DE479731C

DE479731C - Verfahren zur Gewinnung von Prolin, Oxyprolin und anderen stickstoffhaltigen Verbindungen aus Hydrolysaten oder Auszuegen tierischer oder pflanzlicher Stoffe

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Publication number: DE479731C
Application number: DEK98814D
Authority: DE
Original assignee: JOSEPH KAPFHAMMER DR
Current assignee: JOSEPH KAPFHAMMER DR
Priority date: 1926-04-25
Filing date: 1926-04-25
Publication date: 1929-07-31

Description

Verfahren zur Gewinnung von Prolin, Oxyprolin und anderen stickstoffhaltigen Verbindungen aus Hydrolysaten oder Auszügen tierischer oder pflanzlicher Stoffe Es ist bekannt, daß man Prolin, Oxvprolin oder andere stickstoffhaltige Verbindungen aus Hydrolysaten oder Auszügen pflanzlicher oder tierischer Stoffe durch tagelanges Extrahieren mit Butylalkohol oder durch Veresterung oder durch Fällung mit Phosphorwolframsäure gewinnen kann. Diese Methoden sind sehr umständlich, kostspielig und zeitraubend.
Im folgenden ist ein Verfahren beschrieben, welches gestattet, aus tierischen oder pflanzlichen Stoffen Prolin, Oxyprolin oder andere stickstoffhaltige Verbindungen auf einfache Weise aus Hydrolysaten oder Auszügen der erwähnten Ausgangsstoffe abzuscheiden.
Das Verfahren besteht darin, daß man die Hydrolysate oder Auszüge, unter oder-ohne vorherige Reinigung, mit einer wäßrigen Lösung von Ammoniumdiaminchromrhodanid (Reineckesalz) fällt und aus dem entstandenen Niederschlag unmittelbar das Prolin oder Oxyprolin oder andere stickstoffhaltige Verbindungen durch Zerlegen mit löslichen Salzen von Schwermetallen, wie des Quecksilbers, Silbers oder Kupfers, abscheidet. Diese stickstoffhaltigen Verbindungen sollen therapeutische Verwendung finden. Beispiel i Darstellung des Oxyprolins und des Prolins aus Eiweißhydrolysat Das schwefelsaure Hydrolysat von zoo g Gelatine wird mit einer gesättigten wäßrigen, etwa 5prozentigen Lösung von Ammoniumdiaminchromrhodanid versetzt. Der entstandene Niederschlag wird abgesaugt und mit kaltem Wasser gewaschen. Er besteht aus einem Gemisch der komplexen Chromverbindungen des Oxyprolins und Prolins; er wird noch feucht in Wasser gebracht und bei einer Temperatur von 6o° gelöst. Diese Lösung wird mit einer 5prozentigen Lösung von Quecksilberchlorid in Äthylalkohol (oder in Methylalkohol oder in Wasser) zersetzt. Im Filtrat sind die Chloride des Oxyprohns und Prolins enthalten: durch Kochen mit Silbercarbonat werden die Chloride in die freien Säuren übergeführt. Das Filtrat des Silberchlorniederschlages, welches freies Oxyprolin und Prolin enthält, wird durch Eindampfen zur Trockne gebracht.

a) Oxyprolin. Der nach Abdampfen der eben erhaltenen wäßrigen Lösung zurückgebliebene kristallisierte Rückstand wird mit absolutem Alkohol extrahiert. Das Prolin

geht in Lösung; das Oxyprolin bleibt unge-

löst, es ist analysenrein.

b) Prolin. Die alkoholische Lösung wird

mit absolutem Äther versetzt, hierbei kristal-

lisiert analysenreines Prolin aus.

Ausbeute an Oxyprolin...... g g

Ausbeute an Prolin......... 159.

Die Identifizierung des Oxyprolins und des

Prolins erfolgte durch Festlegung folgender

Konstanten: _

i. Bestimmung des freien Aminostickstoffs

nach van Slyke;

z. Bestimmung des Gesamtstickstoffs nach

Kjeldahl;

3. Herstellung der Pikrate.

a. Oxyprolin

Aminostickstoff nach v a n S 1 y k e

e = 0,o657 g.

Amino-N = o,oo6 ccm bei 16°, 75o mm

= 0,000007 g N, also nahezu frei von

Amino-N.

Gesamtstickstoff nach K j e 1 d a h l

,e=o,1314g.

Vorlage: 19,58 11/1o Schwefelsäure

Verbraucht: 9,47 ccm n/10 Na OH

10,1r ccm = 0,0142 g N.

Gefunden: 10,7 "/o N.

Berechnet: 10,7 0/0 N für C5 H903 N.

Oxyprolinpikrat: Schmelzpunkt 189°. Das

Derivat ist in der Literatur noch nicht be-

schrieben: C@H90"N. C6H2 (OH) (N0.,).3.

Mikro-Pregl : e = 4,648 mg.

Gefunden: 1,45o mg H20 --- 3,5"/,H

6,1g0 mg C02 =36,8 01% C.

Berechnet: 36,6 010 C, 3,6 0I0 H.

b. Prolin

Aminostickstoff nach v a n S 1 y k e

e=o,o61gg.

Amino-N = o,oo35 ccm bei 16°, 75o mm

= 0,000004 g 'N, also nahezu frei von

Amino-N.

Gesamtstickstoff nach K j e 1 d a h 1:

e-0,1249.

Vorlage: 1g,xo ccm "/1o Schwefelsäure

Verbraucht: 8,35 ccm "/,0 NaOH

10,75 ccm - 0,015o g N.

Gefunden: 12,x5 % N.

Berechnet: 12,170/0N für C5H902N.

Prolinpikrat: Schmelzpunkt i52°.

Mikro-Pregl : e =: 4,202 mg

1,4o0 mg H20 - 3"64 % H

5,910 mg C02 -38,370/0C.

Gefunden: 38,37 % C, 3,64 % H.

Berechnet: 38,4 % C, 3,5 % H für

C5 H902 N ' C0 H2 (OH) (NO2) 3.

Beispiel 2

Darstellung einer stickstoffhaltigen Verbin-

dung, nämlich des Cholins, aus dem Auszug

junger Lupinenpflanzen

4 kg frischer 12 Tage alter Lupinen-

pflänzchen (Lupinus luteus) werden zermahlen

und in 4 1 kochenden Methylalkohol einge-

tragen. Nach io Stunden wird abgesaugt

und in einer Probe des Filtrates: der Gesamt-

stickstoff nach K j e 1 d a h 1 bestimmt; er be-

trug 1,4 %. Die Gesamtmenge des Filtrates

wird hierauf durch Destillation vom Alkohol

befreit. Die wäßrige Lösung wird mit einer

gesättigten wäßrigen Lösung des Ammonium-

diaminchromrhodanids gefällt und der noch

feuchte Niederschlag mit Methylalkohol ex-

trahiert. Der methylalkoholischeExtrakt wird

mit einer alkoholischen Quecksilberchlorid-

Iösung zerlegt. Im Filtrat ist als, stickstoff-

haltiger Bestandteil das Chohn als Chlorid

enthalten. Die alkoholische Lösung dieses

Cholinchlorids wird mit Goldchloridlösung

versetzt; hierbei entsteht ein. Niederschlag,

der als das Goldsalz des Cholins identifiziert

wurde. Der Niederschlag wog nach dem

Trocknen im Exsikkator über konz. Schwefel-

säure 2 g.

Analyse des Cholingoldchlorids, Mikro-

Pregl

x. e _-_ 1o,o6o mg.

Gefunden: 2,890 mg H20 - 3,21 0'o H

5,05o mg C02 - 13,7o 0, 'o C

4405 mg Au = 438o 0;1oAu.

2. e - 11,79o mg.

Gefunden: 3,440 mg H20 = 3,26 0i0 H

5,82o mg C02_-_ 13,46 0/0 C

5,205 mg Au --- 44,14 o.@oAu.

Berechnet für C5 H14N0 # Au C14 : 3,x6 0:0H,

4443 % Au, 13,56 % C.

Claims

PATENTANSPRUCH: Verfahren zur Gewinnung von Prolin, Oxyprolin 'und anderen stickstoffhaltigen

Verbindungen aus Hydrolysaten oder Auszügen tierischer oder pflanzlicher Stoffe, dadurch gekennzeichnet, daß man zu den betreffenden Hydrolysaten oder Auszügen eine Lösung von Ammoniumdiaminchromrhodanid (Reineckesalz) gibt, den entstandenen Niederschlag entweder erneut unter Erwärmen in Wasser löst oder ihn mit Äthyl- oder Methylalkohol extrahiert, die wäßrige oder alkoholische Lösung mit löslichen Salzen von Schwermetallen, wie des Quecksilbers, Silbers oder Kupfers, versetzt, den gebildeten Niederschlag der Metallsalze der komplexen Chromverbindung (Reineckesäure) abfiltriert und aus dem Filtrat die mineralsauren, Salze der stickstoffhaltigen Verbindungen durch Eindampfen abscheidet.