DK165197B - Fremgangsmaade til bestemmelse af mimotoper - Google Patents

Fremgangsmaade til bestemmelse af mimotoper Download PDF

Info

Publication number
DK165197B
DK165197B DK624986A DK624986A DK165197B DK 165197 B DK165197 B DK 165197B DK 624986 A DK624986 A DK 624986A DK 624986 A DK624986 A DK 624986A DK 165197 B DK165197 B DK 165197B
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
catamers
monomers
catamer
monomer
group
Prior art date
Application number
DK624986A
Other languages
English (en)
Other versions
DK624986D0 (da
DK624986A (da
DK165197C (da
Inventor
Hendrik Mario Geysen
Original Assignee
Coselco Mimotopes Pty Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from PCT/AU1986/000110 external-priority patent/WO1986006487A1/en
Application filed by Coselco Mimotopes Pty Ltd filed Critical Coselco Mimotopes Pty Ltd
Publication of DK624986D0 publication Critical patent/DK624986D0/da
Publication of DK624986A publication Critical patent/DK624986A/da
Publication of DK165197B publication Critical patent/DK165197B/da
Application granted granted Critical
Publication of DK165197C publication Critical patent/DK165197C/da

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6878—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids in epitope analysis

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Bioinformatics & Computational Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Diaphragms For Electromechanical Transducers (AREA)
  • Measuring Pulse, Heart Rate, Blood Pressure Or Blood Flow (AREA)
  • Soft Magnetic Materials (AREA)
  • Control Of Eletrric Generators (AREA)
  • Exchange Systems With Centralized Control (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
  • Mechanical Coupling Of Light Guides (AREA)
  • Table Devices Or Equipment (AREA)
  • Preparing Plates And Mask In Photomechanical Process (AREA)
  • Management, Administration, Business Operations System, And Electronic Commerce (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Investigating Or Analyzing Materials By The Use Of Electric Means (AREA)

Description

DK 165197 B
Opfindelsen angår en fremgangsmåde til påvisning eller bestemmelse af en sekvens af monomere molekyler, som svarer til ligandmolekylet for en bestemt receptor. Den således bestemte sekvens af monomere molekyler er mimotopen (defineret nedenfor) af den særlige ligand.
5 Den mimotop, som bestemmes ifølge den foreliggende fremgangsmåde, har ikke nødvendigvis noget tydeligt eller direkte forhold til det naturlige ligandmolekyle, men vil besidde dets evne til at reagere med receptoren, og faktisk kan den således bestemte mimotop modificeres til at inkorporere specifikke eller yderligere egenskaber i 10 reaktionen med receptoren. En sådan mimotop vil derpå kunne anvendes til at erstatte den naturlige ligand ved behandling eller forebyggelse af en bestemt sygdom, eller den kan anvendes til at formidle en bestemt biologisk virkning.
De nedenfor anførte betegnelser, der anvendes i nærværende 15 beskrivelse, har følgende betydninger: receptor: et molekyle eller molekyl kompleks, der vil bindes specifikt til dets bestemte ligandmolekyle. Det er de receptorer, som ved binding med deres bestemte 20 ligand(er) formidler en biologisk funktion, der har størst interesse. Eksempler på receptorer indbefatter, men er ikke begrænset til, den almindelige klasse af receptorer, der er associeret med cellers overflademembran, og indbefatter f.eks. de immunologisk 25 vigtige receptorer på B-celler, T-celler, makrofager og lignende. Et andet eksempel er receptorer for acetylcholin på nerveceller, der bevirker at et nerve-signal sendes i neuronens længde, når receptormolekylet reagerer med dets ligand, acetylcholin.
30 epitop: Den specifikke overflade på et antigenmolekyle, som tegnes af det område, der vekselvirker med den underklasse af receptorer, der er kendt som antistoffer.
35 catamer: et polymert molekyle, der har en nøjagtig fastlagt li neær sekvens, og som dannes ved kondensation af små molekyler. Bemærk, at denne betegnelse omfatter molekyler, til hvilke der anvendes forskellige typer af 2
DK 165197 B
kondensationsreaktioner til forening af de små molekyler. Et tal, der er sat foran ordet "catamer", angiver at catameren dannes ved kondensation af det anførte antal af små molekyler, f.eks. betegner 5 8-catamer, at catameren er sammensat af otte små molekyler. Eksempler på catamerer omfatter et hvilket som helst givet peptid og et hvilket som helst givet oligo-saccharid.
10 monomer: et molekyle fra gruppen af små molekyler, der kan kondenseres sammen til dannelse af en catamer. Gruppen af monomere omfatter, men er ikke begrænset til, f.eks. gruppen af almindelige L-aminosyrer, gruppen af D-aminosyrer, gruppen af syntetiske 15 aminosyrer, gruppen af nukleotider og gruppen af pentoser og hexoser.
peptid: en catamer, i hvilken de små molekyler er alpha- aminosyrer, som er bundet sammen ved peptidbindin-20 ger. I forbindelse med nærværende beskrivelse må det forstås, at aminosyrerne kan være den L-optiske isomer eller den D-optiske isomer.
mimotop: catamer, som i mindst én af sine konformationer har 25 et overfladeområde med den ækvivalente molekyltopo- logi til den bindingsoverflade af det ligandmolekyle, hvoraf den er en efterligning. I forbindelse med immunologiske receptorer efterligner mimotopen antigenets epitop.
30 komplementær: betegner afpasning af de reagerede overflader på et ligandmolekyle og dets receptor til hinanden. Derfor kan receptoren og dens ligand beskrives som komplementære, og ydermere er kontaktoverfladernes 35 karakteristika komplementære til hinanden.
paratop: Det forbindende sted på et antistof, der er komple mentært til en bestemt epitop.
DK 165197B
3 ligandmolekyle: molekyle, der binder til en bestemt receptor, og, når den er bundet til denne, formidler den biologiske virkning, der er forbundet med denne bestemte 5 receptor.
Eksempler på de receptorer, der kan undersøges ifølge den foreliggende fremgangsmåde, indbefatter, men er ikke begrænset til: 10 hormon - receptorer: f.eks. receptorer for insulin og væksthormon. Bestem melse af mimotoperne af de ligander, der binder til disse receptorer, kan føre til udvikling af en oral erstatning af de daglige injektioner, som diabetikere 15 må tage for at mildne symptomerne ved sukkersyge, og i det andet tilfælde en erstatning for det sjældne human væksthormon, der kun kan opnås fra afdøde eller rekombinant DNA teknologi. Andre eksempler er de vasokonstriktive hormon receptorer. Bestemmelse af 20 mimotopen af den ligand, der binder til disse receptorer, kan føre til udvikling af medikamenter til kontrol af blodtryk.
opiatrecep- 25 torer: bestemmelse af mimotoper af de ligander, der binder til opiatreceptorer i hjernen, kan føre til udvikling af mindre vanedannende erstatninger for morfin og lignende medikamenter.
mikroor-30 ganisme- receptorer: bestemmelse af mimotoper af de ligander, der binder til en receptor, såsom specifikke transportproteiner eller enzymer, der er væsentlige for overlevelse af mikroorganismer, kan føre til en ny gruppe antibioti-35 ka. Af særlig værdi vil være antibiotika mod proto zoer og de bakterier, der er resistente over for de medikamenter, der er i almindelig anvendelse.
enzymer: f.eks. de enzymer, der er ansvarlige for spaltning af 4
DK 165197 B
nervetransmittere. Bestemmelse af de mimotoper, der er i stand til at modulere virkningen- af de enzymer, der spalter de forskellige nervetransmittere, kan føre til udvikling af medikamenter, der kan anvendes ved 5 behandling af sygdomme i forbindelse med nerve transmission.
antistoffer: f.eks. ligandbindestedet på det antistofmolekyle, der forbinder sig med epitopen på det antigen, der ér af 10 interesse. Bestemmelse af en mimotop til epitopen kan føre til udvikling af vacciner, hvor immunogenet er baseret på en eller flere mimotoper, eller diagnostiske midler eller forbindelser, der er anvendelige ved den terapeutiske behandling af autoimmunsygdomme.
15
Eksempler på ligander, der kan undersøges ved den følgende fremgangsmåde, indbefatter, men er ikke begrænset til: toxin er 20 og gifte: f.eks. bindingsstedet på det toxinmolekyle, der reagerer med en bestemt receptor i legemet og giver det bestemte symptom(er) på intoxikation. Bestemmelse af mimotoper til ligandens bindingssted kan føre til udvikling af medikamenter, som kan anvendes til'be-25 handling af forgiftninger, der forårsages af slanger eller andre giftige dyr, uden bivirkninger af hetero-logantivenenumet.
virus- og 30 andre mikro-organismekap- selmolekyler: f.eks. det forbindende sted på et viruskapselmole- kyle, der reagerer med en særlig receptor på cellemembranen i legemet, og som giver virusen lov til at 35 invadere og således inficere den bestemte celle.
Bestemmelse af mimotoper til dette forbindende sted kan føre til udvikling af medikamenter, der specifikt forhindrer intracellulær invasion af virus og således forhindrer deres replikation.
5
DK 165197 B
Det er et primært formål ved den foreliggende opfindelse at påvise eller bestemme den ene eller flere korte sekvenser af monomerer (catamerer), der selektivt binder sig til en bestemt receptor til fremkaldelse af dets biologiske virkning. Disse catamerer vil være 5 ligandens mimotoper. Denne viden er uvurderlig ved fremstilling af meget specifikke diagnostiske og terapuetiske midler.
Den mest almindelige gruppe af små molekyler, som kan kondenseres sammen til dannelse af en catamer, er gruppen af alpha-aminosyrer. Andre molekyler, som er forenelige med en anden valgt 10 kemi, kan også anvendes. F.eks. de catamerer, der er dannet ud fra den specificerede sekvenskondensation af nukleotider eller saccharider. En anden gruppe af små molekyler vil være de ikke-genetisk kodede aminosyrer, såsom beta-aminosyrer, som med fordel kan anvendes til tilføjelse af en ekstra binding på specificerede 15 positioner i catameren.
Fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse er baseret på den idé, at en given receptor vil reagere specifikt med en catamer, som er mimotop for den ligand, mod hvilken receptoren er rettet. Den bygger endvidere på moderne immunologiske metoder til 20 bestemmelse af reaktionen mellem en receptor og dens ligand, når begge er til stede.
I beskrivelsen til AU patentansøgning nr. 45339/85 foreslås det at fremstille mimotoper, der er baseret på en generel længde på ca.
8 monomerer. Det fremgår nu, at den foretrukne fremgangsmåde til 25 fremstilling af mimotoper er ud fra kortere catamerer (to eller tre monomer lange), der er frembragt for alle kombinationer af monomerer fra enten: i) to monomergrupper, der kan være identiske, eller ii) tre monomergrupper, hvoraf den midterste monomer i 30 catameren udvælges fra en gruppe af specielt udvalgte monomerer, som giver kendte rumlige forhold for de to andre monomerer, og at de resterende monomerer i catameren stammer fra to monomergrupper, som kan være identiske.
35 Ydermere har det vist sig, at følsomheden ved bestemmelse af receptorernes binding er nedsat i nogle tilfælde, hvor monomeren syntetiseres i catamerpræparationer, som beskrevet i beskrivelsen til patentansøgning nr. 45339/85.
Det har nu vist sig, at reaktionen let bestemmes mellem en re- 6
DK 165197 B
ceptor og korte mimotoper. Når disse korte mimotoper kondenseres sammen, binder de til receptoren med enten en større affinitet eller med en større specificitet for denne receptor. Denne reaktion kan detekteres, selv nir den korte mimotop, der præsenteres for recep-5 toren, er si lille som to monomermolekyler lang. Ved bestemmelse af den optimale korte mimotop pi hvert trin og derpå afprøvning af yderligere variationer kan den endelige struktur af en stærkt bindende mimotop bestemmes.
Ifølge den foreliggende opfindelse tilvejebringes der en frem-10 gangsmide til påvisning eller bestemmelse af den monomersekvens, der er topografisk ækvivalent til den ligand, som er komplementær til en bestemt receptor, som har interesse, og hidtil kendt viden angående identitet, struktur og sekvens af receptoren eller dens ligand er irrelevant. Fremgangsmåden omfatter: 15 1. at en flerhed af catamerer syntetiseres, hvor hver catamer har den almene formel: D2-°1 20 hvor D.j repræsenterer en angivet monomer fra en første mono mergruppe, og Dg repræsenterer en angivet monomer, der udvælges fra en anden monomergruppe, der kan være den samme som eller forskellig fra den første monomergruppe. Flerheden af catamerer omfatter catamerer, hvori hver angivet 25 monomer varieres systematisk til at indeholde enheder fra de respektive monomergrupper, 2. at hver catamer bringes i kontakt med den receptor, der har interesse, og 30 3. at tilstedeværelsen eller mangel på binding mellem hver catamer og denne receptor påvises eller bestemmes.
Fremgangsmåden kan også omfatte: a. at en yderligere flerhed af catamerer syntetiseres, hvor hver catamer har den generelle formel:
Dg-Dg-D^ eller Dg-D^-Dg 35
DK 165197B
7 hvor D1 og Dg betegner det samme, som anført ovenfor, og fortrinsvis repræsenterer en kombination af monomerer, der svarer til en catamer, der binder til receptoren, og Dg betegner en angiven monomer, der udvælges fra en tredje gruppe af 5 monomerer, der kan være den samme som eller forskellig fra enten den første eller den anden monomergruppe, og b. at trinnene 2 og 3 udføres med den yderligere flerhed af cata-merer.
10
Procedurerne ifølge trin a. og b. kan gentages for yderligere at "udvide" catamererne ved systematisk at tilføje yderligere monomerer til catamererne og afprøves på samme måde, som i trin b.
I et andet vigtigt aspekt kan fremgangsmåden ifølge den fore-15 liggende opfindelse omfatte: A. at en flerhed af catamerer syntetiseres, hvor hver yderligere catamer har den almene formel: 20 D2-Sp-D1 hvor D.j og D2 betegner det samme, som anført ovenfor, og Sp betegner et afstandsmolekyle (engelsk: spacer molecule), der kan modificere den relative orientering af monomererne D^ og 25 Dg, og B. at trinnene 2 og 3 ovenfor udføres med flerheden af yderligere catamerer.
30 Afstandsmolekylet "Sp", som beskrevet ovenfor, kan også ind føres systematisk i alle mulige positioner af de "udvidede'1 catamerer, der er anført ovenfor, og afprøves på samme mide som i trin B. ovenfor.
I endnu et andet aspekt kan den foreliggende fremgangsmåde 35 yderligere omfatte trin til systematisk erstatning af monomerer i en hvilken som helst af de catamerer, der er anført ovenfor, med deres optiske isomerer, enten individuelt eller i monomerkombinationer, og igen udføre trinnene 2 og 3, som beskrevet ovenfor.
I et yderligere aspekt kan fremgangsmåden yderligere omfatte 8
DK 165197 B
trin til systematisk erstatning af monomerer i en hvilken som helst af de catamerer, der er anført ovenfor, og som binder til den receptor, der har interesse, enten individuelt eller i monomerkombinationer, med andre monomerer, der udvælges fra den respektive monomer-5 gruppe (er) og igen udføre trinnene 2 og 3, som anført ovenfor.
Det fremgår, at fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse ikke kræver forudgående information om ligandens natur, og i særdeleshed kræver den ingen forkendskab om den monomersekvens, der udgør liganden. I virkeligheden er det ikke nødvendigt for ud-10 øvelse af nærværende opfindelse at kende oprindelsen eller identiteten af den ligand, mod hvilken receptoren er rettet. Ydermere gør opfindelsen ingen antagelser om naturen af liganden af den bestemte receptor. Fremgangsmåden vil identificere mimotoper af usammenhængende såvel som sammenhængende ligander. Det vil, på 15 grund af selve naturen af fremgangsmåden ifølge opfindelsen, forstås at mimotoperne kan eller kan ikke bestå af enheder fra den samme gruppe af monomerer, som udgør den ligand, hvoraf den .er en efterligning.
Den flerhed af catamerer, der kræves syntetiseret ved udøvelse 20 af nærværende opfindelse, kan fremstilles ved en hvilken som helst af de kendte fremgangsmåder til catamersyntese. De foretrukne fremgangsmåder, når monomererne er aminosyrer, er at anvende fastfasemetoden, der er beskrevet i beskrivelsen til AU patentbeskrivelse nr. 25429/84, hvor hver catamer syntetiseres på en poly-25 ethy lenbærer.
Det følgende er en detaljeret beskrivelse af en udførelsesform af den foreliggende opfindelse, når den anvendes til bestemmelse af en mimotop til en ligand, der er i stand til at binde til en receptor, når denne receptor er et antistof. I denne forbindelse omtales liganden 30 almindeligvis som epitopen til antistoffet. Fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse udføres fortrinsvis ved screening af en flerhed af syntetiserede catamerer mod et antistof, som har interesse. Antistoffet vil ideelt være et monoklonalt antistof, som kan fremstilles ved en hver af de sædvanlige fremgangsmåder. Polyklonalt antiserum 35 fra mennesker og dyr kan anvendes, hvis en monoklonal antistofkilde med de ønskede egenskaber ikke står til rådighed, dog kan analyser af de resulterende data kompliceres, idet de observerede reaktioner kan hidrøre fra mere end ét monoklonalt antistof. Ved anvendelse af polyklonalt antiserum, kan det være nødvendigt at reducere anti-
DK 165197B
9 stoffets uensartethed ved anvendelse af metoder, der er velkendt for fagfolk inden for området, f.eks. iso-elektrisk fokusering, HPLC-baseret chromatografi eller affinitetschromatografi.
Almindelige indikationer tyder pi, at en epitop kan efterlignes 5 af en catamer, der almindeligvis er ca. 6 monomerer lang, når monomererne stammer fra gruppen af alpha-aminosyrer. Det må dog forstås, at den foreliggende opfindelse ikke er begrænset til sekvenser, der er dannet af seks monomerer. 6-catamerens evne til at være mimotop for epitopen er ikke kritisk afhængig af en hver position, 10 der har en særlig monomer. Det har vist sig, at visse positioner i de fleste mimotoper ikke er begrænset til en enkel bestemt monomer med hensyn til binding med receptoren.
A. Syntese af en flerhed af catamerer.
15 Den foretrukne måde, at udøve nærværende opfindelse på, er som anført ovenfor, at syntetisere catamererne på en fast bærer. I denne udførselsform vil flerheden af catamerer alle have den generelle formel: 20 Y-Dg'-D^-Lk-Cfast bærer), hvor Lk betegner et linkermolekyle, der tilvejebringer en passende endegruppe til kondensering af monomererne til den faste bærer. D^ og Dg repræsenterer angivne positioner, som er besat af monomerer, 25 der er udvalgt fra kendte monomergrupper, men som forandres systematisk mellem catamererne. Det bør bemærkes, at den gruppe af monomerer, der anvendes til den angivne D^-position, ikke behøver at være den samme gruppe af monomerer, der anvendes i den angivne Dg-position. Y i den generelle formel betegner endegruppen 30 af catameren, og kan være, men er ikke begrænset til, f.eks. et hydrogenatom eller en acetylgruppe. Y kan også betegne et andet molekyle, der er koblet til catameren til bevaring af særlige egenskaber i de molekylære omgivelser af en peptidbinding ved den angivne aminoterminalposition.
35 Hvis i er antallet af elementer i gruppen af monomerer, der forbindes i Depositionen, og j er antallet af elementer i gruppen af monomerer, der forbindes i Dg-positionen, så vil der blive syntetiseret et totalt antal forskellige catamerer på i·].
I den foreliggende udførselsform forberedes bærerstavene så-
DK 165197B
10 ledes, at monomererne kan kobles til dem ved kobling af et passende linkermolekyle.
Ved kobling til D^-positionen vil hver stav blive behandlet med en reaktionsblanding, der kun indeholder en enkel monomer, sisom 5 en beskyttende aminosyre eller lignende. I denne position vil hver af i monomererne blive koblet til j stave. Ved kobling til Dg-positionen behandles hver stav igen med en reaktionsblanding, der kun indeholder en enkel monomer, såsom en beskyttende aminosyre eller lignende. Hver af de j stave, som har en særlig monomer i D^-10 positionen, vil få en forskellig monomer koblet til D2“positionen. På denne måde vil en hver kombination af elementerne fra gruppen (grupperne) af monomerer forekomme i de i*j stave.
Derpå kobles den ønskede endegruppe Y under anvendelse af en passende kemi.
15 Efter syntese af flerheden af catamerer fjernes eventuelle sidekædebeskyttende grupper fra catamererne ved anvendelse af passende metoder, og de stavkoblede catamerer vaskes.
En foretrukken udførelselsform for opfindelsen er at syntetisere mere end ét sæt flerheder af catamerer til hjælp ved analysen af 20 data. Såvel som syntetisering af catamerer med den generelle formel Y-Dg-D^-Lk-Cfast bærer) som beskrevet ovenfor, kan der således yderligere fremstilles 25 grupper af catamerer med den generelle formel Y-D2”Sp~D.j-Lk-(fast bærer) hvor Sp betegner et afstandsmolekyle, der kan begrænse den 30 relative orientering af monomererne ved de angivne positioner til en særlig geometrisk konfiguration(er). Afstandsmolekylet kan også velovervejet udvælges til at tillade en større fleksibilitet af den relative geometriske konfiguration mellem monomererne i de angivne positioner, og D2. Det skal bemærkes, at medlemmerne af 35 gruppen af afstandsmolekyler kan fremstilles ved kondensation af mere end én monomer. Eksempler på afstandsmolekyler indbefatter, men er ikke begrænset til, glycin (ca. lineær udvidelse), beta-alanin (forøget fleksibilitet), prolin (tvungen bøjning), glycyl-prolin (udvidet bøjning, på anden side kendt som mods.at bøjning i proteinstruk- 11
DK 165197 B
turterminologien) og o-aminobenzosyre (en planar bøjning).
Ved at analysere resultaterne fra disse grupper af catamerer kan det foretrukne rumlige forhold mellem monomererne i mimotoperne afledes, som det vil fremgå af de passende eksempler nedenfor.
5 B, Afprøvning af flerheden af catamerer.
Flerheden af catamerer, der fremstilles som i A ovenfor, kontaktes derefter med det særlige antistof, som har interesse. Reaktionen mellem antistoffet og hver catamer kan derefter påvises 10 ved en hvilken som helst af de sædvanlige metoder, f.eks. radio-immunoanalyse (RIA). Den foretrukne fremgangsmåde til påvisning er imidlertid anvendelse af den velkendte ELISA-analyse (engelsk: enzyme-linked immunosorbent assay).
Ved slutningen af hver analyse kan antistofferne fjernes fra 15 catamererne ved f.eks. vask med en opløsning af 8M urinstof, 0,1% 2-mercaptoethanol og 0,1% natriumdodecylsulphat, efterfulgt af adskillige vask i phosphatpufferet saltopløsning. Pi denne måde kan flerheden af catamerer anvendes til afprøvning med mange andre antistoffer.
20 C. Analyse af data
Ved afprøvning af en gruppe af catamerer med antistof er det fundet, at visse catamerer vil fremvise påviselig binding med antistoffet. Disse reagerende catamerer identificerer anvendelige kombi-25 nationer af elementer fra gruppen (grupperne) af monomerer. Disse kombinationer af monomerer er korte mimotoper, der ved forlængelse kan binde til antistoffet med en større affinitet eller ændre specificiteten. Analyse af data lettes meget ved at indbefatte et antal kontrol peptider i syntesen, som hjælper til bestemmelse af væsentlige 30 reaktioner. Yderligere analyser af dataene kan udføres på et antal forskellige måder. Disse indbefatter: 1. at hver af disse reagerende kombinationer af monomerer permu-teres til dannelse af en liste over catamerer, som kan omfatte 35 mimotoper, der binder til paratopen; hver catamer i denne liste kan betragtes som en mulig mimotop; 2. at kandidater fra listen over reagerende monomerkombinationer udtages, og at der yderligere syntetiseres grupper af catamerer, i hvilke den kendte reagerende monomerkombination
DK 165197B
12 holdes konstant, og yderligere monomer tilsættes systematisk ved begge ender; i eksemplet ovenfor vil en egnet gruppe af sådanne catamerer således omfatte catamerer med formlerne 5 Y-D3-A2-A.j-Lk-(fast bærer) og Y-A^-A^-Dg-Lk-Cfast bærer) hvor A^ og A^ betegner den reagerende monomerkombination fra 10 de tidligere resultater, og betegner en ny angiven position, hvor hver af elementerne i monomergruppen varieres systematisk, og 3. at resultaterne fra forskellige grupper af en flerhed af catamerer kombineres, og at resultaterne analyseres for at deducere 15 en enkel monomersekvens eller et lille antal af sådanne sekven ser, som vil binde til det antistof, der har interesse. Analyse af disse data er mulig, idet de reagerende monomerkombinationer nu er kendte, når de ligger ved siden af hinanden, ligesom de reagerende monomerkombi nationer, når der er særlige 20 geometriske konfigurationer mellem dem. På denne måde kan disse data således aflæses til at forudsige mimotopens struktur, når den er bundet til antistoffet; denne fremgangsmåde vil være mest fordelagtig, når det antistof, der anvendes til afprøvning af flerheden af catamerer, er et monoklonalt antistof.
25 Den procedure, der er anført i 2. ovenfor, kan gentages, indtil der ikke opnås nogen yderligere forstærkning af bindingen ved yder ligere forlængelse af mimotopen. Ideelt bør mimotopsekvensen afprøves ved regulær syntese og afprøvning af udskiftningsnet for mimotopen til opnåelse af den optimalt bindende mimotop til yderligere 30 forlængelse, som beskrevet i AU patentbeskrivelse nr. 25428/84.
D. Syntese af udvalgte catamerer.
De udvalgte catamerer kan syntetiseres ved anvendelse af lignende fremgangsmåder som de, der er beskrevet i A. Efter at de 35 udvalgte catamerer er blevet syntetiseret, bringes de til reaktion med det antistof, som har interesse. Det er derefter simpelt at udvælge den catamer, der bindes stærkest til antistoffet.
Binding af mimotopen med antistoffet kan yderligere forstærkes ved at syntetisere en yderligere flerhed af catamerer, der er baseret
DK 165197B
13 på sekvensen af den stærkest bindende mimotop. Denne flerhed af catamerer består af systematisk tilføjelse af afstandsmolekyler (-Sp-) i alle positioner af mimotopen, og hvor det er muligt, systematisk erstatte hver monomer i catameren med dens optiske isomer. Af-5 prøvning af denne gruppe af catamerer med antistoffet vil give uvurderlig information om den relative orientering af monomererne og deres stereokemi, som det kræves for binding til antistoffet.
I de nedenfor anførte eksempler 1, 2, 3 og 4 bestemmes mimotoperne til det antigen, mod hvilket forskellige monoklonale 10 antistoffer er frembragt. Den fastlagte monomergruppe er gruppen af almindelige L-alpha-syrer, med mindre andet er angivet. Linker- -1 molekylet, -Lk-, er 3-amino-N (6-aminohexyl)-propanamid, og endegruppen, Y-, er en acetylrest. I eksempel 5 nedenfor bestemmes mimotopen til en antigenisk determinant af humanchorionisk gonado-15 trophin, der inducerer et monoklonalt antistof. Linkermolekylet, -Lk-, er det samme som det, der anvendes i tidligere eksempler. Endegruppen, Y-, er enten β-θΙβηγΙ-β-βΙθηίη eller β-alanin. Den fastlagte monomergruppe udvides til at indbefatte D-optiske isomerer af almindelige alpha-aminosyrer og adskillige ualmindelige aminosyrer.
20 | eksempel 6 nedenfor fastlægges mimotopen til et receptorsted på viruser. Linkermolekylet, -Lk-, er det samme som i tidligere eksempler. Endegruppen, Y-, er enten β-alanyl-β-alanin eller β-alanin. Den fastlagte monomergruppe udvides, som beskrevet i eksempel 5.
25 Eksempel 1
Der frembringes et monoklonalt antistof mod spermhvalmyoglobin under anvendelse af almindelige fremgangsmåder. Dette monoklonale antistof afprøves mod en catamergruppe med den generelle formel: 30 Y-D2“D^-Lk-(fast bærer)
Tre par af de reagerende monomerer binder til catamererne med næsten samme reaktion og væsentlig højere end andre monomerpar. Sekvenserne er E-F, E-L og E-H..
35 Der syntetiseres en yderligere catamergruppe, der omfatter alle 4-catamerer, der kan fremstilles fra monomergruppen; glutaminsyre (E), phenylalanin (F), histidin (H) og leucin (L). Følgende catamerer viste sig at binde væsentlig højere end de resterende catamerer: 14
DK 165197 B
L-H-E-F
L-H-F-E
F-L-H-E
F-H-L-E
5 H-E-F-L
Denne lille gruppe af korte mimotoper kan nu blive kandidater til yderligere forlængelser.
10 Eksempel 2
Der frembringes et monoklonalt antistof mod spermhvalmyoglobin under anvendelse af almindelige fremgangsmåder. Dette monoklonale antistof afprøves mod en catamergruppe med den generelle formel: 15 Y-Dg-D^-Lk-Cfast bærer)
Tre par af de reagerende monomerer binder til catamererne med næsten samme reaktion og væsentlig højere end andre monomerpar. Sekvenserne er E-F, E-L og E-H.
20 Der syntetiseres yderligere seks catamergrupper under anven delse af parrene E-F, E-L og E-H som udgangspunkter. Under anvendelse af E-F parret som et eksempel har catamererne i hver gruppe den generelle formel: 25 Y-E-F-Lk-(fast bærer), eller Y-E-Sp-F-Lk-(fast bærer), hvor Sp er et afstandsmolekyle fra gruppen af beta-alanin, glybin og L-prolin. Ydermere blev de L-optiske isomerer systematisk erstattet 30 af de D-optiske isomerer af bide glutaminsyre og phenylalanin.
De catamerer, der gav de bedste reaktioner fra hver catamergruppe, var C-glutaminsyre - L-prolin - L-phenylalanin 35 L-glutaminsyre - L-leucin, og D-glutaminsyre - L-prolin - D-histidin.
Disse resultater viser, at monomererne F og H placeres bedre ikke nærliggende E; ydermere placeres E og L bedst nærliggende.
15
DK 165197 B
De optiske isomerer i catamererne, der giver den bedste binding, indicerer en struktur for en stærkt bindende mimotop, som beskrevet nedenfor. Det skal bemærkes, at sperhvalmyoglobinmolekylet har et område, som svarer til den forudsagte mimotop. Tydeligvis bliver 5 denne forudsagte mimotop en kandidat til yderligere forlængelse.
Strukturen nedenfor er en to-dimensionel gengivelse af det rumlige forhold mellem aminosyrerne, F, E, L og H, når de er bundet til et monoklonalt antistof mod spermhvalmyoglobin (se eksempel 2). Det skal bemærkes, at dette kun er en illustration, som 10 ikke må blive fortolket på den måde, at den illustrerede catamer er plan. Ydermere skal de bindinger, der forener F og E samt L og H, forstås som repræsenterende en afstand, der er større end en peptidbinding.
15 j^F
- cs
IV
Når denne struktur sammenlignes med røntgen kry stal log raf i-20 strukturen af myoglobin, er det især af væsentlig interessse at bemærke, at sekvensen -F-L-E-L- findes i positionerne 135 til 138, og at der er to histidinenheder (i position 81 og 82) i umiddelbar nærhed af glutaminsyren i position 136. Dette giver en betragtelig tiltro til den foreslåede struktur af epitopen af det monoklonale 25 antistof.
Eksempel 3
En mimotop til et monoklonalt antiserum, der var frembragt mod mund- og klovsygevirus, blev defineret til sekvensen W-Q-M-G-H-S.
30 Der blev syntetiseret en serie catamerer, hvori en beta-alaninenhed systematisk indførtes mellem monomererne. Sekvensen W-Q-M-p-G-H-S gav en reaktion, der er væsentlig større end basissekvensen, hvor β repræsenterer beta-alanin. Det har yderligere vist sig, at der opnås fremragende binding til antistoffet med sekvenserne: 35
W-Q-M-p-p-H-S
W-Q-M-p-p-p-H-S
hvilket indicerer, at glycin i udgangsmimotopen er et afstandsmole- 16
DK 165197 B
kyle mellem to reagerende elementer, W-Q-M og H-S. Det fremgår siledes tydeligt, at mimotopen er fremstillet af to dele. Ydermere er foreningen af disse dele ikke kritisk for, om mimotopen er i stand til at reagere stærkt med antistoffet.
5 Der syntetiseres en yderligere catamergruppe, hvori den D-optiske isomer systematisk erstatter den L-optiske isomermonomer i udgangsmimotopen. Resultaterne fra afprøvning med antistoffet viser, at ved stærkest binding bør monomererne i hver element have samme optiske isomer, og at der er en præference for, at monomererne i 10 W-Q-M-elementet er de D-optiske isomerer, hvorimod monomererne i elementet H-S bør være L-optiske isomerer. Disse resultater kan forklares til at betyde, at epitopen til antistoffet er fremstillet af to nærliggende anti-parallelle kæder, hvori kæderetningen er M-Q-W og i den anden kæde er H-S. Denne forudsigelse fører til det forslag, 15 at en anden mimotop til det monoklonale antistof vil være:
G-H-S-p-G-W-Q-M
Denne syntetiseres og viser sig at reagere med sammenlignelig 20 binding til antistoffet som den stærkt bindende catamer: W-Q-M-p-G-H-S.
Den måde, hvorpå de to elementer W-Q-M og H-S er forenet, er 25 således irrelevant for evnen til at kombinere med antistoffet si længe, at deres relative positioner forbliver den samme. Den bedste s mimotop som en potentiel immunogen vil være en, hvori disse elementer er forenet fra begge sider for at minimere tilpasningsmobiliteten.
30
Eksempel 4
Et monoklonait antistof (S093-7), der er frembragt mod mund-og klovsygevirus, afprøves med catamerer med den generelle formel: 35 Y-D2-D^-Lk-(fast bærer)
Det viser sig, at dipeptid Q-F reagerer væsentlig stærkere med det monoklonale antistof end med nogen andre dipeptider.
Der syntetiseres yderligere catamergrupper med de generelle 17
DK 165197 B
formler: Y-Q-F-Dg-Lk-(fast bærer) og 5 Y-Dg-Q-F-Lk-(fast bærer) når disse catamergrupper omsættes med antiserum viser det sig, at følgende catamerer reagerer væsentlig bedre med det monoklonale antistof end nogle af de andre: 10
H-Q-F
N-Q-F
G-Q-F
Q-F-Q
15 Q-F-G
Denne lille gruppe af korte mimotoper kan nu blive kandidater til yderligere udvidelser.
20 Eksempel 5
Der frembringes et monoklonalt antistof (S218-4) mod human-chorionisk gonadotrophin under anvendelse af almindelige fremgangsmåder. Dette blev afprøvet med catamerer med den gerede formel: 25 Y1-D2-D1-Lk-(fast bærer) hvor Y^- betegner 8-alanyl-p-alanin. Det viser sig, at dipeptidet i de angivne positioner, som binder stærkest til det monoklonale antistof, er F-A.
30 Der syntetiseres yderligere catamergrupper med de generelle formler: Y2-Dg-Sp-F-A-Lk-(fast bærer) og 35 Y-j-F-A-Sp-Dg-Lk-Cfast bærer) hvor Sp betegner et afstandsmolekyle, som er et element fra gruppen [ingen, β-alanin], og Y^- betegner endegruppen, β-alanyl. Den monomergruppe, der anvendes i den angivne position Dg, udvides til 18
DK 165197 B
at indbefatte både L- og D-optiske isomerer af de almindelige alpha-aminosyrer og de usædvanlige aminosyrer, a-aminosmørsyre, γ-aminosmørsyre, L-norcIeucin, sarcosin, ornithin, L-norvalin, L-homophenylalanin, β-alanin. Når disse catamergrupper omsættes 5 med det monoklonale antistof, viser det sig, at de catamerer, der reagerer stærkest, er: y2-pd-f-a og 10 y2-ad-f-a hvor PD og Ap betegner de D-optiske isomerer af prolin henholdsvis alanin.
Der syntetiseres yderligere catamergrupper med de generelle 15 formler: Y2~D4-Sp-Pp-F-A-Lk-(fast bærer) Yl-PD-F-A-Sp-D4-Lk-(fast bærer) Y2-D4“Sp-Ap-F-A~Lk-(fast bærer) 20 og Y-j-Ao-F-A-Sp-D^Lk-Cfast bærer) hvor den udvidede monomergruppe anvendes i den angivne position D^. Når disse catamergrupper omsættes med det monoklonale antistof, 25 viser det sig, at den catamer, der reagerer stærkest, er: VPd-F-A-Dd hvor Dp betegner den D-optiske isomer af asparaginsyre.
30 Der syntetiseres yderligere catamergrupper med de generelle formler: Y2~Dcj-Sp-Pp-F-A-Dp-Lk-(fast bærer) og 35 Y^-Pp-F-A-Dp-Sp-Dg-Lk-Cfast bærer) hvor den udvidede monomergruppe anvendes i den angivne position Dg. Når disse catamergrupper omsættes med det monoklonale antistof, viser det sig, at den catamer, der reagerer stærkest med antistoffet,
DK 165197 B
19 er:
W^V^D
hvor β betegner β-alanin og er blevet indbefattet i syntesen af 5 catameren som et afstandsmolekyle.
Forudbehandling af det monoklonale antistof med humanchorio-nisk gonadotrophin fjerner fuldstændigt antistoffets evne til at reagere med catameren p-Rp^-Pp-F-A-Dp, hvilket siledes illustrerer mimotopens specificitet.
10
Eksempel 6
Dette eksempel illustrerer anvendelse af opfindelsen til påvisning af en mimotop til en receptor, der ikke er et antigen, imod hvilket et antistof er blevet frembragt. I dette eksempel påvises 15 mimotoper i en receptor, til hvilken en virion binder. I dette tilfælde er afprøvningssystemet til påvisning af binding til catamererne blevet modificeret. I dette eksempel får de syntetiserede catamerer lov til at reagere med influenzaviruspartikler (stamme A-Shearwater/1/72).
Efter reaktion vaskes catamererne for at fjerne ubundne viruspar-20 tikler. Tilstedeværelsen af bundne viruspartikler påvises ved at omsætte med et polyklonalt antistof (S227-1), der er blevet frembragt mod hæmaglutinin fra influenzavirus A/Shearwater/1/72. De antistoffer, der har reageret med den bundne virus, påvises på almindelig måde ved hjælp af ELISA.
25 Der syntetiseres en catamergruppe med den generelle formel: Y-j-Dg-D^-Lk-Cfast bærer) hvor endegruppen Y^- er β-alanyl-β-alanίn. Den monomergruppe, der 30 anvendes i de angivne positioner D^ og Dg, består af D- og L-optiske isomerer af almindelige alpha-aminosyrer. Når catamererne omsættes med en suspension af influenzavirionerstamme A/Shearwater/ 1/72, binder partikler til dipeptiderne ved de anførte positioner:
35 Aq-K
'd"k n-id og md“'d
DK 165197B
20 hvor suffikset "D" betegner den D-optiske isomer af den anførte aminosyre. Efter fjernelse af den bundne virus fra catamererne, omsættes catamererne med polyklonalt antistof S227-1 i samme koncentration som den, der anvendes til at påvise virus, for at sikre at de 5 toppe, der findes, skyldes binding af virus snarere end binding af polyklonalt antistof.
Der syntetiseres yderligere catamergrupper med den generelle formel: 10 Yg-Dg-Sp-Ap-K-Lk-Cfast bærer) Y^Ap-K-Sp-Ds-Lk-Cfast bærer) hvor Y^- betegner β-alaninendegruppen og Sp betegner en bestanddel fra gruppen af afstandsmolekyler, [ingen,β-alanin]. Den mono-15 mergruppe, der anvendes til at angive position D^, er den udvidede gruppe, der er beskrevet i eksempel 5. Når disse catamergrupper omsættes med influenzavirus stamme A/Shearwater/1/72 binder virionerne stærkest til catameren:
2° YrAD-K-KD
Dette eksempel viser, at opfindelsen kan anvendes til bestemmelse af mimotoper pi receptormolekyler og ligander i almindelighed. Udførelse af fremgangsmåden begrænses kun ved evnen til at påvise 25 tilstedeværelse af binding til catamergruppen.
30 35

Claims (5)

21 DK 165197 B
1. Fremgangsmåde til påvisning eller bestemmelse af den monomersekvens, som er topografisk ækvivalent med den ligand, der er komplementær til en særlig receptor, som er af interesse, k e n - 5 detegnet ved, 1. at der syntetiseret en flerhed af catamerer, hvor hver catamer har den generelle formel: d2-d, 10 hvor D.j betegner en designeret monomer, der udvælges fra en første monomergruppe og D^ betegner en designeret monomer, der udvælges fra en anden monomergruppe, som kan være den samme som eller 15 forskellig fra den første monomergruppe, hvilken flerhed af catamerer omfatter catamerer, hvor? hver designeret monomer systematisk varieres til at indeholde enheder fra en respektiv gruppe af monomerer, 2. at hver catamer kontaktes med receptoren, som er af 20 interesse, og 3. at forekomst eller fravær af binding mellem hver catamer og denne receptor påvises eller bestemmes.
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den yderligere omfatter: 25 a. at der syntetiseres en yderligere flerhed af catamerer, hvor hver catamer har den generelle formel: D2~D2"D^, eller D2-D1-D3 30 hvor og D^ betegner det samme, som anført ovenfor i krav 1, og Dg betegner en designeret monomer, som udvælges fra en tredie monomergruppe, der kan være den samme som eller forskellig fra enten den første eller den 35 anden monomergruppe, og b. at trin 2 og 3, som defineret i krav 1, udføres pi denne yderligere flerhed af catamerer.
3. Fremgangsmåde ifølge krav 2, kendetegnet ved, at trin a. og b. gentages med systematisk addition af yderligere 22 DK 165197 B monomerer til catamererne.
4. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1-3, kendetegnet ved, at den yderligere omfatter: a. at der syntetiseres en flerhed af yderligere catamerer, 5 hvor hver yderligere catamer har den generelle formel: D2-Sp-D1 hvor D.j og D2 betegner det samme, som defineret i krav 10 1, og Sp betegner et afstandsmolekyle, der kan ændre den relative orientering af monomererne D1 og D2, og b. at trin 2 og 3, som defineret i krav 1, udføres på denne flerhed af yderligere catamerer.
5. Fremgangsmåde ifølge krav 2 eller 3, kendeteg-15 net ved, at trin a. og b. gentages med systematisk indføring af et afstandsmolekyle, Sp, som defineret i krav 4, i alle mulige positioner af de yderligere flerheder af catamerer, som defineret i krav 2 eller 3.
6. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1-5, 20 kendetegnet ved, at den yderligere omfatter systematisk erstatning af monomererne i enhver af de catamerer, der er refereret til ovenfor, med deres optiske isomerer, enten individuelt eller i monomer kombinationer, og at trin 2 og 3, som defineret i krav 1, igen udføres.
7. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1-6, kendetegnet ved, at den yderligere omfatter systematisk erstatning af monomererne i enhver af de catamerer, der binder med den receptor, som har interesse, enten individuelt eller i monomerkombinationer med andre monomerer, der udvælges fra den (de) 30 respektive gruppe (grupper) af monomerer, og at trin 2 og 3, som defineret i krav 1, igen udføres.
8. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at hver flerhed af catamerer syntetiseres på en fast bærer og har den generelle formel: 35 Y-D2-D.j-Lk-(fast bærer) hvor og D2 betegner det samme, som defineret i krav 1, Lk betegner et linkermolekyle, og Y betegner catamerens endegruppe. DK 165197B 23
9. Fremgangsmåde ifølge krav 4, kendetegnet ved, at hver flerhed af yderligere catamerer syntetiseres på en fast bærer og har den generelle formel:
5 Y-Dg-Sp-D.j-Lk-(fast bærer) hvor D1 og Dg betegner det samme som defineret i krav 1, Sp betegner det samme som defineret i krav 4, og Lk og Y betegner det samme som defineret i krav 8. 10 15 20 25 30 . 35
DK624986A 1985-04-22 1986-12-22 Fremgangsmaade til bestemmelse af mimotoper DK165197C (da)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
AUPH024085 1985-04-22
AUPH024085 1985-04-22
PCT/AU1986/000110 WO1986006487A1 (en) 1985-04-22 1986-04-22 Method for determining mimotopes
AU8600110 1986-04-22

Publications (4)

Publication Number Publication Date
DK624986D0 DK624986D0 (da) 1986-12-22
DK624986A DK624986A (da) 1987-02-22
DK165197B true DK165197B (da) 1992-10-19
DK165197C DK165197C (da) 1993-03-01

Family

ID=3771065

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK624986A DK165197C (da) 1985-04-22 1986-12-22 Fremgangsmaade til bestemmelse af mimotoper

Country Status (10)

Country Link
US (1) US4833092A (da)
EP (1) EP0220245B1 (da)
JP (1) JPS62502568A (da)
AT (1) ATE78097T1 (da)
CA (1) CA1267084A (da)
DE (1) DE3685930T2 (da)
DK (1) DK165197C (da)
MY (1) MY102884A (da)
NO (1) NO168793C (da)
NZ (1) NZ215865A (da)

Families Citing this family (220)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5866363A (en) 1985-08-28 1999-02-02 Pieczenik; George Method and means for sorting and identifying biological information
JP2525798B2 (ja) * 1987-03-12 1996-08-21 第一製薬株式会社 ペプチド誘導体
US5217869A (en) * 1987-10-13 1993-06-08 Terrapin Technologies, Inc. Method to produce immunodiagnostic reagents
US5300425A (en) * 1987-10-13 1994-04-05 Terrapin Technologies, Inc. Method to produce immunodiagnostic reagents
US5200320A (en) * 1987-12-07 1993-04-06 National Jewish Center For Immunology And Respiratory Medicine Method for identifying useful polypeptide vaccines
US5266684A (en) * 1988-05-02 1993-11-30 The Reagents Of The University Of California Peptide mixtures
US5925525A (en) * 1989-06-07 1999-07-20 Affymetrix, Inc. Method of identifying nucleotide differences
US6919211B1 (en) * 1989-06-07 2005-07-19 Affymetrix, Inc. Polypeptide arrays
US6346413B1 (en) 1989-06-07 2002-02-12 Affymetrix, Inc. Polymer arrays
US5143854A (en) 1989-06-07 1992-09-01 Affymax Technologies N.V. Large scale photolithographic solid phase synthesis of polypeptides and receptor binding screening thereof
US5547839A (en) * 1989-06-07 1996-08-20 Affymax Technologies N.V. Sequencing of surface immobilized polymers utilizing microflourescence detection
US5424186A (en) * 1989-06-07 1995-06-13 Affymax Technologies N.V. Very large scale immobilized polymer synthesis
US5800992A (en) 1989-06-07 1998-09-01 Fodor; Stephen P.A. Method of detecting nucleic acids
US6551784B2 (en) 1989-06-07 2003-04-22 Affymetrix Inc Method of comparing nucleic acid sequences
US6406844B1 (en) 1989-06-07 2002-06-18 Affymetrix, Inc. Very large scale immobilized polymer synthesis
US6955915B2 (en) * 1989-06-07 2005-10-18 Affymetrix, Inc. Apparatus comprising polymers
US6416952B1 (en) 1989-06-07 2002-07-09 Affymetrix, Inc. Photolithographic and other means for manufacturing arrays
US5744101A (en) * 1989-06-07 1998-04-28 Affymax Technologies N.V. Photolabile nucleoside protecting groups
US6040138A (en) 1995-09-15 2000-03-21 Affymetrix, Inc. Expression monitoring by hybridization to high density oligonucleotide arrays
US6309822B1 (en) 1989-06-07 2001-10-30 Affymetrix, Inc. Method for comparing copy number of nucleic acid sequences
JP3443119B2 (ja) 1989-08-07 2003-09-02 ペプテック リミテッド 腫瘍壊死因子結合リガンド
US20030225254A1 (en) * 1989-08-07 2003-12-04 Rathjen Deborah Ann Tumour necrosis factor binding ligands
US5959087A (en) * 1989-08-07 1999-09-28 Peptide Technology, Ltd. Tumour necrosis factor binding ligands
US6506558B1 (en) 1990-03-07 2003-01-14 Affymetrix Inc. Very large scale immobilized polymer synthesis
US5543293A (en) * 1990-06-11 1996-08-06 Nexstar Pharmaceuticals, Inc. DNA ligands of thrombin
US6759392B1 (en) * 1990-06-11 2004-07-06 Gilead Sciences, Inc. High affinity RNA ligands of basic fibroblast growth factor
US5707796A (en) * 1990-06-11 1998-01-13 Nexstar Pharmaceuticals, Inc. Method for selecting nucleic acids on the basis of structure
US6177557B1 (en) 1990-06-11 2001-01-23 Nexstar Pharmaceuticals, Inc. High affinity ligands of basic fibroblast growth factor and thrombin
US5503978A (en) * 1990-06-11 1996-04-02 University Research Corporation Method for identification of high affinity DNA ligands of HIV-1 reverse transcriptase
US5723286A (en) * 1990-06-20 1998-03-03 Affymax Technologies N.V. Peptide library and screening systems
US5650489A (en) * 1990-07-02 1997-07-22 The Arizona Board Of Regents Random bio-oligomer library, a method of synthesis thereof, and a method of use thereof
US5476839A (en) * 1990-07-10 1995-12-19 Incyte Pharmaceuticals, Inc. Basophil granule proteins
US6197529B1 (en) 1990-11-21 2001-03-06 Torrey Pines Institute For Molecular Studies Linear substituted oligoalkyleneimine libraries
AU662891B2 (en) * 1990-11-27 1995-09-21 Biogen Idec Ma Inc. Anti CD-4 antibodies blocking HIV-induced syncytia
EP0834575B1 (en) 1990-12-06 2001-11-28 Affymetrix, Inc. (a Delaware Corporation) Identification of nucleic acids in samples
ZA924244B (en) * 1991-06-18 1993-12-10 Lilly Co Eli Rapid synthesis and screening of peptide mimetics
US5698391A (en) * 1991-08-23 1997-12-16 Isis Pharmaceuticals, Inc. Methods for synthetic unrandomization of oligomer fragments
WO1993004204A1 (en) * 1991-08-23 1993-03-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Synthetic unrandomization of oligomer fragments
US5747253A (en) * 1991-08-23 1998-05-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Combinatorial oligomer immunoabsorbant screening assay for transcription factors and other biomolecule binding
US5770358A (en) * 1991-09-18 1998-06-23 Affymax Technologies N.V. Tagged synthetic oligomer libraries
US5639603A (en) * 1991-09-18 1997-06-17 Affymax Technologies N.V. Synthesizing and screening molecular diversity
US6764681B2 (en) * 1991-10-07 2004-07-20 Biogen, Inc. Method of prophylaxis or treatment of antigen presenting cell driven skin conditions using inhibitors of the CD2/LFA-3 interaction
US5733731A (en) * 1991-10-16 1998-03-31 Affymax Technologies N.V. Peptide library and screening method
US5270170A (en) * 1991-10-16 1993-12-14 Affymax Technologies N.V. Peptide library and screening method
US6943034B1 (en) 1991-11-22 2005-09-13 Affymetrix, Inc. Combinatorial strategies for polymer synthesis
US6468740B1 (en) 1992-11-05 2002-10-22 Affymetrix, Inc. Cyclic and substituted immobilized molecular synthesis
US6849462B1 (en) 1991-11-22 2005-02-01 Affymetrix, Inc. Combinatorial strategies for polymer synthesis
CA2124087C (en) * 1991-11-22 2002-10-01 James L. Winkler Combinatorial strategies for polymer synthesis
US5871734A (en) * 1992-01-13 1999-02-16 Biogen, Inc. Treatment for asthma with VLA-4 blocking agents
US5932214A (en) * 1994-08-11 1999-08-03 Biogen, Inc. Treatment for inflammatory bowel disease with VLA-4 blockers
AU675446B2 (en) * 1992-07-27 1997-02-06 Terrapin Technologies, Inc. Sorbent families
US5721099A (en) * 1992-10-01 1998-02-24 Trustees Of Columbia University In The City Of New York Complex combinatorial chemical libraries encoded with tags
US5565324A (en) * 1992-10-01 1996-10-15 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Complex combinatorial chemical libraries encoded with tags
US6503759B1 (en) 1992-10-01 2003-01-07 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Complex combinatorial chemical libraries encoded with tags
ATE161730T1 (de) * 1993-02-09 1998-01-15 Biogen Inc Antikörper zur behandlung von insulinabhängigen diabetes
US5367053A (en) * 1993-05-19 1994-11-22 Houghten Pharmaceuticals, Inc. Opioid peptide inhibitors
US6632613B1 (en) 1993-06-02 2003-10-14 University Of Utah Research Foundation Compositions and kits for fluorescence polarization assay of large molecules
US5480971A (en) * 1993-06-17 1996-01-02 Houghten Pharmaceuticals, Inc. Peralkylated oligopeptide mixtures
US5846731A (en) * 1993-06-17 1998-12-08 Torry Pines Institute For Molecular Studies Peralkylated oligopeptide mixtures
US5380668A (en) * 1993-07-06 1995-01-10 University Of Utah Research Foundation Compounds having the antigenicity of hCG
US6576419B1 (en) 1993-07-23 2003-06-10 University Of Utah Research Foundation Assay procedure using fluorogenic tracers
CN1154640C (zh) * 1993-10-01 2004-06-23 纽约市哥伦比亚大学理事 用标示物编码的多元组合化学库
WO1995010296A1 (en) * 1993-10-12 1995-04-20 Glycomed Incorporated A library of glyco-peptides useful for identification of cell adhesion inhibitors
US5503805A (en) * 1993-11-02 1996-04-02 Affymax Technologies N.V. Apparatus and method for parallel coupling reactions
US6165778A (en) * 1993-11-02 2000-12-26 Affymax Technologies N.V. Reaction vessel agitation apparatus
US6287787B1 (en) 1993-11-24 2001-09-11 Torrey Pines Institute For Molecular Studies Dimeric oligopeptide mixture sets
JPH09511486A (ja) * 1994-01-13 1997-11-18 ザ・トラスティーズ・オブ・コランビア・ユニバーシティー・イン・ザ・シティー・オブ・ニューヨーク 合成レセプター、ライブラリー及びこれらの使用
US5593853A (en) * 1994-02-09 1997-01-14 Martek Corporation Generation and screening of synthetic drug libraries
US6936477B2 (en) * 1994-04-13 2005-08-30 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Complex combinatorial chemical libraries encoded with tags
US5846841A (en) * 1994-05-20 1998-12-08 Selectide Corporation Motif Libraries
US7378236B1 (en) 1994-06-17 2008-05-27 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Method for analyzing gene expression patterns
US7323298B1 (en) 1994-06-17 2008-01-29 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Microarray for determining the relative abundances of polynuceotide sequences
US5582997A (en) * 1994-08-24 1996-12-10 Torrey Pines Institute For Molecular Studies Lysine/leucine polypeptides, mixture sets and libraries thereof
US5645996A (en) * 1994-08-24 1997-07-08 Torrey Pines Institute For Molecular Studies Melittin-related polypeptides, mixture sets and libraries thereof
US5602097A (en) * 1994-09-13 1997-02-11 Ceres Technologies, Inc. Synthetic antibiotics
US5885782A (en) * 1994-09-13 1999-03-23 Nce Pharmaceuticals, Inc. Synthetic antibiotics
US6020312A (en) * 1994-09-13 2000-02-01 Nce Pharmaceuticals, Inc. Synthetic antibiotics
US8236493B2 (en) * 1994-10-21 2012-08-07 Affymetrix, Inc. Methods of enzymatic discrimination enhancement and surface-bound double-stranded DNA
US5747458A (en) * 1995-06-07 1998-05-05 Chiron Corporation Urokinase receptor ligands
US5958792A (en) * 1995-06-07 1999-09-28 Chiron Corporation Combinatorial libraries of substrate-bound cyclic organic compounds
EP0880598A4 (en) 1996-01-23 2005-02-23 Affymetrix Inc RAPID EVALUATION OF NUCLEIC ACID ABUNDANCE DIFFERENCE, WITH A HIGH-DENSITY OLIGONUCLEOTIDE SYSTEM
US6183988B1 (en) 1996-10-02 2001-02-06 The General Hospital Corporation Leukocyte-specific protein and gene, and methods of use thereof
US6096496A (en) 1997-06-19 2000-08-01 Frankel; Robert D. Supports incorporating vertical cavity emitting lasers and tracking apparatus for use in combinatorial synthesis
US6312689B1 (en) 1998-07-23 2001-11-06 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Anti-CCR2 antibodies and methods of use therefor
EE200100123A (et) * 1998-08-31 2002-06-17 Biogen, Incorporated CD2 siduva aine kasutamine ja mäluefektor-T-lümfotsüütide populatsioon
JP2002524529A (ja) 1998-09-14 2002-08-06 ボード オブ リージェンツ， ザ ユニバーシティ オブ テキサス システム インテグリンアンタゴニストを用いて多発性骨髄腫および骨髄腫誘導骨吸収を治療する方法
US6545264B1 (en) 1998-10-30 2003-04-08 Affymetrix, Inc. Systems and methods for high performance scanning
US20030166003A1 (en) * 1999-06-14 2003-09-04 Cochran Andrea G. Structured peptide scaffold for displaying turn libraries on phage
WO2000077194A1 (en) 1999-06-14 2000-12-21 Genentech, Inc. A structured peptide scaffold for displaying turn libraries on phage
NZ519447A (en) 1999-12-16 2004-03-26 Biogen Inc Methods of treating central nervous system ischemic or hemorrhagic injury using anti alpha4 integrin antagonists
US20020169128A1 (en) * 2001-04-09 2002-11-14 Geroge Sigounas Erythropoietin ameliorates chemotherapy-induced toxicity in vivo
EP1930023A3 (en) 2001-04-09 2008-08-06 East Carolina University Erythropoietin ameliorates chemotherapy-induced toxicity in vivo
US6914123B2 (en) * 2001-04-17 2005-07-05 Genentech, Inc. Hairpin peptides with a novel structural motif and methods relating thereto
US20070160576A1 (en) 2001-06-05 2007-07-12 Genentech, Inc. IL-17A/F heterologous polypeptides and therapeutic uses thereof
PT2000545E (pt) 2001-06-20 2011-12-21 Genentech Inc Composições e métodos para o diagnóstico e tratamento do tumor pulmonar
US7803915B2 (en) 2001-06-20 2010-09-28 Genentech, Inc. Antibody compositions for the diagnosis and treatment of tumor
US20050107595A1 (en) * 2001-06-20 2005-05-19 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
US20030013208A1 (en) * 2001-07-13 2003-01-16 Milagen, Inc. Information enhanced antibody arrays
WO2003009740A2 (en) * 2001-07-24 2003-02-06 Biogen Idec Ma Inc. Methods for treating or preventing sclerotic disorders using cd2-binding agents
DE60238143D1 (de) 2001-09-18 2010-12-09 Genentech Inc Zusammensetzungen und verfahren für die diagnose von tumoren
EP1326076A3 (en) * 2001-10-26 2004-01-28 Millenium Pharmaceuticals, Inc. Methods for indentification of ligands or modulators of 2871 receptor, a g-protein coupled receptor
AU2002367318B2 (en) 2002-01-02 2007-07-12 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
US8802618B2 (en) * 2002-03-08 2014-08-12 Board Of Regents, The University Of Texas System Controlled modulation of amino acid side chain length of peptide antigens
JP2005536190A (ja) 2002-04-16 2005-12-02 ジェネンテック・インコーポレーテッド 腫瘍の診断と治療のための組成物と方法
EP2305710A3 (en) 2002-06-03 2013-05-29 Genentech, Inc. Synthetic antibody phage libraries
EP2177626B1 (en) 2002-08-19 2013-12-18 Dart NeuroScience (Cayman) Ltd Screening methods for cognitive enhancers
MXPA05002287A (es) * 2002-08-29 2005-08-18 Genentech Inc 2 polipeptidos similares a achaete-scute y acidos nucleicos de codificacion, y metodos para el diagnostico y tratamiento de tumores.
US6910785B2 (en) * 2003-01-22 2005-06-28 Cooper Technologies Company Industrial luminaire with prismatic refractor
US20040185499A1 (en) * 2003-03-20 2004-09-23 Jolley Michael E. Method of epitope scanning using fluorescence polarization
US8613922B2 (en) 2003-04-24 2013-12-24 The University Of North Carolina At Chapel Hill Methods for inhibiting diabetic retinopathy with an antibody against integrin associated protein (IAP)
DE10329087B4 (de) * 2003-06-27 2014-02-13 Biomedical International R + D Gmbh Antigenhaltige Mikrosphären zur Allergietherapie
EP2784084B2 (en) 2003-07-08 2023-10-04 Novartis Pharma AG Antagonist antibodies to IL-17A/F heterologous polypeptides
US20050095648A1 (en) * 2003-10-30 2005-05-05 Mario Geysen Method for designing linear epitopes and algorithm therefor and polypeptide epitopes
CA2545697C (en) 2003-11-14 2016-12-20 Richard Mulligan Self-cleaving ribozymes and uses thereof
DK2295073T3 (da) 2003-11-17 2014-07-28 Genentech Inc Antistof mod cd22 til behandling af tumor af hæmatopoietisk oprindelse
MXPA06000176A (es) 2003-12-10 2006-06-27 Millennium Pharm Inc Anticuerpos anti-ccr2 humanizados y sus metodos de uso.
WO2005077018A2 (en) * 2004-02-06 2005-08-25 Astellas Us Llc Methods of treating skin disorders
ES2459750T3 (es) 2004-03-02 2014-05-12 Mcgill University Composiciones y métodos para prevenir o tratar una respuesta inflamatoria
MXPA06012744A (es) * 2004-05-04 2007-02-19 Genaissance Pharmaceutical Inc Marcadores de haplotipo y metodos para utilizarlos en la determinacion de la respuesta al tratamiento.
CA2565259A1 (en) * 2004-05-07 2005-12-08 Astellas Us Llc Soluble lfa-3 polypeptide for treating viral disorders
CA2478458A1 (en) * 2004-08-20 2006-02-20 Michael Panzara Treatment of pediatric multiple sclerosis
CA2587597A1 (en) * 2004-11-19 2006-05-26 Biogen Idec Ma Inc. Treatment for multiple sclerosis
ZA200707490B (en) 2005-03-10 2008-12-31 Genentech Inc Methods and compositions for modulatiing vascular integrity
AU2006242154B2 (en) 2005-05-02 2011-11-03 Cold Spring Harbor Laboratory Composition and methods for cancer diagnosis utilizing the mir 17-92 cluster
WO2006132788A2 (en) 2005-06-06 2006-12-14 Genentech, Inc. Transgenic models for different genes and their use for gene characterization
EP1899376A2 (en) 2005-06-16 2008-03-19 The Feinstein Institute for Medical Research Antibodies against hmgb1 and fragments thereof
EP1922410A2 (en) 2005-08-15 2008-05-21 Genentech, Inc. Gene disruptions, compositions and methods relating thereto
US8945573B2 (en) 2005-09-08 2015-02-03 The Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine, Inc. Targeted identification of immunogenic peptides
EP1962584A2 (en) 2005-11-21 2008-09-03 Genentech, Inc. Novel gene disruptions, compositions and methods relating thereto
BRPI0619118A2 (pt) 2005-12-02 2011-09-13 Genentech Inc composições e métodos para o tratamento de doenças e desordens associadas com a sinalização de citocina
EP2050335A1 (en) 2006-02-17 2009-04-22 Genentech, Inc. Gene disruptions, compositions and methods relating thereto
AU2007243946B2 (en) 2006-04-05 2012-11-29 Curis, Inc. Method for using BOC/CDO to modulate hedgehog signaling
CA2649387A1 (en) 2006-04-19 2008-03-27 Genentech, Inc. Novel gene disruptions, compositions and methods relating thereto
WO2007134132A2 (en) * 2006-05-12 2007-11-22 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of bladder and urinary tract tumors
US20080015145A1 (en) * 2006-07-11 2008-01-17 Maria Gyongyossy-Issa Mimotope receptors and inhibitors for platelet-platelet and platelet-endothelium interactions
AU2007284651B2 (en) 2006-08-09 2014-03-20 Institute For Systems Biology Organ-specific proteins and methods of their use
ES2372217T3 (es) 2006-09-12 2012-01-17 Genentech, Inc. Procedimientos y composiciones para el diagnóstico y tratamiento del cáncer de pulmón utilizando el gen de pdgfra, kit o kdr como marcador genético.
AU2008218199B2 (en) 2007-02-22 2013-10-31 Genentech, Inc. Methods for detecting inflammatory bowel disease
AU2008307145B2 (en) * 2007-10-04 2014-07-10 Bionomics Limited Markers of endothelial cells and uses thereof
KR101867606B1 (ko) 2007-11-07 2018-06-18 제넨테크, 인크. 미생물 질환의 치료를 위한 조성물 및 방법
US9182406B2 (en) * 2008-08-04 2015-11-10 Biodesy, Inc. Nonlinear optical detection of molecules comprising an unnatural amino acid possessing a hyperpolarizability
EP3255060A1 (en) 2008-12-09 2017-12-13 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-pd-l1 antibodies and their use to enhance t-cell function
JP2013525260A (ja) * 2009-04-17 2013-06-20 バイオジェン・アイデック・エムエイ・インコーポレイテッド 急性骨髄性白血病を治療するための組成物および方法
US8926976B2 (en) * 2009-09-25 2015-01-06 Xoma Technology Ltd. Modulators
EP2480888B1 (en) 2009-09-25 2016-11-30 XOMA Technology Ltd. Screening methods
MX2012003773A (es) * 2009-09-29 2012-11-06 Dart Neuroscience Cayman Ltd Genes. metodos y composiciones relacionadas con la neurogenesis y su modulacion.
WO2011041789A1 (en) 2009-10-02 2011-04-07 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Piscine reovirus immunogenic compositions
JP5819308B2 (ja) 2009-10-22 2015-11-24 ジェネンテック， インコーポレイテッド マクロファージ刺激タンパク質のヘプシン活性化を調節するための方法及び組成物
JP2013510878A (ja) * 2009-11-12 2013-03-28 テキサス テック ユニバーシティー 高増殖性障害を処置する組成物および方法
PH12012500982A1 (en) 2009-11-30 2019-07-10 Genentech Inc Antibodies for treating and diagnosing tumors expressing slc34a2 (tat211=seqid2)
US9556249B2 (en) 2010-02-18 2017-01-31 Genentech, Inc. Neuregulin antagonists and use thereof in treating cancer
MA34057B1 (fr) 2010-02-23 2013-03-05 Genentech Inc Compositions et methodes pour le diagnostic et le traitement d'une tumeur
HRP20171045T1 (hr) 2010-04-16 2017-10-06 Biogen Ma Inc. Protutijela anti-vla-4
SG185027A1 (en) 2010-05-03 2012-11-29 Genentech Inc Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
WO2012071436A1 (en) 2010-11-24 2012-05-31 Genentech, Inc. Method of treating autoimmune inflammatory disorders using il-23r loss-of-function mutants
GB2503604B (en) 2011-03-21 2020-04-22 Biodesy Llc Classification of kinase inhibitors using second harmonic optical techniques
WO2012142526A1 (en) 2011-04-14 2012-10-18 Modiano Jaime Use of tumor fas expression to determine response to anti-cancer therapy
US9139824B2 (en) 2011-04-21 2015-09-22 The University Court Of The University Of Aberdeen Sapolegina protein in for use as a medicament
DK2715352T3 (da) 2011-05-31 2019-05-20 Biogen Ma Inc Fremgangsmåde til vurdering af risiko for pml
MX368257B (es) 2011-08-01 2019-09-26 Genentech Inc Antagonistas de unión al eje pd-1e inhibidores de mek y sus usos en el tratamiento de cáncer.
WO2013040433A1 (en) 2011-09-15 2013-03-21 Genentech, Inc. Methods of promoting differentiation
US9358250B2 (en) 2011-10-15 2016-06-07 Genentech, Inc. Methods of using SCD1 antagonists
JP2015506944A (ja) 2012-01-18 2015-03-05 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｆｇｆ１９修飾薬を使用する方法
KR102148303B1 (ko) 2012-02-11 2020-08-26 제넨테크, 인크. R-스폰딘 전위 및 그의 사용 방법
US9139863B2 (en) 2012-03-16 2015-09-22 Genentech, Inc. Engineered conformationally-stabilized proteins
RU2014141617A (ru) 2012-03-16 2016-05-10 Дженентек, Инк. Сконструированные конформационно-стабилизированные белки
JP2015511598A (ja) 2012-03-16 2015-04-20 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト Ｐａｋ１阻害剤を用いて黒色腫を治療する方法
GB2517857A (en) 2012-04-25 2015-03-04 Biodesy Inc Methods for detecting allosteric modulators of proteins
WO2013170191A1 (en) 2012-05-11 2013-11-14 Genentech, Inc. Methods of using antagonists of nad biosynthesis from nicotinamide
RU2689760C2 (ru) 2012-05-31 2019-05-30 Дженентек, Инк. Способы лечения рака с применением антагонистов аксиального связывания pd-1 и vegf антагонистов
US20160228528A1 (en) 2013-01-28 2016-08-11 Janssen Sciences Ireland Uc A single or multistage mycobacterium avium subsp. paratuberculosis subunit vaccine
JP2016509045A (ja) 2013-02-22 2016-03-24 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト がんを治療し、薬剤耐性を防止する方法
MX2015011428A (es) 2013-03-06 2016-02-03 Genentech Inc Metodos para tratar y prevenir la resistencia a los farmacos para el cancer.
JP2016516046A (ja) 2013-03-14 2016-06-02 ジェネンテック， インコーポレイテッド がんの治療方法及びがん薬物耐性を阻止する方法
CA2905123A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Genentech, Inc. Methods of treating cancer and preventing cancer drug resistance
WO2014145016A2 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Genentech, Inc. Il-22 polypeptides and il-22 fc fusion proteins and methods of use
BR112015023120A2 (pt) 2013-03-15 2017-11-21 Genentech Inc método para identificar um indivíduo com uma doença ou disfunção, método para prever a responsividade de um indivíduo com uma doença ou disfunção, método para determinar a probabilidade de que um indivíduo com uma doença ou disfunção exibirá benefício do tratamento, método para selecionar uma terapia, usos de um antagonista de ligação do eixo pd-l1, ensaio para identificar um indivíduo com uma doença, kit de diagnóstico, método para avaliar uma resposta ao tratamento e método para monitorar a resposta de um indivíduo tratado
BR112016000853A2 (pt) 2013-07-16 2017-12-12 Genentech Inc métodos para tratar ou retardar, reduzir ou inibir a recidiva ou a progressão do câncer e a progressão de uma doença imune-relacionada em um indivíduo, para aumentar, melhorar ou estimular uma resposta ou função imune em um indivíduo e kit
AU2014364593A1 (en) 2013-12-17 2016-07-07 Genentech, Inc. Methods of treating cancer using PD-1 axis binding antagonists and an anti-CD20 antibody
WO2015116902A1 (en) 2014-01-31 2015-08-06 Genentech, Inc. G-protein coupled receptors in hedgehog signaling
EP3110976B1 (en) 2014-02-27 2020-05-13 Biogen MA Inc. Method of assessing risk of pml
EP3636073B1 (en) 2014-05-05 2023-11-15 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Humanized c5 and c3 animals
RU2016144405A (ru) 2014-05-23 2018-06-26 Дженентек, Инк. MiT БИОМАРКЕРЫ И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
CN107073121A (zh) 2014-06-13 2017-08-18 基因泰克公司 治疗及预防癌症药物抗性的方法
EP3563870A1 (en) 2014-07-15 2019-11-06 F. Hoffmann-La Roche AG Methods of treating cancer using pd-1 axis binding antagonists and mek inhibitors
WO2016037157A2 (en) 2014-09-05 2016-03-10 The Johns Hopkins University Targeting capn9/capns2 activity as a therapeutic strategy for the treatment of myofibroblast differentiation and associated pathologies
EP4141032B1 (en) 2014-11-20 2024-05-29 F. Hoffmann-La Roche AG Combination therapy of t cell activating bispecific antigen binding molecules and pd-1 axis binding antagonists
CN107206088A (zh) 2014-12-05 2017-09-26 豪夫迈·罗氏有限公司 使用pd‑1轴拮抗剂和hpk1拮抗剂用于治疗癌症的方法和组合物
WO2016106286A1 (en) 2014-12-23 2016-06-30 Biodesy, Inc. Attachment of proteins to interfaces for use in nonlinear optical detection
EP3273974A4 (en) 2015-03-26 2018-11-07 Women and Infants Hospital of Rhode Island Inc. Therapy for malignant disease
EP3718569B1 (en) 2015-05-22 2023-05-03 Translational Drug Development, LLC Benzamide and active compound compositions and methods of use
EP3311165B1 (en) 2015-06-19 2020-12-09 University Of Rochester Septin proteins as novel biomarkers for detection and treatment of müllerian cancers
HK1254818A1 (zh) 2015-06-26 2019-07-26 The Regents Of The University Of California 抗原肽及其用於诊断和治疗自闭症的用途
JP2018529719A (ja) 2015-09-30 2018-10-11 メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツングＭｅｒｃｋ Ｐａｔｅｎｔ Ｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ ｍｉｔ ｂｅｓｃｈｒａｅｎｋｔｅｒ Ｈａｆｔｕｎｇ Ａｌｋ陰性がんを処置するためのｐｄ−１系結合アンタゴニストおよびａｌｋ阻害剤の組合せ
EP3371211B1 (en) 2015-11-04 2025-01-01 Icahn School of Medicine at Mount Sinai Rho-associated protein kinase ("rock") inhibitor for treating tumors and cancer, and identifying candidate subjects for such treatment
US11135221B2 (en) 2015-12-23 2021-10-05 Moonshot Pharma Llc Methods for inducing an immune response
WO2017139329A1 (en) 2016-02-09 2017-08-17 Alexander Krantz Site-selective functionalization of proteins using traceless affinity lables
WO2017189730A1 (en) 2016-04-26 2017-11-02 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Treatment of hippo pathway mutant tumors and methods of identifying subjects as candidates for treatment
AU2017292646A1 (en) 2016-07-05 2019-02-07 Blade Therapeutics, Inc. Calpain modulators and therapeutic uses thereof
WO2018064119A1 (en) 2016-09-28 2018-04-05 Blade Therapeutics, Inc. Calpain modulators and therapeutic uses thereof
US10780080B2 (en) 2016-11-23 2020-09-22 Translational Drug Development, Llc Benzamide and active compound compositions and methods of use
WO2018140510A1 (en) 2017-01-25 2018-08-02 Biogen Ma Inc. Compositions and methods for treatment of stroke and other cns disorders
WO2018152496A1 (en) 2017-02-17 2018-08-23 The Usa, As Represented By The Secretary, Dept. Of Health And Human Services Compositions and methods for the diagnosis and treatment of zika virus infection
SG10202111663PA (en) 2017-02-27 2021-12-30 Regeneron Pharma Humanized model of kidney and liver disorders
EP3624820A1 (en) 2017-04-21 2020-03-25 H. Hoffnabb-La Roche Ag Use of klk5 antagonists for treatment of a disease
EP3615569A1 (en) 2017-04-25 2020-03-04 The U.S.A. As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Antibodies and methods for the diagnosis and treatment of epstein barr virus infection
JP2020525434A (ja) 2017-06-22 2020-08-27 ムーンショット ファーマ エルエルシー アンレキサノクス及び免疫調節剤を含む組成物で癌を治療する方法
WO2019018629A1 (en) 2017-07-19 2019-01-24 The Usa, As Represented By The Secretary, Dept. Of Health And Human Services ANTIBODIES AND METHODS FOR DIAGNOSING AND TREATING INFECTION WITH HEPATITIS B VIRUS
US11400165B2 (en) 2017-11-04 2022-08-02 Advanced Proteome Therapeutics Inc. Composition and method for modifying polypeptides
US20190211098A1 (en) 2017-12-22 2019-07-11 Genentech, Inc. Use of pilra binding agents for treatment of a disease
CN119080931A (zh) 2018-06-04 2024-12-06 马萨诸塞州渤健公司 具有降低的效应功能的抗vla-4抗体
WO2020239558A1 (en) 2019-05-24 2020-12-03 Pfizer Inc. Combination therapies using cdk inhibitors
CN114650840A (zh) 2019-11-20 2022-06-21 英特维特国际股份有限公司 一种针对副猪嗜血杆菌的新型疫苗
CN114728052A (zh) 2019-11-20 2022-07-08 英特维特国际股份有限公司 一种针对副猪嗜血杆菌的新型疫苗
EP4061414A1 (en) 2019-11-20 2022-09-28 Intervet International B.V. A novel vaccine against heamophilus parasuis
WO2022084210A1 (en) 2020-10-20 2022-04-28 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy of pd-1 axis binding antagonists and lrrk2 inhitibors
US20220168293A1 (en) 2020-12-02 2022-06-02 Pfizer Inc. Time to resolution of axitinib-related adverse events
WO2022159414A1 (en) 2021-01-22 2022-07-28 University Of Rochester Erythropoietin for gastroinfestinal dysfunction
CA3216220A1 (en) 2021-06-09 2022-12-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination of a particular braf inhibitor (paradox breaker) and a pd-1 axis binding antagonist for use in the treatment of cancer
TW202327595A (zh) 2021-10-05 2023-07-16 美商輝瑞大藥廠 用於治療癌症之氮雜內醯胺化合物的組合

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4554101A (en) * 1981-01-09 1985-11-19 New York Blood Center, Inc. Identification and preparation of epitopes on antigens and allergens on the basis of hydrophilicity
WO1984002983A1 (en) * 1983-01-21 1984-08-02 Frederick James Primus Specific cea-family antigens, antibodies specific thereto and their methods of use
NZ207394A (en) * 1983-03-08 1987-03-06 Commw Serum Lab Commission Detecting or determining sequence of amino acids
EP0291636A1 (en) * 1983-11-07 1988-11-23 The Wistar Institute Immune response to viruses induced by anti-idiotype antibodies
DE3586772T2 (de) * 1984-07-24 1993-03-04 Coselco Mimotopes Pty Ltd Verfahren zur bestimmung von mimotopen.

Also Published As

Publication number Publication date
MY102884A (en) 1993-03-31
NO168793B (no) 1991-12-23
DK624986D0 (da) 1986-12-22
DE3685930D1 (de) 1992-08-13
EP0220245A4 (en) 1988-01-26
NO865215L (no) 1986-12-22
DK624986A (da) 1987-02-22
ATE78097T1 (de) 1992-07-15
JPS62502568A (ja) 1987-10-01
EP0220245B1 (en) 1992-07-08
NO168793C (no) 1992-04-01
EP0220245A1 (en) 1987-05-06
DK165197C (da) 1993-03-01
US4833092A (en) 1989-05-23
CA1267084A (en) 1990-03-27
DE3685930T2 (de) 1992-12-24
NZ215865A (en) 1988-10-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK165197B (da) Fremgangsmaade til bestemmelse af mimotoper
WO1986006487A1 (en) Method for determining mimotopes
CA1255586A (en) Method of determining mimotopes
Seligmann et al. Immunochemical studies in four cases of alpha chain disease
CA2424611C (en) Identification of protein binding sites
DK167825B1 (da) Fremgangsmaade og reagenssystem til immunobestemmelse af glycoprotein-analyten hb alc.
Towbin et al. Immunoblotting in the clinical laboratory
US5217869A (en) Method to produce immunodiagnostic reagents
JP3135126B2 (ja) 疾患の臨床的発現に基づく、診断用試薬を得る方法、アッセイ、及び治療剤
EP0871658B1 (en) Modified avidin and streptavidin molecules and use thereof
JPH09101306A (ja) 標的蛋白質の親和性精製に有用なペプチドリガンドの選択のための組み合わせペプチドライブラリーのスクリーニング
IE883094L (en) Immunodiagnositc reagents
JP4130505B2 (ja) Ｄ−アミノ酸からなるペプチドによる診断方法の干渉の排除
JP5611831B2 (ja) リウマチ性関節炎自己抗体との免疫反応性合成ペプチド
Sioud et al. Selection of ligands for polyclonal antibodies from random peptide libraries: potential identification of (auto) antigens that may trigger B and T cell responses in autoimmune diseases
Fiordalisi et al. Site-Directed Mutagenesis of. kappa.-Bungarotoxin: Implications for Neuronal Receptor Specificity
Real‐Fernández et al. Ferrocenyl glycopeptides as electrochemical probes to detect autoantibodies in multiple sclerosis patients' sera
JP4318458B2 (ja) ｐａｎ特異的モノクローナル抗体
JP3510889B2 (ja) 糖尿病及び前糖尿症状の診断のための方法
AU592560B2 (en) Improved method for determining mimotopes
JPH06510988A (ja) 合成ペプチドを用いてのｈｔｌｖ−１とｈｔｌｖ−２との区別
JPH10259197A (ja) ペプチド混合物の製造方法
RU2137138C1 (ru) Диагностическая композиция для определения сифилиса и тест-система "аквасиф" на ее основе
CN120309725A (zh) 一种p-tau231单克隆抗体的制备方法、p-tau231单克隆抗体及抗体可变区
ARNON Structural Aspects of Lysozyme–From the Viewpoint of an Antibody

Legal Events

Date Code Title Description
AHB Application shelved due to non-payment
PBP Patent lapsed