DE2907778C2

DE2907778C2 -

Info

Publication number: DE2907778C2
Application number: DE2907778A
Authority: DE
Inventors: Tadashi Takatsuki Osaka Jp Nakajima; Kyoji Osaka Jp Rikimi; Yasuji Kobe Hyogo Jp Soda; Kenichi Fujiidera Osaka Jp Kashima; Akira Nishinomiya Hyogo Jp Miyamoto; Yoshikazu Osaka Jp Soejima
Original assignee: Nippon Shoji Kaisha Ltd
Current assignee: Azwell Inc
Priority date: 1978-02-28
Filing date: 1979-02-28
Publication date: 1990-09-06
Also published as: DE2907778A1; JPS623127B2; US4263286A; NL7901601A; JPS54117034A

Description

Die Erfindung betrifft die Verwendung von Phosphatidyl säurederivaten der Gruppe Phosphatidylcholine, Phosphatidyl säuren und deren Salze und Phosphatidylethanolamine in Arzneimitteln gegen Wahrnehmungs-, Bewußtseins- und Bewegungs störungen.

Es ist bekannt, daß Phosphatidylcholine, z. B. Lecithine, ausgezeichnete biologische Aktivitäten aufweisen und als Arz neimittel geeignet sind, und daß Polyen-phosphatidylcholin ein hochgereinigtes Lecitin, das man aus Sojabohnen erhält und das sich hauptsächlich aus 1,2-Dilinoleoylphosphatidyl cholin zusammensetzt, eine sehr starke Wirkung gegen Leber schäden aufweist und deshalb zur Behandlung zahlreicher Le bererkrankungen, wie Hepatitis und Fettleber, geeignet ist.

Als Ergebnis von umfangreichen Untersuchungen über die phar makologischen Eigenschaften von Lecithinen und deren Analogen, wurde nun gefunden, daß einige Phosphatidylsäurederivate auch eine hervorragende therapeutische Wirkung bei Wahrneh mungs- und Bewußstseinsstörungen sowie Bewegungsstörungen aufweisen.

Das zunehmende Auftreten von Unfällen, z. B. Automobilunfällen, und von Apoplexy, der Haupttodesursache bei älteren Menschen, verursacht durch das Ansteigen der Bevölkerung im höheren Lebensalter, bedingt, daß zahlreiche Patienten Wahrnehmungs-, Bewußtseins- und Bewegungsstörungen haben und daher ist es ein sehr großes Problem, ein Arzneimittel zu finden, mit dem man diese Leiden behandeln kann. Einige Arzneimittel, wie Citicolin (d. h. Citidindiphosphatcholin), Meclofenoxat hydrochlorid (d. h. (4-Chlorofphenoxy)-essigsäure-2-(dimethyl amino)-ethylester-hydrochlorid) oder Pyrithioxin (d. h. 3,3′- (Dithiodimethylen)-bis[5-hydroxy-6-methyl-4-pyridinmethanol]) sind bereits entwickelt und zur Behandlung von Patienten mit Wahrnehmungs-, Bewußtseins- und Bewegungsstörungen ver wendet worden.

Es wurde nun gefunden, daß einige Phosphatidylsäurederi vate das Bewußtsein anregen und die Motilität des pyranidalen Systems intensivieren und bei Wahrnehmungs-, Bewußt seins- und Bewegungsstörungen wirksam sind und daher kann man diese Verbindungen als wirksame Bestandteile in Arz neimitteln zur Behandlung von Wahrnehmungs-, Bewußtseins- und Bewegungsstörungen verwenden. Bei der Verwendung dieser Ver bindungen in Arzneimitteln erzielt man Effekte, die gleich oder größer sind als die mit den vorher erwähnten, bekann ten Arzneimitteln erzielbaren Wirkungen, wobei aber die außerordentlich niedrige Toxizität der erfindungsgemäß zu verwendenden Verbindung zu beachten ist.

Aufgabe der Erfindung ist es, eine neue Verwendung von Phosphatidylsäurederivaten aufzuzeigen.

Die Erfindung betrifft die Verwendung eines Phosphatidyl säurederivats gemäß dem Patentanspruch 1.

In den Formeln (I), (II) und (III) schließen die Fettsäurereste für R¹ bis R⁶ Reste einer gesättigten Fettsäure mit 6 bis 22 Kohlenstoffatomen, wie Hexansäure, Caprinsäure, Laurin säure, Myristinsäure, Palmitinsäure, Stearinsäure, Arachin säure und Behensäure, und eine ungesättigte Fettsäure mit 14 bis 20 Kohlenstoffatomen, wie Myristoleinsäure, Palmi toleinsäure, Oleinsäure, Linoleinsäure, Linolensäure und Arachidinsäure, ein. Vorzugsweise ist wenigstens einer der Reste R¹ und R² oder von R³ und R⁴ oder von R⁵ und R⁶ ein Rest einer ungesättigten Fettsäure, insbesondere einer höheren ungesättigten Fettsäure, wie Linoleinsäure, Linolen säure und Arachidonsäure. Bei den obigen Formeln (I), (II) und (III), bei denen ein Rest von R¹ und R², von R³ und R⁴ oder von R⁵ und R⁶ Wasserstoff ist, bezeichnet man diese Verbindungen als Lysotyp-Verbindungen, d. h. z. B. Lysophospha tidylcholine, Lysophosphatidylsäuren bzw. Lysophosphatidyl ethanolamine.

Geeignete Beispiele für Phosphatidylsäurederivate sind 1,2-Dihexanoylphosphatidylcholin, 1,2-Dilinoleoyphosphatidyl cholin, 1-Linoleoyl-2-linolenoylphosphatidylcholin, 1-Linoleoyl-2-arachidonylphosphatidyl cholin, 1-Linolenoyl-2-linoleoylphosphatdiylcholin, 1,2- Dilinolenoylphosphatdiylcholin, 1-Linolenoyl-2-arachidonyl phosphatidylcholin, 1-Arachidonyl-2-linoleolphosphatidyl cholin, 1-Arachidonyl-2-linolenoylphosphatidylcholin, 1,2- Arachidonylphosphatidylcholin, 1-Palmitoyl-2-linoleoylphospha tidylsäure-dinatriumsalz, 1-Linoleoyl-2-palmitoylphosphati dylsäure, dinatriumsalz, Dilinoleoylphosphatidylsäure oder deren Natriumsalz und Diarachidonylphosphatidylsäure-dinatrium salz.

Zu diesen Phosphatidylsäurederivaten gehören sowohl natürliche als auch synthetische oder halbsynthetische Produkte, z. B. Lecithine, die von verschiedenen Pflanzen erhalten wurden, wie Sojabohnen, Mais, Rapssamen oder Erdnüssen.

Diese natürlichen Lecithine erhalten einen Rest von hoch-ungesättigten Fettsäuren und es werden hoch gereinigte Produkte bevorzugt. Geeignete Beispiele für sol che natürlichen oder halbsynthetischen Produkte sind Soja bohnenphosphatidylcholin, Sojabohnenphosphatidylsäure-dina triumsalz, Sojabohnenphosphatidylethanolamin, Sojabohnen lysophosphatidylcholin, Sojabohnenlysophosphatidylsäure-dina triumsalz, Sojabohnenlysophosphatidyläthanolamin, und Eidotterphosphatidylsäure-dinatriumsalz.

Verfahren zur Synthese der Phosphatidylsäurederivate sind be kannt. Bevorzugte Verfahren werden in der ungeprüften japa nischen Patentveröffentlichung 91213/1976 und in der US-PS 41 30 571 beschrieben; nach diesen Verfahren erhält man hoch reine Produkte. Andere Literaturstellen, aus denen die Her stellung von Phosphatidylsäurederivaten bekannt ist, sind Biochem. J., Bd. 69, Seite 458 (1958),; ibid. Bd. 102, Seite 205 (1967); und ibid. Bd. 102, Seite 221 (1967).

Die Phosphatidylsäurederivate können Patienten oral oder paren teral, wie durch intramuskuläre Injektion, intravenöse Tropf injektion oder intravenöse Injektion, verabreicht werden, wobei intravenöse Tropfinjektionen und intravenöse Injektio nen bevorzugt werden. Die injizierbaren Lösungen werden ge wöhnlich in Form ihrer wäßrigen Lösungen angewendet und sie können gewöhnlich zahlreiche übliche Additive enthalten, wie löslichmachende Substanzen (z. B. Gallensäure aus der Gruppe Desoxycholinsäure, Apocholinsäure, Chenodesoxycholinsäure, Taurocholinsäure und Cholinsäure), isotonisch-machende Mittel (z. B. Glucose, Natriumchlorid, Kaliumchlorid und Kalziumchlorid), Stabilisatoren (z. B. Ethanol, α-Tocopherol und Nikotinamid), Konservierungsmittel (z. B. Benzylalkohol und Phenol) und pH-Einstellmittel (z. B. Natrium hydroxid, Kaliumhydroxid und Kalziumhydroxid). Für orale Verabreichung kann die aktive Verbindung in üblichen Zubereitungen verwen det werden, wie in Tabletten, Kapseln, Pulvern oder Flüssig keiten (z. B. Suspensionen, Lösungen, Emulsionen oder Sirupen) und in Abmischung mit üblichen pharmazeutischen organischen oder anorganischen Trägermaterialien, die für eine enterale Verabreichung geeignet sind. Zur Herstellung von wäßrigen Zubereitungen kann man die aktive Verbindung auflösen, su spendieren oder in einem wäßrigen Medium mechanisch emulgie ren, z. B. mittels Ultraschall.

Bei der Herstellung von Arzneimitteln für orale Verabrei chungen enthält eine Dosierungseinheit 5 bis 5000 mg, vorzugs weise 10 bis 2000 mg an Phosphatidylsäurederivat und eine solche Dosierungseinheit kann im allgemeinen 1 bis 3 mal täg lich an Erwachsene verabreicht werden. Zubereitungen für Injek tionen enthalten 0,5 bis 500 mg, vorzugsweise 1 bis 100 mg des Phosphatidylsäurederivates als Dosierungseinheit. Die inji zierbaren Zubereitungen werden gewöhnlich bei Erwachsenen einmal täglich verabreicht, sie können jedoch auch zwei- bis dreimal täglich verabreicht werden. Die aktive Verbindung kann somit in einer Dosis von 10 mg bis 15 g, vorzugsweise 50 mg bis 10 g, oral oder in einer Dosierung von 1 bis 1500 mg, vorzugsweise 10 bis 500 mg parenteral an Erwachsene verab reicht werden. Kindern werden kleinere Mengen verabreicht, jedoch kann man wegen der niedrigen Toxizität auch Kindern die gleichen Mengen verabreichen wie Erwachsenen.

Anschließend werden die pharmakologischen Aktivitäten der Phosphatidylsäurederivate unter Bezugnahme auf die Figuren gezeigt.

Die therapeutische Aktivität der Arzneimittel gegen Bewußt seins-, Wahrnehmungs- und Bewegungsstörungen werden im allgemeinen aus den Experimentalergebnissen bei der Arousal- Reaktion und der ausgelösten Muskelentspannung bei den Vorder- und Hinterbeinen durch Stimulierung der retikulären Hirnstammbildung und bei der ausgelösten Muskelentspannung in den vorderen und hinteren Gliedern durch Stimulierung der Großhirnrinde und des Hyppokampus bewertet (cf. Seiichi Fujimoto, J. Kansai Med. Sch., Bd. 21, Nr. 3, Seiten 26-52 (Sept. 1969); Yasuhara et al, Kiso-to-Rinsho, Bd. 9, Nr. 2, Seiten 7-14 (Jan. 1975); und ibid, Bd. 9, Nr. 11, Seiten 151-158 (Okt. 1975)). Die Aktivitäten der Phosphatidyl säurederivate wurden, wie nachfolgend gezeigt wird, auf diese Weise bewertet.

Die folgenden Versuche wurden unter Verwendung von Kanin chen bei der Arousal-Reaktion und der ausgelösten muskulären Entladung durch Stimulierung der retikulären Hirnstammbil dung und auch durch Stimulierung der Großhirnrinde und des Hyppokampus durchgeführt. Aus den Ergebnissen der Arousal-Reaktion und der ausgelösten Muskelentspannung durch Stimulierung der retikularen Hirnstammbildung wurden die Wirkungen der geprüften Verbindungen auf die Funktion des Gehirns hinsichtlich des Bewußtseins und der Bewegung be wertet. Das heißt, daß die Arousal-Reaktion eintritt, wenn die retikulare Hirnstammbildung stimuliert wird und das EEG (Elektroenzephalogramm) der Großhirnrinde und des Hyppokampus aufgezeichnet werden. Verabreicht man ein Arzneimittel mit einer Wirkung auf die Aufhebung des Bewußt seins, so beobachtet man eine Arousal-Reaktion auf das EEG der Großhirnseite und des Hyppokampus auch in dem Fall, wenn der elektrische Stimulus vermindert wird und daher wird die Wirkung der geprüften Verbindung auf die Anhebung des Bewußtseins aus der Beziehung zwischen der Menge der ge prüften Verbindung und dem Grab der Verminderung des elek trischen Stimulus, der erforderlich ist, um die Arousal- Reaktion auftreten zu lassen, bewertet. Die Wirkung der ge prüften Verbindung auf die Bewegung wird gleichzeitig durch Aufzeichnung der ausgelösten Muskelentspannung bei den Vorder- und Hinterextremitäten untersucht.

Aus den Ergebnissen der ausgelösten muskulären Entspannungen durch Stimulierung der Großhirnrinde kann man außerdem die Wirkung der Testverbindung auf die Funktion des Gehirns im Hinblick auf die Bewegung, insbesondere auf die Funktion des pyramidalen Systems, das bei der freiwilligen Bewe gung teilnimmt, bewerten. Wird somit die Großhirnrinde sti muliert, so tritt eine tonische Muskelentspannung öfters in den vorderen Extremitäten als in den hinteren Extremitäten des Kaninchens auf und diese Muskelentspannungen erhöhen sich in der Größe und werden durch die Verabreichung eines Arz neimittels, das eine Erleichterungswirkung auf das System, das an der freiwilligen Bewegung teilnimmt, hat, verlängert. Infolgedessen kann man aus der Beziehung zwischen der Menge der Testverbindung und dem Grad der Erleichterung der Mus kelentspannung die Wirkung der Testverbindung auf die frei willige Bewegung bewerten.

Die Untersuchungen über die Muskelentspannung durch Stimu lierung des Hyppocampus wurden zum Zwecke der Untersuchung der Wirkung auf das extrapyramidale System durchgeführt, welches bei der unfreiwilligen Bewegung eine Rolle spielt. Legt man einen elektrischen Stimulus an den Hyppokampus an, so tritt hauptsächlich eine phasische Muskelentspannung an den vorderen und hinteren Gliedern des Kaninchens auf und infolgedessen kann man durch Beoachtung der Veränderung der Amplitude und der Verlängerung der Muskelentspannung die Wirkung der Testverbindung auf die Erleichterung der unfreiwilligen Bewegung bewerten.

Um die Wirkung der Testverbindung bei einem Symptom, das einem klinischen Zustand ähnelt (z. B. Apoplexie oder Ge hirnoperation) zu bewerten, insbesondere, um die Wirkung auf die Motilität des pyramidalen Systems zu prüfen, zer stört man die innere Kapsel bei Kaninchen und dann wird die Großhirnrinde elektrisch stimuliert und die Muskelent spannungen in den vorderen und hinteren Extremitäten wer den gemessen.

Versuch I Untersuchung der Arousal-Reaktion und der ausgelösten Mus kelentspannung bei normalen Kaninchen Methode

In gleicher Weise wie von Yasuhara et al, Current Therapeu tical Research, Bd. 16, Nr. 4, Seiten 346-374 (April 1974), insbesondere auf Seite 347 beschrieben, wurden normale Kaninchen (1 Gruppe: 5 Kaninchen) ohne Anästhesie elektrisch stimuliert und eine Testverbindung (in Form einer Zusammen setzung gemäß dem nachfolgenden Beispiel 1: hoch-gereinigtes Sojabohnenlecitin, 0,3, 0,5 1, 3 und 5 mg bezogen auf Lecithin) wurde intravenös injiziert und die Wirkungen wurden beobachtet.

Ergebnisse (a) Im Falle der Stimulierung des retikularen Hirn stammes

Legt man einen elektrischen Stimulus von 100 Hz an den re tikularen Hirnstamm vor der Verabreichung der Testverbindung an, so beträgt der Schwellwert der Arousal-Reaktion bei einem Kaninchen 0,8 V in der Großhirnrinde und 0,7 V im Hypo kampus und der Schwellwert der ausgelösten Muskelentspannung bei den vorderen und hinteren Extremitäten betrug 0,8 V. Nach der Verabreichung von 5 mg/kg Lecithin nahm der Schwell wert der Arousal-Reaktion auf 0,4 V sowohl bei der Groß hirnrinde und den Hypokampus ab und der Schwellwert der aus gelösten Muskelentspannung bei den vorderen und hinteren Extre mitäten nahm auf 0,6 V ab. Die Änderung der Schwellwerte vor und nach der Verabreichung der Testverbindung wurde in Prozent ausgedrückt. In den Fig. 1 und 2 werden die Durchschnitts änderungen gezeigt. In diesen Figuren wird auf der Abszisse die Menge der Testverbindung angezeigt und die Ordinate ergibt den Prozentsatz der Schwellwertänderung und der obere Teil bedeutet eine Erhöhung des Schwellwertes (+) und der untere Teil eine Erniedrigung (-) des Schwellwertes und der Punkt Null stellt eine Kontrolle dar (d. h. der Wert vor der Verabreichung der Testverbindung).

Fig. 1 zeigt die Veränderung des Schwellwertes der Arousal- Reaktion und die durchgezogene Linie gibt die Daten der Groß hirnrinde an und die gestrichelte Linie die Daten für den Hyppokampus. Aus diesen Daten wird ersichtlich, daß der Schwellwert der Arousal-Reaktion in der Großhirnrinde und in dem Hyppokampus um mehr als 35% im Durchschnitt bei Ver abreichung der Testverbindung abnahm.

Fig. 2 zeigt die Veränderung der Schwellwerte der ausgelösten Muskelentspannung, wobei die durchgezogene Linie die Daten für das vordere Glied und die gestrichelte Linie die Daten für das hintere Glied angibt. Aus diesen Daten ist ersicht lich, daß die Schwellwerte der ausgelösten Muskelentspannung bei Verabreichung der Testverbindung um etwa 20% abnahmen.

Dabei sei festgestellt, daß zwar die Schwellwerte bei den Fig. 1 und 2 mit einer Zunahme der Menge der Testverbindung dazu neigen anzusteigen, jedoch können sie spontan im Laufe der Zeit ansteigen, weil im Falle der Injektion einer physio logischen Kochsalzlösung (Vergleich) auch eine Erhöhung statt findet.

(b) Stimulierung der Großhirnrinde und des Hyppokampus

Nach den obigen Untersuchungen der Stimulierung des retikula ren Hirnstamms wurde die Wirkung der Testverbindungen auf die Muskelentspannung, die durch eine Stimulierung der Groß hirnrinde und des Hyppokampus ausgelöst wurde, untersucht. Als Ergebnis wurde festgestellt, daß beim Stimulieren der Großhirnrinde nach intravenöser Injektion von 0,3 mg/kg bis 5 mg/kg der Testverbindung die Muskelentspannung in den hinteren Gliedern sich fast nicht veränderte, während die Muskelentspannung in den vorderen Gliedern deutlich er leichtert wurde. Das heißt, daß die erfindungsgemäß ver wendete Verbindung eine erleichternde Wirkung auf die Moti lität des pyramidalen Systems ausübt.

Dagegen wurden bei der Stimulierung des Hyppokampus verschie dene Wirkungen beobachtet. Wird eine der erfindungsgemäß zu verwendenden Verbindungen intravenös in einer Dosis von 3 mg/kg bis 5 mg/kg injiziert, so wird die Muskelentspannung des Streck- und des Beugemuskels sowohl in den Vorder- als auch in den Hintergliedern inhibiert. Das heißt, daß die Stimu lierung des Hyppokampus eine inhibierende Wirkung, im Ge gensatz zu der Stimulierung des Großhirns aufweist und daß daher die Verbindungen der vorliegenden Erfindung eine inhibierende Wirkung auf die Motilität beim extrapyramidalen System aufweisen.

Aus diesen Ergebnissen wird deutlich, daß die vorgenannten Verbindungen eine erleichternde Wirkung auf das Bewußtsein haben und daß sie besonders wirksam hinsichtlich der Motili tät des pyramidalen Systems, d. h. hinsichtlich der motori schen, willkürlichen Bewegung haben.

Versuch II

Die Arousal-Reaktion und die ausgelöste Muskelentspannung bei normalen Kaninchen wurde in gleicher Weise wie im Ver such I untersucht, mit der Ausnahme, daß die in Beispiel 2 beschriebene Zusammensetzung (synthetisches Lecithin) als Test verbindung verwendet wurde.

Die Versuchsergebnisse hinsichtlich der Stimulierung des retikularen Hirnstamms werden in den Fig. 3 und 4 gezeigt. Fig. 3 zeigt die Veränderung des Schwellwertes der Arousal- Reaktion und Fig. 4 zeigt die Veränderung des Schwellwertes bei der ausgelösten Muskelentspannung. Die gleichen für die Fig. 1 und 2 gegebenen Erklärungen gelten auch für diese Figuren.

Aus diesen Untersuchungen wird ersichtlich, daß bei einer Verabreichung von synthetischem Lecithin in einer Dosis von 0,3 mg/kg bis 1 mg/kg der Schwellwert der Arousal-Reaktion und die ausgelöste Muskelentspannung im Vorderglied um etwa 30% durchschnittlich bzw. etwa 20% durchschnittlich ab nahm. Das heißt, daß synthetisches Lecithin die gleiche Wir kung auf das Bewußtsein und die Bewegung hatte wie Soja bohnenlecitin.

Versuch III

Die Arousal-Reaktion bei der Stimulierung des retikularen Hirnstamms bei normalen Kaninchen wurde in gleicher Weise wie im Versuch I untersucht, mit der Ausnahme, daß das Dinatriumsalz von Sojabohnenphosphatidinsäure, Sojabohnen lysophosphatidylcholin, Sojabohnenlysophosphatidinsäure dinatriumsalz, Sojabohnenlysophosphatidylethanolamin, Eidotter phosphatidinsäure-dinatriumsalz, Dihexanoylphosphatidylcholin, Diarachidonylphosphatidylcholin, Diarachidonylphosphatidin säure-dinatriumsalz, Dilinoleoylphosphatidinsäure-dinatrium salz und 1-Linoleoyl-2-palmitoylphosphatidinsäure-dinatrium salz als Testverbindung verwendet wurden. Die erzielten Ergebnisse werden in den Fig. 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 bzw. 14 gezeigt.

Versuch IV

Es wurden Versuche hinsichtlich der Arousal-Reaktion und der ausgelösten Muskelentspannung bei Kaninchen, deren innere Kapsel zerstört worden war, durchgeführt:

Methode

In die innere Kapsel von Kaninchen wurde eine Elektrode zum Zerstören der inneren Kapsel eingeführt und ein elektrischer Strom durch die Elektrode geschickt und dadurch die innere Kapsel zerstört. Den so behandelten Kaninchen wurde die Testverbindung verabreicht, um deren Wirkung auf den Schwell wert der Muskelentspannung bei den vorderen und hinteren Extremitäten durch Stimulierung der Großhirnrinde zu unter suchen. Die Testverbindung (in Form einer Zusammensetzung gemäß Beispiel 1) wurde intravenös in einer Dosis von 0,5 mg/kg oder 1,0 mg/kg (berechnet auf Lecithin) täglich inji ziert.

Die Schwellwerte wurden vor der Zerstörung der inneren Kapsel, unmittelbar nach der Zerstörung und 1 bis 4 Wochen nach der Zerstörung gemessen.

Ergebnisse

Als Vergleichsversuch, ohne Verabreichung der Testverbindung, wurde die Veränderung der Schwellwerte der ausgelösten Mus kelentspannungen in den vorderen und hinteren Extremitäten durch Stimulierung der Großhirnrinde beobachtet. Die Ergebnisse werden in Tabelle 1 gezeigt. In der Tabelle werden die Schwell werte durch die Spannungszahl (V) gezeigt und der Prozent satz der Veränderung (%) bedeutet einen Prozentsatz der Ver änderung der Schwellwerte nach der Zerstörung der inneren Kapsel zu den Schwellwerten vor der Zerstörung. Die verwen deten Abkürzungen haben folgende Bedeutung:

FC:
EEG der Großhirnrinde
FEMG:	ausgelöste Muskelentspannung bei den vorderen Extremitäten
HEMG:	ausgelöste Muskelentspannung bei den hinteren Extremitäten

Aus Tabelle 1 geht hervor, daß unmittelbar nach der Zer störung der inneren Kapsel der Prozentsatz der Veränderung der Schwellwerte durch Stimulierung der Großhirnrinde in den vorderen Extremitäten um durchschnittlich 120% zunahm und um durchschnittlich 89% bei den hinteren Extremitäten und 4 Wochen nach der Zerstörung erhöhte sich die prozentuale Veränderung auf 133% durchschnittlich bei den vorderen Ex tremitäten und auf 129% durchschnittlich bei den hinteren Extremitäten.

In gleicher Weise wie bei den vorstehenden Untersuchungen wurde die Testverbindung intravenös in einer Dosis von 0,5 mg/kg bzw. 1,0 mg/kg täglich injiziert und die Grenzwerte der ausgelösten Muskelentspannung durch Stimulierung der Groß hirnrinde wurde gemessen. Die Ergebnisse werden in Tabelle 2 und 3 gezeigt.

Aus den vorstehenden Ergebnissen ist ersichtlich, daß bei einer intravenösen Injizierung der Testverbindung in einer Dosis von 0,5 mg/kg pro Tag unmittelbar nach der Zerstörung der inneren Kapsel die prozentuale Veränderung der Schwell werte durch Stimulierung der Großhirnrinde um 126% durch schnittlich bei den vorderen Extremitäten und um 207% im Durchschnitt bei den hinteren Extremitäten erhöht wurde; 1 Woche nach der Zerstörung nahm die prozentuale Veränderung auf 21% im Durchschnitt bei den vorderen Extremitäten und auf 63% im Durchschnitt bei den hinteren Extremitäten ab; 2 Wochen nach der Zerstörung betrug die prozentuale Änderung durchschnittlich 26% in den vorderen Extremitäten und durch schnittlich 24% in den hinteren Extremitäten; und 4 Wochen nach der Zerstörung betrug die prozentuale Abnahme durchschnitt lich -17% bei den vorderen Extremitäten und -22% bei den hin teren Extremitäten.

Verabreichte man die Testverbindung in einer Dosis von 1,0 mg/kg unmittelbar nach der Zerstörung der inneren Kapsel, so erhöhte sich die prozentuale Veränderung auf durchschnittlich 278% bei den vorderen Extremitäten und durchschnittlich 223% bei den hinteren Extremitäten; 1 oder 2 Wochen nach der Zer störung wurde eine prozentuale Änderung praktisch nicht festge stellt und die Änderung in den vorderen Extremtitäten nach 1 oder 2 Wochen betrug 252% bzw. 214% im Durchschnitt, je doch wurde 3 Wochen nach der Zerstörung eine prozentuale Änderung von durchschnittlich 19% bei den vorderen Extremi täten und von 0% bei den hinteren Extremitäten festgestellt und 4 Wochen nach der Zerstörung nahm die prozentuale Änderung um -3% durchschnittlich bei den vorderen Extremitäten und um -27% durchschnittlich bei den hinteren Extremitäten ab. Diese Zahlenwerte sind niedriger als vor der Zerstörung und auch niedriger als im Falle der Verabreichung der Testverbin dung in einer Dosis von 0,5 mg/kg.

Bei den an Kaninchen mit zerstörten inneren Kapseln durchge führten Versuchen, bei denen keine Testverbindung verabreicht wurde, nahmen die Schwellwerte der ausgelösten Muskelentspan nung durch Stimulierung der Großhirnrinde erheblich zu, wäh rend bei Verabreichung der Testverbindung die Schwellwerte merk lich abnahmen. Die Wirkung der Testverbindung war stärker bei einer Verabreichung der Testverbindung in Mengen von 0,5 mg/kg als bei einer Dosis von 1,0 mg/kg.

Durch Versuche wurde bereits bestätigt, daß Cytochrom C, Cytocholin, Meclofenoxat-hydrochlorid und Pyrithioxin, die als Arzneimittel für die Behandlung von Bewußtseinsstörungen und Wahrnehmungs- und Bewegungsstörungen verwendet wur den, eine abnehmende Wirkung auf die Schwellwerte der ausge lösten Muskelentspannung bei den vorderen und hinteren Ex tremitäten durch Stimulierung der Großhirnrinde bei Kanin chen, deren innere Kapsel zerstört worden war, hervorrufen. Es wurde nun bestätigt, daß die erfindungsgemäß zu verwendenden Verbindungen die gleiche Wirkung haben, wie die bekannten Arzneimittel.

Versuch V

Um die Wirkung der aktiven Verbindungen auf das Wahrneh mungsvermögen zu prüfen, wurde ein Versuch durchgeführt, hin sichtlich des afferenten ausgelösten Potentials als Ergeb nis der Stimulierung des Ischiasnerves. Wird der Ischiasnerv stimuliert, so wird das in der Großhirnrinde ausgelöste Potential aufgezeichnet und summiert. Diese ausgelösten elektrischen Potentiale sind zuerst 3 kleine negative Anspre chungen, dann erfolgt eine positive Ansprechung und daran anschließend wiederum 2 negative Ansprechungen, die je weils mit N₁, N₂, N₃, P, N₄ und N₅ bezeichnet werden.

Um die Wirkung einer der erfindungsgemäß zu verwendenden Ver bindungen zu prüfen, wurde Dilinoleoylphosphatidinsäure dinatriumsalz geprüft, der Ischiasnerv einmal pro Sekunde stimuliert und die Daten von 50maligem Stimuli und N₁, N₂, N₃, P, N₄ und N₅ wurden aufgezeichnet und summiert. Die Er gebnisse sind in den Fig. 15, 16, 17, 18, 19 und 20 gezeigt in denen die Daten für N₁, N₂, N₃, P, N₄ und N₅ aufgezeichnet sind. In diesen Figuren bedeutet die Ordinate die Verände rung des Wertes jeder Komponente und der obere Teil bedeutet eine Erhöhung des Wertes (+) und der untere Teil eine Erniedri gung des Wertes (-) und der Punkt Null stellt die Kontrolle dar (d. h. der Wert vor der Verabreichung der Testverbindung). Die grafischen Darstellungen zeigen die Durchschnittsände rung und die Abszisse gibt die Menge der verwendeten Test verbindung an.

Wie aus den Ergebnissen deutlich ersichtlich ist, zeigt das Natriumsalz von Dilinoleoylphosphatidinsäure eine Er leichterungswirkung auf die Komponente N₁ und N₂, insbeson dere auf N₁, die eine enge Beziehung zur Wahrnehmung haben. Da die frühen Komponenten, wie N₁ und N₂, hauptsächlich nach dem Ansteigen des afferenten Pfades von der peripheralen zu der cerebralen Rinde auftreten, ist aus den Versuchsergebnissen mit der erfindungsgemäß verwendeten Verbindung ersichtlich, daß diese eine erleichternde Wirkung auf den afferenten Pfad hat.

Toxizität

Die in den Arzneimitten verwendeten Verbindungen haben eine bemerkenswert niedrige Toxizität.

Verabreicht man z. B. Polyenphosphatidylcholin (Sojabohnen phosphatidylcholin) 4 Wochen alten ICR-Mäusen während 7 Tagen intravenös, intraperitoneal, subkutan bzw. oral, in Dosen von 4000 mg/kg, 10 000 mg/kg, 10 000 mg/kg bzw. 10 000 mg/kg, so trat kein Todesfall bei den Mäusen ein. Wurde Polyesphos phatdiylcholin Spragne-Dowley-Ratten während 7 Tagen intra venös, intraperitoneal, subkutan bzw. oral verabreicht in Dosen von 2000 mg/kg, 4000 mg/kg, 4000 mg/kg bzw. 6000 mg/kg, so trat auch bei den Ratten kein Todesfall ein. Darüber hinaus wurden bei keinem der Tiere abnormale Symptome beobachtet, mit der Ausnahme, daß die motorische Bewegung bei den Gruppen etwas inhibiert war, denen große Dosen der Verbindungen ver abreicht worden waren. Ein Unterschied zwischen männlichen und weiblichen Tieren wurde bei beiden Tierarten nicht fest gestellt.

Die akute Toxizität der im nachfolgenden Beispiel 1 beschrie benen Zusammensetzung wurde unter Verwendung von männlichen Wistar-Ratten und Kaninchen geprüft, wobei man 72 Stunden nach der Verabreichung der Verbindung die Anzahl der Todesfälle beobachtete. Bei Ratten beträgt die LD₅₀ bei intraperitonealer Verabreichung 18,3 ml/kg (berechnet auf Polyenphosphatidyl cholin, 915,0 mg/kg) und bei intravenöser Injektion beträgt die LD₅₀ 16,2 ml/kg (berechnet auf Polyenphosphatidylcholin, 810,0 mg/kg). Bei Kaninchen beträgt die LD₅₀ bei intravenöser Injektion 10,0 ml/kg (berechnet für Polyenphosphatidylcholin, 500,0 mg/kg).

Außerdem wurde Dilinoleoylphosphatidinsäure-dinatriumsalz männlichen Mäusen mit einem Gewicht von 25 g in einer Dosis von 100 mg/kg in die Schwanzvene während 30 Sekunden verab reicht und die Tiere wurden 75 Stunden beobachtet. Keine der Mäuse starb.

Klinische Prüfung

Polyenphosphatidylcholin wurde drei Patienten, nämlich einer 64 Jahre alten Frau, die unter einem Hirninfarkt (Thrombus) litt und Bewegungsstörungen im linken Arm und im linken Bein hatte, und auch Bewußtseinsstörungen zeigte, einem 56 Jahre alten Mann, der unter einem Gehirninfarkt litt und Bewegungsstörungen im rechten Arm und im rechten Bein hatte, und einer 39jährigen Frau, die unter den Folgen einer Apoplexy litt und Bewegungsstörungen im linken Arm und im linken Bein hatte, verabreicht. Die Verbindungen wurden diesen Patienten durch intravenöse Tropf-Injektion in einer Dosis von 500 mg/10 ml verabreicht. Die Leiden der Patienten nahmen nach etwa 2- bis 3wöchiger Behandlung ab.

Die Phosphatidinsäurederivate der vorerwähnten Art sind für die Behandlung von Bewußtseinsstörungen und Wahrnehmungs- und Bewegungsstörungen sehr geeignet und sind sehr sicher, insbesondere bei der Behandlung von posttraumatischen Sympto men bei Kopfverletzungen und bei den Folgen von Apoplexy sowie auch bei (Peitschenschlagsyndrom) "Whiplash"-Verletzungen.

Die Zubereitungen der bei den erfindungsgemäßen Arzneimit teln verwendeten Zusammensetzungen werden in den folgenden Beispielen gezeigt.

Beispiel 1

Polyenphosphatidylcholin (hochreines Sojabohnenlecithin)\|50,0 mg
Desoxycholinsäure	23,0 mg
Natriumcholrid	3,5 mg
Natriumhydroxid	2,5 mg
Benzylalkohol	9,0 mg
destilliertes Wasser, gesamt	1,0 ml

Die obigen Verbindungen werden vermischt, und in 1-ml-Ampullen in üblicher Weise abgefüllt.

Beispiel 2

1,2-Dilinoleoylphosphatidylcholin (synthetisches Produkt)\|50,0 mg
Desoxycholinsäure	49,0 mg
Glucose	5 mg
Natriumhydroxid	3,0 mg
Benzylalkohol	9,0 mg
destilliertes Wasser, gesamt	1,0 ml

Die obigen Verbindungen werden in üblicher Weise vermischt und in 1-ml-Ampullen abgefüllt.

Beispiel 3

Sojabohnenphosphatidinsäure-natriumsalz\|25,0 mg
Desoxycholinsäurenatriumsalz	39,0 mg
Glucose	50 mg
Benzylalkohol	4,5 mg
destilliertes Wasser, gesamt	1,0 ml

Die obigen Verbindungen werden vermischt, und in üblicher Weise in 1-ml-Ampullen abgefüllt.

Beispiel 4

1,2-Dilinoleoylphosphatidinsäuredinatriumsalz\|25,0 mg
Desoxycholinsäure-natriumsalz	35,0 mg
Glucose	50,0 mg
Benzylalkohol	4,5 mg
destilliertes Wasser, gesamt	1,0 ml

Die obigen Verbindungen werden vermischt und in üblicher Weise in 1 nl-Ampullen abgefüllt.

Beispiel 5

1,2-Dilinoleoylphosphatidinsäuredinatriumsalz\|25,0 mg
Glucose	50,0 mg
Benzylalkohol	4,5 mg
destilliertes Wasser, gesamt	1,0 ml

Die obigen Verbindungen werden vermischt und die Mischung wird mit Ultraschall behandelt und dann in 1-ml-Ampullen abgefüllt.

Beispiel 6

Sojabohnenlysophosphatidylcholin\|25,0 mg
Glucose	50,0 mg
Benzylalkohol	4,5 mg
destilliertes Wasser, gesamt	1,0 ml

Die obigen Verbindungen werden vermischt und die Mischung wird mit Ultraschall behandelt und in 1-ml-Ampullen abge füllt.

Beispiel 7

Sojabohnenphosphatidinsäuredinatriumsalz\|25,0 mg
Glucose	50,0 mg
Benzylalkohol	4,5 mg
destilliertes Wasser, gesamt	1,0 ml

Die obige Verbindung wird vermischt und die Mischung wird mit Ultraschall behandelt und dann in 1-ml-Ampullen abgefüllt.

Beispiel 8

1,2-Dihexanoylphosphatidylcholin\|25,0 mg
Glucose	50,0 mg
Benzylalkohol	4,5 mg
destilliertes Wasser, gesamt	1,0 ml

Die obige Verbindung wird gemischt und die Mischung wurde mit Ultraschall behandelt und in 1-ml-Ampullen abgefüllt.

Claims

1. Verwendung eines Phophatidylsäurederivates aus der Gruppe Phosphatidylcholin der allgemeinen Formel worin R¹ und R², die gleich oder verschieden sind, jeweils einen Rest einer ungesättigten Fettsäure mit 14 bis 20 Koh lenstoffatomen bedeuten, oder einer der Reste R¹ und R² Wasserstoff ist und der andere einen Rest einer gesättig ten Fettsäure mit 6 bis 22 Kohlenstoffatomen oder einen Rest einer ungesättigten Fettsäure 14 bis 20 Kohlenstoffato men bedeutet, oder R¹ und R² beide Hexanoylgruppen sind;
Phosphatidylsäure der allgemeinen Formel worin R³ und R⁴ gleich oder verschieden sind und jeweils Wasserstoff, einen Rest einer gesättigten Fettsäure mit 6 bis 22 Kohlenstoffatomen, oder einen Rest einer unge sättigten Fettsäure mit 14 bis 20 Kohlenstoffatomen be deuten, mit dem Proviso, daß wenigstens einer der Reste R³ oder R⁴ ein Rest der vorgenannten gesättigten oder ungesättigten Fettsäuren ist, oder eines Salzes davon;
oder Phosphatidylethanolamin der allgemeinen Formel worin R⁵ und R⁶ gleich oder verschieden sind und je weils Wasserstoff, einen Rest einer gesättigten Fettsäure mit 6 bis 22 Kohlenstoffatomen, oder einen Rest einer ungesättigten Fettsäure mit 14 bis 20 Kohlenstoffatomen bedeuten, mit dem Proviso, daß wenigstens einer der Re ste R⁵ und R⁶ ein Rest der oben genannten gesättigten oder ungesättigten Fettsäuren ist, zur Bekämpfung von Wahrnehmungs-, Bewußtseins- und Bewegungsstörungen.

2. Verwendung gemäß Anspruch 1, dadurch gekenn zeichnet, daß das Phosphatidylsäurederivat eine Verbindung aus der Gruppe Sojabohnenphosphatidylcholin, Sojabohnenphosphatidylsäure dinatriumsalz, Sojabohnenphosphatidyläthanolamin, Eidotter phosphatidylsäure-dinatriumsalz, Sojabohnenlysophosphati dylcholin, Sojabohnenlysophosphatidylsäure-dinatriumsalz, Sojabohnenlysophosphatidylethanolamin, 1,2-Dihexanoyl phosphatidylcholin, 1,2- Dilinoleoylphosphatidylcholin, 1,2-Diarachidonylphosphatidylcholin, 1-Palmitoyl-2-linoleoylphosphatidylsäure-dinatriumsalz, 1-Linoleoyl-2-palmitoylphosphatidylsäure-dinatriumsalz, 1,2-Dilinoleoylphosphatidylsäure-dinatriumsalz und 1,2-Diarachidonylphosphatidylsäure-dinatriumsalz ist.

3. Verwendung gemäß Anspruch 1, dadurch gekenn zeichnet, daß für intravenöse Injektionen der Gehalt an Phosphatidylsäurederivat 0,5 bis 500 mg pro Dosierungseinheit beträgt.

4. Verwendung gemäß Anspruch 1, dadurch gekenn zeichnet, daß für orale Verabreichung der Ge halt an Phosphatidylsäurederivat 10 bis 5000 mg pro Do sierungseinheit beträgt.