DD228461B1 - Verfahren zur herstellung von anionenaustauschern - Google Patents
Verfahren zur herstellung von anionenaustauschernInfo
- Publication number
- DD228461B1 DD228461B1 DD26599884A DD26599884A DD228461B1 DD 228461 B1 DD228461 B1 DD 228461B1 DD 26599884 A DD26599884 A DD 26599884A DD 26599884 A DD26599884 A DD 26599884A DD 228461 B1 DD228461 B1 DD 228461B1
- Authority
- DD
- German Democratic Republic
- Prior art keywords
- anion exchangers
- chemically
- general formula
- concentration
- paper
- Prior art date
Links
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 title claims abstract description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 12
- 238000012856 packing Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 3
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 claims description 4
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 claims description 2
- MGNCLNQXLYJVJD-UHFFFAOYSA-N cyanuric chloride Chemical compound ClC1=NC(Cl)=NC(Cl)=N1 MGNCLNQXLYJVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 6
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 20
- 239000000123 paper Substances 0.000 description 16
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 14
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 14
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 7
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 5
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 5
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 5
- -1 o-nitrobenzyl Chemical group 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 3
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 description 3
- PNIJXLWFAQLLHR-UHFFFAOYSA-M (4-aminophenyl)methyl-triethylazanium;bromide Chemical compound [Br-].CC[N+](CC)(CC)CC1=CC=C(N)C=C1 PNIJXLWFAQLLHR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- ORIGBPZNJGZIIP-UHFFFAOYSA-M 1-aminoethyl(triethyl)azanium;bromide Chemical compound [Br-].CC[N+](CC)(CC)C(C)N ORIGBPZNJGZIIP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- WJAXXWSZNSFVNG-UHFFFAOYSA-N 2-bromoethanamine;hydron;bromide Chemical compound [Br-].[NH3+]CCBr WJAXXWSZNSFVNG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical compound CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DBAZZGZGCITUQK-UHFFFAOYSA-N 4-(bromomethyl)aniline;hydrobromide Chemical compound Br.NC1=CC=C(CBr)C=C1 DBAZZGZGCITUQK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 2
- 230000005670 electromagnetic radiation Effects 0.000 description 2
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 2
- YMDNODNLFSHHCV-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-n,n-diethylethanamine Chemical compound CCN(CC)CCCl YMDNODNLFSHHCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005299 abrasion Methods 0.000 description 1
- 125000000738 acetamido group Chemical group [H]C([H])([H])C(=O)N([H])[*] 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- 125000006367 bivalent amino carbonyl group Chemical group [H]N([*:1])C([*:2])=O 0.000 description 1
- 239000012876 carrier material Substances 0.000 description 1
- 239000013043 chemical agent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000011888 foil Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000003958 fumigation Methods 0.000 description 1
- 229940083124 ganglion-blocking antiadrenergic secondary and tertiary amines Drugs 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000004745 nonwoven fabric Substances 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000007669 thermal treatment Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000002759 woven fabric Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- Manufacture Of Macromolecular Shaped Articles (AREA)
Abstract
Verfahren zur Herstellung von chemisch eluierbaren, mechanisch stabilen Anionenaustauschern. Aus WP 245 785 bekannte geformte oder nicht geformte makromolekulare Massen mit chemisch aktiven Füllkörpern wie z. B. Cyanurchlorid werden erfindungsgemäß mit Verbindungen der allgemeinen Formel
Description
X - fl - N _
in der X NH2-, OH-oder SH-Gruppen
R Alkylgruppen mit 1-10 C-Atomen, Aromaten, photolytische Gruppen wie
substituierte o-Nitrobenzyl- oder substituierte Methyl-phenancylester, Heterocycler R1, R2, R3 Alkylgruppen mit 1-4 C-Atomen oder H-Atome Y Halogen, Hydroxylgruppen
sind, in an sich bekannter Weise umsetzt.
2. Verfahren nach Punkt 1, dadurch gekennzeichnet, daß Verbindungen der allgemeinen Formel I intermediär durch Reaktion von Verbindungen der allgemeinen Formel Il
Ϋ NH3-R-Y II
mit tertiären Aminen der allgemeinen Formel III
-R1
N-R2 III
-R3
in der R, R1, R2, R3, Y die oben genannte Bedeutung haben,gebildet werden.
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von chemisch eluierbaren, mechanisch stabilen Anionenaustauschern auf der Basis makromolekularer Massen. Die Anionenaustauscher werden für analytische und präparative Aufgaben in der Molekularbiologie, Biochemie und Gentechnik angewandt.
Flächenträger mit Anionenaustauscheigenschaften sind bekannt. Zur Zeit befinden sich zwei Flächenträger mit Anionenaustauscheigenschaften auf der Grundlage von Cellulose-Papier und einer Kunststoffmembran auf dem Markt. Im ersten Fall handelt es sich um ein DEAE-Papier (DE 81 DEAE Cellulose Papier, Hersteller Whatman [England]), das dadurch erhalten wird, daß zunächst Cellulose nach der US-PS 3823133 mit Diethylaminoethylchlorid derivatisiert und anschließend mit entsprechenden Dispersionsmitteln zu einem flächigen Cellulose-Papier weiterverarbeitet wird. Obwohl dieser Anionenaustausch-Flächenträgereine hohe max. Bindungskapazität von etwa 300-400 μg/cm2 für Nucleinsäuren aufweist, sind seine zu geringen mechanischen Stabilitätsmerkmale wie Abrieb, Reißen, Abfledern ganzer Schichten die Ursache dafür, daß er kaum für biochemische Untersuchungen eingesetzt werden kann. Im zweiten Fall handelt es sich um eine DEAE-Kunststoffmembran (NA-45, Hersteller Schleicher & Schüll [USA]),die zwar über hohe mechanische Stabilität verfügt, deren Bindungskapazität mit 10-20 pg/cm allerdings zu niedrig liegt.
Beiden Trägern ist der Substituent, die Diethylaminoethylgruppe, gemeinsam. Von Trägermaterialien mit diesem Substituenten als ionisch bindender Gruppe sind jedoch Nucleinsäuren (Oligonucleotide, DNS) chemisch, z. B. durch Piperidin, nicht eluierbar.
Die Erfindung hat das Ziel, billig mechanisch stabile und chemisch eluierbare Anionenaustauscher herzustellen, die insbesondere in der Molekularbiologie und Biochemie einsetzbar sind.
Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, neue Anionenaustauscher auf makromolekularer Basis herzustellen, die eine hohe Bindungskapazität besitzen und die chemisch eluierbar sind.
Es werden aus WP 245785 bekannte geformte oder nicht geformte makromolekulare Massen mit chemisch aktiven Füllkörpern,
— aus einer makromolekularen Verbindung in einer Konzentration von 5-80VoI.-%
— aus einer makromolekularen Verbindung mit 4,6-Dihalogen-1,3,5-triazin-Gruppierungen in einer Konzentration von 1-80Vol.-%
— aus 2,4,6-Trihalogen-1,3,5-triazin in einer Konzentrationvon 0,5-50Vol.-%
— aus Halogeniden in einer Konzentration bis zu 20 Vol.-%
— gegebenenfalls aus puffernden Substanzen bis zu 5 Vol.-% bestehen, erfindungsgemäß mit Verbindungen der allgemeinen Formel I
- Λ-
R-N-R -K3
in an sich bekannter Weise umgesetzt, wobei
X NH2-, OH-oder SH-Gruppierungen
R Alkylgruppen mit 1-10 C-Atomen, Aromaten, photolytische Gruppen wie substituierte o-Nitrobenzylester oder
Methylphenancylester sowie Heterocyclen R1, R2, R3 Alkylgruppen mit 1-4 C-Atomen oder H-Atome Y Halogenide oder Hydroxyl-Gruppen.
sind. Anstelle der direkten Umsetzung der geformten und nicht geformten makromolekularen Massen mit chemisch aktiven Füllkörpern mit Verbindungen der allgemeinen Formel I kann vorteilhafterweise Verbindungen der Formel I intermediär durch Reaktion von Verbindungen der allgemeinen Formel Il
Y-R-NH3 + Y" Il
mit tertiären Aminen der allgmeinen Formel III
-R1 N-R2III
erzeugt werden.
Im ersten Fall können geformte makromolekulare Massen mit chemisch aktiven Füllkörpern wie z.B. mechanisch stabile Cellulose-Papiere, Vliese und Gewebe umgesetzt und auf diese Weise mechanisch stabile Anionenaustausch-Flächenträger mit hohen Bindungskapazitäten für Nucleinsäuren von bis zu 120pg/cm2 erhalten werden.
Im zweiten Fall können nichtgeformte makromolekulare Massen mit chemisch aktiven Füllkörpern wie z. B. sphärische, kristalline und fasrige Cellulose umgesetzt und auf diese Weise Anionenaustauscher erhalten werden, die entweder in dieser Form eingesetzt werden können oder mit flüssigen Dispersionsmitteln zu geformten Anionenaustausch-Flächenträgern verarbeitet werden.
Werden zur Umsetzung der geformten und nicht geformten makromolekularen Massen mit chemisch aktiven Füllkörpern Verbindungen der allgemeinen Formel I bzw. Verbindungen der allgemeinen Formel Il in Verbindung mit tertiären Aminen eingesetzt, wobei R = Alkylgruppen mit 1-10 C-Atomen oder Aromaten sind, ergeben sich Anionenaustauscher, die chemisch mit primären, sekundären und tertiären Aminen eluierbar sind. Diese chemische Elution hat besonders Bedeutung für die Entwicklung neuer Festphasen-Sequenzierungsverfahren von Nucleinsäurefragmenten bzw. zur Isolierung von DNA-Fragmenten aus Agarose- oder Polyacrylamid-Gelen. Werden zur Umsetzung der geformten und nicht geformten makromolekularen Massen mit chemisch aktiven Füllkörpern Verbindungen der allgemeinen Formel I eingesetzt, wobei R = substituierte o-Nitrobenzyl- oder substituierte Methylphenancylester sind, ergeben sich Anionenaustauscher, die photolytisch, d. h. unter Verwendung elektromagnetischer Strahlung eluierbar sind.
Alle o.g. Ionenaustauscher sind zusätzlich mit ionischen Mitteln, d.h. mit hohen lonenstärken der Salze wie z.B. NH4HCO3, (NH4I2CO3, Et3NHCO3, Et3NHAc, NH4Ac, K2HPO4, NaCI u.a. eluierbar
Der Begriff „chemisch eluierbar" beinhaltet also im Rahmen der vorliegenden Erfindung:
1. Elution durch chemische Verbindungen, deren Gemische oder Lösungen in Lösungsmitteln einschließlich Wasser, gegebenenfalls unter Erwärmen,
2. Elution mit Ionen in Lösungen von Lösungsmitteln einschließlich Wasser,
3. Elution durch Spaltung von Bindungen mittels Strahlung einschließlich Licht
4. Elution durch thermische Behandlung in Substanz oder in Gegenwart von Lösungsmitteln einschließlich Wasser.
Die erfindungsgemäßen Anionenaustauscher besitzen eine hohe Bindungskapazität und weisen insbesondere in der Flächenform eine hervorragende mechanische Stabilität auf. Aus diesem Grund ist der Einsatz der geformten Anionenaustauscher in der molekularbiologischen und biochemischen Forschung besonders angezeigt. Gegenüber herkömmlichen Anionenaustauschern verfügen die erfindungsgemäßen Austauscher zusätzlich zur ionischen Elution über weitere Elutionsmöglichkeiten mit chemischen Mitteln oder elektromagnetischer Strahlung.
Cellulose-Papier (Whatman 540) wird nach WP 245785 mit Cyanurchlorid aktiviert. Das auf diese Weise oberflächenbehandelte Papier (5 χ 7cm) wird aus seiner speziellen Verpackung (geschweißte Folie, die unter NrBegasung bei -200C gelagert wird) entnommen und in eine gläserne Reaktionskammer gelegt, in der 2mmol (450mg) Triethyl-1-amino-ethyl-ammoniumbromid in 7ml Acetonitril vorgelegt wurden. Die Reaktionskammer wird etwa 12h bei Raumtemperatur geschüttelt. Nach Beendigung der Reaktion wird das Papier mehrmals mit Wasser gewaschen und zwischen Fließpapier getrocknet. Anstelle des Lösungsmittels Acetonitril können auch wäßrige Puffersysteme verwendet werden.
400mg kristalline, underivatisierte Cellulose wird nach WP 245785 mit Cyanurchlorid aktiviert und anschließend in einem 25ml Rundkolben mit 2mmol (450mg) Triethyl-1-amino-ethyl-ammonium-brornid in 7ml Acetonitril 12h bei Raumtemperatur umgesetzt. Nach Beendigung der Reaktion wird die Cellulose auf einer Fritte mehrmals mit Wasser gewaschen und wie unter Beispiel 1 getrocknet.
Cellulose-Papier (Whatman 540) wird wie in Beispiel 1 mit Cyanurchlorid oberflächenaktiviert und anschließend in eine gläserne Reaktionskammer gelegt, in der 2mmol (410mg) 1-Brom-2-amino-ethan-hydrobromid in 7ml Acetonitril vorgelegt wurden. Die Reaktion wird sodann unter Zugabe von 5ml Triethylamin gestartet. Die Reaktionskammer wird mit Parafilm" abgedichtet und etwa 12h bei Raumtemperatur geschüttelt. Nach Beendigung der Reaktion wird das Papier wie im Beispiel 1 gewaschen und getrocknet.
400mg kristalline underivatisierte Cellulose z.B. Whatman wird wie in Beispiel 2 mit Cyanurchlorid aktiviert und anschließend in einem 25ml Rundkolben mit 2mmol (410mg) i-Brom-2-amino-ethan-hydrobromid in 7ml Acetonitril versetzt. Die Reaktion wird durch Zugabe von 5ml Triethylamin gestartet und nach 12h bei Raumtemperatur durch Waschen der Cellulose und Trocknen, wie im Beispiel 2 beschrieben, beendet.
Oberflächenaktiviertes Whatman 540 Papier (5 x 7cm) aus Beispiel 1 wird in einer Reaktionskammer mit 2mmol (574mg) p-Aminobenzyl-triethyl-ammonium-bromid in 7ml Acetonitril 12h bei Raumtemperatur umgesetzt und wie unter Beispiel 1 weiter aufgearbeitet.
400mg kristalline, nach Beispiel 2 oberflächenaktivierte Whatman Cellulose wird mit2mmol (574mg) p-Amino-benzyl-triethylammonium-bromid in 7ml Acetonitril, wie in Beispiel 2 beschrieben, umgesetzt und aufgearbeitet.
Oberflächenaktiviertes Whatman 540 Papier (5 χ 7cm) aus Beispiel 1 wird mit 2mmol (540mg) p-Amino-benzylbromid-hydrobromtd in 7ml Acetonitril in einem Reaktionsgefäß versetzt und die Reaktion mit 5ml Triethylamin gestartet. Nach 12h bei Raumtemperatur wird das Papier wie in Beispiel 1 gewaschen und getrocknet.
400mg kristalline, nach Beispiel 2 oberflächenaktivierte Whatman Cellulose wird analog Beispiel 4mit2mmol (540mg) p-Aminobenzylbromid-hydrobromid in Acetonitril und Triethylamin umgesetzt, nach Beendigung der Reaktion gewaschen und getrocknet.
Oberflächenaktiviertes Whatman 540 Papier (5 χ 7cm) aus Beispiel 1 wird mit 2mmol Glycin-(o-nitro-p-methyl-triethylammoniumbromid)-benzylester in 7ml Acetonitril 12h bei Raumtemperatur in einer Reaktionskammer umgesetzt und wie im Beispiel 1 weiter aufgearbeitet.
Halbsynthetisches Papier vom Typ Hekosyn® (Polyamid und Cellulose) wird wie in Beispiel 1 mit Cyanurchlorid oberflächenaktiviert und anschließend in eine gläserne Reaktionskammer gelegt, in der 2mmol (410mg) 1-Brom-2-amino-ethan-hydrobromid in 7ml Acetonitril vorgelegt wurden. Die Reaktion wird sodann unter Zugabe von 5ml Triethylamin gestartet. Die Reaktionskammer wird mit Parafilm abgedichtet und etwa 12h bei Raumtemperatur geschüttelt. Nach Beendigung der Reaktion wird das Papier wie im Beispiel 1 gewaschen und getrocknet.
Claims (2)
1. Verfahren zur Herstellung von chemisch eluierbaren, mechanisch stabilen Anionenaustauschern auf der Basis makromolekularer Massen mit chemisch aktiven Füllkörpern, bestehend aus
— einer makromolekularen Verbindung in einer Konzentration von 5-80 Vol.-%
— einer makromolekularen Verbindung mit 4,6-Dihalogen-1,3,5-triazin-Gruppierungen in einer Konzentration von 1-80Vol.-%
— 2,4,6-Trihalogen-1,3,5-triazin in einer Konzentration von 0,5-50 Vol.-%
— Halogeniden in einer Konzentration bis zu 20VoI.-%
— gegebenenfalls aus puffernden Substanzen bis zu 5 Vol.-%,
dadurch gekennzeichnet, daß man die Massen mit Verbindungen der allgemeinen Formel I
Priority Applications (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DD26599884A DD228461B1 (de) | 1984-08-06 | 1984-08-06 | Verfahren zur herstellung von anionenaustauschern |
| US06/761,107 US4849077A (en) | 1984-08-06 | 1985-07-31 | Process for solid phase-sequencing of nucleic acid fragments |
| YU01255/85A YU125585A (en) | 1984-08-06 | 1985-08-02 | Process for sequentioning fragments of nucleinic acid in solid phase and device for process executing |
| EP85109906A EP0171072A3 (de) | 1984-08-06 | 1985-08-06 | Verfahren und Vorrichtung zur Festphasen-Sequenzierung von Nucleinsäurefragmenten |
| HU852989A HU198796B (en) | 1984-08-06 | 1985-08-06 | Method for making carrier sheets of anionite and solid phase method and device for detecting sequences of fragmentums of nucleic acid |
| US07/120,092 US4882127A (en) | 1984-08-06 | 1987-11-12 | Device for solid phase sequencing of nucleic acid fragments |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DD26599884A DD228461B1 (de) | 1984-08-06 | 1984-08-06 | Verfahren zur herstellung von anionenaustauschern |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DD228461A1 DD228461A1 (de) | 1985-10-16 |
| DD228461B1 true DD228461B1 (de) | 1989-10-18 |
Family
ID=5559418
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DD26599884A DD228461B1 (de) | 1984-08-06 | 1984-08-06 | Verfahren zur herstellung von anionenaustauschern |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| DD (1) | DD228461B1 (de) |
-
1984
- 1984-08-06 DD DD26599884A patent/DD228461B1/de not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DD228461A1 (de) | 1985-10-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE69027431T2 (de) | Kumarinderivate zur verwendung als nukleotidvernetzungsreagenzien | |
| EP0098947B1 (de) | Polymere Mono-, Di-, Tri- und Tetrasulfidverbindungen, Verfahren zu ihrer Herstellung und Verwendung | |
| DE69406544T2 (de) | Etikettierreagenz und nachweismethode | |
| DE3853060T2 (de) | Verfahren zur Herstellung von Oligonucleotiden. | |
| DE3788914T2 (de) | Verbindungen zur Spaltung von RNS an eine spezifische Position, Oligomere, verwendet bei der Herstellung dieser Verbindungen und Ausgangsprodukte für die Synthese dieser Oligomere. | |
| DE69032167T2 (de) | Ungeladene polymere mit morpholino-einheiten und mit achiralen bindungen zwischen diesen einheiten | |
| DE69731132T2 (de) | Festträger-Reagenzien für die direkte Synthese von 3'-markierten Polynukleotiden | |
| DE69406119T2 (de) | Nukleotide/elektronische leitfähige polymer copolymerisat, verfahren zu seiner herstellung und seine verwendung | |
| DE69724218T2 (de) | Universale feste träger und verfahren zu ihrer verwendung | |
| DE68919281T2 (de) | Ladungsmodifizierte hydrophobe Membranmaterialien und Verfahren zur Herstellung. | |
| DE3852800T2 (de) | Polymere von Polystyrenen und vernetzten Dextranen, ihre Herstellung und Anwendung für die Analyse und die Reinigung von biologischen Molekülen. | |
| DE3685626T2 (de) | Sequenzierung von peptiden. | |
| DE69123243T2 (de) | Methode zur verbesserung der okuläre, blut- und biokompatibilität synthetischer polymeren | |
| DE69032847T2 (de) | Hydrophobe Nukleinsäure-Sonde | |
| DE60124637T2 (de) | Neues Reagens zur Markierung von Nukleinsäuren | |
| DE69630400T2 (de) | Kupplungsarm für festträger oligonukleotid-synthese und verfahren zur herstellung davon | |
| DE69507618T2 (de) | Fester träger-reagenzien zur synthese von 3'-stickstoffhaltigen polynukleotiden | |
| DE68908737T2 (de) | Imidazol-Verbindungen und diese enthaltende Textilbehandlungs-Zusammenstellungen. | |
| DE69405396T2 (de) | Verfahren zur synthese von nukleinsäuren auf einem festträger und verbindungen verwendbar als festträger in diesem verfahren | |
| DE69928733T2 (de) | Polysaccharide und Oligosaccharide vernetzt mit Disilane-, Dithioether-, Disulphone- oder Butane-diylderivaten und ihre Formgebung als Trägermaterialien | |
| Wang et al. | Crystal and molecular structure of a derivative of 1, N6-ethenoadenosine hydrochloride. Dimensions and molecular interactions of the fluorescent. epsilon.-adenosine (. epsilon. Ado) system | |
| DD228461B1 (de) | Verfahren zur herstellung von anionenaustauschern | |
| EP1626952B1 (de) | Multifunktionales reagenz zur synthese von thiolmodifizierten oligomeren | |
| DE3881691T2 (de) | Polydeoxyribonukleotide, pharmazeutische zusammensetzungen, verwendung und herstellung von polydeoxyribonukleotiden. | |
| DE69105811T2 (de) | Verfahren zur Extraktion von bestimmten Nukleinsäurefragmenten. |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| ENJ | Ceased due to non-payment of renewal fee |