DD213066A1 - Verfahren zur bestimmung der aktivitaet von marker-enzymen beim enzymimmunoassay - Google Patents
Verfahren zur bestimmung der aktivitaet von marker-enzymen beim enzymimmunoassay Download PDFInfo
- Publication number
- DD213066A1 DD213066A1 DD24663782A DD24663782A DD213066A1 DD 213066 A1 DD213066 A1 DD 213066A1 DD 24663782 A DD24663782 A DD 24663782A DD 24663782 A DD24663782 A DD 24663782A DD 213066 A1 DD213066 A1 DD 213066A1
- Authority
- DD
- German Democratic Republic
- Prior art keywords
- enzyme
- activity
- marker
- electrode
- enzymes
- Prior art date
Links
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 title claims abstract description 36
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 title claims abstract description 36
- 230000000694 effects Effects 0.000 title claims abstract description 23
- 239000003550 marker Substances 0.000 title claims abstract description 22
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 30
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 claims description 7
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 claims description 7
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 5
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 4
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 claims description 3
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 claims description 3
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 claims description 3
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 claims description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 3
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 claims description 3
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 claims description 3
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 claims description 2
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 claims description 2
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 claims description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 claims description 2
- 102000002464 Galactosidases Human genes 0.000 claims 1
- 108010093031 Galactosidases Proteins 0.000 claims 1
- 150000002926 oxygen Chemical class 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 230000008659 phytopathology Effects 0.000 abstract description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 108010061951 Methemoglobin Proteins 0.000 description 3
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 3
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 3
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 description 2
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 2
- 229960000301 factor viii Drugs 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 1,2-phenylenediamine Chemical compound NC1=CC=CC=C1N GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102100026189 Beta-galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- NBSCHQHZLSJFNQ-GASJEMHNSA-N D-Glucose 6-phosphate Chemical compound OC1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O NBSCHQHZLSJFNQ-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- VFRROHXSMXFLSN-UHFFFAOYSA-N Glc6P Natural products OP(=O)(O)OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O VFRROHXSMXFLSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010073178 Glucan 1,4-alpha-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- 102100022624 Glucoamylase Human genes 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- BTIJJDXEELBZFS-QDUVMHSLSA-K hemin Chemical compound CC1=C(CCC(O)=O)C(C=C2C(CCC(O)=O)=C(C)\C(N2[Fe](Cl)N23)=C\4)=N\C1=C/C2=C(C)C(C=C)=C3\C=C/1C(C)=C(C=C)C/4=N\1 BTIJJDXEELBZFS-QDUVMHSLSA-K 0.000 description 1
- 229940025294 hemin Drugs 0.000 description 1
- 229960000900 human factor viii Drugs 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Messung der Aktivitaet von Marker-Enzymen in einem gekoppelten System von Enzymimmunoassay mit amperometrischen Elektroden. Das Verfahren ist fuer die Messung der Aktivitaet von Marker-Enzymen in Enzymimmunoassays im klinischen Labor, der Veterinaermedizin, der Phytopathologie und der biowissenschaftlichen Forschung geeignet.
Description
Dr. R. Rennaberg ,
Dr. W. SchöSler " :
Dr. M. Gänchen
"Verfahren zur Bestimmung der Aktivität von Marker-Enzymen beim Enzymimmunoassay" . .
Anwendungsgebiet der Erfindung
Die Erfindung betrifft"ein Verfahren zur Bestimmung der Akti- (~ vität von Marker-Enzyraen beim Enzymimmunoassay (EIA). Das Verfahren ist besonders für den Einsatz in klinischen Labors, in der Veterinärmedizin, der Phytopathologie und der biowissenschaftlichen Forschung geeignet.
Charakteristik der: bekannten technischen„ ,Löjs^nasji Grundprinzip des EIA ist eine.Äntigen-Antikörper-Reaktion, bei der einer der Reaktionspartner an ein Enzym gekoppelt ist (Konjugat), dessen enzymatische Aktivität als Nachweiskri.terium der immunologischen Reaktion fungiert. Für die Bestimmung von Antigenen oder Antikörpern gibt es eine Vielzahl von Varianten des EIA.'So können sowohl die Antigene als auch die Antikörper an eine feste Phase adsorbiert werden (ELISA-Tech- y. nik) als auch in homogener Phase (EMIT-Technik) bestimmt .werden« Einige Varianten des EIA verwenden einen weiteren speziesspezifischen Antikörper, der an ein Enzym gekoppelt ist, zum Nachweis der Antigen-Antikörper-Reaktion. Die Aktivität der Marker-Enzyme wird über die Messung des Substratumsatzes in der.Mehrzahl der. EIA spektralphotometrisch bestimmt« Das hat vor allem bei der EMIT-Technik den Nachteil, daß Trübungen und die Eigenfarbe der Probe oder von Nachweisreagenzien die Messung stören«, Bei einer Reihe von Assays sind zudem teure Hilfsenzyme, Kofaktoren und Substrate
η Q
nötig, um das Reaktionsprodukt der markeranzyrakatalysierten Reaktion in ein spektral gut auswertbares Produkt umzuwandeln. Weiterhin ist die Bestimmung der Aktivität des Marker-Enzyms mit Thermistoren (Börrebaeck, C«, Börjeson, 3., Mattiasson, B., Clin. Chim. Acta (1978), 86, 267), fluorimetrisch (Aikawa, T., Suzuki, S., Murayama, H., Hashiba, K., Kitagaw/a, Τ«, Ishikavsa, E., Endocrinol. (1979), 105, 1) und durch Chemolumineszenz (Velan* 3», Halraann, M*, Immunochemistry (1978) 15, 331) bekannt» Andererseits wurden Enzymiiamunosensoren entwickelt.(Aizawa, M,, Marioka, A., Suzuki, S., Nagamura, Y., Anal, Biochem. (1979) 94, 22)'; bei denen ein elektrochemischer Sensor mit einer Membran bespannt wird, an der Antikörper immobilisiert sind. Gemessen wird bsi diesen Sensoren die Aktivität der an der antikörperbeschichteten Membran über die Antigene gebundenen Marker-Enzyme· Unvorteilhaft ist hierbei, daß der Probendurchsatz von der Dauer aer Inkubation in der Meßzelle (bis zu mehreren Stunden)limitiert ist. Eine Verwendung der Enzyrairamunosensoren für serienmäßige Schnellbestitnmungen ist dadurch nicht möglich. Sakannt ist auch die Auswertung von EIA mit Hilfe potentiometrischer Elektroden (Meyerhoff, M. E*, Recnnitz, G. Ae# Anal. Biochenu (1979) 95, 483, Alexander, D. W., Maltra, C, Anal. Chenu (1982) 54, 82). Dabei erfolgt die Inkubation außerhalb 'der Meßzelle und die Bestimmung der Aktivität von i>Iarker-Enzymen durch Probenahme, Dar Nachteil der potentionietrischen Bestimmung liegt jedoch in der langen Einstellzeit der Elektrode (10 bis 20 min), die dadurch keine serienmäßigen Schhellbestiromungen erlaubt.
Ziel dar Erfindung
Ziel-der Erfindung ist es, die Nachteile der bekannten Lösungen zu umgehen und ein Verfahren zu entwickeln, das die Bestimmung der Aktivität von Marker-Enzyrnen im Enzymimmunoassay mit hoher Genauigkeit, hohem Probendurchsa-tz, unabhängig von
ί~\ ί'1 ίϋ :" > Γ·
den optischen Eigenschaften der Probelösungen ohne oder mit stark verringertem zusätzlichen Verbrauch von Hilfsenzyraen und ohne zusätzliche Kofaktoren oder Farbstoffe gestattet.
Darlegung des Wesens der Erfindung
Die Aufgabe der Erfindung besteht darin, die Aktivität von Marker-Enzyraen durch amperornetrische Methoden schnell und exakt zu bestimmen. Die Aufgabe wird dadurch gelöst, daß nach einer Vorinkubation außerhalb der Heßzelle der Substratuasatz durch das'Marker-Enzyra in einer Meßzelle arnperosoetrisch direkt mit einer Sauerstoffelektrode oder aber nach Umwandlung eines elektroinaktiven Reaktionsproduktes in elektroaktive Produkte durch immobilisierte Enzyme mit einer Enzymelektrode bestimmt wird»
Bei der Messung der Aktivität des Marker-Enzyms mittels einer Sauerstoffelektrode werden als Harker-Enzyme zweckmäßigerweise Katalase, Peroxidase.f Glukoseoxidase, Hämoglobinderivate und Hämin© verwendet·
Zur Messung der Aktivität des, Marker-Enzyms mit einer Enzymelektrode werden ß-Galactosidase, alkalische Phosphatase und Glucoamylase benutzt. - -
Das erfindungsgemäSe Verfahren arbeitet mit hoher Genauigkeit und ermöglicht einen schnellen Probendurchsatz« Die optischen Eigenschaften der Probelösungen spielen hierbei keine Rolle* Zusätzliche Hilfsenzyme, Kofaktoren oder Farbstoffe sind nicht erforderlich*
Die Erfindung wird nachstehend an zwei Ausführungsbeispielen erläutert*
, , , η η λ η η π U. O Q O Α.{\ ί'-
1» _Beisplel . . '
Amperomeirische Messung der Aktivität das Marker-Enzyms alkalische Phosphatase im Enzymimmunoassay zur Bestimmung von
Faktor-yill-Anticien '
Polystyrolröhrchen werden adsorptiv mit Faktor VIII-Antigen (5 ,ug/tnl) beschichtet und nachfolgend dreimal mit PBS-Puffer, pH = 8,0, der 0,1 % Tween 20, 0,5 ra NaCl enthält, gewaschen. Anschließend wird ein Inkubationsgeraisch (0,5 ml), bestehend aus dem zu bestimmenden Plasma und einem ira Überschuß vorhandenen Kaninchen-anti-human-FaktorVIII-Antikörper, in die Polystyrolröhrchen überführt und 5 h bei 37°C stehengelassen. Nach erneutem dreimaligem Waschen werden 0,5 ml eines Konjugats (3 ,ug/ral) - bestehend aus einem Hammel-anti-Kaninchen-IgG-Antikörper, der mittels Glutaraldehyd an das Enzym alkalische Phosphatase gebunden wurde - zugegeben und nach mehrstündiger Inkubation und nachfolgendem Auswaschen die Enzymaktivität bestimmt. Hierzu wird über den Mantel einer Sauerstoff elektrode ein Dialyseschlauch gespannt, auf den eine Enzymraembran, die 40 U/cm Glukoseoxidase (GOD) in Gelatine enthält, gelegt wird. Diese Enzytnmembran wird mit einem weiteren Dialyseschlauch zur Lösungsseite hin befestigt. Die so präparierte Elektrode taucht in die gerührte Pufferlösung ein (Na-Phosphatpuffer, pH 7jO). Nach einer entsprechenden Inkubationszeit mit 10 mii Glucose-6-phosphat in den Teströhrchen des EIA, während der das Substrat vora Marker-Enzym alkalische Phosphatase (AP) in 2 ml Diäthanolarainpuffer (pH 9,8) umgesetzt wird:
^lP
Glukose-6-Phosphat —i-ί—~£» Glukose +. Phosphat
wird die'Reaktion im Teströhrchen durch Zugabe von 50 ,ul · konzentriertervHCl-Lösung abgestoppt«, 0^5 ml der Reaktionslö sung werden in die elektrochemisch© Meßzelle verbracht. Der Abfall das kathddischen Stromes (Op-Vsrbrauch) bzw. der An-
i Π R 9. η ü \)
stieg des anodischen Stromes (H202-3ildung) ist der Konzentration der durch die alkalische Phosphatase gebildeten Glukose und damit der Aktivität des Marker-Enzyms proportional» Auf der Grundlage einer Eichkurve erfolgt die Bestimmung der Aktivität des Marker-Enzyms bzw. der Konzentration des Faktor VIII assoziierten Antigens.
2« Seispiel . . ' -
Ainperometrische Messung der pseudoperoxidatischen Aktivität von Methätnoglobin χει Enzymimmunoassay zur ,^,Q Grundlage dieses EIA ist das sogenannte sandwich-Prinzip*· Hierzu werden konstante Mengen (10 ,ug/ml) Hammol-anti-Kaninchen-IgG-Antikörper adsorptiv unter Verwendung eines 0,1 m Natriumcarbonat/bicarbonat-Puffers, pH =9,6, an Polystyrolröhrchen gebunden und anschließend dreimal mit PBS-Puffer, der 0,2 % Rinderseruraalbumin und 0,05 % Tween 20 enthält, gewaschen. Nachfolgend erfolgt die Zugabe definierter (aber unterschiedlicher) Mengen von reinem Kaninchen-IgG in o, g. Puffer und Inkubation bei Raumtemperatur. Nach mehrmaligem 'Waschen vjird eine geeignete Verdünnung eines Konjugats, bestehend aus dem Hamsel-anti-Kaninchen-IgG-Antikörper und Methämoglobin, zugegeben und nach mehrstündiger Inkubation bei 37°C und nachfolgendem Auswaschen des Konjugats die enzyrsanaloge, pseudoperoxidatische Aktivität des Hämoglobins bestimmte Dazu wird eine Sauerstoffelektrode verwendet, die mit einem Dialyseschlauch bespannt wird. Nach einer entsprechenden Inkubationszeit mit 15 mM O-Phenylendiamin in Natriumcitratpuffer (pH 5,0) und 5 mM H20p wird die Reaktion durch Zugabe von HCl gestoppt« 0,5 ml der Reaktionslösung werden in die elektrochemische Meßzelle verbracht. Aus dem Anstieg des kathodischen Stromes kann über eine Eichkurve der Verbrauch von H0O2 und damit die pseudoperoxidatische Aktivität von Methämoglobin bestimmt werden. Aus der Aktivität des Methämoglobins wird die Konzentration an.-IgG ermittelt.
Claims (3)
- Erfindunqsansρrucn1. Verfahren zur Bestimmung· der Aktivität von Marker-Enzymen in inkubierten Proben von Enzymimmunoassays mittels einer Indikatorelektrode, dadurch gekennzeichnet, daß die mit
einer Substratlösung versetzte Probe in eine elektrochemische Meßzelle überführt und anschließend die Enzymaktivitat des Marker-Enzyms über die mit.einer Sauerstoffelektrode oder Enzymelektrode angezeigte Stromstärke gemessen wird. · · - 2. Verfahren nach Punkt 1, dadurch gekennzeichnet, daß mit
der Sauerstoffelektrode die Aktivität des Marker-Enzyraes
in der Meßzelle über die Messung des Verbrauchs von 0? und HJD2 oder die Bildung von HpO2 bestimmt wird, wozu als
Marker-Enzyme Katalase, Peroxidase;, Glukoseoxidase, Hämoglobinderivate und Hämine vervjendet werden. - 3. Verfahren nach Punkt 1, dadurch gekennzeichnet, daß mit
der Enzymelektrode auf deä7 Basis einer modifizierten Sauerstoffelektrode der Verbrauch von Op oder HpOp oder die
Bildung von HpOp bestimmt wird, wozu als Marker-Enzyme S-. Galactosidase, alkalische Phosphatase und Glucoatnylase benutzt werden.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DD24663782A DD213066A1 (de) | 1982-12-28 | 1982-12-28 | Verfahren zur bestimmung der aktivitaet von marker-enzymen beim enzymimmunoassay |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DD24663782A DD213066A1 (de) | 1982-12-28 | 1982-12-28 | Verfahren zur bestimmung der aktivitaet von marker-enzymen beim enzymimmunoassay |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DD213066A1 true DD213066A1 (de) | 1984-08-29 |
Family
ID=5543889
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DD24663782A DD213066A1 (de) | 1982-12-28 | 1982-12-28 | Verfahren zur bestimmung der aktivitaet von marker-enzymen beim enzymimmunoassay |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| DD (1) | DD213066A1 (de) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001029560A1 (de) * | 1999-10-21 | 2001-04-26 | Kist Europe Korea Institute Of Science And Technology Europe Forschungsgesellschaft Mbh | Elektrochemischer enzymimmunoassay |
-
1982
- 1982-12-28 DD DD24663782A patent/DD213066A1/de not_active IP Right Cessation
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001029560A1 (de) * | 1999-10-21 | 2001-04-26 | Kist Europe Korea Institute Of Science And Technology Europe Forschungsgesellschaft Mbh | Elektrochemischer enzymimmunoassay |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5427912A (en) | Electrochemical enzymatic complementation immunoassay | |
| JP3009155B2 (ja) | 免疫クロマトグラフイー分析方法 | |
| DE69219686T2 (de) | Verfahren und Vorrichtung zur Verwendung in spezifischen Bindungstests | |
| Meyerhoff et al. | Novel nonseparation sandwich-type electrochemical enzyme immunoassay system for detecting marker proteins in undiluted blood | |
| JP3135067B2 (ja) | 免疫診断検査系およびその利用 | |
| JPS63500672A (ja) | 結合し得る物質の比色検定 | |
| US5055407A (en) | Composition and method of assaying aqueous liquids for specific gravity | |
| JP4426103B2 (ja) | 生物流体中のβ−ラクタム環を含む抗生物質を測定するための方法 | |
| DE3586951T2 (de) | Festphasendiffusionstextverfahren. | |
| US5055415A (en) | Method for immunoassay procedure for the detection of antigen by reacting with antibody which increases its electrical charge and electrophoretic mobility | |
| US4628035A (en) | Immunoassay method | |
| JPS62100660A (ja) | 高分子のイムノアツセイ法 | |
| US5780239A (en) | Method for the determination of cast in urine | |
| JPH0792460B2 (ja) | 抽出組成物として界面活性剤混合物を使用する歯周病に随伴する微生物検出用キットおよびその検出方法 | |
| US5063151A (en) | Immunoassay method and kit | |
| Grimshaw et al. | Development of an equilibrium immunoassay using electrochemiluminescent detection for a novel recombinant protein product and its application to pre-clinical product development | |
| DD213066A1 (de) | Verfahren zur bestimmung der aktivitaet von marker-enzymen beim enzymimmunoassay | |
| Byzova et al. | Immunochromatographic technique for express determination of ampicillin in milk and dairy products | |
| EP0713094B1 (de) | Heterogener Immunoassay mittels präzipitierbarer Festphase | |
| DE4216980C2 (de) | Immunosensorisches Nachweisverfahren | |
| EP0682254B1 (de) | Enzym-verknüpfte Chemilumineszenzbestimmung | |
| JP2510369B2 (ja) | ジフェニルメタン誘導体類、その製造方法およびそれを含有するヨ―ドチロニン類を結合する蛋白からヨ―ドチロニン類を置換するための試薬 | |
| EP0420170A2 (de) | Stabilisierendes Reagens für Membranimmunoteste | |
| JPS61230058A (ja) | アルブミンの定量法 | |
| WO1989010556A1 (en) | Detection method |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| ENJ | Ceased due to non-payment of renewal fee |