DK2201120T3 - GCSF-fusionsproteinsystemer, der er egnet til høj ekspression af peptider - Google Patents

GCSF-fusionsproteinsystemer, der er egnet til høj ekspression af peptider Download PDF

Info

Publication number
DK2201120T3
DK2201120T3 DK08852235.4T DK08852235T DK2201120T3 DK 2201120 T3 DK2201120 T3 DK 2201120T3 DK 08852235 T DK08852235 T DK 08852235T DK 2201120 T3 DK2201120 T3 DK 2201120T3
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
peptide
fusion
use according
gly
gcsf
Prior art date
Application number
DK08852235.4T
Other languages
English (en)
Inventor
Pankaj R Patel
Sanjay Bandyopadhyay
Sanjeev Kumar Mendiretta
Vibhor Saraswat
Arun Kumar Singh
Original Assignee
Cadila Healthcare Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Cadila Healthcare Ltd filed Critical Cadila Healthcare Ltd
Application granted granted Critical
Publication of DK2201120T3 publication Critical patent/DK2201120T3/da

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/62DNA sequences coding for fusion proteins
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/02Non-specific cardiovascular stimulants, e.g. drugs for syncope, antihypotensives
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/53Colony-stimulating factor [CSF]
    • C07K14/535Granulocyte CSF; Granulocyte-macrophage CSF
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575Hormones
    • C07K14/62Insulins
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575Hormones
    • C07K14/635Parathyroid hormone, i.e. parathormone; Parathyroid hormone-related peptides
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00Preparation of peptides or proteins
    • C12P21/02Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)

Claims (28)

1. Anvendelse af granulocytkolonistimulerende faktor (GCSF) til forøget ekspression af et peptid af interesse, hvor GCSF’en fusioneres med peptidet af interesse til at bevirke ekspression af dette i en E. coli-værtscelle.
2. Anvendelse ifølge krav 1, hvor GCSF’en danner et fusionsprodukt med peptidet.
3. Anvendelse ifølge krav 1 eller 2, hvor fusionsproduktkonstruktionen er repræsenteret af formlen fusionspartner-CS-fusionspeptid, hvor fusionspeptidet er et peptid af interesse, CS er et egnet spaltningssted, og fusionspartneren er GCSF.
4. Anvendelse ifølge krav 3, hvor CS enten findes i fusionspartneren eller fu-sionspeptidaminosyresekvenserne eller er en egnet linker.
5. Anvendelse ifølge et hvilket som helst af krav 2 til 4, som efter ekspressionen endvidere omfatter at isolere fusionsproduktet og at fraspalte GCSF-delen af fusionsproduktet til at give det ønskede peptid af interesse.
6. Anvendelse ifølge et hvilket som helst af de foregående krav, hvor fusionspartneren ved sin C-terminale ende er koblet med et peptid ved dettes N-termi-nale ende via et spaltningssted.
7. Anvendelse ifølge et hvilket som helst af de foregående krav, hvor peptidet er valgt blandt de peptider, der har en længde på fra 10 aminosyrer til 90 aminosyrer.
8. Anvendelse ifølge et hvilket som helst af de foregående krav, hvor peptidet er valgt blandt gruppen bestående af caltrin, calcitonin, insulin, angiotensin, vævsplasminogenaktivator, væksthormon, vækstfaktorer, væksthormonfrigi- vende faktorer, cytokiner, erythropoietin, interferoner, interleukiner, oxytocin, vasopressin, ACTH, kollagenbindende protein, parathyreoideahormon, glucagon-lignende peptid, glucagon, proinsulin, tumornekrosefaktor, stof P, hjernenatriure-tisk peptid, individuelle tunge og lette antistofkæder, peptidantibiotika, fuzeon, octreotid, somatostatin og egnede varianter af disse peptider.
9. Anvendelse ifølge et hvilket som helst af de foregående krav, hvor fusionsproduktkonstruktionen er klonet i en egnet ekspressionsvektor.
10. Anvendelse ifølge krav 9, hvor fusionsproduktkonstruktionen kodes i en egnet ekspressionsvektor, som er valgt blandt dem, der kan udtrykke fusionsproduktet i E. coli.
11. Anvendelse ifølge et hvilket som helst af de foregående krav, hvor peptidet er valgt blandt parathyreoideahormon (PTH) (1-34), angiotensin og proinsulin.
12. Anvendelse ifølge et hvilket som helst af de foregående krav, hvor peptidet er PTH (1 -34) af sekvens ID No 6 og sekvens ID No 7.
13. Anvendelse ifølge krav 11 eller 12, hvor peptidet PTH (1-34) udtrykkes af ekspressionsvektor pET27B-GCSF-PTH, som er deponeret under MTCC tilgangsnummer 5425.
14. Anvendelse ifølge et hvilket som helst af krav 1 til 11, hvor peptidet er proinsulin af sekvens ID No 12 og 13.
15. Anvendelse ifølge krav 14, hvor peptidet proinsulin udtrykkes af ekspressionsvektor pET27B-GCSF-proinsulin, som er deponeret under MTCC tilgangsnummer 5424.
16. Anvendelse ifølge et hvilket som helst af krav 1 til 11, hvor peptidet er an- giotensin af sekvens ID No 16 og 17.
17. Anvendelse ifølge krav 16, hvor peptidet angiotensin udtrykkes af ekspressionsvektor pET27B-GCSF-angiotensin, som er ekspressionsvektoren pET27B, i hvilken der er indført den GCSF-angiotensin-fusionsproduktkodende sekvens, som er angivet i sekvens ID No 16 og 17.
18. Anvendelse ifølge et hvilket som helst af krav 1 til 17, hvor spaltningsstedet er et enzymatisk eller kemisk spaltningssted.
19. Anvendelse ifølge krav 18, hvor spaltningsstedet er et kemisk spaltningssted.
20. Anvendelse ifølge krav 18, hvor spaltningsstedet er et enzymatisk spaltningssted.
21. Anvendelse ifølge krav 18 eller 19, hvor spaltningsstederne er de, som kan spaltes af kemikalier, der er valgt blandt cynogenbromid, 2-(2-nitrophenyl-sulphenyl)-methyl-3’-bromindolenin, BNPS-skatol, N-bromsuccinamid, O-iodos-benzoesyre, HBr/DMSO, NTCB, natriummetal i flydende ammoniak, hydroxyl-amin eller fortyndede syrer.
22. Anvendelse ifølge krav 18 eller 21, hvor kemikaliet er cynogenbromid.
23. Anvendelse ifølge krav 18 eller 20, hvor de enzymatiske spaltningssteder er de, der genkendes af enterokinase, trypsin, chymotrypsin, elastase, pepsin, papain, subtilisin, thermolysin, V8 protease, endoproteinase Arg C (submaxillaris protease), clostripain, thrombin, collagenase, lysobacter enzymogenes (Lys C), mysobacter AI-1 protease eller faktor Xa.
24. Anvendelse ifølge krav 23, hvor enzymet er enterokinase.
25. Anvendelse ifølge et hvilket som helst af de foregående krav, som endvidere omfatter trinene: a) at klone genet, der koder fusionsproduktkonstruktionen, i en egnet ekspressionsvektor; b) at omdanne egnede værtsceller med den ovennævnte ekspressionsvektor; c) at udtrykke det ønskede peptid som et fusionsprotein i E. coli-værtsceller; d) at bryde værtscellerne og indsamle fusionsproteinet som inklusionslegemer; e) at separere fusionsproteinet, der indeholder inklusionslegemer, fra andre værtskomponenter; f) at solubilisere fusionsproteinet med et egnet denatureringsmiddel; g) at spalte spaltningsstedet med et egnet enzym eller kemikalie til frigivelse af fusionspeptidet; og h) at oprense fusionspeptidet fra reaktionsblandingen.
26. Anvendelse ifølge krav 1, hvor GCSF-fusionspartneren kodes af nucleotid-sekvensen, der er angivet i sekvens ID No 1 og 2.
27. Fusionsprodukt, der udtrykkes ved processen ifølge et hvilket som helst af de foregående krav, hvor fusionsproduktet har formlen fusionspartner-CS-fusionspeptid hvor fusionspeptidet er et peptid af interesse, CS er et egnet spaltningssted, og fusionspartneren er GCSF, og hvor peptidet er valgt blandt parathyreoideahor-mon (PTH) (1-34), angiotensin og proinsulin.
28. Ekspressionsvektor, der er valgt blandt pET27B-GCSF-PTH, som er deponeret under MTCC tilgangsnummer 5425, pET27B-GCSF-proinsuin, som er deponeret under MTCC tilgangsnummer 5424, og pET27B-GCSF-angiotensin, der er en ekspressionsvektor pET27B, i hvilket der er indført en GCSF-angioten- sionfusionsproteinkodende sekvens, som er angivet i sekvens ID No 16 og 17.
DK08852235.4T 2007-09-21 2008-09-22 GCSF-fusionsproteinsystemer, der er egnet til høj ekspression af peptider DK2201120T3 (da)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
IN1848MU2007 2007-09-21
PCT/IN2008/000599 WO2009066320A2 (en) 2007-09-21 2008-09-22 Fusion protein systems suitable for high expression of peptides

Publications (1)

Publication Number Publication Date
DK2201120T3 true DK2201120T3 (da) 2014-03-17

Family

ID=40667943

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK08852235.4T DK2201120T3 (da) 2007-09-21 2008-09-22 GCSF-fusionsproteinsystemer, der er egnet til høj ekspression af peptider

Country Status (7)

Country Link
US (1) US8507221B2 (da)
EP (2) EP2201120B1 (da)
JP (1) JP5368450B2 (da)
AU (1) AU2008327513B2 (da)
DK (1) DK2201120T3 (da)
PL (1) PL2201120T3 (da)
WO (1) WO2009066320A2 (da)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2499255A4 (en) * 2009-11-09 2013-06-19 Univ Colorado Regents EFFICIENT PRODUCTION OF PEPTIDES
WO2018152371A1 (en) * 2017-02-15 2018-08-23 Fred Hutchinson Cancer Research Center In vivo gene therapy for immune deficiencies
CN106967663B (zh) * 2017-05-06 2020-08-14 中国海洋大学 一种用于农作物病害防治的重组菌株
EP3630807B1 (en) 2017-05-25 2025-08-13 Leidos, Inc. Pd-1 and ctla-4 dual inhibitor peptides
WO2019130344A1 (en) * 2017-12-27 2019-07-04 Council Of Scientific And Industrial Research A polypeptide exhibiting granulocyte-colony stimulating factor activity
WO2019143193A1 (ko) 2018-01-19 2019-07-25 주식회사 펩진 재조합 폴리펩타이드 생산용 n-말단 융합 파트너 및 이를 이용하여 재조합 폴리 펩타이드를 생산하는방법
JP7606471B2 (ja) 2019-05-22 2024-12-25 レイドス, インコーポレイテッド Lag3結合ペプチド
RU2728611C1 (ru) * 2019-05-24 2020-07-30 Закрытое акционерное общество "ФАРМ-ХОЛДИНГ" РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pF265, КОДИРУЮЩАЯ ГИБРИДНЫЙ ПОЛИПЕПТИД, СОДЕРЖАЩИЙ ПРОИНСУЛИН ЧЕЛОВЕКА, И ШТАММ БАКТЕРИЙ Escherichia coli - ПРОДУЦЕНТ ГИБРИДНОГО ПОЛИПЕПТИДА, СОДЕРЖАЩЕГО ПРОИНСУЛИН ЧЕЛОВЕКА
US11578102B2 (en) 2020-07-31 2023-02-14 Leidos, Inc. LAG3 binding peptides
CN116731126B (zh) * 2023-01-30 2024-02-23 态创生物科技(广州)有限公司 内含肽ChiATP、内含肽ChiATP-二肽-2融合蛋白及二肽-2的表达方法

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NZ199391A (en) 1981-01-02 1985-12-13 Genentech Inc Chimeric polypeptides comprising a proinsulin sequence,and preparation by recombinant dna technique;production of human insulin
DE3526995A1 (de) 1985-07-27 1987-02-05 Hoechst Ag Fusionsproteine, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung
US5223404A (en) 1988-01-20 1993-06-29 Sunstar Kabushiki Kaisha Composition for testing periodontal diseases
JP3531947B2 (ja) 1991-08-19 2004-05-31 第一サントリーファーマ株式会社 ペプチドの製造方法
US5738849A (en) * 1992-11-24 1998-04-14 G. D. Searle & Co. Interleukin-3 (IL-3) variant fusion proteins, their recombinant production, and therapeutic compositions comprising them
KR100230578B1 (ko) 1997-07-25 1999-12-01 허영섭 포스포리불로키나제를 융합파트너로 이용하는 재조합 인간 부갑상선호르몬의 발현벡터
WO2007091250A2 (en) 2006-02-06 2007-08-16 The Medical Research And Infrastructure Fund Of The Tel-Aviv Sourasky Medical Center Enzyme replacement therapy for treating lysosomal storage diseases
AU2007224331B2 (en) 2006-03-06 2011-05-26 Cadila Healthcare Limited Process for preparing human G-CSF

Also Published As

Publication number Publication date
JP2010539898A (ja) 2010-12-24
EP2201120A2 (en) 2010-06-30
WO2009066320A2 (en) 2009-05-28
US20120142891A1 (en) 2012-06-07
WO2009066320A3 (en) 2009-09-24
AU2008327513B2 (en) 2012-05-03
US8507221B2 (en) 2013-08-13
AU2008327513A2 (en) 2010-06-17
PL2201120T3 (pl) 2014-05-30
JP5368450B2 (ja) 2013-12-18
EP2201120B1 (en) 2013-12-25
EP2522728A1 (en) 2012-11-14
AU2008327513A1 (en) 2009-05-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2201120B1 (en) Gcsf fusion protein systems suitable for high expression of peptides
CN110305223B (zh) 重组串联融合蛋白制备目标多肽的方法
US9951368B2 (en) Methods of DNA constructs for high yield production of polypeptides
EP2986633B1 (en) Methods for the expression of peptides and proteins
Satakarni et al. Production of recombinant peptides as fusions with SUMO
KR20090125047A (ko) 증대된 단백질 발현 및 정제를 위한 방법 및 조성물
JP2020513834A (ja) ペプチドの発現および大規模生産
JP5347255B2 (ja) 組換え蛋白質の可溶性蛋白質としての製造方法
CN101172996A (zh) 用于多肽融合表达的连接肽及多肽融合表达方法
CA2485837A1 (en) Methods and dna constructs for high yield production of polypeptides
US8080387B2 (en) Method for preparing soluble and active recombinant proteins usins PDI as a fusion partner
KR100368073B1 (ko) 융합파트너를 이용한 재조합 단백질의 제조방법
Park et al. Optimization of the hydroxylamine cleavage of an expressed fusion protein to produce a recombinant antimicrobial peptide
RU2728611C1 (ru) РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pF265, КОДИРУЮЩАЯ ГИБРИДНЫЙ ПОЛИПЕПТИД, СОДЕРЖАЩИЙ ПРОИНСУЛИН ЧЕЛОВЕКА, И ШТАММ БАКТЕРИЙ Escherichia coli - ПРОДУЦЕНТ ГИБРИДНОГО ПОЛИПЕПТИДА, СОДЕРЖАЩЕГО ПРОИНСУЛИН ЧЕЛОВЕКА
JP2007037498A (ja) タンパク質を製造する方法
WO2002046405A1 (fr) Procede de production de rfrp
JP2000228991A (ja) アペリンの製造法
JP2002325585A (ja) Rfrpの製造法
JP2003009867A (ja) Gpr8に対するリガンドポリペプチドの製造法
JPWO2000036122A1 (ja) アペリンの製造法
HK1182132A (en) Prokaryotic expression construct