DK143498B - Oxaprostaglandin-forbindelser af e2- eller f2alfaraekken til anvendelse som fertilitetskontrolmidler - Google Patents

Description

(19) DANMARK

(12) FREMLÆGGELSESSKRIFT dij 1431)-98 B

DIREKTORATET FOR PATENT- OO VAREMÆRKEVÆSENET

(21) Ansøgning nr. 5059/75 (51) lnt.CI.3 C 07 C 177/00 (22) Indleveringsdag 1· jun. 1975 A 61 |( 31/557 (24) Løbedag 1· jun. 1975 (41) Aim. tilgængelig 5· dec. 1975 (44) Fremlagt 51 · aug. 1981 (86) International ansøgning nr. -(86) International indleveringedag -(85) Videreførelsesdag -(62) Stamansøgning nr. -

(30) Prioritet 2. jun. 1972, 259215* US 50. apr. 1975, 555644, US

(71) Ansøger PFIZER INC., New York, US.

(72) Opfinder Michael Rose Johnson, US: Hans-Jurgen Ernst Hess, US.

(74) Fuldmægtig Ingeniørfirmaet Hofman-Bang & Boutard.

(54) Oxaprostaglandin-forhindelser af E2- eller F2alfa-rækken til an= vendeise som fertilitetskontrol« midler.

Opfindelsen angår hidtil ukendte oxaprostaglandin-forhindelser af E2- eller F2a-rækken til anvendelse som fertilitetskontrolmidler. Disse forbindelser er analoge til de naturligt forekommende pros-taglandiner og er ejendommelige ved, at de har den i kravets kendetegnende del angivne formel I.

D

o ^ Prostaglandineme er umættede C2Q-fedtsyrer, som udviser forskel- O lige fysiologiske virkninger. For eksempel er prostaglandineme af £ af E- og A-rækken kraftige vasodilatorer (Bergstrom, et al.,

Acta Physiol. Scan. 64:552-55, 1965 og Bergstrom, et al., t 3 2 143498

Life Sci. 6:449-455, 1967) og sænker det systemiske arterieblodtryk (vasodepression) ved intravenøs indgivning (Weeks and King, Federation Froc. 23:327, 1964; Bergstrom, et al., 1965, op. cit.; Carlson, et al., Acta. Med. Scand. 183:423-430, 1968; og Carlson, et al., Acta Physiol. Scand. 75:161-169, 1969).

En anden velkendt fysiologisk virkning af PGE-^ og PGE2 er som bronchodilator (Cuthbert, Brit. Med. J. 4:723-726, 1969)·

Endnu en vigtig fysiologisk rolle spiller de naturlige prosta-glandiner i forbindelse med forplantningscyklussen. PGEg vides at have evne til at fremkalde veer (Karim, et al., J. Obstet Gynaec. Brit. Cwlth. 77:200-210, 1970), at fremkalde terapeutisk abort (Bygdeman, et al., Contraception, 4, 293 (1971)) og at være anvendelig til kontrol af fertilitet (Karim, Contraception, 3, 173 (1971)). Der er opnået patenter på flere prostaglandiner af E- og F-rækken som vefremkaldere hos pattedyr (belgisk patent nr.

754 158 og vesttysk patent nr. 2 034 641) og på FGF^, F£ og F^ til kontrol af forplantningscyklussen (sydafrikansk patent nr. 69/6089).

Andre kendte fysiologiske aktiviteter for PGE^ er ved inhiberin-gen af mavesyresekretion (Shaw og Ramwell, i Worcester Symp. on Prostaglandins, New York, Wiley, 1968, s. 55-64) og også af blod-pladeaggregation (Emmons, et al., Brit. Med. J. 2:468-472, 1967).

Det vides nu, at sådanne fysiologiske virkninger in vivo kun vil blive fremkaldt i et kort tidsrum efter indgivningen af en prostaglandin. En væsentlig mængde vidnesbyrd angiver, at grunden til dette hurtige ophør af aktivitet er, at de naturlige prostaglandiner hurtigt og effektivt deaktiveres metabolisk ved β-oxidation af carboxylsyresidekæden og ved oxidation af 15a-hydroxygruppen (Anggard, et al., Acta. Physiol. Scand., 81, 396 (1971) og deri givne henvisninger).

Det blev selvfølgelig betragtet som ønskeligt at tilvejebringe analoge til prostaglandinerne, som ville have ækvivalente fysiologiske aktiviteter med de naturlige forbindelser, men hos hvilke virkningens selektivitet og aktivitetens varighed ville være forøget. Forøget virkningsselektivitet kunne forventes at afhjælpe de alvorlige bivirkninger, især gastrointestinale bivirkninger, som hyppigt iagttages efter systemisk indgivning af de 3 143498 naturlige prostaglandiner (se Lancet, 536, 1971).

De hidtil ukendte forbindelser ifølge opfindelsen er u-trisnor-prostaglandiner, som i 17-stillingen har to hydrogenatomer og én substituent med formlen (CH2)n~0“ ’ hvori n er 0 eller 1, og m er 0, 1 eller 2. Disse forbindelser tilfredsstiller på enestående måde de ovennævnte krav, dvs. de har aktivitetsprofiler, som kan sammenlignes med de naturlige prostaglandiners, selv om de er mere vævsselektive i deres virkning og udviser længere varighed af aktiviteten end de naturlige prostaglandiner.

Særligt foretrukne, hidtil ukendte prostaglandiner ifølge opfindelsen, er: 9-oxo-lla,15a-dihydroxy-19-oxa-cis-5-trans-13-prostadiensyre; 9-oxo-lla,15a-dihydroxy-19-oxa-cis-5-trans-13- uu-homopro stadiensyre; 9-oxo-lla,15a-dihydroxy-18-oxa-cis-5-trans-13-prostadiensyre; 9a,11a,15a-trihydroxy-19-oxa-cis-5-trans-13-prostadiensyre; 9a, 11a, 15a-trihydroxy-19-oxa-cis-5-trans-13-«>-homoprostadiensyre; 9a,lla,15a-trihydroxy-18-oxa-cis-5-trans-13-prostadiensyre.

Fremstillingen af de hidtil ukendte oxaprostaglandin-forbindelser ifølge opfindelsen kan belyses ved det følgende reaktionsskema, 1 2 hvori R betyder hydrogen, 2-tetrahydropyranyl eller -CO-R , hvor R betyder alkyl med 1-5 carbonatomer, phenyl eller p-bi- phenyl, THP betyder 2-tetrahydropyranyl, og n og m har den i kravet angivne betydning.

4 143498

REAKTIONSSKEMA

,0 o—<y ? \ o o /sj !i i. .

{ I +CH3(CH2)ni-0-(CH2)nCH2C-CH2-?-(0C.i552 >

) X BO' CKO

I 11 o o—β O— I \ __> x) m ϊν H + (CH )„-0"

Kl° §. (CK2jmCH5

V

O--^ 0'—&

(Ί —> A

o*--icH?'|nCHo )-C^\X^/(<CH2)n-0- HO' = (CH2)mCH3 SHK>' ^^X^(CH2)JW3 OH ΟΊΗΡ · 3

VI VII

5 143498 tt°H “ A) -» J-C (CH2)n-rO- J-VVA/^^V0· {P° (CHg^CHj THP0 \ (CH2)nCH5 OIHP 0®^

vin IX

>/

Oxapro staglandln F2a eller E^

Som vist i reaktionsskemaet bringes aldehydet I til at reagere med det hidtil ukendte reagens II til dannelse af ketonen III. Reaktanterne anvendes i væsentligt ækvimolære forhold, og reaktionen udføres fortrinsvis i ca. 30 minutter.

Ketonen III behandles med 1,2-dimethoxyethan og zinkborhydrid i ca. 1 time til dannelse af alkoholerne IV og V, som derpå adskilles, f.eks. ved anvendelse af søjlekromatografi med ether som elueringsmiddel.

V —* VI involverer behandling med vandfrit kaliumcarbonat i ca.

1 time efterfulgt af saltsyre og ekstraktion, f.eks. med ethyl-acetat, og endelig koncentrering, VI —* VII kræver behandling med 2,3-dihydropyran og p-toluen-sulfonsyre i ca. 15 minutter i en nitrogenatmosfære og efterfølgende kombination med ether, vaskning med f.eks. natriumhydrogen-carbonatopløsning og derpå med saltvand og endelig koncentrering.

VII —> VIII udføres ved reaktion i ca. 1 time med diisobutyl-aluminiumhydrid i n-hexan afkølet til -78° C i en nitrogenatmosfære. Blandingen blandes derpå med ether, vaskes, tørres og koncentreres.

VIII —» IX udføres ve4 reaktion med (4-carboxy-b-butyl)-triphenylphosphoniumbromid og methylsulfinylmethid i dimethylsulf-oxid ved stuetemperatur i mindst 2 timer. Blandingen gøres derpå sur med f.eks. vandig saltsyre og ekstraheres derefter med ethyl-acetat og koncentreres ved inddampning.

6 143498 IX —» oxaprostaglandin F2a involverer hydrolyse med vandig eddikesyre, koncentrering og rensning ved søjlekromatografi.

IX —> oxaprostaglanding E2 kræver behandling med Jones' reagens i ca. 20 minutter ved -10° C til dannelse af et andet mellemprodukt før syrebehandlingen og rensningen som ovenfor.

Det hidtil ukendte reagens II fremstilles ved at bringe et passende phosphonat, såsom dimethyl-methyl-phosphonat, i et reaktionsinert opløsningsmiddel, såsom tetrahydrofuran, og i en nitrogenatmosfære i kontakt med en organolithiumforbindelse, såsom n-butyllithium. Derpå tilsættes en tilsvarende alkoxyester, såsom methyl-4-methoxybutyrat, og produktet renses ved ekstraktion i methylenchlorid og koncentreres.

Fra den angivne litteratur er de naturlige prostaglandiner kendt for at udøve et spektrum af fysiologiske aktiviteter. Ved talrige in vivo og in vitro prøvninger er det påvist, at de her omhandlede oxaprostaglandin-analoge har de samme fysiologiske aktiviteter som udøves af de naturlige prostaglandiner. Disse prøvninger inkluderer blandt andet en prøvning for virkning på isoleret glat muskel fra marsvin-ileum og rotte-uterus, en prøvning for virkning på histamininduceret broncho spasme hos marsvin, en prøvning for virkninger på hunde-blodtryk, en prøvning for fremkaldelse af diarré hos mus og en prøvning for fremkaldelse af abort hos tidligt gravide rotter.

Resultaterne af disse forskellige fysiologiske prøvninger er anført i tabel I nedenfor. Det vil bemærkes, at disse oxa-prostaglandin-analoge ikke blot har en fertilitetskontrolvirkning, som kvantitativt kan sammenlignes med de naturlige prostaglandiners, men at de også har fordelen af vævsselektivitet, især 19-oxa-prostaglandin E2.

På basis af den iagttagne forskel ved rotte-uterus- og marsvinil eum-pr øvning erne med 19-oxa-prostaglandin E2 ville man forvente at have en reduktion af de ubehagelige gastrointestinale bivirkninger, som mødtes, når 11 aturlig PGEg anvendtes som abortfremkalder (Lancet, 536, 1971)· Denne vigtige fordel er blevet rigeligt bekræftet af, at 19-oxa-prostaglandin E2 nu har vist sig at være kun 10 % så effektiv som naturlig PGE2 til fremkaldelse af diarré hos mus in vivo, medens den er lige så effektiv som naturlig PGE2 til fremkaldelse af abort hos den tidligt gravide rotte.

7 143498 SS s v£> vo O- ·

II I

o O O bQ H

'“"v ri Η Η ft r*

«ΰ X * I I I I X -H W

w lA O- -3" g α ·» -¾ Cd cm a a

H

> CQ

α Q.

,-n o Λ Ό w .

s_/ W Cd © a a a cq .

d O O O O O ft cd o OH OOOOOO © ft k HB ΙΠ Η ΙΛ 1Π ΙΟ (A Ό CQ -p

H\ I I I I I O H

(Ubo O OOOOO Φ s> α α o o o o o h -g o •η η η η η h a ag

> Λ| © o H

to a a a a & w a > „ 3 S CQ -Ph h © © · h a -p o -p ©da ^ o i -p 0 a ø © h v_^ cd x) -p > © Λ a -p _ μ cq oooooo h o a >> dH OOOOOOO -P ι ^ ·ρ h

aa ΗΗΐΌΐηΐΌΌΚΛ © α „S

©\ i i i i i i -p -H -p § ft

-P bo O OOOOO Cd B Φ P H

da (Λ ΟΟΌΟΗ > cd a © H

HI I HH ΝΊ Η -P ® H

i cd a cq CQ H -P

, η I 4J 0) · Η Ή Φ Φ ωι+3 ό .μ ,α c a a S o I >, φ -Η Φ <j i er; α α η bo > h H H-P O O CO a w -d-a a α a a α ο η α η

Cd ι—1 CQ CQ a Η fit Η .α Η to

1 w ho cq »cd »cd I

c cd cq o ft P< α HH +3¾ t T* a o cq α η ω ω α edw en (D tA ι i i m o α o α g .g *P O Η K3 C" p £ CO Η H ft cq tj ft O CJ C Φ η S i <d a m .* a æ cq eb tj φ a an Μ Φ cd H H ft ο α > > φ φ η α ι a cq a a a g η s φ η χ φ ο α

Ο cd Λ -Ρ bO bO bO

hw η φ a_ ο ο α fii ο -ί ν ι ι ι η η λ a a ο φ CM > -Ρ Ο CQ CQ <Η ό ,¾ α ο ο cd cd d>, æ η ft ft -ρ da ό a cq cq c ΰΰ -P Φ cd Ό cd > φ a a -p a !> ο o cq a ·> φ «η «η a CM CM CQ X) Φ o p£j ft H CQ CQ CQ Λ

rd O CQ «Cd Η Η H CQ

pi ft O ft Φ CQ CQ bQ

I I x} -P o o a

c ο o CM -P Η Ό H

h a a a a > w >> η η a

Tf CM O CM CM O CM Η Ο ,¾ φ Φ © a ft si ft ft x! ft -P ft cq χ x fii cd P A P P i P σί h ft3ftft=ft ΗθίΡααΛ bo I ι Φ O (B 83 a cd cdcdcdcdcdcd ad w Η Η h

-P « M X X X X

CQ OOOOOO CM

O I I I I I I Ή ^ a O di 03 0> 03 CO O cd ,Ω Ο Ό Φ ft HHHHHHft ^ 8 143498

De fysiologiske reaktioner iagttaget ved disse prøvninger er nyttige til bestemmelse af anvendeligheden af prøvestoffet til behandling af forskellige naturlige og pathologiske tilstande.

De følgende yderligere prøvninger, hvorved en række oxaprostag-landin-forbindelser ifølge opfindelsen er sammenlignet med naturlig PGE2 og PGF2a, viser at forbindelserne ifølge opfindelsen har selektive aktiviteter, der gør dem nyttige som midler til fertilitetskontrol. PGE2 og PGF2a markedsføres i dag til human brug som midler til fremkaldelse af aborter i tredie måned. De anvendte prøvninger er følgende: Ål. Spasmogen virkning på isoleret marsvineuterus, angivet som relativ styrke (PGE2/PGF2a = 100): en prøvning for ferti litet skontrol-aktivitet.

A2. Spasmogen virkning på isoleret rotteuterus, angivet som relativ styrke (PGE2/FGF2a = 100): en prøvning for fertili-tetskontrol-aktivitet.

B. Spasmogen virkning på isoleret marsvineileum, angivet som relativ styrke (PGE2/FGF2a = 100): en prøvning for diarré, en almindelig gastrointenstinal bivirkning af prostaglan-diner.

C. Tilnærmet % beskyttelse af marsvin mod en toxisk aerosoldosis af histamin ved aerosolindgivning af midlet i æk-vimolær dosis til 100yug/ml PGE2 (PGE2 = 85%) : en prøvning for bronchodilator-aktivitet.

D. Tærskelværdi (i yug/kg i. v.) for depressorvirkning på blodtrykket hos anæstetiserede hunde (PGE2 = 0,1): en prøvning for antihypertensiv aktivitet.

Resultaterne er anført i den følgende table II: 143498 9

TABEL_II

Forbindelse Eks.nr. Smp. Al A2 B C D

---1-—--1- 18- oxa-PGE2 4 olie ' 11 3,3 3 1,0 19- oxa-PGE2 1 55-56° C 10-20 10 1 19 1,0 19-oxa-FGF2a 2 olie 15 10 2,5 19-oxa-vVhomo-PGE2 3 58° C 33 10 38 0,4 19-oxa-u-homo-FGf,2oc 3 olie 10 3

Det ses af tabel II, (1) at 18-oxa-PGE2, fremstillet i eksempel 4, er et mere selektivt middel til fertilitetskontrol end PGE2 på grund af dens 3 gange så store selektivitet af spasmogen bivirkning på uterus-fremfor ileumglatmusklen og dens reducerede bronchodilator- og hypotensive aktivitet; (2) at 19-oxa-PGE2, fremstillet i eksempel 1, er et mere selektivt middel til fertilitetskontrol end PGE2 på grund af dens 10 - 20 gange så store selektivitet af spasmogen virkning på uterus- fremfor ileumglatmuskel og dens reducerede bronchodilator-og hypotensive aktivitet; (3) at 19-oxa-PGF2a, fremstillet i eksempel 2, er et mere selektivt middel til fertilitetskontrol end PGF2a på grund af dens mere end 4 gange så store selektivitet af spasmogen virkning på uterus- fremfor ileumglatmuskel; (4) at 19-oxa-u)-homo-PGE2, fremstillet i eksempel 3» er et mere selektivt middel til fertilitetskontrol end PGE2 på grund af dens 3 gange så store selektivitet af spasmogen virkning på uterus- fremfor ileumglatmuskel og den reducerede bronchodilator- og hypotensive aktivitet; og (5) at 19-oxa-u-homo-PGF2a, fremstillet i eksempel 3, er et mere selektivt middel til fertilitetskontrol end PGF2a på grund af den 3 gange så store selektivitet af spasmogen virkning på uterus- fremfor ileumglatmuskel.

De hidtil ukendte oxaprostaglandin-forbindelser ifølge opfindelsen har mere selektive aktivitetsprofiler end de tilsvarende naturligt forekommende prostaglandiner og udviser i mange tilfælde en længere virkningsvarighed. Hvis der for eksempel ønskes 143498 10 en intravaginal behandling til abortfremkaldelse, er et egnet medium en tampon imprægneret med 19-oxa-l"-homo-'-pro staglandin-®2α eller lactose-tabletter med det samme middel. Ved sådanne behandlinger ville en egnet dosis være omkring 100 mg, idet der anvendes 1 eller 2 doser.

I tilfælde, hvor en midtvejsabort er nødvendig, ville et effektivt middel være en fysiologisk saltopløsning af 19-oxa-PGE2 indgivet som en intravenøs infusion. En egnet dosering kunne være fra omkring 5 til omkring 100 pg/min., indgivet i et tidsrum på fra omkring 2 til omkring 10 timer.

De hidtil ukendte oxaprostaglandinforbindelser ifølge opfindelsen kan anvendes i en lang række farmaceutiske præparater, som indeholder forbindelsen eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf, og de kan indgives på samme måde som naturlige prostaglandiner ad en række forskellige veje, såsom intravenøst, oralt og topisk, herunder som aerosol, intravaginalt og intranasalt. Farmaceutisk acceptable salte inkluderer salxe af farmaceutisk acceptable baser, såsom alkali- og jordalkalimetalbaser, ammoniak og aminer.

Til fremstilling af enhver af de ovennævnte doseringsformer eller enhver af de talrige andre mulige former kan anvendes forskellige reaktionsinerte fortyndingsmidler, excipienter eller bærere. Sådanne stoffer inkluderer for eksempel vand, ethanol, gelatiner, lactose, stivelser, magnesiumstearat, talcum, vegetabilske olier, benzylalkoholer, gummier, polyalkylenglycoler, vaseline, cholesterol og andre kendte bærere for lægemidler. Om ønsket kan disse farmaceutiske midler indeholde hjælpestoffer, såsom konserveringsmidler, befugtningsmidler, stabiliseringsmidler eller andre terapeutiske midler, såsom antibiotica.

De følgende eksempler tjener til nærmere at belyse fremstillingen af oxaprostaglandin-forbindelseme ifølge opfindelsen.

n 143498 EKSEMPEL_1 A. En opløsning af 12,4 g (100 nmol) dimethylmethylphosphonat i 125 ml tørt tetrahydrofuran blev afkølet til -78° C i en tør nitrogenatmosfære. Til den omrørte phosphonatopløsning sattes 45 ml 2,37 M n-butyllithium i hexanopløsning dråbevis i løbet af 30 minutter med en sådan hastighed, at reaktionstemperaturen aldrig steg over -65° C. Efter yderligere 5 minutters omrøring ved -78° C tilsattes dråbevis 6,6 g (50,0 mmol) methyl-4-methoxybutyrat [fremstillet ifølge R. Huisgen og J. Reinertshafter, Am., 575, 197 (1952)] med en hastighed, som holdt reaktionstemperaturen på under -70° C (10 minutter). Efter 3 timer ved -78° C fik reaktionsblandingen lov at opvarmes til omgivelsernes temperatur og blev neutraliseret med 6 ml eddikesyre og rotationsinddampet til en hvid gel. Det gelatinøse materiale blev optaget i 25 ml vand, den vandige fase ekstraheret tre gange med hver gang 100 ml methyl-enchlorid, og de kombinerede organiske ekstrakter blev tørret over magnesiumsulfat og koncentreret (vandstrålepumpe) til en rå remanens og destilleret, kp. 141 - 145° C/l,7 - 0,6 mmHg, hvorved der blev opnået 7,6 g (68 %) dimethyl-2-oxo-6-oxaheptylphos-phonat.

Gasfasechromatografi (der anvendtes en 127 x 6 mm kolonne indeholdende 10 % SE 30 på "Chromosorb1® P", partikelstørrelse 0,149-0,177 mm, ved 105° C) angav en renhed på > 99,9 %. NMR-spek-tret (CDCl^) viste: 0

En dublet centreret ved 3,78 <5 (J = 11,5 Hz, 6H) for (CH^0)2-P-; en triplet centreret ved 3,37 6 (2H) for CHj-0-CH2-CH2-; en singlet ved 3,28 i (3H) for CH,-0-CHo-, -> d 0 0 en dublet centreret ved 3,14 4 (J = 23 Hz, 2H) for -C-CH5-P-; 0 * en triplet centreret ved 2,71 4 (2H) for -CH2-CH2-C- og en en multiplet 1,57 - 2,10 δ (2H) for -CH2-CH2-CH2.

B. Det under A fremstillede dimethyl-2-oxo-6-oxaheptylphosphonat (1,68 g, 7,5 mmol) i 125 ml vandfri ether blev behandlet med 2,5 ml (5,9 mmol) 2,37 M n-butyllithium i n-hexan i en tør nitrogenatmosfære ved stuetemperatur. Efter 5 minutters omrøring tilsat- 22 143498 tes yderligere 225 ml vandfri ether efterfulgt af 1,75 g (5,0 mmol) 2-[3a-p-phenylbenzoyloxy-5oc-hydroxy-^-formylcyclopentan-Ια-yl]eddikesyr e-Z^-lacton i én portion. Efter 30 minutter blev reaktionsblandingen omsat med 2,5 ni iseddike, fortyndet med 200 ml vandfri ether, vasket to gange med 200 ml 10 % saltsyre, en gang med 200 ml mættet vandig natriumhydrogencarbonatopløsning, en gang med 100 ml vand, tørret over vandfrit magnesiumsulfat og inddampet, hvorved der blev opnået 1,972 g (88 %) 2-[3a-p-phenyl-benzoyloxy-5a-hydroxy-2p-(3-oxo-7-oxa-trans-l-octen-l-yl)cyclo-pent-la-yljeddikesyre-^lacton som en olie.

Produktets infrarøde spektrum (CHCl^) udviste absorptionsbånd ved 1770 cm”^· (stærk), 1717 cm-1 (stærk), 1675 cm~^ (middel) og 1630 cm-^ (middel), som kan tilskrives carbonylgrupperne. Det ultra-violette spektrum havde en = 274 nm og en = 21 380 (ethanolopløsning). NMR-spektret (CDCl^) udviste en multiplet ved 7,23 - 8,18 S (9H) for p-biphenylgruppen, en dublet af dubletter centreret ved 6,71 6 (IH, J = 7,16 Hz) og en dublet centreret ved 6,27 6 (IH, J = 16 Hz) for de alkeniske protoner, en triplet ved 3,30 i> (2H) for -C^-C^-O-CH^, en singlet ved 3,21 & (3H) for -C^-O-CH^, og multipletter ved 4,90 - 5,50 £ (2H), 2,21 - 3,07 S (8H) og 1,58 - 2,06 6 (2H) for resten af protonerne.

C. Til en opløsning af 1972 mg (4,4 mmol) 23α-p-phenylbenzoyloxy-5«~hydroxy-2|i - ( 3-oxo-7-oxa-trans-l-octen-l-yl) cyclopent-iq -yl}-eddikesyre-^-lacton, fremstillet under B, i 15 ml tørt 1,2-dimethoxyethan i en tør nitrogenatmosfære ved omgivelsernes temperatur sattes dråbevis 4,0 ml af en 0,5 M zinkborhydridopløsning. Efter omrøring ved stuetemperatur i 1 time blev reaktionsblandingen afkølet til 0° C, og der tilsattes dråbevis en mættet na-triumhydrogentartratopløsning, indtil hydrogenudviklingen ophørte. Reaktionsblandingen omrørtes i 5 minutter, ved hvilket tidspunkt der tilsattes 250 ml tørt methylenchlorid. Efter tørring over magnesiumsulfat og koncentrering (vandstrålepumpe) blev det resulterende halvfaste stof renset ved søjlekromatografi på silica-gel (Baker '’Analyzed" Reagent, partikelstørrelse 0,074 - 0,250 13 , U$498 mm) under anvendelse af ether som eluerlngsmiddel♦ Efter eluering af de mindre polære urenheder elueredes fraktioner indeholdende 450 mg 2-[3a-p-phenylbenzoyloxy-5oc-hydroxy-2p-(3oc-hydroxy-7-oxa-trans-l-octen-l-yl)cyclopent-la-yl]eddikesyre-,T^lacton, 294 mg 2-[3a-p-phenylbenzoyloxy-5a-hydroxy-2p-(3p-hydroxy-7-oxa-trans- 1- octen-l-yl)cyclopent-la-yl]eddikesyre-^-lacton og 486 mg af de to blandet.

Det infrarøde spektrum (CHCl·*) af den første af disse to forbin- > —1 delser havde stærke carbonylabsorptioner ved 1770 og 1715 cm .

D. En heterogen blanding af 450 mg (1,0 mmol) 2-£3#.-p-phenylbenzoyl-oxy-5eo-hydroxy-2P- (3x,-hydroxy-7-oxa-trans-l-octen-l-yl) cyclopent- 1 -yl]eddikesyre-Clacton, fremstillet under C, 4,5 ml absolut methanol og 140 mg fint pulveriseret vandfrit kaliumcarbo-nat blev omrørt ved stuetemperatur i 1 time og derpå afkølet til 0° C. Til den afkølede opløsning sattes 2,0 ml (2,0 mmol) 1,QN vandig saltsyre. Efter omrøring ved 0° i yderligere 10 minutter tilsattes 5 ml vand under samtidig dannelse af methyl-p-phenyl-benzoat, som blev opsamlet ved filtrering. Filtratet blev mættet med fast natriumchlorid, ekstraheret med ethylacetat (4 x 10 ml), de kombinerede organiske ekstrakter vasket med mættet natrium-hydrogencarbonat (10 ml), tørret over magnesiumsulfat og koncentreret, hvorved der blev opnået 204 mg (76 9é) viskøs, olieagtig 2- [3α,5α-dihydroxy-2β-(3α-hydroxy-7-oxa-trans~l-octen-l-yl)-cy clopent-la-yl ] eddike syr e-Z^-lac t on.

Det infrarøde spektrum (CHC1,) udviste en stærk absorption ved — 1 > Ί 1770 cm for lactoncarbonylet og middel absorption ved 960 cm for trans-dobbeltbindingen.

E. Til en opløsning af 192 mg (0,71 mmol) 2-£3«u5&-dihydroxy-2(S-(3oe.-hydroxy-7-oxa-trans-l-octen-yl)cyclopent-Lt-yl3eddikesyre-)f^lacton, fremstillet under D, i 5 ml vandfrit methylenchlorid og 1 ml 2,3-dihydropyran ved 0° C i en tør nitrogenatmosfære sattes 5 mg p-toluensulfonsyre-monohydrat. Efter omrøring i 15 minutter blev reaktionsblandingen kombineret med 100 ml ether, etheropløsningen vasket med mættet natriumhydrogencarbonat (1 x 15 ml), derpå med mættet saltvand (l x 15 ml), tørret over magnesiumsulfat og koncentreret, hvorved der blev opnået 310 mg (100 %) 2-[5cc-hydroxy-3oc(tetrahydropyran-2-yloxy)-2p-(3a-[tetra-hydropyran-2-yloxy]-7-oxa-trans-l-octen-l-yl)cyclopent-l<x-yl]-eddikesyre-J^lacton.

14 143498 NMR-spektret (CDCl^) udviste en multiplet ved 5,30 - 5,62 S (2H) for de alkeniske protoner, en singlet ved 3,34 S (3H) for methyletherprotonerne, og multipletter ved 4,36 - 5,18 i (4H), 3,22 - 4,24 ί (9H) og 1,18 - 2,92 £ (20H) for de resterende protoner.

F. En opløsning af 310 mg (0,71 mmol) 2-£5*--hydroxy-3cL-(tetra-hydropyran-2-yloxy)-2β-(3a- [tetrahydropyran-2-yloxy ]-7-oxa-trans- 1- octen-l-yl) cyclopent-l«.-yl}eddikesyre-^lacton, fremstillet under E, i 5 ml tørt toluen blev afkølet til -78° C i en tør nitrogenatmosfære. Til denne afkølede opløsning sattes 1,5 ml 20 % diisobutylaluminiumhydrid i n-hexan dråbevis med en sådan hastighed, at den indre temperatur aldrig steg over -65° C (15 minutter). Efter yderligere 45 minutters omrøring ved -78° C tilsattes vandigt methanol, indtil gasudviklingen ophørte, og reaktionsblandingen fik lov at opvarme til stuetemperatur. Reaktionsblandingen blev kombineret med 100 ml ether, vasket med 50 % natriumkaliumtartratopløsning (4 x 20 ml), tørret over magnesiumsulfat og koncentreret, hvorved der blev opnået 290 mg (93 %) 2- [ 5oc-hydroxy-3a- (tetrahydropyran-2-yloxy) -2β- (3α- [ t etrahydr o-pyran-2-yloxy]-7-oxa-trans-l-octen-l-yl)cyclopent-l-yl Jacetal-dehyd- ^hemiacetal.

G. Til en opløsning af 870 mg (2,0 mmol) (4-oarboxy-n-butyl)-triphenylphosphoniumbromid i en tør nitrogenatmosfære i 5,0 ml tørt dimethylsulfoxid sattes 2,0 ml (4,4 mmol) af en 2,2 M opløsning af natriummethylsulfonylmethid i dimethylsulfoxid. Til denne røde ylidopløsning sattes dråbevis en opløsning af 290 mg (0,66 mmol) 2-[5a-hydroxy-3a-(tetrahydropyran-2-yloxy)-2β-(3α-[tetrahydropyran-2-yloxy]-7-oxa-trans-l-octen-l-yl)cyclopent-l^-yljacetaldehyd-if-hemiacetal, fremstillet tinder F, i 3,0 ml tørt dimethylsulfoxid i løbet af 20 minutter. Efter yderligere 2 timers omrøring ved stuetemperatur hældtes reaktionsblandingen ud i vand. Den basiske vandige opløsning blev vasket to gange med ethylacetat (20 ml) og gjort sur til pH ca. 3 med 10 % vandig saltsyre. Den sure opløsning blev ekstraheret med ethylacetat (3 x 20 ml), og de kombinerede organiske ekstrakter vasket 1 gang med vand (10 ml), tørret over magnesiumsulfat og inddampet til en fast remanens, der vejede 784 mg. Denne faste remanens blev udrevet med ethylacetat og filtreret. Filtratet blev renset ved søjlechromatografi på silica-gel (Baker "Analyzed” 143498 15

Reagent, partikelstørrelse 0,074 - 0,250 mm) under anvendelse af ethylacetat som elueringsmiddel. Efter fjernelse af urenheder med høj Rf blev der opsamlet 225 mg (66 %) 9a-hydroxy-llcc,15oc-bis-(tetrahydropyran-2-yloxy)-19-oxa-cis-5-trans-13-prostadien-syre.

NMR-spektret (CDCl^) udviste en multiplet (variabel) ved 5,85 - 6,38 b (2H) for -OH-protonerne, en multiplet ved 5,27 - 5,68 b (4H) for de alkeniske protoner, en multiplet ved 4,52-4,84 i (2H) for acetal-protonerne, en singlet ved 3,34 & (3H) for methylether-protonerne, og multipletter ved 3,25 - 4,35 b (9H) og 1,20 - 2,72 i (28H) for de resterende protoner.

H. Til en opløsning af 190 mg (0,356 mmol) 9a-hydroxy-ll«.,15!,i--bis-(tetrahydropyran-2-yloxy)-19-oxa-cis-5-trans-13-prostadiensyre, fremstillet under G, i 5 ml reagensrent acetone afkølet til -10° C under en nitrogenatmosfære sattes dråbevis 0,143 ml (0,356 mmol) Jones' reagens. Efter 20 minutter ved -10° C tilsattes 0,140 ml 2-propanol, og reaktionsblandingen omrørtes i yderligere 5 minutter, ved hvilket tidspunkt den blev kombineret med 40 ml ethylacetat, vasket med vand (3x5 ml), tørret over magnesiumsulfat og koncentreret, hvorved der blev opnået 174 mg 9-oxo-lla,15a-bis-(tetrahydropyran-2-yloxy)-19-oxa-cis-5-trans-13-prostadiensyre.

I. En opløsning af 174 mg (0,334· mmol) 9-oxo-llii--15^--bis-tetrahydro-pyran-2-yloxy)-19-oxa-cis-5-trans-13~prostadiensyre, fremstillet under H, i 3,0 ml af en blanding af eddikesyre og vand i forholdet 65:35 blev omrørt under nitrogen ved 40° C i 5 timer og derpå koncentreret ved rotationsfordampning. Den resulterende rå o!/A\ bleV renset ved søjlechromatografi på silica-gel ("Mallinck-rodt^CC-4", partikelstørrelse 0,074 - 0,149 mm) under anvendelse af ethylacetat som elueringsmiddel. Efter eluering af mindre polære urenheder opsamledes det halvfaste stof 9-οχο-11α,15α-dihydroxy-19-oxa-cis-5-trans-13-prostadiensyre, som vejede 33 mg. Dette produkt er 19-oxa-prastaglandln E2, smp. 58 - 59° C (ethylacetat/ cyclohexan).

16 143498

Analyse: beregnet: C 64,39 - Η 8,53-fundet: C 64,30 - H 8,28.

[a]p5 = -71,2 (C = 1,0, methanol).

Produktets Infrarøde spektrum (CHCl^) udviste en stærk absorption ved 1715 cm-"1' for carbonylgrupperne og middel absorption ved 965 cm-1 for trans-dobbeltbindingen. Det ultraviolette spektrum i methanol med tilsat kaliumhydroxid udviste en λ = 278 nm og en e = nidx max 28 000.

EKSEMPEL_2

En opløsning af 52 mg (0,10 mmol) 9a-hydroxy-1115^-bis-(tetra-hydropyran-2-yloxy)-19-oxa-cis-5-trans-13-prostadiensyre, fremstillet i eksempel 1-G, i 3,0 ml af en blanding af iseddike og vand i forholdet 65:35 blev omrørt under nitrogen ved 40° C i 5 timer og derpå koncentreret ved rotationsfordampning. Den resulterende rå olie blev renset på silica-gel ("Mallinckrodt ^ CC-4", partikelstørrelse 0,074 - 0,149 mm) under anvendelse af ethyl-acetat og derpå methanol som opløsningsmidler. Efter eluering af mindre polære urenheder opsamledes den olieagtige 9oc,lla,15a-trihydroxy-cis-5-trans-13-prostadiensyre, der vejede 15 mg. Dette produkt er 19-oxaprostaglandin F2a‘ EKSEMPEL_3 A. En opløsning af 12,4 g (100 mmol) dimethylmethylphosphonat i 125 ml tørt tetrahydrofuran blev afkølet til -78° C i en tør nitrogenatmosfære. Til den omrørte phosphonatopløsning sattes 40 ml 2,67 M n-butyllithium i hexanopløsning dråbevis i løbet af 30 minutter med en sådan hastighed, at reaktionstemperaturen aldrig steg over -65° C. Efter yderligere 5 minutters omrøring ved -78° C tilsattes dråbevis 8,0 g (50,0 mmol) ethyl-4-ethoxybutyrat (fremstillet ifølge R. Huisgen og J. Reinertshafter, Ann., 575, 197 (1952)) med en hastighed, som holdt reaktionstemperaturen under -70° C (10 minutter). Efter 3 timer ved -78° C fik reaktionsblandingen lov at opvarmes til omgivelsernes temperatur, blev neutraliseret med 6 ml eddikesyre og rotationsinddampet til en hvid gel. Det gelatinøse materiale blev optaget i 25 ml vand, den vandige fase ekstraheret med 100 ml portioner af methylen-chlorid (tre gange), og de kombinerede organiske ekstrakter tør- 17 143498 ret over magnesiumsulfat og koncentreret (vandstrålepumpe) til en rå remanens og destilleret, kp. 130 - 132° C/0,1 mmHg, hvorved der blev opnået 7,4 g (62#) dimethyl-2-oxo-6-oxaoctylphosphonat.

NMR-spektret (CDC1,) viste D 0 en dublet centreret ved 3,78 b (J = 11,5 Hz, 6H) for (CH^Ojg-P-, en triplet centreret ved 3,28 <h (2H) for CH^-O-CHg-, en kvartet ved 3,43 h (2H) for CH9-0-CH5-, —- 0 0 en dublet centreret ved 3,14 ^ (J = 23 Hz, 2H) -C-CH2-P-, en triplet centreret ved 2,71 & (2H) for -CHg-CHg-C-, en multiplet 1,57 - 2,20 & (2H) for -CH2-CH2-CH2 og en triplet centreret ved 1,15 b (3H) for CH-j-CHg-O-CH,,.

B. 2,5 g (10,7 mmol) dimethyl-2-oxo-6-oxaoctylphosphonat, fremstillet under A, i 175 ml vandfri ether blev behandlet med 5,0 ml (8,0 mmol) 1,6 M n-butyllithium i n-hexan i en tør nitrogen-atmosfære ved stuetemperatur. Efter 5 minutters omrøring tilsattes yderligere 350 ml vandfri ether efterfulgt af 2,5 g (7,2 mmol) 2-[3a-p-phenylbenzoyloxy-5a-hydroxy-2p-formylcyclopentan-la-yl]-eddikesyre-/^-lacton i en portion. Efter 30 minutter blev reaktionsblandingen omsat med 5,0 ml iseddike, fortyndet med 200 ml vandfri ether, vasket med 200 ml 10 % saltsyre (to gange), 200 ml mættet natriumhydrogencarbonatopløsning (én gang), 100 ml vand (én gang), tørret over magnesiumsulfat og inddampet, hvorved der blev opnået 3,591 g (109 %) rå 2-[3cc-p-phenylbenzoyloxy-5oc-hydroxy-2β-(3-oxo-7-oxa-trans-l-nonen-l-yl)cyclopent-la-yl]eddike syre-r-lac ton som en olie.

Produktets infrarøde spektrum (CHCl^) udviste absorptionsbånd ved I76O cm“^ (stærk), 1707 cm-^ (stærk), 1665 cm”·*· (middel) og 1620 cm-1 (middel), som kan tilskrives carbonylgrupperne. NMR-spektret (CDCl^) stemte overens med strukturen.

C. Til en opløsning af 3491 mg (7,6 mmol) rå 2-[3<c-p-phenylbenzo-yl-oxy-5&.-hydroxy-2j?> - ( 3 - o xo-7- oxa-trans - 1-nonen- 1-yl) cyclopent-!UL-yl]eddikesyre-i)^-lacton, fremstillet tinder B, i 30 ml tørt 18 143498 1,2-dimethoxyethan i en tør nitrogenatmosfære ved omgivelsernes temperatur sattes dråbevis 2,5 ml 0,5 M zinkborhydridopløsning.

Efter omrøring ved stuetemperatur i 1 time blev reaktionsblandingen afkølet til 0° C, og der tilsattes dråbevis en mættet natrium-hydrogentartratopløsning, indtil hydrogenudviklingen ophørte. Reaktionsblandingen blev omrørt i 5 'minutter, til hvilket tidspunkt der tilsattes 250 ml tørt methylenchlorid. Efter tørring over magnesiumsulfat og koncentrering (vandstrålepumpe) blev det resulterende halvfaste stof renset ved søjlechromatografi på silica-gel (Baker "Analyzed" Reagent, partikelstørrelse 0,074 -0,250 mm) under anvendelse af ether som elueringsmiddel. Efter eluering af mindre polære urenheder blev der elueret fraktioner indeholdende 705 mg 2-[5a-p-phenylbenzoyloxy-5cc-hydroxy-2p-(3a-hydroxy-7-oxa-trans-l-nonen-l-yl)cyclopent-la-yl]eddikesyre-/ilac-ton, en fraktion indeholdende 2-[3a-p-phenylbenzoyloxy-5a-hydroxy-2β-(3 P-hydroxy-7-oxa-trans-l-nonen-l-yl)cyclopent-la-yl]eddike-syre-^lacton og en fraktion af de to blandet.

Det infrarøde spektrum (CHC1,) af den første forbindelse ovenfor 2 —1 havde stærke carbonylabsorptioner ved 1770 og 1705 cm . NMR-spektret (CDCl^) stemte overens med strukturen.

D. En heterogen blanding af 703 mg (1,5 mmol) 2-£3^-p-phenylbenz-oyloxy- 5-<*--hydroxy-2fi - (3d-hydroxy-7-oxa-trans-l-nonen-l-yl) -cyclopent-l't-yl]]eddikesyre-Jjr-lacton, fremstillet under C, 7,0 ml absolut methanol og 207 mg fint pulveriseret vandfrit kaliumcarbonat blev omrørt ved stuetemperatur i 1 time og derpå afkølet til 0° C. Til den afkølede opløsning sattes 3,5 ml (3,0 mmol) 1,0 N vandig saltsyre. Efter omrøring ved 0° C i yderligere 10 minutter tilsattes 7 ml vand under samtidig dannelse af methyl-p-phenylbenzoat, som blev opsamlet ved filtrering. Filtratet blev mættet med fast natriumchlorid, ekstraheret med ethyl-acetat (4 x 10 ml), de kombinerede organiske ekstrakter blev vasket med mættet natriumhydrogencarbonat (10 ml), tørret over magnesiumsulfat og koncentreret, hvorved der blev opnået 350 mg (85,5 %) viskøs olieagtig 2-[3a,5oc-dihydroxy-2P-(3a-hydroxy-7-oxa-trans-l-nonen-l-yl) cyclopent-la-yl ] eddikesyre-/i-lacton.

Det infrarøde spektrum (CHCl^) udviste en stærk absorption ved 1170 cm-·*· for lactoncarbonylet og en middel absorption ved 965 cm-1 for trans-dobbeltbinding.

19 143498 E. Til en opløsning af 350 mg (1,28 mmol) 2-[3<t, 5<t-dihydroxy-2j2>-(3oL-hydroxy-7-oxa-trans-l-nonert»l-yl)oyelopent-la-yl]eddikesyre-'r-lacton, fremstillet vinder D, i 3,5 ml vandfrit methylenchlorid og 350 jil 2,3-dihydropyran ved 0° C i en tør nitrogenatmosfære sattes 3»5 mg p-toluensulfonsyre-monohydrat. Efter omrøring i 15 minutter blev reaktionsblandingen kombineret med 100 ml ether, etheropløsningen vasket med mættet natriumhydrogencarbonatopløsning (1 x 15 ml) og derpå med mættet saltvand (1 x 15 ml), tørret over magnesiumsulfat og koncentreret, hvorved der blev opnået 590 mg (>100 %) 2-[5α-Ι^η^-3α-(ΐβΐΓ3ΐητ(ΪΓορ3ΓΓηη-2^1οΧ5Γ)-2β- (3α-[tetrahydropyran-2-yloxy]7-oxa-trans-1-nonen-l-yl)cyclopent-Ια-yl]eddike syre-X^lacton.

NMR-spektret (CDCl^) udviste en multiplet ved 5,30 - 5,65 i (2H) for de alkeniske protoner, en kvartet ved 3,50 S (2H) for ethyletherprotonerne, multipletter ved 4,35 - 5,18 h (4H), 3,22 - 4,24 S (8H) og 1,18 - 2,92 i (21H) og en triplet ved 1,20 S (3H).

F. En opløsning af 575 mg (1,28 mmol) rå 2- [5a-hydroxy-3a-(tetrahydro-pyran-2-yloxy) - 2β-)( 3α- [tetishydropyran-2-yloxy]-7-oxa-trans-l-nonen-l-yl)cyclopent-yl]]eddikesyre-^-lacton, fremstillet under E, i 5,75 ml tørt toluen blev afkølet til -78° C i en tør nitrogenatmosfære. Til denne afkølede opløsning sattes 1,8 ml 20 % diisobutylaluminiumhydrid i n-hexan dråbevis med en sådan hastighed, at den indre temperatur aldrig steg over -65° C (15 minutter). Efter yderligere 1 times omrøring ved -78° C tilsattes vandigt methanol, indtil gasudviklingen ophørte, og reaktionsblandingen fik lov at opvarmes til stuetemperatur. Reaktionsblandingen blev kombineret med 50 ml ether, vasket med 50 % natriumkaliumtartratopløsning (4 x 10 ml), tørret over magnesiumsulfat og koncentreret, hvorved der blev opnået 458 mg (80 %) 2- [ 5a-hydroxy-3a- (tetrahydropyran-2-yloxy)-2β- (3α- [tetrahydro-pyran-2-yloxy]-7-oxa-trans-l-nonen-l-yl)cyclopent-l-yl]ac etal-dehyd-J^-hemiacetal.

20 143498 G. Til en opløsning af 1330 mg (3,0 mmol) (4-carboxy-n-butyl)-triphenylphosphoniumbromid i 6 ml tørt dimethylsulfoxid i en tør nitrogenatmosfære sattes 3,4 ml (6,8 mmol) af en 2,0 M opløsning af natriummethylsulfinylmethid i dimethylsulfoxid. Til denne røde ylid-opløsning sattes dråbevis en opløsning af 454 mg (1,0 mmol) rå 2-[5a-hydroxy-3a-(tetrahydropyran-2-yloxy)-2β-(3α-[te-trahydropyran-2-yloxy]-7-oxa-trans-l-nonen-l-yl)cyclopent-la-yl]-acetaldehyd-tf'-hemiacetal, fremstillet tinder F, i 3,0 ml tørt dimethylsulfoxid i løbet af 20 minutter. Efter 2 timers omrøring ved stuetemperatur hældtes reaktionsblandingen ud i isvand. Den basiske vandige opløsning blev vasket to gange med ethylacetat (30 ml) og gjort sur til pH ca. 3 med 10 % vandig saltsyre.

Den sure opløsning blev ekstraheret med ethylacetat (4 x 25 ml), og de kombinerede organiske ekstrakter vasket en gang med vand (25 ml), tørret over magnesiumsulfat og inddampet til en fast remanens, der vejede 900 mg. Denne faste remanens blev udrevet med ethylacetat og filtreret. Filtratet blev renset ved søjle-chromatografi på silica-gel (Baker ’'Analyzed” Reagent, partikelstørrelse 0,074 - 0,250 mm) under anvendelse af ethylacetat som elueringsmiddel. Efter fjernelse af urenheder med høj Rf-værdi blev der opsamlet 290 mg (54 %) 9a-hydroxy-lla,15<x-bis-(tetra-hydropyran-2-yloxy)-19-oxa-cis-5-trans-13-m-homo-prostadiensyre.

NMR-spektret (CDCl^) udviste en multiplet (variabel) ved 6,2 - 6,6 b (2H) for -OH-protonerne, en multiplet ved 5,3 - 5,7 4 (4H) for de alkeniske protoner, en multiplet ved 4,6 - 4,9 & (2H) for acetalprotonerne, en kvartet ved 3,5 4 (2H) for ethyletherprotonerne, og multipletter ved 3,3 - 4,4 & (9H) og 1,0 - 2,6 b (31H) for de resterende protoner.

H. Til en opløsning af 290 mg (0,540 mmol) 9/£-hydroxy-ll*,15*--'bis-(tetrahydropyran-2-yloxy)-19-oxa-cis-5-trans-13-w-homo-prosta-diensyre, fremstillet under G, i 5,4 ml reagensrent acetone afkølet til -10° C under nitrogen sattes dråbevis 0,226 ml (0,600 mmol) 2,67 M Jones' reagens. Efter 5 minutter ved -10° C tilsattes 0,230 ml 2-propanol, og reaktionsblandingen omrørtes i yderligere 5 minutter, til hvilket tidspunkt den blev kombineret med 21 143498 30 ml ethylacetat, vasket med vand (3 x 5 ml), tørret over magnesiumsulfat, koncentreret og chromatograferet på silica-gel (Baker, partikelstørrelse 0,074 - 0,250 mm, CH2C12 elueringsmiddel), hvorved der blev opnået 180 mg 9-oxo-lla,15a-bis-(tetrahydropyran- 2-yloxy)—19—oxa—cis—5—trans—13“fl*homo—prostadiensyre.

I. En opløsning af 129 mg (0,240 mmol) 9-οχο-ΙΙκ,15*-bis-(tetra-hydropyran-2-yloxy)-19-oxa-cis-5-trans-13-uJ-homo-prostadiensyre, fremstillet under H, i 3,0 ml af en blanding af iseddike og vand i forholdet 65:35 blev omrørt under nitrogen ved 40° C i 2,5 timer og derpå koncentreret ved rotationsfordampning. Den resulterende rå oli^blev renset ved søjlechromatografi på silica-gel ("Mallinckrodt©CC-4", partikelstørrelse 0,074 - 0,149 mm) under anvendelse af ethylacetat som elueringsmiddel. Efter eluering af mindre polære urenheder blev der opsamlet 9-oxo-lla, 15oc-dihydroxy-19-oxa-cis-5-trans-13-u>-homo-prostadiensyre, der vejede 40 mg (smp. 56 - 57° C). Dette produkt er 19-oxa-æ-homoprostaglan-din E2.

Det ultraviolette spektrum i methanol med tilsat kaliumhydroxidopløsning udviste en \max = 278 nm og en emax = 25 700.

Hvis der ønskes 19-oxa-w>-homoprostaglandin-F2^, følges den i eksempel 2 angivne procedure under anvendelse af produktet fremstillet under G ovenfor som udgangsmateriale.

EKSEMPEL_4 A. En opløsning af 12,4 g (100 mmol) dimethylmethylphosphonat i 125 ml tørt tetrahydrofuran blev afkølet til -78° C i en tør nitrogenatmosfære. Til den omrørte phosphonatopløsning sattes 40 ml 2,67 M n-butyllithium i hexanopløsning dråbevis i løbet af 30 minutter med en sådan hastighed, at reaktionstemperaturen aldrig steg over -65° C. Efter yderligere 5 minutters omrøring ved -78° C tilsattes dråbevis 7,6 g (50,0 mmol) ethyl-3-ethoxypropionat med en hastighed, der holdt reaktionstemperaturen under -70° C (10 minutter). Efter 3 timer ved -78° C fik reaktionsblandingen lov at opvarmes til omgivelsernes temperatur, blev neutraliseret med 6 ml eddikesyre og rotationsinddampet til en hvid gel. Det gelatinøse materiale blev optaget i 25 ml vand, den vandige fase 22 143698 ekstraheredes med 100 ml portioner ether (3 gange), de kombinerede organiske ekstrakter tørredes over magnesiumsulfat og koncentreredes (vandstrålepumpe) til en rå remanens og detilleredes, kp. 107 - 114° C/0,1 mmHg, hvorved der blev opnået 5,6 g (50 %) dimethyl-2-oxo-5-oxaheptylpho sphonat.

NMR-spektret (CDC1-) viste * 0 en dublet centreret ved 3»79 £ (J = 11 »5 Hz, 6h) for (CH^O^-P-, en triplet centreret ved 3 »28 6 (2H) for CH^-O-C^-C^- > en kvartet ved 3»43 6 (2H) for CH^-O-CH«-, —- ^ 0 0 en dublet centreret ved 3»14 i (J = 23 Hz, 2H) -C-CHg-P-, Π en triplet centreret ved 2,87 i (2H) for -CHg-C^-C- og en triplet ventreret ved 1,19 £ (3H) for CH^-CH^-O-CHg· B. 3,8 g (17,1 mmol) dimethyl-2-oxo-5-oxaheptylphosphonat, fremstillet under A, i 200 ml vandfri ether blev behandlet med 4,8 ml (12 mmol) 2,5 M n-butyllithium i n-hexan i en tør nitrogenatmosfære ved stuetemperatur. Efter 5 minutters omrøring tilsattes yderligere 400 ml vandfri ether efterfulgt af 4 g (11,4 mmol) 2-[3cc-p-phenylbenzoyloxy-5-a-hydroxy-2p-formylcyclopentan-la-yl]-eddikesyre-r-lacton i en portion. Efter 35 minutter blev reaktionsblandingen omsat med 5,0 ml iseddike, fortyndet med 200 ml vandfri ether, vasket med 200 ml 10 % saltsyre (2 gange), 200 ml mættet natriumhydrogencarbonatopløsning (1 gang), 100 ml vand (1 gang), tørret over magnesiumsulfat og inddampet, hvorved der blev opnået 4,057 (80 %) rå 2-[3a-p-phenylbenzoyloxy-5a-hydroxy-2P-(3-oxo-6-oxa-trans-l-octen-l-yl)cyclopent-la-yl]eddikesyre-Clacton som en olie.

Produktets infrarøde spektrum (CHCl-j) udviste absorptionsbånd ved 1770 cm-"1' (stærk), 1707 cm-"*" (stærk), I67O cm-"1" (middel) og 1620 cm-i (middel), der kan tilskrives carbonylgrupperne. NMR-spektret (CDCl^) stemte overens med strukturen.

C. Til en opløsning af 4100 mg (9,-2 mmol) rå 2-£3<J(-p-phenylbenzoyl-oxy-5<s( -hydroxy-2 β- (3-oxo-6-oxa-trans-l-octen-l-yl) cyclopent-Dc- 23 143498 ylQeddikesyre-fl-’-lacton, fremstillet under B, 30 ml tørt 1,2-dimet-hoxyethan i en tør nitrogenatmosfasre ved 0° C sattes dråbevis 4,5 ml af en 1,0 M zinkborhydridopløsning. Efter omrøring ved 0° C i en time tilsattes dråbevis en mættet natriumhydrogentartratopløsning, indtil hydrogenudviklingen ophørte. Reaktionsblandingen omrørtes i 5 minutter, til hvilket tidspunkt der tilsattes 200 ml tørt methylen-chlorid. Efter tørring over magnesiumsulfat og koncentrering (vandstrålepumpe) blev det resulterende halvfaste stof renset ved søjlechromatografi på silica-gel (Baker "Analyzed" Reagent, partikelstørrelse 0,074 - 0,250 mm) under anvendelse af ether/ethyl--acetat (5:l) som elueringsmiddel. Efter eluering af mindre polære urenheder elueredes fraktioner indeholdende 778 mg 2-[3oc-p-phenylbenzoyloxy-5a-hydroxy-2 β-(3oc-hydroxy-6-oxa-trans-l-octen- l-yl)cyclopent-la-yl]eddikesyre-3S^lacton (5), 2-[3<x-p-phenyl-benzoyloxy-5oc-hydroxy-^- (3 β-hydroxy-6-oxa-tΓans-l-oct en-l-yl) -cyclopent-loc-yl]eddikesyre-}f^lacton og 355 mg af de to blandet.

Det infrarøde spektrum (CHCl^) af den første af de ovennævnte fraktioner havde stærke carbonylabsorptioner ved 1775 og 1715 cm”·*·. NMR-spektret (CDCl^) stemte overens med strukturen.

D. En heterogen blanding af lOOg mg (2,24 mmol) 2-[3ti,-p-phenyl-benzoyloxy-5a.-hydroxy-2 p-(3<t-hydroxy-6-oxa-trans-l-octen-l-yl) -cyclopent-l^-yl^eddikesyre-jf'-lacton, fremstillet under C, 10,0 ml absolut methanol og 310 mg fint pulveriseret, vandfrit kaliumcarbonat blev omrørt ved stuetemperatur i 1 time og derpå afkølet ved 0° C. Til den afkølede opløsning sattes 10 ml (10 mmol) 1,0 N saltsyre. Efter omrøring ved 0° C i yderligere 10 minutter tilsattes 10 ml vand under samtidig dannelse af methyl-p-phenylbenzoat, som blev opsamlet ved filtrering. Filtratet blev mættet med fast natriumchlorid, ekstraheret med ethylacetat (2 x 100 ml), de kombinerede organiske ekstrakter vasket med mættet natriumhydrogencarbonat (2 x 25 ml), tørret over magnesiumsulfat og koncentreret, hvorved der blev opnået 570 mg (94 %) viskøs, olieagtig 2-(3α,5α-dihydroxy-2β-(3α-hydroxy-6-oxa-trans- l-octen-l-yl)cyclopent-la-yl]eddikesyre-2i‘'-lacton.

Det infrarøde spektrum (CHC1,) udviste en stærk absorption ved -1 _i 1770 cm for lactoncarbonylet og middel absorption ved 965 cm for trans-dobbeltbindingen.

24 143498 E. Til en opløsning af 570 mg (2,11 mmol) 2-^3 £t,5^jrdihydroxy-2£-(3^-hydroxy-6-oxa-trans-l-octen..l-yl)cyclopent-la:-yl}eddikesyre-^-lacton, fremstillet under D, i 5,7 mg vandfrit methylen-chlorid og 570 μΐ 2,3-dihydropyran ved 0° i en tør nitrogen-atmosfære sattes 5,7 mg p-toluensulfonsyre-monohydrat. Efter omrøring i 15 minutter blev reaktionsblandingen kombineret med 200 ml ether, etheropløsningen vasket med mættet natriumhydrogen-carbonat (l x 25 ml) og derpå med mættet saltvand (1 x 25 ml), tørret over magnesiumsulfat og koncentreret, hvorved der blev opnået 925 mg (100 %) 2- [ 5a-hydroxy-3cc- (tetrahydropyran-2-yloxy) -2β-(3α-[tetrahydropyran-2-yloxy]-6-oxa-trans-l-octen-l-yl)cyclo-pent-la-yl]eddikesyre-Clacton.

NMR-spektret (CDClj) udviste en multiplet ved 5,30 - 5,70 S (2H) for de alkeniske protoner, en kvartet ved 3,40 S (2H) for ethyletherprotoneme, multipletter ved 4,35 - 5,18 & (4H), 3,18 - 4,32 £ (8H) og 1,18 - 2,92 4 (25H) og en triplet ved 1,10 & (3H).

F. En opløsning af 880 mg (2,01 mmol) rå 2-£5*_-hydroxy-3it-(tetra-hydropyran- 2-yloxy) -2(i- (3o_-rtetrahydropyran-2-yloxy3-6-oxa-trans- 1- octen-l-yl)cyclopent-l<x.-yl£eddikesyre-'CLlacton, fremstillet under E, i 8,8 ml tørt toluen blev afkølet til -78° C i en tør nitrogenatmosfære. Til denne afkølede opløsning sattes 3 ml 20 % diisobutylaluminiumhydrid i n-hexan dråbevis med en sådan hastighed, at den indre temperatur aldrig steg over -65° C (15 minutter). Efter yderligere 30 minutters omrøring ved -78° C tilsattes vandigt methanol, indtil gasudviklingen ophørte, og reaktionsblandingen fik lov at opvarmes til stuetemperatur. Reaktionsblandingen blev kombineret med 100 ml ether, vasket med 50 % natriumkaliumtartratopløsning (4 x 10 ml), tørret over magnesiumsulfat og koncentreret, hvorved der blev opnået 654 mg 2- [ 5oc-hydroxy-3a- (tetrahydropyran-2-yloxy) -2β- (3α- [ tetrahydro-pyran-2-yloxy]-6-oxa-trans-l-octen-l-yl)cyclopent-la-yl]acetal-dehyd-tf'-hemiacetal.

25 U3498 G. Til en opløsning af 2600 mg (6,0 mmol) (4-carboxy-n-toutyl)-triphenylphosphoniumbromid i en tør nitrogenatmosfære i 6 ml tørt dimethylsulfoxid sattes 6,0 ml (12,0 mmol) af en 2,0 M opløsning af natriiimmethylsulfinylmethid i dimethylsulfoxid. Til denne røde ylid-opløsning sattes dråbevis en opløsning af 660 mg (1,5 mmol) rå 2-[ 5oc-hydroxy-3oc-(tetrahydropyran-2-yloxy)-2β-(3α-[te-trahydropyran-2-yloxy]-6-oxa-trans-l-octen-l-yl)cyclopent-la-yl]-acetaldehyd-r^-hemiacetal, fremstillet under F, i 5,0 ml tørt dimethylsulfoxid i løbet af 20 minutter. Efter yderligere 2 timers omrøring ved stuetemperatur hældtes reaktionsblandingen ud i isvand. Den basiske vandige opløsning blev vasket to gange med ethylacetat (100 ml) og gjort sur til pH ca. 3 med 10 % saltsyre. Den sure opløsning blev ekstraheret med ethylacetat (3 x 100 ml), og de kombinerede organiske ekstrakter vasket én gang med vand (25 ml), tørret over magnesiumsulfat og inddampet til en fast remanens. Denne faste remanens blev udrevet med ethylacetat og filtreret. Filtratet blev renset ved søjlechromatografi på silica-gel (Baker "Analyzed" Reagent, partikelstørrelse 0,074 -0,250 mm) under anvendelse af ethylacetat som elueringsmiddel.

Efter fjernelse af urenheder med høj R^-værdi blev der opsamlet 550 mg (70 %) 9a-hydroxy-lla,15oc-bis-(tetrahydropyran-2-yloxy)-18-oxa-cis-5-trans-13-prostadiensyre.

NMR-spektret (CDCl^) udviste en multiplet (variabel) ved 6,2 - 6,6 4 (2H) for -OH-protonerne, en multiplet ved 5*3 - 5,7 S (4H) for de alkeniske protoner, en multiplet ved 4,6-4,9 £ (2H) for acetalprotonerne, en kvartet ved 3,5 4 (2H) for ethylether-protonerne og multipletter ved 3,3 - 4,4 S (9H) og 1,0 - 2,6 4 (31H) for de resterende protoner.

H. Til en opløsning af 400 mg (0,765 mmol) 9a-hydroxy-lla,15a-bis-(tetrahydropyran-2-yloxy)-18-oxa-cis-5-trans-13-prostadiensyre, fremstillet under G, i 8 ml reagensrent acetone afkølet til -10° C under nitrogen sattes dråbevis 0,338 ml (0,900 mmol) 2,67 M Jones’ reagens. Efter 5 minutter ved -10° C tilsattes 0,350 ml 2-propanol, og reaktionsblandingen omrørtes yderligere i 26 143498 5 minutter, til hvilket tidspunkt den blev kombineret med 60 ml ethylacetat, vasket med vand (3 x 5 ml), tørret over magnesiumsulfat og koncentreret, hvorved der blev opnået 280 mg 9-οχο-11α,15α-bis-(tetrahydropyran-2-yloxy)-18-oxa-cis-5-trans-13-prostadien-syre.

I. En opløsning af 280 mg (0,240 mmol) 9-oxo-llø<, 15A.-bis-(tetrahy-dropyran-2-yloxy)-18-oxa-cis-5-trans-13-prostadiensyre, fremstillet under H, i 4,0 ml af en blanding af iseddike og vand i forholdet 65:35 omrørtes under nitrogen ved 40° C i 2,5 timer og blev derpå koncentreret ved rotationsfordampning. Den resulterende olie blev renset ved søjlechromatografi på silica-gel ("Mallinckrodi®CC-4", partikelstørrelse 0,074 - 0,149 mm) under anvendelse af ethylacetat som. elueringsmiddel. Efter eluering af mindre polære urenheder opsamledes den olieagtige 9-οχο-11α,15α-dihydroxy-18-oxa-cis-5-trans-13-prostadiensyre, som vejede 66 mg. Dette produkt er 18-oxaprostaglandin E2.

Det ultraviolette spektrum i methanol med tilsat kaliumhydroxidopløsning udviste en λ__„ = 278 nm og en ε = 23 800 - 25 600.

tucUC ωαΛ EKSEMPEL 5

En opløsning af 75 mg (0,10 mmol) 9tf-hydroxy-ll/v,15^-bis-(tetra-hydropyran-2-yloxy) -18-oxa-cis-5-trans-13-prostadiensyre, fremstillet i eksempel 4-G, i 3,0 ml af en blanding af iseddikesyre og vand i forholdet 65:35 omrørtes under nitrogen ved 40° C i 5 timer og blev derpå koncentreret ved rotationsfordampning. Den resulterende rå olie blev renset på silica-gel ("Mallinckrodt^ CC-4", partikelstørrelse 0,074 - 0,149 mm) under anvendelse af ethylacetat og derpå methanol som elueringsmidler. Efter eluering af mindre polære urenheder opsamledes den olieagtige 9a,11a,15a-trihydroxy-18-oxa-cis-5-trans-13-prostaglandinsyre, som vejede 20 mg. Dette produkt er 18-oxaprostaglandin F2a.

EKSEMPEL_8

Til en opløsning af 35 mg 19-oxa-PGE2, fremstillet i eksempel 1, i 7 ml absolut methanol afkølet i is sattes en isafkølet opløsning af 105 mg natriumborhydrid i 12 ml absolut methanol. Opløsningen omrørtes under nitrogen i 20 minutter ved 0 - 5° C og derpå i 1,0 time ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen blev