DE837007C - Verfahren zur Herstellung von Dextran-Abbau-Produkten fuer medizinische Zwecke - Google Patents
Verfahren zur Herstellung von Dextran-Abbau-Produkten fuer medizinische ZweckeInfo
- Publication number
- DE837007C DE837007C DEA28A DEA0000028A DE837007C DE 837007 C DE837007 C DE 837007C DE A28 A DEA28 A DE A28A DE A0000028 A DEA0000028 A DE A0000028A DE 837007 C DE837007 C DE 837007C
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- dextran
- viscosity
- manufacture
- degradation products
- medical purposes
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 title claims description 33
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 title claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 16
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 16
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims description 9
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 9
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims description 9
- 241000863387 Cellvibrio Species 0.000 claims description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 2
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 2
- 244000009727 Crotalaria berteroana Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000011990 functional testing Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 239000003058 plasma substitute Substances 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N sodium nitrate Inorganic materials [Na+].[O-][N+]([O-])=O VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
- C08B37/0009—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid alpha-D-Glucans, e.g. polydextrose, alternan, glycogen; (alpha-1,4)(alpha-1,6)-D-Glucans; (alpha-1,3)(alpha-1,4)-D-Glucans, e.g. isolichenan or nigeran; (alpha-1,4)-D-Glucans; (alpha-1,3)-D-Glucans, e.g. pseudonigeran; Derivatives thereof
- C08B37/0021—Dextran, i.e. (alpha-1,4)-D-glucan; Derivatives thereof, e.g. Sephadex, i.e. crosslinked dextran
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Description
- Verfahren zur Herstellung von Dextran -Abbau-Produkten für medizinische Zwecke Es ist bereits lekannt, daß durch eine milde hydrolytisclle Behandlung des hochmolekularen, neutralen P()ly saccharids Dextran ein Produkt erhalten werden kann, welches für medizinische Zwecke, z. B. bei Salben, als Plasmaersatzmittel und in Lösungen verwendet wurde, welche für Funktionspriifungen, z. B. der Nieren, benutzt werden. Zu diesem Zweck wurde eine milde hydrolytische Behandlung von Dextran angegeben, welche in einem sauren Medium ausgeführt wurde, so daß eine tilischung von polymeren Homologen von teilweise depolymerisiertem Dextran erhalten wird, welche in Wasser löslich ist und bei einer Konzentration voll 4O in Wasser eine relative \'iskosität zwischen 1,3 und 15 zeigt, obwohl diese Viskosität, wie jetzt nachgewiesen wurde, in gewissen Fällen vorteilhaft bis auf 1,2 herabgesetzt werden kann.
- Es wurde nun überraschenderweise gefunden, daß T)extran-Abbau-Produkte mit solchen Eigenschaften durch eine geregelte teilweise Spaltung des Dextrans auf enzymatischem Wege erhalten werden können, z. B. mit Hilfe von Enzymen oder Mikroorganismen, welche in einem Dextran enthaltenden Substrat, welches Enzyme erzeugt, kultiviert wurden. Die Arbeitsbedingungen können in weiten Grenzen verschieden gewählt werden, und indem man Proben in verschiedenen Zwischenräumen entnimmt und die Viskosität feststellt, ist es möglich, die erforderlichen Behandlungsperioden zu ermitteln, welche für die Erreichung des gewünschten Spaltungsgrades verlangt werden.
- In diesem Zusammenhang wird bemerkt, daß der Ausdruck Mikroorganismen Bakterien, Schimmel, Hefen und andere Pilzarten einschließt. Unter diesen '.Iikroorganismen hat sich beispielsweise die Art Cellvibrio (z. B. C. fulva) als geeignet erwiesen.
- Im folgenden sind einige Ausführungsbeispiele für die Herstellung von teilweise gespaltenem und dennoch hochmolekularem Dextran angegeben, und zwar, nach der vorliegenden Erfindung mit Hilfe -on Enzymen und Enzyme erzeugenden Mikroorganismen.
- Beispiel I Der Mikroorganismus Cellvibrio fulva wird in einem Substrat von folgender Zusammensetzung geziichtet: 0,5 g NaN03, 0,25 g K2HPO4, 0,1 g MgSO4, 7 g H20, 20 g Dextran und I 1 Leitungswasser. Die Bakterien werden, nachdem sie sich genügend entwickelt haben, in der Kulturflüssigkeit in einer geeigneten Stühle zerrieben. Die Lösung wird in einem Nitrocellulosebeutel einige Tage lang bei einigen Graden über Null gegen Wasser dialysiert. Nach der Dialyse wird die I,ösung zentrifugiert, bis sie klar ist, und durch ein Glasfilter, z. B. Jena G 4, filtriert.
- Ein solcher Enzymextrakt wurde dann zur Dextranlösung gegeben. Der Dextrangehalt der Lösung war 0,7%. Die Versuchstemperatur war 25,o° C, und der Wert betrug 5,2.
- Die Spaltung des Dextrans wurde unter anderem durch Messungen der Viskosität und Bestimmungen des Betrages von reduzierendem Zucker verfolgt.
- I)ie folgende Tabelle zeigt, wie die relative Viskosität im Laufe der Zeit unter den erhaltenen Versuchsbedingungen sinkt.
Zeit nach Relative Spe- Betrag des frei Beginn des Viskosi- zifische gewordenen reduzie- Versuchs Viskosi- renden Zuckers in Pro- in Minuten tät tät zenten des Dextrans o I,78 0,78 0 7 1,76 0,76 20 I,72 0,72 50 I,6I o,6I 6,6 1,57 0,57 o 100 1,50 0,50 230 1,33 0,33 367 1,24 o,24 1 54° 1,19 0,19 2 1406 1,09 0,09 3 - Diese Versuche sind, wie erwähnt, mit einer Nonzentration von 0,70/0 ausgeführt, bezogen auf eine 4°/'Oige Lösung. Der Wert bei einer Versuchszeit von 230 Minuten für die relative Viskosität 1,33 entspricht bei einer 4%igen Lösung einem relativen Viskositätswert von 4,2, und bei einerVersuchszeit von 1406 Minuten entspricht dem angegebenen Viskositätswert von 1,09 bei einer 4%igen Lösung ein Wert von I,5.
- Die relative Viskosität ar = t//710, wobei rl die Viskosität der Lösung mit z1O die Viskosität des Lösungsmittels, im vorliegenden Fall Wasser, ist. Die spezifische Viskosität r/,p = 1.
- Wie aus dieser Tabelle zu ersehen, wird die Viskosität deutlich herabgesetzt, obwohl nur sehr geringe Beträge von reduzierendem Zucker gebildet werden.
- Im Laufe des Versuches wird auch die Niederschlagskonstante erniedrigt. Der Versuch zeigt, daß während der ersten Spaltung des Dextrans verhältnismäßig große Bruchstücke des nextranmoleküls gebildet werden. Nach der vorliegenden Erfindung kann diese Teilspaltung. des Dextrans unterbrochen werden, wenn der gewünschte Viskositätswert erreicht ist. Dies kann durch Zerstörung des Enzyms, z. B. durch Erhitzen, geschehen. Auf diese Weise ist es mit Hilfe von Enzymen möglich, das Dextran teilweise auf eine solcheMolekulargröße zu spalten, welche in die obenerwähnten Grenzen für die relative Viskosität des schon früher bekannten, teilweise hydrolysierten t)extrans fällt.
- Beispiel 2 Zu 500 cm3 4%iger hochviskoser Rohdextranlösung werden 200cm3 Enzymlösung zugegeben, welche durch wässerige Extraktion einer Cellvibrio-fulva-Kultur hergestellt wurde. Der pH-Wert der Mischung ist 5,2.
- Die Temperatur wurde bei 25° C gehalten. (Gleichlaufend mit diesem Versuch wurde ein Kontrollversuch in derselben Weise ausgeführt, nur mit dem Unterschied, daß das Enzym weggelassen wurde.) Nach 3 Tagen wurde das Dextran in beiden Versuchen mit Alkohol ausgefällt. Das Dextran wurde noch einmal in Wasser aufgelöst und durch Dialyse gegen Wasser in einem Beutel aus Cellulosehydratfolie gereinigt. Die aus dem teilweise gespaltenen Dextran durch Enzymwirkung bereitete Dextranlösung hatte einen Gehalt an Trockensubstanz, der bis auf 3,5% anstieg, und ihre relative Viskosität war 5,2, was in 4%iger Lösung einer relativen Viskosität von 6,I entspricht. (Die aus dem Dextran aus dem Kontrollversuch bereitete Dextranlösung hatte einen Gehalt an Trockensubstanz, welcher bis zu 2,80/o stieg, und ihre relative Viskosität war 28,7.) Der Versuch zeigt, daß es auf diesem Wege möglich ist, ein teilweise gespaltenes Dextran zu erhalten, welches innerhalb der oben angegebenen Grenzen liegt.
- Beispiel 3 Rohdextran wurde der unmittelbaren Einwirkung des Mikroorganismus Cellvibrio fulva in einer Lösung folgender Zusammensetzung bei 25 bis 30 C ausgesetzt: Na N 03 0,5 g K2HPO4 . 0,25 g MgSO4 . 0,1 g Rohdextran .. . 20 g Leitungswasser . . .. 1 1 Das Wachstum des Mikroorganismus wurde u. a. durch die Bildung einer gelben Farbe im Substrat und die deutliche Herabsetzung der Viskosität der Kulturflüssigkeit infolge der Spaltung des Dextrans beobachtet. Durch Entnahme von Proben in geeigneten Zwischenräumen, Fällen des Dextrans mit Alkohol, Reinigen desselben durch Dialyse und Messen der Viskosität der isolierten Dextranproben ist es so möglich, Produkte mit einem geeigneten Spaltungsgrad in derselben Weise wie nach Beispiel I und 2 herzustellen. Die Spaltung des Dextrans kann z. B. unterbrochen werden, wenn bei einer Konzentration von 40/0 die relative Viskosität 7 beträgt.
Dauer der Hy(trolyse Relative Viskosität in Stunden (6%) I Ion 75 () 37 S 27 19 14 44 6,7 jo 6.1 h7 4.5 146 2,3 356 1,8
Claims (2)
- PATENTANSPRÜCHE: I. Verfahren zur Herstellung von Dextran-Abbau-Produkten für medizinische Zwecke, dadurch gekennzeichnet, daß man Dextran einer Spaltung mit Hilfe von Enzymen oder von Enzyme erzeugenden, auf einem Dextran enthaltenden Substrat gezüchteten Mikroorganismen unterwirft und diese Behandlung zu einem Zeitpunkt unterbricht, in welchem eine wässerige Lösung der erzeugten Produkte bei einer Konzentration von 4 eine relative Viskosität zwischen 1,2 bis 15 zeigt.
- 2. Verfahren nach Anspruch I, dadurch gekennzeichnet, daß die Spaltung mit Hilfe der Mikroorganismus Cellvibrio fulva oder eines Enzyms desselben ausgeführt wird.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE837007X | 1948-10-14 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE837007C true DE837007C (de) | 1952-04-17 |
Family
ID=20354104
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DEA28A Expired DE837007C (de) | 1948-10-14 | 1949-10-12 | Verfahren zur Herstellung von Dextran-Abbau-Produkten fuer medizinische Zwecke |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| DE (1) | DE837007C (de) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE1033167B (de) * | 1955-06-11 | 1958-07-03 | Ohio Commw Eng Co | Verfahren zum Gewinnen von Dextranase |
| DE1052639B (de) * | 1951-06-21 | 1959-03-12 | Ohio Commw Eng Co | Verfahren zum enzymatischen Abbau von Dextran |
| DE1083984B (de) * | 1952-02-15 | 1960-06-23 | Svenska Sockerfabriks Ab | Verfahren zur Gewinnung von Dextransucrase |
-
1949
- 1949-10-12 DE DEA28A patent/DE837007C/de not_active Expired
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE1052639B (de) * | 1951-06-21 | 1959-03-12 | Ohio Commw Eng Co | Verfahren zum enzymatischen Abbau von Dextran |
| DE1083984B (de) * | 1952-02-15 | 1960-06-23 | Svenska Sockerfabriks Ab | Verfahren zur Gewinnung von Dextransucrase |
| DE1033167B (de) * | 1955-06-11 | 1958-07-03 | Ohio Commw Eng Co | Verfahren zum Gewinnen von Dextranase |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE4134854C2 (de) | ||
| DE3517629C2 (de) | ||
| DE2843351B2 (de) | Neue Pectinesterase, Verfahren zu deren Herstellung und die Verwendung zur Herstellung von demethoxiliertem Pectin | |
| DE2417291C3 (de) | ||
| DE1940488A1 (de) | Verfahren zur Herstellung von Protease durch Kultivierung von Bakterien | |
| DE837007C (de) | Verfahren zur Herstellung von Dextran-Abbau-Produkten fuer medizinische Zwecke | |
| DE69107815T2 (de) | Verfahren zur Herstellung neuer nichtkovalenten Polysaccharid-Protein-Zusammensetzungen mit pharmakologischen Eigenschaften. | |
| DE1642676A1 (de) | Verfahren zur Reinigung von Lipopolysacchariden | |
| DE3687463T2 (de) | Polypeptid-produkt. | |
| CH644896A5 (de) | Polysaccharid, verfahren zur herstellung desselben und dasselbe enthaltendes, den cholesterinspiegel senkendes mittel. | |
| DE1949719C2 (de) | Mikrobiologische Herstellung von Dextranase | |
| DE3013627A1 (de) | Verfahren zur gewinnung von cellulaseenzymen aus thielavia terrestris | |
| AT405941B (de) | Verfahren zur herstellung von xanthangummi durch fermentation | |
| DE3885012T2 (de) | Fermentationsverfahren zur Herstellung eines Polysaccharids wie Xanthan. | |
| DE2239210C3 (de) | Verfahren zur Herstellung von a- Galactosidase, die eine starke a- Galactosidase-Aktivität und eine äußerst geringe Invertase-Aktivität aufweist, und deren Verwendung zur Zerlegung von Raffinose | |
| DE112016006312T5 (de) | Verfahren zur Herstellung von Anthocyaninoligomeren unter Verwendung von Coenzym, das von Aspergillus Sp.-Stamm abgeleitet ist | |
| DE1617344B2 (de) | Verfahren zur herstellung eines tetanus-impfstoffes | |
| DE3329255C2 (de) | Verfahren zur Herstellung der Substanz TF-500 mit carcinostatischen und immunostimulierenden Eigenschaften | |
| DE1185335B (de) | Verfahren zur Herstellung von neuen Staphylococcen-Antigenen | |
| DE918532C (de) | Verfahren zur Herstellung von Polymerhomologen von Dextran | |
| DE2120438A1 (de) | Verfahren zur Verbesserung'der Eigenschaften von Isoamylasen (Alpha-1,6glukosidasen) | |
| DE3617368C2 (de) | Verfahren zur Herstellung eines stickstoffhaltigen Polysaccharids | |
| CH280323A (de) | Verfahren zur Herstellung eines Dextran-Abbauproduktes für pharmazeutische Zwecke. | |
| DE1617344C3 (de) | Verfahren zur Herstellung eines Tetanus-Impfstoffes | |
| DE2151265C3 (de) | Biotechnisches Verfahren zur Herstellung von a-Amylase |