CZ684990A3 - Léčivo skládající se z první a druhé účinné látky - Google Patents
Léčivo skládající se z první a druhé účinné látky Download PDFInfo
- Publication number
- CZ684990A3 CZ684990A3 CS906849A CS684990A CZ684990A3 CZ 684990 A3 CZ684990 A3 CZ 684990A3 CS 906849 A CS906849 A CS 906849A CS 684990 A CS684990 A CS 684990A CZ 684990 A3 CZ684990 A3 CZ 684990A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- histone
- fragment
- active
- medicament according
- medicament
- Prior art date
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims description 32
- 239000013543 active substance Substances 0.000 title claims description 19
- 108010033040 Histones Proteins 0.000 claims abstract description 55
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 claims abstract description 49
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 claims abstract description 44
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 claims abstract description 21
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 claims abstract description 21
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 claims abstract description 16
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 15
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 claims abstract description 15
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 claims abstract description 11
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 claims abstract description 10
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 6
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 31
- 102000006947 Histones Human genes 0.000 claims description 26
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 16
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 7
- 102000017286 Histone H2A Human genes 0.000 claims description 5
- 108050005231 Histone H2A Proteins 0.000 claims description 5
- 101710103773 Histone H2B Proteins 0.000 claims description 5
- 102100021639 Histone H2B type 1-K Human genes 0.000 claims description 5
- WXJKFRMKJORORD-DCAQKATOSA-N Lys-Arg-Ala Chemical compound NC(=N)NCCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN WXJKFRMKJORORD-DCAQKATOSA-N 0.000 claims description 4
- NTSPQIONFJUMJV-AVGNSLFASA-N Lys-Arg-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NTSPQIONFJUMJV-AVGNSLFASA-N 0.000 claims description 4
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 claims description 4
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims 1
- 210000004900 c-terminal fragment Anatomy 0.000 claims 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 abstract description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 46
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 12
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 12
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 12
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 10
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 10
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 10
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 10
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 10
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 9
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 8
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 7
- DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N Carmustine Chemical compound ClCCNC(=O)N(N=O)CCCl DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 101000588067 Homo sapiens Metaxin-1 Proteins 0.000 description 6
- 102100031603 Metaxin-1 Human genes 0.000 description 6
- 101000727837 Rattus norvegicus Reduced folate transporter Proteins 0.000 description 6
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 208000011691 Burkitt lymphomas Diseases 0.000 description 5
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 5
- 229940009456 adriamycin Drugs 0.000 description 5
- DVQHYTBCTGYNNN-UHFFFAOYSA-N azane;cyclobutane-1,1-dicarboxylic acid;platinum Chemical compound N.N.[Pt].OC(=O)C1(C(O)=O)CCC1 DVQHYTBCTGYNNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 5
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 4
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 4
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 4
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 4
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 4
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 3
- 208000031637 Erythroblastic Acute Leukemia Diseases 0.000 description 3
- 208000036566 Erythroleukaemia Diseases 0.000 description 3
- 101000623878 Homo sapiens Metaxin-2 Proteins 0.000 description 3
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 3
- 102100023138 Metaxin-2 Human genes 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 208000021841 acute erythroid leukemia Diseases 0.000 description 3
- 229960004562 carboplatin Drugs 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- WUIABRMSWOKTOF-OYALTWQYSA-O 3-[[2-[2-[2-[[(2s,3r)-2-[[(2s,3s,4r)-4-[[(2s,3r)-2-[[6-amino-2-[(1s)-3-amino-1-[[(2s)-2,3-diamino-3-oxopropyl]amino]-3-oxopropyl]-5-methylpyrimidine-4-carbonyl]amino]-3-[(2r,3s,4s,5s,6s)-3-[(2r,3s,4s,5r,6r)-4-carbamoyloxy-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)ox Chemical compound OS(O)(=O)=O.N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C WUIABRMSWOKTOF-OYALTWQYSA-O 0.000 description 2
- 208000006558 Dental Calculus Diseases 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- PLXBWHJQWKZRKG-UHFFFAOYSA-N Resazurin Chemical compound C1=CC(=O)C=C2OC3=CC(O)=CC=C3[N+]([O-])=C21 PLXBWHJQWKZRKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 229960004395 bleomycin sulfate Drugs 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 2
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001609 comparable effect Effects 0.000 description 2
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 2
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- WEEMDRWIKYCTQM-UHFFFAOYSA-N 2,6-dimethoxybenzenecarbothioamide Chemical compound COC1=CC=CC(OC)=C1C(N)=S WEEMDRWIKYCTQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- -1 Fluoracil Chemical compound 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 208000025747 Rheumatic disease Diseases 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003466 anti-cipated effect Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 description 1
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 229960005243 carmustine Drugs 0.000 description 1
- 230000022534 cell killing Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 229940000425 combination drug Drugs 0.000 description 1
- 208000035250 cutaneous malignant susceptibility to 1 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000890 drug combination Substances 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003284 homeostatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 231100000508 hormonal effect Toxicity 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 230000001926 lymphatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 210000005170 neoplastic cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 229960002385 streptomycin sulfate Drugs 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000003319 supportive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000002992 thymic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000724 thymus hormone Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/1703—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- A61K38/1709—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
- A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
- A61K33/243—Platinum; Compounds thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Description
Oblast techniky
Vynález se týká cytostatického nebo cytostatického kombinačního léčiva skládajícího se z první a druhé účinné látky, které vykazují synergický účinek v místě patogenního procesu.
Dosavadní stav techniky
Cytostatika se používají např. pro terapii zhoubných nádorů. Včasná diagnóza a včasné odstranění nádorů jsou dnes klíčovými zásahy pro úspěšné léčení rakoviny. S úspěchem se též používá terapie ozařování při lokálně ohraničených nádorech a také jako přídavná terapie k chirurgii.
Při diseminovaných a metastá zují cích nádorech však zůstávají jako léčebné postupy chemoterapie a immunoterapie. S chemoterapií se pravidelně spojují těžké vedlejší nepříznivé účinky. Cytostatika použitá v kombinačních pokusech tak způsobují poškození ledvin, jater, poruchy hemopoezy a mnohá další poškození, která značně ovlivňují celkový stav a odolnost pacientů. K tomu je nutné připomenout, že prakticky všechna cytostatika účinkují silně immunosupresivně. Tyto vedlejší účinky mají za následek, že se dávkování cytostatik nedá nasadit v dostatečné výšce nebo, že se terapie musí „ přerušit před docílením žádaného efektu. Situaci navíc * ztěžuje též skutečnost, že se při delším podávání cytostatik
- často dostavuje resistence nádorových buněk. Navíc existují též takové rakovinové buňky, proti kterým jsou známá γ cytostatika neúčinná.
- 2 er ee ··«· • e ♦ 9 · r r · ·
Imunoterapie se většinou provádějí s interferony a interleukiny, pro stimulaci buněčné aktivity. Zpravidla se jedná jen o podpůrné, aditivní opatření. Pro immunosupresivní účinek cytostatik se tyto používají též pro terapii autoimmunitnich nemocí, jako např. rheumatických chorob, sclerosis multiplex a lupenky, přičemž ale i tady je potřeba počítat s těžkými vedlejšími účinky, a proto dávkování není často dostačující nebo se léčba musí předčasně ukončit.
Cílem předloženého vynálezu je připravit takovou kombinaci účinných látek, která prokáže podstatně zlepšený cytostatický, nebo dokonce cytotoxický účinek, jako dosud používaná cytostatika, např. vincristin, methotrexat, cisplatina samotná, aby se takto dala uskutečnit účinnější chemoterapie s podstatně zmírněnými nebo značně zmenšenými vedlejšími účinky a aby se dala výrazně snížit účinná dávka cytostatik. Kombinací účinných látek se též zvýší terapeutický účinek známých cytostatik nebo se tento vůbec umožní. Z přihlášky evropského patentu 85 100 179.2 je již známo, že minimálně jeden histon a/nebo nejméně jeden fragment histonu může projevit hormonální účinek, který se dá s výhodou využít např. pro léčbu rakoviny. Zvláště se jedná o histony Hl, H2A a/nebo H2B a H3. V přihlášce německého patentu 37 37 274 je poukaz na přímý cytostatický účinek směsi histonů H2A/H2B na určité nádorové buněčné linie. Cytostatický účinek Hl na různé neoplastické buněčné linie je popsaný v přihlášce amerického patentu 07/332,658 z 3.4. 1989. Jedná se o doplněk (CIP) k přihlášce USP 777, 783 Z 10.1. 1985.
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu je léčivo skládající se z první a druhé účinné látky, které vykazují synergický účinek v místě patogenního procesu, jehož podstata spočívá v tom,
- 3 r r r r
r. r r ř r c r
t c.
* r r· r e • f • e r e e f ř řt«ř ř * · e · · e e · · * · e * · '.
že jako první účinnou látku obsahuje alespoň jedno cytostatikum a jako druhou účinnou látku, která má cytostatický nebo cytotoxický účinek, obsahuje alespoň jeden histon nebo alespoň jeden aktivní fragment histonu nebo kombinaci alespoň jednoho histonu a alespoň jednoho aktivního fragmentu histonu.
Jako druhou účinnou látku obsahuje léčivo podle vynálezu s výhodou látku zvolenou ze souboru zahrnujícího Hl, H2A, H2B, H2A:H2B a H3. Jako aktivní fragment histonu v druhé účinné látce obsahuje léčivo podle vynálezu s výhodou evolučně variabilní fragment. Aktivní fragment histonu v druhé účinné látce je s výhodou N- nebo C-terminální.
Podle jednoho provedení obsahuje léčivo podle vynálezu ve druhé účinné látce alespoň jeden fragment histonu H2A s dílčí sekvencí 1-41 nebo 1-36 nebo 1-12 nebo 1-11 nebo 12 - 36 nebo 12 - 41 nebo 1-28 nebo 11 - 23.
Podle dalšího provedení obsahuje léčivo podle vynálezu ve druhé účinné látce alespoň jeden fragment histonu podtypu H2A Z s dílčí sekvencí 1-30 nebo 9 -25.
Podle dalšího provedení obsahuje léčivo podle vynálezu ve druhé účinné látce alespoň jeden fragment histonu H2B s dílčí sekvencí 1-35 nebo 1-34 nebo 1-32 nebo 1-31 nebo 1-29 nebo 1-26 nebo 1-23 nebo 24
- 35 nebo 24 - 34 nebo 24 - 32 nebo 24 - 31 nebo 24 - 29 nebo 1-20 nebo 21 - 29 nebo 21 - 31 nebo 21-32 nebo 21
- 34 nebo 21 - 35 nebo 14 - 26.
Podle dalšího provedení obsahuje léčivo podle vynálezu ve druhé účinné látce alespoň jeden fragment histonu podtypu H2B P.A. s dílčí sekvencí 17-50.
Γ Γ r r f r r r r f e* r rr r
ΓΡ f f · · · · r ρ p · · t f. · · ρ p rr· · f · · e r ρ p «« ·
Podle dalšího provedení obsahuje léčivo podle vynálezu ve druhé účinné látce alespoň jeden fragment histonu H3 s dílčí sekvencí 3 - 34 a 17 - 29.
Podle dalšího provedení obsahuje léčivo podle vynálezu ve druhé účinné látce alespoň jeden histon a/nebo fragment histonu, kterýžto histon a/nebo fragment obsahuje alespoň jednu z aminokyselinových sekvencí zvolených ze souboru zahrnujícího KRAA (Lys Arg Ala Ala) a KRVA (Lys Arg Val Ala.
Podle dalšího provedení obsahuje léčivo podle vynálezu ve druhé účinné látce C-terminální fragment histonu H1 nebo jeho část s opakující se sekvencí aminokyselin KRAA (Lys Arg Ala Ala) a/nebo N-terminální fragment histonu H2B nebo jeho část s opakující se sekvencí aminokyselin KRVA (Lys Arg Val Ala).
Při dvou posledně uvedených provedeních je první účinná látka s výhodou zvolena ze souboru zahrnujícího vincristine, methotrexate a cisplatin. Je-li tomu tak, obsahuje druhá účinná látka s výhodou H2A:H2B.
Předmětem vynálezu je dále léčivo podle některého z výše uvedených provedení pro léčbu rakoviny a autoimunitních chorob.
Účinnost kombinovaného léčiva podle vynálezu je dokumentována v popsaných pokusech a také v návaznosti na grafy, které jsou znázorněny na přiložených obrázcích 1 až 15.
r r r «* t r r · · * r r · r r · · * r cr · čeř*··
Přehled obrázků na výkresech
Na obr. 1 je znázorněn graf, v němž je komplex H2A:H2B charakterizován pomocí absorbance eluátu z dělení pomocí HPLC.
Na obr. 2 až 7 jsou uvedeny sloupcové diagramy ilustrující přírůstky buněk za použití různých léčivových kombinací podle vynálezu.
Na obr. 18 až 15 jsou uvedeny závislosti indexu cytotoxicity na různých cytostatik za přítomnosti nebo nepřítomnosti histonu Hl.
Příklady provedeni vynálezu
Používá se vždy směs histonů H2A:H2B, případně komplex H2A:H2B podle obr. 1, která (-ý) se získá z brzlíkového preparátu (homeostatický tymický hormon) z telecího brzlíku podle Comsu & Bernardiho (Extraction, Fractionating and Testing of Homogenous Thymic Hormon Preparation, Annals of the New York Academy of Sciences, Vol. 240, s. 402-403; 28.2. 1975) vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií. Eluce se provedla na koloně μBondak C-18 pomocí lineárního- gradientu (%B) acetonitrilu od 20 do 80% v 0,1% kyselině trifluoroctové při průtokové rychlosti 1 ral/min. Absorbance eluátu se měřila při 214 nm. Na obr. 1 je na ose % objem v ml, na levém ordinátu absorbance při 214 nm a pravém ordinátu lineární gradient (%B).
* Též se dá připravit čistý H2A nebo čistý H2B. Je potřebné jenom objasnit, zda H2A:H2B (obr. 1) je směsí histonů H2A a H2B nebo je to sloučenina H2A a H2B (H2A: H2B-komplex). Je jasné, že se mohou použít i různé jiné známé postupy přípravy histonů. Vynález se neomezuje na ·· ····
St f e t r r
«· r r r rř rr ·· e r • r • r • f ·· · ♦e·· » · · • · · * ··· · • · použití H2A:H2B, ale s cytostatickým nebo pokrývá i jejich aktivní fragmenty cytotoxickým účinkem.
I když není dosud znám mechanismus cytostatického nebo cytotoxického účinku histonů, z vynálezu vyplývá, že aktivní význam mají repetitivní aminokyselinové sekvence KRAA a KRVA. První z nich se např. nachází v C-terminálním úseku HI a druhá např. V N-terminálním úseku H2B.
Maligní buňky se pěstovaly v kompletovaném živném médiu (RPMI 1640 s 10% FCS). Kultivační médium se denně obnovovalo. Když dno kultivační nádoby zarostlo, buňky setřely a zčásti znovu nasadily, protože na pokusy jsou potřebné buňky z oblasti optimálního růstu. Kultivace probíhala při 36,5eC a 5,5% CO2 v termostatu. Koncentrace živých buněk se určila s barvivém nigrosin (0,2% ve fyziologickém roztoku pufrovaném fosfátem [PBS]) v Neubaurové počítací komůrce.
Složky chemoterapeutika podle vynálezu (např. H2A: H2B a jedno ze známých cytostatik) se přidaly do živného média vždy jednotlivě jakož i v kombinaci podle vynálezu a sterilně se přefiltrovaly.
Pro pokusy se setřely nepříliš husté narostlé maligní buňky ze dna kultivační nádoby, určil se počet živých buněk a nastavil na 3,5xl05 buněk/ml. Část této suspenze buněk se inkubovala s přidáním chemoterapeutika podle vynálezu, případně s jeho složkami v termostatu. Konečná koncentrace maligních buněk v jamce byla l,75xl05 buněk/ml.
I • · ····
- 7 ··· • ·
Příklad 1
Účinnost Η2Α:Η2Β v kombinaci s cytostatiky cysplatinou, methotrexatem a vincristinem se testovala na linii lymfomových buněk OH 77. Na obr. 2 jsou uvedené testy cytotoxicity s těmito cytostatiky a s H2A:H2B vždy samotnými oproti buňkám linie lymfomu OH 77. Inkubovaly se buňky této linie po dobu 48 hodin s:
CisPl (1 pg/ml cisplatina), MTX1 (5 gg/ml methotrexat), Viní (5 gg/ml vincristin),
CisP2 (2 ug/ml cisplatina), MTX2 (10 pg/ml methotrexat), Vin2 (10 μg/ml vincristin), a 250 μg/ml H2A:H2B a zaznamenal se přírůstek buněk v %. K znamená kontrolu přírůstku buněk za 48 hodin (růst buněk bez přidání cytostatika nebo H2A:H2B). Cytostatika, jakož i H2A:H2B, prokázaly jenom malý nebo žádný cytostatický účinek.
Na obr. 3 je uvedený jiný test cytotoxicity, přičemž se uvedená cytostatika použila vždy v kombinaci s H2A:H2B. Jednotlivé pokusy ukazují inkubaci buněk linie lymfomu OH 77 po dobu 48 hodin s:
Vinl/H2A:H2B (5 μg/ml vincristin + 100 μg/ml H2A:H2B),
MTX1/H2A:H2B (5 μg/ml methotrexat + 100 μg/ml H2A:H2B),
CisPl/H2A:H2B (1 μg/ml cisplatina + 100 μg/ml H2A:H2B), a zaznamenal se· přírůstek buněk v %. K opět znamená kontrolu přírůstku buněk za 48 hodin bez jakéhokoliv přídavku a pro lepší porovnání s H2A:H2B je připojený cytostatický účinek samotného přídavku 100 μg/ml H2A: H2B.
Kombinace H2A:H2B + vincristin, a to v kombinacích, které naznačovaly u jednotlivých substancí jen lehký cytostatický účinek (obr. 2), vedla naproti tomu k synergickému účinku s cytotoxickým efektem (obr. 3).
r * ···· r r r r r e * f «- r * t r f tr r <r r r · · f r · · r c rt * ·
Γ · · t r r r r e · ·
Cytostatické účinky s kombinacemi H2A:H2B + methotrexat, resp. H2A:H2B + cisplatina jsou oproti jednotlivým látkám zlepšené. To platí především pro kombinaci H2A:H2B + methotrexat.
Příklad 2
Účinek H2A:H2B v kombinaci s uvedenými cytostatiky se testoval na melanomové buněčné linii EG 463 in vitro.
Obr. 4 ukazuje další test cytotoxicity s dotyčnými cytostatiky a H2A:H2B, vždy s buňkami melanomové linie EG 463. Buňky této linie se inkubovaly vždy jednotlivě s následovanými substancemi a zaznamenal se přírůstek buněk:
CisPl (1 μ9/ιη1 cisplatina), CisP2 ( 2 μ9/ιη1 cisplatina),
MTX1 (5 μ9/ιη1 methotrexat), MTX2 (10 μ9/πι1 methotrexat),
Viní (5 μ9/κι1 vincristin), Vin2 (10 μg/ml vincristin), a 250 μ9/πι1 H2A:H2B. K označuje kontrolu přírůstku buněk za 48 hodin bez jakéhokoliv přídavku.
Na obr. 5 se inkubovaly buňky melanomové buněčné linie EG 463 po dobu 48 hodin s uvedenými cytostatiky v kombinaci s H2A:H2B a zaznamenal se přírůstek buněk v %:
Vinl/H2A:H2B (5 μ9/πι1 vincristin + 100 μ9/ιη1 H2A:H2B),
MTX1/H2A:H2B (5 μ9/η1 methotrexat + 100 μα/πιΐ H2A:H2B),
CisPl/H2A:H2B (1 μ9/ιη1 cisplatina + 100 μ9/πι1 H2A:H2B),
K opět znamená kontrolní přírůstek buněk za 48 hodin bez jakéhokoliv přídavku a pro H2A:H2B označuje cytostatický účinek samotného přídavku 100 μ9/ιη1 H2A:H2B. Obr. 5 zdůrazňuje, že kombinace H2A:H2B + vincristin, ze které jednotlivé složky samostatně účinkují lehce cytostaticky (obr. 4), neúčinkují synergicky, ale jenom aditivně.
Naproti tomu se ukazuje, že methotrexat a cisplatina, které jako samostatné látky neúčinkují ani
- 9 r r r r r r f f r ř r r ř f r ř f r r r 9 * · · · r · » r · · r ret · • ·
r. · · cytostaticky (obr. 4), v kombinaci s H2A:H2B působí cytotoxicky (synergicky) (obr. 5).
Příklad 3
Účinek H2A:H2B v kombinaci s uvedenými cytostatiky se testoval in vitro i na linii fibroblastů Hufibl. Obr. 6 ilustruje ještě další test cytotoxicity s cytostatiky a H2A:H2B, a to vždy samostatně oproti buňkám linie fibroblastů Hufibl. Buňky této linie se inkubovaly 48 hodin s následovanými jednotlivými látkami a zaznamenal se přírůstek buněk v %:
CisPl (1 gg/ml cisplatina), CisP2 ( 2 μg/ml cisplatina),
MTX1 (5 μg/ml methotrexat), MTX2 (10 μg/ml methotrexat),
Viní (5 μg/ml vincristin), Vin2 (10 μg/ml vincristin), a 250 μg/ml H2A:H2B. K opět označuje kontrolu přírůstku buněk bez jakéhokoliv přídavku.
Na obr. 7 jsou zobrazeny přírůstky buněk v % po dobu 48 hodin inkubace fibroblastové buněčné linie Hufibl s uvedenými cytostatiky kombinovanými následujícím způsobem s H2A:H2B:
Vinl/H2A:H2B (5 μ9/ιη1 vincristin + 100 μg/ml H2A:H2B),
MTX1/H2A:H2B (5 μ9/πι1 methotrexat + 100 pg/ml H2A:H2B),
CisPl/H2A:H2B (1 μg/ml cisplatina + 100 μg/ml H2A:H2B),
Kromě toho se buněčná linie inkubovala jen se 100 μg/ml
H2A:H2B. K znovu znamená kontrolní přírůstek buněk za 48 hodin bez jakéhokoliv přídavku.
Nepozoruje se synergický účinek H2A:H2B s cytostatiky na netransformované lidské fibroblasty. Již dokumentovaný cytostatický účinek chemoterapeutik se s pomocí H2A:H2B zvýší (obr. 6), ale nemění se na cytotoxický účinek.
• r r ♦ · r r • f • r f • f ·«« r· r r r rr r rr f e c r ♦ f r • f r t
- io - v//
W
Přídavné pokusy
Buňky zavedených buněčných linií různého hernopoietického původu pocházející od leukemického pacienta s Burkittovým lymfomem (DAUDI) nebo erythroleukémií (K562) byly podrobeny zkoušce na přežití za přítomnosti následujících klinicky používaných chemoterapeutických léčiv: Carmustine (BCNU), Adriamycin, Bleomycin, Sulfáte, 5-Fluorouracil, Paraplatin (Carboplatin), Methotrexate, Taxol (Paclitaxel), Etoposide, Cytosine Arabinofuranoside (Are-C).
Pf ···· Γ · · t · · e·· · • · ·· ·
Buňkami bylo zaočkováno médium RPMI 1640 obsahující tepelně inaktivované fetální telecí sérum (10 %), L-glutamin (2mM), hydrogenuhličitan sodný (2 g/1), sulfát streptomycinu (20 000 m.j./l) a penicilín (20 000 m.j./l) umístěné v 96-jamkové mikrotitrové misce s plochým dnem při koncentraci 100 μΐ/jamka a 2 x 105/ml. Chemoterapeutická léčiva byla přidána v množství 50 μΐ/jamku do dosažení konečné koncentrace uvedené v tabulce 1 uvedené dále. Histon H1 byl přidán v množství 50 μΐ/jamka až do dosažení konečné koncentrace 150 nebo 250 μg/ml. Při kontrolním pokusu bylo použito místo histonu H1 samotného média. Misky byly inkubovány 48 hodin při 37’C v atmosféře obsahující 5 % oxidu uhličitého.. Životaschopnost buněk byla stanovena zkouškou barvení Alamarovou modří (redukce spojená s růstem buněk vyvolá změnu zbarvení indikátoru Alamarové modři z nefluo- rescentního modrého zbarvení (oxidovaná forma) na fluores- centní červené zbarvení (redukovaná forma). Při této zkoušce byla přidána Alamarova modř (10 % objemových, vztaženo na jamku) a následovala čtyřhodinová inkubace při 37’C v atmo- sféře 5% oxidu uhličitého. Zkouška byla vyhodnocována pro měření misky ve fluorimetru při 560 nm (excitace) a 570 nm (emise). Životaschopnost buněk byla vyjádřena jako index cytotoxicity (Cl), který byl vypočítán r e r r r r r c r t f r * f r • c r e • rc ·» f ř • r • -re • r ···eeee r · c · ce · •
z následujícího vzorce
- EM570 (za přítomnosti Hl)
Cl = - x 100 em570 (za nepřítomnosti Hl)
Dávka kombinace chemoterapeutického léčiva a histonu Hl, které je zapotřebí pro usmrcení buněk z 50% (Cl = 50) byla označena jako LD50. Dávka chemoterapeutického léčiva potřebná pro dosažení usmrcení buněk z 50 % (LD50) byla určena graficky a byla porovnána s dávkou LD50 chemoterapeutického léčiva v kombinaci s histonem Hl (chemoterapeutické léčivo: 150 μg/ml; histon Hl: 250 μg/ml) a vyjádře- na v tabulce 1 jako snížení koncentrace léčiva v %. Výsledky jsou uvedeny v dále popsaných grafech.
Na obr. 8A, 8B, 8C a 8D je znázorněna závislost indexu cytotoxicity na koncentraci BCNU (obr. 8A), Adriamycinu (obr. 8B), Bleomycin sulfátu (obr. 8C) a 5-Fluorouracilu (obr. 8D) za přítomnosti nebo nepřítomnosti histonu Hl v množství 250 μg/ml, použitého v ko-kultuře s buňkami Burkittova lymfomu, buněčné linie DAUDI.
Na obr. 9A, 9B a 9C je znázorněna závislost indexu cytotoxicity na koncentraci Paraplatinu (obr. 9A), Methotrexate (obr. 9B) a Taxolu (9C) za přítomnosti nebo nepřítomnosti histonu Hl v množství 250 μg/ml, použitého v ko-kultuře s buňkami Burkittova lymfomu, buněčné linie DAUDI.
Na obr. 10A, 10B a 10C je znázorněna závislost indexu cytotoxicity na koncentraci BCNU (obr. 10A), Adriamycinu (obr. 10B) a 5-Fluorouracilu (obr. 10C) za přítomnosti nebo nepřítomnosti histonu Hl v množství 250 tr r f rr e r e • r r • C • f r řf t r • re·· • r e ee· · • r ♦ · ··· trtt ·· · μg/ml, použitého v ko-kultuře s buňkami erythroleukemické buněčné linie K562.
Na obr. 11A, 11B a 11C je znázorněna závislost indexu cytotoxicity na koncentraci Taxolu (obr. 11A), ^araplatine (obr. 11B) a Hethotrexate (11C) za přítomnosti nebo nepřítomnosti histonu H1 v množství 250 μςτ/ιηΐ, použitého v ko-kultuře s buňkami erythroleukemické buněčné linie K562.
Na obr. 12A, 12B a 12C je znázorněna závislost indexu cytotoxicity na koncentraci Methotrexate (obr. 12A), Adriamycinu (obr. 12B) a 5-Fluorouracilu (12C) za přítomnosti nebo nepřítomnosti histonu H1 v množství 150 μg/ml, použitého v ko-kultuře s buňkami Burkittova lymfomu, buněčné linie DAUDI.
Na obr. 13A, 13B a 13C je znázorněna závislost indexu cytotoxicity na koncentraci Etoposide (obr. 13A), Cytosine Arabinofuranosidu (obr. 13B) a Taxolu (obr. 13C) za přítomnosti nebo nepřítomnosti histonu H1 v množství 150 μg/ml, použitého v ko-kultuře s buňkami Burkittova lymfomu, buněčné linie DAUDI.
Na obr. 14A, 14B a 14C je znázorněna závislost indexu cytotoxicity na koncentraci Methotrexate (obr. 14A), Adriamycinu (obr. 14B) a 5-Fluorouracilu (14C) za přítomnosti nebo nepřítomnosti histonu H1 v množství 150 μg/ml, použitého v ko-kultuře s buňkami erythroleukemické buněčné linie K562.
Na obr. 15A, 15B a 15C je znázorněna závislost indexu cytotoxicity na koncentraci Etoposide (obr. 15A), Cytosine Arabinofuranosidu (obr. 15B) a Taxolu (obr. 15C) za
- 13 ♦ ' c c * ee ee f r e r r · · e . e · ♦ r e · ee · ·
Γ · · přítomnosti nebo nepřítomnosti histonu Hl v množství 150 pg/ml, použitého v ko-kultuře s buňkami erythroleukemické buněčné linie K562.
Shrnutí pokusů s měřením cytotoxicity je uvedeno v tabulce 1. Hodnoty LD50 (koncentrace potřebná pro usmrcení 50 % buněk) byly stanoveny z grafů na obr. 8 až 15. Tyto hodnoty byly získány graficky jako hodnota koncentrace léčiva ( na ose x) odpovídající průsečíku souřadnice vedené od indexu cytotoxycity rovného 50 % na ose y s křivkou zakreslenou na grafu. Pokud bylo průsečíků několik, byla pro hodnotu LD50 použita nejnižší možná koncentrace.
Tabulka 1
| Buněčná | Histon | Chemoterapeutické | LD50 | LD50 | Snížení |
| linie | (úg/ml) | léčivo | léčivo | s Hl | koncent- |
| samotné | (pg/ml) | race lé- | |||
| (ug/ml) | čiva (%) |
| Daudi | 250 | BCNU Adriamydn Bleomycin Sulfáte 5-Fluorouracil Carboplatin Methotrcxate Taxol | 6 0,2 8 0,3 7 >2 0,02 | 0,3 0,06 <0,004 < 0,005 0,4 2,3 0,002 | 95 70 > 99,9 > 98,3 94,3 udl 90 |
| Daudi | 150 | Etoposide | 5 | 0,52 | 89,6 |
| Adriamydn | 0,16 | 0,09 | 43,8 | ||
| Cytosine Arabinofuranoside | 0,2 | <0,2 | ud^ | ||
| 5-Fluorouradl | 0,53 | 0,3 | 43,4 | ||
| Methotrcxate | >20 | >20 | ud^ | ||
| Taxol | 0,033 | 0,013 | 60,6 | ||
| K562 | 250 | BCNU | > 10 | < 0,039 | ud3 |
| Adriamydn | 2 | < 0,015 | > 99,3 | ||
| 5-Fluorouracil | >30 | <0,005 | ud3 | ||
| Carboplatin | >100 | < 0,391 | ud3 | ||
| Methotrcxate | >20 | < 0,078 | ud^ | ||
| Taxol | > 10 | < 0,002 | ud3 | ||
| K562 | 150 | Etoposide | >200 | 30 | udl |
| Adriamydn | 0,7 | <0,03 | > 95,7 | ||
| Cytosine Arabinofuranoside | >50 | <0,2 | ud$ | ||
| 5-Fluorouracil | >2 | < 0,005 | ud3 | ||
| Methotrcxate | >20 · | >20 | ud3 | ||
| /Taxol | 1,05 | <0,002 | >99,8 |
- 14 r r rf eerr r r t t t r f · « r c te· · r · · e r r te «· · ud1 = neměřitelné (nejvyšší použitá koncentrace léčiva nižší než LD50) ud2 = neměřitelné (nejnižší použitá koncentrace léčiva vyšší než LD50) ud3 = neměřitelné (ud1 a ud2 zároveň)
Vynález není omezený na kombinaci směsi nebo komplexu histonů H2A:H2B s cytostatiky. Dá se předpokládat, že porovnatelný účinek se docílí se samotným histonem H2A nebo histonem H2B v kombinaci s cytostatiky, dále se dá předpokládat, že porovnatelné účinky budou mít histony Hl a H3 v kombinaci s cytostatiky. Odborníkovi je nakonec jasné, že namísto histonů se mohou vzít aktivní složky, které jsou složené z nejméně pěti aminokyselinových zbytků a mají cytostatický nebo cytotoxický účinek.
Vynález není nakonec omezen ani na použití cytostatika. Podle poznatků, vyplývajících z vynálezu, dokáže odborník vytvořit kombinace libovolných cytostatik s minimálně jedním histonem nebo aktivním fragmentem histonu, pro přípravu kombinovaného chemoterapeutika podle poznatků vynálezu, které vykazuje přinejmenším zvýšený chemoterapeutický účinek, i přes sníženou dávku použitého cytostatika, takže dokonce při zvýšeném cytostatickém účinku jsou vedlejší účinky cytostatika podstatně zmírněny nebo se mohou nabízet nová kombinovaná chemoterapeutika, která vykazují synergický účinek s cytotoxickým efektem, přičemž i tady se dá snížit dávka cytostatika a odpovídajícím způsobem se mohou zmírnit vedlejší účinky. Synergickým účinkem mohou dosud neúčinná cytostatika nabývat své účinnosti, i když sama o sobě neprokázala terapeutický účinek při léčbě nádorových a autoimmunitních nemocí.
f f r r r r- » t c ř ·· • · r r· · • r e t! · • c c « · ee cc ··· f r e* ···· c r e · · r e · « c e- c r · · c · · ccee β· ·
Protože podávání histonů neprovázejí žádné vedlejší účinky, vzniká podle poznatků vynálezu nakonec při kombinaci s cytostatiky možnost chemoterapie s podstatně vyšším předpokladem úspěšnosti během delší doby aplikace, přičemž je možno udržovat vedlejší účinky na únosné hranici.
Kombinace účinných látek podle vynálezu se může podávat i tak, že první a druhá účinná látka se podávají dohromady nebo odděleně, synergický účinek kombinace účinných látek podle vynálezu se vyskytuje vždy na místě patogenního procesu, nezávisle na tom, zda se jednotlivé účinné látky podaly dohromady nebo odděleně.
I když uvedené pokusy ukazují účinnost kombinace účinných látek podle vynálezu jen proti rakovinovým buňkám, zejména proti buňkám maligních nádorů lymfatických žláz a maligního melanomu, neomezuje se vynález jen na použití terapeutických postupů pro léčení maligních nádorů. Je pravděpodobné, že kombinaci účinných látek podle vynálezu bude možné použít pro léčbu autoimmunitních chorob.
rv
Γ r r f - f t t ( r » f c • r r • f r e tt c r r *
Claims (14)
1. Léčivo skládající se z první a druhé účinné látky, které vykazují synergický účinek v místě patogenního procesu, vyznačující se tím, že jako první účinnou látku obsahuje alespoň jedno cytostatikum a jako druhou účinnou látku, která má cytostatický nebo cytotoxický účinek, obsahuje alespoň jeden histon nebo alespoň jeden aktivní fragment histonu nebo kombinaci alespoň jednoho histonu a alespoň jednoho aktivního fragmentu histonu.
2. Léčivo podle nároku 1, vyznačující se t i m , že jako druhou účinnou látku obsahuje látku zvolenou ze souboru zahrnujícího Hl, H2A, H2B, H2A:H2B a H3.
3. Léčivo podle nároku 1, vyznačující se t i m , že jako aktivní fragment histonu v druhé účinné látce obsahuje evolučně variabilní fragment.
4. Léčivo podle nároku 1, vyznačující se t i m , že jako aktivní fragment histonu v druhé účinné látce obsahuje N- nebo C-terminální fragment.
5. Léčivo podle nároku 1, vyznačující se t i m , že ve druhé účinné látce obsahuje alespoň jeden fragment histonu H2A s dílčí sekvencí 1-41 nebo 1 - 36 nebo 1-12 nebo 1-11 nebo 12 - 36 nebo 12 - 41 nebo 1-28 nebo 11 - 23.
6. Léčivo podle nároku 1, vyznačující se t i m , že ve druhé účinné látce obsahuje alespoň jeden fragment histonu podtypu H2A Z s dílčí sekvencí 1 - 30 nebo 9 -25.
Γ 9 9 9 99 ř r * f f. e
C C * řf C r
7. Léčivo podle nároku 1, vyznačující se t í m , že ve druhé účinné látce obsahuje alespoň jeden fragment histonů H2B s dílčí sekvencí 1-35 nebo 1-34 nebo 1-32 nebo 1-31 nebo 1-29 nebo 1-26 nebo 1-23
8. Léčivo podle nároku 1, vyznačující se t i m , že ve druhé účinné látce obsahuje alespoň jeden fragment histonů podtypu H2B P.A. s dílčí sekvencí 17 - 50.
9. Léčivo podle nároku 1, vyznačující se t í m , že ve druhé účinné látce obsahuje alespoň jeden fragment histonů H3 s dílčí sekvencí 3 - 34 a 17 - 29.
9 r c r c r c f c r c
10. Léčivo podle nároku 1, vyznačující se t x m , že ve druhé účinné látce obsahuje alespoň jeden histon a/nebo fragment histonů, kterýžto histon a/nebo fragment obsahuje alespoň jednu z aminokyselinových sekvencí zvolených ze souboru zahrnujícího KRAA (Lys Arg Ala Ala) a KRVA (Lys Arg Val Ala.
11. Léčivo podle nároku 10, vyznačující se t í m , že ve druhé účinné složce obsahuje C-terminální fragment histonů HI nebo jeho část s opakující se sekvencí aminokyselin KRAA (Lys Arg Ala Ala) a/nebo N-terminální fragment histonů H2B nebo jeho část s opakující se sekvencí aminokyselin KRVA (Lys Arg Val Ala).
12. Léčivo podle nároku 10 nebo 11, vyznačující se tím, že první účinná látka je zvolena ze souboru zahrnujícího vincristine, methotrexate a cisplatin.
- 18 • r f e • f r r tc · c r r r ř»ft e
r e · 9 r r ee · · • ♦
13. Léčivo podle nároku 12, vyznačující se t í a , že jako druhou účinnou látku obsahuje H2A:H2B.
14. Léčivo podle některého z nároků 1 až 13 pro léčbu rakoviny a autoimunitních chorob.
MP-1735--90-6^?v ¢,8 W r e c ·
C · e> » r ··
M · · e · • · · • · • · · · · · · ♦· · · · · • · t • ♦ · ··· 4» • · ·· ♦
Objem (ml)
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE4000154A DE4000154A1 (de) | 1990-01-04 | 1990-01-04 | Chemotherapeutisches mittel, insbesondere zur behandlung von krebserkrankungen |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ684990A3 true CZ684990A3 (cs) | 1998-04-15 |
| CZ283924B6 CZ283924B6 (cs) | 1998-07-15 |
Family
ID=6397630
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS906849A CZ283924B6 (cs) | 1990-01-04 | 1990-12-28 | Léčivo skládající se z první a druhé účinné látky |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5578571A (cs) |
| EP (1) | EP0438756B1 (cs) |
| JP (1) | JPH0813756B2 (cs) |
| AT (1) | ATE104553T1 (cs) |
| CA (1) | CA2033249C (cs) |
| CZ (1) | CZ283924B6 (cs) |
| DE (2) | DE4000154A1 (cs) |
| SK (1) | SK279960B6 (cs) |
| UA (1) | UA27704C2 (cs) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5780432A (en) * | 1990-12-28 | 1998-07-14 | Allegheny University Of The Health Sciences | Therapeutic method for treatment of carcinoma or autoimmune diseases |
| WO1996040170A2 (en) * | 1995-06-07 | 1996-12-19 | Procept, Inc. | Metal-containing compounds and their use for inhibiting the immune response |
| DE19715149A1 (de) * | 1997-04-11 | 1998-10-15 | Symbiotec Gmbh | Krebstherapeutikum und Diagnose zur Charakterisierung von Krebszellen mit individueller Eigenschaft |
| US20030017987A1 (en) | 1997-04-11 | 2003-01-23 | Michael Zeppezauer | Therapeutic, prophylactic, and diagnostic agent for cancer, useful for characterizing cancer cells with individual properties |
| KR100261114B1 (ko) * | 1998-01-24 | 2000-07-01 | 박종헌 | 히스톤을 함유하는 류마티스 관절염 치료제 조성물 |
| US6884423B1 (en) * | 1998-08-13 | 2005-04-26 | Symbiotec Gmbh | Antimicrobial histone H1 compositions, kits, and methods of use thereof |
| CN1296974A (zh) * | 1999-11-23 | 2001-05-30 | 上海博容基因开发有限公司 | 一种新的多肽——人组蛋白h2a.21和编码这种多肽的多核苷酸 |
| US20040219140A1 (en) * | 2001-02-22 | 2004-11-04 | Reiner Class | Compositions and methods for preventing platelet aggregation |
| DE102005022319A1 (de) | 2005-05-10 | 2006-11-23 | Symbiotec Gesellschaft Zur Forschung Und Entwicklung Auf Dem Gebiet Der Biotechnologie Mbh | Verwendung von Histonen zu therapeutischen Zwecken |
| US8778875B2 (en) * | 2005-08-05 | 2014-07-15 | Symbiotec Gesellschaft zur Forshung und Entwickling auf dem Gebiet der Biotechnologie, mbH | Use of an active biological substance in abnormal cellular and viral membrane physiologies |
| US20080138326A1 (en) * | 2006-12-06 | 2008-06-12 | Kaneka Corporation | Method for cancer treatment, carcinogenesis suppression or mitigation of adverse reactions of anticancer agents |
| SG194802A1 (en) | 2011-05-16 | 2013-12-30 | Genzyme Corp | Induction of immune tolerance by using methotrexate |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4902505A (en) * | 1986-07-30 | 1990-02-20 | Alkermes | Chimeric peptides for neuropeptide delivery through the blood-brain barrier |
| JPS63139134A (ja) * | 1986-12-02 | 1988-06-10 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | Ｔ細胞活性化剤 |
| DE3737274A1 (de) * | 1987-11-03 | 1989-06-01 | Rusch Volker | Verwendung von reinem h2a- und/oder h2b-histon als wirksubstanz zur herstellung von arzneimitteln |
| EP0316030B1 (en) * | 1987-11-11 | 1991-12-18 | Akzo N.V. | Vincristine-containing product |
-
1990
- 1990-01-04 DE DE4000154A patent/DE4000154A1/de not_active Withdrawn
- 1990-12-21 AT AT9090125093T patent/ATE104553T1/de not_active IP Right Cessation
- 1990-12-21 EP EP90125093A patent/EP0438756B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1990-12-21 DE DE59005456T patent/DE59005456D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1990-12-27 CA CA002033249A patent/CA2033249C/en not_active Expired - Fee Related
- 1990-12-28 SK SK6849-90A patent/SK279960B6/sk unknown
- 1990-12-28 CZ CS906849A patent/CZ283924B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1990-12-28 JP JP2417523A patent/JPH0813756B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
1991
- 1991-01-03 UA UA4984039A patent/UA27704C2/uk unknown
-
1994
- 1994-09-22 US US08/310,378 patent/US5578571A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0438756A1 (de) | 1991-07-31 |
| SK684990A3 (en) | 1999-06-11 |
| UA27704C2 (uk) | 2000-10-16 |
| US5578571A (en) | 1996-11-26 |
| SK279960B6 (sk) | 1999-06-11 |
| JPH0813756B2 (ja) | 1996-02-14 |
| ATE104553T1 (de) | 1994-05-15 |
| DE4000154A1 (de) | 1991-07-11 |
| CA2033249A1 (en) | 1991-07-05 |
| JPH04305535A (ja) | 1992-10-28 |
| CZ283924B6 (cs) | 1998-07-15 |
| EP0438756B1 (de) | 1994-04-20 |
| CA2033249C (en) | 1997-01-21 |
| DE59005456D1 (de) | 1994-05-26 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Eriksson et al. | Summing up 15 years of somatostatin analog therapy in neuroendocrine tumors: future outlook | |
| CZ684990A3 (cs) | Léčivo skládající se z první a druhé účinné látky | |
| Agarwala et al. | Interferons in melanoma | |
| EP3042669B1 (en) | Antitumor agent and antitumor effect enhancer | |
| US7851443B2 (en) | Combination comprising combretastatin and anticancer agents | |
| WO2021252931A2 (en) | C-type natriuretic peptides and methods thereof in treating cancer | |
| Plöckinger et al. | Treatment of gastroenteropancreatic neuroendocrine tumors | |
| EP2240195A1 (en) | Treatment of melanoma with alpha thymosin peptides in combination with antibodies against cytotoxic t lymphocyte-associated antigen 4 (ctla4) | |
| Fujiwara et al. | Application of an interleukin 2 slow delivery system to the immunotherapy of established murine colon 26 adenocarcinoma liver metastases | |
| EP0295559B1 (en) | Pharmaceutical composition for the treatment of tumours | |
| JP6782932B2 (ja) | Ｎｐｒ−ａアゴニストの新規用途 | |
| Von Rohr et al. | Immunomodulation during prolonged treatment with combined interleukin-2 and interferon-alpha in patients with advanced malignancy | |
| US5780432A (en) | Therapeutic method for treatment of carcinoma or autoimmune diseases | |
| US5215744A (en) | Methods for the treatment of tumors | |
| CN114126660A (zh) | 药物复合物及其制备方法和用途 | |
| US20150174207A1 (en) | Methods for treating cancer with ghrh agonists | |
| JPS63501724A (ja) | 腫瘍壊死因子及び抗生物質及び腫瘍処理方法の組合せ | |
| Rüegg et al. | Tumor necrosis factor: clinical use and mechanisms of action | |
| Mitchell et al. | Experimental rationale for continuous infusion chemotherapy | |
| JP6987271B2 (ja) | 新規キノカルコン化合物、及びがん又は炎症を治療するためのその用途 | |
| Rodolfo et al. | Influence of the donors' clinical status on in vitro and in vivo tumor-cytotoxic activation of interleukin-2-exposed lymphocytes and their circulation in different organs | |
| Sheehan‐Dare et al. | Hepatic tumors with hyperglucagonemia response to treatment with human lymphoblastoid interferon | |
| EP1165117B1 (en) | Use of interferon-beta in the manufacture of a medicament for the treatment of ewing's sarcoma and eoe | |
| WAKABAYASHI et al. | Antitumor Activity of Recombinant Human Tumor Necrosis Factor-α (rH-TNFα) and Liposome-entrapped rH-TNFα | |
| CN112168971B (zh) | 抗vegf抗体和pdgf/pdgfr抑制剂在制备治疗表达fgf2肿瘤的药物的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| IF00 | In force as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20071228 |