DD298884A5 - VACCINES AGAINST VIRAL ANTIGENES AND METHOD OF PREPARING THEM - Google Patents

VACCINES AGAINST VIRAL ANTIGENES AND METHOD OF PREPARING THEM Download PDF

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Ralf Boldt
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Abstract

Die Erfindung betrifft Impfstoffe gegen antigene Epitope verschiedenen Ursprungs, sowie Verfahren zu ihrer Herstellung. Erfindungsgemaesz wird partiell oxidiertes Polysaccharid an die Oberflaeche von Bakterien gebunden, und die derart modifizierten Bakterien werden mit viralen oder bakteriellen Proteinen bzw. Polypeptiden ueberzogen (divestierte Bakterien). Diese Bakterien, eingesetzt in Impfstoffen, fuehren zu einer verstaerkten Immunantwort. Die Anwendungsgebiete der Erfindung sind die Medizin, Veterinaermedizin und die pharmazeutische Industrie.{Impfstoffe; * HIV; Epitope; Antigendrift; Bakterienverkleidung; BCG; Immunstimulation; Polysaccharide; Medizin; Veterinaermedizin; Pharmazie; divestierte Bakterien}The invention relates to vaccines against antigenic epitopes of various origins, and to processes for their preparation. According to the invention partially oxidized polysaccharide is bound to the surface of bacteria, and the thus modified bacteria are coated with viral or bacterial proteins or polypeptides (divested bacteria). These bacteria, used in vaccines, lead to an amplified immune response. The fields of application of the invention are medicine, veterinary medicine and the pharmaceutical industry {vaccines; * HIV; epitopes; Antigenic drift; Bacteria panel; BCG; Immune stimulation; polysaccharides; Medicine; Veterinary medicine; Pharmacy; divested bacteria}

Description

Anwendungsgebiet der Erfindung .Field of application of the invention.

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung eines Impfstoffes gegen antigene Epitope verschiedenen Ursprungs sowie Verfahren zu ihrer Herstellung. Die neuen Impfstoffe führen zu einer verstärkten humoralen und zellulären Immunantwort gegenüber viralen, bakteriellen u.a. Proteinen bzw. Polypeptiden. Die Anwendungsgebiete der Erfindung sind die Medizin, Veterinärmedizin und die pharmazeutische Industrie.The invention relates to a process for the preparation of a vaccine against antigenic epitopes of various origins and to processes for their preparation. The new vaccines lead to an increased humoral and cellular immune response to viral, bacterial and others. Proteins or polypeptides. The fields of application of the invention are medicine, veterinary medicine and the pharmaceutical industry.

Charakteristik der bekannten technischen LösungenCharacteristic of the known technical solutions

Zur Bekämpfung von Infektionskrankheiten, vorzugsweise Viruskrankheiten, werden zahlreiche Impfstoffe hergestellt. So werden zum Beispiel von führenden Firmen Impfstoffe hergestellt, die entweder attenuierte Viren oder isolierte bzw. gentechnisch hergestellte virale Antigene enthalten (Behring-Werke-Mitteilung: Virus Hepatitiden, Hepatitis B, Mai 1988, Mitteilung: Röteln, Juli 1988). Im Grunde genommen haben sich die Impfstoffe in den letzten 10-15 Jahren nicht viel geändert. Es werden überwiegend Lebendimpfstoffe, Totvakzine oder Toxoide verwendet (Roitt, I. M.: Essential Immunology, Blackwall, Oxford 1980; Schuster, G.: Virus und Viruskrankheiten, Ziemsen Verlag 1988). Neueste Ergebnisse mit virusmodifizierten, tumorspezifischen Vakzinen bringen bei der Krebsbekämpfung Hoffnungen. (Schirrmacher, V.: DE-PS3806565 vom 14.09.1989) In dieser Patentvorschrift (PS) (Beispiel 3) wird auf die Wirkung der BCG als Vakzine hingewiesen, wenn man sie mit Newcastle-Disease-Virus inkubierten, autologen und inaktivierten Tumorzellen zusammenmischt. Die „Verkleidung" von Bakterien (vorzugsweise BCG) mit partiell oxidierten Dextranen und viralen Proteinen zur Herstellung von Vakzinen ist bisher nicht beschrieben worden.To combat infectious diseases, preferably viral diseases, numerous vaccines are produced. For example, leading companies manufacture vaccines containing either attenuated viruses or isolated or genetically engineered viral antigens (Behring-Werke communication: Virus Hepatitis, Hepatitis B, May 1988, Communication: Rubella, July 1988). Basically, the vaccines have not changed much in the last 10-15 years. It is predominantly live vaccines, dead vaccines or toxoids used (Roitt, I. M .: Essential Immunology, Blackwall, Oxford 1980, Schuster, G .: virus and viral diseases, Ziemsen Verlag 1988). Recent results with virus-modified, tumor-specific vaccines bring hope in the fight against cancer. (Schirrmacher, V .: DE-PS3806565 of 14.09.1989) In this patent specification (PS) (Example 3), the effect of BCG as a vaccine is pointed out when mixed with Newcastle disease virus, autologous and inactivated tumor cells mixed together , The "disguise" of bacteria (preferably BCG) with partially oxidized dextrans and viral proteins for the production of vaccines has not previously been described.

Es ist das Ziel der Erfindung, einen neuen Impfstoff zur Verfügung zu stellen, de: schwach immunoge Proteine bzw. Polypeptide in die Lage versetzt, eine verstärkte Immunantwort auszulösen.It is the object of the invention to provide a novel vaccine which enables weakly immunogenic proteins or polypeptides to elicit an enhanced immune response.

Darlegung des Wesens der ErfindungExplanation of the essence of the invention

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, Impfstoffe gegen antigene Epitope vet ohiedenen Ursprungs sowie Verfahren zu ihrer Herstellung zu entwickeln. Erfindungsgemäß wurde die Aufgabe dadurch gelöst, daß partiell oxidiertes Polysaccharid an die Oberfläche von Bakterien gebunden und die derart beladenen Bakterien mit definierten Epitopen (Proteinen bzw. Polypeptiden u. a.) überzogen werden. Die derart modifizierten Bakterien werden ggf. mit Zusatzstoffen versehen, z.B. 3-7%iger Dextranlöüung zur Stabilisierung. Als Polysaccharide eignen sich Dextrane, Amylose, Amylopectin oder Glycogen, aber auch andere Polysaccharide, wie z. B. Pectin, Glucomannan, Chitosan oder Lipopolysaccharide. Als Bakterien kommen vorzugsweise Mycobakterien -sowohl in vivo als auch in denaturiertem Zustand- in Frage. Überraschenderweise hat sich herausgestellt, daß schwach immunogene virale oder bakterielle Antigene bzw. Epitope eine verstärkte Immunantwort hervorrufen, wenn sie auf Bakterien, die mit partiell oxidierten Polysacchariden beladen sind, aufgezogen werden. Derart „verkleidete" Bakterien (divestierte Bakterien) zeigen sich als wirksame Impfstoffe. Die partiell oxidierten Polysaccharide (vorzugsweise Dextran) binden sich kovalent durch die aktiven Aldehyclgruppen an die Bakterienoberflächen, indem sie mit vorhandenen Aminogruppen reagieren. Gibt man die partiell oxidierten Polysaccharide im Überschuß zu attennuierten (vorzugsweise BCG) oder zu getöteten Bakterien, bleiben noch freie Aldehydgruppen übrig, um die Bakterien mit Epitopen, Polypeptiden oder anderen freien aminogruppenhaltigen Antigenen ?«i beschichten. Nur Epitope bzw. Polypeptide, die keine eigenen freien Aminogruppen enthalten, müssen geringfügig mit einer entsprechenden Aminosäure, wie z. B. Arginin, durch Kopplung modifiziert werden. Nach der Oxidation der Polysaccharide muß das Oxidationsmittel schonend entfernt werden, Nach der Beschichtung der Bakterien mit den partiell oxidierten Polysacchariden wird nach dem Ablauf der Bindungsreaktion der Überschuß der oxidierten Polysaccharide durch einfache Waschvorgänge entfernt. Als Waschflüssigkeit ist die nichtoxidierte Polysaccharidlösung am besten geeignet. Wirkt die Polysaccharidlösung stabilisierend (wie z. B. Dextran), kann die zweite Reaktion - die Antigenbesr.hichtung - in dieser Lösung durchgeführt werden. Bei der Durchführung der Reaktion muß der optimale pH-Wert, individuell entsprechend den Baktorieneigenschaften leicht alkalisch oder leicht acid, eingestellt werden. Wichtig ist, daß die Bindungsreaktion zwischen Aldehyd- und Aminogruppen auf den attenuierten Bakterienoberflächen stattfindet. Bei toten Bakterien wird die Kopplungsreaktion bai pH4,0 oder bei pH9,0 durchgeführt. Die Antigenbindung wird immunchemisch, z.B. durch Immunfluoreszenzmikroskopie, mittels spezifischer Antikörper geprüft. Sämtliche Lösungen werden vor der Verwendung sterilisiert. Die Dextran'ösung z.B. kann autokiaviert und/oder bakterienfiltriert werden. Bei attenuierten Bakterien muß ein Vitalitätstest durchgeführt werden. Auch A:itigendriftproteine - man versteht darunter instabile virale Antigene - als Gemische einer großen Zahl von Fpitopen können auf Bakterien vorteilhaft konzentriert werden (1 mg Feuchtbakteriumoberfläche entspricht ca. 50cm2). Die divestierten Bakterien können ampulliert und als Impfstoff ohne Adjuvanszusatz verwendet werden. Antigene Epitope verschiedenen Ursprungs können mit den partiell oxidierten Polysacchariden 'vorzugsweise Dextran) extra in einer Lösung reagieren, und diese Lösung kann als Stabilisator zum Impfstoff verwendet werden.The invention has for its object to develop vaccines against antigenic epitopes vet ohiedenen origin and methods for their preparation. According to the invention the object has been achieved in that partially oxidized polysaccharide bound to the surface of bacteria and the thus loaded bacteria with defined epitopes (proteins or polypeptides, etc.) are coated. The bacteria modified in this way are optionally provided with additives, eg 3-7% dextran solution for stabilization. As polysaccharides are dextrans, amylose, amylopectin or glycogen, but also other polysaccharides, such as. As pectin, glucomannan, chitosan or lipopolysaccharides. Preferred bacteria are mycobacteria-both in vivo and in the denatured state. Surprisingly, it has been found that poorly immunogenic viral or bacterial antigens or epitopes produce an enhanced immune response when grown on bacteria loaded with partially oxidized polysaccharides. Such "disguised" bacteria (divested bacteria) are effective vaccines The partially oxidized polysaccharides (preferably dextran) covalently bind to the bacterial surfaces through the active aldehyde groups by reacting with the amino groups present In excess, the partially oxidized polysaccharides are added attenuated (preferably BCG) or killed bacteria, free aldehyde groups are left to coat the bacteria with epitopes, polypeptides or other free amino group-containing antigens. "Only epitopes or polypeptides that do not contain their own free amino groups must have a slight After oxidation of the polysaccharides, the oxidizing agent must be removed gently After coating the bacteria with the partially oxidized polysaccharides, after the end of the binding reaction, the excess of the o xidierten polysaccharides removed by simple washing. As the washing liquid, the non-oxidized polysaccharide solution is best suited. If the polysaccharide solution acts to stabilize (such as dextran), the second reaction - the antigen labeling step - can be carried out in this solution. In carrying out the reaction, the optimum pH must be adjusted individually according to the bactoring properties slightly alkaline or slightly acidic. It is important that the binding reaction between aldehyde and amino groups takes place on the attenuated bacterial surfaces. For dead bacteria, the coupling reaction is pH bai pH4.0 or at pH9.0. The antigen binding is tested immunochemically, eg by immunofluorescence microscopy, by means of specific antibodies. All solutions are sterilized before use. The dextran solution, for example, can be autoclaved and / or bacteria-filtered. In attenuated bacteria, a vitality test must be performed. Also, antigen drift proteins - one understands as unstable viral antigens - as mixtures of a large number of fpitopes can be favorably concentrated on bacteria (1 mg of wet bacterial surface corresponds to approximately 50 cm 2 ). The divested bacteria can be ampullated and used as a vaccine without adjuvant addition. Antigenic epitopes of various origins can react with the partially oxidized polysaccharides, preferably dextran, extra in solution, and this solution can be used as a stabilizer for the vaccine.

Ausführungsbeispieleembodiments

Beispiel 1example 1

Herstellung eines Impfstoffes gegen Hepatitis-B mittels divestierter Bakterien 50ml (20g/l) Dextran-35-Lösung wurden mit 40ml 45mM HJO4 bei pH4,5 unter Kühlung langsam oxidiert. Man erreicht einenPreparation of hepatitis B vaccine using divested bacteria 50ml (20g / l) dextran 35 solution was slowly oxidized with 40ml 45mM HJO 4 at pH 4.5 with cooling. You reach one

Oxidationsgrad von 12% (2x 12 Aldehydgruppen auf 100 Glucoseeinheiten). ,Oxidation degree of 12% (2x 12 aldehyde groups per 100 glucose units). .

Durch 2malige Fällung mit 60%- bzw. 96%igem Ethanol wurde die partiell oxidierte Dextranlösung gereinigt und anschließend bis zur weiteren Bearbeitung als Feststoff im Kühlschrank lichtgeschützt aufbewahrt. Vor der Anwendung bringt man das partiellBy twice precipitation with 60% - or 96% ethanol, the partially oxidized dextran solution was purified and then kept protected from light until further processing as a solid in the refrigerator. This is done partially before using

oxidierte Dextran in wäßrige Lösung. -.oxidized dextran in aqueous solution. -.

Bacille de Calmette üuerin (BCG) von BCG-Institut Jena, die für unspezifische Immunisierung von Krebskranken verwendet wird, wurde mit dem partiell oxidierten Dextran bei schwach alkalischem pH beschichtet. (Bei vitalen Bakterien arbeitet man leicht acid bei pH 5,5.) Die Beschichtung wurde auf mit 70%igem Ethanol behandelten und anschließend gewaschenen Bakterienoberflächen durchgeführt. Der Überschuß des partiell oxidierten Dextrans wurde durch mehrere Waschvorgänge mit Dextran-Lösung en .lernt und die Bakterien mit Hepatitis-B-S-Antigen, das aus den Seren von asymptomatischen HBS-Trägern isoliert wurde, beschichtet. Die erfolgreiche Beschichtung wurde mittels monoklonalem Anti-HBS durch indirekten Immunfluoreszenztest bestätigt.Bacille de Calmette üuerin (BCG) from BCG Institute Jena, which is used for non-specific immunization of cancer patients, was coated with the partially oxidized dextran at a low alkaline pH. (In the case of vital bacteria, acid is readily processed at pH 5.5.) The coating was carried out on bacterial surfaces treated with 70% ethanol and subsequently washed. The excess of the partially oxidized dextran was washed by dextran solution washing several times and the bacteria were coated with hepatitis B-S antigen isolated from the sera of asymptomatic HBS carriers. The successful coating was confirmed by monoclonal anti-HBS by indirect immunofluorescence assay.

Die mit den HBS-divestierten-Bakterien geimpften Mäuse produzieren Anti-HBS-Antikörper schon im low-tolfii anten Bereich, verglichen mit der Immunantwort von Mäusen, die nur mit HBS geimpft wurden. Ein vollkommenes Fehlen des Antikörpers gegenüber dem schwach immunogenen H3S konnte nur bei der letzten Gruppe festgestellt werden.The mice vaccinated with the HBS-divorced bacteria produce anti-HBS antibodies already in the low-tolfium region compared to the immune response of mice inoculated with HBS alone. A complete lack of antibody to the poorly immunogenic H3S could only be detected in the last group.

Beispiel 2Example 2

Herstellung eines Impfstoffes gegen HIV-gp-120Preparation of a vaccine against HIV gp-120

Als Antigen wurde ein Nonapeptid der V3 Region gp-120 des HIV, gekoppelt mit Keyhole Limpet Haemocyanin (KLH-9) verwendet.The antigen used was a nonapeptide of HIV V3 region gp-120 coupled with keyhole limpet hemocyanin (KLH-9).

BCG wurde wie im Beispiel 1 mit partiell oxidiertem Dextran beschichtet (BCG-D).BCG was coated as in Example 1 with partially oxidized dextran (BCG-D).

60mg BCG-D wurden in 3 ml 4%iger Dextran-35-Lösung aufgenommen und der pH-Wert auf 9,0 eingestellt.60 mg of BCG-D were taken up in 3 ml of 4% dextran 35 solution and the pH was adjusted to 9.0.

Unter Kühlung wurde 30μΙ (2mg/ml) KHL-9 langsam zugegeben und lichtgaschützt bei +40C vorsichtig geschüttelt.While cooling, 30μΙ (2mg / ml) KHL-9 was slowly added and shaken gently at +4 0 C, protected from light.

Die Suspensionen mit divestierten Bakterien können portioniert in Ampullen bis zur Verwendung aufbewahrt werden.The suspensions with divested bacteria can be stored portioned in ampoules until use.

Beispiel 3Example 3

Herstellung eines modifizierten Impfstoffes gegen HIV-gp-120 nach Beispiel 2 70μΙ 4%ige partiell oxidierte Dextranlösung wurde bei pH9,0 mit 30μΙ 2mg/ml KHL-9 unter Kühlung und lichtgeschützt über 12 Stunden geschüttelt und diese Lösung zu dem in Beispiel 2 hergestellten Impfstoff gemischt.Preparation of a Modified Vaccine Against HIV-gp-120 According to Example 2 70μΙ 4% partially oxidized dextran solution was shaken at pH9.0 with 30μΙ 2mg / ml KHL-9 with cooling and protected from light for 12 hours and this solution to that prepared in Example 2 Vaccine mixed.

Claims (13)

1. Verfahren zur Herstellung von Impfstoffen gegen virale oder bakterielle Antigene bzw. Epitope, dadurch gekennzeichnet, daß partiell oxidiertes Polysaccharid an die Oberfläche von Bakterien gebunden, die derart modifizierten Bakterien mit viralen oder bakteriellen Proteinen bzw. Polypeptiden überzogen und die entstehenden Suspensionen gegebenenfalls mit Zusatzstoffen versehen werden.1. A process for the preparation of vaccines against viral or bacterial antigens or epitopes, characterized in that partially oxidized polysaccharide bound to the surface of bacteria, such modified bacteria coated with viral or bacterial proteins or polypeptides and the resulting suspensions optionally with additives be provided. 2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß als Polysaccharide vorzugsweise Dextran, aber auch andere Polysaccharide, wie z. B. Stärke, Glucomannan, Pectin, Cellulose, Chitosan oder auch Lipopolysaccharide, Verwendung finden.2. The method according to claim 1, characterized in that as polysaccharides, preferably dextran, but also other polysaccharides, such as. As starch, glucomannan, pectin, cellulose, chitosan or lipopolysaccharides, use. 3. Verfahren nach Anspruch 1 und 2, dadurch gekennzeichnet, daß als Bakterien Mycobakterien, wie BCG oder auch z. B. Bordetella pertussis, eingesetzt werden.3. The method according to claim 1 and 2, characterized in that as bacteria mycobacteria, such as BCG or z. B. Bordetella pertussis used. 4. Verfahren nach Anspruch 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß als Proteine auch Antigen-Drift-Proteine eingesetzt werden.4. The method according to claim 1 to 3, characterized in that are used as proteins and antigen-drift proteins. 5. Verfahren nach Anspruch 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß vitale, abgeschwächte Bakterien eingesetzt werden.5. The method according to claim 1 to 4, characterized in that vital, attenuated bacteria are used. 6. Verfahren nach Anspruch 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß denaturierte Bakterien eingesetzt werden.6. The method according to claim 1 to 4, characterized in that denatured bacteria are used. 7. Verfahren nach Anspruch 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, daß die mit partiell oxidierten Polysacchariden und danach mit Proteinen überzogenen Bakterien in nachträglich denaturierter Form zur Anwendung kommen.7. The method according to claim 1 to 5, characterized in that the partially oxidized polysaccharides and then coated with proteins bacteria are used in subsequently denatured form. 8. Verfahren nach Anspruch 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, daß die divestierten (verkleideten) Bakterien in einer partiell oxidierten Polysaccharidlösung, die vorher mit dem gewünschten Antigen (Proteine, Polypeptide, Epitopgemische) reagiert hat, stabilisiert werden.8. The method according to claim 1 to 5, characterized in that the divested (disguised) bacteria in a partially oxidized polysaccharide solution which has previously reacted with the desired antigen (proteins, polypeptides, epitope mixtures) are stabilized. 9. Verfahren nach Anspruch 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, daß die divestisitcn Bakterien mit Glucose, Mannose, Lactose oder einer anderen Mono- bzw. Polysaccharidlösung stabilisiert werden.9. The method according to claim 1 to 5, characterized in that the divestisitcn bacteria with glucose, mannose, lactose or another mono- or polysaccharide solution are stabilized. 10. Impfstoffe gegen virale oder bakterielle Antigene bzw. Epitope, dadurch gekennzeichnet, daß als wirksame Komponente verkleidete Bakterien eingesetzt werden, die durch Bindung partiell oxidierter Polysaccharide an Bakterien und durch Überziehen der derart modifizierten Bakterien mit viralen oder bakteriellen Proteinen bzw. Polypeptiden gewonnen werden.10. Vaccines against viral or bacterial antigens or epitopes, characterized in that are used as an effective component disguised bacteria obtained by binding partially oxidized polysaccharides to bacteria and by coating the thus modified bacteria with viral or bacterial proteins or polypeptides. 11. Impfstoff nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß die mit partiell oxidierten Polysacchariden und danach mit Proteinen überzogenen Bakterien in vivo Anwendung finden.11. A vaccine according to claim 10, characterized in that the partially oxidized polysaccharides and then coated with proteins bacteria find in vivo application. 12. Divestierte Bakterien.12. Divested bacteria. 13. Divestierte Bakterien nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, daß sie eine Polysaccharidhülle enthalten, die mit Epitopen verschiedenen Ursprungs überzogen sind.13. Divested bacteria according to claim 12, characterized in that they contain a Polysaccharidhülle, which are coated with epitopes of different origin.
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Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE4141970C2 (en) * 1991-12-16 1998-02-19 Charite Med Fakultaet Combination vaccine against AIDS, schistosomiasis and tuberculosis and process for its preparation
RU2123331C1 (en) * 1996-03-28 1998-12-20 Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Method of live antimeasles vaccine preparing
US20050180964A1 (en) 2003-03-17 2005-08-18 Puntenney Steven B. Methods and compositions for the inhibition of growth of infectious Aspergillus fumigatus and other mycotic organisms in the gut of mammalian and avian species
US20050220846A1 (en) 2004-04-05 2005-10-06 Puntenney Steven B Use of beta-1,3 (4)-endoglucanohydrolase, beta-1,3 (4) glucan, diatomaceous earth, mineral clay and glucomannan to augment immune function
US8142798B2 (en) 2006-04-26 2012-03-27 OmniGen Research, L.L.C. Augmentation of titer for vaccination in animals
EP3892298A1 (en) 2020-04-09 2021-10-13 PreviPharma Consulting GmbH Epitopes having sequence homology to coronavirus spike protein subunit and uses thereof

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3839555A (en) * 1971-03-26 1974-10-01 Rit Rech Ind Therapeut Vaccine adjuvant and method
FR2402664A1 (en) * 1977-09-07 1979-04-06 Agronomique Inst Nat Rech PHOSPHORYLCHOLINE COUPLING PRODUCTS, AMINO COMPOUNDS METHOD OF OBTAINING AND APPLICATIONS
FR2403081A1 (en) * 1977-09-19 1979-04-13 Merieux Inst NEW PARTICULAR MATERIAL, ITS PREPARATION AND APPLICATION, ESPECIALLY AS A MEDICINAL PRODUCT
US4727136A (en) * 1985-10-01 1988-02-23 Canadian Patents And Development Ltd. Modified meningococcal group B polysaccharide for conjugate vaccine

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