DK200401579A - Protein- eller glycoproteinfragment - Google Patents

Description

PATENTKRAV 1. Fragment af et protein eller af et glycoprotein indkodet af en Iben læseramme fra RNA-sekvensen fra LAVELI-virus og svarende til fig. 7A-7J eller af RNA-sekvensen fra UWMAL-vi-rus og svarende til fig. 8A-8I, hvilket fragment er et immunogent epitopbærende peptid, der genkendes fra antistoffer af LAS-patientsera. 2. Fragment af et protein eller af et glycoprotein ifølge krav 1, hvilket fragment er et im munogent peptid med UWMflL- eller LAVEL1-Env-sekvenser som beskrevet i fig. 3E-3F, i hvilket der er mindst én aminosyresubstitution ved én eller flere af stillingerne 8, 9, 90, 102, 131, 133, 140, 156, 172, 177, 179, 185, 188, 192, 198, 207, 209, 290, 305, 308, 323, 333, 335, 337, 341, 342, 353, 356, 359, 363, 404, 428, 440, 457, 461, 477, 483, 484, 486, 538, 555, 641, 652, 656, 660, 663, 694, 740, 733, 799, 854, 856, 862 og 875, i for hold til Env-sekvenserne fra UWBRU og LAVARV2, hvor de immunogene peptider binder til antistoffer fra LAS-patientsera. 3. Fragment af et protein eller af et glycoprotein ifølge krav 2, kendetegnet ved, at pepti-det omfatter mindst én af nedenstående konserverede sekvenser: stillinger 37-130, 211-289, 488-830, 490-620, 531-877 og 680-700 fra Env som vist i fig. 3E-3F. 4. Fragment af et protein eller af et glycoprotein ifølge et hvilket som helst af kravene 1-3 med en størrelse, der er mindre end 250 aminosyrerester eller mindre end 150 aminosy-rerester. 5. Fragment af et protein eller af et glycoprotein ifølge krav 4 med en størrelse, der ligger på mellem 5 og 150 aminosyrerester. 6. Poiypeptid omfattende aminosyresekvensen af et fragment af et protein eller af et glycoprotein ifølge et hvilket som helst af kravene 1-5. 7. Polypeptid ifølge krav 6, hvilket polypeptid er kovalent koblet til et fysiologisk acceptabelt og ikke-toksisk bærermolekyle for at forbedre dets in v/vo-immunogene karakter. 8. Polypeptid ifølge krav 6, hvilket polypeptid omfatter aminosyresekvensen fra p25-pepti-det, mellem resterne 138-385 i gag-proteinet fra LAVEU- eller LAVMAL-viruser, som beskrevet i fig. 3A. 9. Polypeptid ifølge krav 6, hvilket polypeptid omfatter aminosyresekvensen fra pl3-pepti-det, mellem resterne 385-519 i gag-proteinet fra LAVeL1- eller LAVMAL-viruser, som beskrevet i fig. 3A. 10. Polypeptid ifølge krav 6, hvilket polypeptid omfatter en specifik LAVEU-epitop og bindes til antistoffer fra LAS-patientsera, hvilken LAVELI-epitop ikke reagerer med antistoffer rettet mod specifikke epitoper af HIVBRU, HIVarv-2 °9 HIVMAL. 11. Polypeptid ifølge krav 6, hvilket polypeptid omfatter en specifik LAVEU-epitop og binder til antistoffer fra LAS-patientsera, hvilken LAVEU-epitop ikke reagerer med antistoffer rettet mod specifikke epitoper af HIVBru og HIVARV.2. 12. Polypeptid ifølge krav 6, hvilket polypeptid omfatter en specifik LAVMAL-epitop og binder til antistoffer fra LAS-patientsera, hvilken LAVMAL-epitop ikke reagerer med antistoffer rettet mod specifikke epitoper af HIVBRU, HIVarv,_2 og HIVEL]. 13. Polypeptid ifølge krav 6, hvilket polypeptid omfatter en specifik LAVMAL-epitop og binder til antistoffer fra LAS-patientsera, hvilken LAVMAL-epitop ikke reagerer med antistoffer rettet mod specifikke epitoper af HIVBRU og HIVarv_2. 14. Fragmenter eller polypeptider ifølge et hvilket som helst af kravene 1-13 dannet ved kemisk spaltning. 15. Fragmenter eller polypeptider ifølge et hvilket som helst af kravene 1-13 dannet ved ekspression af en rekombinant DNA. 16. Fragmenter eller polypeptider ifølge et hvilket som helst af kravene 1-13 dannet ved kemisk syntese. 17. Oligomerer af fragmenter eller polypeptider ifølge et hvilket som helst af kravene 1-13, især oligomerer fra 2 til 10 monomerer. 18. Nukleinsyre, der koder for et fragment af et protein eller af et glycoprotein ifølge et hvilket som helst af kravene 1-5. 19. Rekombinant DNA, der indkoder et polypeptid ifølge et hvilket som helst af kravene 6-13. 20. Rekombinant vektor omfattende en nukleinsyre eller en rekombinant DNA ifølge krav 18 eller 19. 21. Mikroorganismer transformeret med en vektor ifølge krav 20. 22. Celler transformeret med en vektor ifølge krav 20, især eukaryote celler. 23. Celler ifølge krav 22, hvilke celler er gærceller eller pattedyrceller, fortrinsvis lymfocytter. 24. Immunogene præparater omfattende mindst ét polypeptid eller fragment ifølge et hvilket som helst af kravene 1-13. 25. Fremgangsmåde til fremstilling af et epitopbærende polypeptid ifølge krav 1-13, hvilken fremgangsmåde omfatter: - indsættelse af en nukleinsyre, der koder for et epitopbærende polypeptid ifølge et hvilket som helst af kravene 1-13, i en vektor, hvilken nukleinsyre eksprimeres under regulering af en egnet promotor eller replikon; - transformering af en egnet vært med denne vektor; og - isolering og rensning af det således vundne epitopbærende polypeptid. 26. Fremgangsmåde ifølge krav 25, hvor det epitopbærende polypeptid isoleres og renses ved elektroforese. 27. Fremgangsmåde til fremstilling af antistoffer, der er specifikke for fragmenter af poly-peptider ifølge et hvilket som helst af kravene 1-13, hvilken fremgangsmåde omfatter: - kondensering af miltceller, der i forvejen er immuniseret med fragmenter eller polypeptider ifølge et hvilket som helst af kravene 1-13, med relevante myeloma-celler; - udvælgelse af de resulterende hybridoma-producerende antistoffer med specificitet for disse fragmenter eller polypeptider; og - isolering af disse antistoffer, der er specifikke for fragmenter eller polypeptider.