DER0014931MA

DER0014931MA -

Info

Publication number: DER0014931MA
Authority: DE

Description

BUNDESREPUBLIK DEUTSCHLAND

Tag der Anmeldung: 27. August 1954 Bekanntgemacht am 5. Juli 1956

DEUTSCHES PATENTAMT

In neuerer Zeit werden Organpräparate therapeutisch verwendet, die unter größtmöglicher Schonung des Zellgefüges mit Hilfe der Gefriertrocknung konserviert worden sind. Zur Arbeitsweise der Gefriertrocknung gehört' es bekanntlich, die lebendfrisch entnommenen Organteile sofort möglichst rasch tiefzukühlen und dann bei Temperaturen, die zumindest unterhalb des Gefrierpunktes liegen, das Wasser abzusublimieren.

Demgegenüber wurde nun überraschenderweise gefunden, daß man die Wirkung von Organpräparaten dadurch steigern kann, daß man die frischen Organteile unmittelbar vor der Gefriertrocknung erwärmt. Mit besonderem Vorteil wählt man dazu sogar überphysiologische Temperaturen bis hinauf zu 90° C.

Durch die erfindungsgemäße Wirkungssteigerung läßt sich die Ausbeute bei der Herstellung von therapeutisch wertvollen Zellpräparaten ganz bedeutend steigern, denn man kann bei jeder einzelnen Applikation die Dosierung entsprechend niedriger wählen. Diese Ausbeutesteigerung erlaubt es, aus einer gegebenen Anzahl von Spendertieren einen vermehrten Betrag an therapeutischem Wirkstoff zu produzieren. Das ist für die Herstellung von therapeutisch ver-

609 548/33

R 14931 IVa/30 h

wendbaren Organpräparaien wichtig, denn der wesentliche Teil der Arbeit erstreckt sich auf die Auswahl und ärztliche Untersuchung der Spendertiere sowie auf die operative Gewinnung der einzelnen Organe. Durch die nachfolgend angeführten Versuche wird diese Wirkungssteigerung veranschaulicht.

. ■ I. Testung der Wirkungserhöhung

ίο Testobjekt für diese Untersuchungen waren Mäuse, denen operativ beide Eierstöcke entfernt wurden, und die sich somit in einem. Hormon- (Oestrogen-) Mangelzustand befanden. Dieser Oestrogenmangel ist an den Zellformen des Vaginalepithels im mikroskopischen Ausstrichpräparat abzulesen. Das Auftreten sogenannter Schollen ist dabei ein Maß für den Grad der Wiederherstellung des normalen Züstandes. Zur Testung der Wirksamkeit vorbehandelter Präparate wurde eine Gruppe ovariectomierter Mäuse mit unbehandelten Zellen, eine andere Gruppe, mit vorbehandelten Zellen gespritzt und die durchschnittliche Schollenzahl beider Gruppen über einen Monat hinweg verglichen. Die Wirkungssteigerung oder'der Wirkungsabfall ist in den beigefügten Protokoll-60

blättern dargestellt bzw. in Prozent der mittleren Schollenzahl der "Kontrollgrüppe ausgedrückt.

II. Durchführung der Vorbehandlung der Zellen.

Die Organzellen wurden unter sterilen Kautelen aus dem frisch getöteten Versuchstier entnommen, mit einer Schere fein zerkleinert und dann (für Versuchszwecke) in abgewogene Portionen aufgeteilt. Jeweils eine Portion wurde ohne- eine 'besondere¹ Vorbehandlung gefriergetrocknet und Kontrolltieren injiziert. Die anderen Portionen wurden in sterile und dicht verschlossene Kölbchen oder Gläschen gefüllt und in diesen 15 Minuten auf -f 60⁰C erhitzt, indem das Kölbchen in ein Wasserbad dieser Temperatur eingetaucht wurde. Anschließend wurden die Kölbchen in einem. Bad. fließenden Leitungswassers auf etwa + 10⁰C abgekühlt, wozu 2 Minuten benötigt wurden. Unmittelbar danach erfolgte das Einfrieren des Präparates durch Eintauchen in ein Kohlensäure-Aceton-Bad. Die Trocknung wurde bei — 25⁰C durch-, geführt. · Suspendierung der Zellen wie üblich inj-Ringerlösung. Injektion intramuskulär. <■

Die Ergebnisse sind in nachfolgender Tabelle zusarri- mengestellt. '

70

75

	Zahl der	durch	Verminderung Erhöhung	0/ /0
	Versuchs-	schnitt-	1
Versuchsanordnung	■ ; tiere	liche Zahl	gegenüber den jeweiligen	—
		. der.	■; Kontrollgruppen
	2	Schollen	0/ /0
Kontrolltiere	4	10,4
(Injektion regelrecht getrockneten Ovars) ........	3	*7>7*	—
Trocknung oberhalb des Gefrierpunktes		3.8	60	35
Vor dem Einfrieren 5 Stunden bei Zimmertemperatur
stehenlassen		8,5	12	49
Vor dem Einfrieren 15 Minuten in Glycerin-Ringer-	2
Lösung stehenlassen (ungetrocknet)		13.0		etwa 206
Vor dem Einfrieren 15 Minuten in Glycerin-Ringer-	2
Lösung stehenlassen (Gefriertrocknung)		15.5		etwa 260 (?)
Vor dem Einfrieren 30 Minuten auf 37⁰C erwärmt	•3
(Gefriertrocknung) ..		23 =!		etwa 240
Vor dem Einfrieren 15 Minuten auf 60° C erwärmt
(Gefriertrocknung) .... ....		27 6
Vor dem Einfrieren 10 Minuten auf 80⁰C erwärmt	8	-"/ J^
(Gefriertrocknung)	25.I

95

105

Claims

PATENTANSPRUCH:

Verfahren zur Herstellung von durch Gefriertrocknung konservierten Organpräparaten mit erhöhter physiologischer' Wirksamkeit, dadurch gekennzeichnet, daß man die Frischorgane vor der Abkühlung kurze Zeit auf Temperaturen zwischen 25 und 85⁰C erhitzt.

© 609 548/33 6. 56