DD140877A1 - Verfahren zur herstellung von sarcosylheptapeptiden - Google Patents
Verfahren zur herstellung von sarcosylheptapeptiden Download PDFInfo
- Publication number
- DD140877A1 DD140877A1 DD20986378A DD20986378A DD140877A1 DD 140877 A1 DD140877 A1 DD 140877A1 DD 20986378 A DD20986378 A DD 20986378A DD 20986378 A DD20986378 A DD 20986378A DD 140877 A1 DD140877 A1 DD 140877A1
- Authority
- DD
- German Democratic Republic
- Prior art keywords
- val
- arg
- sar
- tyr
- pro
- Prior art date
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 5
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 27
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 5
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 3
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims abstract description 3
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 claims abstract description 3
- -1 Ile Chemical class 0.000 claims description 6
- CBWFTZNMONHKNZ-UHFFFAOYSA-N 2-[methyl(phenylmethoxycarbonyl)amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN(C)C(=O)OCC1=CC=CC=C1 CBWFTZNMONHKNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 4
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 abstract description 7
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 6
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 abstract description 6
- 238000009833 condensation Methods 0.000 abstract description 5
- 230000005494 condensation Effects 0.000 abstract description 5
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 abstract description 3
- ZUSSTQCWRDLYJA-UHFFFAOYSA-N n-hydroxy-5-norbornene-2,3-dicarboximide Chemical compound C1=CC2CC1C1C2C(=O)N(O)C1=O ZUSSTQCWRDLYJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 abstract description 2
- 238000011403 purification operation Methods 0.000 abstract description 2
- CZGUSIXMZVURDU-JZXHSEFVSA-N Ile(5)-angiotensin II Chemical class C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C([O-])=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=[NH2+])NC(=O)[C@@H]([NH3+])CC([O-])=O)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 CZGUSIXMZVURDU-JZXHSEFVSA-N 0.000 abstract 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 6
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 6
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 6
- CUKWUWBLQQDQAC-VEQWQPCFSA-N (3s)-3-amino-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s,3s)-1-[[(2s)-1-[(2s)-2-[[(1s)-1-carboxyethyl]carbamoyl]pyrrolidin-1-yl]-3-(1h-imidazol-5-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-ox Chemical class C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 CUKWUWBLQQDQAC-VEQWQPCFSA-N 0.000 description 5
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 5
- 102000005862 Angiotensin II Human genes 0.000 description 4
- 101800000733 Angiotensin-2 Proteins 0.000 description 4
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229950006323 angiotensin ii Drugs 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 3
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 1,3-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1NC(=O)NC1CCCCC1 ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- 238000001226 reprecipitation Methods 0.000 description 2
- FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N sarcosine Chemical compound C[NH2+]CC([O-])=O FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010083387 Saralasin Proteins 0.000 description 1
- 108010077895 Sarcosine Proteins 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- VJHCJDRQFCCTHL-UHFFFAOYSA-N acetic acid 2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O VJHCJDRQFCCTHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- SWLVFNYSXGMGBS-UHFFFAOYSA-N ammonium bromide Chemical compound [NH4+].[Br-] SWLVFNYSXGMGBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 238000009903 catalytic hydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- AQEFLFZSWDEAIP-UHFFFAOYSA-N di-tert-butyl ether Chemical compound CC(C)(C)OC(C)(C)C AQEFLFZSWDEAIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 1
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001631 hypertensive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000006502 nitrobenzyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- FELJDCNGZFDUNR-UHFFFAOYSA-N prolyl-alanine Chemical compound OC(=O)C(C)NC(=O)C1CCCN1 FELJDCNGZFDUNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 1
- PFGWGEPQIUAZME-NXSMLHPHSA-N saralasin Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)CNC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 PFGWGEPQIUAZME-NXSMLHPHSA-N 0.000 description 1
- 229940043230 sarcosine Drugs 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 238000010626 work up procedure Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Sarcosylheptapeptiden der Formel I, welche biologisch aktiv sind und Vorstufen zur Herstellung pharmazeutisch nutzbarer Analoga des Angiotensin II darstellen. Die Erfindung hat das Ziel, Peptide der angegebenen Formel mit hohen Ausbeuten unter Vermeidung aufwendiger Reinigungsoperationen zu gewinnen. Erfindungsgemäß wird das geschützte Oktapeptid aus zwei Tetrapeptiden Z-Sar-Arg(NO ind 2)-Val-Tyr-OH (1-4) und X-His-Pro-Y-ONb (5-8) hergestellt. Das hierfür erforderliche Tetrapeptid Z-Sar-Arg(NO ind 2)-Val-Tyr-OH erhält man durch Kondensation von Z-Sar-OH mit DCCI unter Zusatz von HONB bzw. des entstehenden aktivierten Esters Z-Sar-ONb, der nach Isolierung oder in situ mit dem H-Arg(NO ind 2)-Val-Tyr-OH-Hydrobromid umgesetzt wird, unter Zusatz von mindestens 2 Mol eines tertiären Amins, vorzugsweise 3 Mol Triäthylamin. Das Tetrapeptid lässt sich in guter Reinheit durch Umkristallisieren aus Isopropanol erhalten. Das geschützte Tetrapeptid X-His-Pro-Y-Onb wird in bekannter Weise hergestellt. Die so erhaltenen Tetrapeptide werden nach Zusatz von N-Äthylmorpholin zum geschützten Sarcosylheptapeptid in der Weise umgesetzt, dass das Sarcosyltripeptid und die Kondensationsmittel in 10- bis 20%igem Überschuss eingesetzt werden und das entstehende Oktapeptid nacheinander aus Isopropanol und Methanol umkristallisiert wird. Z-Sar-Arg(NO ind 2)-Val-Tyr-X-His-Pro-Y-Onb, I X = Val oder Ile, Y = Ile, Ala, Leu, Thr(OMe) oder Thr
Description
Verfahren zur Herstellung; von Sarcosylheptapeptiden
der Erfindung
Die Erfindung betrifft ein "Verfahren zur Herstellung von Sarcosylheptapeptiden der Formel I
Z-Sar-Arg(E02)-Val-Tyr-X-His-Pro-Y-ONb,
in der X = VaI oder lie
und Y = eine neutrale hydrophobe Aminosäure wie lie, AIa,
Leu, Thr(OMe) oder Thr bedeuten.
Diese Verbindungen stellen Vorstufen zur Herstellung pharmazeutisch nutzbarer Analoge des Angiotensin II dar,
Anwendungsgebiet für die Erfindung ist die pharmazeutische Industrie.
^jjgj^jj.yi.gtik der bekannten technischen Lösungen
Die Herstellung und die biologische Wirksamkeit von Hepta- und Oktapeptiden mit dem Angiotensin II verwandter Struktur zur Gewinnung von Antagonisten ist bereits mehrfach beschrieben worden. So werden z.B. nach der DOS212 73 93 derartige Peptide durch stufenweise Kondensation am festen Träger hergestellt. Dieses Verfahren besitzt einige Nachteile. Bei
a) hohem Risiko für größere Ansätze ist
b) ein sehr, großer Reinigungsaufwand erforderlich, um die für klinische Untersuchungen stehenden Anforderungen an Standardisierung zu erfüllen.
Bei Verfahren mit Kondensation von Fragmenten, wie in Hoppe-Seylers Z. physiol. Chenu 357, Seite 825-828 und 3£äs Seite 1083-1096 und in der DOS 23 23 322 und DOS 24 57 4^3 beschrieben sind, verlaufen wichtige Synthesestufen mit geringer Aus-
t beute, z.B. bei der Darstellung von Z-Arg(Z)p-Val~Tyr(Bu )-
Val-His-Pro-Ala-OBu5.
Das schrittweise Anknüpfen der H-terminalen Aminosäuren ist bei diesen Verfahren hinsichtlich Reinheit der erhaltenen Produkte und Ausbeute nach der Reinigung nicht optimal.
Ziel der Erfindung ist es, geschützte Oktapeptide der allgemeinen Formel I in hoher Ausbeute unter Vermeidung aufwendiger Reinigungsoperationen in für die Weiterverarbeitung genügend reiner Form darzustellen. Es wird insbesondere angestrebt, daß die Entfernung der Schutsgruppen durch katalytisch^ Hydrierung als die in der Peptidsynthese vorteilhafteste Abspaltungsreaktion erfolgen kann.
Darlegung des Wesens der Erfindung
Erfindungsgemäß werden Sarcosyiheptapeptide der allgemeinen 3?ormel I .
Z-S ar-Arg( ITO2)-VaI-Tyr-X-His-Pro-Y-OlTb,
in der X = VaI oder lie - '""" und Y = eine neutrale hydrophobe Aminosäure wie lie,AIa,
Leu, Thr(OMe) oder Thr bedeuten,
durch Kondensation von Z-Sarcosin an H~Arg(KOp)-Val-Tyr-OH und anschließender Kondensation mit X-His-Pro-»Y-01Tb, wobei X und Y die o.g. Bedeutung haben, jeweils unter Zusatz von Dicyclohexylcarbodiimid (DGCI) und I'I-Hydroxynorbornen-2,3-dicarbonsäureimid (HONB) und in Gegenwart von mindestens 2 Mol tertiärem Amin hergestellt.
- 3 - dQ^ ö©a
Die Herstellung des Z-Sarcosyltripeptides erfolgt', indem man Z-Sarcosin in THF/Dioxan-Gemischen mit HOHB/DCCI zum aktivierten Ester Z-Sar-OlTb umsetzt. Dieser aktivierte Ester,, der entweder nach Abtrennen dos.Dicyclohexyl (DCH)-Harnstoffs durch Einrotieren des Lösungsmittelgemisches isoliert oder ohne weitere Isolierung eingesetzt wird, reagiert mit dem Tripeptid H-Arg(l'TOp)-Val~Tyr-OH-Hydrobromid in Gegenwart von vorzugsweise 3 Mol Triethylamin zum Tetrapeptide !Jach Umkristallisation aus Isopropanol wird das Z-Sarcosyltripeptid Z-Sar-Arg(IJOp)-Val-Tyr-OH in 10-20%igem Überschuß unter Zusatz von vorzugsweise 3 Mol IT-Ä'thylmorpholin mit dein Tetrapsptid X-HiS-PrO-Y-OiIb, welches in bekannter Weise hergestellt wird," umgesetzt. !lach Abtrennen des entstehenden Dicyclohexyl-Harnstoffs und des überwiegenden Anteils des Amin-Hydrobromids werden überschüssiges Z-Sarcosyltripeptid und Restharnstoff nach üblicher Aufarbeitung durch Umkristallisation des Oktapeptids aus Isopropanol und anschließendes nochmaliges Umfallen aus Methanol quantitativ entfernt.
Infolge der Verwendung des Nitrobenzyl-Schutzes besteht ein Vorteil des Verfahrens in der Möglichkeit der gleichzeitigen Abspaltung aller Schutzgruppen, die nahezu quantitativ in Gegenwart von 5% Pd/BaSCK in Eisessig/Methanol/Wasser-Gemischen gelingt c
Das erhaltene Produkt besitzt bereits einen hohen Reinheitsgrad und kann durch Chromatographie an Carboxymethylcellulose weiter aufgereinigt werden.
Aufgrund ihrer hemmenden Wirkung auf eine durch Angiotensin II hervorgerufene Erhöhung des Blutdrucks sind diese Peptide wirksame Mittel, um einer durch Angiotensin II verursachten Hypertension entgegen zu wirken. Das Verfahren ist auch geeignet zur Herstellung von Peptiden, die wie Angiotensin II hypertensiν wirken, was von der Wahl der C-terminalen Aminosäure abhängt»
Im folgenden wird das erfindungsgemäße Verfahren an Beispielen erläutert.
λ \ \\\\'-Aη 7 ύ
- 4 - ZO? ö63 . .
Beispiel 1 ί Z-Sarcosyl-nitroar^inyl^yalyl-tyrosin
#»46 g (20 mMol) Z-Sarcosin v/erden zusammen mit 20 inLIol Η0ΪΙΒ (3$58 g) in einem Gemisch aus 30 ml Dioxan und 20ml Tetrahydrofuran gelöst. Danach wird abgekühlt und bei 0 bis + 20G DGCI dazugegeben. Die Temperatur wird 30 min bei 0 bis + 20G gehalten. Es wird anschließend noch eine Stunde bei Raumtemperatur weitergerührt. Der ausfallende Dicyclohexyl-Harnstoff wird abgesaugt, das Piltrat eingeengt. Der rohe Z-Sarcosyl-OHB-ester kann nun entweder nach Umfallen aus Essigester/Hexan isoliert werden (Pp· 82-840C) oder sofort weiter in situ umgesetzt werden.
Der Rückstand v/ird in 15 ml DMF aufgenommen und mit einer Lösung von 10,8 g (16 mMol) H-Arg(ITO2)-VaI-Tyr-OH · 1,2 HBr (HBr-Gehalt wird vorher durch Titration bestimmt) und 5,36 ml Triethylamin in 50 ml DIv1IB1 (ausfallendes HEt3 · HBr bleibt unberüchsichtigt) vereinigt. Es wird 4 Tage bei Raumtemperatur gerührt« Die Reaktionslösung färbt sich während dieser Zeit gelblich. Das Lösungsmittel wird bei 4O0C im Vakuum entfernt und der ölige Rüchstand zuerst mit Essigester (20 ml) und dann mit 40 ml 2 η HCl verrieben. Anschließend rührt man fen inzwischen pulverig gewordenen Rückstand noch mit 5% HaHCO-, und schließlich mit Wasser aus,.Is wird getrocknet und 2 mal aus Isopropanol umkristallisiert.
Ausbeute: 10,6 g (83%) Pp. 139-14O0C
[ei] 20 a .. 2)2 (c s 1$ DMP)
Rf-Wert: 0,82 n-Butauol/Eisessig/Wasser 4:4:1
3? Si3
Beispiel 2 : Z-Sarcosyl-nitroarginyl-valyl^tyrosyl-valyl·» histidyl-prolyl-alanin-nitrobenzylester
5,47 g (7,6 mMol) R-Val-His-Pro-Ala-OHb » 2 HBr und 5,3 g (7,6 mMol.+ 10%) Z-Sar-Arg(H02)-Val-aJyr-0n v/erden zusammen mit 1,5 g (7,6 mMol + 10%) HOKB in 40 ml absol. DMP gelöst. Es wird auf -100C abgekühlt, 2,8 ml KAM hinzugefügt, 1,8 g DCCI gelöst in 10 ml DIIF addiert, 2 Stunden bei dieser Temperatur gehalten und anschließend noch 3 Tage bei Raumtemperatur gerührt.
Das Lösungsmittel wird im Vakuum entfernt und der Rückstand mit trockenem Äther verrieben. Danach wird nacheinander mit 5% NaHCOo, 5% KHSO4 und Wasser verrieben, lach dem Trocknen wird aus Isopropanol und anschließend noch einmal aus absol. Methanol umkristallisiert.
Ausbeute: 6,6 g (71%) nach Umkristallisation F · 215-2170C
f = - 36,6 (c = 1, DMP) Rf-Wert: 0,35 n-Butanol/Eisessig/Wasser 4:1:1 R,,-Wert: 0,81 see. Butanol/ 3% Ammoniak 100 : 44
Q <
~ 6
prolyl-«alanin
3 g des geschützten Oktapeptides, nach Beispiel 2 hergestellt, werden mit 2 g Pd/BaSO^ (5%) in 45 ml eines Lösungsmitteigemisches aus Methanol/Eisessig/Wasser im Verhältnis 3:3:1 hydriert, lach 48 h wird ein weiteres Gramm Katalysator zugefügt. Nach maximal 96 h ist die Hydrierung beendet. Der Katalysator wird abzentrifugiert und mehrfach gewaschen. Die vereinigten Zentrifugate und Waschlösungen werden im Vakuum vom Lösungsmittel befreit und das Produkt nach Auflösen in wenig Methanol mit Äther ausgefällt.
Ausbeute: 2,4 g F .^"2OO unter Zersetzung·
* - 79,8 (6 = 0,5, 1 η Bisessig)
Beispiel 4 J .?ri?i^?i?ilLyA^
histidyl-prolvl-isoleucin-nitrobenzylester
2g (2,51 mMol) H-Val-His-Pro-Ile-OITb 2HBr, hergestellt aus Z-VaI-HiS-IH-HH2 und H-Pro-Ile-OHb durch Azid-Synthese und Entfernen der Schutsgruppe, und 1,97 g (2,8 mMol) Z-Sar-ArgClTOg)· Val-Tyr-OH v/erden zusammen mit 495 mg (2,8 mMol) HOlIB in 25 ml DLIP gelöst. Es wird auf -100C abgekühlt, 0,78 ml (6,2 mMol) T$M hinzugefügt, 576 mg (-2,8 mMol) DCCI gelöst in 3 ml DlEP addiert, 2 Stunden bei dieser Temperatur gehalten und anschließend noch 3 Tage bei Raumtemperatur gerührt
Das Lösungsmittel wird im Vakuum entfernt und der Rückstand mit trockenem Äther verrieben. Danach wird nacheinander mit 5% HaHCO3, 5%-KHSO. und V/asser verrieben. Nach dem Trocknen wird aus Isopropanol und anschließend aus Methanol umkristallisiert. '
Ausbeute: 2,8 g (77%) P 202-2050C
IjQ |2 = - 24,4 (c = 1, DIvIF)
Rf-Wert: 0,685 n-Butanol/Eisessig/Wasser 4:1:1
Rf-Wert: 0,94 n-Butanol/Eisessig/Wasser/Pyridin 9;2:6:7
Rf-Wert: 0,57 see. Butanol/ 3% NH3 100:44
Z-S ar 82%
ff ο r m e 1 s c h- e m a
H-Arg(NO2)-Val-Tyr-OH
1. DCCI/HOHB
2. Umkristallisation aus Isopropanol
Z-S ar-Arg (I1TO2) - Yal-Tyr-
OH
H-Val-His-Pro-Ala-OKb
1. DCCI/HOEB
2. Umkristallisation aus Isopropanol und Methanol
Z~Sar~Arg(IT02)~7al-Tyr-Yal-His-Pro~Ala-0Nb
2β CM-Zellulose
.Sar-Arg-Val-Tyr-Val-His-Pro-Ala
f4 .&
Verwendete Abkürzungen
| Z- | = Benzylcarbonyl |
| -OKb | = p-Nitrobenzylester |
| HOEB | = Ii-Hydroxy-norbornen-2,3-dicarbonsäureimid |
| DCCI | = Dicyclohexylcarbodiimid |
| Sar | = Sarcosin (IT-Metnylglyein) |
| VaI' | = Valin |
| Tyr | = Tyrosin |
| Arg(NO2) | = g-Nitroarginin |
| Arg | = Arginin |
| His | = Histidin |
| Ala | = Alanin |
| lie | = Isoleucin |
| Leu . | = Leucin |
| Pro | = Prolin |
| Thr | = Threonin |
| NAM | = U-Äthylraorpholin |
| DMP | = N-Dimethylformamid |
| OBu* | = 't-Butyl ester |
| Bu* | = t-Butyläther |
Claims (3)
1· Verfahren zur Herstellung von Peptiden der allgemeinen Formel I
in denen X = VaI oder He
und Y = eine neutrale hydrophobe Aminosäure wie
Ile,Ala,Leu,Thr(OMe) oder Thr darstellt,
dadurch'gekennzeichnet, daß Z-Sarcosin an Η-Arg(HOp)-Val»ü?yr-OH, und das entstandene Z-Sarcosyltripeptid an X-His-Pro-Y-OIJb kondensiert wird, jeweils unter Zusatz τ;:\γνοη Dicyclohexylcarbodiimid (DCCI) und IT-Hy droxy-norbornen-2,3-dicarbonsäureimid (HOBB) und in Gegenwart von mindestens 2 Mol eines tertiären Amins und anschließend das erhalt eine Oktapeptid I nacheinander aus Isopropanol und Methanol umkristallisiert wird«
2. Verfahren nach Punkt 1 dadurch gekennzeichnet, daß Z-Sar in THF/Dioxan in den aktivierten Esi?er überführt wird, der nach Isolierung oder in situ mit Arg(NOp)-Val-Tyr-Hydrobromid unter Zusatz von vorzugsweise 3 Mol Triäthylamin umgesetzt wird.
3· Verfahren nach Punkt 1 dadurch gekennzeichnet, daß das Z-Sarcosyltripeptid Z-Sar-Arg(UOg)-Val-Tyr-OH und die Kondensationsmittel in 10-20% Überschuß eingesetzt werden, unter Zusatz von vorzugsweise 3 Mol U-iithylmorpholin.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DD20986378A DD140877B1 (de) | 1978-12-18 | 1978-12-18 | Verfahren zur herstellung von sarcosylheptapeptiden |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DD20986378A DD140877B1 (de) | 1978-12-18 | 1978-12-18 | Verfahren zur herstellung von sarcosylheptapeptiden |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DD140877A1 true DD140877A1 (de) | 1980-04-02 |
| DD140877B1 DD140877B1 (de) | 1984-11-07 |
Family
ID=5515916
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DD20986378A DD140877B1 (de) | 1978-12-18 | 1978-12-18 | Verfahren zur herstellung von sarcosylheptapeptiden |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| DD (1) | DD140877B1 (de) |
-
1978
- 1978-12-18 DD DD20986378A patent/DD140877B1/de not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DD140877B1 (de) | 1984-11-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE2919218A1 (de) | Nonapeptide | |
| EP0017760B1 (de) | Somatostatin-analoge Peptide, ihre Herstellung und Verwendung, sie enthaltende pharmazeutische Präparate und deren Herstellung | |
| EP0001295A2 (de) | Somatostatin-analoge Cyclopeptide, Verfahren zu ihrer Herstellung, pharmazeutische Präparate enthaltend diese Verbindungen, sowie ihre therapeutische Anwendung | |
| EP0025897B1 (de) | Neue Peptide und Verfahren zu ihrer Herstellung | |
| EP0179332B1 (de) | Neue ZNS-aktive Peptide mit Wirkung auf das cholinerge System | |
| DE2528935C2 (de) | Verfahren zur Herstellung Arginylreste enthaltender Peptide und hierbei eingesetzte Zwischenprodukte | |
| CH636598A5 (de) | Verfahren zur herstellung neuer psychopharmakologisch aktiver peptide. | |
| DE1543872C3 (de) | D Ser hoch 1 Nie hoch 4 Pentacosapeptid sowie Verfahren zu dessen Herstellung | |
| DE2127393C3 (de) | Hepta- und Octapeptide | |
| DE2831534C2 (de) | Octapeptide, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Octapeptide enthaltende Angiotensin-II-antagonistisch wirkende Arzneimittel | |
| EP0003028B1 (de) | Beta h-Endorphin-Analoge, diese enthaltende Präparate und deren Herstellung | |
| DE2003421A1 (de) | Verfahren zur Herstellung eines bisher unbekannten Polypeptids | |
| DE2831271A1 (de) | Neue, in der l-stellung eine alpha -hydroxysaeure enthaltende, angiotensin-ii-antagonistisch wirkende peptide und verfahren zur herstellung dieser verbindungen | |
| DD140877A1 (de) | Verfahren zur herstellung von sarcosylheptapeptiden | |
| DE2124451C3 (de) | Peptide und ihre Verwendung bei der Bekämpfung von Hochdruck | |
| DE1205546B (de) | Verfahren zur Herstellung neuer Dekapeptide | |
| US4358440A (en) | Polypeptide and its production and use | |
| DE1965101A1 (de) | Pentadekapeptide mit adrenocorticotroper Wirkung und Verfahren zu ihrer Herstellung | |
| DE69024839T2 (de) | Retro-Inverso-Peptide, Analoga von Thymopenthin, die eine oder mehrere Bindungen tragen, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung zur Zubereitung eines Medikamentes | |
| DE3537405A1 (de) | Biologisch aktive penta- und heptapeptide, verfahren zu deren herstellung und arzneimittel, welche diese enthalten | |
| DE2311786A1 (de) | Verfahren zur herstellung von peptiden | |
| US3234201A (en) | Octadecapeptides and derivatives thereof | |
| DE1643496B2 (de) | Verfahren zur herstellung von menschlichem corticotropin bzw. analoger verbindungen | |
| EP0248209A2 (de) | Cyclische Peptide mit cytoprotektiver Wirkung | |
| DE2244689C3 (de) | Dekapeptid mit der Aminosäuresequenz des Gonadotropin freigebenden Hormons GnRH |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| ENJ | Ceased due to non-payment of renewal fee |