CZ36599A3

CZ36599A3 - Sloučeniny kyseliny neuraminové

Info

Publication number: CZ36599A3
Application number: CZ99365A
Authority: CZ
Inventors: Takeshi Honda; Yoshiyuki Kobayashi; Makoto Yamashita
Original assignee: Sankyo Company Limited
Priority date: 1996-08-13
Filing date: 1997-08-12
Publication date: 1999-06-16
Also published as: DK0934939T3; HUP9903632A3; NO990672D0; NZ334101A; NO990672L; EP0934939A4; AU3785897A; EP0934939B1; ATE239006T1; CZ293041B6; NO319321B1; HUP9903632A2; HU226130B1; IL128358A0; ES2198002T3; CN1232461A; IL128358A; HK1022687A1; RU2169145C2; CA2263336C

Description

Sloučeniny kyseliny neuraminové

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká sloučenin kyseliny neuraminové, které mají vynikající inhibiční účinky na sialidázu in vivo, a jejich farmaceuticky přijatelných solí. Vynález se týká přípravků na léčbu a prevenci chřipkových virových infekcí, které obsahují jako účinnou složku sloučeninu kyseliny neuraminové nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl, dále se týká použití těchto sloučenin pro přípravu léčiv na léčbu a prevenci chřipkových virových infekcí, způsobu léčby nebo prevence chřipkové virové infekce zpočívající podání farmaceuticky účinného množství těchto léčiv teplokrevným živočichům a způsobu přípravy.

Dosavadní stav techniky

Chřipka je onemocnění způsobené virovou infekcí. Součástí procesu rozmnožování chřipkového viru je disociace virových částic, které jsou přichyceny na povrchových buněčných strukturách. Virové částice jsou vázány na sialovou kyselinu buněčných povrchů hostitelských buněk pomocí hemaglutininu na povrchu virových částic. Virové částice disociují účinkem sialidázy přítomné na povrchu virových částic. Sialidáza štěpí kyselinu sialovou a vyvolává tak sekundární infekci okolních buněk. Inhibice sialidázy by mohla zabránit disociaci virových částic z buněčného povrchu a tím zamezit sekundární infekci. Proto látka s inhibičním účinkem na sialidázu může být účinná při léčbě a prevenci chřipkového onemocnění (výhodně léčbě).

Známé inhibitory sialidázy s kostrou kyseliny sialové (neuraminové) jsou popsány v WO 91/16320 (Japonská PCT přohláška (Kokai) č. Hei 5-507 068). Sloučenina A (GG-167) následujícího obecného vzorce, byla vyvinuta jako léčivo proti chřipce.

• · • · · · ♦ · • · · · · · · ····· · ··· ···

OH

CH₃

H s

COOH

Sloučenina A (GG-167)

Podstata vynálezu

Předkladatelé vynálezu provedli seriózní výzkum syntézy derivátu, který by měl vyšší terapeutické účinky proti chřipkové infekci než Sloučenina A (GG-167) popsaná v WO 91/16320 (Japonská PGT přihláška (Kokai) č. Hei 5-507 068) a výzkum jeho farmakologických účinků. Výsledkem jejich práce je zjištění, že acylderiváty hydroxylových skupin v polohách

7- a 8- a/nebo 9- a esterové deriváty karboxylové skupiny v poloze 1- Sloučeniny A vykazují vynikající inhibiční účinky in vivo na replikaci viru a inhibují sialidázu podobně jako Sloučenina A. Při podání myším infikovaným chřipkovým virem, vykazují lepší terapeutický účinek než Sloučenina A. Jsou potenciálním protichřipkovým lékem a splňují záměry předkládaného vynálezu.

Předkládaný vynález poskytuje derivát kyseliny neuraminové nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl, který má vynikající inhibiční účinky na sialidázu in vivo. Předkládaný vynález poskytuje přípravek na léčbu nebo prevenci chřipkové virové infekce obsahující tyto látky jako účinné složky, dále způsob použití těchto látek při přípravě léčiva na léčbu nebo prevenci chřipkové virové infekce, uvádí způsob léčby nebo prevence chřipkové virové infekce zahrnující podání farmaceuticky účinných dávek předkládaných sloučenin teplokrevným živočichům a poskytuje způsob přípravy.

• · • · · ' ·· ·· ► · · ► · · · · • · · ► · · · • · • · · • 999 9

Derivát kyseliny neuraminové předkládaného vynálezu je látka obecného vzorce 1:

(1) [kde R¹ je Ci - 4 alkyl, případně substituovaný halogenem; R², R³ a R⁴ jsou stejné nebo odlišné a jsou H, alifatický C3-25 acyl a W je H nebo esterový zbytek, za podmínky, že je vyloučen případ, kdy R¹ je methyl a R², R³, R⁴ a W jsou současně H].

Ve výše uvedeném vzorci 1 zahrnuje definice pro R¹Ci-4 alkyl, případně substituovaný halogenem např. skupiny methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, s-butyl a t-butyl, výhodně methyl.

Halogen ze skupiny R¹, podle definice C1-4 alkyl, případně substituovaný halogenem je například fluór, chlór a bróm, výhodně fluór.

Skupina R¹ dle definice Ci-4 alkyl, případně substituovaný halogenem je např. monofluormethyl, trifluormethyl, 1-fluorethyl, 2-fluorethyl, difluormethyl, 1-fluorpropyl,

3-fluorpropyl, 4-fluorbutyl, trichlormethy1, 1-chlorethyl, 2-chlorpropyl, 3-chlorpropyl, 1-bromethyl, 2-bromethyl,

3-brompropyl,

4-brombutyl a fluorem,

2-fluorpropyl, monochlormethyl, dichlormethyl,

2-chlorethyl, 1-chlorpropyl,

4-chlorbuty1, monohrommethy1,

1-brompropyl, 2-brompropyl, fluorchlormethyl, výhodně methyl substituovaný výhodněji monofluormethyl a difluormethyl.

Alkyl ze skupiny R¹, podle definice C1-4 alkyl, případně substituovaný halogenem je například výhodně methyl, případně substituovaný fluorem, výhodněji methyl, monofluormethyl a difluormethyl, nejvýhodněji methyl.

0 «0 • « «

0 0 0· «

0««

0«

Ve výše uvedeném vzorci 1 zahrnuje definice pro R², R³a R⁴ alifatický C3-25 acyl např. alkylkarbonylové skupiny jako propionyl, butyryl, isobutyryl, pentanoyl, pivaloyl, valeryl, isovaleryl, oktanoyl, nonylkarbony1, decylkarbonyl,

3-methylnonylkarbonyl, 8-methylnonylkarbony1, 3-ethyloktylkarbonyl, 3,7-dimethyloktylkarbonyl, undecylkarbonyl, dodecylkarbony1, tridecylkarbonyl, tetradecylkarbonyl, pentadecylkarbony1, hexadecylkarbonyl, 1-methylpentadecylkarbonyl, 14-methylpentadecylkarbonyl, 13,13-dimethylpentadecylkarbonyl, heptadecylkarbonyl, 15-methylhexadecylkarbonyl, oktadecylkarbonyl, 1-methylheptadecylkarbonyl, nonadecylkarbonyl, eikosylkarbonyl, trikosylkarbonyl a tetrakosylkarbonyl, výhodně alifatický Ce-25 acyl, výhodněji alifatický C6-20 acyl, zvláště výhodně hexanoyl, oktanoyl, dekanoyl, dodekanoyl, myristoyl, palmitoyl nebo stearoyl.

R², R³ a R⁴ jsou výhodně H nebo alifatický Ce-25 acyl, výhodněji H nebo alifatický C6-20 acyl, zvláště výhodně H nebo hexanoyl, oktanoyl, dekanoyl, dodekanoyl, myristoyl, palmitoyl nebo stearoyl.

Vhodné kombinace R², R³ a R⁴ jsou:

(a) kombinace, kde R² je alifatický C3-25 acyl (výhodně alifatický Ce-25 acyl, výhodněji alifatický Ce-2o acyl, zvláště výhodně hexanoyl, oktanoyl, dekanoyl, dodekanoyl, myristoyl, palmitoyl nebo stearoyl) a R³ a R⁴ jsou H;

(h) kombinace, kde R³ je alifatický C3-25 acyl (výhodně alifatický Ce-25 acyl, výhodněji alifatický Ce-20 acyl, zvláště výhodně hexanoyl, oktanoyl, dekanoyl, dodekanoyl, myristoyl, palmitoyl nebo stearoyl) a R² a R⁴ jsou H;

(c) kombinace, kde R⁴ je alifatický C3-25 acyl (výhodně alifatický Ce-25 acyl, výhodněji alifatický C6-20 acyl, zvláště výhodně hexanoyl, oktanoyl, dekanoyl, dodekanoyl, myristoyl, palmitoyl nebo stearoyl) a R² a R³ jsou H;

(d) kombinace, kde R² a R³ jsou alifatický C3-25 acyl (výhodně alifatický Ce-25 acyl, výhodněji alifatický Ce-20 acyl, zvláště výhodně hexanoyl, oktanoyl, dekanoyl, dodekanoyl, myristoyl, palmitoyl nebo stearoyl) a R⁴ je H;

(e) kombinace, kde R² a R⁴ jsou alifatický C3-25 acyl (výhodně • · · · • · · 0 • · · · · · · • 0

0 0*

Ce-20 acyl, dodekanoyl, alifatický Ce-25 acyl, výhodněji alifatický zvláště výhodně hexanoyl, oktanoyl, dekanoyl, myristoyl, palmitoyl nebo stearoyl) a R³ je H;

(f) kombinace, kde R³ a R⁴ jsou alifatický C3-25 acyl (výhodně alifatický Ce-25 acyl, výhodněji alifatický C6-20 acyl, zvláště výhodně hexanoyl, oktanoyl, dekanoyl, dodekanoyl, myristoyl, palmitoyl nebo stearoyl) a R² je H;

(g) kombinace, kde R², R³ a R⁴ jsou alifatický C3-25 acyl (výhodně alifatický Ce-25 acyl, výhodněji alifatický Ce-20 acyl, zvláště výhodně hexanoyl, oktanoyl, dekanoyl, dodekanoyl, myristoyl, palmitoyl nebo stearoyl); a (h) kombinace, kde R², R³ a R⁴ jsou H.

Z uvedených kombinací jsou výhodné (a) a (h).

Ve výše uvedeném vzorci 1 zahrnuje definice pro W esterový zbytek např. alkyl jako methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, s-butyl, isobutyl, s-butyl, t-butyl, n-pentyl, isopentyl, 2-methylbuty1, neopentyl, 1-ethylpropyl, n-hexyl, isohexyl, 4-methylpentyl, 3-methylpentyl, 2-methylpentyl,

3,3-dimethylbuty1, 1,2-dimethylbuty1,

2.2- dimethylbuty1,

1.3- dimethylbutyl,

1-methylpentyl, 1,1-dimethylbutyl, 2,3-dimethylbutyl,

2-ethylbutyl, 1-methylhexyl, 2-methylhexyl

4-methylhexyl,

4.4- dimethylpěntyl, 3-methylheptyl, 6-methylheptyl,

5.5- dimethylhexy1,

5-methylhexy1, oktyl, 1-methylheptyl,

4-methylheptyl, 1-prpylpentyl, nonyl, 3-methyloktyl, 5-methyloktyl, 6-methylokty1, 1-propylhexyl 6,6-dimethylheptyl, decyl, 1-methylnonyl,

3-methylhexyl,

1- propylbutyl, 2-methylheptyl, 5-methylheptyl,

2-ethylhexyl, 4-methylokty1,,

2- ethylheptyl,

3- methylnonyl,

3-ethyloktyl, 3,7-dimethylokty1, undecyl, 4m8-dimethylnonyl, dodecyl, tridecyl, tetradecyl, pentadecyl, 3,7,11-trimethyldodecy1, hexadecyl, 4,8,12-trimethyltridecyl, 1-methylpentadecy1,

14- methylpentadecy1, 13,13-dimethyltetradecyl, heptadecyl,

15- methylhexadecyl, oktadecyl, 1-methylheptadecyl, nonadecyl, eikosyl, 3,7,11,15-tetramethylhexadecyl, heneikosyl, dokosyl.

8-methylnonyl,

7,7-dimethylokty1, ·· ·· l Φ Φ φ » φ · φ • φ φ φφφ φ φ φ φ φφ trikosyl a tetrakosyl;

alkenyl, jako ethenyl, 1-propenyl, 2-propenyl,

1- methyl-2-propenyl, 1-methyl-l-propenyl, 2-methyl-l-propenyl, 2-methy1-2-propenyl, 2-ethyl-2-propenyl, 1-butenyl,

2- butenyl, l-methyl-2-butenyl, 1-methyl-l-butenyl,

3- methyl-2-butenyl, 1-ethy1-2-butenyl, 3-butenyl, l-methyl-3-butenyl, 2-methy1-3-buteny1, l-ethyl-3-buteny1,

2-pentenyl,

3- pentenyl,

4- pentenyl, 1-hexenyl, l-methyl-2-pentenyl, l-methyl-3-pentenyl, l-methyl-4-pentenyl, 2-hexenyl, 3-hexenyl,

1- pentenyl,

2- methyl-2-pentenyl,

2-methyl-3-pentenyl,

2-methyl-4-pentenyl,

4-hexenyl a 5-hexenyl;

alkinyl, jako ethinyl, 2-propinyl, 1-methy1-2-propiny1,

2- methyl-2-propinyl, 2-ethyl-2-propinyl, 2-butinyl, l-methyl-2-butinyl, 2-methy1-2-butinyl, 1-ethy1-2-butinyl,

3- butinyl, l-methyl-3-butinyl,

2-methyl-3-butinyl, l-methyl-2-pentinyl, l-methyl-3-pentinyl, l-methyl-4-pentinyl, 3-hexinyl, 4-hexinyl

1- ethyl-3-butinyl,

2- methyl-2-pentinyl,

2-methyl-3-pentinyl,

2-methyl-4-pentinyl, a 5-hexinyl;

nižší halogenalky1, jako trifluormethyl, trichlormethyl, difluormethyl, dichlormethyl, dibrommethyl, fluormethyl, 2,2,2-trifluorethy1, 2,2,2-trichlorethyl, 2-bromethyl,

2-chlorethyl, 2-fluorethyl, 2-jodethyl, 3-chlorpropyl,

4-fluorpropyl, 6-jodhexyl a 2,2-dibromethyl;

hydroxyalkyl, jako

2-pentinyl,

3- pentinyl,

4- pentinyl, 2-hexinyl,

2-hydroxyethyl, nižší

2,3-dihydroxypropyl, a 4-hydroxybutyl;

alifatický acyl s nižším alkylem, jako acetrylmethyl; nižší alkyl substituovaný 1 až 3 aryly, jako benzyl, fenethyl, 3-fenylpropy1, α-naftylmethyl, β-naftylmethyl, difenylmethyl, trifenylmethyl, 6-fenylhexyl, α-naftyldifenylmethyl, 9-anthrylmethyl;

aralkyl, kde arylová část je substituována nižším alkylem, nižším alkoxylem, nitro, halogenem, kyano nebo alkoxykarbonylem, jako 4-methylbenzyl, 2,4,6-trimethylbenzyl,

3-hydroxypropyl,

3,4-dihydroxybuty1 ·· ·· ·« * • ::.. :::. ::í: : -:: : ·: : ··:♦ · ··· ··· ·· ·· »· . ». .»

1- ethoxyethyl,

2- methoxyethyl, ethoxymethyl,

3,4,5-trimethylbenzyl, 4-methoxybenzyl, 4-methoxyfenyldifenylmethyl, 2-nitrobenzyl, 4-nitrobenzyl, 4-chlorbenzyl,

4-brombenzy1, 4-kyanobenzy1, 4-kyanobenzyldifenylmethyl, bis(2-nitrofenyl)methyl, piperonyl a 4-methoxykarbonylbenzy1;

tri(alkyl a/nebo fenyl)silyl, jako trimethylsilyl, triethylsilyl, isopropyldimethylsily1, t-butyldimethylsilyl, methyldiisopropylsilyl, methyldi-t-butylsilyl, triisopropylsilyl, methyldifenylsilyl, isopropyldifenylsilyl, butyldifenylsilyl a fenyldiisopropylsilyl;

chránící skupina odštěpitelná biologickou hydrolýzou in vivo, tj. ester hydrolyzovaný in vivo na volnou kyselinu nebo její sůl, např. nižší alkoxy nižší alkyl jako methoxymethy1, 1-methy1-1-methoxyethy1, 1-(i sopropy1)ethyl,

12-ethoxyethyl, 1,1-dimethyl-l-methoxymethyl, n-propoxymethy1, isopropoxymethyl,

2-butoxymethyl a t-butoxymethy1;

nižší alkoxy nižší alkoxy nižší alkyl jako 2-methoxyethoxymethyl;

aryloxy nižší alkyl jako fenoxymethyl;

halogenovaný nižší alkoxy nižší alkyl jako 2,2,2-trlchlorethoxymethyl a bis(2-chlorethoxyjmethyl;

nižší alkoxykarbonyl nižší alkyl jako methoxykarbonylmethyl;

kyano nižší alkyl jako kyanomethyl a kyanoethyl;

nižší alkylthiomethyl jako methylthiomethyl a ethylthiomethyl ;

arylthiomethyl jako fenylthiomethyl a naftylthiomethyl; nižší alkylsulfonyl nižší alkyl případně substituovaný halogenem jako 2-methansulfonylethy1 a 2-trofluormethansulfonylethy1;

arylsulfonyl nižší alkyl jako 2-benzensulfonylethy1 a 2-toluensulfonylethyl;

alifatický acyloxy nižší alkyl jako formyloxymethyl, acetoxymethy1, propionyloxymethyl, pivaloyloxymethyl, valeryloxymethyl, hexanoyloxymethyl, 1-formyloxyethy1,

1-propionyloxyethyl, 1-butyryloxyethyl, butyryloxymethyl, isovaleryloxymetbyl, 1-acetoxyethyl, 1-pivaloyloxyethyl, *· ·* ** * ** • * · 9 9 < ·» » · · ί · *·· ♦ · 9 9 9 9 9 9 • · · · * · · ··*· 9 ··« ··· • · 9 »· 9 9 ·*

1- valeryloxyethyl,

2- formyloxyethyl, 2-butyryloxyethyl,

2-isovaleryloxyethyl,

1-isovaleryloxyethyl, 2-acetoxyethy1, 2-pivaloyloxyethyl, 2-hexanoyloxyethyl,

1-hexanoyloxyethyl, 2-propionyloxyethyl, 2-valeryloxyethyl,

1-acetoxypropyl, 1-propionyloxypropy1,

1-pivaloyloxypropyl, 1-valeryloxypropyl, propyl, 1-hexanoyloxypropyl,

1-propionyloxybutyl, 1-butyryloxybutyl,

1-acetoxypentyl, 1-propionyloxypentyl, 1-pivaloyloxypentyl a 1-pivaloyloxyhexyl;

1-formyloxypropyl, 1-butyryloxypropyl, 1-lsovaleryloxy1-acetoxybutyl, 1-pivaloyloxybutyl, 1-butyryloxypentyl, cyk1oalkylkarbony1oxy cyklopentanoyloxymethyl, cyklopentanoyloxyethyl, cyklopentanoyloxypropyl, nižší alkyl jako cyklohexanoyloxymethyl, cyklohexanoyloxyethy1, cyklohexanoyloxypropyl, cyklopentanoyloxybutyl a cyklohexanoyloxybutyl;

arometický acyloxy nižší alkyl jako benzoyloxymethyk;

(alkoxykarbonyloxy)alkyl ethoxykarbonyloxymethyl, isopropoxykarbonyloxymethyl, isobutoxykarbonyloxymethylm hexyloxykarbonyloxymethyl, cyklohexyloxykarbonyloxy(cyklohexyl)methyl, jako methoxykarbonyloxymethyl, propoxykarbonyloxymethyl, butoxykarbonyloxymethyl, pentyloxykarbonyloxymethyl, cyklohexyloxykarbonyloxymethyl, l-(methoxykarbonyloxy)ethyl, l-(propoxykarhonyloxy)ethyl, l-(butoxykarbonyloxy)ethyl,

1-(t-hutoxykarbonyloxy)ethyl, 1-(hexyloxykarbonyloxy)ethyl, l-(ethoxykarbonyloxy)ethyl, 1 —(isopropoxykarbonyloxy)ethyl, 1-(isobutoxykarhonyloxy)ethyl, l-(pentyloxykarhonyloxy)ethyl, 1-(cyklopentyloxykarbonyloxy) ethyl, l-(cyklopentyloxykarbonyloxy)propyl, l-(cyklohexyloxykarbonyloxy)propyl, 1-(cyklopentyloxykarbonyloxy)butyl, 1-(cyklohexyloxykarbonyloxy)butyl,

1-(cyklohexyloxykarbonyloxy)ethyl,

1- (ethoxykarbonyloxy)propyl,

2- (ethoxykarbonyloxy)ethyl,

2-(i sopropoxykarbonyloxy)ethyl, 2-(isobutoxykarhonyloxy)ethyl, 2-(hexyloxykarbonyloxy)ethyl, l-(ethoxykarbonyloxy)propyl,

2-(methoxykarbonyloxy)ethyl, 2-(propoxykarbonyloxy)e thy1,

2-(butoxykarbonyloxy)ethyl, 2-(pentyloxykarbonyloxy)ethyl, l-(methoxykarbonyloxy)propyl, l-(propoxykarbonyloxy)propyl, ·· ·

1-(isopropoxykarbonyloxy)propyl, 1-(butoxykarbonyloxy)propyl, l-(isobutoxykarbonyloxy)propyl, l-(pentyloxykarbonyloxy)propyl, 1-(hexyloxykarbonyloxy)propyl, l-(methoxykarbonyloxy)butyl, l-(propoxykarbonyloxy)hutyl,

1-(butoxykarbonyloxy)butyl,

1-(methoxykarbonyloxy)pentyl, l-(ethoxykarbonyloxy)pentyl,

1-(ethoxykarbonyloxy)hexy1;

oxodioxolenylmethyl jako l-(ethoxykarbonyloxy)butyl, l-(isopropoxykarbonyloxy)butyl, 1-(isobutoxykarbonyloxy)butyl, 1-(ethoxykarbonyloxy)pentyl, l-(methoxykarbonyloxy)hexyl (5-fenyl-2-oxo-l,3-dioxolen-4-yl)methyl, [5-(4-methylfenyl)-2-oxo-l,3-dioxolen-4-yl]methyl, [5-(4-methoxyfenyl)-2-oxo-l,3-dioxolen~4-yl]methyl, [5-(4-fluorfenyl)-2-oxo-l,3-dioxolen-4-y1]methyl, [5-(4-chlorfenyl)-2-oxo-l,3-dioxolen-4-ylJmethyl, (2-oxo-l,3-dioxolen-4-yl)methyl, (5-methyl-2-oxo-1,3-dioxolen-4-yl)methyl, (5-ethyl-2-oxo-l,3-dioxolen-4-y1)methyl, (5-propyl-2-oxo-l,3-dioxolen-4-yl)methyl, (5-isopropyl-2-oxo-l,3-dioxolen-4-yl)methyl, (5-butyl-2-oxo-l,3-dioxolen-4-yl)methyl;

ftalidyl jako ftalidyl, dimethylftalidyl a dimethoxyftalidyl;

aryl jako fenyl a indanyl; a karboxyalkyl jako karboxymethyl, výhodně alkyl, výhodněji Ci -1 β alkyl.

V případě, že nejméně jedna ze skupin R^z, R³ nebo R⁴ je alifatický C3- 25 acyl, je esterový zbytek W výhodně C1-1β alkyl. V tomto případě je W jako celek výhodně H nebo C1- 1β alkyl, výhodněji H.

V případě, že všechny skupiny R², R³ a R⁴ jsou H, je esterový zbytek W výhodně C1-1 a alkyl, výhodněji Ce-ie alkyl. V tomto případě je W jako celek výhodně esterový zbytek, výhodněji výhodněji Ce -1 β alkyl.

Farmaceuticky přijatelné soli uvedených látek zahrnují soli alkalických kovů jako jsou sodné, draselné a lithné; soli kovů alkalických zemin jako jsou vápenaté a hořečnaté; soli

I 00 • ·

0 0 0

0 aminů jako glukosaminu, kovů např. hliníku, železa, měčfi, niklu, kobaltu; soli anorganických aminů jako jsou soli amonné; soli organických t-oktylaminu, dibenzylaminu, morfolinu, fenylglycinalkylesteru, ethylendiaminu,

N-methylglukaminu, guanidinu, diethylaminu, triethylaminu, dicyklohexylaminu, N,N'-dibenzylethylendiaminu, chlorprokainu, prokainu, diethanolaminu, N-benzylfenethylaminu, piperazinu, tetramethylamonia, tris(hydroxymethyl)aminomethanu; soli halogenkyselin jako je fluorovodíková, chlorovodíková, bromovodíková a jodovodíková; soli anorganických kyselin jako nitrát, perchlorát, sulfát a fosfát; soli organických kyselin včetně nižších alkansulfonátů jako methansulfonát;

triflurmethansulfonát a ethansulfonát, arylsulfonáty jako benzensulfonát a p-toluensulfonát, acetát, trifluoracetát, malát, fumarát, sukcinát, citrát, tartarát, oxalát a maleát; soli aminokyselin jako jsou glycin, lysin, arginin, ornitin, glutamát a aspartát. Výhodné jsou soli alkalických kovů lithné) a organických kyselin (acetát, anorganických kyselin (hydrochlorid (sodné, draselné a trifluoracetát) a a sulfát).

Výhodné sloučeniny sloučeniny, kde:

(1) R¹ je methyl případně substituovaný fluorem, (2) R¹ je methyl, monofluormethyl nebo difluormethyl, (3) R¹ je methyl, (4) R² je H nebo alifatický Ce-25 acyl, (5) R² je H nebo alifatický Ce-20 acyl, (6) R² je H nebo hexanoyl, oktanoyl, dekanoyl, dodekanoyl, myristoyl, palmitoyl nebo stearoyl, (7) R³ je H nebo alifatický Ce-25 acyl, (8) R³ je H nebo alifatický Ce-20 acyl, (9) R² je H nebo hexanoyl, oktanoyl, dekanoyl, dodekanoyl, myristoyl, palmitoyl nebo stearoyl, (10) R⁴ je H nebo alifatický Ce-25 acyl, (11) R⁴ je H nebo alifatický Ce-20 acyl, (12) R⁴ je H nebo hexanoyl, oktanoyl, dekanoyl, dodekanoyl, myristoyl, palmitoyl nebo stearoyl, předkládaného vynálezu zahrnují • ·

(13)	R² je alifatický C3-25	acyl a	R³	a R⁴	jsou	současně H,
(14)	R² je alifatický Ce-25	acyl a	R³	a R⁴	jsou	současně H,
(15)	R² je alifatický Ce-20	acyl a	R³	a R⁴	jsou	současně H,
(16)	R² je hexanoyl,	oktanoyl,	dekanoyl,	dodekanoyl,
myristoyl, palmitoyl nebo stearoyl,	a	R³ a	R⁴ jsou současně H,
(17)	W je H nebo C1 - 1 β alkyl	Z
(18)	W je H,
(19)	W je esterový zbytek,
(20)	ff je Ce-18 alkyl.
	Dále ze sloučenin získaných	kombinací substituentů R¹ ,

R², R³ , R⁴ a W zvolených mezi body (1) až (20) jsou výhodnější sloučeniny, kde:

(21) R², R³ a R⁴ jsou H a W je esterový zbytek, (22) R², R³ a R⁴ jsou H a W je Ce -1 β alkyl, (23) R¹ je methyl případně substituovaný fluorem, R² je alifatický C3-25 acyl a R³ a R⁴ jsou současně H a W je esterový zbytek, (24) R¹ je methyl, R² je alifatický C6-25 acyl a R³ a R⁴ jsou současně H a W je H nebo Ce-1β alkyl, (25) R¹ je methyl, R² je alifatický C6-20 acyl a R³, R⁴a ff jsou současně H, (26) R¹ je methyl případně substituovaný fluorem, R², R³ a R⁴jsou současně H a W je esterový zbytek, (27) R¹ je methyl, R², R³ a R⁴ jsou současně H a ff je Ce-ie alkyl.

Následují příklady vynález nevymezují pouze předkládaných i lustruj i.

sloučenin vynálezu,

- 11a • · · · » · © » · · · · » · · 1 > · · 4 • · · · ·· ·

Tabulka 1

č.	R¹	R²	R³	R⁴	W
1	ch₃	H	H	H	H
2	ch₃	H	H	CH₃CO	H
3	ch₃	H	H	CH₃(CH₂)₅CO	H
4	ch₃	H	H	CH₃(CH₂)i₀CO	H
5	ch₃	H	H	CH₃(CH₂)₁₃CO	H
6	ch₃	H	H	CH₃(CH₂)₁₅CO	H
7	ch₃	H	H	CH₃(CH₂)₁₇CO	H
8	ch₃	H	H	CH₃(CH₂)₂,CO	H
9	ch₃	H	ch₃co	H	H
10	ch₃	H	ch₃ch₂co	H	H
11	ch₃	H	CH₃(CH₂)₂CO	H	H
12	ch₃	H	CH₃(CH₂)₃CO	H	H

13	ch₃	H	CH₃(CH₂)₄CO	H	H
14	ch₃	H	CH₃(CH₂)₅CO	H	H
15	ch₃	H	CH₃(CH₂)₆CO	H	H
16	ch₃	H	CH₃(CH₂)₈CO	H	H
17	ch₃	H	CH₃(CH₂)_í0CO	H	H
18	ch₃	H	CH₃(CH₂),₂CO	H	H
19	ch₃	H	CH₃(CH₂)i₄GO	H	H
20	ch₃	H	CH₃(CH₂)j₆CO	H	H
21	ch₃	H	CH₃(CH₂)₁₈CO	H	H
22	ch₃	H	CH₃(CH₂)₂oCO	H	H
23	ch₃	H	CH₃(CH₂)₂₂CO	H	H
24	ch₃	H	CH₃(CH₂)₄CO	ch₃co	H
25	ch₃	H	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₅CO	H
26	ch₃	H	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₀CO	H
27	ch₃	H	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₃CO	H
28	ch₃	H	CH₃(CH₂)₁₂CO	ch₃co	H
29	ch₃	H	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₅CO	H
30	ch₃	H	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)ioCO	H
31	ch₃	H	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₁₃CO	H
32	ch₃	CH₃CO	H	H	H
33	ch₃	ch₃ch₂co	H	H	H
34	ch₃	CH₃(CH₂)₂CO	H	H	H
35	ch₃	CH₃(CH₂)₃CO	H	H	H
36	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	H	H	H
37	ch₃	CH₃(CH₂)₅CO	H	H	H
38	ch₃	CH₃(CH₂)₆CO	H	H	H
38a	ch₃	CH₃(CH₂)₇CO	H	H	H
39	ch₃	CH₃(CH₂)₈CO	H	H	H
39a	ch₃	CH₃(CH₂)₉CO	H	H	H

• fc ·

	13	• · • · · • fcfc • fcfc • · · • ·	fcfc fcfc · ·· <· • · · · · · · *· · ··· · ·· · • fcfc · ···· · ··· ··· • fcfc · · · • fc fcfc fc ·· · ·
40	ch₃	CH₃(CH₂),oCO	H	H	H
40a	ch₃	CH₃(CH₂)uCO	H	H	H
41	ch₃	CH₃(CH₂)₁₂CO	H	H	H
41a	ch₃	CH₃(CH₂)i₃CO	H	H	H
42	ch₃	CH₃(CH₂)₁₄CO	H	H	H
42a	ch₃	CH₃(CH₂)₁₅CO	H	H	H
43	ch₃	CH₃(CH₂),₆CO	H	H	H
43a	ch₃	CH₃(CH₂)i₇CO	H	H	H
44	ch₃	CH₃(CH₂)₁₈CO	H	H	H
44a	ch₃	CH₃(CH₂)₁₉CO	H	H	H
45	ch₃	CH₃(CH₂)₂oCO	H	H	H
45a	ch₃	CH₃(CH₂)₂iCO	H	H	H
45b	ch₃	CH₃(CH₂)₂₂CO	H	H	H
45c	ch₃	CH₃(CH₂)₂₃CO	H	H	H
46	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	H	CH₃CO	H
47	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	H	CH₃(CH₂)₅CO	H
48	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	H	CH₃(CH₂)ioCO	H
49	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	H	CH₃(CH₂)₁₃CO	H
50	ch₃	CH₃(CH₂)i₂CO	H	ch₃co	H
51	ch₃	CH₃(CH₂)₁₂CO	H	CH₃(CH₂)₅CO	H
52	ch₃	CH₃(CH₂)i₂CO	H	CH₃(CH₂)ioCO	H
53	ch₃	CH₃(CH₂)_i2CO	H	CH₃(CH₂)₁₃CO	H
54	ch₃	ch₃co	CH₃CO	H	H
55	ch₃	ch₃ch₂co	ch₃ch₂co	H	H
56	ch₃	CH₃(CH₂)₂CO	CH₃(CH₂)₂CO	H	H
57	ch₃	CH₃(CH₂)₃CO	CH₃(CH₂)₃CO	H	H,
58	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	H	H
59	ch₃	CH₃(CH₂)₅CO	CH₃(CH₂)₅CO	H	H
60	ch₃	CH₃(CH₂)₆CO	CH₃(CH₂)₆CO	H	H

·· ·· • 9 9

9 9 99

9 9 9

9 9 9 ♦ · • ·· · ·

61	ch₃	CH₃(CH₂)₈CO	CH₃(CH₂)₈CO	H	H
62	ch₃	CH₃(CH₂),oCO	CH₃(CH₂)₁₀CO	H	H
63	ch₃	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₁₂CO	H	H
64	ch₃	CH₃(CH₂)₁₄CO	CH₃(CH₂)i₄CO	H	H
65	ch₃	CH₃(CH₂)i₆CO	CH₃(CH₂)i₆CO	H	H
66	ch₃	CH₃(CH₂)i₈CO	CH₃(CH₂)₁₈CO	H	H
67	ch₃	CH₃(CH₂)₂₀CO	CH₃(CH₂)₂oCO	H	H
68	ch₃	CH₃(CH₂)₂₂CO	CH₃(CH₂)₂₂CO	H	H
69	ch₃	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₆CO	H	H
70	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₂CO	H	H
71	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	ch₃co	H
72	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₅CO	H
73	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₁₀CO	H
74	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₁₃CO	H
75	ch₃	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₁₂CO	ch₃co	H
76	ch₃	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₅CO	H
77	ch₃	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)ioCO	H
78	ch₃	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)i₃CO	H
79	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₁₂CO	CHjCOO	H
80	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₅CO	H
81	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂),₂CO	CH₃(CH₂)₁₀CO	H
82	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₁₃CO	H
83	ch₃	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₄CO	ch₃co	H
84	ch₃	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₅CO	H
85	ch₃	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)ioCO	H
86	ch₃	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₃CO	H „
87	ch₃	H	H	H	(CH₂)₅CH₃
87a	ch₃	H	H	H	(CH₂)₆CH₃
87b	ch₃	H	H	H	(CH₂)₇CH₃

♦ ♦ · ·· ·· • · · · • · · · • · · · · · • ·

87c	ch₃	H	H	H	(CH₂)₈CH₃
87d	ch₃	H	H	H	(CH₂)₉CH₃
87e	ch₃	H	H	H	(CH₂),oCH₃
87f	ch₃	H	H	H	(CH₂)„CH₃
87g	ch₃	H	H	H	(CH₂)₁₂CH₃
88	ch₃	H	H	H	(CH₂)₁₃CH₃
88a	ch₃	H	H	H	(CH₂)mCH₃
89	ch₃	H	H	H	(CH₂)₁₅CH₃
90	ch₃	H	H	H	(CH₂)₁₆CH₃
91	ch₃	H	H	H	(CH₂)i₇CH₃
92	ch₃	H	H	H	(CH₂)i₈CH₃
92a	ch₃	H	H	H	(CH₂)_wCH₃
93	ch₃	H	H	H	(CH₂)₂oCH₃
94	ch₃	H	H	H	(CH₂)₂₁CH₃
94a	ch₃	H	H	H	(CH₂)₂₂CH₃
94b	ch₃	H	H	H	(CH₂)₂₃CH₃
95	ch₃	H	H	CH₃(CH₂)₅CO	(CH₂)₅CH₃
96	ch₃	H	H	CH₃(CH₂)₁₀CO	(CH₂)₁₃CH₃
97	ch₃	H	H	CH₃(CH₂)₁₃CO	(CH₂)₅CH₃
98	ch₃	H	H	CH₃(CH₂)i₅CO	(CH₂)₁₃CH₃
99	ch₃	H	H	CH₃(CH₂)₁₇CO	(CH₂)₅CH₃
100	ch₃	H	H	CH₃(CH₂)₂iCO	(CH₂)₁₃CH₃
101	ch₃	H	CH₃CO	H	(CH₂)₅CH₃
102	ch₃	H	ch₃ch₂co	H	(CH₂)_í3CH₃
103	ch₃	H	CH₃(CH₂)₂CO	H	(CH₂)₅CH₃
104	ch₃	H	CH₃(CH₂)₃CO	H	(CH₂)₁₃CH₃
105	ch₃	H	CH₃(CH₂)₄CO	H	(CH₂)₅CH₃
106	ch₃	H	CH₃(CH₂)₅CO	H	(CH₂)i₃CH₃
107	ch₃	H	CH₃(CH₂)₆CO	H	(CH₂)₅CH₃

108	ch₃	H	CH₃(CH₂)«CO	H	(CH₂)₁₃CH₃
109	ch₃	H	CH₃(CH₂),oCO	H	(CH₂)₅CH₃
110	ch₃	H	CH₃(CH₂)i₂CO	H	(CH₂)₁₃CH₃
111	ch₃	H	CH₃(CH₂)₁₄CO	H	(CH₂)₅CH₃
112	ch₃	H	CH₃(CH₂)₁₆CO	H	(CH₂)₁₃CH₃
113	ch₃	H	CH₃(CH₂)₁₈CO	H	(CH₂)₅CH₃
114	ch₃	H	CH₃(CH₂)₂₀CO	H	(CH₂)₁₃CH₃
115	ch₃	H	CH₃(CH₂)₂₂CO	H	(CH₂)₅CH₃
116	ch₃	H	CH₃(CH₂)₄CO	gh₃co	(CH₂)₁₃CH₃
117	ch₃	H	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₅CO	(CH₂)₅CH₃
118	ch₃	H	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)ioCO	(CH₂)i₃CH₃
119	ch₃	H	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₁₃CO	(CH₂)₅CH₃
120	ch₃	H	CH₃(CH₂)i₂CO	ch₃co	(CH₂)₁₃CH₃
121	ch₃	H	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₅CO	(CH₂)₅CH₃
122	ch₃	H	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)ioCO	(CH₂)_I3CH₃
123	ch₃	H	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)i₃CO	(CH₂)₅CH₃
124	ch₃	CH₃CO	H	H	(CH₂)₁₃CH₃
125	ch₃	ch₃ch₂co	H	H	(CH₂)₅CH₃
126	ch₃	CH₃(CH₂)₂CO	H	H	(CH₂)₁₃CH₃
127	ch₃	CH₃(CH₂)₃CO	H	H	(CH₂)₅CH₃
128	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	H	H	(CH₂)₁₃CH₃
129	ch₃	CH₃(CH₂)₅CO	H	H	(CH₂)₅CH₃
130	ch₃	CH₃(CH₂)₆CO	H	H	(CH₂)₁₃CH₃
131	ch₃	CH₃(CH₂)₈CO	H	H	(CH₂)₅CH₃
132	ch₃	CH₃(CH₂),oCO	H	H	(CH₂)i₃CH₃
133	ch₃	CH₃(CH₂),₂CO	H	H	(ch₂)₅ch₃
134	ch₃	CH₃(CH₂)i₄CO	H	H	(CH₂)i₃CH₃
135	ch₃	CH₃(CH₂)₁₆CO	H	H	(CH₂)₅CH₃
136	ch₃	CH₃(CH₂)₁₈CO	H	H	(CH₂)₁₃CH₃

• · 0

0« 00 • 0 0 • 0 0 0 0

0·

0 0 0

00 • 0 0 00 00

0 0 0 0 0

0 0 0 0 0 0

00000 0 000 000

0 0 0 0 « 0 0 0 0 0 0

137	ch₃	CH₃(CH₂)₂₀CO	H	H	(CH₂)₅CH₃
138	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	H	ch₃co	(CH₂)₁₃CH₃
139	gh₃	CH₃(CH₂)₄CO	H	CH₃(CH₂)₅CO	(CH₂)₅CH₃
140	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	H	CH₃(CH₂)ioCO	(CH₂)₁₃CH₃
141	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	H	CH₃(CH₂)₁₃CO	(CH₂)₅CH₃
142	ch₃	CH₃(CH₂)₁₂CO	H	ch₃co	(CH₂)i₃CH₃
143	ch₃	CH₃(CH₂)i₂CO	H	CH₃(CH₂)₅CO	(CH₂)₅CH₃
144	ch₃	CH₃(CH₂)₁₂CO	H	CH₃(CH₂)₁₀CO	(CH₂)₁₃CH₃
145	ch₃	CH₃(CH₂)₁₂CO	H	CH₃(CH₂)₁₃CO	(CH₂)₅CH₃
146	ch₃	ch₃co	CH₃CO	H	(CH₂)₁₃CH₃
147	ch₃	ch₃ch₂co	ch₃ch₂co	H	ch₃
148	ch₃	CH₃(CH₂)₂CO	CH₃(CH₂)₂CO	H	(CH₂)₅CH₃
149	ch₃	CH₃(CH₂)₃CO	CH₃(CH₂)₃CO	H	(CH₂),_oCH₃
150	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	H	(CH₂)₁₃CH₃
151	ch₃	CH₃(CH₂)₅CO	CH₃(CH₂)₅CO	H	(CH₂)i₅CH₃
152	ch₃	CH₃(CH₂)₆CO	CH₃(CH₂)₆CO	H	(CH₂)₁₇CH₃
153	ch₃	CH₃(CH₂)₈CO	CH₃(CH₂)₈CO	H	(CH₂)₂₁CH₃
154	ch₃	CH₃(CH₂)₁₀CO	CH₃(CH₂)₁₀CO	H	ch₃
155	ch₃	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)i₂CO	H	(CH₂)₅CH₃
156	ch₃	CH₃(CH₂)₁₄CO	CH₃(CH₂)₁₄CO	H	(CH₂)_1oCH₃
157	ch₃	CH₃(CH₂)₁₆CO	CH₃(CH₂)₁₆CO	H	(ch₂)₁₃ch₃
158	ch₃	CH₃(CH₂)i₈CO	CH₃(CH₂)i₈CO	H	(CH₂)₁₅CH₃
159	ch₃	CH₃(CH₂)₂₀CO	CH₃(CH₂)₂₀CO	H	(ch₂)₁₇ch₃
160	ch₃	CH₃(CH₂)₂₂CO	CH₃(CH₂)₂₂CO	H	(CH₂)₂iCH₃
161	ch₃	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₆CO	H	ch₃
162	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂),₂CO	H	(CH₂)₅CH₃
163	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	ch₃co	(CH₂)ioCH₃
164	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₅CO	(CH₂)₁₃CH₃
165	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₁₀CO	(CH₂)₁₅CH₃

φφ « ·· φφ • · · • · ··· ♦ · · · • · · · • · · · • · · • · · · • ·φ·« • · · φ· φφ φ φ φ φ φ φ φφφ φφφ φ φ φ φ φ φ

166	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₃CO	(CH₂)i₇CH₃
167	ch₃	CH₃(CH₂),₂CO	CH₃(CH₂),₂CO	ch₃co	(CH₂)₂₁CH₃
168	ch₃	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₅CO	ch₃
169	ch₃	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂),oCO	(CH₂)₅CH₃
170	ch₃	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₁₃CO	(CH₂)ioCH₃
171	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂),₂CO	ch₃coo	(CH₂)₁₃CH₃
172	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₅CO	(CH₂)i₅CH₃
173	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₁₀CO	(CH₂)₁₇CH₃
174	ch₃	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₁₃CO	(CH₂)₂₁CH₃
175	ch₃	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₄CO	ch₃co	ch₃
176	ch₃	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₅CO	(CH₂)_sCH₃
177	gh₃	CH₃(CH₂)_i2CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂),oCO	(CH₂)_1oCH₃
178	ch₃	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₁₃CO	(ch₂)₁₃ch₃
179	ch₂f	H	H	H	H
180	ch₂f	H	H	ch₃co	H
181	ch₂f	H	H	CH₃(CH₂)₅CO	H
182	ch₂f	H	H	CH₃(CH₂)ioCO	H
183	ch₂f	H	H	CH₃(CH₂)₁₃CO	H
184	ch₂f	H	H	CH₃(CH₂)₁₅CO	H
185	ch₂f	H	H	CH₃(CH₂)i₇CO	H
186	ch₂f	H	H	CH₃(CH₂)₂₁CO	H
187	ch₂f	H	CH₃CO	H	H
188	ch₂f	H	ch₃ch₂co	H	H
189	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₂CO	H	H
190	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₃CO	H	H
191	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₄CO	H	H
192	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₅CO	H	H
193	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₆CO	H	H
194	ch₂f	H	CH₃(CH₂)_gCO	H	H

Doc: FP9726s.doc

195	ch₂f	H	CH₃(CH₂),oCO	H	H
196	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₁₂CO	H	H
197	ch₂f	H	CH₃(CH₂),₄CO	H	H
198	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₁₆CO	H	H
199	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₁₈CO	H	H
200	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₂₀CO	H	H
201	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₂₂CO	H	H
202	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃CO	H
203	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₅CO	H
204	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₀CO	H
205	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₁₃CO	H
206	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₁₂CO	ch₃co	H
207	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₅CO	H
208	ch₂f	H	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₁₀CO	H
209	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)_i3CO	H
210	ch₂f	CH₃CO	H	H	H
211	ch₂f	ch₃ch₂co	H	H	H
212	ch₂f	CH₃(CH₂)₂CO	H	H	H
213	ch₂f	CH₃(CH₂)₃CO	H	H	H
214	ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	H	H	H
215	ch₂f	CH₃(CH₂)₅CO	H	H	H
2Í6	ch₂f	CH₃(CH₂)₆CO	H	H	H
217	ch₂f	CH₃(CH₂)₈CO	H	H	H
218	ch₂f	CH₃(CH₂)₁₀CO	H	H	H
219	ch₂f	CH₃(CH₂)₁₂CO	H	H	H
220	ch₂f	CH₃(CH₂)₁₄CO	H	H	H
221	ch₂f	CH₃(CH₂)₁₆CO	H	H	H
222	ch₂f	CH₃(CH₂)₁₈CO	H	H	H
223	ch₂f	CH₃(CH₂)₂oCO	H	H	H

4* • 4 4 • · · 4* • · « • · » 4

4« 44

4« 4 * «4 ·4 • 4 4

4

44

4 4 4 •44 444

224	ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	H	ch₃co	H
225	ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	H	CH₃(CH₂)₅CO	H
226	ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	H	CH₃(CH₂)₁₀CO	H
227	ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	H	CH₃(CH₂)₁₃CO	H
228	ch₂f	CH₃(CH₂)i₂CO	H	ch₃co	H
229	ch₂f	CH₃(CH₂),₂CO	H	CH₃(CH₂)₅CO	H
230	ch₂f	CH₃(CH₂)i₂CO	H	CH₃(CH₂),oCO	H
231	ch₂f	CH₃(CH₂)₁₂CO	H	CH₃(CH₂)₁₃CO	H
232	ch₂f	ch₃co	ch₃co	H	H
233	ch₂f	ch₃ch₂co	ch₃ch₂co	H	H
234	ch₂f	CH₃(CH₂)₂CO	CH₃(CH₂)₂CO	H	H
235	ch₂f	CH₃(CH₂)₃CO	CH₃(CH₂)₃CO	H	H
236	ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	H	H
237	ch₂f	CH₃(CH₂)₅CO	CH₃(CH₂)₅CO	H	H
238	ch₂f	CH₃(CH₂)₆CO	CH₃(CH₂)₆CO	H	H
239	ch₂f	CH₃(CH₂)₈CO	CH₃(CH₂)₈CO	H	H
240	ch₂f	CH₃(CH₂)₁₀CO	CH₃(CH₂)k>CO	H	H
241	ch₂f	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₁₂CO	H	H
242	ch₂f	CH₃(CH₂)i₄CO	CH₃(CH₂)i₄CO	H	H
243	ch₂f	CH₃(CH₂)i₆CO	CH₃(CH₂)i₆CO	H	H
244	ch₂f	CH₃(CH₂),₈CO	CH₃(CH₂)i«CO	H	H
245	ch₂f	CH₃(CH₂)₂₀CO	CH₃(CH₂)₂₀CO	H	H
246	ch₂f	CH₃(CH₂)₂₂CO	CH₃(CH₂)₂₂CO	H	H
247	ch₂f	CH₃(CH₂),₂CO	CH₃(CH₂)₆CO	H	H
248	ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₂CO	H	H
249	ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	ch₃go	H
250	ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₅CO	H
251	ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₁₀CO	H
252	ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₁₃CO	H

·· ·

ch₂f	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂),₂CO	ch₃co	H
ch₂f	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₅CO	H
ch₂f	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₁₀CO	H
ch₂f	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)i₃CO	H
ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₂CO	ch₃co	H
ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₅CO	H
ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₁₀CO	H
ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)j₂CO	CH₃(CH₂)₁₃CO	H
ch₂f	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₄CO	ch₃co	H
ch₂f	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₅CO	H
ch₂f	CH₃(CH₂),₂CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₁₀CO	H
ch₂f	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₃CO	H
ch₂f	H	H	H	(CH₂)₅CH₃
ch₂f	H	H	H	(CH₂)₁₃CH₃
ch₂f	H	H	H	(ch₂)₁₅ch₃
ch₂f	H	H	H	(CH₂)₁₆CH₃
ch₂f	H	H	H	(CH₂)i₇CH₃
CHjF	H	H	H	(CH₂)₁₈CH₃
ch₂f	H	H	H	(CH₂)₂oCH₃
ch₂f	H	H	H	(CH₂)₂₁CH₃
ch₂f	H	H	CH₃CO	(CH₂)₁₃CH₃
ch₂f	H	H	CH₃(CH₂)₅CO	(CH₂)₅CH₃
ch₂f	H	H	CH₃(CH₂)i₀CO	(CH₂)₁₃CH₃
ch₂f	H	H	CH₃(CH₂)i₃CO	(CH₂)₅CH₃
ch₂f	H	H	CH₃(CH₂)₁₅CO	(CH₂)₁₃CH₃
ch₂f	H	H	CH₃(CH₂)i₇CO	(CH₂)₅CH₃
ch₂f	H	H	CH₃(CH₂)₂,CO	(CH₂)j₃CH₃
ch₂f	H	CH₃CO	H	(CH₂)₅CH₃
ch₂f	H	ch₃ch₂co	H	(CH₂)₁₃CH₃

φφ φ φ φ φ φ φφφφ φ · · φ β φ φ φ φ *

282	CH₂F	H	CH₃(CH₂)₂CO	H	(CH₂)₅CH₃
283	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₃CO	H	(CH₂)₁₃CH₃
284	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₄CO	H	(CH₂)₅CH₃
285	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₅CO	H	(CH₂)₁₃CH₃
286	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₆CO	H	(CH₂)₅CH₃
287	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₈CO	H	(CH₂)₁₃CH₃
288	ch₂f	H	CH₃(CH₂)ioCO	H	(CH₂)₅CH₃
289	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₁₂CO	H	(CH₂)_I3CH₃
290	ch₂f	H	CH₃(CH₂)i₄CO	H	(CH₂)₅CH₃
291	ch₂f	H	CH₃(CH₂)i₆CO	H	(CH₂)i₃CH₃
292	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₁₈CO	H	(CH₂)₅CH₃
293	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₂₀CO	H	(ch₂)₁₃ch₃
294	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₂₂CO	H	(CH₂)₅CH₃
295	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₄CO	CH3CO	(CH₂)₁₃CH₃
296	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₅CO	(CH₂)₅CH₃
297	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₀CO	(CH₂)₁₃CH₃
298	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₃CO	(CH₂)₅CH₃
299	ch₂f	H	CH₃(CH₂)i₂CO	CH3CO	(ch₂)₁₃ch₃
300	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₅CO	(CH₂)₅CH₃
301	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)i₀CO	(CH₂)₁₃CH₃
302	ch₂f	H	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₁₃CO	(CH₂)₅CH₃
303	ch₂f	CH₃CO	H	H	(CH₂)₁₃CH₃
304	ch₂f	CH3CH2CO	H	H	(CH₂)₅GH₃
305	ch₂f	CH₃(CH₂)₂CO	H	H	(CH₂)₁₃CH₃
306	ch₂f	CH₃(CH₂)₃CO	H	H	(CH₂)₅CH₃
307	ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	H	H	(CH₂)₁₃CH₃
308	ch₂f	CH₃(CH₂)₅CO	H	H	(CH₂)₅CH₃
309	ch₂f	CH₃(CH₂)₆CO	H	H	(CH₂),₃CH₃
310	ch₂f	CH₃(CH₂)₈CO	H	H	(CH₂)₅CH₃

c· · • 0 • · > 4 » 0 0 I

000 004

ch₂f	CH₃(CH₂)₁₀CO	H	H	(CH₂)₁₃CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₁₂CO	H	H	(CH₂)₅CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)_I4CO	H	H	(CH₂)i₃CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₁₆CO	H	H	(CH₂)₅CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)i₈CO	H	H	(CH₂)₁₃CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₂₀CO	H	H	(CH₂)₅CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	H	ch₃co	(CH₂)i₃CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	H	CH₃(CH₂)₅CO	(CH₂)₅CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	H	CH₃(CH₂)₁₀CO	(CH₂)₁₃CH₃
ch₂f	CH₃(GH₂)₄CO	H	CH₃(CH₂)_i3CO	(CH₂)₅CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₁₂CO	H	ch₃co	(CH₂)i₃CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₁₂CO	H	CH₃(GH₂)₅CO	(CH₂)₅CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)i₂CO	H	GH₃(CH₂)ioCO	(CH₂)₁₃CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂),₂CO	H	CH₃(CH₂)i₃CO	(CH₂)₅CH₃
ch₂f	ch₃co	ch₃co	H	(ch₂)₁₃ch₃
ch₂f	ch₃ch₂co	ch₃ch₂co	H	ch₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₂CO	CH₃(CH₂)₂CO	H	(CH₂)₅CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₃CO	CH₃(CH₂)₃CO	H	(CH₂)ioCH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	H	(ch₂)₁₃ch₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₅CO	CH₃(CH₂)₅CO	H	(CH₂)i₅GH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₆CO	CH₃(CH₂)₆CO	H	(CH₂)₁₇CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₈CO	CH₃(CH₂)₈CO	H	(CH₂)₂₁CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)ioCO	CH₃(CH₂)ioCO	H	ch₃
ch₂f	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)i₂CO	H	(CH₂)₅CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂),₄CO	CH₃(CH₂)j₄CO	H	(CH₂)_1oCH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)i₆CO	CH₃(CH₂)₁₆CO	H	(CH₂)₁₃CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₁₈CO	CH₃(CH₂)₁₈CO	H	(CH₂)i₅CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₂₀CO	CH₃(CH₂)₂₀CO	H	(ch₂),₇ch₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₂₂CO	CH₃(CH₂)₂₂CO	H	(CH₂)₂₁CH₃

ch₂f	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₆CO	H	ch₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₁₂CO	H	(ch₂)₅ch₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	ch₃co	(CH₂)_1oCH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₅CO	(ch₂)₁₃ch₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂),oCO	(CH₂)₁₅CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₁₃CO	(CH₂)₁₇CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₁₂CO	ch₃co	(CH₂)₂₁CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₅CO	ch₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₁₀CO	(CH₂)₅CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)i₃CO	(CH₂)_1oCH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₂CO	ch₃co	(CH₂)₁₃CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₅CO	(CH₂)₁₅CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂))₂CO	CH₃(CH₂)₁₀CO	(CH₂)₁₇CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₁₃CO	(CH₂)₂₁CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₄CO	ch₃co	ch₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₅CO	(CH₂)₅CH₃
ch₂f	CH₃(CH₂),₂CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₁₀CO	(CH₂)ioCH₃
ch₂f	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₁₃CO	(CH₂)₁₃CH₃
chf₂	H	H	H	H
chf₂	H	H	ch₃co	H
chf₂	H	H	CH₃(CH₂)₅CO	H
chf₂	H	H	CH₃(CH₂),oCO	H
chf₂	H	H	CH₃(CH₂)₁₃CO	H
chf₂	H	H	CH₃(CH₂)i₅CO	H
chf₂	H	H	CH₃(CH₂)i₇CO	H
chf₂	H	H	CH₃(CH₂)₂₁CO	Η ,
chf₂	H	ch₃co	H	H
chf₂	H	ch₃ch₂co	H	H
chf₂	H	CH₃(CH₂)₂CO	H	H

·· ·· ·· · ·· • · · · · · · ·

369	chf₂	Η	CH₃(CH₂)₃CO	H	H
370	chf₂	H	CH₃(CH₂)₄CO	H	H
371	CHF 2	H	CH₃(CH₂)₅CO	H	H
372	chf₂	H	CH₃(CH₂)₆CO	H	H
373	chf₂	H	CH₃(CH₂)₈CO	H	H
374	chf₂	H	CH₃(CH₂)ioCO	H	Η
375	chf₂	H	CH₃(CH₂)₁₂CO	H	H
376	chf₂	H	CH₃(CH₂)₁₄CO	H	H
377	chf₂	H	CH₃(CH₂)₁₆CO	H	H
37«	chf₂	H	CH₃(CH₂)i₈CO	H	H
379	chf₂	H	CH₃(CH₂)₂oCO	H	H
380	chf₂	H	CH₃(CH₂)₂₂CO	H	H
381	chf₂	H	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃CO	H
382	chf₂	H	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₅CO	H
383	chf₂	H	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₁₀CO	H
384	chf₂	H	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂),₃CO	H
385	chf₂	H	CH₃(CH₂)₁₂CO	ch₃co	H
386	chf₂	H	CH₃(CH₂)_]2CO	CH₃(CH₂)₅CO	H
387	chf₂	H	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₁₀CO	H
388	chf₂	H	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₁₃CO	H
389	chf₂	CH₃CO	H	H	H
390	chf₂	CH₃CH₂CO	H	H	H
391	chf₂	CH₃(CH₂)₂CO	H	H	H
392	chf₂	CH₃(CH₂)₃CO	H	H	H
393	chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	H	H	H
394	chf₂	CH₃(CH₂)₅CO	H	H	H
395	chf₂	CH₃(CH₂)₆CO	H	H	H
396	chf₂	CH₃(CH₂)₈CO	H	H	H
397	chf₂	CH₃(CH₂),oCO	H	H	H

chf₂	CH₃(CH₂)i₂CO	H	H	H
chf₂	CH₃(CH₂)₁₄CO	H	H	H
chf₂	CH₃(CH₂)₁₆CO	H	H	H
chf₂	CH₃(CH₂)₁₈CO	H	H	H
chf₂	CH₃(CH₂)₂₀CO	H	H	H
chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	H	ch₃co	H
chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	H	CH₃(CH₂)₅CO	H
ghf₂	CH₃(CH₂)₄CO	H	CH3(CH₂)joCO	H
chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	H	CH₃(CH₂)₁₃CO	H
chf₂	CH₃(CH₂)i₂CO	H	ch₃co	H
chf₂	CH₃(CH₂)₁₂CO	H	CH₃(CH₂)₅CO	H
chf₂	CH₃(CH₂)i₂CO	H	CH₃(CH₂)₁₀CO	H
chf₂	CH₃(CH₂)₁₂CO	H	CH₃(CH₂)₁₃CO	H
chf₂	ch₃co	ch₃co	H	H
chf₂	ch₃ch₂co	ch₃ch₂co	H	H
chf₂	CH₃(CH₂)₂CO	CH₃(CH₂)₂CO	H	H
chf₂	CH₃(CH₂)₃CO	CH₃(CH₂)₃CO	H	H
chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	H	H
chf₂	CH₃(CH₂)₅CO	CH₃(CH₂)₅CO	H	H
chf₂	CH₃(CH₂)₆CO	CH₃(CH₂)₆CO	H	H
chf₂	CH₃(CH₂)₈CO	CH₃(CH₂)₈CO	H	H
chf₂	CH₃(CH₂)ioCO	CH₃(CH₂)₁₀CO	H	H
chf₂	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)i₂CO	H	H
chf₂	CH₃(CH₂)i₄CO	CH₃(CH₂)₁₄CO	H	H
chf₂	CH₃(CH₂)i₆CO	CH₃(CH₂),₆CO	H	H
chf₂	CH₃(CH₂),₈CO	CH₃(CH₂)i₈CO	H	H
chf₂	CH₃(CH₂)₂₀CO	CH₃(CH₂)₂₀CO	H	H
chf₂	CH₃(CH₂)₂₂CO	CH₃(CH₂)₂₂CO	H	H
chf₂	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₆CO	H	H

chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₂CO	H	H
chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	ch₃co	H
chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₅CO	H
chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₀CO	H
chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₃CO	H
chf₂	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₁₂CO	ch₃co ^;	H
chf₂	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₅CO	H
chf₂	CH₃(CH₂),₂CO	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)ioCO	H
chf₂	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)i₃CO	H
chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₂ČO	ch₃co	H
chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₅CO	H
chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)ioCO	H
chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₁₃CO	H
chf₂	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₄CO	ch₃co	H
chf₂	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₅CO	H
chf₂	CH₃(CH₂),₂CO	GH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂),oCO	H
chf₂	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₃CO	H
chf₂	H	H	H	(CH₂)₅CH₃
chf₂	H	H	H /	(CH₂)₁₃CH₃
chf₂	H	H	H	(CH₂)₁₅CH₃
chf₂	H	H	H	(CH₂)₁₆CH₃
chf₂	H	H	H	(CH₂)i₇CH₃
ciif₂	H	H	H	(CH₂)₁₈CH₃
chf₂	H	H	H	(CH₂)₂₀CH₃
chf₂	H	H	H	(CH₂)₂₁CH₃
chf₂	H	H	CH₃CO	/ch₂)₁₃ch₃
chf₂	H	H	CH₃(CH₂)₅CO	(CH₂)₅CH₃
chf₂	H	H	CH₃(CH₂)i₀CO	(CH₂)₁₃CH₃
chf₂	H	H	CH₃(CH₂)i₃CO	(CH₂)₅CH₃

456	chf₂	H	H	CH₃(GH₂)i₅CO	(CH₂)₁₃CH₃
457	chf₂	H	H	CH₃(CH₂)₁₇CO	(CH₂)₅CH₃
,458	chf₂	H	H	CH₃(CH₂)₂₁CO	(CH₂)₁₃CH₃
459	chf₂	H	CH₃CO	H	(CH₂)₅CH₃
460	chf₂	H	ch₃ch₂co	H	(CH₂)₁₃CH₃
461	chf₂	H	CH₃(CH₂)₂CO	H	(CH₂)₅CH₃
462	chf₂	H	CH₃(CH₂)₃CO	H	(CH₂)₁₃CH₃
463	chf₂	H	CH₃(CH₂)₄CO	H	(CH₂)₅CH₃
464	chf₂	H	CH₃(CH₂)₅CO	H	(CH₂)₁₃CH₃
465	chf₂	H	CH₃(CH₂)₆ČO	H	(CH₂)₅CH₃
466	chf₂	H	CH₃(CH₂)₈CO	H	(CH₂)₁₃CH₃
467	chf₂	H	CH₃(CH₂)ioCO	H	(CH₂)₅CH₃
468	chf₂	H	CH₃(CH₂)₁₂CO	H	(CH₂)₁₃CH₃
469	chf₂	H	CH₃(CH₂)i4CO	H	(CH₂)₅CH₃
470	chf₂	H	CH₃(CH₂)i₆CO	H	(CH₂)₁₃CH₃
471	chf₂	H	CH₃(CH₂)₁₈CO	H	(CH₂)₅CH₃
472	chf₂	H	CH₃(CH₂)₂₀CO	H	(CH₂)₁₃CH₃
473	chf₂	H	CH₃(CH₂)₂₂CO	H	(CH₂)₅CH₃
474	chf₂	H	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃CO	(CH₂)₁₃CH₃
475	chf₂	H	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(GH₂)₅CO	(CH₂)₅CH₃
476	chf₂	H	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₀CO	(CH₂)₁₃CH₃
4*77	chf₂	H	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₁₃CO	(CH₂)₅CH₃
478	chf₂	H	CH₃(CH₂)i₂CO	ch₃go	(CH₂)i₃CH₃
479	chf₂	H	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₅CO	(CH₂)₅CH₃
480	chf₂	H	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₁₀CO	(CH₂)i₃CH₃
481	chf₂	H	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)i₃CO	(CH₂)₅CH₃
482	chf₂	CH₃CO	H	H	(CH₂)₁₃CH₃
483	chf₂	ch₃ch₂co	H	H	(CH₂)₅CH₃
484	chf₂	CH₃(CH₂)₂CO	H	H	(CH₂)₁₃CH₃

• · · • φ φφ • φ · φ φφφφ φ φ φ φ · · φ • φ φ* » · φ φ

I · · Φ φφφ φφφ • · φ· Φ·

485	chf₂	CH₃(CH₂)₃CO	H	H	(CH₂)₅CH₃
486	chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	H	H	(CH₂)₁₃CH₃
487	chf₂	CH₃(CH₂)₅CO	H	H	(CH₂)₅CH₃
488	chf₂	CH₃(CH₂)₆CO	H	H	(CH₂)₁₃CH₃
489	chf₂	CH₃(CH₂)₈CO	H	H	(CH₂)₅CH₃
490	chf₂	CH₃(CH₂)ioCO	H	H	(CH₂)₁₃CH₃
491	chf₂	CH₃(CH₂)i₂CO	H	H	(CH₂)₅CH₃
492	chf₂	CH₃(CH₂)i₄CO	H	H	(CH₂)₁₃CH₃
493	chf₂	CH₃(CH₂)i₆CO	H	H	(CH₂)₅CH₃
494	chf₂	CH₃(CH₂)i₈CO	H	H	(CH₂)i₃CH₃
495	chf₂	CH₃(CH₂)₂oCO	H	H	(CH₂)₅CH₃
496	chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	H	CH₃CO	(CH₂)₁₃CH₃
497	chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	H	CH₃(CH₂)₅CO	(CH₂)₅CH₃
498	chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	H	CH₃(CH₂)ioCO	(CH₂)₁₃CH₃
499	chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	H	CH₃(CH₂)i₃CO	(CH₂)₅CH₃
500	chf₂	CH₃(CH₂)i₂CO	H	ch₃co	(CH₂)₁₃CH₃
501	chf₂	CH₃(CH₂)i₂CO	H	CH₃(CH₂)₅CO	(CH₂)₅CH₃
502	chf₂	CH₃(CH₂)i₂CO	H	CH₃(CH₂)ioCO	(CH₂)i₃CH₃
503	chf₂	CH₃(CH₂),₂GO	H	CH₃(CH₂)₁₃CO	(CH₂)₅CH₃
504	chf₂	ch₃co	ch₃co	H	(CH₂)₁₃CH₃
505	chf₂	ch₃ch₂co	ch₃ch₂co	H	ch₃
5Ó6	chf₂	CH₃(CH₂)₂CO	CH₃(CH₂)₂CO	H	<CH₂)₅CH₃
507	chf₂	CH₃(CH₂)₃CO	CH₃(CH₂)₃CO	H	(GH₂)ioGH₃
508	chf₂	CH₃(GH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	H	(CH₂)₁₃CH₃
509	chf₂	CH₃(CH₂)₅CO	CH₃(CH₂)₅CO	H	(ch₂)₁₅ch₃
510	chf₂	CH₃(CH₂)₆CO	CH₃(CH₂)₆CO	H	(CH₂)i₇CH₃
511	chf₂	CH₃(CH₂)₈CO	CH₃(CH₂)₈CO	H	(CH₂)₂iCH₃
512	chf₂	CH₃(CH₂),oCO	CH₃(CH₂)ioCO	H	ch₃
513	chf₂	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₁₂CO	H	(CH₂)₅CH₃

ί*>;Λί ·* ·4 • 1 * • · · · ·

4* ·

514	chf₂	CH₃(CH₂)₁₄CO	CH₃(CH₂)i₄CO	H	(CH₂)_1oCH₃
515	chf₂	CH₃(CH₂)₁₆CO	CH₃(CH₂)i₆CO	H	(CH₂)₁₃CH₃
516	chf₂	CH₃(CH₂)₁₈CO	CH₃(CH₂)i₈CO	H	(CH₂)₁₅CH₃
517	chf₂	CH₃(CH₂)₂₀CO	CH₃(CH₂)₂₀CO	H	(CH₂)_J7CH₃
518	chf₂	CH₃(CH₂)₂₂CO	CH₃(CH₂)₂₂CO	H	(CH₂)_2ICH₃
519	chf₂	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₆CO	H	ch₃
520	chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₂CO	H	(CH₂)₅CH₃
521	chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃CO	(CH₂)ioCH₃
522	chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)5CO	(CH₂)₁₃CH₃
523	chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₁₀CO	(CH₂)₁₅CH₃
524	chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₃CO	(CH₂)₁₇CH₃
525	chf₂	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₁₂CO	ch₃co	(CH₂)₂₁CH₃
526	chf₂	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₅CO	ch₃
527	chf₂	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)j₂CO	CH₃(CH₂)₁₀CO	(CH₂)₅CH₃
528	chf₂	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂),₃CO	(CH₂)ioCH₃
529	chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)_j2CO	ch₃co	(CH₂)₁₃CH₃
530	chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₅CO	(CH₂)₁₅CH₃
531	chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)ioCO	(CH₂)₁₇CH₃
532	chf₂	CH₃(CH₂)₄CO	GH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)i₃CO	(CH₂)₂₁CH₃
533	chf₂	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃CO	ch₃
534	chf₂	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)5CO	(CH₂)₅CH₃
535	chf₂	CH₃(CH₂)i₂CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)ioCO	(CH₂),oCH₃
536	chf₂	CH₃(CH₂)₁₂CO	CH₃(CH₂)₄CO	CH₃(CH₂)₁₃CO	(CH₂)₁₃CH₃

Výhodné sloučeniny jsou sloučeniny, č. 36,37,38,38a, 39, 39a, 40, 40a, 41, 41a, 42, 42a, 43, 43a, 44, 44a, 45, 45a, 45b, 45c, 87, 87a, 87b, 87c, 87d, 87e, 87f, 87g, 88, 88a, 89, 90, 91, 92, 92a, 93, 94, 94a, 94b, 214,115,216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 265, 266, 267, 268, 269, 270, 271, 272, 393, 394, 395, 396, 397, 398, 399, 400, 401, 402, 444, 445, 446, 447, 448, 449, 450 a i 451.

I

I t. u a ,η

• to *· *· • · · «· to ···· · · • ·· ··* · to·*···· · · ♦ to ·· ·· · ·· ·· • to toto·· • · to • to to •··

	Výhodnější sloučeniny	jsou	sloučeniny č. 36, 37,	38
38a,	39,	39a, 40, 40a,	41,	41a,	42, 42a, 43, 43a,	44,	44a
45,	45a,	45b, 45c, 87,	87a,	87b,	87c, 87d, 87e, 87f,	87g,	88
88a,	89,	90, 91, 92,	92a,	93, 94	, 94a, 94b, 219,	220,	221
222,	269	, 270, 271, 272	, 398	, 399,	400, 401, 448, 449	a 451.

Nejvýhodnější sloučeniny jsou:

5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-hexanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranozová kyselina (č. 36)

5-acetamido-2, 3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-oktanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranozová kyselina (č. 38)

5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-dekanoy1-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranozová kyselina (č. 39)

5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-dodekanoy1-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranozová kyselina (č. 40)

5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-myristoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranozová kyselina (č. 41)

5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-palmitoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranozová kyselina (č. 42)

5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-stearolyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranozová kyselina (č. 43) hexyl 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranozoát (č. 87) myristyl 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranozoát (č. 88) cetyl 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranozoát (č. 89) stearyl 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranozoát (č. 91)

Dále jsou popsány postupy příprav předkládaných sloučenin obecného vzorce 1.

Předkládané sloučeniny obecného vzorce 1 se připravují postupy A, B nebo G, jak je dále uvedeno. Sloučeninu obecného vzorce 1 lze připravit i postupem J, uvedeným později.

Výchozí látku, sloučeninu 2 použitou v postupech A a B,

44 • 4 4

4 4 4 4

4 4

4· ♦ « 4 4

4 4 4

44444

4 4

44 >4 4

4 4 4

4 4 4 4 4

4 • 4 44 lze připravit podle postupů D, E, F nebo G, uvedených níže. Dále výchozí látku, sloučeninu 5, lze připravit podle postupu II, uvedeného níže.

Významy R¹ , R² , R^2a, R³ , R^3a, R⁴ , R^4a, R⁸ , R⁷ , R⁸ , W, W^a , Me, Ac a Boc v postupech A až J jsou vysvětleny níže:

R¹, R², R³, R⁴ a W mají výše definovaný význam,

R^2a je stejná jako R² nebo představuje chránící skupinu hydroxylu (výhodně t-butyldimethylsilyl nebo (společně s R^3a) isopropyliden),

R^2b představuje chránící skupinu hydroxylu (výhodně t-butyldimethylsilyl),

R^3a je stejná jako R³ nebo představuje chránící skupinu hydroxylu (výhodně t-butyldimethylsilyl nebo (společně s R^2a) isopropyliden),

R^4a je stejná jako R⁴ nebo představuje chránící skupinu hydroxylu (výhodně t-butyldimethylsilyl)

R⁶, R⁷ a R^a jsou stejné nebo odlišné a jsou alifatický C3-25 acyl,

W^a je stejné jako W nebo představuje chránící skupinu karboxylu (výhodně methyl, ethyl, benzyl, allyl, methoxymethyl, methylthiomethyl, 2-(trimethylsilyl)ethoxy~ methoxy nebo difenylmethy1, výhodněji methyl, benzyl nebo difenylmethyl),

Ac je acetyl,

Boc je t-butoxykarbony1, a

Me je methyl.

Podrobný popis jednotlivých postupů:

• 9

99 99 9 • 9 · · * ·

9999 9 999

99 9 9 9 9999 • 9 9 9 9 9 9

99 99 9

Postup A

OR²³

Postup A je postup přípravy předkládané sloučeniny 1, který zpočívá v odštěpení chránící skupiny ze sloučeniny 3 připravené reakcí výchozí sloučeniny 2. Sloučenina 2 je lehce dostupná podle postupu uvedeného dále u N,N’-di-t-butoxykarbonylthiomočoviny.

Krok A-l

V kroku A~1 se připraví sloučenina 3 reakcí sloučeniny 2 s N,N'-di-t-butoxykarbonylthiomočovinou v inertním rozpouštědle za přítomnosti báze a chloridu rtutnatého.

Volba rozpouštědla nemá žádné zvláštní omezení, pokud rozpouštědlo neovlivňuje negativně průběh reakce. Vhodná ·9 99

9 9 9 9

9999 9 9

9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9

99 99

9«

9 9 9

999 999

9 9 • 99 >9 • 9

99*9 rozpouštědla jsou aromatické uhlovodíky jako benzen, toluen a xylen; estery jako diethylether, diisopropylether, tetrahydrofuran, dioxan, dimethoxyethan a diethylenglykol dimethylether; a amidy jako N,N-dimethylacetamid a dimethylformamid, výhodně amidy (konkrétně Ν,Ν/dimethylacetamid a dimethylformamid).

Vhodnou baží jsou organické baze jako triethylamin a dimethylaminopyridin.

Reakční teplota se obvykle pohybuje v rozmezí -10 až 50 °C, výhodně 10 až 30 °C.

Reakční doba závisí na použitém materiálu, bázi, reakční teplotě atd., obvykle se pohybuje v rozmezí 1 až 24 h, výhodně 5 až 10 h.

Po zkončení reakce se např. nerozpustné složky odfiltrují za sníženého tlaku, přidá se organické rozpouštědlo nemísitelné s vodou, např. ethylacetát, směs se promyje vodou a fáze oddělí. Organická fáze obsahující produkt se vysuší bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo oddestiluje.

Pokud je to nezbytné, lze žádanou sloučeninu dále purifikovat rekrystalizací nebo různými chromatografickými postupy.

Krok A-2

V kroku A-2 se připraví předkládaná sloučenina 1 odtěpením t-butoxykarbonylové skupiny ze sloučeniny 3 v inertním rozpouštědle.

Volha rozpouštědla nemá žádné zvláštní omezení, pokud rozpouštědlo neovlivňuje negativně průběh reakce. Vhodná rozpouštědla jsou alkoholy jako methanol a ethanol, voda a jejich směsi.

Elimlnačním činidlem je výhodně kyselina, její volba nemá žádné zvláštní omezení, pokud je v reakční směsi použita jako kyselý katalyzátor. Vhodnými kyselinami jsou Bróenstedovy kyseliny jako anorganické kyseliny, např. chlorovodíková, bromovodíková, sírová, chloristá a organické kyseliny, např. octová, mravenčí, šťavelová, methansulfonová, p-toluensulfonová, trifluoroctová a trifluormethansulfonová;

·· ·· ·· · ·· ·· • fc · · · · fcfc·· • · ··· fcfcfcfc fc··· fc fcfc fc fc fc · fcfcfcfc · ··· fc·· • •••♦•fc · · fc··· ·· · ····

- 35 Lewisovy kyseliny, jako chlorid zinečnatý, chlorid cíničitý, chlorid boritý, fluorid boritý a bromid iontoměniče; výhodně organické kyseliny a trifluoroctová).

Reakční teplota se obvykle 50 °C, výhodně 10 až 30 °C.

Reakční doba závisí na použitém materiálu, reakční teplotě atd., obvykle se pohybuje v rozmezí 15 min až 10 h, výhodně 1 až 5 h.

Po zkončení reakce se reakční směs např. neutralizuje, rozpouštědlo oddestiluje za sníženého tlaku a produkt přečistí sloupcovou chromatografií na silikagelu.

Dále v případě, že R^2a, R^3a nebo R^4a jsou chránící skupiny hydroxylu nebo W je chránící skupina karboxylu, musí být i tyto skupiny odštěpeny za vzniku předkládané boritý; a kyselé (zejména octová pohybuje v rozmezí -10 až sloučeniny 1.

Způsob odštěpení chránících skupin závisí na jejich typu a provádí se obvyklými postupy oblasti techniky, např. postupy uvedenými v Protective groups in Organic Synthesis, 2.vyd., (1991, Green et al.).

V případě, že chránící skupinou pro hydroxyly je trialkylsilyl, např. t-butyldimethylsilyl, je výhodné štěpící činidlo kyslina octová ve směsi vody a tetrahydrofuranu, nebo tetrabutylamonium fluorid v tetrahydrofuranu.

V případě, že chránící skupinou pro hydroxyly je isopropyliden, použije se pro odštěpení postup uvedený dále v krocích E-2 nebo E-4.

V případě, že chránící skupinou pro karboxyl je difenylmethyl, odštěpení se provede katalytickou redukcí v kyselině, např. octové a trifluoroctové, nebo komplexem BF3-etherát.

V případě, že chránící skupinou pro karboxyl je benzyl, odštěpení se provede katalytickou redukcí, v případě, že chránící skupinou je methyl, odštěpí se hydrolýzou.

• · · · 9 9 ·

9 9 9 9 9 *

99 99 ·

99 ♦ · • · 99 • 9

9999

99

9 9 9 • 9 9 9

999 999

9

99

Postup Β

Postup B je postup přípravy předkládané sloučeniny 1, který zpočívá v reakci výchozí sloučeniny 2, snadno dostupné dále popsaným postupem, s kyanatačním činidlem a reakcí produktu s amoniakem, případně s následným odštěpením chránících skupin.

Krok B-l

V kroku B-l se připraví sloučenina 4 reakcí sloučeniny 2 s kyanatačním činidlem v inertním rozpouštědle.

Volba rozpouštědla nemá žádné zvláštní omezení, pokud rozpouštědlo neovlivňuje negativně průběh reakce. Vhodná rozpouštědla jsou alkoholy jako methanol, ethanol, n-propanol, isopropanol, n-butanol, isobutanol, t-butanol, fc· fcfc • · · • fcfc·· • fcfc · · • fcfc · fc· fcfc • fc · • fcfc • fcfcfc fc · fcfc·fc fcfcfc • fc · • fc fcfc • fcfc · • fcfc · fc fcfcfc fcfcfc • · • fc fcfc isoamylalkohol, diethylenglykol, glycerin, oktanol, cyklohexanol a methyl cellosolv; amidy jako formamid, N,N-dimethylformamid, N,N-dimethylacetamid, N-methyl-2-pyrrolidon, N-methylpyrroli- dinon a hexamethylfosfotriamid; a sulfoxidy jako dimethylsulfoxid a sulfolan; výhodně alkoholy (zejména methanol).

Vhodné kyanatační činidlo je výhodně bromkyan s octanem sodným jako baží.

Reakčni teplota se obvykle pohybuje v rozmezí -10 až 50 °C, výhodně 10 až 40 °C.

Reakčni doba závisí na použitém materiálu, bázi, reakčni teplotě atd., obvykle se pohybuje v rozmezí 15 min až 10 h, výhodně 1 až 5 h.

Po zkončení reakce se např. rozpouštědlo oddestiluje za sníženého tlaku a produkt přečistí rekrystalizací nebo sloupcovou chromatografií na silikagelu.

Krok B-2

V kroku B-2 se připraví předkládaná sloučenina 1 reakcí sloučeniny 4 s amoniakem v inertním rozpouštědle.

Volba rozpouštědla nemá žádné zvláštní omezení, pokud rozpouštědlo neovlivňuje negativně průběh reakce. Vhodná rozpouštědla jsou alkoholy (zvláště methanol).

Reakčni doba závisí na použitém materiálu, hází, reakčni teplotě atd., obvykle se pohybuje v rozmezí 15 min až 10 h, výhodně 1 až 5 h.

Po zkončení reakce se např. rozpouštědlo oddestiluje a produkt přečistí rekrystalizací nebo sloupcovou chromatografií na silikagelu.

Dále v případě, že R^2a, R^3a nebo R^4a jsou chránící skupiny hydroxylu nebo W^a je chránící skupina karboxylu, musí být i tyto skupiny odštěpeny za vzniku předkládané sloučeniny 1. Odšpěpení se provede analogicky jako v postupu A.

• · • · · • 4444

4« • 44 4

4444 4 • 4 4 4 4 4

4 4 4 4 4 4

4« 44 44 4

44

4 4 4

444 444

4

44

Postup C

—NBoc

BocNH (6)

Postup C je který zpočívá v postup přípravy předkládané sloučeniny 1, částečné nebo úplné acylaci hydroxylových skupin výchozí sloučeniny 5, snadno dostupné dále popsaným postupem, s následným odštěpením chránících skupin.

Krok C-l

V kroku C-l se připraví sloučenina 6 zavedením acylovýeh skupin do sloučeniny 5 v inertním rozpouštědle.

Acylaci lze provést třemi způsoby, 1 až 3.

<Způsob 1>

Podle způsobu 1 se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce RCO-Hal nebo RCO-O-COR « · · 0 0000

- 39 > · ♦ 0 » « 0 0

000 000 [ kde,

R je alkyl, Hal je odstupující skupina, odstupující skupina nemá žádné zvláštní omezení pokud je eliminována jako nukleofilní zbytek a jde výhodně o halogen, např. chlór, bróm a jód; nižší alkoxykarbonyi jako methoxykarbonyloxy a ethoxykarbonyloxy; halogenovaný alkylkarbonyloxy jako dichloracetoxy, trichloracetoxy nižší alkansulfonyloxy jako a ethansulfonyloxy; halogen nižší jako trifluormethansulfonyloxy chloracetoxy, a trifluoracetoxy; methansulfonyloxy alkansulfonyloxy a pentafluorethansulfonyloxy; benzensulfonyloxy, a p-nitrobenzensulfonyloxy; výhodněji halogen, alkansulfonyloxy a arylsulfonyoxy] se sloučeninoiu 5 v rozpouštědle, nepřítomnosti baze.

Volba rozpouštědla nemá žádné rozpouštědlo neovlivňuje do určité míry výchozí uhlovodíky arylsulfonyloxy jako p-toluensulfonyloxy halogen nižší za přítomnosti nebo alifatické uhlovodíky zvláštní omezení, pokud negativně průběh reakce a rozpouští materiál. Vhodná rozpouštědla jsou jako hexan a heptan; aromatické jako benzen, toluen a xylen; halogenované uhlovodíky jako methylenchlorid, chloroform, tetrachlormethan, dichlorbenzen; estery jako propylacetát, butylaeetát dichlorethan, chlorbenzen a ethylmravenčan, ethylacetát, a diethylkarbonát; ethery jako diethylether, diisopropylether, tetrahydrofuran, dioxan, dimethoxyethan a diethylenglykol dimethylether; nitrily jako acetonitril a isobutyronitri 1; a amidy jako formamid, N,N-dimethylformamid,

N,N-dimethylacetamid, N-methy1-2-pyrrolidon,

N-methylpyrrolidinon a hexamethylfosfo- triamid.

Volba baze nemá žádné zvláštní omezení, pokud jde o bázi obvykle používanou v této oblasti techniky, výhodné baze jsou N-methylmorfolin, triethylamin, tributylamin, diisopropylethylamin, dicyklohexylamin, N-methylpiperidin, pyridin, 4-pyrrolidinipyridin, pikolin,

4-(N,N-dimethylamino)pyridin, 2,6-di(t-butyl)4-methylpyridin, chinolin, N,N-dimethylani1in a N,N-diethylanilin.

9« >· 99

9 9 9 9

9999 9 « • 9 9 9 · · 9

9 9 9 9 9 • 9 9 9

99

9 9 9

999 999

9 9

99 99

Mimochodem, 4-(N,N-dimethylamino)pyridin a 4-pyrrolidinopyridin lze použít v katalyrickém množství v kombinaci s dalšími bázemi a dále kvartérní amoniové soli jako benzyltriethylamonium chlorid a tetrabutylamoniumchlorid a dále lze účinnost reakce zvýšit přídavkem crown etheru jako dibenzo-18-crown-6.

Reakční teplota se obvykle pohybuje v rozmezí -20 až teplota varu použitého rozpouštědla, výhodně 0 až teplota varu použitého rozpouštědla.

Reakční doba závisí na použitém materiálu, bázi, reakční teplotě, zvoleném rozpouštědle atd., obvykle se pohybuje v rozmezí 10 min až 3 dny, výhodně 1 až 6 h.

<Způsob 2>

Podle způsobu 2 se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce RCOOH [kde R má výše uvedený význam] se sloučeninou 5 v rozpouštědle za přítomnosti nebo nepřítomnosti esterifikačního činidla a katalytického množství baze.

Vhodné esterifikační činidla jsou kondenzační činidla, halogenované mravečany jako chlormravenčan methylnatý a chlormravenčan ethylnatý a kyseliny, jako diethylkyanofosfát, jsou N-hydroxyderiváty diestery kyanofosforečné Vhodná kondenzační činidla jako N-hydroxysukcinimid,

1-hydroxybenzotriazol a N-hydroxy-5-norbornen-2,3-dikarboxyimid; disulfidické sloučeniny jako 2,2'-dipyridyl disulfid sloučeniony kyseliny jantarové jako N,N'-disukcinimidyl karbonát; fosfinchloridy jako N,N'-bis(2-oxo-3-oxazolidinyl)fosfinchlorid; deriváty kyseliny štavelové jako N,N'-disukcinimidyl oxalát (OSO), N,N'-diftalimid oxalát (DPO), N,N'-bis(norbornenylsukcinimidyl)oxalát (BNO), 1,1'-bis(benzotriazoly1)oxalát (BBTO), 1,1'-bis(6-chlorbenzo(BCTO) a 1,1'-bis(6-trifluormethylbenzo(BTBO); triarylfosfiny jako např.

azodikarboxylová kyselina di(nižší alkyl)diethyl azodikarboxylát-trifenylfosf in;

triazolyl)oxalát triazoly1)oxalát trifenylfosfin a triarylfosfin jako

N-nižší alkyl-5-arylisoxazolium-3'-sulfonáty jako N-ethyl-5-fenylisoxazolium-3'-sulfonát; deriváty karbodiimidu jako

4· *4 > · · ··

I · · ·

I · · * ·· · · • · ···· • 4 «· • · · 4 • · · · tft ··* • · • 4 ··

Ν',Ν'-dicykloalkylkarbodiimidy napr ,

Ν',Ν'-dicyklohexylkarbodi imid karbodi imid diselenid:

(DCC) a l-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)(EDAPC); diheteroaryldiselenidy jako di-pyridylarylsulfonyltriazolidy jako p-nitrobenzensulfonyltriazolid; 2-halogen-l-nižší alkylpyridinium halogenidy jako 2-chlor-l-methylpyridinium jodid; diarylfosforylazidy jako difenylfosforylazid (DPPA); a deriváty imidazolu jako 1,1'-oxazolyldiimidazol a Ν,N'-karbony1diimidazol; výhodně diarylfosforylazidy.

rozpouštědla nemá žádné zvláštní omezení, pokud negativně průběh reakce a rozpouští materiál. Vhodná rozpouštědla jsou uhlovodíky jako hexan a heptan; aromatické jako benzen, toluen a xylen; halogenované

Volba rozpouštědlo neovlivňuje do určité míry výchozí alifatické uhlovodíky uhlovodíky jako methylenchlorid, chloroform, tetrachlormethan.

dichlorbenzen; estery jako propylacetát, butylacetát dichlorethan, chlorbenzen a ethylmravenčan, ethylacetát, a diethylkarbonát; ethery jako diethylether, diisopropylether, tetrahydrofuran, dioxan, dimethoxyethan a diethylenglykol dimethylether; nitrily jako acetonitril a isobutyronitril; a amidy jako formamid, N,N-dimethylformamid,

Ν,N-dimethylacetamid, N-methy1-2-pyrrolidon,

N-methylpyrrolidinon a hexamethylfosfo- triamid.

Pro volbu baze platí stejné podmínky jako ve <způsobu 1>. Reakční teplota se pohybuje v rozmezí -20 až 80 °C, výhodně 0 °C až laboratorní teplota.

Reakční doba závisí hlavně na reakční teplotě, použitém materiálu, zvoleném rozpouštědle atd., obvykle se pohybuje v rozmezí 10 min až 3 dny, výhodně 30 min až 1 den.

<Způsob 3>

Podle způsobu 3 se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce RCOOH [kde R má výše uvedený význam] se sloučeninou 5 v rozpouštědle a za přítomnosti dialkylesteru halogenované fosforečné kyseliny jako je diethylchlorfosfát a baze.

nemá žádné zvláštní omezení, pokud negativně průběh reakce a rozpouští

Volba rozpouštědla rozpouštědlo neovlivňuje ·· · • · · • · · · • · ···· • · · ·· · ·· ·· • · · • · ··· • · · · · • · · · ·· ·· • 6 ·· • · · · • · · · • >·· *·· • · ·· ·· do určité alifatické uhlovodíky míry výchozí materiál. Vhodná rozpouštědla jsou uhlovodíky jako hexan a heptan; aromatické jako benzen, toluen a xylen; halogenované uhlovodíky jako methylenchlorid, chloroform, tetrachlormethan, dichlorbenzen; estery jako propylacetát, butylacetát dichlorethan, chlorbenzen a ethylmravenčan, ethylacetát, a diethylkarbonát; ethery jako diethylether, diisopropylether, tetrahydrofuran, dioxan, dimethoxyethan a diethylenglykol dimethylether; nitrily jako acetonitril a isobutyronitril; a amidy jako formamid, N,N-dimethylformamid,

N,N-dimethylacetamid, N-methy1-2-pyrrolidon,

N-methylpyrrolidinon a hexamethylfosfo- triamid.

Pro volbu baze platí stejné podmínky jako ve <způsobu 1>. Reakční teplota se pohybuje v rozmezí 0 °C až teplota varu použitého rozpouštědla, výhodně laboratorní teplota až °C.

Reakční doba závisí hlavně na reakční teplotě, použitém výchozím materiálu, reagenciích, zvoleném rozpouštědle atd., obvykle se pohybuje v rozmezí 10 min až 3 dny, výhodně 30 min až 1 den.

Ve <způsobech> acylace 1 až 3 se sloučenina 6 získá zavedením 1 až 3 acylových skupin do sloučeniny 5. Rozsah acylace je řízen počtem ekvivalentů acylačního činidla použitého k derivatizaci.

Po zkončení acylace se produkt 6 izoluje z reakční směsi obvyklým postupem. Například se reakční směs neutralizuje, rozpouštědlo oddestiluje za sníženého tlaku (pokud bylo přítomno), ke zbytku se přidá rozpouštědlo nemísitelné s vodou jako ethylacetát, směs se promyje vodou a fáze oddělí. Organická fáze obsahující produkt se vysuší bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo oddestiluje.

Žádanou sloučeninu lze oddělit a purifikovat vhodnou kombinací obvyklých postupů, např. rekrystalizací, přesrážením nebo různými postupy absorpční sloupcové chromatografie na silikagelu, oxidu hlinitém, Florisilu; postupem využívajícím syntetické absorpční činidlo jako je rozdělovači sloupcová chromatografie na Sephadexu LH-20 (Pharmacia Co., Ltd.), • β ·

Amberlit XAD-11 (Rohm & Haas Co., Ltd.) a Diaion HP-20 (Mitsubishi Chemical Corp.), nebo běžnou sloupcovou chromatografií na reverzní fázi využívající silikagel nebo alkylovaný silikagel (výhodně HPLC). Všechny postupy využívají dále příslušná eluční činidla.

Krok C-2

V kroku C-2 se připraví sloučenina 1 odštěpením t-butoxykarbonylově skupiny ze sloučeniny 6 v inertním systému rozpouštědel.

Krok C-2 se provádí analogicky jako krok A-2.

Dále v případě kde W^a je chránící skupina karboxylu, se sloučenina 1 připraví odštěpením chránící skupiny analogicky jako v kroku A-2.

4 4 4 4 · • 4 ·· 4· · • · · · · 4 4 • 4444 · 444 4 • · · 4 » 4 444444 •• 4 4 4 4 4

44 4 4 4

Postup D

°-V

Postup D je postup přípravy sloučeniny 2a, výchozí látky pro postupy A a B. Sloučenina 2a se připravuje ze sloučeniny 7 snadno dostupné dále uvedeným postupem.

4

4 4 4 » 4 4 1 » 4 4 4

444 4 4 4

Krok D-l

V kroku D-l se připraví sloučenina 8 reakcí sloučeniny 7 s baží v inertním rozpouštědle.

Volba rozpouštědla nemá žádné zvláštní omezení, pokud rozpouštědlo neovlivňuje negativně průběh reakce a rozpouští do určité míry výchozí materiál. Vhodná rozpouštědla jsou alifatické uhlovodíky jako hexan, heptan, ligroin a petrolether; aromatické uhlovodíky jako benzen, toluen a xylen; halogenované uhlovodíky jako methylenchlorid, chloroform, tetrachlormethan, dichlorethan, chlorbenzen a dichlorbenzen; ethery jako diethylether, diisopropylether, tetrahydrofuran, dioxan, dimethoxyethan a diethylenglykol dimethylether; a methanol; výhodně halogenované uhlovodíky a methanol.

Volba baze nemá žádné zvláštní omezení, pokud baze neovlivňuje stabilitu jiných funkčních skupin (např. methylester). Vhodnou baží jsou methoxidy alkalických kovů jako methoxid sodný a draselný.

Reakční teplota se pohybuje v rozmezí -10 až 50 °C, výhodně 10 až 30 °C.

Reakční doba závisí hlavně na reakční teplotě, použitém výchozím materiálu, bázi atd., obvykle se pohybuje v rozmezí 15 min až 10 h, výhodně 1 až 5 h.

Po zkončení reakce se reakční směs např. neutralizuje kyselinou chlorovodíkovou v dioxanu, rozpouštědlo oddestiluje za sníženého tlaku a produkt purifikuje sloupcovou chromatografií na silikagelu.

Krok D-2

V kroku D-2 se připraví sloučenina 9 zavedením isopropy1idenové skupiny do sloučeniny 8 v inertním rozpouštědle.

Volba rozpouštědla nemá žádné zvláštní omezení, pokud rozpouštědlo neovlivňuje negativně průběh reakce a rozpouští do určité míry výchozí materiál. Vhodná rozpouštědla jsou alifatické uhlovodíky jako hexan, heptan, ligroin a petrolether; aromatické uhlovodíky jako benzen, toluen a xylen; ethery jako tetrahydrofuran, dioxan, dimethylether; ketony diethylether, d i methoxyethan jako aceton, di isopropylether, a diethylenglykol methylethylketon, methylisobutylketon, isoforon a cyklohexanon, výhodně ketony (zejména aceton).

Vhodným činidlem je výhodně 2,2-dimethoxypropan za katalýzy např. kyselinou p-toluensulfonovou.

Reakční doba závisí hlavně na reakční teplotě, použitém výchozím materiálu atd., obvykle se pohybuje v rozmezí 15 min až 10 h, výhodně 1 až 5 h.

Po zkončení reakce se např. do reakční směsi přidá rozpouštědlo nemísitelné s vodou, např. ethylacetát, vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného, produkt se extrahuje do ethylacetátu a rozpouštědlo se oddestiluje. Produkt se purifikuje např. rekrystalizací nebo různými chromatografickými postupy.

Krok D-3

V kroku D-3 se, pokud je to nezbytné 1) nahradí methylová skupina methylesteru jiným esterovým zbytkem, 2) hydrolyzuje methylkarboxylátová část nebo 3) zavede chránící skupina na karboxyl nebo esterový zbytek po hydrolýze z bodu 2).

(Transesterif ikace)

V tomto kroku se připraví sloučenina 10 reakcí sloučeniny 9 s alkoholem za vzniku požadovaného esteru v inertním rozpouštědla a za katalýzy vhodnou baží.

Volba rozpouštědla nemá žádné zvláštní omezení, pokud rozpouštědlo neovlivňuje negativně průběh reakce a rozpouští do určité míry výchozí materiál. Vhodná rozpouštědla jsou alifatické uhlovodíky jako hexan, heptan, ligroin a petrolether; aromatické uhlovodíky jako benzen, toluen a xylen; halogenované uhlovodíky jako methylenchlorid, chloroform, tetrachlormethan, dichlorethan, chlorbenzen a dichlorbenzen; ethery jako diethylether, diIsopropylether, • · · · · · • · · · · * · · · · · « • · · · · · · * · · · 9 9

99 99

tetrahydrofuran, dioxan, dimethoxyethan a diethylenglykol dimethylether; a alkoholy jako methanol, ethanol, n-propanol, isopropanol, n-butanol, isobutanol, t-butanol, isoamylalkohol, diethylenglykol, glycerin, oktanol, cyklohexanol a methylcellosolv. Výhodné je zvolit alkohol, který je současně reakční složkou.

Vhodnou baží jsou organické baze jako pyridin, triethylamin, diethylamin a 4-N,N-dimethytlaminopyridin.

Po zkončení reakce se např. reakční směs neutralizuje kyselinou, přidá se rozpouštědlo nemísitelné s vodou např. ethylacetát, požadovaná sloučenina se extrahuje do ethylacetátu, atd. promyje vodou a rozpouštědlo oddestiluje. Produkt se dále purifikuje např. rekrystalizaci nebo různými chromatografickými postupy.

(Difenylmethyláce)

V tomto kroku se připraví sloučenina 10 reakcí sloučeniny 9 s difenyldiazomethanem v inertním rozpouštědle a za katalýzy Lewisovou kyselinou.

Volba rozpouštědla nemá žádné zvláštní omezení, pokud rozpouštědlo neovlivňuje negativně průběh reakce a rozpouští do určité míry výchozí materiál. Vhodná rozpouštědla jsou alifatické uhlovodíky jako hexan, heptan, ligroin a petrolether; aromatické uhlovodíky jako benzen, toluen a xylen; halogenované uhlovodíky jako methylenchlorid, chloroform, tetrachlormethan, dichlorethan, chlorbenzen a dichlorbenzen; ethery jako diethylether, diisopropylether, tetrahydrofuran, dioxan, dimethoxyethan a diethylenglykol dimethylether; a alkoholy jako methanol, ethanol, n-propanol, isopropanol, n-butanol, isobutanol, t-butanol, isoamylalkohol, diethylenglykol, glycerin, oktanol, cyklohexanol a methyl cellosolv; výhodněji alkoholy (zejména methanol), halogenované uhlovodíky (dichlormethan) a jejich směsi.

Vhodnou Lewisovou kyselinou je BF3-etherát.

Reakční teplota se pohybuje v rozmezí 0 až 50 °C, výhodně laboratorní teplota.

Reakční doba závisí hlavně na použitém výchozím • · • · ·· · ·* «· • · · · · · · • · · · ···· • ··«··· ··· · ·· • · · · · • 9 9 99 99 materiálu, Lewísově kyselině, reakční teplotě a obvykle se pohybuje v rozmezí 10 min až 5 h, výhodně 1 až 3 h.

Po zkončení reakce se např. rozpouštědlo oddestiluje a produkt purifikuje rekrystalizací nebo různými chromatografickými postupy.

kde W* je H, rozpouštědle nemá žádné zvláštní omezení, pokud negativně průběh reakce a rozpouští materiál. Vhodná rozpouštědla jsou a toluen; ethery jako ketony jako aceton uvedených organických (Hydrolýza)

V tomto kroku se připraví sloučenina 10, hydrolýzou sloučeniny 9 v inertním a v přítomnosti baze.

Volba rozpouštědla rozpouštědlo neovlivňuje do určité míry výchozí aromatické uhlovodíky jako benzen diethylether a tetrahydrofuran; a methylethylketon; voda a směsi rozpouštědel s vodou.

Vhodné baze jsou hydroxidy alkalických kovů jako hydroxid lithný, sodný a draselný; hydrogenuhličitaný alkalických kovů jako hydrogenuhličitan sodný a draselný.

Reakční teplota se pohybuje v rozmezí -10 až 50 °C, výhodně 10 až 30 °C,

Reakční doba závisí hlavně na použitém výchozím materiálu, bázi, reakční teplotě a obvykle se pohybuje v rozmezí 15 min až 10 h, výhodně 1 až 5 h.

Po zkončení reakce se např. reakční směs ochladí, mírně okyselí zředěnou kyselinou chlorovodíkovou, přidá se rozpouštědlo nemísitelné s vodou jako ethylacetát, požadovaná sloučenina se extrahuje do ethylacetátu a rozpouštědlo oddestiluje. Produkt se dále purifikuje např. rekrystalizací nebo různými chromatografickými postupy.

(Zavedení chránící skupiny nebo esterového zbytku na karboxyl)

V tomto kroku se připraví sloučenina 10 zavedením chránící skupiny nebo esterového zbytku na karboxyl v poloze 1- sloučeniny 9, kde W^a je H.

9 9 9

9999 9

9 9 9 9

99

99 > 9 9 9 » 9 9 9

999 999 • 9

9 9 9

Zavedení chránící skupiny nebo esterového zbytku závisí na typu zbytku nebo skupiny a provádí se obecnými postupy organické syntézy, např. podle postupů popsaných v Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vyd., (1991, Green et al.)

Krok D-4

V kroku D-4 se připraví sloučenina 2a redukcí sloučeniny 10 vhodným redukčním činidlem v inertním rozpouštědle.

Volba rozpouštědla rozpouštědlo neovlivňuje do určité míry výchozí alifatické uhlovodíky a petrolether; aromatické a xylen; ethery jako tetrahydrofuran, dioxan, cyklohexanon; nitrily jako amidy jako formamid, nemá žádné zvláštní omezení, pokud negativně průběh reakce a rozpouští materiál. Vhodná rozpouštědla jsou jako hexan, heptan, ligroin uhlovodíky jako benzen, toluen diethylether, diisopropylether, dimethoxyethan a diethylenglykol dimethylether; alkoholy jako methanol, ethanol, n-propanol, isopropanol, n-butanol, isohutanol, t-butanol, isoamylalkohol, diethylenglykol, glycerin, oktanol, cyklohexanol a methylcellosolv; ketony jako aceton, methylethylketon, methylisobutylketon, isoforon a acetonitril a isohutyronitri1;

N,N-dimethylformamid, N,N-dimethylacetamid, N-methyl-2-pyrrolidon, N-methylpyrrolidinon a hexamethylfosfotriamid; sulfoxidy jako dimethylsulfoxid a sulfolan; alifatické karboxylové kyseliny jako octová; a směsi uvedených organických rozpouštědel s vodou; výhodně alkoholy (zejména methanol), ethery jako tetrahydrofuran a dioxan, alifatické karboxylové kyseliny jako octová a směsi uvedených organických rozpouštědel s vodou.

Jako redukční činidlo je vhodné použít Pd/C, Pt a Raney Ni v přítomnosti [plynného vodíku, Lindlarův katalyzátor (Pd-BaS04 nebo Pd-CaC03 v kombinaci s octanem olovnatým) je zvláště výhodný.

Reakční teplota se pohybuje v rozmezí -10 až 50 °C, 10 až °C.

Reakční doba závisí na použitém výchozím materiálu, bázi, reakční teplotě a obvykle se pohybuje v rozmezí 15 min až • · · •999· · h₇ výhodně 1 až 5 h.

Po zkončení reakce se např. z reakční směsi odfiltruje katalyzátor na sníženého tlaku, rozpouštědlo oddestiluje za sníženého tlaku a produkt případně purifikuje rekrystalizací nebo různými chromatografickými postupy.

Postup E

E-4

E-3

E-5 v

0* 00 ·· 0 00 00 • · 0 ··· 9 9 9· • 000· 0 · · · 9 9 9 9 • 00 0 · 0 0 ·«·· 9 000 000 ·00···· 0 9 ·· 00 00 0 «0 00

Postup E je postup přípravy sloučeniny 2b nebo 2c, výchozích látek pro postupy A a B. Sloučenina se připravuje ze sloučeniny 10 snadno dostupné výše uvedeným postupem.

Krok E-l

V kroku E-l se připraví sloučenina 12 zavedením žádané acylové skupiny do sloučeniny 10 v inertním rozpouštědle.

Tento krok se provádí stejně jako výše popsaný krok C-l.

Volba rozpouštědla rozpouštědlo neovlivňuje do určité míry výchozí

Krok E-2

V kroku E-2 se připraví sloučenina 13 reakcí sloučeniny 12 s činidlem odštěpujícím isopropy1idenovou skupinu v inertním rozpouštědle.

nemá žádné zvláštní omezení, pokud negativně průběh reakce a rozpouští materiál. Vhodná rozpouštědla jsou halogenované uhlovodíky jako methylenchlorid a chloroform.

Vhodným štěpícím činidlem je kyselina, její volba nemá žádné zvláštní omezení, pokud je použita jako katalyzátor. Vhodnými kyselinami jsou Bróenstedovy kyseliny jako např. chlorovodíková, organické kyseliny, methansulfonová, anorganické kyseliny, sírová, chloristá a mravenčí, šťavelová, trifluoroctová jako chlorid bromovodíková, např. octová, p-toluensulfonová, a trifluormethansulfonová; Lewisovy kyseliny, zinečnatý, chlorid cíničitý, chlorid boritý, fluorid boritý a bromid boritý; a kyselé iontoměniče; výhodně organické kyseliny (zejména trifluoroctová).

Reakční doba závisí hlavně na reakční teplotě, použitém výchozím materiálu, kyselině, atd., obvykle se pohybuje v rozmezí 15 min až 10 h, výhodně 1 až 5 h.

Po zkončení reakce se např. neutralizuje reakční směs, rozpouštědlo se oddestiluje za sníženého tlaku a produkt se purifikuje sloupcovou chromatografií na silikagelu.

Dále se v tomto kroku převede acylová skupina R® z polohy

7- do polohy 9-.

·· 99 · ·· ··

9 9 · · · · · 9 · • · · 9 9 · ··· · ·· · • 9 9 · · » ♦ ···· 9 9 99 ···

99·9«>· 9 9 ·· ♦ · ·♦ · 99 9»

O

Krok E-3

V kroku E-3 se připraví výchozí látka 2b redukcí sloučeniny 13 v inertním rozpouštědle.

Tento krok se provádí stejně jako výše popsaný krok D-4.

Krok E-4

V kroku E-4 se připraví sloučenina 14 reakcí sloučeniny 12 s činidlem odštěpujícím isopropylidenovou skupinu v inertním rozpouštědle.

Volba rozpouštědla nemá žádné zvláštní omezení, pokud rozpouštědlo neovlivňuje negativně průběh reakce a rozpouští do určité míry výchozí materiál. Vhodným rozpouštědlem je směs kyseliny octové (sloužící rovněž jako katalyzátor) a vody.

Reakční teplota se pohybuje v rozmezí 10 až 70 °C, výhodně 30 až 60 °C.

Reakční doba závisí hlavně na reakční teplotě, použitém výchozím materiálu, kyselině, atd., obvykle se pohybuje v rozmezí 15 min až 24 h, výhodně 10 až 20 h.

Po zkončení reakce se např. rozpouštědlo oddestiluje za sníženého tlaku, odparek zředí rozpouštědlem němísitelným s vodou např. ethylacetátem a vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, produkt se extrahuje ethylacetátem a rozpouštědlo oddestiluje. Produkt se případně ještě purifikuje sloupcovou chromatografií na silikagelu.

Krok E-5

V kroku E-5 se připraví výchozí látka 2c redukcí sloučeniny 14 v inertním rozpouštědle.

Tento krok se provádí stejně jako výše popsaný krok D-4.

0 • 0

0* ·

0 0·

Postup F

F-5

R¹CNI

II

O <2d) • 0 0 «0

0 000 0 0 • 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 <0 0

0 0 0 0 0 ·

F-2 v

F-6 v

00 0 0 0 0

0 0 0

000 000

0

0« 00 • ··· • fc 1 • fc <

fcfcfc·· · fcfc fcfc » fcfc 1 » fcfc 1

Postup F je postup přípravy sloučeniny 2b nebo 2c, výchozí látky pro postupy A a B. Sloučenina se připravuje ze sloučeniny 14 snadno dostupné výše uvedeným postupem.

Krok F-l

V kroku F-l se připraví sloučenina 15 zavedením chránící skupiny na hydroxyly sloučeniny 14 v inertním rozpouštědle.

Volba chránící skupiny nemá žádné zvláštní omezení, výhodné jsou t-butyldimethylsily1 a t-butyldifenylsilyl.

Silylace se provádí standartním postupem. Např. reakcí s t-hutyldimethylsilylhalogenidem (zejména chloridem) v dimethylformamidu za přítomnosti baze jako je triethylamin a 4-(N,N-dimethylamino)pyridin.

Reakčni teplota se pohybuje v rozmezí -10 až 50 °C, výhodně 10 až 40 °C.

Reakčni doba závisí na reakčni teplotě, použitém výchozím materiálu, bázi, atd., obvykle se pohybuje v rozmezí 15 min až 24 h, výhodně 10 až 20 h.

Po zkončení reakce se např. reakčni směs zředí rozpouštědlem nemísitelným s vodou např. ethylacetátem a vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, produkt se extrahuje ethylacetátem a rozpouštědlo oddestiluje. Produkt se případně ještě silikagelu.

purifikuje sloupcovou chromatografií na

Krok F-2

V kroku F-2 se připraví sloučenina 16 zavedením žádané acylové skupiny do sloučeniny 15 v inertním rozpouštědle.

Tento krok se provádí stejně jako výše popsaný krok C-l.

Krok F-3

V kroku F-3 se připraví sloučenina 17 reakcí sloučeniny 16 s činidlem odštěpujícím chránící skupiny na hydroxylech (výhodně t-butyldimethylsilyl nebo t-butyldifenylsilyl) v inertním rozpouštědle.

Vhodným rozpouštědlem jsou výhodně alkoholy, methanol

00 00

0 0 ·0

0000 0 0

0 0 0 0 0 0

00 00 0

0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

000 000 0 0

00 a ethanol, voda a jejich směsi.

Vhodným štěpícím činidlem jsou kyseliny. Volba kyseliny zvláštní omezení, pokud je použita jako Vhodnými kyselinami jsou Bróenstedovy kyseliny kyseliny, napr chlorovodíková, kyseliny, např. methansulfonová, nemá žádné katalyzátor. jako anorganické bromovodíková, sírová, chloristá a organické octová, mravenčí, štavelová, p-toluensulfonová, trifluoroctová a trifluormethansulfonová; Lewisovy kyseliny, jako chlorid zinečnatý, chlorid cíničitý, chlorid boritý, fluorid boritý a bromid boritý; a kyselé iontoměniČe; výhodně organické kyseliny a trifluoroctová).

(zejména octová

Činidla obsahující fluoridový iont, jako tetrabutylamonium fluorid, jsou rovněž výhodná.

Dále se v tomto kroku převede acylová skupina R⁷ z polohy

8- do polohy 9-.

Krok F-4

V kroku F-4 se připraví sloučenina 18 bučf 1) zavedením chránící skupiny na hydroxyl v poloze 8- sloučeniny 17, nebo 2) zavedením žádané acylové skupiny.

(Zavedení acylu)

Tento krok se provádí stejně jako krok C-l.

(Zavedení chránící skupiny)

Vhodnou chránící skupinou je t-butyldimethylsilyl, zavádí se t-butyldimethylsilyl triflátem v methylenchloridu s lutidinem jako baží.

·· ·· ·· 4 44

444 4 4 4 4444

4444 4 444 4 44 4

44 444 4 4444 4 444 444 • 444444 4 4

44 44 4 44 44

Krok F-5

V kroku F-5 se připraví výchozí látka 2d redukcí sloučeniny 18 v inertním rozpouštědle.

Tento krok se provádí stejně jako výše popsaný krok D-4.

Krok F-6

V kroku F-6 se připraví výchozí látka 2e redukcí sloučeniny 16 v inertním rozpouštědle.

Tento krok se provádí stejně jako výše popsaný krok D-4.

Postup G

G-3

G-1 v

G-2 ▼

G-4 v

R¹CNI

II

O

OR⁸

99

9 9 9 9

9999 · 9 · · 9 9 9 9

9 9 · 99

99 99 • 99 99

9 9 9 9

9 9 9 9 9

9999 · 999 999

9 9 • 99 99

Postup G je postup přípravy sloučeniny 2f nebo 2g, výchozí látky pro postupy A a B. Sloučenina se připravuje ze sloučeniny 13 nebo 14 snadno dostupné výše uvedenými postupy.

Krok G-l

V kroku G-l se připraví sloučenina 19 zavedením žádané acylové skupiny do sloučeniny 13 v inertním rozpouštědle.

Tento krok se provádí stejně jako výše popsaný krok G-l.

Krok G-2

V kroku G-2 se připraví výchozí látka 2f redukcí sloučeniny 19 v inertním rozpouštědle.

Tento krok se provádí stejně jako výše popsaný krok D-4.

Krok G-3

V kroku G-3 se připraví sloučenina 20 zavedením žádané acylové skupiny do sloučeniny 14 v inertním rozpouštědle.

Tento krok se provádí stejně jako výše popsaný krok C-l.

Krok G-4

V kroku G-4 se připraví výchozí látka 2g redukcí sloučeniny 20 v inertním rozpouštědle.

Tento krok se provádí stejně jako výše popsaný krok D-4.

~ 58 -

H-2 « · • ···

Postup η ·· ·· ? · · · ··· **··

COOMe Η-1 (26)

(27)

Η-3 (28)

OAc k^OAc

AcO'^”“-<'^O's_rx' ^c°OMe

O COOMe

H-4

H-5 (29)

H-6

OAc k^OAc

AcO^--^^O^^C00Me cr

Ň,

H-7

OAc (30) kx-°Ac AcO'^'^,'^,-/^'^OXj^-^Co°Me H-8

R’CNřA<

⁰ ŇH, (32)

R¹CN II O (7)

H-9

II

O

ŇH ^=NBoc

BocNH (5) ·· ·· ·» · • · · · · · • ···· « 9 9 9

9 9 9 9 9 9999

9 9 9 9 9 9

99 99 9

99

9 9

Postup H je postup přípravy sloučeniny 5, výchozí látky pro postup C. Sloučenina 5 se připravuje ze sloučeniny 26 popsané v Carbohydrate Research, 83, 163-169 (1980), nebo WO 95/32 955.

Volba rozpouštědla rozpouštědlo neovlivňuje do určité míry výchozí aromatické uhlovodíky halogenované uhlovodíky

Krok H-l

V kroku H-l se připraví sloučenina 27 reakcí známé sloučeniny 26 s azidačním činidlem v inertním rozpouštědle.

nemá žádné zvláštní omezení, pokud negativně průběh reakce a rozpouští materiál. Vhodná rozpouštědla jsou jako benzen, toluen a xylen; jako methylenchlorid a chloroform;

ethery jako diethylether, diisopropylether, tetrahydrofuran, dioxan a dimethoxyethan; a nitrily jako acetonitril a isobutyronitril.

Volba azidačního činidla nemá žádné zvláštní omezení, pokud jde o činidlo běžně používané k azidaci. Výhodná činidla jsou diarylfosfoazidy jako difenylfosfoazid; trialkylsilylazidy jako triethylsilylazid a trimethylsilylazid a azidy alkalických kovů jako azid sodný sodný.

Reakční teplota se pohybuje a draselný, výhodně azid rozmezí -10 az 50 °C, výhodně 10 až 30 °C.

Reakční doba závisí hlavně na výchozím materiálu, atd.

min až 10 h, výhodně 1 až 5 h.

Po zkončení reakce se např. roztokem kyseliny chlorovodíkové oddestiluje za sníženého tlaku chromatografií na silikagelu.

reakční teplotě, použitém obvykle se pohybuje v rozmezí reakční směs neutralizuje v dioxanu, rozpouštědlo se a produkt se purifikuje

Krok H-2

V kroku H-2 se připraví sloučenina 28 zavedením t-butoxykarbonylové skupiny do sloučeniny 27 v inertním rozpouštědle.

t-Butoxykarbonylace se provádí reakcí di-t-butyldikarbo99 99 99 9 99 99 • 9 9 0 · « 9 9 9 9 • 9 9 99 0 0 0 « 0 ·« 0 • · · 0 0 0 0 9999 0 000 000

0000*00 0 0

99 00 0 00 00

- 60 nátu nebo 2-(t-butoxykarbonyloxyimino)-2-fenylacetonitrilu v inertním rozpouštědle (např. aromatické uhlovodíky jako benzen, toluen a xylen; halogenované uhlovodíky jako methylenchlorid a chloroform; ethery jako diethylether, diisopropylether, tetrahydrofuran a dioxan; a amidy jako dimethylformamid) za přítomnosti baze (např. 4-(N,N-dimethylamino)pyridin).

Po zkončení reakce se např. reakční směs neutralizuje, rozpouštědlo oddestiluje za sníženého tlaku, odparek se zředí rozpouštědlem nemísitelným s vodou jako ethylacetát, produkt se extrahuje ethylacetátem a rozpouštědlo oddestiluje. Produkt se případně ještě purifikuje rekrystalizací nebo různými chromatografickými postupy.

Krok H-3

V kroku H-3 se připraví sloučenina 29 reakcí sloučeniny 28 s baží v inertním rozpouštědle.

Tento krok se provádí stejně jako výše popsaný krok D-l.

Krok H-4

V kroku H-4 se acyluje sloučenina 29 v inertním rozpouštědle. Acylace se provádí standartními postupy pro chránění hydroxylových skupin. Např. lze acetylaci provést 1) reakcí s acetanhydridem v pyridinu nebo 2) reakcí s acetylchloridem (zejméně chloridem) v methylenchloridu a v přítomnosti bazického katalyzátoru (např. triethylaminu a 4-N,N-dimethylaminopyridinu).

Po zkončení reakce se např. rozpouštědlo oddestiluje za sníženého tlaku, přidá se rozpouštědlo nemísitelné s vodou jako ethylacetát a vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Produkt se extrahuje do ethylacetátu a rozpouštědlo oddestiluje. Produkt lze dále přečistit rekrystalizací nebo různými chromatografickými postupy.

Krok H-5

V kroku H-5 se připraví sloučenina 30 odštěpením t-butoxykarbonylové skupiny ze sloučeniny připravené v kroku

4» • »4 • 4 4 44 • 4 4 4 • 4 4 ·

Λ 44

4

4 «

4 4 4

4 4444

4 4 · 4 ··

4 < · 4 «44

Λ

4

4 4

4« 44

Η-4 vhodným eliminačním činidlem v inertním rozpouštědle.

Eliminace t-butoxykarbonylové skupiny se provádí standartnímí postupy.

Volba rozpouštědla nemá žádné zvláštní omezení, pokud rozpouštědlo neovlivňuje negativně průběh reakce a rozpouští do určité míry výchozí materiál. Vhodná rozpouštědla jsou alifatické uhlovodíky jako hexan, heptan, ligroin a petrolether; aromatické uhlovodíky jako benzen, toluen a xylen; halogenované uhlovodíky jako methylenchlorid, chloroform, tetrachlormethan, dichlorethan, chlorbenzen a dichlorbenzen; estery jako ethylmravenčan, ethylacetát, propylacetát, butylacetát a diethylkarbonát; ethery jako diethylether, diisopropylether, tetrahydrofuran, dioxan, dimethoxyethan a diethylenglykol dimethylether; amidy jako formamid, N,N-dimethylformamid, N,N-dimethylacetamid, N-methyl-2-pyrrolidon, N-methylpyrrolidinon a hexamethylfosfotriamid; a sulfoxidy jako dimethylsulfoxid a sulfolan; výhodně halogenované uhlovodíky (zejména methylenchlorid).

Volba činidla nemá žádné zvláštní omezení, pokud jde o běžně používané činidlo k azidaci. Výhodná je kyselina chlorovodíková.

Reakční doba závisí hlavně na reakční teplotě, použitém výchozím materiálu, atd., obvykle se pohybuje v rozmezí 15 min až 24 h, výhodně 1 až 10 h.

Krok H-6

V kroku H-6 se připraví sloučenina 7 zavedením vhodné acylové skupiny do sloučeniny 30 v inertním rozpouštědle.

Tento krok se provádí stejně jako výše popsaný krok C-l.

• ·

- 62 ·*

0 0 • · ··· • · · ·

0 0 ·

00 ·· 00 <9 · · <

0

0 0 0 0 0 0 00000 0 000 000 • 0 0 0 0 90 0 00 ··

Krok H-7

V kroku H-7 se připraví sloučenina 32 redukcí sloučeniny 7 v inertním rozpouštědle.

Tento krok se provádí stejně jako výše popsaný krok D-4.

Krok H-8

V kroku H-8 se připraví sloučenina 33 reakcí sloučeniny s N,N'-dl-t-butoxykarbonylthiomočovinou v inertním rozpouštědle za přítomnoti baze a chloridu rtufnatého.

Tento krok se provádí stejně jako výše popsaný krok A-l.

Krok H-9

V kroku H-9 se připraví sloučenina 34 reakcí sloučeniny s baží v inertním rozpouštědle.

Tento krok se provádí stejně jako výše popsaný krok D-l.

Krok H-10

Transesterifikace, hydrolýza, chránění nebo esterifikace

V kroku H-10 se provádí 1) substituce methylu na methylkarboxylátu jiným esterovým zbytkem, 2) hydrolýza methylkarboxylátu nebo 3) zavedení chránící skupiny na karboxyl nebo esterový zbytek po hydrolýze z bodu 2), dle volby.

Tento krok se provádí stejně jako výše popsaný krok D-3.

Sloučeninu 1 předkládaného vynálezu lze připravit i jinými postupy než postupy uvedenými výše. Konkrétně lze připravit předkládanou sloučeninu 1 změněným pořadím kroků v postupech A až H, dle situace. Například lze připravit předkládanou sloučeninu 1 postupem J uvedeným níže, ze sloučeniny 10 zísané jako intermediát v postupu D.

• · · · ·· · ··

9 9 9 9 9

Postup J

\=NH

HsN (1j) • · ·· · • · ·· ·· • · · ··· · · · • · ·

- 64 Krok J-l

Krok J-l se provádí v případě nutnosti a slouží k přípravě sloučeniny 35 zavedením vhodné acylové skupiny do sloučeniny 10 v inertním rozpouštědle.

Tento krok se provádí stejně jako výše popsaný krok C-l.

Krok J-2

V kroku J-2 se připraví sloučenina 36 redukcí sloučeniny v inertním rozpouštědle.

Tento krok se provádí stejně jako výše popsaný krok D-4.

Krok J-3

V kroku J-3 se připraví sloučenina 37 reakcí sloučeniny s N,N'-di-t-butoxykarbonylthiomočovinou v inertním rozpouštědle za přítomnoti baze a chloridu rtuťnatého.

Tento krok se provádí stejně jako výše popsaný krok A-l.

Krok J-4

Krok J-4 se provádí v případě nutnosti a slouží k přípravě sloučeniny 38 odštěpením chránící skupiny ze sloučeniny 37.

Způsob eliminace chránící skupiny závisí na typu chránící skupiny a lze volit standartní postup, např. postupy popsané v Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vyd., (1991, Green et al.).

V případě difenylmethylově chránící skupiny lze volit katalytickou redukci a použít kyselinu octovou a trifluoroctovou nebo komplex BF3.etherát.

V případě benzylové chránící skupiny na karboxylu lze volit katalytickou redukci, v případě alkylové chránící skupiny jako je methyl nebo ethyl se provádí hydrolýza.

Krok J-5

V kroku J-5 se připraví předkládaná sloučenina lj odštěpením t-butoxykarbonylové skupiny a isopropylidenové skupiny ze sloučeniny 38 v inertním rozpouštědle.

Tento krok se provádí stejně jako výše popsaný krok E-2.

• · ·

Sloučeninu kyseliny neuraminové 1 připravenou výše uvedenými postupy nebo její sůl, lze v případě nutnosti převést na farmaceuticky přijatelnou sůl.

Sloučenina kyseliny neuraminové 1 předkládaného vynálezu podléhá in vivo hydrolýze vlivem přítomných hydroláz a vykazuje vynikající inhibiční účinek na replikaci viru a inhibiční účinek na sialidázu. Dále sloučenina kyseliny neuraminové 1 vykázala při podání myším infikovaným virem chřipky lepší terapeutický účinek než Sloučenina A (GG-167) popsaná v dokumentu W091/16320 (Japonská PCT přihláška (Kokai) No. Hei 5-507068. Proto je sloučenina kyseliny neuraminové 1 předkládaného vynálezu použitelná při terapii nebo prevecni (výhodně terapii) virových infekcí (výhodně chřipkových virových infekcí).

Sloučeninu kyseliny neuraminové 1 předkládaného vynálezu lze podávat např. perorálně nebo intranasálně ve formě roztoků jako kapalné přípravky, vodné kapalné přípravky obsahující organické rozpouštědlo, atd., ve formě aerosolu, práškové formě, atd. Kapalné přípravky a kapalné přípravky obsahující organické rozpouštědlo se připravují dobře známými postupy a využívají purifikovanou vodu, farmaceuticky přijatelná organická rozpouštědla (např. ethanol, propylenglykol, PEG 400, atd.) a stabilizátory (paraoxybenzoáty jako methylparaben a propylparaben; alkoholy jako chlorbutanol, benzylalkohol a fenylethylalkohol; benzalkonium chlorid; fenoly jako fenol a kresol; thimerosal, kyselina dehydrooctová, atd.). Aerosoly se připravují dobře známými postupy a využívají jako nosných plynů různé druhy freonů a dusíkatých plynů, a povrchově aktivní činidlo, např. lecitin. Prášky se připravují dobře známými postupy a využívají excipienty (např. organické excipienty jako jsou cukry, např. laktóza, sacharóza, glukóza, mannit a sorbit; škroby např. obilný, bramborový, a-škrob, dextrin a karboxymethylový škrob; cellulózy, např. krystalickou celulózu, nízko-substituovanou hydroxy·· ··

- 66 propylcelulózu, hydroxypropylcelulózu, hydroxypropylmethylcelulózu, karboxymethylcelulózu, vápenatou sůl sodnou sůl a Pullulan např. lehký karboxymethylcelulózy a vnitřně zesíťovanou karboxymethylcelulózy; arabská guma; dextran a anorganické excipienty jako jsou křemičitany, křemičitanový anhydrid, syntetický hlinito-křemičitan a hlinito-metakřemičitan hořečnatý; fosforečnany, např. fosforečnan vápenatý; uhličitany, např. uhličitan vápenatý a sírany, např. síran vápenatý), lubrikanty (např. kys. stearová, kovové soli kys. stearové, např. vápenatá a hořečnatá; talek, koloidní oxid kys. boritá;

vosk a spermacet; síroan sodný; glykol; kys.

křemičitý; vosky jako včelí kys. adipová; sírany jako fumarová; benzoát sodný;

DL-leucin; sodná sůl mastné kyseliny; laurylsulfáty jako laurylsulfát sodný laurylsulfát křemičité např. stabilizátory a propylparaben;

hořečnatý; kyseliny a výše uvedené škroby), jako methylparaben anhydrid a hydrát;

(paraoxybenzoáty alkoholy jako chlorbutanol, benzylalkohol a fenylethylalkohol; benzalkonium chlorid; fenoly jako fenol a kresol; thimerosal; kys. dehydrooctová a sorbová), korigenty (např. sladidla, octy, parfémy atd. běžné přísady), ředidla, apod.

Dávka účinné složky závisí na celkovém stavu onemocnění, věku pacienta, cestě podání atd. Např. v případě roztoků je vhodné podávat účinnou složku v množství 0,1 mg (výhodně 1 mg) až 1000 mg (výhodně 500 mg); v případě prášků je vhodné podávat účinnou složku v množství 0,1 mg (výhodně 1 mg) až 1000 mg (výhodně 500 mg); v případě aerosolů je vhodné podávat účinnou složku v množství 0,1 mg (výhodně 1 mg) až 1000 mg (výhodně 500 mg); jednou nebo několikrát denně, podle stavu onemocnění.

• · · · • · · · · * · · · · ·· · • · · · · · · ···· · ··· ··· • · · • ·

Příklady provedení vynálezu

Dále je vynález podrobněji vysvětlen na Příkladech, Příkladech příprav a Příkladech příprav lékové formy. Uváděné příklady v žádném směru vynález nevymezují.

Příklad 1

Sůl trifluoroctové kyseliny a myristyl 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoátu (E8, sloučenina 88)

COO(CH2)₁₃CH₃ —nh cf₃cooh

NH₂ ^z

i) Methyl 5-acetamido-4-azido-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E3)

Methyl 5-acetamido-7,8,9-tri-0-acetyl-4-azido-2,3,4,5-tetradeoxy-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (El) (syntetizovaný podle Mark von Itzstein et al., Carbohydr. Res., 244, 181-185 (1993) a Carbohydr. Res., 259, 293-299 (1993) (1,3 g; 2,8 mmol) byl rozpuštěn v methanolu (26 ml, 20x objem) při laboratorní teplotě a za stejných podmínek přidáno katalytické množství methoxidu sodného. Směs byla míchána 1 h. Po zkončení reakce byla reakční směs neutralizována, přidán Dowex-50x8 (H⁺). Dále byla reakční směs přefiltrována a ionex promyt methanolem. Filtrát byl spojen a oddestilován za sníženého tlaku, odparek byl « ·

I > · · chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 60 g, ethylacetát:2-propanol:voda = 2:2:1) s výtěžkem 440 mg (100 %) sloučeniny E4 jako bílé pevné látky.

Rf 0,3 (methylenchlorid:methanol = 5:1)

Sloučenina E2 (580 mg; 1,8 mmol) byla rozpuštěna v acetonu (29 ml, 50x objem) při laboratorní teplotě a postupně přidán 2,2-dimethoxypropan (0,7 ml; 5,2 mmol) a DL-10-kamforsulfonová kyselina (42 mg; 0,18 mmol) za chlazení ledem. Reakční směs byla dále a míchána při laboratorní teplotě 1 h. Po zkončení reakce byla reakční směs neutralizována triethylaminem, oddestilována za sníženého tlaku a zbytek chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 60 g, benzen:acetonitri 1 = 1:1) s výtěžkem

540 mg (84 fc) sloučeniny E3 jako bílé pevné látky.

Rf 0,3 (benzen:acetonitri1 = 1:1).

¹H-NMR (270 MHz, CDCls , TMS) δ (ppm):

5,97 (1H, d, J=2,4 Hz), 5,63 (1H, d, J=7,l Hz), 4,36 (1H, ddd, J=7,9; 6,4; 4,8 Hz), 4,30-4,00 (6H, m), 3,81 (3H, s), 3,57 (1H, dd, J=7,9; 5,3 Hz), 2,12 (3H, s), 1,40 (3H, s), 1,36 (3H, s);

[a]D²⁴ = +122,4° (c=l,0; CHCI3).

i i) 5-Acetamido-4-azido-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyl iden-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E4)

Sloučenina E3 (460 mg; 1,2 mmol) byla rozpuštěna v methanolu (24 ml, 30x objem) při laboratorní teplotě a postupně přidán 1 M hydroxid sodný (2,9 ml; 1,4 mmol) při laboratorní teplotě. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 1 h. Po zkončení reakce byla reakční směs neutralizována, přidán Dowex-50W. Dále byla reakční směs přefiltrována a ionex promyt vodou. Filtrát byl spojen a oddestilován za sníženého tlaku, odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 60 g, ethylacetát:2-propanol:voda = 2:2:1) s výtěžkem 440 mg (100 fc) sloučeniny E4 jako bílé pevné látky.

Rf 0,25 (ethylacetát:2-propanol:voda = 5:2:1) ¹H-NMR (270 MHz, CD3OD, TMS) δ (ppm):

5,72 (1H, d, J=2,l Hz), 4,37 (1H, dt, J=8,8; 5,5 Hz),

4,27 (1H, dd, J=6,9; 1,4 Hz), 4,20-4,04 (3H, m), 4,00 (1H, dd,

J=8,8; 5,0 Hz), 3,54 (1H, d, J=8,8 Hz), 2,03 (3H, s), 1,37 (3H, s), 1,32 (3H, s);

fa]D²⁴ = +43,4° (c=0,53; MeOH).

(510 mg; ob j em). 3,4 mmol) (1H, dt, J=7,7 Hz), iii) Myristyl 5-acetamido-4-azido-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E5)

Sloučenina E4 (460 mg; 1,2 mmol), myristylalkohol (530 mg; 2,5 mmol) a 2-brom-l-ethylpyridinium tetrafluorborát 1,9 mmol) byly rozpuštěny ve formamidu (22 ml, 50x Postupně byl přidán tri-n-butylamin (0,9 ml;

a směs byla míchána na olejové lázni při 50 °C,

h. Reakční směs byla zředěna ethylacetátem a nasyceným solným roztokem, vodná fáze extrahována ethylacetátem. Organická fáze byla sušena síranem hořečnatým, přefiltrována a rozpouštědla odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 100 g, benzen:ethylacetát = 1:1) s výtěžkem 190 mg (28 fc) titulní sloučeniny E5 jako bílé pevné látky.

Rf 0,4 (benzen:ethylacetát = 1:1) ¹ H-NMR (270 MHz, CDCI3, TMS) δ (ppm):

5,95 (1H, d, J=2,4 Hz), 5,60 (1H, d, J=7,0 Hz), 4,36

J=7,7; 5,7 Hz), 4,30-4,00 (8H, m), 3,58 (1H, d,

2,12 (3H, s), 1,69 (2H, kvintet, J=6,3 Hz), 1,40 (3H, s), 1,35 (3H, s), 1,26 (22H, bs), 0,88 (3H, t, J=6,3 Hz);

[q]d²⁴ = +84,3° (c=0,54; CHCI3).

iv) Myristyl 5-acetamido-4-amino-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E6)

Sloučenina E5 (134 mg; 0,24 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (6,7 ml, 50x objem) při laboratorní teplotě. Postupně byl přidán Lindlarův katalyzátor (47 mg; 0,35x objem) při laboratorní teplotě a směs byla míchána při laboratorní teplotě ve vodíkové atmosféře (100 kPa) 2 h. Po zkončení ·

• · • · · « « · · • · · 9 · 9 9 9 9 9

9 999 9 9 9 9 9 9 9 9

99 9 9 9 999999 9 99 99 9

reakce byla reakční směs přefiltrována filtrační zbytek promyt ethanolem. Filtrát byl oddestilován za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 60 g, ethylacetát:2-propanol:voda = 5:2:1) s výtěžkem 110 mg (88 %) titulní sloučeniny E6 jako bílé pevné látky.

Rf 0,28 (ethylacetát:2-propanol:voda = 8:2:1) ¹H-NMR (270 MHz, CD3OD, TMS) δ (ppm):

5,93 (1H, d, J = 2,6 Hz), 4,31 (1H, kvintet, J=6,9 Hz), 4,23-3,93 (5H, m), 3,88 (1H, t, J=9,0 Hz), 3,67-3,50 (2H, m) , 2,05 (3H, s), 1,68 (2H, kvintet, J=8,l Hz), 1,37 (3H, s), 1,33 (3H, s), 1,27 (22H, bs), 0,88 (3H, t, J=8,l Hz);

v) Myristyl 5-acetamido-4-(N,N'-bis-t-butoxykarbonyl)guanidino-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E7)

Sloučenina E6 (110 mg; 0,21 mmol), Ν,Ν'-bis-t-butoxykarbonylthiomočovina (72 mg; 0,26 mmol) a triethylamin (0,8 ml; 0,57 mmol) byly rozpuštěny v dimethylformamidu (22 ml, 50x objem) při laboratorní teplotě. Postupně byl přidán chlorid rtuťnatý (70,5 mg; 0,26 mmol) za chlazení ledem. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 2 h. Reakční směs byla zředěna ethylacetátem a přefiltrována přes Celit, filtr promyt ethylacetátem. Filtrát byl promyt nasyceným solným roztokem, vodná fáze extrahována ethylacetátem. Organická fáze byla sušena síranem hořečnatým, přefiltrována a rozpouštědla odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 100 g, hexan:ethylacetát = 3:2) s výtěžkem 120 mg (71 %) titulní sloučeniny E7 jako bílé pevné látky.

Rf 0,4 (hexan:ethylacetát = 3:2) ¹H-NMR (270 MHz, CDCI3, TMS) δ (ppm):

s), 8,63 (1H, d, J=7,8 Hz), 7,99 (1H, d, d, J=2,4 Hz), 5,32 (1H, d, J=4,4 Hz), tt, J=7,8; 1,6 Hz), 4,40 (1H, dt, J=10,6, 4,8 Hz),

4,33-3,90 (6H, m), 3,52 (1H, dd, J=8,7; 3,9 Hz), 2,02 (3H, s),

1,64 (2H, m), 1,52 (9H, s), 1,49 (9H, s), 1,43 (3H, s), 1,36 (3H, s), 1,26 (22H, bs), 0,88 (3H, t, J=6,7 Hz);

11,4

J=4,8 Hz), 5,14 (1H, (1H,

5,78 (1H, ·· ·· ·· · * © © ·©·· · «·· · ·· · • ·· ··· ······ ··· ··· ······· · ·

- 71 [a]D²⁴ = -20,9° (c=0,58; CHCI3) .

vi) Sůl trifluoroctové kyseliny a myristyl 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoátu (E8)

Sloučenina E7 (84 mg; 0,11 mmol) byla rozpuštěna v methylenchloridu (4,7 ml, 50x objem) při laboratorní teplotě. Postupně byla přidána kyselina trifluoroctová (0,85 ml; lOx objem) při laboratorní teplotě. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 22 h. Po zkončení reakce byla reakční směs odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 15 g, ethylacetát:2-propanol:voda = 8:2:1) s výtěžkem 82 mg (88 %) titulní sloučeniny E8 jako bílé pevné látky.

Rf 0,6 (ethylacetát:2-propanol:voda = 8:2:1) ¹ H-NMR (270 MHz, CDsOD) δ (ppm):

5,83 (1H, d, J=2,7 Hz), 4,44 (1H, dd, J=9,0; 2,7 Hz), 4,38 (1H, dd, J=9,0; <1 Hz), 4,18 (2H, t, J=6,2 Hz), 4,17 (1H, t, J=9,0 Hz), 3,90-3,74 (2H, m), 3,68 (1H, dd, J=12,0;

4,5 Hz), 3,65 (1H, d, J=9,0 Hz), 1,99 (3H, s), 1,67 (2H, kvintet, J=6,2 Hz), 1,26 (24H, bs), 0,87 (3H, t, J=6,2 Hz);

FAB-MS (positive): 529 (M+H+);

HR-MS vypočteno pro C26H49N4O7 : 529,3597, nalezeno : 529,3605 (M+H+).

to* toto toto to ·· ·· • •to to·· ···♦ • · ··· ···· · · · · • ·· ··· · ···· · ··· to·· ······· · · ·· ·· ·· · ·· ··

- 72 Příklad 2

Sůl trifluoroctové kyseliny a hexyl 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoátu (E12, sloučenina 87)

COOfCHJsCHs _nhZ=nh cf₃cooh

i) Hexyl 5-acetamido-4-azido-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E9)

Sloučenina E4 (940 mg; 2,6 mmol), 1-hexanol (0,66 g; 5,3 mmol) a 2-brom-l-ethylpyridinium tetrafluorborát (1,1 g; 4,0 mmol) byly rozpuštěny v dimethylformamidu (47 ml, 50x objem) při laboratorní teplotě. Postupně byl přidán tri-n-butylamin (1,9 ml; 8,0 mmol) a směs byla míchána na olejové lázni p^i 50 °G, 6 h. Reakční směs byla zředěna

I ethylacetátem a nasyceným solným roztokem, vodná fáze extrahována ethylacetátem. Organická fáze byla sušena síranem hořečnatým, přefiltrována a rozpouštědla odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 150 g, benzen:aceton!tri 1 = 2:1) s výtěžkem

560 mg (44 515) titulní sloučeniny E9 jako nahnědlé pevné látky.

Rf 0,43 (benzen:acetonitril = 2:1) ¹H-NMR (270 MHz, CDCI3 , TMS) δ (ppm):

6,53 (1H, d, J=6,9 Hz), 5,92 (1H, d, J=2,5 Hz), 4,48 (1H, bs), 4,41-4,29 (2H, m), 4,24-4,00 (7H, m), 3,63 (1H, bd,

J=7,3 Hz), 1,7 (2H, kvintet, J=6,5 Hz), 1,40 (3H, s), 1,35 (9H, bs), 1,30 (3H, s), 0,89 (3H, t, J=6,5 Hz);

[a]D²⁴ = +8° (c=0,4; CHCI3).

00 0 0· 00

000 000 0000

0000 0 000 0 00 0

00 000 000000 000 000

0000000 0 0

00 00 0 00 00

- 73 ii) Hexyl 5-acetamido-4-(N,N'-bis-t-butoxykarbonyl)guanidino-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (Eli)

Sloučenina E9 (533 mg; 1,1 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (25 ml, 50x objem) při laboratorní teplotě. Postupně byl přidán Lindlarův katalyzátor (190 mg; 0,35x objem) při laboratorní teplotě a směs byla míchána při laboratorní teplotě ve vodíkové atmosféře (100 kPa) 2,5 h. Po zkončení reakce byla reakční směs přefiltrována filtrační zbytek promyt ethanolem. Filtrát byl oddestilován za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 50 g, ethylacetát:2-propanol:voda = 5:2:1) s výtěžkem 303 mg (60 %) titulní sloučeniny E10 jako nahnědlé pevné pěny.

Rf 0,44 (ethylacetát:2-propanol:voda = 5:2:1)

Sloučenina E10 (290 mg; 0,63 mmol), N,N'-bis-t-butoxykarhonylthiomočovina (210 mg; 0,75 mmol) a triethylamin (0,22 ml; 1,6 mmol) byly rozpuštěny v dimethylformamidu (15 ml, 50x objem) při laboratorní teplotě. Postupně byl přidán chlorid rtutnatý (220 mg; 0,8 mmol) za chlazení ledem. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 2 h. Reakční směs byla zředěna ethylacetátem a přefiltrována přes Celit, filtr promyt ethylacetátem. Filtrát byl promyt nasyceným solným roztokem, vodná fáze extrahována ethylacetátem. Organická fáze byla sušena síranem hořečnatým, přefiltrována a rozpouštědla odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 75 g, hexan:ethylacetát = 1:1) s výtěžkem 273 mg (66 titulní sloučeniny Eli jako bílé pevné látky.

Rf 0,38 (benzen:ethylacetát = 5:1) ¹H-NMR (270 MHz, CDCI3, TMS) δ (ppm):

11,4 (IH, s), 8,64 (IH, d, J=7,7 Hz)

J=4,7 Hz), 5,78 (IH, d, J=2,4 Hz), 5,33 (IH, 5,14 (IH, tt, J=7,9; <1 Hz), 4,40 (IH, dt, 4,23-3,90 (7H, m), 3,51 (IH, dd, J=8,2; 4,5 Hz) 1,68 (2H, kvintet, J=6,4), 1,51 (9H, s), 1,49 , 7,99 (IH, d, d, J=4,4 Hz),

J=7,8, 5,7 Hz), , 2,01 (3H, s), (9H, S.) , 1,43 ·· ·♦ ·· · ·· ·» • 9 9 9 9 9 9 9 9

99 9 9 9 9 9 9 9 9 9

999 999999 999 999

9 9 9 9 9 9 9

9 · 9 9 9 9 9 9 9 (3H, s), 1,36 (3H, s), 1,35-1,20 (6H, m), 0,89 (3H, t,

J=6,4 Hz);

[a]o²⁴ = -22,0° (c=0,5; CHCI3).

iii) Sůl trifluoroctové kyseliny a hexyl 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoátu (E12)

Sloučenina Eli (158 mg; 0,24 mmol) byla rozpuštěna v methylenchloridu (3,0 ml, 50x objem) při laboratorní teplotě. Postupně byla přidána kyselina trifluoroctová (1,6 ml; lOx objem) při laboratorní teplotě. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 18 h. Po zkončení reakce byla reakční směs odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 15 g, ethylacetát:2-propanol:voda = 5:2:1) s výtěžkem 155 mg (100 %) titulní sloučeniny E12 jako bílé pevné látky.

Rf 0,8 (ethylacetát:2-propanol:voda = 5:2:1) ¹H-NMR (270 MHz, CD3OD) δ (ppm):

	5,94	(1H, d,
4,38	(1H,	dd, J=10,
(2H,	t,	J=6,2 Hz)
J = 9,	3 Hz) ,	3,61 (1H
(2H,	kvintet, J=6,
J=6,	3 Hz) ;
	[q]d²⁴	= +18,1°

m), <6H,

J=9,3; 2,4 Hz), J=9,3 Hz), 4,20

3,66 (1H, bd, ,97 (3H, s), 1,63 m), 0,80 (3H, t.

·· «· • · · * • · 9 · · 4 • 9 9 9 9 9

9 9 9 9

99 ·· * • · ··

9 9 9

9 9 9 9 9

999 9 · 999 99 9

Příklad 3

Sůl trifluoroctové kyseliny a 5-acetami.do-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-myristoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózové kyseliny (E17, sloučenina 41)

CF₃COOH

i) Methyl 5-acetamido-4-azido-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropy1iden-7-0-myristoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E13)

Sloučenina E3 (61 mg; 0,16 mmol) byla rozpuštěna v methylenchloridu (3,0 ml, 50x objem) teplotě. Postupně byl přidán myristoyl a 4-dimethylaminopyridin ledem. Směs byla míchána

0,2 mmol) chlazení 30 min. Dále byl přidán laboratorní reakce ještě teplotě byla reakční 30 min. Dále roztok. Organická při laboratorní chlorid (0,54 ml; (24,1 mg; 0,2 mmol) za při laboratorní teplotě triethylamin (0,028 ml; 0,2 mmol) při směs byla míchána 6 h. Po zkončení zředěna methanolem a míchána ethylacetát a nasycený solný sušena síranem hořečnatým, za sníženého tlaku.

směs byla byl přidán fáze byla přefiltrována a rozpouštědla odpařena Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 15 g, benzen:ethylacetát = 1:1) s výtěžkem 70 mg (74 titulní sloučeniny E13 jako bezbarvého transparentního syrupu. Rf 0,42 (benzen:ethylacetát = 2:1) ¹H-NMR (270 MHz, CDCI3, TMS) δ (ppm):

5,95 (1H, d, J=2,7 Hz), 5,88 (1H, d, J=7,9 Hz), 5,35

00 • 0 0 · • 0 · ·

0 » · 00 0 • 0

00

0 · * 0 0 0

0 0 0 0 0

0 000 0 »00

00 000 00000

0 0 0 0 0 0

00 00 0

(1H,	dd,	J=6,0;	1,8 HZ), 4,80 (1H,	dd, J=9,l, 2,7	Hz), 4,71
(1H,	dd, J	=9,1;	2,7 Hz), 4,39 (1H, q,	J=6,0 Hz), 4,14	(1H, dd,
J=8,	8; 6,0	Hz),	3,95 (1H, dd, J=8,8	; 6,0 Hz), 3,81	(3H, s),
3,45	(1H,	ddd,	J=10,5; 9,1; 7,9 Hz),	2,41 (1H, t, J	=7,5 Hz),
2,39	(1H,	t,	J=7,5 Hz), 2,02 (3H	, s), 1,63 (2H,	kvintet,
J=7,	5 Hz) ,	1,37	(3H, s), 1,35 (3H,	s), 1,26 (20H,	s), 0,88

(3H, t, J=7,5 Hz).

ii) Methyl 5-acetamido-4-amino-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-7-O-myristoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-eno~ pyranózoát (E14)

Sloučenina E13 (70 mg; 0,12 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (3,5 ml, 50x objem) při laboratorní teplotě. Postupně byl přidán Lindlarův katalyzátor (25 mg; 0,35x objem) při laboratorní teplotě a směs byla míchána při laboratorní teplotě ve vodíkové atmosféře (100 kPa) 1,5 h. Po zkončení reakce byla reakční směs přefiltrována filtrační zbytek promyt ethanolem. Filtrát byl oddestilován za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 15 g, ethylacetát:2-propanol:voda = 5:2:1) s výtěžkem mg (84 titulní sloučeniny E14 jako bílé pevné látky.

	Rf 0,	49 (i	methylenchlorid:	methan	lOl	= 10	:1) ;
	5,94	(1H	, d, J=2,4 Hz),	5,42	(1H	, dd	, J=4,7; 1	,8	Hz),
4,39	(1H,	dt,	J=7,l; 6,0 Hz),	4,18	(1H	, dd	, J=9,5; 1	/6	Hz),
4,14	(1H,	dd,	J=8,7; 6,4 Hz),	3,93	(1H	, dd	, J=8,7; 6	,4	Hz),
3,87	(1H,	t,	J=9,5), 3,78	(3H,	s) ,	3,	44 (1H, dd,	J=	9,5;
2,4	Hz) ,	2,35	(2H, q, J=7,	3 Hz),	1,	94	(3H, s), 1,	60	(2H,
kvin	tet, J	= 7,3	Hz), 1,32 (3H,	s) , 1,	27	(20H	, s), 0,88	(3H	I, t,

J=7,3 Hz).

iii) Methyl 5-acetamido-4-(N,N'-bis-t-butoxykarbonyl)guanidino-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-7-0-myristoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E15)

Sloučenina E14 (57 mg; 0,1 mmol), Ν,Ν’-bis-t-butoxykarbony1thiomočovina (34 mg; 0,12 mmol) a triethylamin (0,035 ml; 0,25 mmol) byly rozpuštěny v dimethylformamidu (28 ml, 50x objem) při laboratorní teplotě. Postupně byl • 9 9* • · 9 • 9 999 · 9 9 • · · 9 μ 99 • · • · ·

· • 9 99

9 9 · • 9 9 9

999 999

9 9 »9 99 • 9 ···· přidán chlorid rtuťnatý (35 mg; 0,13 mmol) za chlazení ledem. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 2 h. Reakční směs byla zředěna ethylacetátem a přefiltrována přes Celit, filtr promyt ethylacetátem. Filtrát byl promyt nasyceným solným roztokem, vodná fáze extrahována ethylacetátem. Organická fáze byla sušena síranem hořečnatým, přefiltrována a rozpouštědla odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 15 g, hexan:ethylacetát = 2:1) s výtěžkem 75 mg (100 %) titulní sloučeniny E15 jako bezbarvého transparentního syrupu.

Rf 0,33 (hexan:ethylacetát = 2:1)

¹H-NMR (270 11,4 (IH,	MHz, s) ,	CDCls 8,64	, TMS) δ (ppm):
(IH, d,	J=8,7 Hz), 6,06 (IH, d,
J=8,7 Hz), 5,88	(IH	, d,	J=2,4 Hz), 5,37 (IH, dd, J=6,4;
1,5 Hz), 5,15	(IH,	dt,	J=8,7;	2,4 Hz), 4,38 (IH, q,
J=6,4 Hz), 4,28	(IH	, dd.	J=8,7;	1,5 Hz), 4,23 (IH, t,
J=8,7 Hz), 4,10	(IH,	dd, J=	9,6; 6,4	Hz), 3,95 (IH, dd, J=9,6;

6,4 Hz), 3,80 (3H, s), 2,453 (IH, dt, J=16,0; 7,5 Hz), 2,33 (IH, dt, J=16,0; 7,5 Hz), 1,87 (3H, s), 1,61 (2H, kvintet, J=7,5), 1,49 (9H, s), 1,48 (9H, s), 1,38 (3H, s), 1,35 (3H, s), 1,25 (20H, bs), 0,88 (3H, t, J=7,5 Hz).

iv) 5-Acetamido-4-(N,N'-bis-t-butoxykarbonyl)guanidino-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropy1iden-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E16)

Sloučenina E15 (51 mg; 0,07 mmol) byla rozpuštěna ve směsi methanolu (2 ml, 40x objem) a vody (0,5 ml, lOx objem) a byl přidán hydroxid lithný (3,3 mg; 0,078 mmol) při laboratorní teplotě. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 8 h. Po zkončení reakce byla reakční směs neutralizována, přidán Dowex-50W. Dále byla reakční směs přefiltrována a ionex promyt methanolem. Filtrát byl spojen a oddestilován za sníženého tlaku, odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 60 g, ethylacetát:2-propanol:voda = 10:2:1) s výtěžkem 33 mg (66 5fe) sloučeniny E16 jako bílé pevné látky.

Rf 0,45 (methylenchlorid:methanol = 10:1);

• ·· « • * · · • · · · · ···· · ··· «

- 78 ¹H-NMR (270 MHz, CD3OD, TMS) δ (ppm):

11,4 (1H, s), 8,48 (1H, d, J=8,0 Hz), 6,31 (1H, tupý s), 5,90 (1H, bs), 5,30 (1H, bs), 5,10 (1H, bs), 4,60-3,30 (7H, m), 2,48 (1H, dt, J=13,5; 6,5 Hz), 2,32 (1H, dt, J=13,5;

6,5 Hz), 1,88 (3H, s), 1,60 (2H, kvintet, J=6,5), 1,48 (18H, s), 1,39 (3H, s), 1,37 (3H, s), 1,25 (20H, bs), 0,88 (3H, t, J=6,5 Hz).

v) Sůl trifluoroctové kyseliny a 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-myristoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózové kyseliny (E17)

Sloučenina E16 (33 mg; 0,046 mmol) byla rozpuštěna v methylenchloridu (1,6 ml, 50x objem) při laboratorní teplotě. Postupně byla přidána kyselina trifluoroctová (0,6 ml; lOx objem) při laboratorní teplotě. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 22 h. Po zkončení reakce byla reakční směs odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 5 g, 2-propanol:voda =

5:1) s výtěžkem 30 mg (84 %) titulní sloučeniny E17 jako nažloutlé pevné látky.

Rf 0,4 (2-propanol:voda = 5:1) ¹H-NMR (270 MHz, CD3OD) δ (ppm):

5,63 (1H, d, J=2,3 Hz), 4,49 (1H, dd, J=9,3; 2,3 Hz),

4,39 (1H, d, J=10,6 Hz), 4,25-4,00 (4H, m), 3,77 (1H, d,

J=9,3 Hz), 2,36 (2H, t, J=7,4 Hz), 1,92 (3H, s), 1,70-1,50 (2H, bs), 0,90 (3H, t, J=7,4 Hz);

FAB-MS (positive): 543 (M+H+);

HR-MS vypočteno pro C26H47N4O8 : 543,3378, nalezeno : 553,3412 (M+H⁺).

[O]d²⁴ = +25° (c=0,12; MeOH).

Příklad 4

Sůl trifluoroctové kyseliny a 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-hexanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózové kyseliny (E22, sloučenina 36) • ·

i) Methyl 5-acetamido-4-azido-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-7-0-hexanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E18)

Sloučenina E3 (270 mg; v methylenchloridu (13,5 ml, teplotě.

mmol) chlazení 30 min.

laboratorní reakce ještě roztok

Postupně byl přidán hexanoyl a 4-dimethylaminopyridin ledem. Směs byla míchána Dále byl přidán triethylamin

0,73 mmol) byla rozpuštěna 50x objem) při laboratorní chlorid (0,14 ml; (110 mg; 0,9 mmol) za při laboratorní teplotě (0,13 ml; 0,9 mmol) při teplotě a směs byla míchána 19 h. Po zkončení byla reakční 30 min. Dále Organická zředěna methanolem a míchána ethylacetát a nasycený solný sušena síranem hořečnatým, za sníženého tlaku.

směs byla byl přidán fáze byla přefiltrována a rozpouštědla odpařena Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 75 g, benzen:ethylacetát = 1:1) s výtěžkem 220 mg (74 %) titulní sloučeniny E18 jako bezbarvého transparentního syrupu. Rf 0,45 (benzen:ethylacetát = 1:1) ¹H-NMR (270 MHz, GDCI3, TMS) δ (ppm):

6,11 (1H, d, J=8,0 Hz), (1H, d, J=5,3; 2,0 Hz), 4,69 (1H, dd, J=10,6; 2,0 Hz), 4,38 dd, J=9,5; 5,5 Hz), 3,95 (1H,

s), 3,59 (1H, ddd, J=10,6;

J=15,9; 7,4 Hz), 2,36 (1H, dt,

5,95 (1H, d, J=2,6	Hz), 5,38
(1H, dd, J=9,2; 2,6	Hz), 4,65
(1H, q, J=5,5 Hz),	4,14 (1H,
dd, J=9,5; 5,4 Hz),	3,81 (3H,
9,2; 8,0 Hz), 2,44	(1H, dt,
J=15,9; 7,4 Hz), 2,01	(3H, s),

• · • · · ··· · · · · • · · · · · ··· · «· · • · · · · · · ···· · ··· ··· ······· · · ·· ·· ·· · · · ··

- 80 1,64 (2H, kvintet, J=7,4 Hz), 1,37 (3H, s), 1,35 (3H, s),

1,35-1,30 (4H, m), 0,90 (3H, t, J=7,4 Hz).

[a)D²⁴ = +94,3° (c=0,35; CHCI3).

ii) Methyl 5-acetamido-4-(N,N'-bis-t-hutoxykarhonyl)guanidino-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-7-O-hexanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E20)

Sloučenina E18 (190 mg; 0,41 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (9,3 ml, 50x objem) při laboratorní teplotě. Postupně byl přidán Lindlarův katalyzátor (70 mg; 0,38x objem) při laboratorní teplotě a směs byla míchána při laboratorní teplotě ve vodíkové atmosféře (100 kPa) 2,5 h. Po zkončení reakce byla reakční směs přefiltrována, filtrační zbytek promyt ethanolem. Filtrát byl oddestilován za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 60 g, ethylacetát:2-propanol:voda = 5:2:1) s výtěžkem

140 mg (80 %) titulní sloučeniny E19 jako nažloutlé pevné látky.

Rf 0,4 (ethylacetát:2-propanol:voda = 5:2:1);

Sloučenina E19 (140 mg; 0,3 mmol), Ν,Ν'-bis-t-butoxykarbonylthiomočovina (120 mg; 0,43 mmol) a triethylamin (0,12 ml; 0,86 mmol) byly rozpuštěny v dimethylformamidu (7 ml, 50x objem) při laboratorní teplotě. Postupně byl přidán chlorid rtuťnatý (110 mg; 0,41 mmol) za chlazení ledem. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 1,5 h. Reakční směs byla zředěna ethylacetátem a přefiltrována přes Celit, filtr promyt ethylacetátem. Filtrát byl promyt nasyceným solným roztokem, vodná fáze extrahována ethylacetátem. Organická fáze byla sušena síranem hořečnatým, přefiltrována a rozpouštědla odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 50 g, benzen:ethylacetát =

3:1) s výtěžkem 220 mg (100 %) titulní sloučeniny E20 jako bílé pevné pěny.

Rf 0,5 (benzen:ethylacetát = 3:1) ¹H-NMR (270 MHz, CDCI3, TMS) δ (ppm):

11,4 (1H, s), 8,46 (1H, d, J=8,7 Hz), 5,97 (1H, d,

·· · • ·

J=8,7 Hz), 5,88	(1H,	d,	J=2,3 Hz), 5,37	(1H,	dd, J=6,3;
1,6 Hz), 5,15	(1H,	dt,	J=8,7; 2,3 Hz),	4,37	(1H, q,
J=6,4 Hz), 4,29	(1H,	dd	, J=8,7; 1,5 Hz),	4,24	(1H, t,
J=8,7 Hz), 4,11	(1H, dd	, J	=8,8; 6,4 Hz), 3,96	(1H,	dd, J=8,8;
6,4 Hz), 3,81 (3H, s)	, 2	,46 (1H, dt, J=15,	9; 7,4	Hz), 2,33

(1H, dt, J=15,9; 7,4 Hz), 1,88 (3H, s), 1,70-1,50 (2H, m), 1,49 (9H, s), 1,48 (9H, s), 1,38 (3H, s), 1,37 (3H, s), 1,40-1,25 (4H, m), 0,89 (3H, t, J=7,4 Hz).

(qJd²⁴ = -28,3° (c=0,4; CHC13).

iii) 5-Acetamido-4-(N,N'-bis-t-hutoxykarbonyl)guanidino-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-7-0-hexanoy1-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózová kyselina (E21)

Sloučenina E20 (180 mg; 0,26 mmol) byla rozpuštěna ve směsi methanolu (10,8 ml, 60x objem) a vody (1,8 ml, lOx objem) a byl přidán hydroxid lithný monohydrát (12 mg; 0,29 mmol) při laboratorní teplotě. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 17 h. Po zkončení reakce byla reakčni směs neutralizována, přidán Dowex-50W. Dále byla reakčni směs přefiltrována a ionex promyt methanolem. Filtrát byl spojen a oddestilován za sníženého tlaku, odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 50 g, methylenchlorid:methanol = 10:1) s výtěžkem 130 mg (75 $) sloučeniny E21 jako bílé pevné pěny.

Rf 0,24 (methylenchlorid:methanol = 10:1);

¹H-NMR (270 MHz, CD3OD, TMS) δ (ppm):

11,4 (1H, bs), 8,52 (1H, bs), 5,95 (2H, bs), 5,32 (1H, bs), 5,15 (1H, bs), 4,60-4,10 (3H, m), 3,95 (1H, bs),

2,70-2,20 (2H, m), 1,89 (3H, m), 1,75-1,00 (28H, m), 0,85 (3H, m).

iv) Sůl trifluoroctové kyseliny a 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-hexanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózové kyseliny (E22)

Sloučenina E21 (95 mg; 0,15 mmol) byla rozpuštěna v methylenchloridu (4,8 ml, 50x objem) při laboratorní • * « 9 • · • •4 9 9 9 9 9 9 9

4444 4 444 4 44 4

44 444 4 4444 9 444 444

4444444 4 4

44 44 4 44 44 teplotě. Postupně byla přidána kyselina trifluoroctová (0,95 ml; lOx objem) při laboratorní teplotě. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 4,5 h. Po zkončení reakce byla reakční směs odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 20 g, ethylacetát:2-propanol:voda = 4:2:1) s výtěžkem 54 mg (57 %) titulní sloučeniny E22 jako bílé pevné látky.

Rf 0,3 (ethylacetát:2-propanol:voda = 4:2:1) ¹H-NMR (270 MHz, CD3OD) δ (ppm):

5,53 (1H, d, J=2,2 Hz), 4,50-4,00 (6H, m), 3,59 (1H, d,

J=9,2 Hz), 2,35 (2H, t, J=7,5 Hz), 2,01 (3H, s), 1,70-1,50 (2H, m), 1,40-1,20 (4H, m), 0,91 (3H, t, J=7,5 Hz);

IR (KBr) (cm¹) 3333, 1665, 1617, 1401, 1385, 1176;

FAB-MS (positive): 431 (M+H⁺);

HR-MS vypočteno pro C18H31N4O8 : 431,2165, nalezeno : 431,2125 (M+H⁺).

[a]D²⁴ = +29° (c=0,2; MeOH).

Příklad 5

Sůl trifluoroctové kyseliny a 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-oktanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózové kyseliny (E27, sloučenina 38)

• · · · · · ··*· • · · · · · · · φ · · * · • · · · · · ·····* ··· ··· ······· · · • · · · ·· · · · · ·

i) Methyl 5-acetamido-4-azido-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-7-O-oktanoy1-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E23)

Sloučenina E3 (185 mg; 0,5 mmol) byla rozpuštěna v methylenchloridu (5,0 ml) při laboratorní teplotě. Postupně byl přidán oktanoyl chlorid (0,132 ml; 0,75 mmol) a 4-dímethylaminopyridin (91 mg; 0,75 mmol) za chlazení ledem. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 30 min. Dále byl přidán triethylamin (0,104 ml; 0,75 mmol) při laboratorní teplotě a směs byla míchána 6 h. Po zkončení reakce byla reakční směs byla zředěna methanolem a míchána ještě 30 min. Dále byl přidán ethylacetát a nasycený solný roztok. Organická fáze byla sušena síranem hořečnatým, přefiltrována a rozpouštědla odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, methylenchlorid:methanol = 50:1) s výtěžkem 150 mg (64 %) titulní sloučeniny E23 jako bezbarvého transparentního syrupu.

Rf 0,45 (methylenchlorid:methanol = 20:1) ¹H-NMR (270 MHz, CDCI3, TMS) δ (ppm):

	5,95	(1H, d, J=2,7 Hz),	5,88 (1	H, d,	J=7,	9	Hz) ,	5,35
(1H,	dd, J	=6,0; 1,8 Hz), 4,80	(1H, dd,	J=9,l;	2,	7	Hz) ,	4,71
(1H,	dd, J	=10,5; 1,8 Hz), 4,39	(1H, q,	J=6,0	Hz),		4,14	(1H,
dd,	J=8,8;	6,0 Hz), 4,395 (1	H, dd,	J=8,8;	6,	0	Hz),	3,81
(3H,	s ) , 3 ,	45 (1H, ddd, J=10,5;	9,1; 7	,9 Hz),	2,	41	(1H	, t,
J=7,	5 Hz) ,	2,39 (1H, t, J=7,5	Hz), 2,	02 (3H,	s)	Z	1,63	(2H,
kvin	tet, J=	7,5 Hz), 1,37 (3H, s)	, 1,35	(3H, s)	, 1,	26	(8H	, s) ,

0,88 (3H, t, J = 7,5 Hz).

ii) Methyl 5-acetamido-4-amino-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-7-0-oktanoy1-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E24)

Sloučenina E23 (130 mg; 0,28 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (6,0 ml) při laboratorní teplotě. Postupně byl přidán Lindlarův katalyzátor (46 mg; 0,35x objem) při laboratorní teplotě a směs byla míchána při laboratorní teplotě ve vodíkové atmosféře (100 kPa) 1,5 h. Po zkončení reakce byla reakční směs přefiltrována, filtrační zbytek • · ·

Φ Φ · · ·Φ * φφ • · · φφφ · φ · • φ · φ · · φφφ φ φφ φ φ · φ · φ φ φφφφ φ φφφ φφφφφφφ φ φ φφ φ» φφ φ φφ φφ promyt ethanolem. Filtrát byl oddestilován za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 15 g, ethylacetát:2-propanol:voda = 5:2:1) s výtěžkem mg (77 %) titulní sloučeniny E24 jako bílé pevné látky.

Rf 0,35 (n-hexan:ethylacetát = 2:1);

¹H-NMR (270 MHz, CD3OD, TMS) δ (ppm):

	5,94	(IH.	, d, J	=2,4 Hz), 5,42	(IH, dd, J=4,7; 1	,8	Hz),
4,39	(IH,	dt,	J=7,1;	6,0 HZ), 4,18	(IH, dd, J=9,5; 1	,6	Hz),
4,14	(IH,	dd,	J=8,7;	6,4 Hz), 3,93	(IH, dd, J=8,7; 6	,4	Hz),
3,87	(IH,	t,	J=9,5	), 3,78 (3H,	s), 3,44 (IH, dd,	J=	^:9,5;
2,4	Hz),	2,35	(2H,	q, J=7,3 Hz),	1,94 (3H, s), 1,	60	(2H,
kvin	tet, J	= 7,3	Hz), 1	,32 (3H, s), í,	,31 (8H, s), 0,88	(3H	t, t,

J=7,3 Hz).

iii) Methyl 5-acetamido-4-(N,N'-bis-t-butoxykarbony1)guanidino-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-7-0-oktanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E25)

Sloučenina E24 (90 mg; 0,2 mmol), Ν,Ν’-bis-t-butoxykarbonylthiomočovina (83 mg; 0,30 mmol) a triethylamin (0,035 ml; 0,25 mmol) byly rozpuštěny v dimethylformamidu (5 ml) při laboratorní teplotě. Postupně byl přidán chlorid rtuťnatý (82 mg; 0,30 mmol) za chlazení ledem. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 2 h. Reakční směs byla zředěna ethylacetátem a přefiltrována přes Celit, filtr promyt ethylacetátem. Filtrát byl promyt nasyceným solným roztokem, vodná fáze extrahována ethylacetátem. Organická fáze byla sušena síranem hořečnatým, přefiltrována a rozpouštědla odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 15 g, hexan:ethylacetát = 2:1) s výtěžkem 120 mg (88 %) titulní sloučeniny E25 jako bezbarvého transparentního syrupu.

Rf 0,30 (hexan:ethylacetát = 2:1)

¹H-NMR 11,4	(270 MHz,	CDC13, TMS)	δ (ppm): d, J=8,7 Hz), 6,06 (IH,	d,
(IH,	s) ,	8,46	(IH,
J=8,7 Hz),	5,88	(IH,	d.	J=2,4	Hz), 5,37 (IH, dd, J=6	,4;
1,5 Hz), 5	,15	(IH,	dt,	J=8,7	; 2,4 Hz), 4,38 (IH,	q./
J=6,4 Hz),	4,28	(IH,	dd,	J=8	,7; 1,5 Hz), 4,23 (IH,	t,

• · · · · · • · · · · · · • ···· · · · · · • ·· ··· ······ ······· · « • · · · · · · · · · ·

J=8,7 Hz), 4,10 (IH, dd, J=9,6; 6,4 Hz), 3,95 (IH, dd, J=9,6;

6,4 Hz), 3,80 (3H, s), 2,453 (IH, dt, J=16,0; 7,5 Hz), 2,33 (IH, dt, J=16,0; 7,5 Hz), 1,87 (3H, s), 1,61 (2H, kvintet, J=7,5 Hz), 1,49 (9H, s), 1,48 (9H, s), 1,38 (3H, s), 1,35 (3H, s), 1,25 (8H, bs), 0,88 (3H, t, J=7,5 Hz).

iv) 5-Acetamido-4-(N,N'-bis-t-butoxykarbonyl)guanidino-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-i sopropyliden-7-0-oktanoy1-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózová kyselina (E26)

Sloučenina E25 (100 mg; 0,15 mmol) byla rozpuštěna ve směsi methanolu (4 ml, 40x objem) a vody (1 ml, lOx objem) a byl přidán hydroxid lithný monohydrát (7,0 mg; 0,165 mmol) při laboratorní teplotě. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 8 h. Po zkončení reakce byla reakční směs neutralizována, přidán Dowex-50W. Dále byla reakční směs promyt methanolem. Filtrát byl spojen sníženého tlaku, odparek byl sloupci silikagelu (Kieselgel 60, ethylacetát:2-propanol:voda = 10:2:1) s výtěžkem 56 mg (56 %) sloučeniny E26 jako bílé pevné látky.

Rf 0,35 (methylenchlorid:methanol = 10:1);

¹H-NMR (270 MHz, CDaOD, TMS) δ (ppm):

11,4 (IH, s), 8,48 (IH, d, J=8,0 Hz), 6,31 (IH, tupý s), bs), 5,30 (IH, bs), 5,10 (IH, bs), 4,60-3,30 (7H, (IH, dt, J=13,5; 6,5 Hz), 2,32 (IH, dt, J=13,5;

6,5 Hz), 1,88 (3H, s), 1,60 (2H, kvintet, J=6,5), 1,48 (18H, s), 1,39 (3H, s), 1,37 (3H, s), 1,25 (8H, bs), 0,88 (3H, t, J=6,5 Hz).

přefiltrována a ionex a oddestilován za chromatografován na

5,90 (IH, m), 2,48

v) Sůl trifluoroctové kyseliny a 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-oktanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózové kyseliny (E27)

Sloučenina E26 (50 mg; 0,075 mmol) byla rozpuštěna v methylenchloridu (3 ml, 50x objem) při laboratorní teplotě. Postupně byla přidána kyselina trifluoroctová (1 ml; lOx objem) při laboratorní teplotě. Směs byla míchána při

0 0 0 • · 0 · • 0 0 0 0 0

0 0 · · 0 • •00 0 • 0 ·

00 • · 0 · • · 0 0 0 • · · 000 0 0 · • 0 0 • 0 · 0 0 laboratorní teplotě 22 h. Po zkončení reakce byla reakční směs odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 5 g, 2-propanol:voda = 5:1) s výtěžkem 38 mg (88 $) titulní sloučeniny E27 jako nažloutlé pevné látky.

Rf 0,3 (2-propanol:voda = 5:1) ¹ H-NMR (270 MHz, CDaOD) δ (ppm):

5,55 (1H, bs), 4,40-4,10 (7H, m), 3,65 (1H, d,

J = 9,0 Hz), 2,36 (2H, t, J=7,0 Hz), 2,00 (3H, s), 1,70-1,50 (2H, m), 1,30 (8H, bs), 0,90 (3H, t, J=7,0 Hz);

FAB-MS (positive): 459 (M+H⁺);

[a]D²⁴ = +19,2° (c=0,26; MeOH).

Příklad 6

Sůl trifluoroctové kyseliny a 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-dekanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózové kyseliny (E32, sloučenina 39)

OCO(CH2)8CH₃ΌΗ

COOH

HN

CH₃GNH ii

O

NH ^>=nh

CF3COOH

i) Methyl 5-acetamido~4-azido-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-7-0-dekanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E28)

Sloučenina E3 (214 mg; 0,58 mmol) byla rozpuštěna v methylenchloridu (6,0 ml) při laboratorní teplotě. Postupně ·· 99 byl přidán dekanoyl a 4-dimethylaminopyridin ledem. Směs byla míchána

0,87 mmol) za chlazení byl přidán teplotě a chlorid (0,152 ml;

(106 mg; 0,87 mmol) při laboratorní teplotě 30 min. Dále triethylamin (0,12 ml; 0,87 mmol) při laboratorní směs byla míchána 6 h. Po zkončení reakce byla reakční směs byla zředěna methanolem a míchána ještě 30 min. Dále byl přidán ethylacetát a nasycený solný roztok. Organická fáze byla sušena síranem hořečnatým, přefiltrována a rozpouštědla odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, methylenchlorid:methanol = 50:1) s výtěžkem 180 mg (63 5fc) titulní sloučeniny E28 jako bezbarvého transparentního syrupu. Rf 0,56 (methylenchlorid:methanol = 20:1) ¹H-NMR (270 MHz, CDCI3, TMS) δ (ppm):

5,95 (1H, d, J=2,7 Hz), 5,88

J=6,0; 1,8 Hz), 4,80 (1H,

J=10,5; 1,8 Hz), 4,39 (1H

J=8,8; 6,0 Hz), 3,945 (1H, (3H,s), 3,45 (1H, ddd, J=10,5; 9,

J=7,5 Hz), 2,39 (1H, t, J=7,5 Hz), kvintet, J=7,5 Hz), 1,37 (3H, s), 1,

0,88 (3H, t, J=7,5 Hz).

(1H, d, J=7,9	Hz) ,	5,35
dd, J=9,l; 2,7	Hz) ,	4,71
, q, J=6,0 Hz),	4,14	(1H,
dd, J=8,8; 6,0	Hz),	3,81
1; 7,9 Hz), 2,41	(1H,	t,
2,02 (3H, s),	1,63	(2H,
35 (3H, s), 1,26	(12H,	s) ,

(1H, dd, (1H, dd, dd, ii) Methyl 5-acetamido-4-amino-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-7-0-dekanoy1-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E29)

Sloučenina E28 (170 mg; 0,32 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (10,0 ml) při laboratorní teplotě. Postupně byl přidán Lindlarův katalyzátor (60 mg; 0,35x objem) při laboratorní teplotě a směs byla míchána při laboratorní teplotě ve vodíkové atmosféře (100 kPa) 1,5 h. Po zkončení reakce byla reakční směs přefiltrována, filtrační zbytek promyt ethanolem. Filtrát byl oddestilován za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 15 g, ethylacetát:2-propanol:voda = 5:2:1) s výtěžkem

120 mg (80 %) titulní sloučeniny E29 jako bílé pevné látky.

Rf 0,40 (n-hexan:ethylacetát - 2:1);

							·· »· • · · • · · · · • · · · • · · ·	·· • · • · • · · • ·	• • • · ···· · •
	¹H-NMR (270 MHz, CD₃ OD,	TMS) δ	(ppm):
	5,94	(1H	, d, J—2,	4 Hz)	, 5,42	(1H, dd,	.1=4,7;	1,8	Hz) ,
4,39	(1H,	dt,	J=7,l; 6,	0 Hz)	, 4,18	(1H, dd,	«1=9,5;	1,6	Hz) ,
4,14	(1H,	dd,	J=8,7; 6,	4 Hz)	, 3,93	(1H, dd,	J=8,7;	6,4	Hz) ,
3,87	(1H,	t,	J=9,5),	3,78	(3H,	s), 3,44	(1H, dd, J=	9,5;
2,4	Hz),	2,35	(2H, q,	J=7	,3 Hz),	1,94 (3H	s),	1,60	(2H,
kvintet, J	= 7,3	Hz), 1,32	(3H,	s) , 1,	31 (3H, s),	1,27	(12H,	s) ,
0,88	(3H,	t, J··	=7,3 Hz).

iii) Methyl 5-acetamido-4-(N,N'-bis-t-butoxykarbonyl)guanidino-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropy1iden-7-0-dekanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E30)

Sloučenina E29 (100 mg; 0,21 mmol), Ν,Ν'-bis-t-butoxykarbonylthiomočovina (87 mg; 0,31 mmol) a triethylamin (0,087 ml; 0,63 mmol) byly rozpuštěny v dimethylformamidu (5 ml) při laboratorní teplotě. Postupně byl přidán chlorid rtuťnatý (84 mg; 0,31 mmol) za chlazení ledem. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 2 h. Reakční směs byla zředěna ethylacetátem a přefiltrována přes Celit, filtr promyt ethylacetátem. Filtrát byl promyt nasyceným solným roztokem, vodná fáze extrahována ethylacetátem. Organická fáze byla sušena síranem hořečnatým, přefiltrována a rozpouštědla odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, hexan:ethylacetát = 2:1) s výtěžkem 120 mg (87 fc) titulní sloučeniny E30 jako bezbarvého transparentního syrupu.

Rf 0,30 (hexan:ethylacetát = 2:1)

¹H-NMR (270 11,4 (1H,	MHz, s) ,	CDCls, TMS) δ	(PPm):
8,46	(1H, d.	J=8,7 Hz), 6,	06 (1H, d,
J=8,7 Hz), 5,88	(1H	, d.	J=2,4 Hz), 5,37 (1H,	dd, «1=6,4;
1,5 Hz), 5,15	(1H,	dt,	«1=8,7;	2,4 Hz), 4,38	(1H, q,
J=6,4 Hz), 4,28	(1H	, dd,	«1=8,7;	1,5 Hz), 4,23	(1H, t,
J=8,7 Hz), 4,10	(1H,	dd, J =	9,6; 6,4	Hz), 3,95 (1H,	dd, «1=9,6;

6,4 Hz), 3,80 (3H, s), 2,453 (1H, dt, J=16,0; 7,5 Hz), 2,33 (1H, dt, J=16,0; 7,5 Hz), 1,87 (3H, s), 1,61 (2H, kvintet, J=7,5 Hz), 1,49 (9H, s), 1,48 (9H, s), 1,38 (3H, s), 1,35 (3H, s), 1,25 (8H, bs), 0,88 (3H, t, J=7,5 Hz).

•4 44 44

4 4 4 4 • 4444 4 4

4 4 4 4 4 4

4444 44 4 ·

• 44 4

44 • 4 4 4

4 4 4

444 444

4 • 4 44 iv) 5-Acetamido-4-(N,N¹-bis-t-butoxykarbony1)guanidino-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropy1iden-7-0-dekanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózová kyselina (E31)

Sloučenina E30 (100 mg; 0,14 mmol) byla rozpuštěna ve směsi methanolu (4 ml, 40x objem) a vody (1 ml, lOx objem) a byl přidán hydroxid lithný monohydrát (6,5 mg; 0,154 mmol) při laboratorní teplotě. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 8 h. Po zkončení reakce byla reakční směs neutralizována, přidán Dowex-50W. Dále byla reakční směs přefiltrována a ionex promyt methanolem. Filtrát byl spojen sníženého tlaku, odparek byl sloupci silikagelu (Kieselgel 60, ethylacetát:2-propanol:voda = 10:2:1) s výtěžkem 53 mg (55 %) sloučeniny E31 jako bílé pevné látky.

Rf 0,38 (methylenchlorid:methanol = 10:1);

¹H-NMR (270 MHz, CD3OD, TMS) δ (ppm):

11,4 (1H, s), 8,48 (1H, d, J=8,0 Hz), 6,31 (1H, tupý s), bs), 5,30 (1H, bs), 5,10 (1H, bs), 4,60-3,30 (7H, (1H, dt, J=13,5; 6,5 Hz), 2,32 (1H, dt, J=13,5;

(3H, s), 1,60 (2H, kvintet, J=6,5), 1,48 (18H, s), 1,37 (3H, s), 1,25 (12H, bs), 0,88 (3H, t, a oddestilován za chromatografován na

5,90 (1H, m), 2,48

6,5 Hz), 1,88 s), 1,39 (3H,

J=6,5 Hz).

v) Sůl trifluoroctové kyseliny a 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-dekanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózové kyseliny (E27)

Sloučenina E31 (40 mg; 0,057 mmol) byla rozpuštěna v methylenchloridu (3 ml, 50x objem) při laboratorní teplotě. Postupně byla přidána kyselina trifluoroctová (1 ml; lOx objem) při laboratorní teplotě. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 22 h. Po zkončení reakce byla reakční směs odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 5 g, 2-propanol:voda = 5:1) s výtěžkem 30 mg (87 %) titulní sloučeniny E31 jako nažloutlé pevné látky.

• 9 99 99

9 9 9 9

9 999 9 9

9 9 9 9 9 9

99 99 9

999 9

99

9 9 9

999 999

9

99

Rf 0,3 (2-propanol:voda = 5:1) ¹H-NMR (270 MHz, CD3OD) δ (ppm):

5,55 (1H, bs), 4,40-4,10 (7H, m), 3,65

J=9,0 Hz), 2,36 (2H, t, J=7,0 Hz), 2,00 (3H, s), (2H, m), 1,30 (12H, bs), 0,90 (3H, t, J=7,0 Hz);

FAB-MS (positive): 487 (M+H+);

[q]d²⁴ = +17,2° (c=0,15; MeOH).

(1H, d, 1,70-1,50

Příklad 7

Sůl trifluoroctové kyseliny a 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-palmitoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózové kyseliny (E37, sloučenina 42)

i) Methyl 5-acetamido-4-azido-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyl iden-7-0-palmitoy1-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E33)

Sloučenina E3 (1,35 g; 3,66 mmol) byla rozpuštěna v methylenchloridu (10 ml) při laboratorní teplotě. Postupně byl přidán palmitoyl chlorid (1,88 ml; 6,22 mmol) a 4-dimethylaminopyridin (759 mg; 6,22 mmol) za chlazení ledem. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 30 min. Dále byl přidán triethylamin (0,86 ml; 6,21 mmol) při laboratorní teplotě a směs byla míchána 15 h. Po zkončení reakce byla • · · ♦ • to to · ··· • · · to · ·· to· • to • ·· · toto to · • to • · · to to • to reakční směs byla zředěna methanolem a míchána ještě 30 min. Dále byl přidán ethylacetát a nasycený solný roztok. Organická fáze byla sušena síranem hořečnatým, přefiltrována a rozpouštědla odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, n-hexan:ethylacetát =2:1) s výtěžkem 1,42 g (64 %) titulní sloučeniny E33 jako bezbarvé pěny.

Rf 0,53 (n-hexan:ethylacetát = 1:1)

	¹H-NMR (270 MHz, CDCls, TMS) δ (ppm):
5,95	(1H, d, J=2,7 Hz), 5,88	(1H, d,	J=7,9	Hz),	5,35
(1H,	dd,	J=6,0; 1,8 Hz), 4,80 (1H,	dd, J=9,l;	2,7	Hz),	4,71
(1H,	dd,	J=10,5; 1,8 Hz), 4,39 (1H	, q, J=6,0	Hz) ,	4,14	(1H,
dd,	J=8,8; 6,0 Hz), 3,945 (1H,	dd, J=8,8;	6,0	Hz),	3,81
(3H,	s) , í	!,45 (1H, ddd, J=10,5; 9,	1; 7,9 Hz),	2,41	(1H,	t,
J=7,	5 Hz) ,	2,39 (1H, t, J=7,5 Hz),	2,02 (3H,	s) ,	1,63	(2H,
kvintet, J	r=7,5 Hz), 1,37 (3H, s), 1,	35 (3H, s),	1,26	(24H,	s) ,

0,88 (3H, t, J=7,5 Hz).

ii) Methyl 5-acetamido-4-amino-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-7-0-palmitoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E34)

Sloučenina E33 (1,42 g; 2,34 mmol) byla rozpuštěna v ethanoiu (15 ml) při laboratorní teplotě. Postupně byl přidán Lindlarův katalyzátor (477 mg; 0,34x objem) při laboratorní teplotě a směs byla míchána při vodíkové atmosféře (100 kPa) 2 h.

reakční směs přefiltrována, filtrační zbytek promyt ethanolem. Filtrát byl oddestilován za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 15 g, ethylacetát:methanol = 10:1) s výtěžkem 1,16 g (85 %) titulní sloučeniny E34 jako bezbarvé pěny.

Rf 0,18 (ethylacetát:methanol = 5:1);

¹H-NMR (270 MHz, CDsOD, TMS) δ (ppm):

laboratorní Po zkončení teplotě ve reakce byla

	5,94	(1H	, d, J=2,4 Hz),	5,42	(1H, dd,	J=4,7;	1,8 Hz),
4,39	(1H,	dt,	J=7,l; 6,0 Hz),	4,18	(1H, dd,	J=9,5;	1,6 Hz),
4,14	(1H,	dd,	J=8,7; 6,4 Hz),	3,93	(1H, dd,	J=8,7;	6,4 Hz),
3,87	(1H,	t,	J=9,5), 3,78	(3H,	s), 3,44	(1H, dd	, J=9,5;

• 0 · > 0 0 > 0 0« > 0 0 0«

00 » 0 0 1 ► 0 0 «

2,4 Hz), 2,35 (2H, q, J=7,3 Hz), 1,94 (3H, s), 1,60 (2H, kvintet, J=7,3 Hz), 1,32 (3H, s), 1,27 (24H, s), 0,88 (3H, t, J=7,3 Hz).

iii) Methyl 5-acetamido-4-(N,N'-bis-t-butoxykarbonyl)guanidino-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-7-0-palmitoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E35)

Sloučenina E34 (1,16 g; 2,0 mmol), Ν,Ν'-bis-t-butoxykarbonylthiomočovina (828 mg; 2,99 mmol) a triethylamin (0,42 ml; 3,03 mmol) byly rozpuštěny v dimethylformamidu (12 ml) při laboratorní teplotě. Postupně byl přidán chlorid rtutnatý (813 mg; 2,99 mmol) za chlazení ledem. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 2 h. Reakční směs byla zředěna ethylacetátem a přefiltrována přes Celit, filtr promyt ethylacetátem. Filtrát byl promyt nasyceným solným roztokem, vodná fáze extrahována ethylacetátem. Organická fáze byla sušena síranem hořečnatým, přefiltrována a rozpouštědla odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 15 g, hexan:ethylacetát = sloučeniny E35 jako

2:1)	s	výtěžkem	i,o g (	61 %)	titulní
bezbarvé	pěny.
	Rf	0,52 (hexan:ethylacetát =	2:1)
	¹ H-	NMR (270	MHz, CDC13	, TMS)	δ (ppm):
	11,	4 (IH,	s), 8,46	(IH,	d, J=8,
J=8,	7 Hz), 5,88	(IH, d,	J=2,4	Hz), 5,
1,5	Hz) ,	5,15	(IH, dt,	J=8,7	; 2,4 H

J=6,4 Hz), 4,28 (IH, dd,

Hz), 6,06 (IH, d, (IH, dd, J=6,4;

, 4,38 (IH, q,

1,5 Hz), 4,23 (IH, t.

J=8,7;

J=8,7 Hz), 4,10 (IH, dd, J=9,6; 6,4 Hz), 3,95 (IH, dd, J=9,6;

6,4 Hz), 3,80 (3H, s), 2,453 (IH, dt, J=16,0; 7,5 Hz), 2,33 (IH, dt, J=16,0; 7,5 Hz), 1,87 (3H, s), 1,61 (2H, kvintet, J=7,5 Hz), 1,49 (9H, s), 1,48 (9H, s), 1,38 (3H, s), 1,35 (3H, s), 1,25 (24H, bs), 0,88 (3H, t, J=7,5 Hz).

iv) 5-Acetamido-4-(N,N’-bis-t-butoxykarbonyl)guanidino-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-7-0-palmitoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózová kyselina (E36)

Sloučenina E35 (61 mg; 0,07 mmol) byla rozpuštěna ve

9* 99 * 9 9 9

9999 9 9

9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9

99 99

9

99 9

999 99« «

9 99 směsi methanolu (1,2 ml, 40x objem) a vody (0,15 ml, lOx objem) a byl přidán hydroxid lithný monohydrát (3,4 mg; 0,08 mmol) při laboratorní teplotě. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 3 h. Po zkončení reakce byla reakční směs neutralizována, přidán Dowex-50W. Dále byla reakční směs přefiltrována a ionex promyt methanolem. Filtrát byl spojen a oddestilován za sníženého tlaku, odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, ethylacetát:methanol = 10:1) s výtěžkem 33 mg (55 %) sloučeniny E36 jako bezbarvé pěny.

Rf 0,61 (ethylacetát:methanol = 10:1);

¹ H-NMR (270 MHz, CD₃OD, TMS) δ (ppm):

11,4 (1H, s), 8,48 (1H, d, J=8,0 Hz), 6,31 (1H, tupý s),

5,90 (1H, bs), 5,30 (1H, bs), 5,10 (1H, bs), 4,60-3,30 (7H, m), 2,48 (1H, dt, J=13,5; 6,5 Hz), 2,32 (1H, dt, J=13,5;

6,5 Hz), 1,88 (3H, s), 1,60 (2H, kvintet, J=6,5), 1,48 (24H, s), 1,39 (3H, s), 1,37 (3H, s), 1,25 (8H, bs), 0,88 (3H, t, J=6,5 Hz).

v) Sůl trifluoroctové kyseliny a 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-palmitoy1-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózové kyseliny (E37)

Sloučenina E36 (289 mg; 0,36 mmol) byla rozpuštěna v methylenchloridu (3 ml, 50x objem) při laboratorní teplotě. Postupně byla přidána kyselina trifluoroctová (1 ml; lOx objem) při laboratorní teplotě. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 22 h. Po zkončení reakce byla reakční směs odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 5 g, ethylacetát:2-propanol:voda = 5:2:1) s výtěžkem 206 mg (84 %) titulní sloučeniny E37 jako bezbarvé pěny.

Rf 0,44 (2-propanol:voda = 5:1) ¹H-NMR (270 MHz, CD3OD) δ (ppm):

5,55 (1H, bs), 4,40-4,10 (7H, m), 3,65 (1H, d,

J=9,0 Hz), 2,36 (2H, t, J=7,0 Hz), 2,00 (3H, S), 1,70-1,50 (2H, m), 1,30 (24H, bs), 0,90 (3H, t, J=7,0 Hz);

·· • · · • · ··· • · · · • · · · ·· ·· ·«· ·« · • * · • · · · » · · ···» • · ·

9 ·· • · η *·· fc* f · fc · • · ··· ··

FAB-MS [a]D²⁴	(positive): 571 (M+H⁺); = +18,5° (c=0,12; MeOH).
Příklad 8
Sůl	trifluoroctové kyseliny	a	5-acetamido

-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-dodekanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózové kyseliny (E42, sloučenina 40)

i) Methyl 5-acetamido-4-azido-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-7-0-dodekanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E38)

Sloučenina E3 (1,07 g; v methylenchloridu (11 ml) při byl přidán dodekanoyl a 4-dimethylaminopyridin ledem. Směs byla míchána byl přidán triethylamin

2,89 mmol) byla rozpuštěna laboratorní teplotě. Postupně 4,33 mmol) chlorid (529 mg;

(529 mg; 4,33 mmol) za chlazení při laboratorní teplotě 30 min. Dále (0,6 ml; 4,33 mmol) při laboratorní teplotě a směs byla míchána 2,5 h. Po zkončení reakce byla reakční směs byla zředěna methanolem a míchána ještě 30 min. Dále byl přidán ethylacetát a nasycený solný roztok. Organická fáze byla sušena síranem horečnatým, přefiltrována a rozpouštědla odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, • · • · · • · · · · · · • ···· · ··· ··· • · * · • · · ♦ · · · n-hexan:ethylacetát = 2:1) s výtěžkem 1,07 g (67 %) titulní sloučeniny E38 jako bezbarvé pěny.

Rf 0,44 (n-hexan:ethylacetát = 1:1) ¹H-NMR (270 MHz, CDCI3, TMS) δ (ppm):

	5,95	(1H, d, J=2,7 Hz),	5,88 (1H, d,	J = 7,9	Hz),	5,35
(1H,	dd,	J=6,0; 1,8 Hz), 4,80	(1H, dd, J=9,l;	2,7	Hz),	4,71
(1H,	dd,	J=10,5; 1,8 Hz), 4,39	(1H, q, J=6,0	Hz) ,	4,14	(1H,
dd,	J = 8,8	; 6,0 Hz), 3,945 (	1H, dd, J=8,8;	6,0	HZ),	3,81
(3H,	3) , 3	,45 (1H, ddd, J=10,5	; 9,1; 7,9 Hz),	2,41	(1H,	t,
J=7,	5 Hz) ,	2,39 (1H, t, J=7,5	Hz), 2,02 (3H,	3),	1,63	(2H,
kvin	tet, J	=7,5 Hz), 1,37 (3H, s	), 1,35 (3H, s),	1,26	(16H,	3) ,

0,88 (3H, t, J=7,5 Hz).

ii) Methyl 5-acetamido-4-amino-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-i sopropy1iden-7-0-dodekanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E39)

Sloučenina E38 (1,06 g; 1,92 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (10 ml) při laboratorní teplotě. Postupně byl přidán Lindlarův katalyzátor (353 mg; 0,33x objem) při laboratorní teplotě a směs byla míchána při laboratorní teplotě ve vodíkové atmosféře (100 kPa) 1,5 h. Po zkončení reakce byla reakční směs přefiltrována, filtrační zbytek promyt ethanolem. Filtrát byl oddestilován za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 15 g, ethylacetát:methanol = 5:1) s výtěžkem 871 mg (86 &) titulní sloučeniny E39 jako bezbarvé pěny.

Rf 0,36 (ethylacetát:methanol = 5:1);

¹H-NMR (270 MHz, CD3OD, TMS) δ (ppm):

	5,94	(1H	, d, J=2,4 Hz),	5,42	(1H, dd, J=4,7; 1	,8 Hz),
4,39	(1H,	dt,	J=7,l; 6,0 Hz),	4,18	(1H, dd, J=9,5; 1	,6 Hz),
4,14	(1H,	dd,	J=8,7; 6,4 Hz),	3,93	(1H, dd, J=8,7; 6	,4 HZ),
3,87	(1H,	t,	J=9,5), 3,78	(3H,	s), 3,44 (1H, dd,	J=9,5;
2,4	Hz) ,	2,35	(2H, q, J = 7,	3 Hz) ,	1,94 (3H, s), 1,	60 (2H,
kvintet, J	= 7,3	Hz), 1,32 (3H,	s) , 1,	27 (16H, s), 0,88	(3H, t,

J=7,3 Hz).

iil)

Methyl 5-acetamido-4-(Ν,N'-bis-t-butoxykarbonyl)guani- 96 dino-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-7-0-dodekanoy1-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E40)

Sloučenina E39 (868 mg; 1,65 mmol), N,N'-bis-t-butoxykarbonylthiomočovina (940 mg; 3,4 mmol) a triethylamin (0,95 ml; 6,90 mmol) byly rozpuštěny v dimethylformamidu (10 ml) při laboratorní teplotě. Postupně byl přidán chlorid rtuťnatý (926 mg; 3,4 mmol) za chlazení ledem. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 2 h. Reakční směs byla zředěna ethylacetátem a přefiltrována přes Celit, filtr promyt ethylacetátem. Filtrát byl promyt nasyceným solným roztokem, vodná fáze extrahována ethylacetátem. Organická fáze byla sušena síranem hořečnatým, přefiltrována a rozpouštědla odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 15 g, hexan:ethylacetát =

2:1) s výtěžkem	1,3	g (100 %)	titulní	sloučeniny	E40 jako
bezbarvé pěny.
Rf 0,52 (hexan:ethylacetát =	2:1)
¹H-NMR (270	MHz,	CDCls, TMS)	δ (ppm)
11,4 (1H,	s) ,	8,46 (1H,	d, J=8	,7 Hz), 6,	06 (1H, d,
J=8,7 Hz), 5,88	(1H,	d, J=2,4	Hz), 5	,37 (1H,	dd, J=6,4;
1,5 Hz), 5,15	(1H,	dt, J=8,7;	2,4	Hz), 4,38	(1H, q,
J=6,4 Hz), 4,28	(1H,	dd, J=8,	7; 1,5	Hz), 4,23	(1H, t,

J=8,7 Hz), 4,10 (1H, dd, J=9,6; 6,4 Hz), 3,95 (1H, dd, J=9,6;

6,4 Hz), 3,80 (3H, s), 2,453 (1H, dt, J=16,0; 7,5 Hz), 2,33 (1H, dt, J=16,0; 7,5 Hz), 1,87 (3H, s), 1,61 (2H, kvintet,

J=7,5 Hz), 1,49 (9H, s), 1,48 (9H, s), 1,38 (3H, s), 1,35 (3H, s), 1,25 (16H, bs), 0,88 (3H, t, J=7,5 Hz).

iv) 5-Acetamido-4-(Ν,N'-bis-t-butoxykarbonyl)guanidino-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-7-0-dodekanoy1-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózová kyselina (E41)

Sloučenina E40 (100 mg; 0,15 mmol) byla rozpuštěna ve směsi methanolu (4 ml, 40x objem) a vody (1 ml, lOx objem) a byl přidán hydroxid lithný monohydrát (7 mg; 0,165 mmol) při laboratorní teplotě. Směs byla míchána při laboratorní teplotě

h. Po zkončení reakce byla reakční směs neutralizována, přidán Dowex-50W. Dále byla reakční směs přefiltrována a ionex • · • · i · · ·· · ··· · ·· · • · · · · · · ···· · ··· ··· ······· · · • · · · ·· · · · ··

- 97 promyt methanolem. Filtrát byl spojen a oddestilován za sníženého tlaku, odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, ethylacetát:2-propanol:voda = 10:2:1) s výtěžkem 56 mg (65 %) sloučeniny E41 jako bezbarvé pěny.

Rf 0,61 (ethylacetát:methanol = 10:1);

¹H-NMR (270 MHz, CD3OD, TMS) δ (ppm):

11,4 (IH, s), 8,48 (IH, d, J=8,0 Hz), 6,31 (IH, tupý s),

5,90 (IH, bs), 5,30 (IH, bs), 5,10 (IH, bs), 4,60-3,30 (7H, m), 2,48 (IH, dt, J=13,5; 6,5 Hz), 2,32 (IH, dt, J=13,5;

v) Sůl trifluoroctové kyseliny a 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guan idino-9-0-dodekanoy1-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózové kyseliny (E42)

Sloučenina E41 (50 mg; 0,075 mmol) byla rozpuštěna v methylenchloridu (3 ml, 50x objem) při laboratorní teplotě. Postupně byla přidána kyselina trifluoroctová (1 ml; lOx objem) při laboratorní teplotě. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 22 h. Po zkončení reakce byla reakční směs odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 5 g, 2-propanol:voda = 5:1) s výtěžkem 38 mg (88 titulní sloučeniny E42 jako nažloutlé pevné látky.

Rf 0,3 (2-propanol:voda = 5:1) ¹H-NMR (270 MHz, CD3OD) δ (ppm):

5,55 (IH, bs), 4,40-4,10 (7H, m), 3,65 (IH, d,

J=9,0 Hz), 2,36 (2H, t, J=7,0 Hz), 2,00 (3H, s), 1,70-1,50 (2H, m), 1,30 (8H, bs), 0,90 (3H, t, J=7,0 Hz);

FAB-MS (positive): 515 (M+H⁺);

[q]d²⁴ = +20,5° (c=0,08; MeOH).

• · • ···· · · · · · ·· · • · · « · · · ···· · ··· ··· • ••••·· · ·

C« ·· ·* · ·· ··

- 98 Příklad 9

Sůl trifluoroctové kyseliny a 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-oktadekanoy1-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózové kyseliny (E47, sloučenina 43)

i) Methyl 5-acetamido-4-azido-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropy 1iden-7-0-oktadekanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranó zoát (E43)

Sloučenina E3 (1,10 g; 2,98 mmol) byla rozpuštěna v methylenchloridu (11 ml) při laboratorní teplotě. Postupně chlorid (1,70 ml; 5,03 mmol) (620 mg; 5,07 mmol) za chlazení při laboratorní teplotě 30 min. Dále (0,7 ml; 5,05 mmol) při laboratorní zkončení reakce byla míchána ještě 30 min.

byl přidán stearoyl a 4-dimethylaminopyridin ledem. Směs byla míchána byl přidán triethylamin teplotě a směs byla míchána 15 h. Po reakční směs byla zředěna methanolem a Dále byl přidán ethylacetát a nasycený solný roztok. Organická fáze byla sušena síranem hořečnatým, přefiltrována a rozpouštědla odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, n-hexan: ethy lacetát = 2:1) s výtěžkem 1,21 g (64 ss) titulní sloučeniny E43 jako bezbarvé pěny.

Rf 0,51 (n-hexan:ethylacetát = 1:1) ¹H-NMR (270 MHz, CDCI3, TMS) δ (ppm):

		99	4 4 · · ♦ · · • · · ·· • · · · • · · · 44 4 4	• · · • 4 4 4 4 · 4 4 4 4 4 44444 4 4 4 4 4« 4	44 44 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4
	5,95 (1H, d, J=2,7 Hz),	5,88	(1H, d,	J=7,9	Hz),	5,35
(1H,	dd, J=6,0; 1,8 Hz), 4,80	(1H,	dd, J=9,l;	2,7	Hz),	4,71
(1H,	dd, J=10,5; 1,8 Hz), 4,39	(1H	, q, J=6,0	Hz) ,	4,14	(1H,
dd,	J=8,8; 6,0 Hz), 3,945 (1H,	dd, J=8,8;	6,0	Hz),	3,81
(3H,	s), 3,45 (1H, ddd, J=10,5;	9,	i; 7,9 Hz),	2,41	(1H,	t,
J=7,	5 Hz), 2,39 (1H, t, J=7,5	Hz) ,	2,02 (3H,	s) ,	1,63	(2H,
kvintet, J=7,5 Hz), 1,37 (3H, s)	, 1,	35 (3H, s),	1,26	(28H,	s) ,

0,88 (3H, t, J=7,5 Hz).

ii) Methyl 5-acetamido-4-amino-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0— isopropy1iden-7-0-oktadekanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E44

Sloučenina E43 (1,20 g; 1,88 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (12 ml) při laboratorní teplotě. Postupně byl přidán Lindlarův katalyzátor (399 mg; 0,33x objem) při laboratorní teplotě a směs byla míchána při vodíkové atmosféře (100 kPa) 3 h.

reakční směs přefiltrována, filtrační zbytek promyt ethanolem. Filtrát byl oddestilován za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 15 g, ethylacetát:methanol = 10:1) s výtěžkem 942 mg (80 %) titulní sloučeniny E44 jako bezbarvé pěny.

Rf 0,37 (ethylacetát:methanol = 4:1);

¹H-NMR (270 MHz, CD3OD, TMS) δ (ppm):

laboratorní Po zkončení teplotě ve reakce byla

5,94	(1H	, d, J—2,	4 Hz),	5,42	(1H, dd, J=4,7; 1,8 Hz),
4,39 (1H,	dt,	J=7,1; 6,	0 Hz) ,	4,18	(1H, dd, J=9,5; 1,6 Hz),
4,14 (1H,	dd,	J=8,7; 6,	4 Hz),	3,93	(1H, dd, J=8,7; 6,4 Hz),
3,87 (1H,	t,	J=9,5),	3,78	(3H,	s), 3,44 (1H, dd, J=9,5;
2,4 Hz),	2,35	(2H, q,	J=7,	3 Hz),	1,94 (3H, s), 1,60 (2H,
kvintet, J	= 7,3	Hz), 1,32	(3H,	s) , 1,	31 (3H, s), 1,27 (28H, s),

0,88 (3H, t, J=7,3 Hz).

iii) Methyl 5-acetamido-4-(N,N'-bis-t-butoxykarbonyl)guanidino-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-7-0-oktadekanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát (E45)

Sloučenina E44 (916 mg; 1,50 mmol), N,N'-bis-t-butoxykarbonylthiomočovina (0,27 ml; 1,95 mmol) ·» *

- 100 a triethylamin (0,27 ml; 1,95 mmol) byly rozpuštěny v dimethylformamidu (12 ml) při laboratorní teplotě. Postupně byl přidán chlorid rtutnatý (529 mg; 1,95 mmol) za chlazení ledem. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 4 h. Reakční směs byla zředěna ethylacetátem a přefiltrována přes Celit, filtr promyt ethylacetátem. Filtrát byl promyt nasyceným solným roztokem, vodná fáze extrahována ethylacetátem. Organická fáze byla sušena síranem hořečnatým, přefiltrována sníženého tlaku. Odparek byl silikagelu (Kieselgel 60, 15 g, 750 mg (59 fc) titulní výtěžkem a rozpouštědla odpařena za chromatografován na sloupci hexan:ethylacetát = 2:1) s sloučeniny E45 jako bezbarvé pěny.

Rf 0,29 (hexan:ethylacetát = 2:1) ¹ H-NMR (270 MHz, CDCI3, TMS) δ (ppm): s), 8,46 (1H, d, (1H, dt, (1H,

11,4 (1H,

J=8,7 Hz), 5,88 1,5 Hz), 5,15 J=6,4 Hz), 4,28 (1H, d, J=8,7 Hz), 6,06 (1H, d, J=2,4 Hz), 5,37 (1H, dd, J=6,4;

J=8,7; 2,4 Hz), 4,38 (1H, q,

1,5 Hz), 4,23 (1H, t,

J=8,7;

J=8,7 Hz), 4,10 (1H, dd, J=9,6; 6,4 Hz), 3,95 (1H, dd, J=9,6; 6,4 Hz), 3,80 (3H, s), 2,453 (1H, dt, J=16,0; 7,5 Hz), 2,33 (1H, dt, J=16,0; 7,5 Hz), 1,87 (3H, s), 1,61 (2H, kvintet, J=7,5 Hz), 1,49 (9H, s), 1,48 (9H, s), 1,38 (3H, s), 1,35 (3H, s), 1,25 (28H, bs), 0,88 (3H, t, J=7,5 Hz).

dd, iv) 5-Acetamido-4-(N,N'-bis-t-butoxykarbonyl)guanidino-2,3,4,5-tetradeoxy-8,9-0-isopropyliden-7-0-oktadekanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózová kyselina (E46)

Sloučenina E45 (741 mg; 0,87 mmol) byla rozpuštěna ve směsi methanolu (15 ml) a vody (1,5 ml) a byl přidán hydroxid lithný monohydrát (38 mg; 0,91 mmol) při laboratorní teplotě. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 6 h. Po zkončení reakce byla reakční směs neutralizována roztokem 4N HC1 v dioxanu. Reakční směs byla odpařena za sníženého tlaku a odparek chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, ethylacetát:methanol = 10:1) s výtěžkem 430 mg (59 fc) sloučeniny E16 jako bezbarvé pěny.

Rf 0,40 (ethylacetát:methanol = 5:1);

• ·

101 ¹H-NMR (270 MHz, CD3OD, TMS) δ (ppm):

11,4 (1H, s), 8,48 (1H, d, J=8,0 Hz), 6,31 (1H, tupý s),

6,5 Hz), 1,88 (3H, s), 1,60 (2H, kvintet, J=6,5), 1,48 (24H, s), 1,39 (3H, s), 1,37 (3H, s), 1,25 (28H, bs), 0,88 (3H, t, J=6,5 Hz).

v) Sůl trifluoroctové kyseliny a 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-oktadekanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózové kyseliny (E47)

Sloučenina E46 (422 mg; 0,50 mmol) byla rozpuštěna v methylenchloridu (3 ml) při laboratorní teplotě. Postupně byla přidána kyselina trifluoroctová (1 ml) při laboratorní teplotě. Směs byla míchána při laboratorní teplotě 22 h. Po zkončení reakce byla reakční směs odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na sloupci silikagelu (Kieselgel 60, 5 g, ethylacetát:2-propanol:voda = 5:2:1) s výtěžkem

300 mg (84 %) titulní sloučeniny E47 jako bezbarvé pěny.

Rf 0,44 (2-propanol:voda = 5:1) ¹ H-NMR (270 MHz, CD3OD) δ (ppm):

5,55 (1H, bs), 4,40-4,10 (7H, m), 3,65 (1H, d,

J=9,0 Hz), 2,36 (2H, t, J=7,0 Hz), 2,00 (3H, s), 1,70-1,50 (2H, m), 1,30 (28H, bs), 0,90 (3H, t, J=7,0 Hz);

FAB-MS (positive): 599 (M+H*);

[q]d²⁴ = +19,8° (c=0,15; MeOH).

- 102 «fc fcfc • fcfc • · · ·· • fcfc fc · 9

9 9

9 99

9 9

999 999

9

9 9 9

Příklad 10

Sůl trifluoroctové kyseliny a cetyl 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoátu (E48, sloučenina 89)

Sloučenina byla připravena analogickým postupem dle příkladu 1, místo myristyl alkoholu byl použit cetyl alkohol.

¹H-NMR (270 MHz, CD3OD) δ

5,83 (1H,	d, J=2,7 Hz)
4,38 (1H, dd,	J=9,0; <1 Hz)
(1H, t, J=9,0	Hz), 3,90-3,74
4,5 Hz), 3,65	(1H, d, J=9
kvintet, J=6,2	Hz), 1,26 (28H

(ppm):

4,44 (1H, dd, J=9,0; 2,7 Hz),

4,18 (2H, t, J=6,2 Hz), 4,17

2H, m), 3,68 (1H, dd, J=12,0;

Hz), 1,99 (3H, s), 1,67 (2H, bs), 0,87 (3H, t, J=6,2 HZ).

Příklad 11

Sůl trifluoroctové kyseliny a stearyl 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoátu (E49, sloučenina 91)

OH k .OH

HO

CH₃CNH ii

O

Sloučenina byla připrav příkladu 1, místo myristyl alkohol.

¹H-NMR (270 MHz, CD3OD) δ

5,83 (1H, d, J=2,7 Hz),

4,38 (1H, dd, J=9,0; <1 Hz), (1H, t, J=9,0 Hz), 3,90-3,74

4,5 Hz), 3,65 (1H, d, J=9, kvintet, J=6,2 Hz), 1,26 (32H, analogickým postupem dle

alkoholu	byl	použit stearyl
(ppm):
4,44 (1H,	dd,	J=9,0; 2,7 Hz),
4,18 (2H,	t,	J=6,2 Hz), 4,17
2H, m), 3	,68	(1H, dd, J=12,0;

Hz), 1,99 (3H, s), 1,67 (2H, bs), 0,87 (3H, t, J=6,2 Hz).

Příklad přípravy 1

Byl připraven vodný roztok o složení: sloučenina příkladu 4 (10 % hmotn.), benzalkonium chlorid (0,04 % hmotn.), fenylethylalkohol (0,40 % hmotn.) a purifikovaná voda (89,56 % hmotn.).

Příklad přípravy 2

Byl připraven vodný roztok s organickým rozpouštědlem

104 příkladu 4 (10 % hmotn.), benzalkonium ), polyethylenglykol 400 (10 % hmotn.), hmotn.) a purifikovaná voda (39,96 % • 9 99 99 9 99 9« *99 · 9 9 · · · 9

9999 9 999 9 99 9

99 999 99999· 999 999 • 99999« · 9

99 9· · 99 99 ο složení: sloučenina chlorid (0,04 % hmotn propylenglykol (30 $ hmotn.).

Příklad přípravy 3

Byl připraven suchý prášek o složení: sloučenina příkladu 4 (40 % hmotn.) a laktóza (60 fc hmotn.).

Příklad přípravy 4

Byl připraven aerosol o složení: sloučenina příkladu 4 (10 fc hmotn.), lecitin (0,5 fc hmotn.), Freon 11 (34,5 fc hmotn.) a Freon 12 (55 fc hmotn.).

Příklad testu 1

Inhibice sialidázy chřipkového viru

Do myší průdušnice (BALB/C, samice, 5 až 6 týdnů staré, tělesná hmotnost 20 g) byla za anestezie zavedena kanyla a injikován fyziologický roztok pufrovaný fosfátovým pufrem (0,5 ml). Promývací roztok byl odsát z plic a postup třikrát opakován. Byly připraveny směsi obsahující 1 umol testované sloučeniny, množství promývacího roztoku z plic obsahující 0,01 mg proteinů a fyziologický roztok pufrovaný fosfátovým tyto směsi o konečném objemu 100 ul byky inkubovány Po odebrání 10 ul vzorků z připravených byla provedena sialidázová reakce pufrem a při 37 °C 1 až 3 dny.

směsi reakčních v 32,5 mmol.I^-1

6,5) obsahujícím 40 mmol.1¹chřipkový virus A/PR/8/34 vytvářejících plak) a jako umbelliferyl-N-acetyl-a-D-neuraminát fluorescence 4-methylumhel1iferonu

2-(N-morfolino)ethansulfonátovém

CaCl2, jako zdroj (ekvivalent 5xl0⁵substrát 0,1 mmol.I^-1amonný. uvolněného pufru (pH sialidázy jednotek 4-methy1Intenzita reakcí byla měřena při excitační vlnové délce 360 nm a 460 nm. Rovněž byla vypracována křivka závislosti koncentrace na inhibici • ΦΦΦ

105

1111 91

111 19

1 119 1 · • · · · » · Φ

1111 9 9

11 11 «

• φ φφφ • φφ •

φ φφφ φ

vycházející z výsledků analogických pokusů, využívajících místo testovaných sloučenin Sloučeninu A (GG-167) v různých koncentracích. Ve vztahu k této křivce se pak udává množství testované sloučeniny s určitou inhibiční aktivitou na sialidázu.

Ačkoliv předkládané sloučeniny nevykazují přímou inhibiční aktivitu na sialidázu, vykazují inhibiční účinky v biologickém materiálu obsahujícím hydrolázu (např. promývací roztok z myších plic) podobné účinkům Sloučeniny A.

Příklad testu 2

Léčba infekce na myších, pokus-1

Byl připraven roztok obsahující 500 pfu (jednotky vytvářející plak) myšího chřipkového viru kmene A/PR/8/34 v 50 umol.l^-1 fosfátovém pufru obsahujícím 0,42% bovinní sérum albumin a tímto roztokem intranasálně infikovány myši (BALB/C, samice, 5 až 6 týdnů staré, 20 g). Byly připraveny dávkové roztoky 0,6 umol/kg/50 ul suspendováním testovaných předkládaných sloučenin ve fyziologickém roztoku a intranasálně podávány zvířatům celkem 3x, tj, 4 h před, 4 h po a 17 h po infikování virem. Test byl prováděn na skupinách po 7 nebo 8 zvířatech a výsledky byly vyjádřeny jako počet přeživších zvířat úměrný k počtu testovaných zvířat 6, 8 a 10 dní po infikování. Jako srovnávací sloučenina byla použita Sloučenina A (GG-167).

Tabulka 2

	6.	den	8. den	10. den
Fyziologický	roztok	1/7	0/7	0/7
Sloučenina A		7/7	3/7	0/7
Sloučenina Př	. 1	8/8	5/8	3/8
Sloučenina Př	. 2	8/8	2/8	1/8

• 4 ···· 4

106 ·· 44 ··

4 4 4 4

4 «44 « 4 • 4 « 4 4 4 4

4 4 4 4 4 4 «4 4· ·

444

Ve skupině léčené sloučeninou A uhynula po 10 dnech od infikování všechna zvířata, naproti tomu, ve skupině léčené sloučeninou příkladu 1 nebo 2 přežilo 3 nebo 1 zvíře. Tyto výsledky naznačují, že předkládané sloučeniny příkladu 1 nebo 2 mají lepši terapeutické účinky proti chřipce než sloučenina A.

Příklad testu 3

Léčba infekce na myších, pokus-2

Byl připraven roztok obsahující 500 pfu (jednotky vytvářející plak) myšího chřipkového viru kmene A/PR/8/34 v 50 umol.1¹ fosfátovém pufru obsahujícím 0,42% bovinní sérum albumin a tímto roztokem intranasálně infikovány myši (BALB/C, samice, 5 až 6 týdnů staré, 20 g). Byly připraveny dávkové roztoky 0,9 umol/kg/50 ul suspendováním testovaných předkládaných sloučenin ve fyziologickém roztoku a intranasálně podávány zvířatům celkem 3x, tj. 4 h před, 4 h po a 17 h po infikování virem. Test byl prováděn na skupinách po 4 až 12 zvířatech a výsledky byly vyjádřeny jako počet přeživších zvířat úměrný k počtu testovaných zvířat 8 a 10 dní po infikování. Jako srovnávací sloučenina byla použita Sloučenina A (GG-167).

Tabulka 3

	8. den	10. den
Fyziologický roztok	0/4	0/4
Sloučenina A	0/8	0/8
Sloučenina Př. 1	4/12	2/12
Sloučenina Př. 10	10/12	5/12
Sloučenina Př. 11	11/11	5/11

Ve skupině léčené sloučeninou A uhynula po 10 dnech od infikování všechna zvířata, naproti tomu ve skupině léčené

- 107 ·· · • *9 • 9 9 9 • · 9 9 9 9 9 ·

9 9 • 9 9 >9 99

9 9 9

9 9 9 9 ·

9

99 sloučeninou příkladu 1, 10 nebo 11 přežilo 2 až 5 zvířat. Tyto výsledky naznačují, že předkládané sloučeniny příkladu 1, 10 a 11 mají lepší terapeutické účinky proti chřipce než sloučenina A.

Příklad testu 4

Léčba infekce na myších, pokus-3

Byl připraven roztok obsahující 500 pfu (jednotky vytvářející plak) myšího chřipkového viru kmene A/PR/8/34 v 50 umol.l^-1 fosfátovém pufru obsahujícím 0,42¾ bovinní sérum albumin a tímto roztokem intranasálně infikovány myši (BALB/C, samice, 5 až 6 týdnů staré, 20 g) . Byly připraveny dávkové roztoky 0,3 umol/kg/50 ul suspendováním testovaných předkládaných sloučenin ve fyziologickém roztoku a intranasálně podávány zvířatům celkem 3x, tj. 4 h před, 4 h po a 17 h po infikování virem. Test byl prováděn na skupinách po 10 nebo 11 zvířatech a výsledky byly vyjádřeny jako počet přeživších zvířat úměrný k počtu testovaných zvířat 6 a 8 dní po infikování. Jako srovnávací sloučenina byla použita Sloučenina A (GG-167).

Tabulka 4

	6. den	8. den
Fyziologický roztok	0/10	0/10
Sloučenina A	10/10	1/10
Sloučenina Př. 3	10/10	10/10
Sloučenina Př. 4	10/10	6/10
Sloučenina Př. 5	11/11	10/11
Sloučenina Př. 6	11/11	10/11
Sloučenina Př. 7	10/10	3/10
Sloučenina Př. 8	11/11	2/11
Sloučenina Př. 9	10/10	4/10

108

00 « 0 0 0 0

0 0 00 0

0 0 0 0 0

0 0 0 0 —* 00 0 0 4 » · 00 00

0 0 0 0 0

0 0 0 0 0 t

0000 0 000 000 přežilo po 10 dnech od tomu, ve skupině léčené

Ve skupině léčené sloučeninou A infikování pouze 1 zvíře, naproti sloučeninou příkladů 3 až 9 přežilo 2 až 10 zvířat. Tyto výsledky naznačují, že předkládané sloučeniny příkladů 3 až 9 mají lepší terapeutické účinky proti sloučenina A.

chřipce než

Průmyslová využitelnost

Sloučeniny kyseliny neuraminové vynálezu, podléhají in vivo hydrolýze a vykazují a inhibiční vynikáj ící účinky inhibiční účinky na sialidázu.

1, předkládaného působením hydrolázy na replikaci viru Sloučeniny kyseliny neuraminové 1 vykazují při podání myším infikovaným chřipkovým virem lepší v W091/16320 terapeutické účinky, než Sloučenina A popsaná (Japonská PCT přihláška (Kokai) No. Hei 5-507068). Proto jsou sloučeniny kyseliny neuraminové 1 předkládaného vynálezu použitelné při terapii nebo prevenci (výhodně terapii) virových infekcí (výhodně virové chřipky).

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Sloučenina obecného vzorce 1:

[kde R¹ je methyl, případně substituovaný halogenem; R², R³a R⁴ jsou stejné nebo odlišné a jsou H, alifatický C3-25 acyl a W je H nebo esterový zbytek, za podmínky, že je vyloučen případ, kdy R¹ je methyl a R², R³, R⁴ a W jsou současně H], nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
2. Sloučenina podle nároku 1,vyznačující se t i m , že R¹ je methyl případně substituovaný fluorem, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
3. Sloučenina podle nároku 1,vyznačující se t i m , že R¹ je methyl, monofluormethy1 nebo difluormethyl, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
4. Sloučenina podle nároku 1,vyznačující se t i m , že R¹ je methyl, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
5. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, vyznačující se tím, žeR² jeH nebo alifatický Ce-25 acyl, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

·· ·· ·* · ·* ·· • · · · · · ···· • ··«· · · * · · · · · • · · · · · · ···· · ··· ··· ······· · · — 110 — ·* ·· *· · ·· ··
6. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, vyznačující se tím, žeR² jeH nebo alifatický Ce-20 acyl, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
7. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, vyznačující se tím, že R² jeH nebo hexanoyl, oktanoyl, dekanoyl, dodekanoyl, myristoyl, palmitoyl nebo stearoyl, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
8. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7, vyznačující se tím, že R³ je H nebo alifatický Ce-25 acyl, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
9. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7, vyznačující se tím, že R³ je H nebo alifatický Ce-20 acyl, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
10. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7, vyznačující se tím, že R³ jeH nebo hexanoyl, oktanoyl, dekanoyl, dodekanoyl, myristoyl, palmitoyl nebo stearoyl, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
11. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 10, vyznačující se tím, že R⁴ jeH nebo alifatický C6-25 acyl, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
12. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 10, vyznačující se tím, žeR⁴ jeH nebo alifatický Ce-20 acyl, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
13. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 10, vyznačující se tím, ŽeR⁴ jeH nebo hexanoyl, oktanoyl, dekanoyl, dodekanoyl, myristoyl, palmitoyl nebo stearoyl, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
14. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, vyznačující se tím, že R² je alifatický

0 0 0

00000 0

111

00 0«

0 0 0

0 0 0 00

0 0 0 I

0 0 0 <

— 00 00

00 00

0 0 0 0

0 0 0 0 • 0 0 0 0 0 0 0

0 * 0 0

C3-25 acyl a R³ a R⁴ jsou současně H, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
15. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, vyznačující se tím, žeR² je alifatický Ce-25 acyl a R³ a R⁴ jsou současně H, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
16. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, vyznačující se tím, že R² je alifatický Ce-20 acyl a R³ a R⁴ jsou současně H, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

17. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, vyznačující se tím, že R² je hexanoyl, oktanoyl, dekanoyl, dodekanoyl, myristoyl, palmitoyl nebo stearoyl a R³ a R⁴ jsou současně H, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

18 . Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 17, v y z n a č u j í c í se tím t že W je H nebo Ci- 1e alkyl, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl • 19. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 17, v y z n a č u j í c í se tím, že W je H, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl. 20. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 17, v y z n a č u j £ c í se tím, že W je esterový zbytek, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl • 21. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 az 17, v y z n a č u j í c í se tím , že W je C6-18 alkyl, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl • 22. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, v y z n a č u j í c í se tím, w ze R² , R³ a R⁴ jsou

• · • fcfcfc ·

112 ·♦ ·» ·* • « · · · • · ·♦· ♦ · • · · « * · · • · · · · · fcfc ·· ♦ · • fc· fc fc ♦ současně Ha W je esterový zbytek, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

23. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4,

vyznačuj í c í s e tím, že R² , R³ a R⁴ jsou současně H a W je Ce -1 β alkyl, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl. 24. Sloučenina podle nároku 1, vyzná č u jící s e

t í m , že R¹ je methyl případně substituovaný fluorem, R² je alifatický C3- 25 acyl, R³ a R⁴ jsou současně Ha W je H nebo esterový zbytek, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

25. Sloučenina podle nároku 1, vyznačující se t í m , že R¹ je methyl, R² je alifatický Ce - 2 5 acyl, R³ a R⁴jsou současně H a W je H nebo C1 - 1 e alkyl, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

26. Sloučenina podle nároku 1, vyznačující se t í m , že R¹ je methyl, R² je alifatický Ce-20 acyl, R³, R⁴ a W jsou současně H, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

27. Sloučenina podle nároku 1, vyznačující se t í m , že R¹ je methyl případně substituovaný fluorem, R²,

R³, R⁴ jsou současně H a W je esterový zbytek, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

28. Sloučenina podle nároku 1, vyznačující se t í m , že R¹ je methyl, R², R³, R⁴ jsou současně H a W je Ce-1β alkyl, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

29. Sloučenina podle nároku 1 volená ze skupiny látek:

5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-hexanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózová kyselina

5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-oktanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózová kyselina

- 113 ·· ·· toto · *· *· ··· · · « · · · · • · ··· to tototo · ·· · to ·· «·· ·«···« ··· ··· «•••••to · · • to ·· ·* to ·· ··

5-acetami do-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-dekanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózová kyselina

5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-dodekanoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózová kyselina

5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-myristoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózová kyselina

5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-palmitoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózová kyselina

5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-9-0-stearoyl-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózová kyselina hexyl 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát myristyl 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát cetyl 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-D-glycero-D-galakto~non-2-enopyranózoát stearyl 5-acetamido-2,3,4,5-tetradeoxy-4-guanidino-D-glycero-D-galakto-non-2-enopyranózoát

30. Přípravek na léčbu nebo prevenci virových infekcí, vyznačující se tím, že obsahuje jako účinnou složku sloučeninu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 29, nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl.

31. Použití sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 29, nebo její farmaceuticky přijatelné soli při přípravě farmaceutického přípravku na léčbu nebo prevenci virových infekc i.

32. Způsob léčby nebo prevence virového onemocnění, vyznačující se tím, že zahrnuje podání farmaceuticky účinného množství sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 29, nebo její farmaceuticky přijatelné soli.