komplexního onemocnění označovaného jakožto syndrom získané nedostatečnosti imunity CAcguired Immune Deficiency Syndrome - AIDS) a je členem rodu lentiviru retrovirů (ΜΑ. Gonda, F.Vong-Staal, R.C. Gallo. Sequence Homology and Morphological Similarity of HTLV III And Visna Virus, A Pathogenic Lentivirus Sekvenční homologie a morfologická podobnost HTLV III a visna viru, patogenní lentivirus]. Science, 227, str.173, 1986; P. Sonigo, N. Alizon a kol.. Nucleotide Seguence of the Visna Lentivirus; Relationship to the AIDS Virus [Nukleotidová sekvence visna viru: Vztah k viru AIDS], Cell, 42, str. 369, 19857. Komplexní onemocnění AIDS zahrnuje progresivní destrukci imunitního systému a degeneraci centrálního a periferního nervového systému. Vir HIV byl dříve znám a označován jakožto LAV,

HTLV-ΠΙ nebo ARV.

Běžnou char.iktt.Tistikou replikace ret.roviru jo pnsl. Iranslacní zpraccivání prekursorových polyproteinů virálně kodovanou proteasou ko «generaci zralých virálních proteinů nutných pro virální povely a funkci. Přerušení tohoto procesu se jeví jakožto prevence produkce normálně infekčního viru. Nezpracované strukturální proteiny byly rovněž zjištěny v klonech neinfekčních HIV kmenu izolovaných od lidských pacientů. Výsledky vedou k poznání, ze inhibice HIV proteasy představuje schůdný způsob pro ošetřování nebo prevenci AIDS a/nebo pro ošetřování nebo prevenci infekce virem HIV.

HIV genom kóduje strukturální proteinově prekursory, známé jakožto ”gag and pol”, které se zpracovávají na žádanou proteasu. reverzní transkriptasu a systém endonukleasa/integrasa. Proteasa dále štěpí gag a ”gag-pol” proteiny za získání zralých strukturálních proteinů jádra viru.

Vyvíjí se značné úsilí zaměřené na kontrolu HIV prostřednictvím strukturálních proteinových prekursorů. které se zpracovávají k získání retrovirální proteasy. reverzní transkriptasy a systému endonukleasa/integrasa. Například běžně používaný terapeutický prostředek AZT je inhibitorem viralni reversní transkriptasy CH. Mitsuya, NS- Broder, Inhibition of the In Vitro Infectivity in Cytopathic Effects of HTLV III” [Inhibice in vitro infekčnosti cytopatického působení HTLV III], Proč. Nati. Acad. Sci. USA. 83. str. 1911, 1986).

Výzkumné úsilí se rovněž zaměřuje na inhibitory HIV proteasy. Například se v evropském patentovém spise číslo 346847 popisují sloučeniny, o nichž se uvádí, že jsou užitečné jakožto inhibitory HIV proteasy.

Na neštěstí jsou však známé inhibitory HIV proteasy spojeny s problémy toxicity, biologické dostupnosti nebo krátkého poločasu in vivo. Obzvláště se zdá. že biologická dostupnost při orálním podání je potřebnou charakteristikou ihnibitoru HIV proteasy pro chronickou povahu onemocnění. Avšak peptidy a peptidová raimetika jsou notoricky neschopná orální absorpce- Proto nehledě na terapeutickou sílu spojenou s inhibitorem proteasy a vynaložené ís i 1 í se ještě nezískalo schůdné terapeut, ické činidlo.

Vynález se proto týká nových inhibitorů HIV proteasy, které jsou užitečné pro ošetřování nebo prevenci infekce HIV a/nebo íásledného syndromu získané nedostatečnosti imunity CRIDS) ^odstata vynálezu

Podstatou vynálezu je sloučenina obecného vzorce I

kde znamená

R a R° na sobe nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, arylaIkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, heterocyklalkýlovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu nebo nenasycenou heterocyklalkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, nebo

R a R° spolu s atomem dusíku,na který jsou vázány, vytvářejí heterocykl ickou skupinu nebo nenasycenou heterocyklickou skupinu za podmínky, že atom dusíku není kvartem i zován,

Z skupinu obecného vzorce

J!

(R²

(R²)

0. 1, 2, 3 nebo 4,
0, 1, 2 nebo 3, 0, 1 nebo 2, atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, a-	-
rylaikylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém
podílu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkylthio-

skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, aminoskupinu, alkylaminoskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, dialkylaminoskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v každém alkylovém podílu, karbamoylovou skupinu nebo N-alkylkarbamoylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v každém alkylovém podílu,

R¹ skupinu arylovou, heterocyklickou skupinu nebo nenasycenou heterocyklickou skupinu, cykloalkylovou skupinu s 5 až 7 atomy uhlíku nebo skupinu obecného vzorce -S-R^la, kde znamená R^la skupinu arylovou, heterocyklickou skupinu nebo nenasycenou heterocyk1ickou skupinu, cykloalkylovou skupinu s 5 až 7 atomy uhlíku.

X skupinu obecného vzorce

Y arylovou skupinu nebo nenasycenou heterocyk1ickou skupinu ,

Y¹ heterocyklickou skupinu,

R^3a skupinu obecného vzorce υ

1) -C(O)-NR⁴R⁴,

j 4 nebo 5.

3, 4 nebo 5.

r⁴ na sobě nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo hydroxyalkýlovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a r⁵ a R⁶ na sobě nezávisle atom vodíku, hydroxyskupinu. alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, aminoskupinu, alkylamínoskupinu s 1 až 4 ac,

Lomy uhlíku, hydroxya1kylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, karhoxyskiipi nu . a 1 koxykarbony t ovi <u skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku υ alkyl čivém podílu. kurbanoy lovou skupinu, N-a1ky1karbamoy1ovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, arylovou skupinu, heterocyk1ickou skupinu, nebo nenasycenou heterocyklickou skupinu.

nebo její farmaceuticky vhodná sílí.

Zde uváděné teploty jsou vždy míněny ve C. Všechna jednotky jsou míněny hmotnostně s výjimkou kapalin, jejichž množství jsou uváděna v objemových jednotkách.

Výrazem “alkylová skupina s 1 až 6 atomy uhlíku” se zde vždy míní alkylová uhlovodíková skupina s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až 6 atomy uhlíku, jako je například skupina methylová, ethylová, n-propylová, isopropylová, n-butylová, sek. butylová, terč.-butylová, pentylová. neo-pentylová a hexylová skupina. Výraz “alkylová skupina s 1 až 6 atomy uhlíku zahrnuje ve své definici také významy výrazu alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku.

Výrazem “halogen se míní atom chloru, fluoru, bromu nebo jodu.

Výrazem “halogenalkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku se zde vždy míní alkylová uhlovodíková skupina s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až 4 atomy uhlíku s vázaným jedním až třemi atomy halogenu, jako je například skupina chlormethylová, 2-bromethylová, 1-chlořisopropylová. 3-fluorpropylová, 2,3-dibrombuty1ová, 3-chlorisobutylová. jod-terč.-butylová a trifluormethyl ová skupina.

Výrazem hydroxyalkýlová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku se zde vždy míní alkylová uhlovodíková skupina s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až 4 atomy uhlíku svázanou hydroxylovou skupinou, jako je například skupina hydroxymethylová, 2-hydroxyethýlová, 3-hydroxypropylová, 2-hydroxyisopropylová a 4-hydroxybutylová skupina.

Výrazem alkylthioskupina s 1 až 6 atomy uhlíku se zde vždy míní alkylová uhlovodíková skupina s přímým nebo s rozvětveným

--Lezcem .: 1 až jLony uhlíku. vázaná ru zbytek molekuly přeci. ί ln i»· t.v í ni atomu τ í íy . Jako typické příklady takové skupiny ce uadě j í methy 1thioskupina . et.hy 1 thioskupina , propy 1 thioskupina . sopropy i thi oskup i na, buty1thioskup i na. sek.-buty1thi oskup i na. erc--buty1thioskupina, pentylthioskupina a hexy1thioskupina.

Výrazem alkylaminoskupina s 1 až 4 atomy uhlíku” se zde 'ždy míní alkylová uhlovodíková skupina s přímým nebo s rosvót.veíým řetězcem s 1 až 4 atomy uhlíku, vázaná na aminoskupinu. Jako .ypické příklady se uvádějí methylaminoskupina. ethylaminoskupiia, propy1aminoskupina, iso-propylaminoskupina. n-butylaminosku>ina a sek.-butylaminoskupina.

Výrazem ”dialkylaminoskupina s 1 až 4 atomy uhlíku v každém ilkylovem podílu” se zde vždy míní dvě alkylové uhlovodíkové skuliny s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až 4 atomy uhlíku, /ázané na společnou aminoskupinu. Jako typické příklady se uválejí di-methylaminoskupina, ethylmethylaminoskupina, methylprojylaminoskupina, ethy1 isopropylaminoskupina, butylmethylaminoskudna a sek.-butylethylaminoskupina.

Výrazem alkoxyskupina s 1 až 6 atomy uhlíku se zde vždy níní alkylová uhlovodíková skupina s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až 6 atomy uhlíku, vázaná na zbytek molekuly prostřednictvím atomu kyslíku. Jako typické příklady takové skupiny se jvádějí methoxyskupina. ethoxyskupina, propoxyskupina, isopropo•cyskupina, butoxyskupina. sek.-butoxyskupina. terč.-butoxyskupiia, pentoxyskupina a hexoxyskupina.

Výrazem alkoxykarbony 1ová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku j alkoxypodílu” se zde vždy míní skupina s přímým nebo rozvětvelým alkoxyřetězcem s 1 až 4 atomy uhlíku, vázaná na karbonylový podíl. Jako typické příklady takové skupiny se uvádějí skupina nethoxykarbony lová, jropoxykarbony 1ová a ethoxykarbonylová, propoxykarbony 1ová. isobutoxykarbonylová skupina.

Výrazem ”N-a1ky1karbamoylevá skupina s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu” se zde vždy skupina s přímým nebo rozvětveným alkylovým řetězcem s 1 až 4 atomy uhlíku, vázaná na atom lusíku karbamuylového podílu. Jako typické příklady takové skupinv sr? uváděli skupina N-niethy 1 ka rl oraoy l iwá. N-ethy 1 kurbarioy 1 uvá . Npropy1karbamoy1ová. N-i sopropy1karbamoylová. N-buby1karbamoy1ová a N-terč.-buty1karbamoyIová skup i na.

Výrazem cykloalkylová skupina s 5 až 7 atomy uhlíku se zde vždy míní nasycená uhlovodíkoví! skupina s 5 až 7 atomy uhlíku, která je nesubstituovaná nebo je substituovaná jedním, dvěma nebo třemi substituenty na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího atom halogenu, halogenalkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, karboxyskupinu, alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxypodílu. karbamoylovou skupinu, N-alkylkarbamoylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, aminoskupinu, alkylaminoskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, dialkylaminoskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v každém alkylovém podílu a skupinu obecného vzorce -CCH2>a-R⁷, kde znamená a 1, 2, 3 nebo 4 a R⁷ hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, karboxyskupinu, alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxypodílu, karbamoylovou skupinu, aminoskupinu, alkylaminoskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, dialkylaminoskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v každém alkylovém podílu. Jako typické příklady takové skupiny se uvádějí skupina cyklopentylová. cyklohexylová, cykloheptylová. methylcyklopentylová, 4-ethoxycyklohexylová. 5-karboxycykloheptylová a 6chlorcyklohexylová skupina.

Výrazem heterocyklická skupina” se zde vždy míní nesubstituovaná nebo substituovaná stabilní pětičlenná až sedmičlenná monocyklická skupina nebo sedmičlenná až desetičlenná bicyklická heterocyklické skupina, která je nasycená a která obsahuje atomy uhlíku a jeden až tři heteroatorny ze souboru zahrnujícího atom dusíku, kyslíku nebo síry. přičemž každý heteroatom dusíku a síry může být popřípadě oxidován a každý heteroatom dusíku může být kvartem i zován, přičemž je zahrnuta bicyklické! skupina, ve které je kterákoliv ze shora definovaných heterocyk1ických skupin kondenzována na benzenové jádro. Heterocyklické jádro může být vázáno na kterémkoliv heteroatomu nebo na atomu uhlíku za tuováno nebo ie substituováno ;edu í m , Jvgna .nebo bron i subst i tuent.y na robo nezávicle voleným ze souboru zahrnujícího a tóra halogenu. halogenalkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, karboxyskupinu, alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v a1koxypodί1u, karbamoy I ovou skupinu, N-a 1 ky 1 karbamoy lovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alky lovem podílu, aminoskupinu, alkylaminoskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, dialky1aminoskupi nu s 1 až 4 atomy uhlíku v každém alkylovém podílu a skupinu obecného vzorce -CCHz)a-R⁷. kde znamená a 1, 2, 3 nebo 4 a R⁷ hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, karboxyskupinu, alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxypodílu, karbamoylovou skupinu, aminoskupinu, alkylaminoskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, dialkylaminoskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v každém alkylovém podílu.

Výrazem nenasycená heterocykiická skupina” se zde vždy míní nesubstituovaná nebo substituovaná stabilní pětičlenná až sedmičlenná monocyklická skupina nebo sedmičlenná až desetičlenná bicyklická heterocykiické- skupina, která má jednu nebo několik dvojných vazeb a která obsahuje atomy uhlíku a jeden až tri heteroatomy ze souboru zahrnujícího atom dusíku, kyslíku nebo síry, přičemž každý heteroatom dusíku a síry může být popřípadě oxidován a každý heteroatora dusíku může být kvartemizován, přičemž je zahrnuta bicyklické skupina, ve které je kterákoliv ze shora definovaných heterocykiických skupin kondenzována na benzenové jádro. Heterocykiické jádro může být vázáno na kterémkoliv heteroatomu nebo na atomu uhlíku za vytvoření stabilní struktury. Heterocyklické jádro je nesubstituováno nebo je substituováno jedním, dvěma nebo třemi substituenty na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího atom halogenu, halogena1kylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy' uhlíku, karboxyskupinu, alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v a l koxypodί1u, karbamoylovou skupinu, N-a1ky1karbamoy1ovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alky10 loven podílu, aninoskupinu, alkylaninuskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alky loven podílu, dia 1ky1ami noskupi nu s 1 až 4 atomy uhlíku v každém alkylovém podílu a skupinu obecného vzorce -(CIl2)a-R⁷kde znamená a 1, 2. 3 nebo 4 a R^z hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, karboxyskupinu, alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxypodílu, karbamoylovou skupinu, aminoskupinu, alky 1aninoskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, dialkylaminoskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v každém alkylovém podílu.

Jakožto příklady hákových heterocyk1ických a nenasycených heterocyklických skupin se uvádějí skupina piperidinylová , piperazinylová, azepinylová pyrrolylová, pyrrolidinylová, pyrazolylová , pyrazolidinylová, imidazolylová. imidazlinyová, imidazolidinylová, pyridyová, pyrazinyová, pyrimidinylová. pyridazinylová, oxazolylová, oxazolidinylová, isoxazolylová, isoxazolidinylová, morfo1inylová, thiazolylová, thiazolidinylová, isothiazolylová, chinuklidinylová, isothaizolidinylová, indolylová, chinolinylová, isochinoliny lová, benzimidazolylová, thiadiazolylová, benzopyranylová, benzothiazolylová, benzoazolylová, fůrylová, tetrahydrofurylová, tetrahydropyranýlová, thienylová, benzothienylová, thiamofolinylová, thiamofo1inylsulfoxidová. thiamofoliny1sulfonová, oxadiazolylová. triazolylová, tetrahydrochinolinylová, tetrahydroisochinolinylová. 3-methy1imidazoly lová, 3-methoxypyridylová, 4-chlorchinolinylová, 4-aminothiazolylová, 8-methylchinolinylová. 6-chlorchinoxalinylová. 3-ethylpyri dy lová. 6-methoxybenzimidazoly lová, 4-hydroxyfurylová. 4-methylisochinolinylová, 6.8dibromchinolinylová, 4.8-dimethylnaftylová, 2-methy1-1,2,3,4-tetrahydroisochinolinylová, N-methy lchinol i n-2-y lová, a 2-terc.-butoxykarbony1-1.2,3,4-i soch i no1 i n-7-y1ová skup i na

Výrazem heterocyklalkýlová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu se zde vždy míní alkylová uhlovodíková skupina s přímým nebo s rovětveným řetězcem s 1 až 4 atomy uhlíku s vázanou heterocyklickou skupinou. Výrazem nenasycená heterocyklalkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku υ alkylovém podílu se zde vždy míní alkylová uhlovodíková skupina s přímým nebo s rovětvenýn řetěz·.;·.® s 1 až 4 at.ony uhlíku vz.tir uj n·-nasy..n--nou hi.-t, ,? rocyk 1 iekou skupinou. Jakožto typické heterccyfclulkyluvt.· skupiny s 1 uď 4 dtuiay uhlíku v alky loven podílu i i i e n a s y c e n é h e t e r c > c y k alkylové skupiny s 1 až 4 atomy uhlíku v a 1 kýlovém podílu se uvádějí skupina pyrroly lmethy lová , chinolinylmethylová, 1-indoly lethylová, 2-furylethylová. 3-t,hien-2-y lpropy lová , 1-imidazolyl isopropy lová a 4-thiazoylbutylová.

Výrazem arylová skupina” zde vždy míní fenylová nebo naftylová skupina, která je popřípadě substituovaná jedním, dvěma nebo třemi substituenty na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího atom halogenu, morfolinoa1koxykarbonylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxypodílu, pyridylalkoxykarbonylovou skupinu s i až 4 atomy uhlíku v a 1 koxy perlí 1 u . ha logena 1 ky l rjvou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, karboxyskupinu, alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxypodílu, karbamoylovou skupinu, N-alkylkarbamoylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alky lovem podílu, aminoskupinu, alkylaminoskupinu s 1 až 4 atomy uh líku v alkylovém podílu, dialkylaminoskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v každém alkylovém podílu a skupinu obecného vzorce '-CCH2 >a-R⁷kde znamená a 1, 2, 3 nebo 4 a R⁷ hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, karboxyskupinu, alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxypodílu, karbamoylovou skupinu, aminoskupiiiu, alkylaminoskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, dialkylaminoskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v každém alky1ovem pod ί1u.

Výrazem “arylaikylová skupina s 3 až 4 atomy uhlíku” se zde vždy míní alkylová skupina s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s 1 až 4 atomy uhl íku. maj ící arylový podíl. Jakožto typické arylalkylové skupiny s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu se příkladně uvádějí skupina 1-fenylmethylová, 2-fenylethylová, 3-nafty1propylová, 1-nafty 1isopropylová a 4-f eny 1 buty 1 ová skupina.

Výrazem skupina chránící aminoskupinu” se zde vžily míní, jako ostatně obecně v organické chemii, skupina, která brání Loaby se aminoskupina podílela na reakcích jiných funkčních skupin v molekule, která piny. když je to žá«loucí skupin se uvádějí skupina skup i na trichloracetylová, tylová; chránící skupiny však může opi?, odstranit 2 amínosknJakožto příklady Jakových chránících íornylová, tritylová, Ltalinidoskupina, ch1oracety1ová, bromacety1ová, jodaceurethanového typu, jako je například skupina benzy1oxykarbonylová, 4-fenylbenzyloxykarbonylová, 2-methy1benzy1oxykarbony 1ová, 4-methoxybenzy1oxykarbonylová, 4-fluorbenzyloxykarbonylová, 4-chlorbenzyloxykarbony 1ová, 3-chlorbenzy1oxykarbonylová, 2-chlorbenzyloxykarbonylová, 2,4-dichlorbenzyloxy karbony lová , 4-brombenzyloxykarbonylová, 3-brombenzyloxykarbony lová, 4-nitrobenzyloxykarbonylová, 4-kyanobenzyloxykarbonylová, 2-<4-xeny1)isopropoxykarbonylová, 1,1-difenyleth-l-yloxykarbonylová, 1,1-difenylprop-l-y1oxykarbonylová, 2-fenylprop-2-yloxykarbonylová, 2-Cp-tolyljprop-2-yloxykarbonylová, cyklopentanyloxykarbony1ová, 1-methy1cyk1opentany1oxykarbony 1ová, cyk1ohexany1oxykarbonylová, 1-methy1cyklohexanyloxykarbonylová, 2-methylcyklohexany1oxykarbony1ová, 2-< 4-to1uy1su1f ony 1)ethoxy karbony 1ová, 2(methylsulfony1)ethoxykarbonylová, 2-<trifenylfosf inoíethoxykarbonylová. fluorenylmethoxykarbonylová (FMOC), 2-trimethylsily1ethoxykarbonylová, allyloxykarbonylová, 1-Ctrlmethylsilylmethy1)prop-l-enyloxykarbonylová, 5-benzisoxalylmethoxykarbonylová. 4-acetoxybenzy1oxykarbony1ová, 2.2.2-trichlorethoxykarbony1ová, 2-ethinyl-2-propoxykarbonylová, cyklopropylmethoxykarbonylová. 4Cdecyloxy)benzyloxykarbonylová, isobornyloxykarbonylová a 1-piperidyloxykarbonylová skupina: nebo například skupina benzoylmethylsulfonylová. 2-nitrofeny1sulfenylová a difenylfosfinoxidová skupina.

Druh používané skupiny ke chránění aminoskupiny nemá rozhodující význam, pokud·je taková derivatizovaná aminoskupina stálá za podmínek následující reakce nebo následujících reakcí na jiných místech molekuly jakožto meziproduktu a pokud se může selektivně odstranit ve vhodné chvíli bez narušení zbylé molekuly včetně jiné chránící skupiny nebo jichých chránících skupin. Jakožto zvlášt výhodné skupiny se uvádějí terč.-butoxykarbony 1ová skupiny <t-Boc) a benzyloxykarbonylová skupinma CCbZ). Příklady da ί / i c h v!:.· ínv‘' *1 Pr -i 'tec f. i ve v i ji 'ian i c ké sy n Lez 1981 a J .V - Bartoň irán í ·..· sch s»i :i jsou ?ι·;..ίΐ)’· ’ publika,·· ?r,.mps in 0 í ^rw ϊ 11 ‘ l-yTikhcc i s . ’ i *hi án i < · i skupiny .·), k.ip i kt , la 7. John ’/ i lov and Sons , New York.

, Protéct, i ve Groups in Onanie Chem istry (Chránící skupí ny v organ i cké chera i i ) , kap i to 1 a 2 ( J - G . V - McOm i e E<1 - , Plenům Press, New York. N.Y. 1973).

Druh používané skupiny ke chránění ani noskupi ny nemá rozhodující význam, pokud je taková derivatizovaná aminoskupinu stálá za podmínek následující reakce noho následujících reakcí na jiných místech molekuly jakožto meziproduktu a pokud se může selektivně odstranit ve vhodné divili bez narušení zbyle molekuly včetně jiné chránící skupiny nebo jiných chránících skupin. Jakožto zvlášt výhodné skupiny se uvádějí terč.-butoxykarbonylová skupiny (t-Boc) a benzy1oxykarbonylová skupinna (CbZ)- Příklady dalších vhodných chránících skupin jsou popsány v publikaci T.V. Green. Protective Groups in Organie Synthesis, (Chránící skupiny v organické syntéze), kapitola 7, Johm Viley and Sons. New York, 1981 a J.V. Bartoň, Protective Groups in Organie Chemistry (Chránící skupiny v organické chemii), kapitola 2 (J.G.V. McOmie Ed.. Plenům Press, New York. N.Y. 1973).

Výrazem “skupina chránící karboxyskupinu se míní skupiny, kterých se obecně používá k substituování karboxyskupiny k jejímu chránění za reagování jiných funkčních skupin sloučeniny. Jakožto příklady takových chránících skupin se uvádějí skupina methylová, p-nitrobenzylová, p-methyl benzy lová, p-inethoxy benzy lová, 3,4-dimethoxybenzylová, 2,4-d imethoxybenzylová, 2,4.6-trimethoxybenzylová. pentamethy1benzylová, 3,4-methylendioxybenzylová. benzhydrylová, 4,4 -dimethoxybenzhydrylová. 2,2 ,4.4 -tetramethoxybenzhydrylová, ter.- butylová, terč.-amylová, 4-methoxytritylová, 4,4 -dimethoxytritylová, 4,4 ,4”-trimethoxytritylová, 2-fenylprop-2-ylová. trimethylsilylová, terč.-buty1dimethylsilylová, fenacylová, 2,2,2-tri c h lorethy1ová, n-(ď i(n-buty1)methylsilyl) e t hy 1 ová , p-t.o l uensu 1 f ony lethy lová , 4-n i trobenzy 1 su 1 f ony lethy 1 ová , a 1 lyl ová , c i nnamy 1 ová a 1 - (t r i methy ls i l methy 1 )prop-l-en-3-y lová skupina. Jakožto výhodná skupina. chránící karboxyskupinu, sp ivádí skupina J >enzhyt i i y 1 - -vá. Palči příklady takových chránících rkupin jsou popsány v publikaci 1Ξ. Has lam. Protéct i ve Groups in Onanie Clienistry «'Chránící skupiny v organické chemií), kapitola 5 (J.G.V. McOmie Eil. , Plenům Press, New York. N.Y.1973) a T. V. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis (Chránící skupiny v organické syntéze), kapitola 5 , Johm Viley and Sons, New York, N.Y. 1901.

tra

Sloučeniny podle vynálezu mají alespoň dvě označená hvězdičkou v následujícím obecném asymetri cká vzore i I cen-

R°

V důsledku těchto asymetrických center mohou být sloučeniny ve formě směsí diastereoisomerů racemických směsí a jednotlivých enantioraerfl. Vynález zahrnuje všechny jednotlivé isomery a jejich směs i.

Jak shora uvedeno, týká se vynález také farmaceuticky vhodných solí sloučenin obecného vzorce I. Jakkoliv sloučeniny obecného vzorce I jsou obecně neutrální, mohou obsahovat dostatečně kyselých skupin nebo dostatečně zásaditých skupin nebo jak zásadité tak kyselé skupiny, aby mohly reagovat s různými anorganickými zásadami, anorganickými nebo organickými kyselinami pro přípravu farmaceuticky vhodných solí.

Výrazem farmaceuticky vhodné soli se míní soli sloučenin shora uvedeného obecného vzorce, které jsou v podstatě netoxické pro živé organismy. Jakožto typické farmaceuticky vhodné soli se uvádějí suli, připravené reakcí sloučenin shora uvedeného obecného vzorce s farmaceuticky vhodnými minerálními nebo organickými kyselinami nebo s iarmaceuticky vhodnými anorganickými zásadami. Takové soli jsou známy jakožto adični soli s kyselinami uelo a! i ίη ί χás. !aa i .

Jakožl-o příklady farmuceuticky vhodných airii.Talnr.-h kyselin, použitelných pru přípravu f arnaceiit icky vhodných suli, o uvádějí příkladně kysel ina ch 1 oruvnd í ková , br oriovt >d i ková , h.idovod í ková , fosforečná a sírová. Jakožto příklady farmaceuticky vhodných organických kyselin, kterých lze použít pro přípravu farmaceuticky vhodných solí, se uvádějí kyselina p-toluensu1fonová, methansulfonová, štavelová, p-hromfenylsu1fonová, karboxylová. jar.tarova, citrónová, bezoová a octová kyselina.

Jakožto takové farmaceuticky vhodné soli, připravené za použití minerálních nebo organických kyselin, se uvádějí příkladně pyrosulfát, hydrogensulfát, sulfít, hydrogensulfit, fosfát, monohydrogensofát, dihydrogenfosfát, metafosfát, pyrofosfát, chlo rid, bromid, jodid, acetát, propionát, dekanoát, kaprylát, akrylát, formát, isobutyrát, kaproát, hept.anoát, propit» lát, oxalát, malonát, sukcinát, suberát, sebekát, fumarát, maleát, butin-1,4dioát, hexin-1,6-dioát, benzoát, chlorbenzoát, methy1benzoát, dinitrobenzoát,, hydroxybenzoát, methoxybenzoát, xylensulfonát, fenylacetát, fenylpropionát, rát, laktát, gama-hydroxybutyrát, glýkolát, tartrát, methansulfonát, propansulfonát. naftalen-l-sulfonát, naftalen-2-sulfonát a mandelát. Výhodnými, farmaceuticky vhodnými adičními solemi s kyselinou, jsou soli s minerálními kyselinami, například s kyselinou chlorovodíkovou a bromovodíkovou a s organickými kyselinami, například s kyselinou maleinovou a methansulfonovou.

ftdiční soli se zásadami se odvozují od anorganických zásad, jako jsou například amonium a hydroxidy, uhličitany á hydrogenuhličitany alkalických kovů a kovů alkalických zemin.Jakožto takové zásady, vhodné pro přípravu farmaceuticky vhodných solí, se příkladně uvádějí hydroxid sodný, draselný a amonný, uhličitan draselný a sodný, hydrogenuh1ičitan sodný a draselný, hydroxid vápenatý a uhličitan vápenatý. Obzvláště vhodnými jsou draselné a sodné soli.

Připomíná se. že zcela určitý aniontový nebo kationtový potili v jakékoliv soli podle vynálezu nemá rozhodujícího významu.

fta lát. sulfonát, feny 1butyrát, cit16 pokud taková sůl jako celek je farmaceuticky vhodná a pokud aniontový nebo kationtový podíl nedodávají soli nežádoucí kva 1 i ty. <®LII 4

Výhodnými jsou sloučeniny podle vználezu obecného vzorce I, kde znamená

Y skupinu obecného vzorce

R¹ arylovou skupinu nebo skupinu vzorce -S-R^la, kde znamená R^laarylovou skupinu.

R² atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku q □ nebo 1.

X skupinu vzorce

R^3a skupinu vzorce -CCCD-NR^R⁴, kde má R⁴ shora uvedený význam, a jejich farmaceuticky vhodné soli.

Z těchto výhodných sloučenin podle vználezu obecného vzorce I jsou obzvláště výhodnými sloučeniny, kde znamená Y fenylovou skupinu.

Y¹ dekahydro-C4aS, 8aS-isochinolinylovou skupinu a

R³ -CCOjNHCterc.-butyl)ovou skupinu a jejich farmaceuticky vhodné soli.

Z těchto výhodných sloučenin podle vználezu obecného vzorce I jsou především výhodnými sloučeniny, kde znamená R a R° spolu s atomem uhlíku, na který jsou vázány, heterocyklickou nebo.nenasycenou heterocyklickou skupinu za podmínky, že atom dusíku není kvartemizován a jejich farmaceuticky vhodné soli.

Nejvýhodnějšími jsou sloučeniny vzorce

5C3 R*,4 S*)]-N-[l -oxo-1 -<3”-[í -oxo-2’-aza-3 -fe lylmethy1-4 -hydroxy-5 -<2 -N-terc.-butylkarbamido)feny1] jenty1-4-methy1)f eny11methy1-1.2,3,4-tetrahydroi sochi noli n

i -oxo-5 -C3”-[l ,2 ,3 ,4 -tetrahydroisochinolin-2 -yl :arbony11-6”-methyl)feny13 penty1-dekahydroisochinolin-3-N-terc.»uty 1 karboxam i d a

NH(t-butyl) [3S(3Rx,4aR*,8aRx-2 Sx, 3 Rxjl-2-[2 -hydroxy-3 -fenylmethy1-4 aza5 -oxo-5 -C3”-[l -oxo-2 -N-methylaza-3 -chinolin-2 -ylpropy11-6-methy1jf eny11penty1-dekahydroisochinolin-3-N-t-buty1karboxamid a jejich farmaceuticky vhodná sůl.

Nejvýhodnějšími sloučeninami podle vynálezu obecného vzorce

I jsou následující sloučeniny:

[3 S-C3 Rx,4 Sx)]-N-[1 -oxo-1 -C3”-[l -oxo-2 -aza-3 feny 1methy1-4 -hydroxy-5 -(2 -N-terc.-butylkarbamidojfeny11penty1-4”-brom]feny 1jmethy11-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin,

C3 ' ' S-C3 'Rx,4 'S*j] -N-[ 1 '-oxo-1 '-C3-[ 1 ' ' '-oxo-2 ' ' '-aza-3 '' 'naftylmethy1-4 -hydroxy-5 -C2 -N-terc.-butylkarbamidojfeny1]penty1-4”-methy11 feny1jmethy11-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin, [3 S-(3 Rx,4 Sxj]-N-[1 -oxo-1 -C3-[l -oxo-2 -aza-3 r * s s * s / , , , naftylthiomethy1-4 -hydroxy-5 -(2 -N-terc.-butylkarbami dojfeny1]penty1-4”-methyl1feny1jmethy11-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin, [3 S-<3 Rx,4 Sxj]-N-[1 -oxo-1 -C3”-[l -oxo-2 -aza-3 feny1lmethy1-4 -hydroxy-5 -C2 -N-terc.-butylkarbamidojfeny 11penty1-4”-methoxy]feny1jmethy11-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin, [3 S-C3 Rx,4 Sxj]-N-[1 -oxo-1 -C3”-(l -oxo-2 -aza-3 x x x x x x x fenylmethy1-4 -hydroxy-5 -<2 -N-terc.-butylkarbamidojfeny11 penty1-4-methy1th i olfeny1jmethy11-1,2.3,4-tetrahydroi soch i no1 i n, [3 S-<3 Rx,4 Sxj]-N-Cl -oxo-1 -C3-C1 -oxo-2 -aza-3 cyklohexylmethy1-4 ' -hydroxy-5'' -(2 -N-terc.-butylkarbamidojfenyllpentyl-4-methylthio]fenyljmethyl]-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin, [3 ' ' S-<3 ' Rx ,4 Sx j]-N-[ 1 -oxo-1 '-<3”-[l'' '-oxo-2 '-aza-3 '' 'fenylmethy1-4 ' -hydroxy-5 -C2 -N-terc.-butylkarbamidojfeny13 penty1-4-am i nolf eny1jmethy11-1,2,3,4-tetrahydroi sochi no1 i n, [3 S-(3'Rx,4 'Sx j]-N-[l -oxo-1 '-<3”-(l ' ' '-oxo-2' -aza-3 ' ' 'feny1lmethy1-4 -hydroxy-5 -C2 -N-terc.-butylkarbamidojfeny11penty1-4”-karbamoy11 feny 1jmethy11-1,2.3.4-tetrahydroisochi nolin, [3S-(3Rx ,4aRx ,l3aRx ,2 Sx , 3 Rxjl-2-[2 -hydroxy-3 -naft-2-y1thiomet19 hyl-4E -áza-5 -oxo-5 -<3-41 .2 ,3 ,4 -tetrahydroisochinoli n-2 -ylkarbony 1)-6”-methy1)feny11 ponty 1-dekahydroisochi no1 i n-3-N-tere.-buty1karboxamid.

13S-43Rx,4aRx,8aRx,2 Sx,3 R*)l-2-[2 -hydroxy-3 -f eny lthiomethy 1 4 -aza-5 -oxo-5 -43-41 .2 .3 ,4 -tetrahydroisoehinolin2 -y1karbony 1)-6“-methy1)f eny1]penty1-dekahydroisochino1in-3-N terč.-buty1karboxam1d,

13S-43Rx,4aRx,8aRx,2 S*.3 R*)]-2-12 -hydroxy-3 -fenyImethy1-4 -a za-5 -oxo-5 -43-48 -methy1-1 .2 .3 .4 -tetrahydroisochinolin-2 -y1karbony 1 )-6-nethy1)feny 1 ]penty1-dekahydroisochinol in-3-N-terc. -butylkarboxamid, [3S-C3Rx,4aRx,8aRx.2 S*,3 Rx )1-2-12 -hydroxy-3 -fenyImethy14 -aza-5 -oxo-5 -43-<1,2,3,4 -tetrahydroisoehinolin2 -y 1 karbony 1 ) -6 -chlor)feny 11 penty 1 -dekahydroisoehinol in-3-liteře .-buty1karboxami d, [3S-C3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx,3 Rx )1-2-12 -hydroxy-3 -fenyImethy14 -aza-5 -oxo-5 -43-41 ,2 ,3 ,4 -tetrahydroisoehinolin2 -ylkarbony 1)-6”-methoxy)feny 11penty1-dekahydroisochinolin-3N-terc.-butylkarboxamid,

13S-C3Rx,4aRx,8aRx,2Sx,3 Rx)1-2-12 -hydroxy-3'-fenyImethy1-4 -a za-5 -oxo-5 -43-41 ' ,2 ,3 ' ,4 -tetrahydroisoehinolin2 -ylkarbony1)-6-trifluormethyl)fenyl]penty1-dekahydroisochinolin-3-N-terc.-butylkarboxamid,

13S-C3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx.3 Rx )]-2-12 -hydroxy-3 -fenyImethy14 -aza-5 -oxo-5-43-41 ,2 .3 ,4 -tetrahydroisoehinolin2 -y1karbony 1)-6-methy1th i o)f eny1]penty 1-dekahydro i soch i no1in-3-N-terc.-butylkarboxamid,

13S-43Rx,4aRx,8aRx,2 Sx,3 Rx >1-2-12 -hydroxy-3 -fenyImethy14 -aza-5 -oxo-5 -43-11 -oxo-2 -N-methylaza-3 chinolin2 -ylpropy1]-6”-brom)fenyllpentyl-dekahydroisochinolin-3-Nterc.-butylkarboxamid,

13S-(3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx,3 Rx)]-2-12 -hydroxy-3 -fenyImethy14 -aza-5 -oxo-5 -43-11 -oxo-2 -N-methylaza-3 chinolin2 -ylpropy11-6-ethoxy)feny1]penty1-dekahydroisoehinolin-3-Nterc.-butylkarboxamid.

133-C3Rx,4aRx.8aR*,2 3* , 3 Rx)l-2-12 -hydroxy-3 -naft-l-y1thiomethyl-4 -aza-5 -oxo-5 -C3-tl -oxo-2 -N-raethylaza-3 -chi no 1in-2 -y 1 propy 1 1 -6” -brora)feny 1 ] penty 1 -dekahydroisochino 1 i n

3-N-terč.-buty1karboxami d,

13S-C3Rx,4aRx,BaRx,2 3x,3 Rx)]-2-12 -hydroxy-3 -fenylmethy14 -aza-5 -oxo-5 -<3”-tl -oxo-2 -N-ethylaza-3 -chinolin2 -y1propy11-6“-brom)feny 11penty1-dekahydroisochino1in-3-Nterc.-buty1karboxam i d, [3S-(3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx,3 Rx)]-2-f2 -hydroxy-3 -fenylmethy14 -aza-5 -oxo-5 -C3“-tl -oxo-2 -N-methylaza-4 -chinolin2 -y lbuty 1 ] -6” -brom) feny 11 penty 1 -dekahydroisochinol i n-3-liteře .-buty1karboxamid, t3S-C3Rx,4aRx,8aRx.2 Sx,3 Rx)l-2-12 -hydroxy-3 -fenylmethy14 -aza-5 -oxo-5 -C3-tl -oxo-2 -N-methylaza-4 -chinolin2 -y1butyl1-6”-brom)feny11penty1-dekahydroisochinolin-3-Nterc.-buty1karboxam i d,

13S-(3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx,3 Rx)1-2-12 -hydroxy-3 -feny lmethy 14 -aza-5 -oxo-5 -C3”-tl -oxo-2 -N-methylaza-3 -chinolin8 -ylpropy11-6“-methyl)feny11penty1-dekahydroisochinolin-3-N terč.-buty1karboxam i d,

13S-C3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx,3 Rx )1-2-12 -hydroxy-3 -naft-2-ylmethy1 4 -aza-5 -oxo-5 -C3-tl -oxo-2 -N-methylaza-3 -chinolin2 -y1propy11-6“-brom)f eny11penty1-dekahydroi soch inolin-3-Nterc.-buty1karboxam i d.

13S-C3Rx,4aRx,8aRx.2 Sx,3 Rx)]-2-12 -hydroxy-3 -fenylmethy14 -aza-5 -oxo-5 -C3-tl -oxo-2 aza-3 -chinolin-2 -ylpropy11-6-brom)feny 11penty1-dekahydroisochinolin-3-N-terc.buty1karboxam i d.

13S-(3Rx,4aRx.8aRx,2 Sx,3 R* )1-2-12 -hydroxy-3 -fenylmethy1s s / + r r f f f f f /

-aza-5 -oxo-5 -C3”-tl -oxo-2 -aza-3 -naft-2 -ylpropy11 -6-methy1)feny11penty1-dekahydroisochinolin-3-Nterc.-buty1karboxamid,

R-C2 Rx,3 Sx)l-2-12 -hydroxy-3 -fenylmethy1-4 -aza-5 -oxo5 -<3-tl -oxo-2 -aza-3 -naft-2 -y1)propy1-6-methy1 feny 11penty1-N-terc.-buty1benzamid.

)21

R-C2 R*,3 Sx)l-2-12 -hydroxy-3 -fenyImethy1-4 -aza-5 -oxo5 -C3-<1 -oxo-2 -N-methylaza-3 -chinolin-2 -y1)propy16> -methy 1 )f eny 1 1 penty 1 -N-terc . - buty 1 benzamid ,

R-(2 Rx , 3 Sx)l-2-12 -hydroxy-3 -naftyImethy1-4 -aza-5 -oxo-5 <3-tl -oxo-2 -N-methy1aza-3 -chinolin-2 -y1)propy1-6”methy1)feny1]penty1-N-terc.-buty1benzamid.

R-(2 Rx.3 Sx)1-2-12 -hydroxy-3 -fenyImethy1-4 -aza-5 -oxo-5 C3-[l -oxo-2 -N-met,hy laza-3 <8 -methylchinolin-2 y1)propy1-6“-methy1)feny1]penty1-N-terc.-buty1benzamid,

R-C2 Rx,3 S*)l-2-12 -hydroxy-3 -fenyImethy1-4 -aza-5 -oxo-5 C3-C1 -oxo-2 -aza-3 -chinolin-2 -y1)propy1-6-chlor)feny11penty1-N-terc.-buty1benzamid,

R-C2 Rx,3 Sx)1-2-12 -hydroxy-3 -fenyImethy1-4 -aza-5 -oxo-5 X X X XXX XXX xxxx

03-Cl -oxo-2 -aza-3 -chinoxa1in-2 -y1)propy1-methy 1)feny1]penty1-N-terc.-buty1benzamid,

R-C2 Rx,3 Sx)1-2-12 -hydroxy-3 -fenyImethy1-4 -aza-5 -oxo-5 C3-fl -oxo-2 -aza-3 -naft-2 -y1)propy1-6-methyDřeny lipeňty 1-4-methy1-N-terč.-buty1benzam i d,

R-C2 Rx,3 Sx)1-2-12 -hydroxy-3 -fenyImethy1-4 -aza-5 -oxo-5 C3-(l -oxo-2 -N-methylaza-3 -pyrid-2 -yl)propyl-6-methy 1 )feny11 penty1-N-terc.-buty1benzamid.

R-C2 Rx,3 Sx)1-2-12 -hydroxy-3 -fenyImethy1-4 -aza-5 -oxo-5 C3-(l -oxo-2 -aza-3 -chinolin-2 -yl)propy1-6”-methyl)feny1]penty1-N-terc.-buty1pro1inbenzamid,

C3S-C3Rx,4aRx,SaRx , 2 Sx .3 Rx)]-2-12 -hydroxy-3 -fenyImethy1-4 aza 5 -oxo-5 -<3”-[l -oxo-2 -N-methylaza-3 -pyrid-2 -ylpropy 11 -6“-methyl)feny1]penty1-dekahydroisochinolin-3-N-terc.buty1karboxami d,

R-C2 Rx,3 Sx)1-2-12 -hydroxy-3 -fenyImethy1-4 -aza-5 -oxo-5 <3-Cl -oxo-2 -N-methylaza-3 -pyrid-3 -y1)propy1-6-methy 1)feny 11 penty1-N-terc.-buty1benzamid,

R-(2 Rx,3 Sx)1-2-12 -hydroxy-3 -fenyImethy1-4 -aza-5 -oxo-5 C3-(l -oxo-2 -N-methylaza-3 -pyrid-4 -y1)propy1-6-methy 1)feny11penty1-N-terc.-buty1benzamid,

R-(2 Rx,3 Sx)l-2-12 -hydroxy-3 -fenyImethy1-4 -aza-5 -oxo-5 <3-(1 -oxo-2 -N-methylaza-3 -feny 1)propyl-6”-methy1^feny 1 ] pen ty 1 - N - terč . - buty 1 benzam i d, [2 R-C2 R* , 3 Ξ-Ό]-2-[2 -hydroxy-3 -feny lmethy 1-4 -aza-5 -oxo-¹·' C3”-C1 -oxo-2 -N-methylaza-3 -naft-2 -y1jpropy1-6”-methy 1>feny1]penty1-N-terc--butylbenzamid.

a jejich farmaceuticky vhodné soli.

Sloučeniny podle vynálezu obecného vzorce I se mohou připravovat způsobem podle reakčního schéma I^:

Reakční schéma I

X

R^L (I) pn ného kde R, R°, R¹ . X a 2 mají shora uvedený význam.

Reakcí 1.1 je standardní kopulační reakce, běžně používaná synteze peptidfl, která se provádí reakcí vhodně substituovase vhodně substituovanou karboxyaminu obecného vzorce IA.

lovou kyselinou obecného vzorce IB.nebo s její aktivovanou formou v aprotickém rozpouštědle nebo ve směsi rozpouštědel. Reakce se s výhodou provádí v přítomnosti kopulačního činidla. Jakožto typická aprotická rozpouštědla, používaná při této reakci, se uvádějí tetrahydrofuran, dimethv1formamid a s výhodou směs těchto rozpouštědel. Reakce se provádí při teplotě přibližně -30 az přibližně 25 C. Aminové reakční činidlo se používá obecně v ekvimolárních množstvích se zřetelem ke sloučenině karboxylové kyseliny v přítomnosti ekuimolárního množství až mírného nadbytku kopu ladního činidla. Jakožto typická kopulační činidla se uváděli karbodiimidy, například dicyklohexylkarbodiimid (DCC) a M.M -diethy1karbodiimid; imidazoly, například karbonyldiimidazol; jakož také činidla jako chlorid bis-C2-oxo-3-oxazolidiny1osfinové kyseliny CBOP-C1) nebo N-ethoxykarbony1-2-ethoxy-l,2-dihydrochinolin (EEDQ) Výhodným kopulačním činidlem pro tuto reakci je dicyklohexylkar-

<ΗΟΒΤ.Η2θ)Jakmile je reakce ukončena, může se meziprodukt popřípadě izolovat o sobě známým způsobem. Například se meziprodukt může nechat vykrystalovat a oddělí se filtrací, nebo se může reakční

by, jako jsou krystalizace nebo chromatografie na pevných nosičích, jako jsou silikagel nebo oxid hlinitý, před prováděním dalšího reakčního stupně.

Sloučeniny obecného vzorce IA. kde znamená X skupinu obecného vzorce se připravují způsobem podle reakčního schéma A. Reakční schéma A

1. aktivace kyselinou

2· vytváření amidu

OH

kde znamená

R^b skupinu chránící aminoskupinu a

R¹, R^3a a Y mají shora uvedený význam.

Reakce podle reakčního schéma A se provádějí postupným sledem reakcí 1 až 6. Jakmile je reakce ukončena, může se meziprodukt popřípadě izolovat o sobě známým způsobem. Například se meziprodukt může nechat vykrystalovat a oddělí se filtrací, nebo se může reakční rozpouštědlo odstranit extrakcí, odpařením nebo dekantací. Získaný meziprodukt se může dále popřípadě čistit o sobě známými způsoby, jako jsou krystalizace nebo chromatografie na pevných nosičích, jako jsou silikagel nebo oxid hlinitý, před prováděním dalšího reakčního stupně.

Reakce A.l se zpravidla provádí aktivací, to znamená konverzí vhodně substituované kyseliny arylkarboxylové, heterocyklické karboxýlové nebo nenasycené heterocyklické karboxýlové na odpovídající acylchlorid nebo acylbromid reakcí s thionylchloridem, s thiony 1bromidem. s chloridem fosforitým, s bromidem fosforitým, s chloridem fosforečným nebo s bromidem fosforečným za podmínek o sobě známých ze stavu techniky. Vhodné sloučeniny kyseliny arylkarboxylové, heterocyklické karboxýlové nebo nenasycené heterocyklické karboxýlové kyseliny jsou obchodně dostupné nebo se mohou připravovat o sobě známým způsobem.

Podle reakce A.2 se acylchlorid nebo acylbromid, připravený

- 25 podle stupně A.l. nechává reagovat s amoniakem nebo s primárním aminem nebo se sekundárním aminem obecného vzorce h-nr⁴r⁴ ,

kde R⁴ , R⁵ . R⁶ a p mají význam, uvedený u obecného vzorce I, v nepolárním aprotickém rozpouštědle nebo ve směsi rozpouštědel v přítomnosti nebo v nepřítomnosti činidla vázajícího kyselinu za získání odpovídajícího amidu. Reakce se provádí při teplotě přibližně -20 až přibližně 25 ’c. Jakožto typická rozpouštědla pro tuto reakci se uvádějí ethery a chlorované uhlovodíky. přičemž výhodnými rozpouštědly jsou diethylether, chloroform a meťhylenchlorid. Reakce se s výhodou provádí v přítomnosti činidla, vázajícího kyselinu, jako jsou terciární aminy, s výhodou triethylamin.

Podle reakce A.3 se amid. připravený podle stupně A.2. nechává reagovat se silnou zásadou v přítomnosti solubi1izačního činidla k získání aniontu, který se pak nechává reagovat podle reakce A.4 s Veinrebovým amidem k získání ketonu. Reakce A.3 se provádí v aprotickém rozpouštědle při teplotě přibližně -73 až přibližně 0 C. Jakožto typické zásady, používané při reakci A.3. se uvádějí 1ithiumamidové zásady a alky 11 ithiové zásady, s výhodou alky 11 ithiové zásady s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu 1 ithiumdialkylamidové zásady s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu. Jakožto typická solubi1izační činidla, používaná při re- 26 akci A.3 se uvádějí tetramethyla1kylendiaminy s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu s výhodou tetramethy1ethylendiamin. Reakce A.4 se provádí v aprotickém rozpouštědle při teplotě přibližně -80 až přibližně -40 O. Jakožto typická rozpouštědla, používaná při reakci A.3 a A.4 se uvádějí ethery, především tetrahydrofuran Při reakci A.4 se aniontu obecně používá v množství přibližně ekvimolárním až v množství přibližně tří molárních nadbytků aniontu s výhodou v množství přibližně dvou molárních nadbytků aniontu se zřetelem na Veinrebovo amidické činidlo.

Podle reakce A.5 se keton, připravený podle stupně A.3, redukuje na odpovídající alkohol za použití vhodného redukčního činidla. Reakce se provádí v protickém rozpouštědle při teplotě přibližně -25 až přibližně 25 C. Jakožto typická redukční činidla, používaná pro tuto reakci se uvádějí natřiumborhydrid, lithiumborhydrid, diisobutylaluminiumhydrid a natrium-bis<2-methoxyethoxyjaluminiumhydrid, přičemž výhodným redukčním činidlem je natriumborhydrid. Jakožto typická protická rozpouštědla, používaná při této reakci, se uvádějí alkoholy, s výhodou ethanol.

Reakcí A.6 je standardní reakce odstraňování chránící skupiny z aminoskupiny, prováděná o sobě známým způsobem za získání aminu obecného vzorce IA. Tento amin se pak nechává reagovat způsobem. podrobně popsaným v odstavci v souvislosti s reakcí podle reakčního schéma I. Amin se může nechávat reagovat bez čištění avšak s výhodou se nejprve čistění provádí.

Sloučeniny obecného vzorce IA, kde znamená X skupinu obecného vzorce

se připravují způsobem podle reakčního schéma B.

Reakční schéma B

BOC —N H

(Veinrebův amid· )

H

4. redukce

5· deprotekce

6. acylatce

7. deprotekce

kde R¹, R^b R^3b a Y mají shora uvedený význam.

Reakce podle reakčního schéma B se provádějí postupným sledem reakcí 1 až 7. Jakmile je reakce ukončena, může se meziprodukt popřípadě izolovat o sobě známým způsobem. Například se meziprodukt může nechat vykrystalovat a oddělí se filtrací, nebo se může reakční rozpouštědlo odstranit extrakcí, odpařením nebo dekantací- Získaný meziprodukt se může dále popřípadě čistit o sobě známými způsoby, jako jsou krystalizace nebo chromatografie na pevných nosičích, jako jsou silikagel nebo oxid hlinitý, před prováděním dalšího reakčního stupně.

Při reakci B-l se vhodně substituovaný ary lamin, heterocyklický amin nebo nenasycený heterocyklický amin chrání za o sobě známých podmínek za použití v oboru o sobě známých skupin chráních aminoskupinu. Reakce B.2 až B.5 se provádějí v podstatě, jak je popsáno v případě reakcí podle schéma A.3 až A. 6 s tou výjimkou, že podle reakčního schéma B je třeba ještě přídavné reakce k odstranění chránící skupiny, reakce B.5, zavedené v reakci B.l. Jde o o sobě známou reakci k odstraňování chránící skupiny z aminoskupiny. Například se může t-Boc skuji na v reakčním schéma B-1 odstranit silnou kyselinou, s výhodou trifluoroctovou kyse1 inou.

Podle reakce B.6 se meziprodukt acyluje vhodným acylhalogenidem, isokyanátem nebo chlorformátem, s výhodou v přítomnosti činidla, vázajícího kyselinu, jako jsou terciární aminy, s výhodou triethylamin- Reakce se provádí při teplotě přibližně -20 až přibližně 25 C. Jakožto typická rozpouštědla, používaná pro tuto reakci, se uvádějí ethery a chlorované uhlovodíky, s výhodou diethylether, chloroform a methylenchloridReakce B.7 je standardní reakcí odstraňování chránící skupiny z aminoskupiny a provádí se o sobě známým způsobem podobně jako v případě aminu IA podle shora uvedeného reakčního schéma I. Tento amin se může nechávat reagovat bez čištění, s výhodou se však čistí.

Sloučeniny obecného vzorce I, kde znamená X skupinu obecného vzorce

se připravují způsobem podle reakčního schéma C.

kde R¹ , R^b, R^3a a Y¹ mají shora uvedený význam a kde znamená G at.cn halogenu.

Reakce podle reakčního schéma C se provádějí postupným sledem reakcí 1 až 7. Jakmile je reakce ukončena, může se meziprodukt popřípadě izolovat o sobě známým způsobem. Například se meziprodukt může nechat vykrystalovat a oddělí se filtrací, nebo se může reakční rozpouštědlo odstranit extrakcí, odpařením nebo dekantací. Získaný meziprodukt se může dále popřípadě čistit o sobě známými způsoby, jako jsou krystalizace nebo chromatografie na pevných nosičích, jako jsou silikagel nebo oxid hlinitý, před prováděním dalšího reakčního stupně.

Rakce C.l se provádí aktivací, to znamená,že se karboxylová kyselina se chráněnou aminoskupinou obecného vzorce

převádí na odpovídající směsný anhydrid za podmínek v oboru o sobě známých ze stavu techniky. Například se karboxylová kyselina se chráněnou aminoskupinou může nechávat reagovat s alkylchlorformátem s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylovém podílu, jako je například isobuty1chlorformát, s výhodou v přítomnosti činidla vázajícího kyselinu. Jakožto výhodná činidla, vázající kyselinu, se uvádějí trialkylaminy, s výhodou triethylamin. Reakce se zpravidla provádí v aprotickém rozpouštědle, jako je ethylacetát. Volba rozpouštědla nemá rozhodující význam, pokud je rozpouštědlo inertní k probíhajícím reakcím a pokud jsou reakční složky dostatečně rozpustné k dosažení žádané reakce.Výsledného směsného anhydridu se s výhodou používá v reakčním stupná C.2 bez izolace a bez dalšího čištění.

Reakce C.2 se provádí ve dvou stupních. Nejdříve se roztok hydroxidu sodného pokrytý vrstvou etherového rozpouštědlla, s výhodou d i ethy 1 etherem, nechává reagovat s velkým nadbytkem N-iiiethy1-N-nitro-N-nitrosoguanidinu za získání diazomethanového reakč31 ního činidla. Hydroxidu sodného se s výhodou používá ve formě vodného roztoku, obsahujícího přibližně hydroxidu sodného 4 až 6 mol/litr. Jakmile je reakce v podstatě ukončena, vysuší se organická vrstva sušidlem, jako je například hydroxid draselný. Tento roztok se pak nechává reagovat se směsným anhydridem, získaným podle reakčního stupně C-l, za získání odpovídající <z-diazokarbonylové sloučeniny. Diazomethanový reakční produkt se s výhodou používá v tomto reakčním stupni bez izolace a čištění. Reakce se o

zpravidla provádí při teplotě přibližně -50 až přibližně -20 C, s výhodou při teplotě -30 C.

Při reakčním stupni C.3 se a-diazokarbonylová sloučenina, připravená podle reakčního stupně C.2, nechává reagovat s kyselinou obecného vzorce H-0, kde znamená 6 atom halogenu, v aprotickém rozpouštědle, jako je například diethylether, za získání α-halogenkarbonylové sloučeniny. Výhodným kyselinovým reakčním činidlem je kyselina chlorovodíková, která vede k a-chlorkarbonylové sloučenině. Reakce se zpravidla provádí při teplotě přibližně -30 až přibližně O C- Volba rozpouštědla nemá rozhodující význam, pokud je rozpouštědlo inertní k probíhající reakci a pokud se v něm reakční složky dostatečně rozpouštějí k proběhnutí reakce. Kyselinové reakční činidlo se zpravidla přidává ve formě bezvodého plynu v malých přídavcích až do chvíle, kdy se zdá, že reakce proběhla dokonale.Reakce se monitoruje chromatografií v tenké vrstvě.

Při reakci C.4 se karbonylový podíl sloučeniny, připravené způsobem podle reakčního stupně C.3, redukuje za o sobě známých podmínek, za získání «-ehlorhydroxysloučeniny. Například se sloučenina, připravená způsobem podle reakčního stupně C.3, smísí s redukčním činidlem ve směsi s rozpouštědlem. Jakožto typická redukční činidla se uvádějí natriumborhydrid, 1ithiumborhydrid, borhydrid zinečnatý, diisobutylaluminiumhydrid a natrium-bis<2methoxyethoxy)aluminiumhydrid. přičemž výhodným redukčním činidlem je natriumborhydrid'. Jakožto typické rozpouštědlové směsi se uvádí směs protického a aprotického rozpouštědla, například systém tetrahydrofuran/voda. Volba rozpouštědla nemá rozhodující vý32 znám, pokud je rozpouštědlo inertní k probíhající reakci a pokud se v něm reakční složky dostatečně rozpouštějí k proběhnutí reakce. Reakce se zpravidla provádí při teplotě přibližně -10 až přio o bližně 10 C, s výhodou při teplotě přibližně O C.

Při reakci C.5 se <z-chlorhydroxyslouČenina, připravená podle reakce C.4, zpracovává silnou zásadou za získání odpovídajícího epoxidu za o sobě známých podmínek. Například se může nechávat a-chlorhydroxysloučenina reagovat se směsí hydroxidu draselného a ethanolu v organickém rozpouštědle, například v ethylacetátu. Volba rozpouštědla nemá rozhodující význam, pokud je rozpouštědlo inertní k probíhající reakci a pokud se v něm reakční složky dostatečně rozpouštějí k proběhnutí reakce. Reakce se zpravidla proo vádí při teplotě přibližně 0 C až při teplotě přibližně zpětného toku rozpouštědla, s výhodou při teplotě místnosti.

Při reakci C.6 se epoxid, připravený podle reakce C.5, nechává reagovat s heterocyklickým reakčním činidlem obecného vzorce

v protickém rozpouštědle při teplotě přibližně 70 C až přibližně o

100 C. Volba rozpouštědla nemá rozhodující význam, pokud je rozpouštědlo inertní k probíhající reakci a pokud se v něm reakční složky dostatečně rozpouštějí k proběhnutí reakce. Typickými rozpouštědly pro tuto reakci jsou alkoholy, s výhodou ethanol. Reako ce se zpravidla provádí při teplotě přibližně 80 C.

Reakce C.7 je standardní reakcí odstraňování chránící skupiny z aminoskupiny a provádí se o sobě známým způsobem k získání odpovídajícího aminu, kterého se může používat pro shora uvedenou reakci podle shora uvedeného reakčního schéma I. Tento amin se může nechávat reagovat bez čištění. avšak s výhodou se nejprve čistí.

Veinrebův anid, používaný jakožto reakční složka v reakcích A.4 a B.3, se připravuje reakcí aminokyseliny se chráněnou aminoskupinou s N-methoxy-N-methy1 aminem v přítomnosti promotoru, činidla vázajícího kyselinu a kopulačního činidla v aprotickém rozpouštědle nebo ve směsi rozpouštědel při teplotě přibližně -25 až 25 C. Jakožto výhodný promotor se pro tuto reakci uvádí HOBT.H2O Výhodnou látkou, vázající terciární alkylaminy, jsou triethylamin a N-methylmorfolin. Jakožto výhodné kopulační činidlo se uvádí ethy1d imethylamí nopropy1karbod i im i dhydroc h1oř i d. Ve i nrebův amid, získaný touto reakcí, se s výhodou izoluje před svým použitím při reakci A.4 a B-3Sloučeniny obecného vzorce IA, kde znamená R¹ skupinu vzorce S-R^la, kde znamená R^la arylovou skupinu nebo cykloalkylovou skupinu s 5 až 7 atomy uhlíku, se připravují za použití Veinrebova amidu obecného vzorce

R¹

N \

CH3

0CH3 klad podle reakce A.4 a B.3. Tento Veinrebův amid se připravuje tak, že se nechává reagovat šeřin s chráněnou aminoskupinou s trifenylfosfinem a diethylazodikarboxylátem (DEAD) v aprotickém rozo pouštědle při teplotě přibližně -80 až 0 C za vzniku odpovídajícího β-laktonu. Tato reakce se zpravidla provádí v etheru, napřiv tetrahydrofuranu při teplotě přibližně -80 až přibližně C. Laktonový kruh se pak otevírá za získání sloučeniny □becného vzorce

t.ak, že se lakt.nn nechává reagovat, se vhodně substituovaným thioaniontem o struktuře -S-R¹ , kde R¹ má význam, definovaný u obecného vzorce I. Thioaniontová sloučenina se s výhodou vytváří reakcí odpovídajícího thiolu se silnou zásadou, jako je například hydrid sodný nebo hydrid draselný. Reakce se zpravidla provádí v aprotickém rozpouštědle při teplotě přibližně 0 až přibližně o

Ca v inertní atmosféře, jako například v prostředí dusíku. Jakožto typická rozpouštědla pro tuto reakci se uvádějí ethery, s výhodou tetrahydrofuran. Žádané amidové reakční činidlo se pak připraví reakcí získané karboxylové kyseliny s N-methoxy-N-methylaminem v přítomnosti promotoru, činidla vázajícího kyselinu a kopulačního činidla v podstatě shora popsaným způsobem.

Heterocykiické reakční složky, používané při reakci C-6, obecného vzorcec

se mohou připravovat o sobě známými způsoby. Například se heterocyklické reakční složky zpravidla připravují z odpovídající aminokyseliny s chráněnou amlnoskuinou aktivací kyselinou s následným zpracováním alkylamlnem. Tato reakce se zpravidla provádí v přítomnosti prostředku, vázajícího kyselinu, jako je například N-methylmorfo1in. Odstraněním skupiny, chránící aminoskupinu, o sobě známými způsoby odstraňování chránících skupin se získají heterocykiické reakční složky, používané při shora uvedené reakci C.8.

Například [3S-<3Rx,4aR*,BaRx]-dekahydroisochinolin-3-N-terc.butoxykarbonylamid se připravuje sledem následujících stupňů za použití <2S)-1,2,3,4-tetrahydro-3-isochinolinkarboxylové kyseliny

1) ochrana aminoskupiny <t-Boc>,

2) aktivace kyselinou/reakce s terč.-butylaminem,

:.i5

3) katalytická hydronenace,

4) odstranění chránící skupiny z aminoskupiny.

Piperazinová reakční činidlo se může připravovat převáděním vhodně substituované pyrazinové sloučeniny na odpovídající piperazinovou sloučeninu v oboru o sobě známými způsoby, například katalytickou hydrogenací. Například se hydrogenace může provádět smícháním pyrazinového reakčního činidla s katalyzátorem v prostředí vodíku v aprotickém rozpouštědle při teplotě přibližně O až přibližně 60 C. Jakožto vhodné katalyzátory se uvádějí například palladium na uhlí, kovová platina a oxid platiny. Výhodným katalyzátorem je oxid platiny. Jakožto typická rozpouštědla pro tuto reakci se uvádějí tetrahydrofuran, dimethy1formamid a směs tetrahydrofuranu a dimethylformamidu.

fltom dusíku na získaném piperazinovém reakčním činidle se může alkylovat o sobě známým způsboem. Například se piperazinové reakční činidlo může nechávat reagovat s halogenalkylem s 1 až 4 atomy uhlíku, nebo s halogenmethylpyridinem, například s methy1jodidem nebo s chlormethy1pyridinem. Výhodnými halogenovými substituenty jsou atom chloru, bromu nebo jodu. Reakce se provádí o

při teplotě přibližně □ až 60 C v inertním rozpouštědle pro obě složky a v přítomnosti činidla vázajícího kyselinu. Jakožto výhodné činidlo vázající kyselinu se uvádí uhličitan draselný. Jakožto typická rozpouštědla se uvádí směs protických a aprotických rozpouštědel, například acetonitrilu a vody. Volba rozpouštědla nemá rozhodující význam, pokud je rozpouštědlo inertní k probíhající reakci a pokud se v něm reakční složky dostatečně rozpouštějí k proběhnutí reakce.

Nebo se alkylováné piperazinové reakční činidlo může připravovat prováděním redukční aminace. Například se piperazinové reakční činidlo, shora připravené, může nechávat reagovat s aldehydem (například s aldehydem karboxylové kyseliny, s ethanalem, s propanalem) nebo s ketonem v přítomnosti redukčního činidla a kyseliny. Reakce se zpravidla provádí v alkoholickém rozpouštědle, jako jsou například methanol, ethanol nebo isopropanol. Jakožto typická redukční činidla se uvádějí příkladně borhydrid sodný, 1 ithiumkyanoborhydrid a natřiumkyanoborhydrid. Výhodným redukčním činidlem je natřiumkyanoborhydrid. Jakožto typické kyseliny se uvádí jakákoliv protická kyselina, jako je například kyselina chlorovodíková, sírová, methansulfonová a octová kyselina, Výhodnou je kyselina octová.

Karboxylové kyseliny, používané jakožto reakční složka při reakci I., se připravují o sobe známým způsobem, pokud nejsou obchodně dostupné. Sloučeniny obecného vzorce IB

(IB) se připravují způsobem podle schéma II. Schéma II

1. karbonyldiimidazol

HOOC^ ^^E*

R—NH u

Λ.

υ

Λ/¹ chlorid bisCtrifeny1fosf injpalladnatý

CO (plyn)

COOCH₃ zásada alkohol u

Λ.

COOCH, hydrolyza '0

Λ

C00H

R^b kde mají Z. R a R° význam, uvedený u obecného vzorce I a kde znamená Ex atom jodu nebo alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až Λ atomy uhlíku v alkylovém podílu.

Když znamená E* atom jodu, provádějí se reakce podle schéma

II postupným sledem reakce 1 až 3. Jakmile je reakce ukončena, může se meziprodukt popřípadě izolovat o sobě známým způsobem. Například se meziprodukt může nechat vykrystalovat a oddělí se filtrací, nebo se může reakční rozpouštědlo odstranit extrakcí, odpařením nebo dekantací. Získaný meziprodukt se může dále popřípadě čistit o sobě známými způsoby, jako jsou krystalizace nebo chromatografie na pevných nosičích, jako jsou silikagel nebo oxid hlinitý, před prováděním dalšího reakčního stupně.

Když znamená Εχ alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, sloučenina, připravená jakožto meziprodukt podle reakce II.1, se nechává reagovat při stupni II.3 přímo; reakce II.2 není v tomto případě nutná.

Reakcí II.1 je standardní kopulační reakce, běžně používaná při synteze peptidů a popsaná při kopulační reakci podle schéma

I. Reakce se provádí jednoduchým smíšením vhodně substituovaného aminopodílu, RR°NH se sloučeninou obecného vzorce

HOOC Ex kde znamená Ex atom jodu nebo alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu a Z má shora uvedený význam u obecného vzorce I. Reakce se provádí v nepolárním aprotickém rozpouštědle nebo ve směsi rozpouštědel v přítomnosti nebo v nepřítomnosti činidla, vázajícího kyselinu za získání odpovídajícího aminu. Jakožto typická rozpouštědla pro tuto reakci se uvádějí tetrahydrofuran a dimethylformamid, především však tetrahydrofuran. Reakce se provádí při teplotě přibližně -30 až přibližně 25 o

C. Amin se obecně používá v ekvimolárních množstvích se zřetelem na karboxylovou kyselinu v přítomnosti ekvimolárního množství až mírního nadbytku kopulačního reakčníhci činidla.

Reakce II.2 je karbony lácí sloučeniny, připravené v reakci

II. 1, což vede k náhradě jodu jakožto substituentu alkoxykarbonyI lovým podílem s 1 až 4 atomy uhlíku, s výhodou methoxy karbony 1 čivou skupinou. Reakce se provádí jednoduchým smícháním jodovaného meziproduktu z reakčního stupně II.2 a katalyzátoru v prostředí oxidu uhelnatého a v alkoholickém rozpouštědle s výhodou v met.hanolu za získání alkylesteru žádané sloučeniny. Tato reakce se provádí v přítomnosti činidla, zázajícího kyselinu, s výhodou v přítomnosti dicyklohexylaminu. Reakce se provádí při teplotě o

přibližně 0 až přibližně 25 C. Výhodným katalyzátorem je bis(trifenylfosfinJchlorid palladnatý.

Reakce II.3 je standardní hydrolyzou alkylesteru za získání odpovídající karboxylové kyseliny, které se používá při reakci I. Reakce se provádí smícháním alkylesteru s hydroxidem lithným ve vhodném rozpouštědle a následným okyselením reakčního roztoku na hodnotu pH 2 až 3, čímž se získá žádaná kyselina karboxylová. Jakožto typická rozpouštědla se uvádějí směs etheru a vody, s výhodou směs tetrahydrofuranu a vody. Reakce se provádí při teplotě o

přibližně O až 35 C. Lithiumhydroxidové reakční činidlo se obecně používá v ekvimolárních množstvích až přibližně v množství dvou molárních nadbytků se zřetelem na esterové reakční činidlo, s výhodou v přibližně jednom molárním nadbytku.

Nebo se sloučenina obecného vzorce 0

R - N l

R°

COO(alkyl) může připravovat tak, že se nechává reagovat aminopodíl sloučeniny obecného vzorde RR°NH se sloučeninou obecného vzorce

O

Rx

C00<alkyl) kde znamená Rx aktivační skupinu jako je například například pen39 taíluorfenol za o sobě znaných podmínek. Reakce se provádí v aprotickém rozpouštědle jako je například t.etrahydroí uran, dimethylf ormamid, nebo methylenchlorid při teplotě přibližně 0 až přibližně 35 C- Výhodným rozpouštědlem je methylenchlorid. Jakožto činidla vázajícího kyselinu se používá triethylaminu nebo N-methylmorfolinu. Výsledná sloučenina se pak může hydrolyzovat. čímž se získá žádaná kyselina karboxylové jakožto reakční činidlo (používané při reakci podle shora uvedeného schéma I).

Aminopodíl. RR°NH, kde znamená R a R° na sobě nezávisle alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, arylalkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, heterocyklalkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, kterého se shora používá, se může připravovat o sobě známým způsobem. Například se methy lamin s chráněnou aminoskupinou se může nechávat reagovat se sloučeninou obecného vzorce R-X (nebo R°-X), kde znamená X atom halogenu, v přítomnosti promotoru, například s jodidem sodným nebo s jodidem draselným a se silnou zásadou, jako je například hydrid sodný nebo n-buty11ithiura, za získání sloučeniny obecného vzorce CH3-N(R^b)-R (nebo CH3-N(R^b)-R°), kde znamená R^b skupinu chránící aminoskupinu a R a R° mají shora uvedený význam. Jakožto typická rozpouštědla se uvádějí dimethylformamid nebo tetrahydrofuran, přičemž výhodným rozpouštědlem je dimethylformamid. Reakce se provádí při teplotě přibližně -10 až přibližně 10 C, s výhoo dou při teplotě přibližně 0 C. Získaný chráněný amin se pak může zbavovat chránící skupiny za použití o sobě známých způsobů . K usnadnění izolace volného aminu se může vytvářet sůl například reakcí aminu, zbaveného chránící skupiny, s kyselinou, například s kyselinou chlorovodíkovou.

Jakožto jiný způsob přípravy aminosloučeniny obecného vzorce RR°NH je reakce sloučeniny s chráněnou aminos loučeninou obecného vzorce R-NH-R^b se vhodně substituovaným alkyljodidem nebo alkylbromidem (R°-J nebo R°-Br), jako jsou -například methyljodid nebo ethylbromid, čímž se získá sloučenina s chráněnou aminoskupinou obecného vzorce RR°NH-R^b. Z t.éto sloučeniny se pak může odstraňovat chránící skupina a může se izolovat pro použití při shora u40 vedených reakcích.

Jak shora uvedeno, zahrnuje vynález všechny asymetrické formy, jednotlivé isomery a jejich směsi. Takové isomery se mohou připravovat ze svých případných prekursorů shora popsaným způsobem nebo štěpením racemických směsí. Štěpení racemických směsí se může provádět v přítomnosti štěpícího činidla, chromatograficky nebo opakovanou krystalizací nebo kombinací těchto způsobů, jak je ostatně v oboru známo. Podrobnosti takových štěpení jsou popsány v publikaci Jacques a kol., Enantiomers, Racemates and Resolutions CEnantiomery, racemáty a štěpeni), John Viley & Sons, 1931.

Sloučeniny, používané jakožto výchozí látky při přípravě sloučenin podle vynálezu, jsou známy a pokud nejsou obchodně dostupné, mohou se připravovat o sobě známými způsoby.

Farmaceuticky vhodné soli podle vynálezu se zpravidla připravují reakcí sloučenin obecného vzorce I s ekvimolárním množstvím nebo s nadbytkem kyseliny nebo zásady. Reakce se zpravidla provádějí v rozpouštědle obou složek, jako jsou například diethy lether nebo benzen v případě přípravy adičních solí s kyselinou a voda nebo alkoholy v případě přípravy adičních solí se zásadou. Soli se zpravidla vysrážejí z roztoku v průběhu jedné hodiny až deseti dnů a mohou se izolovat filtrací nebo jinými o sobě známými způsoby.

Následující ''přípravy a příklady praktického provedení vynález blíže objasňují, nijak jej v§ak neomezují.

V přípravách a v příkladech se používá zkratek pro teplotu tání, pro spektra protonové magnetické resonance, pro elektronová hmotová spektra, pro desorpční hmotová spektra, pro spektra při bombardování rychlými atomy, pro infračervená spektra, pro ultrafialová spektra, pro elementární analýzu, pro vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií a pro chromatografi i v tenké vrstvě j jejich běžném slova smyslu t.t., “MNR, EIMS, MSCFD), 'MSCFAB), IR, UV, analýza HPLC a TLC. Absorpční maxima >ro IR spektra se uvádějí jen pokud mají význam, neuvádějí se těly veškerá pozorovaná maxima.

V případě NMR spekter se používá následujících zkratek s” singlet, d” dublet, dd dublet dubletu, t triplet, g“ kvartet, n multiplet, dm” dublet multipletu a ' br.s , br.d br.t”, br.ro, široký singlet, široký dublet, široký triplet, široký multiplet. J znamená kopulační konstantu v Hertz (Hz). Pokud není jinak uvedeno, vztahují se hodnoty NMR na volnou zásadu předmětné sloučeniny.

Protonová nukleární magnetická resonanční spektra (¹H NMR) se získají na GE QE-300 spektrometru při 300 MHz nebo na spektrometru společnosti Bruker Corp. 270 MHz.Chemické posuny se vyjadřují v delta (6) hodnotách (části na milion, tetramethylsilan). MSCFD) se odečítají na spektrometru Varian-MAT 731 za použití uhlíkových dendritických emiterů. EIMS se získají za použití zařízení CEC 21-110 společnosti Consolidated Electrodynamics Corporation. Spektra MS(EAB) se získají za použití spektrometru VG ZAB-3. IR spektra se získají za použití zařízení Perkin-Elmer 281- UV spektra se získají za použití zařízení Cary 118. Chromatografie v tenké vrstvě (TLC) se provádí za použití si1ikagelových destiček E. Merck. Teploty tání jsou nekorigované.

Příklady provedení vynálezu

Příprava 1

A. N-(terc.-Butyl)-2-methylbenzamid

Do studeného (0 C) roztoku 139,2 g (0,9 mol) o-toluylchloridu ve 1200 ml methylénchloridu při 25 C v prostředí dusíku se pomalu přidá 180,0 g (1,8 mol) triethylaminu a pak po kapkách roztok obsahující 73,14 g (1,0 mol) terč.-butylaminu ve 200 ml methylénchloridu. Výsledná reakční směs se ohřeje na teplotu místnosti a nechává se reagovat po dobu dvou a půl hodiny. Reakční směs se zředí 1800 ml vody. Vzniklá organická a vodná vrstva se oddělí a organická vrstva se promyje postupně 2N roztokem hydroxidu sodného, 1,ON kyselinou chlorovodíkovou a solankou, vysuší se síranem horečnatým, zfiltruje a zkoncentruje se za sníženého

- 42 tlaku, čímž se získá 167,6 a žádaného N-(terč .-buty 1 )-2-met,hy 1 benzamidu jakožto meziproduktu ve forne bílé pevné lát.ky o tepot.ě tání 77 až 78 C ve výtěžku 97 % teorie.

’ H NMR CCPCI3): δ 1,41 Cs, 9H), 2,41 Cs, 3H). 5,54 Cbr.s, 1H) ,

7,13-7,30 Cn, 4H)

IR CCHCI3)·· 3430, 3011, 2971, 2932, 1661, 1510, 1484, 1452,

1393, 1366, 1304, 1216, 876 cm ^_1

MS CFD): m/e 191 CM*), 191 C100)

Analysa pro CizHivNO:

vypočteno: C 75,35 H 8,76 N 7,32 nalezeno C 75,10 H 9,11 N 7,20

B. S-N-terc.-Buty1-2-C3-CN-benzyloxykarbony1)amino-2-oxo-4-feny1buty1)benzam i d

Do roztoku 7,0 g C36,5 mmol) N-Cterc.-buty1)-2-methy1benzamidu, meziproduktu podle přípravy IA, ve 200 ml bezvodého tetrahydrofuranu se přidá injekční stříkačkou 12,1 ml ¢30,3 mmol) N,NN ,N -tetramethylethylendiaminuu CTMEDA). Získaný roztok se o

ochladí na teplotu -73 C a pak 55.9 ml sek.-buty11ithia se přidá po kapkách injekční stříkačkou za udržování teploty reakční směsi o

pod -60 C. Získaný reakční roztok se pak míchá po dobu přibližně jedné hodiny při teplotě -73 C, před přidáním roztoku obsahujícího 5 g <14,6 mmol) CS)-N-methoxy-N-methy1-2-CN-benzyloxykarbony 1)amino-3-fenylpropanamidu v 50 ml bezvodého tetrahydrofuranu kanylou za udržování reakční teploty pod -65 C. Získaná reakční o

směs se ohřeje na teplotu -20 C, přidá se 20 ml nasyceného roztoku chloridu amonného a zředí se 200 ml diethyletheru. Organická a vodná vrstva se oddělí, organická vrstva se promyje postupně vodou, 0.2N hydrogensÍránem sodným a solankou, vysuší se síranem sodným, zfiltruje se a odpaří se k suchu za sníženého tlaku, čímž se získá bezbarvý olej. Tento olej se čistí bleskovou chromatograf i í Cza použití 25 % ethylacetátu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 6.08 g žádaného S-N-terc.-buty12-C3-CN-benzyloxykarbony1)amino-2-oxo- 4-fenylbuty1)benzamidu ve formě bezbarvé pěny ve výtěžku 88 % teorie.

[aId -289,26 Cc 0,12, methanol)

4::

NMR (ODCI3): δ 1,38 (s. 9H). 2,99 (dd,J=15; 6 Hz, 1H),

3.24 (dd, J=15 6 Hz, 1H) , 3,39 Gl, J=18 Hz, 1Π),

4,16 (d, J=18 Hz, 1H), 4,72 Gjd. J=15 6 Hz, 1H).

5,00-5,09 (η, 2H), 9,96 Gl, J=6 Hz, 1H),

5.93 Cbr.s, 1H) , 7,63-7,49 (n, 14H)

IR (CHCI3): 3431, 3027, 3012, 2973, 1713, 1658, 1511, 1454, 1383 1366, 1307, 1231, 1046 cm ^_1

MS (FD): m/e 472 (M*), 213 (100)

Analysa pro C2<?H3 2N2 04^: vypočteno: C 73,70 H 6,82 N 5,93 nalezeno C 73,41 H 6,93 N 5,33

C. t R-(Rx,Sx)]-N-terc.-Buty1-2-(3-(N-benzyloxykarbony 1)amino-2hydroxy-4-fenylbuty1)benzamid

Do roztoku 6,96 g (14,7 mmol) S-N-terc.-buty1-2-(3-(N-benzy1 oxykarbony1 )amino-2-oxo-4-fenylbuty1 )benzamidu, meziproduktu podle přípravy 1B, ve 200 ml absolutního ethanolu se v prostředí dusíku přidá 2,78 g (73,5 mmol) borhydridu sodného. Když je reakce v podstatě ukončena, jak se sleduje chromatografií v tenké vrstvě, zředí se reakční směs 200 ml ethylacetátu a reakce se ukončí přidáním po kapkách 20 ml nasyceného roztoku chloridu amonného. Organická a vodná vrstva se oddělí a organická vrstva se promyje postupně IN kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou, vysuší se síranem sodným, zfiltruje se a odpaří se k suchu za sníženého tlaku. čímž se získá 6,4 g bezbarvého oleje. Tento olej se čistí bleskovou chromatografií (za použití gradientu 2 až 10 % methylenchloridu v ethylacetátu), čímž se získá 5,12 g žádaného [R-(Rx,Sx)l-N-terc.-buty12-(3-<N - benzy 1 oxy karbony 1) amino-2 - hydroxy -4-fenylbutyl) benzam i d jakožto meziproduktu ve výtěžku 74 % teorie.

lalD +10,38 (c 0,10, methanol) ¹H NMR (CDCI3): S 1,40 (s, 9H), 2,79 (dd, J=12; 3 Hz, 1H),

2,90-2,98 (m, 2H), 3,04 (44, J=12; 3 Hz, 1H)

3.70-3,81 (m, 1H), 3,97 (m, 1H), 4,96-5,03 (m,

2H), 5,10 (d, J=9 Hz, 1H), 5,88 (d, J=6 Hz, 1H).

5.93 (s, 1H), 7,13-7.42 (η, 14H)

IR (CUCI3):

3431 , 301

3012

2071

1643 , 1511

1454

1367, 1220, 1023 cn

MS (FD): m/e 475 CM*), 475 (100) Analysa pro C29H3-4N20-4^:vypočteno·· O 73,30 H 7,22 nalezeno : C 73,12 H 7,43

N 5,00 M 5,62

D . [ R-C R*,Sx)]-N-terc.-Buty1-2-(3-ani no-2-hydroxy-4-feny 1buty 1 ) benzamid

Připraví se suspenze, obsahující 41,0 g <120 mmol) [R-CRx,Sx)]N- terč.-buty1-2-C3-CN-benzyloxykarbony 1)amino-2-hydroxo-4-feny1/ buty1)benzamidu, meziproduktu podle přípravy IC a 500 mg 1(3¾ palladia na uhlí ve 150 ml absolutního ethanolu. Tato suspenze se protřepává za tlaku vodíku 414 kPa v třepací aparatuře Parr a 10¾ palladium na uhlí jakožto katalyzátor se odstraní filtrací. Získaný filtrát se odpaří za sníženého tlaku, čímž se získá 31,1 g lehce žluté pěny. [R-CRx,Sx)]-N-terc.-Butyl-2-C3-amino-2-hydroxy—4—feny1buty1)benzamidu se používá bez dalšího čištění. Výtěžek je 96 ¾ teorie.

[ccId -»-34,68 Cc 1,0, methanol) !H NMR CCDCl3)^: δ 1,46 Cs, 9H). 2,71 Cdd, J=13,7: 9,5 Hz, 1H),

2,84 Cdd, J=13,3: 2,51 Hz, 1H), 2,95-3,06 Cm. 2H),

3,23-3,29 Cm, 1H), 3,84-3,90 Cm, 1H), 6,23 Cs,

1H), 7,19-7,37 Cm, 12H)

IR CCHCI3)^: 3440, 3382, 3007, 2970, 2934, 1643, 1516, 1454,

1367, 1213 cm

MS CFD)= m/e 341 CM*), 341 C100)

Příprava 2

A. [3S-C3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx,3 Rx)]-2-[3 -N(Benzyloxykarbony1)amino-2 -hydroxy-4 -fenyl]buty1-NCterc.- butyDdekahydroisochinolin3-karboxamid

Roztok [1R-ClRx,3Sx,1 Sx,4aSx,BaS*)1-l-[C1 -NCbenzyloxykarbony1)amino- 2 -feny 1)ethy1]oxiránu a dekahydroixochinolin-3N-terc.-buty1karboxamidu v absolutním ethanolu se zahříváním udr45 zuje na teplotě Pí.) 1' pře:

noc. Reakční snes se odpaří k suchu za získá zbytek. Tento zbytek ce čistí bleskovou chromatooraf i í (za použití aradient.u 10 až 5i.i % ethvlaacetátu v methylenchloridu). čímž se získá 6,47 g (3S-C3R* ,4<jR*8cíP , 2 S-* , 3 Rx)]-2-[3 -N<benzy1oxykarbony 1)amino-2 - hydroxy- 4 feny1]buty1-NCterč.- buty1)dekahydroisochinolin-3-karboxamidu ve formě bílé pěny ve výtěžku 75 % teorie.

¹H NMR CCDCls ) & 1,29 (3, 911), 1,25-2,05 C	m, 23),	2,20	“ <4- -	35 Cm,
2H), 2,55-2,70 Cm, 113), 2,	35-3,10	Cm,	3H)	, 3,24
C br.s, 13), 3,32 Cbr.s, 1H)	, 3,93	(br.	s ,	13) ,
4,99 Cbr.s, 2H), 5,16-5,13	Cm, 1H),	5,	30	Cbr.s,

1H), 7,05-7,33 Cm, 10H)

IR (CDC1₃>^: 3600-3100 (br.), 3031, 2929, 1714, 1673, 1512, 1455,

1363, 1232, 1199, 1047 cm -¹

ÍIS CFD): m/e 536 (M-H), 1063 (100)

B. 13S-C3Rx,4aR*,3aR*,2 S*,3 Rx)]-2-[3 -Amino-2 -hydroxy-4 -feny 1 1 butyldekahydroisochinolin-3-N-terc.-butylkarboxamid

Rychle míchaná suspenze 6,37 g <11,91 mmol) [3S-C3R*,4aRx8aR*,2 Sx,3 Rx)]-2- [3 -NCbenzy1oxykarbony 1)amino-2 -hydroxy-4 feny 11 buty1-NCterc--butyl)dekahydroixochinolin-3-karboxamidu, memeziprodukt podle přípravy 2A, a 1,2 g 10^ palladia na uhlí ve 200 ml absolutního ethanolu se zpracovávají vodíkem v prostředí dusíku. Po přibližně 48 hodinách se reakční směs zfiltruje přes celit a získaný filtrát se odpaří k suchu za sníženého tlaku, čímž se získá 5,09 g [3S-C3R*,4aRx,8aRx,2 S*,3 R*)]-2-[3 - amino2 -hydroxy-4 -fenyl]butyldekahydroisochinolin-3-N-terc.-butylkarboxamidu. Tohoto meziproduktu se používá bez dalšího čištění.

NMR (CDCI3)· S 1.33 <s, 9H), 1,40-1,95 <m. Cm, 2H), 2,59-2.75 Cm, 3H), 2	10H), 2,25-2,48 ,80-3,40 Cm, 7H). 1H), 7,18-7,35
	3,75-3.90 Cm. 1H), Cm, 5H)	6,19 Cbr.s,
IR	CCDCI3): 3600-3100 (br.), 2929,	2365, 1671,	1515, 1455,
	1367, 1245, 1047 cm ~^l
MS	CFD): m/e 402 CM*, 100)

Příprava 3

2R-N ( Penzy i oxy karbony 1 )ara i no-3-naf t-2-y 1 th i opropanoová kyselina

Do roztoku 1,23 g <3,00 mmol) naftalen-2-thiolu ve 30 ml tetrahydrofuranu se pomalu přidá 1,77 g (3,16 mmol) 60¾ hydridu sodného v prostředí dusíku. Míchá se přibližně po dobu 15 minut a pomalu se přidá NChenzyloxykarbony 1 )serin-&-lřakton ve 20 ml tetrahydrofuranu. Reakční směs se nechává reagovat při teplotě místnoti po dobu přibližně jedné hodiny a zkoncentruje se za sníženého tlaku za získání zbytku. Tento zbytek se rozpustí v ethylacetátu a promyje se 0,5N hydrogensÍránem sodným a nasycenou solankou, organická vrstva se vysuší síranem sodným, zfiltruje se a odpaří se k suchu za sníženého tlaku, čímž se získá bezbarvý olej. Tento olej se čistí bleskovou chromatografií, čímž se získá 2,08 g 2R-N(benzyloxykarbony1)amino-3-naft-2-ylthiopropanoová kyseliny ve formě bledě žluté pevné látky ve výtěžku 63 % teorie. [alD -55,72 (c 1,0, methanol) *H NMR <CDC1₃)^; S 3,42-3,61 (br.m, 2H), 5,53-5,76 (br.s, 1H),

4,35-5,08 (br.m, 2H), 5,54-5,76 (br.s, 1H) ,

7,06-7,97 (m, 12H)

IR (KBr): 3348, 3043, 1746, 1715. 1674, 1560, 1550, 1269,

1200, 1060 cm -¹

MS (FD)'- m/e 381 (M^-*-), 381 (100)

Analysa pro C20H19NQ4S:

vypočteno: C 66,12 H 5,02 N 3,67 nalezeno = C 66,22 H 5,04 N 3,86

B. 3R-Benzy1-2-aza-3-(naft-2-ylthiomethy1)-4-oxo-5-diazopentanoát

Do studeného (-30 C) roztoku 15,38 g (40,3 mmol) 2R-N(benzyloxykarbonyl)amino-3-naft-2-ylthiopropanoové kyseliny, meziproduktu podle přípravy 3A, ve 230 ml ethylacetátu se v prostředí dusíku pomalu přidá injekční stříkačkou 5,62 ml (40,3 mmol) triethylaminuu. Do získaného roztoku se vnese injekční stříkačkou 7,84 ml (60,5 mmol) isobuty1chlorforraátu. V oddělené baňce se 10

- ·\7 ; NCnethyl )-N-C nitro)-NCní ti'oso)guanidi nu pečlivě přidá do dvou/r ;í.vo směsi 170 al diet.hy b-thorii u ’?0 ní 5N roztoku hydroxi Ineho, přičemž dojde k silnému vývoji plynu. Když je tato rea v podstatě ukončena, organická vrstva se slije od vodné vrst klo hytlroxidu sodného a vysuší se. Tot.o vytváření diazoraethanu a >řidávání se opakuje za použití stejných množství diethyletheru a rydroxidu sodného a 30 g HCmethy1)-N-Cnitro)-NCnitroso)guanidinu. lískané diazomethanové reakční činidlo se pak přidá do směsného inhydridového roztoku. shora připraveného, a reakční směs se lechává reagovat za chladu (-30 0) do dobu přibližně 20 minut.

Cdyž je reakce v podstatě ukončena, jak se sleduje chromatografi i 7 tenké vrstvě, nechává se roztokem probublávat, dusík za použití jžehnuté Pasteurovy pipety k odstranění nadbytku diazomethanu a jak se roztok zkoncentruje za sníženého tlaku, čímž se získá zbytek. Tento zbytek se čistí bleskovou chromatografií (za použití 10 % ethylacetátu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 13,62 g 3R-benzy1-2-aza-3-(naft-2-ylthiomethy1)-4jxo-5-diazopentanoátu ve formě žlutého oleje ve výtěžku 83 % teorie.

*Η NMR CCDC13): 6 3,32-3,46 Cm, 2H), 4,40-4.67 Cm, 1H).

5,00-5,09 Cm, 2H) , 5,44 Cs, 1H),

5,76 Cd, J=7,8 Hz, 1H), 7,25-7,86 Cm, 12H)

Z. 3R-Benzyl-2-aza-3-Cnaft-2-ylthiomethy1)-4-oxo-5-chlorpentanoát Dva rázy Cpřibližně dvousekundové) bezvodé kyseliny chlorovodíkové Cplynné) se vedou studeným C-20 C) roztokem 13,62 g

C33.59 mmol) 3R-benzyl-2-aza-3-Cnaft-2-ylthiomethy1)-4-oxo-5-diazopentanoátu, meziproduktu podle přípravy 3B, ve 230 ml diethylatheru, čímž dojde k vývoji plynu. Tento proces se opakuje, přičemž se dbá toho, aby se nepřidal nadbytek kyseliny chlorovodíkové. Když je reakce v podstatě ukončena, jak se sleduje chromatografií v tenké vrstvě, zkoncentruje se roztok za sníženého tlaku, čímž se získá zbytek. Tento zbytek se čistí bleskovou chromatoirafi i (za použití 10 ť ethylacetátu v methylenchloridu jakožto alučního činidla), čímž se získá 12.05 g 3R-benzy1-2-aza-3-Cnaftč-y lthiomethy l )-4-oxo-5-ch lorpentanoát.u ve formě světle t.říslově

zabarvené látky	ve výtěžku 87 %	teorie.
^TH HMR (CDOI3):	-S 3,41 (dd, J	= 12: 6 Hz. 1H), 3	1 C“ 1 . . t . '·	<d«l, ,1 = 12^:
	6 Hz, 1H) 4,18	(AB .4, J=41,9 Hz.	J=15	,9 Hz, 2H),
	4,77 (dd, J=9	2 Hz. 1H), 5,04	(AB q	, J=12, Hz,
[<z1d -30,00° (c	J=10,4 Hz. 2H), (komplex. 12H) 1,0, methanol)	5,59 (d, J=7 Hz,	1H) ,	7,24-7,85
IR (CHCI3): 34: cm	26, 3031, 3012, -1	1717, 1502, 1340,	1230,	1223, 1045

MS (FD): m/e 413 (M⁺), 413 (100)

Analysa pro C29H20NO3SCI:

vypočteno'- O 63,34 H 4,37 N 3,33 nalezeno : C 64,12 H 4,95 N 3,54

D. (3R-(3R*,4Sx)]Benzy1-2-aza-3-(naft-2-y1thiomethy1)-4-hydroxy5-chlorpentanoát

Do studeného (0 C) roztoku 530 mg (1,28 mmol) 3R-benzyl-2-aza-3-(naft-2-ylthiomethy1)-4-oxo-5- chlorpentanoátu, meziproduktu podle přípravy 3C, v 10 ml tetrahydrofuranu a 1 ml vody se přidá 73 mg (1,92 mmol) borhydridu sodného. Když je reakce v podstatě ukončena, jak se sleduje chromatografií v tenké vrstvě, upraví se hodnota pH reakční směsi na 3 přidáním 10 ml vodného nasyceného roztoku chloridu amonného a 500 μΐ 5N kyseliny chlorovodíkové. Získaný roztok se extrahuje dvakrát methylenchloridem a spojené organické vrstvy se promyjí vodou, vysuší se síranem sodným, zfiltrují se a odpaří se k suchu za sníženého tlaku, čímž se získá zbytek. Tento zbytek se čistí radiální chromatografií (za použití methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 212 mg [3R-(3Rx,4SOlbenzyl-2-aza-3-(naft-2-ylthiomethyl)-4-hydroxy-5-chlorpentanoátu ve formě tříslově zbarvené pevné látky ve výtěžku 40 %£ teorie¹H NMR (CDCI3): S 3,40 (s, 2H), 3,61-3,71 (m, 2H), 3,97-3,99 (m,

2H), 4,99 (s, 2H), 5,16 (br.s, 1H), 7.21-7,33 (komplex, 12H)

MS (FD): m/e 415 (M*), 415 (100) [<x]d -47,67 (c 0,36, methanol)

IR (CHCI3): 3630, 3412, 3011, 1720. 1902, 1236

Ar.a 1 y 3a pr o C> > H> > NO3 01 '3 ·.

63,53 li 5,32: N 3.3?

1044 cn vypočteno - !

nalezeno - 1

3.64

E. [ 3R-< 3R* , 4Sx ) ] Benzy 1 -2-aza-3-oxirany 1 -4-nať t.-2-y 1 thiobutanoát

Roztok 31 mg <0,55 mmol) hydroxidu draselného v 1 ml ethanolu se přidá do roztoku 190 mg <0,46 mmol) [3R-(3Rx,4S*)]benzy1-2aza-3-(naf t-2-y1thiomethy1)-4-hydroxy-5-ch1orpentanoátu, meziproduktu podle přípravy 3D, v 6 ml systému 1 2 ethanol/ethylacetát. Když je reakce v podstatě ukončena, jak se sleduje chronato graf ií v tenké vrstvě, vlije se reakční směs do směsi vody a methylenchloridu. Získané vrstvy se oddělí a organická vrstva se promyje vodou, vysuší se síranem sodným, zfiltruje se a zkoncenbruje se za sníženého tlaku, čímž se získá zbytek. Tento zbytek ;e čistí radiální chromatografií (za použití 10 % ethylacetátu j methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 172 ig [3R-(3Rx,4S*)]Benzyl-2-aza-3-oxirany1-4-naft-2-ylthiobutanoátu je formě světle tříslově zbarvené pevné látky ve výtěžku 99 % teorie.

H NMR CCDCI3): 5 2,76 (br.s, 2H), 3,01 (br.s, 1H), 3,31 Cd, J=5

Hz, 2H), 3.77 (br.s, 1H). 5,05 Cs, 2H), 5,22 (d, J=6 Hz, 1H), 7,25-7,85 (komplex, 12H)

ÍS (FD): m/e 379 CM*), 379 (100) <x1d -125,42 (c 0,59, methanol)

R <CHCl3>^: 3640, 3022, 2976, 1720, 1502, 1235, 1045 cm nalysá pro C22H21NO3S:

ypočteno: 0 69,63 H 5.58 N 3,69 alezeno - C 69,41 H 5,53 N 3,64

C3R-(3Rx,4Rx,3 S*,4a S*,8a S*)]Benzy1-2-[aza-3-naft-2-y1thio ethy1)-4-hydroxy-5-(3 -Cl-NCterč.-buty1)amino-1-oxomethy1) ekahydroisochinolin-2 -y 1)]pentanoát

Připraví se roztok obsahující 165 mg (0,40 mmol) [3R-(3Rx3χ)]Benzy 1-2-aza-3-oxirany1-4-naft-2-ylthiobutanoátu meziproduk1 podle přípravy 3E, a 94 mg (0,43 mmol) 3 -<1-N(terč.-buty1)ani 50 vypočteno- C no-l-oxomethy 1 )dekahydro-(2H) isochinol inu v 5 ra 1 ethanolu. Získaná reakční snes se nechává reagovat po dobu přibližně 19 hodin při teplotě přibližné 00 ť. Roztok se ochladí na teplotu místnosti a zkoncentruje se za sníženého tlaku, čímž se získá zbytek. Tento zbytek se čistí radiální chromatografii (za použití 10 % ethylacetátu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 103 mg [3R-C3Rx,4Rx,3'Sx,4a'Sx,3aSx)]benzyl-2-[aza-3naft-2-ylthiomethyi )-4-hydroxy-5-C3 -Cl - NCterc. -buty 1 )amino-1·· oxomethy1)dekahydroisochinolin-2 -yl)]pentanoátu ve formě bílé pěny ve výtěžku 42 % teorie.

¹H NMR (CDCl3)= S 1,10-1,73 (m, 20H), 2,13-2,31 (η, 2H), 2,442,53 Cm, ÍH), 2,56-2,63 (m, ÍH), 2,36-2,97 (ra, ÍH), 3,52 Cbr.s. 2H), 4,02 (br.s, 2H), 4,93 Cs,

2H), 5,65 Cs, ÍH), 5,94 Cs, ÍH), 7,25-7,33 Ckomplex, 13H)

MS CFD): m/e 629 CM*), 133 C100) [«Id -92,45 Cc 1,06, methanol)

IR CCHC1₃)^: 3429, 3010, 2929, 1713, 1670, 1514, 1455, 1047 cm Analysa pro C35H47N3O4S:

69.93 H 7,67

6,30

6,53 nalezeno

C 69,36

G. [2R-C2R*,3R*,3 S*,4a Sx,8a S*)]-N-Cterc.-Butyl)-2 -t2-hydroxy3-amino-4-(naft-2-ylthio)]buty1)-dekahydroisochinolin-3 -karboxamid

Připraví se roztok obsahující 50 mg CO.081 mmol) [3R-C3Rx4Rx,3 Sx,4a Sx,8a Sx)]benzy1-2-[aza-3-naft-2-ylthiomethy1)-4-hydroxy-5-C3 -Cl- NCterc.-buty1>amino-1“-oxomethy1)dekahydroixochinolin-2 -y 1)]pentanoátu, meziproduktu podle přípravy 3F, a 1 ml 33% vodného roztoku kyseliny bromovodíkové v kyselině octovéZískaná reakční směs se nechává reagovat po dobu přibližně jedné hodiny při teplotě místnosti a zkoncentruje se za sníženého tlaku, čímž se získá zbytek. Tento zbytek se suspenduje v toluenu a zkoncentruje se za sníženého tlaku, čímž se získá 61 mg [2R-(2Rx~ 3Rx,3 Sx,4a Sx,3a Sx)]-N-Cterč.-buty1)-2 -[2-hydroxy-3-amino-4(naf t-2-y lthio)]butyl)-dekahydroisochino 1in-3 -karboxam i du, kte51 rého se dále používá Lez čištění. Ml NMR ťtŠDCl ; ) ^: 3 1,14 < s . 1H) , .17-2,07 <kornel , 66-2.37 (n. 2H ) 3,75 Cd, J=12 Hz, 4,36-4,47 Cm, 1H)

3.21-3,25 Cm 1H), 3,35 Cd,

6,73 Cs, II!) ,

2H) ,

J=6 Hz 7,30

1H) , , 90

C komplex, 711)

MS CFD): τι/e 483 CM⁺), 433 C100)

Příprava 4

A . 2R-2-NCBenzy loxy karbony 1 ) ami no-3-fenylthiopropanoové kysel i na 2R-2-NCBenzyloxykarbony1)amino-3-fenylthiopropanoové kysel i na se připravuje v podstatě způsobem podrobně popsaným v přípravě

3A za použití 13,1 ml C127 mmol) thiofenolu, 4,6 g C117 mmol) 60% roztoku hydridu sodného a 25,6 g <116 mmol) CL)-NCbenzyloxykarbony 1) ser i n-ři- laktonu ve 450 ml tetrahydrof uranu za získání zbytku. Tento zbytek se čistí bleskovou chromatografií Cza použití gradientu 0 až 2 % kyseliny octové v systému 4 : 1 methylenchlorid/ethylacetát, čímž se získá 27,9 g 2R-2-NCbenzyloxykarbonyl)amino3-fenylthiopropanoové kyseliny ve formě bílé pevné látky ve výtěžku 72 % teorie.

¹H NMR CCDCI3): S 7,55-7,18 Cm, 10H) , 5,55 Cd, J=7 Hz, 1H), 5,08

Cs, 2H), 4,73-4.60 Cm. 1H), 3,55-3,30 Cm, 2H)

IR CKBr): 3304, 3035. 1687, 1532. 736 cm -¹

MS CFD): m/e 332, 288, 271, 181

Analysa pro C17H17NO4S:

vypočteno: C 61,61 H 5,17 N 4,23 nalezeno - C 61,69 H 5,22 N 4,47

B. 3 R-Benzy 1-2-aza-3-f eny1th i omethy1-4-oxo-5-d i azopentanoát

3R-Benzy1-2-aza-3-fenylthiomethy1-4-oxo-5-diazopentanoat se připravuje v podstatě způsobem podrobně popsaným v přípravě 3B za použití 12,1 g C37 mmol) 2R-2-NCbenzyloxykarbony1)amino-3-feny1thiopropanoové kyseliny, meziproduktu podle přípravy 4A, 5,09 ml '37 mmol) triethylaminu, 7,13 ml <55.0 mmol) isobutylehlorforraátu i 146 mmol diazomet.hanového roztoku, čímž se lethanový roztok se připravuje za použití získá zbytek. Diazo100 ml diethy1etheru,

150 ml 5N roztoku hydroxidu sodného a 21 g C 146 mmol) NCmethyl).1-C n i tro ) - M C n i troso )auan i d i nu způsobem popsaným v odstavci IB. zbytek se čistí bleskovou chromatografií (za použití gradientu O az 5 % ethylacetátu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), cínz se získá 3R-benzy 1 -2-aza-3-feny 1 thiomethy 1 -4-oxo-5-diazrjpentanoátu ve formě žlutého oleje ve výtěžku 73 teorie.

¹H NMR CCDCI3): S 7,50-7,19 Cm, 10H), 5,62 Cd, J=7 Hz, IH), 5,47

Cbr-s, IH), 5,11 Cs, 2H), 4,50-4,32 Cm, IH),

3,33 Cd, J=6 Hz, IH)

IR CKBr): 3012, 2115, 1720. 1501. 1367, 1223 cm

MS CFD): m/e 356, 323, 242

C. 3R-Benzy1-2-aza-3-fenylthiomethy1-4-oxo-5-chlorpentanoát

3R-Benzy1-2-aza-3-feny1thiomethy1-4-oxo-5-chiorpentanoát se připravuje v podstatě způsoben podrobně popsaným v přípravě 3C za použití 22,3 g C63 mmol) 3R-benzyl-2-aza-3-fenylthiomethyl-4-αxo-5-diazopentanoátu, meziproduktu podle přípravy 4B, a malého množství kyseliny chlorovodíkové Cplyn) ve 400 ml diethyletheru za získání 21 g 3R-benzy1-2-aza-3-fenylthiomethyl-4-oxo-5-chlorpentanoátu ve formě bílé pevné látky. Této pevné látky se používá bez dalšího čištění.

*H NMR CCDCI3)- 6 7,50-7,15 Cm, 10H), 5,56 Cdd, J=2 6,7Hz, IH),

5,11 Cs, 2H), 4.78-4,67 Cm. IH). 4.20 Cd, J=15,9

Hz, IH), 4,12 Cd. J=15,9 Hz. IH). 3.48-3,23 Cm, 2H)

IR CKBr): 3349. 1732. 1684. 1515, 1266 cm ^_1

MS CFD): m/e 363 CM*)

Analysa pro CisHieNO3SCI vypočteno: C 59,42 H 4,99 N 3,85 nalezeno : C 59,57 H 5,09 N 4.13

D. (3R-C3Rx,4Sx)1-Benzy1-2-aza-3-fenylthiomethy1-4-hydroxy-5ch1orpentanoát [3R-C 3Rx,4Sx)1 -Benzy1-2-aza-3-feny11h i omethy1-4-hydroxy-5zhlorpentanoát se připravuje v podstatě způsobem podrobně popsaným v přípravě 3D za použití 21 g C53 mmol) 3R-benzyl-2-aza-3-feny1thiomethy1-4-oxo-5-chlorpentanoátu, meziproduktu podle přípravy 40, 2,4 g C 63 nnal) borhydridu sodného ve 3f:n ni tetrahydrof lirami za získání zbytku. Tento zbytek se čistí bleskovou rhrúnato•irafií (za použití aradient.u 0 až 2 ť methanolu v methy 1 enoh 1 oridu jakožto elučniho činidla), další bleskovou chromatografií (za použití gradientu 0 až 2 % ethylacetátu v chloroformu jakožto elučniho činidla) a prekrystalováním z methylenchloridu při teplotě -78 C, čímž se získá 8,3 g [3R-C3Rx,4Sx)]-benzy1-2-aza-3f eny lthiomet.hy 1 -4-hydroxy-5-ch lorpentanoátu ve výtěžku 39 % teorie.

^lH NMR CCDC13): 6 7,47-7,19 Cm, 10H), 5,22-5,03 Cm, 1H), 5,09

Cs, 2H), 4,01-3,89 Cm, 2H), 3,75-3,58 Cm, 2H),

3,32 Cd, J=4 Hz, 2H).

IR CKBr) 3321, 2951, 1688, 1542, 1246, 738 cm ~ⁱ

MS CFD): m/e 366 CM⁺), 119

Analysa pro CieH20NO3SCI:

vypočteno: C 59,09 H 5,51 N 3,83 nalezeno : C 59,03 H 5,50 N 3,96

- [ 3R-C3Rx,4Sx)1-Benzy1-2-aza-3-oxirany1-4-feny1thíobutanoát [3R-C3R*,4S*)]-Benzy1-2-aza-3-oxirany1-4-fenylthiobutanoát se jíiprávuje v podstatě způsobem podrobně popsaným v přípravě 3E za joužití 8,3 g C23 mmol) [3R-C3R*,4Sx)l-benzyl-2-aza-3-fenylthioíethyl-4-hydroxy-5-chlorpentanoátu, meziproduktu podle přípravy ID, 1,4 g C25 mmol) hydroxidu draselného ve 400 ml ethanolu za :ískání zbytku. Tento zbytek se čistí bleskovou chromatografií za použití gradientu 0 až 2 % ethylacetátu v methylenchloridu, ímž se získá 6,4 g [3R-C3Rx,4S*)]-benzyl-2-aza-3-oxirany1-4-fey1thiobutanoátu ve formě bílé pevné látky ve výtěžku 85 % teorie H NMR CCDCI3): 5 7.45-7.15 Cm, 10H), 5,12 Cs, 1H), 5,08 Cs. 2H).

3,77-3,62 Cm, 1H), 3,21 Cd, J=6 Hz, 2H), 2,99

Cm, 1H), 2,77 Cm. 2H).

S CKBr): 3303, 3067, 1694, 1538, 1257, 741 cm -¹5 CFD): m/e 329

H 5,81 N 4,25

H 5,82 N 4,29 aalysa pro C32 H45N3O4S: /počteno: C 65,63 11 ezeno C 6.5,48

Γ- [3R-C?Rx . 4R« .3 5* methy1)-4-hydroxy-5-C3 dekahydroi soch i no 1 in-2 [3R-C3Rx,4Rx,3

4a bx.vá S*)IBenzyl-2-faza-3-řenylthio-(r-N(t,erc.-butyl ) an i no-1 -oxonet.hy 1 )-y1)]penfanoát

Sx,4a Sx.Ga 5* ) 3 Benzy 1 -2-[ aza-3-f eny 1 th i οποί, hy 1 ) -4 -hydroxy-5 - C 3 -C1-NC terč . -buty 1 )ara i no -1 - oxonet.hy 1 )dekahydroisochinolin-2 -y1)3pentanoát se připravuje v podstatě způsoben podrobně popsaným v přípravě 3F za použití 6,3 g <19 mmol) [3R-<3Rx,4Sx)3-benzy1-2-aza-3-oxi raný 1-4-f eny1th i obutanoátu, meziproduktu podle přípravy 4E, 5,0 g <21 mmol) 3-[N-Cterc--buty1)aminokarbony13dekahydro-C2H)isochino1 inu v 300 ml ethanolu za získání zbytku. Tento zbytek se čistí bleskovou chromatografií (za použití gradientu 0 až 20 % ethylacetátu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 4,3 g [3R-C3Rx,4Rx,3 Sx4a Sx.Ga Sx)3 benzy 1-2-[aza-3- feny lthiomethy 1 ) -4-hydroxy-5-C3 <1-N<terč.-buty1)ami no-1-oxomethy1)dekahydroi sochino1in-2 y1)3pentanoátu ve formě bílé pevné látky ve výtěžku 40 % teorie ¹H NMR CCDCI3): S 7.41-7,11 <m, 10H) , 5,90 <d,J=5 Hz, 1H),

5,64 Cs. 1H), 5,05 <d, J=4 Hz, 2H), 4,08-3,90

Cm, 2H), 3,40 <d, J=6 Hz, 2H), 3,05 <s, 1H),

2,95-2,85 Cm. 1H), 2,62-2,45 <m, 2H). 2,28-2,15 Cm, 2H), 2,05-1,88 <m, 2H), 1,73-1,10 Cm, 7H), 1,29 Cs, 9H)

IR CKBr): 3330, 2925, 2862, 1706, 1661. 1520, 1454, 1246,

738, 694 cm ^-1

ÍS <FD): m/e 568 CM+), 467 lna lysá pro C32H45N3O4S:

vypočteno: C 67,69 H 7,99 N 7,40 mlezeno = C 67,64 H 8,20 N 7,45

j. [2R-C2Rx,3Rx,3 S*,4a Sx,8a Sx)3-N-Cterč.-Buty1)-2 -[2-hydroxy:-amino-4-Cfenylthio)3buty1)-dekahydroisochinolin-3 -karboxamid [2R-C2Rx,3Rx,3 Sx,4a Sx.Ga Sx)3-N-Cterc--Buty1)-2 -[2-hydro:y-3-ami no-4 - ( feny lthici) 3 buty 1 ) -dekahydro i soch i no 1 in-3 -karboxaid se připravuje v podstatě způsobem podrobně popsaným v přípraě 30 za použití 1 g Cl,3 mmol) [3R-C3Rx,4Rx,3 Sx,4a Sx.Ga Sx)3 benzyl-2-[aza-3-feny1thiomethy1j-4-hydroxy-5-C3 -C1-N(bere.- tuby 1 j am i no- 1 ” -oxomethy 1 j dekahydro i soc hi.no li π-2 -y 1 j 1 pen t anoá bu, meziproduktu podle přípravy 4F a 40 ml 30% kyseliny bronovodi kove v kyselině octové s bou výjimkou, že se surový produkt rozpustí ve 30 nl methanolu. Do získaného roztoku se přidá 2 ml diethylaminu a 2 ml koncentrovaného roztoku hydroxidu amonného a pak se směs zkoncentruje za sníženého tlaku, čímž se získá zbytek. Tento zbytek se rozpustí ve vodě a v ethylacetátu. Získané vrstvy se oddělí a organická vrstva se promyje postupně vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou, vysuší se síranem sodným, zfiltruje se a odpaří se za sníženého tlaku, čímž se získá zbytek. Tento zbytek se čistí bleskovou chromatográfií (za použití gradientu O až 10 % methanolu v chloroformu, obsahujícím 3 kapky hydroxidu amonného na 1000 ml chloroformuj, čímž se získá 0,54 g [2R-(2Rx,3Rx,3 S*,4a Sx,3a Sxj]-N-Cterč.-Buty1j-2 -[2-hydroxy-3-amino-4-(fenylthioj]butylj-dekahydroisochinolin-3 -karboxamidu ve formě bílé pěny ve výt-ěžku 71 % teorie.

NMR (CDCl3j= 5 7,41-7,16 (m, 5Hj, 6,07 Cs, lHj. 3,73-3,70

Cm, 1Hj, 3,45-3.33 Cm, lHj, 3,03-2,34 Cm, 3Hj,

2,33-2,20 Cm, 3Hj, 2,00-1,05 Cm. 12Hj, 1.33 Cs,

9Hj

IR CKBrj: 2924, 2362, 1660, 1517, 1454, 1439, 737, 691 cm -¹

MS CFDj: m/e 434 CM+j, 293

Příprava 5

A. Pyrazin-2-N-Cterc.-buty1jkarboxamid

Do suspenze 50 g (0,403 molj pyrazin-2-karboxylové kyseliny v 600 ml tetráhydrof uranu a 100 ml dimethy Iformamidu se přidá 65,9 g (0,407 molj karbonyldiimidazolu. Získaná reakční směs se nechává reagovat při teplotě 50 C tak dlouho, až ustane vývoj plynu. Když se reakční směs ochladí, přidá se pomalu 73.5 g (1,00 molj terč.-butylaminu. Reakční směs se nechává reagovat po dobu přibližně 30 minut, zkoncentruje se za sníženého tlaku, zbytek se rozpustí v 500 ml methylénchloridu a pak se promyje postupně vodou, kyselinou chlorovodíkovou (hodnota pH 2j, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu ve vodě, 1M hydroxidem draselným a solankou, vysusí se síranem sodným a zkoncentruje se, čímž se získá 63,5 g pyruzin-2-N-Cterč.-buty1jkarboxamidu ve formě bílé pevné látky ve výtěžku 95 t teorie.

NMR (CDClj): δ 1,51 (s, 9H), 7,73 (br.s, 1H) ,

3,49 Cm, 1H), 3,72 Cm. 1H) , 9,33 Cs, 1H)

B- < + /-)-Piperazin-2-N-Cterč.-buty1)karboxamid

Směs 63,5 g CO,332 mol) pyrazin-2-N-Cterč.-buty1)karboxaraidu, meziproduktu podle přípravy 5A, 70 g (0,308 mol) oxidu platiny ve 186 ml ethanolu se zahříváním udržuje přes noc na teploe tě 40 C v prostředí vodíku za tlaku 414 kPa. Získaný surový produkt se odfiltruje a filtrát se zkoncentruje, čímž se získá 65 g (-·-/-)-p iperazi n-2-N-(terč.-buty 1) karboxam i du bílé pevné látky ve výtěžku 95 % teorie.

MS (FD)'· _n/_e 135 <M+, 100)

C. (+/-)-Pyrid-3 -ylmethyl)piperazin-2-N-(terc.-huty1)karboxamid

Do roztoku 5,0 g (0,027 mol) <+/-)-piperazin-2-N-(terč.-buty 1)karboxamidu, meziproduktu podle přípravy 5B, ve 160 ml směsi : 1 vody a acetonitrilu se přidá 18,65 g <0,135 mol) uhličitanu draselného- Získaná směs se intenzivně míchá za přidávání 4,43 g (0,027 mol) 3-chlormethylpyridinhydrochloridu a pak se nechává pomalu reagovat přes noc. Získaná reakční směs se zkoncentruje za sníženého tlaku, suspenduje se v roztoku 20 % isopropanolu v chloroformu a promyje se postupně vodou a solankou, vysuší se síranem sodným, zfiltruje se a zkoncentruje se za získání zbytku. Tento zbytek se Čistí bleskovou chromatografií (za použití 5 % methanolu v methylénchloridu, obsahujícího 1 % hydroxidu amonného jakožto elučního činidla), čímž se získá 1,34 g <+/-)-pyrid-3 -ylmethy1)piperazin-2-N-(terc.-buty1) karboxamidu ve formě čirého žlutého oleje ve výtěžku 13 % teorie. 1H NMR (CDCI3 )'- S 1,10 (s, 9H), 1,39-2.01 Cm, 2H), 2,35 Cm, 1H),

2,57-2,74 (m, 4H), 3,09 (m. 1H) , 3,27 (s, 2H),

6,71 (br.s, 1H), 7.03 (m, 1H), 7,44 (m. 1H) .

8,26 (m, 2H)

IR (KBr): 3691, 3611, 3366, 2974, 1666, 1602. 1521, 1479, 1456,

1427, 1393, 1366

1324

1139

1947, 339 <.·η ( 2D (3^Η

193

Ο . [2S-(2R*,2 Sx,3 R* )1-1-12 -Hydroxy-3 -(N-benzyloxykarbony 1)a nino-4 -feny 1buty 1J-4-(pyrid-3”-ylnethy1)piperazin-2-N-(terč.-buty 1)karboxam i d

Roztok, obsahující 0,377 g (1,27 mmol) [1S-(1R*,1 R*)]-l[1 -N-benzyloxykarbony 1)amino- 2 - feny1)ethy1]oxiránu a 9,359 g (1,27 mmol) (*/-)-pyrid-3 ylmethy1)piperazin- 2-N-(terc.- butyl)karboxamidu, meziproduktu podle přípravy 5C, ve 12 ml isopropanoo lu se nechává reagovat při teplotě 45 C po dobu přibližně 48 hodin. Reakční směs se ochladí a pak se odpaří za sníženého tlaku, čímž se získá surový produkt. Tento produkt se čistí radiální chromatografií (6 mm destička, za použití gradientu 5 až 10 % isopropanolu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 120 mg isomerů A a 68 mg isomerů B v celkovém výtěžku 26 % teorie. Isomer A

NMR (CDCI3): 61,	33 (s, 9H), 2.26-2,89	(m, 13H). 3,29	(m,	1H) ,
3,45	(s. 2H), 3,79-3,95 (m	, 3H), 4,73 (br	. s,	1H) ,
4,97	(br.s, 2H), 5,20 (m.	1H), 7,14-7,29	(m,	6H) ,
7,57	(m, 1H), 7,82 (br.s.	1H), 8,53 (m.	2H)

IR	(KBr):	3692, 3434,	2970,	2829,	1714,	1661,
		1455, 1427,	1393,	1365,	1231,	1149,
MS	(FD):	m/e 573 (M-,	100)

1604. 1579, 1512, 1029, 909 cm -¹

E . [2S-(2Rx,2 Sx,3 Rx)]-l-[2 -Hydroxy-3 -amino-4 -feny13buty14-(pyrid-3”-ylmethy1)piperazin-2-N-(terc.-butyl)karboxamid

Roztok, obsahující 0,062 g (0,11 mmol) meziproduktu podle příprava 5D (isomer A) se mícbá přibližně 90 minut v 1,5 ml roztoku 30% kyseliny bromovodíkové v kyselině octové. Získaná směs se zkoncentruje, azeotropicky se desiluje třikrát s toluenem, zbytek še rozpustí v methanolu obsahujícím 1 ml vždy diethy1aminu a hydroxidu amonného a odpaří se za sníženého tlaku za 'ískání zbytku. Tento zbytek se čistí radiální chromatografií (2 ím destička, za použití gradientu 15 až 25 % methanolu v methylenchloridu obsahujícím 1 °£ hydroxidu amonného jakožto elučního činidla), čímž se získá 13 nm [2S-<2R*,2 S*,3 R*)]-1-[2 -Hydroxy3 -am i no-4 - f eny 1J buky 1 -4 - C py ri d-3 -y lmethy 1 ) p i peraz in-2-N-C t.erc . buty 1 ) karboxam i du ve formě bílé pevné látky ve výtěžku 23 teorie *H NMR CCDCls): -S 1,33 Cs, 9H), 2,36-3.21 Cm, 15H), 3,47 Cd, 211),

3,75 Cm, 1H), 7,19-7,30 Cm, 6H) , 7,57 Cm, 2H>,

8,52 Cm, 2H)

MS CFD): m/e 440 CM⁺, 100)

Příprava 6

A. [2S-C2Rx,2 S* , 3 S*)]-l-[3 -N-Benzy loxykarbony 1 )amino-2 -hydroxy-4 -feny1thiobuty11-4-Cpyrid-3”-ylmethy1)piperazin-2-N- Cterc.buty1)karboxamid ílsomer B]

Roztok 596 mg Cl,81 mmol) [1S-(1Rx,1 S*)]-l-[l -N-Cbenzyloxy kar bony 1 )amino-2 -f eny lthio)et,hy 1 ] oxiranu a 500 mg Cl, 81 mmol ¢+/-)-pyrid-3 -ylmethy1)piperazin-2-N- Cterc. -buty1)karboxamidu, meziproduktu podle přípravy 50, v 15 ml isopropanolu se zahříváe ním udržuje na teplotě 43 C po dobu přibližně 48 hodin. Reakce se monitoruje za použití chromatograíie v tenké vrstvě Cza použití 10 % isopropanolu v methylenchloridu obsahujícím 1 % hydroxidu amonného, isomer A Rf = 0,7, isomer B Rf = 0,6). Když je reakce v podstatě ukončena, odpaří se směs za sníženého tlaku za získání zbytku. Tento zbytek se čistí radiální chromatografií <6 mm destička, za použití gradientu 5 až 15 % isopropanolu v methylenchloridu obsahujícího 1 % hydroxidu amonného jakožto elučního činidla). čímž se získá 200 mg Cvýtěžek 18 % teorie) isomeru A ve formě lehce tříslově zbarvené pěny a 119 mg Cvýtěžek 11 %) isomeru B ve formě bílé pěny.

Isomer Ά¹H NMR CCDCla): S 1,31 Cs. 9H), 2,25-2.62 Cm, 7H). 2,78-2,95 Cm,

2H), 2,98-3,03 Cm, 1H), 3.10-3,25 Cm, 2H), 3,403,55 Cm, 2H), 3,72-3,85 Cm, 1H), 3,90-4,00 Cm,

1H), 5,05 Cs, 2H), .. 7,01 Cbr.s, 1H), 7,10-7,40

Cm. 11H), 7,62 Cd, J=7,3 Hz, 1H), 8,49 Cs, 2H)

MS CFD): _n/e 606 CM⁺, 100)

Analysa pro	C33 1U3 N5LMS =
vypočteno^:	C 65,42 H	7,15	N 11,56
nalezeno ·	C 65,38 H	7,27	N 11,36
Isomer Eb
¹H NMR (CDC	I3): S 1,33 (s.	9H), 2,	25-2,85 (m.	8H), 3,20-3,32	(m,
	3H), 3,47	(Ξ, 2H),	3,73-3,95	(m, 2H), 5.06	(s,
	2H), 5,30	-5,38 (m.	1H), 7,10	-7,42 (ra, 12H),
	7,55-7,85	(m, 2H),	3,50-8,60	(ra, 2H)
MS (FD): m/e 606 (M) , 497	(100)
HR MS (FAB)	pro C33 H44N5O4S:
vypočteno^:	606,3114
nalezena ^:	606,3141

B. [2S-(2Rx,2 Sx,3 Sx)]-l-[2 -hydroxy-3 -araino-4 -fenylthiobuty 1] 4-<pyrid-3-yImethyl)piperazin-2-N-(terč.-butyl)karboxamid

Roztok 110 mg (0,18 mmol) isomeru B podle přípravy 6A v 5 ml 30¾ kyseliny bromovodíkové v kyselině octové se míchá při teplotě místnosti po dobu přibližně jedné hodiny. Reakční směs se zkoncentruje za sníženého tlaku, čímž se získá zbytek. Tento zbytek se rozpustí ve 4 ml hydroxidu amonného. Získaný roztok se extrahuje čtyřikrát vždy 10 ml podílem 10¾ roztoku isopropanolu v chloroformu. Spojené organické vrstvy se vysuší síranem sodným, zfiltrují se a zkoncentrují se za sníženého tlaku, čímž se získá zbytek. Tento zbytek se čistí radiální chromatografií (2 mm destička. za použití gradientu 10 až 30 ¾ methanolu v methylenchloridu obsahujícího 1 ¾ hydroxidu amonného jakožto elučního činidla), čímž se získá 65 mg (výtěžek 72 ¾ teorie) [2S-(2Rx,2 Sx3 Sx)]- l-[2 -hydroxy-3 -amino-4 -fenylthiobutyl]-4-(pyrid-3-ylmethy1)piperazin-2-N-(terc.-buty1jkarboxamidu ve formě lehce žluté pěny.

¹H NMR (CDCI3): 6 1,25 (s, 9H), 2,25-2,78 (m, 7H), 3,00-3,32 (m,

4H), 3,47 (s, 2H), 3,60-3,75 (m, 1H), 4,18-4,35 (m, 1H), 6,90-7,65 (m, 9H), 8,40-8,60 (m, 2H)

MS (FD): m/e 473 (M*, 100)

Příprava 7

Pentafluor f enylester 3-nethoxykarbonyl-4-methy1benzoátu

Do roztoku 1,0 g <5,15 mmol) 3-methoxykarbony1-4-methy1 benzoové kyseliny a 1,9 g <10,3 mnol) pentafluorfenoiu v 13 ml methyl ench lor i du se přidá 2,0 g <10,30 mmol) EDO. Získaná reakční směs se nechává reagovat po dobu přibližně čtyř hodin a pak se zředí methylenchloridem. Reakční směs se promyje čtyřikrát ÍM roztokem uhličitanu draselného, vysuší se síranem sodným, zfiltruje se a zkoncentruje se za sníženého tlaku, čímž se získá surový zbytek. Tento zbytek se čistí sloupcovou chromatografií (za použití 50 % hexanu v ethylacetátu jakožto elučního činidla), čímž se získá 1,80 g pentaf luorf eny 1 esteru 3-methoxykarbonyl-4methy1benzoátu ve formě bílé pevné látky ve výrtěžku 97 % teorie.

Příklad 1

A. N-[<1 -Oxo-1 -<3-jod-4-methy1)feny1)methy1]-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin

Do roztoku, obsahujícího 5,00 g <19,1 mmol) 3-jod-4-methy1benzoové kyseliny a 3,40 g <21,0 mmol) 1,1-karbonyldiimidazolu v 80 ml tetrahydrofuranu se v prostředí dusíku přidá 2,7 ml <21,0 mmol) 1,2,3,4-tetrahydroisochinolinu injekční stříkačkou. Získaná reakční směs se nechává reagovat po dobu přibližně dvou hodin a pak se odpaří k suchu za sníženého tlaku, čímž se získá zbytek. Tento zbytek se rozpustí ve 100 ml ethylacetátu, promyje se postupně nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankovým roztokem, vysuší se síranem sodným, zfiltruje se a odpaří se k suchu za sníženého tlaku, čímž se získá lehce žlutý olej. Tento olej se čistí bleskovou chromatografií (za použití gradientu 14 až 20 % hexanu v ethylacetátu, čímž se získá 6,92 g N-CC1 oxo-1 - <3” - jod-4 -methy 1 )f eny 1 )methy 1 ] -1,2,3,4-tetrahydroisochi nolinu čirého oleje, který ztuhne stáním ve výtěžku 96 % teorie.

¹ H NMR <CDCl3>-- 5 2,46 <s, 3H), 2,90 (br.s, 2H) , 3,65 (br.s, 1H),

3,95 <br.s, 1H), 4,85 (br.s, 1H), 7,17-7,34 <m,

6H), 7,90 <s, 1H)

33,64

1624, 1536, 1547, 1497. 1370.

1035, 831 cm ~^l

CM*·, 100)

1108 ,

IR (CDClí): 3010 1050

MS CEO): m/e 377

Analysa pro Ci-HisNOJ: vypočteno'· 0 54,13 H nalezeno C 53,89 H

4,28 4,24

3,71

3,61

B. N-[<1 -Oxo-1 -(3-methoxykarbonyl1-4-methy1)feny1)methyl]1,2,3,4-tetrahydroisochinoli n

Roztok, obsahující 6,35 g (16,8 mmol) N-[(l -oxo-1 -C3jod-4”-methy1)f eny1)methy11-1,2,3,4-tetrahydroisochinolinu, produktu podle příkladu IA, 3,35 1,18 g (1,68 mmol) chloridu 150 ml bezvodého methanolu se uhelnatého. Když je reakce v chromatografií v tenké vrstvě ml (16,3 mmol) dicyklohexylaminu a bis(trifenylfosfin)palladnatého ve intenzivně míchá v prostředí oxidu podstatě ukončena podle sledování odpaří se směs k suchu za sníženého tlaku, čímž se získá zbytek. Tento zbytek se rozpustí ve 200 ml ethylacetátu a získaná směs se zfiltruje přes celit k odstranění nerozpustných organických solí- Filtrát se pak promyje postupně nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankovým roztokem, vysuší se síranem sodným, zfiltruje se a odpaří se k suchu za sníženého tlaku. Získaný produkt se čistí bleskovou chromatograf i í (za použití gradientu 14 až 20 % ethylacetátu v hexanu), čímž se získá 4,54 g N-[(l -oxo-1 -(3-methoxykarbony 11-4-methyl )f eny 1 )methy 13-1,2.3,4-tetrahydroisochinol in ve formě čirého oleje ve výtěžku 87 % teorie.

íH NMR (CDC1₃)-- S 2,64 (s, 3H), 2,90 (br.s. 2H), 3,89 (s. 3H),

3,98 (br.s, 1H), 4,59 (br.s, 1H), 4,87 (br.s,

1H), 7,05-7,51 (ra, 6H), 8,03 (s, 1H)

IR (CDCI3): 3010. 1722, 1626, 1534, 1497, 1436, 1306, 1268, 1236. 1210. 1149, 1109, 1085, cm

MS (FD)'- m/e 309 CM*, 100)

Analysa pro C19H19.NO3 vypočteno^: C 73,77 nalezeno C 73,95

6,19 6.43

4,53

4,57

2- M-fCl -Oxo-l -<3”-karboxy-4-methy1)feny1]methy1 -1.2,3,4t.et.rahydroi soc h i no 1 i n

Do roztoku, obsahujícího 4,25 g <13.8 mmol) Ν-Γ(1 -oxo-l <8” -nethoxykarbony 1 1 -4-methyl )fenyi )methy 1] -1,2,3,4-tetrahydroi sochinolinu, produktu podle příkladu 18, ve 200 ml směsi 3 ' 1 tetrahydrofuranu a vody se vnese 661 mg (27,6 mmol) hydroxidu lithného- Reakční směs se nechává reagovat po dobu přibližně 24 hodin. Získaná reakční směs se pak odpaří za sníženého tlaku a okyselí se (na hodnotu pH 2 až 3) přidáváním po kapkách IN kyseliny chlorovodíkové, čímž dojede k vysrážení surového produktu. Získaná suspenze se smíchá se 75 ml ethylacetátu a vzniklá vodná a organická vrstva se oddělí. Vodná fáze se extrahuje dvakrát ethylacetátem a spojené organické vrstvy se prámyjí solankou, vysuší se síranem sodným, zfiltrují se a odpaří se k suchu za sníženého tlaku za získání zbytku. Zbytek se zfiltruje přes vrstvu silikagelu za použití roztoku 15 % methanolu v methylenchloridu jakožto elučního činidla, čímž se získá 4,05 g N-1C1 -oxo-l -<3’*karboxy-4-methy1)feny1]methy1-1,2,3,4- tetrahydroisochinolin ve formě bílé pěny.

¹H NMR <CDCl3>^s S 2,68 Cs, 3H), 2,92 Cbr.s. 2H), 3,67 Cbr.s, 1H), 4,00 Cbr.s, 1H), 4,62 Cbr.s, 1H), 4,91 Cbr.s,

1H), 7,18-7,53 Cm, 6H), 8,17 Cs. 1H)

IR CCDC13): 3500-2500 <br.), 1699, 1625, 1584, 1498, 1445, 1371, 1301, 1237, 1202. 1167, 1060, 981, 934, 833, cm“¹

MS CFD): m/e 295 CM*. 100)

Analysa pro C18H17NO3*vypočteno: C 73,20 H 5,80 N 4,74 nalezeno : C 73.14 H 5.90 N 4,44

D. [3 S-C3 ' Rx,4 'Sx)1-N-tl '-Oxo-i ' '_oxo-2 '-_a2a_

-fenylmethy1-4 -hydroxy-5 -C2 -N-terc.-butylkarbamido)feny1]penty14-methy1)feny1]methy1-1,2,3,4-tetrahydraisochi nol in o

Do studeného (-10 C) roztoku, obsahujícího 59 mm CO,2 mmol)

N- [Cl -oxo-l - C3-karboxy-4-methy1)feny1]methy1-1,2,3,4-tetrahydroisochinol inu, produktu podle příkladu 113, 48 mo (0,2 mmol) í R-<: Rx

Sx '.) Ί -N-terc . -buty ! ΰι^Ζϊ proiJiixb; pod 1 c· unino-2-hydroxy-4-feny1buty 1 )ben^.

{pravý ID a 27 mu CO, 2 mmol) l-hvdroxvbenzotri azo1 hydrátu

HOBT. IfeO) ve 4 ml bezvodého tetrahydrof uranu, se přidá 41.3 mu CíJ,2 mmol.) 1.3-d i cy k lohexy 1 karbod i in i du CDGC). Po přibližně 10 minutách se reakční snes ohřeje na teplotu místnosti a nechává se reagovat přes noc. Reakční směs se pak zředí 50 ml ethylacetátu, zfiltruje se přes celit a promyje se postupně vodou, nasyceným roztokem hvdroaenuhličitanu sodného a nasyceným solankovým roztokem. Po vysušení síranem soilným se reakční směs zfiltruje a zkoncentruje se za sníženého tlaku, čímž se získá surový produkt. Tento produkt se čistí rotační chromatografií <1 mm destička, za použití systému 3=2 methylenchloridethy1acetát), čímž se získá 30,2 mg [3 S-C3 R*,4 S*)]-N[1 -oxo-1 -C3-C1' ' oxo-2 ” ' -aza-3 ' ''-feny 1methy1-4 -hydroxy5 - (2 -N-terc.-buty1karbanido)feny 11 penty1-4-methyl)fenyllmethy1-1,2,3,4-tetrahydroisochinolinu ve formě bílé pěny ve výtěžku 24 % teorie.

[<z1d -0,99 Cc = 1,014, methanol) ¹H NMR CCDCI3): 5 1,45 (s, 9H), 2,21 Cs, 3H), 2,78-3,20 Cm, 7H), 3,53 Cbr.s, 1H), 3,39-3,95 Cm, 2H), 4,55-4,62

Cm, 2H), 4,35 Cbr.s, 1H), 5,92 Cs.lH). 6,27 Cd,

J=9,7 Hz, 1H), 7,09-7,43 Cm, 16H),

IR CCDCl3)= 3423. 3500-3100 <br.>, 3010, 1644, 1514, 1455, 1395, 1363, 1300, 1237, 1223, 1210 cm“¹

MS (FD): m/e 618 CM*. 100)

Analysa pro C39H43N3O4: vypočteno: C 75,32 nalezeno : C 75,60

H 7,02 H 6,39

N 6,80 N 6,87

Příklad 2

A. 5-Methy11-3-methoxykarbony1benzoová kyselina

Roztok, obsahu jící 23.93 g C131 mmo1)5-methy1 i sof ta 1ové kyseliny a 18.2 ml C137 mmol) N,N-dinethy1formamiddimethy1aceta1u ve

200 ml methylenchloridu se zahříváním udržuje na teplotě zpětného boku a nechává se reagovat po dobu přibližně dvou hodin. Reakční ~ (·»«4 — snes se odpaří sa sníženého tlaku a nonokyse 1 i na se oddělí od dikyseiiny bleskovou .•.•hromat.oqrai i i (za použití 7 methanolu v methylenchloridu jakožto elučního činidla. Rf (nonokyseliny) = 0,5 Rf<dikyše 1 iny) = 0.1 až 0,3). Frakce, obsahující monokvselinu, se spojí a odpaří se k suchu za sníženého tlaku, čímž se získá zbytek. Tento zbytek se rozpustí ve 200 ml ethylacetátu a roztok se extrahuje dvakrát vždy 150 ml podíly 1M roztoku uhličitanu draselného. Spojené vodné extrakty se okyselí IN kyselinou chlorovodíkovou (hodnota pH 2) a získaný roztok se pak extrahuje třikrát vždy 150 ml podíly ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí se solankou, vsuší se síranem sodným, zfiltrují se a odpaří se k suchu za sníženého tlaku, čímž se získá bílá pevná látka. Tato pevná látka se čistí překrystalováním ze systému ethylacetát,/hexan, čímž se získá 6,65 g 5-methy 11-3-methoxykarbony lbenzoové kyseliny ve formě malých bílých jehlic ve výtěžku 26 % teorie.

¹H NMR (CDCI3 ) -- δ 2,47 (s, 3H), 3,95 (s, 3H) ,	3,10	(br.s, 2H),
	3,57 (s, 1H).
IR	(CDCI3): 3400-2200 (br.), 1721, 1606, 1441,	1272,	1214, 1129,
	935. 757. 703, 534, 475 cm¹.
MS	(FD)= m/e 194 (Μ-, 100).

Analysa pro C10H10O4:

vypočteno: C 61,85 H 5,19 nalezeno : C 61,83 H 5,31

B. N-[l -0xo-l -(3-methoxykarbonyl-5-methy1)fenyl]methy11.2.3.4- tetrahydroisochinolin

N-[l -Oxo-1 -(3-methoxykarbony 1-5“-methy1)fenyl]methy111.2.3.4- tetrahydroisochinolinu se připravuje v podstatě způsobem podle příkladu 1A za použití 1,0 g (5,15 mmol) 5-methyl1-3-methoxy karbony lbenzoové kyseliny, meziproduktu podle příkladu 2A, 0,88 g (5,40 mmol) 1,1-karbonyldiimidazolu a 0,63 ml (5.40 mmol) 1,23.4- tetrahydroisochinolinu v 10 ml bezvodého tetrahydrofuranu, čímž se získá zbytek. Zbytek se čistí bleskovou chromatografií (za použití gradientu 30 až 45 % ethylacetátu v hexanu), čímž se získá 1,48 g N-ll -oxo-1 -(3‘*-methoxykarbony 1-5-methy 1 )feny 1 ] methy 1 - 1.2,3 - 4-tebrahydroiroch i nol i nu ve formě Čirého oleie ve (s, 311). 2.90-3.10 <n. 23), .91 Cs, 3H). 4.1)1 Cbr.s. lil) , 4,56 Cbr.s.

IH), 4,39 Cbr.s. 1H), 7,10-7,30 Cm, 411). 7,47 Cs, lín, 7,92 Cd, J=7,0 Hz, 2H)

IR CCDCl-j): 3025, 3010, 1723, 1627, 1441, 1317, 1294, 1233, cm^-1MS CFD): m/e 309 CM*. 100)

H NMR CCDClj í ? · έ.

ID

Analysa pro C19H19NO3 vypočteno : 0 73,77 nalezeno : C 73,55

H 6,19 H 6,19

H 4,53 H 4,55

C. N—Cl -Oxo-1 -C3-karboxy-5-methy1)feny11 methy1-1,2,3,4-tetrahydro isochinolin

N-C1 -Oxo-1 -C3-karboxy-5”-methy1)f eny11 methy1-1,2,3,4-tetrahydroisochinolinu se připravuje v podstatě stejně jako podle příkladu 1C za použití 304 mg (12,7 mmol) hydroxidu lithného a 1,31 g (4,23 mmol) N-Cl -oxo-1 -C3”-methoxykarbonyl-5”- methyl)feny11methy1-1,2,3,4-tetrahydroisochinol inu, meziproduktu podle příkladu 2B, v 30 ml směsi 3 : 1 tetráhydrof uranu a vody za získání zbytku, který se čistí překrystalováním z ethylacetátu, přičemž se získá 1,03 g bílé pevné látky ve výtěžku 90 % teorie. ¹H NMR (CDCI3): 6 2,37 Cs, 3H) , 2,31 Cbr.s, 2H), 3.52 Cbr.s, 1H) ,

3,81 Cbr.s, 1H) , 4,55 Cbr.s, 1H), 4,74 Cbr.s,

1H), 6,95-7,30 Cm, 4H), 7,43 Cs, 1H), 7,31 Cs,

1H)

IR CKBr): 3600-2200 Cbr), 1715, 1577, 1485, 1438, 1280, 1203,

933, 335, 337, 773, 765. 743, 680, 635 cm^-1

MS CFD): m/e 295 CM*), 591 C100)

Analysa pro CieHi7N03^: nalezeno

D. [3 S-C3 3 -fenylmethy1-4

73,20	H 5,80	N	4,74
73,21	II 5,92	N	4,77

Rx , 4	Sx)1-N-C 1	-Oxo-	1 -C3

-hydroxy-5

-C . 1 oxo-2 -azaN-terc.-buty1karbami do)f eny1]penty1-5”-methy1)f eny1]methyl-1,2.3,4-tetrahydroi soch i nolin [3 ' ' S-(8 Rx .4 ' <> ) I - N-Γ 1 '-Oxo-l -Γ 1 ' ' 'oxo-2 ' ' ' -áza3 -fenylmethy1-4 -hydroxy-5 '-<2 '-N-terc --buty Ikarbam do)feny i 1 penty 1-5 -methy 1 )f eny 11 methy 1-1,2,3,4-tetrahydroisochi nolin se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu ID za použití 439 mg (1,69 mmol) 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (DCC), 229 mg <1,69 mmol) 1-hydroxybenzotriazolhydrátu (H0BT.H₂0), 500 mg <1,69 mmol) N-C1 '-Oxo-l'-<3-karboxy-5-methy 1)feny1]methy1-1,2,3,4-tetrahydroisochinolinu, meziproduktu podle příkladu 2C a 349 mg <1,22 mmol) [R-(Rx,Sx)l-N-terc.-butyl2-(3-amino-2-hydroxy-4-fenylbuty1)benzamidu, meziproduktu podle přípravy ID v 10 ml bezvodého tetrahydrofuranu, obsahujícího 0,5 ml dimethylformamidu za získání zbytku. Tento zbytek se čistí rotační chromatografií <6 mm destička, za použití gradientu 30 až 50 % ethylacetátu v hexanu jakožto elučního činidla), čímž se zís ká 740 mg bílé pěny ve výtěžku 71 % teorie.

[<x1d -18,73 (c=l,004, methanol)

NMR (CDCI3)^: 6 1,42 Cs, 9H), 2,35 (s, 3H), 2,78-3,05 <m, 5H),

3,54 (br.s, 1H), 3,90-4,06 <m, 1H), 4,48-4,55 (ra, 2H), 4,34 (br.s, 1H), 5,94-5,99 Cm, 2H) ,

6,36 (br.s, 1H), 7,12-7,55 (m, 15H)

IR (CDCI3): 3600-3100 (br.), 3028, 3008, 1642, 1600, 1515, 1455, 1369, 1233, 1050 cm-¹

MS (FD): m/e 618 (Μ*, 100)

Analysa pro C39H-43N3 04^: vypočteno: C 75,82 H 7,02 N 6,80 nalezeno - C 76,04 H 7,01 N 6,92

Příklad 3

A. N-[l -Oxo-l -(3-jod-2-methyl)fenyl]methyl-l,2,3,4-tetrahydroisochinol in

N-Γ1 -Oxo-1 - (3- jod-2-methy1)feny11 methy1-1,2,3,4-tetrahydroisochinol in se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu 1A za použití 4,93 mg (13,32 mmol) 3jod-2-methy1benzoové kyseliny, 3.36 π (20,70 mmol) 1,1-karbony 1 d i imidazo i u a 2-6 ml '.29,2 nnol) 1,2.3 - 4-tetr v 9ii ml bezvodeho t eř rahydroiuranu - čímž ze z hvdroisec h ino 1 i nu ská z!-ytek. Tento který stáním utuhne, ve

3H (rotamery)), 2,70-3,05 (n, zbytek se u ist í bleskovou ι':πγοπ<ι1ο*ϊΓ3Ι 1 í '.*^a pou^i 9i ur<j*j až 59 % hexanu v ethylacetátu jakožto elučního činidla), cín; získá 6,37 «η lehce žlutého olele, který stáním ztuhne, ve výtěžku 97 % teor i e.

!H NMR (CDCI3): 6 2,31 2,40 (2s,

2H). 3.40-3,61	Ί Cm,	1H ) .	4,95-4.	20 Cm,	1H) , 4
4,42 (η, 1H),	4,94	(dd.	J=35,6;	17,3 H	z, 1H),
6.30-7,40 (m,	6H) ,	7,37	(d, J=7	,3 Hz,	1H)
, 1626, 1536,	1431 ,	1333	, 1299,	1259,
l, 1157, 1102,	1043,	1003	, 932,	910 cm	-1

MS (FD): m/e 377 (M⁺, 100)

Analysa pro C17H16MOJ:

vypočteno: C 54,13 nalezeno - C 54.35

H 4,54 H 4,15

N 3.71 N 3,55

B. N-íl -0xo-l -(3“-methoxykarbony 1-2-methy1)feny 1]methy1-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin

N-íl -Oxo-1 -(3'’-methoxykarbonyl-2-raethyl)fenyl]methyl1,2,3,4-tetrahydroisochinolin se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu 1B za použití 6,77 g (17,9 mmol ) N-11 -oxo-1 -C3“-jod-2“ -methy 1 )f eny 1 lmethy 1-1,2,3,4-tet,rahydroisochinolinu, meziproduktu podle příkladu 3A, 3,6 ml (17,9 mmol) dicyklohexylaminu a 490 mg (0,70 mmol) chloridu bisCtrifenylfosfin)palladanatého ve 230 ml bezvodého methanolu v prostředí oxidu uhelnatého za získání zbytku. Tento zbytek se čistí bleskovou chromatografií (za použití gradientu 14 až 25 % ethylacetátu v hexanu jakožto elučního činidla), čímž se získá 3,15 g lehce žlutého oleje ve výtěžku 57 % teorie.

*H NMR (CDCI3): 6 2,44 2,52 (2s, 3H (rotamery)), 2,75-2,35 (m,

1H), 2,97-3,01 (m. 1H), 3,41-3,44 (m, 1H), 3,90 (3, 3H), 3,92-4,13 Cm, 1H), 4,25-4,40 (m, 1H),

4,96 (dd, J=40,l: 17,4 Hz, 1H), 6,35 (d. J=7,3 Hz, 0,5H), 7,10-7,36 (m, 4,5H), 7,33-7,91

Cm. 1H) h4t.«

IR (CDC13)- 1723, 1626

MS (FD): m/e 309 (M*. 100)

0. Μ - ί 1 -i íxo-1 - (3 ” - kar boxy -2 -methy 1 ) f eny 1 ] methy 1-1,2,3,4tetrahydroi sochinolín

Η-[ 1 -Oxo-1 - (3“ -karboxy-2’’ -methy 1 )f eny 1 ] methy 1-1,2,3,4tetrahydroisochinolin se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu IC za použití 464 mg (19,4 mmol) hydroxidu lithného a 2,99 g (9,68 mmol) N-[l -oxo-1 -(3-methoxykarbony 1-2”-methy1)f eny1Imethy i -1,2,3,4-tetrahydro isochino1 inu, meziproduktu podle příkladu 3B, ve 200 ml směsi 3 : 1 tetrahydrofuranu a vody, čímž se získá zbytek. Tento zbytek se čistí bleskovou chromatografií (za použití systému 1 : 1 ethy1acetát/methylenchlorid obsahujícího 1 % kyseliny octové jakožto elučního činidla), čímž se získá 2,79 g lehce hnědé pěny ve výtěžku 98 teorie.

¹H NMR (CDCl3)^; <S 2,50 2,58 (2s, 3H (rotamery)), 2,76-2,81 (m,

1H), 3,01 (t, J=6,l Hz, 1H), 3,43-3,47 Cm, 1H) ,

3,99-4,03 (m, 1H), 4,30-4,01 Cm, 1H), 4.98 Cdd,

J=33,7; 17,4 Hz, 1H). 6,87 Cd, J=7,2 Hz, 0,5H), 7,11-7,43 Cm, 4,5H), 3,04-8,07 Cm, 1H)

IR CCDCI3): 3600-2400 Cbr.), 1700, 1626, 1478, 1257,

1222, 1160. 1039 cm¹

MS CFD) = m/e 295 CM*. 100)

Analysa pro CieHi7N03^: vypočteno; C 73,20 H 5,80 N 4,74 nalezeno χ C 73,45 H 5,66 N 4,30

D. [3 S-C3 Rx.4 Sx)]-N-(1 -Oxo-1 -C3”-[l oxo-2 -aza3 -fenyImethy1-4 -hydroxy-5 -C2 -N-terc.-butylkarbamido)feny 11penty1-2-methyl)feny1Imethy1-1,2.3,4-tetrahydroisochi no 1 i n [3 S-C3 Rx,4 Sx)]-N-[1 -0xo-l -C3-[l oxo-2 -aza3 -fenyImethy1-4 -hydroxy-5 -(2 -N-terc.-butylkarbamido)f eny11 penty1-2-methy1)feny1]methy1-1,2,3,4-tetrahydroisochino1in se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán d i cy k 1 ohi?xy 1 kar 'i přikladu ID za použití bodrinida 250 ne thy1)fenylί ne thy 1 podle příkladu 30. 2

176 nn <0,35 mmol) 1,3no CO. 85 mmol) H-fl -·>χο-1 - C3“-kar b.Jxy-2 1,2.3.4-tetraňydroisocniuolmu. meziprodukt )0 ng Cl.01 anol) Γ R-< R« - S* ) I -M - terč .-buty 1

2-C 3 - am i no-2-hydroxy-4-feny1buty1)benzami du, meziproduktu pod 1e přípravy ID a 115 mg CO, 35 mmol) 1-hydroxy benzotr iazolhydrátu CHOBT.HsO) v 10 ni bezvodého tetrahydrofuranu, čímž se získá surový produkt. Tento produkt se čistí rotační chromatografií <4 mm destička, za použití gradientu 30 až 60 % ethylacetátu v methylen-chloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 373 mg bílé pěny ve výtěžku 71 % teorie.

[ocId -13,34 Cc=l,004, methanol) ^JH NMR CCDC13): 6 1,46 Cs, 9H). 1,91, 1,97, 2,11, 2,20 C4s, 3H

Crotamery)), 2,72 Cbr.s, 1H), 2,36-3,20 (π, 6H), 3,39 Cbr.s, 1H), 3,30-4,01 Cm, 2H), 4,28 Cm,

1H), 4,59 Cbr.s, 1H), 4,78 Cd, J=17,2 Hz, 1H),

4,99 Cd, J=17,6 Hz, 1H), 6,04 Cbr.s, 1H), 6,33

Cbr.s, 1H), 6,86-7,41 Cm, 16H).

IR CCDC13)^: 3600-3100 Cbr.), 3009, 1642, 1514, 1455

1300 cm¹

1369,

MS CFD): m/e 613 CM⁺, 220 Analysa pro C39H43N3Q4: vypočteno: C 75,82 H nalezeno ^: C 75,53 H <100)

7,02

7,03

N 6,30 N 6,71

Příklad 4

A.

N-íl -Oxo-1 -<3”-jod-4-ethyl)fenyllmethy1-1,2.3,4-tetrahydroisochinolin

N-Cl -Oxo-1 -C3-jod-4-ethyl)fenyl]methyl-1.2,3,4-tetrahydroisochinolin se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v přikladu 1A za použití 4,74 mg <17,17 mmol) 4ethy1-3-jodbenzoové kyseliny, 2,30 g <17,17 mnol) 1,1-karbony 1diimiduzolu a 2,2 ml <17,17 mmol) 1,2,3,4-tetrahydroisochino1 inu v 70 ml bezvodého tetrahydrofuranu v prostředí dusíku, čímž se získá zbytek. Tento zbytek se čistí bleskovou chromatografi i Cza

JUDr.

o o

o

DC t

Ό

I «—’ použití 14 % ethylacetátu v hexanu jakožto elučního činidla), címz se získá 4,40 g lehce žlutého oleje, který stáním ztuhne, ve výtěžku 65 % teorie.

Ml NMR CCDCU): δ 1,22 Ct, J=7,5 Hz, 3H), 2,76 Cg, J=7,5 Hz. 2H), 2,90 (br.s, 2H), 3,59-4,05 Cm, 2H), 4,50-4,95 Cm, 2H), 6,90-7,38 Cm, 6H), 7,90 Cs, 1H)

IR CCDCl3)^; 3010, 2974, 1624, 1586, 1545, 1498. 1434, 1299, 1253, 1220, 1034, 840 cn’¹

MS CFD): ra/e 391 CM*, 100)

Analysa pro CieHieNOJ:

vypočteno: C 55,26 H 4,64 N 3,58 J 32,44 nalezeno : C 55,96 H 4,71 N 3,67 J 32,48

B. N-[l -Oxo-1 -C3-methoxykarbony1-4-ethy1)fenyllmethyl1,2,3,4-tetrahydroisochinolin

N-tl -Oxo-1 -<3-methoxykarbony1-4-ethy1)feny1Imethy1,2,3,4-tetrahydroisochinolin se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu IB za použití 4,13 g CIO,56 mmol) N-Cl -oxo-1 -<3“-jod-4”-ethyl)fenyl]methyl-l,2,3,4-tetrahydroisochinolinu, meziproduktu podle příkladu 4A, 2,2 ml <11,09 mmol) dicyklohexylaminu a 140 mg <0,20 mmol) chloridu bisCtrifenylfosfin)palladanatého ve 200 ml bezvodého methanolu v prostředí oxidu uhelnatého za získání zbytku. Tento zbytek se čistí bleskovou chromatografií Cza použití gradientu 11 až 20 % ethylacetátu v hexanu jakožto elučního činidla), čímž se získá 1.76 g lehce žlutého oleje ve výtěžku 52 teorie.

*H	NMR CCDC13): 8 1,25 <t, J-7.4 Hz,	3H)	«	2.80-3,10	Cm. 4H).
	3,60-4,05 Cm,	5H),	4	.50-4,	95 Cm, 2H).	7,19 -
	7,25 Cm, 4H),	7.34	Cd,	J=7.9	Hz. 1H).	7.52 Cd.
	J-7,9 Hz, 1H).	7.97	<s,	1H)
IR	CCDC13): 3010. 1724, 1625,	1585,	1498	. 1435	. 1299.
	1234, 1194, 1151,	1109,	1088	, 1051	cm^-1
MS	CFD): m/e 323 CM*. 100)
Analysa pro C2oH2iN03^:
vypočteno: C 74,28 H 6,25	N 4	.34
nalezeno : G 74,02 H 6,50	N 4	,59

C. N-[ 1 '-Oxo-l -<3-karboxy-4-ethy1)feny1Jmethy1-1,2.3.4tetrahydroisochinolin

N-[ 1 -Oxo-l -<3”-karboxy-4-ethy1)fenyllmethy1-1.2.3.4tetrahydroisochinolin se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu 10 za použití 357 mg (14,91mmol) hydroxidu lithného a 1.60 g <4.97 mmol) N-[1 -oxo-l'-<3“-methoxykarbony1-4-ethy1)feny1]methy1-1,2.3.4-tetrahydro i soch i no1 i nu, mez i produktu podle příkladu 4B, ve 40 ml směsi 3 ^: 1 tetrahydrofuranu a vody, přičemž se však směs nechává reagovat pres noc při teplotě 50 C. Získaný zbytek se čistí sloupcovou chromatografií (na aktivovaném dřevěném uhlí), čímž se získá 1,35 g bílé pěny ve výtěžku 88 % teorie.

»H NMR (CDC13): 8 1,27 (t. J=7,5 Hz, 3H), 2,96 (br.s, 2H), 3,10 <g, J=7,4 Hz, 2H), 3,66 (br.s, 1H), 3,99 (br.s.

1H), 4,62 (br.s, 1H), 4,89 (br.s, 1H). 7,137,25 Cm, 4H>, 7,33 Cd. J=7,9 Hz, 1H), 7,58 Cd,

J=7,2 Hz, 1H), 8,12 Cd, J=l,6 Hz, 1H)

IR CKBr)= 3600-2300 Cbr.), 1700, 1625, 1497, 1443, 1300, 1237, 1150, 1109, 1048, 933 cm'¹

MS (FD)'- m/e 309 CM*, 100)

D. [3 S-C3 Rx,4 Sx)]-N-[1 -0xo-l -C3-[l oxo-2 -aza3 -fenyImethyl-4 -hydroxy-5 -C2 -N-terc.-butylkarbamido)feny11penty1-4-ethyl)fenyllmethy1-1,2,3,4-tetrahydroisochinol in [3 S-C3 Rx,4 Sx)]-N-[1 -0xo-l -<3-[l oxo-2 -aza3 -fenyImethyl-4 -hydroxy-5 -C2 -N-terc.-butylkarbamido)feny11penty1-4-ethyl)feny11methy1-1,2,3,4- tetrahydroisochinolin se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu ID za použití 206 mg (1,0 mmol) 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (DCC), 300 mg (0,97 mmol) N-[1'-oxo-l'-(3-karboxy-4ethy1)f eny1Imethyl- 1,2,3,4-tetrahydroisochinolinu, meziproduktu podle příkladu 4C, 341 mg (1,18 mmol) tR-(Rx.Sx)1-N-terc.-buty12-(3-amino-2-hydroxy-4-fenylbuty1)benzamidu, meziproduktu podle i

přípravy ID a 135 mg (1.0 mmol) 1-hydroxybenzotriazolhydrátu (HOBT.H2O) v 6 ml studeného (-10 C) bezvodého tetrahydrofuranu.

čímž se získá produkt. Tento produkt se čistí rotační chromatografií (6 mm destička, za použití gradientu 1 až 5 % methanolu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 410 mg

1H

IR

MS bílé pěny ve výtěžku 67 % teorie.

NMR CCDC1₃): 6 1,07 (t, J=7,6 Hz, 3H), J=7,5 Hz, 2H), 2,70-3,30

1H). 3,91-3,95 Cm. 1H), 4

Cbr.s, 1H), 5,97 Cs, 1H), 1H), 6,90-7,60 Cm, 16H) CCDCI3): 3009, 1645. 1514, 1455, 1236. CFD): m/e 632 CM*. 100)

1,45 Cs, 9H), 2,54 Cg, Cm, 5H), 3,55 Cbr.s.

,40-4,65 Cm, 2H), 4,83

6.32 Cbr.d, J=9,2. Hz,

1213 cm^-1

Příklad 5

A. N-Cl -Oxo-1 -C3-methoxykarbony 1-6”-methyl)fenyl]methyl1,2,3,4-tetrahydroisochinolin

N-[1 -Oxo-1 -C3-methopxykarbony1-6-methyl)feny1Imethy11,2,3,4-tetrahydroisochinolin se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu IA za použití 100 mg (0.52 mmol) 6-methy1-3-methylester-l-benzendikarboxylové kyseliny,84 mg (0,52 mmol) 1,1-karbonyldiimidazolu a 0,07 ml (0,52 mmol) 1,2,34-tetrahydroisochinolinu ve 4 ml tetrahydrofuranu, čímž se získá zbytek. Tento zbytek se čistí rotační chromatografií (2 mra destička. za použití gradientu 25 až 50 % hexanu v ethylacetátu jakožto elučního činidla), čímž se získá 109 mg čirého oleje ve výtěžku 71 % teorie.

*H NMR <CDC1₃): δ 2.27. 2.38 C2s, 3H Crotamery)), 2.80-3,00

Cm. 2H). 3.46 Cbr.s. 1.5H). 3.90 Cs. 3H). 4.104.40 Cm. 1.5H). 5.29 Cbr.s. 1H). 6.85 Cd. J-7.3

Hz. 0.5H). 7.11-7.34 Cm. 4.5H). 7.88-7.98 Cm. 2H)

IR CCDCl3)^; 3009. 1721. 1628. 1469. 1437. 1306. 1263.

1238. 1223. 1211. 1127 MS (FD): m/e 309 CM*. 100) cm

Analysa pro C19H19NO3: vypočteno: C 73,77 H 6,19 nalezeno - C 73,53 H 6,35

N 4.53 N 4.46

B. N-fl-Oxo-1 -C3-karboxy-6-methyl)fenyllmethyl-l,2,3,4tetrahydroisochinol in

N-[1 -Oxo-1 -(3-karboxy-6-methy1)f eny1]methy-1,2,3,4tetrahydroisochinolin se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu 1C za použití 13 mg C0,74mmoi) hydroxidu lithného a 109 mg (0,34 mmol) N-[1 -oxo-1'-(3“-methoxykarbonyl -6-methy Dfenyllmethyl-1,2,3,4-tetra-hydro i soc h i no1 i nu, meziproduktu podle příkladu 5A, v 10 ml směsi 3 ^: 1 tetrahydrofuranu a vody, přičemž se však po okyselení reakční směsi sloučenina extrahuje roztokem 3 · 1 methylenchloridu a isopropylalkoholu. Získaný zbytek se čistí rotační chromatografií (2 mm destička, za použití 1 % kyseliny octové v systému 1 ^: 1 ethylacetát/methylenchlorid jakožto elučního činidla), čímž e získá 107 mg pěny.

*H NMR (CDCI3): δ 2.28. 2,39 C2s, 3H (rotamery)), 2,30-3,00 Cm,

2H), 3,47 Cbr.s, 1H), 3,81 Cbr.s, 0.5H), 4,204,44 Cm, 1,5H), 4,30-5,06 Cbr.s, 1H), 6,85 Cd,

J=7,3 Hz, 0,5H), 7,11-7,36 Cm, 4.5H), 7,94-8,02 (π, 2H)

IR CCDCI3) 3600-2400 (br.). 1698, 1623, 1498, 1447, 1300, 1240. 1159, 1129. 1048. 910 cm¹

MS CFD): m/e 295 (M⁺. 100)

C. 13 S-C3 ' ' 'Rx,4 '' 'Sx)]-N-[1 '-0xo-l'-C3-[1 'oxo-2 -aza3 -feny lmethy 1-4 ' -hydroxy-5 -C2 - N-terc.- buty 1 karbaní i do ) f eny 11 penty 1 -6” -methy 1) f eny 13 methy 1-1,2,3,4-tetrahy dro i soch i nol in

Roztok, obsahující 90 mg ¢0,30 mmol) N-[l -oxo-1 -<3”-karboxy-6 -methyl )f eny 1 lmethy 1-1.2.3,4-tetrahy dro i soch i nol inu. meziproduktu podle příkladu 5B a 52 mg ¢0,32 mmol) 1,1-karbonyldiimidazolu ve 3 ml tetrahydrof uranu se míchá po dobu 60 minut v prostředí dusíku.Do tohoto roztoku se přidá 109 mg (0,38 mmol) [R- (Rx.S*)]- N-terc.-buty1-2- C3-amino-2-hydroxy-4-fenyIbuty1)benzamidu. meziproduktu podle přípravy ID, čímž se získá čirý žlutý roztok. Nechá se reagovat přes noc. roztok se odpaří k suchu za sníženého tlaku, čímž se získá zbytek. Tento zbytek se znova rozpustí ve 100 ml ethylacetátu a zfiltruje se přes cel i74 t,e_ Filtrát se extrahuje postupně nasyceným roztokem hydrogenuhlicitanu sodného a solanky, vysuší se síranem sodným, zfiltruje se a odpaří se k suchu za sníženého tlaku za získání produktu. Tento produkt se čistí rotační chromatografií <2 mm destička, za použití gradientu 50 až 100 % ethylacetátu v hexanu jakožto elučního činidla), čímž se získá 100 mg bílé pěny ve výtěžku 54 % teorie.

[<x]d -21,13 Cc=l,003, methanol) ¹H NMR CCDC1₃): 5 1,43 Cs. 9H). 2,20, 2,31 C2s, 3H Crotamery)),

2.66-3,05 Cm, 6H), 3,39 Cbr.s, IH), 4,05-4,40

Cm, 2H). 3.90 Cbr.s, IH), 4,52 Cbr.s, IH), 4.88 Cbr.s, IH), 6,14 Cbr.s, IH), 6,80-7,65 Cm, 17H)

IR CCDCI3): 3600-3100 Cbr.), 3431, 3027, 3010, 1641, 1516, 1455, 1368. 1234. 1048 cm¹

MS CFD): m/e 618 CM*. 100)

Analysa pro C39H-43N3Q4^: vypočteno: C 75,82 H 7,02 N 6.30 nalezeno C 75,58 H 7,27 N 6.71

Příklad 6 [3S-C3Rx.4aR*,8aRx,2 S*,3 Rx)1-2-12 -Hydroxy-3 -fenylmethy1-4 -aza-5 -oxo-5 -C3-ll .2 ,3 ,4 -tetrahydroisochinolin-1 ylkarbony11-6”-methy1)feny11penty1dekahydroisochinolin-3-N-terc.buty1karboxam id

13S-C3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx,3 Rx)]-2-12 -Hydroxy-3 -fenylmethy14 -aza-5 -oxo-5 -C3“-tl .2 .3 .4 -tetrahydroisochinolin1 -ylkarbonyl]-6-methy1>fenyllpenty1dekahydroisochinolin- 3-Nterc.-buty1karboxamid se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu ID za použití 256 mg Cl.24 mmol) 1.3-dicyklohexylkarbodiimidu CDCC), 168 mg <1,24 mmol) 1-hydroxybenzotriazolhydrátu CH0BT.H20) 366 mg <1,24 mmol) N-1C1 -oxo1 -C3 -karboxy-4“-methyl)feny1lmethy1-1,2,3,4tetrahydroisochinolinu, meziporoduktu podle příkladu 10. a 500 mg Cl,24 mmol) 13SC3Rx,4aRx.8aRx.2 Sx.3 Rx)1-2-13 -amino-2 -hydroxy-4 -feny11buty1dekahydroisochinolin-3-N-terc.-buty1karboxamidu, meziproduktu po75 lile přípravy 2B, v 15 ml studeného (-10 C) bezvodého tetrahydrofuranu, čímž se získá produkt. Tento produkt se čistí rotační chromatografií (6 mm destička, za použití 3 % methanolu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 439 mg bílé pěny ve výtěžku 53 % teorie.

[<x1d -69.1017° (c=l,013, methanol) ^JH NMR (CDCI3): δ 1,13 (s, 9H). 1,20- 2,10 (m, 14H), 2.20-2,35 (m, 4H), 2,50-3,05 <m, 7H), 3,37-3,60 (m. 2H),

3,30-4,10 (m, 2H), 4,40-4,70 (m, 2H), 4,35 (br.s. 1H), 5,67 (br.s, 1H), 6,72 (br.d, J=3.4

Hz, 1H), 6.95-7,34 Cm, 12H, aromatický)

IR (KBr): 3600-3150 (br.), 3009, 1627, 1514, 1455, 1247, 1047 cm“¹MS (FD): m/e 679 <M*), 578 (100)

Analysa pro C^zHs^N^O^:

vypočteno: C 74,30 H 8,02 N 8,25 nalezeno - C 74,07 H 8,00 N 8,22

Příklad 7

A. 2-[2 -N-(Methy1)aza-3 -oxo-3 -[3-methoxykarbony1-4”-methy11 fenyl)propyllchinolin

Roztok 1,91 g (9,86 mmol) 4-methyl-3-methoxykarbony1benzoové kyseliny, 2.6 ml <34,8 mmol) thionylchloridu a jedna kapka dimethylformamidu v 50 ml benzenu se zahříváním udržuje na teplotě zpětného toku po dobu dvou hodin v prostředí dusíku. Reakční směs se pak odpaří k suchu za sníženého tlaku. čímž se získá zbytek, který se opět rozpustí ve 200 ml ethylacetátu a pak se pomalu přidá do studeného (-1O C) roztoku 1.86 g (11.6 mmol) 2-(2-azopropy1)chinolinu ve 30 ml systému 1 ^: 2 pyridin/methylenchlorid. Získaná směs se postupně ohřeje na tepolotu místnosti a pak se zkoncentruje za sníženého tlaku za získání zbytku.Tento zbytek se znova rozpustí ve 100 ml ethylacetátu. promyje se postupně nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solanky, vysuší se síranem sodným a zfiltruje se. Žádaný produkt se čistí bleskovou chromatografií (za použití gradientu 1 až 5 methanolu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 1,29 g svět76 le žlutého oleje ve výtěžku 38 % teorie.

¹H NMR CCDC.I’)'· 6 2,57, 2,63 C2br.s, 3H (rotamery)), 3.03, 3,15

C2br.s, 3H Crotamery)). 3.67, 3,90 (2br.s, 3H

Crotamery)), 4,77, 5,05 C2br.s, 2H (rotamery)),

7,10-8.25 Cm, 9H)

IR CCHCI3) 2977. 1724. 1631. 1239, 1047 cm¹

MS CFD): m/e 347 CM*. 100)

Analysa pro C21H20N2O3:

vypoěteno^: C 72,40 H 5,79 N 8,04 nalezeno - C 72,23 H 5.93 N 8,07

B. 2-CC2 -N-CMethy1)aza-3 -oxo-3 -[3-karboxy-4-methy13 feny 1)propy13 ch i no1 i n

2-tC2 -N-CMethy1)aza-3 -oxo-3 -13-karboxy-4-methy13 feny1)propy13chinolin se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu 1C, za použití 76 mg ¢3,18 mmol) hydroxidu lithného a 367 mg Cl,06 mmol) 2-[2 -N-Cmethy1)aza-3 -oxo-3 [3-methoxykarbonyl-4-methy13feny1)propy13chinolinu, meziproduktu podle příkladu 7A, ve 20 ml směsi 2 ^: 1 tetrahydrofuranu a vody, čímž se získá 330 mg bílé pevné látky ve výtěžku 94 % teorie. *H NMR CDMSO-ds): 6 2.40- 2.60 Cm. 3H), 2,96 Cs, 3H). 4,69. 4.90

C2br.s. 2H Crotamery)). 7,20-8,00 Cm, 8H). 8.35

Cbr.s, 1H)

IR CCHCl3>- 3600-2400 Cbr). 1700, 1631. 1507, 1403. 1248, 1204. 1085. 830 cm“¹

MS CFD): m/e 335 CM*. 100)

C. [3S-(3Rx,4aR*.8aRx.2 Sx,3 Rx)]-2-[2 -Hydroxy-3 -fenylmethyl4 -aza-5 -oxo-5 - C3-[l oxo-2 -N- Cmethy1)aza-3 -chinolin2 -y Ipropy 1] -6- methy 1 )feny 13penty Idekahydroisochinol in-3- liteře .-buty 1karboxam i d t3S-C3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx,3 Rx)3-2-[2 -Hydroxy-3 -fenylmethylX X X X X X XXX XXX

-aza-5 -oxo-5 - C3’’-[l oxo-2 -N- Cmethy 1 )aza-3 -chinol in2 -yIpropy13-6”- methy1)feny13pentyIdekahydroisochinolin-3- Nt.erc.-buty 1 karboxamid se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu ID za použití 126 mg CO.61 mmol) 1,377 dicyklohexylkarbodiimidu (DCC), 83 mg (0,61 mmol) 1-hydroxybenzotriazolhydrátu CHOBT.H2O), 202 mg (0,61 mmol) 2-1(2 -N-(methy1)aza-'3 -oxo-3 -13-karboxy-4 -methy 11 feny 1 )propy 1 ] chinol inu , meziproduktu podle příkladu 7B, a 245 mg (0,61 mmol) [3S-(3Rx,4aRx8aR*,2 Sx,3 R*)]-2-[3 -amino-2 -hydroxy-4 -fenyllbutyldekahydroisochinolin-3-N-terc.-buty1karboxamidu, meziproduktu podle přípravy 2B v 5,5 ml bezvodého tetrahydrofuranu, obsahujícího 0,5 ml dimethylformamidu, čímž se získá produkt. Tento produkt se čistí rotační chromatografií (2 mm destička, za použití 5 % methanolu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 272 mg bílé pěny ve výtěžku 62 % teorie.

1«1d -59,0476 (c=l,05, methanol) *H NMR (CDCI3): 6 1,16 Cs, 9H), 1.15-3,20 (m, 24H). 3,90-4,10 (m. 2H), 4,56 (br.s, 1H). 4,72, 5,03 (2br.s, 2H, (rotamery)), 6,00 Cbr.s, 1H), 6,55-6,80 Cm, 1H),

7,00-8,25 Cm, 14H)

IR CCHCI3): 3650-3150 (br.), 2929, 1632 Cbr.), 1509, 1455,

1245, 1047 cm^-1

MS CFD): m/e 719 CM*), 617 (100)

Příklad 8

A. N-[l -Oxo-1 -<3”-karboxy)fenylmethy1]-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin

Do studeného (-5 C) roztoku 22,3 ml (315 mmol) thionylchloridu ve 35 ml benzenu, obsahujícího 350 μΐ dimethylformamidu, se přidá najednou 25,0 g <150 mmol) isoftalové kyseliny- Reakční směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu přibližně 16 hodin, ochladí se na teplotu místnosti a odpaří se k suchu za sníženého tlaku, čímž se získá zbytek. Tento zbytek se ještě jednou azeotropicky destiluje s benzenem a zředí se 200 ml diethyletheru. Získaný roztok se ochladí na teplotu -10 C a po kapkách se přidá 18,8 ml (150 mmol) 1,2,3,4-tetrahydroisochinolinu. Reakce se ukončí přidáním 100 ml vody. Organická a vodná vrstva se oddělí a organická vrstva se vysuší síranem sodným, zfiltruje se a zkoncent-ruje se za sníženého tlaku, čímž se získá zbytek. Tento zby78 tek se čistí bleskovou chromatografii), čímž se získá 477 mg bezbarvé pěny ve výtěžku 1 % teorie.

’H NMR CDMSO-de): δ 2,69-2,37 (br.s, 2H) , 3,83-4,22 Cbr.s, 4H),

4.73-4,30 Cbr.s, ÍH), 7,02-7.27 Cm, 4H), 7,417,47 Cm, 2H), 7,94-8,06 Cm, 2H)

MS CFAB): 282 CM*), 119 (100) x x

B. N-[l -Oxo-1 -<3-pentaf luorf enoxykarbony 1 )f eny Imethy 1 ]-1,23,4-tetrahydroisochinolin

Do studeného (0 C) roztoku 210 mg (0,75 mmol) N-[l -oxo-1

C3-karboxy)fenyImethy1]-1,2,3,4-tetrahydroisochinolinu, meziproduktu podle příkladu 8A, a 207 mg <1,13 mmol) pentafluorfenolu v 5 ml bezvodého tetrahydrofuranu se přidá 173 mg (0,90 mmol)

1-ethyl-3-[3-dimethylaminopropy1) karbodi imidhydrochloridu (EDO . Získaná reakční směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a nechá se reagovat po dobu přibližně 4 hodiny, přičemž se zředí 10 ml systému 3 : 1 chloroform/lsopropanol a promyje se postupně nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Získané vrstvy se oddělí a organická vrstva se vysuší síranem sodným, zfiltruje se a zkoncentruje se za sníženého tlaku, čímž se získá zbytek- Tento zbytek se čistí rotační chromatografii, čímž se získá 74 mg bezbarvé pěny ve výtěžku 22 % teorie.

*H NMR <CDCl3>= δ 2,83-3,08 Cm, 2H), 3,62-3,73 Cbr.s, ÍH), 3,924,13 Cbr.s, ÍH), 4,58-4,63 Cbr.s. ÍH). 4,82-4,98 Cbr.s, ÍH), 7,07-7.33 Cm.4H). 7,59-7,68 Cm, ÍH),

7,76-7,81 Cm. ÍH), 8,26-8,34 Cm, 2H)

MS CFD)= m/e 447 CM*). 447 C100)

C. [3 S-C3 Rx,4 S*)]-N-[l -0xo-l -<3“-[l oxo-2 -aza3 - fenyImethy1-4 -hydroxy-5 ~(2 -N-terc.-butylkarbamido)f eny 1 ] penty 1 )feny 1 Imethy 1-1,2,3,4-tetrahydroisochinol in

Roztok 72 mg <0,016 mmol) N-[l -oxo-1 -C3-pentafluorfenoxykarbony 1)fenyImethy1]-1,2,3,4-tetrahydroisochinolinu, meziproduktu podle příkladu 8B. ve 3 ml bezvodého methylenchloridu se přidá kanylou do roztoku 52 mg CO,15 mmol) [ R-CR*,S*)]-N-terc.buty1-2- C3-amino-2-hydroxy-4-feny1butyl)benzami du, meziproduktu

- 79 podle přípravy ID, v 5 ml bezvodého methylenchloridu. Do tohoto roztoku se přidá 19 jol CO. 18 mmol) 4-methylmorfo 1 i nu injekční stříkačkou a získaná reakční směs se nechá reagovat po dobu přibližně 16 hodin. Reakční směs se pak promyje postupně nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, 2N roztokem hydrogensíranu sodného a solankou. Organická vrstva se vysuší síranem sodným, zfiltruje se a zkoricentru je se za sníženého tlaku, čímž se získá zbytek. Tento zbytek se čistí rotační chromatografií, čímž se získá 27 mg bezbarvé pěny ve výtěžku 30 % teorie.

NMR CCDC1₃)^; 6 1,44 Cs, 9H). 2,73-3,11 Cm, 6H), 3,50-3.61

Cbr.s, 1H), 3,88-4,00 Cm, 2H), 4,46-4,62 Cm, 2H), 4,83-4,90 Cbr.s. 1H), 5,87 Cd, J=6Hz, 1H), 6,16

Cs, 1H), 7,13-7.56 Cm. 16H), 7.71-7,80 Cm, 2H)

MS CFD): m/e 604 <M*). 604 <100)

Příklad 9

A. N-terc.-Butoxykarbonyl)methylamin

Do studeného <0 C) roztoku 22 g CO,33 mmol) methylaminhydrochloridu v 550 ml bezvodého methylenchloridu se přidá 48 ml <0,34 mol) triethylaminu a pak 75 g <0,34 mol) terč.-butoxykarbonylanhydridu. Získaná reakční směs se nechává reagovat po dobu o

přibližně jedné hodiny při teplotě 0 C, nechá se ohřát na teplotu místnosti a nechá se reagovat přes noc. Reakční směs se pak zředí vodou. Vzniklé vrstvy se oddělí a organická vrstva se promyje vodou, vysuší se síranem sodným, zfiltruje se a zkoncentruje se za získání 47,4 q čirého oleje.

B. 2-<<N-Methyl)-N-<terc.-butoxykarbonyl)amino)methy1)pyridin

Do studeného <0 C) roztoku 3,0 g <18,30 mmol) 2-<chlormethy1)pyridinu a 2,0 g <15,25 mmol) N-terc.- butoxykarbonyl)methylaminu. sloučeniny podle příkladu 9A. ve 40 ml bezvodého dimethylformamidu se přidá 1,12 g <27.9 mmol) hydridu sodného. Reakční směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a pomalu se přidá 5.5 g <36,6 mmol) jodidu sodného. Reakční směs se nechává reagovat přes noc a pak se vlije do nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sod80 ného a získaná emulze se zředí vodou. Získané vrstvy se oddělí a vodná vrstva se extrahuje dvakrát methylenchloridem. Spojené organické extrakty se vysuší síranem sodným, zfiltrují se a zkoncentrují se za získání surového produktu. Tento surový produkt se čistí bleskovou chromatografií (za použití gradientu 20 až 50 % ethylacetátu v hexanu jakožto elučniho činidla), čímž se získá 69 mg žlutého oleje ve výtěžku 20 % teorie.

^ΤΗ NMR <CDCl3>^: 6 1.20-1.75 Cm. 9H), 2,75-3,10 Cm, 3H) , 4,40-

4,62 Cm,	2H) .	7,13-7,31	Cm, 2H)	7	.60-7,73 Cm.
1H). 8.	53 Cd	,J=4,38 Hz.	1H)
IR CCHCls): 3010. 2980,	2935,	1687, 1594,	1573.	1479.	1455, 1421,
1394, 1369,	1305,	1249, 1172,	1152,	1050,	879 cm ^-1

MS CFD): m/e 223 CM*. 100)

C. 2-C CN-Methy1)amino)methyl)pyridinhydrochlorid

Roztok 300 mg Cl,35 mmol) a 5 ml 5N vodné kyseliny chlorovodíkové v 5 ml dioxanu se nechává reagovat pres noc. Získaná reakční směs se zkoncentruje za sníženého tlaku, čímž se získá zbytek. Tento zbytek se azeotropicky destiluje s toluenem a odpaří se k suchu za sníženého tlaku, čímž se získá amorfní žlutá pevná látka. Této pevné látky se dále používá bez čištění.

^JH NMR CDMSO-de): δ 2.50-2.63 Cm, 3H), 4.25-4,45 Cm. 2H). 7,617.65 Cm. 1H). 7.86 Cd. J=7.84 Hz. 1H). 8.128.14 Cm. 1H). 8.71 Cd. J=4,90 Hz, 1H)

D. 2-CC2 -CN-Methy1)aza-3 -oxo-3 -C3”-methoxykarbony1-4methy13 feny 1)propyllpyridin

Roztok, obsahující 260 mg ¢1,33 mmol) 2-CCN-methyl)amino)methy1)pyridinhydrochloridu. sloučeniny podle příkladu 9C, 238 mg CO.66 mmol) pentafluorfeny1ester 3-methoxykarbonyl-4-methylbenzoátu, meziproduktu podle přípravy 7. a 0,5 ml triethylaminu v 5 ml bezvodého methylenchloridu se nechává reagovat přes noc. Získaná reakční směs se zředí methylenchloridem a pak se nechává reagovat třikrát s ÍM uhličitanem draselným. Spojené organické extrakty se vysuší síranem sodným, zfiltrují se a zkoncentrují se za sníženého tlaku za získání surového produktu. Tento materiál se čistí radiální chromatografiί (4 mm, za použití gradientu 0 az 5 % met hanolu v methylenchloridu), čímž se získá 154 mg žlutého oleje ve výtěžku 40 % teorie.

NMR CCDC13): S 2,50-2,80 Cm, 3H). 2,90-3,20 (m, 3H), 3.704,00 Cm, 3H), 4,50-4,95 Cm. 2H), 7,05-7,77 Cm,

6H), 8,05 Cs, 1H), 8,57 Cd, J=3,91 Hz, 1H)

IR CCHC13)^: 3027, 3003, 2954, 1723, 1631, 1594, 1573, 1477, 1437, 1404, 1303, 1249, 1038, 1077 cm“¹

MS (FD): m/e 298 (M*. 100)

Analysa pro CivHieN203^: vypočteno: C 68,44 H 6,08 N 9,39 nalezeno : C 68,64 H 6,21 N 9,27

E. 2-[(2'-(N-Methy1)aza-3 '-oxo-3 '-[3”-karboxy-4-methy13-feny 1)propy1]pyr i d i nhydroch1or i d

2-1(2 -(N-Methy 1 )aza-3 -oxo-3 -[3-karboxy-4-methy13-feny 1)propy13pyridinhydrochlorid se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu 1C za použití 99 mg (0,33 mmol) 2-C(2 -<N-methy1)aza-3 -oxo-3 -13-methoxykarbony1- 4-methyl]feny1)propyl3pyridinu, sloučeniny podle příkladu 9D, a 16 mg (0,66 mmol) hydroxidu lithného v 8 ml 3:1 směsi tetrahydrofuranu a vody, čímž se získá 94 mg pevné látky, které se používá bez dalšího čištění.

*H NMR (DMSO-de): S 2.40-2.60 (m. 3H), 2,85-3.10 (m, 3H),

4.60-5.05 (m. 2H), 7.20-8,85 (m. 7H)

IR (CHCI3): 3700-1800 (br.). 1713. 1635, 1537. 1518, 1484, 1470, 1404, 1356, 1306, 1236. 1085. 997, 981 cm“¹

MS (FD): m/e 285 CM*. 100)

F. [2 R-C2 Rx,3 S*)]-2-[2 -Hydroxy-3 -fenylmethy1-4 -aza-5 -oxo5 - (3”-Cl oxo-2 -N-(methy1)aza-3 -pyrid- 2 - ylpropyll6-methy1)f eny13 penty1-N-terc.-buty1benzam i d [2 R-(2 Rx,3 S*)3-2-[2 -Hydroxy-3 -fenylmethy1-4 -aza-5 -oxo5 - <3“-Cl oxo-2 -N-(methy1)aza-3 -pyrid- 2 - ylpropyll6”-methy1)feny13penty1-N-terc.-buty1benzamid se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu ID za použití mg <0,28 mmol) (R-(Rx,Sx)]-N-terc.-butyl-2-C3-amino-2-hydroxy4-fenylbuty1)benzamidu, sloučeniny podle přípravy ID, 93 mg <0,29 mmol) 2-((2 -CN-methy 1 )aza-3 -oxo-3 - [ 3”-karboxy-4 -methy 11 -f eny 1 ) propy13pyridinhydrochloridu, sloučeniny podle příkladu 9E, 38 mg <0.28 mmol) 1-hydroxybenzotriazolhydrátu CH0BT.H20) a 58 mg <0,28 mmol) 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (DCC), v 5 ml tetrahydrofuranu. čímž se získá surový produkt. Tento surový produkt se čistí radiální chromatografií <2 mm, za použití gradientu 2 až 4 % methanolu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 50 mg bílé pevné látky ve výtěžku 28 % teorie.

¹H NMR CCDCI3)- 5 1.46 Cs, 9H), 2,10-2,22 Cm, 3H), 2,80-3,22 Cm,

7H), 3,80-3.98 Cm, 1H), 4,48-4,65 Cm, 2H), 4,704.95 Cm, 1H), 5,95-6.40 Cm, 3H), 7,05-7,78 Cm,

15H), 8,50-8.62 Cm, 1H)

IR CCHC1₃)^; 3600-3100 Cbr.), 2974. 2931, 1643, 1573, 1514, 1485, 1455. 1437, 1395, 1368, 1311, 1233, 1077, 1049, 910, 882 cm ^_1

MS CED): m/e 607 CM*. 100)

Příklad 10 [3S-C3Rx,4aRx,8aRx,2 S*,3 Rx)3-2-[2 -Hydroxy-3 -fenyImethy1-4 -aza-5 -oxo- 5 - (3-(l oxo-2 -N-Cmethy1)aza-3 -pyrid- 2 yl propy 13-6”-methy1)feny13 pentyldekahydroijochinolin- 3- N-terc.buty1karboxami d [3S-(3Rx,4aRx,8aRx,2 S*,3 Rx)3-2-12 -Hydroxy-3 -fenyImethy1-4-aza-5 -oxo- 5 - C3“-íl oxo-2 -N-Cmethy1)aza-3 -pyrid- 2 y lpropy 13 -6 -methyl )f eny 13 penty ldekahydroii^ochinol in- 3- N-terc. butylkarboxamid se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu 2D za použití 124 mg <0,31 mmol) (3SC3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx,3 Rx )3-2-( 3 -amino-2 -hydroxy-4 -feny13buty1dekahydroisochinol in-3-N-terc. -butylkarboxamidu , sloučeniny podle přípravy 2B, 44 mg <0,33 mmol) 2-((2 -CN-methy1)aza-3 -oxo-3 (3'*karboxy-4-methy 11 -fenyl )propy 13 pyridinhydroch loridu, sloučeniny podle příkladu 9E, 42 mg (0,31 mmol) 1-hydroxybenzotriazolhydrátu (HOBT.H2O) a 64 mg (0,31 mmol) 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu

CDCC), v 5 ml bezvodého tetrahydrofuranu a 0,5 ml bezvodého dimethylf omam i du. Získaný surový produkt, se čistí radiální chromatograf i i (2 mm, za použití gradientu 0 až 5 methanolu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 111 mg bílé pěny ve výtěžku 50 % teorie.

¹H NMR <CDC1₃): S 1.13 (s. 9H), 1.20-2.35 Cs, 19H) . 2.50-2,70

Cm. 2H), 2,90-3,10 Cm. 4H). 3,25-3,60 Cm. 1H) ,

3,92-4,10 Cm, 2H), 4,50-4,66 Cm. 2H), 4,80-4,92

Cm, 1H), 5,60-5,76 Cm, 1H), 6,50-6,78 Cm, 1H),

7,06-7,44 Cm. 9H), 7.60-7,80 Cm, 1H) 3,54-8.61

Cm, 1H)

IR CCHC13) 3600-3100 Cbr.), 3000, 2929, 2865, 1669, 1632, 1572, 1512, 1455, 1437, 1394, 1368, 1305, 1277. 1148, 1077, 983, 909 cm¹

MS CFD): m/e 667 CM*. 100)

Analysa pro C4oH53Ns04^: vypočteno: C 71,93 H 8.00 N 10,49 nalezeno : C 72,17 H 7,71 N 10,40

Příklad 11

A. 3-C CN-Methy1)-N-Cterc.-butoxykarbonyl)amino)methy1)pyridin

3-C CN-Methy1)-N-Cterc.-butoxykarbonyl)amino)methy1)pyridin se připravuje v podstatě způsobem. který je podrobně popsán v příkladu 9B za použití 6,0 g C45.7 mmol) N-terc.- butoxykarbony 1)methylaminu, sloučeniny podle příkladu 9A, 9,02 g (55,0 mmol) 3-(chlormethy1)pyridlnu. 10,3 g <68,5 mmol) Jodidu sodného, 4,1 g <103 mmol) 60^ hydridu sodného ve 100 ml dimethylformamidu. Surový produkt se čistí radiální chromatografií <6 mm, za použití gradientu 20 až 100 % ethylacetátu v methylenchloridu Jakožto elučního činidla), čímž se získá 760 mg oranžového oleje.

NMR (CDCI3): δ 1.48 (s, 9H), 2.85 Cbr.s, 3H), 4.44 <s, 2H.

7,25-7,32 Cm. 1H). 7,50-7,65 Cm, 1H),. 8,50-8,60

Cm, 2H)

MS CFD): m/e 285 CM*. 100)

- 84 B. 3-((N-Methy1)aoino)methy1jpyridin

3-(<N-Methy1)amino)methy1)pyridin se připravuje odstraňováním chránící skupiny z 3-(<N-methyl)-N-(terc.-butoxykarbonyl)aminoimebhy1)pyridinu, sloučeniny podle příkladu 11A, způsobem, který je podrobně popsán v příkladu 9CC. 3-1(2 -N-(Methy1)aza-3 -oxo-3 -[3”-methoxykarbony 1-4“methy11 f eny1)propy1 ] py r i d i n

3-1 (2 -N-(Methy1)aza-3 -oxo-3 -[3-methoxykarbony 1-4“-methy 1]feny 1)propy11pyridin se připravuje v podstatě způsobem, podrobně popsaným v příkladu 9D, za použití 488 mg (4,0 mmol) 3-((Nmethy1)amino)methy1)pyridinu, sloučeniny podle příkladu 11B a 700 mg pentaf luorf eny les ter-3-methoxy karbony 1 -4-methy 1 benzoátu, sloučeniny podle přípravy 7, v 8 ml methylenchloridu, přičemž se však triethylamin do reakční směsi nepřidává. Surový produkt se čistí radiální chromatografií (4 mm, za použití gradientu 2 až 4 % methanolu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 495 mg čirého oleje ve výtěžku 83 % teorie*H NMR (CDC1₃)^; 6 2,64 (s. 3H), 2,90-3,15 (s, 3H), 3,90 (s, 3H),

4.50- 4,90 (m, 2H), 7,25-7,40 (m, 2,5H), 7,407,55 (m. 1H). 7,70-7,35 (m, 0,5H), 3,03 (s, 1H,

8.50- 9,00 (m, 1H)

IR (CHCI3): 3008. 1724, 1632, 1580, 1503, 1481, 1437, 1425, 1405, 1306, 1260, 1224, 1192, 1163, 1081, 1076, 1030, 836 cm-¹

MS (FD)= m/e 298 (Μ*, 100)

Analysa pro Ci7HieN203^: vypočteno: C 68,44 H 6,08 N 9,39 nalezeno : C 68,16 H 6,35 N 9,42

D. 3-[(2 -N-(Methy1)aza-3 -oxo-3 -13-karboxy-4-methy1]feny 1)propy13 pyr i d i nhydroch1oř i d

3-1(2 -N-(Methy 1 )aza-3 -oxo-3 -t3“-karboxy-4'‘-methyllfenyl)propy1]pyridinhydrochlorid se připravuje v podstatě způsobem, podrobně popsaným v příkladu 1C, za použití 189 mg (0,63 mmol) 3((2 - N-(methyl)aza-3 -oxo-3 -13“ -methoxykarbony 1-4”-methy1]fe- 35 ny1)propy1]pyridinu, sloučeniny podle příkladu 1113 a 46 mg <1,9 mmol) hydroxidu lithného v 10 ml směsi 3 ^: 1 tetráhydrofuranu a vody, reakční směs se vsak okyselí na hodnotu pH 2 za použití 5N kyseliny chlorovodíkové a následně se přidá chlorid lithný. Získanóí směs se několikrát promyje isopropanolem, vysuší se síranem sodným, zfiltruje se a za sníženého tlaku se odpaří k suchu, čímž se získá 150 mg bílé pěny.

Ή NMR <CDCl3>^: 6 2,63 Cs, 3H>. 3,03 Cs, 3H), 4,60-5,00 Cm, 2H,

7,10-7,70 Cm, 5H), 7,90-3,10 Cm, 1H), 3.50-9,00

Cm, 1H)

MS CFD): m/e 235 CM*. 100) hydrátu m i du (DCC),

E. [3S-C3Rx,4aR*,8aR*,2 Sx , 3 Rx)1-2-12 -Hydroxy-3 -fenylmethy14 - aza-5 - oxo-5 - C3‘‘-[l' -oxo-2 -N-Cmethy1)aza-3 -pyrid3 -y1propyl)-6-methy1)feny11penty1dekahydroisochinolin- 3-Nterc.-buty1karboxamid [3S-C3Rx,4aRx,3aRx,2 Sx,3 Rx)1-2-12 -Hydroxy-3 -fenylmethy1-4 -aza-5 -oxo- 5 - C3”-ll oxo-2 -N-Cmethy1)aza-3 -pyrid- 3 ylpropy1]-6-methy1)feny1]penty1dekahydroisochinolin- 3- N-terc.buty1karboxamid se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu ID za použití 177 mg CO,44 mmol) C3SC3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx,3 Rx)1-2-13 -amíno-2 -hydroxy-4 -feny11buty1dekahydroisochinolin-3-N-terc.-buty1karboxamidu, sloučeniny podle přípravy 2B, 143 mg <0,45 mmol) 3-1C2 -N-Cmethy1)aza-3 -oxo-3 13-karboxy-4-methy11feny1)propy11pyr i d i nhydrochloridu. sloučeniny podle příkladu 11D, 59 mg <0,44 mmol) 1-hydroxybenzotriazolCHOBT.H2O) a 91 mg (0,44 mmol) 1,3-dicyklohexylkarbodii v 5 ml tetráhydrofuranu. Získaný surový produkt se čistí radiální chromatográfií <2 mm, za použití gradientu 2 až 5 % methanolu v methylénchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 119 mg bílé pěny ve výtěžku 40 % teorie.

JH NMR <CDCl3)^: 6 1,14 Cs, 9H), 1,20-2,35 Cm, 18H), 2,48-3,10

Cm, 6H), 3,35-3,55 Cm, 1H), 3,95-4,13 Cm, 2H) ,

4,55 Cm. 3H), 5,72 Cbr.s, 1H), 6,70-6,35 Cm,

1H), 7,04-7.38 Cm, 10,5H), 7,65-7,32 Cm, 0,5H),

8,55-8,65 Cm, 1H)

- 86 IR (CHCI3): 3691, 3600-3100 (br.), 3429, 3008, 2929, 1670, 1634,

1512, 1481, 1455, 1394, 1368, 1246, 1075,1046, 910 cn'¹

MS (FD): m/e 668 (Μ*), 567 (100)

Analysa pro 0.^ioH53 N5O-4 ^: vypočteno-' C 71,93 H 8,00 N 10,49 nalezeno : C 71,63 H 7,85 N 10,34

Příklad 12

A. 4-[ (N-Cterc.-Butoxykarbony 1)amino)methy1]pyridin

Do roztoku 10,0 g (92 mmol) 4-amino)methy1)pyridinu v 500 ml methylenchloridu se přidá 21 g (97 mmol) terč --butoxykarbony1anhydridu. Získaná reakční směs se nechává reagovat přibližně 30 minut. Když je reakce v podstatě ukončena podle chromatografie v tenké vrstvě, promyje se reakční směs postupně nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou, vysuší se síranem sodným, zfiltruje se a zkoncentrouje se za získání surového produktu. Surový produkt se čistí bleskovou chromatografií ( za použití gradientu 50 až 100 % ethylacetátu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 15,23 g světle žlutého oleje ve výtěžku 80 %£ teorie.

NMR (CDC13): 5 1,46 Cs, 9H). 4,33 <d,J=5.91 Hz, 2H), 4.98

Cbr-s. 1H). 7,18-7.26 Cm, 2H), 8,54-8,56 Cm. 2H)

IR CCHCI3): 3458. 2982, 1715, 1605, 1565, 1507, 1455, 1418, 1396.

1369, 1348, 1275. 1248, 1166, 1069, 1050, 996, 862 cm“¹

MS CFD): m/e 209 CM*. 100)

Analysa pro ΟιιΗιβΝ2θ2^: vypočteno: C 63,44 H 7,74 N 13,45 nalezeno : C 63,44 H 7,71 N 13,49

B. 4-C <N-(Methy1)-N-(terc.-butoxykarbony1)amino)methy1)pyridin

Do studeného (0 C) roztoku 8,0 g C38 mmol) 4-(CN-Cterc.butoxykarbony1)amino)methy1]pyridinu, sloučeniny podle příkladu

12A, v 50 bezvodého .dimethylformamidu se přidá 1,00 g (41,8 mmol) hydridu sodného. Získaná reakční směs se míchá po dobu přibližně minut a pak se pomalu přidá 5,72 g (40,3 mmol) methy1jodidu.

Reakční směs se vlije do směsi methy lench lor i du a vody a proraz-i se. Vzniklé vrstvy se oddě l í a organická vrstva se promyje čtyřikrát IN roztokem hydroxidu sodného, vysuší se síranem sodným, zfiltruje se a za sníženého tlaku se odpaří k suchu (za použiti tepla), čímž se získá 7,54 g temně oranžového oleje ve výtěžku 83 % teor i e.

¹H NMR CCDCI3): 6 1,30-1,70 Cm, 9H) , 2.75-3,00 Cm, 3H). 4,42

Cbr.s, 2H), 7,12 Cd. J=4,73 Hz, 2H), 8,55 Cd,

J=5,54 Hz, 2H)

C. 4-C CN-(Methy1)amino)methy1)pyridindi hydrochlorid

4-C CN-(Methy1)amino)methy1)pyridindihydrochlorid se připravuje v podstatě způsobem, podrobně popsaným v příkladu 9C, za použití 1,15 g <5,17 mmol) 4-<CN-Cmethyl)-N-Cterc.-butoxykarbonyl)amino)methy1)pyridinu, sloučeniny podle příkladu 12B a 15 ml 5N kyseliny chlorovodíkové v 15 ml dioxanu za získání surového materiálu. Tohoto materiálu se přímo používá bez dalšího čištění.

*H NMR CDMSO-ds): 6 2,58 <s, 3H), 4.40 Cs, 2H), 8,15-8,25 Cm,

1H). 8,90-9,90 Cm, 1H), 10,22 Cbr.s, 2H)

IR CKBr): 3800-1800 <br.), 1638, 1599, 1503, 1428, 1233, 1193,

1145, 1067, 1002. 887, 809, 766, 593, 478 cm¹

D. 4-[<2 -N-(Methy1)aza-3 -oxo-3 -[3”-methoxykarbony 1-4-methylJfenyl)propy13 pyridin

3-CC2 -N-<Methy1)aza-3 -oxo-3 -[3-methoxykarbonyl-4”-methy 1 3 feny 1 )propyl 3 pyridin se připravuje v podstatě způsobem, který Je podrobně popsán v příkladu 9D za použití (5,17 mmol) pentafluorfeny1esteru 3-methoxykarbonyl-4-raethy1benzoátu, sloučeniny podle přípravy 7 a 2 ml tri ethy laminuu ve 20 ml bezvodého methylenchloridu. Získaný surový produkt se čistí radiální chromatografií <6 mm, za použití gradientu 2 až 4 % methanolu v methy lenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 617 mg produktu ve výtěžku 64 % teorie.

‘H NMR CCDC13)·- 6 2.62 <s, 3H), 2.80-3,20 <m. 3H), 3,70-4,00

Cm, 3H), 4,40-4,85 Cm, 2H), 7,00-7,60 Cm, 4H>,

8,03 Cs, 1H), 8,55-8,70 Cm, 2H)

IR CCHCI3):	3009. 2955, 1437, 1404,	1724. 1363 .	1634 1305	, 1604, , 1261,	1565, 1089,	1503, 1077 ,	1483, 1449, 1069 cm^-1
MS CFD): m/e 298 CM*. 100)
Analysa pro	Cl 7 Hl 8 N2 03 ^:
vypočteno: 1	C 68,44 H	6,03	N	9,39
nalezeno ^: l	C 68,65 H	6,20	N	9,41

Ε. 4-[C2 -N-CMethy1)aza-3 -oxo-3 -[3-karboxy-4”-methy1]feny1)propyl]pyridinhydrochlorid

4-(C2 -N-CMethyi)aza-3 -oxo-3 -[8-karboxy-4”-methyl]fenyl)propy11pyridinhydrochlorid se připravuje v podstatě způsobem, podrobně popsaným v příkladu 11D, za použití 124 mg <0,42 mmol) 4-[<2 -N- Cmethy1)aza-3 -oxo-3 -13-methoxykarbony 1-4”-methy11 feny 1)propy11 pyridinu, sloučeniny podle příkladu 12D a 30 mg <1,25 mmol) hydroxidu lithného v 10 ml směsi 3 1 tetrahydrofuranu a vody za získání 120 mg bílé pěny, které se používá bez dalšího čištění.

!H NMR <DMS0-d&): $ 2,54 <s, 3H), 2,98 Cs, 3H). 4,65-4,95 Cm,

2H), 7,20-8,00 Cm, 5H), 8,76-8,90 Cm, 2H)

IR CCHC13): 3400-3200 Cbr.), 1711, 1636, 1506, 1484, 1452,

1401, 1203, 1087, 1005, 925, 792, 744 cm“¹

MS CFD): m/e 285 CM*. 100)

F. [3S-C3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx,3 Rx)1-2-(2 -Hydroxy-3 -fenylmethyl4 - aza-5 -oxo- 5 - C3“-(l -oxo-2 -N-Cmethy 1 )aza-3 -pyrid4 -ylpropyll-6'*-methyl)fenyllpentyldekahydroisochinolin- 3-Nterc.-butylkarboxam i d

C3S-C3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx,3 Rx)]-2-(2 -Hydroxy-3 -fenylmethy1-4 -aza-5 -oxo- 5 - C3-[l oxo-2 -N-Cmethy1)aza-3 -pyrid- 4 ylpropy11 -6”-methyl)feny11penty1dekahydroisochinolin- 3- N-terc.buty1karboxamid se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu' ID za použití 109 mg <0,272 mmol) (3S(3Rx,4aRx,8aRx.2 Sx,3 Rx)l-2-(3 -amino-2 -hydroxy-4 -fenyi]butyldekahydroisochinolin-3-N-terc.-buty1karboxamidu, sloučeniny podle přípravy 2B. 92 mg CO.287 mmol) 4-CC2 -N-Cmethy1)aza~3 -oxo-3 (3”-karboxy-4“-methy11 feny 1)propy11pyridinhydrochloridu, slouče89 niny podle příkladu 12E, 37 mg <0,272 mmol) 1-hydroxybenzotriazolhy drátu CHOBT.H2O) a 56 πυτ <0,272 mmol) 1,3-dicyklohexy1karbodi imidu CDCC) ve 8 ml tetrahydrofuranu. Získaný surový produkt se čistí radiální chromatografi i <2 mm, za použití gradientu 2 až 6 % methanolu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 40 mg produktu ve výtěžku 22 % teorie.

»H NMR <CDCl3)^; 6 1,14 Cs, 9H), 1,20-2,35 <m, 13H), 2.45-2,70

Cm, 2H), 2,80-3,10 Cm, 5H), 3,25-3,55 Cm, 1H),

3,95-4,10 Cm, 2H), 4,38-4,78 Cm, 3H), 5,79

Cbr.s, 1H), 6,75-7,40 Cm, 10H), 8,60 Cbr.s, 2H)

IR CCHCls): 3600-3100, 3008, 2929, 2865, 1728, 1669, 1635, 1604, 1513, 1482, 1455, 1447, 1393, 1367, 1275, 1117, 1076, 910 cm^-1

MS CFD): _n/e 668 CM*. 100)

Analysa pro C4oH53Ns04^: vypočteno-' C 71,93 H 8,00 N 10,49 nalezeno - C 72,10 H 8,12 N 10,37

Příklad 13

A. 4-CC3 -N-CMethy1)aza-4 -oxo-4 -[3-methoxykarbony 1-4“-methy 1]feny1)propy1]pyridin

4-CC3 -N-CMethy1)aza-4 -oxo-4 -[3”-methoxykarbonyl-4“-methy llfenyl)propyl]pyridin se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu 9D za použití 803 mg C3.84 mmol)

2-[2-<N-Cmethyl)amino)ethyl]pyridindihydrochloridu, 500 mg <1,44 mmol pentafluorfeny1esteru 3-methoxykarbony1-4-methylbenzoátu. sloučeniny podle přípravy 7 a 2 ml triethylaminu ve 10 ml methylenchloridu. Získaný surový produkt se čistí radiální chromatograf i í C4 mm, za použití gradientu 50 až 100 % methanolu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 497 mg produktu ve výtěžku 64 % teorie.

NMR CCDC13): 5 2,62 Cs, 3H), 2,84-3,25 Cm. 5H). 3,62-4,00

Cm, 5H), 6,95-7,98 Cm, 6H), 3,38-8,62 Cm. 1H)

IR CCHCI3)·· 2954. 1723, 1626, 1594, 1571. 1504, 1473, 1436, 1405, 1302, 1259, 1153, 1100, 1033, 1052. 995, 919, 334 cm^-1

MS (FD): _n/e 312 (M*, ICO)

Analysa pro CielfeoNzQs:

vypočteno·- C 69,21 H 6,45 N 8,97 nalezeno C 63,97 H 6.84 N 8,95

B. 2-[(3 -N-(Methy1)aza-4 -oxo-4 -13”-karboxy-4-methy1]feny 1)propy1 ] py r i d i nhydroch1or i d

2-[(3 -N-(Methy 1 )aza-4 -oxo-4 -t3‘‘-karboxy-4-methyl]fenyl)propy1]pyridinhydroch1ořid se připravuje v podstatě způsobem, podrobně popsaným v příkladu 11D, za použití 153 mg (0,49 mmol) 4-[(3 -N-(methy1)aza-4 -oxo-4 -[3-methoxykarbony 1-4“-methy1]fenyl )propyl]pyridinu, sloučeniny podle příkladu 13A a 36 mg (1,47 mmol) hydroxidu lithného v 10 ml směsi 3 1 tetrahydrofuranu a vody za získání 134 mg hygroskopické bílé pěny, které se používá bez dalšího čištění.

*H NMR (DMS0-d6)^: S 2.40-2,55 (s, 3H), 2,85-3,90 (m, 8H),

7,20-3,85 (m, 7H)

IR (CHCI3): 3800-1800 (br.), 1715, 1631, 1540, 1506, 1484, 1474, 1451, 1406, 1242, 1166, 1085, 1044, 1001, 341 cm^-1

MS (FD): m/e 299 CM·*, 100)

C- [3S-(3Rx,4aRx,8aR*,2 S*,3 Rx)]-2-C2 -Hydroxy-3 -fenyImethy14 - aza-5 -oxo- 5 - (3-tl -oxo-2 -N-(methy1)aza-4 -pyrid2 -ylpropyl]-6”-methyl)fenyl]pentyldekahydroisochinolin- 3-Nterc.-buty1karboxami d [3S-(3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx,3 Rx)]-2-[2 -Hydroxy-3 -fenyImethy1-4 -aza-5 -oxo- 5 - (3”-tl oxo-2 -N-(methy1)aza-4 -pyrid- 2 ylpropyl]-6-methy1)feny1]pentyldekahydroisochinolin- 3- N-terc.buty1karboxamid se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu ID za použití 69 mg (0.17 mmol) [3S(3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx,3 Rx)]-2-[3 -amino-2 -hydroxy-4 -fenyljbutyldekahydroisochinolin-3-N-terc.-buty1karboxamidu, sloučeniny podle přípravy 2B, 60 mg (0,18 mmol) 2-[(3 -N-(methy1)aza-4 -oxo-4 [3-karboxy-4”-methy11 feny 1)propy1]pyridinhydrochloridu, sloučeniny podle příkladu 13B, 23 mg (0,17 mmol) 1-hydroxybenzotriazolhydrátu (H0BT.H2 0) a 35 mg (0,17 mmol) 1,3-dicyklohexy1karbodii 91 iuidu CDCC) ve 3 ml bezvodého tetrahydrof uranu za získání 60 mg produktu ve výtěžku 53 % teorie^AH NMR ¢00013): 6 0,3-3,55 Cm. 38H), 3,70-4,10 Cm, 2H), 4,35-4,65 Cm, 1H). 5,73-5,93 Cm, 111), 6,70-7,40 Cm, 1011),

7,42-7,70 Cm. 1H), 3,23 Cs, 0.5H). 3.55 Cs, 0,5H)

IR CCHCls)- 3691, 3600-3100, 3023, 3005, 2929, 1670. 1627, 1512. 1455, 1395, 1368, 1243, 1049, 910 ra¹

MS CFD): m/e 682 CM*. 100)

Analysa pro C41 H55N5O4^: vypočteno: 0 72,22 H 8,13 N 10,27 nalezeno 0 72,00 H 8,15 N 10,18

Příklad 14

A. 2-CC2 -N-CMethy1)aza-3'-oxo-3 -C3-methoxykarbony 1-4-methy 11 f eny1)propy13 pyraz i n

2-C(2 -N-CMethy1)aza-3 -oxo-3 -C3-methoxykarbony1-4-methy 1 3 feny 1 ) propy I 3 py razí n se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu 110 za použití 204 mg Cl,66 mmol) 2- C2-CN- Cmethy1)amino)methyl]pyrazindihydrochloridu a 300 mg ¢0,83 mmol) pentafluorfeny1esteru 3-methoxykarbony 1-4-methy1benzoátu. sloučeniny podle přípravy 7 v 10 ml methylenchloridu. Získaný surový produkt se čistí radiální chromatografií C4 mm, za použití gradientu 10 až 30 % acetonu v methylenchloridu jakožto elučniho činidla), čímž se získá 212 mg světle oranžového oleje ve výtěžku 85 % teorie.

*H NMR CCDC1₃): 6 2,61 Cs, 3H), 3,07 Cs, 3H), 3,88 Cs. 3H), 4,554,95 Cm, 2H). 7,20-7,38 Cm, 1H), 7,40-7,60 Cm.

1H). 8.04 Cs. 1H). 8,35-8,80 Cm. 1H)

IR CCHCI3): 3022. 3007. 2954, 1724, 1634, 1503, 1483, 1449. 1437, 1402, 1303, 1261. 1138. 1152, 1089, 1077, 1057, 1020 cm“¹

MS CFD): m/e 299 CM*, 100)

B- 2-CC2 -N-CMethy1)aza-3 -oxo-3 -C3”-karboxy-4-methy13 feny 1>propy13 pyraz i n

2-CC2 -N-CMethy1)aza-3 -oxo-3 -C3-karboxy-4-methy13feny1)92 propy1Jpyrazin se připravuje v podstatě způsobem, podrobně popsaným v příkladu 11D, za použití 150 mu <0.50 mmol) 2-[<2 -N-Cmethy1)aza-3 -oxo-3 -[3-methoxykarbony 1-4“-methy11f eny1)propy11pyrazinu. sloučeniny podle příkladu 14A a 36 mg <1,50 mmol) hydroxidu lithného v 8 ml směsi 3 ' 1 tetrahydrof uranu a vody za získaní 121 mg bílé pěny ve výtěžku 35 % teorie.

¹H NMR CCDCI3)^; 6 2,65	Cs, 3H), 3.	11 Cs, 3H),	4,55	-4,93	Cm, 2H)
7,20-7,	,38 Cm, 1H)	, 7,50-7,62	Cm,	1H) ,	8,18 Cs
1H), 8,	,40-3,35 Cm.	3H)
IR CCHCI3): 3700-2400 Cbr.), 1700,	1634, 1530,	1504,	1433 ,	1450,
1402, 1304,	1176, 1152.	1086, 1020,	923,	367,	837 cm~

MS CFD): m/e 286 CM*. 100)

C. [3S-C3Rx,4aR*,8aR*,2 Sx,3 Rx)]-2-[2 -Hydroxy-3 -fenylmethy14 -aza-5 -oxo-5 - <3”-Cl -oxo-2 -N-Cmethy1)aza-3 -pyrazin2 -ylpropy11-6-methy1)feny11pentyldekahydroisochinolin- 3-Nterc.-butylkarboxam i d

13S-C3Rx,4aRx,8aR*,2 S*,3 R*)l-2-[2 -Hydroxy-3 -fenylmethy1-4 -aza-5 -oxo-5 -<3-[l oxo-2 -N-Cmethy1)aza-3 -pyrazin- 2 ylpropy11-6-methyl)feny11pentyldekahydroisochinolin- 3- N-terc.buty1karboxamid se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu ID za použití 75.1 mg <0,187 mmol) [3S<3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx,3 R*)1-2-13 -amino-2 -hydroxy-4 -feny11buty1dekahydroisochinolin-3-N-terc.-buty1karboxamidu, sloučeniny podle přípravy 2B, 59,3 mg <0,208 mmol) 2-[<2 -N-(methy1)aza-3 -oxo-3 [3-karboxy-4-methy11 feny1)propyl1pyrazinu. sloučeniny podle příkladu 14Β» 25,3 mg <0,187 mmol) 1-hydroxybenzotriazolhydrátu <H0BT-H20) a 38,6 mg <0,187 mmol) 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu <DCC) ve 2 ml bezvodého tetrahydrofuranu za získání 89 mg bílé pěny ve výtěžku 71 % teorie.

*H NMR <CDC1₃) S 1,13 Cs. 9H), 1,15-2,30 <s, 19H), 2.47-2.70

Cm, 2H), 2,90-3,08 Cm, 5H), 3.30-3,50 <m, 1H),

3,95-4,05 Cm, 1H), 4,50-4,65 Cm, 2H), 4,83 Cbr.s, 1H). 5,77 Cm, 1H), 6,70-6,90 Cm, 1H), 7.02-7.38

Cm, 3H). 3,48-8.58 Cm. 2.5H). 3,71 Cs. 0.5H)

IR (CHCI3): 3690, 3613, 3600-3200 Cbr.), 3025, 3009, 2977, 2929,

1670. 1636, 1513. 1455. 1395. 1368. 1077. 1047. 1020,

979 cm'¹

MS (FD)'- m/e 669 CM*. 100)

Příklad 15

A - 2- [C2-N-Cterč.-Butopxykarbony 1)azopropy1]naftalen

Do roztoku 2.0 g (15.25 mmol) N-terc.-butoxykarbony 1)methy1aminu, sloučeniny podle příkladu 9A, ve 40 ml bezvodého dimethylformamidu se přidá 622 mg (15,30 mmol) 60^ hydridu sodného. Po přibližně jedné hodině se přidá 3,38 g (15,30 mmol) 2-(brommethy1)naftalénu a získaná reakční směs se nechává reagovat po dobu pěti hodin a pak se vlije do směsi methylenchloridu a vody. Získané vrstyvy se oddělí a organická vrstva se promyje dvakrát vodou, jednou nasyceným roztokem uhličitanu sodného, jednou solankou a pak se vysuší síranem sodným a zfiltruje se. Získaný surový produkt se čistí radiální chromatografií (6 mm, za použití gradientu 0 až 5 % ethylacetátu v hexanu jakožto elučního činidla), čímž se získá 2,25 mg čirého oleje ve výtěžku 54 % teorie.

‘H NMR CCDCI3): 5 1,50 Cs, 9H), 2,75-2,95 Cm, 3H). 4,58 Cs, 2H) .

7,30-7,90 Cm, 7H)

IR CCHCI3)·· 3010, 2980, 2932, 1686, 1510, 1482, 1455, 1425, 1394, 1368, 1244. 1147, 1049, 875. 818 cm¹

MS (FD): _m/e 271 CM*. 100)

Analysa pro CiyH2iN02^: vypočteno: C 75.25 H 7,80 N 5,15 nalezeno C 75,42 H 7,98 N 5,08

B. 2-C2-Azopropy1)naftalen

Roztok 505 mg (1,86 mmol) 2-C(2-N-(terc.-butoxykarbonyl)azopropy1]naftalénu, sloučeniny podle příkladu 15A, v 10 ml 10^ roztoku kyseliny trifluoroctové v methylenchloridu se nechává reagovat po dobu přibližně jedné hodiny. Výsledná reakční směs se pak odpaří za získání zbytku. Tento zbytek se opat rozpustí v methylenchloridu, promyje se nasyceným roztokem uhličitanu sodného. vysuší se síranem sodným, zfiltruje se a zkoncentruje se za získání 300 mg žlutého oleje ve výtěžku 94 / teorie, kterého se dále používá bez čistění.

*H NMR (CDCI3): 8 2,49 (s, 311), 3,91 (s, 2H), 7,38-7.55 (m, 3H),

7,70-7,90 (m, 411)

IR (CHCI3): 3059, 3011, 2974, 2941, 2852, 2798, 1681, 1602, 1509, 1479, 1440, 1272, 1126, 1244, 1095, 909, 894, 857,

819 cm^-1

MS (FD): _n/_e 171 <M*. 100)

0. 2-[(2 -N-CMethy1)aza-3 -oxo-3 -[3”-methoxykarbonyl-4-methy 1 3 f eny1)propy11naf ta1en

2-[(2 -N-CMethy1)aza-3 -oxo-3 -[3“-methoxykarbony 1-4-methy 1 ] feny 1) propy 13 naf ta len se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu 11C,za použití 71 mg (0,42 mmol) 2-(2-azopropy1)naftalénu, sloučeniny podle příkladu 15B, a 100 mg (0,28 mmol) pentafluorfeny1esteru 3-methoxykarbony1-4-methylbenzoátu, sloučeniny podle přípravy 7, v 5 ml bezvodého methylenchloridu. Získaný surový produkt se čistí radiální chromatografií (1 mm, za použití gradientu 10 až 35 % ethylacetátu v hexanu jakožto elučního činidla), čímž se získá 79 mg oleje ve výtěžku 81 % teorie.

⁴H NMR (CDCl3)^; 6 2.61 (s, 3H), 2,75-3,25 Cm, 3H), 3.60-4,00 (m, 3H), 4.55-5.00 (m. 2H), 7,08-8.18 Cm, 10H)

IR (CHCI3): 3029. 3011. 2954, 2930, 1724, 1628, 1503, 1483, 1437, 1404, 1305, 1272. 1247, 1166, 1151, 1089, 1076, 817 cm-¹

Analysa pro C22H2iN03^: vypočteno: C 76,06 H 6,09 N 4,03 nalezeno : C 76.31 H 6.37 N 3.77

D. 2-C(2 -N-CMethyl)aza-3 -oxo-3 -13-karboxy-4-methy13 feny 1 )propy13 naf ta1en

2-1(2 -N-(Methy1)aza-3 -oxo-3 -C3-karboxy-4-methyl3fenyl)propy13nafta len se připravuje v podstatě způsobem, podrobně popsaným v příkladu 1C, za použití 51 mg (0,15 mmol) 2-1(2 -N(methy1)aza-3 -oxo-3 -ť3-methoxykarbonyl-4 -methyl3fenyl)propy13 naftalénu, sloučeniny podle příkladu 15C a 8 mg (0,30 mmol) hydroxidu lithného v 5 ml směsi 3 ' 1 tetrahydrofuranu a vody za získání 48 mg bílé pěny ve výtěžku 96 % teorie, které se dále používá bez čištění.

Ul NMR CDMSO-de): 6 2,38-2.60 Cm, 3H), 2,76-3,00 Cm, 3H). 4,504,90 Cm, 2H). 7,13-8,00 Cm, 10H)

MS CFD): m/e 347 CM*, 100)

E. C3S-C3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx,3 Rx)]-2-[2 -Hydroxy-3 -fenyImethy14 -aza-5 -oxo-5 - C3-[l -oxo-2 -N-Cmethy1)aza-3 -naft2 -y1propy13-6”-methy1)feny11penty1dekahydroisoch inolin- 3-Nterc.-buty1karboxam i d [3S-C3Rx,4aRx,8aRx,2 'Sx,3 Rx)3-2-[2 -Hydroxy-3 -íenyImethy1-4 -aza-5 -oxo-5 -C3”-fl oxo-2 -N-Cmethy1)aza-3 -naft- 2 -ylpropy13-6”-methyl)feny13 penty1dekahydroisochinolin- 3-N-terc.-buty 1 karboxam i d se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu ID za použití 46 mg CO,11 mmol) E3S-C3Rx4aRx,8aRx,2 Sx,3 Rx)3-2- £3 -amino-2 -hydroxy-4 -feny13buty1dekahydroisochinol in-3-N-terc.-buty1karboxamidu, sloučeniny podle přípravy 2B. 38 mg CO,11 mmol) 2-£<2 -N-Cmethy1)aza-3 -oxo-3 £3”-karboxy-4“-methy13 feny1)propy13naftalénu, sloučeniny podle příkladu 15D, 15 mg CO,11 mmol) 1-hydroxybenzotriazolhydrátu CHOBT.H2O) a 23 mg CO,11 mmol) 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu CDCC) ve 0,2 ml bezvodého tetrahydrofuranu. Získaný surový produkt se čistí radiální chromatografii C2 mm, za použití gradientu O až 5 % methanolu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 54 mg bílé pěny ve výtěžku 68 % teorie.

£cc3d -65,35 CC =* 1,01, methanol) *H NMR CCDC13): 5 1,13 Cs, 9H), 1,15-2,35 Cs, 15H), 2,45-3.10

Cm. 6H>, 3.20-3,55 Cm. ÍH). 3.82-4.10 Cm, 2H>.

4,50-4,65 Cm. 2H). 4,88 Cbr.s, ÍH). 5.69 •'br.s.

ÍH). 6,50-6,83 Cm. ÍH). 6.95-7,90 Cm, 15H)

IR CCHC13): 3622. 3600-3100 Cbr.). 3024, 3008, 2976, 2929. 1670.

1630, 1512, 1455. 1394. 1368, 1246. 1200, 1076. 1047,

910, 819 cra'¹

MS CFD): m/e 718 CM*. 100), 616 C100)

Analysa pro CasHseN^O^:

vypočteno: C 75,39 II 7,37 nalezeno : C 75,32 H 7,38

N 7,81 N 8,04

Příklad 16

1-CC2 -N-CMethy1)aza-3 -oxo-3 -[3“-methoxykarbony 1-4“-met hy11f eny1)propy13 naf ta1en l-[(2 -N-(Methy1)aza-3 -oxo-3 -13-methoxykarbonyl-4-methy 11 feny 1 ) propy 11 nafta len se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu 9D, za použití 57 mg (0.56 mmol) triethylaminu, 87 mg (0,42 mmol) N-methyl-l-naftalenmethylaminhydrochloridu a 100 mg (0,28 mmol) pentaf1uorfeny1esteru 3-methoxy karbony 1-4 -methy lbenzoátu, sloučeniny podle přípravy 7, v 5 ml bezvodého methylenchloridu. Získaný surový produkt se čistí radiální chromatografií <2 mm, za použití gradientu 30 až 50 % ethylacetátu v hexanu jakožto elučního činidla), čímž se získá 97 mg světle žlutého oleje ve výtěžku 100 % teorie.

	NMR (CDCI3): δ 2,56 Cbr.s.	3H) ,	2.70-3,30 Cm, 3H),	3,60-4,00
	Cm, 3H), 4.85	-5,40	Cm. 2H), 7.10-8,30	Cm, 10H)
IR	CCHCI3): 3029. 3010, 1723,	1511,	1483, 1436, 1405,	1304, 1252,
	1222, 1212, 1210,	1192.	1090, 1076, 804 cm	-1
MS	CFD): m/e 347 CM*. 100)

Analysa pro C22H2iN03^: vypočteno: C 76,06 H 6,09 N 4,03 nalezeno - C 76.33 H 6.28 N 4,14

B. 1—[(2 -N-(Methy1)aza-3 -oxo-3 -C3-karboxy-4”-methyl3fenyl)propyl]naftalen —C C2 -N-CMethy1)aza-3 -oxo-3 -£3-karboxy-4”-methy13 feny1)~ propy13naftalen se připravuje v podstatě způsobem, podrobně popsa ným v příkladu 1C, za použití 89 mg (0,26 mmol) l-[(2 -N-(methy 1)aza-3 ' -oxo-3 - [ 3 -methoxy karbony 1 -4 -methy 13 f eny 1)propy 13 naf talénu, sloučeniny podle příkladu 16A a 13 mg (0,52 mmol) hydroxidu lithného v 8 ml směsi 3 : 1 tetrahydrof uranu a vody za získání 86 mg bílé pěny ve výtěžku 100 % teorie, které se dále používá bez čištění.

¹H NMR CCDCI3): 6 2,64 Cm, 3H>, 2,70-3,25 Cm.

Cm, 2H>, 7,05-3,35 Cm, 10H)

IR CCHCI3)^: 3700-2300, 1700, 1623, 1504, 1439 1199, 1073, 1045, 873 cm¹

MS CFD): m/e 333 CM*, 100)

3H), 4,30-5,30 8,70 Cbr.s, 1H) 1450, 1404, 1263,

Analysa pro C2iHi9N03^:vypočteno: C 75,66 H 5,74 nalezeno : C 75,91 H 5,96

N 4,20 N 4,22

C. 4 ' 1 '

C3S-C3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx , 3 Rx)]-2-(2 -Hydroxy-3 -fenylmethy1aza-5 -oxo-5 - C3-Cl -oxo-2 -N-Cmethy1)aza-3 -naft-ylpropy11-6”-methy1)f eny1]penty1dekahydroisochinolin- 3-Nterc.-buty1karboxam i d [3S-C3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx,3 Rx)1-2-(2 -Hydroxy-3 -fenylmethy1-4 -aza-5 -oxo-5 -C3”-[l oxo-2 -N-Cmethy1)aza-3 -naft- 1 -ylpropy 11 -6”-methy1)feny11pentyldekahydroisochinolin- 3-N-terc.-buty lkarboxamid se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu ID za použití 80 mg CO,20 mmol) C3S-C3Rx4aRx,8aRx,2 Sx,3 Rx)l-2- [3 -amino-2 -hydroxy-4 -feny 1]butyldekahydroisochinolin-3-N-terc.-butylkarboxamidu, sloučeniny podle přípravy 2B, 66 mg CO,20 mmol) 1-((2 -N-Cmethy1)aza-3 -oxo-3 [ 3 -karboxy-4-methy Uf eny1)propy1]nafta1enu, s1oučen i ny pod1e příkladu 16B, 27 mg (0,20 mmol) 1-hydroxybenzotriazolhydrátu CH0BT.H20) a 42 mg (0.20 mmol) 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu CDCC) ve 0,5 ml bezvodého dimethylformamidu. Získaný surový produkt se čistí radiální chromatografií <2 mm, za použití gradientu O až 4 % methanolu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 86 mg bílé pěny ve výtěžku 86 % teorie.

*Η NMR CCDC13)- S 1,13 Cs. 9H), 1,10-4.60 Cm, 28H), 4,80-5.40

Cm, 2H). 5,65 Cm, 1H), 6.60-7,60 Cm, 13H),

7,75-7,95 Cm. 2H), 8,10-8,25 Cm. 1H)

IR CCHCI3): 3600-3100 Cbr.). 3028, 3009, 2929, 1670, 1631, 1512,

1455, 1394, 1368. 1259, 1075, 1047, 910, 837 cm-¹

MS CFD): m/e 718 CM* + 1), 616 C100)

Analysa pro C^sHsďN^O^: vypočteno: C 75,39 H /,87 N 7,31 nalezeno C 75,59 H 7.79 N 7,63

Příklad 17

A. [ (2 -N-(Methy1)aza-3 -oxo-3 -(3-methoxykarbony 1-4”-methy 1f eny1)propy1]benzen [(2 -N-(Methy1)aza-3 -oxo-3 -C3”-methoxykarbony1-4-methy 1feny 1)propy1]benzen se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu 9D, za použití N-methy11-N-benzylaminu a pentafluorfeny1esteru 3-methoxykarbony1-4-methy1benzoátu, sloučeniny podle přípravy 7, v bezvodém methylenchloridu.

NMR CCDCU): 6 2.59 Cs, 3H), 2,75-3,15 Cm, 3H), 3,70-3,95

Cm, 3H), 4,40-4,80 Cm, 2H), 7,00-7,55 Cm, 7H), 8,02 Cs, 1H)

IR CCHC13): 3030, 3010, 1723, 1628, 1497, 1454, 1437. 1404, 1359, 1303, 1242, 1195, 1165, 1089, 836 cm“¹

MS CFD): m/e 297 CM*, 100)

Analysa pro C18H19NO3:

vypočteno: C 72,71 H 6,44 N 4,71 nalezeno : C 72,72 H 6,49 N 4,88

B. [C2 -N-(Methy1)aza-3 -oxo-3 -C3“-karboxy-4”-methy1feny 1)propy1]benzen [ (2 -N-(Methy1)aza-3 -oxo-3 -C3”-karboxy-4”-methylfeny 1 )propy13benzen se připravuje v podstatě způsobem, podrobně popsaným v příkladu IC, za použití 110 mg (0,37 mmol) [C2 -N-Cmethyl)aza-3 -oxo-3 -13”-methoxykarbony1-4”-methy11 fenyl)propy11 nafta lénu, sloučeniny podle příkladu 17A a 18 mg (0.74 mmol) hydroxidu lithného v 10 ml směsi 3 : 1 tetrahydrofuranu a vody, přičemž se však ve chvíli, kdy je reakce v podstatě ukončena, reakční směs rozdělí mezi 10 ml IN kyseliny chlorovodíkové a 10 ml ethylacetátu. Vytvořené vrstvy se oddělí a vodná fáze se extrahuje 10 ml ethylacetátu- Ethylacetátové extrakty se promyjí solankou, vysuší se síranem sodným a zfiltrují se. Získaný surový produkt se čistí radiální chromatografií C4mm, za použití gradientu 10 až 50 % methanolu v methylenchloridu) za získání 37 mg bílé pevné látky ve výtěžku 83 % teorie.

!H NMR CCD3ÚD): 6 2,51 Cs, 3H) , 2.75-3,10 Cm, 3H) . 4,40-4.85 (η. 2H). 6,90-7,90 (m, 8H)

IR (CHCI3): 3800-2300 (br.). 1616, 1573. 1497, 1454, 1402. 1879.

1261, 1101, 1077, 833 cm’¹

MS (FD): _n/e 283 (Μ* , 100)

C. [3S-(3Rx,4aRx,8aRx,2 S* , 3 Rx)]-2-(2 -Hydroxy-3 -fenylmethy1 4 -aza-5 -oxo-5 - (3-[l -oxo-2 -N-(nethy1)aza-3 -fenylpropy1J-6-nethy1)f eny1]pentyldekahydroisochinolin- 3-N-terč.buty1karboxamid [3S-(3Rx,4aR*,8aR*,2 S*,3 R*)]-2-[2 -Hydroxy-3 -fenylmethy1-4 -aza-5 -oxo-5 -(3-[l -oxo-2 -N-<methy1)aza-3 -fenylpropy11 6-methy1)feny 1]pentyldekahydroisochinolin-3-N-terc.-buty1karboxamid se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu ID za použití 99 mg (0,25 mmol) [3S-(3Rx,4aRx,8aRx2 3χ,3 Rx)]-2-[3 -amino-2 -hydroxy-4 -feny 1]butyldekahydroisochinol in-3-N-terc --buty lkarboxamidu , sloučeniny podle přípravy 2B, 70 mg (0,25 mmol) [(2 -N-<methy1)aza-3 -oxo-3 -[3“-karboxy-4“methy1]feny 1)propy1]naftalénu, sloučeniny podle příkladu 17B, 33 mg (0,25 mmol) 1-hydroxybenzotriazolhydrátu (HOBT.H2O) a 51 mg (0,25 mmol) 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (DCC) ve 3 ml bezvodého dimethylformamidu. Získaný surový produkt se čistí radiální chromatografií (4 mm, za použití gradientu 2 % methanolu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 108 mg bílé pěny ve výtěžku 66 % teorie.

¹H NMR (CDCI3): S 1,17 (s. 9H). 1,20-3,10 (m, 26H), 3,25-3.55 (m. 1H), 3.90-4,17 (m, 2H). 4,35-4.80 (m, 2H),

5,71 (br.s, 1H), 6,55-6,80 (m, 1H), 7,00-7,42 (m. 11H), 8,00 (s. 1H)

IR (CHCI3)·· 3600-3100 (br.). 3011. 2931. 2861. 1672. 1631, 1515. 1455, 1391, 1368. 1250. 1079, 1047. 910 cm¹

MS (FD): _m/e 668 (M-. 100)

Analysa pro C41H54N4O4^: vypočteno: C 73,84 H 8,16 N 8,40 nalezeno C 73,81 H 8,39 N 8,35

100

Příklad 18

A- [ <2 -Aza-3 -oxrj-3 -[3-methoxykarbony 1-4-methy1fenyl)propy11 benzen t(2 -Aza-3 -oxo-3 -[3-methoxykarbony1-4-methy1feny1 )propy1]benzen se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu 11C. za použití 150 mg <0,416 mmol) pentafluorfeny1esteru 3-methoxykarbony 1-4-methy1benzoátu, sloučeniny podle přípravy 7 a 67 mg <0,62 mmol) benzylaminu v 5 ml methylenchloridu. Získaný surový produkt se čistí radiální chromatografií <1 mm, za použití 50 % hexanu v ethylacetátu jakožto elučního činidla), čímž se získá 99 mg produktu ve výtěžku 84 % teorie.

IR (CHCI3)'- 3452, 3031. 3012. 2954. 1724. 1660, 1612. 1522. 1491.

1454. 1437, 1400, 1309, 1249, 1191, 1152, 1083, 1029 cm^-1

MS CFD): m/_e 233 <M⁺, 100)

B. [C2 -Aza-3 -oxo-3 -C3” -karboxy-4*' -methylf enyl )-propyl] benzen

1-CC2 -Aza-3 -oxo-3 -C3“-karboxy-4-methyIfenyl)propyl]benzen se připravuje v podstatě způsobem, podrobně popsaným v příkladu 1C, za použití 66 mg (0,23 mmol) [<2 -aza-3 -oxo-3 -[3-methoxykarbony 1 -4“ -methyl]feny1)propy1]benzenu, sloučeniny podle příkladu 18A a 17 mg (0,23 mmol) hydroxidu lithného v 5 ml směsi 3 : 1 tetrahydrofuranu a vody, za získání 64 mg bílé pevné látky ve výtěžku 100 % teorie, které se dále používá bez Čištění.

NMR (CDCI3): 5 2.60 (s, 3H), 4,50-4,60 (m, 2H). 7.15-7,40 (m,

6H), 7,80-7,90 (m. 1H). 8.39 (s. 1H). 8,98-9,10 (m. 1H)

IR (CHCI3): 4000-2000 (br.), 3296, 3070, 3031. 2977, 2930, 1700, 1636, 1610, 1570. 1545. 1497. 1416, 1310. 1264, 917, 698, 671 cm^-1

MS (FD): _m/e 269 (M^-*·, 100)

Analysa pro C16H15NO3:

vypočteno: C 71,36 H 5,61 N 5,20 nalezeno C 71.42 H 5,99 N 5,12

101

0. í3S-C3R*,4aRx,8aRx,2 S*- 3 R*)1-2-(2 -Hydroxy-3 -fenylmethy14 -asa- 5 -oxo-5 - <3-[1 -oxo-2 -aza-3 -fenylpropyl]-6”methyl )feny11pentyldekahydroisochinolin- 3-N-terc. -buty lkarboxa1 3S-C3R* , 4aRx . GaK* . 2 S* , 3 K* ) J -2-(2 '-Hydroxy-3 -feny lmethy i aza- 5 -oxo- 5 -C3-(l

-oxo-2

-aza-feny 1propy11-6“methy1) f eny1]pentyldekahydroisochino1 in- 3-N-terc.- buty1karboxamid se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu ID za použití 72 mg (0,13 mmol) (3S-C3R*,4aRx,8aRx2 S*,3 Rx)]-2-13 -amino-2 -hydroxy-4 -feny 11butyldekahydroisochinolin-3-N-terc.-butylkarboxamidu, sloučeniny podle přípravy 2B, mg (0,13 mmol) [(2 -aza-3 -oxo-3 -(3”-karboxy-4 -methylfeny1)-propy11 benzenu, sloučeniny podle příkladu 18B, 24 mg (0,18 mmol) 1-hydroxybenzotriazolhydrátu (HOBT.H2O) a 37mg (0,18 mmol)

1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (DOG) ve 3 ml bezvodého tetrahydrofuranu. Získaný surový produkt se čistí radiální chromatografií (1 mm, za použití gradientu 0 až 5 % methanolu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 72 mg bílého prášku.

NMR (CDCI3): 6 1,06 (s, 9H), 1,15-2,70 (m, 21H), 2.85-3,05 (m, 2H). 3,48-3,55 (m, 1H), 3,75-4,00 (m, 2H),

4,50-4,70 Cm, 3H), 5,68 (s, 1H), 6,75-7,42 Cm,

12H), 7,76 (m, 1H)

IR (CHCI3): 3429, 3600-3100 (br.), 3009, 2929, 2865, 1657, 1606,

1517, 1497, 1455. 1394, 1368, 1277. 1145, 1046, 910 cm'¹

Analysa pro C40H52N4O4:

vypočteno: C 73,59 H 8.03 N 8.58 nalezeno = C 73.31 H 7,92 N 8,43

Příklad 19

A. 1-(N-(Methy1)-N-(terč.-butoxykarbony 1)amino)methy1-4-fluorbenzen

1-(N-(Methy1)-N-(terč.-butoxykarbony 1)amino)methy1-4-fluorbenzen se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně, popsán v příkladu 15A za použití 3,0 g (22,9 mmol) N-terc.-butoxykarbony1)methylaminu, sloučeniny podle příkladu 9A, 3,97 g (27,4

102 mmol) 4-fluorbenzyIchloridu, 604 mg (25,2 mmol) hydridu sodného, 0,2 mg (25,2 mmol) jodidu sodného v 6,0 ml bezvodého dimethylformamidu. Získaný surový produkt, se čistí bleskovou chromatografií (za použití gradientu 5 až 10 ť ethylacetátu v hexanu jakožto elučního činidla), čímž se získá 3,74 mg čirého oleje ve výtěžku 68 %. teorie.

^JH NMR CCDCI3): 6 1,47 (s, 9H), 2,80 (br.s, 21H), 4,38 (s, 2H), 6,90-7,25 (m, 4H),

IR CCHCI3): 3031, 2981, 2932, 1686, 1607, 1510, 1481, 1455, 1428,

1394, 1368, 1314, 1300, 1294, 1173. 1147, 878, 822 cm“¹

MS (FD): m/e 239 (M*), 469 (100)

Analysa pro C13H18NO2F·vypočteno: C 65,25 H 7,58 N 5,85 F 7,94 nalezeno : C 65,10 H 7,48 N 5,81 F 7,81

B. l-(N-(Methy1)amino)methy1-4-fluorbenzenhydrochlorid l-(N-(Methy1)amino)methy1-4-fluorbenzenhydrochlorid se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu 9C, za použití 2,0 g (8,36 mmol) 1-(N-(methy1)-N-(terč--butoxykarbonyl)amino)methy1-4-fluorbenzenu, sloučeniny podle příkladu 19A. 10 ml 5N kyseliny chlorovodíkové v 10 ml dioxanu za získání 1,38 g bílé pevné látky ve výtěžku 95 % teorie.

MS (FD): m/e 139 (M* + 1, 100)

IR (CHCI3): 2989, 2934, 2857, 2776. 2711, 2432, 1603. 1516, 1477.

1440, 1422, 1236, 1167. 838. 825. 772, 548, 501 cm“¹

C- l-[<2 -N-(Methy1)aza-3 -oxo-3 -[3“-methoxykarbony1-4-methy 1 3 feny 1)propy13-4-fluorbenzen l-[(2 -N-(Methy1)aza-3 -oxo-3 -[3”-methoxykarbony1-4”-methy 13 feny 1 ) propy 13 -4-f luorbenzen se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu 9D, za použití 520 mg (1,44 mmol) pentafluorfeny1esteru 3-methoxykarbony 1-4-methylbenzoátu, sloučeniny podle přípravy 7, a 351 mg (2,17 mmol) 1-(NCmethy1 )amino)methy1-4-fluorbenzenhydrochloridu, sloučeniny podle příkladu 19B a 0,5 ml triethylaminu v 5 ml methylenchloridu. Získaný surový produkt se čistí bleskovou chromatografi i (za použití

108 grád i ent.u :.:O až 30 ethy 1 acetátu v hexanu jakožto elučního

nidl a), čímž se získá 3	76 ne:		aného produktu ve výběžku
teor i e-
¹ H NMR CCDCI3) 8 2,61 <	s. 3H)	··> . i	80-3,10	(n, 31!) , 8,87 Cbr
3H), 4	,40-4,	30 C	m, 2H),	7.00-7.55 Cm, 6
8,02 Cs.	1H)
IR CCHCI3): 3029, 3009,	2954,	2931	, 1724,	1629, 1511, 1484,
1404, 1355,	1805,	1157	, 1089.	1076, 970. 384, 3!
MS CFD): m/e 315 CM*, 100)
Analysa pro CieHieNOsF:
vypočteno: 0 68,56 H	5,75	N	4,44	F 6,02
nalezeno C 63,36 H	5,89	N	4,61	F 6,10
		X

D. 1-[C2 -N-CMethy1)aza-3 -oxo-3 -<3-karboxy-4-methy1 feny 1)propy1]-4-fluorbenzen

1-[C2 -N-CMethy1)aza-3 -oxo-3 -<3-karboxy-4-methylfeny1)propy11-4-fluorbenzen se připravuje v podstatě způsobem, podrobně popsaným v příkladu 1C, za použití 269 mg <0,35 mmol) l-[<2 -N<methy1)aza-3 -oxo-3 -13-methoxykarbony 1-4-methyl 1 feny 1)propy 11 4-fluorbenzenu, sloučeniny podle příkladu 19C a 102 mg <4,03 mmol) hydroxidu lithného v 10 ml směsi 3 : 1 tetrahydrofuranu a vody, přičemž se získá 254 mg čiré amorfní látky ve výtěžku 99 % teor i e¹H NMR <CDCl3)^; 5 2,63 Cs, 3H). 2,30-3,10 <m, 3H), 4,40-4.80 Cm, 2H). 7.00-7,60 Cm, 6H), 8,17 Cs, 1H)

IR CCHC1₃)^: 3700-2300 Cbr.), 1699, 1628, 1609, 1511, 1484, 1450.

1403, 1355, 1302, 1158, 1097, 1076, 924, 851, 823 cm^-1

MS CFD): m/e 301 CM*), 603 C100)

E. C3S-C3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx , 3 Rx)]-2-[2 -Hydroxy-3 -fenylmethy 14 -aza-5 -oxo- 5 - C3- [1 -oxo-2 -N-Cmethy1)aza-3 <4 fluorfeny1)propy1]-6-methyl)f eny11pentyldekahydroisoch inolin-3N-terč.-butylkarboxamid

13S-C3R*,4aRx,3aRx,2 za-5 -oxo-5 -C3-[l

S*,3 Rx)]-2-[2 -Hydroxy-3 -fenylmethy1-4 -a-oxo-2 -N-Cmethy1)aza-3 <4 -fluorfe104 nyl) propy1J-6-methy1 ) f eny1]penty1dekahydro i soch 1 no 1 i n-3-N-terc.buty 1 karboxamid se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu ID, za C3Rx,4aRx,8aRx,2 S*,3 Rx)J-2-[3 použití 76 mg (0,19 mmol) [3S-amino-2 -hydroxy-4 -fenylJbuty1dekahydroisochino1 in-3-N-terc.-buty1karboxam idu, sloučen i ny podle přípravy 2B, 57 mg CO,19 mmol) sloučeniny podle příkladu 19D, 26 mg (0,19 mmol) 1-hydroxybenzotriazolhydrátu CHOBT.H2O) a 39 mg (0,19 mmol) 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (DCC) v bezvodém tetrahydrofuranu a v bezvodém dimethylformamidu. Získaný surový produkt se čistí bleskovou chromatografií (za použití gradientu 1 až 4 % methanolu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 96 mg žádaného produktu ve výtěžku 74 % teorie.

!H NMR CCDC13): S 1,14 Cs, 9H), 1.20-2,36 Cm, 19H), 2,50-3,10

Cm, 6H), 3,35-3,60 Cm, 1H), 3,90-4,10 Cm, 2H).

4,35-4.75 Cm, 3H), 5,68 Cs, 1H), 6,65-6,82 Cm,

1H), 6,98-7,40 Cm, 11H)

IR CCHC1₃)^: 3613, 3600-3100 Cbr.>, 3011, 2977. 2929, 2866, 1670, 1632, 1511, 1455, 1394, 1368, 1158, 1075. 1047. 879, 823 cm^-1

MS (FD): m/e 686 CM* +1) 584 (100)

Příklad 20

A. 3-N,N-CDimethy1)karbamoy1-6-methylbenzoát, methylester

3-N,N-CDimethy1)karbamoy1-6-methylbenzoát, methylester, se připravuje v podstatě způsobem podrobně popsaným v příkladu 9D za použití 388 mg (1,08 mmol) pentafluorfenylester 3-methoxykarbony1

4-methylbenzoátu, sloučeniny podle přípravy 7, a 176 mg (2,16 mmol) dimethylaminhydrochloridu a 0,5 ml triethylaminu v 5 ml methylenchloridu. Získaný surový produkt se čistí bleskovou chromatografií (za použití 20 % ethylacetátu v hexanu jakožto elučního činidla), čímž se získá 226 mg čirého oleje ve výtěžku 95 % teorie.

Mí NMR CCDCI3): 5 2,61	Cs,	3H), 2,90-3,20 Cm,	6H)	0 0 0	Cs, 3H)
7,24-7,	30	Cm, 1H), 7,43-7,43	C m,	1H) ,	7,93 Cd
J=l,63	Hz,	1H)

105

IR fClICL^): 3029 1304

MS CFD): m/e 221

3007, 2954 1253. 1151

CM*, 100)

1723, 1628 109S9 1081

1509, 1487, 1437

1007, 973. 919.

1401 , cm ¹

Analysa pro Ci2Hie>N03^:vypočteno¹ 0 65,14 H nalezeno - C 65,37 H

6,33 6,73

N 6,33 N 6,09

B. C3-N,N-C Dimethy1karbamoy i-6-methy1)benzoová kyselina (3-N,N-CDimethy1karbamoy1-6-methy1)benzoová kyselina se připravuje v podstatě způsobem podrobně popsaným v příkladu 1C za použití 186 mg CO,84 mmol) 3-N

N-C dimethy1)karbamoy1-6-methy1benzoát methylesteru, sloučeniny podle příkladu 20A, a 101 mg (4,2 nnol) hydroxidu lithného v 10 ml směsi 3 1 tetráhydrofuranu a vody, přičemž se získá 158 mg bílé pevné látky ve výtěžku 91 % teorie.

*H NMR CCDCI3): 6 2,67 Cs, 3H), 2,90-3.40 Cm, 6H)

J-7,33 Hz, 1H), 7.45-7,65 Cm. 1H),

1,36 Hz, 1H)

IR CCHC13)- 3700-2300 Cbr.), 1699, 1628, 1557, 1509, 1401, 1302, 1265, 1152, 1099, 1062, 922,

MS CFD): m/e 208 CM* + 1), 415 C100)

7,32 Cd, 3,12 Cd, J=

1437, 1452, 334 cm“¹

Analysa pro CnHi3N03^:vypočteno: C 63,76 H nalezeno : C 63,89 H

6,32

6,23

N 6,76 N 6,50

C. [3S-C3Rx ,4aRx ,8aRx ,2 Sx,3 Rx)]-2-;£2 -Hydroxy-3 -feny lmethy 14 -aza-5 -oxo- 5 - (3*- Cl -oxo-1 -N,N-(dimethy1)aminomethy1]6“-methyl)feny11penty1dekahydroisochinolin-3-N-terc.-butylkarboxamid [3S-C3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx,3 Rx)l-2-£2 -Hydroxy-3 -fenylmethy14 -aza-5 -oxo-5 -C3-[l -oxo-1 -N,N-Cdimethy1)aminomethy116-methy1)f eny11penty1dekahydroisochinolin-3-N-terc.-buty1karboxamid se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu ID, za použití 165 mg <0,41 mmol) t3S-C3Rx,4aRx,SaR*2 Sx,3 Rx)]-2-[3 -amino-2 -hydroxy-4 -fenyllbutyldekahydroisochinolin-3-N-terc.-butylkarboxamidu, sloučeniny podle přípravy 2B.

106 mm <0,41 nnol) sloučeniny podle příkladu 20B, 56 mg <0,41 mmol) 1-hydroxybenzobriazolhydrátu CH0BT.H>0) a 85 mg <0.41 mmol) 1,3dicyk 1 ohexy 1 karbodi iiaidu CDCC) ve 2 mi bezvodého tetrahydrof uranu. Získaný surový produkt se čistí radiální chromatografií <1 mm, za použití gradientu 1 až 5 % methanolu v methylenchloridu jakožto elučniho činidla), čímž se získá 76 mg žádaného produktu ve výtěžku 31 % teorie.

NMR CCDC1₃)^: 6 1,16 <s, 9H), 1,20-3,50 <m, 29H), 3,95-4,22

Cm, 2H), 4,55-4,70 Cm, 1H), 5,83 Cm, 1H), 6,807,55 Cm, 8H), 6,98-7,40 Cm, 11H)

IR CCHCI3): 3650-3100, 2930, 2866, 1669, 1628, 1513, 1455, 1394, 1368, 1306, 1265, 1147, 1116, 1086, 1048, 910, 837 cm^-1

MS CFD): m/e 591 CM*). 490 C100)

Analysa pro C35H50N4O.3 ·vypočteno: C 71,15 H 8,53 N 9,48 nalezeno C 71.45 H 8.74 N 9,44

Příklad 21 [3S-C3Rx,4aRx,8aRx,2 S*,3 Sx)]-2-[2 -Hydroxy-3 -fenylthiomethy14 -aza-5 -oxo- 5 - C3”- [1 -oxo-2 -N-Cmethy1)aza-3 -pyrid2 -ylpropy11-6-methy1)fenyUpentyldekahydroisochinolin-3N-terc.-butylkarboxamid [3S-C3R*,4aR*,8aR*,2 S^,3 S*>]-2-[2 -Hydroxy-3 -fenylthiomethyl-4 -aza-5 -oxo-5 -C3“-[l -oxo-2 -N-Cmethy1)aza-3 pyrid-.2 -ylpropy11-6”-methy1)feny1]pentyldekahydroisochino1in-3-N-terc--butylkarboxamid se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu ID, za použití 103 mg CO,244 mmol) [2R-C2Rx,3Rx,3 S*,4a S*,8a S*)]-N-Cterc--buty1)-2 -[2-hydroxy-3-amino-4-Cfenylthio)]buty1)-dekahydroisochinolin-3 -karboxamidu. sloučeniny podle přípravy 40, 86 mg CO,27 mmol) 2-1 C2 C N-methy1)aza-3 -oxo-3 - [3“-karboxy-4”-methy1J-feny 1)propy11pyri dinhydrochloridu, sloučeniny podle příkladu 9E, 33 mg CO,24 mmol)

1-hydroxybenzotriazolhydrátu CHOBT.HsO) a 50 mg ¢0,24 mmol) 1,3dicyklohexylkarbodiimidu CDCC) a 102 jal triethylaminu v bezvodém

- 107 tetrahydrof uranu. Získaný surový produkt se čist.i radiální chronatoaraťií <2 mm, za použití grád ientu t.i a;

n e t h a η o 1 u v n e t h y lenchloridu jakožto elučního činidla), cinz se získá i něho produktu ve výtěžku 86 ť teorie.

^JH NMR CCDC13): 6 1,05 Cs, 9H), 1.10-2,'24 Cm, 16H)

Cm, 4H), 2,85-2,96 Cm, 1H) , 3,04 Cs

3,45 Cm, 1H), 3,50-3,95 Cm, 2H> ,

1H), 4,35-4,65 Cm, 2H),

Cs, 1H) , 7,14-7,50 Cm, 9H) ,

8,56 Cd, J=4,66 Hz, 1H)

IR CCHCl3>^; 3600-3100 Cbr.), 3028, 3007 1573, 1514, 1481. 1455 1077, 1047 cm^-1

MS (FD): m/e 700 <M⁺, 100)

Analysa pro C35H50N4O4: vypočteno: C 71,15 H 8,53 N nalezeno : C 71,45 H 8,74 N

147 nn žádá·

2,40-2,60 s, 3H), 3,374,00-4,10 Cm, 5,49 2H) ,

4,70-5,00 Cín. 1H), 7,53-7,63 (n

2976, 2929, 1439, 1394, 1368,

1670, 1633,

1276, 1247

9,48 9,44

Příklad 22 [3S-C3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx , 3 Sx)3-2-[2 -Hydroxy-3 -feny1thiomethy14 -aza-5 -oxo- 5 - <3- [1 -oxo-2 -N-(methy1)aza-3 -pyrid4 -y 1 propy 13 -6 -methyl )f eny 13 penty l dekahydro i soch i no 1 in-3-Nterc.-buty1karboxam i d [3S-C3Rx,4aRx,8aRx,2 S*,3 Rx)3-2-[2 -Hydroxy-3 -fenylthiomethy 1-4 -aza-5 -oxo-5 -<3“-[l -oxo-2 -N-(methy1)aza-3 * r + s pyr id- 4 -y 1 propy 13 -6 -methy 1 )f eny 1 3 penty ldekahydroisochino1 in-3-N-terč.-buty1karboxamid se připravuje v podstatě způsobem, který Je podrobně popsán v příkladu ID, za použití 56 mg C0.13 mmol) [2R-<2Rx.3Rx,3 'S*,4a 'Sx,8a'Sx)3-N-<terč.-buty1)-2 [2-hydroxy-3-amino-4-(fenylthio)3 butyl )-dekahydroisrjchinol in-3 -karboxamidu, sloučeniny podle přípravy 40, 50 mg <0,16 mmol) 4-[<2 N-(methy1)aza-3 -oxo-3 -13-karboxy-4” -methy1]feny 1)propy13 pyridinhydrochloridu, sloučeniny podle příkladu 12E, 18 mg (0,13 mmol)

1-hydroxybenzotriazolhydrátu CHOBT.HaO) a 27 mg (0,13 mmol) 1,3dicyklohexy 1 karbodiimidu (DCC) a 54 jal triethylaminu ve 2 ml tet,- 108 rahydrofuranu. Získaný surový produkt se čistí radiální chromatograf i í (1 mm, za použití 5 % met.hanolu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 56 no žádaného produktu ve výtěžku 50 % teorie.

¹H NMR CCDCI3): 8 1,03 (s, 9H). 1,19-2,60 Cm, 20H), 2,85-3,05

Cm, 4H), 3,35-3,45 Cm, 1H), 3,55-3,95 Cm, 2H),

4,00-4,10 Cm. 1H), 4,33-4,30 Cm, 3H), 5,54 Cs,

1H), 7,05-7,75 Cm, 10H) , 3,52-3,60 Cm, 211)

MS CEO): m/e 700 CM*), 599 (100)

Příklad 23 [3S-(3Rx,4aRx,3aRx,2 Sx , 3 Sx)]-2-[2 -Hydroxy-3 -naft-2-ylthiomethyl-4 -aza-5 -oxo-5 -C3“- [1 -oxo-2' -N-(methy1)aza-3 pyrid- 2 -y 1 propy 11-6'· -methy 1 )f eny 11 penty ldekahydroisochino1in-3-N-terc.-butylkarboxamid [3S-(3Rx,4aRx,3aRx,2 Sx,3 Sx)]-2-[2 -Hydroxy-3 -naft-2-ylthiomethy1-4 -aza-5 -oxo-5 - (3- [1 -oxo- 2 -N- (methyl)azax x x x x x x

-pyrid- 2 - y1propy1]-6“- methyl)fenyl3pentyldekahydroisochinolin-3-N-terc.-butylkarboxamid se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu ID. za použití 77 mg (0,16 mmol) [2R-(2Rx,3Rx,3 Sx,4a Sx.8a Sx)]-N-Cterc.-buty1)-2 [2-hydroxy-3-amino-4- (fenylthio)]butyl)-dekahydroisochinolin-3 karboxamidu, sloučeniny podle přípravy 40, 38 mg (0,18 mmol) 2[(2 -(N-methy1)aza-3 - oxo-3 -C3“- karboxy-4”-methyl3-fenyl)-propy13pyridinhydrochloridu,. sloučeniny podle příkladu 9E, 22 mg (0,16 mmol) 1-hydroxybenzotriazolhydrátu (HOBT.H2O), 34 mg (0,16 mmol) 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (DCC) a 68 μΐ triethylaminu ve 3 ml bezvodého tetrahydrofuranu. Získaný surový produkt se čistí radiální chromatografií (2 mm, za použití gradientu 0 až 6 % methanolu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), následovanou radiální chromatografií (2 mm, za použití gradientu 1 až 4 % methanolu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 81 mg žádaného produktu ve výtěžku 67 % teorie.

ΊΗ NMR (CDCI3): 8 1,06 (s, 9H), 1,10-2,65 (m, 19H), 2,65-3,05

Cm, 4H), 3,42-4,18 (m, 5H), 4,40-4,90 (m. 3H),

109

5,63 Cs, ÍH), 7,10-7,90 Cm, 13H). 3,53 C<1,

J=3,13 Hz, ÍH)

IR (CHCI3): 3600-3100 Cbr.), 3025, 3003, 2929, 1670, 1632, 1572,

1515, 1455, 1394, 1363, 1247, 1147, 1077, 1047, 944,

316 cm-¹

MS CFD): m/e 751 CM* + 1, 100)

Analysa pro C44H55N5O4S:

vypočteno: C 70,46 H 7,39 nalezeno C 70,46 H 7,19

Příklad 24 [2S-C2Rx,2 S*,3 R*)]-l-[2 -Hydroxy-3 -fenyImethy1-4 -aza-5 -oxo5 -C3- £1 ' -oxo-2 -N-Cmethy1)aza-3 -pyrid- 2 -ylpropyll6 -methy 1 )f eny 1 ] penty 1 - <pyrid-3 -y Imethy 1 )piperazin-2-N - Ct.erc . -bu ty1)karboxam i d [2S-C2Rx,2 Sx,3 Rx)]-l-[2 -Hydroxy-3 -fenyImethy1-4 -aza-5 oxo-5 -C3- Cl -oxo-2 -N-Cmethy1)aza-3 -pyrid- 2 -ylpropyl3-6- methy1)feny13penty1- Cpyrid-3- yImethy1)piperazin- 2-N(terč.-buty1)karboxamid se připravuje v podstatě způsobem, který je podrobně popsán v příkladu ID, za použití 67 mg ¢0,13 mmol) [2S-C2Rx,2 Sx,3 Rx)3-1-C2 -hydroxy-3 -amino-4 -feny13 buty1-4-Cpyrid-3 -yImethy1)piperazin-2-N-Cterč.-buty1)karboxamidu. sloučeniny podle přípravy 5E, 59 mg CO,15 mmol) 2-CC2 -CN-methyl)aza-3 oxo-3 -[3-karboxy-4-methy13-feny1)-propy13 pyridinhydrochloridu, sloučeniny podle příkladu 9E. 21 mg ¢0,15 mmol) 1-hydroxybenzotr i azol hydrátu CHOBT.H2O), 31 mg CO,15 mmol) 1,3-dicyklohexylkarbodi imidu CDCC) a 64 μΐ triethylaminu ve 3 ml bezvodého tetrahydrofuranu a 0.5 ml dimethylformámidu. Získaný surový produkt se čistí radiální chromatografii Cl mm, za použití gradientu 5 až 8 % methanolu v methylenchloridu jakožto elučního činidla), čímž se získá 93 mg žádaného produktu ve výtěžku 87 % teorie.

NMR CCDCI3): S 1,33 Cs, 9H), 2,10-3,10 Cm, 16H), 3,32-3,55

Cm, 3H), 3,90-4,03 Cm, ÍH), 4,38-4,57 Cm, 2H),

4,65-4,92 Cm, 2H), 6,23 Cd, J=9,26 Hz. ÍH),

7,03-7.43 Cm. 11H), 7,56-7,91 Cm, 3H), 8,50-8,60 Cm, 2H)

110

IR (CHCI

151:

:i ) - 3691, 3700-3100 (br.), 3025, 3007, 2976. 1634, 1553,

1430, 1455, 1427, 1405, 1366, 1237, 1151, 1077, 1048 cn'¹ í-’ř í k 1 ad 25 [ 3S-(3R^x , 4aRx , 3aRx, 2 S* , 3 R*)]-2-[2 -Hydroxy-3 -fenylmethy za-5 -oxo-5 -(3- (1 -oxo-2 -N-(methy 1 )aza-3 -pyridyl propy 1 ] - 6 -methy 1 )f eny 1.1 penty ldekahydroisochino 1 in-3-Nbut.y 1 karboxam i dd imethansu 1 f onát

1-4 -a2 terč.Do studeného (0 0) roztoku 100 mg (0,15 mmol) [3S-(3Rx,4aRx2 Sx,3 Rx)]-2-[2 -hydroxy-3 -fenylmethy1-4 -aza- 5 -oxo- 5 - (3C1 -oxo-2 -N-(methy1)aza-3 -pyrid- 2 -ylpropy13- 6-methy 1 )feny1]pentyldekahydroisochinolin-3-N- terč.-buty1karboxamidu, sloučeniny podle příkladu 10 ve 2 ml bezvodého methylenchloridu se přidá 0,3 ml (0,30 mmol) 1M methansulfonové kyseliny (v methylenchloridu)- Získaná reakční směs se odpaří k suchu za sníženého tlaku, čímž se získá 122,7 mg [3S-(3Rx,4aRx,8aR«,2 S*,3 Rx)]-2[2 - hydroxy-3 -feny lmethy 1-4 -aza-5 -oxo-5 -(3'*- [1 -oxo-2 N-(methy1)aza- 3 -pyrid- 2 -ylpropyll- 6-methy1)feny11penty 1dekahydro isochinolin- 3-N- terč.-buty1karboxam i dd imethansu1f onátu.

Příklad 26 [3S-(3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx , 3 Sx)]-2-[2 -Hydroxy-3 -feny1thiomethy14 -aza- 5 -oxo-5 - (3‘‘- Cl -oxo-2 -N-(methy 1 )aza-3 -pyrid2 -ylpropyll- 6- methy1)feny11pentyldekahydroisochinolin-3N- terč.-butylkarboxamiddimethansulfonát (3S-(3R*,4aRx,8aRx,2 Sx.3 Sx)]-2-[2 -Hydroxy-3 -feny1thiomethy14 -aza- 5-ΟΧΟ-5- (3“- [l-oxo-2-N-(methy1)aza-3 -pyrid2 ' -ylpropyll- 6“- methyl)feny11pentyldekahydroisochinolín-3N- terč.-butylkarboxamiddimethansulfonát se připravuje v podstatě způsobem podle příkladu 25 za použití 30 mg (0,043 mmol) [3S-(3Rx,4aRx,8aRx,2's*,3 Sx)]-2-t2 -hydroxy-3 '- feny 1thiomethy14 -aza- 5 -oxo-5 - (3- fl '-oxo-2 -N-(methy1)aza- 3 -pyrid2 - ylpropyll- 6- methyl)feny11pentyldekahydroisochi no 1in- 3111

N-terc.-buty1karboxamidu, sloučeniny podle přikladu 21. a 172 μΐ (1.1.()::5 nnol) 0,5M motk.»nsu 1 fonové kyseliny (v methylenchloridu) ve 2 ml nethylenchloridu ve výtěžku 30 nn.

Příklad 27 [35-(3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx , 3 3*)1-2-(2 - Hydroxy- 3 - naft-2-ylthiomethy1-4 -aza- 5 -oxo-5 - (3- [1 -oxo-2 -H-(methy1)aza-3 pyrid- 2 -ylpropyll- 6- methy1)fenyl1pentyldekahydroisochino1in-3-N- terč.-butylkarboxamiddimethansulfonát (3S-(3Rx,4aRx,3aRx,2 Sx,3 'Sx)1-2-[2'-Hydroxy-3'-naft-2-y1thiomethyl- 4 -aza- 5 -oxo-5 - (3”- [1 -oxo-2 -N-Cmethy1)aza3 ' -pyrid- 2 ' -ylpropyll- 6- methy1)feny11pentyldekahydroisochinolin-3-N- terč.-butylkarboxamiddimethansulfonát se připravuje v podstatě způsoben podle příkladu 25 za použití 35 mg <0,047 mmol) (3S-C3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx,3 Sx)]-2-t2 -Hydroxy-3 -naft-2-ylthiomethyl- 4 -aza- 5 -oxo-5 - C3‘‘- [1 -oxo-2 -N-Cmethy 1 )aza3 -pyrid- 2 -ylpropyll- 6”-methyl)fenyllpentyldekahydroisochinolin-3-N-terc.-butylkarboxamidu, sloučeniny podle příkladu 23 a 193 ul <0,096 mmol) 0,5M methansulfonové kyseliny (v methylenchloridu) ve 2 ml methylenchloridu ve výtěžku 35 mg.

Příklad 28 [2S-C2Rx,2 Sx,3 Rx)l-l-(2 -Hydroxy-3 -fenyImethy1-4 -aza-5 -oxo5 -C3- C1 -oxo-2 -N-Cmethy 1 )aza-3 -pyrid- 2 -ylpropyll6*’ -methyl )feny11penty1-Cpyrid-3 -y Imethy 1 )piperazin-2-N-terc . -buty 1karboxam i dtr imethansulfonát (2S-C2Rx,2Sx,3 Rx)1-1-C2 -Hydroxy-3 -fenyImethy1-4 -aza-5 oxo-5 -C3”- [1 -oxo-2 -N-Cmethy1)aza-3 -pyrid- 2 -ylpropyll-6- methy1)feny1]penty1- Cpyrid-3”- yImethy1)piperazin- 2-Nterc.-buty1karboxamidtrimethansulfonát se připravuje v podstatě způsobem podle příkladu 25 za použití 35,9 mg CO,051 mmol) [25C2Rx,2 Sx,3 Rx)l-l-[2 -hydroxy- 3 -fenyImethy1- 4 -aza-5 -oxo-5 (3”- [1

-y1propy1]-6-N-Cmethy1)aza-3 -pyrid- 2

-oxo-2

112 methy11)f eny1]penty1 -(pyrid-3-yImethy1piperazin-2-N-terč.-tuLy 1 karboxamidu, sloučeniny podle příkladu 23 a 193 ul (0,096 mnol) 0,5M methansulfonové kyseliny (v methylenchloridu) ve 2 ml methylenchloridu ve výtěžku 50 mg.

Jak shora uvedeno, jsou sloučeniny podle vynálezu užitečné pro inhibici HIV preteasy, která má vztah k produkci virální složky- Vynález se proto také týká způsobu ošetřování a prevence HIV infekce, přičemž se podává primátům účinné množství sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli. Vynález se rovněž také týká způsobu ošetřování a prevence AIDS, přičemž se podává primátům účinné množství sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli. Vynález se také týká způsobu inhibice replikace HIV, přičemž se podává buňkám infikovaným HIV, buňkám, citlivým k infekci HIV nebo primátům účinné množství sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli.

Výrazem farmaceuticky účinné množství se zde vždy míní množství sloučeniny obecného vzorce I podle vynálezu, které je schopné inhibovat HIV proteasu, která zprostředkovává produkci virální složky. Inhibice HIV proteasy zahrnuje jak terapeutické tak profylaktické ošetřování. Specifickou dávku podávané sloučeniny pro dosažení terapeutického nebo profylaktického účinku vždy určuje lékař se zřetelem na okolnosti ošetřovaného případu, jako jsou určitá podávaná sloučenina, cesta podání, ošetřovaný stav a podobné skutečnosti. Zpravidla je denní dávka účinné látky přibližně 0,01 až přibližně 50 mg/kg tělesné hmotností, s výhodou přibližně 0,05 až 20 mg/kg a především přibližně 0,1 až přibližně 10 mg/kg.

Sloučeniny podle vynálezu obecného vzorce I se mohou podávat různou cestou včetně orální, rektální, transdermální, subkutanní, intravenozní, intramuskulární a intranasální. Součeniny podle vynálezu obecného vzorce I se s výhodou před podáváním zpracovávají na farmaceutické prostředky. Vynález se proto také hýká farmaceutických prostředků obsahujících účinné množství sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli a farmaceuticky vhodný nosič,' ředidlo nebo excipient.

Účinná látka je v takových farmaceutických prostředcích obsažena ve hmotnostním množství přibližně 0,1 až přibližně 99,9 %, vztaženo na hmotnost farmaceutického prostředku. Výrazem farmaceuticky vhodný se zde vždy míní, že nosič, ředidlo nebo excipient jsou kompatibilní s jinými složkami farmaceutického prostředku a nejsou škodlivé pro příjemce farmaceutického prostředku Farmaceutické prostředky podle vynálezu se připravují o sobě známými způsoby za použití snadno dostupných složek. Pro výrobu farmaceutických prostředků se účinná látka obecného vzorce I podle vynálezu zpravidla mísí s nosiči nebo se ředí nosiči nebo se zapouzdřuje do nosiče, který může mít formu kapsle, sáčku, papírku nebo jiného obalu. Pokud nosič slouží jako ředidlo, může to být pevná, polopevná nebo kapalná látka, která působí jako nosič, excipient nebo prostředí pro účinnou látku. Farmaceutické prostředky mohou proto mít formu tablet, pilulek, prášků, kosočtverečků, sáčků, elixírů, suspenzí, emulzí, roztoků, sirupů, aerosolů (jakožto pevné nebo kapalné prostředí), mastí, obsahujících například až hmotnostně 10 % účinné látky, měkkých a tvrdých želatinových kapslí, čípků, sterilních vstřikovátelných roztoků a sterilních balených prášků.

Následující formulační příklady objasňují vynález, nijak jej však neomezují. Výrazem účinná látka“ se vždy míní sloučenina obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodná sůl.

Příklad farmaceutického prostředku 1

Tvrdé želatinové kapsle se připravují z následujících složek:

Množství <mg/kapsle) účinná látka 250 škrob, sušený 200 stearát hořečnatý 10 celkem

460 mg

114

Příklad farmaceutického prostředku 2

Tablety se připravují z následujících složek:

Množství (mg/tableta) účinná látka 250 celulóza, mikrokrystalická 400 oxid křemičitý, sublimovaný 10 kyselina stearová 5 celkem 665 mg

Uvedené složky se smísí a slisují se na tablety vždy o hmotnosti 665 mg.

Příklad farmaceutického prostředku 3

Aerosolový roztok se připravuje z následujících složek^:

Hmotnost účinná látka 0,25 methanol 25,75 hnací prostředek 22 (chlordifluormethan) 74,00 celkem 100,00

Účinná látka se smísí s ethanolem a směs se vnese do části o

hnacího prostředku 22, ochlazeného na teplotu -30 C, a vše se převede do plnicího zařízení. Požadované množství se plní do nádobek z nerezavějící ocele a zředí se zbytkem hnacího prostředku. Obal se opatří ventilem.

Příklad farmaceutického prostředku 4

Tablety, obsahující vždy 60 mg účinné látky, se připravují z následujících složek:

Množství (mg/tableta) účinná látka 60,0 škrob 45.0 celulóza, mikrokrystalická 35,0 polyvinylpyrrolidon (10¾ roztok ve vodě) 4,0 natriumkarboxymethy1ováný škrob 4,5 stearát horečnatý 0,5 mastek 1,0 celken 150,U

Účinná látka, škrob a celulóza se vedou sítem No. 45 nesh

IJ.S. Cprůměr ok 355 mikrometrů) a důkladně se proraísí. Se získaným práskem se smísí roztok polyvinylpyrrolidonu a směs se vede sítem Mo. 14 nesh IJ.S. Cprůměr ok 1400 mikrometrů). Takto získané granule se suší při teplotě 50 C, vedou sítem No. 18 nesh IJ.S. Cprůměr ok ÍOOO mikrometrů). Natriumkarboxymethy lovariý škrub, stearát horečnatý a mastek se vedou sítem No. 60 mesh IJ.S. Cprůměr ok 250 mikrometrů), přidají se «lo granulí, promísí se a směs se lisuje na tablety vždy o hmotnosti 150 mg.

Příklad farmaceutického prostředku 5

Kapsle, obsahující vždy 80 mg účinné látky, se připravují z následujících složek:

Množství Cmg/kapsle) účinná látka 80 škrob 59 mikrokrystalická celulóza 59 stearát hořečnatý 2 celkem 200

Účinná látka, škrob a stearát hořečnatý se smísí, vedou se sítem No. 45 mesh U.S. Cprůměr ok 355 mikrometrů) a plní se do tvrdých želatinových kapslí v množství vždy 200 mg.

Příklad farmaceutického prostředku 6

Čípky, obsahující vždy 225 mg účinné látky, se připravují z následujících složek:

Množství Cmg) účinná látka 225 glyceridy nasycených mastných kyselin 2000 celkem 2225

Účinná látka se vede sítem No. 60 mesh IJ.S. Cprůměr ok 250 mikrometrů) a suspenduje se v glyceridech nasycených mastných kyselin, předem roztavených za použití minimálně nutného tepla.

116

Směs se lije .-lo formy na čípky o nominální kapacitě 2,0 g a nechá se ochladit.

Příklad farmaceutického prostředku 7
Suspenze, obsahující vždy 50	mg účinné látky	v 5,0 ml,
připravuje z následujících složek:
účinná látka		50,00 mg
natri umkarboxymethy1ce1u1óza		50,00 mg
sirup		1,25 ml
roztok kyseliny benzoové		0,10 ml
chuťová přísada		q.V.
barvivo		q.V.
čištěná voda do		5,0 ml

Účinná látka se vede sítem No. 45 mesh U.S. (průměr ok 355 mikrometrů) a smísí se s natriumkarboxymethy1celulózou a sirupem za vzniku hladké pasty. Přidá se za míchání roztok kyseliny benzoové, chutové přísady a barviva, zředěné trochou vody. Pak se přidá dostatečné množství vody k dosažení požadovaného objemu.

Farmaceutický prostředek 8

Intravenozní prostředek se připravuje z následujících složek: účinná látka 100 mg isotonická solanka 1000 ml

Shora uvedený roztok se podává intravenozně rychlostí 1 ml/min.

Následující pokus (fluorescenční HIV-1 preteasová inhibitorová zkouška) dokládá schopnost sloučenin podle vynálezu inhibovat HIV preteasu.

Následně se používá těchto zkratek:

BSA hovězí sérový albumin

BOC terč.-butyloxykarbony1

BrZ 2-brombenzyloxykarbony1

-C1Z 2 - c h 1 orbenzy 1 oxy karbony 1

DCC di cyklohexy1karbod i im i d

DIEA di isopropy1ethylamin

117

DTT 11 i t h i i .'· th r - t to 1

EDTA e thy1endi am i ntetraoctová kyše1 i na

EITG f1uoresceinisothiokarbamy1

HEPES 4-(2-hydroxyethy1 ) -1 -piperazi nethansu 1 f onová kysel i na MES 4-morfolinethansulfonová kyselina

PAM fenylacetimidomethy1

TAPS 3-[tris C hydroxymethy1)methy1]am i no-l-sulfonová kyše lina

TRIS tris(hydroxymethyl)arainomethan

TOS p-toluensulfony1 (tosyl)

I Příprava proteasy a gag frakcí

A. Kultura E. coli K12 L507/pHPl0D

Lyofily E. coli K12 L507/pHP10D se získají od organizace Northern Regional Research Laboratory, Peoria, Illinois 61604 pod objednacím číslem NRRL B-18560 (uloženo 14. listopadu 1989). Lyofily se dekantují do zkumavek, obsahujících 10 ml LB prostředí (10 g Bactotryptonu, 5 g Bacto kvasničného extraktu a 10 g vodného roztoku chloridu sodného na litr, za hodnoty pH nastavené na o

7,5, a inkubují se přes noc při teplotě 32 C.

Malý podíl kultury, inkubované přes noc, se umístí na

LB-agarových (LB prostředí s 15 g/1 Bacto-agaru) destičkách, obsahujících 12,5 pg/ml tetracyklinu takovým způsobem, aby se získal jeden koloniový izolát E. coli K12 L507/pHP10D. Získaná jedna kolonie se očkuje do 10 ml LB prostředí, obsahujícího 12.5 yg/ml o

tetracyklinu, a inkubuje se přes noc při teplotě 32 G za intenzivního protřepávání. 10 ml kultury, inkubované přes noc, se očkuje do LB prostředí obsahujícího 12,5 pg/ml tetracyklinu a inkuo buje se přes noc při teplotě 32 C za intenzivního protřepávání až do dosažení mid-log fáze.

B. Kultura E. coli K12 L507/pHGAG

Lyofily E. coli K12 L507/pHGAG se získají od organizace Northern Regional Research Laboratory (NRRL) pod objednacím číslem NRRL B-18561 (uloženo 14.listopadu 1989). Čištěná kolonie E. coli K12 L5G7/pHGAG se izoluje a použije se jakožto inokula pro

C. Příprava proteasové frakce

Kultura E. coli K12 L507/pHP10D se nechává růst. na mid-log © fázi při teplotě 32 C v prostředí LB obsahujícím 12,5 ng/ml tetracyklinu. Teplota kultivačního prostředí se rychle zvýší na 40

C k navození exprese genu a buňky se nechají růst po dobu 2,5 hodin při této teplotě dříve než se kultura rychle ochladí na ledu. Buňky se odstředí a buněčná peleta se znova suspenduje ve 20 ml 50 mmol MES pufru (hodnota pH 6,0), obsahujícím 1 mmol ethylendiamintetrraoctové kyseliny (EDTA), 1 mmol DTT, 1 mmol PMSF a 10 t glycerolu (pufr A). Provádí se lyse buněk působením zvuku za použití zařízení Fisher Model 300 Dismembrator a mikrotipové sondy. Následuje odstřeďování při 27000 x g, supernatant se zřědí na celkový objem 60 ml pufrem A a vnese se na 2,0 x 19 cm sloupec QAE-Sepharose (1 ml/min, teplota 4 C), který je vyvážen pufrem A. Sloupec se promývá isokraticky po dobu 180 minut a pak se eluuje gradientem elučního činidla 0 až 1.0M vodný roztok chloridu sodného v pufru A po dobu 120 minut- Enzymatická aktivita se měří HPLC za použití syntetického peptidů

Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val způsobem, který popsal Margolin a kol., Biochem. Biophys. Res. Commun., 167, str. 554 až 560, 1990: měří se produkce pl peptidů (Ser-Gln-Asn-Tyr).

Aktivní frakce se spojí, upraví se na 1,2M v síranu amonném a nanesou se na 2,0 x 18 cm sloupec hexy1agarosy, vyvážený pufrem A obsahujícím 1.2M síranu amonného. Vzorek se nanáší rychlostí 1 ml/min při teplotě 4 C, promyje se vyvažovačím pufrem v průběhu 240 minut (1 ml/min) a eluuje se použitím reverzního lineárního gradientu 1,2 až 0M síranu amonného v pufru A v průběhu 120 minut za těže průtokové rychlosti. Sloupec se pak promývá isokraticky v pufru A po dobu 120 minut.

Aktivní frakce se spojí, zkoncentrují se na 10 ml za použití míchané jednotky Amicon s YM-10 membránou a pak se nanesou na

- 119 kafčXuvý sloapi-c MonoS <1,0 x 10 cn). který je vyvážen pufrem A.

o

Vzorek se nanáší rychlostí 1 nl/nin xo teploty 25 C. Promývá se isokraticky po dobu 80 minut, proteasa se eluuje za použití lineárního gradientu 0 až 0.45M vodného roztoku chloridu sodného v pufru A po dobu 40 minut. Sloupec se promývá isokraticky v pufru A obsahujícím 0,45 M vodného roztoku chloridu sodného po dobu 80 minut.

Aktivní frakce se spojí a zkoncentrují se na 200 ul za použití míchané jednotky Amicon a YM-10 membrány a pak se proteasa nanáší na exkluzní kolonu Sepharose 6 vyváženou v pufru A obsahujícím 0,lM vodný roztok chloridu sodného. Sloupec se promyje isokraticky v tomto pufru při průtokové rychlosti 0,5 ml/min a pak se HIV proteasa eluuje jako samostatný pík.

QAE-Sepharosa a hexylagarosa jsou obchodními produkty společnosti Sigma Chemical Company. Superose 6 a MonoS jsou obchodními produkty společnosti Pharmacia. Pufry a reakční činidla jsou obchodními produkty společnosti Sigma Chemical Company.

D. Příprava gag frakce

Obdobným způsobem se nechává růst kultura E. coli K12 L507/pHGAG na mid-^log fázi při teplotě 32 C posléze zvýšené na 40 °C po dobu přibližně 4 až 5 hodin. Kultura se ochladí na ledu a odstředí se, načež se peleta znova suspenduje v 8 ml lysového pufru obsahujícího 5 mg/ml lysozymu. Lysový pufr obsahuje 50 mMTris-HCl (hodnota pH 7,8), 5 mM EDTA. 1 mM DTT, 100 mM NaCl, 1 yg/ml E64 a 2 Mg/ml aprotininu. Kultura se inkubuje po dobu přibližně 30 až 60 minut při teplotě 4 Ca pak se krátce zpracovává zvukem v jednotce Branson Cell Disrupter při 60¾ výkonu třemi 20 sekundovými rázy za chlazení mezi každým rázem. Kultura se pak odstřeďuje za 15000 x g. Supernatant, který obsahuje nezpracovaný gag protein, se částečně čistí exkluzní chromatografií na sloupci Sephadex G-50 a uloží se při teplotě -20 C v 50¾ glycerolu a lysovém pufru.

II. Příprava substrátu: Na-Biotin-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-I1e120

Val-Gly-LysCNE-FITD-OH 5EQ ID N0:l

A. Příprava Να-Biotin-Gly-Ser-G1n-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys-OH SEQ ID NO:3

Chráněný systém peptid-pryskyřice Ntc-Boc-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr(BrZ)-Pro-Ile-Val-Gly-Lys(2-ClZ)-0CH2-Pam-pryskyřice SEQ ID NO -2 se syntetizuje na peptidovém syntetizeru Advanced Chemtech Model 200 při měřítku 1,5 mmol za použití standardního dvoukopulačního protokolu (double-couple protocol). Aminokoncová Boc skupina se odstraní 50¾ kyselinou trifluoroctovou v methylenchloridu a získaná pryskyřice se neutralizuje 5¾ di(isopropy1)ethy1aminem (DIEA) v methylenchloridu. Potom se přidá 1,1 g (4,5 mmol) biotinu ve 20 ml dimethylsulfoxidu do peptidové pryskyřice a pak se přidá 4,5 mmol dicyklohexylkarbodiimidu (DCC) v 9 ml methylenchloridu. Získaná reakční směs se zředí na 40 ml celkového objemu za použití 11 ml methylenchloridu a pak se nechává reagovat po dobu přibližně 5 hodin. Reakční roztok se zkoncentruje, pryskyřice se promyje postupně dimethylsulfoxidem, dimethy1formamidem a methylenchloridem a neutralizuje se 5¾ DIEA v methylenchloridu. Tato reakce se opakuje dvakrát, s reakční dobou prodlouženou na 12 hodin pro jednu reakci- Ninhydrinová analýza pryskyřice potvrzuje kompletní proběhnutí reakce biotinu s glycináminovou skupinou. Konečná peptidová pryskyřice se promyje extenzivně dimethy1formámidem a methy lenchloridem a vysuší se, čímž se získá 4,3 g (93 ¾ teorie) produktu B. Odstranění chránící skupiny

Z peptidu se odstraní chránící skupina a odštěpí se od pryskyřice působením 50 ml systému fluorovodíková kyselina/m-kresol o teplotě 0 C po dobu jedné hodiny. Po odstranění fluorovodíkové kyseliny vakuovou destilací se m-kresol extrahuje z reakční směsi použitím 100 ml diethyletheru. Peptid se pak solubilizuje 50¾ vodnou kyselinou octovou. vymrazí se a iyofilizuie se, čímž se získá 2,14 g produktu.

121

Čištěnί

Surový Μα - P i ot. i n-G ly -Ser-G 1 n-ňsn - Ty r- Pro- £ 1e-Val-61y- Lys - OH SEU ID NOCÍ se rozpustí ve 200 ml 5'’ó aceton i tri levého (vodného) roztoku, obsahuicího 0,1 % kyseliny trifluoroctové a zfiltruje se

0,22 mikrometrovým filtrem. Získaný roztok se nanáší na 2,2 x 25 cm reverzní fázový sloupec systému oktadecy1-oxid křemičitý (Vydac C-113), který je vyvážen tímtéž pufrem. Peptid se eluuje za použití 855 minutového lineárního gradientu 7,5 až 25 % acetonitrilu za 2 ml/min za shromažďování frakcí. Tyto frakce se analyzují za použití analytické HPLC, což se provádí na sloupci 4,6 x 250 mm Vydac C-18 za podobných podmínek pufrování. Frakce, obsahující žádoucí produkt, se spojí, vymrazí a lyofilizují se, čímž se získá 1,206 g (62 % teorie) produktu.

Aminokyselinová analýza izolovaného N«z-Biot in-Gly-Ser-GlnAsn-Tyr-Pro-Iie-Val-Gly-Lys-OH SEQ ID NQ=3 udává následující poměry·· Asn 1,1; Ser 0,96; Gin 1,1; Pro 1,1; Gly 2,1; Val 0,130; Ile 0,73; Tyr 1,1; Lys 1,1 v souhlase s teorií. Hmotová spektrometrie za bombardování rychlými atomy udává molekulární iontový hmotový pík 12313 v souhlase s teorií.

D. Značení

Čištěný peptid se značí fluorescentním signálním znakem na C-zakončení pro použití při Pandexové zkoušce. Na-Biotin-Gly-SerGln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys-OH SEQ ID NO;3 (1,206 g, 0,936 mmol) se rozpustí ve 100 ml 0.1M borátu sodného o hodnotě pH 9,5. Pak se přidá roztok 3 g (7,7 mmol) fluoresceinisothiokyanátu v 15 ml dimethylsulfoxidu do reakční směsi v 10 stejných podílech v průběhu dvou hodin. Získaná směs se nechává reagovat po dobu jedné hodiny po ukončeném přidávání. Hodnota pH roztoku se nastaví 5N kyselinou chlorovodíkovou na 3, čímž se vytvoří sraženina, která se odstraní odstředěním.

Hodnota pH peptidového roztoku se pak upraví na 7,13 5N roztokem hydroxidu sodného a pak se zředí na 200 ml celkový objem přidáním 0,1 M octanu amonného o hodnotě pH 7,5. Získaný roztok se zfiltruje 0,22 mikrometrovým filtrem a vnese se na 2,2 x 25 cm

5% roztokem acetonitrilu sloupec Vydac C-18, který je vyvážený v Ο,ΙΙΊ roztoku octanu amonného (hodnota pil 7,5). Peptid se eluuje ze sloupce za použití 855 minutového lineárního gradientu 5 až 25 % acetonitrilu při 2 ml/min, přičemž se frakce shromažďují. K analyze frakcí používáno HPLC. Frakce, obsahující žádaný produkt, se spojí, zmrazí a lyofilizují se, čímž se získá 190,2 mg (12 % teorie) produktu.

Aminokyselinová analýza čištěného peptidů udává následující poměry: Asn 1,1: Ser 1,0: Gin 1,1: Pro 1,1: Gly 2,1: Val 0,30; Ile 0,8: Tyr 1,1; Lys 1,0 v souhlase s teorií.

E. Fluorescenční HIV-1 proteasová inhibitorová zkouška

Při fluorescenční HIV-l proteasové inhibitorové zkoušce se používají následující pufry a roztoky:

MES-ALB pufr^; 0,05M 4-morfolinethansulfonová kyselina, hodnota pH 5,5 0,02M NaCl 0.002M EDTA 0,001M DTT 1,0 mg/ml BSA

TSBA puf r roztok Avidinem povlečeých kuliček

0.02M TRIS O.15M NaCl 1,0 mg/ml BSA

0,1¾ roztok částic Fluoricon Avidin Assay (Avidin konjugovaný na pevné polystyrénové kuličky o průměru 0,6 až 0,8 mikrometrů v TBSA pufru enzymový roztok 27 IJ/ml čištěné HIV-1 proteasy v MES-ALB pufru Cl IJ se rovná množství enzymu, potřebnému k hydrolyže lpmol substrátu za minutu při tep1otě 37 C)

Do každého důlku s kulatým dnem 96 důl kove lest. icky se vnese jjI enzymového roztoku, potom 10 ji 1 hodnocené sloučeniny v 20% vodném dimethylsu 1 Coxidoven roztoku. Čištěná !!ÍV-1 í-rotea^a ;ίzíská shora popsaným způsobem. Získaný rozluk se inkubuje po dobu jedné hodiny při teplotě místnosti a pak se přidá 20 ul roztoku obsahuj i čího substrát N<x-BioLin-Gly-Ser-G ln-Asn-Tyr-Pro-I le-Va1Gly-LysCNE-FITC)-OH SEQ ID MO:1 _v MES-ALB pufru <1,5 ul/ml) do každého důlku. Roztok se pak inkubuje po dobu 16 hodin při teplotě místnosti a pak se obsah každého důlku zředí 150 jal MES-ALB pufru.

Do každého důlku s kulatým dnem druhé 96 důlkové destičky Pandex se vnese 25 ul roztoku Avidinem povlečených kuliček. Potom se do každého důlku vnese 25 ul zředěných inkubačních roztoků, shora připravených. Roztoky se důkladně promísí a destičky se vloží do zařízení Pandex, promyjí se, evakuují a provede se odečet. Detekce vzorku se provádí excitací při 405 nm za odečítání následující epifluorescence při 535 nm.

Výsledky IC50, získané při fluorescenční zkoušce sloučenin podle vynálezu, jsou uvedeny v následující tabulce I. Všechny hodnoty jsou normalizovány se zřetelem na pozitivní kontrolu, kterou je C1S-CIR*,4R*,5S*)1-N-<l-<2-amino-2-oxoethy1)-2-oxo-3aza-4-fenylmethy1-5-hydroxy-6-<2-<1-terc.-butylamino-l-oxomethy1) feny 1)hexy1)-2-chinolinylkarboxamid.

Tabulka I

Inhibiční účinnost sloučenin obecného vzorce I

Sloučenina podle příkladu číslo kontrola 1 2

Fluorescenční zkouška IC50 ng/ml 1.00 3,60

300,00 1000.00 35,00

400,00 2,70 0,70

2«, 00

124

9		19,10*
10		5,70*
11		4,50
12		5,00
13		13,40
14		16,10
15		6,60*
16		8,40*
17		5,60*
18		278,00*
19		5,30
20		185,00
21		14,8x
22		2.80
23		11,30
24		4,60
25		n. t.
26		n. t.
27		n. t.
28		n. t.
X	střední hodnota IC50
n-	netestováno

Průmyslová využitelnost

Inhibitor HIV proteázy, který je vhodný pro ošetřování AIDS, je použitelný také ve formě farmaceutického prostředku.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY Inhibitor HIV proteázy obecného vzorce I 0Ί £0G !) o í: t l * kde R a znamená R° na sobě nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, ary laikylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, heterocyklaikylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu nebo nenasycenou heterocyklalkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, nebo R° spolu s atomem dusíku.na který jsou vázány, vytvářejí heterocykl ickou skupinu nebo nenasycenou heterocyklickou skupinu za podmínky, že atom dusíku není kvartérnizován, skupinu obecného vzorce - II -

1/Inhibitor HIV proteázy podle nároku 1 obecného vzorce I.

kde znamená

Z skupinu obecného vzorce

R¹ arylovou skupinu nebo skupinu vzorce -S-R^la, kde znamená R^laarylovou skupinu,

R^ž atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku q 0 nebo 1,

X skupinu vzorce

1 3, 4 nebo 5,

R⁴ na sobě nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo hydroxyalkýlovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a

R⁵ a R⁶ na sobě nezávisle atom vodíku, hydroxyskupinu. alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, aminoskupinu. alkylaminoskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, hydroxyalkýlovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, karboxyskupinu. alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, karbamoylovou skupinu. H-alkylkarbamoylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, arylovou skupinu, heterocyklickou skupinu. nebo nenasycenou heterocyklickou skupinu.

nebo její farmaceuticky vhodná sůl.

1) —

II .

N—C—R°

Ř⁵

P

2)

III _R3b skupinu obecného vzorce

3. Inhibitor HIV proteázy podle nároku 2 obecného vzorce I, kde znamená

Z fenylovou skupinu.

Y¹ dekahydro-C4aS, 8aS-isochinolinylovou skupinu a

R³ -CCO)NH(terc.-buty1)ovou skupinu a jejich farmaceuticky vhodné soli.

4. Inhibitor HIV proteázy podle nároku 1 až 4 obecného vzorce I, kterým je [3S(3Rx,4aRx,8aRx,2 Sx,3 Rx)1-2-[2 -hydroxy-3 -fenylmethy1-4 aza5 -oxo-5 -<3-(l -0X0-,2 -NCmethy1)aza-3 -chinolin-2 yIpropy11-6-methy1)feny1]penty1-dekahydroisochinolin-3-N-terc . buty1karboxam i d, [3 SC3 Rx,4 Sx)]-N-ll -oxo-1 -C3-['l -oxo-2 -aza-3 fenylmethy1-4 -hydroxy-5 -C2 -N-terc.-butylkarbamido)feczj o

L. i ' ; χ/;

ny1]penty1-4-methy1)f eny 11methy 1-1,2,3.4-tetrahydroi soch i no1 i n a [3S(3Rx,4aRx,8aRx,2 S*,3 R*)]-2-C2 '-hydroxy-3 -fenyImethy1-4 aza5 -oxo-5 -C3-t1,2,3 .4 -tetrahydroisochinolin-1 -y 1karbony11-6-methy1)feny13 penty1-dekahydroisochinolin-3-N-terc.buty1karboxamid a jejich farmaceuticky vhodná sfll.

4 atomy uhlíku v každém a liry lovem podílu, karbamoy lovou skupinu nebo H-alkylkarbamoylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v každém alky lovéra podílu,

R¹ skupinu arylovou, heterocyklickou skupinu nebo nenasycenou heterocyklickou skupinu, cykloalkylovou skupinu s 5 až 7 atomy uhlíku nebo skupinu obecného vzorce -S-R^1a, kde znamená R^{1 a} skupinu arylovou, heterocyklickou skupinu nebo nenasycenou heterocyklickou skupinu nebo cykloalkylovou skupinu s 5 až 7 atomy uhlíku,

X skupinu obecného vzorce

Y arylovou skupinu nebo nenasycenou heterocyklickou skupinu.

Y¹ heterocyklickou skupinu,

R^3a skupinu obecného vzorce . 1) -C(O)-NR⁴R⁴, __Rs

'4 0, 1. 2, 3 nebo 4, J? 0. 1, 2 nebo 3, s 0, 1 nebo 2, R² atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až G atomy uhlíku, a- rylaikylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alky lovem podílu, alkoxyskupinu s 1 až G atomy uhlíku, alkylthio- skupinu s 1 až G atomv uhlíku, amino: skupinu, alkylamino- skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, dialky 1aminoskupinu s 1 až

5. Farmaceutický prostředek pro použití jakožto antivirální činidlo a k inhibici HIV replikace, vyznačující se tím, že obsahuje jakožto účinnou látku sloučeninu obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodnou sfll podle nároku 1 až 4 spolu s jedním nebo s několika farmaceuticky vhodnými nosiči, ředidly nebo exciplenty.

6. Použití sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1 až 4 pro přípravu antivirálního činidla.

7. Použití sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1 až 4 pro přípravu farmaceutického prostředku k inhibici HIV replikace.

8. Způsob přípravy inhibitoru HIV proteázy podle nároku 1 až 4 obecného vzorce I kde mají jednotlivé symboly v nároku 1 až 4 uvedený význam, nebo jeho farmaceuticky vhodných solí, vyznačující se tím, že

a) se nechává reagovat sloučenina obecného vzorce IA

- VI

OH kde jednotlivé symboly mají shora uvedený význam, se sloučeninou obecného vzorce IB

O 0 nebo s jejím aktivovaným derivátem, přičemž jednotlivé symboly mají shora uvedený význam,

b) popřípadě se převádí získaný produkt na jeho farmaceuticky vhodnou sůl.