DE545781C - Verfahren zur Gewinnung von angereicherten Thrombinpraeparaten - Google Patents
Verfahren zur Gewinnung von angereicherten ThrombinpraeparatenInfo
- Publication number
- DE545781C DE545781C DEH112645D DEH0112645D DE545781C DE 545781 C DE545781 C DE 545781C DE H112645 D DEH112645 D DE H112645D DE H0112645 D DEH0112645 D DE H0112645D DE 545781 C DE545781 C DE 545781C
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- thrombin
- acid
- production
- thrombin preparations
- preparations
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 title claims description 21
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 title claims description 21
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000002156 adsorbate Substances 0.000 claims description 7
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 5
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- AAWZDTNXLSGCEK-LNVDRNJUSA-N (3r,5r)-1,3,4,5-tetrahydroxycyclohexane-1-carboxylic acid Chemical compound O[C@@H]1CC(O)(C(O)=O)C[C@@H](O)C1O AAWZDTNXLSGCEK-LNVDRNJUSA-N 0.000 claims description 2
- AAWZDTNXLSGCEK-UHFFFAOYSA-N Cordycepinsaeure Natural products OC1CC(O)(C(O)=O)CC(O)C1O AAWZDTNXLSGCEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 claims description 2
- AAWZDTNXLSGCEK-ZHQZDSKASA-N Quinic acid Natural products O[C@H]1CC(O)(C(O)=O)C[C@H](O)C1O AAWZDTNXLSGCEK-ZHQZDSKASA-N 0.000 claims description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims description 2
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 claims description 2
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 3
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 2
- 238000000909 electrodialysis Methods 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
- C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
- C12N9/6424—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12N9/6429—Thrombin (3.4.21.5)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
- C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12Y304/21005—Thrombin (3.4.21.5)
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
- Verfahren zur Gewinnung von angereicherten Thronlbinpräparaten Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Gewinnung von angereicherten Thrombinpräparaten, und es kommt dabei darauf an, daß man mit Aluminiumhydroxyd erhaltene Thrombinadsorbate mit Oxysäuren, wie Citronensäure, Weinsäure, Chinasäure, Glykolsäure oder Milchsäure, oder wäßrigen Lösungen der Salze dieser Säuren eluiert.
- Bisher ist man sich über die Natur des Thrombins noch sehr im Unklaren und weiß nicht einmal gewiß, ob man es als ein Ferment anzusprechen hat oder nicht. Während einige Forscher es bei den Fermenten besprechen, bestreiten andere, daß es Fermentnatur besitze. Daher konnte nicht einmal mit Sicherheit vorausgesehen werden, ob das Thrombin wie die Fermente bekannter Art imstande sein würde, mit Aluminiumhy droxyd Adsorbate zu bilden. Wie dem aber auch sei, jedenfalls war nicht vorauszusehen, daß die mit Aluminiumhydroxyd gebildeten Thrombinadsorbate leicht mit Hilfe von Oxvsäuren der oben angegebenen Art bzw. deren Salzen eluiert werden können. Man erhält dabei <las gereinigte Thrombin in guter Ausbeute und ohne Herabsetzung seiner Wirksamkeit. Das war keinesfalls vorauszusehen, um so weniger, als bei Anwendung der in der Fermentchemie für die Elution von Adsorbaten gebräuchlichen verdünnten anorganischen Säuren o. dgl. das Thrombin zerstört wird. Die Fähigkeit der Oxysäuren, Thrombinadsorbate ebenfalls zerlegen zu können, aber ohne die Wirksamkeit des Thrombins herabzusetzen, also ohne dieses zu schädigen oder zu zerstören, ist demgegenüber als überraschend anzusehen.
- Die wäßrigen Eluate können nach Entfernung der überschüssigen Salze durch Dialyse oder Elektrodialyse im Hochvakuum bei möglichst niedrigen Temperaturen (3o°) zur Trockne gebracht werden.
- Beispiel Das Thrombin kann durch das neue Verfahren grundsätzlich aus jeder Thrombinlösung abgetrennt, gereinigt und konzentriert werden. Im besonderen eignet sich die nach @1@T e'11 a n b y (journ. of Physiology 38, 24, tgo9) dargestellte Thrombinlösung, da sie rasch herstellbar ist und das Thrombin in reichlichen Mengen enthält.
- z 1 der nach M e 11.a n b y dargestellten Thrombinlösung werden zur Adsorption des Thrombins mit aoo ccm Aluminiumhydroxydsuspension (3o bis 35 mg A1 (OH.) 3/ccm) etwa 3o Minuten geschüttelt und zentrifugiert. Das Adsorbat wird zur Elution des Thrombins mehrmals (drei- bis viermal) mit je ioo ccm Natriumcitratlösung 15 Minuten geschüttelt und zentrifugiert. Diese Natriumcitratlösung wurde derart erhalten, daß So g Natriurncitrat -f- l 5 3101. Kristallwasser J in 36o ccm H.0 gelöst und das PH der Lösung durch Zugabe von Citronensäure auf 6 gebracht wurde. Die vereinigten Eluate werden zur Entfernung der Salze der gewöhnlichen Dialyse sowie Elektrodialyse unterworfen. Die so gewonnenen salzarmen Thrombinlösungen werden im Hochvakuum bei möglichst geringer Temperatur (3o°) eingeengt.
- Das auf diese Weise dargestellte Trockenpräparat stellt, falls Verunreinigungen durch Bakterien und Temperaturen über 40° vermieden wurden, ein haltbares und auf Blut und Plasma hochwirksames Produkt dar. Natürlich ist dieses Präparat noch kein chemisch reines Thrombin.
Claims (1)
- PATENTANSPRUCH: Verfahren zur Gewinnung von angereicherten Thrombinpräparaten, dadutch gekennzeichnet, daß man mit Aluminiumhydroxy d erhaltene Thrombinadsorbatemit Oxysäuren, wie Citronensäure, Weinsäure, Chinasäure, Glykolsäure oder Milchsäure, oder wäßrigen Lösungen der Salze dieser Säuren eluiert.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DEH112645D DE545781C (de) | 1927-08-13 | 1927-08-13 | Verfahren zur Gewinnung von angereicherten Thrombinpraeparaten |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DEH112645D DE545781C (de) | 1927-08-13 | 1927-08-13 | Verfahren zur Gewinnung von angereicherten Thrombinpraeparaten |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE545781C true DE545781C (de) | 1932-03-05 |
Family
ID=7171609
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DEH112645D Expired DE545781C (de) | 1927-08-13 | 1927-08-13 | Verfahren zur Gewinnung von angereicherten Thrombinpraeparaten |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| DE (1) | DE545781C (de) |
-
1927
- 1927-08-13 DE DEH112645D patent/DE545781C/de not_active Expired
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE580285C (de) | Verfahren zur Herstellung von Aminosaeuren aus keratinhaltigen Stoffen | |
| DE545781C (de) | Verfahren zur Gewinnung von angereicherten Thrombinpraeparaten | |
| DE475114C (de) | Verfahren zur Herstellung eines Zahnputzmittels | |
| DE441614C (de) | Verfahren zur Herstellung eines antidiabetisch wirksamen Praeparates aus Pankreasdruesen | |
| DE858631C (de) | Verfahren zur Behandlung von Kaese | |
| DE619977C (de) | Verfahren zum Herstellen von Zitronensaeure durch Gaerung | |
| DE2106706B2 (de) | Verfahren zur herstellung von pankreatin als trockenes pulver mit hoher proteolytischer, amylolytischer und lipolytischer aktivitaet | |
| DE654960C (de) | Verfahren zur Darstellung von wasserstoffuebertragenden Co-Enzymen | |
| AT114598B (de) | Verfahren zur Herstellung von antiseptisch wirkenden Mitteln. | |
| DE921281C (de) | Verfahren zur Herstellung eines Heilmittels fuer Gelenkrheumatismus und Brand sowie zur allgemeinen Beruhigung der Nerven | |
| DE876443C (de) | Verfahren zur Reinigung von Praeparaten, die den antiperniciosa-anaemischen Faktor enthalten | |
| DE478947C (de) | Verfahren zur Herstellung eines haltbaren, leicht loeslichen, hellfarbigen Ureasetrockenpraeparates | |
| AT243822B (de) | Verfahren zur Verminderung der Neigung zum Zusammenbacken von Natriumchlorid | |
| AT52848B (de) | Verfahren zur Herstellung von Präparaten für diagnostische und Heilzwecke aus Reinkulturen der für die einzelne Krankheit als spezifisch erkannten Erreger. | |
| DE712563C (de) | Verfahren zum Stabilisieren von Wirkstoffen | |
| DE391675C (de) | Verfahren zur Herstellung hochwirksamer eiweissverdauender Fermente aus Proteinen | |
| DE487199C (de) | Verfahren zur Darstellung von gereinigten Tuberkulinpraeparaten | |
| DE501503C (de) | Verfahren zur Darstellung von Praeparaten mit tuberkulinartiger Wirkung | |
| AT217636B (de) | Verfahren zur Herstellung eines leicht wasserlöslichen Proteinpräparates für die Carcinomdiagnose | |
| DE346219C (de) | Verfahren zur Herstellung von Blaettchenalbumin | |
| DE562818C (de) | Verfahren zur Adsorption von Salzsaeure | |
| AT325783B (de) | Verfahren zum abtrennen des glykofrangulin-komplexes aus pflanzlichen rohstoffen, insbesondere aus der getrockneten rinde des faulbaumes | |
| DE651181C (de) | Verfahren zur Herstellung von diastasehaltigen Enzympraeparaten | |
| DE652281C (de) | Verfahren zur Gewinnung von Milchkasein | |
| AT203639B (de) | Verfahren zur Herstellung von elementarem Silber mit hohen bakteriziden Eigenschaften und katalytischer Aktivität |