DK200200301A - Antistoffer som binder fragmenter af vævsfaktorinhibitor (TFI), sammensætninger omfattende disse antistoffer, og fremgangsmåde til anvendelse af en immunoaffinitetsmatrix omfattende et sådant antistof til at oprense et polypeptid fra et biologisk fluidum - Google Patents

Description

PATENTKRAV 1. Isoleret og renset antistof som har en bindingsspecificitet for vævsfaktorinhibitor (TFI) med en aminosyresekvens som vist i Fig. 3 og binder til en vævsfaktorinhibitor (TFI)-region valgt blandt: (a) de N-terminale aminosyrer 29-55 eller 31-53 i renset moden TFI som vist i Fig. 3; (b) de C-terminale aminosyrer 265-304 i renset moden TFI som vist i Fig. 3; (c) et V8 protease plus trypsin-nedbrudt peptid af TFI med sekvensen af aminosyrerne 82-88 som vist i Fig. 3; (d) et V8 protease plus trypsin-nedbrudt peptid af TFI med sekvensen af aminosyrerne 153-166 som vist i Fig. 3; (e) aminosyrerne 54-104 eller 47-117 i Fig. 3, som danner Kunitz domæne 1 1 TFI; (f) aminosyrerne 125-175 eller 118-188 i Fig. 3, som danner Kunitz domæne 2 i TFI; og (g) aminosyrerne 217-267 eller 210-280 i Fig. 3, som danner Kunitz domæne 3 i TFI. 2. Isoleret og renset antistof som har en bindingsspecificitet for vævsfaktorinhibitor (TFI) med en aminosyresekvens som vist i Fig. 3 og som ikke binder et polypeptid valgt blandt bovin basal proteaseinhibitor-precursor, bovint colostrum-trypsininhibitor, bovint serum-basal proteaseinhibitor, spiselig snegl-isoinhibitor K, rødehavsskildpadde-basal proteaseinhibitor, vestlig sandhugorm gift-basal proteaseinhibitor I, ringhalsgift-basal proteaseinhibitor II, Cape cobra gift-basal proteaseinhibitor II, Russell's hugorm gift-basal proteaseinhibitor II, sandhugorm gift-basal proteaseinhibitor III, østlig grøn mamba gift-basal proteaseinhibitor I homolog, sort mamba gift-basale pro-teaseinhibitorer B, E, I og K, β-1-bungarotoxin B kæde (mindre), β-1-bungarotoxin B kæde (større), β-2-bungarotoxin B kæde, heste-inter-a- trypsininhibitor (aminosyrerne 1-57 og 58-123), svine-inter-a-trypsininhibitor (aminosyrerne 1-57 og 58-123), bovin inter-a-trypsininhibitor (aminosyrerne 1-57 og 58-123), og human α-1-mikroglobulin/inter-a-trypsininhibitor-precur-sor (aminosyrerne 227-283 og 284-352). 3. Antistof som har en bindingsspecificitet for et polypeptid omfattende en eller flere af de følgende regioner i TFI: (a) de N-terminale aminosyrer 29-55 eller 31-53 i renset moden TFI som vist i Fig. 3; (b) de C-terminale aminosyrer 265-304 i renset moden TFI som vist i Fig. 3; (c) et V8 protease plus trypsin-nedbrudt peptid af TFI med sekvensen af aminosyrerne 82-88 som vist i Fig. 3; (d) et V8 protease plus trypsin-nedbrudt peptid af TFI med sekvensen af aminosyrerne 153-166 som vist i Fig, 3; (e) aminosyrerne 54-104 eller 47-117 i Fig. 3, som danner Kunitz domæne 1 1 TFI; (f) aminosyrerne 125-175 eller 118-188 i Fig. 3, som danner Kunitz domæne 2 i TFI; og (g) aminosyrerne 217-267 eller 210-280 i Fig. 3, som danner Kunitz domæne 3 i TFI. 4. Sammensætning omfattende et antistof ifølge krav 1,2 eller 3 og et effektivt bærestof, fortyndingsmedium eller hjælpemiddel. 5. Sammensætning omfattende et antistof ifølge krav 1,2 eller 3 og en opløsning. 6. Antistof ifølge krav 1, 2 eller 3 som er et polyklonalt antistof. 7. Antistof ifølge krav 1,2 eller 3 som er renset på en TFI-peptid- kolonne. 8. Antistof ifølge krav 1, 2 eller 3 konjugeret til en immunoaffinitetsmatrix. 9. Antistof ifølge krav 8, hvor den nævnte immunoaffinitetsmatrix er "Sepharose® 4B". 10. Fremgangsmåde til anvendelse af en immunoaffinitetsmatrix ifølge krav 8 ellert 9 til at oprense et polypeptid fra et biologisk fluidum.