DK142371B - Fremgangsmåde til fremstilling af en vandig papainopløsning. - Google Patents

Description

142371

Den foreliggende opfindelse angår en fremgangsmåde til fremstilling af en vandig papainopløsning indeholdende papain, natriummetasulfit og carbonhydrat til forhindring af kuldeuklarhed i øl med forbedret lagerstabilitet.

5 Normalt er det nødvendigt for bevarelse af øls kvalitet, at det holdes køligt under lagring eller ved transport, hvilket dog hyppigt har uheldige forandringer i øllet til følge. Således kan der efter forskellig kølingsvarighed optræde et for fagmanden som såkaldt kuldeuklarhed kendt 10 fænomen, der såvel i optisk som i organoleptisk henseende betyder en kvalitetsforringelse. Dette uklarhedsfænomen er ikke sjældent så graverende, at sådant denatureret øl ikke mere er acceptabelt for den menneskelige nydelse og dermed mister sin kommercielle anvendelighed. For at undgå de 15 dermed forbundne tab er det af stor økonomisk betydning at stabilisere øllet, således at der, når det holdes køligt, ikke optræder kuldeuklarhed.

Kuldeuklarhedsfænomenet skyldes koagulationen af oprindeligt i øllet opløste proteiner. For at forhindre dette 20 fænomen kan der anvendes stoffer, f.eks. proteaser, der ved nedbrydning holder proteinerne i opløsning, uden der- * ved at påvirke de indeholdte stoffer og øllets kvalitet negativt. Til dette formål har papain vist sig særligt egnet. Der er på dette område derfor allerede blevet frem-25 stillet såvel faste som flydende formuleringer i form af papainblandinger med tilsætningsstoffer, hvorved det sidstnævnte udøver en stabiliserende virkning på enzymets aktivitet.

Som tilsætningsstoffer anvendes ved siden af natriummetabi-30 sulfit polyoler og carbonhydrater. Fra beskrivelsen til US-pa-tent nr. 3.095.358 er det kendt at fremstille papainopløsnin-ger ved blanding af et 50% vandigt papainkoncentrat med en vandig 80% sorbitolopløsning indeholdende reduktionsmidler, såsom natriummetabisulfit, og smagsstoffer til dannel- 2 142371 se af en blanding indeholdende 10-35 vægtprocent af det anvendte papainkoncentrat. Det er endvidere kendtt at såfremt der i stedet for en 80% sorbitolopløsning anvendes en 70% saccharoseopløsning, dannes der imidlertid straks 5 et tungt bundfald.

Fra beskrivelsen til britisk patent nr. 1.326.681 kendes endvidere papainformuleringer, som foruden natriummeta-bisulfit indeholder majssirup, sorbitol eller saccharose.

Det er dog nødvendigt, såfremt de foreligger i flydende-10 vandig form, for opretholdelse af deres proteolytiske aktivitet at nedsætte deres pH-værdi ved tilsætning af syrer, såsom citronsyre, phosphorsyre eller vinsyre.

Det har overraskende vist sig, at der ud fra kommercielt tilgængeligt papain kan fremstilles vandige opløsninger, 15 som under stuetemperaturbetingelser fremviser en høj lagerstabilitet hvad angår opretholdelsen af den proteolytiske enzymaktivitet.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved, at man først fremstiller en opløsning af natriumbisulfit og 20 indstiller opløsningens pH-værdi på ca. 4,85, derefter tilsætter papain og, efter ved filtrering eller centrifugering af have klaret den dannede opløsning, tilsætter saccharose samt eventuelt en ringe mængde sorbitol, således at den færdige opløsning indeholder 1 til 35 vægtpro-25 cent papain, 1,5 til 3 vægtprocent natriummetabisulfit og 20 til 60 vægtprocent, fortrinsvis 35-55 vægtprocent, saccharose og eventuelt op til 10 vægtprocent sorbitol.

Den væsentlige fordel i sammenligning med de kendte papainpræparater består i, at den ved fremgangsmåden iføl-30 ge opfindelsen fremstillede opløsning, skønt den er i flydende form, selv ved stuetemperatur kan lagres over længere tid , eller ved højere temperaturer, som er almindelige i troperne, mindst i flere uger, uden at det kommer 3 1-4237 1 til væsentlige tab i den proteolytiske aktivitet. Dermed bortfalder den ved de tilsvarende kendte præparater nødvendige opbevaring på et køligt sted, hvorved det såvel er sikret, at man har en uindskrænket rådighed over midlet, 5 som at der ikke opstår yderligere stigning i lagringsomkostningerne. Endvidere er det ved de omhandlede papain-opløsninger ikke nødvendigt at tilsætte syre for at opretholde deres enzymatiske aktivitet. Anvendelsen af saccharose byder desuden på den fordel, at omkostningerne ved 10 fremstillingen af de nye papainformuleringer er meget fordelagtige på grund af den i modsætning til de ellers almindelige tilsætningsstoffer lave råvarepris. Da saccharose normalt anvendes i levnedsmidler, er dens anvendelse i det foreliggende tilfælde fysiologisk set absolut uska-15 delig. Anvendelse af saccharose som bestanddel i faste papainformuleringer fremkalder tungtvejende ulemper. Således består der ved håndtering af pulverformige enzympræparater på grund af deres tilbøjelighed til at støve fare for at fremkalde allergier hos arbejderne, og der må der-20 for træffes foranstaltninger under yderligere omkostningsstigning. Disse er unødvendige ved anvendelse af den ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede opløsning.

Bedre doserbarhed og dermed mere rationel og sparsom anvendelse er et yderligere kendetegn ved den omhandlede ~ 25 opløsnings overlegenhed i sammenligning med faste papain-præparater.

Til påvisning af den omhandlede opløsnings overlegenhed i sammenligning med kendte papainformuleringer blev lagerstabiliteten prøvet såvel ved stuetemperatur som ved 30 skærpede betingelser (7 dage ved 60°C). Derved ér udelukkende den stabilitetbevirkende tilsætning blevet varieret. Bedømmelsen af lagerstabiliteten blev gennemført ved hjælp af måling af den proteolytiske aktivitet før og efter lagertiden ved kollagennedbrydningstesten. I den følgende 35 tabel er anført resultaterne af afprøvningen af formuleringerne, som har været opbevaret under de skærpede betingelser.

4 142371

Tabel.

Restaktivitet (%) med aktivator uden aktivator (cystein) 5 Formulering 1 13,5% papain PI (fa. En-zymase/Brussel) 3 % Na2S2C>5 p.p. Merck, nr,. 6528 98 100 10 45 % saccharose, Merck nr.

7651 38,5% dest. vand Formulering 2 45 % glycerol p.a. vandfrit 15 Fluka, nr. 49770 60 62 (som erstatning for saccharose, ellers analog med 1)

Formulering 3 40 % majssirup (handels- 20 produkt) 40 42 (som erstatning for saccharose, ellers analog med 1)

Formulering 4 45 % sorbitol, purum, kryst.

25 Fluka, nr. 85532 34 32 (som erstatning for saccharose, ellers analog med lj COLLUPULIN (handelsprodukt) 65 66 % = vægtprocent.

30 Fremgangsmåden ifølge opfindelsen belyses ved hjælp af det følgende eksempel.

Claims (3)

142371 Eksempel. a) Sammensætning: 13,5% papain P 1* (beregnet på en spec, akt.: 52000 NF-enh./mg) ** 5 2 % natriummetabisulfit (Na2S20^) p.a. vandfrit 45. saccharose P.h.H.V. (ci2H22°ll^ 39,5% dest. vand. % = vægtprocent. b) Procedure:

10 Fremstilling af 1 kg opløsning. 20. natriumpyrosulfit opløses under omrøring i 395 ml destilleret vand. Derefter følger en pH-korrektion med 0,1 N NaOH-opløsning til pH 4,85. Under omrøring tilsætter man 135 g papain og omrører i yderligere ca. 10 minutter.

15 Den uklare opløsning klares derefter fuldstændigt ved centrifugering eller filtrering. Under omrøring tilsætter man 450 g saccharose og omrører i yderligere 10 minutter. Derefter kontrolleres pH-værdien og vægten af den fremstillede opløsning. 20 * [Fa. Enzymase/Brussel (Belgien)] ** [First Suppl. Food Chemicals Codex, 2 Edition 1974, S. 86] . PATENTKRAV· Fremgangsmåde til fremstilling af en vandig papainopløs-25 ning, der indeholder papain, natriummetabisulfit og carbon-hydrat, kendetegnet ved, at man først fremstiller en opløsning af natriummetabisulfit og indstiller opløsningens pH-værdi på ca. 4,85, derefter tilsætter papain og, efter ved filtrering eller centrifugering at have kla-30 ret den dannede opløsning, tilsætter saccharose samt eventuelt en ringe mængde sorbitol, således at den færdi-