CZ293426B6 - Argininové deriváty, jejich použití a meziprodukty pro jejich přípravu - Google Patents

Argininové deriváty, jejich použití a meziprodukty pro jejich přípravu Download PDF

Info

Publication number
CZ293426B6
CZ293426B6 CZ19963713A CZ371396A CZ293426B6 CZ 293426 B6 CZ293426 B6 CZ 293426B6 CZ 19963713 A CZ19963713 A CZ 19963713A CZ 371396 A CZ371396 A CZ 371396A CZ 293426 B6 CZ293426 B6 CZ 293426B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
pro
boc
pamb
phe
alkyl
Prior art date
Application number
CZ19963713A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ371396A3 (en
Inventor
Hans-Joachim Böhm
Stefan Koser
Helmut Mack
Thomas Pfeiffer
Werner Seitz
Hans Wolfgang HÖFFKEN
Wilfried Hornberger
Original Assignee
Abbott Gmbh & Co. Kg
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=6520741&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CZ293426(B6) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Abbott Gmbh & Co. Kg filed Critical Abbott Gmbh & Co. Kg
Publication of CZ371396A3 publication Critical patent/CZ371396A3/cs
Publication of CZ293426B6 publication Critical patent/CZ293426B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0812—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D205/00—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D205/02—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D205/04—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/46—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with hetero atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/48—Sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/60—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0606—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing heteroatoms not provided for by C07K5/06086 - C07K5/06139, e.g. Ser, Met, Cys, Thr
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06104—Dipeptides with the first amino acid being acidic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06104—Dipeptides with the first amino acid being acidic
    • C07K5/06113—Asp- or Asn-amino acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)

Abstract

Řešení se týká argininových derivátů obecného vzorce I, jakož i jejich solí s fyziologicky přijatelnými kyselinami a jejich stereoizomery, jejich použití jako trombinových inhibitorů k potírání chorob, jakož i meziproduktů obecného vzorce II pro jejich přípravu.ŕ

Description

Argininové deriváty, jejich použití a meziprodukty pro jejich přípravu
Oblast techniky
Vynález se týká argininových derivátů, jejich použití k potírání chorob a meziproduktů pro jejich přípravu.
Dosavadní stav techniky
Trombin patří do skupiny serinproteáz a hraje ústřední úlohu jako poslední enzym v kaskádě srážení krve. Jak vnitřní, tak vnější srážecí kaskád}’ vedou přes mnoho zesilujících stupňů ke vzniku trombinu z prototrombinu. Trombinem katalvzované štěpení fíbrinogenu na fibrin pak vede k zahájení krevního srážení a k agregaci trombocytů. která je ze své strany posílena vazbou destičkového faktoru 3 a srážecího faktoru XIII jakož i celé řady vysoce aktivních mediátorů, které zesilují tvorbu trombinu.
Tvorba a působení trombinu jsou ústředními jevy při vzniku jak bílých, arteriálních, tak také červených venózních trombů a jsou proto potenciálně účinnými body pro farmakologické působení. Trombinové inhibitory jsou v opačném postavení než heparin, nezávisle na kofaktorech současně plně potlačují účinky trombinu, jak ve srážecí kaskádě, tak také v působení trombocyty. V akutní fázi mohou zabránit tromboembolickému podráždění po perkutánní transluminámí koronární angioplastice (PTCA) a mohou zabránit lýze a sloužit jako antikoagulancia při extrakorporálním oběhu (přístroje srdce-plíce, hemodialýza). Slouží také obecně k profylaxi trombózy, například při chirurgických zákrocích.
Je známo, že syntetické deriváty argininu ovlivňují aktivitu trombinu, přičemž vstupují do výměny s aktivním serinovým zbytkem proteázového trombinu. Peptidy na bázi Phe-Pro-Arg, u kterých je N-koncová aminoskupina přítomna v D-formě, vykazují zvláště dobrou účinnost. D-Phe-Pro-Arg-izopropylester je popsán jako kompetitivně působící trombinový inhibitor (C. Mattson a spol., Folia Haematol. 109, 43-51, 1982).
Derivatizace C-koncového argininu na aldehyd vede k posílení inhibiční účinnosti. Je popsáno mnoha arginalů, které by mohly vázat poloacetalicky hydroxylovou skupinu „aktivního“ šeřinu (EP 185390, 479489, 526877, 542525; WO 9315756, 9318060).
Trombininhibiční účinnost peptidického ketonu, fluorovaného alkylketonu a amidů kyselin aketokarboxylových je rovněž vysvětlitelná tímto serin-vyměňujícím působením (EP 118280, 195212, 362002, 364344, 410411, 471651, 589741, 293881, 503203, 504064, 530167, WO 9207869; 94 08941).
DE 3108810 a WO 9311152 popisují dipeptidické omega-aminoalkylguanidiny.
U peptidických difenylesterů 4-amidinofenyl-glycinfosfinátů popsaných J. Oleksyszynem a spol. v J. Med. Chem. 37, 226-231 (1994) se jedná o irreverzibilní trombinové inhibitory s nedostatečnou selektivitou oproti jiným serinproteázám.
Nezveřejněné EP 601459 a WO 92/29336 popisují peptidické trombinové inhibitory.
Podstata vynálezu
Předmětem předloženého vynálezu jsou argininové deriváty, jejich použití a meziprodukty pro jejich přípravu.
Podstatou předloženého vynálezu jsou argininové deriváty obecného vzorce I
R1 R2
II
A--B--CO-- N--C-- (CH2)m-- D-- (NH)n--C (I) , jakož i jejich sole s fyziologicky přijatelnými kyselinami a jejich stereoizomery, kde A znamená
t
CH2-CHNH2-CO-2CZ 293426 B6
]’ 1] ch2chnh2-co- 1 Q~|] ch2-chnh2—CO— ^0
X1
^Γ~7| CHNH2-CO- 1 CHNH2-CO- ^*0 t
X1
Nj—JJ— chnh2 -co- Nj—Jj CH2-CHNH2-CO-
N]---π CH2-CHNH2-CO- Ν·χ ^.N N t r==1 CH2-CHNH2-CO- N>^N-X1 N
XI
(CH2) b-CHNH2-COz
(CH2) b-CHNH2-CO-
CHNH2-CO/
-3CZ 293426 B6
CH2-CHNH2-CO-,
X5 X*
-4CZ 293426 B6
CH-CHNH2-C0- ,
NHz
X12~CO-(CH2)c-Íh-CO- ,
Xl3-SO2-CH2-CH2-CHNH2-CO-,
H2N-CH2-CO-,
H2N-CHX13-CO-, kde libovolná skupina -CH2- může být nahrazena atomem kyslíku, atomem sír;, skupinou ) o -NH-- nebo NC, alkylem;
přičemž
XI představuje atom vodíku, Ci_j—alkyl, Ci_4-alkyl-fenyl, C|_5-acyl, Ci-r aíkoxykaTboayl,
Xz představuje atom kyslíku, skupinu NX1, atom síry,
X3 představuje atom vodíku, C^-alkyl, atom fluoru, atom chloru, hydroxyskupinu, skupinu OCHj,
X4 představuje atom vodíku, atom fluoru, atom chloru, CF3. atom bromu, C14—alkyl, fenyl, benzyl, hydroxyskupinu, C|^-alkoxy, fenyloxy, fenyl-C]_4-alkoxy, skupinu NO2, -COOH, —COOC i _4~alkyl,
XJ představuje atom vodíku, atom fluoru, atom chloru, atom bromu, Ci_4-alkyl, fenyl, benzyl, hydroxyskupinu, Ci^-alkoxy, fenyloxy, fenyl-Ci^-alkoxy, -COOH, -COOCi^-alkyl,
X6 představuje atom vodíku, atom fluoru, atom chloru, atom bromu, Cj^-alkyl, hydroxyskupinu, Ci_4-alkoxy,
X7 představuje atom vodíku, atom fluoru, chloru,
X8 představuje atom vodíku, atom fluoru, chloru,
X9 představuje NH2, hydroxyskupinu,
X10 představuje atom vodíku, Ci^-alkyl, hydroxyskupinu, skupinu OCH3,
XII představuje atom vodíku, C|_4-alkyl, hydroxyskupinu, skupinu OCH3,
X12 představuje hydroxyskupinu, Ci^-alkoxy, fenyl-C]^-alkoxy, NH2, N-C^-alkyl,
-nx13x14,
-5CZ 293426 Β6
X13 představuje C|_8-alkyl,
X14 představuje Ci_4-alkyl, nebo
X13X14 představuje -(CHjjda představuje 2, 3, 4, 5 nebo 6, b je 0,1, c představuje 1, 2, d je 3, 4, 5, 6, 7 přičemž ve všech jmenovaných A-zbytcích může být skupina a-NH nebo a-NH2- mono- nebo disubstituována Ci_l2-alkylem, fenyl-C^-alkylenem, X12OC-C]_6-alkylenem, X12OC-Ci_6alkylkarbonylem, -a- nebo p-naftyl-Ciu-alkylenem, C^n-alkylkarbonylem, fenyl-CM-alkylkarbonylem, Ci_7-alkoxykarbonylem, fenyl-Ci_5-alkoxykarbonylem, -a- nebo β-naftyl-C^alkylkarbonylem, C]_6-alkylaminokarbonylem nebo fenyl-Ci-4-alkylaminokarbonylem-, kde X12 má výše uvedený význam, dále A je X‘-NH-CH2-CH2-CO-, X'-NH-CH2-CH2-CH2-CO-, kde X1 má výše uvedený význam, neboje zbytek
H3C-N-CH3
CH3
-6CZ 293426 B6 nebo dále A představuje
X18-O-CO-Ci-4-alkylen-CO-,
C,_1T-alkyl-CO-,
Cj-iff-alkyl-NH-CO-, fenyl-C|4-alkylen-NH-CO-, a- nebo β-naftyl-COnebo C.i-7-cykloalkyl-CO-, přičemž
X!ó představuje atom vodíku, atom fluoru, atom chloru, atom bromu, skupinu CF3, hydroxyskupinu, Ci_8-alkyl, Ci_4-alkoxy,
X17 představuje atom vodíku, hydroxyskupinu, Ci-4-alkyl, Cv^-alkoxy,
X18 představuje atom vodíku, Cj^-alkyl, q je 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8
B představuje (CH2)h * \ I
--N---CH -kde h je 2, 3 nebo 4, a libovolná skupina -CH2- může být zaměněna skupinou -CHOH-, -NX1-, -SO- nebo atomem kyslíku nebo síry
X18 představuje atom vodíku nebo Ci-4-alkyl,
X19 představuje atom vodíku, Ci_6~alkyl, fenyl, benzyl, cyklohexyl nebo cyklohexylmethyl,
R1 představuje atom vodíku nebo Ci^—alkyl,
R2 představuje atom vodíku nebo Ci_4-alkyl,
R3 představuje atom vodíku, Ci-4-alkyl, fenyl, fenyl-C^-alkylen, CH2OH, -CO-X20, -CO-CO-X20,
X20 představuje atom vodíku, Ci_4-alkoxy, Ci^—alkyl, fenyl, fenyl-Ci_4-alkylen, fenyl-C^alkoxy, CF3, C2F5, N-koncově navázaná přirozená aminokyselina, CH2OH, -CH2-O-Cmalkyl, -NH-(Ci_4-alkylen)-fenyl nebo NH-Ct_6-alkyl, m je 0, 2 nebo 3, n představuje 0 nebo 1,
D představuje fenylen, na kterém jsou skupiny (CH2)m a (NH)n z obecného vzorce I navázány ve vzájemné poloze para- nebo meta- a který může být v poloze ortho- vzhledem ke skupině (CH2)m z obecného vzorce I substituován atomem fluoru, atomem chloru, atomem bromu, skupinou HO-CH2-, OH, NH2, NO2, CM-alkoxy, C^-alkyl nebo COX21 -O-(CH2)1_3-CO-X21 nebo -(CH2)m-CO-X2', pyridinylen, pyrimidinylen, pyrazinylen nebo pyridazinylen, na kterých jsou skupiny (CH2)m a (NH)„ z obecného vzorce I navázány ve vzájemné poloze para- nebo meta- a které mohou byt v poloze ortho- vzhledem ke skupině (CH2)m z obecného vzorce I substituovány atomem fluoru, atomem chloru, atomem bromu, skupinou ΗΟ-CHr-, hydroxy, NH2, NO2, CMalkoxy, CM-alkyl nebo COX21 -0-(0¾) m-CO-Χ21 nebo ^Η2)1_3-€Ο-Χ2';
1,4- nebo 1,3-cyklohexylen, ve kterém CH2-skupina v poloze ortho k (CH2)m může být nahrazena skupinou NH, atomem kyslíku, atomem síry nebo skupinou SO nebo piperidinylen, který je v poloze 3 nebo 4 k dusíku spojen s (CH2)m a ve kterém sám atom dusíku nese skupinu C(=NH)NHR4, kde
X21 je atom vodíku, CM-alkyl CM-alkoxy, skupina OH, skupina NH2, NH-CM-alkyl;
R4 představuje atom vodíku, -CO-Ci_20-alkyl, -CO-O-Ci_20-alkyl, hydroxyskupinu nebo skupinu NH2.
-8CZ 293426 B6
Předmětem předloženého vynálezu jsou argininové deriváty obecného vzorce I pro použití při potírání chorob.
Dalším předmětem předloženého vynálezu jsou sloučeniny obecného vzorce II
D—r6 (Π), kde R1, R2, R3 a D mají významy uvedené u vzorce I a
R5 znamená atom vodíku, C^-alkoxy-CO- nebo fenyl-Ci_3-alkoxv-CO-,
R6 znamená kyano-, amidino- nebo guanidinozbytek v poloze m- nebo p- k C(R2,R3) a p je 1, 2 nebo 3, jako meziprodukty pro přípravu argininových derivátů obecného vzorce I.
Alkylové zbytky obsažené ve vzorci I mohou byt přímé nebo rozvětvené.
Výhodné jsou sloučeniny vzorce 1, kde substituenty mají následující významy:
A:
(Y - H, Ci_6-alkyl, fenyl-Ci_4-alkylen, a- nebo 3-naftyl-CH2-, 3,4-dimethoxyfenyI-CH2Xl2-CO-Ci^-aIkylen, [X12=OH, Cj^-alkoxy, ΝΗ2μ Ci_4~alkyl-NH-, fenyl-C^-alkylen-NHNX13X14 (X13= C^-alkyl, X14 = CM-alkyl nebo X13 + X14 = -(CHzMd^, 5, 6))] X12—CO—C]_4—alkylen—CO—, CH3—CO—, C]_6—alkoxy—CO—, fenyl—Cj_3—alkoxy—CO—, Ci_g—alkyl— NH-CO,
-9CZ 293426 B6
Y
CH3-SO2-CH2-CH2-CH (NZ) -CO-
Y
I
CH(NZ)-CO-,
Y
I
CH2-CH(NZ)-CO-,
CH2-CH(NZ)-CO-,
(X4 = H, F, Cl, Br, CF3, Cw-alkyl, OH, OCH3, NO2, fenyl, výhodně H, F, Cl, terc.butyl, OH, OCH3, no2,
X5 = H, F, Cl, Br, CH3, OH, OCH3, fenyl, výhodně H, F, OH, OCH3, fenyl, X6 = H, F, Cl, Br, CH3, OH, OCH3, výhodně H, F, OH, OCH3, X7 = H, F, X8 = H, F),
-- CH2-CH(NZ)-co-,
CH2-CH(NZ)-co-,
Y
Xi 2-CO-(CH2)C-CH(Az)-COc= 1,2 výhodné jsou v této stavební složce sloučeniny s X = OH, CM-alkoxy, NH2, CM-alkyl-NH, NXnX14
-10CZ 293426 B6
Y z-n-chx13-co(X13 = -CH(CH3)2, -CH2-CH(CH3)2, CH2-C(CH3)-C(CH3)3, -CHCH3-CH2-CH3)
Y
I zn-ch2-co-,
R1: H,CH3
R2: H
R3: H, CH3, CHO, COCF3, COC2F5, CO-CH2OH, CO-CH3, CO-CH2-Phenyl, CH2OH, o
R4: H,OH,NH2 m: 0, 1
-11 CZ 293426 B6 výhodná skupina D-stavebních kamenuje
výhodné stavební kameny kombinace -(CH2)m-D-(NH)n- v obecném vzorci I jsou:
pro -(CH2)m-D-(NH)n- s m = 0, n = 0
X22 = H, F, Cl, Br, CH2-OH OH, NH2, NO2, C^-alkoxy, Ci^alkyl, X21-CO~, (X21 = OH, NH2,
C|^-alkyl-NH-, Ci^-alkoxy), X21-CO-Ci_3-alkoxy, ío pro --(CH2)m-D-(NH)m- s m = 0, i, n = 0, 1
- (CH2) (NH)
pro -(CH2)m-D-(NH)n- s m = 0, n = 0, 1
X23 = H, F, Cl, OH, NH2, CM-alkoxy, C^-alkyl
-12CZ 293426 B6 X23
X24 kde X23 a X24 nezávisle na sobě jsou H, F, Cl, OH, NH2, CM-alkoxy, Ci_6-alkyl pro -(CH2)m-D-(NH)n- s m = 0, 1, n = 0;
-<CH2)
\ (NH)nm ~ 0, n ~ 0,
N_N
Zvláště výhodné jsou sloučeniny vzorce I, ve kterých substituenty mají následující význam:
Y
I
CH2-- CH(NH)--CO
Y = H, C^-alkyl nebo X12-CO-Ci_2-alkylen, (X12 = OH, NH2, C^-alkoxy)
X4 = H, F, Cl, CH3, CF3, OCH3 nebo Br,
X5 = H, Cl, CH3, nebo OCH3, OC2H5,
X5 =HneboOCH3,
-13CZ 293426 B6
CH(NH)--CO — '
Y
I (CH3)2CH — (CH2)o,1--CH(NH)--CO--,
Y
I (CH3)3C--(CH2)o,1--CH(NH)--CO-->
Y
I
CH3— CH2 CH(CH3)--CH(NH)--CO--,
R1 =H
R2, R3 = H m = 0, n = 0
-14CZ 293426 B6
X22 = H, Cl, Br, OH, NH2, NO2 nebo C^-alkoxy
X23
X23 = H, Cl, OH, NH2, CM-alkoxy nebo Ci ^-alkyl
kde X23 a X24 jsou na sobě nezávislé a znamenají H, F, Cl, OH, NH2, Ci_4-alkoxy, nebo C]_6- alkyl
pro -(CH2)rn-D-(NH)n- s m = 0, η = 1,
- (CH2)
io R4: H, OH.
-15CZ 293426 B6
Zvláště výhodné jsou následující kombinace, kde A a B mají význam popsaný jako zvláště výhodný:
X22 = Cl, Br, OH, NH2, NO2 nebo C, ^-alkoxy
X23 = H, Cl, OH, NH2, NO2 nebo CM-alkoxy nebo Ci_6~alkyl
NH
-16CZ 293426 B6
A-B-CO-NH-CH2
kde X23 a X24 jsou na sobě nezávislé a znamenají atom vodíku, hydroxyskupinu, atom chloru, skupinu NH2, Ci_4-alkoxy, Ci_*—alkyl.
Jako příklady je možno uvést následující substance:
1. Boc-(D)-Phe-Pro-NH-(4-Am)-2-fenethyl
2. H-(D)-Phe-Pro-NH-(4-Am)-2-fenethyl
3. Boc-Phe-Pro-NH-pAmb
4. H-Phe-Pro-NH-pAmb
5. Boc-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb
6. Ac-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb
7. H-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb
8. H-(D)-Phe-Pro-N(Me)-pAmb
9. Me-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb
10. Z-Me-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb
11. HOOC-CH2-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb
12. MeOOC-CH2-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb
13. tBuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb
14. EtOOC-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb
15. Boc-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb
16. H-(D)-Phe-Pro-NH-mAmb
17. Z-(D)-Phe-Pro-(D,L)(4-Am)-PhgOH
18. Z-(D)-Phe-Pro-(D,L)(4-Am)-PhgOMe
-17CZ 293426 B6
19. H-(D)-Phe-Pro-(D,L)(4-Am)-Phg-OH
20. Boc-(D)-Phe-Pro-(4-Am)-PhgCH2Ph
21. H-(D)-Phe-Pro-(4-Am)-PhgCH2Ph
22. H-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb-[(D,L)-a-Me]-benzyl
23. Me-(D)-Phe-PiO-(D nebo L)(4-Am)-Phg\|/[CH2-OH]/a
24. Me-(D)-Phe-Pro-(D nebo L)(4-Am)-Pl^[CH2-OH]/b
25. Boc-(D)-Phe(4-F)-Pro-NH-pAmb
26. H-(D)-Phe(4-F)-Pro-NH-pAmb
27. Boc-(D)-Phe(4-Cl)-Pro-NH-pAmb io 28. H-(D)“Phe(4-Cl)-Pro-NH-pAmb
29. Boc-(D,L)-Phe(4-Br)-Pro-NH-pAmb
30. H-(D,L)-Phe(4-Br)-Pro-NH-pAmb
31. H-(D)-Phe(4-OH)-Pro-NH-pAmb
32. Boc-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-pAmb
33. H-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-pAmb
34. Boc-(D,L)-Phe(4-EtO)-Pro-NH-pAmb
35. H-(D,L)-Phe(4-EtO)-Pro-NH-pAmb
36. Boc-(D)-Phe(4-BzlO)-Pro-NH-pAmb
37. H-(D)-Phe(4-BzlO)-PrO“NH-pAmb
3 8. Boc-(D,L)-Phe(4-Et)-Pro-NH-pAmb
39. H-(D,L)-Phe(4-Et)-Pro-NH-pAmb
40. Boc-(D,L)-Phe(4-iPr)-Pro-NH-pAmb
41. H-(D,L}-Phe(4-iPr)-Pro-NH-pAmb
42. Z-(D)-Phe(4-tBuO)-Pro-NH-pAmb
43. H-(D)-Phe(4-tBuO)-Pro-NH-pAmb
44. Boc-(D,L)-Phe(4-tBu)-Pro-NH-pAmb
45. H-(D,L)-Phe(4-tBu)-Pro-NH-pAmb
46. H-(D,L)-Phe(4-Ph)-Pro-NH-pAmb
47. Boc-(D,L)-Phe(4-n-Bu)-Pro-NH-pAmb
48. H-(D,L)-Phe(4-n-Bu)-Pro-NH-pAmb
49. Boc-(D)-Phe(4-COOMe)-Pro-NH-pAmb
50. H-(D)-Phe(4-COOMe}-Pro-NH-pAmb
51. H-(D)-Phe(4-NO2)-Pro-NH-pAmb
52. Boc-(D,L)-Phe(3-F)-Pro-NH-pAmb
53. H-(D,L)-Phe(3-F)-Pro-NH-pAmb
54. Boc-(D,L)-Phe(3-Cl)-Pro-NH-pAmb
55. H-(D,L)-Phe(3-Cl)-Pro-NH-pAmb
56. H4D,L)-Phe(3-OH)-Pro-NH-pAmb
57. Boc-(D,L)-Phe(3-MeO)-Pro-NH-pAmb
58. H-(D,L)-Phe(3-MeO)-Pro-NH-pAmb
59. Boc-(D,L)-Phe(3-PhO)-Pro-NH-pAmb
60. H-(D,L)-Phe(3-PhO)-Pro-NH-pAmb
61. Boc-(D,L)-Phe(3-Me)-Pro-NH-pAmb
62. H-(D,L)-Phe(3-Me)-Pro-NH-pAmb
63. H-(D,L)-Phe(3-Ph)-Pro-NH-pAmb
64. Boc-(D,L)-Phe(3-CF3)-Pro-NH-pAmb
65. H-(D,L)-Phe(3-CF3)-Pro-NH-pAmb
66. Boc-(D,L)-Phe(2-F)-Pro-NH-pAmb
67. H-(D,L)-Phe(2-F)-Pro-NH-pAmb
68. Boc-(D,L)-Phe(2-Cl)-Pro-NH-pAmb
69. H-(D,L)-Phe(2-Cl)-Pro-NH-pAmb
-18CZ 293426 B6
70. Boc-(D,L)-Phe(2-OH)-Pro-NH-pAmb Ί1. H-(D,L)-Phe(2-OH)-Pro-NH-pAmb
72. Boc-(D,L)-Phe(2-MeO)-Pro-NH-pAmb
73. H-(D,L)-Phe(2-MeO)-Pro-NH-pAmb
74. Boc-(D,L)-Phe(2-Me)-Pro-NH-pAmb
75. H-(D,L)-Phe(2-Me)-Pro-NH-pAmb
76. Boc-(D,L)-Phe(2-iPr)-Pro-NH-pAmb TI. H-(D,L)-Phe(2-iPr)-Pro-NH-pAmb
78. Boc-(D,L)-Phe(2-Ph)-Pro-NH-pAmb
79. H-(D,L)-Phe(2-Ph)-Pro-NH-pAmb
80. Boc-(D,L)-Phe(3,4-(F)2)-Pro-NH-pAmb
81. H-(D,L)-Phe(3,4-(F)2)-Pro-NH-pAmb
82. Boc-(D,L)-Phe(3,4-(CI)2)-Pro-NH-pAmb
83. H-(D,L)-Phe(3,4-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb
84. Boc-(D,L)-Phe(3-Cl-4-MeO)-Pro-NH-pAmb
85. H-(D,L)-Phe(3-Cl-4-MeO)-Pro-NH-pAmb
86. Boc-(D,L)-Phe(3-CM-EtO)-Pro-NH-pAmb
87. H-(D,L)-Phe(3-Cl-4-EtO)-Pro-NH-pAmb
88. H-(D,L)-Phe(3,4-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb
89. Boc-(D,L)-Phe(3,4-(Me)2)-Pro-NH-pAmb
90. H-(D,L)-Phe(3,4-(Me)2)-Pro-NH-pAmb
91. Boc-(D,L)-Phe(3-Me-4-iPr)-Pro-NH-pAmb
92. H-(D,L)-Phe(3-Me^-iPr)-Pro-NH-pAmb
93. Boc-(D,L)-Phe(2,3-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb
94. H-(D,L)-Phe(2,3-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb
95. Boc-(D,L)-Phe(2,5-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb
96. H-(D,L)-Phe(2,5-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb
97. Boc-(D,L)-Phe(3,5-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb
98. H-(D,L)-Phe(3,5-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb
99. Boc-(D,L)-Phe(3,4,5-(MeO)3)-Pro-NH-pAmb
100. H-(D,L)-Phe(3,4,5-(MeO)3)-Pro-NH-pAmb
101. Boc-(D,L)-Phe(2,4,6-(Me)3)-Pro-NH-pAmb
102. H-(D,L)-Phe(2,4,6-(Me)3)-Pro-NH-pAmb
103. Boc-(D)-alfaNal-Pro~NH-pAmb
104. H-(D)-alfaNal-Pro-NH-pAmb
105. H-(D)-betaNal-Pro-NH-pAmb
106. Boc-(D,L)-alfaNgl-Pro-NH-pAmb
107. H-(D,L)-alfaNgl-Pro-NH-pAmb
108. Boc-(D,L)-betaNgl-Pro-NH-pAmb
109. H-(D,L)-betaNgl-Pro-NH-pAmb
110. H-(D,L)-l-Tic-Pro-NH-pAmb
111. Boc-(D)-3-Tic-Pro-NH-pAmb
112. H-(D)-3-Tic-Pro-NH-pAmb
113. 1-Icc-Pro-NH-pAmb
114. Boc-(D,L)-2-Tgl-Pro-NH-pAmb
115. H-(D,L)-2-Tgl-Pro-NH-pAmb
116. Boc-(D,L)-2-Tal-Pro-NH-pAmb
117. H-(D,L)-2-Tal-Pro-NH-pAmb
118. Boc-(D)-Phg-Pro-NH-pAmb
119. H-(D)-Phg-Pro-NH-pAmb
120. Boc-(D,L)-Phg(4-MeO)-Pro-NH-pAtnb
-19CZ 293426 B6
121. H-(D,L)-Phg(4-MeO)-Pro-NH-pAmb
122. Boc-(D)-Chg-Pro-NH-pAmb
123. H-(D)-Chg-Pro-NH-pAmb
124. EtOOC-(D)-Chg-Pro-NH-pAmb
125. HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-pAmb
126. tBuOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-pAmb
127. Boc-(D)-Cha-Pro-NH-pAmb
128. Me-(D)-Cha-Pro-NH-pAmb
129. Me-(Z)-(D)-Cha-Pro-NH-pAmb io 130. N,N-Me2-(D)-Cha-Pro-NH-pAmb
131. Boc-(D)-Trp(Boc)-Pro-NH-pAmb
132. H-(D)-Trp-Pro-NH-pAmb
133. Boc-(D,L)-Dpa-Pro-NH-pAmb
134. H-(D nebo L)-Dpa-Pro-NH-pAmb/a
135. H-(D nebo L)-Dpa-Pro-NH-pAmb/b
136. EtOOC-(D nebo L)-Dpa-Pro-NH-pAmb/a
137. EtOOC-(D nebo L>-Dpa-Pro-NH-pAmb/b
138. HOOC-CH2-(D nebo L)-Dpa-Pro-NH-pAnib/a
139. HOOC-CH2-(D nebo L)-Dpa-Pro-NH-pAmb/b
140. Boc-(D nebo L)-Dpa(4,4'-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/a
141. Boc-(D nebo L)-Dpa(4,4'-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/b
142. H-(D nebo L)-Dpa(4,4'-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/a
143. H-(D nebo L)-Dpa(4,4'-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/b
144. EtOOC-(D nebo L)-Dpa(4,4'-(Cl)2)-Pro-NH-pAnib/a
145. EtOOC-(D nebo L)-Dpa(4,4'-(Cl)2)-Pro-NH-pAinb/b
146. HOOC-CH2-(D nebo L}-Dpa(4,4'-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/a
147. HOOC-CH2-(D nebo L)-Dpa(4,4'-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/b
148. H-(D nebo L)-Dch-Pro-NH-pAmb/a
149. H-(D nebo Lj-Dch-Pro-NH-pAmb/b
150. Boc-(D)-Val-Pro-NH-pAmb
151. H-(D)-Val-Pro-NH-pAmb
152. Boc-(D)-Leu-Pro-NH-pAmb
153. H-(D>-Leu-Pro-NH-pAmb
154. Boc-(D)-Gly(alfa-tBu)-Pro-NH-pAmb
155. H-(D)-Gly(alfa-tBu)-Pro-NH-pAinb
156. Boc-(D)-Ala(beta-tBu)-Pro-NH-pAmb
157. H-(D)-Ala(beta)-tBu)-Pro-NH-pAmb
158. H-(D nebo L)-Msu-Pro-NH-pAmb/a
159. H-(D nebo L)-Msu-Pro-NH-pAmb/b
160. Boc-(cyklo)Leu-Pro-NH-pAmb
161. H-(cyklo)Leu-Pro-NH-pAmb
162. Boc-Gly-Pro-NH-pAmb
163. H-Gly-Pro-NH-pAmb
164. Ph-CH2-CO-Gly-Pro-NH-pAmb
1 65. Ph-CH2-CH2-CO-Gly-Pro-NH-pAmb
166. Ph-CHr-Gly-Pro-NH-pAmb
167. beta-naftyl-CH2-Gly-Pro-NH-pAmb
168. [3,4-(MeO)2-fenyl]-CH2-Gly-Pro-NH-pAmb
169. Ph-CHr-CO-Pro-NH-pAmb
1 70. Ph-CH2-CH2-CO-Pro-NH-pAmb
-20CZ 293426 B6
171. Ph-CH2-CH2-CH2-CO-Pro-NH-pAmb
172. alfa-naftyl-CO-Pro-NH-pAmb
173. beta-nafityl-CO-Pro-NH-pAmb
174. alfa-naftyl-CH2-CO-Pro-NH-pAmb
175. beta-naftyl-CH2-CO-Pro-NH-pAmb
176. beta-nafiyl-SO2-Pro-NH-pAmb
177. p-Tol-SO2-Pro-NH-pAmb
178. Ph-CH2-CH2-S02-Pro-NH-pAmb
179. H-Asp-Pro-NH-pAmb
180. Boc-Asp(OMe)-Pro-NH-pAmb
181. H-Asp(OMe)-Pro-NH-pAmb
182. Ph-CH2-CO-Asp(OMe)-Pro-NH-pAmb
183. Ph-CH2-CH2-CO-Asp(OMe)-Pro-NH-pAmb
184. (n-Pr)2CH-CO-Asp-Pro-NH-pAmb
185. H-Asp(OBzl)-Pro-NH-pAmb
186. (n-Pr)2CH-CO-Asp(OBzl)-Pro-NH-pAmb
187. Ph-CH2-CO-Asp-Pro-NH-pAmb
188. Ph-CH2-CH2-CO-Asp-Pro-NH-pAmb
189. (n-Pr)2CH-CO-Asp(OMe)-Pro-NH-pAmb
190. 2-(D)-Asp(OMe)-Pro-NH-pAmb
191. H-(D)-Asp-Pro-NH-pAmb
192. Z-(D)-Asp(OtBu)-Pro-NH-pAmb
193. H-(D>-Asp(OtBu)-Pro-NH-pAmb
194. Boc-(D)-Asp(OBzl)-Pro-NH-pAmb
195. H-(D)-Asp(OBzl)-Pro-NH-pAmb
196. Z-(D)-Glu(OtBu)-Pro-NH-pAmb
197. H-(D)-Glu(OtBu)-Pro-NH-pAmb
198. H-(D)-Glu-Pro-NH-pAmb
199. (D)-Ph-CH2-CHOH~CO-Pro-NH-pAmb
200. (Dj-Man-Pro-NH-pAmb
201. Boc-(D)-Phe-Aze-NH-pAmb
202. H-(D)-Phe-Aze-NH-pAmb
203. Boc-(D)-Phe-(D,L)-Pic-NH-pAmb
204. H-(D)-Phe-(D nebo L)-Pic-NH-pAmb/a
205. H-(D>-Phe-(D nebo L)-Pic-NH-pAmb/b
206. Boc-(D)-Phe-(D,L/trans)-Pic(4-Me)-NH-pAmb
207. H-(D)-Phe-(D,L/trans)-Pic(4-Me)-NH-pAmb
208. Boc-(D)-Phe-Pyr-NH-pAmb
209. H-(D)-Phe-Pyr-NH-pAmb
210. Boc-(D)-Phe-Hyp(O-tBu)-NH-pAmb
211. H-(D)-Phe-Hyp-NH-pAmb
212. Boc-(D)-Phe-(Me)Val-NH-pAmb
213. H-(D)-Phe-(Me)Val-NH-pAmb
214. Boc-(D)-Phe-Val-NH-pAmb
215. H-(D)-Phe-Val-NH-pAmb
216. Boc-(D)-Phe-Tia-NH-pAmb
217. H-(D)-Phe-Tia-NH-pAmb
218. H-(D)-Phe-Pro-NH-3-(6-Am)-pico
219. Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(6-Am)-pico
220. H-(D)-Chg-Pro-NH-3-(6-Am)-pico
221. HOOC-CHHD)-Chg-Pro-NH-3-(6-Am)-pico
-21 CZ 293426 B6
222. HOOC-CH2-(D)-Chg-Pyr-NH-3-(6-Am)-pico
223. HOOC-CH2-(D)-Chg-2-Phi-NH-3-(6-Am)-pico
224. HOOC-CH(Me)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(6-Am)-pico
225. Boc-(D)-Phe-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico
226. H-(D)-Phe-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico
227. Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico
228. H-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico
229. tBuOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico
230. HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico
231. MeOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico
232. Boc-(D)-Chg-Pro-NH-2-(5-Am)-pico
233. H-(D)-Chg-Pro-NH-2-(5-Am)-pico
234. HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-2-(5-Am)-pico
235. HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-5-(2-Am}-pym
236. (D)-Man-Pro-NH-4-(l-Am)-pip
237. Boc-(D)-Phe-Pro-NH-pHamb
238. H-(D)-Phe-Pro-NH-pHamb
239. Boc-(D)-Phe-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb
240. H-(D)-Phe-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb
241. Boc-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb
242. H-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb
243. HOOC-CH2-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-(2-MeO)-pAnib
244. Boc-(D)-Chg-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb
245. H-(D)-Chg-Pro-NH-(2‘-MeO)-pAmb
246. HOOC-CH2-(D>-Chg-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb
247. Boc-(D)-Chg-Aze-NH-(2-MeO)-pAmb
248. H-(D)-Chg-Aze-NH-(2-MeO)-pAmb
249. Boc-(D)-Chg-Pro-NH-(2-iPrO)-pAmb
250. H-(D)-Chg-Pro-NH-(2-iPrO)-pAmb
251. Boc-(D)-Chg-Pro-NH-(2-Cl)-pAmb
252. H-(D)-Chg-Pro-NH-(2-Cl)-pAmb
253. H-(D)-Phe-Pro-(D,L)(4-Am)-PhgOMe
254. Boc-(D,L)-Phe(3-OH)-Pro-NH-pAmb
255. Boc-(D,L)-l-Tic-Pro-NH-pAmb
256. H-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-Am)-pico
Sloučeniny obecného vzorce I mohou být přítomny jako takové nebo ve formě svých solí s fyziologicky přijatelnými kyselinami. Příklady takových kyselin jsou kyselina chlorovodíková, kyselina citrónová, kyselina vinná, kyselina mléčná, kyselina fosforečná, kyselina methansulfonová, kyselina octová, kyselina mravenčí, kyselina maleinová, kyselina fumarová, kyselina malonová, kyselina jantarová, kyselina hydroxyjantarová, kyselina sírová, kyselina glutarová, kyselina asparagová, kyselina benzovinná, kyselina benzoová, kyselina glukuronová, kyselina šťavelová, kyselina askorbová a acetylglycin.
Nové sloučeniny je možno použít k terapii a profylaxi všech chorob, ve kterých hraje roli trombin. Toto jsou zejména tromboembolická onemocnění jako infarkt myokardu, neprůchodnost periferních arterií, hluboká žilní trombóza, plicní embolie a mrtvice. Navíc mohou být používány k zabránění reokluzi po otevření arteriálních cév mechanickými metodami nebo lýze.
Dále jsou substance vhodné k zabránění tvorby trombinu přímým potlačením kalikreinu.
Jejich zvláštní přednost spočívá v tom, že jsou účinné také po orálním podání.
-22CZ 293426 B6
Předmětem vynálezu jsou dále následující substance obecného vzorce II, které představují cenné meziprodukty pro výrobu sloučenin obecného vzorce I,
kde R1, R2, R3 a D mají významy uvedené u vzorce I a
R5 znamená atom vodíku, Ci_4-alkoxy-CO- nebo fenyl-Ci_3-alkoxy-CO-,
R6 znamená kyano-, amidino- nebo guanidinozbxtek v poloze m- nebo p- k C(R2,R3) a p znamená 1,2 nebo 3.
Zkratky používané v popise a v příkladech mají následující významy:
Ala Am m- popř. p— Asp Aze Boc Bzl Cbz Cha Chg DCC Dch pAmb mAmb Me Et RCHO - alanin = amidino = meta popř. para = kyselina asparagová = kyselina azetidin-2-karboxylová = terc.butyloxykarbonyl = benzyl = benzyloxykarbonyl = cyklohexylalanin - cyklohexylglycin = dicyklohexylkarbodiimid = dicyklohexylalanin = para-amidinobenzyl = meta-amidinobenzyl - methyl = ethyl = zbytek po redukční aminaci, který' se týká např. přeměny Co-n-alkylen-CHO na Ci_i2—alkyl, fenylCo-3-alkylen-CHO na fenylCo_3-alkylen, X,2OC-Co_5-alkylen-CHO na Xl2OC-C,^-alkylen
As nebo AA Su DMSO LDA THF IRA PPA MOH PHi Ham Trp Asp = aminokyseliny popsané pro A v obec, vzorci = imid kyseliny jantarové = dimethylsulfoxid = diizopropylamid lithia = tetrahydrofuran = Amberlite IRA 420 (měnič iontů; Aldrich) = propanfosfonium anhydrid = methanol = perhydroindolkarbocyklická kyselina = hydroxyamidino = tryptofan = kyselina aspartová
-23CZ 293426 B6
PIP DCM DIPEA DMF Dpa Dpg EDC Glu Gly pHamb HOBT HoSu HyP Icc iPr Leu Man (Me)valin
PIP DCM DIPEA DMF Dpa Dpg EDC Glu Gly pHamb HOBT HoSu HyP Icc iPr Leu Man (Me)valin = fenyl = para-hydroxyamidinobenzyl = talóza (aldohexóza talo-hexóza) = aldohexóza manóza = pyrimidin
4- = hydroxyprolin = fosfatinidylinositol 4,5-bisfosfát = dichlormethan = diizopropylethylamin = dimethylformamid = difenylalanin = difenylglycin = N'-(3-dimethylaminopropyl)-N-ethylkarbodiimid = kyselina glutaminová = glycin = para-hydroxyamidinobenzyl; (Ham = hydroxyamidino) = hydroxybenzotriazol = hydroxysukcinimid = hydroxyprolin = kyselina izochinolinkarboxylová = izopropyl = leucin = kyselina mandlová = N-methyl-valin = methioninsulfon al = ((a popř. (3-)naftylalanin = N-bromsukcinimid = naftylglycin = fenyl = fenylalanin = fenylglycin = 2-perhydroindol-karboxylová kyselina = kyselina pipekolinová (kyselina piperidin-2-karboxylová) = pikolyl
pip:
piperidinyl-methyl
Pro pym = prolin pyrimidyl-methyl
_např. 5-pym:
PyBrop = brom-tris-pyrrolidino-fosfoniumhexafluor-fosfát
Pyr = kyselina 3,4-pyrrolin-2-karboxylová
TM = teplota místnosti
Tal = thienylalanin
TBAB = tetrabutylamoniumbromid
tBu = terciární butyl
TEA = triethy lamin
TEAC1 = tetraethylamoniumchlorid
TFA = kyselina trifluoroctová
Tgl = thienylglycin
Tia = kyselina thiazolidin-4-karboxylová
Tic = kyselina tetrahydroizochinolinová
Tol = tolyl
Trp = tryptofan
Val = valin
Z = benzyloxykarbonyl (= Cbz)
Příklady provedení vynálezu
A. Obecně předpisy
A.I. Odstranění a zavedení chránících skupin
A.l.a. Chrániči skupiny se odštěpují metodami, které popsal Gross a Maienhofer (E. Gross, J. Meienhofer „The Peptides; Analysis, Synthesis, Biology“; 1. vyd. sv. 3, Academie Press, New York 1981).
A.I.b. Cbz-Chránicí skupiny se odštěpují buď hydrogenolyticky za standardních reakčních podmínek nebo pomocí HF metodou podle Stewarta J. M., Younga J. D. „Solid Phase Peptide Synthesis“, 2. vydání; Pierce Chemical Company 1984).
A.I.c. Jestliže se získá chráněná molekula s výlučně Boc-chránicími skupinami, odštěpují se tyto pomocí HCl/dioxanu popř. HCl/methylenchloridu popř. CFjCOOH/methylenchloridu za standardních reakčních podmínek (viz Bodansky, M. a Bodansky A. „The Practice of peptide Synthesis“ Springer-Verlag, 1984).
Α.Π. Obecné návody pro hydrolýzu esterových skupin
A.II.a. 1 mmol esteru se vloží do THF (4 ml/mmol) při 0 °C. Potom se zavede 1,2 ekv. LiOH (1M roztok) a směs se přes noc míchá při TM. Po zpracování s vodou se získá odpovídající kyselina.
A.II.b. 1 mmol esteru se vloží do MeOH (4 ml/mmol) při 0 °C. Potom se zavede 1,2 ekv. LiOH (1M roztok) a směs se přes noc míchá při TM. Po zpracování s vodou se získá odpovídající kyselina.
A.II.c. 1 mmol esteru se míchá ve 2 ml HCI přes noc při TM. Produkt se zpracuje s vodou.
-25CZ 293426 B6
A.III. Obecný návod pro amidaci.
A.III.l. Podle návodu Viewega a spol. (H. Vieweg a spol., Pharmazie 1984, 39,226) se z nitrilů následujícím způsobem vyrobí amidiny, N-hydroxyamidiny a N-amino-amidiny:
ekv. nitrilu se rozpustí v pyridinu/triethylaminu (10/1; asi 20 až 30 ml/g substance). Roztok se pak nasytí plynným H2S a uzavřený nechá stát přes noc při teplotě místnosti. Pak se reakční směs vmíchá do ledové vody okyselené kyselinou chlorovodíkovou, vzniklá sraženina se odsaje, promyje vícekrát vodou a pak se suší. Substance se rozpustí v acetonu (asi 20 až 30 ml/g substance). Po přídavku Mel (1 ml/g substance) se roztok nechá stát přes noc. Přídavkem diethylesteru se vysráží hydrojodid esteru S-methyl-thioimidkyseliny a ještě se pro vyčištění přesráží z MeOH/diethyletheru.
Sůl se vloží do abs. MeOH (asi 30 ml/g substance). Po přídavku octanu amonného (pro syntézu N-hydroxyamidinů se použije hydroxylamoniumacetát popř. -chlorid a pro syntézu N-amidinoamidinů hydraziniumacetát popř. -chlorid) se směs míchá přes noc při TM. Po filtraci suspenze se část rozpouštědla odstraní ve vakuu a amidinohydrojodid se vyloučí přídavkem etheru a odsaje. Pak se surový produkt přečistí pomocí RF-HPLC.
A.III.2. Je také možno provést amidaci pomocí Pinnerovy reakce (D. Neilson v Patai „The Chemistry of Amidines and Imidates“, str. 385-489, John Wiley and Sons, New York, 1975; R. Roger, D. Neilson Chem. Rev. 1961, 6, 179; dále vit příklad 2)
A.III.3 Další možnost amidace spočívá v přeměně nitrilskupiny na hydroxyamidinskupinu pomocí hydroxylaminhydrochloridu a v následující hydrogenaci s H2/Raney-niklem (popř. H2/Pd-C) na amidin.
mmol nitrilderivátu se rozpustí ve 100 ml MeOH a po přídavku 3 ekv. Hydroxylaminhydrochloridu a 4,5 ekv. TEA až do úplného proběhnutí reakce se míchá při teplotě místnosti. Pak se reakční směs odsaje a vyjme do DCM. Organická fáze se promyje vodou (pH 5 až 6), suší se Na2SO4 a odpaří.
Zbytek se rozpustí ve 100 ml 5% methanolické HOAc a po přídavku Raney-niklu (možno také Pd/C 10%) hydrogenuje pod atmosférou vodíku. Po úplné přeměně eduktu se katalyzátor odfiltruje a filtrát se odsaje. Produkt se čistí podle potřeby buď pomocí dělení sloupcovou chromatografií nebo dělením HPLC s reverzní fází.
A.IV Obecný návod pro guanidaci aminů
A.IV.l. Výroba volných guanidinosloučenin
Volné amidinosloučeniny se syntetizují tak, že se vychází z odpovídajících aminů jako výchozích sloučenin podle postupu Millera a spol. popř. Moshera a spol. (A. E. Miller, J. J. Bischoff Synthesis 1986, 777; K. Kim, Y.-T. Lin, H. S. Mosher Tetrahedron Letters 1988, 29, 3183).
A.IV.l.a. 1 ekv. K2CO3 a lekv. aminu se rozpustí v 10ml vody. Potom se za silného míchání přidá 1 ekv, kyseliny aminoiminomethansulfonové po částech a za silného míchání. Po 24hodinovém míchání se reakční směs zfiltruje. Odfiltrovaná pevná látka je guanidin.
A.IV.l.b. Ekvimolámí množství aminu a kyseliny aminoiminomethansulfonové se při teplotě místnosti míchají v absolutním MeOH (1 ml/mmol) až do vzniku čirého roztoku. Potom se rozpouštědlo odstraní ve vakuu a surový produkt se přečistí pomocí RP-HPLC.
A.IV.2. Výroba alkoxykarbonylguanidinů
-26CZ 293426 B6
Reakce za vzniku alkoxykarbonylguanidinů se provádějí analogicky následující literatuře:
1. R. J. Bergeron, J. S. McManis J. Org. Chem. 1987, 52, 1700
2. R. Dubey, S. Abuzer, S. Sharma, R. K. Chatteries J. Med. Chem. 1985, 28, 1748
3. S. Shawkat, S. Sharma Synthesis 1992, 664
4. A. S. Vebdrini, P. Lucietto, G. Fossati, C. Giordani Tetrahedron Lett. 1992, 33, 6541
5. Z. P. Tian, P. Edwards, R. W. Rosake Int. J. Pept. Prot. Res. 1192,40, 119
A.V. Obecné esterifikační postupy
A.V.l. 1 ekv. kyseliny karboxylové se míchá spolu s 1,1 ekv. N'-(3-dimethylaminopropyl)-Nethylkarbodiimidhydrochloridu, 2 ekv. alkoholu a katalytickým množstvím dimethylaminopyridinu při teplotě místnosti přes noc. Potom se roztok zředí methylenchloridem, extrahuje 20% roztokem NaHSO4, suší a odpaří se ve vakuu.
A. V.2.1 ekv. kyseliny karboxylové se zahřívá k varu s odpovídajícím alkoholem a katalytickým množstvím kyseliny p-toluensulfonové ve chloroformu (možno také v toluenu). Po úplné reakci (DC-kontrola) se roztok promyje nasyceným NaHCO3 roztokem a roztokem chloridu sodného, suší a odpaří na rotační odparce.
B. Obecná strategie syntézy
Výroba nárokovaných sloučenin může být prováděna více způsoby.
1. Jestliže se vychází z chráněných A-derivátů W-OH, je možno postupně kopulovat o sobě známými syntézními metodami stavební kameny H-B-COW' (W' = alkyl) a
H-N(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)n-C(NH)NHR4, které jsou použity vždy ve vhodně chráněné formě (viz schéma I). Jak je běžné v peptidové chemii je mezi kopulačními kroky dosaženo odstranění chránících skupin reakčních center pro následují kopulační reakci. Zárodečné stavební kameny jsou buď obchodně dostupné neboje možno je popř. syntetizovat postupy analogickými postupům z literatury.
2. Syntézy mohou být také provedeny v opačném sledu kopulací H-N-(R1)-C(R2R3)(CH2)m-D-(NH)n-C(NH)NHR4 (R4 je vhodná chránící skupina) se vhodně chráněným W-BCOOH- a pak A-deriváty W-A-OH (viz schéma II).
3. Guanidin-, amidin-, N-hydroxyamidin- popř. N-aminoamidinové funkce se buď zavádějí ve chráněné formě (protonované nebo opatřené vhodnými chránícími skupinami) do reakce se stavebním kamenem H-N-(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)n-C(NH)NHR4 při výrobě účinných substancí a pak se odehrání nebo se po kopulaci stavebních kamenů ve stupni W-A-B-CON(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-D-NH2 guanylací popř. W-A-BCO-N(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-DCN vyrobí amidací, N-hydroxyamidací nebo N-amidací.
-27CZ 293426 B6
Schéma I (W-)A-OH + H-B-CO-OW' (W-)A-B-CO-OW'
I (W-)A-B-CO-OH | + H-NCR1)-C(R2R3) - (CH2)m-D-E (W-) A-B-CO-N (R1) -C (R2R3) - (CH2)m-D-E
I
A-B-CO-N (R1) -C (R2R3) -CH2) m-D- (NH) n-C (NH) NH2
Schéma II
W-B-CO-OH | + H-N(R2)-C(R2R3) - (CH2) m-D-E
W-B-CO-N (R1) -C (R2R3)-(CH2)ro-D-E
I
H-B-CO-N (R1)-C (R2R3) - (CH2) m-D-E | + (W-)A-OH (W-) A-B-CO-N (R1) -C (R2R3) - (CH2)m-D-E
I
A-B-CO-N (R1) -C (R2R3) -CH2) m-D- (NH) n-C (NH) NH2
W je jedna z běžných, N-terminálních chránících skupin (výhodně Boc popř. Cbz) nebo hydroxylchránicí skupina a W' znamená methyl, ethyl, terc.butyl nebo benzyl.
E znamená -CN nebo -(NH)n-C(NH)NHR4, kde R4 představuje chránící skupinu. Pro syntézu guanidinu (n = 1) může E také znamenat -NH-R4 popř. NH2.
Pro syntézu N-amidino-piperidinů (n = 0) může E znamenat také R4 popř. H.
-28CZ 293426 B6
Literatura pro peptidovou chemii:
1. E. Gross, J. Meienhofer „The Peptides; Analysis, Synthesis, Biology“; 1. vyd. díl 1; Academie Press, New York 1979
2. E. Gross, J. Meienhofer „The Peptides; Analysis, Synthesis, Biology“; 1. vyd. díl 2; Academie Press, New York 1980
3. E. Gross, J. Meienhofer „The Peptides; Analysis, Synthesis, Biology“; 1. vyd. díl 3; Academie Press, New York 1981
4. M. Deffner, E. Jaeger, P. Steizel, P. Thamm, G. Wendenberg, E. Wiinsch v Houben-Weyl „Methoden der Chemie“, 4. vyd. díl XV/1, vydáno E. Wiinsch Georg. Thieme Verlag, Stuttgart, 1974
5. M. Deffner, E. Jaeger, P. Steizel, P. Thamm, G. Wandenberg, E. Wiinsch v Houben-Weyl „Methoden der Chemie“, 4. vyd. díl XV/2, vydáno E. Wiinsch Georg Thieme Verlag Stuttgart, 1974
6. Bodansky M & Bodansky A. „The Practice of Peptide Synthesis“, Springer-Verlag, 1984
B.I. Kopulace stavebních složek (W-)A-OH a H-B-CO-N(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NHnC(NH)NHR4 popř. H-B-CO-N(Rl)-C(R2R3)(CH2)m-D-CN odpovídající obecnému vzorci I (R1, R2, R3 = H, alkyl) a schéma II
Hydrochlorid HCI x H-B-CO-N(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4 popř. HCI x H-B-CO-N(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN se nejprve vyrobí podle podmínek standardní peptidové kopulace (viz Bodansky M. & Bodansky A. „The Practice of Peptide Synthesis“, SpringerVerlag, 1984) zW-B-CO-OH (W= chránící skupina Boc nebo Cbz) a aminu H-N(Rl)C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4 popř. H-N(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN s následujícím odštěpením chránících skupin. Hydrochlorid se pak podle dále uvedeného nechá reagovat na (odpovídající obecnému vzorci) substance:
B.I.a. W-A-OH = chráněná aminokyselina (odpovídající obecnému vzorci) ekv. chráněné aminokyseliny W-A-OH a 1,1 ekv. hydrochloridu HCI x H-B-CO-N(Rl)C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4 popř. HCI x H-B-CO-N(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-DCN (odpovídající obecnému vzorci I) se podle standardního předpisu pro kopulaci peptidů nechají reagovat na požadovaný produkt. V případě, že E= CN se nitrilová funkce převede podle
A. III.1-3 na amidino- popř. hydroxyamidinoskupinu. Potom se uvedené chránící skupiny odštěpí standardními metodami.
B. I.b. A-OH = N-Acyl-AS (AS jsou pod A v obecném vzorci I jmenované aminokyseliny) acyl = HOOC-Cj-é-alkylkarbonyl, Ci_i2alkylkarbonyl, fenyl-C|^-alkylkarbonyl, a- popř. β-naftyl-Ci^-alkylkarbonyl)
B.I.b.l. Nejprve se chráněné aminokyseliny W-A-OH-jak je popsáno pod B.I.a. kopulují na tam popsaný hydrochlorid (R4 musí být běžná chránící skupina). Potom se N-koncová chránící skupina aminokyseliny odstraní (chránící skupina musí být odštěpena orthogonálně k R4) a tato se nechá reagovat s karboxylovými kyselinami AcylOH (odpovídající obecnému vzorci) za standardních podmínek na požadovaný produkt. Pro uvolnění amidino-, Ν-amino-amidino-, Nhydroxy-amidino nebo guanidinoskupiny se tato (je-li to žádoucí) za standardních podmínek
-29CZ 293426 B6 odštěpí (viz kap. A.I.). Jestliže E= CN převede se nitrilová funkce podle Α.ΙΠ.1-3 na amidino- popř. hydroxyamidinoskupinu.
B.I.b.2. Nejprve se N-terminální aminokyselina H-A-OCH3 (odpovídající obecnému vzorci I) za standardních podmínek pro kopulaci peptidů nechá reagovat na N-acylovaný aminokyselinový ester a pak se esterová skupina hydrolyzuje. Potom se acylovaná aminokyselina kopuluje jak je popsáno pod B.I.b.l s hydrochloridem
HC1 x H-B-CO-N(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4 popř. HC1 x H-N(Rl)-C(R2R3}-(CH2)m-D-CN za standardních podmínek.
V případě, že E = CN, se nitrilová funkce podle A.III.1-3 převede na amidino- popř. hydroxyamidinoskupinu. Potom se chránící skupiny odštěpí.
B-I-c. A-OH = N-Alkyl-AS (AS jsou v obecném vzorci I popsané aminokyseliny, alkyl = Ci_i2—alkyl, fenyl-Cj^-alkylen, HOOC-C]_6-alkylen, a- popř. β-naftyl-Ci-r-alkylen)
Syntézní cesta (syntézní cesta 1) je výstavba alkylovaného stavebního kamenu A-OH (popř. A-B-CO-OH) s následující kopulací stavebního kamenu H-B-CO-N(Rl)-C(R2R3)-(CH2)mD-(NH)nC(NH)NHR4 (popř. H-N(Rl}-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4) popř. H-BCO-N(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN (popř. H-N(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN). Alternativní cesta (syntézní cesta 2) je syntéza stavebního kamene H-AS-B-CO-N(Rl)-C(R2R3)-(CH2)mD-(NH)nC(NH)NHR4, popř. H-AS-B-CO-N(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN s následující Nterminální alkylací. Přítomné amidino- popř. guanidinoskupiny musí být vhodně chráněny.
Jestliže E = CN převede se nitrilová funkce podle A.III.1-3 na amidino- popř. hydroxyamidinoskupinu.
Syntézní cesta 2:
B.I.c.l 1 mmol H-AS-B-CO-N(Rl>-C-(R2R3)-(CH2)n-D-(NH)nC(NH)NHR4 popř. H-AS-B-CO-N(Rl}-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN se rozpustí vMeOH (10 ml). Po přídavku TEAC1 (1 mmol), NaBH3CN (0,7 mmol) a RCHO (1,05 mmol) se reakční směs míchá přes noc. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se vyjme do ethylacetátu. Organická fáze se promyje vodou (2x) a nas. roztokem chloridu sodného (lx) a suší pomocí Na2SO4. Po odstranění rozpouštědla se surový produkt přečistí pomocí RP-HPLC.
Jestliže E = CN převede se nitrilová funkce podle A.III.1-3 na amidino- popř. hydroxyamidinoskupinu.
B.I.c.2. 1 mmol H-AS-B-CO-N(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4 popř. H-ASB-CO(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-I>-CN se vloží do acetonitrilu společně sK2CO3 (2,5 ekv.). Po přídavku alkylačního činidla se reakční směs míchá až do úplné přeměny eduktu při 60 0 C. Po ochlazení se zpracuje s vodou a produkt se přečistí pomocí RP-HPLC.
Jestliže E = CN, převede se nitrilová funkce podle A.III.1-3 na amidino- popř. hydroxyamidinoskupinu.
Syntézní cesta 1:
Příprava alkylovaného stavebního kamenu A-OH (A= N-alkyl-AS) se provádí analogicky návodu z literatury od G. Iwasaki-ho a spol. (G. Iwasaki a spol., Chem. Pharm. Bull 1989, 37, 280 a Chem. Lett, 1981,1691). Následující návod je založen na této literatuře:
-30CZ 293426 B6
B.I.c.3. 1,5 ekv. H-AS-OCH3 nebo H-AS-COOCH3 se společně s 1 ekv. alkylačního činidla a2ekv. uhličitanu amonného míchá v nitromethanu/vodě 4 dny. Vsádka se zpracuje s vodou a produkt se přečistí pomocí chromatografie. Po chránění N-alkylaminofunkce pomocí vhodné chránící skupiny se funkce esteru aminokyseliny zmýdelní a produkt se nechá reagovat analogicky B.l.a.
B.I.c.4. Příprava N-alkyl-AS-OCH3 nebo N-alkyl-AS-B-COOCH3 může být provedena také pomocí redukční aminace z H-AS-OCH3 nebo H-AS-B-COOCH3 a aldehydu.
B.I.d. A-OH = N-subst.aminokarbonyl-AS (AS jsou pod A v obecném vzorci popsané aminokyseliny; subst.aminokarbonyl = Ci^-alkylaminokarbonyl, fenyl-Ci_4-alkylaminokarbonyl) ekv. H-AS-B-CO-N(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4 popř. H-AS-B-CON(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN se nechá reagovat s různými isokyanáty za standardních reakčních podmínek (Arnold a spol., Chem. Rev. 1957, 57, 47) na odpovídající deriváty močoviny. Jestliže E = CN, nitrilová funkce se převede podle A.III.1-3 na amidino- popř. hydroxyamidinoskupinu.
B.I.e. A = X15-(CH2)f-SO2 (X15 a f odpovídají variacím popsaným v obecném vzorci I pod A)
1,1 ekv. hydrochloridu HC1 x H-B-CO-N(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4 popř. HC1 x H-B-CON(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN se společně s 1,5 ekv. diizopropylethylaminu, katalytickým množstvím dimethylaminopyridinu a 1 ekv. substituovaného sulfonylchloridu nechá reagovat v methylenchloridu. Po zpracování s vodou se surový produkt přečistí pomocí RP-HPLC.
Jestliže E = CN, převede se nitrilová funkce podle A.III.1-3 na amidino- popř. hydroxyamidinoskupinu.
B.II. Kopulace aminu
H-N(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4 popř. H-N(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN se stavebním kamenem A-B-CO-OH (odpovídá obecnému vzorci I a schématu I).
Stavební kámen A-B-CO-OH se nejprve syntetizuje analogicky obecnému návodu v kap.B.I. Potom se amin H-N(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC)NH)NHR4 kopuluje jak je uvedeno v následujícím popise se stavebním kamenem A-B-CO-OH:
B.II.a. R1 = H, R2, R3, = H, Ci_4-alkyl, fenyl, feny 1-CM-alkylen, n = 0
B.II.a.l Stavební kámen (v případě potřeby chráněný) A-B-CO-OH se nechá reagovat s aminem H-N(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4 (R4 = -CO-C1_20-alkyl, -CO-O-Ci_20alkyl). Po vodném zpracování se surový produkt přečistí pomocí RP-HPLC. Substance s R4 = H mohou být získány standardními deprotekčními metodami.
B.II.a.2. Stavební kámen (v případě potřeby chráněný) A-B-COOH se nechá reagovat za podmínek standardní peptidové kopulace s aminem H-N(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN (Rl, R2, R3, d, m odpovídá obecnému vzorci). Po zpracování vodou se surový produkt přečistí pomocí RP-HPLC. Získaný nitril se převede jak je popsáno v ap.A.III na amidin (R4 = H), nhydroxy-amidin (R4 = OH), m-amino-amidin (R4 = NH2).
B.II.b. Rl = H, R2 = H, Ci^-alkyl, R3 = H, Ci_4-alkyl, fenyl, fenyl-Ci_4-alkylen, η = 1
B.II.b.l Stavební kámen (v případě potřeby chráněný) A-B-CO-OH se za podmínek standardní peptidové kopulace nechá reagovat s aminem H-N(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)
-31 CZ 293426 B6
NHR4 (R4 = -CO-C]_2o-alkyl, -C0-0-Ci_2o~alkyl). Po vodném zpracování se surový produkt přečistí pomocí RP-HPLC. Substance s R4 = H mohou být získány standardními deprotekčními metodami.
B.Il.b.2. Stavební kámen (v případě potřeby chráněný) A-B-COOH se nechá reagovat za standardních peptidových kopulačních podmínek s aminem H-N(Rl)-C(R2R3)-(CH2)m-DNHW (W je chránící skupina současně přítomná s orthogonální aminoskupinou). Po vodném zpracování se surový produkt přečistí pomocí RP-HPLC. Získaný chráněný amin se uvolní pomocí standardních deprotekčních metod a převede jak je popsáno v kap.A.IV na guanidin (R4 = H).
B.II.c. Rl =CM-alkyl
Tyto substance se připraví jak je popsáno pod B.II.b. Kopulační reakce se provádí s kopulačními reagenciemi pivaloylchloridem, PyBrop (Castro a spol., Tetrahedron Lett. 1990, 31, 669; Castro a spol., Tetrahedron Lett. 1991, 32, 1867; E. Frerot a spol., Tetrahedron 1990, 47, 259) nebo BOPC1 (M. J. O. Anteunis, Int., Pept. Prot. Res. 1978, 29, 574).
B.II.d. R3 = -CO-X10 popř. CO-CO-X20 (odpovídající obecnému vzorci)
B.II.d.l R3 = —CO—X20 (X20 = OH, alkoxy, aryloxy, aralkoxy)
Stavební kámen
A-B-CO-N(Rl)-CR2(COOH)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4 popř. A-B-CO-N(R1)-CR2(COOH)-(CH2)m-D-CN se syntetizuje podle standardních peptidových kopulačních metod (viz. kap.B.II.a.l). Pro produkty s X20 = alkoxy, aryloxy nebo aralkoxy se C-terminální kyselina nechá reagovat standardními esterifikačními metodami (viz. A.VI.) na odpovídající estery. Jestliže D ještě nese nitrilovou funkci, převede se tato podle AIII1-3 na amidino popř. hydroxyamidinoskupinu.
B.II.d.2. R3 = -CO-X20 (X20 = alkyl, aryl, aralkyl, CF3, C2F5)
Stavební kámen
A-B-CO-N(Rl)-CR2(COOH)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4 se připraví jak je popsáno v B.II.d.l. COX20-funkce se potom připraví v Dakin-Westově reakci za standardních reakčních podmínek (W. Steglich, G. Hofle, Angew. Chem. internát, vyd. 1969, 8, 981; W. Steglich, G. Hofle, Chem. Ber. 1969, 102. 883). R4 musí být pro tuto reakci alkoxykarbonylskupina (výhodně Boc nebo Cbz). Alternativně může být také A-B-CO-N(Rl)-CR2(COOH)-(CH2)m-D-CN použit v Dakin-Westově reakci. V tomto případě se pak nitrilová funkce podle A.III.1-3 převede na amidino- popř. hydroxyamidinoskupinu.
Obecný návod pro Dakin-Westovu reakci je následovaný:
ekv. N-terminálně chráněného tripeptidu se společně se 2,5 ekv. triethylaminu, 5 ekv. anhydridu ([X20-C(O)-O-(O)C-X20, odpovídající obecnému vzorci I) a 0,1 ekv. dimethylaminopyridinu míchá při 50 až 60 °C až již není pozorován žádný vývin CO2. Pak se reakční směs míchá 2 hodiny s nasyceným roztokem Na2CO3 při 60 °C. Směs se rozdělí mezi ethylacetát a nasycený roztok NaHCO3 a organická fáze se pak extrahuje nasyceným roztokem NaHCO3 (2x) a 20% roztokem NaHSO4, suší se pomocí Na2SO4 a odpaří se na rotační odparce. Surový produkt se přečistí pomocí RF-HPLC.
B.II.d.3. R3 = -CO-X20 (X20 = přirozená aminokyselina)
-32CZ 293426 B6
Stavební kámen
A-B-CO-N(Rl}-CR2(COOH)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4 se připraví jak je popsáno v B.II.d.l. R4 musí pro následující reakci být alkoxykarbonylskupina (výhodně Boc nebo Cbz). Alternativně ktomu může být pro následující reakci použit A-B-CO-N(R1)-CR2(COOH)(CH2)m-D-CN. Tyto stavební kameny se pak nechají reagovat za standardních podmínek peptidové kopulace s C-terminálně chráněnou aminokyselinou. Požadované produkty se pak uvolní odstraněním chránících skupin (analogicky A.I. a A.IL), popř. se nitrilová funkce podle A.III.1-3 převede na amidino- popř. hydroxyamidinoskupinu.
B. II.d.4. R3 =-CO-CO-X20
Výstavba tohoto stavebního kamene je založena na PCT přihlášce WO 94/08941. Podle tohoto návodu se nejprve následujícím způsobem syntetizuje stavební kámen W-N(R1)-CR2(CO-COX20)-D-(NH)n)-C(NH)NHR4 (W je vhodná chránící skupina a musí být orthogonálně k R4):
Terminálně chráněná aminokyselina W-NH-CR2(COOH)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4 (R4 musí být chránící skupina orthogonálně k W) se nejprve převede na kyanhydrin W-NH-C(U)(R2)-CH(OH)-CN (s U = -(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4).
Potom se nitril převede na karboxyfunkci, karboxylová funkce se esterifikuje za vhodných esterifikačních podmínek (viz A. V.), N-terminální aminochránicí skupina W se odštěpí a získaný amin se kopuluje se stavebním kamenem A-B-CO-OH.
a. Pro tvorbu produktů s X20 = Cj^-alkoxy, fenyl-Ci ^-alkoxy se skupina X20 převede esterifikací.
b. Pro tvorbu produktů s X20 = aminokyselina následuje C-terminální esterová hydrolýza s následující aminokyselinovou kopulací.
c. Pro tvorbu produktů s X20 = H, Cj^-alkyl, fenyl, fenyl-Ci-4-alkylen, -CF3, -C2F5 se C-terminální esterová skupina nejprve hydrolyzuje, potom se převede na Weinreb-amid a pak reaguje s X20 odpovídajícími nukleofily.
Takto získaný stavební kámen A-B-CO-NR1-C(U)(R2)-CH(OH)-C(O)-X20 se oxiduje na ketoamid za podmínek Swemovy oxidace. Potom se ještě přítomné chránící skupiny odštěpí za standardních podmínek.
C. Příprava eduktů
C.l. Příprava Boc-(D)PheOSu ekv. Boc-(D)Phe-OH se míchá s 1,05 ekv. hydroxysukcinimidu a 1,05 ekv. dicyklohexylkarbodiimidu přes noc při TM v acetonitrilu (2,5 ml/mmol). Potom se suspenze filtruje a filtrát se odpaří na rotační odparce. Získá se produkt v téměř kvantitativním výtěžku.
C.2. Příprava Boc-(D,L)Dpa-OH
Boc-(D,L)Dpa-OH se připraví podle návodu Kakkara a spol. (L. Cheng, C. A. Goodwin, M. F. Schully, V.V. Kakkar, J. Med. Chem. 1992, 35, 3364).
C.3. Příprava Boc-(D,L)Dch-OH
-33CZ 293426 B6
Boc-(D,L)Dpa-OH (1 mmol) se hydrogenuje společně s katalytickým množstvím 5% Rh/Al2O3 při 5 bar. Po filtraci a odstranění rozpouštědla ve vakuu se získá produkt ve kvantitativním výtěžku.
C.4. Příprava Boc-l-(D,L)Tic-OH
Boc-l(D,L)Tic-OH se připraví podle návodu R. T. Shumana a spol. (R. T. Shuman a spol., J. Med. Chem. 1993, 36,314).
C.5. Příprava Cbz-(D)PhePro-Osu
i. 30 g Cbz-(D)PheOH, 11,54 g hydroxysukcinimidu, 20,68 g dicyklohexylkarbodiimidu a 300 ml dimethoxyethanu se míchá při teplotě místnosti přes noc. Potom se suspenze filtruje, filtrát se odpaří na rotační odparce a zbytek se rozpustí ve 200 ml acetonitrilu, vyloučená dicyklohexylmočovina se odfiltruje a filtrát se odpaří. Zbude 40 g sukcinimidesteru (bílá pevná látka).
ii. 40 g Cbz-(D)PheOSu, 17,31 g prolinu, 12,63 g NaHCO3, 225 ml vody a 225 ml dimethoxyethanu se přes noc míchá při teplotě místnosti (vývoj plynu). Potom se odstraní dimethoxyethan ve vakuu a zbylý vodný roztok se pomocí IN HC1 nastaví na pH 2. Odloučený olej se extrahuje methylenchloridem. Spojené methylenchloridové extrakty se promyjí nas. roztokem chloridu sodného a po sušení síranem sodným se odpaří na rotační odparce. Zbude
39,7 g Cbz-(D)PheProOH (bílá pevná látka).
iii. 39,7 g Cbz-(D)PheProOH, 11,53 g hydroxysukcinimidu, 20,66 g dicyklohexylkarbodiimidu a 400 ml dimethoxyethanu se míchá přes noc při teplotě místnosti. Další den se dicyklohexylmočovina odfiltruje, filtrát se odpaří a zbytek se vyjme do 300 ml acetonitrilu. Ještě jednou vysrážená dicyklohexylmočovina se odfiltruje a filtrát se odpaří ve vakuu. Zbude 48,92 g hydroxysukcinimidesteru.
C.6. Příprava Boc-chráněných fenylalaninderivátů
Pokud aminokyseliny H-A-OH popř. Boc-A-OH nejsou obchodně dostupné, byly vyrobeny analogicky uvedeným návodům z literatury (přehled: Houben-Weyl, sv. E 16d/díl 1 str. 406 a další).
Často používané edukty pro alaninové deriváty byly ethylester kyseliny benzofenoniminooctové, diethyiester kyseliny acetamidomalonové a ethylester kyseliny izonitriloctové.
Jako příklady je možno uvést ekv. difenylglyciniminu, 3. ekv. K2CO3 a odpovídající benzylbromid (možno také -chlorid popř. jodid) se zahřívají v acetonitrilu k varu přes noc. Po ochlazení se reakční směs filtruje a filtrát se odpaří. Potom se zbytek míchá v IN HC1 až do úplného rozštěpení iminu. Potom se vodná fáze extrahuje ethylacetátem, zalkalizuje Na2CO3 a extrahuje ethylacetátem. Spojené organické extrakty se suší síranem sodným a odpaří se na rotační odparce. Zbytek, odpovídající fenylalaninový derivát, se chrání za standardních podmínek N-terminálně chránící skupinou (výhodně Boc nebo Cbz).
C.7 Příprava Boc-chráněných glycinderivátů
Příprava různých glycinderivátů se provádí např. tak, že se vychází z ethylesteru kyseliny izonitriloctové a odpovídajícího ketonu (viz H.-J. Pretorius, J. Flossdorf, M.-R. Kula Chem. Ber. 195,108. 3079).
-34CZ 293426 B6
Boc-Suberylglycin se syntetizuje analogicky podle literatury (O. P. Goel a spol., Tetrahedron Lett, 1993,34, 953).
Boc-(3-Ph)-Pro-OH se syntetizuje analogicky návodu J. Y. L. Chung-a a spol., (J. Y. L. Chung a spol., J. Org. Chem. 1990, 55, 270).
Tetralinylglycin se připraví tak, že se vychází z 1,2-dihydronaftalenu, 1,2-dihydronaftalen se nejprve převede sHBr na 1-tetralylbromid (analogicky J. Med. Chem. 1994, 37, 1586). Potom se bromid nechá reagovat s ethylesterem kyseliny acetamidomalonové. hydrolyticky se štěpí a získaná α-aminokyselina se za standardních podmínek převede na Boc-chráněnou formu.
C.8 Příprava Boc-(D)-(a-methyl)-Cha-OH
Boc-(D)-(a-methyl)-Cha-OH se vyrobí hydrogenací (D)-(a-methyl)-Phe-OH a následujícím zavedením Boc-chránicí skupiny. Další možnosti pro syntézu a-substituovaných aminokyselin jsou Buchererova syntéza, vycházející z ketonů jakož i cc-alkylace a-aminokyselin.
C.9. Příprava derivátů kyseliny hydroxyoctové
Deriváty kyseliny hydroxyoctové se připraví buď analogicky práci S. Bajusze (W093/18060) nebo tak, že se vychází zodpovídajících derivátů methylesteru kyseliny octové a provede se α-hydroxylace pomocí Davisova reagens (F. A. Davis, L. C. Vishwarkarma, J. M. Billmers, J. Org. Chem. 1984, 49, 3241).
C. 10. p-(2-Aminoethyl)-benzonitril·.
Výroba se provádí podle EP 445796
C.l 1. p-Kyano benzylamin:
C.ll.a. 200 g 4-kyanobenzylbromidu (1,02 mol), 700 ml toluenu, 200 g azidu sodného (3,07 mol), 32,9 g TBAB a 700 ml vody se míchá přes noc při teplotě místnosti. Potom se obě fáze oddělí a toluenová fáze se ještě promyje vodou. Objem rozpouštědla se redukuje na 1/5 ve vakuu.
C.ll.b. 267,6 g trifenylfosfinu (1,02 mol) se vloží při 10 °C do 500 ml tetrahydrofuranu. K tomuto roztoku se pomalu přikape ve 165 ml tetrahydrofuranu rozpuštěný azid (vývoj dusíku). Po ukončení přidávání se pomalu přidá 27,6 ml vody (1,53 mol) a reakční směs se 48 h míchá při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se pak odpaří na rotační odparce a zbytek se vyjme do studené 3N HC1 (1 1). Vyloučená pevná látka se odsaje a filtrát se promývá toluenem až do úplného odstranění trifenylfosfmoxidu. Potom se kyselá vodná fáze pomocí Na2CO3 (pevný) nastaví na hodnotu pH = 9, vyloučená pevná látka se odfiltruje a filtrát se extrahuje diethyletherem. Pevná látka se rozpustí v diethyletheru a společné s etherickými extrakty se suší. Etherové objemy se pak redukují a hydrochlorid se vysráží zaváděním plynného HC1. Sůl se odfiltruje, promyje se diethyletherem a suší se na vzduchu (sůl sublimuje ve vysokém vakuu). Výtěžek 137,6 g.
C.ll.c. Výroba p-kyanobenzylaminu z p-kyanobenzylbromidu se provádí v dobrém výtěžku také přes ftalimid s následujícím štěpením hydrazinhydrátem.
Popřípadě je vhodná syntéza přes urotropiniovou sůl (W. Walter a spol., Ann. 1962,660,60)
-35CZ 293426 B6
C.12. m-Kyanobenzylamin:
Výroba se provádí podle údajů v literatuře (Pharmacie 1978, 33, 15)
C. 13. (D,L)-1 -(4-Kyanofeny l)-ethy lamin;
C. 13 .a. N-(p-Kyanobenzyl)-benzofenonimin
K roztoku 150 g (0,8 mol) 97% benzofenoniminu a 144,8 g (0,74 mol) p-kyano-benzylbromidu ve 450 ml acetonitrilu se přidá 270 g bezvodého K2CO3 a nechá se míchat při teplotě místnosti 6 h. Po odsátí anorganických solí se rozpouštědlo oddestiluje ve vakuu, zbytek se smísí se 300 ml vody a vícekrát se extrahuje ethylacetátem. Organická fáze se promyje 3 x vodou, suší se nad síranem sodným a odpaří se dosucha. Po rozetření s etherem se získá 180 g bílých kiystalů, t.t. 101 až 102 °C.
C.13.b l-(4-Kyanofenyl)ethylamin
K roztoku lithiumdiizopropylamidu vyrobeného z 8,15 g (0,08 mol) diizopropylaminu a 48,3 ml (0,08 mol) 15% roztoku butyllithia v hexanu - ve 100 ml abs.tetrahydrofuranu, se přikape při -70 °C 20,7 g (0,07 mol) N-(p-kyanobenzyl)-benzofenoniminu a dále se 15 minut míchá. Potom se přikape 9,94 g (0,07 mol) methyljodidu a teplota reakční směsi se nechá stoupnout na teplotu místnosti. Po přídavku 100 ml vody se extrahuje vícekrát etherem, etherová fáze se promyje 5% roztokem kyseliny citrónové, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou, suší se nad síranem sodným a ether se oddestiluje. Zbytek se rozpustí ve 150 ml tetrahydrofuranu, přidá se 100 ml IN HCI a míchá se přes noc při teplotě místnosti. Z reakční směsi se ve vakuu oddestiluje tetrahydrofuran, zbylá kyselá fáze se pro odstranění benzofenonu vícekrát extrahuje etherem, potom se kyselá fáze za chlazení ledem zalkalizuje vodným roztokem uhličitanu draselného a olejová báze se extrahuje methylenchloridem. Extrakt se suší nad uhličitanem draselným. Po odtažení methylenchloridu zbude
9,7 g (95 %) nažloutlého oleje, který se použije bez dalšího čištění v následující reakci.
C. 14. 4-Aminomethyl-3-methoxy-benzonitril:
C. 14.a. 3-Nitro-4-methyl-benzonitril
K 1 1 dýmavé kyseliny dusičné se při -10 °C během 90 min přidá 399 g (2,56 mol) p-toluennitrilu. 1 h po přídavku se směs nalije na 2,5 g ledu/vody, vysráží se přitom pevná látka, která se oddělí filtrací přes nuč a promyje vodou do neutrality. Výtěžek produktu činí 363 g (88 %).
‘H-NMR (CDC13: δ v ppm): 8,3 (d, 1H); 7,8 (dd, 1H); 7,5 (dd, 1H); 2,7 (s, 3H).
C. 14.b. 3-Amino-4-methyl-benzonitril:
120 g 3-nitro-4-methyl-benzonitrilu se suspenduje v 1,2 lEtOH a za přítomnosti 7 g Pd/C (10%) se hydrogenuje s 50 1 vodíku při TM. Po oddělení katalyzátoru přes celit se rozpouštědlo odtáhne a získá se 95 g čistého produktu (97 %). 'H-NMR (DMSO-d6: δ v ppm): 7,1 (dd, 1H); 6,90 (d, 1H); 6,85 (dd, 1H); 5,35 (s, 2H, NH2); 2,15 (s, 3H)
C. 14.c. 3-Hydroxy-4—methyl-benzonitril:
K 85 g (0,72 mol) 3-amino-4-methyl-benzonitrilu v 1,8 1 6N HCI se při 0 až 5 °C během 30 min přikape roztok 49,2 g (0,72 mol) dusitanu sodného ve 217 ml vody. Míchá se pak dalších 30 min při 0 až 5 °C a pak ještě 1 h při teplotě varu. Po ochlazení roztoku mohl být produkt extrahován ethylacetátem a z něj ve formě fenolátu extrahován ledově studeným 5N
-36CZ 293426 B6
NaOH. Vodná fáze se pak okyselí 6N HCI na pH 3 a produkt se extrahuje ethylacetátem. Získá se 41 g (43 %) fenolu. ’Η-NMR (DMSO-d6; δ v ppm): 10,3 (s, OH); 7,25 (dd, 1H); 7,15 (d, 1H); 7,1 (dd, 1H); 2.20 (s, 3H)
C. 14.d. 3-Methoxy-4-methyl-benzonitril:
g (0,11 mol) 3-hydroxy-4-methyl-benzonitrilu, rozpuštěného ve 30 ml DMF se přikape k suspenzi 0,11 mol NaH a 30 ml DMF a míchá se tak dlouho, až již není pozorovatelný žádný vývoj H2. Potom se přikape 10,6 ml (0,17 mol) methyljodidu a míchá se 1 h při TM. Roztok se nalije na ledovou vodu a produkt se extrahuje etherem/ethylacetátem 7:1. Po odtažení rozpouštědla začne produkt pomalu krystalovat. Získá se 14,8 g (89 %) produktu. ‘H-NMR (CDC13: δ v ppm): 7,2 (m, 2H); 7,02 (s, 1H); 3,85 (s, 3H); 2,25 (s, 3H).
C. 14.e. 4-Brom-3-methoxy-benzonitril:
14,7 g (0,1 mol) 3-methoxy-4-methyl-benzonitrilu se rozpustí ve 210 ml 1,2-dichlorethanu, po částech se během 1 h brómuje 19,1 g (0,11 mol) NBS za přítomnosti katalytického množství AIBN při 82 °C a pak se po ukončení přidávání dalších 30 min míchá při 82 °C. Po přidání n-heptanu se vysrážený sukcinimid oddělí a rozpouštědlo se odtáhne. Produkt obsahuje vedle malého množství eduktu ještě stopy odpovídajícího benzalbromidu. ‘H-NMR (DMSO-d6; δ v ppm): 7,60 (dd, IH); 7,50 (d, 1H); 7,40 (dd, 1H); 4,68 (s, 2H); 3,96 (s, 3H).
C. 14.f. 4-Ftalimido-3-methoxy-benzonitril:
24,4 g (108 mol) 4-brommethyl-3-methoxy-benzonitrilu, rozpuštěného ve 125 inl DMF a 20,0 g ftalimidu draselného se rozpustí ve 125 ml DMF a 20,0 g ftalimidu draselného a 24 h se míchá při TM a pak ještě 1 h při 50 °C. Smés se nalije na vodu. Produkt se přitom vyloučí jako pevná látka. Získá se 21,5 g (68 %) produktu. ’Η-NMR (DMSO-de; δ v ppm): 7,9 (m, 4h); 7,5 (d, 1H); 7,35 - 7,25 (m, 2H); 7,78 (s, 2H); 3,92 (s, 3H).
C.14.g. 4-Aminomethyl-3-methoxy-benzonitril:
Ke 21,2 g (73 mmol) 4-ftalimidomethyl-3-methoxy-benzonitrilu rozpuštěného ve 290 ml THF se přidá 10,6 ml hydrazinhydrátu a 20 h se míchá při TM. Pak se přikape 180 ml 2N HCI a rozpouštědlo se úplně odtáhne za 1,5 h. Zbytek se vyjme do MTBE, extrahuje se IN HCI, pH se upraví na 9 až 10 2N NaOH a extrahuje se sDCM. Získá se 8,0 g (68 %) produktu. 'H-NMR (DMSO-d6; δ v ppm): 7,55 (dd, 1H); 7,40 (dd, 1H); 7,37 (d, 1H); 3,85 (s, 3H); 3,70 (s, 2H); 2,5 - 1,6 (NH2).
C.l 5 4-Aminomethyl-3-izopropoxy-benzonitril:
C. 15.a. 3-izo-Propoxy-4-methyl-benzonitril:
7,0 g 3-hydroxy-4-methyl-benzonitrilu (52,6 mmol) se deprotonuje s 57,8 mol NaH ve 100 ml THF a smísí se 7,4 ml 2-brompropanu při 0 °C. Po 45 min se teplota zvýší na 50 °C a míchá se dalších 5 h. Reakční směs se nalije na vodu a produkt se extrahuje etherem. Produkt se přečistí sloupcovou chromatografií přes silikagel (eluční činidlo: dichlormethan/10 % heptan). Získá se 6,3 g (68 %); t.t. 60 až 61 °C.
C. 15.b. 4-Brommethyl-3-izopropoxy-benzonitril:
6,1 g 3-izo-propoxy-4-methyl-benzonitrilu (33,4 mmol) se brómuje analogicky příkladu (C.14.e) s NBS a AIBN. Produkt vzniká v téměř kvantitativním výtěžku. ‘H-NMR (DMSO
-37CZ 293426 B6 d6; δ v ppm): 7,65 - 7,30 (3H, aromáty-H); 4,85 (1H, CH), 4,63 (2H, CH2, 1,40 - 1,25 (6H, 2xCH3)
C.15.c. 4-Aminomethyl-3-izopropoxy-benzonitril (hydrochlorid):
8,8 g bromidu (i) (33,4 mmol) se rozpustí ve 100 ml MeOH a při 40 °C se přikape do 150 ml amoniakem nasyceného MeOH. Rozpouštědlo se odtáhne, produkt se vyjme do dichlormethanu, promyje se IN hydroxidem sodným a etherickým HC1 se vysráží hydrochlorid. Získá se 2,6 g. ’Η-NMR (DMSO-d6; δ v ppm): 8,6 (3H, NH3 +), 7,65 - 7,40 (3H, aromátyH), 4,80 (1H, CH); 4,00 (2H, CH2), 1,4-1,3 (6H, 2xCH3)
C.16. 4-Aminomethyl-3-chlor-benzonitril:
C. 16.a. 4-Brommethyl-3-chlor-benzonitril:
3-Chlor~4-methyl-benzonitril se brómuje analogicky příkladu (C.14.e) s NBS a AIBN.
’Η-NMR (DMSO-d6; δ v ppm): 8,10 a 7,85 (3H, aromáty-H), 4,80 (2H, CH2)
C. 16.b. 4-Aminomethyl-3-chlor-benzonitril:
10,0 g bromidu se nechá analogicky příkladu (C.14.f.) reagovat s ftalimidem draselným. Získá se 9,6 g ftalimidomethyl-3-chlor-benzonitrilu, který se štěpí hydrazinhydrátem analogicky příkladu (C.14.g.). Volný amin (4,0 g) se získá po extrakci dichlormethanem z vodné fáze upravené hydroxidem sodným na pH 9-10. ’Η-NMR (DMSO-d6; δ v ppm): 7,95 7,78 (3H, aromáty-H); 3,85 (2H, CH2), 2,1 (široký signál, 2H, NH2
D. Příklady
Příklad 1
Boc-(D}-Phe-Pro-NH-(4-Am)-2-fenethy 1:
K roztoku 10 mol Boc-(D)-Phe-Pro-OH a 11 mmol N-methylmorfolinu v 10 ml DMF se přidá při -15 °C během 2 minut 10 mmol izobutylesteru kyseliny chlormravenčí, míchá se ještě 10 minut a pak se přidá roztok 10 mmol p-kyanobenzylaminu a 11 mmol N-methylmorfolinu ve 3 ml DMF. Po 3-hodinovém míchání při -15 °C není podle DC-kontroly (DCM/MeOH, 9/1) prokazatelná žádná výchozí sloučenina.
K izolaci se reakční směs nalije ve 200 ml vody, odloučí se přitom olej, který po kratší době ztuhne a po rozmělnění se odsaje. Ještě vlhký zbytek se rozpustí ve směsi 250 ml ethylacetátu a 50 ml etheru a postupně se promyje 5% vodným roztokem kyseliny citrónové, hydrogenuhličitanu a chloridu sodného. Po sušení nad síranem sodným se rozpouštědlo oddestiluje ve vakuu, zbytek se smísí s n-hexanem a pak se odsaje. Rekrystalizací z 50 ml ethylacetátu se získá
7,4 mmol DC-čistého produktu, který analogicky A.III.l. metodou H2S reaguje na amidinhydrojodid.
Získají se nažloutlé krystaly; t.t. 158 až 165 °C FAB-MS: 508 (M+FT).
-38CZ 293426 B6
Příklad 2
H-(D)-Phe-Pro-NH-(4-Am)-2-fenethyl:
Odštěpení Boc-skupiny z příkladu 1 se provede analogicky A.l.C. Jako směs rozpouštědel se zde použije dichlormethan/ethylacetát 1:1. Získá se dihydrochlorid ve formě bílých krystalů; t.t. 203 až 206 °C (rozklad); FAB-MS: 408 (M+FT)
Příklad 3
Boc-(L)-Phe-Pro-NH-p Amb:
Sloučenina se vyrobí tak, že se vychází z Boc-(L)-PheOH a H-Pro-p-kyano-benzylamidu x HC1 analogicky B.l. a pak reakcí nitrilu na amidin analogicky A.III. 1. Takto získaný amidinhydrojodid se přes acetátový iontoměnič (IRA 420) převede na amidin-hydroacetát.
'H-NMR (DMSO-d6; δ v ppm): 8,4 (m, 1H, NH); 7,75 (d, 2H, Ar-H); 7,2 (m, 5H, Ar-H); 7,18/7,02 (2g, 1H, NH); 4,48 - 4,18 (m, 4H, CH2/2-cc-H); 3,6 (m, 2H, Pro); 3,0 - 2,7 (m, 2H, CH2-Ph); 2,18 - 1,8 (m, 4H, Pro); 1,3-1,2 (2s, 9H, Boc) MS: 494 (M+FT); 394 (-Boc); t.t. Ϊ 42 °C
Příklad 4
H-(L)-Phe-Pro-NH-pAmb:
Sloučenina se vyrobí Boc-odštěpením analogicky A.I.c. z příkladu 3. Získaný dihydrochlorid se nechá reagovat sloupcovou chromatografií přes silikagel za přídavku kyseliny octové na dihydroacetát; t.t. 69 °C; FAB-MS: 394 (M+H+)
Příklad 5
Boc-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb:
K roztoku 5,1 g (14,2 mmol) Boc-D-Phe-Pro-OH a 1,53 g (15,2 mmol) N-methylmorfolinu v 15 ml DMF se přidá při -15 °C během 2 min 2,0 g (14,6 mmol) izobutylesteru kyseliny chlormravenčí, míchá se 10 minut a pak se přidá roztok 1,9 g (14,2 mmol) p-kyanobenzylaminu a 1,53 g N-methylmorfolinu ve 3 ml DMF. Po 3 hodinovém dalším míchání při -15 °C nebyla podle DC-kontroly (CH2Cl2/MeOH, 9/1) již prokazatelná žádná výchozí sloučenina.
Pro izolaci se reakční směs nalije do 200 ml vody, odloučí se olej, který po krátké době tuhne a po rozmělnění se odsaje. Ještě vlhký zbytek se rozpustí ve směsi ze 250 ml ethylacetátu a 50 ml etheru a postupně se promyje 5% vodným roztokem kyseliny citrónové, hydrogenuhličitanu a nasyceným roztokem chloridu sodného. Po sušení nad síranem sodným se rozpouštědlo oddestiluje ve vakuu, zbytek se smísí s n-hexanem a pak odsaje. Rekrystalizací z 50 ml ethylacetátu se získá 5,6 g DC-čistého Boc-(D)-Phe-Pro-p-kyano-benzylamidu; t.t. 156 až 157 °C.
Tvorba thioamidu: 4,1 g dříve uvedené sloučeniny a 4 ml triethylaminu se rozpustí ve 40 ml pyridinu, při 0 °C se nasytí H2S a nechá stát přes noc při teplotě místnosti. Podle DC-kontroly (CH2Cl2/MeOH, 9/1) je reakce na thioamid úplná. Pro izolaci se pyridin oddestiluje ve vakuu, zbytek se vyjme do 250 ml ethylacetátu a promyje roztokem chloridu sodného, 5% roztokem
-39CZ 293426 B6 kyseliny citrónové a hydrogenuhličitanu sodného. Po sušení a oddestilování rozpouštědla se získá
4,1 g čistého krystalického thioamidu.
Tvorba amidinu: Thioamid se rozpustí ve 150 ml acetonu a nechá stát při teplotě místnosti po přídavku 7 ml methyljodidu. Po odtažení rozpouštědla se amorfní zbytek rozmíchá se suchým etherem a pak se suší. Hydrojodid methylesteru kyseliny S-ethyl-thioimidové se rozpustí v 50 ml ethanolu smísí s 15 ml 10% roztoku octanu amonného a 3 hodiny se zahřívá na 60 °C. Pro izolaci se rozpouštědlo odtáhne, zbytek se rozpustí ve 100 ml CH2C12 a nerozpustný podíl se odfiltruje a pak se oddestiluje CH2CI2. Rozetřením se směsí ethylacetát-diethylether se odstraní v nich rozpustné nečistoty. Zbylá směsná sůl jodid-acetát se rozpustí v acetonu/vodě (3/2) a pomocí IRA-acetát-měniče iontů se převede na čistý acetát. Roztok se odpaří dosucha a zbytek se suší vymražením. Izoluje se 3,8 g DC-čistého (CH2C12/MeOH/50% ledová kyselina octová, 20/5/1) Boc-D-Phe-Pro-NH-pAmb ve formě acetátu, t.t. 195 až 200 °C (rozklad).
Příklad 6
Ac-(D)-Phe-Pro-NH-p Amb:
10,4 g (0,05 mol) Ac-D-Phe-OH, 6,3 g (0,055 mol) N-hydroxysukcinimidu a ll,4g (0,055 mol) dicyklohexylkarbodiimidu se rozpustí ve 150 ml acetonitrilu a míchá se přes noc při teplotě místnosti. Vzniklá sraženina se odfiltruje, rozpouštědlo se oddestiluje a zbytek se suší ve vakuu a použije se v následující reakci bez dalšího čištění.
13,3 g (0,05 mol) (4-kyanobenzyl)prolylamid-hydrochloridu (viz příklad 10) se rozpustí ve 100 ml methylenchloridu a postupně se smísí při 0 °C s 15 ml triethylaminu a roztokem uvedeného Ac-D-Phe-O-sukcinimidu v 70 ml methylenchloridu. Reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti a postupně se promyje vodou, 5% kyselinou citrónovou, 5% hydrogenuhličitanem sodným a chloridem sodným. Po sušení a oddestilování rozpouštědla se zbytek přečistí přes sloupec silikagelu (eluent: CH2Cl2/MeOH, 50/2) a potom se analogicky příkladu 5 převede na amidin.
Acetát: t.t. 220 až 224 °C (rozklad), FAB-MS: 436 (M+H+)
Příklad 7
H-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb:
4,9 g (10 mmol) sloučeniny získané podle příkladu 5 se rozpustí ve směsi rozpouštědel ze 100 ml chloroformu a 100 ml ethylacetátu a při -15 °C pod uzávěrem přístupu vlhkosti se nasytí plynným HCI. Po jedné hodině podle DC (CH2Cl2/MeOH/50% ledová kyselina octová, 20/5/1) nebyla již prokazatelná žádná Boc-sloučenina.
Zaváděním dusíku se při -15 °C odstraní přebytečný plynný HCI, přičemž se vyloučí dihydrochlorid jako jemný krystalizát. Po přídavku 50 ml etheru k doplnění vyloučení se sraženina odsaje a následně se promyje směsí ethylacetát-ether (1/1). Zbytek se rozpustí ve vodě, zpracuje se s aktivním uhlím a lyofílizuje. Získá se 3,7 g (95 % teorie) dihydrochloridu jako bílých kiystalů, t.t. 215 °C (rozklad); FAB-MS: 394 (M+H‘)
-40CZ 293426 B6
Příklad 8
H-(D)-Phe-Pro-N(Me)-pAmb:
Sloučenina se vyrobí analogicky příkladu 5 reakcí Boc-(D)-Phe-Pro-OH a N-methyM-kyanobenzylaminu. Potom se Boc-skupina analogicky A.I.c. odštěpí. Získá se dihydrochlorid ve formě amorfní pevné látky; FAB-MS: 408 (M+H+)
Příklad 9
Me-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb:
4,0 g následující sloučeniny (příklad 10) se rozpustí ve 25 ml EtOH, smísí se s 1,55 g 32% HC1 a po přídavku 0,6 g 10% Pd/C se hydrogenuje. Po 1 h je reakce kvantitativní (podle DC: methylenchlorid/MeOH/50% HOAc; 35/15/5). Po odsátí katalyzátoru a oddestilování rozpouštědla se zbytek převede se 100 ml ethylacetátu na bílý prášek a po rozpuštění ve vodě se lyofilizuje. Izoluje se 3,1 g dihydrochloridu, který se po sintrování při 100 °C nad 215 °C rozkládá.
Příklad 10
Z-Me-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb:
(4-Kyanobenzyl)-propylamid-hydrochlorid:
276 g BocPro-O-sukcinimidu (0,88 mol) se vloží do 2 1 methylenchloridu při 0 °C. K tomuto roztoku se postupně přidá 163,9 g 4-kyanobenzylaminhydrochloridu (0,97 mol) a 230 ml diizopropylethylaminu (1,34 mol). Suspenze se míchá 48 h na tající ledové lázni a pak se filtruje. Filtrát se extrahuje 20% roztokem síranu sodného (4 x), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (3 x) a nasyceným roztokem chloridu sodného (2 x), suší se a odpaří na rotační odparce. Zbude 299 g produktu, který taje po rekrystalizaci z methyl-terc.butyletheru při 124 až 125 °C.
299 g Boc-chráněné sloučeniny se rozpustí v 1 1 diethyletheru. Po přídavku etherického HCIroztoku (HC1 v přebytku) se míchá přes noc. Vyloučená sůl se odfiltruje, promyje se diethyletherem a suší se ve vakuu. Surový produkt se rekrystaluje z EtOH.
Výtěžek: 200 g; t.t. 209 až 213 DC (rozkl.)
Z-Me-(D)-Phe-Pro-p-kyano-benzy lamid:
3,1 g (0,01 mol) Z-Me-(D}-Phe-OH a 1,49 g (0,011 mol) hydroxybenzotriazolu se rozpustí v 50 ml DMF a smísí při 0 °C se 2,1 g (0,01 mol) dicyklohexylkarbodiimidu. Po 30 min se přidá
2,7 g (0,01 mol) (4—kyanobenzyl)-prolylamid-hydrochloridu a 2,2 ml N-methylmorfolinu. Reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti, vyloučená močovina se odfiltruje a rozpouštědlo se oddestiluje ve vakuu. Zbytek se rozpustí ve 100 ml ethylacetátu a postupně se promyje vodou, 5% kyselinou citrónovou, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a roztokem chloridu sodného. Po sušení a oddestilování rozpouštědla zbude 4,7 g (90 % teorie) vazkého oleje, který se použije v následující reakci.
-41 CZ 293426 B6
Amidace pomocí Pinnerovy reakce
Do roztoku 8,9 g abs. EtOH ve 25 ml methylenchloridu se přikape při 0 °C 12,3 g acetylchloridu a dále se 40 min míchá. Potom se při 0 °C přikape roztok 4.7 g výše uvedené substance ve 30 ml abs. methylenchloridu. Reakční směs se nechá stát 4 dny při 0 °C. Po odpaření rozpouštědla ve vakuu se zbytek zředí se 100 ml methylenchloridu a tento roztok se vytřepe s ledově studeným 15% roztokem uhličitanu draselného. Sušením a oddestilováním rozpouštědla se získá surová iminoetherová báze, která se rozpustí ve 30 ml MeOH a smísí s 0.8 g octanu amonného. Roztok se nechá stát 2 dny při teplotě místnosti.
Po odfiltrování rozpouštědla se zbytek přečistí přes sloupec silikagelu (methylenchlorid/MeOH/50% HOAc; 40/10/2,5). Odpařený eluát se vyjme do toluenu a znovu se odpaří na rotační odparce. Zbytek se rozpustí ve vodě, zpracuje se s aktivním uhlím a pak se lyofilizuje. Zbude 4,1 g (76 % teorie) bílých krystalů, které sintrují při 83 °C a tají při 178 až 184 °C.
Příklad 11
HOOC-CH2-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb:
2,4 g terc-BuOOC-CH2-(BOC)-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb-hydroacetátu (z příkladu 13) se míchá v 80 ml absolutního DCM a 15 ml etherického HC1 přes noc při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odtáhne ve vakuu, zbytek se vymíchá zDCM/acetonu a odfiltruje. Získá se 1,6 g produktu jako hydrochloridu popř. dihydrochloridu popř. jako směsi obou solných forem ve formě bílé pevné látky. T.t. 210 až 220 °C.
Příklad 12
MeOOC-CHHDj-Phe-Pro-NH-pAmb:
0,5 g sloučeniny z příkladu 11 se společně míchá při teplotě místnosti se 2 ml etherické HC1, 3 ml DCM a 3 ml methanolu 30 h při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se vícekrát vymíchá z etheru. Získá se 0,5 g produktu jako hydrochloridu popř. dihydrochloridu popř. jako směsi obou solných forem ve formě bílé pevné látky. T.t. 104 až 120 °C.
Příklad 13 terc.BuOOC-CHr-(Boc)-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb:
a) H-(D)-Phe-Pro-p-kyano-benzylamid:
5.6 g Boc-(D)-Phe-Pro-p-kyano-benzylamidu (z příkladu 5) se analogicky štěpí A.I.c. Získá se
4.6 g (95 %) produktu jako hydrochloridu ve formě bílých krystalů.
b) terc.BuOOC-CHrTBOCj-ÍDj-Phe-Pro-p-kyano-benzylamid:
6,19 g H-(D)-Phe-Pro-p-kyano-benzylamidu (15 mmol) se společně zahřívá na 50 °C s 0,98 g terc.butylesteru kyseliny bromoctové (5 mmol) a 0,63 g uhličitanu amonného ve směsi ze 35 ml vody a 8 ml nitromethanu 2 h při 50 °C. Pak se extrahuje analogicky ethylacetátem, organická fáze se vícekrát promyje 0,lN kyselinou chlorovodíkovou, vodné fáze se extrahují DCM a spojené organické fáze se suší nad síranem hořečnatým. Po odtažení rozpouštědla se vyloučí etheric
-42CZ 293426 B6 kým HC1 produkt jako hydrochlorid. Získá se 2,6 g (98 %) hydrochloridu. Přebytečný H-(D)Phe-Pro-p-kyano-benzylamid se zpětně získá extrakcí vodné fáze při pH 10 s DCM.
c) terc.BuOOC-CH2-(BOC)-(D)-Phe-Pro-p-kyano-benzylamid:
2,6 g dříve uvedeného hydrochloridu (4,9 mmol) se společně míchá s 1,2 g (Boc)2O (5,5 mmol) a 1,87 ml DIPEA (11 mmol) se míchá při teplotě místnosti v 95 ml absolutního DCM. Potom se rozpouštědlo odpaří, zbytek se vyjme do etheru, pak se promyje 0,lN kyselinou chlorovodíkovou, potom vodou, rozpouštědlo se suší nad síranem hořečnatým a ve vakuu se odtáhne. Po vymíchání zbytku z hexanu se získá 2,8 g produktu jako bílé pevné látky.
d) terc.BuOOC-CH2-(BOC)-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb:
Přeměna nitrilové funkce na amidinofunkci se provádí analogicky A.III.l. s celkovým výtěžkem 96 %.
Převedení hydrojodidu na hydroacetát se provádí pomocí IRA-acetátového iontoměniče; t.t. 116 až 121 °C.
Příklad 14
EtOOC-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb:
Sloučenina se vyrobí reakcí N-(ethoxykarbonyl)-(D)-fenylalaninu (J. Org. Chem. 1980, 45, 4519) se (4-kyanobenzyl)-propylamidhydrochloridem (z příkladu 10) a následující tvorbou amidinu (analogicky příklad 5). Získají se bílé krystaly hydroacetátu; t.t. 105 až 107 °C; FABMS: 466 (Μ+Γ).
Příklad 15
Boc-(D)-Phe-Pro-NH-m Amb:
Sloučenina se získá z Boc-(D)-Phe-Pro-OH s m-kyanobenzylaminem (analogicky příkladu 5). Hydroacetát se získá ve formě bílých krystalů; t.t. 130 až 133 °C.
Příklad 16
H-(D)-Phe-Pro-NH-mAmb:
Odštěpení Boc-skupiny z příkladu 15 se provede analogicky A.I.c. Bílé krystaly dihydrochloridu tají při 155 až 160 °C; FAB-MS: 394 (M+l+)·
Příklad 17
Z-(D)-Phe-Pro-(D,L)-(4-Am)-PhgOH:
a) 39,7 g (100,1 mmol) DCC se míchá ve 400 ml dimethoxyethanu 18 h při TM. Potom se pevná látka odfiltruje, filtrát se odpaří a zbytek se vyjme do acetonitrilu. Znovu vyloučená pevná látka se odfiltruje a organická roztok se dosucha odpaří. Výtěžek surového produktu: 48,9 g Z-(D)-Phe-Pro-O-sukcinimidu.
-43CZ 293426 B6
b) 24,53 g H-Phg(4-CN)-0Et x HCI, 34,9 ml DIPEA a 41,9 g Z-(D)-Phe-Pro-O sukcinimidu se rozpustí ve 200 ml DMF a míchá se 18 h při TM. Pro zpracování se DMF odstraní ve vakuu a zbytek se vyjme do DCM. Organická fáze se extrahuje 1N HCI, suší se síranem sodným a odpaří se ve vakuu. Zbude 54,04 g Z-(D)-Phe-Pro-NH-Phg(4-CN)-OEt.
c) 54,04 g Z-(D)-Phe-Pro-NH-Phg(4-CN)-OEt se rozpustí ve 340 ml THF/EtOH/vody (3:1:1) a po přídavku 3,05 g LiOH se míchá 18 h při TN. Potom se reakční směs odpaří ve vakuu, zbylý vodný roztok se okyselí na pH 2 a extrahuje se ethylacetátem. Spojené organické extrakty se promyjí nasyceným roztokem NaCl, suší se síranem sodným a odpaří na rotační odparce dosucha. Výtěžek surového produktu: 40,0 g Z-(D)-Phe-Pro-NH-Phg(4-CN)-OH.
d) 2,78 g Z-(D)-Phe-Pro-NH-Phg(4-CN)-OH, 10,9 ml pyridinu a 8,7 ml TEA se spojí v reakční baňce a nasytí se plynným H2S. Roztok se nechá stát 18 h při teplotě místnosti. Potom se reakční směs nalije na 2 1 ledové vody a vodná fáze se upraví 1N HCI na pH 3. Vyloučený produkt se odfiltruje, rozpustí se v ledové kyselině octové a roztok se suší nad síranem sodným.
Po odstranění ethylacetátu ve vakuu se zbytek spojí se 20 ml acetonu a 3,5 ml Mel a 18 h se míchá při TM. Těkavé složky se odstraní ve vakuu a surový thiomethyliminhydrojodid se míchá v 8 ml MeOH a 8 ml methanolického roztoku octanu amonného (10%) 18 h. Pak se reakční směs odpaří, zbytek se vyjme do DCM a vyloučená pevná látka se odfiltruje. Po odpaření filtrátu se 20 získá 3,75 g surového produktu. Tento se přečistí pomocí HPLC chromatografie s reverzní fází.
Výtěžek: 1,5 g 'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 7,7 - 7,4 (m, 4H, Ar-H), 7,3-7,1 (m, 10H, Ar-H); 7,0 (sš, 1H, NH); 5,2 - 4,8 (m, 3H, OCH2/a-Phg); 4,6 - 4,2 (m, 2H, a-Pro/a-Phe);
3,6-3,2 (2H-6-Pro); 3,0 - 2,6 (m, 2H-CH2-Ph); 2,2 - 1,6 (m, 4H, α/β-pro FAB-MS: 572 (Μ+Γ) tt. 155- 158 °C.
Příklad 18
Z-(D)-Phe-Pro-(D,L)-(4-Am)-Phg-OMe:
a) Ke 14 ml DCM se přidá 5,14 ml abs. MeOH a 6,16 ml acetylchloridu při 0 °C. Potom se k tomuto roztoku přidá 2,78 g Z-(D)-Phe-Pro-NH-Phg(4-CN)-OH v 10 mi DCM a nechá se stát 48 h při teplotě místnosti. Pro zpracování se reakční směs odpaří, zbytek se vyjme do ethylacetátu a promyje se studeným roztokem uhličitanu draselného (5%). Po sušení organické 35 fáze síranem sodným se rozpouštědlo odpaří na rotační odparce a surový iminomethylether se nechá stát v 6,5 ml MeOH a 6,5 ml methanolického roztoku octanu amonného (10%) 18 h. Po odpaření se získá 2,4 g surového produktu, který se přečistí HPLC chromatografií s reverzní fází.
’Η-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,6-9,2 (š, N-H); 8,75/8,5 (2d, 1H, NH); 7,8 (m, 2H, Ar-H); 40 7,6 (m, 2H, Ar-H); 7,35 - 7,2 (m, 10H, Ar-H); 7,05 (sš, 1H, NH); 5,6 (2D, 2H, OCH2); 5,0 - 4,2 (3m, 4H, a-Pro/a-Phe/a-Phg); 3,6 (2s, 3H, OCH3); 3,5 - 3,2 (2H, δ-Pro); 3,0 - 2,6 (m, 2H.CH2-Ph); 2,2 - 1,6 (m, 4H, β/gama-Pro)
FAB-MS: 586 (M+Ff); t.t. 129 až 131 °C (hydrochlorid)
Příklad 19
H-(D)-Phe-Pro~(D,L)-(4-Am)-Phg-OH:
Sloučenina se vyrobí Cbz-odštěpením ze sloučeniny vyrobené v příkladu 17. 1 H-NMR (d6DMSO, δ v ppm): 9,0 (š, NH; 8,7/8,4/8,05 (3d, 1H, NH); 7,8 - 7,0 (m, 9H, Ar-H); 5,1/4,9 (d, 1H, a-Phg); 4,45-4,0 (m, 2H, a-Pro/a-Phe); 3,8- 3,0 (m, 2H, δ-Pro); 3,0 - 2,7 (m, 2H, CH2-Ph); 2,2 - 1,4 (m, 4H, β/gama-Pro)
-44CZ 293426 B6
FAB-MS: 438 (M+H+); t.t. 149 až 150 °C (dihydrochlorid)
Příklad 20
Boc-(D)-Phe-Pro-(4-Am)-Phg-CH2Ph
a) N-(Difenylmethylen)-4-kyano-benzylamin:
33,73 g (0,2 mol) 4-kyanobenzylaminu a 36,25 g (0,2 mol) benzofenoniminu se rozpustí v 540 ml DCM při teplotě místnosti a míchá se přes noc. Potom se reakční směs promyje 2x90 ml vody, suší se nad síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří na rotační odparce. Zbude 55,59 g (93,7 %) surového produktu. Po rekrystalizaci z 550 ml iPrOH se získá 97,67 g (80,4 %) čistého produktu. ‘H-NMR (CDC13, δ v ppm): 7,7 - 7,15 (m, 9H, Ar-H); 4,65 (s, 2H, CH2-N)
b) N-(Difenylmethylen)-a-(P-fenylacetyl)-4-kyanobenzylamin):
63,3 mmol LDA se vloží při -30 °C do 45 ml THF. Potom se pomalu přikape 15 g (50,61 mmol) N-(difenylmethylen)-4-kyano-benzylaminu v 75 ml THF. Po dalších 10 min míchání při -30 °C se pomalu přidá při -78 °C 8,6 g (55,7 mmol) chloridu kyseliny (rozpuštěný v 7,5 ml THF). Po 18 hodinách míchání reakční směsi (reakční teplota nechá se přes noc stoupnout na teplotu místnosti), ochladí se na -20 °C, smíchá se 3,6 ml HOAc a 17,25 ml vody. Potom se reakční směs nechá stoupnout na teplotu místnosti a jakmile jí dosáhne, odstraní se THF ve vakuu, zbytek se vyjme do etheru, organická fáze se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného, suší a ether se odstraní na rotační odparce. Zbude 26,18 g surového produktu, který se bez dalšího čištění použije pro reakci v následujícím stupni.
c) a-([J-Fenylacetyl)-4-kyano-benzylamin:
26,18 g syntetizovaného surového produktu se míchá přes noc v 250 ml 0,25N HCI při teplotě místnosti. Potom se reakční směs extrahuje DCM a vodná fáze se lyofilizuje. Po dělení pomocí HPLC s reverzní fází zbude 2,52 g a-(p-fenylacetyl)-4-kyano-benzylaminu. 'H-NMR (d6DMSO, δ v ppm): 9,0 /s, 3H, NH3); 8,0/7,75 (2d, 4H); 7,25 (m, 3H); 7,0 (dd, 2H); 5,7 (s, 1H, NCH); 3,9/3,6 (2d, Ph-CH2-); FAB-MS: 250 (M+).
d) 2,51 g (6,92 mmol) Boc-D-Phe-Pro-OH se vloží do 40 ml abs. DCM při -20 °C. Potom se přidá 0,80 ml N-methylmorfolinu k roztoku a tento se míchá 20 min při -20 °C. Po přídavku dalších 0,80 ml N-methylmorfolinu a 2,52 g (6,92 ml) a,(fl-fenylacetyl)-4-kyano-benzylarninu se reakční směs míchá další hodinu. Pro zpracování se reakční směs zředí 50 ml DCM a organický roztok se promyje IN HCI (3 x 40 ml), 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 40 ml) a nasyceným roztokem chloridu sodného (1 x 40 ml). Po sušení a odpaření roztoku zbude 3,97 g surového produktu. Tento se přečistí sloupcovou chromatografií (hexan/ethylacetát). Výtěžek: 3,43 g.
e) 3,43 g (5,77 mmol) Boc-(D)-Phe-Pro-Phg(4-CN)-CH2-Ph x HOAc se rozpustí ve 21,9 ml pyridinu a 9,85 ml TEA. Tento roztok se při teplotě místnosti nasytí plynným H2S a míchá se přes noc. Potom se odstraní H2S dusíkem a roztok se nalije na 5% kyselinu citrónovou. Vodná fáze se vícekrát extrahuje ethylacetátem. Spojené organické fáze se promyjí nasyceným roztokem NaCl a po sušení síranem sodným se odpaří na rotační odparce. Výtěžek surového produktu: 4,13 g.
f) 4,13 g surového thioamidu se 18 hodin míchá společně se 23,3 ml acetonu a 4,05 ml Mel. Potom se reakční roztok odpaří na rotační odparce. Zbytek se rozpustí v 9,1 ml abs. MeOH
-45CZ 293426 B6 a 9,1 ml abs. roztoku NH4OAc (10% v MeOH) a 18 hodin se míchá. Pak se reakční směs odpaří dosucha a zbytek se přečistí HPLC chromatografií s reverzní fází (acetonitril/voda). Výtěžek: 680 mg (hydroacetát).
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,4/9,2/8,8/8,6 (4d, 1H, N-H); 7,9 - 7,5 (m, 4H, Ar-H); 7,3 - 7,0 (m, 11H, Ar-H/NH); 6,0/5,7 (2m, 1H, a-Phg); 4,4 - 2,6 (m, 8H); 2,2 - 1,6 (m, 4H, β/gama-Pro); 1,3-1,2 (2sš, 9H, Boc)
MS: 612 (M+řT), 512 (-Boc), 365, 161, 120
Příklad 21
H-(D)-Phe-Pro-(4-Am)-Phg-CH2Ph:
Sloučenina se vyrobí Boc-odštěpením (HCl/dioxan) ze sloučeniny vyrobené v příkladu 20. 'HNMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,5/9.4 (2d, 1H, NH); 9,4/9,2 (2sš, 3H, N-H); 7,8 (d, 2H, Ar-H); 7,6 (d, 2H, Ar-H); 7,4 - 7,0 (m, 10H, Ar-H); 5,8/5,6 (2d, 1H, a-Phg); 4,35 (m, 2H, a-Phe/a-Pro); 4,1/3,9 (4d, 2H, CH2-Ph); 3,7 (m, 2H, CH2); 3,2/3,0 (2m, 2H, CH2); 1,8-1,6 (2m, 4H, β/gama-Pro)
MS: 512 (Μ+ΡΓ), 393, 252, 161 (dihydrochlorid)
Příklad 22
H-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb-[(D,L)-a-Me]-benzyl:
(a) N-(p-Kyanobenzyl}-benzofenonimin:
K roztoku 150 g (0,8 mol) 97% benzofenoniminu a 144,8 g (0,74 mol) p-kyano-benzylbromidu ve 450 ml acetonitrilu se přidá 270 g (2,0 mol) bezvodého uhličitanu draselného a ponechá se 6 h míchat při teplotě místnosti. Po odsátí anorganických solí se rozpouštědlo plně oddestiluje, zbytek se smísí se 300 ml vody a extrahuje se vícekrát ethylacetátem. Organická fáze se 2 x promyje vodou, suší se nad síranem sodným a odpaří se dosucha. Po digerování s etherem se získá 180 g bílých krystalů, t.t. 101 až 102 °C.
(b) l-(4-Kyanofenyl)ethylamin:
K roztoku lithiumdiizopropylamidu vyrobeného z 8,15 g (0,08 mol) diizopropylaminu a 48,3 ml (0,08 mol) 15% roztoku butyllithia v hexanu - ve 100 ml abs. tetrahydrofuranu se přikape při -70 °C 20,7 g (0,07 mol) N-(p-kyanobenzyl)-benzofenonimínu a nechá se 15 minut dále míchat. Potom se přikape 9,94 g (0,07 mol) methyljodidu a teplota reakční směsi se nechá stoupnout na teplotu místnosti. Po přídavku 100 ml vody se extrahuje vícekrát etherem, etherová fáze se promyje 5% roztokem kyseliny citrónové, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou, suší se nad síranem sodným a ether se oddestiluje. Zbytek se rozpustí ve 150 ml tetrahydrofuranu, přidá se 100 ml IN HC1 a míchá se přes noc při teplotě místnosti. Z reakční směsi se za vakua oddestiluje tetrahydrofuran, zbylá kyselá fáze se pro odstranění benzofenonu vícekrát extrahuje s etherem, potom se zalkalizuje kyselá fáze vodným roztokem uhličitanu draselného za chlazení ledem a olejová báze se extrahuje methylenchloridem. Extrakt se suší nad uhličitanem draselným. Po odtažení methylenchloridu zbude 9,7 g (95 %) nažloutlého oleje, který se bez dalšího čištění použije v následující reakci.
-46CZ 293426 B6 (c) Boc-D-fenylalanyl-prolin-(D,L)-a-inethyl-4-kyanobenzylamid:
K roztoku 3,65 g (25 mmol) l-(4-kyanofenyl)-ethylaminu a 9,1 g (25 mmol) Boc-Phe-Pro-OH ve 150 ml methylenchloridu se přikape při -5 °C 16,2 g diizopropylaminu a 22 ml (30 mmol) anhydridu kyseliny propan-fosfonové (50% roztok v ethylacetátu). Míchá se 2 h, teplota se přitom nechá stoupnout z -5 °C na 20 °C. Organická fáze se promyje vodou, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a 5% roztokem kyseliny citrónové, suší se nad síranem sodným a odpaří se dosucha. Získá se slabě nažloutlý krystalický zbytek, který se bez dalšího čištění použije v následující reakci.
(d) (D)-Fenylalanyl-prolin-(D,L}-a-methyl-4-amidinobenzylamid·.
4,1 g uvedené sloučeniny s 4 ml triethylaminu se rozpustí ve 40 ml pyridinu, při 0 °C se nasytí H2S a nechá se stát přes noc při teplotě místnosti. Podle DC-kontroly (CH2Cl2/MeOH, 9/1) je přeměna na thioamid úplná. Pro izolaci se pyridin plně oddestiluje ve vakuu, zbytek se vyjme do 250 ml ethylacetátu a promyje se roztokem chloridu sodného, 5% kyseliny citrónové a hydrogenuhličitanu sodného. Po sušení a oddestilování rozpouštědla se získá 4,1 g čistého krystalického thioamidu.
Thioamid se rozpustí ve 150 ml acetonu a při teplotě místnosti se nechá po přídavku 7 ml methyljodidu stát 6 h. Po odtažení rozpouštědla se amorfní zbytek vymíchá se suchým etherem a pak se suší. Hydrojodid methylesteru S-methyl-thioamid kyseliny se rozpustí v 50 ml ethanolu, smísí se s 15 ml 10% roztoku octanu amonného a 3 h se zahřívá na 60 °C. Pro izolaci se rozpouštědlo odtáhne, zbytek se rozpustí ve 100 ml CH2C12, nerozpustné složky se odfiltrují a pak se oddestiluje CH2CI2. Digerací se směsí ethylacetát-diethylether se pak oddělí zde přítomné nerozpustné nečistoty. Zbylá směsná sůl jodid-octan se rozpustí v acetonu/vodě (3/2) a pomocí měniče iontů IRA-acetát se převede na čistý acetát a pak se suší vymražením. Izoluje se bílý prášek, t.t. 110 až 115 °C; FAB-MS: 508 (Μ+ΙΓ) (e) H-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb [(D,L)-a-Me]-benzyl:
Dříve uvedené sloučeniny se rozpustí v 70 ml CH2C12 a smísí se s 80 ml HCl-nasyceného ethylacetátu. Po kratší době se vyloučí sraženina, která přídavkem etheru zcela ztuhne. Odsaje se, promytím etherem se zcela zbaví HCI a suší se ve vakuu. Získají se bílé krystaly, t.t. 190 až 195 °C (dihydrochlorid), FAB-MS: 407 (M+Ff)
Příklad 23
Me-(D)-Phe-Pro-(D popř. L) (4 Am)-Ph U [CH2OH)/a: [CH2OH]/b:
N-(p-Kyanobenzyl}-benzofenonimm se hydroxymethyluje s bezvodým uhličitanem draselným, tetrabutylamoniumjodidem a paraformaldehydem. Bílé krystaly: t.t. 115 až 117 °C. Potom se alkoholová skupina etherifikuje terc.butyldimethylsilylchloridem a pomocí 0,lN kyseliny methansulfonové se v THF odštěpí chráněný (D,L)-a-hydroxymethyl-p-kyanobenzylamin. Tento amin se za standardních podmínek kopuluje se Z-Me-(D)-Phe-Pro-OH a pomocí H2S se převede na thioamid, který se sloupcovou chromatografíí rozdělí na diastereomery. Čistý diastereomer a se adiduje a pak se chránící skupiny odštěpí kyselou katalýzou popř. hydrogenolyticky. Po vymražení získané bílé krystaly tají při 175 až 180 °C, FAB-MS: 438 (M+H+).
-47CZ 293426 B6
Příklad 24
Me-(D)-Phe-Pro-(D popř. L)(4 Am)-Ph U
Z diastereomerně čistého thioamidu b se amidací a odštěpením chránících skupin získají bílé krystaly, FAB-MS: 438 (M+H+).
Příklad 25
Boc-(D)-Phe(4-F)-Pro-NH-pAmb:
Vyrobí se reakcí Boc-D-Phe(4-F)-OH s N-(4-kyanobenzyl)prolin-amidem a následující amidací. Bílé krystaly, t.t. 184 až 187 °C (hydroacetát).
Příklad 26
H-(D)-Phe(4-F)-Pro-NH-pAmb:
Odštěpení Boc-skupiny za standardních podmínek ze sloučeniny 25. Dihydrochlorid: bílé krystaly, t.t. 225 až 230 °C, FAB-MS: 412 (M+H’)
Příklad 27
Boc-(D)-Phe(4-CÍ)-Pro-NH-pAmb:
Sloučenina se vyrobí analogicky příkladu 3 z Boc-(D}-Phe(4—C1)-OH; t.t. 124 až 137 °C (hydroacetát)
Příklad 28
H-(D)-Phe(4-Cl)-Pro-NH-pAmb:
Odštěpení Boc-skupiny z příkladu 27 se provede analogicky A.I.c. Získá se sloučenina jako dihydrochlorid; t.t. 221 až 234 °C.
Příklad 29
Boc-(D,L)-Phe(4-Br)-Pro-NH-pAmb:
Sloučenina se vyrobí z Boc-(D,L}-Phe(4-Br)-OH a H-Pro-p-kyano-benzylamidu x HC1 analogicky příklad 3.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 8,4/8,1 (t, 1H, NH); 7,78 (2d, 2H, Ar-H); 7,2 (m, 2H, Ar-H); 7,0 (2d, 1H, NH); 4,5 - 4,2 (m, 4H, CH2/2 a-H); 3,6 (m, 2H, Pro); 3,0 - 2,6 (m, 2H, CH2-Ph); 2,15-1,7 (m, 4H, β/gama-Pro); 1,3/1,2 (2d, 9H, Boc)
FAB-MS: 575/574 (M+H+); t.t. 171 °C (rozkl.)(hydroacetát)
-48CZ 293426 B6
Příklad 30
H-(D,L)-Phe(4-Br)-Pro-NH-pAmb
Sloučenina se vyrobí Boc-odštěpením sloučeniny z příkladu 29.
‘H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,2 (š, 4H); 8,6/8,5 (2t, 1H, NH); 7,8 (2d, 2H, Ar-H); 7,4 (m,4H, Ar-H); 7,2 (m, 2H, Ar-H); 7,2 (š, 3H, NH); 4,38 (2dd, 3H, CH2/a-H); 4,2 (m, 1H, oc-H); 3,8 - 3,6 (m, 2H, Pro); 3,1 - 2,8 (m, 2H, CH2); 2,2 - 1,7 (m, 4H, Pro);
FAB-MS: 474 (M+H+); t.t. 56 °C (rozkl.)(dihydroacetát)
Příklad 31
H-(D)-Phe(4-OH)-Pro-NH-pAmb:
Sloučenina se získá hydrogenolytickým odštěpením benzylskupiny s Pd/C analogicky běžnému odštěpení Z-chránicí skupiny (A.I.b.) z příkladu 37. Po odfiltrování katalyzátoru a odtáhnutí rozpouštědla se získá dihydrochlorid vysrážením etherickým HC1.
T.t. 129 až 140 °C.
Příklad 32
Boc-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-pAmb:
Výroba se provádí analogicky příkladu 3 z Boc-(D)-Phe(4-MeOH)OH; t.t. 67 až 83 °C (hydroacetát)
Příklad 33
H-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-pAmb·.
Odštěpení Boc-skupiny z příkladu 32 se provede analogicky A.I.c.
T.t. 215 až 227 °C (dihydrochlorid)
Příklad 34
Boc-(D,L)-Phe-(4-EtO)-Pro-NH-pAmb:
Výroby se provádí analogicky příkladu 3 z Boc-(D,L)-Phe(4-EtOH)OH;
t.t. 115 až 145 °C (hydroacetát)
Příklad 35
H-(D,L)-Phe(4-EtO)-Pro-NH-pAmb:
Odštěpení Boc-skupiny z příkladu 34 se provádí analogicky A.I.c.
-49CZ 293426 B6
T.t. 218 až 230 °C (dihydrochlorid)
Příklad 36
Boc-(D)-Phe(4-BzlO)-Pro-NH-pAmb;
Výroba se provádí analogicky příkladu 3 z Boc-(D)-Phe-(4-BzlO)-OH:
T.t. 111 až 125 °C (hydroacetát).
Příklad 37
H-(D)-Phe(4BzlO)-Pro-NH-pAmb:
Odštěpení Boc-skupiny z příkladu 36 se provádí analogicky příkladu 36;
t.t. 201 až 210 °C (dihydrochlorid).
Příklad 38
Boc-(D,L)-Phe(4-Et)-Pro-NH-pAmb:
Výroba se provádí analogicky příkladu 3 z Boc-(D,L)-Phe(4-Et)OH na produkt -hydroacetát.
*H-NMR (dí-DMSO, δ v ppm): 9,25 (2H, amidin), 8,85 (2H, amidin), 8,42 a 8,09 (společně 1H, NH), 7,80 - 6,95 (9H, aromáty-H a NH), 4,45 - 4,20 (4H, 2 x CH a 1 x CH2), 3,75 - asi 3,0 (2H, CH2), 3,0 - 2,6 (2H, CH2), 2,6- asi 2,5 (2H, CH2), 2,3 - 1,5 (4H, 2 x CH2); 1,3- asi 1,2 (9H, Boc), asi 1,2 - 1,05 (3H, CH3).
Příklad 39
H-(D,L)-Phe(4-Et)-Pro-NH-pAmb:
Dihydrochlorid se získá odštěpením Boc-skupiny z příkladu 38 analogicky A.I.c.
’Η-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,55 - 9,40 (2H, amidin), 9,32 - 9,20 (2H, amidin), 8,90 a 8,70 (společně 1H, NH), 8,85 - 8,76 a 8,40 - 8,30 (společně 3H, NPT3), 7,90 - 7,05 (8H, aromáty-H), 4,50-4,10 (4H, 1 x CH2 a 2 x CH), 2,6- asi 2,5 (2H, CH2), 1,9-1,3 (4H, 2 x CH2), 1,2/1,1 (3H, CH3)
Příklad 40
Boc-(D,L)-Phe(4-iPr)-Pro-NH-pAmb:
Hydroacetát se získá reakcí Boc-(D,L)-Phe(4-iPr)OH analogicky příkladu 3.
’Η-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,25 (2H, amidin), 8,50 (2H, amidin), 8,43 a 8,09 (společně 1H, NH), 7,80- 6,95 (9H, aromáty-H a NH), 4,45 - 4,20 (4H, 2 x CH a 1 x CH2), 3,7-asi 3,2
-50CZ 293426 B6 (2H, CH2), 3,0- 2,6 (3H, CH, a CH). 2,2 - 1,5 (4H, 2 x CH2), 1,3- asi 1,2 (9H, Boc), asi 1,2-1,05 (6H,2xCH3).
Příklad 41
H-(D,L)-Phe(4-iPr)-Pro-NH-pAmb:
Dihydrochlorid se získá odštěpením Boc-skupiny z příkladu 40 analogicky A.I.c.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,50 - 9,40 (2H, amidin), 9,30 - 9,20 (2H, amidin), 8,90 a 8,70 (společně 1H, NH), 8,75 a 8,30 (společně 3H, NH+ 3), asi 3,8 - 3,3 (2H, CH2), 3,3 - 2,8 (3H, CH2 a CH), 2,4 - 1,3 (4H, 2 x CH2), 1.20 (6H. 2 x CH3)
Příklad 42
Z-(D)-Phe(4-tBuO)-Pro-NH-pAmb:
Hydroacetát se získá reakcí Z-(D)-Phe(4-tBuO)OH analogicky příkladu 3.
T.t. 92 až 104 °C.
Příklad 43
H-(D)-Phe(4-tBuO)-Pro-NH-pAmb:
Z-chránicí skupina z příkladu 42 se hydrogenolyticky odštěpí analogicky A.I.b. Získá se produkt jako dihydroacetát:
T.t. 94 až 102 °C.
Příklad 44
Boc-(D,L)-Phe(4-tBu)-Pro-NH-pAmb:
Hydroacetát se získá reakcí Boc-(D,L)-Phe(4-tBuOH) analogicky příkladu 3.
T.t.: 151 ažl58°C.
Příklad 45
H-(D,L)-Phe(4-tBu)-Pro-NH-pAmb:
Hydrochlorid se získá odštěpením Boc-skupiny z příkladu 44 analogicky A.I.c.
T.t.: 96 až 110 °C.
-51 CZ 293426 B6
Příklad 46
H-(D,L)-Phe(4-Ph)-Pro-NH-pAmb:
Analogicky příkladu 3 se nechá reagovat Boc-(D,L)-Phe(4-Ph)OH na Boc-(D,L)-Phe(4-Ph)Pro-NH-pAmb hydroacetát a Boc-skupina se odštěpí analogicky A.I.c.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,50 - 9,40 (2H, amidin), 9,30 - 9,20 (2H, amidin), 8,90 a 8,70 (společně 1H, NH), 8,80 a 8,35 (společně 3H, NH+ 3), 7,85 - 7,25 (13H, aromáty-H), 4,50 - 4,15 (4H), 1 x CH2 a 2x CH), asi 3,8 - 3,2 (2H, CH2), 3,10 - 2,95 (2H, CH2), 2,6 - 1,3 (4H, 2 x CH2)
Příklad 47
Boc-(D,L)-Phe(4-nBu)-Pro-NH-pAmb:
Sloučenina 47 se syntetizuje z Boc-(D,L)-Phe(4-Bu)-OH a H-pro-p-kyano-benzylamidu x HC1 analogicky příkladu 3. 'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 10,0 - 9,2 (š, NH); 8,4/8,0 (2t, 1H, NH); 7,78 (2d, 2H, Ar-H); 7,42 (m, 3H, Ar-H); 7,25 - 7,0 (m, 4H, Ar-H/NH); 4,4 - 4,2 (m, 4H, CH2/a-Pro); 3,7 - 3,0 (m, 2H, d-Pro/CH2); 3,0 - 2,6 (m, 4H, 2CH2-Ph); 2,2 - 1,7 (m, 5H, β/gama-Pro); a,5 (m, 3H, p/gama-Pro/CH2); 1,25 (m, 9H, Boc); 0,95 (t, 3H, CH3)-(hydroacetát)
Příklad 48
H-(D,L)-Phe(4nBu)-Pro-NH-pAmb:
Sloučenina se vyrobí odštěpením Boc z příkladu 47.
’Η-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,4 (d, 2H, NH); 9,2 (d, 2H, NH); 8,9/8,6 (2t, 1H, NH); 7,75 (2d, 2H, Ar-H); 7,45 (d, 2H, Ar-H); 7,23 (d, 1H, NH); 7,15 (m, 4H, Ar-H); 4,4 - 4,2 (3m, 4H, CH2/2 a-H); 3,6 (m, 2H, gama-Pro/CH2); 3,1/2,9 (2m, 2H, CH2-Ph); 2,56/2,4 (2m, 2H, CH2); 2,1/1,9/1,6/1,3 (4m, 11H, p/gama-pro/CH2); 0,95 (2t, 3H, CH3)
MS: 450 (M+PT); 247, 176; příklad 48 je předložen jako dihydroacetát.
Příklad 49
Boc-(D)-Phe(4-COOMe)-Pro-NH-pAmb:
a) Boc-(D)-Phe(4-COOMe)-Pro-NH-p-kyano-benzy 1:
12,5 g Boc-(D)-Tyr(Bzl)OH se analogicky příkladu 3 nechá reagovat na 18,9 g Boc-(D)-Tyr(Bzl)-Pro-p-kyanobenzylamidu rozpuštěného v 780 ml MeOH a hydrogenuje se s Pd/C při teplotě místnosti. Po 6 h se katalyzátor odfiltruje a rozpouštědlo se odtáhne. Ve kvantitativním výtěžku se získá Boc-(D)-Tyr-Pro-p-kyanobenzylamid.
12,5 g této sloučeniny se rozpustí v 50 ml pyridinu a při 0 °C se míchá se 4,7 ml anhydridu kyseliny trifluormethansulfonové 1 h. Po další hodině při teplotě místnosti se směs nalije na vodu a extrahuje se ethylacetátem. Organická fáze se promyje vodou a suší nad síranem sodným. Získá se 14 g Boc-(D)-Tyr(S02CF3)-Pro.p.kyanobenzylamidu. 4 g triflátu se vloží do 1,93 ml TEA, 134 mg bisdifenylfosfinopropanu, 73 mg octanu paladnatého, 1 ml MeOH a 40 ml DMF
-52CZ 293426 B6 a odplyní se při 60 až 70 °C oxidem uhelnatým, až se neodebírá již žádný plyn. Směs se nalije na nasycený roztok chloridu sodného a extrahuje se ethylacetátem. Po promytí organické fáze 10% roztokem kyseliny citrónové, sušení nad síranem sodným a odtažení rozpouštědla se získá
3.3 g Boc-(D)-Tyr(4-COOMe)Pro-p-kyanobenzylamidu.
b) Boc-(D)-Phe(4-COOMe)-Pro-NH-pAmb:
1,7 g dříve uvedeného nitrilu se nechá analogicky příkladu 3 reagovat na amidin-hvdrojodid. Získá se po čištění sloupcovou chromatografií přes silikagel 650 mg 1 H-NMR (d6-DMSO. δ v ppm): 9,4 - 8,7 (4H, amidin), 8,9/8,1 (1H, NH (2 rotamery), 7,9 - 7,2 (9H, aromáty-H a NH). 3,85 (3H, COOMe), 1,3-1,2 (9H, Boc)
Příklad 50
H-(D)-Phe(4-COOMe)-Pro-NH-pAmb:
1.3 g sloučeniny z příkladu 49 se přemění přes acetační iontoměnič na amidin-hydroacetát aBoc-skupina se odštěpí analogicky A.I.c. Získá se 1,0 g produktu jako dihydrochloridu. T.t.: 204 až 207 °C (rozklad).
Příklad 51
H-(D)-Phe(4-NO2)-Pro-NH-pAmb:
a) Boc-prolin-(p-amidinobenzyl)-amid
Boc-prolin-(p-kyanobenzyl)amid (výroba viz příklad 5) se analogicky návodu A.III.l. pomocí H2S převede na thioamid a pak na amidin. Amidin se získá ve formě bílých krystalů.
T.t.: 237 až 239 °C.
FAB-MS: 347 (M+EF).
b) N-(p-Amidinobenzyl)-prolinamid-dihydrochlorid:
Analogicky A.I.c. se z dříve uvedené sloučeniny odštěpí Boc-chránicí skupina. Dihydrochlorid se izoluje jako velmi hygroskopický prášek. T.t.: 130 až 140 °C.
FAB-MS: 247 (M+EF).
c) Boc-(D)-Phe(4-NO2)-Pro-NH-pAmb:
Roztok 3,9 g (12,6 mmol) Boc-(D)-Phe(4-NO2)OH ve 40 ml THF se po přídavku 1,9 g (12,6 mmol) 1-hydroxybenzotriazolu a 3,3 g (25 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu 4 h míchá při teplotě místnosti. Vyloučená močovina se odsaje a následně promyje malým množstvím THF.
K. tomuto filtrátu se při 5 °C přidá roztok 4,1 g (12,6 mmol) N-(p-amidinobenzyl)prolinamid-dihydrochloridu a 1,6 g hydrogenuhličitanu sodného v 6 ml vody. Po 48 h míchání při teplotě místnosti se rozpouštědlo oddestiluje, zbytek se vyjme do ethanolu, odfiltrují se nerozpustné látky a znovu se odpaří.
Zbytek se přečistí sloupcovou chromatografií na silikagelu se směsí MeOH/50% kyselina octová. Eluát vlastních frakcí se oddestiluje za přísady toluenu a zbytek se rekrystaluje z 50 ml acetonu
-53CZ 293426 B6 za přídavku malého množství vody. Izoluje se 3,3 g (48 %) teorie amidinacetátu ve formě bílých krystalů. T.t.: 162 až 165 °C. FAB-MS: 539,5 (M+Ff);
d) H-(D)-Phe(4-N02)-Pro-NH-pAmb:
Odštěpení Boc-skupiny se provádí analogicky A.I.c.
Dihydrochlorid: bílé krystaly. T.t.: 218 až 225 °C (rozkl.), FAB-MS: 439 (M+H~).
Příklad 52
Boc-(D,L)-Phe(3-F)-Pro-NH-pAmb:
Sloučenina se vyrobí tak, že se vyjde z Boc-(D,L)-Phe(3-f)-OH a H-Pro-p-kyano-benzylamidu x HC1 analogicky příkladu 3.
‘H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,4 - 9,0 (š, N-H), 8,9/8,4/8,15 (3t, 1H, NH): 7,8 (sš, 2H, Ar-H); 7,45 (2d, 2H, ArH); 7,35 - 6,9 (2m, 5H, Ar-H/NH); 4,5 - 4,2,NCH2/a-Phe/a-Pro); 20 3,7/3,5/3,2 (3m, 2H, δ-Pro); 3,0 - 2,7 (2m, 2H, ArCH,); 2,2 - 1,7 (3m, 4H, β/gama-Pro); 1,25 (2s, 9H, Boc) FAB-MS: 511 (M+FT)
Příklad 53
H-(D,L)-Phe(3-F)-Pro-NH-pAmb:
Sloučenina se získá Boc-odštěpením sloučeniny vyrobené v příkladu 52.
’Η-NMR (dé-DMSO, δ v ppm): 9,4/9,2 (2d, 4H, N-H); 8,9/8,55 (1H); 8,75/8,3 (2sš, 3H, NH3);
7,8 (sš, 2H, Ar-H); 7,45 (2d, 2H, Ar-H); 7,4 - 7,05 (m, 4H, Ar-H); 4,45 - 4,2 (m, 4H, MCH2/aPhe/a-Pro); 3,9 - 3,3 (2H, δ-Pro); 3,2 - 2,8 (m, 2H, Ar-CH2); 2,2 - 1,8 (4H, β/gama-Pro)
FAB-MS: 411 (M+H+) -(dihydrochlorid)
Příklad 54
Boc-(D,L)-Phe(3-Cl)-Pro-NH-pAmb:
Hydroacetát se vyrobí analogicky příkladu 3 z Boc-(D,L)-Phe(3-C1)OH;
‘H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,4 - 8,6 (4H, amidin); 8,45/8,15 (1H, NH); 7,8- 7,0 (9H, aromát-H a NH); 1,3-1,2 (9H, Boc)
-54CZ 293426 B6
Příklad 55
H-(D,L)-Phe(3-Cl)-Pro-NH-pAmb:
Odštěpení Boc-skupiny z 54 se provede analogicky A.l.c.
Získá se produkt jako dihydrochlorid.
’Η-NMR (dé-DMSO, δ v ppm): 9,5 - 9.2 (4H, amidin); 8,95 (1H.NH); 8,8/8,4 (3H, NH+ 3);
7.9 - 7,2 (8H, aromáty-H); 4,50 - 4,15 (4H, CH2 a 2 x CH); 3,8- asi 3,3 (2H, CH,); 3,25 - 2,95 (2H, CH2); 2,2 - 1,5 (4H, 2 x CH,)
Příklad 56
H-(D,L)-Phe(3-OH)-Pro-NH-pAmb:
Sloučenina se získá Boc-odštěpením z Boc-(D,L)-Phe(3-OH)-Pro-NH-pAmb.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,6/9,0 (mb/N-H); 8,8/8,5 (2t, 1H, NH); 8,2 (šs, N-H); 7,8 (2d, 2H, Ar-H); 7,5 (2d, 2H, Ar-H); 7,1 (m, 1H, Ar-H); 6,8 - 6,6 (m3H, Ar-H); 4-4,1 (m, 4H, CH2/2 a-H); 3,8 - 3,6 (m, 2H, Pro); 3,0/2,8 (2m, 2H, CH2); 2,1-1,5 (m, 4H, β/gama-Pro)
Příklad 57
Boc-(D,L)-Phe(3-MeO)-Pro-NH-pAmb:
Hydroacetát se vyrobí z Boc-(D,L)-Phe(3-MeOH)OH analogicky příkladu 3 'H-NMR (dé-DMSO, δ v ppm): 9,4 - 8,7 (4H, amidin); 8,4/8,1 (1H, NH); 7,8 - 6,7 (9H, aromáty-H a NH); 3,7 (3H, OCH3); 1,3-1,2 (9H, Boc)
Příklad 58
H-(D,L)-Phe(3-MeO)-Pro-NH-Amb:
Odštěpení Boc-skupiny z 57 se provádí analogicky A.l.c.
Získá se produkt jako dihydrochlorid.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,55 - 9,15 (4H, amidin); 8,9/8,7 (1H, NH); 8,75/8,30 (3H, NHý); 7,9 - 6,7 (8H, aromáty-H); 4,5 - 4,1 (4N, CH2 a 2 x CH)); 3,75/3,72 (3H, OCH3); 3,3 -
2.9 (2H, CH2); 2,2 - 1,4 (4H, 2 x CH2)
Příklad 59
Boc-(D,L)-Phe(3-PhO)-Pro-NH-pAmb:
Sloučenina se vyrobí z Boc-(D,L)-Phe(3-PhO)OH. Získá se amidin-hydroacetát analogicky příkladu 3.
-55CZ 293426 B6
Příklad 60
H-(D,L)-Phe(3-PhO}-Pro-NH-pAmb:
Dihydrochlorid se získá Boc-štěpením sloučeniny z příkladu 59.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,5 - 9,2 (4H, amidin), 8,9/-8,2 (1H, NH); 8,75/8,35 (3H, NH+ 3); 7,85 - 6,80 (8H, aromáty-H); 4,50 - 4,10 (4H, CH2 a 2 x CH); 3,8 - 2,9 (4H, 2 x CH,);
2,8-1,5 (4H, CH2)
Příklad 61
Boc-(D,L)-Phe(3-Me)-Pro-NH-pAmb:
Sloučenina se získá tak, že se vyjde z Boc-(D,L)-Phe(3-Me)-OH a H-pro-p-kyano-benzylamidu x HCI analogicky příkladu 3.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 8/8,4/8,05 (3t, 1H, NH); 7,74 (2d, 2H, Ar-H); 7,45 (2d, 2H, Ar-H); 7,2 - 6,9 (m, 5H, Ar-H/NH); 4,4 - 4,2 (m, 4H, NCH2/a-Pro/a-Phe); 3,7 - 3,1 (2m, 2H, δ-Pro); 2,9 - 2,7 (2H, Ar-CH2); 2,5 (2s, 3H, CH3); 2,1 - 1,6 (m, 4H, pgama-Pro); 1,25 (2s, 9H, Boc)
MS: 508 (M+H+), 408 (-Boc), 277, 247 - (hydroacetát)
Příklad 62
H-(D,L)-Phe(3-Me)-Pro-NH-pAmb:
Sloučenina se vyrobí Boc-odštěpením sloučeniny z příkladu 61.
MS: 408 (M+H), 247,185, 134,93 - (dihydroacetát)
Příklad 63
H-(D,L)-Phe(3-Ph)-Pro-NH-pAmb:
Odpovídající Boc-chráněná sloučenina se vyrobí analogicky příkladu 3 z Boc-(D,L)-Phe(3-Ph)OH a pak analogicky A.I.c. štěpí na dihydrochlorid.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,5 - 9,2 (4H, amidin); 8,0/asi 8,7 (1H, NH); 8,8/8,35 (3H, NH+ 3); 7,85 - 7,25 (13H, aromáty-H); 4,5 - 4,15 (4H, CH2 a 2 x CH); 3,2 - 3,00 (2H, CH2);
2,2 - 1,4 (4H, 2 x CH2)
Příklad 64
Boc-(D,L)-Phe(3-CF3)-Pro-NH-pAmb:
Sloučenina se vyrobí tak, že se vyjde z Boc-(D,L)-Phe(3-CF3)-OH a H-Pro-p-kyano-benzylamidu x HCI analogicky příkladu 3.
-56CZ 293426 B6 ’Η-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 10,0-9,2 (š, NH); 8,9/8,4/8,15 (3t, 1H, NH); 7,8-7,4 (8H, Ar-H); 7,22/7,05 (2d, 1H, NH); 4,6 - 4,2 (4H, N-CH2/a-Pro/a-H); 3,8 - 3,4 (2H, δ-Pro); 3,1/2,8 (2H, Ar-CH2); 2,1 - 1,6 (4H, β/gama-pro); 1,2 (2s, 9H, Boc)
MS: 562 (M+H+), 462 (-Boc), 247, 188, 134 - (hydroacetát)
Příklad 65
H-(D,L)-Phe(3-CF3)-Pro-NH-pAmb:
Sloučenina se vyrobí Boc-odštěpením sloučeniny vyrobené v příkladu 64.
’Η-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,4 (2s, 2H, NH); 9,2 (2s, 2H, NH); 8,9/8,8 (2t, 1H, NH); 8,8/8,6/8,4 (3sš, 3H, NH3); 7,8- 7,4 (8H, Ar-H); 4,42 - 4,1 (4H, N-CH2/a-Pro/a-H); 3,8 (m, 1H, 5-Pro/Ar-CH2); 2,2 - 1,5 (4H, β/gama-Pro)
T.t.: 195 až 7 °C. (dihydroacetát)
Přiklad 66
Boc-(D,L)-Phe(2-F)-Pro-NH-pAmb:
Sloučenina se vyrobí analogicky příkladu 3 tak, že se vychází z Boc-(D,L)-Phe(2-F)-OH a H-Pro-NH-pCNb x HCI.
’Η-NMR (de-DMSO, δ v ppm): 9,8 - 9,2 (š, N-H); 8,5/8,2 (2t, 1H, NH); 7,75 (2d, 2H, Ar-H); 7,45 (2d, 2H, Ar-H); 7,4 - 7,0 (m, 5H, Ar-H/NH); 4,6 - 4,2 (m, 4H, NCH2/a-Phe/a-pro);
3,6 - 3,0 (4m, 2H, δ-Pro) 2,9 - 2,7 (2m, 2H, Ar-CH2); 2,2 - 1,7 (3m, 4H, β/gama-Pro): 1,2 (ls. 9H, Boc)
MS: 512 (M+H+); 412 (-Boc), 247, 134 - (hydroacetát)
Příklad 67
H-(D,L)-Phe(2-F)-Pro-NH-pAmb:
Sloučenina se získá Boc-odštěpením sloučenin z příkladu 66.
’Η-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,4 (2s, 2H, N-H); 9,15 (2s, 2H, N-H); 8,9/8,6 (2sš, 3H, NH); 7,8 (2d, 2H, Ar-H); 7,45 (2d, 2H, Ar-H); 7,4 - 7,1 (m, 4H, Ar-H); 4,5 - 4,2 (3m, 4H, NCH2/a-Phe/a-Pro); 3,6 - 3,2 (2m, 2H, δ-Pro); 3,0/2,7 (2m, 2H, Ar-CH2); 2,2 - 1,5 (5m, 4H, β/gama-Pro)
MS: 412 (M+H+), 247, 134 - (dihydrochlorid)
Příklad 68
Boc-(D,L)-Phe(2-C l)-Pro-NH-p Amb:
Hydroacetát se vyrobí z Boc-(D,L)-Phe(2-Cl)-OH analogicky příkladu 3.
-57CZ 293426 Β6
Příklad 69
H-(D,L)-Phe(2-Cl)-Pro-NH-pAmb:
Dihydrochlorid se získá z příkladu 68 analogicky A.I.c.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,5 - 9,2 (4H, amidin); 8.9/8,7 (1H, NH); 8,85/8,45 (3H, NH+ 3);
7,9- 7,2 (8H, aromáty-H); 4,5 - 4,1 (4H, CH2 a 2 x CH); 3,8 - 3,0 (4H, 2 x CH2); 2,2 - 1,4 (4H, 2 x CH2)
Příklad 70
Boc-(D,L)-Phe(2-OH)-Pro-NH-pAmb:
Sloučenina se získá tak, že se vyjde z Boc-(D,L)-Phe(2-OH)-OH a H-Pro-p-kyano-benzylamid x HCI a postupuje se analogicky příkladu 3. ‘H-NMR (d6. δ v ppm): 8,4/8,0 (2t, 1H, NH);
7.7 (2d, 2H, Ar-H); 7,4 (2d, 2H, Ar-H); 7,2/7,15 (2d, 1H, NH); 7,0 - 6,6 (4H, Ar-H); 4,45 - 4,2 (m, 4H, H-CH2/a-Pro/a-H); 3,8 - 3,2 (2H, δ-Pro); 3,0/2,8 (2m, 2H, Ar-CH2); 2,1-1,6 (4H, β/gama-Pro); 1,2 (2s, 9H, Boc)
MS: 510 (M+H), 410 (-Boc), 247, 134 - (hydroacetát)
Příklad 71
H-(D,L)-Phe(2-OH)-Pro-NH-pAmb
Sloučenina se vyrobí odštěpením Boc ze sloučeniny vyrobené v příkladu 70.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,4 - 9,0 (š, NH); 8,85/8,5 (2t, 1H, NH); 7,8 (2d, 2H, Ar-H); 7,5 (2d, 2H, Ar-H); 7,2 - 6,7 (4H, Ar-H); 4,4 - 3,7 (m, 4H); N-CH2/a-Pro/a-H); 3,4 - 3,2 (2H, δ-Pro); 3,1-2,75 (2H, Ar-CH2); 2,1-1,4 (4H, β/gama-Pro)
MS: 410 (M+H4): 369,277, 247 - (dihydroacetát)
Příklad 72
Boc-(D,L)-Phe(2-MeO)-Pro-NH-pAmb:
Hydroacetát se získá z Boc-(D,L)-Phe(2-MeOH)OH analogicky příkladu 3.
Příklad 73
H-(D,L)-Phe(2-MeO)-Pro-NH-pAmb:
Dihydrochlorid se získá ze sloučeniny z příkladu 72 analogicky A.I.c.
‘H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,55 - 9,25 (4H, amidin), 8,90/8,65 (1H, NH), 8,7/8,2 (3H, NH3 +), 7,9 - 6,8 (8H, aromáty-H), 4,5 - 4,1 (4H, CH2 a 2 x CH), 3,80 (3H, OCH3), kolem
3.8 - 3,3 (2H, CH2), 3,2 - 2,6 (2H, CH2), 2,2 - 1,4 (4H, 2 x CH2)
-58CZ 293426 B6
Příklad 74
Boc-(D,L)-Phe(2-Me)-Pro-NH-pAmb:
Sloučenina se vyrobí analogicky příkladu 3 jestliže se vyjde z Boc-(D,L)-Phe(2-Me)-OH a H-Pro-p-kyano-benzylamidu x HC1.
’Η-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 8,4/8,05 (2t, 1H, NH): 7,75 (2d, 2H, Ar-H); 7,4 (2d, 2H, Ar-H);
7,2 - 7,0 (m, 5H, Ar-H))/NH); 4,6 - 4,2 (m. 4H, CH2/2 oc-H); 3,7 - 3,55 (2m, 2H, δ-Pro); 3,0-2,6 (m, 2H, CH2); 2,3 (2s. 3H, CH3); 2.2 - 1,6 (m, 4H, β/gama-Pro); 1,35 - 1,2 (ls, 9H, Boc)
FAB-MS: 508 (M+H+) - (hydroacetát)
Příklad 75
H-(D,L)-Phe(2-Me)-Pro-NH-pAmb:
Sloučenina se vyrobí Boc-odštěpením sloučeniny vyrobené v příkladu 74.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,35 (s, 2H, N-H); 9,05 (s, 2H, N-H); 8,8(8,5 (2t, 1H, NH); 7,8/7,75 (2d, 2H, Ar-H); 7,5/7,45 (2d, 2H, Ar-H); 7,2 - 7,0 (m, 4H, Ar-H); 4,4 - 4,2 (3m, 4H, CH2/2 α-H); 3,6/3,3 (2m, 2H, δ-Pro); 3,1/3,0 (2m, 2H, CH2); 2,38 (m, 3H, CH3); 2,2 - 1,3 (4H, β/gama-Pro);
MS: 408 (M+tT), 247, 185, 134-(dihydrochlorid)
Příklad 76
Boc-(D,L)-Phe(2-iPr)-Pro-NH-pAmb:
Hydroacetát se vyrobí z Boc-(D,L)-Phe(2-iPr)OH analogicky příkladu 3.
Příklad 77
H-(D,L)-Phe(2-iPr)-Pro-NH-pAmb:
Dihydrochlorid se získá analogicky A.I.c. ze sloučeniny z příkladu 76.
T.t.: 220 až 221 °C
Příklad 78
Boc-(D,L)-Phe(2-Ph)-Pro-NH-pAmb:
Hydroacetát se vyrobí z Boc-(D,L)-Phe(2-Ph)OH analogicky příkladu 3.
-59CZ 293426 B6
Příklad 79
H-(D,L)-Phe(2-Ph)-Pro-NH-pAmb:
Dihydrochlorid se získá ze sloučeniny z příkladu 78 analogicky A.I.c.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,5 - 9,2 (4H, amidin), 8,85/8,67 (1H, NH), 8,6/8,2 (3H, NH3 +),
7,85 - 7,15 (13H, aromáty-H), 4,4 - 3,0 (8H, 3 x CH2 a 2 x CH), 2,2 - 1,4 (4H, 2 x CH2)
Příklad 80
Boc-(D,L)-Phe(3,4-(F)2-Pro-NH-pAmb:
Hydroacetát se vyrobí z Boc-(D,L)-/Phe(3,4-(F)2)OH (J. Med. Chem. 1967, 10,64) analogicky příkladu 3; bílé krystaly;
T.t.: U0až ll4°C
FAB-MS: 530 (M+Ff)
Příklad 81
H-(D,L)-Phe(3,4-(F)2)-Pro-NH-pAmb:
Dihydrochlorid se získá ze sloučeniny z příkladu 80 Boc-odštépením analogicky A:I.c.; bílé krystaly; T.t. 190 až 195 °C (rozkl.);
FAB-MS: 430 (M+H+)
Příklad 82
Boc-(D,L)-Phe(3,4-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb:
Hydroacetát se získá reakcí Boc-(D,L)-Phe(3,4-(C1)2)-OH (Int. J. Pept. Protein Res. 1987, 30, 13) analogicky příkladu 3; bílé krystaly; T.t.: 135 až 138 °C
FAB-MS: 562 (Μ+1Γ)
Příklad 83
H-(D,L)-Phe(3,4-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb:
Dihydrochlorid se získá z příkladu 82 Boc-odŠtěpením analogicky A.I.c.; bílé krystaly; T.t.: 208 až212°C
FAB-MS: 462 (M+H)
-60CZ 293426 B6
Příklad 84
Boc-(D,L)-Phe(3-Cl-4-MeO)-Pro-NH-pAmb:
Hydroacetát se vyrobí z Boc-(D,L)-Phe(3-Cl-4-MeO)OH analogicky příkladu 3.
Příklad 85
H-(D,L)-Phe(3-Cl-4-MeO)-Pro-NH-pAmb:
Dihydrochlorid se získá z příkladu 84 Boc-odštěpením analogicky' A.I.c.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,58- 9,30 (4H, amidin), 8,98/8,85 (1H, NH). 8,8/8,35 (3H, NH3 +), 7,9- 7,0 (7H- aromáty-H), 4,50 - 4,20 (4H, CH2 a 2 x CH), 3,85/3,82 (3H, OCH3),
3,2 - 2,9 (2H, CH2), 2,2 - 1,5 (4H, 2 x CH2)
Příklad 86
Boc-(D,L)-Phe(3-Cl, 4-OEt)-Pro-NH-pAmb
Sloučenina se vyrobí z Boc-(D,L)-Phe(3-Cl, 4-OEt)-OH a H-Pro-p-kyano-benzylamidu x HC1 jako výchozích sloučenin analogicky příkladu 3 jako hydroacetát.
FAB-MS: 573 (M+H+)
Příklad 87
H-(D,L)-Phe(3-Cl, 4-OEt)-Pro-NH-pAmb
Sloučenina se vyrobí Boc-odštěpením z příkladu 86 jako dihydrochlorid.
‘H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,4 (d, 2H, NH); 9,2 (d, 2H, NH); 8,9/8,7 (2t, 1H, NH); 8,4 - 8,2 (š, 3H, NH3); 7,8 (2d, 2H, Ar-H); 7,45 (2d, 2H, Ar-H); 7,3 (m, 1H, Ar-H); 7,2/7,0 (2H, Ar-H);
4,5 - 4,2 (4H, H-CH2/a-Pro/a-Phe); 4,1 (m, 2H, OCH2); 3,7 - 3,1 (m, 2H, δ-Pro); 3,1 - 2,7 (m, H, Ar-CH2); 2,2 - 1,6 (m, 4H, β/gama-Pro); 1,35 (q, 3H, CH3)
MS: 472 (M+H+), 247, 134; 70
Příklad 88
H-(D,L)-Phe(3,4-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb
Odpovídající Boc-chráněná sloučenina se vyrobí analogicky příkladu 3 z Boc-(D,L)-Phe(3,4(MeO)2)OH a potom se analogicky A.I.c. štěpí na dihydrochlorid.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,55 - 9,25 (4H, amidin), 8,95/asi 8,8 (1H, NH), 8,8/8,35 (3H, NH3 +), 7,9 - 6,7 (7H, aromáty-H), 4,50 - 4,15 (4H,CH2 a 2 x CH), 3,75- 3,68 (6H, 2 x OCH3), 3,2 - 2,8 (2H, CH2), 2,2 - 1,4 (4H, 2 x CH2)
-61 CZ 293426 B6
Příklad 89
Boc-(D,L)-Phe(3,4-(Me)2)-Pro-NH-pAmb
Hydroacetát se vyrobí z Boc-(D,L)-Phe(3,4-(Me)2)OH analogicky příkladu 3; bílé krystaly; T.t.: 108ažll2°C
FAB-MS: 522 (M+H+)
Příklad 90
H-(D,L)-Phe(3,4-(Me)2)-Pro-NH-p Amb
Dihydrochlorid se získá z příkladu 89 Boc-odštěpením analogicky A.I.c.; bílé krystaly; T.t.: 195 až 200 °C;
FAB-MS: 422 (M+H+)
Příklad 91
Boc-(D,L)-Phe(3-Me-4-iPr)-Pro-NH-pAmb
Hydroacetát se vyrobí z Boc-(D,L)-Phe(3-Me-4-iPr)OH analogicky příkladu 3.
Příklad 92
H-(D,L)-Phe(3-Me-4-iPr)-Pro-NH-pAmb
Dihydrochlorid se získá z příkladu 91 Boc-odštěpením analogicky A.I.c.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,5 - 9,2 (4H, amidin), 8,9/9,6 (1H, NH), 8,85/8,40 (3H, NH3 +),
7,9-6,85 (7H, aromáty-H), 4,5 - 4,0 (4H, CH2 a 2 x CH), 3,2 - 2,9 (2H, CH2), 2,32/2,30 (3H, CH3), 2,2 - 1,4 (4H, 2 x CH2), 1,2-1,1 (6H, 2 x CH3)
Příklad 93
Boc-(D,L)-Phe(2,3-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb
Hydroacetát se vyrobí z Boc-(D,L)-Phe(2,3-(MeO)2)OH analogicky příkladu 3.
Příklad 94
H-(D,L)-Phe(2,3-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb
Dihydrochlorid se získá z příkladu 93 Boc-odštěpením analogicky A.I.c.
1,3:1 diastereomemí směs vykazuje oblast tání 138 až 140 °C (rozklad).
-62CZ 293426 B6
Příklad 95
Boc-(D,L)-Phe(2,5-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb
Hydroacetát se vyrobí z Boc-(D,L)-Phe(2,5-(MeO)2)OH analogicky příkladu 3.
Příklad 96
H-(D,L)-Phe(2,5-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb
Dihydrochlorid se získá z příkladu 95 Boc-odštépením analogicky A.I.c.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,55-9,25 (4H-amidin), 8,95/asi 8,7 (1H, NH), 8,7/8,2 (3H, NH3 +), 7,9 - 7,4 a 7,0 - 6,7 (7H, aromáty-H), 4,50 - 4,1 (4H, CH, a 2 x CH), 3,8/3,7 (6H, 2 x OCH3), 3,25 - 2,65 (2H, CH2), 2,2 - 1,5 (4H, 2 x CH2)
Příklad 97
Boc-(D,L)-Phe(3,5-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb
Hydroacetát se vyrobí z Boc-(D,L)-Phe(3,5-(MeO)2)OH analogicky příkladu 3.
Příklad 98
H-(D,L)-Phe(3,5-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb
Dihydrochlorid se získá z příkladu 97 Boc-odštěpením analogicky A.I.c.
‘H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,5-9,2 (4H, amidin), 8,95/asi 8,7 (1H, NH), 8,7/8,3 (3H, NH3 +), 7,85 - 7,40 a 6,60 - 6,35 (7H, aromáty-H), 4,50 - 4,15 (CH2 a 2 x CH), 3,75/3,72 (6H, 2 x OCH3), 3,2 - 2,8 (2H, CH2), 2,2 - 1,4 (4H, 2 x CH2)
Příklad 99
Boc-(D,L)-Phe(3,4,5-(MeO)3)-Pro-NH-pAmb
Výroba se provádí analogicky příkladu 3, přičemž se edukt BOC(D,L)-Phe(3,4,5-(MeO)3)OH vyrobí alkylací benzofenoniminglycinesteru se trimethoxybenzylchloridem, potom zavedením Boc-chránicí skupiny a zmýdelněním esteru.
T.t.: 109 až 121 °C
Příklad 100
H-(D,L)-Phe(3,4,5-(MeO)3-Pro-NH-pAmb
Výroba se provádí z příkladu 99.
T.t.: 180 až 239 °C (dihydrochlorid)
-63CZ 293426 B6
Příklad 101
Boc-(D,L)-Phe(2,4,6-(Me)3)-Pro-NH-pAmb
Hydroacetát se vyrobí z Boc-(D,L)-Phe(2,4,6-(Me)3)OH analogicky příkladu 3.
Příklad 102
H-{D,L)-Phe(2,4,6-{Me)3)-Pro-NH-pAmb
Dihydrochlorid se získá z příkladu 101 Boc-odštěpením analogicky A.I.c.
’Η-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,5 - 9,15 (4H, amidin), 8,85/asi 8,7 (1H, NH), 8,8/8,5 (3H, NHj'), 7,9 - 7,4 a 6,9 - 6,75 (6H, aromáty-H), 4,5 - 4,0 (4H, CH2 a 2 x CH), asi 3,7 - 3,3 (2H. CH2), 3,2 - 3,0 (2H, CH2), 2,25 - 2,10 (6H, 3 x CH3), asi 2,1-1,4 (4H, 2 x CH2)
Příklad 103
Boc-(D)-a-Nal-Pro-NH-pAmb
Výroba se provádí analogicky příkladu 3.
T.t.: 136 až 178 °C (hydroacetát)
Příklad 104
H-(D)-a-Nal-Pro-NH-pAmb
Výroba se provádí z příkladu 103.
T.t.: 228 až 234 °C (dihydrochlorid)
Příklad 105
H-(D)-p-Nal-Pro-NH-pAmb
Výroba se provádí z Boc-(D)-p-Nal-Pro-NH-pAmb
Boc-odštěpením; T.t.: 223 až 229 °C (dihydrochlorid)
Příklad 106
Boc-(D,L)-a-Ngl-Pro-NH-pAmb
Sloučenina se vyrobí tak, že se vychází z Boc-(D,L)-a-Ngl-OH a H-Pro-p-kyano-benzylamidu x HC1 analogicky příkladu 3.
-64CZ 293426 B6 'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 10,0 (š, NH); 8,7/8,5 (2t, 1H, NH); 8,3 - 7,3 (12H, Ar-H/NH); 6,2/6,1 (2d, 1H, a-Ngl); 4,4 (3H, N-CH2/a-Pro); 3,8 - 2,8 (2H, δ-Pro); 2,2 - 1,7 (4H, β/gama-Pro); 1,3 (2s, 9H, Boc)
MS: 530 (M+H+), 430 (-Boc), 247, 134; t.t.: 183 - 185 °C (rozkl.) - (hydroacetát)
Příklad 107
H-(D,L)-a-N gl-Pro-NH-p Amb
Sloučenina se vyrobí Boc-odštěpením z příkladu 106.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,5/9,3 (2d, 4H, NH); 9,0/8,8 (2t, IH, NH); 8.7 (š, 3H,NH3);
8,4 (m, 1H, Ar-H); 8,1 (2d, 2H, Ar-H); 7,9 (2d, 2H, Ar-H); 7,7 - Ί,Ί (6H, Ar-H); 6,25/6,18 (2s, 1H, a-Ngl); 4,6 - 4,35 (m, 3H, N-CH2/a-Pro); 3,85/3,6/3,4 (3m, 2H, δ-Pro); 2,2 - 1,6 (4H, β/gama-Pro)
MS: 430 (Μ+Ι-Γ), 3,69, 277 - (dihydrochlorid)
Příklad 108
Boc-(D,L)^-Ngl-Pro-NH-pAmb
Sloučenina se vyrobí z Boc-(D,l)-3-Ngl-OH a H-Pro-p-kyano-benzylainidu x HCI analogicky příkladu 3.
’Η-NMR (dÉ-DMSO, δ v ppm): 9,8 - 9,2 (š, NH); 8,6/8,4 (2sš, 1H, NH); 8,0 - 7,75 (6H, Ar-H);
7,6 - 7,5 (5H, Ar-H); 7,35/7,18 (2sš, 1H, NH); 5,6/5,45/5,35 (3sš, 1H, a-Ngl); 4,4 (3H, N-CH2/a-Pro); 3,9/3,7 (2sš, 1H, δ-Pro); 3,2 (sš, 1H, δ-Pro); 2,2 - 1,85 (4H, β/gama-Pro); 1,4 (2s, 9H, Boc)
MS: 530 (M+H+), 430 (-Boc), 2,47, 185, 134
T.t.: 183 - 185 °C (rozkl.)- (hydroacetát)
Příklad 109
H-(D,L)-ú-Ngl-Pro-NH-pAmb
Sloučenina se vyrobí Boc-odštěpením z příkladu 108 jako dihydroacetát.
'H-NMR (dů-DMSO, δ v ppm): 9,6 - 9,0 (š, NH); 8,75/8,6 (2t, 1H, NH); 8,0 - 7,8 (6H, Ar-H); 7,6- 7,4 (m, 5H, Ar-H); 5,2 (s, 1H, a-Ngl); 4,5 - 4,3 (m, 3H, N-CH2/a-Pro); 3,9 - 3,0 (2H, δ-Pro); 2,2 - 1,7 (4H, β/gama-Pro)
MS: 430 (M+H+), 247
-65CZ 293426 B6
Příklad 110
H-(D,L)-1 —T ic-Pro-NH-p Amb
Sloučenina se vyrobí tak, že se vyjde z příkladu 255 a provede se Boc-odštěpení, jako dihydroacetát.
'H-NMR (ds-DMSO, δ v ppm): 9,4/9,0 (2sš, 4H, NH); 8.7 (š. 1H, NH); 7,75 (2d, 2H, Ar-H);
7,45 (2d, 2H, Ar-H); 7,4 - 6,8 (4H, Ar-H); 5,2 (2s, 1H, a-Tic); 4,8 - 4,4 (3H, N-CH2/a-Pro);
3,6 - 3,2 (4H, Ar-CH2/5-Pro); 3,0 - 2,7 (2H, N-CH2); 2,2 - 1.8 (4H. β/gama-Pro)
Příklad 111
Boc-(D)-3-T ic-Pro-NH-p Amb
Sloučenina se vyrobí analogicky příkladu 3 tak, že se vychází z Boc-(D)-3-Tic-Ph a H-Pro-pkyano-benzylamidu x HCI, 'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 8,44/8,2 (2sš, 1H, NH); 7,8/7,65 (2d, 2H-Ar-H); 7,5 (2d, 2H, Ar-H); 7,4/7,2 (m, 4H, Ar-H); 4,8 - 4,6 (m, 2H, CH2); 4.4 - 4,2 (m, 4H, CH2/2 a-H); 3,62 (m, 2H, Pro); 3,1 - 2,6 (m, 2H, CH2-Ph); 2,2 - 1,75 (m, 4H, Pro); 1,3 (2s, 9H, Boc)
MS: 505 (M+H+); 406 (-Boc).
T.t.: 143 °C (hydroacetát).
Příklad 112
H-(D)- 3-T ic-Pro-NH-pAmb
Sloučenina se vyrobí Boc-odštěpením z příkladu 111.
FAB-MS: 406 (M+Ff). T.t.: 204 °C - (dihydroacetát)
Příklad 113
-Icc-Pro-NH-p Amb
Sloučenina se vyrobí analogicky příkladu 3, vychází se z 1-Icc-OH a H-Pro-p-kyanobenzylamidu x HCI.
FAB-MS: 402 (M+H+)
Příklad 114
Boc-(D,L)-2-Tgl-Pro-NH-pAmb
Sloučenina se vyrobí jako hydroacetát tak, že se vychází z Boc-(D,L)-2-Tgl-OH a H-Pro-pkyano-benzylamidu x HCI analogicky příkladu 3.
-66CZ 293426 B6 'H-NMR (dí-DMSO, δ v ppm): 8,6/8,4 (2t, 1H, NH); 7.75 (2d, 2H, Ar-H); 7,45 - 6,9 (6H, Ar-H); 5,7 - 5,4 (1H, a-Tgl); 4,4 (m, 3H, N-CH; a-Pro): 3,8 - 3,2 (2H, δ-Pro); 2,1-1,7 (4H, β/gama-Pro); 1,35 (2s, 9H, Boc)
MS: 486 (M+H+), 386 (-Boc), 247, 185, 134
Příklad 115
H-(D,L)-2-Tgl-Pro-NH-pAmb
Sloučenina se vyrobí Boc-odštěpením z příkladu 114.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,4/9,2 (2sš, 4H, NH): 8,9/8.75 (2t, 1H, NH); (sš, 3H, NH); 7,8 (2d, 2H, Ar-H); 7,62 (2d, 2H, Ar-H); 7,5 (2d, 2H, Ar-H): 7,4 (šs, 1H, Ar-H); 7,1 (m, 1H, Ar-H); 5,65/5,6 (2s, 1H, a-Tgl): 4,5 - 4,4 (m, 3H, N-CH,/a-Pro); 3,95 - 3,75 (2m, 1H, δ-Pro); 3,2/3,0 (2dd, 1H, δ-Pro); 2,2-2,0 (1H, β-Pro); 1,9-1.7 (3H. β/gama-Pro)
FAB-MS: 386 (M+H+) - (dihydroacetát)
Příklad 116
Boc-(D}-2-T al-Pro-NH-p Am b
Sloučenina se vyrobí analogicky příkladu 3, vychází se z Boc-(D)-2-Tal-OH a H-Pro-p-kyanobenzylamidu x HC1.
’Η-NMR (dé-DMSO, δ v ppm): 8,85/8,15 (2t. 1H, NH); 7,75 (2d, 2H, Ar-H); 7,45 (2d, 2H. Ar-H); 7,35 (d, 1H, Ar-H); 7,25 (šs, 1H, Ar-H); 7,0 - 6,7 (2H, Ar-H); 4,82 - 4,3 (4H, N-CH2/a-Pro/a-Tal); 4,05/3,6 (2m, 1H, δ-Pro); 3,5 - 2,9 (m. 3H, Ar-CH2/6-Pro); 2,2 - 1,7 (4H, gama-Pro); 1,25 (2s, 9H, Boc)
MS: 500 (M+H+), 400 (-Boc), 247, 134 - (dihydroacetát)
Příklad 117
H-(D)-2-Tal-Pro-NH-pAmb
Sloučenina se vyrobí Boc-odštěpením z příkladu 116.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,4 - 9,0 (4H, NH); 8,85 (š, 3H, NH3 +); 7,8 (d, 2H, Ar-H); 7,5 (d, 2H, Ar-H); 7,45 (d, 1H, Ar-H); 7,0 (dd(s, 2H, Ar-H); 4,4-4,15 (4H, N-CH2//a-Pro/lLTal); 3,8 - 2,9 (3H, Ar-CH/6-Pro); 2,8 (dd, Ar-H); 1,8 (m, 2H, β-Pro); 1,75- 1,55 (2m, 2H, gama-Pro)
FAB-MS: 400 (M+lT) - (dihydroacetát)
-67CZ 293426 B6
Příklad 118
Boc(D)-Phg-Pro-NH-pAmb
Hydroacetát se vyrobí z Boc-(D)-Phg-OH analogicky příkladu 3.
Příklad 119
H-(D)-Phg-Pro-NH-pAmb
Dihydrochlorid se získá z příkladu 118.
'H-NMR (de-DMSO, δ v ppm): 9,6 - 9,3 (4H, amidin); 9,1 - 8,7 (4H, NH a NHf); 8,0 - 7,3 (9H, aromáty-H); 5,4 (1H, CH); 4,6 - 4,3 (3H, CH2 a CH); 3,1 - 2,7 (2H, CH2): 2,2 - 1,6 (4H, 2 x CH2)
Příklad 120
Boc-(D,L)-Phg(4-MeO)-Pro-NH-pAmb
Hydroacetát se vyrobí analogicky příkladu 3 z Boc-(D,L)-Phg(4-MeOH)OH.
Příklad 121
H-(D,L)-Phg(4-MeO)-Pro-NH-pAmb
Dihydrochlorid se získá z příkladu 120.
‘H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,6 - 9,3 (4H, amidin); 9,0/8,9 (1H, NH); 8,8/8,6 (3H, NH3 +); 7,9 - 7,8 a 7,55 - 7,45 a 7,05 - 6,90 (8H, aromáty-H); 5,3 (1H, CH); 4,5 - 4,3 (3H, CH2 a CH); 3,75 (3H, OCH3; 2,2 - 1,6 (4H, 2 x CH2)
Příklad 122
Boc(D)-Chg-Pro-NH-pAmb
a) 8 g (31,1 mmol) Boc-(D)-Chg-OH, 9,88 (37,3 mmol) H-Pro-p-kyanobenzylamidu x HC1, 32 ml (186,54 mmol) DIPEA a 108 ml PPA (50% v ethylacetátu) se při 0 °C smísí v baňce a 18 h se míchá při 0 °C až TM. Potom se reakční směs zředí ethylacetátem a extrahuje se 20% roztokem NaHSO4 (5x), 5% roztokem NaHCO3 a nasyceným roztokem NaCl. Po sušení a odpaření organického roztoku zbude 13,8 g čistého Boc(D)-Chg-Pro-p-kyano-benzylamidu.
b) 13,8 g Boc(D)-Chg-Pro-p-kyano-benzylamidu se rozpustí ve 113 ml pyridinu a 53 mi TEA. Roztok se nasytí plynným H2S a nechá se stát při TM přes noc. Pro zpracování se reakční směs nejprve propláchne dusíkem a pak se nalije na 1 1 5% roztoku kyseliny citrónové. Vyloučená sraženina se odfiltruje a filtrát se extrahuje ethylacetátem (3x). Sraženina se rozpustí v ethylacetátu a spojí se s organickými extrakty. Spojené fáze se promyjí 5% kyselinou citrónovou, suší se síranem sodným a odpaří. Surový produkt se v následující reakci použije bez dalšího čištění.
-68CZ 293426 B6
c) Surový thioamid se rozpustí ve 120 ml acetonu a 21 ml Mel a míchá se přes noc při TM. Potom se reakční směs odpaří ve vakuu dosucha a zbytek se rozpustí ve 48 ml MeOH. Po přídavku 48 ml methanolického roztoku octanu amonného (10%) se roztok míchá 18 h při TM. Pro zpracování amidinu se rozpouštědlo odstraní na rotační odparce, zbytek se vyjme do 5 DCM, sraženina se odsaje a filtrát se odpaří ve vakuu. Získá se 24,6 g surového produktu. Tento se přečistí pomocí HPLC-chromatografie s reverzní fází. Výtěžek 7 g - (hydroacetát).
‘H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,6 - 9,2 (š, N-H); 8,7/8,1 (2t, 1H, NH); 7,75 (2d, 2H. Ar-H);
7,45 (2d, 2H, Ar-H); 7,0/6,9 (2d, 1H, NH); 4,4 (m, 3H, CH2/a-Pro); 4,0 (t. 1H, a-Chg);
io 3,6 - 3,0 (2H, gam-Pro); 2,1 - 1,5 (m, 11H, [3-gama-Pro/CH2); 1,4/1,3 (2s, 9H. Boc): 1.1 - 0,9 (m, 4H)
MS: 486 (M+H), 386 -Boc), 247, 134
Příklad 123
H-(D)-Chg-Pro-NH-pAmb
Sloučenina se vyrobí Boc-odštěpením z příkladu 122.
‘H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,4 - 9,0 (š, NH); 8,9 (t, 1H, NH); 8,4 (š, NH); 7,8 (d, 2H, Ar-H); 7,5 (d, 2H, Ar-H); 4,4 (m, 3H, N-CH2/a-Pro); 3,9 - 3,6 (2m, 2H, a-Pro); 3,8 (d, 1H, a-Pro); 2,0 - 1,5 (m, 10H, CH/p/gama-Pro); 1,2-1,0 (m, 4H, CH)
MS: 386 (M+H+), 247, 185. T.t.: 133 °C - (dihydrochlorid)
Příklad 124
EtOOC-(D)-Chg-Pro-NH-pAmb
Nejprve se z Boc-(D)-Chg-OH a H-Pro-p-kyanobenzylamidu x HCI se vyrobí analogicky příkladu 3
H-(D)-Chg-Pro-p-kyanobenzylamid x HCI.
Potom se postupně v uvedeném pořadí přidá 2,5 g (6,17 mmol) H-(D)-Chg-Pro-p-kyanobenzylamidu x HCI, 2,33 ml (13,58 mmol) DIPEA, 0,075 g (0,617 mmol) DMAP a 0,652 ml ethyl40 esteru kyseliny chlormravenčí ke 25 ml DCM při TM a reakční směs se míchá 18 h při TM.
Potom se reakční směs zředí DCM, promyje se 20% NaHSO4-roztokem, suší se a odpaří. Surový výtěžek EtOOC-(D)-Chg-Pro-p-kyanobenzylamidu: 2,51 g. Takto získaný meziprodukt se analogicky příkladu A.II1.1. převede na odpovídající amidin. Surový produkt se přečistí pomocí HPLC-chromatografie s reverzní fází (acetonitril/voda). Výtěžek: 0,483 g.
'H-NMR (de-DMSO, δ v ppm): 8,7/8,1 (2t, 1H, NH); 7,8 (2d, 2H, Ar-H); 7,4 (2d, 2H, Ar-H);
7,4 (2d, 2H, Ar-H); 7,39/7,3 (2d, 1H, NH); 4,9/4,4 (2m, 3H, CH2/a-Pro); 4,0 (2t, 1H, a-Chg); 3,8 (t, 2H, OCH2); 3,7 - 3,3 (3m, 2H, δ-Pro); 2,1 (m, 1H, β-Pro); 1,9-1,5 (m, 11H, CHXgamaPro); 1,2 - 0,9 (m, 9H, CH2/CH3)
MS: 458 (M+H*), 247,134,70- (hydroacetát)
-69CZ 293426 B6
Příklad 125
HOOC-CH2-(D>-Chg-Pro-NH-pAmb
Sloučenina se vyrobí terc.butyl odštěpením z příkladu 126.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 8,5/8,3 (2t, 1H, NH); 7.8 (2d. 2H, Ar-H); 7,6/7,45 (2d, 2H, Ar-H); 4,4 - 4,2 (m, 3H, N-CH2/a-Pro); 4,1 (m, 1H, a-Chg); 3.8 - 3,2 (4H, HOOCCH2/6-Pro); 2,1-1,4 (m, 11H); 1,2 - 0,9 (m, 4H)
MS: 444 (M+H+), 386, 247 - (hydrochlorid)
Příklad 126 tBuOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-pAmb
Sloučenina se vyrobí analogicky terc.butylesterovému mezistupni příkladu 246.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 8,4 (t, 1H, NH); 7,75 (d, 2H, Ar-H); 7,4 (d, 2H, Ar-H); 4,4 (m,4H, N-CH2/a-Pro/a-Chg); 3,8 - 2,9 (4H, HOOCCH2/6-Pro); 2,1 - 0,9 (m, 15H); 1,3 (s, 9H, tBu)
MS: 500 (M+HT), 444, 247, 170 - (hydroacetát)
Příklad 127
Boc-(D)-Cha-Pro-NH-pAmb
Sloučenina 127 se vyrobí analogicky příkladu 3 'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,4 (š, 4H, NH); 8,8/8,15 (2t, 1H, NH); 7,75 (2d, 2H, Ar-H);
7,45 (2d, 2H, Ar-H); 7,05 (d, 1H, NH); 4,8/4,35 (d/m, 3H, N-CH2/a-Pro/a-Chg); 3,75/3,5 - 3,2 (2H, a-Pro); 2,1 - 1,85 (4H, β/gama-Pro); 1,7 - 1,3 (m, 6H); 1,3 (2d, 9H, Boc); 1,4 - 0,9 (m, 7H)
MS: 500 (M+FT), 400 (-Boc), 247, 134, T.t.: 125 až 7 °C (hydroacetát)
Příklad 128
Me-(D)-Cha-Pro-NH-pAmb
Sloučenina se syntetizuje Cbz-odštěpením z příkladu 129.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,3/8,9 (2s, 4H, NH); 8,85/8,8 (2sš, 2H, NH); 8,7 (t, 1H, NH); 7,8 (2d, 2H, Ar-H); 7,5 (2d, 2H, Ar-H); 4,4 (m, 3H, N-CH2/a-Pro); 4,25 (dš, 1H, a-Chg); 3,9/3,4 (2m, 2H, δ-Pro); 2,5 (s, 3H, NCH3); 2,2 (m, 1H, β-Pro); 2,5 (s, 3H, NCH3); 2,2 (m, 1H, β-Pro); 2,0 - 1,8 (m, 4H); 1,8-1,5 (m, 6H); 1,4 - 0,9 (6H)
MS: 414 (M+H+), 247, 140 - (hydroacetát)
-70CZ 293426 B6
Příklad 129
Me-(Z)-(D)-Cha-Pro-NH-pAmb
Sloučenina se vyrobí analogicky příkladu 3, vychází se z Me-(Z)-(D)-Cha-OH a H-Pro-okyanobenzylamidu x HCI.
’Η-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,8 - 9,2 (š, 4H, NH); 8,8/8.5 (2t, 1H, NH); 7,8 (2d, 2H, Ar-H);
7,5 (2d, Ar-H); 7,4 (m, 5H, Ph-H); 5,2 - 5,0 (2H, OCH2): 4,95 - 4,5 (1H, a-Pro); 4,4 (m, 3H, N-CH2/a-Cha); 3,6 - 3,0 (2H, δ-Pro); 2,82/2,75/2,7 (3s. 3H, NCH3); 2,1 (m, 1H, β-Pro); 1,9-1,4 (m, 11H, β/gama-Pro/CH,); 1,2 - 0,8 (m, 5H)
FAB-MS: 548 (M+H+) - (hydroacetát)
Příklad 130
N,N-Me-(D)-Cha-Pro-NH-pAmb
Sloučenina se vyrobí analogicky příkladu 3 z Ν,Ν-dimethylcyklohexylalaninu a H-Pro-pkyanobenzylamidu x HCI.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 8,8/8,4 (2t, 1H, NH); 7,8 (2d, 2H, Ar-H); 7,45 (2d, 2H, Ar-H);
4,45 - 4,3 (d/m, 3H, N-CH2/a-Pro); 3,9 (m, 1H, a-Cha); 3,6 - 3,2 (2H, δ-Pro); 2,2 (2s, 6H, NCH3); 2,1-1,5 (m, 13H); 1,3 - 0,8 (m, 4H)
FAB-MS: 428 (M+H+) - (hydroacetát)
Příklad 131
Boc-(D)-T rp(Boc)-Pro-NH-pAmb
Sloučenina se vyrobí analogicky příkladu 3, vychází se z Boc-(D)-Trp(Boc)-OH a H-Pro-pkyanobenzylamidu x HCI.
’Η-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,8 - 9,2 (š, N-H); 8,8 - 8,5 (2sš, 1H, NH); 8,25 (8,0/7,8-7,2 (m, 10H, Ar-H/NH); 4,85/4,5 - 4,2 (d/m, 4H, CH2-H); 3,6/3,5 (2m, 2H, CH2, Pro); 3,1 - 2,8 (m, 2H, CH2); 2,2 - 1,6 (m, 4H, Pro); 1,3 (2s, 18H, Boc)
FAB-MS: 633 (M+Ff) - (hydroacetát)
Příklad 132
H-(D)-Trp-Pro-NH-pAmb
Sloučenina se vyrobí Boc-odštěpením z příkladu 131.
’Η-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 11,1 (s, 1H, NH); 9,4/9,15 (2s, 4H, N-H); 8,8 (t, 1H, NZ); 8,6 (s, 3H, N-H); 7,75 (d, 2H, Ar-H); 7,45 (d, 3H, Ar-H); 7,35 (d, 1H, Ar-H); 7,25 (s, 1H, Ar-H); 7,0 (2t, 2H, Ar-H); 4,3 (m, 2H, CH2); 4,18 (sš, 1H, a-H); 3,5 (m, 2H, CH2, Pro); 3, - 3,1 (m, 2H, CH2); 2,15 (dd, 1H, Pro); 1,6/1,4 (2m, 3H, β/gama-Pro)
-71 CZ 293426 B6
FAB-MS: 433 (M+H+) - (dihydrochlorid)
Příklad 133
Boc-(D,L)-Dpa-Pro-NH-pAmb
Sloučenina se vyrobí analogicky příkladu 3 z Boc-(D)-Dpa-OH a H-Pro-p-kyanobenzylamidu x HC1.
‘H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 8,6/8,1 (2t, 1H, NH); 7,75 (2d, 2H, Ar-H); 7,45 - 7,0 (m, 13H, Ar-H/NH); 5,25/5,1 (2t, 1H, a-Dpa); 4,4 - 4,1 (3H, N-CH2/a-Pro); 3,75 (m, 1H, CH);
3,6 - 2,95 (2H, δ-Pro); 2,0 - 1,5 (4H, p/gama-/Pro); 1,2 (2ds, 9H, Boc)
MS: 570 (M+FT), 470 (-Boc), 247, 196, 134. T.t.: 156 °C - (hydroacetát)
Příklad 134
H-(D nebo L)-Dpa-Pro-NH-pAmb/a
Sloučenina 134 se vyrobí Boc-odštěpením z příkladu 133 a potom dělením diastereomerů pomocí HPLC-dělení s reverzní fází.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,3 (2s, 4H, NH); 8,9/8,2 (2t, 1H, NH); 8,4 (š, 3H, NH); 7,8 (2d, 2H, Ar-H); 7,6 (2d, 2H, Ar-H); 7,5 - 7,1 (10, Ar-H); 5,1/4,6 (2d, 1H, a-Dpa); 4,4 - 4,1 (4H, N-CH2/a-Pro/CH); 3,8 - 3,0 (2H, δ-Pro); 2,1-1,1 (4H, β/gama-Pro)
FAB-MS: 470 (M+H+) - (dihydroacetát)
Příklad 135
H-(D nebo L)-Dpa-Pro-NH-pAmb/b 'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,3/9,2 (2s, 4H, NH); 8,4 (t, 1H, NH); 8,35 (sš, 3H, NH); 7,8/7,65 (2d, 4H, Ar-H); 7,4 - 7,1 (10H, Ar-H); 5,0 (d, 1H, α-Dpa); 4,4/3,9 (Μ, 4H, n-CH2/aPro/CH); 3,6/2,9 (2m, 2H, δ-Pro); 1,7-1,3 (4H, β/gama-Pro)
FAB-MS: 470 (M+H+) - (dihydroacetát)
Příklad 136
EtOOC-(D nebo L)-Dpa-Pro-NH-pAmb/a
Pro přípravu výše uvedené sloučeniny se nejprve Boc-(D,L)-Dpa-Pro-p-kyanobenzylamid (meziprodukt pro syntézu z příkladu 131) nejprve pomocí dioxanu/HCl převede na hydrochlorid H-(D,L}-Dpa-Pro-p-kyanobenzylamidu x HC1. Potom se sůl analogicky příkladu 124 převede na diastereomemí pár produktů. Oba diastereomeiy se pak od sebe oddělí pomocí HPLCchromatografie s reverzní fází (acetonitril/voda).
-72CZ 293426 B6 'H-NMR (dé-DMSO, δ v ppm): 8,6/6,6 (2t, 1H, NH); 7,8- 7,0 (m, 15H, Ar-H, NH); 5,3/5,1 (2t, 1H, a-Dpa); 4,4 (2d, 1H, α-Pro); 4,3/4,1 (2t, 2H, CH2); 4,0 (m, 1H, CH); 3,85 (t, 2H, OCH2; 3,6/3,3/3,0 (3m, 2H, δ-Pro); 2,0 - 1,4 (m, 4H, β/gama-Pro); 1,0 (m, 3H, CH3)
MS: 542 (M+H+), 268, 134, 70- (hydroxyacetát)
Příklad 137
EtOOC-(D nebo L)-Dpa-Pro-NH-pAmb/b
Sloučenina se vyrobí analogicky příkladu 3.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 8,2 (2t, 1H, NH); 7,75 (d, 2H, Ar-H); 7,6 (d, 2H, Ar-H); 7,4-7,2 (m, 12H, Ar-H); 5,15 (m, 1H, a-Dpa); 4,4 (m, 3H, NCH2/a-Pro); 3,95 (m. 1H, CH); 3,8/3,1 (2m, 2H, δ-Pro); 3,7 (m, 2H, OCH2); 1,8-1,4 (m, 4H, β/gama-Pro); 1,0 (m, 3H, CH3)
FAB-MS: 542 (M+H+), 268, 134, 79 - (hydroacetát)
Příklad 138
HOOC-CH2-(D nebo L)-Dpa-Pro-NH-pAmb/a
Nejprve se Boc-skupina z Boc-(D,L)-Dpa-Pro-p-kyanobenzylamidu (meziprodukt syntézy z příkladu 133) pomocí dioxanu/HCl odštěpí, 3,42 g (7 mmol) takto získaného hydrochloridu se rozpustí ve 20 ml MOH a po přídavku 0,6 g (6,65 mmol) hydrátu kyseliny glyoxyiové a 1,75 g (28 mmol) NaCNBH3 se míchá přes noc. Pro zpracování se reakční směs odpaří, zbytek se vyjme do DCM a takto získaný organický roztok se extrahuje vodou. Po sušení a odpaření organické fáze se zbytek rozpustí v 5 ml MeOH a požadovaný produkt se po nakapání do diizopropyletheru vysráží. Surový výtěžek: 3,7 g. Surový produkt se bez dalšího čištění analogicky příkladu A.III.l. převede na odpovídající amidin. Diastereomerní směs se rozdělí pomocí HPLC s reverzní fází.
FAB-MS: 528 (M+H+), 254 - (hydroacetát)
Příklad 139
HOOC-CH2-(D nebo L)-Dpa-Pro-NH-pAmb/b
MS: 528 (M+FT), 254, 134, 83 - (hydroacetát)
Příklad 140
Boc-(D nebo L)-Dpa(4,4'-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/a
Sloučenina se vyrobí analogicky příkladu 3, vyjde se z Boc-(D,L)-Dpa(4,4'-(C12)-OH a H-Prop-kyanobenzylamidu z HC1. Syntetizovaný diastereomerní pár se rozdělí pomocí HPLCchromatografie s reverzní fází.
MS: 638 (M+H*), 538 (-Boc), 303,277,247 - (hydroacetát)
-73CZ 293426 B6
Příklad 141
Boc-(D nebo L)-Dpa-(4,4'-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/b
MS: 638 (M+H+), 538 (-Boc), 303, 247, 134, 70 -(hydroacetát)
Příklad 142
H-(D nebo L)-Dpa(4,4'-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/a
Sloučenina se vyrobí Boc-odštěpením z příkladu 140.
‘H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm):
MS: 538 (M+H+), 303, 247, 134, 70 - (hydroacetát)
Příklad 143
H-(D nebo L)-Dpa(4,4'-(CI)2)-Pro-NH-pAmb/b
Sloučenina se vyrobí Boc-odštěpením z příkladu 141.
MS: 538 (M+H+),-303, 264. 247,134, 70 - (hydroacetát)
Příklad 144
EtOOC-(D nebo L)-Dpa(4,4'-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/a
Pro výrobu výše uvedené sloučeniny se nejprve Boc-(D,L)-Dpa(4,4'-(Cl)2)-Pro-p-kyanobenzylamid (meziprodukt pro syntézu z příkladu 141) nejprve pomocí dioxanu/HCl převede na odpovídající hydrochlorid H-(D,L)-Dpa(4,4'-(Cl)2)-Pro-p-kyanobenzylamid x HCI. Potom se sůl analogicky příkladu 124 převede na diastereomemí produktovou směs. Oba diastereomery se vzájemně oddělí HPLC-chromatografií s reverzní fází (acetonitril/voda).
’Η-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 8,6 (2t, 1H, NH); 7,75 (2d, 2H, Ar-H); 7,6- 7,1 (11H, Ar-H/NH); 5,2/5,0 (2t, 1H, a-Dpa); 4,4/4,38 (2d, 1H, CH); 4,3 (m, 1H, a-Pro); 4,0 (m, 2H, NCH2); 3,75 (m, 2H, OCH2); 3,7 - 3,3 (2H, δ-Pro); 2,0 (m, 1H, β-Pro); 1,95 - 1,4 (m, 4H, β/gama-Pro); 1,0 (2t, 3H, CH3)
MS: 610 (M+H+), 247, 134, 70 - (hydroacetát)
Příklad 145
EtOOC-(D nebo L)-Dpa)4,4'-(Cl)2}-Pro-NH-pAmb/b ‘H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 8,2 (2t, 1H, NH); 7,75 (2d, 2H, Ar-H); 7,6-7,1 (11H, Ar-H/NH); 5,1 (2t, 1H, a-Dpa); 4,4 (2d, 1H, CH); 4,3 (m, 2H, NCH2); 4,0/4,39 (m, 1H, a-Pro); 3,85 (m, 2H, OCH2); 3,7 (2H, δ-Pro); 1,9 - 1,5 (4H, β/gama-Pro); 1,0 (2t, 3H, CH3)
MS: 610 (Μ+1Γ), 247, 185,134,3 - (hydroacetát)
-74CZ 293426 B6
Příklad 146
HOOC-CH2-(D nebo L)-Dpa(4,4'-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/a
Nejprve se Boc-skupina z Boc-(D,L)-Dpa(4,4'-Cl)-Pro-p-kyanobenzylamidu (meziprodukt syntézy z příkladu 140) pomocí dioxanu/HCl odštěpí. Potom se vyrobí analogicky příkladu 138 požadovaný produkt.
‘H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 11,2 (š, COOH); 8,9/8,6 (2sš, 1H, NH): 7,8- 7,2 (14H, Ar-H/NH); 4,4- 4,0 (5H, CH7 N-CH2/a-Dpa/a-Pro); 3.8 - 3,8 (2H, δ-Pro); 2.8 (2d, 2H, HOOC-CH2); 2,0 - 1,4 (4H, β/gama-Pro)
MS: 596 (M+H+), 247, 134, 93, 70 - (hydroacetát)
Příklad 147
HOOC-CH2-(D nebo L)-Dpa(4,4'-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/b
FAB-MS: 596 (M+H+)
Příklad 148
H-(D nebo L)-Dch-Pro-NH-pAmb/a
Sloučenina 148 se vyrobí analogicky příkladu 3, vychází se z Boc-(D,L)-Dch-OH a H-Pro-pkyanobenzylamidu x HCI. Syntetizovaný diastereomemí pár se rozdělí pomocí HPLC s reverzní fází.
‘H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,3 - 9,0 (š, NH); 8,9/8,5 (2t, 1H, NH); 7,75/7,5 (2d, 4H, Ar-H); 4,5 - 4,0 (4H, N-CH2/a-Pro/a-Dch); 3,7 - 3,0 (2H, δ-Pro); 2,2 - 1,0 (4H, β/gama-Pro)
FAB-MS: 481 (M+H+)
T.t.: 127 °C - (dihydroacetát)
Příklad 149
H-(D nebo L)-Dch-Pro-NH-pAmb/b
FAB-MS: 481 (M+Ff). T.t.: 127 °C - (dihydroacetát)
Příklad 150
Boc-(D)-Val-Pro-NH-pAmb
Výroba se provádí analogicky příkladu 3.
T.t.: 132 až 145 °C - (hydroacetát)
-75CZ 293426 B6
Příklad 151
H-(D)-Val-Pro-NH-pAmb
Výroba se provádí analogicky příkladu 150.
T.t.: 60 až 80 °C - (dihydrochlorid)
Příklad 152
Boc-(D)-Leu-Pro-NH-pAmb
Výroba se provádí analogicky příkladu 3.
T.t.: 68 až 82 °C - (hydroacetát)
Příklad 153
H-D-Leu-Pro-NH-pAmb
Výroba se provádí analogicky příkladu 152.
T.t.: 228 až 233 °C -- (dihydrochlorid)
Příklad 154
Boc-(D)-Gly(a-tBu)-Pro-NH-pAmb
Výroba se provádí analogicky příkladu 3.
T.t.: 211 až 220 °C - (hydroacetát)
Příklad 155
H-(D)-Gly(a-tBu)-Pro-NH-pAmb
Výroba se provádí z příkladu 154.
T.t.: 236 až 239 °C - (dihydrochlorid)
Příklad 156
Boc-(D)-Ala(p-tBu)-Pro-NH-pAmb
Výroba se provádí analogicky příkladu 3.
T.t.: 185 až 192 °C (hydroacetát)
-76CZ 293426 B6
Příklad 157
H-(D)-Ala(P-tBu>-Pro-NH-pAmb
Výroba se provádí z příkladu 156.
T.t.: 225 až 231 °C (dihydrochlorid)
Příklad 158
H-(D popř. L)-Msu-Pro-NH-pAmb/a
Dihydrochlorid se vyrobí analogicky příkladu 3 z Boc-(D,L)-Msu-OH a pak se analogicky A.I.c. odštěpí Boc-skupina. Diastereomery se oddělí pomocí HPLC.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,40/9,20 (4H, amidin); 8,9 (1H, NH); 8,55 (3H,NHf); 7,85/7,50 (4H, aromáty-H); 4,50 - 4,35 (4H, CH2 a 2 x CH); 3,85 - asi 3,3 (4H, 2 x CH2); 2,95 (3H, CH3); 2,3 - 1,8 (6H, 3 x CH2)
Příklad 159
H-(D popř. L)-Msu-Pro-NH-pAmb/b (Dihydrochlorid) 'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,45/9,30 (4, amidin); 8.95 (1H, NH); 8,85 (3H, NH3 +); 7,80/7,45 (4H, aromáty-H); 4,4 - 4,2 (4H, CH2 a 2 x CH); 3,85 - asi 3,3 (4H, 2 x CH2); 3,00 (3H, CH3), 2,3 - 1,7 (6H, 3 x CH2)
Příklad 160
Boc-(Cyklo)Leu-Pro-NH-pAmb
Sloučenina 160 se vyrobí analogicky příkladu 3 z Boc-(cyklo)Leu-OH a H-Pro-p-kyanobenzylamidu x HC1.
MS: 472 (M+FT), 372 (-Boc), 247, 185, 140 - (hydroacetát)
Příklad 161
H-(Cykl o)Leu-Pro-NH-pAmb
Sloučenina se syntetizuje Boc-odštěpením z příkladu 160.
FAB-MS: 372 (M+H+) - (dihydroacetát)
-77CZ 293426 B6
Příklad 163
H-G ly-Pro-N H-p Amb
Dihydrochlorid se získá Boc-odštěpením z Boc-Gly-Pro-NH-pAmb, který byl vyroben z BocGly-OH analogicky příkladu 3.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,50/9,25 (4H, amidin); 8,85 (1H, NH): 8,30 (3H, NHf); 7,80/7,45 (4H, aromáty-H); 4,5 - 4,2 (3H, CH2 a CH); 3,9 - asi 3,3 (4H, 2 x CH2); 2,2 - 1,7 (4H, 2 x CH2)
Příklad 166
Ph-CH2-Gly-Pro-NH-pAmb
Dihydrochlorid se získá Boc-odštěpením z Ph-CH2-(Boc)Gly-Pro-NH-pAmb hydroacetátu.
‘H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,6 (2H, NH2 +); 9,4/9,2 (4H, amidin); 8,80 (1H. NH); 7,80-7,35 (9H, aromáty-H); 4,40 - 4,25 (3H, CH2 a CH); 4,10 (2H, CH2); 3,95 (2H, CH2); 3,6 - 3,4 (2H, CH2), 2,2 - 1,8 (4H, 2 x CH2)
Příklad 176
P-Naftyl-S02-Pro-NH-pAmb
Výroba se provádí kopulací (3-nafiyl-SO2Cl s H-Pro-OCH3 a následujícím zmýdelněním esteru, kopulací s p-kyanobenzylaminem a převedením nitrilové funkce na amidinovou funkci.
T.t.: 66 až. 72 °C
Příklad 177 p-T ol-S02-Pro-NH-p Amb
Výroba se provádí analogicky příkladu 176.
T.t.: 89 až 95 °C (hydroacetát)
Příklad 178
Ph-CH2-CH2-SO2-Pro-NH-pAmb
Výroba se provádí analogicky příkladu 176.
T.t.: 61 až 69 °C (hydroacetát)
-78CZ 293426 B6
Příklad 179
H-Asp-Pro-NH-pAmb
Z Boc-Asp(OBzl)-Pro-NH-pAmb se odštěpí Boc-skupina analogicky A.l.c. a benzylester se hydrogenuje s Pd/C. Dihydrochlorid se získá zpracováním s etherickým HC1.
'H-NMR (d5-DMSO, δ v ppm): 9,4/9,2 (4H, amidin); 8,6 (1H, NH); 8,45 (3N, NHf ): 7,80/7,45 (4H, aromáty-H); 4,45 - 4,30 (4H, CH2 a 2 x CH); 3,8-asi 3,5 (2H, CH2); 3,2- asi 2,6 (2H, CH3), 2,2-1,7 (4H,2xCH2)
Příklad 191
H-(D)-Asp-Pro-NH-pAmb
Dihydrochlorid se vyrobí analogicky příkladu 179.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,45/9,30 (4H, amidin); 9,05 (1H, NH); 8,9 (3H, NH/);
7,80/7,45 (4H, aromáty-H); 4,45 -4,15 (4H, CH2 a 2 x CH); 2,2-1,7 (4H, 2 x CH2):
FAB-MS: 362 (M+H+)
Příklad 193
H-(D)-Asp(OtBu)-Pro-NH-pAmb
Dihydroacetát se vyrobí ze Z-(D)-Glu(OtBu)-Pro-NH-pAmb hydrogenací nad Pd/C.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,3 (4H, amidin); 8,5 (1H, NH); 8,3 (3H, NH/); 7,75/7,25 (4H, aromáty-H); 4,4 - 4,3 (4H, CH2 a 2 x CH); 2,9 - 2,6 (2H, CH2); 1,8 (4H, 2 x CH,); 1,4 (9H, tBu);
FAB-MS: 418 (M+H+)
Příklad 199 (D)-Ph-CH2-CHOH-Pro-NH-pAmb (a) 3-Fenyl-D-laktyl-prolin-(p-kyanobenzyl)amid:
5,5 g (20,4 mmol) kyseliny O-tetrahydropyranyl-3-fenyl-D-mléčné (WO 93/18060) se rozpustí ve 30 ml DMF a postupně se smísí s 5,4 g (20,4 mmol), N-(p-kyanobenzyl)prolinamidu, 3,3 g (20,4 mmol) N-hydroxy-benzotriazolu, 3,0 g DIPEA a 4,33 g (20,6 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu. Nechá se dále míchat 48 h při teplotě místnosti. Po odsátí vyloučené močoviny se rozpouštědlo odstraní ve vakuu, zbytek se smísí s 50 ml vody a extrahuje ethylacetátem. Po promytí vodou, roztokem NaHCO3 a sušení nad síranem sodným se oddestiluje ethylacetát, zbylý olejovitý zbytek se rozpustí v methanolu a pH se upraví kyselinou p-toluensulfonovou na 2. Tento roztok se nechá stát 6 h při teplotě místnosti. Potom se oddestiluje methanol, zbytek se vyjme do ethylacetátu, promyje se vodou, 5% kyselinou citrónovou a roztokem NaHCO3. Po sušení nad síranem sodným a oddestilování rozpouštědla získaný zbytek se přečistí sloupcovou
-79CZ 293426 B6 chromatografií (eluent: methylenchlorid/aceton/methanol, 45/5/2). Získá se 2,5 g bílých krystalů, které po krystalizaci ze směsi ether-hexan tají při 108 až 110 °C.
(b) 3-Fenyl-D-laktyl-prolin-(p-amidinobenzyl)amid-acetát:
g dříve uvedené sloučeniny a 3 ml triethylaminu se rozpustí ve 30 ml pyridinu, při 0 °C se nasytí H?S a přes noc se nechá stát při teplotě místnosti. Podle DC-kontroly (CH2CI2/MeOH, 9/1) je reakce na thioamid úplná. Pro izolaci se pyridin důkladně oddestiluje ve vakuu, zbytek se vyjme do 250 ml ethylacetátu a promyje roztokem chloridu sodného, 5% kyselinou citrónovou a NaHCOj. Po sušení a oddestilování rozpouštědla se získá 2,3 g amorfního thioamidu.
Thioamid se rozpustí ve 40 ml acetonu a při teplotě místnosti se nechá 6 h stát po přídavku 4 ml methyljodidu. Po odtažení rozpouštědla se amorfní zbytek rozmíchá v sušeném etheru a pak se suší. Hydrojodid methylesteru S-methyl-thioimidové kyseliny se rozpustí v 50 ml ethanolu, smísí s 15 ml 10% roztoku octanu amonného a 2 hodiny se zahřívá na 60 °C. Pro izolaci se rozpouštědlo odtáhne, zbytek se rozpustí ve 100 ml CH2C12, nerozpustný podíl se odfiltruje a pak se oddestiluje CH2C12. Digerací se směsí ethylacetát-diethylether se oddělí přítomné rozpustné nečistoty. Zbylá směsná sůl jodid-acetát se rozpustí v acetonu/vodě (3/2) a pomocí IRA-acetátiontoměniče se převede na čistý acetát a pak se přečistí sloupcovou chromatografií (eluent: methylenchlorid/methanol/50% kyselina octová 40/1/1,5). Jednotlivé frakce se po odstranění eluentu suší vymražením. Zbude 1,1 g bílého prášku. T.t.: 185 až 187 °C.
FAB-MS: 395 (M+H)+.
Příklad 200 (D)-Man-Pro-NH-pAmb
Hydroacetát se vyrobí analogicky příkladu 199, vychází se z O-tetrahydropyranyl-(D}-mandlové kyseliny (WO 93/18060); bílé krystaly.
T.t.: 211 až 213 °C; FAB-MS: 381 M+H+)
Příklad 202
H-(D)-Pro-Aze-pAmb
Směsná sůl hydrojodid/hydrochlorid se vyrobí reakcí Boc-(D)-Phe-OH s H-Aze-p-kyanobenzylamidem analogicky příkladu 3 až k amidinu a potom Boc-odštěpením.
’Η-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 93/9,1 (4H, amidin); 9,10 (1H, NH); 8,7 (3H, NH3 +); 7,8 - 7,2 (9H, aromáty-H); 4,5-asi 3,3 (6H, 2 x CH2 a 2 x CH); 3,2 - 2,8 (2H, CH2); 2,2 - 1,8 (2H, CH2)
Příklad 204 až 205
H-(D)-Phe-(D popř. LJ-Pic-NH-pAmb/a a
H-(D)-Phe-(D popř. L)-Pic-NH-pAmb/b
Dihydrochlorid diastereomemího páru se vyrobí z Boc-(D)-Phe-OH a H-(D,L)-Pic-p-kyanobenzylamidu až k amidinu analogicky příkladu 3. Potom se odštěpí Boc-skupina.
-80CZ 293426 B6 'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,6 - 9,3 (4H, amidin); 9,1 - 8,7 (4H, NH a NH3 +); 7,8 - 7,2 (9H, aromáty-H); 4,6 - 4,3 (4H, CH, a 2 x CH); 3,3 - 2,8 (2H, CH2); 2,3 - 0,9 (6H, 3 x CH,)
FAB-MS: 408 (M+FT)
Diastereomemí pár se pak rozdělí pomocí HPLC-chromatografie na sloučeninu příkladu 204 a 205.
Příklad 207
H-(D)-Phe-(D,L/trans)-Pic(4-Me)-NH-pAmb
Dihydrochlorid se vyrobí analogicky příkladu 204/205 z Boc-(D)-Phe-OH a H-(D,L/trans)-Pic(4-Me)-p-kyanobenzylamidu.
T.t.: 160 až 170 °C
Příklad 206
Boc-(D)-Phe-Pyr-NH-pAmb
Sloučenina 160 se vyrobí analogicky příkladu 3 z Boc-(D)-Phe-OH a H-Pyr-p-kyanobenzylamidu x HC1.
MS: 492,5 (M+Ff), 392, 245, 133
Příklad 209
H-(D)-Phe-Pyr-N H-p Amb
Sloučenina se syntetizuje Boc-odštěpením z příkladu 208.
'H-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 9,4 - 9,2 (š, N-H); 8,8 - 8,2 (š, N-H); 7,75 (2d, 2H, Ar-H); 7,45 (2d, 2H, Ar-H); 7,35 - 7,1 (m, 5H, Ar-H); 6,15/6,0/5,85/5,75 (4sš, 2H, CH=CH); 5,5/4,9 (sš, 1H, a-Pyr); 4,4 - 4,2 (m, 4H, CH2/a-Phe/6-Pyr); 3,6 (d, 1H, δ-Pyr); 3,1 - 3,0 (m, 2H-CH2-Ph)
FAB-MS: 392 (M+H+)
Příklad 210
Boc-(D)-Phe-Hyp(OtBu)-NH-pAmb
Sloučenina se vyrobí analogicky příkladu 1 z Boc-(D)-Phe-Hyp(OtBu)-OH a p-kyanobenzylaminu x HC1.
MS: 566 (M+FT), 466 (-Boc), 319 (466-Phe
-81 CZ 293426 B6
Příklad 211
H-(D)-Phe-Hyp-NH-pAmb
Sloučenina se vyrobí Boc- a terc.butyl-odštěpením z příkladu 210.
'H-NMR (DMSO-ds, δ v ppm): 9,35 (s, 2H, N-H); 8,8 (t, 1H, NH); 8,5 (sš, 3H, N-H); 8,5 (sš, 3H, N-H); 7.75 (2d, 2H, Ar-H); 7,45 (2d, 2H, Ar-H); 7,35 - 7,2 (m, 5H, Ar-H); 4,4 - 4,2 (m, 5H. CH2/2 a-H/CHOH); 3,8 (m, 1H, Pro); 3,0 (m, 2H, CH2); 2,75 (m, 1H, Pro); 1,95 (m, 1H, Pro); 1.8 (3H. Pro)
FAB-MS: 410 (M+H)
Příklad 213
H-(D)-Phe-(Me)Val-NH-pAmb
Dihydrochlorid se vyrobí analogicky příkladu 3 z Boc-(D)-Phe-OH a H-(Me)Val-p-kyanobenzylamidu.
'H-NMR (DMSO-d6, δ v ppm): 9,45/9,25 (4H, amidin); 8,8 (1H, NH); 8,6 (3H, NH3 +); 7,8/7.5/7,3 (9H, aromáty-H); 4,65 (1H, CH); 4,60 (2H, CH2); 4,45 - 4,20 (2H, CH2); 3,20 - 2,95 (2H, CH2), 2,85 (3H, N-CH3); 2,0 (1H, CH); 0,8/0,45 (6H, 2 x CH3)
Příklad 216
Boc-(D)-Phe-Tia-NH-pAmb
Sloučenina se syntetizuje z Boc-(D)-Phe-Tia-OH a p-kyanobenzylaminhydrochloridu analogicky příkladu 1.
MS: 512 (M+řT), 412 (-Boc), 265,204, 133
Příklad 217
H-(D)-Phe-Tia-NH-pAmb
Sloučenina se syntetizuje Boc-odštěpením z příkladu 216.
'H-NMR (DMSO-dé, δ v ppm): 9,4/9,2 (2sš, 4H, N-H); 9,0 (t, 1H, NH); 7,75 (2d, 2H, Ar-H); 7,45 (2d, 3H, Ar-H); 7,4 - 7,2 (m, 5H, Ar-H); 4,8 (d, 1H, α-Tia); 4,7/3,7 (2d, 2H, NCH2S);
4,4 - 4,2 (Μ, 3H, CH2/a-Phe); 3,2/3,1 (2m, 2H, SCH2); 3,0/2,7 (m, 3H, CH2-Ph)
FAB-MS: 412 (M+PF)
-82CZ 293426 B6
Příklad 218
H-(D)-Phe-Pro-NH-3-(6-am)-piko
a) 2-K.yano-5-azidomethyl)pyridin
K roztoku 8,8 g (0,07 mmol) 2-kyano-5-(hydroxymethyl)pyridinu (WO 83/01446) a 6,9 g triethylaminu ve 200 ml methylenchloridu se při teplotě místnosti přikape 14,5 g (0,07 mmol) anhydridu kyseliny trifluoroctové rozpuštěného ve 20 ml methylenchloridu a pak se 2 h míchá. Po oddestilování methylenchloridu se zbytek rozpustí v 50 ml toluenu a 50 ml dimethylsulfoxidu, smísí s 11,2 g (0,17 mol) azidu sodného a 0,7 g tetrabutylamoniumbromidu a přes noc se míchá při teplotě místnosti.
Reakční směs se nalije do 300 ml vody a vícekrát se extrahuje etherem. Po sušení síranem sodným a oddestilování etheru zbudou nažloutlé krystaly (t.t. 62 až 64 °C), které se použijí bez dalšího čištění v následující reakci.
b) 2-Kyano-5-(aminomethyl)pyridin
Podle a) získaná sloučenina se rozpustí ve 45 ml tetrahydrofuranu a 1,2 ml vody a za míchání se po částech smísí s 11,2 g trifenylfosfmu. Reakční směs zůstane stát přes noc při teplotě místnosti.
Po oddestilování rozpouštědla se zbytek vyjme do 100 ml etheru, vyloučený trifenylfosfinoxid a filtrát se nastaví pomocí etherické kyseliny chlorovodíkové na pH 2. Vyloučený hydrochlorid se odsaje, promyje etherem a postupně se digeruje s toluenem a horkým izopropanolem. Izoluje se 4,7 g (40 %) hydrochloridu. T.t.: 253 až. 256 °C.
c) Boc-D-Fenylalanyl-prolin-(6-kyano-3-pikolyl)amid
K. roztoku 2,11 g (12,5 mol) 2-kyano-5-(aminomethyl)pyridinu a 4,5 g (12,5 mmol) Boc-DPhe-Pro-OH v 70 ml CH2C12 se přikape při -5 °C 8,12 g diizopropylethylaminu a potom 11 ml (15 mmol) anhydridu kyseliny propan-fosfonové (50% roztok v ethylacetátu). Míchá se dále 2 h, teplota se přitom nechá stoupnout z -5 °C na 20 °C. Organická fáze se promyje vodou, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a 5% roztokem kyseliny citrónové, suší se nad síranem sodným a odpaří se dosucha. Získá se slabě žlutavý krystalický zbytek. T.t.: 167 až 170 °C; použije se bez dalšího čištění v následující reakci.
d) Boc-D-Fenylalanyl-prolin-(6-amidino-3-pikolyl)amid
1,15 g (16,5 mmol) hydroxylamin-hydrochloridu se suspenduje v 5 ml ethanolu, smísí se s 1,2 g 25% roztoku amoniaku a 10 min se míchá. Po přídavku 45 ml ethanolu se vyloučená sůl odsaje a přidá k roztoku 3,14 g (6,6 mmol) uvedené sloučeniny (stupeň c). Po krátké době se odloučí hydroxyamidinová sloučenina a po 30minutovém následném míchání se odsaje a promyje malým množstvím vody a ethanolu. Zbytek zvlhčený ethanolem se rozpustí ve 40 ml ethanolu a 8 ml ledové kyseliny octové, smísí se s 200 mg 10% Pd/C a hydrogenuje se při asi 50 °C. Po 5 hodinách podle chromatografie na tenké vrstvě (CH2Cl2/MeOH/50% vodná kyselina octová, 20/5/1) již nebyl prokazatelný žádný výchozí materiál.
Po odsátí katalyzátoru přes vrstvu celitu se rozpouštědlo oddestiluje úplně po přídavku toluenu. Po přídavku 50 ml acetonu krystaluje amidinacetát a odfiltruje se. Bílé krystaly, t.t.: 130 až 4 °C, FAB-MS: 495 (M+Ff).
-83CZ 293426 B6
e) H-(D)-Phe-Pro-NH-3-(6-Am)-piko
Ze sloučeniny d) se za standardních podmínek odštěpí Boc-skupina. Dihydrochlorid: bílé krystaly. T.t.: 235 až 240 °C.
FAB-MS: 395 (M+H+)
Příklad 219
Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(6-Am)-piko
a) Boc-D-Cyklohexylglycyl-prolin g (0,113 mmol) Boc-(D)-cyklohexylglycinu a 18,7 g (0,113 mmol) hydrochloridu prolinmethylesteru se suspenduje ve 300 ml CH2CI2 a přikapání 58,3 g (0,45 mol) diizopropylethylaminu uvede do roztoku. Po ochlazení na -15 °C se přikape 113 ml (0,147 mol) anhydridů kyseliny propanfosfonové (50% roztok v ethylacetátu) a 1 hodinu se dále míchá.
Po přídavku 200 ml vody se organická fáze oddělí a promyje se vodným roztokem uhličitanu draselného, 0,5N kyselinou chlorovodíkovou a 5% roztokem hydrogenuhličitanu. Po sušení síranem sodným se oddestiluje rozpouštědlo, olejovitý zbytek (41 g) se rozpustí ve 400 ml ethanolu, smísí se 120 ml IN NaOH a 2 h míchá při teplotě místnosti.
Po oddestilování alkoholu se vodná fáze zředí vodou a vícekrát extrahuje methyl-terc.butyletherem. Vodná fáze se okyselí roztokem KHSO4 a 3 x se extrahuje CH2C12. Po sušení a oddestilování methylenchloridu se olejovitý zbytek krystaluje z diizopropyletheru/n-hexanu. Izoluje se 28 g bílých krystalů.
T.t.: 145 až 148 °C.
b) Boc-(D)-Cyklohexylglycyl-prolin-(6-kyano-3-pikolyl)-amid
26,6 g (0,075 mol) Boc-(D}-cyklohexylglycyl-prolinu a 12,7 g (0,075 mol) 6-kyano-3-pikolylamin-hydrochloridu se suspenduje ve 300 ml CH2C12 a smísí se se 47 g (0,364 mol) diizopropylethylaminu. Potom se přikape při -10 °C 66 ml anhydridů kyseliny propanfosfonové (50% roztok v ethylacetátu), 1 hodinu se míchá při 0 °C, smísí se s 200 ml vody a oddělí se CH2Cl2-fáze. Po promytí organické fáze 0,lN hydroxidem sodným a vodou se suší a rozpouštědlo se oddestiluje. Zbytek se vyjme do 100 ml ethylacetátu, dochází přitom k rychlé krystalizaci, která se dokončí přídavkem 150 ml n-hexanu. Po odsátí a sušení se izoluje 31,4 g (89 % teorie) bílých krystalů.
T.t.: 150 až 151 °C.
c) Boc-(D)-CyklohexylglycyI-prolin-(6-amidino-3-pikolyl)amid
Tvorba amidinu se provádí analogicky příkladu 218, stupeň d. Acetát. Bílé krystaly. T.t.: 160 až 8 °C (rozklad).
FAB-MS: 487 (M+H4)
-84CZ 293426 B6
Příklad 220
H-(D)-Chg-Pro-NH-3-(6-Am)-piko
Odštěpení Boc-skupiny ze stupně c předcházející sloučeniny se provádí za standardních podmínek.
Dihydrochlorid: bílé krystaly, t.t.: 235 až 238 °C (rozklad)
FAB-MS: 387 (M+ff)
Příklad 221
HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(6-Am)-piko
a) H-(D)-Cyklohexylglycylprolin-(6-kyano-3-pikolyl)amid
46,9 g (0,1 mol) Boc-(D)-cyklohexylglycylprolin-(6-kyano-3-pikolyl)amidu (sloučenina 219, stupeň b) se suspenduje ve 300 ml etheru, za míchání při teplotě místnosti se smísí se 600 ml HCl-nasyceného etheru a přes noc se dále míchá. Potom se suspenze za míchání a chlazení ledem zavede do 1,5 1 15% hydroxidu sodného. Po přídavku 80 ml CH2C12 se organická fáze oddělí a alkalická fáze se 6x extrahuje směsí ether/CH2Cl2 (7/3). Spojené organické fáze se suší nad síranem sodným a odpaří se dosucha. Zbude 27,2 g amorfního, bílého prášku, který podle chromatografie na tenké vrstvě (CH2Cl2/MeOH, (4/1)) ještě obsahuje asi 5 až 10 % hydrolýzou kyanoskupiny vzniklé amidové sloučeniny.
b) N-(terc.Butoxykarbonylmethyl)-(D)-cyklohexylglycylprolin-(6-kyano-3-pikolyl)amid
K roztoku 27,2 g (0,074 mol) dříve uvedené sloučeniny (stupeň a) a 28,6 g (0,22 mol) diizopropylethylaminu ve 150 ml methylenchloridu se přikape za míchání při teplotě místnosti 14 g (0,072 mol) terc.butylesteru kyseliny bromoctové a nechá se míchat přes noc.
Reakční roztok se promyje vodou, suší se nad síranem sodným a zbytek po oddestilování rozpouštědla se chromatografuje přes sloupec silikagelu s CH2Cl2/aceton/MeOH (45/5/1) jako eluentem. Izoluje se 28,6 g (80 % teorie) amorfního, bílého prášku. Vzorec krystaluje z diizopropyletheru za přídavku malého množství etheru a taje při 89 až 91 °C.
c) N-terc.Butoxykarbonylmethyl-(D)-cyklohexylglycylprolin-(6-amidino-3-pikolyl)amid
Vzniklá sloučenina se převede na amidin analogicky příkladu 218, stupeň d). Acetát, bílý, amorfní prášek.
FAB-MS: 501 (M+FT)
d) N-(Karboxymethyl)-(D)-cyklohexylglycyl-prolin-(6-amidino-3-pikolyl)amid
2,4 g uvedeného amidin-acetátu se rozpustí v 50 ml směsi CH2C12/CF3COOH (1/1) a nechá se stát přes noc při teplotě místnosti.
Roztok se odpaří ve vakuu, zbytek se vyjme do methylenchloridu, ještě jednou se oddestiluje za přídavku toluenu a pak se chromatografuje přes sloupec silikagelu methanolem/2% vodným amoniakem (50/2). Po oddestilování eluentu se produkt vyjme do vody a po zpracování s aktivním uhlím se lyofilizuje. Lyofilizát (1,45 g) vykazuje teplotu tání 202 až 205 °C.
-85CZ 293426 B6
FAB-MS: 445 (M+H)
Příklad 222
HOOCCH2-(D)-Chg-Pyr-NH-3-(6-Am)-piko
a) 5,2 g (14,75 mmol) Boc-(D)-Chg-Par-OH, 2,88 g (17 mmol) 6-kyano-3-aminomethylpyridinu, 12,2 ml DIPEA a 17 ml PPA (50% v ethylacetátu) se spojí při 0°C v 50 ml DCM. Potom se za míchání nechá během 1,5 h reakční směs stoupnout na teplotu místnosti. Pro zpracování se roztok zředí ve 250 ml ethylacetátu a promyje se nas. roztokem NaHCO3 (3x), 20% roztokem NaHSO43x) a nasyceným roztokem NaCl (lx). Po sušení roztoku síranem hořečnatým se na rotační odparce odstraní ethylacetát. Surový výtěžek: 7,8 g. Surový produkt se bez dalšího čištění použije v následujícím reakčním stupni.
b) Boc-(D)-Chg-Pyr-NH-3-(6-CN)-piko se předloží do 10 ml DCM. Po ochlazení roztoku na 0 °C se přidá 20 ml TFA (50% v DCM). Potom se nechá reakční směs během 3 h ohřát na teplotu místnosti a rozpouštědlo se odpaří na rotační odparce. Zbytek se vyjme do toluenu a rozpouštědlo se ještě jednou odpaří ve vakuu. Tento postup se ještě jednou opakuje. Surový výtěžek 13,5 g.
c) 13,5 g H-(D)-Chg-Pyr-NH-3-(6-CN)-piko x TFA se předloží do 100 ml acetonitrilu. Po přídavku 2,69 g KI, 6,11 g K2CO3 a 2,87 g terc.butylesteru kyseliny bromoctové se suspenze míchá 5 h při teplotě místnosti. Potom se K2CO3 a KI odfiltruje, acetonitril se odstraní na rotační odparce a zbytek se vyjme do ethylacetátu. Roztok se promyje vodou (2x) a nasyceným roztokem NaCl (lx). Suší se nad síranem sodným a odpaří. Surový výtěžek 6,4 g.
d) 6 g terc.BuOOCCH2-(D)-Chg-Pyr-NH-3-(6-CN)-piko se rozpustí ve 42 ml pyridinu a 19,4 ml TEA a nasytí plynným H2S. Po 18hodinovém stání při teplotě místnosti se roztok nejprve probublá dusíkem a pak nalije na 2 litry ledové vody. Vodný roztok se extrahuje ethylacetátem (6x) a spojené organické extrakty se promyjí 5% roztokem NaHSO4. Po sušení a odpaření zbývá 6,1 g terc.BuOOCCH2-(D)-Chg-Pyr-NH-3-(6-CSNH2)-piko surového produktu.
e) 6,1 g surového terc.BuOOCCH2-(D)-Chg-Pyr-NH-3-(6-CSNH2)-piko se rozpustí v 7,4 ml Mel a 70 ml acetonu a míchá se 4,5 h při teplotě místnosti. Potom se roztok odpaří, vyjme se do toluenu a ještě jednou se odpaří na rotační odparce dosucha. Surový výtěžek: 6,1 g.
f) 6,1 g terc.BuOOCCH2-(D)-Chg-Pyr-NH-3-(6-CSMe=NH}-piko se spojí vjednohrdlé baňce se 30 ml MeOH a 30 ml methanolického roztoku octanu amonného (20%) a 18 h se nechá stát při teplotě místnosti. Roztok se odpaří a zbytek se vyjme do DCM. Organický roztok se promyje vodou (3 x 20 ml), suší síranem sodným a odpaří se na rotační odparce. Po vysrážení surového produktu z ethylacetátu/diizopropyletheru se získá 2,7 g surového produktu. Surový produkt se přečistí HPC-chromatografií s reverzní fází. Výtěžek: 0,364 g.
g) 0,28 g terc.BuOOCCH2-(D)-Chg-Pyr-NH-3-(6-Am)-piko se předloží při 0 °C do 5 ml dioxanu a po přídavku 5 ml dioxanu/HCl se 48 hodin míchá při teplotě místnosti. Surový produkt se po odpaření rozpouštědla přečistí pomocí sloupcové chromatografie (MeOH/3% konc. NH3roztok). Výtěžek: 180 mg.
FAB-MS: 443 (Μ+ΗΓ)
-86CZ 293426 B6
Příklad 223
HOOCCH2-(D)-Chg-2-Phi-NH-3-(6-Am)-piko
Vychází se z Boc-(D)-Chg-2-Phi-OH a 3-aminomethyl-6-kyanopyridinu a vyrobí analogicky příkladu 222 terc.BuOOC-CH2-(D)-Chg-2-Phi-NH-3-(6-CN)-piko. Tento meziprodukt následovně převede na sloučeninu příkladu 223:
a) 8 g (14.9 mmol) terc.BuOOC-CH2-(D)-Chg-2-Phi-NH-3-(6-CN)-piko se míchá 18 hodin při 70 °C společně s 8 ml TEA, 2,58 g hydroxylaminhydrochloridu a 90 ml EtOH. Potom se suspenze odpaří, zbytek se rozpustí v DCM a roztok se promyje 3x vždy 5 ml HOAc (30%). Po sušení nad síranem sodným se DCM odpaří na rotační odparce. N-Hydroxyamidin se bez dalšího čištění použije v následující reakci.
b) 5 g N-hydroxyamidinu se spojí v reakční baňce se 6 g Raney-niklu, 40 ml EtOH a 9 ml HOAc a při 60 °C pod atmosférou vodíku se redukuje. Surový produkt se pomocí HPLCchromatografie s reverzní fází (acetonitril/voda) oddělí. Výtěžek 0,7 g.
c) 0,7 g terc.BuOOC-CH2-(D)-Chg-2-Phi-NH-3-(6-Am)-piko se analogicky příkladu 222 převede na volnou kyselinu.
FAB-MS: 499 (M+FT)
Příklad 224
HOOC-CH(Me)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(6-Am)-piko
a) 7,4 g (15,22 mmol) H-(D)-Chg-Pro-NH-3-(6-CN)-piko x TFA, 6,3 g K2CO3 a 3,69 g benzylesteru kyseliny 2-brompropionové se míchá ve 100 ml acetonitrilu 12 h při 50 °C. Po úplné přeměně eduktu se pevná látka odfiltruje a filtrát se odpaří. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu a 2 x se promyje vodou. Po sušení organického roztoku se ethylacetát odstraní na rotační odparce. Surový výtěžek: 5 g. Po sloupcové chromatografií na silikagelu zbývá 3 g produktu.
b) 3 g BzlOOC-CH(Me)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(6-CN)-piko se analogicky příkladu 223 převede na odpovídající amidin. Výtěžek: 0,8 g.
c) Volná kyselina se získá hydrogenací benzylesteru za standardních podmínek. Surový produkt se přečistí pomocí HPLC-chromatografie s reverzní fází. Výtěžek: 0,4 g.
FAB-MS: 459 (M+Ff)
Příklad 225
Boc-(D)-Phe-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-piko
Výroba se provádí analogicky příkladu 227. T.t.: 130 až 140 °C (hydroacetát).
Příklad 226
H-(D)-Phe-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-piko
Výroba se provádí analogicky příkladu 228 (dihydrochlorid)
-87CZ 293426 B6 13C-NMR (DMSO-d6, δ v ppm): 170,79, 167,72, 161,85, 156,34. 140,72, 138,41, 135,87,
134,53, 129,30, 128,49, 127,29, 120,70, 60,23, 52,18, 48,61, 39,1, 36,48, 29,22, 23,33, 21,72
Příklad 227
Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-piko
a) Výroba Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-piko
6,4 g Boc-(D)-Chg-Pro-OH (18,05 mmol) se společně předloží se 4,0 g 2-methyl-3-pikolylaminu (20,5 mmol), výroba viz Arch. Pharm. 308 (1975) 969-76) a 14 ml DIPEA (81,8 mmol) do 200 ml DCM, ochladí se na 5 °C a při této teplotě se přikape 18,8 ml 50% roztoku anhydridu kyseliny propanfosfonové v ethylacetátu (23,92 mmol). Po ohřátí na teplotu místnosti se dále 1 hodinu míchá a koncentruje pak ve vakuu. Zbytek se vyjme do ethylacetátu, ethylacetátová fáze se asi 1 Okřát extrahuje vodou, suší nad síranem hořečnatým a odpaří na rotační odparce. Rozmícháním zbytku s diizopropyletherem se získá 7,2 g (87 %) Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)piko jako bílé pevné substance.
b) Výroba Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-l-oxo)-piko
5,3 g Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-piko (11,58 mmol) se společně se 3,1 g 98% kyseliny m-chlorperbenzoové (18,14 mmol) míchá při teplotě místnosti ve 150 ml DCM 2 h. Potom se až do nasycení zavádí plynný amoniak, 1 h se míchá při teplotě místnosti, sraženina se odsaje, promyje DCM a filtrát se ještě jednou nasytí amoniakem. Potom se DCM-fáze 3krát promyje vodou, suší nad síranem hořečnatým a ve vakuu se odpaří.
Získá se 5,5 g Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-l-oxo)-piko jako bílé pevné látky.
c) Výroba Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-l-MeO}-piko
3,6 g Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-l-oxo)-piko (7,58 mmol) se rozpustí v 10 ml DCM, smísí se 2 ml dimethylsulfátu (21,1 mmol) ve 20 ml DCM, přes noc se míchá při teplotě místnosti, roztok se odpaří ve vakuu a zbytek se 3krát rozmíchá s etherem.
Získá se 4,55 g (100 %) Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-l-oxo)-piko+ CH3OSO3· jako bílé pevné substance, která se bez dalšího čištění použije v následující reakci.
d) Výroba Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-CN)-piko
4,55 g Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-l-oxo)-piko+ CH3OSO3' (7,58 mmol) se rozpustí v 10 ml DMF a při teplotě místnosti se přikape 0,5 g kyanidu sodného (10,02 mmol) (slabě exothermní reakce). Po jedné hodině míchání při teplotě místnosti se DMF oddestiluje ve vakuu (1 mbar), zbytek se vyjme do 1M roztoku hydrogensíranu draselného, extrahuje se etherem, organické fáze se suší nad síranem hořečnatým a odpaří na rotační odparce ve vakuu. Získá se 2,8 g (76 %) Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-CN)-piko jako bílé pěny.
e) Výroba Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Ham)-piko
3,63 g Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-CN)-piko (7,51 mmol) se společně s 1,9 g hydroxylamoniumchloridu (18,76 mmol) a 6,4 ml DIPEA (37,525 mmol) v 50 ml DCM 4 h při teplotě místnosti míchá, potom se odpaří ve vakuu na rotační odparce, zbytek se vyjme do ethylacetátu, 6krát se promyje zředěnou kyselinou chlorovodíkovou (pH 4), organická fáze se suší nad síranem hořečnatým a odpaří ve vakuu na rotační odparce.
-88CZ 293426 B6
Získá se 3,8 g 98 % Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Ham)-piko jako bílé pevné substance.
f) Výroba Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-piko
3.8 g Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Ham)-piko (7,35 mmol) se hydrogenuje dvakrát na špičku špachtle 10% Pd/C v 80 ml ethanolu a 15 ml kyseliny octové při 60 °C za mírného přetlaku. Katalyzátor se odfiltruje přes filtr ze skleněných vláken, promyje se ethanolem a filtrát se odpaří ve vakuu (1 mbar). Po dvojnásobném rozmíchání zbytku s etherem se získá 4,0 g (97 %) Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-piko jako bílé pevné látky. T.t.: 144 až 145 °C (hydroacetát).
Příklad 228
H-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-piko
2.8 g Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-piko x CH3COOH (4,99 mmol) se míchá v 10 ml DCM a 15 ml methanolu se 25 ml etherické kyseliny chlorovodíkové (> 3M) 4 h při teplotě místnosti. Roztok se odpaří ve vakuu, vícekrát se společně destiluje s DCM, methanolem a zbytek se vymíchá z etheru/DCM a etheru/methanolu. Získá se 2,5 g H-(D)-Chg-Pro-NH-3(2-Me-6-Am)-piko x 2 HC1 jako bílé pevné substance.
T.t.: 128 až 135 °C (dihydrochlorid) 13C-NMR (DMSO-d6, 8 v ppm): 17,96, 167,72, 161,86, 156,30, 140,76, 138,53, 135,85, 120,72, 60,56, 55,17,47,43, 39,20, 38,78, 29,66, 27,75, 25,40, 25,31, 25,20,23,71, 21,76
Příklad 229 terc.BuOOC-CH2-(D}-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-piko
a) Výroba H-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-piko
7.8 g Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-piko (17,0 mmol) se míchá ve 35 ml DCM a 35 ml etherické kyseliny chlorovodíkové (>3M) 2 h při teplotě místnosti, odpaří ve vakuu, vícekrát se společně destiluje s methanolem/DCM a zbytek se vymíchá s etherem. Získá se 7,3 g (100 %) H-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-piko x 2HC1 jako bílé pevné substance.
b) Výroba terc.BuOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-piko
9,4 g H-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-piko x 2HC1 (21,79 mmol) se společně s 11,26 g (14,9 ml) DIPEA (81,16 mmol) a 4,89 g (3,69 ml) terc.butylesteru kyseliny bromoctové (25,0 mmol) míchá ve 150 ml DCM (sušeno nad molámím sítem) 16 h při teplotě místnosti. Podle chromatografie na tenké vrstvě je ještě přítomen edukt, přidá se tedy ještě 0,4 ml terc.butylesteru kyseliny bromoctové a 1,5 ml DIPEA a míchá se další 3 h při teplotě místnosti. Potom se reakční směs zahustí nejprve za vakua vodní pumpy potom při 1 mbar při max. 40 °C. Zbytek se vymíchá s etherem, odfiltruje a promyje se etherem. Po vyjmutí krystalizátu do vody se při pH 7,5 vícekrát extrahuje ethylacetátem, tyto ethylacetátové extrakty se spojí s výše uvedeným etherovým filtrátem a odpaří se ve vakuu. Po vyjmutí zbytku do etheru se přidává etherická kyselina chlorovodíková až do pH 3, vyloučená sraženina se odsaje, dobře se promyje etherem a ještě jednou se vymíchá z etheru. Získá se 9,1 g (82 %) terc.BuOOC-CH^Dj-ChgPro-NH-3-(2-Me)-piko x HC1 jako bílé pevné substance.
-89CZ 293426 B6
c) Výroba terc.BuOOC-CH2-(Boc((D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-piko
9,5 g terc.BuOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-piko x HC1 (18,66 mmol) se společně s 18,66 g (Boc)2O (18,66 mmol) předloží do 160 ml DCM, během 5 min se smísí s 5,3 g (7,03 ml) DIPEA 41,05 mmol) a pak se míchá při teplotě místnosti přes noc. Po dalším přídavku DCM se promyje 0,5M HCl-roztokem, až již není přítomen žádný DIPEA (kontrola podle chromatografie na tenké vrstvě), suší se nad síranem horečnatým a odpaří ve vakuu na rotační odparce.
Sloupcovou chromatografií na silikagelu s DCM a O až 5% methanolem se získá 5,8 g terc.BuOOC-CH2-(Boc(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-piko jako bílé pevné substance.
d) Výroba terc.BuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-l-oxo)-piko
5,8 g terc.BuOOC-CHr-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-piko (10,12 mmol) se společně s 9,99 g 70% kyseliny m-chlorperbenzoové (40.5 mmol) ve 200 ml DCM 2 h míchá při teplotě místnosti. Potom se až do nasycení zavádí plynný amoniak, 1 h se míchá při teplotě místnosti, sraženina se odsaje, promyje DCM a filtrát se ještě jednou nasytí amoniakem. Potom se DCM fáze 3krát promyje vodou, suší nad síranem hořečnatým a odpaří ve vakuu. Získá se 5,95 g (100%).
e) Výroba terc.BuOOC-CH2-(Boc)(D)-Chg-Pro-NH-3--(2-Me-l-MeO)-piko+ CH3OSO3~
5.95 g terc.BuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-l-oxo)-piko (10,12 rnmol) se smísí ve 25 ml DCM a 28 ml 5% roztoku dimethylsulfátu v DCM. Po 5hodinovém míchání při 40 °C a ponechání stát přes noc při teplotě místnosti se zředí na 100 ml DCM, rychle se 3krát promyje vodou, suší nad síranem hořečnatým a suší ve vakuu na rotační odparce. Získaný tBuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-l-MeO)-piko+.CH3OSOf se jako surový produkt použije v následující reakci.
f) Výroba tBuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Chg-Pra-NH-3-(2-Me-6-CN)-piko
Zvýše uvedené reakce získaný tBuOOC-CHr-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-l-MeO)piko+CH3OSO3' se během 20 min přikape k roztoku 1,1 g kyanidu sodného (21,3 mmol) v 50 ml DMF, přičemž se teplota udržuje chlazením na 23 až 25 °C. Po dalších 20 min se oddestiluje ve vakuu (1 mbar), zbytek se vyjme do etheru, postupně se promyje vodou, roztokem K.HSO4 (pH 2), vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného, etherová fáze se suší nad síranem hořečnatým a odpaří za vakua na rotační odparce.
Po čištění sloupcovou chromatografií na silikagelu (eluční činidlo DCM s 0 až 2 % MeOH) se získá 4,1 g pevné substance, která se vymíchá z etheru.
Výtěžek: 4,0 g (66 %) tBuOOC-CH2-(Boc>-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-CN)-piko
g) Výroba tBuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Hain)-piko
3.95 g tBuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH~3-(2-Me-6-CN)-piko (6,6 mmol) se společně s 1,15 g hydroxylaminhydrochloridu (16,52 mmol) a 5,12 g (6,78 ml) DIPEA (39,6 mmol) v 75 ml DCM (sušeno nad molekulovým sítem) 2 h zahřívá pod refluxem a pak se míchá přes noc při teplotě místnosti. Po přídavku dalšího DCM se promyje zředěnou kyselinou chlorovodíkovou (pH 4), organická fáze se suší nad síranem hořečnatým a ve vakuu odpaří na rotační odparce. Získá se 4,2 g surového produktu tBuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me6-Ham)-piko, který se jako surový produkt použije v následujícím stupni.
-90CZ 293426 B6
h) Výroba tBuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am}-piko
4.2 g surového produktu tBuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-piko se hydrogenuje ve směsi 15 ml kyseliny octové a 80 ml ethanolu nad Pd/C (10%) vodíkem 5 h při 50 °C. Potom se katalyzátor odfiltruje, promyje se ethanolem, filtrát se odpaří na rotační odparce ve vakuu (1 mbar), zbytek se vícekrát současně destiluje s toluenem/DCM, vyjme se do 100 ml etheru a 3krát se promyje vodou. Spojené vodné fáze se odpaří ve vakuu na rotační odparce (1 mbar) max. 35 až 40 °C a zbytek se současně destiluje s ethanolem. Získá se 4,2 g téměř čistého tBuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-A)-piko x CH3COOH (94 %) přes dva stupně) jako bílé pevné substance.
g) Výroba tBuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-piko
2,0 g tBuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-piko x CH3COOH (2,96 mmol) se v 10 ml DCM společně s 10 ml etherické kyseliny chlorovodíkové (ether nasycený HCI) 1 h 20 min míchá při teplotě místnosti, potom se odpaří na rotační odparce ve vakuu, zbytek se vyjme do vody a vícekrát se extrahuje ethylacetátem. Vodná fáze se odpaří na rotační odparce ve vakuu (1 mbar) při max 35 až 40 °C a vícekrát se současně destiluje s acetonem. Po dělení získané směsi sloupcovou chromatografií na silikagelu (eluční činidlo DCM/methanol/kyselina octová 100/10/2 -> 100/20/5) se získá 0,7 g tBuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH3-(2-Me-6-Am)-piko x (ΗΧ)ι 2 (X = Cl a/nebo CH3CO2~), jako bílá pevná substance, která za rozkladu taje při 205 °C.
Příklad 230
HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-piko
2.2 g tBuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-piko x CH3COOH (3,25 mmol) se ve 30 ml DCM společně s 15 ml etherické kyseliny chlorovodíkové míchá více hodin při teplotě místnosti, během této doby se pomalu vylučuje pevná látka. Pevná látka se odsaje, vícekrát se rozmíchá s horkým DCM a potom se chromatografuje přes silikagel (eluční činidlo methanol/25% vodný roztok amoniaku v poměru 95/5). Získá se 1,3 g (94 %) HOOCCHr-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-piko jako bílá pevná substance, která kolem 210 °C za rozkladu taje.
Příklad 231
MeOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-piko
0,45 g HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am}-piko (0,1 mmol) se předloží do 30 ml methanolu (sušený nad molekulovým sítem), po kapkách se smísí s 1 ml thionylchloridu a 2 h se míchá pod refluxem. Po dalším přídavku 0,3 ml thionylchloridu a 1 h míchání pod refluxem se roztok odpaří ve vakuu na rotační odparce, vícekrát se současně destiluje s methanolem/DCM a zbytek se přečistí sloupcovou chromatografií na silikagelu (eluční činidlo: DCM/methanol/kyselina octová 100/20/5). Po vícenásobné současné destilaci s toluenem se získá 0,38 g MeOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-piko která taje při 155 až 160 °C.
-91 *
Příklad 232
Boc-(D)-Chg-Pro-NH-2-(5-Am)-piko
a) 5-Karboxamido-2-pikolylamin
K roztoku 3,5 g (24 mmol) 2-kyano-5-karboxamidopyridinu v 80 ml methanolu a 20 ml konc.amoniaku se přidají 3 g Raney-niklu a hydrogenuje se při teplotě místnosti. Po asi 7 h je ukončen příjem vodíku.
Po odsátí katalyzátoru se filtrát odpaří a zbytek se rozpustí ve 20 ml 2N kyseliny chlorovodíkové a 20 ml methanolu. Přídavkem 150 ml ethylacetátu dojde k vyloučení hydrochloridu, tento se odsaje a suší (3,7 g). Volná báze taje při 198 až 202 °C.
b) 5-K.yano-2-pikoly lamin g (0,22 mol) 5-karboxamido-2-pikolylaminu se suspenduje ve 150 ml methanolu a 300 ml methylenchloridu, ochladí se na 10 °C a přídavkem 150 ml triethylaminu se uvede do roztoku. Potom se přikape roztok 47,6 g (0,22 mol) (Boc)2 a dále se míchá 4 h při teplotě místnosti.
Po odtáhnutí rozpouštědla se zbytek smísí s nasyceným roztokem uhličitanu draselného a 5 x se extrahuje methylenchloridem. Spojené extrakty se suší a rozpouštědlo se po přídavku toluenu plně oddestiluje.
5,4 g zbytku se suspenduje ve 40 ml dioxanu a 15 ml methylenchloridu, smísí se 4,3 g pyridinu a potom se přidá při 0 °C 5,2 g anhydridu kyseliny trifluoroctové, vznikne tak čirý roztok.
Po přídavku vody se extrahuje ethylacetátem, organická fáze se promyje zředěným roztokem kyseliny citrónové, hydrogenuhličitanu sodného a vodou. Po sušení a odtažení rozpouštědla zbude žlutý olej (asi 5 g), který se rozpustí v 15 ml izopropanolu a 30 ml ethylacetátu a smísí se 35 ml etherické kyseliny chlorovodíkové. Po stání přes se vyloučený hydrochlorid odsaje a suší. Izoluje se 4 g bílých krystalů. T.t.: 230 až 234 °C.
c) Boc-(D)-Cyklohexylglycyl-prolin-(5-kyano-2-pikolyl)-amid
Výroba analogicky příkladu 219, stupeň b) kopulací Boc-(D)-cyklohexylglycyl-prolinu s 5kyano-2-pikolylaminem. Bílé krystaly. T.t.: 128 až 129 °C.
d) Boc-(D)-Cyklohexylglycyl-prolin-(6-amidino-2-pikolyl)-amid
Amidace dříve uvedené sloučeniny se provede analogicky příkladu 218, stupeň d).
Acetát: bílé krystaly. T.t.: 98 až 100 °C (rozklad)
FAB-MS: 487 (M+FT)
Příklad 233
H-(D)-Chg-Pro-NH-2-(5-Am)-piko
Sloučenina 232, stupeň d) se odehrání za standardních podmínek.
Dihydrochlorid: bílé krystaly. T.t.: 233 až 235 °C (rozklad)
-92CZ 293426 B6
FAB-MS: 386 (M+H+)
Příklad 234
HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-2-(5-Am)-piko
Analogicky příkladu 221, stupeň a), b), c) a d) se z Boc-(D)-cyklohexylglycyl-prolin-{5-kyano2-pikolyl)amidu odštěpením Boc-skupiny, kdy nedochází k žádné tvorbě amidu, N-alkylací terc.butylesterem kyseliny bromoctové, tvorbou amidinu a kyselým zmýdelněním terc.butylesteru získá titulní sloučenina.
Bílé krystaly. T.t.: 162 až 4 °C
FAB-MS: 445 (M+H+)
Příklad 235
HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-5-(2-Am)-pym
a) 2-Thiomethyl-5-aminoethylpyrimidin-hydrochlorid
28,1 g (182,2 mmol) 2-thiomethyl-5-formyl-pyrimidinu (Z. Arnold a spol., J-Heterocyclic Chem. 1991, 28. 1281) se při -23 °C předloží do 880 ml MeOH/THF (1:1). Po přídavku 12,8 g (34,3 mmol) CeCl3 x 7 H2O se po částech přidá 5,19 g (137,2 mmol) natriumborohydridu. Po 1,5 h reakční doby se reakční roztok smísí s 1,5 1 nasyceného roztoku NaCl a tato směs se extrahuje DCM (4x130 ml). Spojené organické fáze se suší a odpaří ve vakuu. Výtěžek 26,9 g.
26,89 g (172,14 mmol) 2-thiomethyl-5-hydroxymethyl-pyridinu se rozpustí ve 390 ml DCM (abs.) a po přídavku 1 kapky DMF a 27 ml (370,37 mmol) SOC12 se 45 min míchá při 0 °C. Po zpracování se reakční roztok odpaří dosucha.
Takto získaný 2-thiomethyl-5-chlormethyl-pyridin se společně se 16,79 g (258,2 mmol) NaN3 v 84 ml DMSO míchá přes noc při teplotě místnosti. Vzhledem k neúplně proběhlé reakci se přidá dalších 4,2 g NaN3. Po dalších 2 hodinách reakční doby je chloridový derivát plně zreagován. Pro zpracování se reakční směs nalije do 300 ml vody a vodná fáze se extrahuje s Et2O (5 x 100 ml). Spojené organické extrakty se promyjí vodou (3 x 25 ml), suší a pak se ether plně odstraní ve vakuu.
Koncentrovaný etherický roztok 2-thiomethyl-5-azidomethyl-pyrimidinu se rozpustí ve 28 ml THF a opatrně se přidá za chlazení ledem k roztoku 45,15 g (172,1 mmol) Ph3P v 84 ml THF. Po 15 min se chlazení ledem odstraní, k reakční směsi se přidá 4,65 ml vody a reakční roztok se 18 hodin míchá při teplotě místnosti. Pro zpracování se reakční směs odpaří ve vakuu dosucha a získaný zbytek se vyjme do 3N HCI. Vodný roztok se promyje ethylacetátem/Et2O (1/1; 4 x 50 ml). Potom se pH roztoku upraví na 9 pomocí uhličitanu sodného a extrahuje se DCM (12 x 50 ml). Spojené organické extrakty se suší a odpaří. Zbytek se rozpustí v DCM/ethylesteru a volný amin se vysráží HCI jako hydrochlorid. Výtěžek: 30,48 g.
’Η-NMR (dí-DMSO, δ v ppm): 2,55 (s, 3H, CH3); 4,1 (q, 2H, N-CH2); 8.,8 (s, 2H, Ar-H); 10,8 (sš, NH)
-93CZ 293426 B6
b) Boc-Pro-NH-5-(2-Me)-pym
12,9 g (60 mmol) Boc-Pro-OH se společně s 15 g (65,8 mmol) hydrochloridu 2-thiomethyl-5aminomethylpyrimidinu a 61,4 ML (359 mmol) DIPEA předloží při 0 °C do 150 ml DCM. Po přídavku 63,4 ml PPA (50% v ethylacetátu) se reakční směs míchá 6 h při 0°C až teplotě místnosti. Jakmile plně zreaguje Boc-Pro-OH (DC-kontrola: DCM/MeOH 95:5), reakční směs se vyjme do 300 ml ethylacetátu. Organická fáze se promyje 20% roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2x), vodou (2x) a nasyceným roztokem NaCl. Po sušení organické fáze síranem sodným se ethylacetát odstraní ve vakuu. Zbude 16,7 g požadovaného produktu.
c) Boc-Pro-NH-5-(2-SO2Me)-pym
20,5 g (58,1 mmol) Boc-Pro-NH-5-(2-SMe)-pym se předloží při teplotě místnosti do 700 ml DCM. Potom se po částech k roztoku přidá 42,94 g (174 mmol) m-CPBA během 30 min. Po celkové reakční době se reakční směs extrahuje 20% roztokem NaHSOí (2x), 5% roztokem NaHCOj (6x) a 20% roztokem Na2S2O3 (3x). Po sušení roztoku a odstranění Dcm zbude 21,7 g sulfonu Boc-Pro-NH-5-(2-SO2Me)-pym.
d) Boc-Pro-NH-5-(2-CN)-pym
21,7 g (56,4 mmol) Boc-Pro-NH-5-(2-SO2Me)-pym se rozpustí ve 30 ml DMSO a po přídavku 2,84 g NaCN přes noc při teplotě místnosti míchá. Potom se roztok nalije na 150 ml vody avodný roztok se extrahuje DCM (5x100 ml). Spojené organické fáze se promyjí nasyceným roztokem NaCl (5x) a vodou (2x). Po sušení a odpaření organického roztoku se získá 15,3 g požadovaného kyanidu.
e) H-Pro-NH-5-(2-CN)-pym x 3 TFA
13,98 g (42,1 mmol) Boc-Pro-NH-5-(2-CN)-pym se předloží do DCM. Po přídavku 13 ml (170 mmol) TFA se roztok nechá míchat při teplotě místnosti až do úplné přeměny eduktu (DC-kontrola). Po odpaření roztoku ve vakuu zbude požadovaná sůl, která se bez dalšího čištění použije v následující reakci.
f) H-(D)-Chg-Pro-NH-5-(2-CN)-pym x 3 TFA mmol H-Pro-NH-5-(2-CN)-pym x 3 TFA, 2,44 g (9,5 mmol) Boc-D-Chg-OH a 9,8 ml (57 mmol) DIPEA se při 0 °C předloží. Po přídavku 10,1 ml PPA (50% v ethylacetátu) se nechá reakční směs za míchání během 6 h ohřát na teplotu místnosti. Pro zpracování se zředí 300 ml ethylacetátu a organická fáze se promyje 20% roztokem hydrogensíranu sodného (2x), vodou (2x) a nasyceným roztokem NaCl. Po sušení organické fáze síranem sodným se ethylacetát odstraní ve vakuu. Zbude 4,74 g požadovaného produktu. Takto získaný surový produkt se převede jak popsáno výše na odpovídající sůl kyseliny trifluoroctové.
g) tBuOOC-CHr-(D)-Chg-Pro-NH-5-(2-CN)-pym
4,1 g (11,07 mmol) H-(D)-Chg-Pro-NH-5-(2-CN)-pym x 3 TFA se společně s 1,68 g (12,17 mmol) uhličitanu draselného a 1,63 ml (11,07 mmol) terc.butylesteru kyseliny bromoctové při TM míchá. Po úplné reakci se uhličitan draselný odfiltruje a filtrát se odpaří na rotační odparce. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu a organický roztok se promyje roztokem hydrogenuhličitanu sodného (5%) a nasyceným roztokem chloridu sodného. Potom se rozpouštědlo odstraní ve vakuu (surový výtěžek: 3,66 g). Surový produkt se přečistí pomocí sloupcové chromatografíe (DCM/MeOH 98/2 + 0,5 % konc. roztoku NH3).
Získá se 1,3 g čistého produktu.
-94CZ 293426 B6
g) tBuOOC-CHr-(D)-Chg-Pro-NH-5-(2-Am)-pym
1,3 g (2.68 mmol) tBuOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-5-(2-SMe)-pyn se rozpustí v 15 ml EtOH a po přídavku 0,5 g (6.71 mmol) hydroxylamoniumchloridu a 2,5 ml DIPEA se 4 h míchá při 60 °C. Reakční směs se odpaří na rotační odparce a vyjme se do DCM. Po promytí organického roztoku malým množstvím vody, sušení a odpaření roztoku se surový produkt opět rozpustí v EtOH a po přídavku Raney-niklu se 4 h při 60 °C hydrogenuje pod atmosférou vodíku. Po odfiltrování Raney-niklu se ethanolický roztok odpaří a surový produkt se přečistí pomoci dělení na sloupci silikagelu (DCM/MeOH/50% HOAc 40/10/2). Výtěžek 250 mg.
i) HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-5-(2-Am)-pym
250 mg tBuOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-5-(2-Am)-pym se štěpí s Tfa/DCM na kyselinu a surový produkt se přečistí sloupcovou chromatografíí (MeOH/3 % konc. NH3). Výtěžek: 108 mg.
MS: 446 (M+H~), 369
Příklad 236 (D)-Man-Pro-NH—4-( l-Am)-pip
Roztok 4,2 g (12,6 mmol) O-tetrahydropyranyl-(D)-2-fenyl-2-hydroxyacetyl-(L)-proliiiu (WO 92/18060) ve 40 ml THF se po přídavku 1,9 g (12,6 mmol) 1-hydroxybenzotriazolu a 3,3 g (25 mmoí) dicyklohexylkarbodiimidu 4 h při teplotě místnosti míchá. Vyloučená močovina se odsaje a následně promyje malým množstvím THF.
K tomuto filtrátu se při 5 °C přidá roztok 2,9 (12,6 mmol) l-amidino-4-aminomethyl-piperidindihydrochloridu a 1,6 g hydrogenuhličitanu sodného v 6 ml vody. Po 48 h míchání při teplotě místnosti se rozpouštědlo důkladně oddestiluje, zbytek se vyjme do ethanolu, nerozpustný podíl se odfiltruje a znovu se odpaří.
Zbytek se přečistí přes sloupec silikagelu se směsí CH2Cl2/MeOH/50% kyselina octová (45/5/1,5). Eluát se z jednotlivých frakcí oddestiluje s toluenem jako přísadou a zbytek se rekrystaluje z 50 ml acetonu za přídavku malého množství vody. Izoluje se 3,5 g acetátu ve formě bílých krystalů. T.t.: 199 až 202 °C (rozklad).
FAB-MS: 388 (M+H*)
Příklad 239
Boc-(D)-Phe-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb
a) Boc-Pro-(4-kyano-2-methoxy)-benzylamid
16,0 g Boc-prolinu (50 mmol) rozpuštěného v 80 ml THF se míchá s 5,7 g hydroxysukcinimidu a 10,2 g DCC 30 min při 0 °C. Potom se přikape 8,0 g (50 mmol) 4-aminomethyl-3-methoxybenzonitrilu, rozpuštěného v 50 ml THF při 0 °C a 20 h se míchá při TM. Pevná látka se odfiltruje, filtrát se smísí se stejným objemem ethylacetátu a promyje se studeným 5% roztokem NaHSO4 jakož i nasyceným NaCl roztokem. Získá se 11,5 g (65 %) produktu.
-95CZ 293426 B6 'H-NMR (d5-DMSO, δ ppm): 8,38 (m, NH); 7.50 - 7.35 (m. 3H); 4,40 - 4,05 (m, 3H, N-CH2-Ar/N-CH-CO); 3,87 (s, OCHj); 3,50- 3,25 (m. 2H, N-CH,); 2,25 - 2,00 (m, 1H);
I, 90-1,65 (m, 3H); 1,40 a 1,30 (2s, 9H)
b) H-Pro-(4-kyano-2-methoxy)-benzylamid
II, 4 g (31,7 mmol) Boc-prolin-(2-methoxy-4-kyano)-benzxiamidu se rozpustí ve 130 ml DCM a při 0 až 5 °C se nasytí plynným HC1. Po 2 h je Boc-skupina úplně odštěpena. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a produkt se bez dalšího čištění použije v následujících reakcích.
'H-NMR (d6-DMSO, δ ppm): 10,25 (s, 1H); 8,60 (s, 1H); 7,50 (d, 1H); 7,42 (dd, 1H); 7,39 (d, 1H); 4,40 - 4,20 (m, 3H); 3,88 (s, 3H); 3,20 (m, 2H); 2,35 (m, 1H); 2,00 - 1,80 (m, 3H);
c) Boc-(D)-Phe-Pro-(4-kyano-2-methoxy)benzylamid
3,54 g (13,35 mmol) Boc-(D)-Phe-Pro-OH, 9,9 ml DIPEA a 4,80 g (13,35 mmol) H-Pro-(4kyano-2-methoxy)-benzylamid-hydrochloridu se spojí s 1,1 ml (15,0 mmol) PPA (50% v ethylacetátu) ve 100 ml DCM a 2 h se míchá při 0°C. Reakční směs se postupně promyje 1N NaOH, 1N HC1 a nasyceným roztokem chloridu sodného a suší se nad síranem sodným. Po odtáhnutí rozpouštědla se získá 6,5 g (96 %) produktu.
'H-NMR (d6-DMSO, δ ppm): 8,75/7,88 (1H, NH (2 rotamery)); 7,5 - 7,1 (9H, aromáty-H aNH); 4,4 - 4,1 (4H, CH2 a 2 x CH); 3,85 (3H, OCH3); 3,85 (3H, OCH3); 3,7 - 3,4 (2H, CH2); 3,0 - 2,7 (2H, CH2; 2,3 - 1,5 (4H, 2 x CH2); 1,3-1,1 (9H, Boc)
d) Boc-(D)-Phe-Pro-(4-amidino-2-methoxy)-benzylamid
Nitril z předcházejícího stupně se analogicky A.III.l. převede na 4,6 g amidin-hydrojodidu.
'H-NMR (d6-DMSO, δ ppm): 9,25/8,85 (4H, amidin), 8,75(7,95 (1H, NH (2 rotamery));
7,4 - 7,1 (9H, aromáty-H a NH); 4,45 - 4,10 (4H, CH2 a 2 x CH); 3,90 (3H, OCH3); 3,65-asi 3,4 (2H, CH2), 3,0 - 2,7 (2H, CH2); 1,95 - 1,55 (4H, 2 x CH2); 1.3-1,2 (9H, Boc)
Příklad 240
H-(D)-Phe-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb
Amidin-hydrojodid (příklad 239) se nechá přes acetát-iontoměnič (IRA 420) reagovat na amidin-hydroacetát, potom se rozpustí v 50 ml DCM a při 0 °C se nasytí plynným HC1. Po 1 h se rozpouštědlo odtáhne. Získá se 3,0 g amidinu jako dihydrochloridu.
'H-NMR (d6-DMSO, δ ppm): 9,50/9,27 (4H, amidin); 8,80 (3H, NH3 +); 8,75 (1H, NH); 7,50 - 7,20 (8H, aromáty-H); 4,35 - 4,10 (4H, CH2 a 2 x CH); 3,90 (3H, OCH), asi 1,9 - 1,35 (4H, 2 x CH2)
Příklad 241
Boc-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb
a) Boc-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-(4-kyano-2-methoxy)-benzylamid
1,55 g (5,25 mmol) Boc-(D)-Phe(4-MeO)-OH, 3,9 ml DIPEA a 1,55 g (5,25 mmol) prolin-(2methoxy-4-kyano)-benzylamid-hydrochloridu se spojí při -5 °C se 4,4 ml (5,9 mmol) PPA
-96CZ 293426 B6 (50% v ethylacetátu) ve 35 ml DCM a 1 h se míchá při 0 °C. Reakční směs se postupně promyje lNNaOH, IN HC1 a nasyceným roztokem chloridu sodného a suší se nad síranem sodným. Po odtáhnutí rozpouštědla zbude 2,4 g pevné látky.
'H-NMR (d6-DMSO, δ ppm): 8.72 a 7,87 (t. 2H); 7.42 (1H); 7,35 (m, 3H); 7,15 (d, 2H); 6,85 (d, 2H); 7,00/6,70 (2d, 1H (2 rotamery) 1H): 4.40 - 4,10 (m, 4H); 3,85 (s, 3H); 3,70 (s, 3H); 3,05 - 2,55); 1,95 - 1,55 (m, 4H); 1,2 (s, 9H)
b) Boc-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb
2,4 g nitrilu (příklad 241/a) se analogicky A.III.l. po čištění sloupcovou chromatografií přes silikagel (eluční činidlo: DCM/MeOH 9:1) převede na 1,7 g amidin-hydrojodidu.
'H-NMR (d6-DMSO, δ ppm): 9,25/8,85 (4H. amidin): 7,95 (1H, NH); 7,4 - 6,8 (8H, aromáty-H a NH); 4,4 - 4,1 (4H, CH2 a 2 x CH); 3,90/3,70 (6H, 2 x OCH3), asi 3,7-2,9 (2H, CH2), 3,0 - 2,6 (2H, CH2, 1,9-1,5 (4H, 2 x CH2); 1,3-1,2 (9H, Boc)
Příklad 242
H-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb
1,7 g amidin-hydrojodidu (příklad 241) se přemění na acetátovou sůl pomocí acetát-iontoměniče (IRA 420) a potom se Boc-skupina odštěpí analogicky příkladu 240. Získá se 1,0 g dihydrochloridu.
‘H-NMR (d6-DMSO, 6 ppm): 9,50/0,25 (4H, amidin); 8,85 - 8,65 (4H, NH a NH/); 7,50 - 7,30 a 7,15/6,90 (7H, aromáty-H); 4,28 - 4,05 (4H, CH2 a 2 x CH); 3,90/3,75 (6H, 2 xOCH3); 3,20 - 2,85 (2H, CH2); 1,95 - 1,40 (4H, 2 x CH2);
FAB-MS: 454 (M+Ff)
Příklad 243
HOOC-CH2-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb
Boc-skupina sloučeniny z příkladu 241 a) se odštěpí analogicky příkladu 240. 3,5 g tohoto štěpeného produktu se rozpustí v 80 ml DCM a společně se 4,45 ml DIPEA a 1,09 ml terc.butylesteru kyseliny bromoctové se 3 dny míchá při teplotě místnosti. Produkt se zpracuje jako v příkladu 246 a). 3,0 g vzniklé sloučeniny tBuOOC-CH2-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-(2-methoxy-4-kyano)benzylamid se nechá reagovat analogicky příkladu 246 b) s hydroxylaminhydrochloridem a 3,1 g vzniklého hydroxylamidinu se hydrogenuje se 185 mg Raney-niklu v 65 ml methanolu s přídavkem 0,31 ml ledové kyseliny octové při 50 °C na amidin-hydroacetát. Katalyzátor se odfiltruje a tBuOOC-CH2-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb hydroacetát se přečistí přes silikagel sloupcovou chromatografií (eluční činidlo: DCM+ 10% methanolu + 2 % (50%) kyseliny octové). Získá se 1,3 g terc.butylesteru (FAB-MS: 568 (M+H*)) a zjeho 1,15 g analogicky příkladu 248 d) 850 mg HOOC-CH2-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb.
'H-NMR (d6-DMSO, δ ppm): 9,9- 9,7 a 9,2 - 9,0 (2H,NH3 +); 9,60/9,35 (4H, amidin); 7,50 - 6,73 (5H, aromáty-H); 4,50 - 3,45 (8H, 3 x CH2 a 2 x CH); 3,90 (3H, OCH3; 3,73 (3H, OCH3); 3,40 - 3,27 a 3,06 - 2,87 (2H, CH3); 2,43 - 1,25 (4H, 2 x CH2)
-97CZ 293426 B6
Příklad 244
Boc-(D)-Chg-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb
a) Boc-(D)-Cyklohexylglycin-prolin-(2-methoxy-4-kyano)benzylamid
K 10,0 g (28,2 mmol) Boc-(D)-Chg-Pro-OH v 70 ml absolutního dichlormethanu se při -5 °C přidá 20,8 ml DIPEA (121 mmol), 4.58 g (28,2 mmol) 2-methoxy-4-kyanobenzylaminu a 25 ml PPA (50% roztok v ethylacetátu) a 2h se míchá při 0 °C.
Roztok se pak postupně promyje 0,5N hydroxidem sodným, IN HC1 a nasyceným roztokem chloridu sodného, suší se síranem sodným a rozpouštědlo se úplně odtáhne ve vakuu. V téměř kvantitativním výtěžku vyloučený produkt se nechá bez dalšího čištění reagovat v následujícím stupni.
’Η-NMR (d6-DMSO, δ ppm): 7,9 (1H, NH); 7,45 a 7,35 (3H, aromáty-H); 7,1 (1H, NH);
4,45 - 3,50 (6H, 2 x CH2‘a 2 x CH); 3,86 (3H, OCH3); 2,2 - 1,0 (24H, cyklohexyl + 2 xCH,+ Boc)
b) Boc-(D)-Cyklohexylglycin-prolin-(2-methoxy-4-hydroxyamidino)-benzylamid
12,0 g (24 mmol) kyano-eduktu (a) se analogicky příkladu 246 b) nechá reagovat shydroxylamin-hydrochloridem. Produkt vy padne jako objemná sraženina téměř kvantitativně.
'H-NMR (d6-DMSO, δ ppm): 9,7 - 9,5 (1H, OH); 5,8 (2H, NH2)
c) Boc-(D)-Cyklohexylglycin-prolin-(2-methoxy-4—amidino)-benzylamid
Hydroxyamidino-sloučenina (b) se s Raney-niklem hydrogenuje analogicky příkladu 243. Produkt se přečistí sloupcovou chromatografií přes silikagel (eluční činidlo: dichlormethan/10%20 % MeOH/2 % (50%) kyselina octová). Získá se 10,5 g amidinu jako acetátové soli (výtěžek: 75 % - vychází se z nitrilu (a);
'H-NMR (d6-DMSO, δ ppm): amidino skupina vykazuje jako acetátová sůl extrémně široký signál od asi 10 - 8 ppm; 7,95 (1H, NH, 7,4 - 7,3 (3H, aromáty-H); 7,05 (1H, NH); 4,4 - 3,4 (6H, 2 x CH2 a 2 x CH); 3,89 (3H, OCH3); 2,2 - 1,0 (24H, cyklohexyl + 2 x CH2 + Boc)
Příklad 245
H-(D)-Chg-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb
10,5 g Boc-(D)-Chg-Pro-(2-methoxy-4-amidino)-benzylamidu se rozpustí v absolutním dichlormethanu/MeOH a při 0 až 5 °C se 1 h sytí HC1. Pak se další hodinu míchá při 9 °C, rozpouštědlo se úplně odtáhne ve vakuu a získá se 7,6 g (86 %) produktu jako dihydrochlorid.
‘H-NMR (d6-DMSO, δ ppm): 9,60 a 9,33 (4H, amidin); 8,87 (1H,NH); 8,62 (3H, NH3 +); 7,5-7,3 (3H, aromáty-H); 4,45 - 4,15 (4H, CH2 a 2 x CH); 3,95 (3H, OCH3); 3,95- 3,82 (1H, CH2); 3,65 - 3,55 (1H, CH2); 2,2 - 1,0 (15H, cyklohexyl a 2 x CH2)
-98CZ 293426 B6
Příklad 246
HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb (a) N-terc.Butoxykarbonylmethyl-(D)-cyklohexylglycyl-prolin-(2-methoxy-4-kyano)benzylamid
0,72 g (1,65 mmol) H-(D)-Chg-Pro-(2-methoxy-4-kyano)-benzylamid-hydrochloridu se předloží do 30 ml absolutního dichlormethanu. Po přídavku 1 ml (5,8 mmol) DIPEA se při teplotě místnosti během 40 min přikape roztok 1,65 mmol terc.butylesteru kyseliny bromoctové a 15 ml dichlormethanu. Reakční směs se míchá 3 dny při teplotě místnosti, potom se postupně promyje 0,5N hydroxidem sodným, 0,5N HCI a nasyceným roztokem chloridu sodného. Po sušení se získá 0,7 g surového produktu, který se bez dalšího čištění použije v následujících stupních.
(b) N-terc.Butoxykarbonylmethyl-(D)-cyklohexylglycyl-prolin-(2-methoxy-4-hydroxyamidino)-benzylamid
1,45 g (2,8 mmol) 2-methoxy-4-kyano-benzylamidu (a) se rozpustí ve 20 ml dichlormethanu/MeOH 1:1 a společně s 0,49 g (7,1 mmol) hydroxylamin-hydrochloridu a 2,8 ml DIPEA se míchá při teplotě místnosti 20 h. Po odtáhnutí rozpouštědla se produkt vyjme do dichlormethanu, promyje se vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného a suší. Získá se 1,2 g surového produktu, který se přímo použije dále.
(c) N-terc.Butoxykarbonylmethyl-(D)-cyklohexylglycyl-prolin-(2-methoxy-4-amidino)benzylamid
Hydroxyamidinosloučenina (b) se hydrogenuje s Raney-niklem analogicky příkladu 243. Získá se po přečištění sloupcovou chromatografií přes silikagel (eluční činidlo: dichlormethan/10 %20 % MeOH/2 % (50%) kyselina octová) 0,5 g produktu jako acetátové soli.
(d) N-Hydroxykarbonylmethyl-(D)-cyklohexylglycyl-prolin-(2-methoxy-4-amidino)benzylamid
0,5 g (0,85 mmol) amidino-acetátové soli (c) se rozpustí ve 25 ml absolutního dichlormethanu. Při 0 až 5 °C se až do nasycení zavádí do rozpouštědla plynný HCI. Po 40 min se míchá při teplotě místnosti další hodinu. Po odtáhnutí rozpouštědla ve vakuu se získá 370 mg čistého produktu jako dihydrochloridu.
'H-NMR (d6-DMSO, δ ppm): 9,57 a 9,33 (4H, amidin); 9,8- 9,1 (2H, NH3 +); 7,6- 7,3 (3H, aromáty-H); 4,5- 4,1 (4H, CH2 x CH2 a 2 x CH); 3,93 (3H, OCH3); 3,9 - 3,4 (4H, 2 x CH2); 2,3 - 1,0 (15H, cyklohexyl a 2 x CH2)
Příklad 247
Boc-(D)-Chg-Aze-NH-(2-MeO)-pAmb (a) Boc-(L)-Azetidin-2-karboxylovákyselina-(2-methoxy-4-kyano)-benzylamid
Ke 2,12 g kyseliny Boc-(L)-azetidin-2-karboxylové (10,5 mmol) v 50 ml THF se přidá při 0 až 5 °C 1,22 g (10,5 mmol) hydroxysukcinimidu a 2,18 g (10,5 mmol) DCC a 30 min se míchá. Potom se přidá při 0 až 5 °C 2,10 g (10,5 mmol) hydrochloridu 2-methoxy-4-kyano-benzylaminu a potom 1,48 ml Et3N. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti přes noc. Vyloučená močovina se oddělí filtrací na nuči, filtrát se vyjme do ethylacetátu a postupně se promyje 0,5N HCI, 0,5N hydroxidem sodným a nasyceným roztokem chloridu sodného. Rozpouštědlo se suší
-99CZ 293426 B6 nad síranem sodným a zcela se odtáhne ve vakuu. Získá se 3,1 g (85 %) produktu, který se použije dále bez čištění.
‘H-NMR (d6-DMSO, δ ppm): 8,5 (1H, NH); 7,48 -7,25 (3H. aromáty-H); 4,55 (dd. 1H, CH);
4,45 - 4,15 (2H, CH2); 3,88 (3H, OCH3); 3,9 - 3,7 (2H, CH2): 2,5 - 2,3 (1H, CH2): 2,15-1,95 (1H,CH2); 1,35 (9H, Boc) (b) (L)-Azetidin-2-karboxylová kyselina-(2-methoxy-4-kyano)-benzylamid
3,0 g (8,7 mmol) Boc-Aze-(2-methoxy-4-kyano)-benzylamidu se nechá v téměř kvantitativním výtěžku analogicky příkladu 239 (b) reagovat na požadovaný produkt (b).
'H-NMR (d6-DMSO, δ ppm): 10,0- 9,85 (1H, NH3 +); 7,50 a 7,45- 7,35 (3H, aromáty-H); 5,10-4,95 (1H, CH); 4,35 (d, 2H, CH2); 4,05- 3,65 (2H, CH2); 3,89 (3H, OCH;); 2,8-2,6 (1H, CH2); 2,5-2,3 (1H, CH2) (c) Boc-(D)-cyklohexylglycyl-(L)-azetidin-2-karboxylová kyselina-(2-methoxy-4-kyano)benzylamid
2,2 g Boc-(D)-Chg-OH se analogicky příkladu 241 (a) nechá reagovat se 2,4 g N-Aze-(2methoxy-4-kyano)-benzylamid-hydrochloridu. Získá se 3,5 g.
(d) Boc-(D)-cyklohexylglycyl-(L)-azetidin-2-karboxylová kyselina-(2-methoxy-4amidino)-benzylamid
3,4 g nitrilu (c) se analogicky příkladu 246(b) nechá reagovat s hydroxylamin-hydrochloridem a vzniklý hydroxyamidin se hydrogenuje analogicky příkladu 243 s Raney-niklem. Získá se 3,1 g amidinu jako hydroacetátu.
Příklad 248
H-(D)-Chg-Aze-NH-(2-MeO)-pAmb
3,1 g Boc-sloučeniny (příklad 247) se štěpí analogicky příkladu 245 na dihydrochlorid.
'H-NMR (ds-DMSO, δ ppm): 9,45/9,20 (4H, amidin); 9,0 (1H, NH); 8,55 (3H, NHj; 7,45/7,40 (3H, aromáty-H); 4,75 - 4,10 (4H, CH2 a 2 x CH); 3,90 (3H, OCH3); 2,7 - 1,0 (13H, cyklohexyl aCH2)
Příklad 249
Boc-(D)-Chg-Pro-NH-(2-iPro)-pAmb
4,1 g (11,5 mmol) Boc-(D)-Chg-Pro-OH se nechá reagovat analogicky příkladu 239 vždy s jedním ekvivalentem hydroxysukcinimidu, DCC, 4-aminomethyl-3-izopropoxy-benzonitrilhydrochloridu a Et3N. Získá se 5,7 g (94 %) surového produktu, který se bez dalšího čištění použije v následujících stupních.
'H-NMR (d6-DMSO, δ ppm): 7,85 (1H, NH); 7,43 a 7,30 (3H, aromáty-H); 7,08 (1H, NH); 4,80 - 3,50 (7H, 2 x CH2, 3 x CH); 2,2 - 1,0 (30H, Boc+ cyklohexyl + 2 x CH3 + 2 x CH2)
-100CZ 293426 B6
Příklad 250
H-(D)-Chg-Pro-NH-(2-iPro)-pAmb
5,7 g Boc-sloučeniny (příklad 249) se analogicky příkladu 246 (b) nechá reagovat s hydroxylamin-hydrochloridem a vzniklý hydroxyamidin se analogicky příkladu 243 hydrogenuje s Raney-niklem. Takto vzniklý amidin-hydroacetát se štěpí analogicky příkladu 245. Získá se
3,1 g produktu jako dihydrochloridu.
’Η-NMR (dí-DMSO, δ ppm): 9,40/9,15 (4H, amidin); 8.75 (H, NH); 8,55 (3H, NH3 +); 7,40 - 7,25 (3H, aromáty-H); 4,80 (1H, CH); 4,4 - 3,5 (6H, 3 x CH2 a 2 x CH); 2,3 - 1,0 (15H, cyklohexyl a 2 x CH2); 1,3 (6H, 2 x CH3)
Příklad 251
Boc-(D)-Chg-Pro-NH-(2-Cl)-pAmb (a) Boc-Prolin-(2-chlor-4-kyano)-benzylamid
5,4 g (24 mmol) Boc-Pro-OH se analogicky příkladu 244 (a) nechá reagovat se 20 ml PPA, 17,9 ml DIPEA a 4,0 g (24 mmol) 2-chlor-4-kyanobenz\ laminu na Boc-Pro-(2-chlor-4kyano)-benzylamid. Získá se 7,0 g (80 %) produktu.
’Η-NMR (d6-DMSO, δ ppm): 8,57 (1H, NH); 8,05- 7,45 (3H, aromáty-H); 4,50 - 4,10 (3H, CH2 a CH); 3,4 - 3,2 (2H, CH2); 2,25 - 1,70 (4H, 2 x CH2); 1,4-1,3 (9H, Boc) (b) Prolin-(2-chlor-4-kyano)-benzylamid-hydrochlorid
Boc-skupina se odštěpí analogicky příkladu 239 (b). Získá se 5,6 g (97%) hydrochloridu.
‘H-NMR (d6-DMSO, δ ppm): 10,2 a 8,6 (NH2 +); 9,45 (1H, NH); 8,05 - 7,50 (3H, aromáty-H);
4,45 (d, 2H, CH2); 4,28 (1H, CH); 3,20 (2H, CH2);
(c) Boc-(D)-Cyklohexylglycyl-prolin-(2-chlor-4-kyano)-benzylamid
4,76 g (18,7 mmol) Boc-(D)-cyklohexylglycinu se nechá reagovat analogicky příkladu 241 (a) s 15,5 ml PPA, 14 ml DIPEA a 5,6 g (18,7 mmol) hydrochloridu (b) na Boc-(D)-Chg-Pro-(2chlor-4-kyano)-benzylamid. Získá se 8,7 g (92 %) produktu.
(d) Boc-(D)-Cyklohexylglycyl-prolin-(2-chlor-4-hydroxyamidino)-benzylamid (Kyanoskupina substance (c) se analogicky příkladu 246 (b) nechá reagovat s hydroxylaminem v téměř kvantitativním výtěžku na Boc-(D)-Chg-Pro-(2-chlor-4-hydroxyamidin)-benzyIamid. Získá se 4,6 g produktu.
‘H-NMR (dé-DMSO, δ ppm): 9,75 (1H, OH); 5,90 (2H, NH2) (e) Boc-(D)-Cyklohexylglycyl-prolin-(2-chlor-4-amidino)-benzylamid
4,6 g hydroxyamidinu (d) se analogicky příkladu 243 hydrogenuje s Raney-niklem na amidin. Po čištění sloupcovou chromatografií přes silikagel (eluční činidlo: dichlormethan/15 % MeOH/2 % (50%) kyselina octová) se získá 5,4 g amidinu jako acetátové soli.
-101 CZ 293426 B6 *H-NMR (d6-DMSO, δ ppm): signál amidinu jako acetátové soli není možno pro jeho šířku lokalizovat; 8,15 (1H, NH); 7,9-^7,5 (3H, aromáty-H); 7.05 (1H, NH); 4,5 - 3,4 (6H, 2 x CH2 a 2 x CH); 2,2 - 1,0 (24, cyklohexyl + 2 x CH2 + Boc)
Příklad 252
H-(D)-Chg-Pro-NH(2-Cl)-pAmb
Boc-skupina z příkladu 251 se odštěpí analogicky příkladu 245. Získá se 3,0 g (65 %) produktu jako dihydrochloridu.
’Η-NMR (d6-DMSO, δ ppm): 9,55 a 9,34 (4H, amidin): 9,05 (1H, NH); 8,60 (3H, NH/); 7,95-7,48 (3H-aromáty-H); 4,5 - 3,5 (6H, 2 x při teplotě místnosti, 2 x CH); 2,25 - 1,0 (15H, cyklohexyl + 2 x CH2)
Příklad 253
H-(D)-Phe-Pro-(D,L))(4-Am)-PhgOMe
Sloučenina se vyrobí Cbz-odštěpením z příkladu 18.
‘H-NMR (dé-DMSO, δ ppm): 9/9,2/8,85/8,8 (4d, 1H, NH); 7,8 (m, 2H, Ar-H); 7,6 (m, 2H, Ar-H); 7,3 - 7,0 (m, 5H, Ar-H); 5,7/5,6 (2d, 1H, α-H); 4.8/4,4 (2dd, 1H, a-Phe); 3,9 (m, 1H, a-Pro); 3,75 (2s, 3H, OCH3); 3,6 (2H, δ-Pro); 3,0 - 2,6 (m, 2H, CH2-Ph); 2,2 - 1,6 (m, 4H, β/gama-Pro)
MS: 452 (M+H+), 305, 192. T.t.: 71 až 73 °C (dihydroacetát)
Příklad 256
H-(D)Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-Am)-piko
a) 2-Methoxy-3-pikolylalkohol .HC1
20,0 g kyseliny 2-methoxynikotinové (130,50 mmol) se společně se 28,7 ml N-methylmorfolinu (261,18 mmol) předloží do THF při -10 °C a rychle se přikape 25,4 ml izobutylesteru kyseliny chlormravenčí (195,89 mmol) v 50 ml THF. Vznikne přitom sraženina. Po jednohodinovém míchání při 0 °C se po částech přidá 16,3 g borohydridu sodného (430,95 mmol) a potom se pomalu přikape 250 ml methanolu (silný vývoj plynu a exothermní reakce). Po odsátí vyloučené soli se filtrát za vakua odpaří na rotační odparce, zbytek se vyjme do ethylacetátu, promyje se vodou, zředěnou kyselinou chlorovodíkovou (pH = 2), nasyceným roztokem chloridu sodného (vodná fáze se udržuje velmi malá), suší se nad síranem horečnatým a odpaří se na rotační odparce. Zbytek se vyjme do etheru, smísí s etherickou kyselinou chlorovodíkovou, sraženina se odsaje a vymíchá s etherem. Získá se 16,3 g (71 %) 2-methoxy-3-pikolylalkohol-hydrochloridu jako bílé soli.
b) 2-Methoxy-3-pikolyl-chlorid.HCl
K 17 g 2-methoxy-3-pikolylalkohol.HCI (96,76 mmol) suspendovaného v 60 ml DCM se přikape 51 ml thionylchloridu (696,67 mmol), roztok se míchá při teplotě místnosti 1 h, rozpouštědlo a přebytečná thionylchlorid se odstraní ve vakuu, zbytek se 4krát společně oddestiluje s methano
-102CZ 293426 B6 lem a pak se vymíchá z etheru. Získá se 15,2 g 2-methoxy-3-pikolylchlorid-hydrochloridu (81 %) jako bílé krystalické soli.
c) 2-Methoxy-3-pikoly lamin. 2HC1
15,1 g 2-methoxy-3-pikolylchlorid-hydrochloridu (77.76 mmol) se pomalu přikape ke směsi 600 ml 30% roztoku amoniaku ve vodě a 250 ml methanolu při 35 °C, uvolňující se amoniak se přitom odvádí. Po 1 h míchání při 35 °C se roztok za vakua odpaří na rotační odparce, zbytek se alkalizuje se 20% NaOH-roztokem (vodná fáze se udržuje malá), vícekrát se extrahuje s DCM, organická fáze se suší nad síranem hořečnatým a odpaří se na rotační odparce ve vakuu. Po vyjmutí zbytku do etheru, přidání etherické kyseliny chlorovodíkové, odsátí a promytí sraženiny etherem se získá 11,0 g (67 %) 2-methoxy-3-pikolylaminu.2HCl jako bílého krystalizátu.
d) Boc-(D)Chg-Pro-NH-3-(2-MeO)-piko
Příprava se provádí analogicky Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-piko (viz příklad 227). Výtěžek 92 %.
e) Boc-(D)Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-1 -oxo)-piko
4,9 g Boc-(D)Chg-Pro-NH-3-(2-MeO)-piko (10,32 mmol) se rozpustí ve 100 ml DCM, smísí se se 3,6 g kyseliny meta-chlorperbenzoové (20,64 mmol) a více dnů se míchá při teplotě místnosti (podle DC jen částečná přeměna). Roztok se pak zředí s DCM, suší se nad síranem hořečnatým, nasytí se plynným amoniakem, vyloučená sraženina se odfiltruje a filtrát se odpaří ve vakuu. Směs produkt se vyjme do etheru, extrahuje se 1M roztokem hydrogenuhličitanu draselného (pH 2), vodná fáze se alkalizuje uhličitanem draselným, vícekrát se vytřepe s DCM, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří na rotační odparce za vakua. Získá se 1,6 g Boc-(D)ChgPro-NH-3-(2-MeO)-l-oxo-piko jako pevná pěna. 3,1 g eduktu mohlo být získáno z kyselého etherového extraktu a znovu použito pro přípravu N-oxidu. Vícenásobným opakováním se získá celkem 4,2 g produktu.
f) Boc-(D)Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-CN)-piko
4,2 g Boc-(D)Chg-Pro-NH-3-{2-MeO-6-CN)-piko (8,56 mmol) se smísí společně se 16 ml trimethylsilylkyanidu, 5 ml 1,2-dichlorethanu a 10 ml chloridu kyselina dimethylkarbaminové, ihned se zahřeje na 70 °C a 10 min se míchá při této teplotě. Po odpaření ve vakuu se směs produktu (2 hlavní složky, DC: Rf - 0,46 popř. 0,26, eluční činidlo DCM/MeOH = 95/5) rozdělí sloupcovou chromatografií přes silikagel (eluent: DCM se vzestupem MeOH 0,5 na 1,5 %).
První hlavní frakce obsahuje 1,17 g Boc-(D)Chg—Pro-NH-3-(2-MeO-6-CN)-piko.
g) Příprava Boc-(D)Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-Ham)-piko
1,17 g Boc-(D)Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-CN)-piko (2,34 mmol) se společně míchá při teplotě místnosti s 0,41 g hydroxylamoniumchloridu a 2 ml DIPEA (11,17 mmol) v 10 ml DCM 4 h, potom se ve vakuu odpaří na rotační odparce, zbytek se vyjme do etheru, vícekrát se extrahuje zředěnou kyselinou chlorovodíkovou (pH 4), organická fáze se suší nad síranem hořečnatým a za vakua odpaří na rotační odparce. Získaná směs produktu (2 složky, DC: Rf=0,54 popř. 0,42, eluční činidlo DCM/MeOH = 9/1) se rozdělí sloupcovou chromatografií přes silikagel (eluční činidlo: DCM s MeOH stoupajícím z 0,5 na 1,5 % MeOH). První hlavní frakce obsahuje 300 mg Boc-(D)Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-Ham)-Piko.
nC-NMR (d6-DMSO, δ v ppm): 171,16, 170,46, 159,13, 155,69, 148,89, 145,44, 135,84, 120,76, 111,53, 77,80, 59,55, 56,66, 52,84, 4,56, 38,4, 36,32, 28,87, 28,38, 28,17, 27,72, 27,57, 25,37, 25,29, 23,65.
-103CZ 293426 B6
h) Boc-(D)Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-Am)-piko
300 mg Boc-(D)Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-Ham)-piko (0,56 mmol) se hydrogenuje v 10 ml ethanolu a 2 ml kyseliny octové nad Pd/C (10%) při 60 °C 4 h. Po odfiltrování katalyzátoru a zakoncentrování reakčního roztoku ve vakuu se získá 260 mg Boc-(D)Chg-Pro-NH-3-(2MeO-6-Am)-piko-surového produktu, který se bez dalšího čištění použije v následující reakci.
i) H-(D)Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-Am)-piko
260 mg Boc-(D)Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-Am)-piko surového produktu se společně v 5 ml DCM a 5 ml methanolu míchá při teplotě místnosti s 5 ml etherické kyseliny chlorovodíkové přes noc, reakční směs se zahustí ve vakuu, zbytek se vícekrát destiluje spolu s toluenem/methanolem a pak se vymíchá z etheru. Získá se 210 mg Boc-(D)Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-Am)piko.(HCl)i 2 jako bílé krystalické pevné substance. T.t.: 205 až 212 °C.
FAB-MS: (M+H)+ = 417

Claims (3)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Argininové deriváty obecného vzorce I
    R1 R2
    I I ^nh
    A--B--CO-- N--C-- (CH2)m-- D-- (NH)n--C (I) , li NHR4 jakož i jejich sole s fyziologicky přijatelnými kyselinami a jejich stereoizomery, kde A znamená
    CH2-CHNH2-CO-104CZ 293426 B6
    CH2CHNH2-CO-
    CH2-CHNH2-CO-
    CHNH2-C0-
    CHNH2-CON----|-- CHNH2-COςτ
    CH2-CHNH2-CO»
    N-j---Π-- CH2-CHNH2-COik x-N
    N
    I
    XI f-=]— CH2-CHNH2-CON^^xN-Xl
    N (CH2)b-CHNH2-CO- (CH2)b-CHNH2-CO-
    CHNH2-CO(OC’-.
    -105CZ 293426 B6
    CH2-CHNH2-CO-
    X10 CH2-CHNH2-CO- ΪΊ Xil
    CH-CHNH2-C0- ,
    - 106CZ 293426 B6
    CH-CHNH2-CO- , χΝΗ2
    NH2
    X11-CO-(CH2)c-Ah-CO- ,
    XI3-SO2-CH2-CH2-CHNH2-CO-, h2n-ch2-co-, h2n-chx13-co-, kde libovolná skupina -CH2- může být nahrazena atomem kyslíku, atomem síry, skupinou -NH- nebo NCi^-alkylem;
    přičemž
    XI představuje atom vodíku, C^-alkyL Ci-4-alkyl-fenyl, Ci„5-acyl, Ci^-alkoxykarbonyL
    X2 představuje atom kyslíku, skupinu NX1, atom síry,
    X3 představuje atom vodíku, Ct_4—alkyl, atom fluoru, atom chloru, hydroxyskupinu, skupinu OCH3,
    X4 představuje atom vodíku, atom fluoru, atom chloru, CF3, atom bromu, C^-alkyl, fenyl, benzyl, hydroxyskupinu, Cj^-alkoxy, fenyloxy, fenyl-Ci^-alkoxy, skupinu NO2, -COOH, —COOC i_4—alkyl,
    X5 představuje atom vodíku, atom fluoru, atom chloru, atom bromu, Ci^-alkyl, fenyl, benzyl, hydroxyskupinu, Cj^-alkoxy, fenyloxy, fenyl-Ci_4-alkoxy, -COOH, -COOCM-alkyl,
    X6 představuje atom vodíku, atom fluoru, atom chloru, atom bromu, Cj^-alkyl, hydroxyskupinu, C ^-alkoxy,
    X7 představuje atom vodíku, atom fluoru, chloru,
    X8 představuje atom vodíku, atom fluoru, chloru,
    X9 představuje NH2, hydroxyskupinu,
    X10 představuje atom vodíku, Ci-4-alkyl, hydroxyskupinu, skupinu OCH3,
    XII představuje atom vodíku, Ci_4-alkyl, hydroxyskupinu, skupinu OCH3,
    X12 představuje hydroxyskupinu, Ci^-alkoxy, fenyl-C]^-alkoxy, NH2, N-C^-alkyl,
    -nx13x14,
    -107CZ 293426 B6
    X13 představuje Ci_g-alkyl,
    X14 představuje Ci-4-alkyl, nebo X13X14 představuje -(CFDja představuje 2, 3, 4, 5 nebo 6, b je 0,1, c představuje 1, 2, d je 3, 4, 5, 6, 7 přičemž ve všech jmenovaných A-zbytcích může byt skupina α-NH nebo a-NH2- mono- nebo disubstituována Ci_i2-alkylem, fenyl-Ci_4-alkylenem, Xl2OC-Ci.6-alkylenem, X12OC-C]_6alkylkarbonylem, -a- nebo β-naftyl-Ci^-alkylenem, Ci_i2-alkylkarbonylem, fenyl-Ci_4~alkylkarbonylem, C]_7-alkoxykarbonylem, fenyl-Ci_5-alkoxykarbonylem, -a- nebo β-naftyl-Ci^alkylkarbonylem, Ci_6-alkylaminokarbonylem nebo fenyl-Ci_4-alkylaminokarbonylem-, kde X12 má výše uvedený význam, dále A je X’-NH-CH2-CH2-CO-, X'-NH-€H2-CH2-CH2-CO-, kde X1 má výše uvedený význam, neboje to zbytek
    -108CZ 293426 B6 nebo dále A představuje t
    Xl8-0-CO-C14-alkylen-CO,
    Ci_12-alkyl-CO-,
    Ci_io-alkyl-NH-CO-, fenyl-Ci^-alkylen-NH-CO-, a- nebo β-naftyl-COnebo C3_7-cykloalkyl-CO-, přičemž
    X16 představuje atom vodíku, atom fluoru, atom chloru, atom bromu, skupinu CF3, hydroxyskupinu, Ci-g-alkyl, Ci ^-alkoxy,
    X17 představuje atom vodíku, hydroxyskupinu, Ci_4-alkyl, Ci_4~alkoxy,
    X18 představuje atom vodíku, Ci-4-alkyl, q je 1,2,3,4, 5, 6, 7, 8
    B představuje ^CH2)h
    --N---CH -kde h je 2, 3 nebo 4, a
    -109f
    CL 293426 B6 libovolná skupina -CH2- může být zaměněna skupinou -CHOH-, -NX -SO- nebo atomem kyslíku nebo síry
    X18 >
    představuje atom vodíku nebo Cj^-alkyl,
    X19
    R1
    R2
    R3
    X20 představuje atom vodíku, Ci_6-alkyl, fenyl, benzyl, cyklohexyl nebo cyklohexylmethyl, představuje atom vodíku nebo Ci_4-alkyl, představuje atom vodíku nebo C i_4—alkyl, představuje atom vodíku, C^-alkyl, fenyl, fenyl-C|_4-alkylen, CH2OH, -CO-X20, -COCO-X20, představuje atom vodíku, C^-alkoxy, C|_4-alkyl, fenyl, fenyl-Ci^-alkylen, fenyl-Cb4alkoxy, CF3, C2Fs, N-koncově navázaná přirozená aminokyselina, CH2OH, -CH2-O-Ci_4alkyl, -NH-(Ci_4-alkylen)-fenyl nebo NH-Ci_6-alkyl, je 0, 2 nebo 3, představuje 0 nebo 1, představuje fenylen, na kterém jsou skupiny (CH2)m a (NH)n z obecného vzorce I navázány ve vzájemné poloze para- nebo meta- a který může být v poloze ortho- vzhledem ke skupině (CH2)m z obecného vzorce I substituován atomem fluoru, atomem chloru, atomem bromu, skupinou ΗΟ-CHz-, OH, NH2, NO2, C^-alkoxy, C^-alkyl nebo COX21 -0-(CH2)i_3-CO-X21 nebo -(CH2)i_3-CO-X21, pyridinylen, pyrimidinylen, pyrazinylen nebo pyridazinylen, na kterých jsou skupiny (CH2)m a (NH)n z obecného vzorce I navázány ve vzájemné poloze para- nebo meta- a které mohou být v poloze ortho- vzhledem ke skupině (CH2)m z obecného vzorce I substituovány atomem fluoru, atomem chloru, atomem bromu, skupinou ΗΟ-CHr-, hydroxy, NH2, NO2, C].4alkoxy, Ci^-alkyl nebo COX21 -O-(CH2)i_3-CO-X21 nebo -(CH2)b3-CO-X21;
    1,4- nebo 1,3-cyklohexylen, ve kterém CH2-skupina v poloze ortho k (CH2)m může být nahrazena skupinou NH, atomem kyslíku, atomem síry nebo skupinou SO nebo piperidinylen, který je v poloze 3 nebo 4 k dusíku spojen s (CH2)m a ve kterém sám atom dusíku nese skupinu C(=NH)NHR4, kde
    X21 je atom vodíku, Ci_4-alkyl, Ci_4-alkoxy, skupina OH, skupina NH2, NH-CM-alkyl;
    R4 představuje atom vodíku, -CO-C]_2o-alkyl, -CO-0-Ci_2o-alkyl, hydroxyskupinu nebo skupinu NH2.
    -110CZ 293426 B6 (II),
  2. 2. Argininové deriváty obecného vzorce I podle nároku 1 pro použití při potírání chorob.
  3. 3. Sloučeniny obecného vzorce II kde R1, R2, R3 a D mají významy uvedené u vzorce I a
    R5 znamená atom vodíku, C^-alkoxy-CO- nebo fenyl-Ci_3-alkoxy-CO-,
    R6 znamená kyano-, amidino- nebo guanidinozbytek v poloze m- nebo p- k C(R2,R3) a p je 1,2 nebo 3, jako meziprodukty pro přípravu argininových derivátů obecného vzorce I.
CZ19963713A 1994-06-17 1995-06-06 Argininové deriváty, jejich použití a meziprodukty pro jejich přípravu CZ293426B6 (cs)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE4421052A DE4421052A1 (de) 1994-06-17 1994-06-17 Neue Thrombininhibitoren, ihre Herstellung und Verwendung
PCT/EP1995/002135 WO1995035309A1 (de) 1994-06-17 1995-06-06 Neue thrombininhibitoren, ihre herstellung und verwendung

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ371396A3 CZ371396A3 (en) 1997-10-15
CZ293426B6 true CZ293426B6 (cs) 2004-04-14

Family

ID=6520741

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ19963713A CZ293426B6 (cs) 1994-06-17 1995-06-06 Argininové deriváty, jejich použití a meziprodukty pro jejich přípravu

Country Status (26)

Country Link
US (3) US6455671B1 (cs)
EP (1) EP0773955B1 (cs)
JP (1) JPH10501541A (cs)
CN (1) CN1189476C (cs)
AT (1) ATE237631T1 (cs)
AU (1) AU699501B2 (cs)
BR (1) BR9508057A (cs)
CA (1) CA2193133A1 (cs)
CZ (1) CZ293426B6 (cs)
DE (2) DE4421052A1 (cs)
DK (1) DK0773955T3 (cs)
ES (1) ES2197200T3 (cs)
FI (1) FI965039L (cs)
HR (1) HRP950338B1 (cs)
HU (1) HUT78040A (cs)
IL (1) IL114127A (cs)
MX (1) MX9606521A (cs)
NO (1) NO965412L (cs)
NZ (1) NZ288591A (cs)
PL (1) PL181405B1 (cs)
PT (1) PT773955E (cs)
RU (1) RU2172741C2 (cs)
SI (1) SI9520075B (cs)
TW (1) TW458986B (cs)
WO (1) WO1995035309A1 (cs)
ZA (1) ZA954972B (cs)

Families Citing this family (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5707966A (en) * 1994-03-04 1998-01-13 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5705487A (en) * 1994-03-04 1998-01-06 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5726159A (en) * 1994-03-04 1998-03-10 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
KR100388185B1 (ko) * 1995-02-17 2003-11-28 애보트 게엠베하 운트 콤파니 카게 트롬빈 억제제로서의 신규 디펩티드 아미딘
US5914319A (en) * 1995-02-27 1999-06-22 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5710130A (en) * 1995-02-27 1998-01-20 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
CA2176414A1 (en) * 1995-05-18 1996-11-19 S. David Kimball Acyl guanidine and amidine prodrugs
SA96170106A (ar) * 1995-07-06 2005-12-03 أسترا أكتيبولاج مشتقات حامض أميني جديدة
TW541316B (en) 1995-12-21 2003-07-11 Astrazeneca Ab Prodrugs of thrombin inhibitors
GB9526273D0 (en) * 1995-12-21 1996-02-21 Astra Ab New prodrugs
PL327227A1 (en) * 1995-12-22 1998-12-07 Novo Nordisk As Compounds exhibiting growth hormone liberating properties
AU719216B2 (en) * 1996-02-13 2000-05-04 Akzo Nobel N.V. Serine protease inhibitors
US5942544A (en) * 1996-02-22 1999-08-24 Dupont Pharmaceuticals Company α-branched anilines, toluenes, and analogs thereof as factor Xa inhibitors
US5811402A (en) * 1996-03-22 1998-09-22 Eli Lilly And Company Antithrombotic diamides
KR100483869B1 (ko) * 1996-06-07 2005-09-09 아스트라제네카 악티에볼라그 신규한 아미노산 유도체 및 트롬빈 억제제로서의 그의 용도
SE9602263D0 (sv) 1996-06-07 1996-06-07 Astra Ab New amino acid derivatives
WO1997049404A1 (en) 1996-06-25 1997-12-31 Eli Lilly And Company Anticoagulant agents
US6200967B1 (en) 1996-06-25 2001-03-13 Eli Lilly And Company Anticoagulant agents
SE9602646D0 (sv) 1996-07-04 1996-07-04 Astra Ab Pharmaceutically-useful compounds
DE19632773A1 (de) * 1996-08-14 1998-02-19 Basf Ag Neue Thrombininhibitoren
DE19632772A1 (de) 1996-08-14 1998-02-19 Basf Ag Neue Benzamidine
AR013084A1 (es) 1997-06-19 2000-12-13 Astrazeneca Ab Derivados de amidino utiles como inhibidores de la trombina, composicion farmaceutica, utilizacion de dichos compuestos para la preparacion demedicamentos y proceso para la preparacion de los compuestos mencionados
SE9704543D0 (sv) 1997-12-05 1997-12-05 Astra Ab New compounds
HUP0100082A3 (en) * 1998-01-26 2001-12-28 Abbott Gmbh & Co Kg Thrombin inhibitor, peptide derivatives, pharmaceutical compositions comprising thereof and their use
US6291514B1 (en) * 1998-02-09 2001-09-18 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. Heteroaryl amidines, methylamidines and guanidines, preparation thereof, and use thereof as protease inhibitors
US6417161B1 (en) 1998-04-24 2002-07-09 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. Amino acid amidinohydrazones, alkoxyguanidines and aminoguanidines as protease inhibitors
SE9804313D0 (sv) 1998-12-14 1998-12-14 Astra Ab New compounds
EE200100371A (et) 1999-01-13 2002-02-15 Astrazeneca Ab Amidinobensüülamiini derivaadid ja nende kasutamine trombiini inhibiitoritena
AU3659200A (en) * 1999-04-09 2000-11-14 Basf Aktiengesellschaft Prodrugs of thrombin inhibitors
IL145771A0 (en) * 1999-04-09 2002-07-25 Basf Ag Low-molecular inhibitors of complement proteases
AR023510A1 (es) 1999-04-21 2002-09-04 Astrazeneca Ab Un equipo de partes, formulacion farmaceutica y uso de un inhibidor de trombina.
SE0001803D0 (sv) 2000-05-16 2000-05-16 Astrazeneca Ab New compounds i
US6548694B2 (en) * 2000-05-23 2003-04-15 Hoffman-La Roche Inc. N-(4-carbamimidoyl-phenyl)-glycine derivatives
US6433186B1 (en) 2000-08-16 2002-08-13 Astrazeneca Ab Amidino derivatives and their use as thormbin inhibitors
DE10049937A1 (de) * 2000-10-06 2002-04-11 Knoll Ag Niedermolekulare Inhibitoren von Serinproteasen mit Polyhydroxyalkyl- und Polyhydroxycycloalkylresten
AR035216A1 (es) * 2000-12-01 2004-05-05 Astrazeneca Ab Derivados de acido mandelico ,derivados farmaceuticamente aceptables, uso de estos derivados para la fabricacion de medicamentos, metodos de tratamiento ,procesos para la preparacion de estos derivados, y compuestos intermediarios
US7129233B2 (en) 2000-12-01 2006-10-31 Astrazeneca Ab Mandelic acid derivatives and their use as thrombin inhibitors
DE10064797A1 (de) * 2000-12-22 2002-06-27 Knoll Ag Orale und parenterale pharmazeutische Formulierung, umfassend eine niedermolekulare Thrombininhibitor-Pro-Pharmakon
DE10117730A1 (de) 2001-04-09 2002-10-10 Basf Ag Umsetzung von (Di)Aminen in Gegenwart einer Lysinoxidase und eines Reduktionsmittels
AR034517A1 (es) * 2001-06-21 2004-02-25 Astrazeneca Ab Formulacion farmaceutica
SE0201661D0 (sv) 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab New salts
SE0201659D0 (sv) 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation
SE0201658D0 (sv) * 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab Immediate release pharmaceutical formulation
US7781424B2 (en) * 2003-05-27 2010-08-24 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation
US7795205B2 (en) * 2004-04-12 2010-09-14 Canyon Pharmaceuticals, Inc. Methods for effecting regression of tumor mass and size in a metastasized pancreatic tumor
US8257648B2 (en) 2004-12-21 2012-09-04 Scott Elrod System and method for reducing odors in a blind
DE102005025728A1 (de) * 2005-06-04 2006-12-07 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Polymorphe von 3-[(2-{[4-(Hexyloxycarbonylamino-imino-methyl)-phenylamino]-methyl}-1-methyl-1H-benzimidazol-5-carbonyl)-pyridin-2-yl-amino]-Propionsäure-ethylester
US7524354B2 (en) * 2005-07-07 2009-04-28 Research Foundation Of State University Of New York Controlled synthesis of highly monodispersed gold nanoparticles
TW200827336A (en) 2006-12-06 2008-07-01 Astrazeneca Ab New crystalline forms
RU2377246C2 (ru) * 2007-06-08 2009-12-27 Государственное учреждение гематологический научный центр Российской академии медицинских наук (ГУ ГНЦ РАМН) Синтетическое производное пептида, проявляющее антикоагулянтную активность
US20090061000A1 (en) * 2007-08-31 2009-03-05 Astrazeneca Ab Pharmaceutical formulation use 030
WO2011120040A2 (en) * 2010-03-26 2011-09-29 Matrix Pharma Inc. Thrombin inhibiting compositions
JP2012049597A (ja) * 2010-08-24 2012-03-08 Nikon Corp 撮像装置

Family Cites Families (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HU178398B (en) 1979-06-12 1982-04-28 Gyogyszerkutato Intezet Process for producing new agmatine derivatives of activity against haemagglutination
GB8305985D0 (en) 1983-03-04 1983-04-07 Szelke M Enzyme inhibition
ATE64956T1 (de) * 1984-06-14 1991-07-15 Ciba Geigy Ag Verfahren zur herstellung von thrombininhibitoren.
HU192646B (en) 1984-12-21 1987-06-29 Gyogyszerkutato Intezet Process for preparing new n-alkyl-peptide aldehydes
ZA86746B (en) 1985-02-04 1986-09-24 Merrell Dow Pharma Novel peptidase inhibitors
US5187157A (en) 1987-06-05 1993-02-16 Du Pont Merck Pharmaceutical Company Peptide boronic acid inhibitors of trypsin-like proteases
EP0362002B1 (en) 1988-09-01 1995-07-26 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. HIV protease inhibitors
ZA897515B (en) 1988-10-07 1990-06-27 Merrell Dow Pharma Novel peptidase inhibitors
CA2008116C (en) * 1989-02-23 2001-11-20 Thomas Weller Glycine derivatives
CA2021660A1 (en) 1989-07-26 1991-01-27 Philippe Bey Peptidase inhibitors
GB9017694D0 (en) 1990-08-13 1990-09-26 Sandoz Ltd Improvements in or relating to organic chemistry
IL99527A (en) 1990-09-28 1997-08-14 Lilly Co Eli Tripeptide antithrombotic agents
SE9003534D0 (sv) 1990-11-06 1990-11-06 Kabigen Ab A method for isolating and purifying peptides and proteins
JPH05503300A (ja) * 1990-11-15 1993-06-03 ペンタファルム　アクチェンゲゼルシャフト メタ置換フェニルアラニン誘導体
EP0503203A1 (en) 1991-03-15 1992-09-16 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Novel thrombin inhibitors
DE4115468A1 (de) 1991-05-11 1992-11-12 Behringwerke Ag Amidinophenylalaninderivate, verfahren zu deren herstellung, deren verwendung und diese enthaltende mittel als antikoagulantien
CA2075154A1 (en) 1991-08-06 1993-02-07 Neelakantan Balasubramanian Peptide aldehydes as antithrombotic agents
SE9102462D0 (sv) 1991-08-28 1991-08-28 Astra Ab New isosteric peptides
ZA928581B (en) 1991-11-12 1994-05-06 Lilly Co Eli Antithrombotic agents
SE9103612D0 (sv) 1991-12-04 1991-12-04 Astra Ab New peptide derivatives
ATE171709T1 (de) 1992-02-14 1998-10-15 Corvas Int Inc Inhibitoren der thrombose
JPH08501057A (ja) 1992-03-04 1996-02-06 ヂョヂセルクタトー インテーゼット カーエフテー 新規な抗凝結因子ペプチド誘導体及びそれを含有する製薬学的組成物及びその製造方法
FR2695562B1 (fr) 1992-09-11 1994-10-14 Synthelabo Utilisation d'un inhibiteur direct de la thrombine pour la fabrication d'un médicament à activité thrombolytique.
US5371072A (en) 1992-10-16 1994-12-06 Corvas International, Inc. Asp-Pro-Arg α-keto-amide enzyme inhibitors
AU675981B2 (en) 1992-12-02 1997-02-27 Bristol-Myers Squibb Company Guanidinyl-substituted heterocyclic thrombin inhibitors
US5783563A (en) * 1993-06-03 1998-07-21 Astra Aktiebolag Method for treatment or prophylaxis of venous thrombosis
SE9301916D0 (sv) * 1993-06-03 1993-06-03 Ab Astra New peptides derivatives
EP0648780A1 (en) 1993-08-26 1995-04-19 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclic thrombin inhibitors
CA2140598C (en) 1994-01-27 2010-03-09 Masahiro Ohshima Prolineamide derivatives
ZA951617B (en) 1994-03-04 1997-02-27 Lilly Co Eli Antithrombotic agents.
US5726159A (en) 1994-03-04 1998-03-10 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5705487A (en) 1994-03-04 1998-01-06 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5710130A (en) 1995-02-27 1998-01-20 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
GB2302231B (en) * 1995-03-14 1999-01-13 Matsushita Electric Industrial Co Ltd Speaker system

Also Published As

Publication number Publication date
FI965039A7 (fi) 1997-02-14
ZA954972B (en) 1996-12-17
PL317989A1 (en) 1997-05-12
CN1189476C (zh) 2005-02-16
NO965412D0 (no) 1996-12-16
US20060111553A1 (en) 2006-05-25
DE59510645D1 (de) 2003-05-22
HUT78040A (hu) 1999-06-28
HRP950338A2 (en) 1997-10-31
EP0773955A1 (de) 1997-05-21
PL181405B1 (pl) 2001-07-31
AU2787595A (en) 1996-01-15
EP0773955B1 (de) 2003-04-16
SI9520075A (en) 1997-06-30
MX9606521A (es) 1997-05-31
CN1154114A (zh) 1997-07-09
CA2193133A1 (en) 1995-12-28
IL114127A0 (en) 1995-10-31
TW458986B (en) 2001-10-11
NZ288591A (en) 1999-02-25
ATE237631T1 (de) 2003-05-15
HRP950338B1 (en) 2005-10-31
HU9603474D0 (en) 1997-02-28
NO965412L (no) 1997-02-14
CZ371396A3 (en) 1997-10-15
IL114127A (en) 2001-11-25
WO1995035309A1 (de) 1995-12-28
RU2172741C2 (ru) 2001-08-27
US20030004308A1 (en) 2003-01-02
DE4421052A1 (de) 1995-12-21
JPH10501541A (ja) 1998-02-10
ES2197200T3 (es) 2004-01-01
AU699501B2 (en) 1998-12-03
PT773955E (pt) 2003-09-30
US6455671B1 (en) 2002-09-24
FI965039L (fi) 1997-02-14
FI965039A0 (fi) 1996-12-16
SI9520075B (sl) 2005-02-28
BR9508057A (pt) 1997-08-12
DK0773955T3 (da) 2003-07-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6455671B1 (en) Thrombin inhibitors, the preparation and use thereof
RU2142469C1 (ru) Пептидные производные, их стереоизомеры или физиологически приемлемые соли, обладающие противотромбозной, противосвертывающей или противовоспалительной активностью, способ их получения, фармацевтическая композиция, способ подавления тромбина, способ подавления кининогеназ, применение соединений в качестве исходных в синтезе ингибитора тромбина
JP4089981B2 (ja) トロンビン阻害剤
US5780631A (en) Starting materials in the synthesis of thrombin and kininogenase inhibitors
JPH07109298A (ja) 複素環トロンビンインヒビター
SK104697A3 (en) Novel dipeptide amidines as thrombin inhibitors
KR100689923B1 (ko) 트롬빈 억제제
US7144902B1 (en) Prodrugs of thrombin inhibitors
US6984627B1 (en) Peptide derivatives
JPH10114741A (ja) トロンビン抑制剤用中間体の製造法
AU684086C (en) New peptide derivatives
CZ20002463A3 (cs) Nové inhibitory trombinu

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20060606