DK157732B - Fremgangsmaade til fremstilling af en inaktiveret kombinationsvaccine klar til administrering, aktiv mod newcastle-syge og aegproduktionsfald fremkaldt af adeno-lignende vira - Google Patents
Fremgangsmaade til fremstilling af en inaktiveret kombinationsvaccine klar til administrering, aktiv mod newcastle-syge og aegproduktionsfald fremkaldt af adeno-lignende vira Download PDFInfo
- Publication number
- DK157732B DK157732B DK383079A DK383079A DK157732B DK 157732 B DK157732 B DK 157732B DK 383079 A DK383079 A DK 383079A DK 383079 A DK383079 A DK 383079A DK 157732 B DK157732 B DK 157732B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- virus
- adenol
- inactivated
- medium
- strain
- Prior art date
Links
- 241000700605 Viruses Species 0.000 title claims description 97
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 25
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 15
- 208000010359 Newcastle Disease Diseases 0.000 title claims description 12
- 229940001442 combination vaccine Drugs 0.000 title claims description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 10
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 31
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 27
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 24
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 claims description 23
- 239000003921 oil Substances 0.000 claims description 22
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 claims description 22
- 239000012071 phase Substances 0.000 claims description 20
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 13
- 241000272525 Anas platyrhynchos Species 0.000 claims description 12
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 claims description 10
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims description 10
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 claims description 10
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 7
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 claims description 6
- 244000309466 calf Species 0.000 claims description 6
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 claims description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 6
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 claims description 5
- 238000005096 rolling process Methods 0.000 claims description 5
- ZORQXIQZAOLNGE-UHFFFAOYSA-N 1,1-difluorocyclohexane Chemical compound FC1(F)CCCCC1 ZORQXIQZAOLNGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 241000711404 Avian avulavirus 1 Species 0.000 claims description 4
- 239000000470 constituent Substances 0.000 claims description 4
- 230000002183 duodenal effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000001593 sorbitan monooleate Substances 0.000 claims description 4
- 229940035049 sorbitan monooleate Drugs 0.000 claims description 4
- 235000011069 sorbitan monooleate Nutrition 0.000 claims description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 claims description 4
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 claims description 3
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 3
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 3
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 3
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 3
- 229960003255 natamycin Drugs 0.000 claims description 3
- NCXMLFZGDNKEPB-FFPOYIOWSA-N natamycin Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/C[C@@H](C)OC(=O)/C=C/[C@H]2O[C@@H]2C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 NCXMLFZGDNKEPB-FFPOYIOWSA-N 0.000 claims description 3
- 239000004311 natamycin Substances 0.000 claims description 3
- 235000010298 natamycin Nutrition 0.000 claims description 3
- 229940056360 penicillin g Drugs 0.000 claims description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims description 3
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 2
- 210000004381 amniotic fluid Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 claims description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 2
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 claims description 2
- 230000000937 inactivator Effects 0.000 claims description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 claims description 2
- 238000004264 monolayer culture Methods 0.000 claims description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 claims description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 claims description 2
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims 1
- XONPDZSGENTBNJ-UHFFFAOYSA-N molecular hydrogen;sodium Chemical compound [Na].[H][H] XONPDZSGENTBNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 38
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 11
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 10
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 9
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 9
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 9
- NWGKJDSIEKMTRX-BFWOXRRGSA-N [(2r)-2-[(3r,4s)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]-2-hydroxyethyl] (z)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)C1OC[C@H](O)[C@H]1O NWGKJDSIEKMTRX-BFWOXRRGSA-N 0.000 description 8
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 7
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 7
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 6
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 5
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N beta-propiolactone Chemical compound O=C1CCO1 VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 4
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 4
- 229960000380 propiolactone Drugs 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 4
- 210000001691 amnion Anatomy 0.000 description 3
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 3
- -1 ester ethers Chemical class 0.000 description 3
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 3
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 239000012984 antibiotic solution Substances 0.000 description 2
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 230000017448 oviposition Effects 0.000 description 2
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 2
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 2
- 210000000605 viral structure Anatomy 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241000606790 Haemophilus Species 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 241000711450 Infectious bronchitis virus Species 0.000 description 1
- 241000238367 Mya arenaria Species 0.000 description 1
- 208000003926 Myelitis Diseases 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 208000018569 Respiratory Tract disease Diseases 0.000 description 1
- LUXUAZKGQZPOBZ-SAXJAHGMSA-N [(3S,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl] (Z)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O LUXUAZKGQZPOBZ-SAXJAHGMSA-N 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 1
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 1
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940024546 aluminum hydroxide gel Drugs 0.000 description 1
- SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K aluminum;trihydroxide;hydrate Chemical compound O.[OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010773 plant oil Substances 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 206010039083 rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004906 thiomersal Drugs 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/155—Paramyxoviridae, e.g. parainfluenza virus
- A61K39/17—Newcastle disease virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/235—Adenoviridae
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5252—Virus inactivated (killed)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
- A61K2039/552—Veterinary vaccine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55566—Emulsions, e.g. Freund's adjuvant, MF59
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/70—Multivalent vaccine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/10011—Adenoviridae
- C12N2710/10111—Atadenovirus, e.g. ovine adenovirus D
- C12N2710/10134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/18011—Paramyxoviridae
- C12N2760/18111—Avulavirus, e.g. Newcastle disease virus
- C12N2760/18134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S424/00—Drug, bio-affecting and body treating compositions
- Y10S424/816—Viral vaccine for avian species, e.g. poultry or other birds
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Description
DK 157732 B
Opfindelsen angår en fremgangsmåde til fremstilling af en inaktiveret kombinationsvaccine klar til administrering, aktiv mod Newcastle-syge og ægproduktionsfald fremkaldt af adeno-lignende vira.
5 Newcastle-syge (forkortes ND), der er en af de vigtigste luftvejssygdomme hos fjerkræ, er forårsaget af en virus og kan medføre stor dødelighed hos fjerkræ af alle aldre.
Der er udviklet adskillige vacciner mod ND, og det 10 har vist sig mest hensigtsmæssigt at administrere disse vacciner i deres inaktiverede form, da denne form giver en høj grad af sikkerhed. Endvidere kan anvendelse af en levende vaccine i visse tilfælde medføre, at den inoku-lerede virus spredes fra det vaccinerede fjerkræ til 15 fjerkræ, der er modtageligt for infektioner, eller som ikke er immunt.
Selvom der er udviklet relativt sikre og godt immuniserende levende ND-vacciner, som det f.eks. fremgår af britisk patentbeskrivelse nr. 1.510.100, er der sta-20 dig et behov for inaktiverede ND-vacciner.
Da luftvejssygdomme hos fjerkræ ofte er forårsaget af mere end én infektionskilde, er der udviklet kombinationsvacciner, f.eks. som beskrevet i USA-patentskrift nr. 2.798.835, og som består af en kombination af en 25 vaccine mod infektiøs bronchitis og en ND-vaccine, idet begge komponenter er baseret på levende virus.
Endvidere omhandler offentliggjort hollandsk patentansøgning hr. 71.17.873 (fremlagt under nummeret 157.209) en fremgangsmåde til fremstilling af en kombi-30 nationsvaccine mod luftvejssygdomme hos fjerkræ, som er kendetegnet ved en kombination af en død vaccine mod infektiøs coryza, opnået ved dyrkning af en stamme af Haemophilus gallinarium i et naturligt næringsmedium og påfølgende inaktivering af bakterien, med en død vaccine 35 fra en virus, som fremkalder infektiøs bronchitis, og en død ND-vaccine.
Det bemærkes, at adskillige litteratursteder, f. eks. Avian Dis, 7 (1963) side 106-122, Am.J.Vet.Res. 17
DK 157732B
2 ____ (1956) side 294 og 298, Avian Dis. 11 (1967) side 399- 406 og Virology 33 (1967 side 598-608, angiver at aktiviteten af hver af komponenterne kan svækkes eller kan mistes helt ved blanding af levende vira som følge af gen-5 sidig hæmning.
En forbindelse mellem tilstedeværelse af adeno-lig-nende virus (i det følgende betegnet ALV) og et pludseligt fald i æglægningen og/eller en øget produktion af æg med bløde skaller og/eller af æg uden skaller, der er 10 iagttaget stadigt hyppigere i de sidste år, specielt hos avlsdyr og hos høns af racer med middel æglægning, er angivet i Avian Pathology 5 (1976) side 261-272. I litteraturen betegnes sådanne symptomer i visse tilfælde "egg drop syndrome".
15 I Chemical Abstract, vol. 89 (1978), 103639g an tages det, at en virus, som er isoleret fra dyr med "egg-drop syndrome" formentlig en adeno-virus.
Avian Pathology 6 (1977) side 405-413 omhandler også en forbindelse, som er iagttaget mellem 20 udviklingen af antistoffer mod en hemagglutiniserende virus, betegnet 127 virus, og de i økonomisk henseende meget uheldige symptomer, der er beskrevet ovenfor. Avian Pathology 7 (1978) side 35-47 bekræfter den antagede forbindelse mellem tilstedeværelse af en adeno-lignende 25 virus og det ovenfor beskrevne pludselige fald i produktionen. Endvidere er beskrevet adskillige karakteristiske egenskaber for den pågældende type virus, f.eks. den karakteristiske agglutination af hønse-erythrocyter og den manglende evne af antisera til at kunne neutralise-30 res i de kendte adeno-virus-typer.
I luxembourgsk patentbeskrivelse nr. 79.154 omhandles en fremgangsmåde til fremstilling af en vaccine mod "egg drop syndrome" ud fra en ALV karakteriseret ved en specifik hemagglutination og antisera-reaktion. I beskri-35 velsen og eksemplerne er denne virus betegnet EDS-76 og BC-14. Denne vaccine fremstilles ved at dyrke den hidtil ukendte virus i en vævskultur, fortrinsvis i en vævskultur stammende fra fugle, som kyllingefoster-fibroblaster 3
DK 157732B
og fosterleverceller eller fosternyreceller eller i embryonale andeæg.
Fra Avian Pathology 5 (1976) side 262, andet afsnit, fra Avian Pathology 6 (1977) side 406 og fra luxero-5 bourgsk patentbeskrivelse nr. 79.154, side 1, linie 7-11 fremgår det, at fald i ægproduktionen kan forårsages af Newcastle-syge, infektiøs bronchitis, avian- og cefalo-myelitis, fuglekoppe-virus og kombinationer deraf.
Derfor vil man af praktiske grunde ofte vaccinere 10 fjerkræ samtidigt eller med korte tidsintervaller med to eller flere vacciner mod ovennævnte almindeligt forekommende virus-sygdomme. Specielt vil fjerkræ blive vaccineret samtidig mod ND og det produktionstab, der forårsages af ALV. Ved den hidtil sædvanligt anvendte frem-15 gangsmåde til en sådan samtidig administrering blandede man standardvolumener af de enkelte anvendelsesklare vacciner, og der blev administreret en vaccinedosis, som blev sammensat på stedet. Denne doses bestod derfor af praktisk taget det dobbelte volumen sammenlignet med vo-20 lumenet af de separate administrerede vacciner, samtidig med at koncentrationen af virus deri blev fortyndet.
Endvidere kan man næppe være sikker på at opnå en præcis sammenblanding, da der kan opstå problemer som følge af fremmed infektiøst stof.
25 I denne forbindelse skal det imidlertid bemærkes, at der vil opstå et stort antal problemer i forbindelse med fremstilling af kombinerede vacciner, således som dette er forklaret f.eks. i US patentskrift nr. 3 876 763.
I dette patentskrift, som vedrører en kombineret 30 vandig vaccine, som indeholder dræbt Newcastle-sygevirus og dræbt infektiøs bronchitis-virus og dræbt Hemophilus galinarum sammen med et hjælpemiddel, der kan være en aluminiumhydroxidgel, en aluminiumphosphatgel eller alun, anføres det at det må forventes, at en kombination af 35 flere vacciner giver en ugunstig effekt hos fjerkræ, og at en blanding af forskellige vacciner vil have tendens til at miste de enkelte komponenters aktiviteter som følge af interferens eller gensidig hæmning.
4
DK 157732B
Derfor er det ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen tilsigtet at tilvejebringe en kombinationsvaccine, som er klar til anvendelse, og som er effektiv mod ND og det produktionstab, der forårsages af ALV, og som endvi-5 dere opfylder de nugældende strenge krav fra veterinærmyndighederne i de fleste af de relevante lande.
Det har overraskende vist sig, at en kombinationsvaccine, som er klar til administrering, kan fremstilles ved at forene en inaktiveret ND-virusvæske og en inakti-10 veret ALV-væske.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved, at en ND-virusholdig væske med en titer på mindst 9 8 10 ' EIDi-g/ml inaktiveres, eventuelt homogeniseres og sammen med en væske, som indeholder adenolignende virus 2 15 og med en titer på mindst 10 HA enheder/ml, opnået ved dyrkning af en i andeæg eller i andefosterfibroblast passeret virusstamme 127 i andeæg eller i en cellekultur af andefosterfibroblast og forud inaktiveret og eventuelt homogeniseret, idet volumenforholdet mellem den ND-virus-20 holdige væske og den adenolignende virusholdige væske andrager fra 3:4 til 5:1, sættes til en oliefase, der som væsentlige komponenter indeholder i det mindste én af bestanddelene udvalgt blandt lette paraffiniske mineralolier, vegetabilske olier og naphtheniske mineralolier og i 25 det mindste ét emulgeringsmiddel udvalgt blandt estere og etherestere af alkylenoxidadditionsprodukter og/eller he-xavalente alkoholer med fedtsyrer med 10-20 carbonatomer, idet volumenforholdet mellem den vandige fase, som dannes af de to virusvæsker, og oliefasen kan andrage fra 7:13 30 til 3:7, idet der eventuelt tilsættes et konserveringsmiddel til den vandige fase.
Til anvendelse ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen frembringes den inaktiverede ND-virusholdige væske på en måde, der i princippet er kendt i sig selv, f.eks.
35 ved at dyrke den ønskede virus i befrugtede hønseæg, opsamle den dyrkede virus i en væske med en titer sædvanlig for denne art vaccine, inaktivering deraf, suspendering af virus'en i en passende med stødpude forsynet
DK 157732 B
5 opløsning, homogenisering heraf, blanding af denne med en inaktiveret virusvæske på basis af en ALV, fremstillet ved dyrkning af virus'en i befrugtede andeæg eller i en cellekultur af andeceller, opsamling af den dannede virus 5 i en væske med en titer, som er sædvanlig for denne type vacciner, og inaktivering af virusvæsken på i sig selv kendt måde.
Til fremstillingen af den ND-virusholdige væske kan anvendes forskellige svagt virulente eller praktisk ta-10 get avirulente (lentogene eller velogene) ND-virus med gode immuniseringsegenskaber, såsom La Sota eller Hitch-ner virus (lentogen) eller Herts 33/56 (velogen) virus.
Specielle eksempler på egnede virusstammer er stammerne P/76/5, P/76/4 og P/76/3, som kan tilvejebringes 15 fra Institut fur Medizinische Mikrobiologie, Infections und Seuchenmedizin der Ludwig Maximilians Universitåt, Munchen, VR-108, VR-107, VR-109, VR-699 og VR-623, der kan fås fra American Type Culture Collection, Rockville, Maryland, USA, Queensland V 4 stammen, der kan fås fra 20 the Centr. Vet. Labs., Weybridge, Great Brittain eller L/Z 258 P virus, som er deponeret hos Collection d'Institut Pasteur, Paris, under 1091.
Til fremstilling af den inaktiverede ALV-væske-komponent anvendes fortrinsvis en passeret virusstamme 25 127, som er deponeret hos Collection d'Institut Pasteur,
Paris, under nr. 1090, men også andre, med hensyn til antigenicitet omtrent tilsvarende ALV-virus, som forårsager ægproduktionsfald, kan anvendes med godt resultat. Virusstammen 1090 dyrkes fortrinsvis i andeæg.
30 Fremstillingen af den inaktiverede ALV-væske sker fortrinsvis ud fra en virus afledt fra en passeret virusstamme 127 som angivet i de ovenfor citerede artikler i Avian Pathology, men andre ALV-typer, som forårsager formindskelse af ægproduktionen, kan også anvendes med godt 35 resultat.
Til fremstillingen af kombinationsvaccinen inakti- 6
DK 157732 B
veres 150-250 ml af en med stødpude forsynet NDV-holdig væske, den homogeniseres eventuelt, og sættes sammen med 100-200 ml af en med stødpude forsynet ALV-holdig flydende, forud inaktiveret og eventuelt homogeniseret væske 5 til 600-700 ml af en oliefase. De væsentlige bestanddele i denne oliefase er i det mindste én komponent udvalgt fra gruppen bestående af lette paraffiniske mineralolier (FDA-kvalitet), planteolier og naphteniske mineralolier, sammen med et eller flere egnede emulgeringsmidler, så-10 som ikke-ioniske overfladeaktive forbindelser afledt fra alkylenoxid og/eller hexavalente alkoholer og/eller højere naturlige fedtsyrer (C10-C20), f.eks. estre og ester-ethere. Eksemgier derpå er mannidmonooleat ("Span'®80, "Arlacel" 80®, "Arlacel" A® ) ogpolyoxyethylen (20)-15 sorbitan monooleat (f.eks. ,,Tween,'S'80) .
Volumenforholdet mellem den med stødpude forsynede ND-virusholdige væske og den med stødpude forsynede ALV-holdige væske kan variere fra 3:4 til 5:1 og andrager fortrinsvis 3:2.
20 Volumenforholdet mellem den vandige fase, der ud gøres af de to virusvæsker, og oliefasen andrager fortrinsvis 7:13.
Det har vist sig, at den vandige fase må sættes til oliefasen under kraftig omrøring og/eller homogeni-25 sering for at opnå den ønskede stabile og tyndtflydende emulsion.
Oliefasen indeholder 2-20 vægtprocent (baseret på vægten af oliefasen) af et emulgeringsmiddel, fortrins-vis2-15 vægtprocent, "Arlacel" A ® eller "Arlacel" 30 80® eller "Span" ® 80 og o,2-4% af "Tween" ® 80. Komponenterne i oliefasen er fortrinsvis opvarmet separat til mindst 110°C i en autoklav eller er sterilfiltreret som blanding.
Inaktiveringen af de to udgangsvirusvæsker anvendt 35 som komponenter kan ske med sædvanlige inaktivatorer, f. eks. ved hjælp af β-propiolacton, eventuelt kombineret med en stabilisator, eller med formaldehyd. Fortrinsvis tilsættes β-propiolacton i en koncentration på 0,05 til 7
DK 157732B
0,25 vægtprocent (beregnet på vægten af den vandige fase) til en med stødpude forsynet ND-virusholdig væske, og væsken inkuberes ved ca. 37°C i 1-2 timer, fortrinsvis i 90 minutter, mens den med stødpude forsynede ALV-5 væske inaktiveres med formaldehyd og fortrinsvis ved ca.
20°C i ca. 20 timer og anvendelse af formaldehydkoncentration på 0,02-0,5 vægtprocent. Om nødvendigt homogeniseres virusvæskerne derpå på sædvanlig måde. Et konserveringsmiddel såsom thiomersal eller formalin i pufret 10 opløsning kan derpå eventuelt sættes til den vandige fase.
For at opnå en kombinationsvaccine, som giver den ønskede titer efter administrering, må der anvendes en 9 8 ND-virusholdig udgangsopløsning med en titer på 10 ' EID 15 (Egg Infectious dose) 50/ml til 10^'^ EID 50/ml og for- 1 o trinsvis > 10 EID 50/ml, og en ALV-væske med en aktivi- 2 tet på i det mindste 10 HA (Haemagglutination) enheder 3 og fortrinsvis 10 HA enheder.
Det vil være klart, at de fordelagtige egenskaber 20 af den foreslåede kombinerede virusvaccine ikke kunne forudsiges af fagmanden, da der kunne fremkomme adskillige uønskede reaktioner, som denne ikke kunne udelukke. Således kunne aktiviteterne af den ene eller af begge viruskomponenter i den færdige vaccine blive svækket til 25 et uønsket niveau som følge af uønskede gensidige reaktioner mellem komponenterne i virusvæskerne eller ved reaktioner mellem disse væskekomponenter og et af de tilførte hjælpekemikalier. F.eks. ville fagmanden ikke kunne udelukke, at den tilsatte β-propiolacton ville inakti-30 vere en af viruskomponenterne for kraftigt som følge af indvirkning i for lang tid, samtidig med at en sådan tid ville være nødvendig til inaktivering af den anden komponent .
Anvendelsen af kombinationsvaccinen fremstillet 35 ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen er fordelagtig i forhold til de kendte vacciner, 8
DK 157732 B
der fremstilles ved at blande vacciner på stedet, idet der kun kræves et mindre volumen (f.eks. 0,5 cm i ste-det for 1 cm ), således at der fremkommer mindre lokal irritation. Endvidere bliver den mængde af fremmede ke-5 mikalier, som administreres, mindre. Yderligere undgår man de ovennævnte problemer, som kan fremkomme ved blanding og indførelse af fremmed infektiøst stof.
De således fremstillede vacciner administreres sædvanligvis til fugle, der er 10-20 uger gamle, før æglæg-10 ningen begynder.
Ved en foretrukken udførelsesform for fremgangsmåden ifølge opfindelsen dannes en monolagskultur i en rullende flaske af andefoster-fibroblaster ved at suspendere udgangscellerne i et kulturmedium, som består af 15 i det mindste 70-90 dele Eagle's medium og eventuelt 5-15 dele kalve-serum, en 2-4%'s natriumhydrogencarbonat-opløsning og 1-5 dele af en opløsning eller en suspension af et eller flere antibiotica, såsom penicillin G, streptomycin eller natamycin, og kulturvæsken separeres, 20 når cellekulturen er næsten lukket. Cellekulturen inficeres med virus-suspension, inkuberes ved 37°C i 0,5-2 timer for at opnå tilknytning af virus'en, og der tilsættes, med henblik på opretholdelse af mediets bestanddele, Eagle's medium med 2-10% kalve-serum, 2-10 dele 25 tryptose-phosphat-næringsvæske (30 g/1), 10-20 dele bovin amnion fluid ( BAF) og de ovenfor nævnte additiver, og det virusholdige medium og celler høstes 0,5-2 døgn efter CPE-fremkomsten (CPE = Cytopatic effect).
Cellekulturen inokuleres med en ALV-suspension med £ 30 en aktivitet > 30 x 10 TCID^ pr. rullende dyrknings-
5U
flaske (TCID = Tissue Culture Infections Dose). I denne forbindelse har det vist sig, at cellesuspensionskulturer ikke var egnede til den ovenfor beskrevne fremgangsmåde.
Ganske vist beskriver luxembourgsk patentbeskri-35 velse nr. 79.154 alment fremstilling af vacciner mod "egg drop syndrome", men den her foreslåede foretrukne fremstillingsmåde i industriel målestok for disse vaccinevæsker med acceptabel høj titer er ikke på nogen måde 9
DK 157732B
beskrevet eller foreslået.
I denne forbindelse skal det bemærkes, at det side 2, linie 28-30 i nævnte luxembourgske patentbeskrivelse klart angives, at virus'en bl.a. kan dyrkes på kyllinge-5 foster-fibroblaster. Imidlertid har det vist sig, at en sådan fremgangsmåde ikke fører til de resultater, der er ønskede af økonomiske grunde. Side 6, linie 29-35 angiver, at en kultur af embryonale kyllingelever-celler anvendes, hvilket imidlertid ikke fører til de ønskede, af 10 økonomiske grunde nødvendige resultater, da dyrkning i industriel målestok af embryonale leverceller stadig betragtes som meget vanskelig og derfor er en kostbar produktionsmetode .
Opfindelsen illustreres nærmere ved hjælp af føl-15 gende eksempler.
Eksempel 1 a) Dyrkning af adeno-lignende virus (passeret stamme 127).
I rullende dyrkningsflasker af fabrikatet Bellco 20 frembringes cellekulturer DEF (Duck Embryo Fibroblasts) ud fra andeæg, som udvikles i 12-13 døgn i Eagle 10% kalveserum-medium, indeholdende 0,22 vægtprocent NaHCO^ og 2 volumenprocent af en antibiotica-opløsning indeholdende penicillin G, streptocycin og natamycin.
25 Mediet suges fra, når cellekulturerne er næsten lukkede. Derpå inokuleres kulturerne med en suspension af den passerede virus 127-stamme, inkuberes ved 37°C i 1 time og fyldes op med Eagle's vedligeholdelsesmedium, indeholdende 5% kalveserum, 10 volumenprocent tryptose-30 phosphat-næringsvæske (30 g/1), 10 volumenprocent bovin amnion-væske, 0,22 vægtprocent NaHCO^ og 2 volumenprocent af ovennævnte antibiotica-opløsning.
Det ALV-holdige medium og cellerne høstes 1 døgn efter CPE fremkomst, og cellerne næsten løsner sig fra 35 glasvæggen. Virus-suspensionen fryses ved -20°C og gemmes til vaccineproduktion. HA-titeren og TCID5Q af denne suspension blev bestemt.
10
DK 157732B
) Dyrkning af ND-virus.
SPF-æg, som var udruget i 11 døgn, blev inokuleret med L/Z 258 P virus. Kulturen blev inkuberet ved 37°C i 72 timer, og AAF (Amnion Allantoic Fluid) blev høstet.
5 Denne indeholdt på dette tidspunkt ca. 10^ EID^Q/ml. Virus-suspensionen blev frosset ved -20°C eller lavere og opbevaredes til vaccineproduktion. b2> SPF-æg blev udruget i 11 døgn og inokuleret med Herts 33/66 pode-virus. Efter inkubering ved 37°C i 24-10 48 timer blev AAF høstet, og dette indeholdt ca. 10^ EID^ø/ml. Virus-suspensionen fryses ved -20°C eller lavere og opbevares til vaccineproduktion.
c) Behandling af virus-suspensionerne.
De frosne virus-suspensioner optøs og inaktiveres 15 med 0,05-0,25% β-propiolacton i et vandbad ved 37°C i 90 minutter. Suspensionerne henstilles natten over ved +4°C. Inaktiveringen følges ved at iagttage dannelsen af CPE på DEF eller CEF (Chicken Embryo Fibroblasts), efterfulgt af en hemabsorptionsprøve. Endvidere inkuberes forud 20 udrugede SPF-hønseæg med den inaktiverede virus-væske og kontrolleres derpå.
Virus-suspensionerne homogeniseres med en "Ultra Turrax" homogenisator. Om ønsket fortyndes suspensionen med PBS + 0,3% formalin, afhængigt af ΕΙϋ,-φ af AAF og HA-25 titeren af suspensionen af adeno-lignende virus. Derpå blandes med ND-virus-AAF og suspensionen af adeno-lignen-de virus i forhold på 6:4 og anvendes til emulsionsfremstilling.
d) Fremstilling af emulsionen.
30 Virus-suspensionerne blandes med oliefasen i et forhold på 6,5 dele olie til 3,5 dele virusholdig væske, og blandingen emulgeres således, at den gennemsnitlige dråbestørrelse af den vandige fase bliver 0,05-0,5μ, f.eks. ved indsprøjtning af virus-suspensionen i oliefa-35 sen under samtidig homogenisering med en "Ultra Turrax"-homogenisator.
Oliefasen har følgende sammensætning: "Marcol”® 52 (hvid paraffinisk
. DK 157732B
11
Esso-olie) 93,6 volumenprocent "Arlacel"® A eller "Arlacel" 80® eller "Span" 80 (mannid monooleat) 6,0 " "Tween" ^80 (polyoxyethylen-20-5 sorbitan monooleat) 0,4 "
Oliefasens komponenter opvarmes hver for sig til 110°C i en autoklav, eller de sterilfiltreres som en blanding.
Der opnås en stabil emulsion, hvilket kontrolleres 10 ved: 1.) direkte pipettering efter emulgeringen af emulsionsdråber på den vandige overflade, hvorved dråberne ikke spreder sig ud, men forbliver intakte, og 2) henstand ved 37°C i 4 uger, hvorved der ikke udskil-15 les en vandig fase.
Den sluttelige koncentration af de således fremstillede emulsioner er 21% ND-virusholdig med stødpude forsynet væske og 14% ALV 127-holdig med stødpude forsynet væske.
20 Således opnået vaccine anvendes i en dosering på 0,5 ml pr. dyr intramusculært i bryst- eller lårmuskler eller subcutant i nakken. Otte dage efter vaccinationen kan iagttages hemagglutinations-hæmmende antistoffer.
25 Eksempel 2
Der gås frem som i Eksempel 1 med følgende afvigelser: a) I stedet for at fremstille ALV som angivet i afsnit a) i Eksempel 1, fremstilles en ALV-holdig væske ved in-30 okulering af andeæg, der forud var udruget i 9 døgn, med den passerede 127-virusstamme. Efter 7 døgns inkubering ved 37°C blev AAF (amnion allantoic fluid) høstet. Denne havde en HA-titer på ca. 1:1024. Virus-suspensionen blev derpå frosset ved -20°C og opbevaret til vaccinefremstil-35 ling.
b) Efter behandling af NDV-suspensionen som beskrevet under c) i Eksempel 1, og inaktivering af ALV-suspensio-nen med 0,02-0,5% formaldehyd i 20 timer ved 22°C blev 12
DK 1S7732B
ND-virus- cg ALV-væsketæ blandet i forhold på 4:1 og anvendt til fremstilling af emulsionen som beskrevet under d) i Eksempel 1.
5 Eksempel 3 a) En ALV-holdig væske fremstilles efter det tilsvarende trin i Eksempel 2.
b) En NDrvirusholdig væske fremstilles efter det tilsvarende trin i Eksempel 1.
10 c) Behandlingen af ND-virus-suspæsicnaiudføres på lignende måde som i Eksempel 1, og behandlingen af ALV-suspensio-nen udføres som i Eksempel 2.
De behandlede NDV-AAF og ALV-AAF blandes derpå i forholdet 5:1.
15 d) De sammenblandede virus-suspensioner sættes til og blandes med en oliefase i forholdet 6,,5 dele oliefase: 3,5 dele virusholdig væske, og der fremstilles en emulsion ved at lede blandingen gennem en colloid-mølle.
OMefasen har følgende sammensætning: 20 "Marcel·"'«' 52 91,4 vægtprocent "Arlacel" A© eller "Arlacel"®80 eller "Span" R 80 8,0 "Tween"®80 0,6 25 Eksempel 4
En ALV-holdig væske og en ND. stilles efter de tilsvarende trin i Eksempel 1. Efter behandling af virus-suspensionerne som i c) i Eksempel 1 blandes ND-virusholdig AAF og den ALV-holdige væske i et 30 forhold på 4:3, og der fremstilles en emulsion på samme måde under d) i Eksempel 1. Imidlertid blandes oliefasen og de forenede virusholdige væsker nu i et forhold på 6:4.
Den anvendte oliefase har samme sammensætning som i Eksempel 1 under d).
35 13
DK 157732 B
Eksempel 5
Kombinationsvaccinen, der blev fremstillet ifølge Eksempel 4, er blevet afprøvet på følgende måde.
Ikke tidligere vaccinerede SPF-høns, med en alder 5 på 8 uger, vaccineres med kombinationsvaccinen. Den fundne HAI (hemagglutinations-hæmning)-titer samt antallet af HAI-enheder i sera fra de vaccinerede dyr afviger ikke væsentligt fra de antistof-niveauer, som findes hos dyr, der er vaccinerede med de tilsvarende enkelte vac-10 ciner med en lignende sammensætning og under de samme betingelser.
På tegningen vises de kurver, der fås således ved at afsætte de fundne HAI-enheder og HAI-niveauer udtrykt på formen 2X i en logaritmisk skala, medens tiden er af-15 sat langs abscissen.
Hvad angår ND-virus-HAI-enhederne blev der fundet væsentligt større værdier hos dyr, som forud var vaccineret med levende ND-virus-vaccine (således som det sædvanligt sker i praksis).
16 0 20 På sådanne dyr kan konstateres f.eks. ca. 10 ' - 17 0 10 ' ND-virus-HAI-enheder i perioden fra 4 til 8 uger efter vaccinationen med den kombinerede ND-virus-ALV-vac-cine.
25 30 35
Claims (13)
1. Fremgangsmåde til fremstilling af en inakti-veret kombinationsvaccine klar til administrering, aktiv mod Newcastle-syge (ND) og ægproduktionsfald fremkaldt 5 af adeno-lignende vira, kendetegnet ved, at 9 8 en ND*- virusholdig væske med en titer på mindst 10 ' EID5Q/ml inaktiveres, eventuelt homogeniseres og sammen med en væske, son indeholder adenolignende virus og med en 2 titer på mindst 10 HA enheder/ml, opnået ved dyrkning 10 af en i andeæg eller i andefosterfibroblast passeret virusstamme 127 i andeæg eller i en cellekultur af andefo-sterfibroblast og forud inaktiveret og eventuelt homogeniseret, idet volumenforholdet mellem den ND-virus-holdige væske og den adenolignende virusholdige væske 15 andrager fra 3:4 til 5:1, sættes til en oliefase, der som væsentlige komponenter indeholder i det mindste én af bestanddelene udvalgt blandt lette paraffiniske mineralolier, vegetabilske olier og naphtheniske mineralolier og i det mindste ét emulgeringsmiddel udvalgt 20 blandt estere og etherestere af alkylenoxidadditionsprodukter og/eller hexavalente alkoholer med fedtsyrer med 10-20 carbonatomer, idet volumenforholdet mellem den vandige fase, som dannes af de to virusvæsker, og oliefasen, kan andrage fra 7:13 til 3:7, idet der eventuelt til-25 sættes et konserveringsmiddel til den vandige fase.
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegne t ved, at volumenforholdet mellem den med stødpude forsynede ND-virusholdige væske og den med stødpude forsynede adenolignende virusholdige væske andrager 3:2.
3. Fremgangsmåde ifølge krav 1,kendeteg- net ved, at man som adenolignende virus anvender en passeret virusstamme 127, deponeret under 1090 i Collection d*Institut Pasteur, Paris.
4. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendete g-35 n e t ved, at man anvender en ND-virusstamme L/Z 258 P, deponeret under 1091 hos Collection d1Institut Pasteur, Paris. DK 157732B
5. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at oliefasen indeholder 2-20 vægt% af et emulgeringsmiddel, fortrinsvis 2-15 vægt% dianhydroman-nit-monooleat eller sorbitanmonooleat og 0,2-4 vægt% po- 5 lyoxyethylen-20-sorbitanmonooleat.
6. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at man anvender formaldehyd som inaktivator for væskekomponenten, som indeholder adenolignende virus.
7. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendeteg net ved, at der gås ud fra en ND-virusholdig væske med en titer, andragende fra 109'8 EIDc»/ml til 1010'5 EID™/ ml.
8. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendete g-15 n e t ved, at der gås ud fra en ND-virusholdig væske med en titer >1010 EID50/ml.
9. Fremgangsmåde ifølge krav ^kendetegnet ved, at man dyrker den adenolignende virus i en kultur af andefosterfibroblastceller som monolag i en rullende 20 flaske eller støttet til faste, indifferente bærere.
10 TCIDj-q pr. rullende dyrkningsflaske.
10. Fremgangsmåde ifølge krav 9, kendetegnet ved, at monolagscellekulturen dannes ved at suspendere udgangscellerne i et kulturmedium bestående af mindst 70-90 dele Eagle's medium, hvortil, om ønsket, 25 er sat 5-15 dele kalveserum, 2-4 vægt% natriumhydrogen-carbonatopløsning og 1-5 dele af en opløsning eller suspension af et eller flere antibiotika, såsom penicillin G, streptomycin og natamycin, kulturmediet fraskilles, når cellekulturen er næsten lukket, inokuleres med vi-30 russuspensionen, inkuberes ved 37°C i 0,5-2 timer til fæstning af virussen, og der tilsættes vedligeholdelsesmedium, bestående af i det mindste Eagle's medium med 2-10% kalveserum, 2-10 dele tryptose-phosphat-nærings-væske (30 g/1), 10-20 dele bovinamnionvæske, og de øvri-35 ge ovennævnte additiver, hvorpå det virusholdige medium og cellerne høstes 0,5-2 døgn efter fremkomst af CPE.
11. Fremgangsmåde ifølge krav 10, kende- DK 157732 B tegnet ved, at cellekulturen inokuleres med en suspension af adenolignende virus med en aktivitet 30 x g
12. Passeret adenolignende virusstamme 127 til 5 anvendelse ved fremgangsmåden ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det er den stamme, der er deponeret under nr. 1090 hos Collection d'Institut Pasteur, Paris.
13. Newcastle -sygevirusstamme L/Z 258 P, til anvendelse ved fremgangsmåden ifølge krav 1, kende- 10 tegnet ved, at det er den stamme, der er deponeret under 1091 hos Collection d'Institut Pasteur, Paris.
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NL7809364 | 1978-09-14 | ||
| NL7809364 | 1978-09-14 | ||
| NL7903300 | 1979-04-26 | ||
| NL7903300 | 1979-04-26 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK383079A DK383079A (da) | 1980-03-15 |
| DK157732B true DK157732B (da) | 1990-02-12 |
| DK157732C DK157732C (da) | 1990-07-09 |
Family
ID=26645447
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK383079A DK157732C (da) | 1978-09-14 | 1979-09-13 | Fremgangsmaade til fremstilling af en inaktiveret kombinationsvaccine klar til administrering, aktiv mod newcastle-syge og aegproduktionsfald fremkaldt af adeno-lignende vira |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4537768A (da) |
| EP (1) | EP0009277B1 (da) |
| DE (1) | DE2966914D1 (da) |
| DK (1) | DK157732C (da) |
| ES (2) | ES484187A1 (da) |
| FR (1) | FR2435949A1 (da) |
| GR (1) | GR70272B (da) |
| IE (1) | IE48482B1 (da) |
| LU (1) | LU81687A1 (da) |
| PT (1) | PT70156A (da) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NL7812359A (nl) * | 1978-12-20 | 1980-06-24 | Gist Brocades Nv | Vaccins tegen door reo virus veroorzaakte ziektever- schijnselen en werkwijze voor het bereiden van deze vaccins. |
| SU826584A1 (ru) * | 1979-10-29 | 1982-11-07 | Всесоюзный государственный научно-контрольный институт ветеринарных препаратов | Вакцина против ньюкаслской болезни птиц,способ ее изготовлени и способ профилактики ньюкаслской болезни птиц |
| US5084271B1 (en) * | 1984-09-11 | 1997-08-05 | Univ Melbourne | Vaccine for equine herpesvirus |
| US4613501A (en) * | 1984-12-21 | 1986-09-23 | New York Blood Center, Inc. | Inactivation of viruses in labile blood derivatives |
| ES2060740T3 (es) * | 1988-07-18 | 1994-12-01 | Duphar Int Res | Vacunas de virus vivos para la enfermedad de newcastle. |
| FR2706665B1 (fr) * | 1993-06-11 | 1995-09-08 | Fis | Dispositif pour la fixation d'un boîtier d'affichage électronique. |
| RU2167673C1 (ru) * | 2000-09-04 | 2001-05-27 | Всероссийский научно-исследовательский институт защиты животных | Набор для определения антител к вирусу синдрома снижения яйценоскости-76 кур |
Family Cites Families (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NL292949A (da) * | ||||
| US3083142A (en) * | 1958-02-27 | 1963-03-26 | Glaxo Group Ltd | Improved swine erysipelas vaccine |
| US3060094A (en) * | 1959-04-07 | 1962-10-23 | Ray M Dutcher | Preparation of virus vaccines |
| US3149036A (en) * | 1961-10-16 | 1964-09-15 | Merck & Co Inc | Adjuvant vaccine with aluminum monostearate, mannide monooleate, vegetable oil, and an aqueous phase immunolgical agent |
| US3399263A (en) * | 1965-04-12 | 1968-08-27 | American Cyanamid Co | Stable adjuvant emulsion compositions comprising the hydrated reaction products of a methallic cation and a fatty acid |
| US3678149A (en) * | 1970-01-26 | 1972-07-18 | Samuel J Prigal | Method of enhancing the action of a medicament |
| NL7012832A (da) * | 1970-08-29 | 1972-03-02 | ||
| US3876763A (en) * | 1970-12-29 | 1975-04-08 | Shionogi & Co | Infectious coryza infectious bronchitis and newcastle disease vaccines and production thereof |
| US3906092A (en) * | 1971-11-26 | 1975-09-16 | Merck & Co Inc | Stimulation of antibody response |
| JPS529727B2 (da) * | 1971-12-29 | 1977-03-18 | ||
| JPS506714A (da) * | 1973-05-31 | 1975-01-23 | ||
| US3983228A (en) * | 1973-08-28 | 1976-09-28 | Merck & Co., Inc. | Water-in-oil adjuvant composition |
| US4069313A (en) * | 1974-11-19 | 1978-01-17 | Merck & Co., Inc. | Water-in-oil adjuvant composition |
| US4073743A (en) * | 1975-04-17 | 1978-02-14 | Merck & Co., Inc. | Process for preparing an emulsion |
| JPS529727A (en) * | 1975-07-11 | 1977-01-25 | Toyota Motor Corp | Carburettor |
| GB1590448A (en) * | 1977-03-04 | 1981-06-03 | Akzo Nv | Vaccine and its preparations |
-
1979
- 1979-09-05 EP EP79200490A patent/EP0009277B1/en not_active Expired
- 1979-09-05 DE DE7979200490T patent/DE2966914D1/de not_active Expired
- 1979-09-10 PT PT70156A patent/PT70156A/pt unknown
- 1979-09-11 GR GR60010A patent/GR70272B/el unknown
- 1979-09-13 DK DK383079A patent/DK157732C/da not_active IP Right Cessation
- 1979-09-13 IE IE1745/79A patent/IE48482B1/en unknown
- 1979-09-14 FR FR7923026A patent/FR2435949A1/fr active Granted
- 1979-09-14 LU LU81687A patent/LU81687A1/fr unknown
- 1979-09-14 ES ES484187A patent/ES484187A1/es not_active Expired
- 1979-10-17 ES ES485105A patent/ES485105A1/es not_active Expired
-
1982
- 1982-03-11 US US06/356,952 patent/US4537768A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE2966914D1 (en) | 1984-05-24 |
| IE791745L (en) | 1980-03-14 |
| FR2435949A1 (fr) | 1980-04-11 |
| PT70156A (en) | 1979-10-01 |
| US4537768A (en) | 1985-08-27 |
| EP0009277A1 (en) | 1980-04-02 |
| DK157732C (da) | 1990-07-09 |
| IE48482B1 (en) | 1985-02-06 |
| ES485105A1 (es) | 1980-06-16 |
| DK383079A (da) | 1980-03-15 |
| GR70272B (da) | 1982-09-03 |
| EP0009277B1 (en) | 1984-04-18 |
| LU81687A1 (fr) | 1981-04-17 |
| FR2435949B1 (da) | 1984-05-18 |
| ES484187A1 (es) | 1980-04-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4481188A (en) | Vaccines | |
| US4302444A (en) | Vaccines for immunizing egg-laying birds against Egg Drop disease, preparation of said vaccines, and method of use of said vaccines | |
| AU659490B2 (en) | Chicken anaemia agent vaccine | |
| US4505892A (en) | Infectious bronchitis vaccine for poultry | |
| HU223734B1 (hu) | Javított inaktivált vakcinák | |
| US4357320A (en) | Infectious bronchitis vaccine for poultry | |
| DK157732B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af en inaktiveret kombinationsvaccine klar til administrering, aktiv mod newcastle-syge og aegproduktionsfald fremkaldt af adeno-lignende vira | |
| US6159472A (en) | Intradermal Avian immunization with inactivated vaccines | |
| EP0013449B1 (en) | Vaccine against diseases caused by reo viruses, combined vaccine with newcastle disease virus, process for preparing them and reo virus strain used for their preparation | |
| US4500638A (en) | Infectious bronchitis virus strain | |
| WO1980002505A1 (en) | Combined in activated vaccine,ready for administration and process for the preparation of such vaccine,active against egg production drop caused by adeno like viruses and against diseases caused by reo viruses | |
| US4515777A (en) | Vaccines | |
| DK170923B1 (da) | Vaccine mod infektiøst fuglebronkitisvirus, anvendelse af et inaktiveret infektiøst fuglebronkitisvirus til fremstilling heraf samt vaccinesæt | |
| JPS6244528B2 (da) | ||
| USRE31830E (en) | Infectious bronchitis vaccine for poultry | |
| JPS6220964B2 (da) | ||
| USRE34013E (en) | Infectious bronchitis vaccine for poultry | |
| USRE32423E (en) | Infectious bronchitis virus strain | |
| NL7906696A (nl) | Kant en klaar, gecombineerd vaccin en werkwijze voor het bereiden van dit gecombineerd vaccin tegen pseudovogelpest en door adeno achtige virussen veroorzaakte eiproduktiedalingen. | |
| CN121550411A (zh) | 一种用于预防鸡疾病的四联灭活疫苗 | |
| WO2024172784A1 (en) | A novel vaccine for prophylaxis of bovine viral diarrhea virus infection | |
| NL7903299A (nl) | Vaccins tegen door reo virus veroorzaakte ziekte- verschijnselen en werkwijze voor het bereiden van deze vaccins. | |
| MXPA97007402A (en) | Inactivated vaccines improved | |
| NL8005083A (nl) | Infectieuze bronchitis vaccins voor pluimvee en werkwijze voor het bereiden van dergelijke vaccins. |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PBP | Patent lapsed |