DK151263B - Fremgangsmaade til fremstilling af 9-(beta-d-arabinofuranosyl)-adenin, 5'-phosphat - Google Patents
Fremgangsmaade til fremstilling af 9-(beta-d-arabinofuranosyl)-adenin, 5'-phosphat Download PDFInfo
- Publication number
- DK151263B DK151263B DK487177A DK487177A DK151263B DK 151263 B DK151263 B DK 151263B DK 487177 A DK487177 A DK 487177A DK 487177 A DK487177 A DK 487177A DK 151263 B DK151263 B DK 151263B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- arabinofuranosyl
- phosphate
- aqueous
- mixture
- process according
- Prior art date
Links
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 title claims description 28
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 title claims description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 19
- OIRDTQYFTABQOQ-UHTZMRCNSA-N Vidarabine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-UHTZMRCNSA-N 0.000 title description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 25
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 13
- XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N phosphoryl trichloride Chemical group ClP(Cl)(Cl)=O XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- -1 β-D-arabinofuranosyl Chemical group 0.000 claims description 9
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 8
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims description 7
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 7
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 claims description 6
- 230000000865 phosphorylative effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 6
- DQWPFSLDHJDLRL-UHFFFAOYSA-N triethyl phosphate Chemical group CCOP(=O)(OCC)OCC DQWPFSLDHJDLRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 5
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 claims description 4
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 claims description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 31
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 8
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 6
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 5
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 5
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 5
- 239000001177 diphosphate Substances 0.000 description 4
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J diphosphate(4-) Chemical class [O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 4
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 3
- KUWPCJHYPSUOFW-UHFFFAOYSA-N 2-(hydroxymethyl)-6-(2-nitrophenoxy)oxane-3,4,5-triol Chemical compound OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O KUWPCJHYPSUOFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical group [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000012156 elution solvent Substances 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 150000004682 monohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 239000002831 pharmacologic agent Substances 0.000 description 1
- RLOWWWKZYUNIDI-UHFFFAOYSA-N phosphinic chloride Chemical compound ClP=O RLOWWWKZYUNIDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 238000012958 reprocessing Methods 0.000 description 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 1
- 239000010802 sludge Substances 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000012258 stirred mixture Substances 0.000 description 1
- WVLBCYQITXONBZ-UHFFFAOYSA-N trimethyl phosphate Chemical compound COP(=O)(OC)OC WVLBCYQITXONBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/16—Purine radicals
- C07H19/20—Purine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
151263
Den foreliggende opfindelse angår en fremgangsmåde til fremstilling af esterproduktet 9-(3-D-arabinofuranosyl)-adenin,5'-phos-phat ved phosphorylering af 9-(β-D-arabinofuranosyl)-adenin og hydrolyse af det phosphorylerede produkt.
Ved en kendt frémgangsmåde til fremstilling af 5'-phosphat-esteren af et nucleosid (U.S.-patentskrift nr. 3.703.507) omsættes det tilsvarende nucleosid med phosphoroxychlorid (POClg). i eddikesyre i nærværelse af pyridin. Ved en anden kendt fremgangsmåde (U.S.-patentskrift nr. 3.413.382) omsættes det tilsvarende nucleosid med P0C1., eller diphosphorylchlorid (P^^l^) i nærværelse af trialkyl- 2 15126; phosphat-opløsningsmiddel, reaktionsproduktet hydrolyseres og neutraliseres, og det ønskede nucleotidprodukt isoleres ved adsorptions-og eluerings-teknik under anvendelse af aktiveret kul eller ionbyt-terharpiks. De kendte fremgangsmåder indebærer uønsket tidsrøvende manipulationer og procestrin, og de gør også brug af kostbare adsor-berende medier og elueringsopløsningsmidler.
Fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse til fremstilling af esterproduktet 9-(3-D-arabinofuranosyl)-adenin,51-phos-phat er ejendommelig ved, at 9-(3-D-arabinofuranosyl)-adenin omdannes til et 5'-monophosphoryleret mellemprodukt med et phosphory-leringsmiddel i nærværelse af trialkylphosphat-opløsningsmiddel, reaktionsblandingen underkastes vandig hydrolyse, pH-værdien af den vandige hydrolyseblanding justeres tilstrækkeligt opad til at bevirke opdeling i vandig og ikke-vandig væskefase, trialkylphosphat-opløsningsmidlet fjernes fra den vandige blanding, og den resterende vandige blanding opretholdes ved en pH-værdi, ved hvilken esterproduktet er uopløseligt, for at bringe dette esterprodukt til at udfælde fra den vandige blanding, og nævnte esterprodukt isoleres.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen har den fordel at føre til gode udbytter af det ønskede produkt i krystallinsk form. Fremgangsmåden tilvejebringer også et gunstigt forhold mellem nødvendigt volumen og produktudbytte, hvilket giver mulighed for forøgede chargestørrelser. Produkt-oparbejdningen er simpel, og krav til både arbejde og materialer er begrænset til et minimum.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen kan varieres betydeligt. Udgangsmaterialet, 9-(3-D-arabinofuranosyl)-adenin, kan anvendes enten som monohydrat eller i vandfri form, idet det vandfri nucleosid foretrækkes. Det anvendte phosphoryleringsmiddel kan være et hvilket som helst egnet middel, såsom phosphoroxyhalogenid, navnlig POClg, POBr^ eller P203C14. Phosphoryleringsmidlet anvendes i en mængde på ca. 1 til ca. 5 mol, og fortrinsvis ca. 1,5 til ca. 2 mol, for hvert mol 9-(3-D-arabinofuranosyl)-adenin. Phosphoroxychlorid er et foretrukket phosphoryleringsmiddel. Det anvendte trialkylphosphat-opløsningsmid-del er en ester af phosphorsyre med en aliphatisk (^-(^)-alkohol, såsom trimethylphosphat eller triethylphosphat. Triethylphosphat er et foretrukket opløsningsmiddel. Det molære forhold mellem trialkyl-phosphat-opløsningsmiddel og nucleosid ved fremgangsmåden er mindst 5 til 1. Et forhold på ca. 15 til 1 foretrækkes med henblik på at op- 3 151263 nå de bedste resultater. Phosphoryleringen gennemføres i almindelighed ved temperaturer på fra -30 til 50°C. Det foretrukne område ligger mellem -10 og +10°C, i hvilket reaktionen er fuldendt i løbet af ca. 2 til 5 timer. Ved -20°C ligger reaktionstiden på ca. 6 til 10 timer og ved 30°C på ca. 10 til 30 minutter. Efter reaktionen bliver phosphordi ha lidat- eller trichlordiphosphat-mellemproduktet hydrolyseret til tilvejebringelse af esterproduktet. Dette kan ske ved at kombinere is og/eller vand med reaktionsblandingen. pH-værdi-en af den resulterende vandige blanding bliver ifølge opfindelsen justeret opad ved tilsætning af base, såsom natriumhydroxidopløsning, i tilstrækkelig mængde til at bevirke opdeling i en vandig væskefase og en ikke-vandig væskefase, passende til en værdi inden for pH-området fra ca. 1 til ca. 2,5 eller højere. Den resulterende blanding, der danner de to væskefaser, ekstraheres med et indifferent, med vand ikke-blandbart opløsningsmiddel, såsom dichlormethan eller diethylether, for at fjerne trialkylphosphatet. Da det ønskede produkt, 9-( 3-D-arabinofuranosyl)-adenin,5'-phosphat, er vandopløseligt ved relativt lav pH-værdi og ved relativt høj pH-værdi, holdes den ekstraherede vandige fase, om nødvendigt efter yderligere indstilling, ved en pH-værdi, ved hvilken produktet er uopløseligt (alt efter betingelserne passende inden for pH-området fra ca. 1,3 til ca. 2,5), og blandingen henstilles, fortrinsvis i kulden og med podning, for at bringe det ønskede esterprodukt til at udfælde som en fast fase fra den vandige blanding. Produktet, der vindes i ren krystallinsk form, isoleres i fri syreform på sædvanlig måde, såsom ved filtrering eller centrifugering. Produktet kan, om ønsket, omkrystalliseres eller omdannes til saltform i opløsning ved hjælp af sædvanlige midler, for eksempel ved passende indstilling af pH-værdien.
Produktet, 9-( β-D-arabinofuranosyl)-adenin,5'-phosphat, er anvendeligt som et farmakologisk middel, navnlig som et antiviralt middel, idet det er aktivt over for Herpes simplex-virus, som beskrevet i ovennævnte US-patentskrift nr. 3.703.507, hvilken beskrivelse her medtages ved henvisning.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen beskrives nærmere gennem følgende eksempler.
151263 4
Eksempel 1
En omrørt blanding af 10,69 g (0,04 mol) vandfri 9-( β-D-ara-binofuranosyl)-adenin i 100 ml (0,586 mol) triethylphosphat blev afkølet til 0-2°C i et isbad. Til dette omrørte slam blev der derefter sat 7,05 g (0,046 mol) phosphoroxychlorid dråbevis i løbet af en periode på 2 timer, idet der fortsat blev afkølet i isbad. Blandingen blev derefter omrørt koldt i yderligere 1 time, hvorved vandtes en klar til let tåget opløsning, der blev hældt på 70 g is. Reaktionsbeholderen blev skyllet med 10 ml isvand, og dette blev sat til hydrolyseblandingen, der derefter blev omrørt i et isbad i ca. 15 minutter. Blandingen blev omrørt med afkøling, mens pH-værdi-en blev indstillet fra 0,6 til 2 under anvendelse af 50% natriumhydroxidopløsning. En anden væskefase udskilte, og temperaturen steg til ca. 10°C under dette trin. Blandingen blev omrørt i yderligere 15 minutter, mens pH-værdien holdtes ved 2 ved tilsætning af mere base.
Blandingen blev derefter overført til en skilletragt og ekstraheret med 100 ml dichlormethan. Den nedre fase (ikke-vandig, ca.
200 ml) blev fjernet, og det vandige lag blev igen ekstraheret under anvendelse af 50 ml dichlormethan. Lagene blev igen adskilt, og den øvre (vandige) fase blev genindstillet på pH 2 under anvendelse af nogle få dråber base. Denne opløsning blev podet med nogle få krystaller af 9-( β-D-arabinofuranosyl)-adenin, 5'-phosphat og omrørt ved stuetemperatur, indtil udfældning var godt i gang (ca. 10 minutter). Omrøring blev derefter standset, og blandingen blev henstillet i kulden natten over. Den resulterende hvide krystallinske masse blev opbrudt ved omrøring og igen henstillet natten over i kulden. Blandingen blev derefter filtreret med sugning, og det krystallinske produkt, 9-( β-D-arabinofuranosyl)-adenin,5'-phosphat, blev vasket successivt med isvand (22 ml), kold 50% vandig ethanol (35 ml) og kold absolut ethanol (25 ml). Efter tørring ved 40°C i vakuum i 16 timer vejede produktet 10,59 g (76,2% af det teoretiske) og viste følgende analyse: 151263 5
Ionbyttersøjlechromatografi - UV-prøve:
Fraktion I (ikke-omsat nucleosid + adenin): 1,57%
Fraktion II (ønsket 5'-phosphat-produkt): 91,2 %
Fraktion III (disphosphater): 1,98% K.Fisher - Vand; 5,62% ialt = 100,37%
Det korrigerede udbytte af 9-( β-D-arabinofuranosyl)-adenin, 5'-phosphat var derfor 69,5% af det teoretiske.
Produktanalysen blev gennemført ved følgende metode, der er typisk:
Ionbyttersøjlechromatografi- UV-prøve
En chromatografisk søjle (9 mm x 15 cm) pakkes med 0,5 g anionbytterharpiks (QAE-Sephadex A-25, Cl ), der har været suspenderet i destilleret vand natten over. Ca. 20 mg prøve afvejes nøjagtigt og opløses i 1,0 ml 0,1N NaOH, og denne opløsning overføres til søjlen. Søjlen elueres derefter med vand, indtil der er opsamlet ialt 25 ml i en volumetrisk flaske. Denne fraktion indeholder ikke-omsat 9-{ β-D-arabinofuranosyl)-adenin og adenin. Søjlen elueres derefter med 0,1M phosphat-puffer (pH 7,0), indtil der er opsamlet 50 ml. Denne anden fraktion indeholder det ønskede 5'-phosphat-produkt. En tredie fraktion indeholdende disphosphatestere vindes ved at eluere med 0,4M phosphatpuffer (pH 7,0), indtil ialt 50 ml er opsamlet.
UV-spektret for hver fraktion tages ved 320-220 nm. (Fraktioner 1 og 3 uden fortynding og fraktion 2 efter 20-ganges fortynding). Ud fra absorptionen ved 260 nm (A^26q) beregnes indeholdet for hver fraktion på følgende måde: a
mg af komponent = -- x 10 x V x D
a (1%, 1 om) χ260 hvor V = volumen (ml) af hver fraktion D = fortynding a (1%, 1 ^)^260 = f°r 9-(β-D-arabinofuranosyl)- adenin (Fraktion I) = 437 for 51-phosphat-produktet (Fraktion II) = 361 for diphosphaterne (Fraktion III)
Ud fra mængden af hver komponent beregnes derefter procenten for hver.
151263 s
Eksempel 2
Til 100 ml triethylphosphat blev der sat 10,69 g (0,04 mol) vandfri 9-(β-D-arabinofuranosyl)-adenin i én portion med omrøring. Denne blanding blev afkølet i et isbad til 2°C, og 9,20 g (0,06 mol) phosphoroxychlorid blev derefter tilsat over en periode på tre minutter, idet temperaturen steg til ca. 4°C. Reaktionsblandingen blev omrørt i kulden i 2 timer og 30 minutter, hvorefter den klare opløsning blev hældt i 80 g is. Denne blanding blev omrørt i et isbad for at opretholde en temperatur under 10°C, mens pH-værdien blev indstillet på 2 under anvendelse af 50% natriumhydroxidopløsning.
Den resulterende uklare blanding blev ekstraheret to gange under anvendelse af portioner på 100 ml og 50 ml af dichlormethan, og det vandige lag blev igen indstillet på pH 2 under anvendelse af yderligere base. Efter podning blev denne opløsning anbragt i køleskab natten over, hvorved fremkom et tæt hvidt bundfald. Dette blev omrørt med en glasstav og igen henstillet natten over i kulden. Det hvide produkt blev frafiltreret og vasket under anvendelse af 22 ml isvand, 35 ml kold 50% ethanol og 25 ml kold absolut ethanol. Efter tørring i vakuum ved 40°C vandtes 9,60 g (69,1% af det teoretiske) af produktet, 9-(β-D-arabinofuranosyl)-adenin,5'-phosphat, der viste følgende analyse:
Ionbyttersøjlechromatografi - UV-prøve:
Fraktion I (ikke-omsat nucleosid + adenin): 0,17%
Fraktion II (ønsket 5'-phosphat-produkt): 89,9 %
Fraktion III (diphosphater): 4,54%
Det korrigerede udbytte af 9-(β-D-arabinofuranosyl)-adenin,5'-phosphat var derfor 62,1% af det teoretiske.
Eksempel 3
Til en i isbad afkølet opløsning af 0,72 ml (0,04 mol) vand i 100 ml triethylphosphat blev der langsomt sat 12,27 g (0,08 mol) phosphoroxychlorid ved 0-5°C. Vandfrit 9-(β-D-arabinofuranosyl)-adenin (10,69 g, 0,04 mol) blev derefter tilsat i én portion med omrøring, hvorved fremkom en øjeblikkelig temperaturstigning fra 1°C til 9°C. Reaktionsblandingen var klar på 30 minutter, og efter 2 timer og 30 minutter blev den hældt på 100 g is, og pH blev indstillet til 2 under anvendelse af 50% natriumhydroxidopløsning. Efter ekstraktion to gange under anvendelse af portioner på 200 ml og 151263 7 100 ml af diethylether, blev pH igen indstillet under anvendelse af yderligere base. Den vandige opløsning blev derefter podet med krystaller af 9-(β-D-arabinofuranosyl)-adenin,5'-phosphat og afkølet i køleskab for at udfælde produktet, 9-(β-D-arabinofuranosyl)-adenin, 5'-phosphat, som beskrevet i foregående eksempler. Efter filtrering, vask og.tørring vejede det hvide produkt 10,12 g (72,9% af det teoretiske) og havde følgende analyse:
Ionbyttersøjlechromatografi - OV-prøve:
Praktion I (ikke-omsat nucleosid + adenin). 4,08%
Fraktion II (ønsket 5'-phosphat-produkt): 81,1 %
Fraktion III (diphosphater): 1,51%
Det korrigerede udbytte af 9-(β-D-arabinofuranosyl)-adenin,5'-phosphat var 59,1%.
Eksempel 4
Til et omrørt slam af 10,69 g (0,04 mol) 9-(3-D-arabinofurano-syl)-adenin i 100 ml triethylphosphat afkølet til 2°C i et isbad blev der over en periode på 2 timer sat 11,58 g (0,046 mol) diphos-phorylchlorid ^OgCl^ . Den hvide reaktionsblanding blev omrørt i kulden i yderligere 1 time, inden for hvilket tidsrum den blev en klar opløsning. Denne opløsning blev derefter hældt på 80 g is, og 50% natriumhydroxidopløsning blev sat til denne omrørte, isbad-ak-kølede blanding for at indstille pH på 2. Efter ekstraktion med di-chlormethan, genindstilling af pH og podning blev den vandige opløsning afkølet. Produktet, der udskilte som et hvidt krystallinsk fast stof, 9-(β-D-arabinofuranosyl)-adenin,5'-phosphat, blev opsamlet ved filtrering, vasket og tørret, som beskrevet i foregående eksempler, hvorved vandtes 8,26 g (59,5% af det teoretiske), der havde følgende analyse:
Ionbyttersøjlechromatografi - UV-prøve:
Fraktion I (ikke-omsat nucleosid + adenin): 0,24%
Fraktion II (ønsket 5'-phosphat-produkt): 94,3%
Fraktion III (diphosphater): 2,0 % K. Fischer - Vand: 5,77% ialt = 102,3 %
Det korrigerede udbytte af 9- (β-D-arabinofiiranosyl) -adenin,.
5'-phosphat var derfor 56,1% af det teoretiske.
Claims (8)
1. Fremgangsmåde til fremstilling af esterproduktet 9-(£J-D-arabinofuranosyl)-adenin,5'-phosphat, kendetegnet ved, at 9-(3-D-arabinofuranosyl)-adenin omdannes til et 5'-monophosphoryle-ret mellemprodukt med et phosporyleringsmiddel i nærværelse af tri-alkylphosphat-opløsningsmiddel, reaktionsblandingen underkastes vatr dig hydrolyse, pH-værdien af den vandige hydrolyseblanding justeres tilstrækkeligt opad til at bevirke opdeling i vandig og ikke-vandig væskefase, trialkylphosphat-opløsningsmidlet fjernes fra den vandige blanding, og den resterende vandige blanding opretholdes ved en pH-værdi, ved hvilken esterproduktet er uopløseligt, for at bringe dette esterprodukt til at udfælde fra den vandige blanding, og nævnte esterprodukt isoleres.
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at phosphoryleringsmidlet anvendes i en mængde på 1,15 til 2 mol for hvert mol 9-(β-D-arabinofuranosyl)-adenin.
3. Fremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2, kendetegnet ved, at phosphoryleringsmidlet er phosphoroxychlorid.
4. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1-3, kendetegnet ved, at opløsningsmidlet er triethylphosphat.
5. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1-4, kendetegnet ved, at det molære forhold mellem trialkyl-phosphat og 9-(β-D-arabinofuranosyl)-adenin er ca. 15 til 1.
6. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1-5, kendetegnet ved, at phosphoryleringen gennemføres ved temperaturer mellem -10 og +10°C.
7. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1-6, kendetegnet ved, at den vandige hydrolyseblanding indstilles på en pH-værdi inden for området fra ca. 1 til ca. 2,5.
8. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1-7, kendetegnet ved, at den resterende vandige blanding opretholdes ved en pH-værdi inden for området fra ca. 1,3 til ca. 2,5.
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US73842576A | 1976-11-03 | 1976-11-03 | |
| US73842576 | 1976-11-03 | ||
| US83170377 | 1977-09-12 | ||
| US05/831,703 US4123609A (en) | 1976-11-03 | 1977-09-12 | Process for the production of 9-(β-D-arabinofuranosyl)adenine, 5'-phosphate |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK487177A DK487177A (da) | 1978-05-04 |
| DK151263B true DK151263B (da) | 1987-11-16 |
| DK151263C DK151263C (da) | 1988-05-16 |
Family
ID=27113366
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK487177A DK151263C (da) | 1976-11-03 | 1977-11-02 | Fremgangsmaade til fremstilling af 9-(beta-d-arabinofuranosyl)-adenin, 5'-phosphat |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5356691A (da) |
| AT (1) | AT358187B (da) |
| CA (2) | CA1077030A (da) |
| CH (1) | CH626377A5 (da) |
| DE (1) | DE2749056A1 (da) |
| DK (1) | DK151263C (da) |
| ES (1) | ES463768A1 (da) |
| FR (1) | FR2370057A1 (da) |
| GB (1) | GB1559456A (da) |
| HK (1) | HK3884A (da) |
| NL (1) | NL191060C (da) |
| SE (1) | SE442404B (da) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3413282A (en) * | 1965-03-17 | 1968-11-26 | Ajinomoto Kk | Method of preparing 5'-nucleotides |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR1383572A (fr) * | 1964-02-28 | 1964-12-24 | Necchi Spa | Perfectionnements apportés aux dispositifs automatiques d'arrêt pour machine à coudre |
| BE756704A (fr) * | 1969-09-26 | 1971-03-01 | Parke Davis & Co | Procede de production du 5'-phosphate de 9-(beta-d- arabinofuranosyl) adenine et de ses sels |
-
1977
- 1977-11-02 CA CA290,047A patent/CA1077030A/en not_active Expired
- 1977-11-02 JP JP13216277A patent/JPS5356691A/ja active Pending
- 1977-11-02 AT AT779577A patent/AT358187B/de not_active IP Right Cessation
- 1977-11-02 DK DK487177A patent/DK151263C/da not_active IP Right Cessation
- 1977-11-02 GB GB4564777A patent/GB1559456A/en not_active Expired
- 1977-11-02 NL NL7712102A patent/NL191060C/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-11-02 DE DE19772749056 patent/DE2749056A1/de active Granted
- 1977-11-02 FR FR7732871A patent/FR2370057A1/fr active Granted
- 1977-11-02 CH CH1335777A patent/CH626377A5/fr not_active IP Right Cessation
- 1977-11-02 ES ES463768A patent/ES463768A1/es not_active Expired
- 1977-11-02 SE SE7712368A patent/SE442404B/xx not_active IP Right Cessation
-
1979
- 1979-12-18 CA CA342,182A patent/CA1088927A/en not_active Expired
-
1984
- 1984-01-12 HK HK3884A patent/HK3884A/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3413282A (en) * | 1965-03-17 | 1968-11-26 | Ajinomoto Kk | Method of preparing 5'-nucleotides |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK151263C (da) | 1988-05-16 |
| DE2749056C2 (da) | 1987-07-16 |
| HK3884A (en) | 1984-01-20 |
| ATA779577A (de) | 1980-01-15 |
| NL191060C (nl) | 1995-01-02 |
| AT358187B (de) | 1980-08-25 |
| NL191060B (nl) | 1994-08-01 |
| CA1077030A (en) | 1980-05-06 |
| SE442404B (sv) | 1985-12-23 |
| ES463768A1 (es) | 1978-06-01 |
| DK487177A (da) | 1978-05-04 |
| FR2370057B1 (da) | 1980-06-13 |
| SE7712368L (sv) | 1978-05-04 |
| JPS5356691A (en) | 1978-05-23 |
| NL7712102A (nl) | 1978-05-08 |
| CA1088927A (en) | 1980-11-04 |
| GB1559456A (en) | 1980-01-16 |
| FR2370057A1 (fr) | 1978-06-02 |
| CH626377A5 (en) | 1981-11-13 |
| DE2749056A1 (de) | 1978-05-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Higgins et al. | Aromatic phosphinic acids and derivatives. I. Diphenylphosphinodithoic acid and its derivatives | |
| WO2013142125A1 (en) | Methods of preparing substituted nucleotide analogs | |
| NO174510B (no) | Anlogifremgangsmaate for fremstilling av terapeutisk aktivt 9-(2- fosfonylmethoxyethyl)-adenin | |
| KR20170026494A (ko) | 치환된 뉴클레오타이드 유사체의 제조 방법 | |
| CS233665B1 (en) | Processing of isomere o-phosphonylmethylderivative of anantiomere racemic vicinal diene | |
| DK149609B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af hydroxyamino-alkan- eller -alkenphosphonsyrederivater eller estere eller salte deraf | |
| US5294608A (en) | Guanidinoalkyl-1,1-bisphosphonic acid derivatives, process for their preparation and their use | |
| US4123609A (en) | Process for the production of 9-(β-D-arabinofuranosyl)adenine, 5'-phosphate | |
| US3448098A (en) | Production of guanylic acid | |
| US8288545B2 (en) | Reactive pyrophosphoric and bisphosphonic acid derivatives and methods of their use | |
| EP0071227B1 (en) | Anti-leukemic beta-glycosyl c-nucleosides | |
| DK151263B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af 9-(beta-d-arabinofuranosyl)-adenin, 5'-phosphat | |
| JPH06184173A (ja) | アスコルビル２−モノホスフェートのカルシウム塩を単離する方法 | |
| NO874759L (no) | Fremgangsmaate til fremstilling av purin-9-yl-alkylenoksymetylfosfonsyrer. | |
| NO141993B (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av 1-(tetrahydro-2-furanyl)-5-fluoruracil | |
| IL25711A (en) | 5,5'-dinucleoside phosphates | |
| JPS63135395A (ja) | リン脂質誘導体及びその製造方法 | |
| DK148961B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af vindesin | |
| KR101703258B1 (ko) | 고순도의 (r)-9-[2-(포스포노메톡시)프로필]아데닌의 제조방법 | |
| Quin et al. | Stereochemistry of the reaction of oxygen nucleophiles with a phosphinous chloride in the 7-phosphanorbornene series | |
| JPH05500375A (ja) | ９―ベータ―ｄ―アラビノフラノシル―２―フルオロアデニン ５’―ホスフェートの製造法 | |
| Inoue et al. | A NEW HEXAGONAL CYCLIC ENOL PHOSPHATE OF 6-8-HYDROXY-PROPIONYLLUMAZINES FROM THE MARINE SWIMMING POLYCHAETE, ODONTOSYLLIS UNDECIMDONTA | |
| Young et al. | Reaction of Lanthanum Oxide with Ammonium Iodide | |
| KR101909570B1 (ko) | 고순도 테노포비어 디소프록실 제조방법 | |
| JPS617287A (ja) | ５‐デオキシ‐ｌ‐アラビノースの製造法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PUP | Patent expired |