DD229430A1 - Verfahren zur kontrolle des wachstums von mikroorganismen in biologischen systemen - Google Patents

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DD229430A1
DD229430A1 DD27035284A DD27035284A DD229430A1 DD 229430 A1 DD229430 A1 DD 229430A1 DD 27035284 A DD27035284 A DD 27035284A DD 27035284 A DD27035284 A DD 27035284A DD 229430 A1 DD229430 A1 DD 229430A1
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yeasts
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DD27035284A
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Inventor
Eberhart Findeisen
Ralph Saeuberlich
Peter Hauptmann
Gerhard Jesche
Lothar Liebetrau
Original Assignee
Inst Tech Mikrobiologie
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  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Kontrolle des Wachstums von Mikroorganismen in biologischen Systemen. Sie ist in der Biotechnologie anwendbar. Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Verfahren zur Kontrolle des Wachstums und der Konzentrationsveraenderung von Hefen und/oder Bakterien unabhaengig von den Medieneigenschaften und mit einer verzoegerungsfreien Darstellung der Messwerte zu entwickeln. Die Aufgabe wird dadurch geloest, dass ein eindeutiger, reproduzierbarer Zusammenhang zwischen der Ultraschallabsorption longitudinaler Wellen im MHz-Bereich und dem sich auf Grund von Wachstumsvorgaengen aendernden Hefe- oder Bakterienanteil in unterschiedlichen Fermentationssystemen gefunden wurde. Durch Vergleichsmessungen mit direkten Methoden zur Biomassekonzentrationsbestimmung sind die Ultraschallabsorptionen entsprechenden Hefe- oder Bakterienkonzentrationen zuordenbar.

Description

Verfahren zur Kontrolle des Wachstums von Mikroorganismen in biologischen Systemen
Anwendungsgebiet der Erfindung
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Kontrolle des Wachstums und der Konzentrationsveränderung von Hefen oder Bakterien während des Fermentationsprozesses· Die Messung des Anteils der Biomasse wird besonders in solchen Fermentationssystemen möglich, deren Medieneigenschaften bisher bekannten Verfahren zur Bestimmung der Biomassekonzentration entgegenstehen· Die Erfindung ist in die IPK C 12 N und C 12 Q einzuordnen.
Charakteristik der bekannten technischen Lösungen
Die bekannteste Bestimmung der Biomassekonzentration erfolgt gravimetrisch (R· Dickscheit, A, Oanke "Handbuch der mikrobiologischen Laboratoriurastechnik", Dresden 1971). Dabei wird Fermentorablauf bis zur Gewichtskonstanz getrocknet und der Rückstand ausgewogen. Der Nachteil dieser Methode ist der große Zeitbedarf fur die Durchführung der Bestimmung. Die Aktualität des Meßwertes ist damit in Frage gestellt.
Andere Verfahren zur Kontrolle des Wachstums und der Konzentrationsveränderung von Hefen oder Bakterien beruhen auf optischen Methoden zur Messung der Trübung oder der Absorption in Fermentationsmedien (G· Kortüm "Kolorimetrie, Photometric und
Spektrometrie", Berlin-Heidelberg 1962). Durch den Vergleich mit gravimetrisch ermittelten Biomassekonzentrationen ist die physikalische Bewertung der gewonnenen Meßdaten möglich. Die Anwendung optischer Verfahren ist auf Fermentationsmedien beschränkt, deren optische Eigenschaften die Meßwertermittlung nicht störend beeinflussen.
V/eitere bekannte Möglichkeiten der Kontrolle des Wachstums von Mikroorganismen und der Konzentrationsbestimmung von Biomassen bestehen in der Ermittlung des Stickstoffverbrauchs der Ferraentationskultur oder der Messung des durch die Mikroorganismen gebildeten Kohlendioxyds· Die aus dem Vergleich mit gravimetrischen Konzentrationsbestiraraungen erhaltenen Ergebnisse beider Methoden unterliegen den Einflüssen des jeweiligen Fermentationsregimes· Die Verfahren sind somit nicht universell einsetzbar«
Ziel der Erfindung
Die Erfindung stellt sich das Ziel, das Wachstum und die Konzentrationsveränderung von Hefen oder Bakterien im flüssigen Medium während des Fermentationsprozesses zu verfolgen· Dabei soll gewährleistet werden, daß die Messungen sowohl innerhalb als auch außerhalb des Fermentationsgefäßes möglich sind und die Meßwertermittlungen keinen manuellen Aufwand erfordern.
Darlegung des Wesens der Erfindung
Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Verfahren zur Kontrolle des Wachstums und der Konzentrationsveränderung von Hefen oder Bakterien während des Ferraentationsprozesses zu entwickeln, wobei die Messung unabhängig von den spezifischen Medieneigenschaften erfolgen und die Aktualität der Meßwerte gewährleistet werden soll.
Die Aufgabe wird erfindungsgemäß dadurch gelöst, daß in die Fermentationskultur ein Ultraschallgeber und ein Ultraschallempfänger, die sich in einem definierten Abstand befinden, eingetaucht werden und die durch das Wachstum und die Konzentrationsveränderungen der Hefen oder Bakterien hervorgerufene Absorption der Ultraschallwellen bestimmt wird. Überraschenderweise wurde gefunden, daß die Ultraschallabsorption in solch komplizierten Mehrphasensystemen eindeutig mit dem Anteil der Hefen oder Bakterien korreliert und solche Werte hat, daß eine Messung im Bereich von 2 bis IO MHz möglich ist und die erforderliche Genauigkeit erreicht wird. Durch Vergleichsmessungen kann jeder Absorptionswert einem Wert des Biomassegehaltes zugeordnet werden·
AusfOhrungsbeispiele Beispiel 1
Die Ultraschallabsorption o£ wurde bei einer Frequenz f = 2 MHz mit einem Impulsverfahren bei konstantem Wandlerabstand in Fermentationssystemen, bestehend aus Hefen und Melasse als Substrat sowie Hefen und Sulfitablauge als Substrat bestimmt. Abbildung 1 zeigt die Abhängigkeit der Änderung der Ultraschall· absorption vom Hefegehalt·
Im Rahmen des angegebenen Meßfehlers ist ein linearer Zusammenhang zwischen Ultraschallabsorption und Hefegehalt vorhanden.
Beispiel 2
In der Abbildung 2 ist die gemessene Abhängigkeit der Änderung der Ultraschallabsorption vom Bakteriengehalt in einem Fermentationssystem mit Methanol als Substrat dargestellt. Im Rahmen des angegebenen Meßfahlers ist auch in diesem Beispiel ein linearer Zusammenhang zwischen Ultraschallabsorption und Bakteriengehalt vorhanden.

Claims (2)

  1. Erfindunqsanspruch
    Verfahren zur Kontrolle des Wachstums und der Konzentrationsveränderung von Mikroorganismen in biologischen Systemen gekennzeichnet dadurch, daß aus der Bestimmung des Absorptionskoeffizienten einer longitudinalen Ultraschallwelle im Frequenzbereich von 2 bis 10 MHz in eindeutiger Weise auf den Biomasseanteil in beliebigen Fermentationssystemen> unabhängig von den Medieneigenschaftenv geschlossen wird.
    - Hierzu
  2. 2 Blatt Zeichnungen -
DD27035284A 1984-12-06 1984-12-06 Verfahren zur kontrolle des wachstums von mikroorganismen in biologischen systemen DD229430A1 (de)

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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4848139A (en) * 1984-04-03 1989-07-18 Public Health Laboratory Service Board Determining amount of biological material
DE3819540A1 (de) * 1988-06-09 1989-12-14 Germerdonk Rolf Verfahren und vorrichtung zur ad-hoc-messung der vorhandenen zellmasse und zum ad-hoc-beurteilen des fermentationszustandes in bioreaktoren durch messen der sedimentationseigenschaften einer probe mit hilfe von ultraschall
ES2147149A1 (es) * 1998-11-20 2000-08-16 Consejo Superior Investigacion Procedimiento para la deteccion del crecimiento de microorganismos en fluidos biologicos y muestras clinicas mediante ultrasonidos.

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