DD207379A5 - Verfahren zur herstellung 1,1-alkandioldicarboxylatverknuepfter antibakterieller mittel - Google Patents

Abstract

Brauchbare antibakterielle Mittel, in denen ein Penicillin und/oder ein beta-Lactamaseinhibitor ueber 1,1-Alkandioldicarboxylate verknuepft sind, haben die FormelI, worin A derRest bestimmter Dicarbonsaueren, R hoch 3 H oder (C unter1 - C unter3)-ALKYL, n O oder 1 ist, so dass, wenn n 0 ist, R P oder B ist und R hoch 1 der Rest bestimmter Ester, H oder Salz hiervon ist, und wenn n 1 ist, einer der ResteR und der andere B ist, und P (siehe Rueckseite) ist worin R hoch 2 H oder bestimmte Acylgruppen bedeutet, und B ist der Rest einer beta-Lactamse hemmenden Carbonsauere; ein Verfahren zu ihrer Anwendung, pharmazeutische Mittel hiervon und zu ihrer Herstellung brauchbare Zwischenstufen.

Description

- /- · .-. .;..

.2463 2 5. 6

Verfahren zur Herstellung 1,1-Alkandioldicarboxylatverknüpfter antibakterieller Mittel

Anwendungsgebiet der Erfindung

Die Erfindung bezieht sich auf neue chemische Verbindungen, die als antibakterielle Mittel von Wert sind, insbesondere auf Monoester und Diester bestimmter 1,1-Alkandioldicarboxylate, in denen eine Penicillincarboxylgruppe und/oderdie Carboxylgruppe bestimmter ß-Lactamase-Inhibitoren verestert sind.

Charakteristik der bekannten technischen Lösungen

Penicillansäure-1,1-dioxid (Sulbactam) ist aus der US-PS 4 234 579 als wirksamer ß-Lactamase-Inhibitor und antibakterielles Mittel bekannt. V:

In der US-PS 4 244 951 sind Bisester der Formel (IX) offenbart>_: in denen Sulbactam an bekannte antibakterielle Penicilline über Methahdiol gekoppelt ist.

" '. - f ' ". ' ' ' ''-

— (ix)

COO'

In der vorstehenden Formel bedeutet R₁ bestimmte Acylgruppen bekannter antibakterieller Penicilline. Beispielsweise kann R₁ 2-Amino-2-phenylacetyl.oder 2-Amino-2-(p-hydroxyphenyl)-acetyl bedeuten. .

In der US-PS 4 342 772 (ausgegeben am 3.8.1982) sind analoge Verbindungen offenbart, in denen Penicilline und ß-Läctamase-Inhibitoren, wie Penicillansäure-1,1-dioxid, Clavulansäure und 6-ß-Halogenpenicillansäuren über 1,1-Alkandiolgruppen verknüpft sind.

In der anhängigen Anmeldung US-SN 300 421 (vom 9.9.1981 der gleichen Anmelderin) sind Verbindungen der Formel (IX) offenbart, worin R₁

ist und R₀ bestimmte Alkyl- oder Alkoxygruppen bedeutet.

Ampicillin, 6-^ D-(2-Amino-2-phenylacetamido)_7-penicillansäure, ist in der US-PS 2 985 648 offenbart. Amoxicillin, 6-/~D-(2-Amino-2-/ p-hydroxyphenyl_7-actamido)_7-penicillansäure ist aus der US-PS 3 192 198 und der US-Reissue 28 744 bekannt. p-Acyl-Derivate von Amoxillin sind in der US-PS 2 985 648, 3 520 876

-3- ZAbJZb t>

und 4 053 360 offenbart.

2-ß-<-Acetoxymethyl-2- oC-methyl-penam-S- et -carbonsäure-1 ,1-dioxid ist als brauchbarer ß-Lactamase-Inhibitor in der US-PS 4 256 offenbart.

2-ß-Chlormethyl-2- oC-methyl-penam-S- t<-carbonsäure-1,1-dioxid ist als ß-Lactamase-Inhibitor in der Britischen Anmeldung 2 070 592 offenbart.

Bisester von 1,1-Alkandiolen mit 6-ß-Hydroxymethylpenicillansäüre-1,1-dioxid sind in der US-PS 4 342 768 offenbart. Die ent sprechenden Derivate von 6-od-Hydroxymethylpenicillansäure-1,1-dioxid sind in der anhängigen Anmeldung US-SN 338 794 (vom 11.1.1982 der gleichen Anmelderin) offenbart. 6-Aminoalkylpenicillansäure-1,1-dioxid-ß-lactamase-Inhibitoren sind in der anhängigen Anmeldung US-SN 383 324 (vom 14.6.1982 der gleichen Anmelderin) offenbart.

Ziel und Darlegung des Wesens der Erfindung

Die vorliegende Erfindung liefert Verbindungen der Formel (I), die antibakterielle Mittel sind, und bestimmte Zwischenstufen dafür. Die antibakteriellen Verbindungen der Formel (I) werden vom Magen-Darm-Trakt von Säugetieren wirksam absorbiert und dann rasch in die Komponente Penicillin, PCOOH, und/oder ß-Lactamase-Inhibitor, BCOOH, oder Salze der jeweiligen Komponenten umgewandelt. Die erfindungsgemäßen Verbindungen entsprechen der Formel

RCQCHOC=O

-(U

f /:

R^3-(COCH) OC=O η η

- 4 _ <Li4 OO £3 ü

öder sind ein pharmazeutisch annehmbares kationisches oder Säureadditionssalz hiervon, worin A (C.-C. „) -Alkylen, (C^ ~"^G-i o) Alkyliden, (C₃-C₇)-Cycloalkylen, Phenylen, Naphthalin,

oder das durch Phenyl oder Carboxy substituierte Alkylen oder Alkyliden ist, ,

R³ H oder(C₁-C₃)-Alkyl, η O oder 1,

R und R verschieden und RP oder B ist,

wenn η O ist, R¹H, (C₁-C.)-Alkyl, Benzyl, CH(R³)C1, CH(R³)J oder Tetrabutylammonium ist, und wenn η 1 ist, R P oder B ist., .. · .- ..'.- . ' -. ', ... ,

ist.

worin R² H, <d /V"^c0 ' CgH₅OCH₂CO ,

^R~A\ 7/-CHC0 oder U A-CHCO ist, V // «ι ν '/ ·

Q ^v—^/- COOH

Q H, NH₉,-N-, Benzyloxycarbonylamino, 4-Nitrobenzyloxycarbonyl-

^ ^ό . . . 4

amino oder 1-Methyl-2-methoxycarbonylviny!amino, R H, OH,

24 6.3-2 5, 6

(C₂-C₇)-Alkanoyloxy, (C₂-C₇)-Alkoxycarbonyloxy oder R¹O₆H

ist und R⁵ H, (C₁-C₄)-Alkyl, (C₁-C₄)-Alkoxy,. F, Cl, Br oder CN

ist und «

00

►^CH2^Y "'CHv

CHCH-OH ²

ist,

worin, wenn YH ist, X¹ H, CH₂OH oder CH(R⁸)-NH₂ ist, worin R⁸ H oder CH₃ ist,

wenn Y Cl oder CH^COO ist, X¹ H ist,

3 ·- · . ^J ' ·. . '..- ' - " ^;

und X Cl, Br oder J ist.

Die pharmazeutisch aktiven Verbindungen und Salze der Formel (I) sind solche, worin

a) wenn η 0 ist, R (C₁-C.)-Alkyl, H oder ein Alkalimetallsalz hiervon ist; bevorzugte solche Salze sind die Natrium- und Kaliumsalze; und ,

b) wenn η 1 ist, einer der Reste R und R B und der andere P

2 4 1

ist, worin R und R wie oben definiert sind und Q H oder

NH₂ ist. :

Besonders bevorzugte solche antibakteriellen Mittel sind solche, worin, wenn η 0 ist, R H oder ein kationisches oder Säure-

' ' 2 additionssalz hiervon ist, und wenn 1 ist, R

U J L· I) U

ist, d.h. eine Verbindung der Formeln (II) oder (III), worin R H ist, und (IV)

	/=Γ\ °	BCOCH	(R3	)0C=0	)0C=0
	(\ Λ-CH-C-NH. V '/ ' 1			^A-COOR1	\
	ν-/ ^2 1	0			A
		PCOCH	(R3	)0C=0 \ 1 AC00Rx	/
					) OC=O
R4-
		ι		'C-OCH (R
	-N-		N 0
			0
			BCOCH (R-3

—(III)

—(IV)

Besonders bevorzugte Bedeutungen für A sind (C.-C. _j-Alkylen, (Cj-C₁₂)-Alkyliden, (C₃-C₇)-Cycloalkylen oder Phenylen. Spezieller bevorzugte Verbindungen der Formel (I) sind solche, worin A (CH₇) , (CH,) -C-(CZ₀) , Cyclohexylen oder Phenylen ist,

RR⁷

wobei m 1 bis 8 ist, χ und y jeweils 0 oder 1 bis 6 sind, R H oder (C₁-C₄)-Alkyl und R⁷ (C₁-C₄)-Alkyl ist.

Noch stärker bevorzugte Bedeutungen für A sind (CH ) , (CH₂J₄, (CH₂)g, C(CH₃J₂, 1,4-Phenylen und trans-1,4-Cyclohexylen.

Besonders bevorzugte Carbonsäuren, BCOOH, von denen sich erfindungsgemäße Verbindungen ableiten, sind 6-ß-Brompenicillan-

säure, Clavulansäure und die 1,1-Dioxosäuren der Formel

tOOH

worin Y und X wie zuvor definiert sind.

Spezieller bevorzugte Werte für B sind solche, die sich von den Carbonsäuren der Formel (X) ableiten, worin Y H und X H oder CH₅OH ist, und am meisten bevorzugt sind solche, worin

1 4- ' . ·'. ^:

Y und X beide H sind, d.h. solche, die sich von Penicillansäure-1,1-dioxid ableiten.

Unter den erfindungsgemäßen Verbindungen sind solche der

' ' 2

obigen Formel (IV) und der folgenden Formel (VI), worin R

UQ )C0	ist,	J/ 3	(R3JOC=O ACOOR1	-(VI).
R2NH1		Oy. Il . 0
	N
O*

' . ^; 4 ·... ·. . ·

Besonders bevorzugte Bedeutungen für R umfassen H, OH, Acetoxy, t-Butylcarbonyloxy oder Isobutoxycarbonyloxy.

Besonders bevorzugte Bedeutungen für Q in den erfiridüngsgemäßen Verbindungen mit dieser Variablen sind H, NH„, N_, Benzyloxycärbonylamino und 1-Methy1-2-methoxycarbonylvinylamino, wobei H und NH- besonders bevorzugte Bedeutungen in den erfindüngsgemäßen antibakteriellen Mitteln sind.

Weitere, hier zur Verfügung gestellte, besonders bevorzugte Verbindungen entsprechen den Formeln (V) und (VII)

246325 6

O O

'-COOCHÖC-ACOIT

2 Ν —

O O W

Ν

.CH. CH*.

''COCHOC

ti 13

O ΈΓ

CH. CH.

'/COCHOC

O ΈΓ

-^- (VII) ,

,1

worin R¹ H, (C₁-C.)-Alkyl, Benzyl, CH₃Cl, CH₃J oder ein Carboxylatsalz bildendes Kation ist. Besonders bevorzugte solche Kationen sind Tetrabutylammonium oder ein Alkalimetallkation. Bevorzugte Alkalimetallkationen sind Natrium und Kalium. :

Besonders bevorzugte erfindungsgemäße Verbindungen sind solche, worin RH ist. ,

Die erfindungsgemäßen Verbindungen, die einen der Reste P oder B, wie oben definiert, enthalten, sind wertvoll als Zwischenstufen oder als aktive Vorwirkstoffe für das darin enthaltene spezielle Penicillin oder den ß-Lactamase-Inhibitor. Beispielsweise sind Verbindungen der Formel (V), worin A und R wie oben definiert sind, und R (C₁-C-)-Alkyl, H, oder ein pharmazeutisch annehmbares Kation ist, wertvolle Vorwirkstoffe für Sulbactam;

el (VI),worin R² 4-R C H CH(Q )CO un ist, A und R wie zuvor definiert sind

die Verbindungen der Formel (VI),worin R² 4-R C H CH(Q )CO und

Λ Λ

R H oder OH ist, Q NH

1 und R (C₁-C₄)-Alkyl oder H ist, oder pharmazeutisch annehmbare

- 9. - fc** V */

kationische oder Säureadditionssalze hiervon brauchbare Vorwirkstoffe für Ampicillin (R =H) oder Amoxicillin (R⁴=OH). Solche Verbindungen (V) und (VI), in denen R z.B. GH₂Cl, Benzyl oder Tetrabutylammonium ist, und Verbindungen (VI) mit einer Q -Gruppe, die eine andere Bedeutung als H oder NH» hat, sind brauchbar als Zwischenstufen.

Ebenso sind die erfindungsgemäßen Verbindungen, die sowohl B-als auch P-Resie enthalten, von Wert entweder als Zwischenstufen oder als antibakterielle Mittel, die im Magen-Darm-Trakt von Säugetieren wirksam absorbiert werden, wo sie rasch in die Komponente Penicillin und ß-Lactamase-Inhibitor in praktisch äquimolaren Mengen umgewandelt werden. Die erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel (I) mit einer freien Aminogruppe in einem oder beiden Resten P- und B, wie oben definiert, vermögen Säureadditionssalze zu bilden. Solche Salze mit pharmazeutisch annehmbaren Säuren werden von der Erfindung umfaßt. Beispiele für solche Säuren sind Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Jodwasserstoff säure, Schwefel-/Phosphor-, Zitronen-, Apfel-, Weinr, Malein-, Fumar-, Glucon-, Zucker-/ Benzolsulfon-, p-Toluolsulfon-, p-Chlorbenzolsulfon- und 2-Naphthalinsulfonsäure.

Die Erfindung bezieht sich auf Derivate von Penicillansäure, die durch die folgende Strukturformel wiedergegeben wird:

Ξ .S

Ί r^m3

^Η '""COOH

In Derivaten von Penicillansäure gibt eine unterbrochene Linie (·'') als Bindung eines Substituenten an den bicyclischen Kern an, daß der Substituent unter der Ebene des Kerns liegt. Ein solcher Substituent wird als in oC-Konfiguration befindlich bezeichnet. Umgekehrt bedeutet eine sich verbreiternd dargestellte Bindung (—«* ) eines Substituenten an den bicyclischen Kern, daß der Substituent über der Ebene des Kerns liegt. Diese

-ίο

246325 6

letztere Konfiguration wird als ß-Konfiguration bezeichnet. Die hier verwendete Strichbindung ( -~- ) eines Substitüenten an den bicyclischen Kern gibt an, daß der Substituerit entweder in U- oder ß-Konfiguration stehen kann.

Erfindungsgemäße Verbindungen der Formeln (I) bis (IX) werden als Diester der Dicarbonsäuren der Formel HOOC-A-COOH bezeich-. net, wobei A wie zuvor definiert ist. Beispielsweise wird die

4 1

Verbindung der Formel (VIII), in der R Wasserstoff, Q NH₂ und A (CH₂V₂ ist, als 6-(2-Amino-2-phenylacetamido)-penicillanoyloxymethyl-1,i-dioxopenicillanoyloxymethyl-succinat bezeichnet;

⁴ Hydroxy A (CH)C und Q¹

die Verbindung (VIII), in der R⁴ Hydroxy, A (CHg)₂C und Q-Azido ist, als 6-^~2-Azido-2-(p-hydroxyphenyl)-acetamido_7-penicillanöyloxymethyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-dimethylmalönat bezeichnet; und die Verbindung der Formel (V), in der R Benzyl, R H und A (CH₂)₃ ist, als Benzyl-1,1-dioxqpenicillanoyloxymethyl-glutarat bezeichnet. ·

CH,

-—(VIII)

Ferner ist in der vorliegenden Beschreibung, wenn immer auf eine erfindungsgemäße Verbindung mit einem Penicillinrest Bezug

'·' ' '' ' ' ' 2

genommen wird, P wie oben definiert ist, worin R der Substituent

) : ' -^ .. . .·· ' -. ; · ·" ; ¹¹ - ' ".

ist, worin R und Q wie oben definiert sind (aber Q eine andere Bedeutung als H hat), wenn nicht bereits so angegeben, klar, daß sich dies auf eine Verbindung bezieht, in der der Substituent die D-Konfiguration besitzt.

Die Verbindungen der Formel (I) können nach irgendeiner der auf dem Fachgebiet für die Synthese von Estern bekannten Methoden hergestellt werden. Das bevorzugte Verfahren umfaßt jedoch die Salzbildung durch Kondensation eines Carboxylatsaizes und Halogenmethylesters, worin "Halogen" eine austretende Gruppe X ist. Bevorzugte Bedeutungen für X sind Cl, Br, J, CH₃SO₂O, P-CH₃C-H₄SO₂O. Beispielsweise sind vier allgemeine Methoden nachfolgend für den Fall ausgeführt, daß R³ H, R P^ R^ B Und P

ist, worin Q¹ N₃, C₆H₅CH₂OCONH, P-NO₂C₆H₄OCONH oder

CO₂CH₃

r&

CH₃ ·· CH,

O^ N "'„

M ein Carboxylatsalz bildendes Kation, vorzugsweise Na, K oder N (C.Hg) .-Kationen und X wie oben definiert ist.

H υ

1. PCOOM + XCH₉OCO

BCOCH-OCO

Il * PCOOCH-OCO

BC0CH-0C0

Il *

til)" (VIII)

Abspalten

R⁴-

-CHCONH 1

2. PCOOCH,X + O O \/

^L _N _ L

CH

*· * 0 ;

, MOCO

^(XII) BCOCH-OCO

(VIII,

(VIII)

CViII,

3. PCOOCH-OCO XAV

λ S. —MX

.A +. BCOOCH₂X- -» (VIII) '

MOCO

(HI)

₂ (XIII) (VIII,

4. PCOOCH₀OCO : ; . ' '- ' * \.

XCH₂OCO

+ BCOOM > (VIII) •

(VIII, ¹

(HI)¹¹

(XIV)

Bei jeder der obigen Reaktionen zur Bildung Amino-geschützten Produkts der Formel (VIII)'werden das jeweilige Carboxylatsalz und der Halogenmethy!ester in etwa äquimolaren Mengen in Gegenwart eines polaren organischen Lösungsmittels bei einer Temperatur von etwa 0 bis etwa 80 C, vorzugsweise etwa 25 bis 50°C, zusammengebracht.¹ Während, wie oben angegeben, etwa äquimolare Mengen an Reaktionskomponenten eingesetzt werden, kann ein Überschuß entweder des Carboxylatsalzes oder des Halogenmethylesters, bis zu einem zehnfachen molaren Überschuß, eingesetzt werden. Eine große Anzahl von Lösungsmitteln kann für diese Reaktion verwendet werdendes ist jedoch gewöhnlich vorteilhaft/ein relativ polares organisches Lösungsmittel zu verwenden, um die Reaktionszeit minimal zu halten. Typische verwendbare Lösungsmittel umfassen Ν,Ν-Dimethylformamidj Ν,Ν-Dimethylacetamid, N-Methylpyrrolidon, Dimethylsulfoxid, Ethylacetat, Dichlormethan, Aceton und Hexamethylphosphorsäure-trisamid. Die bis zum praktischen Ende der Reaktion erforderliche Zeit variiert mit einer Anzahl von Faktoren, wie der Natur der Reaktionskomponenten, der Reaktionstemperatur und dem Lösungsmittel.Doch werden bei etwa 25 C Reaktionszeiten von etwa 10 min bis etwa 24 h gewöhnlich angewandt.

Die gewünschte Amino-geschützte Verbindung der Formel (VIII)' wird dann nach dem Fachmann gut bekannten Methoden isoliert. Beispielsweise wird das Reaktionsgemisch in einem mit Wasser nicht mischbaren Lösungsmittel, z.B. Ethylacetat, Chloroform oder Dichlormethan, aufgenommen, mit Wasser, Salzlösung gewaschen und getrocknet. Abdampfen des Lösungsmittels liefert die Zwischenstufe der Formel (VIII)¹, die, wenn gewünscht, z.B. durch Chromatographie an Kieselgel gereinigt werden kann.

Das Abspalten der Aminoschutzgruppe von der Zwischenstufe (VIII) ' erfolgt nach auf dem Fachgebiet gutbekannten Methoden, : vgl. Gross et al. in "The Peptides, Analysis, Synthesis, Biology", Academic Press, New York, N.Y., Band 3, 1981, doch muß die Labilität des ß-Lactamrings und der Esterbindungen angemessen berücksichtigt werden. Wenn z.B. Q 1-:Methyl-2-methoxy-

L 4 Ö J Z D

carbonylvinylamino ist, kann die Schutzgruppe (1-Methyl-2-methoxycarbonylvinyl) einfach durch Behandeln der Verbindung der Formel (VIII)' mit einem Äquivalent einer starken Säure, z.B. Salzsäure, in einem reaktionsinerten Lösungsmittel bei einer Temperatur im Bereich von -10 bis 30°C abgespalten werden. Bei einer typischen Arbeitsweise wird die Enamin-Zwischen-.Stufe mit einem Äquivalent Salzsäure in wässrigem Aceton behandelte Die Reaktion ist gewöhnlich in kurzer Zeit, z.B. innerhalb einer Stunde,beendet. Dann wird das Aceton durch Abziehen im Vakuum entfernt und das Methylacetoacetat-Nebenprodukt durch Extrahieren mit Ether entfernt. Schließlich wird die Verbindung der Formel (VIII, Q =NH₂) durch Lyophilisieren als Hydrochlorid gewonnen.

Zwischenstufenverbindungen der Formel (VIII), worin Q Azido, Benzyloxycarbonylamino oder 4-Nitrobenzyloxycarbonylamino ist, können in die entsprechende Aminoverbindung (VIII, Q =NH₂) umgewandelt werden, indem die Zwischenstufenverbindung (VIII) gewöhnlich für katalytische Hydrogenolyse angewandten Bedingungen unterworfen wird. Die Zwischenstufe wird unter einer Atmosphäre aus Wasserstoff oder Wasserstoff, gegebenenfalls gemischt mit einem inerten Verdünnungsmittel, wie Stickstoff oder Argon, in Gegenwart einer katalytischen Menge eines Hydrpgenplysekatalysators, gerührt oder geschüttelt. Bequeme Lösungsmittel für diese Hydrogenolyse sind niedere Alkanole, wie Methanol und Isopropanöl, Ether, wie Tetrahydrofuran und Dipxan, niedermolekulare Ester, wie Ethylacetat und Butylacetat, chlorierte Kohlenwasserstoffe, wie Dichlormethan und Chloroform, Wasser und Gemische dieser Lösungsmittel. Es ist jedoch üblich, Bedingungen zu wählen, unter denen das Ausgangsmaterial löslich ist. Die Hydrogenolyse erfolgt gewöhnlich bei einer Temperatur im Bereich von 0 bis 60°C und bei einem Druck im Bereich von 1 bis 10 bar (at),vorzugsweise etwa 3 bis 4 bar (at). Die bei dieser Hydrogenolysereaktion verwendeten Katalysatoren sind von der Art der auf dem Gebiet für diese Art von Umwandlung bekannten Mittel, und typische Beispiele sind Nickel und Edelmetalle, wie Palladium, Platin und Rhodium.

- 15 - JLi* Ό <J L· J U

Der Katalysator wird gewöhnlich in einer Menge des 0,5 bis 5,0-, vorzugsweise 1,0-fachen, des Gewichts der Zwischenstufe der Formel (VIII) eingesetzt. Es ist oft bequem, den Katalysator auf einem inerten Träger zu suspendieren, ein besonders geeigneter Katalysator ist Palladium auf einem inerten Träger, wie Kohlenstoff.

Die übrigen erfindungsgemäßen Verbindungen mit einem Penicillinrest, P, wie Verbindungen der Formel (III) , (VI) , (VII) oder (VIII), worin R² _0CH

oder R \\ /)—CHCO ist, worin Q H ist und in

Q¹ .-.

B keine Aminogruppe enthalten ist, werden z.B. nach den gleichen Methoden, wie oben beschrieben, hergestellt, ausgenommen natürlich die letzte Stufe, die Abspaltung der Aminoschutzgruppe ist nicht erforderlich.

Alle übrigen ß-Lactamase-enthaltenden erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel (I) oder (II) werden auch nach den obigen Arbeitsweisen hergestellt, ausgehend von den geeigneten Vorstufen, ausgenommen diejenigen, in denen B der Formel

entspricht, worin Y H und X¹ CH(R⁸JNH₂ und R⁸ H oder CH₃ ist. Eine bevorzugte Arbeitsweise zur Herstellung der Verbindungen (I) oder (II), die die letzteren ß-Lactamase-Reste enthalten, geht von der Amino-geschützten ß-Lactamase, z.B. 6- <*-(Benzyloxycarbonylaminomethyl)-penicillanat-1,1-dioxid, aus. Dies wird in ein Salz, BCOOM, umgewandelt, wobei M Na, K oder Tetra-

butylammonium ist, und das Salz wird dann, wie oben beschrieben, z.B. mit einer Zwischenstufe der Formel (III)' oder der Formel XCH(R )OCOA-COOR umgesetzt. Die Amino-Schutzgruppe wird dann abgespalten, z.B. durch Hydrogenolyse, wie oben beschrieben, um die gewünschte pharmazeutisch aktive Verbindung zu ergeben,

' 1 2 ' · . : .'-. .' ..

in der X CH(R )NH₂ ist. Natürlich kann, wenn das gewünschte Produkt die Formel

^COCHOC=O

η ιο

0 R

-(XV)

BCOCHOC=O OR³

hat, worin R H oder R ——(ν /)——CHCO jede im Penicillinrest

vorhandene Amino-Schutzgruppe gleichzeitig abgespalten werden.

Ein Alternativverfahren zur Herstellung antibakterieller

: . .' ' ; '. . -j ' ' · '

Verbindungen der Formel (VIII), worin Q nHt ^ist> setzt eine Zwischenstufe der Formel

10

•N

0 0 V/ ^s

CH₃ CH₃

⁷COCHOC=O nil OR³

CH.

⁷COCHOC=O 0 R^J

—-(XVI)

-"- ^4DJ Z 3 D

9 2 4 / — \ 2

ein, worin R Q oder R —(ν /V—CHCONH und Q Azido, Benzyloxy-

^. Q²

carbonylamino öder p-Nitrobenzyloxycarbonylamino, R H, Cl, Br oder J und R Cl, Br oder J ist. Die Zwischenstufe (XVI) wird durch katalytische Hydrierung, z.B. nach der oben für die Hydrogenolyse von Azido- oder Benzyloxycarbonylamino-Verbindungen der Formel (VIII) beschriebenen Methode gleichzeitig an den

10 11

Q_, R - und/oder R -Substituenten hydrogenolysiert, um die

1 erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel (VIII), Q =NH₂ zu

liefern. .

Die Zwischenstufen (XVI) werden nach Methoden analog denen erhalten, die oben für die Herstellung von Zwischenstufen der Formel (VIII)' beschrieben wurden, aber unter Verwendung eines R ,R -substituierten 1,1-Dioxopenicillanats anstelle der entsprechend unsubstituierten 1,1-Dioxopenicillansäure, ihrer Salze oder Derivate der Formeln (II))', (II)" oder (Xtil).

Verfahren zur Herstellung der erforderlichen R ,R -disubstituierten 1,1-bioxopenicillansäuren und ihrer Salze werden in der US-PS 4 234 579, 4 342 772 und der BE-PS 882 028 angegeben.

Die Zwischenstufen der Formel (II) können z.B. erhalten werden, wie nach-folqend für den Fall R =H ausqeführt.

2463 25 6

G gHgCH^OCO-A-COOM (XVII)

BCO₂GH₂X (XIII)

-MX

Cj-H₁-CH-OCO 6 5 2 \

BGOOCH₂OCO (II, R¹= C₁

Katalysator

HOOC BCOOCH₂OCO

(II, R

XCH₂OCO .

BCOOCH₂OCO (II)"

BCOOCH₂OCO (ID¹

worin A, B, M und X wie oben definiert sind und X X oder eine besser austretende Gruppe als X ist, z.B, wenn X Cl ist, kann

2 · ' · ' " ."

X Cl, Br, J, OSO₂Cl, OSO₂CH₃ oder P-CH₃OC₆H₄SO₂O sein. Besonders bevorzugte Verbindungen für X sind Br und J.

Die erste oben veranschaulichte Stufe, bei der das Salz des Benzylhalbesters mit dem Halogenmethylester von 1,1-Dioxopenicillansäure zu Verbindungen der Formel (II) umgesetzt wird, worin R Benzyl ist, erfolgt, wie oben für die Herstellung der Zwischenstufen der Formel (VIII) beschrieben.

Die selektive Abspaltung der Benzylgruppe erfolgt typischerweise durch katalytische Hydrogenolyse nach den gleichen Methoden und Bedingungen, wie oben für die Umwandlung für Verbindungen, der Formel (Vlll)beschrieben, worin Q Azido, Benzyloxycarbonylamino oder 4-Nitrobenzyloxycarbonylamino ist, zu den entsprechenden erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel (VIII), worin Q =NH₂· Eine besonders bevorzugte Methode verwendet Pd/C-Kätalysator bei 3 bis 4 bar (at) Druck und Tetrahydrofuran oder Ethylacetat als Lösungsmittel. Die Carbonsäure der Formel (II,

R =H), kann dann nach Standardmethoden isoliert oder die Säure bequem mit einer geeigneten Base zum entsprechenden Salz der Formel (II) ' umgesetzt werden, worin M ein Carboxylatsalz bildendes Kation, wie oben definiert, ist. Eine bevorzugte Methode zur Erlangung der Natrium- und Kaliumsalze der Formel (II)' wendet das Natrium- oder Kaliumsalz der 2-Ethylhexansäüre als Base an. Typischerweise wird die Carbonsäure der Formel (II) . in Ethylacetat gelöst, eine äquimolare Menge Natrium- (oder Kalium-)-2-ethylhexanoat wird unter Rühren zugesetzt und das ausgefallene Salz der Formel (II)¹ durch Filtrieren gesammelt und gewaschen.

Die Salze der Formel (II)', in denen M Tetrabutylammonium ist, können aus der entsprechenden Säure, dem Natrium- oder Kaliumsalz erhalten werden. Wird beispielsweise eine Carbonsäure der Formel (II) verwendet, wird sie typischerweise mit einer äquimolaren Menge Tetrabutylammoniumhydroxid in Gegenwart eines mit Wasser nicht mischbaren organischen Lösungsmittels, vorzugsweise Chloroform, umgesetzt. Die Lösungsmittelschicht wird abgetrennt und das Produkt durch Verdampfen des Lösungsmittels isoliert.

Die Zwischenstufen der Formel (II)" werden durch Eliminieren

2 ' ^:

der Elemente MX bei der Reaktion der entsprechenden Verbindun-

' ' ' ' · 2 ' 2

gen der Formel (II) "-und XCH₂X , worin M, X und X wie oben definiert sind, erhalten. Die Reaktion erfolgt unter Anwendung der gleichen Methoden und Bedingungen, wie oben für die Herstellung von Zwischenstufen der Formel (VIII) beschrieben.

Die Zwischenstufen der Formel (III) können unter Anwendung der gleichen Methoden und Bedingungen, wie oben für die Herstellung von Zwischenstufen der Formel (II) beschrieben, erhalten werden, aber unter Verwendung der analogen Penicillinderivate, PCOOCH(R³)X anstelle von BCOOCH(R³)X, z.B. wie nach-

' · . . 3

folgend für den Fall R = H ausgeführt:

-mx

+ PCO₂CH₂X .·' .',' '

(XVII) (XII)

VV ·'..' H, : . " '

PCO₂CH₂OCO-A-CO₂CH₂CgH₁. - PCO-CH^OCO-A-COOH .· · * ² ο 5 Katalysator 2 2

(III, R¹ = C₆H₅CH₂) (III, R¹ - H, Q¹ 5ί.NH₂)

-♦· PCO₂Ch₂OCO-A-COOM -'.(TH, R¹= M)

CHI, R¹ = CH₂X, Q¹ ^NH₂) /

' ' ' ' 2 ' ' ' ''

worin A, M, X und X und P wie oben definiert sind. Die Aminoschutzgruppe kann abgespalten werden, wie oben für die Umwandlung von Zwischenstufenverbindungen der Formel (VIII) in Aminoverbindungen der gleichen Formel beschrieben.

' '. .' ". 4 .'.. Die erfindungsgemäßen Verbindungen, worin R Acyloxy oder Alkoxycarbonyloxy ist, wie oben definiert, können hergestellt werden, ausgehend von dem geeigneten p-Acy!amoxicillin oder p-Alkyloxycarbonylamoxicillin, -hergestellt z.B. durch Acylieren von 6-Aminopenicillansäure mit der geeigneten Säure der Formel

1 · 4

worin Q wie oben definiert und R Formyloxy, Alkanoyloxy oder Alkoxycarbonyloxy ist oder ein Carboxy1-aktiviertes Derivat hiervon, naqh in der US-PS 4 053 360 offenbarten Methoden. Alternativ können die Zwischenstufen der Formel (VIII)¹ und

- 21 - £kü ö L Ό υ

4 ihre Vorstufen der Formel (VI) und (XIII), worin R Hydroxy ist, hergestellt werden, wie oben beschrieben, und die Zwischenstufe

' ' 4 '

der Formel (VIII¹, R =OH) dann acyliert oder alkoxycarbonyliert, um die entsprechende Verbindung der Formel (VIII) zu ergeben,

.''. 4 . '·. '

worin R Formyloxy, Alkylcarbonyloxy, Alkoxycarbonyloxy oder R C >H .COO ist, wie oben definiert.

Die Acylierung oder Alkoxycarbonylierung der Zwischenstufe der

4 1 '· '

Formel· (VIII)', worin R Hydroxy und Q wie zuvor definiert ist, kann z.B. durch Umsetzen der Verbindung der Formel (VIII)' mit dem geeigneten Säurechlorid oder Säureanhydrid oder gemischten Anhydrid erfolgen. Die Umsetzung erfolgt gewöhnlich in Gegenwart eines reaktionsinerten Lösungsmittelsystems. Bei einer typischen Arbeitsweise werden 0,5 bis 2,0 Mol-Äquivalente, vorzugsweise etwa 1 Mol-Äquivalent des geeigneten Säurechlorids oder Säureanhydrids mit der Ausgangsverbindung der Formel (VIII), worin R Hydroxy ist., in einem reaktionsinerten Lösungsmittel in Gegenwart eines tertiären Amins bei einer Temperatur im Bereich von -TO- bis 30°C zusammengebracht. Reaktionsinerte Lösungsmittel, die bei dieser Acylierung verwendet werden können, sind chlorierte Kohlenwasserstoffe, wie Chloroform und Di chlorine than, Ether, wie Diethylether und Tetrahydrofuran, niedermolekulare Ester, wie Ethylacetat und Butylacetat, niedermolekulare aliphatische Ketone, wie Aceton und Methylethylketon, tertiäre Amide, wie N,N-Dimethylformamid und N-Methylpyrrolidon, Acetonitril und deren Gemische. Das tertiäre .Amin wird normalerweise in einer dem Ausgangs-Säurechlorid oder -Säureanhydrid äquivalenten Menge eingesetzt, und typische tertiäre Amine, die verwendet werden können, sind Triethylamin, Tribütylamin, Diisopropylethylamin, Pyridin und 4-Dimethylaminopyridin.

Neben ihrer Brauchbarkeit als Zwischenstufen für die Herstellung der zugeordneten antibakteriellen Verbindungen der Formel (I),worin η 1 ist, sind die Carbonsäuren und Salze

1 '

der Formel (II) bis (VI), worin R H oder ein Alkalimetallkation, z.B. Na oder K ist, brauchbare Vorwirkstofformen der ß-Lactamase-Inhibitoren, BCOOH, oder Penicillin, PCOOH, worin

- 22 - Ci+ D O £ DV

.<* ' ' . ' -... " ' . .

B und P wie zuvor definiert sind. Besonders bevorzugte solche ß-Lactamase-hemmenden Verbindungen sind solche der Formel (V), in denen R H, Na oder K ist, und A und R wie zuvor definiert sind, die brauchbare Vorwirkstoffe für Periicillansäure-1,1-dioxid (Sulbactam) sind.

Ebenso sind die Penicillinderivate der Formel (VI), worin R H, Na oder K und R² 2 ,6-(CH-O)-C^H₀CQ, C Ja₁-OCH₀CO oder 4-R⁴-C,H.CH(NH₉)CO ist, und die pharmazeutisch annehmbaren Säureadditionssalze solcher Verbindungen, worin R die letztere Bedeutung hat, brauchbare Vorwirkstoffe für die entsprechenden Penicilline. Besonders bevorzugte Derivate dieser Art haben die

..' -. ο ' ·

Formel (VI), worin R

· .· . Λ : -:'...' . .

ist und insbesondere solche, worin R H oder OH ist, die brauchbare Vorwirkstofformen der gut bekannten antibakteriellen Mittel Ampicillin und Amoxilliri sind.

Die Verbindungen der Formel (I), die eine freie Aminpgruppe enthalten, bilden Säureadditionssalze,und diese Säureadditionssalze werden als unter den Umfang und in das Gebiet der Erfindung fallend angesehen. Diese Säureadditionssalze werden nach Standardmethoden für Penicillinverbindungen hergestellt, z.B. durch Zusammenbringen einer Lösung der Verbindung der Formel (I), in einem geeigneten Lösungsmittel (z.B. Wasser, Ethylacetat, Aceton, Methanol, Ethanol oder Butanol), mit einer Lösung, die ein stöchiometrisches Äquivalent der geeigneten Säure enthält. Wenn sich das Salz abscheidet, wird es abfiltriert. Alternativ kann es durch Abdampfen des Lösungsmittels oder im Falle wässriger Lösungen durch Lyophilisieren gewonnen werden. Von besonderem Wert sind das Sulfat, Hydrochlorid, Hydrobromid, Nitrat, Phosphat, Citrat, Tartrat, Pamoat, Perchlorat, Sulfosalicylat, Benzolsulfonat, 4-Toluolsulfonat und 2-Naphtylensulfonat.

Die Verbindungen der Formel (I) und deren Salze können nach herkömmlichen Methoden für Penicillinverbindungen gereinigt werden, z.B. durch Umkristallisieren oder Chromatographie, die Labilität des ß-Lactam-Ringsystems und der Esterbindungen muß jedoch angemessen berücksichtigt werden.

Bestimmte der erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel (IV), die einen ß-Lactamase-hemmenden Rest B enthalten, sind z.B. gegenüber den oben beschriebenen Hydrogenolysebedingungen nicht ausreichend stabil, z.B. bestimmte solcher Verbindungen, in denen B

,CHCH₂OH

·."—V

PP _X3

Cl „ f „ .CH₃

^l3

oder

„er

ist, worin X Cl, Br oder J ist. Eine besonders bevorzugte Methode zur Herstellung erfindungsgemäßer Verbindungen (IV), die einen der obigen Reste B enthalten, umfaßt die Verwendung einer Schutzgruppe, die durch milde Hydrolyse oder durch milde Reduktionsmethoden, wie z.B. nachfolgend ausgeführt, abspaltbar ist.

BCO₂CH₂I

(XVIII)

BC0CH,0C=0 η * -

*> Civ),

worin A, B und R wie oben definiert sind, M ein Kation, vorzugsweise Natrium, Kalium oder Tetrabutylammonium, und R eine Aminoschutzgruppe ist, die durch milde Hydrolyse oder milde Reduktionsmethoden abspaltbar ist. Beispiele für geeignete Gruppen sind Tripheny!methyl und

^CH γ

13 ' ' ' ' ' '

worin R Alkoxy mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen oder NH₂ ist.

Alternativ können die Verbindungen der Formel (IV), die gegenüber Hydrogenolysebedingungen nicht stabil sind, nach der folgenden Methode hergestellt werden.

CO₂R¹⁴

ft. + BCO

/ 14

COOR

R⁴-C^H,CHCONH

KHR¹² ^ f ^"" ^{+ aiXl} ► CXVIIIl —►UV)

^CO₃CH₂I

12

worin A, M und R wie oben definiert sind, B der Rest eines ß-^Lactamase-Inhibitors, wie oben definiert, ist, vorzugsweise ein solcher, der gegenüber Hydrögenolysebedingungen instabil

ist, und R eine durch milde Hydrolyse oder Reduktion abspaltbare Carboxyschutzgruppe ist, z.B. p-N0₉C,H.CH₀, R^aR R°Si oder R^aR R⁰SiCH₂CH₂, worin jeder Rest R^a, R und R^c Alkyl mit 1 bis 12 Kohlenstoffatomen, Aryl oder Aralkyl mit 5 bis 8 Kohlenstoffatomen ist.

Wie oben in der Beschreibung des Standes der Technik ausgeführt, sind viele der als Ausgangsmaterial für Synthesen der erfindungsgemäßen Verbindungen verwendeten ß-Lactamase-Inhibitoren auf· dem Fachgebiet bekannt. 6- oC-Hydroxymethylpenicillansäure-i , 1-dioxid wird durch Umsetzen von Benzyl-6,6-dibrompenicillanat in einem reaktionsinerten Lösungsmittel bei -70 bis -20 C mit t^Butyllithium oder t-Buty!magnesiumchlorid hergestellt. Das anfallende Enolat wird dann mit Formaldehyd behandelt und das anfallende Gemisch von Benzyl-e-brom-e-hydroxymethylpenicillanat-Isomeren wird isoliert. Dieses Gemisch wird zum entsprechenden 1,1-Dioxid oxidiert, z.B. unter Verwendung einer organischen Persäure, wie m-Chlorperbenzoesäure. Das isolierte Sulfon wird in Gegenwart eines Pd/CaCO^Katalysators hydriert, was zur Bildung des gewünschten 6- o^-Hydroxymethylpenicillansäuresulfons führt.

Wie oben erwähnt, steht fi-ß-Hydroxymethylpenicillansäuresulfon nach US-PS 4 342 768 (ausgegeben am 3.8.1982) zur Verfügung.

Eine bevorzugte Methode zur Herstellung der 6-Aminomethyl- und 6-(1-Amino)-ethyl-penicillansäure^i/1-dioxide geht auch von

aus. Dieses wird mit 1 Möläqui-

valent Methylmagnesiumbromid in einem Ether-Lösungsmittel bei -100 bis -5Q°C für kurze Zeit umgesetzt. Das anfallende Mono-Grighard-Reagens wird mit etwa 0,5 Moläquivalenten Benzyloxycarboxamidomethylacetat oder 1-Benzyloxycarboxamidoethylacetat bei der gleichen Temperatur für etwa 0,5 bis 2 h zusammengebracht, um ein Epimerengemisch von z.B. Benzyl-6-brom-6-benzyloxycarbonylaminomethylpenicillanat zu liefern. Dieses wird in der nächsten Stufe umgesetzt, oder das Gemisch kann säulenchromatographisch getrennt werden. In der nächsten Stufe wird das Bromatom abgespalten, z.B. durch Halogenolyse mit Tri-n-butylzinnhydrid, gegebenenfalls in Gegenwart einer kleinen Menge eines freie Radikale liefernden Starters, vorzugsweise 2,2'-AzO-bisisobutyronitril (AIBN),und Kohlenwasserstoff-Lösungsmittel, z.B. Benzol oder Toluol, bei 60-100°C. Der 6-ß-Benzylpxycarbonylaminopenicillanatester wird dann durch Kristallisieren gewonnen (wenn ein Epimerengemisch als Ausgangsmaterial eingesetzt wird) und das 6-c^-Epimer wird durch Einengen der Mutterlauge und Chromatographie des Rückstands gewonnen. Die Epimerensul-.fi.de werden dann zu Sulfonen oxidiert, z.B., wie oben für die 6-Hydroxymethylpenicillanate beschrieben, und die Benzylschutzgruppen nach Hydrogenolyse-Standardmethoden abgespalten..

Wenn für ein Salz einer antibakteriellen Verbindung gemäß der Erfindung therapeutische Verwendung in Betracht kommt, muß ein pharmazeutisch annehmbares Salz verwendet werden; doch können auch andere als diese Salze für eine Vielzahl von Zwecken verwendet werden. Solche Zwecke umfassen das Isolieren Und Reinigen besonderer Verbindungen und die gegenseitige Umwandlung pharmazeutisch annehmbarer Salze und ihrer Nichtsalz-Gegenstücke.

-27 - £*Γθ OL Ό U

Die erfindungsgemäßen, paarig zugeordneten Verbindungen der Formel (I), worin η 1 ist, einer der Reste R und R B und der

2 andere P ist, wie oben definiert, wobei R 2,6-Dimethoxybenzoyl,

4 Phenoxyacetyl oder 4-R C ,-H₄CHCQ ist, die Carbonsäuren, Nieder-

. . NH₂

alkylester und Alkalimetallsalze hiervon der Formel (II) oder (V), sowie die Carbonsäuren, Niederalkylester und Alkalimetall-

' 2 salze der Verbindungen der Formel (VI), worin R 2,6-Dimethoxy-

4 ' '

benzoyl, Phenoxyacetyl oder 4-R C_fiH.CHCO ist, sowie die Säure-

NH₂

additionssalze solcher Verbindungen, die eine freie Aminogruppe (NH₂) enthalten, besitzen alle in vivo antibakterielle Aktivität in Säugetieren. Diese Aktivität kann durch Standardtechniken für Penicillinverbindungen demonstriert werden. Beispielsweise wird die obige Verbindung der Formel (I), (II), (V) oder (VI) Mäusen verabreicht, in denen akute Infektionen durch intraperitoneale Beimpfung mit einer standardisierten Kultur eines pathogenen Bakteriums\hervorgerufen worden sind. Die Schwere der Infektion ist so standardisiert, daß die Mäuse das 1- bis 1Ö-fache der LD₁₀₀ erhalten (LD₁ : die Mindestbeimpfung, die erforderlich ist, um zuverlässig 100 % der Kontrollmäuse zu töten). Nach dem Ende des Tests wird die Aktivität der Verbindung ermittelt, indem die Anzahl der überlebenden gezählt wird, die dem Bakterium ausgesetzt waren und auch die erfindungsgemäße Verbindung erhielten. Die anvtibakteriellen Verbindungen der Formel I sowie die Carbonsäuren, Ester und Alkalimetallsalze der Formeln (II), (V) und (VI) können sowohl oral (p.o.) als auch subkutan (s.c.). verabreicht werden.

Die in vivo-Aktivität der erfindungsgemäßen antibakteriellen Verbindungen macht sie für die Kontrolle bakterieller Infektionen in Säugetieren, den Menschen eingeschlossen, sowohl auf oralem als auch parenteralem Veräbreichuhgswege geeignet. Die Verbindungen sind bei der Kontrolle von durch empfängliche Bakterien in menschlichen Patienten ausgelösten Infektionen brauchbar.

- ²⁸ - 4i»ÖJ-.t J. vy

Eine erfindungsgemäße Verbindung, ζ.B. eine der Formel (VIII,

' -1 '· ' 4 ' ' ' ' '·

Q = NH«), worin R eine andere Bedeutung als Wasserstoff hat, zerfällt zu 6- (2-Amino-2-₍/~4-hydroxyphenyl_7-acetamido) penicillansäure (Amoxicillin) und Penicillansäure-1,1-dioxid (Sulbactam) nach Verabreichung an ein Säugetier, sowohl oral als auch parenteral. Sulbactam wirkt dann als ein ß-Lactamase- inhibitor und erhöht die antibäkterielle Effektivität des Amoxicillin?·. Ähnlich zerfällt eine Verbindung der Formel (VIII) > worin R Wasserstoff ist, zu 6-(2-Amino-ⁱ2-phenylacetamido)-penicillansäure (Ampicillin) und Sulbactam. So finden die paarig zugeordneten antibakteriellen Verbindungen der Formel (I) Verwendung bei der Kontrolle von Bakterien, die gegenüber einem annähernd äquimolaren Gemisch aus Penicillin, PCOOH, Und BCOOH, empfindlich sind, z.B. gegenüber einem 1:1-Gemisch aus Amoxicillin und Sulbactam für die Verbindung (VIII), worin Q NH₉ und R HO ist, oder Ampicillin und Sulbactam für die

· ' *·. .: ' ' 4 .'-.'. ;· .' '

entsprechende Verbindung, worin R H ist. Beispiele für solche Bakterien sind empfängliche Stämme von Escherichia coli und Staphylococcus aureus.

Die Carbonsäuren der Formel (II) und insbesondere solche der Formel ' . . " . '; . .:'.-· ^::.^:[- /. ' . ·.. ' ·.'' '. .' ·'. '

'^GH^-^;· ·' , ->-, . · -: '

^N ''CO₀CH₀OC-A^OOH

Of, R¹= R³= H)

wobei die Alkylester 1 bis 4 Kohlenstoffatome im Alkylrest haben, und die Alkalimetallsalze, insbesondere die Natrium- und Kaliumsalze, sind brauchbar als orale oder parenterale Vorwirkstoffformen von Sulbactam und haben als solche therapeutische Anwendungen als ß-Lactamase-Inhibitor, z.B. die für Sulbactam in der US-PS 4 234 579 offenbarten Anwendungen.

-29 - £40 J £ D Ό

Die antibakteriellen Carbonsäuren, Ester und Salze der Formel (VI), wie oben definiert, insbesondere solche der Formel

"CO-CH-OC-A-COOH

.0 , ·, ;

(XX)

(C.-C.)-Alkylester und pharmazeutisch annehmbaren Säureadditionsund kationischen Salze sind brauchbar als orale und parenterale

Vorwirkstofformen von Amoxicillin (wenn R eine andere Bedeutung

als Wasserstoff hat) und Ampicillin (wenn R Wasserstoff ist).

Beispiele für pharmazeutisch annehmbare Säureadditionssalze der erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel (I) mit einer freien NH₂-Gruppe irr Q oder X umfassen die Salze der Chlorwasserstoff-, Bromwasserstoff-, Schwefel-, Phosphor-, Essig-, Malein-, Apfel-, Fumar-, Bernstein-, Milch-, Wein-, Zitronen-, Glupon-, Zucker-, Benzolsulfon-, p-Toluolsulfon-, p-Chlorbenzolsulfpn- und 2-Naphthalinsulfonsäure.

Beispiele für pharmazeutisch annehmbare kationische Salze der Carbonsäureverbindungen der Formeln (II), (III), (V) oder (VI) umfassen, die Alkalimetallsalze, wie die Natrium- und Kaliumsalze, sowie das Ammoniumsalz und Salze pharmazeutisch annehm- barer Amine, wie N-Methylglucamin, Ν,Ν-Dibenzylethylendiamin, Ethanolamin und Procain.

Die obigen Vorwirkstoffe der Formel (II) und (III),worin R = (C₁-C₄)-Alkyl, H oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon, können auch als physikalische Gemische der beiden Verbindungen verabreicht werden, vorzugsweise ist das Gemisch ein solches mit einem Gewichtsverhältnis im Bereich von etwa 1:3 bis 3:1. Solche Gemische würden nach Verabreichung an ein Säugetier entweder oral oder parenteral auch zu Gemischen des ß-Lac-

- 30 - ^wm T W %f *m +J W

tamase-Inhibitors (BCOOH) und des Penicillins (PCOOH) zerfallen.

Zur Bestimmung, ob ein besonderer Stamm von Escherichia coli oder Staphylococcus aureüs gegenüber einer bestimmten therapeutischen Verbindung oder einem Gemisch empfindlich ist, kann der früher beschriebene in vivo-Test herangezogen werden. Alternativ kann z.B. die Mindesthemmkonzentration (MHK) eines 1:1-Gemischs aus Amoxicillin und Sulbactam oder Ampicillin/Sulbactam gemessen werden. Die MHK-Werte können nach der von der International Colloborative Study on Antibiotic Sensitivity Testing (Ericcson und Sherris, Acta Pathologica et Microbiologia , Scandinav. , Supp. 217, Section B: 64-68 (1971)) empfohlenen Arbeitsweise gemessen werden, die Hirn-Herz-Infusions-(BHI) Agar und die Inoculum-Replikationseinrichtung anwendet. Röhrchen mit dem Wachstum über Nacht Werden 10Ofach verdünnt zur Verwendung als Standardinoculum (20.000 bis 10.000 Zellen in «etwa 0,002 ml werden auf die Agaroberflache aufgebracht; 20 ml BHI-Agar/Platte). 12 Zweifachverdünnungen der Testverbindung werden angewandt, wobei die Anfangskonzentratiön des Testwirkstoffs 200 ug/ml beträgt. Einzelne Kolonien bleiben außer Betracht bei dem Betrachten der Platten nach 18h bei 37°C. Die Suszeptibilität (MHK) des Testorganismus wird als niedrigste Konzentration der Verbindung angenommen, die in der Lage ist, vollständige Wachstumshemmung hervorzurufen, wie mit dem bloßen Auge beurteilt.

Wenn eine erfindungsgemäße antibakterielle Verbindung oder ein Salz hiervon in einem Säuger, insbesondere dem Menschen, verwendet wird, kann die Verbindung allein verabreicht oder mit anderen antibiotischen Substanzen und/oder pharmazeutisch annehmbaren Trägern oder Verdünnungsmitteln gemischt werden. Der Träger oder das Verdünnungsmittel wird auf der Basis der gewünschten Verabreichungsweise gewählt. Kommt z.B. die orale Verabreichung in Betracht, kann eine erfindungsgemäße antibakterielle Verbindung in Form von Tabletten, Kapseln, Rundoder Rautenpastillen, Pulvern, Sirupen, Elixieren, wässrigen Lösungen und Suspensionen und dgl. gemäß pharmazeutischer

- 31 - L·^v j L· j w

Standairdpraxid verwendet werden. Das Verhältnis von aktivem Bestandteil zu Träger hängt natürlich von der chemischen Natur, der Löslichkeit und Stabilität des aktiven Bestandteils sowie der in Betracht gezogenen Dosierung ab. Im Falle von Tabletten für orale Verwendung umfassen gewöhnlich verwendete Träger Lactose, Natriumeitrat und Salze der Phosphorsäure. Verschiedene den Zerfall fördernde Mittel, Wie Stärke, und Gleitmittel, wie Magnesiümstearat, Natriumlaurylsulfat und Talkum, werden gewöhnlich in Tabletten verwendet. Für orale Verabreichung in Kapselform sind brauchbare Verdünnungsmittel Lactose und hochmolekulare Ethy!englykole, z.B. Polyethylenglykole mit Molekulargewichten von 2000 bis 4000. Wenn wässrige Suspensionen für orale Verwendung verlangt werden, wird der aktive Bestandteil mit emulgierenden und suspendierenden Mitteln kombiniert. Wenn gewünscht, können bestimmte Süßungs- und/oder Aromatisierungs- mittel zugesetzt werden. Für parenterale Verabreichung, wozu -intramuskuläre, intraperitoneaIe, subkutane und intravenöse Verwendung gehören, werden gewöhnlich sterile Lösungen der aktiven Bestandteile hergestellt, und der pH-Wert der Lösungen geeignet eingestellt und gepuffert. Für intravenöse Verwendung sollte die Gesamtkonzentration an gelösten Stoffen gesteuert werden, um das Präparat isotonisch zu machen.

Wie früher angegeben, ;1 sind die erfindungsgemäßen antibakteriellen Verbindungen brauchbar bei menschlichen Patienten, und die anwendbaren Tagesdosen unterscheiden sich nicht wesentlich von anderen, klinisch verwendeten Penicillinantibiotika. Der verschreibende Arzt wird letztlich die geeignete Dosis für einen bestimmten Patienten bestimmen, und sie wird mit dem Alter, Gewicht und der Reaktion des Einzelpatienten sowie der Art und der Schwere der Symptome des Patienten variieren. Die erfindungsgemäßen antibakteriellen Verbindungen werden normalerweise oral in Dosen im Bereich Von 20 bis etwa 100 mg/kg Körpergewicht pro Tag und parenteral in Dosen von etwa 10 bis etwa 100 mg/kg Körpergewicht pro Tag, gewöhnlich in unterteilten Dosen, eingesetzt. In manchen Fällen kann es nötig sein, Dosen außerhalb dieser Bereiche zu verwenden. "

- 32 - ££t t) 4 Zb b

Die folgenden Beispiele und Herstellungen dienen lediglich der weiteren Veranschaulichung. Kernmagnetische Resonanzspektren (NMR) wurden für Lösungen in deuteriertem Chloroform

oder deuteriertem Dimethylsulfoxid (DMSO-d,) gemessen und Peak-Lagen sind in Teilen pro Million (ppm) nach niederem Feld hin von Tetramethylsilan angegeben. Die folgenden Abkürzungen für Peak-Formen werden verwendet: bs = breites Singulett; s = Singulett; d = Dublett; t = Triplett; q .'.= Quadruplett, m = Multiplett.

Ausführungsbeispiele Beispiel 1 .

Monobenzylester von Dicarbonsäuren

A) trans-1 ,^-Cyclohexandicarbonsäuremonobenzylester

Zu einer Lösung von 1,0g (2,8 mMol) Dibenzyl-trans-1,A-cyclohexandicarboxylat in 20 ml tert.-Butanol (warm) wird eine Lösung von 1,9 g Kaiiumhydroxid in 10 ml tert.,>-Butanol gegeben. Nach Rühren bei Raumtemperatur über Nacht wird das . trübe Gemisch zum Entfernen von Lösungsmittel eingeengt, in . Wasser aufgenommen und auf pH 5,3 angesäuert, dann nach min mit verdünnter Salzsäure auf pH 5,25 angesäuert. Der ausgefallene Feststoff wird auf einem Filter gesammelt, erneut in verdünnter Natriumbicarbonatlösung gelöst und wieder auf pH 5,25 eingestellt, um den gereinigten Mönoester auszufällen, ¹H-NMR (DMSO-D₆) , ppm (cf): 1,1-2,3 (m, 10H) , 5,1 (s, 1H) , 7,35 (s, 5H) .

B) Mönobenzylterephthalat

Zu einer warmen Lösung von 10 g Dibenzylterephthalat in

200 ml t-Butanol wird eine Lösung von 1,9 g Kaliumhydroxid in 100 ml t-Butanol und 10 ml Wasser gegeben. Das anfallende Gemisch wird bei Raumtemperatur 6O h gerührt. Das Lösungsmittel wird im Vakuum abgezogen, der Rückstand in Wasser aufgenommen und auf pH 5,3 angesäuert und wie im obigen Teil A) aufgearbeitet, um den gewünschten Monoester in 56 % Ausbeute zu ergeben, Schmp. 178°C. ¹H-NMR (DMSO), ppm (<f) : 5,3 (s, 2H), 7,4 (s, 5H), 8,1 (s, 4H); IR-Absorptionspeaks bei 1690 und 1710 cm"¹.

Verseifen des Dibenzylterephthalats (15 g) in Benzylalkohol (225 ml) mit einer äquimolaren Menge Kaliumhydroxids durch Rühren über Nacht bei Raumtemperatur und Verreiben mit Ethylether liefert 75 % Ausbeute an Kaliumsalz des Monobenzylterephthalats.

Beispiel 2 ν

cis-1,2-Cyclohexandicarbonsäure-monobenzylester

Zu 15,4 g (0,10 Mol) cis-1^-Cyclohexandicarbonsäure-anhydrid in 200 ml Toluol wird eine Lösung von 10,8 g (0,10 Mol) Benzylalkohol in 50 ml Toluol getropft. Das Gemisch wird bei Raumtemperatur 1 h gerührt, dann auf 60 C erwärmt und 1 h bei dieser Temperatur gehalten. Das Lösungsmittel wird auf ein kleines Volumen abgedampft und der Produkt-Monoester nach Kühlen und Filtrieren des ausgefallenen Feststoffs erhalten.

Alternativ wird das Reaktionsgemisch in Toluol mit einer äquimolaren Menge ethanolischen Kaliumhydroxids behandelt, um das Kaliumsalz des Monobenzylesters zu erhalten. Das Natriumsalz wird durch Verwendung methanolischen Natriumhydroxids ebenso erhalten.

Die entsprechenden Monoberizylester oder ihre Natrium- oder Kaliumsalze werden aus den folgenden Dicarbonsäureanhydriden

- 34 - XAO JaD Ό

nach der obigen Arbeitsweise erhalten:

Bernsteinsäureanhydrid ·

Glutarsäureanhydrid (in Toluol über Nacht rückflußgeköcht) cis-1,2-Cyclobutancarbonsäureanhydrid Phthalsäureanhydrid

1 ,2-Naphthalindicarbonsäureanhydrid

3,4-Furändicarbonsäure

2,3-Pyridindicarbonsäure

2,3-Pyrazindicarbonsäure

Beispiel 3

Behzyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-succinat

Zu einem Gemisch von 9,2 g (0,044 Mol) Benzylsuccinat-Halbester in 20Q ml Chloroform und 25 ml Wasser wurde 40 %iges wässriges Tetrabütylammönium-hydroxid unter kräftigem Rühren gegeben, bis ein pH von 8,5 erreicht war. Die Chioroformschicht wurde abgetrennt und die wässrige Schicht mit (Ι χ 100 ml) Chloroform extrahiert. Die vereinigten Chloroformextrakte wurden (über Na„S0.) getrocknet und im Vakuum zu einem öl eingeengt. Das Öl wurde mit 200 ml Toluol vereinigt, und 16,5 g (0,044 Mol) Jodmethylpenicillanat-1,1-dioxid wurden zugesetzt. Das Gemisch wurde 30 min gerührt, mit Ethylacetat auf 400 ml verdünnt und das ausgefallene Tetrabutylammoniumjodid abfiltriert. Der Filterkuchen wurde mit 100 ml Ethylacetat gewaschen und die vereinigten Filtrate mit gesättigter NaHCO₃ (1 χ 100 ml), Wasser (1 χ 100 ml), Salzlösung (1 χ 100 ml) gewaschen, (über Na-SO.) getrocknet und-im Vakuum zu einem Öl eingeengt. Chromatographie an Kieselgel (1 kg), Elution mit 1:1 (V/V) Ethylacetat/Hexan) ergab 8,5 g (43 %) eines weißen Feststoffs.

¹H-NMR (CDCl₃) , ppm (/): 1,45 (s, 3H) , 1,63 (s, 3H), 2,77 (s, 4H), 3,47 (d, 2H), 4,43 (s, 1H), 4,62 (t, 1H), 5,17 (s, 2H), 5,84 (AB-Quadruplett, 2H), 7,4 (s, 5H).

25 6

Ebenso wurden die folgenden Verbindungen aus dem geeigneten

Monobenzylester hergestellt:

a) Benzyl-^1 ,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-glutarat

(61 % Ausbeute) - ¹H-NMR (CDCl₃) ppm (S) :"1,42 (s, 3H), 1,6(S, 3H), 1,8-2,2 (m, 2H), 2,28-2,68 (m, 4H), 3,45 . (d, 2H), 4,4 (s, 1H), 4,6 (t, 1H), 5,14 (s, 1H), 5,8 (AB-Qüadruplett, 2H), 7,37 (s, 5H).

b) Benzyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-adipat

( 47 % Ausbeute) - ¹H-NMR (CDCl₃) ppm (S): 1,46 (s, 3H), 1,63 is, 3H), 1,53-1,86 (m, 4H), 2,22-2,6 (m, 4H), 3,46 (d, 2H) , 4,42 (s, 1H), 4,6 (t, 1H) , 5,13 (s, 2H) , 5,82 (AB-Quadruplett, 2H), 7,33 (s, 5H).

c) Benzyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-dimethylmalohat (73,8 % Ausbeute) - ¹H-NMR (CDCl₃) ppm ( S) : 1,4 (s, 3H), 1,53 (s, 9H), 3,45 (d, 2H), 4,4 (s, 1H), 4,56 (t, 1H), ·. 5,22 (s, 2H), 5,78 (AB-Quadruplett, 2H), 7,35 (s, 5H).

d) Benzyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-malonat

(45 % Ausbeute) - ¹H-NMR (CDCl₃) ppm (S): 1,43\(s, 3H),

i,6 (s, 3H), 3,46 Od, 2H), 3,53 (s, 2H), 4,42 (s,iH),

4,6 (t-, 1H), 5,2 (s, 2H), 5,85 j( AB-Quadruplett, 2H) , 7,39

(s, 5H), IR-Spektrum (Nujol) cm"¹: 1795, 1790

e) Benzyl-1,i-dioxopenicillanoyloxymethyl-sebacat

(54 % Ausbeute) , Öl, ¹H-NMR (CDCl₃) ppm (cf ) : 1,2-1,9 (m, 18H) , 2,1-2,5 (m, 4H), 3,4 (d, 2H), 4,4 (s, 1H) , 4,6 (t, 1H), 5,1 (s, 2H), 5,8 (q, 2H), 7,3 (s, 5H).

f). Ebenso werden die übrigen Monobenzylester der Beispiele und 2 in die entsprechenden Verbindungen der Formel

CgH₅CH₂OC=O

' ' :. . ' ! '·

worin A wie für den Ausgangs-Monobenzylester definiert ist, umgewandelt.

g) Alternativ werden die obigen Benzyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-Diester hergestellt, wie unten für den Adxpat-Diester beschrieben.

Ein Gemisch von 17,0 g (0,0665 Mol) Natrium-1,1-dioxopenicillanat, 18,0 g (0,0634 Mol) Benzylchlormethyl-adipat, 6,7 g (0,020 Mol) Tetrabutylammoniumbromid und 300 ml Aceton wird unter Stickstoff auf Rückfluß über Nacht erwärmt. Das Aceton wird verdampft, und das zurückbleibende Gel in 300 ml Ethylacetat aufgenommen. Wasser (150 ml) wird zugesetzt, die organische Schicht wird abgetrennt und die wässrige Schicht mit frischem Ethylacetat (150 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Extrakte werden mit Wasser (3 χ 250 ml),Salzlösung (2 χ 150 ml) gewaschen,(über Na₂SO₄) getrocknet und im Vakuum zu einem öl (31,8 g) eingeengt. Das Öl wird an 700 g Kieselgel chromätographiert, wobei mit 2:1 Hexan/Ethylacetat eluiert wird, um die weniger polaren Verunreinigungen zu entfernen, dann mit 1:1. Ethylacetat/Hexan, um das Produkt zu entfernen. Abdampfen des Lösungsmittels aus den Produktfraktionen liefert 27,3 g (89,5 %).

Durch Verwendung des entsprechenden Methylhalbesters oder eines

anderen Alkylhalbesters, wobei Alkyl Ethyl, n-Propyl, Isopropyl, η-Butyl oder Isobutyl Ist, anstelle des Benzyl-Halbesters bei der obigen Arbeitsweise fällt das entsprechende Alkyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-dlcarboxylat an.

Beispiel 4

Natrium-1,i-dioxopenicillanoyloxymethyl-succinat

Eine Lösung von 8,4 g (0,019 Mol) Benzyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-succinat in 75 ml Tetrahydrofuran wurde zu einer Suspension von 4 g 10 % (Gew./Gew.) Pd/C in Tetrahydrofuran (THF) gegeben und unter 3,5 bar (50 psi) Wasserstoff auf einer Hydrierapparatur geschüttelt. Nach 30 min wurde der Katalysator durch Filtrieren durch ein Filterhilfsmittel entfernt und der Kuchen mit 75 ml THF gewaschen, die vereinigten Filtrate wurden im Vakuum eingeengt und in 75 ml Ethylacetat aufgenommen. Zu dieser Lösung wurden 3,07 g (0,019 Mol) Natrium-2-ethylhexanoat unter Rühren gegeben. Nach 15 min wurde der Niederschlag filtriert, mit Diethylether gewaschen und unter Stickstoff getrocknet, um 6,8 g (95 %) eines weißen Feststoffs zu.ergeben.

Die folgenden Natriumsalze würden ebenso hergestellt, mit der Ausnahme, daß in Fällen, wo sich kein Niederschlag nach Zugabe von Natrium-2-ethylhexanoat bildet, Ethylether zugesetzt wird, um die Ausfällung zu bewirken.

a) Natrium-1.,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-glutarat (93 % Ausbeute) - ¹-H-NMR (P₂O) ppm ( <T) : 1 ,48 (s, 3H) , 1,63 (s, 3H), 1,6-2,7 (m, 6H), 3,22-3,98 (m, 2H), 4,68 (s, 1H), 4,8-5,13 (m, 1H), 5,86 (AB-Quadruplett, 2H).

b) Natrium-1,1-dioxopehicillanoyloxymethyl-adipat (79 % Ausbeute) - ¹H-NMR (D₂O) ppm ( <i) : 1,46 (s, 3H), 1,63 (s, 3H), 1,44-1,8 (m, 4H), 2,1-2,6 (m, 4H), 3,1-3,96

- 38 - ·· τ w w — -

(m, 2H), 4,56-4,76 (HOD-Peak, überdeckt C-3H), 5,0-5,16 (m, IH), 5,92 (AB-Quadruplett, 2H).

c) Natrium-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-dimethyl-malonat

(94,5 % Ausbeute) +) - ¹H-NMR (D₂O) ppm. ( <f) : 1,33(S₇ 6H),

1,44 (s, 3H), 1,58 (s, 3H), 3,16-3,9 (m, 2H), 4,65 (s, 1H),

4,93-5,1 (m, 1H), 5,93 (AB-Quadruplett, 2H); IR-Spektrum (Nuj.pl), 1780 cm"¹.

d) Natrium-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-malonat

(88 % Ausbeute) - ¹H-NMR (D_0) ppm («Γ): 1,45 (s, 3H), 1,6 (s, 3H), 3,2-3,93 (m, 2H), 4,66 (s, 1H), 4,96-5,13 (m, IH), 5,88 (AB-Quadruplett, 2H). Es wurde festgestellt, daß die CH„-Malonat-Wasserstoffatome mit D„0 austauschten.

e) Natrium-1,1-dioxopenicillanoylpxymethyl-sebacat

(80 % Ausbeute) - ¹H-NMR (D₂O) ppm (£ ): 1,2-1,7 (m, 18H), 2,15 (t, 1H), 2,45 (t, 2H), 3,45 (d, 1H), 3,65-3,75 (dd, 1H), 4,75 (s, 1H), 5,15-5,25 (m, 1H), 5,8-6,0 (dd, 2H); IR-Spektrum (KBr) cm"¹: 1570, 1770, 1800.

f) Die übrigen Benzylester des Beispiels 3 werden hydriert und in das entsprechende Natriumsalz nach der obigen Arbeitsweise umgewandelt. Das entsprechende Kaliumsalze wird durch Verwendung von Kalium-2-ethylhexanoat bei der obigen Arbeitsweise erhalten,

+) Umkristallisieren aus Ethylacetat/Hexan liefert Kristallnadeln.

-39- 4 4 D J

B e is ρ i e 1 4 A

Kristallines 1,i-Dioxopenicillanoyloxymethyl-adipinsäure-Hydrat

Zu 400 ml Aceton werden 48,5 g (0,19 Mol) Natrium-1,1-dioxopenicillanat, 48,0 g (0,17 Mol) Benzylchlormethyladipat und 19,3 g (0,06 Mol) Tetrabutylainmoniumbromid gegeben. Das Gemisch wird über Nacht unter Stickstoff auf Rückfluß erwärmt, filtriert, mit Aceton gewaschen und das Filtrat eingedampft. Der Rückstand wird in 500 ml Ethylacetat aufgenommen, im Wechsel mit Salzlösung und Wasser, 250 ml-Portionen,wieder mit Salzlösung gewaschen und (über MgSO₄) getrocknet. Abziehen des Lösungsmittels im Vakuum lieferte 89,6 g hellgelbes öl. Das Öl wird in 250 ml Ethylacetat aufgenommen, 20,0 g 10 % Pd/C zugesetzt und das Gemisch bei 3,5 bar "(at) 1 h hydriert. Nach Zugabe von 15 g frischem Katalysator wird die Hydrierung 2,5 h weitergeführt. Der Katalysator wird abfiltriert, der Kuchen mit Aceton (1500 ml) gewaschen und das vereinigte Filtrat und die Waschflüssigkeiten im Vakuum eingeengt, um ein viskoses Öl zu erhalten. Das Öl wird in 150 ml Aceton aufgenommen und mit Wasser langsam versetzt, um die Kristallisation zu starten, dann fortgeführt, bis 800 ml Wasser zugesetzt sind. Nach 30 min Rühren wird das kristalline Produkt durch Hydrieren gewonnen, mit Wasser gewaschen und luftgetrocknet, um 58,2 g der Titel-Carbonsäure zu erhalten. Umkristallisieren aus Ethylacetat liefert das kristalline Monohydrat, Schmp. 100-102°C.

Analyse, berechnet für C₁₅H₂₁O₉NS-H₃O: C 44,0; H 5,66; N 3,42 gefunden: C 43,93;H 5,65; N 3,42

Die Kristallinität wurde durch Röntgenkristallographie bestätigt. /

Bei Sp i e 1 5

Natrium-1,i-dioxopenicillanoyloxymethyl-trans-i,4-cyclohexandicarboxylat

A) Benzyl-chlormethyl-trans-i,^-cyclohexandicarboxylat

Zu einem Gemisch von 3,06 g (0,03 6 Mol) Natriumbffcarbonat, 5,46 g (0,018 Mol) Kalium-benzyl-trans-1,4-cyclohexandicarboxylat, 50 ml Wasser und 500 ml Chloroform werden 6,17 g (0,018 Mol) Tetrabutylammonium-hydrogensulfat gegeben und das Gemisch bei Raumtemperatur über Nacht gerührt. Die Schichten werden getrennt. Die wässrige Schicht wird zweimal mit Chloroform extrahiert und die vereinigten Chloroformschichten getrocknet und zur Trockne eingeengt. Das anfallende Tetrabutylammoniumsalz wird in Methylenchlorid (20 ml) aufgenommen und die Lösung zu 20 ml Bromchlormethan. bei O⁰C getrocknet. Das anfallende Gemisch wird bei Raumtemperatur 70 h gerührt und das Lösungsmittel abgedampft und Ethyläcetat dem Rückstand zugesetzt. Das ausgefallene Tetrabutylammoniumbromid wird abfiltriert und das Filtrat (über Na₃SO₄) getrocknet und im Vakuum zu 5 g (91 %) Rohprodukt eingeengt. Reinigen durch Kieselgel-Chromatographie unter Elution jnit 1:3 Ethylether/Hexan ergab 1,9 g (35 %) des gewünschten Produkts, ein öl. H-NMR (CDCl₃) ppm (S) : 1,0 - 2,4 (m, 10H) , 5,1 (s, 2H) , 5,7 (s, 2H) ,7,3 (s, 5H) .

B) Benzyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-trans-i,4^ cyclohexandicarboxylat

Eine Lösung von 4,2 g (13,5 mMol) Benzylchlormethyl-trans-1 ,^cyclohexändicarboxyiat, 3 ,63 g (14,2 mMol) Natrium-1 ,1-dioxopenicillanat, 1,45 g (4,5 mMol) und 100 ml Aceton wird über Nacht auf Rückfluß erwärmt. Das Aceton wird abgedampft, Ethyläcetat (100 ml) zugesetzt und-die Lösung mit Wasser

*

(dreimal), Salzlösung gewaschen und über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet.Das Lösungsmittel wird im Vakuum abgezogen, um ein Rohprodukt zu liefern, das durch Säulen-

-ti - LAO J Zt)

Chromatographie an Kieselgel unter Elution mit 1:1 Ethyl- acetat/Hexan gereinigt wird, um 5,3 g (78 %) Reinprodukt, ein Öl, zu liefern, das in der nächsten Stufe eingesetzt wird. ¹H-NMR (CDCl₃) ppm (£): 1,3-1,65 (m, 6H), 1,65-2,6 (m, 10H) , 3,4 (d, 2H), 4,4 (s, 1H), 4,55 (t, 1H), 5,1 (s, 2H), 5,8 (q, 2H), 7,3 (s, 5H); IR-Spektrum (CHCl₃) cm"¹: 1730, 1760, 4810.

C) Zu einer Lösung von 2,5 g (4,9 mMol) des im obigen Teil B hergestellten Benzylesters in 50 ml Ethylacetat unter einer Stickstoffatmosphäre werden 1,5g 10 % Pd/C-Katalysator gegeben. Das anfallende Gemisch wird bei 1 bis 2 bar (at) Druck etwa 20 min gerührt. Der Katalysator wird abfiltriert und 0,82 g (4,9 mMol) Natrium-2-ethylhexanoat dem Filtrat zugesetzt. Nach 30 min Rühren bei Raumtemperatur wird das Gemisch auf ein Drittel seines'Volumens eingeengt und 3 Vol. Ethylether zugesetzt. Die ausgefallene Titelverbindung wird filtriert, mit Ether gewaschen und unter Stickstoff getrocknet, um 1,7 g (79 % Stufen-Ausbeute) zu ergeben. ¹H-NMR (D₂O) ppm (<T): 1,3-2,4 (m, 16H), 3 ,4-3,6 (m, 2H) ,

4,6 (s, 1H), 4,9-5,0 (m, 1H), 5,7 (q, 2H); IR-Spektrum (KBr) cm"¹: 1565, 1760, 1810, 1780.

Beispiel 6

Kristalline 1,1-Dioxopenicillanoyloxymethyl-trans-i ,4-cyclohexancarbonsäure

Zu einer Lösung von 6,07 g (12 mMol) Benzyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-trans-1 ,4-cyclohexanclicarboxylat in 100 ml Ethylacetat unter Stickstoff werden 3,2 g 10 % Pd/C-Katalysator gegeben. Das Gemisch wird 45 min unter Schütteln bei 3,5 bar (50 psi) hydriert. Es wird filtriert, das Filtrat im Vakuum eingeengt«, um ein Rückstandsöl zu liefern, das beim Stehen kristallisigrt. Das Produkt wird aus Ethylacetat/Hexan unter

2 L

42 - *» -* ?

einer Stickstoffatmosphäre umkristallisiert, um 2,35 g kristallines Produkt zu erhalten, das etwas öl zu enthalten schien. Es wurde in Ethylacetat (100 ml) aufgenommen und eine äquivalente Menge Natrium-2-ethylhexanoat zugesetzt. Das ausgefallene Natriumsalz wird 45 min gerührt, auf ein Drittel seines Volumens eingeengt und Ethylether zugesetzt, um die Ausfällung zu vervollständigen. Das Natriumsalz wird durch Filtrieren gesammelt, mit Ether gewaschen und unter Stickstoff getrocknet. Das Natriumsalz wird in Wasser (50 ml) aufgenommen, angesäuert mit Salzsäure, und das Gemisch mit Ethylacetat extrahiert. Die Extrakte werden (über Na₃SO₄) getrocknet, das Lösungsmittel im Vakuum abgezogen, der Rückstand aus Ethylacetat/Hexan kristallisiert und unter Stickstoff getrocknet, um 1,85 g (37 %) Produkt, Schmp. 118,5-119 C zu erhalten, das sich durch Röntgenbeugung als kristallin erweist. ¹H-NMR (CDCl₃) ppm (S): 1,4 (s, 3H), 1,4-1,55 (m, 4H), 1,6 (s, 3H), 2,05-2,15 (m, 4H), 2,25-2,45 (m, 2H), 3,4-3,6 (m, 2H), 4,4 (s, 1H), 4,6-4,65 (m, IH), 5,7-5,95 (dd, 2H); IR-Spektrum (KBr) cm"¹: 1700, 17 60, 1780, 1800.

Bei spiel 7

1,1-Dioxopenicillanoyloxymethyl-terephthalat und sein Natriumsalz

A) Benzyl-chlormethyl-terephthalat

Zu einer Lösung von 18,53 g (0,062 Mol) Kaliuirtbenzylterephthalat in 300 ml Wasser werden 600 ml Chloroform, 10,38 g (0,121 Mol) Natriumbicarbonat und 20,95 g (0,062 Mol) Tetrabutylammonium-hydrogensulfat gegeben. Das anfallende Gemisch wird bei Raumtemperatur 3 h gerührt, die organische Schicht wird abgetrennt und die wässrige Phase zweimal mit Chloroform extrahiert. Die organischen Schichten werden vereinigt,(über Na-SO.) getrocknet und das Lösungsmittel abgedampft, um das Tetrabutylammoniumsalz von 3enzylterephthalat zu ergeben. Dieses wird in 25 ml Methy-

lenchlorid aufgenommen und die Lösung zu 100 ml Bromchlormethan bei 0 C gegeben. Das anfallende Gemisch kann sich auf Raumtemperatur erwärmen, wird über Nacht gerührt und das Produkt nach den in Beispiel 5, Teil A, beschriebenen Methoden isoliert und gereinigt, um den Titel-Diester als Kristalle zu erhalten,-Schmp. 64-66°C. ¹H-NMR (GDCl₃) ppm («Γ): 5,3 (s, 2H), 5,9 (s, 2H), 7,3 (s, 5H), 8,1 (s, 4H); IR-Spektrum (KEr) cm~¹: 17 20 und 1735.

B) Benzyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-terephthalat

Eine Lösung von 6,34 g (0,021 Mol) Benzylchlormethylterephthalat, 5,58 g (0,022 Mol) Natrium-1,1-dioxopenicillanat, 2,24 g (0,0069 Mol) Tetrabutylammoniuitibromid und 200 m] Aceton wird 18 h bei Rückfluß unter einer Stickstoffatmosphäre gerührt. Das Aceton wird abgedampft,.der Rückstand in Ethylacetat aufgenommen, dreimal mit Wasser gewaschen und (über Na₀SO.) getrocknet. Abdampfen des Lösungsmittels liefert 11 g Rohprodukt, das über eine 20 χ 2 cm-Kieselgelsäule unter Elution mit Ethylacetat/Hexan, 1:1, gereinigt wird. Eindampfen der Produktfraktionen ergab 10 g (96 %) des gewünschten Benzylesters als Öl. H-NMR (CDCl₃) ppm

(<f): 1,4 (ξ, 3H), 1,5 (s, 3H), 3,4 (d, 2H), 4,4 (s, 1H), 4,6 .(t, 1H) , 5,4 (s, 2H) , 6,1 (q, 2H) , 7,4 (s, 5H) , 8,1

(s, 4K); IR-Spektrum (CHCl₃) cm"¹: 1725, 1745, 1780, 1810.

C) Eine Lösung von 9 g des in Teil B erhaltenen Benzylesters in 50 ml Ethylacetat wird unter Vakuum gesetzt, um Luft zu entfernen,und unter eine Stickstoffatraosphäre gebracht. Dazu werden 2,-5 g 10 % Pd/C-Katalysator gegeben und das Gemisch bei 3 bar (at) 20 min hydriert. Das Gemisch wird durcl ein Filterhilfsmittel filtriert, wobei mit Ethylacetat gewaschen wird. Zum Filtrat und den Waschlösungen werden 2,98 Natrium-2-ethyihexanoat gegeben und das anfallende Gemisch 3 min gerührt. Jeweils weitere 50 ml Ethylacetat und Ethylether werden zu dem anfallenden dicken Gemisch gegeben und dieses filtriert, wobei mit Ethylether gewaschen wird. Nach

- : - 44 - 4HU yJ X* VsJT r.Λ*γ^

dem Trocknen über Nacht werden 5,8 g (75 %) kristallines Natriumsalz erhalten.

D) Zu einer Lösung von 1 g des obigen Natriumsalzes in 50 ml Wasser werden 5 ml η-Salzsäure gegeben und das anfallende Gemisch mit 75 ml Ethylacetat extrahiert. Das Ethylacetat . wird im Vakuum abgezogen, um einen Brei zu erhalten,und ausreichend Ethylacetat zugesetzt, um den Niederschlag gerade eben zu lösen. Diese Lösung wird gerührt, während langsam Hexan bei Raumtemperatur bis zum Trübungspunkt zugesetzt wird. Nun wird auf dem Dampfbad erwärmt, um Lösung zu bewirken, und einige wenige Tropfen Hexan zugesetzt, das Gemisch auf Raumtemperatur gekühlt und in den Kühlschrank gestellt. Die anfallenden Kristalle werden abfiltriert und unter Stickstoff getrocknet, um 900 mg (95 %)der Titel-Säure Schmp. 167-169° (Zers.) zu erhalten. ¹H-NMR (DMSO) ppm (S j: 1,4 (s, 3H), 1,5 (s, 3H), 3,4 (d, 2H), 4,6 (s, 1H), 5,1-5,3 im, 2H) , 6,"1 (q, 2H), 8,1 (s, 4H); IR-Spektrum (KBr) cm"¹: 1700, 1750, 1780, 1810.

Beispiel 8

Natrium—1,i-dioxopenicillanoyloxymethyl-isophthalat

A) Benzyl-chlormethyl-isophthalat

Nach der Arbeitsweise des Beispiels 7,TeIl A, werden 17,0 g (0,058 Mol) Kalium-benzyl-isophthalat in 45 ml Wasser und 500 ml Chloroform-in das Tetrabutylammoniumsalz umgewandelt und dieses mit überschüssigem Bromchlormethan umgesetzt. Das anfallende Rohprodukt (15 g), wird in Ethylacetat aufgenommen, dieses zu 45 g Kieselgel gegeben, das Gemisch aufgeschlämriit und das Lösungsmittel-abgedampft. Das zurückgebliebene Kieselgel wurde trocken auf eine 20 cm (8 Zoll)-Säule mit Kieselgel gebracht und mit Ethylether/Hexan,1:3, eluiert. Abdampfen des Lösungsmittels aus den produkthaltigen

Fraktionen ergibt den gewünschten Diester als Öl. H-NMR (CDCl₃) ppm («Γ): 5,3 (s, 2H), 5,9 (s, 2H), 7,3 (s, 5H), 8,O-8,3 (m, 3H), 8,55 (t, 1H).

B) Benzyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-isophthalat

Ein Gemisch aus 12,22 g (0,04 Mol) Benzylchlormethyl-isophthalat, 10,75 g (0,042 Mol) Natrium-1,1-dioxopeniCillanat, 4,31 g (0,0134 Mol) Tetrabutylammoniumbromid und 400 ml Aceton werden 30 h auf Rückfluß erwärmt. Das Aceton wurde verdampft und durch Ethylacetat ersetzt. Die Lösung wurde mit Wasser (dreimal), Salzlösung (einmal) gewaschen und (über Na₃SO₄) getrocknet. Verdampfen des Lösungsmittels und Kieselgel-Chromatographie des Rückstands unter Elution mit Ethylether/Hexan (65:35) liefert ein Produkt-Öl in 41 % Ausbeute, das beim Stehen kristallisiert. H-NMR (CpCl₃) ppm : 1,3 (s, 3H), 1,5 (s, 3H), 3,4 (d, 2H), 4,5 (s, 1H),

4,6 (t, 1H), 5,3 (s, 2H), 6,0 (q, 2H), 7,4 (s, 5H) , 7,5-7,7 (m, 1H) ,8,1-8,4 (m, 2H), 8,7-8,8 (m, 1H); IR-Spektrum (KBr) cm"¹: 1720, 1750, 1805.

C) Ein Gemisch aus 8,14 g (0,016 Mol) des in Teil B erhaltenen Benzylesters, 2,5 g 10 % Pd/C-Katalysator und 50 ml Ethyl-, acetat wird nach der Arbeitsweise des Beispiels 7, Teil C, hydriert. Das Gemisch wird filtriert, um Katalysator zu entfernen, und 2,70 g (0,016 Mol) Natrium-2-ethylhexanoat -werden zugesetzt. Nach 20 min Rühren wird der dicke Brei auf ein Drittel seines Volumens eingeengt und Ethylether zugesetzt, um die Fällung zu vervollständigen. Die anfallenden Kristalle werden durch Filtrieren gesammelt, unter. Stickstoff getrocknet, um 6,33 g (90 %) des Natriumsalzes der Titelverbindung zu erhalten. ¹H-NMR (DMSO) ppm ( £) : 1,3 (s, 3H) , 1 ,5 (s,3H), 3,3-3,4 (m, 1H), 3,5-3,6 (m, 1H), 4,55 (s, 1H), 5,0-5,2 (m, IH), 6,O5;(q, 2H), 7,45 (t, 1H), 7,8-8,3 (m, 2H), 8,5 (bs, 1H); IR-Spektrum (KBr) cm"¹: 1575, 1620, 1740, 1810.

Beispiel 9

Tetrabutylämmonium-6-/Ö-(2- j_ 1 -methyl-2-methoxycarbonylvinylamino_7-2-phenylacetamido)_7-penicillanat

Zu 300 ml Chloroform werden 39,3 g 6-^~D-(2-AminO-2-phenylacetamido)_7-penicillansäure-Trihydrat gegeben, 50 ml Wasser werden zugesetzt und der pH des Gemischs wird durch Zugabe von 40 %igem wässrigem Tetrabutylammonium-hydroxid auf 8,5 eingestellt. Die Schichten werden getrennt, die wässrige Schicht mit Natriumsulfat gesättigt und mit frischem Chloroform extrahiert. Die Extrakte und die anfangs untere Schicht werden vereinigt und das Lösungsmittel auf etwa 250 ml Gesamtvolumen abgedampft.

Hierzu werden 150 ml Methylacetoacetat und 30 g wasserfreies Magnesiumsulfat gegeben. Das Gemisch wird 3 h auf Rückfluß erwärmt, kann dann absitzen,und die warme organische Schicht wird dekantiert. Die klare Chloroformlösung kann sich abkühlen, um Kristalle der Titelverbindung in 52 % Ausbeute zu erhalten, Schmp. 182-184°C (Zers.). ¹H-NMR (CDCl₃) ppm ( cf) : 0,8-2,0 (m, 4H), 1,88 (s, 3H), 3,1-3,6 (m, 8H), 3,6 (s, 3H), 4,17 (s, 1H), 4,58 (s, 1H), 5,05 (d, 1H) , 5,38-5,6 (m, 2H) , 6,78 (d, 1H), 7,35 (s, 5H) , 9,4 (d, 1H) .

B e is ρ i e 1 10

Tetrabutylammonium-6-/ D-(2-/ i-methyl-2-methöxycarbonylvinylamino_/-2-/ 4-hydroxyphenyl_/-acetamido)_7-penicillanat

ZU 300 ml Dichlormethan wurden 41,9 g 6-(2-Amino-2-^ 4-hydroxyphenyl_7~acetamido)-penicillansäure-Trihydrat und 50 ml Wasser gegeben, und dann wurde der pH mit 40%igem wässrigem Tetrabutylammonium-hydroxid auf 8,5 eingestellt. Drei Schichten wurden erhalten. Die obere Schicht wurde entfernt, mit Natriumsulfat gesättigt und dann mit Dichlormethan^ extrahiert. Die Extrakte wurden mit der mittleren Schicht und der unteren Schichtvereiniat

- 47 - tit Ό J LO Ό

und das anfallende Gemisch im Vakuum zu einem öl eingeengt, das beim Verreiben mit Aceton kristallisierte. Dies lieferte 44,6 g Tetrabutylammonium-6-(2-amino-2-/~4-hydroxyphenyl_7-acetamido) penicillanat.

Das obige Salz wurde zu 150 ml Methylacetoacetat gegeben und die Suspension auf ca. 65 C erwärmt, bis eine klare Lösung erhalten wurde (8 min). Das Gemisch konnte sich abkühlen, und dann wurde der Feststoff abfiltriert. Der Feststoff wurde mit Methylacetoacetat, dann mit Diethylether gewaschen, um 49,25 g Tetrabutylammonium-6-(2-/~1-methyl-2-methoxycarbonylvinylamino_7-2-/ 4-hydroxyphenyl_7-acetamido) ^-penicillanat-Kristalle zu erhalten.

B e i s ρ i el 11

A) Chlormethyl-6-^ D-(2-^ i-methyl-2-methoxycarbonylvinylamino_/-2-phenylacetamido)_7-penicillanat

Zu 42,9 g (0,062 Mol) Tetrabutylammonium-6-/~D-(2-</~1-methyl-2-methoxycarbonylvinylamino_7-2-phenylacetamido) _7-penicillanat werden 500 ml Chlor j odme than gegeben und das Gemisch 1 h bei Raumtemperatur gerührt. Das Gemisch wird eingeengt, an 1 kg Kieselgel, chromatographiert, wobei mit 80:20 Vol. Ethylacetat/Hexan eluiert wird und 75 ml-Fraktionen aufgefangen werden. Die Fraktionen 5 bis 13 werden vereinigt und zur Trockne eingeengt, um ein gelbes Öl zu ergeben. Dieses wurde erneut chromatographiert, wobei mit einem 1:1-Volumengemisch der gleichen Lösungsmittel eluiert wurde, um 30,6 g (80 %) des gewünschten Chlormethylesters als Schaum zu ergeben. H-NMR (CDCl₃) ppm (X): 1,5 (s, 3H), 1,57 (s, 3H), 1,9 (s, 3H), 3,65 (s, 3H), 4,4 (s, 1H), 4,65 (s, 1H), 5,12 (d, TH), 5,42-5,7 (m, 2H) , 5,75 (doppeltes d, 2H), 6,8 (d, 1H), 7,4 (s,5H), , 9,35 (d, IH) .

246325 6

B) Jodmethyl-6-(_ D-(2-/ 1-methyl-2-methoxycarbonylyinylamino_7" 2-phenylacetamido)_7-penicillanat

Der obige Chlormethylester, 4,96 g (10 mMol) und 7,5 g (50 mMol) Natriumjodid werden mit 50 ml Aceton zusammengebracht und über Nacht gerührt. Das Gemisch wird zur Trockne eingeengt, der Rückstand in Ethylacetat (150 ml) aufgenommen, mit 3 χ 50 ml Wasser, 1 χ 50 ml Salzlösung gewaschen, (über Na₃SO₄) getrocknet und eingeengt, um 6,0 g Produkt als blaßgelben Schaum zu liefern. Verreiben mit Petrolether lieferte einen blaßgelben Feststoff, 5,2 g (89 %)..

C) Ausgehend von Tetrabutylammonium-6-/~D-(2-/~1-methyl-2-methoxycarbonylvinylamino_7-2-/~4-hydroxyphenyl_7-acetamido)_7-penicillanat bei den obigen Arbeitsweisen, aber unter Verwendung von Dimethylformamid als Cosolvens im Teil A, liefert den Jodmethylester von Amoxicillin-enamin.

B e i s ρ i e 1 1 2

6~Z D-(2-Amino-2-phenylacetamido)_7-penicillanoyloxymethyltrans-1,4-cyclohexandicarbonsäure-Hydrochlorid

A) Berizyl-6-^ D-(2-^ 1-methyl-2-methoxycarbonylvinylamino_7-2-phenylacetamido)_7-penicillanoyloxymethyl-trans-1,4-cyclohexandicarboxylat

Eine Lösung von 2,22 g (3,28 mMol) Tetrabutylammonium-6-/ D- (2-^~1-methy.l-2-methoxycarbonylvinylamino_7-2-phenylacetamido)_7~penicillanat und 1,00 g (3,23 mMol) Benzylchlormethyl-trans-1,4-cyclohexandicarboxylat in 100 ml Aceton wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Das Aceton wird abgedampft und durch Ethylacetat ersetzt. Die Lösung wird mit Wasser gewaschen, (über Na₃SO₄) getrocknet und das Lösungs-

-49- z4bJZ-.b b

mittel im Vakuum abgezogen. Das anfallende Rohmaterial wird durch Chromatographie an Kieselgel unter Elution mit 40:60 Ethylacetat/Hexan gereeinigt, um 1,5 g (53 %) zu ergeben.

B) Der im obigen Teil A erhaltene Benzylester, 1,5 g (2,08 mMol) wird in 25 ml Aceton gelöst, und 20,1 ml 0,1 η Salzsäure werden zugesetzt. Das Gemisch wird 10 min gerührt, weitere 2,0 ml 0,1 η Salzsäure werden zugesetzt und das Lösungsmittel abgedampft; Der Rückstand wird mit 75 ml Wasser versetzt, das anfallende Gemisch zweimal mit Ethylether, der eine kleine Menge Ethylacetat enthält, extrahiert. Die Extrakte werden mit 0,75 g 10 % Pd/C-Katalysator versetzt und das Gemisch unter Wasserstoff bei 3,5 bar (50 psi) 30 min geschüttelt. Der Katalysator wird abfiltriert und das Filtrat gefriergetrocknet, um 700 mg Produkt zu erhalten. IR-Spektrum (KBr) cm"¹: 1680, 1700, 1750, 1800. ¹H-NMR (DMSO) ppm ( S) : 1,25 (s, 3H), 1,45 (s, 3H), 1,8-2,0 (m, 4H), 2,05-2,4 (m, 4H), 3,25-3,55 (m, 2H), 4,35 (s, 1H), 5,07 (bs, 1H), 5,35-5,45 (m, 1H), 5,55 (q, 1H), 5,65-5,85 (dd, 2H), 7,3-7,6 (m, 5H), 8,9 (bs, 1H), 9,45 (d, 3H).

Beispiel 13

6-/~D-(2-Amino-2-^ 4-hydroxyphenyl_7~acetamido)_7-penicillanoyloxymethyl-trans-1,4-cyclohexan-dicarbonsäure-Hydrochlorid

A) Benzyl-6-/ D-(2-^ 1-methyl-2-methoxycarbonylvinylamino 7-2- /_ 4-hydroxyphenyl_7-acetamido) _7-penicillanoyloxymethyltrans-1,4-cyclohexandicarboxylat

Eine Lösung von 0,5 g (1,61 mMol) Benzylchlormethyl-trans-1,4-cyclohexandicarboxylat und 1,14 g (1,61 mMol) Tetrabutylammonium-6-/ D-(2-^ 1-methyl-2-methoxycarbonylvinylamino_7-2-/~4-hydroxyphenyl_7-acetamido)_7-penicillanat in 50 ml Dimethylformamid wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt.

Das Reaktionsgemisch wird mit Ethylacetat verdünnt, dreimal mit Wasser, dann mit Salzlösung gewaschen,(über Na₃SO₄) getrocknet. Das Lösungsmittel wird im Vakuum abgezogen. Der Rückstand wird mit frischem Ethylacetat versetzt, das Gemisch wieder mit Wasser, Salzlösung gewaschen und getrocknet und zum Entfernen des letzten Dimethylformamids abgedampft. Der Rückstand wird durch Kieselgel-Chromatographie unter Elution mit 7:3 Ethylacetat/Hexan gereinigt, um 500 mg (42%) gereinigten Diester zu ergeben.

B) Zu einer Lösung von 0,5 g (0,678 mMol) des im obigen Teil A erhaltenen gereinigten Diesters in 25 ml Aceton werden 6,8 ml 0,1 η Salzsäure gegeben. Nach 10 min Rühren wird ein weiterer ml Q,, 1 η Salzsäure gegeben und das Aceton im Vakuum abgezogen. Der Rückstand wird zwischen Wasser und Ethylether verteilt und die.wässrige Schicht mit Ether gewaschen. Zur wässrigen Phase werden 0,35 g 10 % Pd/C-Katalysator unter einer Stickstoffatmosphäre gegeben und das anfallende Gemisch : wird über Nacht bei 3,5 bar (50 psi) hydriert. Das Gemisch wird filtriert, um Katalysator zu entfernen, und das wässrige Filtrat wird gefriergetrocknet, um 200 mg (.50 %) der Titelverbindung zu ergeben. H-NMR (DMSO-D,) ppm ( <fj. ; ' 1 ,1-2 ,7 (m, Ϊ6Η), 3,4-4,0 (bs, 1H), 4,3-4,5 (m, 1H), 5,0-5,2 (m, 1H), 5,4-6,0 (m, 3H), 6,7-7,6 (dd, 4H); IR-Spektrum (KBr) cm"¹: 1700, 1770, 3000, 3500.

Beispiel 14

Natrium-6-(2-phenoxyacetamido)-penicillanoyloxymethyldiraethylmalonat

A) Benzyl-6-(2-phenoxyacetamido)-peniciJlanoyloxymethyldimethylmalonat

Zu 50 ml Dimethylformamid werden 3,88 g (0,01 Mol) Kalium-6-(2-phenoxyacetamido)-penicillanat, 2,7 g (0,01 Mol)

- si - 44Ό JZDD

Benzylchlormethyl-dimethylmalonat gegeben und das Gemisch bei Raumtemperatur 3 h gerührt. Das Gemisch wird in 150 ml Ethylacetat gegossen, mit 3 χ SO.mi Wasser, 1 χ 50 ml Salzlösung gewaschen, (über Na₂SO-) getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingeengt. Der Rückstand wird in einer kleinen Menge Ethylacetat aufgenommen und auf eine Kieselgelsäule (200 g) überführt. Die Säule wird mit 1:1 Ethylacetat/Hexan eluiert. Die Produktfraktionen werden vereinigt und im Vakuum zu 2,0 g Produkt, ein farbloses Öl, eingeengt. H-NMR (CDCIo) ppm (S): 1,42 (s, 9H), 1,5 (s, 3H), 4,4 (s, 1H), 4,5 (s, 2H)> 5,13 (s, 2H), 5,4-5,86 (m, 4H), 6,8-7,5 (m, 5H), 7,3 (s, 5H).

B) Ein Gemisch aus 2,0 g (3,4 mMol) des Produkts des obigen Teils A, 40 ml Ethylacetat und 2,0 g 10 % Pd/C-Katalysator wird 45 min bei 3,5 bar (50 psi) unter einer Wasserstoffatmosphäre gerührt. Ein weiteres Gramm Katalysator wird zu^- gesetzt und weitere 30 min gerührt. Das Gemisch wird filtriert, wobei der Kuchen mit Ethylacetat gewaschen wird. Das Filtrat und die Waschflüssigkeiten werden gerührt, während 0,56 g (3,37 mMol) Natrium<-2-ethylhexanoat zugegeben werden. Unter Zusatz eines gleichen Volumens Ethylether wird weiter gerührt. Die ausgefallenen Feststoffe werden durch 30 min Rühren granuliert, filtriert, mit Ether gewaschen und unter einer Stickstoffatmosphäre ge- . trocknet, um 1,35 g (77 %) des Natriumsalzes der Titelverbindung zu ergeben. H-NMR (D₂O) ppm ( <Γ) : 1,33 (s, 9H), 1/4 (s, 3H) , 4,4-4,6 (s /"auf breitem Singulett^?/ 3H) , 5,5 (bs, 2H), 5,8 (dd, 2H), 6,63-7,33 (m, 5H).

B el· spiel 1 5

Natrium-6-(2-phenoxyacetamido)-penicillanoyloxymethy1-glütarat

A) Benzyl-6-(2-phenoxyacetamido)-penicillanoyloxymethylglutarat

246 3Z5.b

Zu 50 ml Dimethylformamid werden 3,88 g (0,01 Mol) Kalium-6-(2-phenoxyacetamido)-penicillanat, 2,7 g (0,01 Mol) Benzylchlormethyl-glutarat gegeben und das Gemisch 3 h gerührt, worauf 3,0 g (0,02 Mol) Natriumjodid zugesetzt werden und über Nacht weitergerührt wird. Das Reaktionsgemisch wird durch Zugabe von 150 ml Ethylacetat abgeschreckt, mit Wasser (3.x.50 ml), Salzlösung (1 χ 50 ml) gewaschen und (über Na₃SO.) getrocknet. Abziehen des Lösungsmittels im Vakuum liefert 6,0 g Öl, das säulenchromatographisch an Kieselgel (300 g) mit Ethylacetat/Hexan, 1:1, als Lösungsmittel gereinigt wird. Einengen der Produktfraktionen liefert 5,0 g (85 %) farbloses Öl. ¹H-NMR (CDCl₃) ppm (cO: 1,45 (s, 3H), 1,55 (s, 3H), 1,73-2,16 (m, 2H), 2,16-2,6 Cm₁₇ 4H), 4,4 (s, 1H), 4,5 (s, 2H), 5,05 (s, 2H), 5,4-5,83 (m, 2H), 5,73 (s, 2H), 6,66-7,4 (m, 5H), 7,28 (s, 5H).

B) Das in Teil A erhaltene Produkt, 5,0 g (0,0085 Mol), 50 ml Ethylacetat und 5 g 10 % Pd/C-Katalysator werden 1h bei 3 bar (at) Druck hydriert. Weitere 2,5 g Katalysator werden zugesetzt und die Hydrierung 2h weitergeführt. Das Gemisch wird durch Diatomeenerde filtriert, wobei mit Ethylacetat gewaschen wird. Die vereinigten Filtrat- und Waschlösungen, 2pO ml, werden in einen sauberen Kolben gegossen und 6,13 ml Natrium-2-ethylhexanoat in Ethylacetat (0,23 g/ml) zugesetzt. Nach 30 min Rühren wird das Gemisch mit einem gleichen Volumen Ethylether verdünnt und filtriert, um 2,25 g (51 %) Natriumsalz zu erhalten. ¹H-NMR (D₂O) ppm (S): 1,4 (s, 3H), .1,43 (s, 3H), 1,4-2,5 (m, 6H), 4,4-4,8 (HOD), 5,46 (bs, 2H), 5,73 (bs, 2H), 6,64-7_T4 (m, 5H).

Beispiel 16

Natrium-6-(2,6-dimethoxybenzamido)-penicillanoyloxymethyldimethylmalonat

Ein Gemisch aus 4,0*2 g (0,01 Mol) Natrium-6-(2,6-dimethoxy-

2463 25 6

benzamide) -penicillanat, 3,3 g (0,01 Mol) Benzylchlormethyldimethylmalonat und 30 ml Dimethylformamid wird bei 25°C 60' h gerührt, dann das Produkt isoliert und nach der Arbeitsweise des vorhergehenden Beispiels gereinigt, um Benzyl-6-(2,6-dimethoxybenzamido)-penicillanoyloxymethyl-dimethylmalonat in 65 % Ausbeute zu erhalten. 'H-NMR (CDCl₃) ppm (S¹): 1,46 (s, 9H), 1,6 (s, 3H), 3,78 (s, 6H), 4,38 (s, 1H), 5,16 (s, 2H), 5,5-6,1 (m, 4H), 6,53 (d, 2H), 7,1-7,43 (m, 1H), 7,3 (S, 5H).

Zu 3,5 g (5,7 mMol) dieses Benzylesters in 50 ml Ethylacetat werden 2,5 g 10 % Pd/C-Katalysator gegeben und das Gemisch bei 3,5 bar (50 psi) Druck 1 h hydriert. Nach dem Filtrieren zürn Entfernen des Katalysators wird das Filtrat mit einer äquimolaren Menge Natrium-2-ethylhexanoat in Ethylacetat versetzt. Das Produkt-Natriumsalz wird mit Ethylether ausgefällt und durch Filtrieren gesammelt, um 1,95 g (63 %) der Titelverbindüng zu ergeben. ¹H-NMR (D₃O) ppm (^T): 1,33 (s, 6H), 1,42 (s, 3H), 1,6 (s, 3H), 3,73 (s, 6H), 4,4-4,8 (HOD-Signal), 5,5-5,8 (m, 2H), 5,78 (dd, 2H), 6,6 (d, 2H), 7,13-7,46 (m, 1H); IR-Spektrum (KBr): 1787 cm"¹.

Beispiel 17

Die Arbeitsweise des vorhergehenden Beispiels wird mit Natrium-6-(2,6-dimethoxybenzamido)-penicillanat und Benzylchlormethylglutarat in 2,2-mmolarem Maßstab wiederholt, um Benzyl-6- (.2,6-dimethoxybenzamido)-penicillanoyloxymethyl-glutarat in quantitativer Ausbeute als Öl zu liefern. H-NMR (CDCl-) ppm (£): 1,48 (s, 3H), 1,61 (s, 3H), 1,7-2,2 (m, 2H), 2,2-2,62 (m, 4H), 3,8 (s, 6H), 4,38 (s, 1H), 5,08 (s, 2H), 5,5-6,06 (m, 4H), 6,5 (d, 2H) , 7,1-7,38 (m, 1H), 7,3 (s, 5H).

Hydrieren von 1,4 g (2,2 mMol) des obigen Benzylesters über Pd/C-Katalysator nach der in den vorhergehenden Beispielen angewandten Methode und Umwandeln in das Natriümsalz mit Natrium-

2463 2 5 6

2-ethylhexanoat liefert 0,87 g (72,5 %) Natrium-6-(2,6-dimethoxybenzamido)-penicillanoyloxymethyl-glutarat. H-NMR (D₂O) ppm ( «f) : 1,43 (s, 3H), 1,58 (s, 3H), 1,5-2,5 (m, 6H), 3,75 (s/ 6H), 4,4-4,7 (HOD-Signal), 5,5-5,9 (m, 4H), 6,6 (d, 2H), 7,13-7,5 (m, 1H); IR-Spektrum (KBr): 1786 cm"¹.

B e is ρ i e 1 18

1,1-Dioxopenicillanoyloxymethyl-6-/~D-(2-^~1-methyl-2-methoxycarbony lvinylamino_7-2-pheny!acetamido)_7-penicillanoyloxymethyltrans-1,4-cyclohexandicarboxylat -

Ein Gemisch von 2,33 g (3,97 itiMol) Natrium-1 ,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-trans-1 ,4-cyclohexandicarboxylat, 1 ,72 g (3,97 mMol) Jodmethyl-6-/~D- (2 ,-/"~1 -methyl-2-methoxycarbonyl vinylaminq7-2-pheny!acetamido)_/-penicillanat und 40 ml Dimethylformamid wird bei Raumtemperatur 5 min gerührt. Das Gemisch wird mit Ethylacetat verdünnt, dreimal mit kleinen Mengen Wasser, einmal mit Salzlösung gewaschen und (über Na₃SO₄) getrocknet. Abziehen des Lösungsmittels im Vakuum und Chromatographie des Rückstands an einer Kieselgelsäule unter Elution mit 7:3 Ethylacetat/Hexan liefert 1,4 g (40 %) des gewünschten Enamins. H-NMR (CDCl₃) ppm ( S) : 1,3-2,4 (m, 16H), 3,3-3,7 (m, 5H), 4,3-4,4 (s, 2H) , 4,5-4,7 (m, 2H) , 5,0-5,2 (d, 1H) , 5,3-5,4 (m, 2H) , -5,5-5,9 (m, 4H) , 6,5-6,8 (d, 1H),7,3 (s, 5H); IR-Spektrum (KBr) cm"¹: 1600, 1760, 1800.

Beispiel 19

1,1-Dioxopenicillanoyloxymethyl-6-/ D-(2-amino-2-phenylacetamido)_7-penicillanoyloxymethyl-trans-1,4-cyclohexandicarboxy- lat-Hydrochlorid

Zu einer Lösung von 1,4 g (1,61 mMol) 1,1-Dioxopenicillanoyloxy

methyl-6-^ D- (2-/_ 1-methyl-2-raethoxycarbonylvinylaininö_7-2-phenylacetaraido) _7-penicillanoyloxymethyl-trans-1 ,4-cyclohexandicarboxylat in 150 ml Aceton werden 20 ml 0,1 η Salzsäure gegeben und die Lösung 5 min gerührt. Das Lösungsmittel wird im Vakuum abgezogen, der Rückstand mit Wasser verdünnt und die wässrige Phase zweimal mit 1:1 Ethylether/Ethylacetat gewaschen. Die wässrige Phase wird filtriert und gefriergetrocknet, um 634 mg (48 %) der Titelverbindung zu erhalten, Schmp. 155-170° (Zers.), ¹H-NMR (DMSO-D₆ mit D^-Austausch) ppm (S): 1,25-1,5 (m, 16H), 1,85-1,95 (m, 4H) , 2,35-2,5 (m, 2H) , 3,3 (dd, 1H) , 3,7 (dd, 1H) , 4,4 (s,IH), 4,55 (s, 1H), 5,1 (s, 1H), 5,2 (q, IH), 5,45 (d, IH),5,55-5,65 (q, 1H), 5,7-5,95 (m, 4H) , 7,4-7,6 (m, 5H) , 8,85 (bs, 3H), 9,45 (d, 1H); IR-Spektrum (KBr) cm"¹: 1690, 1760, 1800.

B e i spiel 20 Benzyl-chlormethyl-sebacat

Zu einem Gemisch von 48,67 g (0,155 Mol) Monobenzylsebacat, 26,04 g (0,310 Mol) Natriumbicarbonat, 200 ml Wasser und 52,55 g (0,155 Mol) Tetrabutylammoniumhydrogen-sulfat werden 100 ml Chloroform gegeben. Nach dem Schütteln wird die organische Schicht abgetrennt, die wässrige Phase wieder mit Chloroform extrahiert und die vereinigten Chloroformschichten (über Na-SOj getrocknet. Abdampfen des Lösungsmittels liefert einen Rückstand, der in 50 ml Bromchlormethan aufgenommen und über Nacht bei Raumtemperatur gerührt wird. Das Gemisch wird im Vakuum abgezogen, der Rückstand mit Ethylacetat gemischt, filtriert und das Filtrat im Vakuum eingeengt. Das rohe Rückstandsprodukt wird säulenchromatographisch an Kieselgel gereinigt, um 2 g gereinigten Monoester, ein Öl, zu liefern. ¹H-NMR (CDCl₃) ppm ( <f) : 1,1-1,9 (m, 12H) , 2,2-2,5 (m, 4H) , 5,0 (s, 2H), 5,6 (s, 2H), 7,3 (s, 5H).

- 56 - Ί·4 Ό J Z \) (3

B e i s p i e 1 2 1

1,i-Dioxopenicillanoyloxymethyl-6-/ D-(2-^~1-methyl-2-methoxycarbonylvinylamino_7-2-pheny!acetamido)_7-penicillanoyloxymethyl- sebacat

Zu einer Lösung von 0,59 g (1,0 itiMol) Jodmethyl-6-/~D- (2-^~1 methyl-2-methoxycarbonylvinylaiuino_7-2-phenylacetamido) _7-penicillanat in 10 ml Dimethylformamid werden 0,47 g (1,0 mMol) Natrium-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-sebacat gegeben und das Gemisch gerührt, bis vollständig gelöst ist.: Das Reaktionsgemisch wird an einem 23 cm-Kieselgel-Säulenbett blitzchromatographiert, wozu mit 7:3 Ethylacetat/Hexan eluiert wird, um 200 mg (22 %) des gewünschten Enamins zu erhalten. H-NMR (CDCl₃) ppm (S): 1,2-1,8 (m, 24H), 1,9 (s, 3H), 2,2-2,6 (m, 4H) ,3,4-3,8 (m, 5H) , 4,4 (s, 2H) , 4,6-4,7 (m, 2H), 5,2 (d, VH), 5,3 (s, 1H), 5,6-6,0 (m, 4H) , 6,9 (d, 1H) , 7,3 (s, 5H) .

Bei spie 1 22

1,T-Dioxopenicillanoyloxymethyl-6-^ D-(2-amino-2-phenylacetämido)-penicillanoyloxymethyl-sebäcat-Hydrochlorid

Zu einer gerührten Lösung von 200 mg (0,22 mMol) Penicillanoyloxymethyl-6-/~D- (2-(_ 1-methyl-2-methoxycarbonylvinylamino_7-2-phenylacetamido)_7-penicillanoyloxymethyl-sebacat in 25 ml Aceton werden 3,2 ml 0,1 η Salzsäure gegeben und das Gemisch einige wenige Minuten gerührt, ein weiterer ml Salzsäure zugesetzt und 1 min weitergerührt. Das Aceton wird abgedampft, der Rückstand mit Wasser verdünnt, zweimal mit 1:1 Ethylether/Ethylacetat gewaschen. Die wässrige Schicht wird filtriert und gefriergetrocknet, um 110 mg (59 .%..)" Produkt zu erhalten. H-NMR (DMSO-D₆ + D₂O Austausch) ppm (S): 1,2-1,6 (m, 24H), 2,4 (q, 4H), 3,3 (d, 1H) , 3,65-3,75 (dd, 1H) ,4,4 (s, 1H) , 4,55 (s, 1H) , 5,05 (s, 1H), 5,2 (q, 1H), 5,45 (d, 1H), 5,55-5,65 (m, 1H), 5,7-5,9 (m, 4H), 7,35-7,55 (m, 5H), 8,65 (bs, 3H), 9,45 (d, 1H).

-57 - £4t).*/-b b

Bei spiel 23

1, i-Dioxopenicillanoyloxymethyl-e-^ D-(2-amino-2-phenylacetamido)-penicillanoyloxymethyl-terephthalat-Hydrochlorid

A) 1,i-Dioxopenicillanoyloxymethyl-6-^ D-(2-^ 1-methyl-2-methoxycarbonylvinylamino_7-2-phenylacetamido)_7-penicillanpyloxymethyl-terephthalat

Zu einer Lösung von 0,59 g (1 mMol) Jodmethyl-6-^~D-(2-Y~1-methyl-2-methoxycarbonylvinylamino_7-2-phenylacetamido)_7-penicillanat in 10 ml Dimethylformamid werden 0,48 g (1,1 mMol) Natrium-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-terephthalat gegeben und das Gemisch gerührt, bis eine Lösung erhalten wird. Die Lösung wird mit Ethylacetat verdünnt und mit kleinen Portionen Wasser (dreimal),einmal mit Salzlösung gewaschen und (über Na₃SO₄) getrocknet. Das Lösungsmittel wird im Vakuum abgezogen, der Rückstand in einer kleinen Menge Ethylacetat aufgenommen und durch Kieselgel-Chromatographie und Elution mit Ethylacetat/Hexan, 6:4, gereinigt. Die produkthaltigen Fraktionen werden eingeengt, um 0,3 g (23 %) der Enamin-geschützten Verbindung zu ergeben. ¹H-NMR (CDCl₃) ppm (S)'. 1,1-1,5 (m, 12H), 1,7 (s, 3H), 3,3-3,6 (m, 5H), 4,4 (s, 2H), 4,4-4,6 (m, 2H), 5,1 (d, iHJ, 5,4 (s, 1H), 5,8-6,1 (m, 4H), 6,9 (d, 1H), 7,2 (s, 5H), 8,0 (s, 4H).

B) Zu einer gerührten Lösung von 0,3 g (0,35 mMol) des obigen Enamin-geschützten Produkts in 25 ml Aceton werden 4,5 ml 0,1 η Salzsäure gegeben. Das anfallende Gemisch wird einige wenige Minuten gerührt, das Lösungsmittel abgedampft und der Rückstand zwischen Wasser und Ethylether verteilt. Die wässrige Phase wird dann mit 1:1 Ethylether/Ethylacetat gewaschen, filtriert und das Filtrat gefriergetrocknet, um 222 mg (78 %) des Hydrochlorids der Titelverbindung zu erhalten. ¹H-NMR (DMSO + D₂O) ppm ( £): 1,25-1,4 (d, 6H), 1,4-1,5 (d, 6H), 3,2-3,3 (d, 1H), 3,65-3,75 (dd, 1H), 4,45

v58- . ÄIJ.OOO O

(s, 1H), 4,6 (S₁ 1H), 5,1 (s, 1H), 5,2 (d, 1H), 5,45-5,5 (d, IH), 5,55-5,65 (m, 1H), 6,0-6,4 (m, 4H), 7,35-7,55 . (m, 5H), 8,15 (s, 4H), 8,85 (bs, 3H), 9,45 (d, 1H) ; IR-Spektrum (KBr) cm~¹: 1690, 1740, 1800.

Be i s ρ i e 1 2 4

1,1 -Dioxopenicillanoyloxymethyl-e-^ D- (2-amino-2-^phenylacetamido)-periicillanoyloxymethyl-isophthalat-Hydrochlorid

A) 1,i-Dioxopenicillanoyloxymethyl-e-/ D-(2-^ 1-methyl-2-methoxycarbonylvinylamino_7-2-phenylacetamido)_7-penicillanoyloxymethyl-isophthalat

Zu einer Lösung von 0,59 g (110 mMol) Jodmethyl-6-^~D-(2- ^~1-methyl-2-methoxycarbonylvinylainino_7-2-phenylacetamido) J-penicillanat in 10 ml Dimethylformaid werden 0,43 g (1,0 mMol) Natrium-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-isophthalat gegeben und das Gemisch bei Raumtemperatur gerührt, bis die Lösung vollständig ist. Das Reaktionsgemisch wird nach der Arbeitsweise des vorhergehenden Beispiels (Teil A) aufgearbeitet, um 200 mg (23 %) des gekuppelten Enamins zu ergeben. H-NMR (CDCl₃) ppm>£): 1,3-1,6 (m, 12H), 1,85 (s, 3H), 3,6 (s, , 3H), 3,4-3,55 (m, 2H), -4,45 (s, 2H), 4,6-4,7 (m, 2H),

5.2 (d, 1H), 5,4-5,7 (m, 2H), 5,9-6,2 (m, 4H), 6,9 (bd, 1H),

7.3 (s, 5H), 7,5-7,7 (m, 1H), 8,1-8,4 (m, 2H), 8,7 (bs, 1H), 9,4 (d, 1H).

B) Die Enamin-Schutzgruppe wird abgespalten und das Hydrochlorid nach der Methode des vorhergehenden Beispiels (Teil B) in 94 % Ausbeute gebildet. ¹H-NMR (DMSO + D₂O) ppm ( <f) : 1,3 (d, 6H) , 1,5 (d, 6H), 3,7 (dd, 1H), 3,3 (d, 1H), 4,5 (s, 1H), 4,65 (s, 1H), 5,1 (s, 1H), 5,2 (d, 1H), 5,45 (d, 1H), 5,55-5,65 (m, 1H), 6,0-6,2 (m, 4H), 7,35-7,55 (m, 5H), 7,8 (t, 1H), 8,25-8,35 (m, 2H), 8,48 (t, 1H), 8,85 (bs, 3H),

246325 6

fc H U *J L

-1

9,45 (d,1H); IR-Spektrum (KBr): 1750 - 1800 cm (breit).

B ei s ρ i e 1 2 5

6-/ D- (2-Amino-2-phenylacetainido) 7-penicillanoyloxymethyl-i ,1 dioxppehicillanoyloxymethyl-succinat-Hydrochlorid

/"viii, R⁴ = h; q¹ - Nh₂, a= (ch₂)₂_7

Zu einer Lösung von 5,9 g (0,01 Mol) Jodmethyl-6-/~D-(2-/ 1-methyl-2-methoxycarbonylvinylamino_7-2-phenylacetamido)_/-penicillanat in 30 ml Dimethylformamid wurden 5,5 g (0,014 mMol) Natrium-T,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-succinat unter Rühren gegeben. Nach 20 min wurden "150 ml Ethylacetat zugesetzt und das Gemisch mit Wasser (3 χ 50 ml), Salzlösung (50 ml), Wasser (2 χ 50 ml)> Salzlösung (50 ml) -gewaschen, (über Na₃SO₄) getrocknet und zu 6,3g eines gelben Schaums eingeengt. Das Produkt wurde in .60 ml Aceton gelöst und durch Rühren mit 80 ml 0,1 η Salzsäure 15 min hydrolysiert. Das Aceton wurde im Vakuum abgezogen und der wässrige Rückstand mit Ethylacetat (50 ml), Ethylacetat/Ethylether (1:1, 75 ml) und Ethylacetat (50 ml) extrahiert. Die wässrige .Phase wur^e filtriert, um eine klare Lösung zu erhalten, die nach Gefriertrocknen 2795 g eines festen Gemischs ergab. Chromatographie an Sephadex LH-20 (Wasser) ergab 0,26 g (3 %) reines Hydrochlorid. ¹H-NMR (Perdeutero-Dimethylsulfoxid) ppm ( £) : 1,4 (s, 6H) , 1,52 (s, 6H) , 2,7 (s, 4H), 3,1-3,95 (m, 2H), 4,4 (s, 1H), 4,52 (s, 1H), 5,0-5,28 (m, 2H), 5,3-5,68 (m, 2H), 5,68-6,0 (m, 4H), 7,43 (breit s, 5H) ; IR-Spektrum (Nujöl) cm~¹: 1810-1730 (breit).

a) 6-,/"D- (2-Amino-2-phenylacetamido) _7-penicillanoyloxymethyl-1,i-dioxopenicillanoyloxymethyl-glutarat-HydrOchlorid /"VIII/ R⁴ = H, Q¹ = NH₂, A = (CH₃)₃_7

Ähnlich wurden 2,94 g (5 mMol) des gleichen Jodmethylesters

44b325 6

von MethylaGetoacetat-enamin-geschütztem Ampicillin und 3,0 g (7,5 inMol) Natrium-1 ,i-dioxopenicillanoyloxymethylglutarat in 20 ml Dimethylformamid 5 min gerührt und mit 150 ml Ethylacetat abgeschreckt. Das Gemisch wurde mit Wasser ( 3 χ 50 ml), Salzlösung (50 ml) gewaschen, (über Na-SO.) getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingeengt. Der Rückstand wurde chromatographisch an Kieselgel (100 g) unter Elütion mit Methylenchlorid/Ethylacetat (60:40 Vol.) gereinigt, wobei alle 60 s Fraktionen aufgefangen wurden. Fraktionen 16 bis 24 wurden vereinigt und das Lösungsmittel abgedampft, um 1,8 g Schaum zu ergeben. Dieser wurde in 30 ml Aceton gelöst, 21,5 ml 0,1 η Salzsäure wurde zugesetzt und das Gemisch 20 min gerührt. Das Aceton wurde bei vermindertem Druck abgedampft, die wässrige Phase mit Ethylether (30ml) und 1:1 Ethylacetat/Ethylether extrahiert. Die wässrige Schicht wurde durch Diatomeenerde filtriert und das Filtrat lyophilisiert, um 1,45 g (37 %) des gewünschten Hydrochlorids zu liefern.

H-NMR (Perdeutero-Dimethylsulfoxid) ppm { S) '· 1/4 (s, 6H), 1,52 (s, 6H), 1,5 - 2,0 (m, 2H), 2,2 - 2,5 (m, 4H), 3,06-3,9 (m, 2H), 4,38 (s, 1H), 4,5 (s, 1H), 5,03-5,26 (m, 2H),5,33-5,63 (m, 2H), 5,63-5,93 (m, 4H), 7,43 (breitess, 5H); IR-Spektrum (Nujol) cm"¹: 1815-1730

Die folgenden Verbindungen werden auch nach der obigen Methode erhalten:

b)_: 6-/~D- (2-Amino-2-phenylacetamido) _7-penicillanoyloxymethyl-1,1-dioxopenicillanOyloxymethyl-adipat-Hydrochlorid /"VIII, R⁴ = H, Q¹ = NH₂, A = (CH₂)₄_7

(50 % Ausbeute - nach Reinigung durch Chromatographie an Sephadex LH20 (Pharmacia Fine Chemicals Co.) wird ein Material erhalten, das nach Hochdruck-Flüssigchromatographietest 95 % rein ist) H-NMR (Perdeutero-Dimethylsulfoxid) ppm ( £)': 1,4 (s, 6H), (diese beiden Singuletts liegen über

246 325.5

einem Multiplett für 4H-Atome) 2,2-2,6 (m, 4H), 3,06-3,93

(m, 2H), 4,4 (s, 1H), 4,53 (s, 1H), 5,06-5,26 (m, 2H), 5,36-

5,96 (m, 6H), 7,46 (breites s, 5H); IR-Spektrum (Nüjol) cm"¹ ; 1815-1725.

c) 6-/ D-(2-Amino-2-phenylacetamido)_7-penicillanoyloxymethyl-

1,1 -dioxopenicillanoyloxymethyl-diinethylmalonat-Hydrochlorid /"VIII,R⁴ = H., Q¹ = NH₂, A= (CH₃) £. J

- (76 % Ausbeute) - 250 MHz ¹H-NMR (Perdeutero-Dimethylsulfoxid) ppm (S): 1,341 (s, 6H), 1,366 (s, 6H), 1,48 (s, 6H), 3,0-3,9 (m, 2H), 4,41 (s, 1H), 4,53 (s, 1H), 5,116 (breites s, 1H), 5,2 (breites s, 1H), 5,46 (d, 1H) ,5,55-5,65 (m, 1H), 5,7-6,0 (m, 4H), 7,33-7,64 (m, 5H), 8,88 (breites s, 3H), 9,45 (d, 1H); IR-Spektrum (Nujol) cm"¹ : 1815-1-770.

d) 6—^ D-(2-Amino-2-phenylacetamido)_7-penicillanoyloxymethyi-1,i-dioxopenicillanoyloxymethyl-malonat-Hydrochlorid /"VIII, R⁴ = H, Q¹ = NH₂, A =CH₂_7

- (80 % Ausbeute) - ¹H-NMR (Dimethylsulfoxid) ppm ( ξ) : 1,33 (s, 6H), 1,46 (s, 6H), 3,0-3,9 (m, 2H), 3,73 (s, 2H), 4,36 (s; 1H), 4,46 (s, 1H), 5,0-5,26 (m, 2H), 5,3-5,96 (m, 6H), 7,4 (breites s, 5H). '-..'[

B eis ρ i e 1 2 6

6-/ D-(2-Amino-2-phenylacetamido)_7-penicillanoyloxymethyl-1 ,T-dioxopenicillanoyloxymethyl-glutarat-Hydrochlorid

/""VIII, R⁴ = H, Q¹ = NH₂, A = (CH₂) ₃_7 '

A) 6-/ D-(2-Azido-2-phenylacetamido)_7-penicillanoyloxymethyli,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-glutarat

Zu einem Gemisch von 1,18 g (0,0023 Mol) Jodmethyl-6-/~D-(2-azido-2-phenylacetamido) _7-penicillanat und 1,2 g (0,003MoI) Natrium-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-glutarat wurden 15ml

- 62 - £4DJiD D

Dimethylformamid gegeben und das Gemisch zur Lösung gerührt. Nach 1 h wurde ein weiteres Gramm Natriumsalz zugesetzt und die Lösung weitere 30 min gerührt, mit Ethylacetät (100 ml) verdünnt und mit Salzlösung (2 χ 30 ml) , Wasser (2 χ 30 ml) , Salzlösung (1 χ 30 ml) gewaschen, (über Na₂SO.) getrocknet und im Vakuum zu einem Schaum eingeengt. Chromatographie an Kieselgel (100 g) unter Elution mit 7:3 Ethylacetat/Hexan ergab 0,7 2 g (43 %) gereinigter Azidoverbindung. ¹H-NMR (CDCl₃) ppm (£): 1,41 (s, 3H), 1,5 (s, 3H), 1,6 (s, 3H), 1,63 (s, 3H), 1,77-2,23 (m, 2H), 2,26-2,66 (m, 4H), 3,42 (d, 2H), 4,38 (s, 1H), 4,43 (s, 1H), 4,58 (t, TH), 5,06 (s, 1H), 5,4-5,9 (m, 6H), 7,1 (d, 1H), 7,33 (s, 5H).

B) Das oben erhaltene Azid-Produkt wurde in 15 ml Dichlormethan und 15 ml Isopropanol gelöst und mit 0,5 g 10 %Pd/C zusammengebracht. Das Gemisch wurde unter 3,5 bar (50 psi) Wasserstoff 45min hydriert. Nach Zugabe von weiteren 0,25 g Katalysator wurde weitere 30 min hydriert. Der Katalysator wurde abfiltriert, mit Dichlormethan/Isopropanol gewaschen und das Filtrat im Vakuum eingeengt, um etwa 3 ml einer Suspension zu ergeben. Zugabe von 30 ml Diethylether ergab einen Niederschlag, der nach 5 min Rühren und Filtrieren 0,24 g (35 %) freie Base ergab. Ein Anteil von 0,21 g der Base wurde in 2,8 ml 0,1 η Salzsäure gelöst und nach Filtration durch Diatomeenerde gefriergetrocknet, um 0,14 g Hydrochlorid zu ergeben.

Eine Probe der freien Base wurde für ein H-NMR (Perdeutero-Dimethylsulfoxid) verwendet, ppm [S): 1,38 (s, 3H), 1,43 (S, 3H), 1,5 (s, 3H), 1,6(s, 3H), 1,65-2,0 (m, 2H), 2,25-2,6 (m, 4H teilweise überdeckt durch DMSO) , 3,1-3,9 (m, 2H) , 4,43 (s, 1H)¹, 4,5 (breites s, 2H), 5,03-5,2 (m, 1H) , 5,36-5,6 (m, 2H) , 5,6-5,9 (m, 4H), 7,26 (breites s, 5H) .

2463 25 6

B e i s ρ i e 1 2 7

6-/ D-(2-Amino-2-phenylacetamido)_7~penicillanoyloxymethyl-1,1-dioXopenlcillanoyloxymethyl-adipat-Hydrochlorid

A) Unter Einsatz von Natrium-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-. ·'. adipat anstelle von Natrium-1,i-dioxopenicillanoyloxymethylglutarat in der Arbeitsweise des Beispiels 5, Teil A, wurde 6-/ D-(2-Azido-2-phenylacetamido)_7-penicillanoyloxymethyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyladipat in 37,7 % Ausbeute erhalten, ¹H-NMR (CDCl₃) ppm (S): 1,45 (s, 3H), 1,55 (s,3H), 1,63 (s, 3H), 1,68 (s, 3H), (erstere Singuletts überm, 4H), 2,2-2,6 (m, 4H), 3,48 (d, 2H), 4,43 (s, IH), 4,48 (s, 1H), 4,65 (t, 1H), 5,12 (s, 1H), 5,5-5,95 (m, 6H), 7,15 (d, 1H), 7,38 (s, 5H).

B) Die freie Base der Titelverbindung wurde nach Hydrieren der im Teil A erhaltenen Azidoverbindung nach der Arbeitsweise des Beispiels 5, Teil B, erhalten. Sie wurde in das Hydrochlorid umgewandelt, wie auch in Beispiel 5B beschrieben, identisch mit dem in Beispiel 4, Teil B, erhaltenen.

B ei s pi e 1 2 8

Chlormethyl-1,i-dioxo-penicillanoyloxymethyl-glutarat

Eine Lösung von 3,9 g (0,0084 Mol) Behzyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-glutarat in 50 ml Tetrahydrofuran (THF) wurde in Gegenwart von 3,0 g 10 % Pd/C unter 3,5 bar (50 psi) Wasserstoff in einer Parr-Hydrierapparatur hydriert. Der Katalysator wurde abfiltriert und der Kuchen mit THF gewaschen und die Filtrate im Vakuum zu 3,5 g eines viskosen Öls eingeengt. Das Öl wurde in 25 ml Chloroform gelöst, mit 10 ml Wasser überschichtet, das Gemisch gerührt und durch Zugabe von 40 %igem Tetrabutylammoniumhydroxid auf pH 8,0 eingestellt. Die Chloroformschicht wurde abgetrennt und die wässrige Schicht mit Chloroform (2 χ 30 ml) extrahiert. Die vereinigten Chloroform-

24 6 3 25 6

schichten wurden (über Na₂SO.) getrocknet und im Vakuum zu 5,8 g eines Öls eingeengt, das in 35 ml Jodchlormethan gelöst und 15 h gerührt wurde. Einengen im Vakuum und Chromatographie an Kieselgel (Ethylacetat/Hexan) ergab 0,20 g (6 %) der Titelverbindung. ¹H-NMR (CDCl₃) ppm ( S).: 1/44 (s, 3H), 1,63 (s, 3H) , 1 ,82-2,2 (m, 2H)V 2,26-2,7 (m, 4H), 3,48 (d, 2H), 4,43 (s, IH), 4,63 (t, 1H), 5,72 (s, 2H), 5,83 (AB-Quadruplett, 2H).

B e is ρ i e 1 2 9

6-/ D- (2-Amino-2-phenylacetaitiido) _7-penicillanoyloxymethyl-1,i-dioxopenicillanoyloxymethyl-glutärat-Hydrochlorid /"VIII, R⁴ = H, Q¹ = NH₀, A= ./.(CHx)U 7

Zu einer Lösung, von 0,2 g (0,0005 Mol) Chlorraethyl-1 ,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-glutarat in 2ml Aceton wurden 0,323 g (0,0005 Mol) Tetrabutylammonium-6-/~D-(2-^~1-methyl-2-methoxycarbonylvinylamino_7-2-phenylacetamido)_7-penieillanat unter Rühren gegeben. Nach 20 h Rühren bei Raumtemperatur wwrde das Losungsmittel im Vakuum abgezogen und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert, wobei mit 7:3 Ethylacetat/Hexan eluiert wurde, um 0,18 g eines Öls zu ergeben. Zu einer Lösung dieses Produkts in 15 ml Aceton wurden 2 ml 0,1 η Salzsäure, dann weitere 5 ml Wasser gegeben und das Gemisch (pH .1,2) 30 min gerührt. Aceton wurde im Vakuum abgezogen und der wässrige Rückstand mit Ethylether (2 χ 30 ml) gewaschen, filtriert und zu 0,12 g (75 %, bezogen auf Enamin) des Hydrochloride gefriergetrocknet.

B e .i s ρ i e 1 ^ 3 0

Jodmethyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-dimethylmalonat

A) Chlormethyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-dimethylmalonat

Zu einer Lösung von 10 g (0,025 Mol) Natrium-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-dimethylmalonat in 25 ml Wasser wurden 150 ml Chloroform, dann 8,5 g (0,025 Mol) Tetrabutylammoniumhydrogensulfat gegeben. Die wässrige Schicht wurde unter Rühren unter Zugabe von Natriumbicarbonat auf pH 7,5 eingestellt. Die Chloroformschicht wurde abgetrennt und die wässrige Phase mit Chloroform (1 χ 100 ml) extrahiert. Die vereinigten Chloroformschichten wurden (über Na₃SO₄) getrocknet und im Vakuum zu 19,5 g eines viskosen Öls, das noch Chloroform enthielt, eingeengt. Das Öl wurde in 95.ml Chlorjodmethan gelöst und über Nacht gerührt. Einengen im Vakuum und Chromatographie an 300 g Kieselgel unter Eluieren mit Ethylacetat/Hexan, 1:1 Vol., ergab 7,4 g (70 %) Chlormethylester als Öl. ¹H-NxMR (CDCl₃) ppm (S): 1,43 (s, 3H), 1,5 (s, 6H), 1,6 (s, 3H), 3,45 (d, 2H), 4,38 (s, 1H), 4,6 (t, 1H) ,5,68 (s, 2H) , 5,8 (AB-Quadruplett, 2H) .

B) Zu einer Lösung von 7,4 g (0,0156 Mol) Chlormethyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-dimethylmalonat in 50 ml Aceton wurden. 11,75 g (0,078 Mol) Natrium j odid gegeben und die Lösung 20 h gerührt. Einengen im Vakuum ergab einen öligen Feststoff, der zwischen 50 ml Wasser und 100 ml

: Ethylacetat verteilt wurde. Die wässrige Schicht wurde abgetrennt und die organische Schicht mit Wasser (50 ml), Salzlösung (50 ml) gewaschen, (über Na^SO₄) getrocknet und im Vakuum zu. einem gelben Öl eingeengt. Chromatographie an 150 g Kieselgel unter Eluieren mit 1:1 Ethylacetat/Hexan (Volumenbasis) ergab 8,3 g (100 %) Jodmethylester als klares viskoses Öl. ¹H-NMR (CDCl₃) ppm (£): 1,48 (s, 3H), 1,52 (s, 6H), 1,65 (s, 3H), 3,46 (d, 2H), 4,45 (s, 1H), 4,65 (t,

246 3 25 ö

1H), 5,83 (AB-Quadruplett, 2H), 5,93 (s, 2H), IR- (rein) cm"¹: 1810-1735.

C) Die obigen Arbeitsweisen werden wiederholt, aber ausgehend von einem der übrigen Natrium- oder Kaliumsalze des Beispiels 4, um die folgenden Verbindungen

CO₂CH₂X

'CO₂CH₂O-C

zu erhalten, worin A wie in Beispiel 4 definiert und X Gl oder J ist.

Beispiel .31

6-/_ D- (2-Amino-2-/~p-hydroxyphenyl_7-acetamido) _7-penicillanoyloxymethyl-T,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-dimethylmalonat- Hydrochlörid

/"VIII, R⁴ = OH, Q¹ = NH₂, A = (CH₃)₂C_7

A) 6-/. p—-(2-^ 1-Methyl-2-methoxycarbonylvinylamino J-2-/_ phydröxyphenyl_7-acetamido) _7-penicillanoyloxymethyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-dimethylmalonat

Zu einem Gemisch von 1,83 g (0,0026 Mol) Tetrabutylammonium-6-/ D-(2-/~1-methyl-2-methoxycarbonylvinylamino_7-2-/ phydroxyphenyl_/-acetamido)_7-penicillanat und 1,35 g (0,0026 Mol) Jödmethyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyldimethylmalonat wurden 10 ml Dimethylformamid gegeben. Nach 15 min Rühren wurde die Lösung mit 100 ml Ethylacetat verdünnt, mit Salzlösung (25 ml), Wasser (3 χ 25 ml), Salzlösung (25 ml) gewaschen,(über Na„S0.) getrocknet und zu einem

£.4 Ό 0 CO Ό

Schaum engeengt. Der Schaum wurde in Ethylacetat aufgenommen und an 100 g Kieselgel chromatographiert, wobei mit 1:1 (VoI) Ethylacetat/Hexan eluiert wurde, um 1,2 g (5.4%) Enamingeschütztes Addukt zu ergeben. H-NMR (CDCIo) ppm ( <f) : 1,4-1,66 (m, 18H), 1,96 (s, 3H), 3,45 (d, 2H), 3,66 (s, 3H), 4,46 (s, 1H), 4,5 (s, 1H) , 4,56-4,73 (m, 2H), 5,02 (d, 1H), 5,43-5,96 (m, 6H), 6,7 (d, 2H), 7,13 (d, 2H), IR-Spektrum (Nujol) cm~¹: 1810-1725 (breit).

B) Zu dem obigen Enamin-Produkt (1,2 g), gelöst in 30 ml Aceton, wurden 14 ml 0,1 η-Salzsäure gegeben, nach 20 min wurde Aceton im Vakuum abgezogen und der wässrige Rückstand mit Ethylether (2 χ 50 ml) und Ethylacetat (30 ml) extrahiert, Gefriertrocknen der wässrigen Phase ergab 0,8 g (72 %) des Hydrochlorids der Titelverbindung. H-NMR (Perdeutero-Dimethylsulfoxid) ppm ( £) : 1,42 (breites s, 12H), 1,53 (s, 6H), 3,05-3,9 (m, 2H), 4,36 (s, 1H), 4,48 (s, 1H), 4,83-5,26 (m, 2H), 5,26-6,0 (m, 6H), 6,73 (d, 2H), 7,23 (d, 2H); IR-Spektrum (Nujol) cm"¹: 1815-1725 (breit).

Beispiel 32

6-/ D-(2-AiHino-2-^ p-acetoxyphenyl_7-acetamido) _7-penicillanoyl-

oxymethyl-1,1-dioxoperiicillanoyloxymethyl-dimethylmalonat (VIII, R⁴ = CH^COO, Q¹ = NH₀, A = (CHJ.C 7

•J £· J έ ~

A) 6-/ D-(2-/ 1-Methyl-2-methoxycarbonylvinylamino_7-2-/ pacetoxyphenyl_7-acetamido)_7-penicillanoyloxymethyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-dimethylmalonat

6~l D-(2-/ 1-Methyl-2-methoxycarbonylvinylamino_7-2-/ phydroxyphenyl^Z-acetamido)_/-penicillanoyloxymethyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-dimethylmalonat, hergestellt nach der Arbeitsweise des Beispiels 33, Teil A, (2,55 g, 0,003 Mol) und 0,366 g (0,003 Mol) 4-Dimethylaminopyridin

246325 6

wurden in 30 ml Dichlormethan gelöst und 0,28 ml (0,003 Mol) Essigsäureanhydrid wurden zugesetzt. Die Lösung wurde 25 min gerührt, auf 100 ml verdünnt, mit Wasser (30 ml),Salzlösung (30 ml) gewaschen, (über Na₀SOJ getrocknet und zu 2,1 g (78 % ) eines gelben Schaums eingeengt. H-NMR (CDCIo) ppm (cf).i 1,46 (s, 3H), 1 ,52 (s, 9H) , 1 ,56 (s, 3H), 1,64 (s, 3H), 1,92 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 3,48 (d, 2H), 3,66 (s, 3H), 4,46 (s, 1H), 4,5 (s, 1H), 4,6-4,76 (m, 2H), 5,13 (d, 1H), 5,4-6,0 (m, 6H), 7,1 (d, 2H) , 7,43 (d, 2H); IR-Spektrum .' -(NuJ¹Ol) cm"¹ : 1810-1725.

B) Der im obigen Teil A erhaltene Schaum, 2,1 g, wurde in 50 ml Aceton gelöst und 23 ml 0,1 η Salzsäure wurden zugesetzt. Nach 20 min Rühren wurde das Aceton im Vakuum entfernt und die wässrige Schicht mit Ethylether (2 χ 30 ml) gewaschen, durch Diatomeenerde filtriert und zu 1,77 g (71 %) des

' ' ' 1

Hydrochlorids der Titelverbindung gefriergetrocknet. H-NMR (Perdeutero-Dimethylsulfoxid) ppm (<i) : 1,23-1,64 (m, 18H), 2,26 (s, 3H), 3,0-3,9 (m, 2H), 4,36 (s, 1H), 4,46 (s, 1H), 5,0-5,23 (m, 2H), 5,23-5,96 (m, 6H), 7,1 (d, 2H) , 7,5 (d, 2H).

B ei s ρ i e 1 3 3

A) Durch Wiederholen der Arbeitsweise des Beispiels 34, Teil A, im gleichen 3 mMol-Maßstab, aber unter Verwendung von Pivaloylchlorid anstelle von Essigsäureanhydrid, wurde ein Rohprodukt erhalten, das durch Chromatographie an 100 g Kieselgel unter Eluieren mit 60:40 (V/V) Methylenchlorid/Ethylacetat gereinigt wurde. Einengen der produkthaltigen Fraktionen ergab 2,3 g (82 %) farblosen Schaum, der β~1~Ό~(2-/~1-Methyl-2-methoxycarbonylvinylamino_7-2- (_ p-pivaloyloxyphenyl_7-acetamido) _/-penicillanoyloxymethyl-1,i-dioxopenicillanoyloxymethyl-dimethylmalonat ist. H-NMR (CDCl,,) ppm ( «Γ) :. 1,3-1,7 (m, 27H), 1,93 (s, 3H), 3,48 (d,

-69- ZAb 3 Zb ο

2H) ,3,68 (s, 3H), 4,48 (s, 1H), 4,51 (s, 1H), 4,6-4,73 (m, 2H), 5,13 (d, IH), 5,46-6,03 (m, 6H), 7,1 (d, 2H), 7,43 (d, 2H), IR-Spektrum (Nujol) cm"¹: 1820-1710.

B) Zu 2,2 g (2,35 mMol) des im Teil A erhaltenen Enamins in 30 ml Aceton wurden 24 ml 0,1 η Salzsäure gegeben. Das Gemisch wurde bei Raumtemperatur 5 min gerührt, das Aceton im Vakuum abgedampft und der wässrige Rückstand mit Ethylether (3 χ 50 ml) gewaschen. Der verbleibende Ether wurde aus der wässrigen Schicht durch Abziehen im Vakuum entfernt. Die wässrige Lösung wurde dann durch Filtrieren geklärt und zu 1,61 g (80 %) 6-/~D-(2-Amino-2-/~p-pivaloyloxyphenyl_7-acetamido)_/-penicillanoyloxymethyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-dimethylmalonat-Hydrochlorid gefriergetrocknet. ¹H-NMR (Perdeutero-Dimethylsulfoxid) ppm ( €): 1>16-1,66 (m, 27H) ,3,03-3,93 (m, 2H), 4,43 (s, 1H), 4,53 Xs₁

5,02-5,26 (m, 2H), 5,33-6,03 (m, 6H) , 7,13 (d, 2H)-_r 7>63 (d, 2H); IR-Spektrum (Nujol) cm"¹: 1820-1725 (breit). !

C) Unter Verwendung von Araeisen/Essigsäureanhydrid als Acylierungsmittel im Teil A und Entfernen der Schutzgruppe nach der obigen Methode wird 6-^ D-(2-Amino-2-/ p-formylgxyphenyl_7-acetamido)_7-penicillanoyloxymethyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-dimethylmalonat-Hydrochlorid erhalten.

Beispiel 34

Benzyl-6-/ 0-(2-^ 1-methyl-2-methoxycarbonylvinylamino) -2-phenylacetamido)_7-penicillanoyloxymethyl-glutarat

1. Benzyl-chlormethyl-glutarat

Ein Gemisch aus 1,5 g (3,75 mMol) Tetrabutylammonium-benzylglutarat und 20 ml Chlorjodmethan wird bei Raumtemperatur 3 h gerührt und im Vakuum zu einem viskosen Öl eingeengt.

- το- ίΑΌ ό Δ D D

Das Öl wird in 20 ml Ethylacetat und 30 ml Hexan aufgenommen und filtriert, um Tetrabutylammoniumjodid zu entfernen. Das Lösungsmittel wird im Vakuum abgezogen und der Rückstand durch Chromatographie an 75 g Kieselgel unter Eluieren mit 70:30 Äthylacetat/Hexan (Vol.) gereinigt. (15 ml·} Fraktionen wurden alle 0,7 min aufgefangen. Die das gewünschte Produkt enthaltenden Fraktionen (Fraktionen 8 bis 11) werden vereinigt und das Lösungsmittel im Vakuum abgezogen, um 0,55 g (62,5 %) des gewünschten Produkts zu ergeben. H-NMR (CDCl₃) ppm (£): 1,65-2,2 (m, 2H) , 2,26-2,64 (m, 4H), 5,1 (s, 2H), 5,65 (s, 2H), 7,3 (s, 5H).

2. Ein Gemisch aus 0,55 g (2 mMol) Benzyl-chlormethyl-glutarat/ 1,37 g (2 Mol) Tetrabutylammonium-6-/~D- (2-/~1 -methyl-2-methoxycarbonylvinylamino_/-2-phenylacetamido)_/-penicillanat und 20 ml Aceton wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Das Aceton wird abgedampft und der Rückstand durch Chromatographie an Kieselgel unter Eluieren mit 60:40 (Vol.) Ethylacetat/Hexän gereinigt, um 1,2 g (88 %) Produkt, ein öl, zu ergeben. ¹H-NMR (CDCl₃) ppm ( <f): 1 ,45 (s, 3H), 1,53 (s, 3H), 1,9 (s, 3H), 1,8-2,2 (m, 2H) , 2,22-2,62 (m, 4H) , 3,64 (s, 3H), 4,4 (s, 1H), 4,62 (s, 1H), 5,05-5,22 (s, 3H), 5,4-5,73 (m, 2H), 5,78 (s, 2H), 6,84 (d, 1H), 7,3 (s, 5H), 7,34 (s> 5H) , 9,3 (d, 1H) .

B e i s ρ i e 1 3 5

6-/ D-(2-Amino-2-phenylacetamido)_7-penicillanoyloxymethyl-1,1 dioxo-penicillänoyloxymethyl-dimethylmalonat-p-toluolsulfonat

A) 6-/ D-(2-^ 1-Methyl-2-methoxycarbonylvinylamiho_7-2-phenylacetamido)_/-penicillanoyloxymethyl-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-dimethylmalonat

Zu 4,0 g (0,01 Mol) Natrium-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-

dimethylmalonat und 6,0 g (0,01 MoI) Jodmethyl-6-/ D-(2- £ i-methyl-2-methoxycarbonylvinylamino_7-2-phenylacetainido) J-penicillanat werden 40 ml Dimethylformamid gegeben, und das Gemisch wird bei Raumtemperatur 30 min gerührt. Es wird in 300 ml Ethylacetat gegossen, mit Wasser (4 χ 100 ml), Salzlösung (1 χ 100 ml)_: gewaschen, (über Na₃SO₄) getrocknet und im Vakuum zu 9,3 g Schaum eingeengt. Der Schaum wird durch Chromatographie an Kieselgel (300 g) unter Eluieren von 60:40 Ethylacetat/Hexan und Auffangen von 25 ml-Fraktionen gereinigt. Fraktionen 39 bis 65 werden vereinigt und im Vakuum zu 4,3 g (51 %) gelbbraunen Schaums eingeengt. H-NMR (CDCl₃) ppm (<O : 1,43 (s, 3H), 1,46 (s, 9H), 1,53 (s, 3H) , 1 ,6 (s, 3H), 1,9 (s, 3H), 3,42 (d, 2H), 3,63 (s, 3H), 4,4 (s, 1H), 4,42 (s, 1H), 4,53 - 4,-5.7 -'(m, 2H), 5,06 (d, 1H), 5,35-5,93 (m, 6H), 6,73 (d, 1H), 7,33 (s, 5H), 9,4 (d,.iH).

B) Zu 30 ml Ethylacetat werden 0,836 g (1 mMol) des im obigen Teil A erhaltenen Enamins gegeben und das Gemisch zu einer Lösung gerührt. Eine Lösung von 0,19 g (1 mMol) p-Toluolsulfönsäure-Hydrat in 5 ml Ethylacetat wird zugesetzt, das Gemisch 15 min gerührt und das Lösungsmittel abgedampft, um ein hartes Harz zu erhalten. Das Harz wird mit 150 ml Ethylether verrieben, über Nacht gerührt, filtriert, mit Ethylether gewaschen und zu 0,84 g (92 %) Tosylat luftgetrocknet. ¹H-NMR (DMSO.Dg) ppm (S): 1,4 (s, 12H), 1,5 (s, 6H), 2,3 (s, 3H), 3,1-3,9 (m, 2H), 4,36 (s, 1H), 4,5 (s, IH), 5,0-5,26 (m, 2H), 5,33-6,0 (m, 6H), 7,06 (d, 2H), 7,3-7,63 (m, 7H). ;

Beispiel 36

e-ß-Brompenicillanoyloxymethyl-e-/ D-(2-amino-2-phenyl) acetamido_7-penicillanoyloxymethyl-glutarat

A) Jodmethyl-6-ß-brompenicillanat

Zu einer gerührten Lösung von 0,96 g (3 mMol) Kalium-6-ßbrompenicillanat und 1,80 g (18 mMol) Kaliumbicarbonat in jeweils 9 ml Wasser und Ethylacetat werden 0,10 g (0,3 mMol) Tetrabutylammonium-hydrogensulfat, dann 0,45 g (4,5 mMol) Chlormethylchlorsulfonat gegeben und das Gemisch 1,5 h gerührt. Die organische Phase wird abgetrennt, die wässrige Phase mit Ethylacetat extrahiert und die vereinigten organischen Schichten mit Wasser gewaschen, getrocknet und im Vakuum zu etwa 5 ml eingeengt. Das Rohprodukt wird durch Chromatographie an Kieselgel (Petrolether/Ethylacetat, 9:1) gereinigt, um Chlormethyl-6-ß-brompenicillanat als nahezu farbloses öl zu liefern.

Zu einer Lösung von 0,82 g (2,5 mMol) dieses Chlormethylesters in Aceton (5 ml) werden 0,75 g (5 mMol) Natriumjodid gegeben und das Gemisch 24 h gerührt. Das ausgefallene Salz wird abfiltriert, das Filtrat im Vakuum eingeengt, der ölige Rückstand in Ethylacetat aufgenommen. Die Lösung wird mit Wasser gewaschen,(über MgSO₄) getrocknet, zu einem kleinen Volumen eingeengt und in der gleichen Weise wie der Chlormethylester gereinigt, um den gewünschten Jodmethylester als gelbes Öl zu liefern. ¹H-NMR (CDCl₃) ppm (S): 1,55 (s, 3H), 1,69 (s, 3H), 4,5 (s, 1H), 5,34 und 5,57 (2d, J = 4 Hz, 2H), 5,97 (ABq, J = 5 Hz, 2H).

B) e-ß-Brompenicillanoyloxymethyl-e-/ D-(2-(2-methyl-2-methoxycarbonylvinylamino_7-2-phenylacetamido)_7-penicillanoyloxymethyl-glutarat

Zu einer gerührten Lösung von Tetrabutylammonium-6-₍/~D-(2-methyl-2-methoxycarbonylvinylamino_7-2-phenylacetamido)J-penicillanoyloxymethyl-glutarat (832 mg, 1 mMol) in jeweils 3 ml Ethylacetat und Dichlormethan wird eine Lösung von 430 mg (1 mMol) Jodmethyl-6-ß-brompenicillanat in 5 ml Ethylacetat gegeben. Nach wenigen Minuten Rühren wird der anfallende Brei eingeengt, um Dichlormethan zu entfernen, filtriert,

246 3 25 b

um ausgefallenes Salz zu entfernen ,und das Filtrat; mitWasser (5 ml) gewaschen. Zur organischen Phase wird frisches Wasser (10 ml) gegeben und der pH mit 1 η Salzsäure auf 3 eingestellt. Die wässrige Phase wird abgetrennt und gefriergetrocknet, um die Titelverbindung als Hydrochlorid zu ergeben.

Beispiel 37

Unter Einsatz der geeigneten Ausgangsverbindung der Formel BCOOH oder ihres Natrium- oder Kaliumsalzes in den Arbeitsweisen der Herstellungen C und D oder Teil A des vorhergehenden Beispiels werden die entsprechenden Verbindungen der Formel BCOOCH(R )Cl oder BCOOCH(R )J in gleicher Weise erhalten, wobei R H, CH₃, CpH,- oder C^H^ und B wie nachfolgend definiert ist:

24.6 325 6

BCOOH oder Salz, erhalten nach

Ü.S. 4 342 772

U.S. 4 342 772

U.S. 4 342 768

OO

,1——Ν-—

V .CH.

Herstellung ι

-N

XH₂OCOCH₃

U.S. 4 256

G.B. 2 070

-N

D.S. 4 342

-75- Z4t> J ZD o

B e i s pi, i el 3 8

Kristalline Säure der Formel V, R¹ = R³ = H

A) 1 ; T-Dioxopenicillanoyloxymethy!-glutarsäure

Benzyl-1,i-dioxopenicillanoyloxymethyl-glutarat wird nach der Methode des Beispiels 4A hydrogenolysiert. Nach Abdampfjen des Ethylacetats aus dem Filtrat wird das zurückbleibende Öl in Isopropanol aufgenommen, das Gemisch bei 22°C 60 min gerührt und über Nacht bei 50⁰C gehalten. Der anfallende Feststoff wird in Isopropanol aufgenommen, filtriert und mit kaltem Isopropanol und Hexan gewaschen. Die anfallenden Kristalle von 1,1-Dioxopenicillanoyloxymethylglutarsäure werden bei Raumtemperatur zu 63 %iger Ausbeute vakuumgetrocknet, Schmp. 76-78 C.

B) 1,Ί-Dioxopenicillanoyloxymethyl-dimethy!malonsäure

" Eine Lösung von 10 g Natrium-1,1-dioxopenicillanoyloxymethyl-dimethylmalonat in 100 ml Ethylacetat wird mit Salzsäure (23 ml,.In in 50 ml Wasser) behandelt. Das Gemisch wird gerührt und kann dann stehen. Die organische Schicht wird.abgetrennt, getrocknet, das Lösungsmittel im Vakuum abgezogen und der Rückstand an 400 g Kieselgel chromatögraphiert, wobei mit 1:1 Ethylacetat/Aceton eluiert wird. Die Produktfraktionen werden vereinigt und das Lösungsmittel abgedampft. Das anfallende viskose Öl wird in Ethylether gelöst, filtriert, um Unlösliches zu entfernen, und das Filtrat eingeengt, .um ein Öl zu erhalten, das nach Kratzen kristallisiert, 7,2 g weiße Kristalle, Schmp. 121-123°C.

c Analyse: berechne gefunden: C 44,13; H 5,19; N 3,65

berechnet für C₁₄H₁₉O₉NS C 44,56; H 5,07; N 3,71

2463-üb.

Herstellung A Dibenzyldimethylmalonat

Zu 75 ml Wasser, das 4,0 g Natriumhydroxid enthält, werden bei O⁰C 17,0 g (0,05 Mol) Tetrabutylammoniumhydrogensulfat gegeben, das Gemisch wird 15 min gerührt, kann sich erwärmen ,und 100 ml Chloroform mit 14,2 g (0,05 Mol) Dibenzylmalonat und 6,6 ml (0,10 Mol) Methyljodid zugesetzt. Pas Gemisch (Anfangs-pH > 12) wird 30 min gerührt, worauf das Gemisch einen pH von etwa 8.hat. Es wird weitere 10 min gerührt, die organische Phase wird abgetrennt. Zur organischen Schicht wird eine weitere Charge von 4,0 g Natriumhydroxid, 17,0 g Tetrabutylammonium-hydrogensulfat in 75 ml Wasser und 6,6 g Methyljodid gegeben. Das anfallende Gemisch wird bei Raumtemperatur 30 min gerührt, die Chloroformschicht wird abgetrennt, (über Na₃SO₄) getrocknet und im Vakuum eingeengt. Das anfallende Rückstandsöl wird mit 500 ml Ethylether verrieben, die anfallenden Feststoffe werden filtriert und mit Ether gewaschen und das Filtrat und die Waschflüssigkeiten eingeengt, um 15,0 g (96 %) Produkt zu liefern/ das durch das H-NMR-Spektrum identifiziert wird.

Herstellung B Benzyidimethylmalonat-Halbester

Eine Lösung von 3,12 g (48 itiMol) 85 % igen Kaliumhydroxids in 75 ml Benzylalkohol wird zu 15,0 g Dibenzyldimethylmalonat in 75 ml Benzylalkohol gegeben. Die anfallende Lösung wird 60 h gerührt, 1,5 1 Ethylether werden zugesetzt und das anfallende Gemisch zweimal mit 100 ml-Portionen Wasser extrahiert. Die vereinigten wässrigen Schichten werden mit 100 ml Ether gewaschen. Zur organischen Schicht werden 100 ml Ethylether gegeben, und das Gemisch wird mit 6n Salzsäure auf pH 2,5 angesäuert. Die EthersChicht wird abgetrennt und die wässrige Phase wieder mit Ether extrahiert. Die Etherextrakte werden (über

-77- ίήο^5 b

Na₃SO₄) getrocknet und Lösungsmittel abgedampft, um das Produkt,

ein farbloses Öl, zu ergeben, 8,6 g (81 %). R,- O,1 (DSC, 2:1

1 Hexan/Ethylacetat). Struktur wurde durch H-NMR gesichert.

Herstellung G Chlormethyl-penicillanat-i,1-dioxid

Ein Gemisch aus 4,66 g Penicillansäure-1,1-dioxid, 50 ml Dichlormethan und 35 ml Wasser wurde mit genügend Tetrabutylammonium-hydroxid (40 %ig in Wasser) behandelt, um einen pH von 6,0 zu ergeben. Die Dichlormethan-Schicht wurde abgetrennt und die wässrige Phase mit frischem Dichlormethan (2 χ 50 ml) extrahiert. Die organischen Schichten wurden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und zu 10,1 g Tetrabutylammoniumsalz des Penicillansäure-1,1-dioxids eingeengt.

Das obige Tetrabutylammoniumpenicillanat-1,1-dioxid wurde zu 50 ml Chlorjodmethan gegeben und das Reaktionsgemisch wurde bei Raumtemperatur über Nacht gerührt..Es wurde im Vakuum auf das halbe Volumen eingeengt und an 200 g Kieselgel chromatographiert, wozu Ethylacetat/Hexan als Elutionsmittel verwendet wurde und jeweils 12 ml-Schnitte alle 30 s genommen wurden. Die Fraktionen 41 bis 7 3 wurden vereinigt und zur Trockne eingeengt, um 3,2 g der Titelverbindung zu ergeben.

Das NMR-Spektrum (CDCl₃) zeigte Absorptionen bei 1,5 (s, 3H), 1,66 (s, 3H), 3,42 (d, 2H), 4,38 (s, 1H), 4,6 (t, 1H) und 5,7 (dd, 2H) ppm.

24632b b

Herstellung D Jodmethyl-penicillanat-1, 1-dioxid

Zu einer Lösung von 7,9 g Chlormethyl-penicillanat-i,1-dioxid in 100 ml trockenem Aceton, unter einer Stickstoffatmosphäre gehalten, wurden 21,0 g Natriumjodid gegeben, und das Reaktionsgemisch wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde im Vakuum eingeengt und der Rückstand in 150 ml Ethylacetat und 150 ml Wasser gelöst. Die organische Schicht wurde abgetrennt und die wässrige Schicht mit frischem Ethylacetat extrahiert. Die organischen Extrakte wurden vereinigt, mit Wasser (1 χ 500 ml) und Salzlösung (1 χ 50 ml) gewaschen und über Natriumsulfat getrocknet. Entfernen des Lösungsmittels ergab 10,5 g des Titelprodukts, Schmp. 100-102°C.

Das NMR-Spektrum (CDCl₃) zeigte Absorptionen bei 1,55 (s, 3H), 1,68 (s, 3H), 3,5 (d, 2H), 4,4 (s, 1H), 4,65 (t, 1H) und 6,0 (dd, 2H) ppm.

Herstellung E

Tetrabutylaiamonium-6-(2-benzyloxycarbonylamino-2-/ 4-hydroxyphenyl_7-acetamido)-penicillanat

Zu einem rasch gerührten Gemisch von 1,0 g 6-(2-Benzyloxycarbonylamino-2-/ 4-hydroxyphenyl_7-acetamido)-penicillansäure, 30 ml Dichlormethan und 20 ml Wasser wurde 40 %iges wässriges Tetrabutylammoniumhydroxid gegeben, bis ein pH von 8,0 erhalten wurde. Es wurde weitere 30 min bei pH 8,0 gerührt und dann die Schichten getrennt. Die wässrige Schicht wurde mit Dichlormethan extrahiert,und dann wurden die vereinigten Dichlormethanlösungen (über Na₃SO₄) getrocknet und im Vakuum eingeengt. Dies lieferte 1,1 g der Titelverbindung.

Das NMR-Spektrum (in DMSO-d_g) zeigte Absorptionen bei 0,70-1,80

246 3 2 5: 6

(m, 34H) , 2,90-3,50 (m, 8H) , 3,93 (s, 1H), 5,10 (s, 2H), 5,23-5,50 (m, 3H), 6,76 (d, 2H), 7,20 (d, 2H), 7,40 (s, 5H), 7,76 (d, 1H) und 8,6 (d, 1H) ppm.

Herstellung F

Chlormethyl-6-/ D-(2-azido-2-phenylacetamido)_7-penicillanat

Eine Lösung von 12,0 g (0,03 Mol) des Natriumsalzes der 6-/ D-(2-Azido-2-phenylacetamido)-penicillansäure in 25 ml Wasser wird mit 100 ml Methylenchlorid und 10,17 g (0,03 Mol) Tetrabutylammoniumhydrogensulfat zusammengebracht. Das Gemisch (pH 3,0) wird auf pH 7,5 mit Nätriumbicarbonat eingestellt, die organische Schicht abgetrennt und die wässrige Schicht mit 2 χ 100 ml Methylenchlorid extrahiert. Die vereinigten organischen Schichten werden (über Na-SO.) getrocknet und das Lösungsmittel eingeengt, um einen festen Rückstand zu ergeben. Der Rückstand wird mit Ethylacetat (300 ml) verrieben, filtriert, der Kuchen mit Ethylacetat, dann mit Ethylether gewaschen und unter Stickstoff zu 16,5 g (89 %) Tetrabutylammoniumsalz getrocknet.

Ein Gemisch aus 12,32 g (0,02 Mol) des obigen Salzes wird mit 70 ml Chlorjodmethan zusammengebracht und das Gemisch über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wird zur Trockne eingeengt und der Rückstand durch Chromatographie an 600 g Kieselgel gereinigt, wobei mit 1:1 (VoI) Ethylacetat/ Hexan eluiert wurde, um 8,1 g (95 %) des gewünschten Chlormethylesters als blaßgelbes, viskoses Öl zu ergeben.

Chlormethyl-6-/ 2-azido-2-(p-hydroxyphenyl)-acetamido_7-penicillanat wird ebenso erhalten.

ό £0 O

Herstellung G

Jodmethyl-6-/ D-(2-azido-2-phenylacetamido)_7-penicillanat

In einem mit Stopfen versehenen Kolben werden 1,27 g (3 mMol) Chlormethyl-6-/~D-(2-azido-2-phenylacetamido)_7-penicillanat, 20 ml Aceton und 2,25 g (15 mMol) Natriumjodid zusammengebracht. Das Gemisch wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt, die anfallende Suspension eingeengt, der Rückstand in 100 ml Ethylacetat aufgenommen, mit 3 χ 30 ml-Wasser, 1 χ 30 ml Salzlösung gewaschen,(über Na„SO.) getrocknet und im Vakuum zu einem blaßgelben Schaum eingeengt. Der Schaum wird durch Chromatographie an 75 g Kieselgel unter Eluieren mit 1:1 (VoI) Ethylacetat/Hexan und unter Auffangen von 20 ml-Fraktionen gereinigt. Die Fraktionen 11 bis 15 werden Vereinigt und im Vakuum zu 1,18 g (76 %) des gewünschten Produkts, einem blaßgelben Harz, eingeengt.

Herstellung H Benzylchlormethyl-adipat

Zu 3 50 ml Bromchlormethan, auf O⁰C gekühlt, werden 67 g (0,14 Mol) Tetrabutylammoniumsalz des Benzyladipat-Halbesters gegeben und das Gemisch über Nacht bei 0 C gerührt, das sich dann auf Raumtemperatur erwärmen kann. Der Überschuß an Bromchlormethan wird im Vakuum abgezogen, 400 ml Ethylether werden dem Rückstand zugesetzt und das Gemisch wird zur Bildung von Kristallen aus Tetrabutylämmoniumbromid gerührt. Die Kristalle werden abfiitriert, mit Ether gewaschen, mit Ethylacetat (300 ml) 1 h gerührt und erneut filtriert und mit Ethylacetat gewaschen. Die vereinigten Filtrate werden im Vakuum eingeengt, der Rückstand durch Chromatographie an Kieselgel (1 kg) unter Eluieren mit 2:1 Hexan/Ethylacetat gereinigt, um 19,1 g (48 %) der Titelverbindung zu ergeben. H-NMR (CDCl₃) ppm (£): 1,58-1,9 (m, 4H), 2,2-2,62 (m, 4H), 5,13 (s, 2H), 5,68 (s, 2H), 7,38 (s, 5H) '.

Die übrigen Benzylchlormethylester der folgenden Formel werden ebenso hergestellt: .

0 0

Il Il '.' ; ' :

CgH₅CH₂OC A-— COCH₂Cl ,

worin A wie in den Beispielen definiert ist.

Herstellung I

6- i^-Hydroxyinethylpenicillansäuresulfon

A) Benzyl-6-brom-6-hydroxymethylpenicilianat

Eine Lösung von 44,9 g Benzyl-6,6-dibrompenicillanat in 600 ml trockenem Tetrahydrofuran wurde auf -78°C gekühlt, und 56,4 ml t-Buty!magnesiumchlorid wurden unter kräftigem Rühren unter einer -inerten Atmosphäre "zugetropft, wobei die Temperatur bei -6O⁰C gehalten wurde. Nach 30 min Rühren bei -78°C wurde die Lösung mit gasförmigem Formaldehyd in einem Stickstoffstrom behandelt, bis 5 Moläquivalente zugesetzt waren. Das Reaktionsgemisch wurde bei -78°C durch Zugabe von 5,7 ml Essigsäure, über 25 min zugetropft, abgeschreckt. Die Reaktionslösung konnte sich auf Raumtemperatur erwärmen und wurde im Vakuum eingeengt. Zum Rückstand wurden 200 ml Wasser und 200 ml Ethylacetat gegeben. Die organische Schicht wurde abgetrennt und die Wasserschicht wieder mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Phasen wurden vereinigt, nacheinander mit Wasser (200 ml), 5 %igem wässrigem Nätriumbicarbonat (200 ml) und Salzlösung (200 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet.Entfernen des Lösungsmittels unter vermindertem Druck liefert 38,2 g des gewünschten Produkts, epimer am C-6.

- ⁸² - Z4D ό ZlD Ό

B) Benzyl-e-brom-S-hydroxymethylpenicillanat-sulfon

Zu einer Lösung von 500 ml Benzyl-e-brom-S-hydroxymethylpenicillanat in 30 ml Methylenchlorid, in einem Eisbad auf 0 bis 5°C gekühlt, wurden 633 mg 85% m-Chlorperbenzoesäure portionsweise über 20 min zugesetzt. Das Reaktionsgemisch konnte·sich auf Raumtemperatur erwärmen und wurde etwa 40 h gerührt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum abgezogen und der Rückstand mit Wasser und Ethylacetat behandelt. Der pH des Gemischs wurde mit einer gesättigten Natriumbicarbonatlösung auf 7,4 eingestellt, und die organische Phase wurde abgetrennt und mit 30 ml frischem Wasser behandelt. Der pH des Gemischs wurde mit gesättigter Natriumbicarbonatlösung auf 8,2 eingestellt und die Ethylacetatschicht abgetrennt und mit einer gesättigten Natriumbicarbonätlösung und einer Salzlösung gewaschen. Die Ethylacetatschicht wurde abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und zu einem Öl (500 mg) eingedampft.

C) 6- e^-Hydroxymethylpenicillansäuresulfon

Eine Suspension von 500 mg 5 % Pd/C und 500 mg Benzyl-6-• brom-e-hydroxymethylpenicillanatsulfat in 200 ml 50 % Wasser/Methanol wurde in einer Wasserstoffatmosphäre bei einem Anfangsdruck von 3,3 bar (48 psii) 20 min geschüttelt. Weitere 500 mg frischen Katalysators wurden zugesetzt und der Wasserstoffdruck auf 3,57 bar (51 psi) eingestellt. Nach einstündigem Schütteln wurde der Katalysator abfiltriert und das Methanol im Vakuum abgezogen. Der pH der zurückbleibenden Lösung wurde auf 8,0 eingestellt, und es wurde mit Ethylacetat extrahiert. Die wässrige Schicht wurde mit 6 η-Salzsäure auf pH 2 angesäuert und das Produkt mit Ethylacetat extrahiert. Entfernen des Lösungsmittels ergab 100 mg des gewünschten Produkts, das aus Chloroform/Ethylacetat, einen Tropfen Dimethylsulfoxid enthaltend, kristallisiert wurde, Schmp. 211-212°C (Zers.).

246 325 6

Das NMR (100 MHz)-Spektrum (DMS0-D_g) zeigte Absorption bei 4,93 (d,1H, J=2Hz), 4,27 (s, 1H), 3,76 (m, 3H), 1,5 (s, 3H) und 1,4 (s, 3H) ppm.

Herstellung J

Benzyl-6-<*-brom-6-ß-(benzyloxycarbonylaminomethyl)-penicillanat und 6-ß-Brom-6- 6C-(benzyloxycarbonyl-aminomethyl) penicillanat ;

Zu einer Lösung von Benzyl-6,6-dibrompenicillanat (108,73 g, 0,242 Mol) in 600 ml trockenem Tetrahydrofuran (THF) auf -78°C gekühlt, wurde eine Etherlösung von Methylmagnesiumbromid (83,5 ml, 2,9m) gegeben. Nach 15 min Rühren bei -78⁰C wurde eine Lösung von Benzyloxycarboxamidomethylacetat (27 g, 0,121 Mol) in 200 ml trockenem iTHF über 10 min zugesetzt. Nach einstündigem Rühren bei-78°C wurde das Reaktionsgemisch durch Zugabe von 14,52 ml Essigsäure abgeschreckt. Das Gemisch wurde auf Raumtemperatur erwärmt und flüchtige Anteile im Vakuum bei Weniger als 35°C entfernt. Ethylacetat wurde zugesetzt, um den Rückstand zu lösen, und die Lösung wurde mit Wasser (100 ml) , wässriger NaHCO₃ (100 ml) und 2 χ 100 ml Wasser gewaschen, dann über Na₃SO₄ getrocknet und im Vakuum zu 113 g öligen Produkts eingeengt. Das Öl wurde an 1,2 kg Kieselgel säulenchromatographiert, wobei zuerst mit 6 1 1:1 Hexan/Chloroform und dann mit Chloroform eluiert wurde. Die ersten 6 1 Eluat wurden verworfen. Weiteres Eluat wurde in 25 ml-Fraktionen aufgefangen. Die Fraktionen 181-190 wurden eingeengt. Das PNMR-Spektrum des Rückstands in CDCl₃ zeigte 3enzyl-6-c<-brom-6-ß-(benzyloxycarbonylaminomethyl) -penicillanat: V" /TMS 1 ,37 (3H, s) , 1,57 (3H-, s) , 3,86 (2H, d, J = 6Hz), 4,42 (1H, s), 5,06 (2H, s), 5,12 (2H, s) , 5,52 (1H, s), 7,25 (1OH, s). Die Fraktionen 201 bis 249 wurden eingeengt und das PNMR-Spektrum dieses Rückstands in CDCl^ zeigte Benzyl-6-ß-brom-6- oc-(benzyloxycarbonylaminomethyl)-penicillanat: d^/TMS 1,36 (3H, s), 1,60 (3H, s), 3,90 (2H, d,

2463 25 6

J =6,2 Hz), 4,47 (1H, s) , 5,07 (2H, s) , 5,14 (2H, s), 5,40 (TH, t, JV= 6,2), 5,47 (1H, s), 7,28 (5H, s), 7,30 (5H, s) . Das Produkt der Fraktionen 171 bis 240 wurde vereinigt und zu 22 g Schaum eingeengt und im nächsten Versuch eingesetzt.

Herstellung K

Benzyl-6-ß-(benzyloxycarbonylaminomethyl)-penicillanat

Zu einer Lösung von Titelprodukt (Epimerengemisch) der Herstellung J (22 g, 0,0413 Mol) in 100 ml Benzol wurde Tri-nbutylzinnhydrid (32,7 ml, 0,124 Mol) gegeben. Das Gemisch wurde unter N₂ 2 h rückflußgekocht, im Vakuum zu einem Öl eingeengt und das öl mit 4 χ 100 ml Hexan verrieben. Das verbleibende viskose öl wurde in 70 ml Ether aufgenommen, woraus das Titelprodukt über 1 h kristallisierte (8,1 g in zwei Ausbeuten) ; PNMR/CDC1₃/cT/TMS: 1,37 (3H, s) , 1,57 (3H, s) , 3,58 (3H, m), 4,34 (1H, s) , 5,04 (2H, s) , 5,12 (2H, s) , 5,33 (1H, d, J = 4Hz) , 7,32 (1OH,'s').

Benzyl-6-c^-(benzyloxycarbonylaminomethyl)-penicillanat wird durch Einengen von Mutterlaugen und Chromatographie gewonnen.

Herstellung L '

Benzyl-6-ß- (benzyloxycarbonylaminomethyl) -penicillanät-1-ocoxid und Benzyl-6-ß- (benzyloxycarbonylaminomethyl) -penicillanat-1-ß-oxid

Zu einer Lösung des Titelprodukts der vorhergehenden Herstellung (4,54 g, 0,01 Mol) in 70 ml Ethylacetat wurde m-Qhlorperbenzoesäure (2,02 g, 0,01 Mol) in 30 ml Ethylacetat gegeben. Das Gemisch wurde 30 min bei Raumtemperatur gerührt, mit 1 χ 50 ml gesättigter NaHCO.,-Lösung und 2 χ 50 ml H₃O gewaschen, über

-es- Z4bJ/D D

Na SO. getrocknet und im Vakuum zu einem viskosen öl eingeengt. Das Öl wurde in 50 ml Ether und 10 ml CHCl₃ gelöst und die Kristallisation des Titel- «r-Oxids durch Kratzen angeregt. /~2,2 g, Schmp. 123-124°C, PNMR/CDC^/<f/TMS 1 ,22 (3H, s) , 1,51 (3H, s), 3,7 (3H, m), 4,34 (1H, s) , 4,63 (1H, d, J= 4Hz) , 5,13 (2H, s),5,22 (2H, s), 5,50 (1H, m), 7,34 (5H, s), 7,40 (5H, s)_7· Einengen der Mutterlauge bis zur Trockne im Vakuum ergab das Titel-ß-Oxid als viskoses Öl /~2,5 g; PNMR/CDCl-j/<f/TMS 1,05 (3H> s), 1,60 (3H, s) , 3,8 (3H, m) , 4,63 (IH, s), 4,73 (1H, d, J = 4 Hz), 5,13 (2H, s),^K5,23 (2H, q) , 5,70 (1H, m), 7,35 (5H, s), 7,39 (5H, s)_7-

Herstellung M

Benzyl-^ö- pC- (benzyloxycarbonylaminomethyl) -penicillanat-1-ß-oxid

Zum Titel-ß-Oxid der vorhergehenden Herstellung (2,3 g, 4,9mMol) in 100 ml CHCl₃ wurde 1 ,5-Diazabicyclo_i/~4,3,0_7non-5-en (DBN, 0,607 g, 4,9 mMol) gegeben. Das Gemisch wurde bei Raumtemperatur 15 min gerührt, mit 15 ml 1 η HCl verdünnt und die Schichten getrennt. Die organische Schicht wurde mit 2 χ 50 ml H_0 gewaschen, über Na₃SO₄ getrocknet und im Vakuum zu einem 01,(2,3 g) eingeengt. Das Öl wurde an 100 g Kieselgel säulenchromatographiert, wobei mit 4:1 CHC^/Ethylacetat in 20 ml-Fraktionen eIuiert-wurde. Die Fraktionen 41 bis 70 wurden vereinigt und im Vakuum zum Titelprodukt, einem viskosen Öl, eingeengt ^~0,9 g; PNMR/CDCI₃/TMS 1,03 (3H, s), 1,60 (3H,s), 3,67 (3H, m) , 4,46 (1H, s) , 4,88 (1H, m) 5,08 (2H, s) , 5;17 (2H, q), 5,39 (1H, m), 7,32 (5H,s), 7,37 (5H, s)_/.

ZAbJZb D

Herstellung N

Benzyl-6-ß-(benzyloxycarbonylaminomethy1)-penicillanat-1, 1-dioxid

Zu einer Lösung des Titelprodukts der Herstellung K (8,0 g, 0,0176 Mol) in 200 ml Ethylacetat, auf 0 - 5°C gekühlt, wurde m-Chlorperbenzöesäure (10,68 g, 0,0528 Mol) gegeben. Das Gemisch wurde auf Raumtemperatur erwärmt, 6 h gerührt, erneut auf 0 bis 5 C gekühlt und mit 50 ml gesättigter NaHSO.,-Lösung verdünnt. Die organische Schicht wurde abgetrennt, mit 2 χ 50 ml gesättigter NaHCO₃-Lösung und 2 χ 50 ml H₃O gewaschen, über Na„S0. getrocknet und im Vakuum zu einem viskosen Öl (8,6 g) eingeengt. Das Öl wurde an 250 g Kieselgel chromatographiert, wobei mit 19:1 CHCl-j/Ethylacetat in 25 ml-Fraktionen eluiert wurde. Die Fraktionen 44 bis 150 wurden vereinigt und im Vakuum zum Titelprodukt, einem weißen, harzartigen Schaum, eingeengt. /~7,6 g; PNMR/CDCl.,/<f/TMS 1,25 (3H, s) , 1,49 (3H, s) , 3,98 (3H,m), 4,45 (1H, s) , 4,59 (1H, d, J= 4Hz), 5,09 (2H, S-) , 5,19 (2H, q) , 5,36 (1H, br), 7,36 (1OH, s)_7.

Herstellung 0

Benzyl-6- oC~(benzyloxycarbonylaminomethyl)-penicillanat-1 , 1-dioxid

Nach der Arbeitsweise der Herstellung M wurde das Titel-1,1-Dioxid der vorhergehenden Herstellung (3,3 g, 6,79 mMol) in das Titelprodukt dieses Beispiels (3,1 g roh) umgewandelt und durch Säulenchromatographie an 150 g Kieselgel unter Eluieren mit 1:9 Ethylacetat/CHCI₃ in 20 ml-Fraktionen gereinigt. Die Fraktionen 26 bis 37 wurden vereinigt und im Vakuum zum gereinigten Titelprodukt eingeengt, einem viskosen öl, das beim Stehen kristallisiert. ^"1 ,9 g; Schmp. 11 2-1.1 3°C; PNMR/CDC1₃/«f / TMS 1,20 (3H, s) , 1,49 (3H, s), 3,65 (3H, m) , 4,32 (1H, s) , 4,59 (1H, m), 5,07 (2H, s), 5,14 (2H, q), 5,30 (1H, br), 7,32 (1OH, s) 7.

Das Titelprodukt dieser Herstellung wurde auch durch weitere Oxidation des Titelprodukts der Herstellung M mit überschüssiger m-Chlorperbenzoesäure nach der Methode der Herstellung N 'erhalten.' : ' ;' ':·.^;; ' . ''. ' ·' . -: . :^: · '^: ...'.,

Herstellung P

6-ß-(Aminomethyl)-penicillansäure-1,1-dioxid

Titelprodukt der Herstellung N (1,9 g), THF (40 ml), H₃O (40 ml) und 10 % Pd/C (1,9 g) wurden zusammengebracht und 1 h bei 3,5 bar (50 psig) Überdruck hydriert. Katalysator wurde durch Filtrieren rückgewonnen und THF aus dem Filtrat im Vakuum abgezogen. Die wässrige Schicht wurde mit 30 ml Ethyläcetat gewaschen, zu einem weißen Pulver gefriergetrocknet und eine erste Kristallausbeute (0,26 g) durch Verreiben des Pulvers mit 5 ml Wasser erhalten. Eine zweite Ausbeute (0,14 g) kristallisierte nach Zugabe von 10 ml Aceton zur Mutterlauge, und eine dritte Ausbeute (0,35 g) durch Einengen der zweiten Mutterlauge auf 2 mliund Zugabe von 50 ml Aceton. Gesamtausbeute an Titelprodukt 0,75 g/~PNMR/25O MHz/D₂0/ ^" /DSS 1,47 (3H, s), 1,59 (3H, s), 3γ74 (2H, m), 4,36 (1H, td, J= 4, 5,5Hz), 4,45 (iH,s), 5,17 (IH, d, J = 4Hz) J.

Um das Kaliumsalz zu erhalten, wird Titelprodukt (1,0 g) in 30 ml Wasser gelöst und in einem Eis/Wasser-Bad gekühlt, 1 Äquivalent 1 η KOH wird zu der gut gerührten Lösung getropft und die anfallende Lösung gefriergetrocknet.

Herstellung Q

6- OC- (Aminomethyl) -penicillansäure-1 ,1 -dioxid

Nach der Methode des vorhergehenden Versuchs wurde Titelprodukt

246325 6

der Herstellung O (1,7 g) in das Titelprodukt dieser Herstellung umgewandelt, mit der Ausnahme, daß kristallines Produkt direkt durch Einengen im Vakuum nach der Ethylacetat-Extraktion erhalten wurde /~0,7 g; PNMR/250 MHζ/D₂O/DSS 1,44 (3H, s) , 1,59 (3H, s)_f 3,63 (2H, d, J =5,5 Hz) 4,07 (1H, td, J = 2, 5,5Hz) 4,31 (1H, s), 5,06 (1H, d, J= 2) J.

Um das Hydrochlorid zu erhalten, wird Produkt (0,7 g) in Wasser (30 ml) gelöst, 1 Äquivalent verdünnte Salzsäure wird zugetropft und die anfallende Lösung gefriergetrocknet.

Um das Natriumsalz zu erhalten, wird Produkt (0,7 gj in Wasser (30 ml) gelöst. Bei 0 bis 5 C wird 1 Äquivalent verdünntes Natriumhydroxid unter kräftigem Rühren zugesetzt und die Lösung gefriergetrocknet. '

Herstellung R ,,

Kalium-2-ß-chlormethyl-2- o^-methyl-3- oc-carboxylat-1 ,1-dioxid

A) 6- oc -Brompenicillansäure-i-oxid

6- oC-Brompenicillansäure-N,N'-difcenzy!ethylendiamin-(DBED) Salz /^Nature, 201, 1124 (1964); J.'org. Chem., 27,2668 (196.2)_7,^Ci 30 g (37,5 itiMol) wird in 330 ml Methylenchlorid" gelöst und auf 0°C gekühlt. 13 ml (156 mMol) konz. Salzsäure werden langsam zugesetzt, und das Gemisch wird 10 min bei 0 bis 5°C gerührt. Das ausgeschiedene DBED.HCl-SaIz wird abfiltriert, wobei mit 150 ml Methylenchlorid gewaschen wird. So schnell wie möglich werden das Filtrat und die Waschlösungen nach ihrer Vereinigung mit kaltem Wasser (60 ml) gewaschen, wobei 5 min gerührt wird, bevor die Schichten getrennt werden. Die organische Phase wird im Vakuum auf 65 bis 80 ml eingeengt und das Konzentrat unter Rühren auf 5°C gekühlt. Über 30 min werden 13 ml (86,9 mMol)

-89 - mu^t j v

40 %ige Peressigsäure bei 15 bis 18°C (Eisbad) zugesetzt. Das anfallende Gemisch wird 2 h bei 0 bis 5°C gerührt, filtriert und der Kuchen mit (10 ml) Wasser von 5°C, Methylenchlorid von 0 bis 5°C und Heptan gewaschen. Der gewaschene Feststoff wird getrocknet, um 16,26 g (73 %) Bromsulfon zu erhalten.

B) p-Nitrobenzyl-6-erf-brompenicillanat-1-oxid

Zu einer Lösung des Produkts des Teils A, 12g (0,04 Mol) in 100 ml Aceton werden 7,5 g (0,041 Mol) Kalium-2-ethylhexanoat gegeben. Das ausgefallene Salz wird abfiltriert, mit kaltem Aceton gewaschen und luftgetrocknet. Das Kaliumsalz (10 g) wird in 75 ml Ν,Ν-Dimethylacetamid gelöst und 7,8 g (0,04 Mol) p-Nitrobenzylbromid werden zugesetzt und ' das Gemisch 24 h.bei 23°C gerührt, mit (500 ml) Wasser gewaschen und mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Extrakte werden mit Wasser gewaschen, (über MgSO.) getrocknet und bei vermindertem Druck eingeengt, um ein öl zu liefern, das beim Stehen kristallisiert. Nach dem Aufschlämmen mit Ether und Filtrieren werden 9 g (70 %) des Esters erhalten, Schmp. 124-125°C (Zers.).

C) p^Nitrobenzyl-2-ß-chlormethyl-2- oC.-methyl-6-brompenam-3- oi -carboxylat

., Eine Lösung von 5 g (0,012 Mol) des obigen Esters in 120 ml wasserfreiem Dioxan wird unter Stickstoff auf Rückfluß mit 1,5 g (0,012 Mol) Chinolin und 1,6 g (0,012 Mol) Benzoylchlorid 4 h auf Rückfluß erwärmt. Das Gemisch wird mit ml Wasser verdünnt und mit Ethylacetat extrahiert. Die Extrakte werden-mit 5 %iger Natriumbicarbonatlösung, 5%iger Phosphorsäure und schließlich mit Wasser gewaschen. Die organische Schicht wird (über MgSO₄) getrocknet und das Lösungsmittel abgedampft. Das verbleibende Öl wird mit Ethylether und kaltem Toluol gewaschen, um Kristalle zu

246325 6

erhalten, 3,5 g, Schmp. 130-135°C (Zers.).

D) p-Nitrobenzyl-2-ß-chlorinethyl-2- o£-methyl-6-brompenam-3-<X.-carboxylat-1-oxid

Zu einer Lösung von 1 g (0,0022 Mol) des Produkts des Teils C in 50 ml Methylenchlorid werden 473 mg (0,0022 Mol) m-Chlorperbenzoesäure gegeben und die Lösung 3 h bei 23°C gerührt. Das Lösungsmittel wird auf 20 ml eingeengt, das Konzentrat mit Heptan (50 ml) verdünnt und das Lösungsmittel dekantiert. Der Rückstand wird mit Ethylether aufgeschlämmt, um Kristalle zu liefern, 250 mg (24 %) , Schmp. 136-137°C (Zers.) .

E) Zu einer Lösung von 7 g (0,015 Mol) des Produkts des Teils P in 150 ml Ethylacetat wird eine Suspension von 4 g 30 % Pd/Diatomeenerde und 2,8 g Natriumbiearbonat in 150 ml Wasser gegeben. Das Gemisch wird bei 3,5 bar (50 psi) 3 h hydriert. Das Gemisch wird filtriert, das wässrige Filtrat wird abgetrennt und mit 1,5 g Kaliumpermanganat in 50 ml Wasser behandelt. Das Gemisch wird 1 h gerührt,: 250 mg Natriumbisulfit werden zugesetzt, und es wird filtriert. Das Filtrat wird mit konz. Salzsäure auf pH 2 eingestellt und lyophilisiert, um ein amorphes Pulver zu ergeben. Das Pulver wird mit Ethylacetat extrahiert, die Extrakte werden auf 20ml eingeengt und mit 100 ml Heptan verdünnt, um festes 2-ß-Chlormethyl-2- <*:-methyl-penam-3- e^-carbpnsäure-1,1-dioxid auszufällen. Die gesammelte Säure wird in Aceton gelöst, mit festem Kalium-2-ethylhexanoat behandelt 'und die ausgefallene kristalline Titelverbindung durch Filtrieren gesammelt, 170 mg, Schmp. 140°C (Zers.).

Analyse: berechnet für gefunden:

C	28	,27;	H	3	, 24 ;	N	4	,12
C	28	,27;	H	3	,69;	N	3	,84

¹H-NMR (D₂O) ppm (S)'. 1,68 (s, 3H), 3,2-3,9 (m, J - 2Hz, J ~ 4Hz, J ^ 6Hz, 2H), 4,0-4,4 (m, 2H) , 4,3 (s, 1H), 5,02 (dd, J ~ 4Hz, J ~ 2Hz, 1H).

Claims (7)

1. Erfindungsanspruch

   1. Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der Formel ;

   ΐ--. f '.' .' .':^;;r-

   RCOCHOC*O 0

   R³/

   R¹CCOCH)_nOC-O
   μ η

   — (I)

   oder eines pharmazeutisch annehmbaren kationischen oder Sau reädditionssalzes hiervon, worin A (C.^-C^ ₂) -Alkylen, (Cj-C₁ Alkyliden, (C^-C₇)-Cycloalkylen, Phenylen, Naphthalin,

   oder das durch Phenyl oder Carboxy substituierte Alkylen oder Alkyliden ist,

   R³ H oder (C₁-C₃)-Alkyl,

   η 0 oder 1,

   R und R verschieden und

   L U, D J L D D

   RP oder B ist,

   wenn η 0 ist, R¹H, (C₁-C₄J-AIlCyI, Benzyl, CH(R³JCl, CH(R³JJ

   oder Tetrabutylammonium ist, und wenn η 1 ist, R P oder B

   !St·, '.; . " . :- ' ; ^;.

   worin R H,

   ist,

   OCH₃

   CO , C₆H₅OCH₂CO , OCH,

   \jr$

   CHCO oder

   _V/y-CHCO ist, COOH

   Q H, NH₀, N^, Benzyloxycarbonylamxno, 4-Nitrobenzyloxycarbonylamino oder i-Methyl-2-methoxycarbonylvinylamino, R H, OH, .'i^:.^C2~^C7^ -'Alkanoyloxy, (C₃-C₇)-Alkoxycarbonyloxy oder R⁵C H.COO ist und R⁵ H, (C₁-C₄J-AlKyI, (C₁-C₄J-AIkOXy, F, Cl, Br oder CN ist und

   X^J

   ⁷CH.

   oder

   CHCH₂OH ²

   worin, wenn Y H ist, X¹ H, CH₂OH oder CH(R⁸)-NH₂ ist, worin R⁸ H oder CHo ist, wenn Y Cl oder CH₃COO ist, X¹ H ist,

   und X³ Cl, Br oder J ist,

   gekennzeichnet dadurch, daß Verbindungen der Formeln

   a. PCOOM und Jl

   XCHOCp=O

   R³ R¹ CCOCH},

   η >

   R³ /

   R¹CCOCH) „0C=0

   oder

   R¹CjCOCHJ OC=O H η

   b. PCOOCHCR³Ix ^unä

   MOC=O

   A oder

   R³/

   R¹CCOCH) OC=O

   C. BCOOCHCR³Ix und

   MOC=O

   A oder

   d. BCOOM und

   R³ XCHOC=O

   AP C 07 D /246 325/6

   at-'-'- '-.'·> 61 809 12

   ^? 2463 25 6

   worin η, A, B, P und B wie oben definiert sind, M ein Carboxylatsalz-bildendes Kation und X eine austretende Gruppe ist, in Gegenwart eines polaren organischen Lösungsmittels zusammengebracht werden und, P oder B eine Q -oder X¹-Gruppe, ausgewählt unter Azido, Benzyloxycarbonylamino, 4-Nitrobenzyloxycarbonylamino oder 1«4Hethyi-2«methoxycarbonylvinylamino, enthält, diese Gruppe in eine Aminogruppe umgewandelt wird.
2. 2. Verfahren nach Punkt 1, gekennzeichnet dadurch, daß das Zusammenbringen bei einer Temperatur von 0 bis 80° C erfolgt und als Lösungsmittel N,N-Dimethylformaraid, sthylacetat, Dichlormethan oder Aoeton verwendet wird.
3. 3. Verfahren nach Punkt 2, gekennzeichnet dadurch, daß die Temperatur 25 bis 50° C beträgt·
4. 4. Verfahren nach Punkt 1, gekennzeichnet dadurch, daß Teil a oder Teil b, wofür η Null, R¹ H, (C₁-G₄)AIlCyI, Natrium, Kalium oder Tetrabutylammonium und R^ H ist.
5. 5. Verfahren nach Punkt 1, gekennzeichnet dadurch, daß Teil c oder Teil d, wofür η Null, R¹ H, (C₁-C₄)AIkJl, Natrium, Kalium oder Tetrabutylammonium und R-* H ist.
6. 6. Verfahren nach Punkt 1, gekennzeichnet dadurch, daß η 1, einer der Reste R und R B und der andere P und R³ H ist.
7. 7. Verfahren nach Punkt 1, gekennzeichnet dadurch, daß R²

   O O

   R⁴—/ y_ CHCO und B ' ^

   ^: 1st. .. . . . . -'i. '

   - -» -

   -tStfi1983*ll3727