DD211921A3 - PROCESS FOR OBTAINING BIOMASS WITH REDUCED NUCLEINE ACID CONTENT - Google Patents

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DD211921A3
DD211921A3 DD24504782A DD24504782A DD211921A3 DD 211921 A3 DD211921 A3 DD 211921A3 DD 24504782 A DD24504782 A DD 24504782A DD 24504782 A DD24504782 A DD 24504782A DD 211921 A3 DD211921 A3 DD 211921A3
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biomass
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nucleic acid
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suspension
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DD24504782A
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Klaus Triems
Engelbert Faulhaber
Barbara Dittrich
Gustav-Adolf Luebbert
Joachim Bauch
Herbert Gentzsch
Original Assignee
Adw Ddr
Vnii Biosinteza Belkovych Vesc
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Abstract

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Gewinnung von Biomasse mit vermindertem Nukleinsaeuregehalt auf Basis n-alkanhaltiger Kohlenwasserstoffgemische und Hefen auf dem Gebiet der Biotechnologie. Das Ziel der Erfindung besteht in der Gestaltung eines Verfahrens zur Gewinnung von Biomasse mit einem verminderten Nukleinsaeuregehalt, das eine breite und ernaehrungsphysiologisch guenstige Anwendung der Biomasse als Futtermittelkomponente in der Tierernaehrung ermoeglicht. Der Erfindung liegt hierbei die Aufgabe zugrunde, ein Verfahren zu entwickeln, das die Herstellung einer Biomasse mit vermindertem Nukleinsaeuregehalt ohne zusaetzliche technisch-oekonomische Massnahmen zur Qualitaetssicherung erlaubt.Erfindungsgemaess wird die Aufgabe so geloest, dass die im Fermentationsprozess gewonnene Biomasse/Kohlenwasserstoffgemisch/Prozesswasser/Luft-Suspension durch einen nachfolgenden Aufrahmungsprozess von einem Teil des Prozesswassers befreit wird und danach bei Anwesenheit eines oberflaechenaktiven Hilfsstoffes erwaermt und die eingestellte Temperatur eine bestimmte Zeit bei einem erhoehten pH-Wert gegenueber dem in der Fermentation gehalten wird. Das unter dieser Kombination von Massnahmen innerhalb des Gewinnungsverfahrens der Biomasse gewonnene Endprodukt stellt eine wertvolle Futtermittelkomponente in der Tierernaehrung dar.The invention relates to a method for obtaining biomass with reduced nucleic acid content based on n-alkane-containing hydrocarbon mixtures and yeasts in the field of biotechnology. The object of the invention is to provide a method for obtaining biomass with a reduced nucleic acid content, which enables a broad and nutritionally favorable use of the biomass as a feed component in animal nutrition. The invention is based on the object to develop a method that allows the production of a biomass with reduced nucleic acid content without additional technical-economic measures for quality assurance. Erfindungsgemaess the object is achieved so that the biomass / hydrocarbon mixture / process water / air obtained in the fermentation process -Suspension is freed by a subsequent creaming process of a portion of the process water and then heated in the presence of a surface active adjuvant and the set temperature is maintained for a certain time at an elevated pH over that in the fermentation. The end product obtained by this combination of measures within the biomass extraction process is a valuable feed component in animal nutrition.

Description

Titel der ErfindungTitle of the invention

Verfahren zur Gewinnung von Biomasse mit vermindertem !nucleinsäuregehaltProcess for obtaining biomass with reduced nucleic acid content

Anwendungsgebiet der ErfindungField of application of the invention

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Gewinnung von Biomasse mit vermindertem nucleinsäuregehalt, die durch eine mikrobielle Konvertierung von n-»alkanhaltigen Kohlenwasserstoffgemischen, insbesondere Erdöldestillaten bzw, -raffinaten mit Hefen gewonnen werden« Sie kann in der mikrobiologischen Industrie angewendet werden.The invention relates to a method for obtaining biomass with reduced nucleic acid content, which are obtained by a microbial conversion of n- »alkane-containing hydrocarbon mixtures, in particular petroleum distillates or, -refins with yeasts« It can be used in the microbiological industry.

Charakteristik der bekannten technischen LosungenCharacteristic of the known technical solutions

Wesentliche Qualitätsmerkmale mikrobiell gewonnener Biomasse werden durch das eingesetzte Substrat, den eingesetzten Produktionsstamm und durch die Züchtungsbedingungen bei aeroben, nicht geschützten Permentationsprozessen bestimmt. Das betrifft solche charakteristischen Eigenschaften, wie den Rohprotein- und Vitamingehalt, den Spurenelementegehalt und insbesondere den Bukleinsäuregehalt· Bei dem zuletzt genannten Merkmal ist davon ausgegangen worden, daß erhöhte ITukleinsäuregehalte in mikrobiell en Biomassen aus ernährungsphysiologischen Aspekten bei ihrem Einsatz als Tierfutterkomponente nicht günstig sind. Mikroorganismen sind aufgrund ihres relativ hohen PhosphorgehaltesEssential quality features of microbially obtained biomass are determined by the substrate used, the production strain used and by the cultivation conditions in aerobic, non-protected per- mation processes. This concerns such characteristics as the Rohprotein and Vitamingehalt, the trace element content and in particular the Bukleinsäuregehalt · The latter feature has been assumed that increased ITukleinsäuregehalte in microbial biomass from nutritional aspects are not favorable in their use as animal feed component. Microorganisms are due to their relatively high phosphorus content

besonders gute Bukleinsäureträger.particularly good Bukleinsäureträger.

Zur Erniedrigung des Bukleinsäuregehaltes in Biomassen bietet der Stand der Technik eine Vielzahl von Verfahren an, die durch eine gezielte nachbehandlung der Biomasse eine Herab-. setzung des Hukleinsäuregehaltes bewirken- Hierbei wird die lukleinsäureentfernung mittels alkalischer Extraktion mit und ohne Zerstören der Zellen durch mechanische Einflüsse sowie mit und ohne Temperaturerhöhung durchgeführt. Das Ziel "solcher Operationen ist dabei meistens die Gewinnung eines Eiweißkonzentrates (lovland, J. Harper, J. M.. und Prey, A. L. Lebensmittelwissenschaft und -technologie 9,> 131 bis 142 (1976).To lower the Bukleinsäuregehaltes in biomass, the prior art offers a variety of methods that by a targeted post-treatment of the biomass a down-. The removal of nucleic acid by means of alkaline extraction with and without destroying the cells is carried out by mechanical influences and with and without temperature increase. The goal of such operations is usually the recovery of a protein concentrate (lovland, J. Harper, J. M .. and Prey, A. L. Food Science and Technology 9,> 131 to 142 (1976).

Diese Verfahren bedeuten die Einführung von zusätzlichen Maßnahmen in das entsprechende Biomassegewinnungsverfahren und stellen eine ökonomisch-technische Belastung dar.These methods mean the introduction of additional measures in the corresponding biomass extraction process and represent an economic-technical burden.

Es sind nur wenige Verfahren bekannt, wo durch geeignete ¥/ahl der Züchtungs- und Aufarbeitungsparameter der Biomasse innerhalb des Gewinnungsverfahrens der Biomasse selbst eine Reduzierung des lukleinsäuregehaltes bewirkt wird. Das betrifft die Zugabe von Hilfsstoffen mit Inhibitorwirkung für die Sukleinsäurebildung im Permentationsprozeß. Außer der zusätzlichen Zugabe eines Hilfsstoffes können damit auch weitere Iebenreaktionen bei der BiomasseZüchtung ausgelöst werden»Only a few processes are known where a suitable reduction of the biomass breeding and processing parameters within the biomass recovery process itself causes a reduction in the nucleic acid content. This concerns the addition of excipients with inhibitory effect for suiquinic acid formation in the permentation process. In addition to the additional addition of an adjuvant, it can also be used to induce further reactions in biomass production »

Ziel der ErfindungObject of the invention

Ziel der Erfindung ist'ein Verfahren zur Gewinnung von Biomasse mit einem verminderten Hukleinsäuregehalt, das eine breite und ernährungsphysiologisch günstige Anwendung der Biomasse als Puttermittelkomponente in der Tierernährung erlaubt.The aim of the invention is a process for obtaining biomass having a reduced huicin acid content, which allows a broad and nutritionally favorable application of the biomass as a putter component in animal nutrition.

Darlegung' des Wesens der ErfindungExplanation of the essence of the invention

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Verfahren zu entwickeln, das die Herstellung einer Biomasse mit vermindertem Nucleinsäuregehalt ermöglicht, ohne daß zusätzliche technisch-ökonomische Maßnahmen zur Qualitätssicherung der Biomasse notwendig sind und der Wertstoffgehalt an Eiweiß und Vitaminen voll erhalten bleibt.The invention has for its object to develop a method that allows the production of a biomass with reduced nucleic acid content, without additional technical and economic measures for quality assurance of the biomass are necessary and the valuable material content of protein and vitamins is fully retained.

Erfindungsgemäß wird die Aufgabe so gelöst, daß die im Fermentationsprozeß gewonnene Biomasse/Kohlenwasserstoff-According to the invention, the object is achieved in such a way that the biomass / hydrocarbonate obtained in the fermentation process

TO gemisch/Prozeßwasser/Luft-Suspension durch einen anschließenden Aufrahmungsprozeß von einem Teil des Prozeßwassers befreit und erwärmt wird und eine bestimmte Zeit bei dieser Temperatur gehalten wird und gleichzeitig der pH-Wert der Suspension gegenüber dem in der Fermentation erhöht wird.TO mixture / process water / air suspension is freed by a subsequent creaming process of a portion of the process water and heated and kept at this temperature for a certain time and at the same time the pH of the suspension is increased over that in the fermentation.

Die Anwendung von erhöhten Temperaturen bewirkt bei Mikroorganismen einen größeren Einfluß auf den gesainten Stoffwechselmechanismus, d, h. sowohl auf den Mineralstoffwechsel als auch auf den Zellstoffwechsel« Eine Beeinflussung von Enzymsynthesen und -aktivitäten und die Synthese sowie der Abbau von Aminosäuren und organischen Säuren ist festzustellen. Die Mikroorganismen erfahren eine Vielzahl von Veränderungen physikalischer und chemischer Art. Es kommt zu einer Beeinflussung des physiologischen Zustandes und der chemischen Zusammensetzung der Biomasse. Dabei ist zu berücksichtigen, daß die Mikroorganismenzelle in der Lage ist, Stoffe zu speichern und solche Stoffe bei Limitationen zu nutzen. Überraschenderweise wurde dabei gefunden, daß es bei diesen Vorgängen graduelle Beeinflussungen bei Antvesen-The use of elevated temperatures causes a greater influence on the metabolic mechanism of microorganisms, d, h. on the metabolism of minerals as well as on cell metabolism "An influence on enzyme syntheses and activities as well as the synthesis as well as the degradation of amino acids and organic acids can be observed. The microorganisms undergo a variety of physical and chemical changes. There is an influence on the physiological state and the chemical composition of the biomass. It should be noted that the microorganism cell is able to store substances and to use such substances in Limitations. Surprisingly, it was found that in these processes, gradual effects on antivenen

heit von oberflächenaktiven Substanzen und je nach der Führung des Temperatur- und Zeit- sowie pH-Fiveaus des Mediums gibt. Diese Permeabilität der Biomasse bei Erwärmung unter Anwesenheit von einem oberflächenaktiven Stoff und einer pH-Wert-Veränderung kann durch die Vorgänge einer Thermolyse, Autolyse, enzymatischen Permeabilisierung und außerdem dertion of surface-active substances and depending on the guidance of the temperature and time and pH levels of the medium. This biomass permeability upon heating in the presence of a surfactant and a pH change may be due to the processes of thermolysis, autolysis, enzymatic permeabilization, and moreover

Permeabilisierung bei Einfluß eines Tensides erfolgen« Der letztere Einfluß ist mit entscheidend für die vollkommenere Permeabilität der Biomasse· ÜTach der Erwärmung der Biomasse suspension 'ist die Biomasse merklich geschrumpft und deformiert. Für die Qualität der Biomasse als auch für die anderen im System befindlichen Stoffe ist von großer Bedeutung, unter welchen konkreten Bedingungen das Verfahren arbeitet. Bei zu langer Erwärmung der Biomasse kommt es zu erheblichen Verlusten an Biomasse und zur Beeinflussung der anderen Stoffe im System.Permeabilization takes place under the influence of a surfactant "The latter influence is decisive for the more perfect permeability of the biomass. After the heating of the biomass suspension, the biomass is markedly shrunk and deformed. For the quality of the biomass as well as for the other substances in the system, it is of great importance under which concrete conditions the process works. Excessive warming of the biomass leads to significant losses of biomass and to the influence of other substances in the system.

Ss wurde desweiteren überraschenderweise gefunden, daß bei Vorliegen eines Systems Biomasse/Kohlenwasserstoffgemisch/ Prozeßwasser/Luft, erhalten durch die nichtgeschützte, aerobe Züchtung einer Hefe auf einem Kohlenwasserstoffgemisch im Siedebereich von 513 K bis 633 K und einer Teilentwässerung der Suspension durch einen nachfolgenden Aufrahmungsprozeß durch Zusatz eines Tensides bei gleichzeitiger Erwärmung der Suspension auf 338 K bis 363 K, vorzugsweise 353 K bis 353 K und der Haltung der Temperatur über 5 bis 40 Minuten, vorzugsweise 10 bis 25 Minuten sowie einem pH-Wert des Mediums zwischen 5 und 6 ein erhöhter Austritt von Nukleinsäuren aus der Biomasse in das Prozeßwasser erreicht wird, so daß die im Verfahren gewinnbare Biomasse einen verminderten Hukleinsäuregehalt aufweist.It was also surprisingly found that in the presence of a system biomass / hydrocarbon mixture / process water / air, obtained by the unprotected, aerobic breeding of a yeast on a hydrocarbon mixture in the boiling range of 513 K to 633 K and a partial dewatering of the suspension by a subsequent creaming process by addition a surfactant with simultaneous heating of the suspension to 338 K to 363 K, preferably 353 K to 353 K and the attitude of the temperature over 5 to 40 minutes, preferably 10 to 25 minutes and a pH of the medium between 5 and 6, an increased outlet of nucleic acids from the biomass is achieved in the process water, so that the obtainable in the process biomass has a reduced Hukleinsäuregehalt.

Das führt zu einer entscheidenden Qualitätssteigerung der Biomasse und damit zur Verbesserung der Applikation des Produktes als Puttermittelkomponente aus ernährungsphysiologischer Sicht, Die technisch-ökonomischen Aufwendungen sind dabei gegenüber anderen zusätzlichen Maßnahmen im Verfahren zur Herabsetzung des Uukleinsäuregehaltes gering. Die in das Prozeßwasser abgegebenen Nukleinsäuren dienen gleichzeitig als Substrat für eine den Gesamtprozeß fördernde, sich auf einem bestimmten ' Hiveau befindliche bakterielle Begleitflora, indem diese akzessorischen Substanzen für das Wachstum der Produktionskultur bereitstellt. Eine Stabilität der Wachstumsgeschwindigkeit und der Wertstoffgewinnung, vor allem des Rohprotein-This leads to a decisive increase in quality of the biomass and thus to improve the application of the product as Puttermittelkomponente from a nutritional point of view, the technical-economic expenses are low compared to other additional measures in the process for reducing the Uukleinsäuregehaltes low. At the same time, the nucleic acids released into the process water serve as a substrate for an overall process-promoting bacterial accompanying flora at a certain level, by providing accessory substances for the growth of the production culture. Stability of the growth rate and the recovery of valuable material, especially the crude protein

und Vi taming ehalte s der Bioinasse, ist dabei festzustellen. An den nachstehenden Beispielen ist die Erfindung näher erläutert. and Vi taming content of the bioinasse is to be ascertained. The invention is explained in more detail in the following examples.

Beispiel 1example 1

In einem Yersuchsrührfermentor mit einem Gesamtvolumen von 250 et und einem Arbeitsvolumen von 90 t werden in einem ungeschützten, aeroben und kontinuierlichen Prozeß Hefen des Stammes Lodderomyces elongisporus -BIET H 128 auf einer Erdöldestillatfraktion vom Siedebereich 513 K bis 633 K ge-'."O züchtet. Der n-Alkangehalt im eingesetzten Erdöldestillat be-. trägt 16,5 Ha.-%. Die l?ermentationstemperatur ist 306 K, der pH-Wert beträgt 4,2. Die.-spezifische Begasungsintensität beträgt 63OO nr/h, die Energieaufnahme 250 kW. Die Verweilzeit beträgt 5 Stunden, Die Bahr- und Spurensalze werden in Form von zwei Lösungen in den Jermentationsprozeß eingetragen. Hierbei beinhaltet die 1. liährlösung eine 15 %ige Kaliümchloridlösung, die 2.. -Nährlösung eine aus den Medien Magnesiumsulfat, Kupfersulfat, Zinksulfat, Mangansulfat, Eisen-III-chlorid, Phosphorsäure und Wasser bestehende Salzlösung, Entsprechend der im kontinuierlichen Prozeß angestrebten Produktivität und den nachfolgenden spezifischen Verbrauchswerten werden die notwendigen Dosiermengen an lährlösungen zugegeben. Spezifische Verbrauchskennziffem der Hahr- und Spurensalze:In a Yersuchsrührfermentor with a total volume of 250 et and a working volume of 90 t in an unprotected, aerobic and continuous process yeasts of the strain Lodderomyces elongisporus -BIET H 128 on a petroleum distillate fraction boiling 513 K to 633 K ge '' "O cultivated The n-alkane content in the used petroleum distillate amounts to 16.5 ha .-% The fermentation temperature is 306 K, the pH is 4.2 The die-specific fumigation intensity is 6300 nr / h, the energy absorption 250 kW The residence time is 5 hours The Bahr and trace salts are entered in the form of two solutions in the Jermentationsprozeß.Herein, the first liährlösung contains a 15% Kaliümchloridlösung, the 2 .. -Nährlösung one from the media magnesium sulfate, copper sulfate , Zinc sulfate, manganese sulfate, ferric chloride, phosphoric acid and water-existing saline solution, According to the productivity aimed at in the continuous process and the n The following specific consumption values are added to the required dosing quantities of leaching solutions. Specific consumption indices of trace and trace salts:

Element ' spezifischer Verbrauchswert g Element/kg HefetrockensubstanzElement 'specific consumption value g element / kg yeast dry matter

P 18P 18

K 20K 20

Mg 0,94Mg 0.94

Fe 0,02Fe 0.02

.Cu 0,03.Cu 0.03

Mn 0,16Mn 0.16

Zn 0,22Zn 0.22

In das wäßrige Kulturmedium wird zur Intensivierung des Fermentationsprozesses ein Hilfsstoff von der Struktur eines Propylenoxid-ethylenoxidaddukts in einer Konzentration von 600 mg/1 wäßriges Kulturmedium zugegeben* Es ergibt sich im Fermentationsprozeß eine Produktivität von 3,6 kg Hefetrockensubstanz/t»h«In order to intensify the fermentation process, an adjuvant of the structure of a propylene oxide ethylene oxide adduct in a concentration of 600 mg / 1 aqueous culture medium is added to the aqueous culture medium. The productivity of the fermentation process is 3.6 kg of yeast dry matter / t »h«

Das Yierphasengemisch Erdoldestillat/Biomasse/Prozeßwasser/ luft wird in einem geeigneten Trennapparat einem Aufrahmungsprozeß unterzogen, wobei 60 % des Prozeßwassers abgetrennt werden kann« Febea weiteren StoffWechselprodukten, wie Eiweißbruchstücken, Fettsäuren, koh'lehydrathaltigen Substanzen enthält das abgetrennte Prozeßwasser auch 230 mg Nukleinsäuren/ 1 Prozeßwasser« Zur restlichen Erdöldestillat/Biomasse/Prozeßwasser/Luft-Suspension führt man wiederum.ca· 0,8 g des vor-' stehend genannten Hilfsstoffes zu und erwärmt die Suspension auf 353 K bis 358 K, wobei diese Temperatur 15 Minuten einwirkt· Durch diese Maßnahme werden gleichzeitig Inhaltsstoffe der Hefezellen, vorzugsweise Kaliumionen, ausgeschieden,, so daß ohne Zugabe weiterer Hilfsmittel ein Anstieg des pH-Wertes der Suspension auf pH 5,3 erreicht wird« Unter diesen Bedingungen erfolgt eine bevorzugte Extraktion der Nukleinsäuren, und der Gehalt an Bukleinsäuren im Prozeßwasser beträgt dann 810 mg/1.The Yierphasengemisch Erdoldestillat / biomass / process water / air is subjected in a suitable separation apparatus a Aufrahmungsprozeß, wherein 60 % of the process water can be separated «Febea other metabolites, such as protein fragments, fatty acids, koh'lehydrathaltigen substances, the separated process water also contains 230 mg of nucleic acids / 1 Process water "To the remaining petroleum distillate / biomass / process water / air suspension is again .ca. 0.8 g of the above-mentioned auxiliary substance and the suspension is heated to 353 K to 358 K, wherein this temperature is applied for 15 minutes this measure, at the same time ingredients of the yeast cells, preferably potassium ions, excreted, so that without addition of additional aids, an increase in the pH of the suspension to pH 5.3 is reached. "Under these conditions, a preferred extraction of nucleic acids, and the content of Buccinic acids in the process water is then 810 mg /. 1

Dieser Anteil entspricht einer Abnahme des Fukleinsäurege- ~25 haltes in der Hefebiomasse um ca* 20 %. This proportion corresponds to a decrease of the content of the nucleic acid in the yeast biomass by approximately 20 %.

Die aufkonzentrierte Biomasse-Suspension wird durch Yakuumeindampfung weiter angereichert und anschließend in einem Düsemspruhtrocknungsprozeß getrocknet. Durch eine extraktive Reinigung der Hefetrockensubstanz in einer Gegenstromdrehscheibenextraktionsanlage bei 313 K mit einem Extraktionsmittelgemisch Benzin-Ethanol-Wasser (80-19-1 Tol-jS) werden die restlichen Kohlenwasserstoffe und der größte Teil der Lipide aus der 3iomasse entfernt« Das Extraktionsmittelgemisch wird durch eine zweistufige thermisehe Trocknung aus der Biomasse entfernt und ein Endprodukt mit einem hohen Rohproteingehalt, einem verminderten Bukleinsäuregehalt und einer hohen Verdaulichkeit erhalten.The concentrated biomass suspension is further enriched by Yakuumeindampfung and then dried in a Düsemspruhtrocknungsprozeß. By extractive purification of the yeast dry matter in a countercurrent rotary screen extraction unit at 313 K with an extractant mixture gasoline-ethanol-water (80-19-1 Tol-jS) the remaining hydrocarbons and most of the lipids are removed from the 3iomasse «The extractant mixture is by a two-stage thermic drying removed from the biomass and a final product with a high crude protein content, a reduced Bukleinsäuregehalt and a high digestibility obtained.

Charakteristische Keimzahlen der Biomasse, bezogen auf Trockenurodukt (Ma*-%)Characteristic germ counts of the biomass, based on dry uroduct (Ma * -%)

Aussehen: beige bis hellbraun Rohproteingehalt: 62,1Appearance: beige to light brown. Crude protein content: 62.1

Besatz: ohne Gefüge: nicht klumpig Geruch: arteigen Aschegehalt: 6,4 FeuchtegBhalt: 8,2Trimming: without texture: not lumpy odor: typical ash content: 6.4 moisture content: 8.2

Lysingehalt:Lysine content: 7,87.8 Methioningehalt:methionine: 1,51.5 HukleinsäuregehaltHukleinsäuregehalt : 7,2: 7.2 Phosphorgehalt:Phosphorus content: 1,31.3 biologische Werbiological who tigkeit:ACTION: 8888

Beispiel 2Example 2

Die Gewinnungsbedisgungen für die aufkonzentrierte Biomassesuspension nach dem Aufrahmungsprozeß entsprechen denen im Beispiel 1. Im Prozeßwasser nach der Aufrahmung· des Erdöldestillat/Biomasse/Prozeßwasser/Luf t-Geinisches sind 260 mg Sukleinsäure/1 Prozeßwasser. Der Einfluß der Srwärmungstemperatur und ihrer Dauer bei Anwesenheit eines oberflächenaktiven Hilfsstoffes und einem gleichzeitig angestiegenen pH-Wert in Form eines Kombinationsregimes von Maßnahmen für die Bukleinsäureausschüttung aus der Biomasse zeigt folgendes Untersuchungsbild» Hierbei wurde . eine durcS Aufrahmung erhaltene aufkonzentrierte Biomassesuspension durch die Behandlung im Temperaturbereich 313 K bis 363 K in einem Umlaufthermostaten beeinflußt. Durch Rühren wurde ein Temperaturausgleich und eine Homogenität der Versuchssuspension herbeigeführt. Das Aufgerahmte wurde vorher mit 0,6 g Propylenoxidethylenozidaddukt/kg Aufgerahmtes in Form einer 10 %igen Lösung versetzt* Durch weitgehend gleiche Yersuchsbedingungen wurden Fremdeinflüsse reduziert. Die Phasenzusammensetzung des Aufgerahmten betrug 2,34 Ma*-% Hefetrockensubstanz, 19,87 Ma*-% Erdöldestillat und 77,79 Ma*-% Proseßwasser.The recovery conditions for the concentrated biomass suspension after the creaming process are the same as in Example 1. In the process water after frying the petroleum distillate / biomass / process water / air t-gereinish are 260 mg suiquinic acid / 1 process water. The influence of the surface temperature and its duration in the presence of a surface-active auxiliary and a simultaneously increased pH in the form of a combination regime of measures for the distribution of bile acid from the biomass is shown by the following investigation. a suspension of biomass suspension obtained by treatment in the temperature range 313 K to 363 K in a circulating thermostat affected. By stirring, a temperature compensation and homogeneity of the test suspension was brought about. The cream was previously mixed with 0.6 g propylene oxide ethylene oxide adduct / kg Aufgefahmtes in the form of a 10% solution * By similar conditions Yersuchsbedingungen foreign influences were reduced. 2.34 The phase composition of creamed was Ma * -% yeast dry matter, 19.87 Ma * -% petroleum distillate and 77.79 Ma * -% Proseßwasser.

Bach der Behandlung der Suspension in Abhängigkeit von der Temperatur und Zeit wurden die Prozeßwässer durch Zentrifugation der Suspension bei 15 000 U/min und Filtration über eine G S-^ritte zur Abtrennung der Biomasse gewonnen· In den Prozeßwässern wurde der Hukleinsäuregehalt UY-spektralphotometrisch bestimmt. Die Ergebnisse sind in nachfolgender Tabelle wiedergegeben.Bach the treatment of the suspension as a function of temperature and time, the process waters were obtained by centrifuging the suspension at 15,000 rev / min and filtration over a G S ^ ritte to separate the biomass · In the process waters the Hukleinsäuregehalt UY was determined spectrophotometrically , The results are shown in the following table.

Im Vergleich sind die lukleinsäurewerte von demselben Produkt aus dem technischen Versuch aufgeführt.In comparison, the nucleic acid values of the same product from the technical experiment are listed.

Tabelle: Sukleinsäuregehalt in Abhängigkeit von der Behandlungstemperatur und -zeit von Biomassesuspension Table: Suucleic acid content as a function of the treatment temperature and time of biomass suspension

Probebezeichnungsample name Behandlungs bedingungenTreatment conditions Sukleinsäure- gehalt (mg Hukleinsäure/ ' 1 Prozeßwasser)Succinic acid content (mg huicinic acid / 1 process water) pH-WertPH value Prozeßwasserprocess water aus Aufrahmungfrom creaming 260260 4,24.2 Prozeßwasser ausProcess water off Aufkonzentrierungconcentration durch Wärme/Zeit-by heat / time Behandlungtreatment 895895 5,85.8 Aufgerahmte BioFramed organic 30 min = t30 min = t massesuspensionmass suspension pH-Wert: 5,4pH value: 5.4 bis 5,8to 5.8 313 E313 E ' 410'410 4,64.6 323 K323 K 462462 4,84.8 333 K333 K 775775 5,25.2 343 K343 K 826826 -5,6-5.6 353 K353 K 889889 5,85.8 363 K363K 898898 5,95.9 353K=T353K = T

10 min 10 min 821821 20 min20 min 905905 30 min30 min 912912 40 min40 min 914914

Probebezeichnung Behandlungs- Bukleinsäuregehalt pH-WertSample name Treatment - Buccinic acid pH value

bedingungen (mg lukleinsäure/conditions (mg nucleic acid /

1 Prozeßwasser)1 process water)

Aus den Versuchsergebnissen ist die eindeutige Abhängigkeit der ITukleinsäureausschüttung aus der Biomasse in Abhängigkeit von Temperatur und Zeit unter den Bedingungen einsr den Permeabilisierungsprozeß unterstützenden Tensidzugabe vor der Erwärmung und einer pH-Werterhöhung des Mediums sichtbar«From the test results the clear dependence of the ITukleinsäureausschüttung from the biomass as a function of temperature and time under the conditions of the permeabilization process supporting surfactant addition before heating and a pH increase of the medium visible «

Beispiel 3Example 3

Bei Anwendung der im Beispiel 1 angegebenen prinzipiellen Fermentations-, Aufarbeitongs- und Reinigungsbedingungen unter den" Bedingungen der Maßstabsvergrößerung bei Butzung eines zweitägigen .Produktionstauchstrahlf ermentors mit einem Bruttovolumen von 2200 nr sowie einer Erwärmungstemperatur von 353 K bis 358 K der durch eine Aufrahmung vorentwässerten Biomassesuspension über einen Zeitraum von 25 Minuten, werden folgende Uukleinsäurewerte in den abgetrennten Prozeßwässern erhalten:When using the stated in Example 1, the main fermentation, Aufarbeitongs- and cleaning conditions under the "conditions of scaling up when using a two-day .Endungs-auchauchstrahlf ermentors with a gross volume of 2200 nr and a heating temperature of 353 K to 358 K by pre-drained biomass suspension over a period of 25 minutes, the following Uukleinsäurewerte be obtained in the separated process waters:

Prozeßwasser nach der Aufrahmung 215 mg lukleindes Vierphasengemisches säure/1 Prozeß-Process water after creaming 215 mg lukleindes four-phase mixed acid / 1 process

wasser  water

Prozeßwasser nach der Erwär- 910 mg Uukleinmung der Biomassesuspension säure/1 ProzeßwasserProcess water after heating 910 mg Uukleinmung the Biomassesuspension acid / 1 process water

Das erzeugte Endprodukt weist folgende charakteristische Keimzahlen auf: .The end product produced has the following characteristic germ counts:.

Charakteristische Kennzahlen der Biomasse, bezogen auf Trockenprodukt (Ma·-9S)Characteristic figures of the biomass, based on dry product (Ma · -9S)

Aussehen: beige bis hellbraun Rohproteingehalt: 62,6 Besatz: ohne . Lysingehalt: 7,4Appearance: beige to light brown Crude protein content: 62.6 Trimming: without. Lysine content: 7.4

Gefüge: nicht klumpig Methioningehalt: 1,4 Geruch: arteigen Bukleinsäuregehalt:6,7Microstructure: not lumpy Methionine content: 1.4 Odor: Typical Buccinic acid content: 6,7

Phosphorgehalt: 1,1 . biologische WerPhosphorus content: 1.1. biological who

tigkeit: 87Activity: 87

Claims (1)

ErfindungsansOruchErfindungsansOruch Verfahren zur Gewinnung von Biomasse mit vermindertem Fukleinsäuregehalt, die durch Züchtung von Hefen auf n-alkanhaltigen Kohlenwasserstoffgemischen, insbesondere Erdöldestillaten bzw» -raxfinaten erhalten wird und die durch einen Aufrahnprozeß vorentwässert wurde, dadurch gekennzeichnet, daß die vorentwässerte Biomassesuspension mit einem nichtionogenem Tensid vom Typ PropylenoxLd Ethylenoxid - Addukt in einer Menge von 0,2 bis 1,2 g/fej Biomassesuspension versetzt, auf 338 K bis 363 K erwärmt und diese Temperatur 5 bis 40 Minuten gehalten wird, wobei in bekannter Weise in einem pH-Bereich von 5 - δ gearbeitet wird.Process for the production of biomass with reduced nucleic acid content obtained by cultivating yeasts on n-alkane-containing hydrocarbon mixtures, in particular petroleum distillates or extrinses, which has been pre-dewatered by a creaming process, characterized in that the pre-dewatered biomass suspension is admixed with a nonionic surfactant of the type propylene oxide Ethylene oxide adduct in an amount of 0.2 to 1.2 g / fej Biomassesuspension, heated to 338 K to 363 K and this temperature is maintained for 5-40 minutes, wherein in a known manner in a pH range of 5 - δ is working.
DD24504782A 1982-11-19 1982-11-19 PROCESS FOR OBTAINING BIOMASS WITH REDUCED NUCLEINE ACID CONTENT DD211921A3 (en)

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