DK174196B1 - Co-vaccinationspræparat - Google Patents
Co-vaccinationspræparat Download PDFInfo
- Publication number
- DK174196B1 DK174196B1 DK198800307A DK30788A DK174196B1 DK 174196 B1 DK174196 B1 DK 174196B1 DK 198800307 A DK198800307 A DK 198800307A DK 30788 A DK30788 A DK 30788A DK 174196 B1 DK174196 B1 DK 174196B1
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- coli
- composition according
- bacterin
- gram
- cells
- Prior art date
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 9
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 title description 4
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims description 35
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 claims description 19
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 claims description 18
- 241000606856 Pasteurella multocida Species 0.000 claims description 17
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 17
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 15
- 229940051027 pasteurella multocida Drugs 0.000 claims description 15
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 14
- 241000588622 Moraxella bovis Species 0.000 claims description 9
- 241001138501 Salmonella enterica Species 0.000 claims description 7
- 241000293869 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium Species 0.000 claims description 7
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims description 6
- 244000052769 pathogen Species 0.000 claims description 5
- 244000000058 gram-negative pathogen Species 0.000 claims description 4
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 claims description 4
- 241000588779 Bordetella bronchiseptica Species 0.000 claims description 3
- 241000589893 Brachyspira hyodysenteriae Species 0.000 claims description 3
- 241000606807 Glaesserella parasuis Species 0.000 claims description 3
- 241000589926 Leptospira interrogans serovar Hardjo Species 0.000 claims description 3
- 241001518154 Leptospira kirschneri serovar Grippotyphosa Species 0.000 claims description 3
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 claims description 3
- 241000392514 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Dublin Species 0.000 claims description 3
- 241000589876 Campylobacter Species 0.000 claims description 2
- 241000589872 Campylobacter hyointestinalis Species 0.000 claims description 2
- 241001550390 Leptospira interrogans serovar Canicola Species 0.000 claims description 2
- 241000606748 Actinobacillus pleuropneumoniae Species 0.000 claims 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 18
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 17
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 15
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 15
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 5
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 229960004279 formaldehyde Drugs 0.000 description 4
- 235000019256 formaldehyde Nutrition 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 108010038854 colibacterin Proteins 0.000 description 3
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 3
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 102000019040 Nuclear Antigens Human genes 0.000 description 2
- 108010051791 Nuclear Antigens Proteins 0.000 description 2
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 244000309466 calf Species 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N Acrylic acid Chemical group OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000589877 Campylobacter coli Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 101710146739 Enterotoxin Proteins 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 241000606790 Haemophilus Species 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 241001354013 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Enteritidis Species 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 229940024546 aluminum hydroxide gel Drugs 0.000 description 1
- SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K aluminum;trihydroxide;hydrate Chemical compound O.[OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 229940096529 carboxypolymethylene Drugs 0.000 description 1
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000012510 hollow fiber Substances 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 239000001974 tryptic soy broth Substances 0.000 description 1
- 108010050327 trypticase-soy broth Proteins 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/104—Pseudomonadales, e.g. Pseudomonas
- A61K39/1045—Moraxella
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/025—Enterobacteriales, e.g. Enterobacter
- A61K39/0258—Escherichia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/025—Enterobacteriales, e.g. Enterobacter
- A61K39/0275—Salmonella
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/102—Pasteurellales, e.g. Actinobacillus, Pasteurella; Haemophilus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/52—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells
- A61K2039/521—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells inactivated (killed)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55583—Polysaccharides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55588—Adjuvants of undefined constitution
- A61K2039/55594—Adjuvants of undefined constitution from bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/70—Multivalent vaccine
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
i DK 174196 B1
Den foreliggende opfindelse angår et forbedret præparat til co-vaccinering af dyr, herunder pattedyr og fugle, mod gramnegative organismer og de sygdomme, som forårsages derved. Nærmere bestemt angår opfindelsen en co-vaccine, 5 hvori der anvendes en bakteriel lipopolysaccharid-(LPS)-fraktion, som er fri for O-carbohydrat-sidekæder, eksempelvis E. coli J5 og mutanter deraf, og et bacterin, som er rettet mod en eller flere gramnegative organismer til den immunologiske beskyttelse af et dyr mod gramnegative organismer og 10 de sygdomme, som forårsages af disse organismer.
Gramnegative bakterier har ens LPS-strukturer. Nogle mutante gramnegative bakteriestammer mangler O-carbohydrat-sidekæderne, som normalt er knyttet til gramnegative bakterier. Disse mutante organismer mangler hår og ydre antige-15 ner, som normalt er knyttet til LPS-membranen, idet LPS- og andre kerneantigener lades eksponerede tilbage.
Escherichia coli stammen J5 er et velkendt eksempel på en genetisk stabil gramnegativ bakterieart med LPS og andre kerneantigener eksponerede. Andre gramnegative bakteri-20 er af andre arter, såsom Salmonella enteritidis, ATCC nr.
53000, beskrevet i europæisk patentansøgning nr. 158.282, mangler ligeledes O-carbohydrat-sidekæderne (ligeledes kendte som "K-antigener"). Den europæiske patentansøgning angår en fremgangsmåde til fremstilling af gramnegative bakterier 25 uden O-carbohydrat-sidekæde.
I EP offentliggørelsesskrift nr. 89283 beskrives en kombination af inaktiverede ADP-ribosylerende toxiner, herunder inaktiveret E. coli-enterotoxin, med vacciner mod bakterielle endotoxiner fra gramnegative bakterier. Bak-30 terielt lipopolysaccharid omtales ikke.
Den foreliggende opfindelse angår et præparat, virkningsfuldt til co-injicering af et dyr til øgning af dyrets immunreaktion mod et gramnegativt pathogen, hvilket præparat er ejendommeligt ved, at det omfatter en virkningsfuld immun-35 reaktionsøgende dosis af DK 174196 B1 2 a) bakterielt lipopolysaccharid, fri for O-carbohydrat-sidekæder, b) et helcellebacterin, afledt af pathogenet.
Det har ifølge opfindelsen vist sig, at bakterielt 5 lipopolysaccharid, fri for O-carbohydrat-sidekæder, er en virkningsfuld immunmodulator, når det anvendes i forening med gramnegative bacteriner.
Præparatet ifølge den foreliggende opfindelse kan eventuelt indgives i blanding med en farmakologisk acceptabel 10 bærer forud for indgift til et dyr. Farmakologisk acceptable bærere til opfindelsen er bærere, som sædvanligvis anvendes i vacciner, såsom vandige og oliebaserede bærere, og omfatter antigen/hjælpestofkombinationer med langsom frigivelse. Typiske eksempler på komponenter i sådanne bærere er salt-15 vand, aluminiumhydroxidgel og carboxypolymethylen.
Der kræves en kilde til bakterielt lipopolysaccharid, fri O-carbohydrat-sidekæder. E.coli-stamme J5 eller mutanter deraf er typiske eksempler på en gramnegativ organisme med eksponeret LPS og andre kerneantigener. Hele celler af E.
20 coli-stammen J5 er en foretrukken kilde til bakterielt lipopolysaccharid, fri for O-carbohydrat-sidekæder.
E. coli-stammen J5, dvs. ATCC nr. 39355, kan dyrkes i egnede vækstmedier, såsom hjernehjerteinfusions- eller tryptin-soja-dyrkningsvæske. Man kan anvendes enten beriget 25 eller minimal næringsvæske, og kulturen kan dyrkes i glasbeholdere eller fermentorapparater. Et foretrukket medium er Trypticase Soy Broth (Difco Laboratories, Detroit, MI, USA) .
Man kan anvende frosne eller lyofiliserede J5-kulturer til inokulering af mediet.
30 Størrelsen af et inokulum bør ikke være mindre end 0,2 volumenprocent af det samlede volumen. Vækst af organismerne styres ved anvendelse af sukkerarter, ændringer i pH-enheder og en ændring i kulturens absorbans.
Gramnegative bakterieceller, fri for O-carbohydrat-35 sidekæder, og bacteriner ifølge den foreliggende opfindelse kan være levende eller inaktiverede og kan anvendes i hvilken DK 174196 B1 3 som helst kombination deraf. En foretrukken kilde til bakterielt lipopolysaccharid, fri for O-carbohydrat-sidekæder, er inaktiverede celler. Man foretrækker ligeledes at anvende inaktiverede vacciner.
5 Gramnegative bakterieceller, fri for O-carbohydrat- sidekæder, kan inaktiveres ved kogning eller behandling med anti-bakterielle midler, såsom 0,2 volumenprocent formaldehyd, β-propriolacton eller antibiotika. Den foretrukne fremgangsmåde til inaktivering af cellerne er med formaldehyd.
10 Cellekulturen kan derpå eventuelt blive koncentreret og/eller vasket til fjernelse af komponenter i mediet. Vaskede og koncentrerede celler, fri for O-carbohydratsidekæder, foretrækkes .
Cellekulturen koncentreres typisk fra 5-50 volumenpro-15 cent. En fremgangsmåde til koncentrering af celler er hulfi-bermetoden (Amicon Corporation, Danvers, MA, USA). Ved denne fremgangsmåde anvendes der hule fibre indeholdende indsatser, som indbefatter en matrix af fibre, gennem hvilken prøven pumpes.
20 Ved den foretrukne fremgangsmåde anvendes E. coli J5-celler, vaskede og koncentrerede til 2-3 x 1010 cfu/ml, optisk bestemt. Dette svarer til en fortynding på ca. tyve gange af en J5-cellekultur.
Bacteriner af forskellige typer gramnegative organis-25 mer er anvendelige til den foreliggende opfindelse. Specifikke eksempler på gramnegative bacterinstammer er de følgende: Pasteurella multocida, P. hemolytica, Escherichia coli, Bordetella bronchiseptica, Salmonella typhimurium, S. chole-raesuis, S. dublin, Pseudomonas aeruginosa, Haemophilus 30 pleuropneumoniae, H. parasuis, H. sommnus, Moraxella bovis, Treponema hyodysenteriae, Campylobacter sputurum, C. hyointe-stinalis, Leptospira canicola, L. grippotyphosa, L. hardjo, L. icterohaemorrhagiae, L. pomoma og L. bratislava.
Bacteriner, anvendelige i den foreliggende opfindelse, frem-35 stilles ifølge kendt teknik.
DK 174196 B1 4
Ved fremstillingen af præparaterne ifølge opfindelsen blandes bacterinerne fortrinsvis grundigt med det bakterielle lipopolysaccharid, fri for O-carbohydrat-sidekæder. Blandingen af bacterinet eller bacterinerne med det bakterielle 5 lipopolysaccharid fri for O-carbohydrat-sidekæder, kan ske under formuleringen af bacterinet eller efter fremstillingen af selve bacterinet.
Det bakterielle lipopolysaccharid, fri for O-carbo-hydrater, og bacterinet co-indgives enten ufortyndet eller 10 fortyndet med en farmakologisk saltvandsopløsning. Signifikant gunstige resultater er opnået med fortyndingsværdier på op ca. 1:25 med et antal testede pathogener. I talrige forsøg har ufortyndede eller fortyndede opløsninger på ca.
1:5 givet særdeles gunstige resultater. Hver ml af vaccine-15 præparatet indeholder fortrinsvis 6-600 x 108 cfu/ml E. coli.
Co-vaccinepræparatet kan anvendes til øgning af immunreaktionen og således beskytte dyr forud for infektion af dyrene med det gramnegative pathogen, mod hvilket inokulerin-gen er beredt. Co-vaccinen kan ligeledes anvendes til stimu-20 lering af immunreaktionen og således beskytte dyr, som for tiden er inficerede med det gramnegative pathogen, mod hvilket inokuleringen er beredt.
Den foreliggende opfindelse kan anvendes til dyr med et antigen/antistof- immunreaktionssystem. Specifikke dyr, 25 hvortil man kan anvende opfindelsen, omfatter sådanne husdyr som kvæg, får, geder, svin, hunde, katte og hunde samt fjerkræ. En tilnærmelsesvis typisk dosis er 0,5-1,5 ml til fjerkræ, 1,0-3 ml til svin og 2-4 ml til kvæg.
De følgende eksempler anvendes til yderligere belys-30 ning af opfindelsen, men bør ikke anses som begrænsende dens ramme.
Eksempel 1 - Produktion af J5 bacterin E. coli J5 bacterin fremstilles ved inokulering af 35 mediet med organismer i aktiv vækst (ATCC nr. 39355). Under vækstfasen holdes temperaturen på 37°C ± 2°C, og pH-værdien 5 DK 174196 B1 holdes konstant på 7,0-7,3. Væksten overvåges og holdes ved en pH-værdi på 7,0-7,3 ved tilsætning af 5 N natriumhydroxid. Dextrose tilsættes som en steril 50%'s opløsning til opnåelse af maksimal vækst. Ved slutningen af vækstperioden inaktive-5 res bacterinet med formaldehyd. Efter inaktivering køres der tests for at holde det fri formaldehyd-indhold på under 0,2%.
Eksempel 2 - J5 og Pasteurella multocida 10 En E. coli J5 kultur dyrkes og inaktiveres med formal dehyd som i eksempel 1. Den koncentreres derpå til ca.
5-10% af dens oprindelige grundform og vaskes med 3 rumfang fysiologisk saltvandsopløsning.
Det inaktiverede, koncentrerede E. coli J5 bacterin 15 forenes derpå godt med Midcon Labs' Pasteurella Multocida (PM) bacterin i de følgende forhold: 97,5 ml PM Bacterin (25% opløsning) 2,5 ml J5 20 95,0 ml PM Bacterin (50% opløsning) 5,0 ml J5
Vaccinepræparaterne indgives subcutant eller intramus-kulært, fortyndet eller i en fortynding på 1:5. Fortyndings-25 midlet er steril, phosphatpufret saltvandsopløsning.
Resultaterne af sammenlignende forsøg med Midcon Labs' (PM) bacterin, E. coli J5 bacterin og en forening af E. coli J5 bacterin med PM bacterin er angivet i tabel I.
USDA Pasteurella multocida (PM) Standard Reference Bacterin, 30 IRP 248 og PM Challenge Culture, IRP 255 anvendes ved afprøvningen ifølge USDA forsøgsforskrifter.
35
Tabel I
6 DK 174196 B1
Ikke- vacci- 5 Fortynding USDA MIDCON MIDCON MIDCON kun nerede PM PM PM med PM med 25% kon- STANDARD STANDARD 25% J5 50% J5 J5 troldyr A. ufortyndet #101+ #201 #301 #401 #501 #601 10 12/20* 11/20 17/19 13/19 4/20 0/20 B. 1:5 #102 #202 #302 #402 #502 #602
1/20 1/20 4/20 1/20 0/20 X
15 * antal overlevende/antal aktiverede + bur nr.
X ingen mus i denne gruppe
Eksempel 3 - J5 og Salmonella choleraesuis 20 En vaccine fremstilles med E. coli J5 bacterin og
Midcon Labs' Salmonella choleraesuis bacterin ifølge fremgangsmåderne fra eksempel 2.
De sammenlignende forsøgsresultater af anvendelsen af enten bacterinet alene eller co-vaccinepræparatet af E.
25 coli J5 bacterinet og Salmonella choleraesuis bacterin er vist i tabel II. Aktiveringskulturen er Salmonella choleraesuis, USDA IRP 224.
30 35
Tabel III
DK 174196 B1 7 SALMO- SALMO- SALMO- ikke- NELLA NELLA NELLA vacci- 5 CHOLE- CHOLE- CHOLE- kun kun nerede RAESUIS RAESUIS RAESUIS 25% 50% kon-
Fortynding BACTERIN W/25% J-5 W/50% J-5 J-5 J-5 troldyr ufortyndet #201+ #301 #401 #501 #601 #701 10 11/20* 15/20 12/20 3/20 4/20 0/20 1:5 #202 #302 #402 #502 #602 #702
4/20 10/20 5/20 1/20 l/20 X
15 * antal overlevende/antal aktiverede + bur nr.
X ingen mus i denne gruppe 1 intet tilgængeligt USDA standard bacterin.
20
Eksempel 4 - J5 οα E. coli
En vaccine fremstillet med E. coli J5 bacterin og E. coli bacterin Sero type 987p ifølge fremgangsmåderne fra eksempel 2. I tabel III er vist resultaterne af forsøg med 25 anvendelsen af enten bacterins alene eller co-vaccinepræparatet af E. coli J5 bacterin og E. coli bacterin. En yderligere fortynding af vaccinen afprøves ligeledes ved 1:25.
30 35 DK 174196 B1 8
Tabel IIil
Ikke-vacci- E.COLI E.COLI kun kun nerede 5 E. COLI W/25% W/50% 25% 50% kon-
Fortynding BACTERIN J-5 J-5 J-5 J-5 troldyr ufortyndet #201+ #301 #401 #501 #601 #701 10 12/20* 20/20 20/20 14/20 13/20 0/20 1:5 #202 #302 #402 #502 #602 #702
6/20 20/20 18/20 8/20 10/20 X
15 1:25 #203 #303 #403 #503 #603 #703
2/20 8/20 5/20 2/20 3/20 X
* antal overlevende/antal aktiverede 20 + bur nr.
X ingen mus i denne gruppe 1 intet tilgængeligt USDA standard
Eksempel 5 25 8 ml Salmonella typhimurium Standard Reference Bacte- rin NVSL #81 IRP STB Serie 1 blandes med 2 ml saltvand, ufortyndet E. coli J5, E. coli J5, fortyndet 1:10, E. coli J5, fortyndet 1:100, og E. coli J5, fortyndet 1:1000. Blandingen fortyndes derpå yderligere i forholdet 1:5 og 1:25 30 med saltvand.
20 8 uger gamle White Swiss Webster mus fra SASCO,
Omaha, NE, USA, anvendes til hver fortynding. Musene vaccineres med 0,1 ml IP 2 gange med ugers mellemrum. 14 dage efter den anden vaccination aktiveres musene med 0,25 ml af 35 en 104 fortynding af S. typhimurium.
DK 174196 B1 9 I tabel IV er vist resultaterne af forsøget med S. typhimurium bacterin alene eller i forening med E. coli J5 ved forskellige fortyndinger.
5 Tabel IV
Fortynding af testet S. typhimurium/E. coli J5 Bacterin
Vaccine 1:5 1:15 10 J-5 ufortyndet 2/20* 4/20 J-5 1:10 1/20 4/20 J-5 1:100 3/17 6/20 15 _ J-5 1:1000 2/20 9/20
Ingen J-5 2/18 6/14 20 * antal døde/antal aktiverede
Eksempel 6 8 ml Midcon Labs' Pasteurella multocida blandes med 2 ml phosphatpufret saltvand, ufortyndet E. coli J5, 25 E. coli J5, fortyndet i forholdet 1:10. E. coli J5, fortyndet i forholdet 1:100. Blandingen indgives derpå eller fortyndes yderligere i forholdet 1:5 med phosphatpufret saltvand.
Tyve 6 uger gamle White Swiss Webster mus fra SASCO,
Omaha, Nebraska, USA, anvendes ved hver fortynding. Musene 30 vaccineres med 0,1 ml IP og aktiveres 14 dage efter vaccinationen med 0,20 ml af en 106 fortynding af aktiveringsstammen (USDA-stamme 169).
I tabel V er vist resultaterne af forsøget under anvendelse af bacterinet alene eller i kombination med E.
35 coli J5 ved forskellige fortyndinger.
Tabel V
10 DK 174196 B1
Fortynding af testet P. multocida /C. coli bacterin 5 Vaccine Ufortyndet 1:5 J-5 ufortyndet 4/20* 11/20 J-5 1:10 8/20 17/20 10 ______ J-5 1:100 6/20 14/20
Ingen J-5 10/20 12/20 15 * antal døde/antal aktiverede.
Eksempel 7
En vaccine fremstilles med E. coli J5 bacterin og Midcon Labs' Moraxella bovis (MB) ifølge fremgangsmåderne 20 fra eksempel 2.
Kvæg vaccineres to gange med enten bacterin alene eller med co-vaccinepræparatet af E. coli J5 bacterin og Moraxella bovis bacterin. Tidsforløbet mellem den første og anden vaccination er 21 dage. 25 dage efter den anden vacci-25 nation aktiveres kvæget med Moraxella bovis. Det aktiverede kvæg undersøges 7, 15, 19, 29 og 40 dage efter aktivering for synlige øjenlæsioner.
I tabel VI er vist resultaterne af aktiveringsforsøget .
30 35 DK 174196 B1
Tabel VI
11
MIDCON MIDCON MIDCON
Antal dage ef- MB MB med MB med Ikke-vaccinerede 5 ter aktivering STANDARD 25% J5 50% J5 kontroldyr 7 114/121* 111/111 89/90 73/87 15 113/121 111/111 89/90 64/84 10 __________ 19 111/121 109/109+ 86/90 50/86“ 29 110/121 109/109 84/90 39/86 15 40 110/121 109/109 84/90 37/86 * antal symptomfri dyr/antal aktiverede + to kalve mistet i tordenvejr en inficeret kalv mistet i tordenvejr.
Claims (7)
1. Præparat, virkningsfuldt til co-injicering af et dyr til øgning af dyrets immunreaktion mod et gramnegativt pathogen, kendetegnet ved, at det omfatter en 5 virkningsfuld immunreaktionsøgende dosis af a) bakterielt lipopolysaccharid, fri for O-carbohydrat-sidekæder, b) et helcellebacterin, afledt af pathogenet.
2. Præparat ifølge krav 1, kendetegnet 10 ved, at lipopolysaccharidet er indeholdt i gramnegative bakterieceller.
3. Præparat ifølge krav 2, kendetegnet ved, at cellerne er E. coli J5 eller mutanter deraf.
4. Præparat ifølge krav 1, kendetegnet 15 ved, at pathogenet er valgt blandt Pasteurella multocida, P. hemolytica, Escherichia coli, Bordetella bronchiseptica, Salmonella typhimurium, S. Choleraesuis, S. dublin, Pseudomonas aeruginosa, Haemophilus pleuropneumoniae, H. parasuis, H. sommnus, Moraxella bovis, Treponema hyodysenteriae, Campy-20 lobacter sputurum, C. hyointestinalis, Leptospira canicola, L. grippotyphosa, L. hardjo, L. icterohaemorrhagiae, L. pomoma og L. bratislava.
5. Præparat ifølge krav 3, kendetegnet ved, at pathogenet er valgt blandt Pasteurella multocida,
25 P. hemolytica, Escherichia coli, Bordetella bronchiseptica, Salmonella typhimurium, S. choleraesuis, S. dublin, Pseudomonas aeruginosa, Haemophilus pleuropneumoniae, H. parasuis, H. sommnus, Moraxella bovis, Treponema hyodysenteriae, Campylobacter sputurum, C. hyointestinalis, Leptospira canicola,
30 L. grippotyphosa, L. hardjo, L. icterohaemorrhagiae, L. pomoma og L. bratislava.
6. Præparat ifølge krav 2, kendetegnet ved, at cellerne er koncentrerede til ca. 5-50 volumenprocent .
7. Præparat ifølge krav 3, kendetegnet ved, at cellerne er koncentreret til ca. 2-3 x 1010 cfu/ml.
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US86645186A | 1986-05-23 | 1986-05-23 | |
| US86645186 | 1986-05-23 | ||
| US8701222 | 1987-05-22 | ||
| PCT/US1987/001222 WO1987007148A1 (en) | 1986-05-23 | 1987-05-22 | Co-vaccination using non-o-carbohydrate side-chain gram-negative bacteria preparation |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK30788D0 DK30788D0 (da) | 1988-01-22 |
| DK30788A DK30788A (da) | 1988-01-22 |
| DK174196B1 true DK174196B1 (da) | 2002-09-16 |
Family
ID=25347657
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK198800307A DK174196B1 (da) | 1986-05-23 | 1988-01-22 | Co-vaccinationspræparat |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0367757B1 (da) |
| CA (1) | CA1305667C (da) |
| DE (1) | DE3750725T2 (da) |
| DK (1) | DK174196B1 (da) |
| IE (1) | IE66690B1 (da) |
| IL (1) | IL82624A (da) |
| WO (1) | WO1987007148A1 (da) |
| ZA (1) | ZA873698B (da) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2082155C (en) † | 1990-05-29 | 2008-04-15 | Krishnaswamy I. Dayalu | Swine pneumonia vaccine and method of preparation |
| ATE173634T1 (de) * | 1994-04-20 | 1998-12-15 | Us Army | Impfstoff gegen gram-negative bakterielle infektionen |
| US6749831B1 (en) | 1997-05-16 | 2004-06-15 | Medical Defense Technology, Llc | Vaccine against lipopolysaccharide core |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1085956A (en) * | 1963-09-10 | 1967-10-04 | Nat Res Dev | Improvements relating to vaccines |
| US4016253A (en) * | 1975-04-02 | 1977-04-05 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Vaccine for immunization of swine against Bordetella bronchiseptica infection and method of use |
| US4167560A (en) * | 1977-04-12 | 1979-09-11 | Texas Vet Lab, Inc. | Polyvalent shipping fever vaccine |
| DK138379A (da) * | 1979-04-04 | 1980-10-05 | Nordisk Droge & Kemikalie | Vaccine imod pleuropneumonia (ondartet lungesyge) hos svin dens anvendelse samt fremgangsmaade og substat til dyrkning specielt aerob fermentering af mikroorganismen haemophilus pleuropneumoniae |
| IL59663A (en) * | 1980-03-19 | 1983-02-23 | Univ Ramot | Vaccines obtained from bacterial mutant strains of enterobacteriaceae and pseudomonaceae |
| US4455142A (en) * | 1980-07-07 | 1984-06-19 | Alza Corporation | Method of coadministering an antigen and an immunopotentiator |
| US4428931A (en) * | 1982-03-15 | 1984-01-31 | Merck & Co., Inc. | Bacterial toxoids and gram-negative immune globulin therefrom |
| US4469672A (en) * | 1983-04-07 | 1984-09-04 | Iowa State University Research Foundation | Method of combined parenteral and oral vaccination for swine dysentery |
| IE940698L (en) * | 1984-04-05 | 1985-10-05 | Univ Missouri | Vaccine and serum for endotoxin associated disease and method of preparing same as well as to methods of immunization and treatment of such disease and to a detoxified endotoxin and bacterial mutant |
-
1987
- 1987-05-22 ZA ZA873698A patent/ZA873698B/xx unknown
- 1987-05-22 IE IE134387A patent/IE66690B1/en not_active IP Right Cessation
- 1987-05-22 IL IL82624A patent/IL82624A/xx not_active IP Right Cessation
- 1987-05-22 DE DE3750725T patent/DE3750725T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1987-05-22 EP EP87903666A patent/EP0367757B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1987-05-22 WO PCT/US1987/001222 patent/WO1987007148A1/en not_active Ceased
- 1987-05-25 CA CA000537927A patent/CA1305667C/en not_active Expired - Lifetime
-
1988
- 1988-01-22 DK DK198800307A patent/DK174196B1/da active IP Right Grant
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0367757A1 (en) | 1990-05-16 |
| CA1305667C (en) | 1992-07-28 |
| ZA873698B (en) | 1987-11-18 |
| IL82624A (en) | 1993-02-21 |
| DE3750725D1 (de) | 1994-12-08 |
| IE66690B1 (en) | 1996-01-24 |
| DK30788D0 (da) | 1988-01-22 |
| IL82624A0 (en) | 1987-11-30 |
| DE3750725T2 (de) | 1995-06-08 |
| EP0367757B1 (en) | 1994-11-02 |
| DK30788A (da) | 1988-01-22 |
| IE871343L (en) | 1987-11-23 |
| WO1987007148A1 (en) | 1987-12-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4298597A (en) | Vaccine for diarrhea caused by E. coli | |
| Deb et al. | Laboratory trials with inactivated vaccines against Escherichia coli (O78 K80) infection in fowls | |
| Elliott et al. | Streptococcal infection in young pigs. V. An immunogenic polysaccharide from Streptococcus suis type 2 with particular reference to vaccination against streptococcal meningitis in pigs | |
| US4789544A (en) | Co-vaccination using non-O-carbohydrate side-chain gram-negative bacteria preparation | |
| AU667858B2 (en) | Gram-negative bacterial vaccines | |
| Deb et al. | Laboratory trials with inactivated vaccines against Escherichia coli (O2: K1) infection in fowls | |
| US4606919A (en) | Vaccine for the treatment of urinary tract infections containing aluminum phosphate | |
| DK174196B1 (da) | Co-vaccinationspræparat | |
| US5536496A (en) | Pasteurella multocida toxoid vaccines | |
| McCarthy et al. | Immunization of rainbow trout, Salmo gairdneri Richardson, against bacterial kidney disease: preliminary efficacy evaluation | |
| US4335106A (en) | Processes for the growth of a modified Pasteurella multocida bacteria and preparation of a vaccine therefrom | |
| PEDERSEN | The serology of Bordetella bronchiseptica isolated from pigs compared with strains from other animal species | |
| GB2023420A (en) | Preparations containing antigen from pasteurella haemolytica | |
| US3328252A (en) | Pasteurella and salmonella vaccines | |
| Ward et al. | Factors influencing the efficacy of vaccines against vibriosis caused by Vibrio anguillarum | |
| US8563005B2 (en) | Actinobacillus suis antigens | |
| JP2721218B2 (ja) | ブタ赤痢ワクチン | |
| Smith et al. | Immunogenicity of killed Bordetella bronchiseptica vaccines in the mouse | |
| US6096322A (en) | Pathogenicity and protective attributes of major clones of Escherichia coli recovered from chickens during processing | |
| CA2312296C (en) | Pasteurella multocida toxoid vaccines | |
| Claus et al. | Immunogenicity of Clostridium septicum in guinea pigs | |
| RU2018322C1 (ru) | Вакцина против рожи свиней | |
| Davis et al. | Further observations on the use of a bivalent bacterin against Haemophilus gallinarum | |
| CA2086258C (en) | Pasteurella multocida toxoid vaccines | |
| Šourek et al. | Mouse-protection experience with monovalent Pseudomonas aeruginosa vaccine |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| B1 | Patent granted (law 1993) |