EA030583B1 - Гербицидостойкие растения - Google Patents

Abstract

Изобретение предоставляет гербицидостойкие растения Brassica зимнего вида. Изобретение также предоставляет способы борьбы с ростом сорняков путем нанесения гербицида, к которому гербицидостойкие растения изобретения проявляют устойчивость. Растения изобретения экспрессируют фермент AHAS, устойчивый к действию одного или более ингибиторов фермента AHAS.

Description

настоящее изобретение предоставляет агрономическую продукцию, например масло из семян, жмых и др. В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная агрономическая продукция может быть пригодна для употребления животными или людьми. Агрономическая продукция может производиться из растений, включая семена указанных растений, обработанные или полученные способами, получившими подробное описание в данном документе.

Ферменты AHAS.

В различных вариантах осуществления изобретения могут использоваться зимние виды Brassica, содержащие как W574(At)X, так и S653(At)X в пластидных полипептидах AHASL. Они могут находиться в различных аллелях, например в различных геномах, где каждый содержит одну мутацию в соответствующем гене AHASL, либо они могут находиться в одном гене AHASL в качестве аллели с двойной мутацией. В различных вариантах осуществления изобретения это могут быть W574(At)L и S653(At)N: первый из которых назвать мутацией "РМ2", а второй мутацией "РМ1". На фиг. 1 (SEQ ID NO: 1) и фиг. 3 (SEQ ID NO: 3) представлена частичная нуклеотидная последовательность и частичная аминокислотная последовательность, соответственно, для мутации РМ2 в В. napus. На фиг. 2 (SEQ ID NO: 2) и фиг. 4 SEQ ID NO: 4) представлена частичная нуклеотидная последовательность и частичная аминокислотная последовательность, соответственно, для мутации РМ1 в В. napus. На фиг. 5 (SEQ ID NO: 5) и фиг. 6 представлена вторая нуклеотидная последовательность и вторая аминокислотная последовательность, соответственно, для мутации РМ2, например, последовательности РМ2, введенной в В. juncea из В. napus.

Зимние виды Brassica, указанные в данном документе, могут представлять собой разновидности, полученные посредством межродового скрещивания, например, разновидности с естественным опылением или гибриды, например гибриды F1.

Несмотря на то что характеристики трансгенного или нетрансгенного мутанта AHAS могут использоваться в данном изобретении, в зимних видах Brassica, в различных вариантах осуществления изобретения, данная характеристика или характеристики могут быть нетрансгенными, т.е. могут получены с помощью процесса, за исключением технологий рекомбинантных ДНК, включающего мутагенез, генопластику и/или изоляцию растений, являющихся спонтанными мутантами. В данной области знаний известно большое количество техник мутагенеза, которые могут включать применение мутагенных химических агентов или облучение семян, частей растений или выращенных клеток растения; либо, или в дополнение, выращивание клеток растения или условий для выращивания клеток растения, что может повысить частоту появления или накопления спонтанных мутаций. Технологии генопластики могут включать стратегии направленной мутации, такие как введение в ядро клетки растения олигонуклеотидов, способствующих нуклеотидному замещению системы исправления ошибок спаривания оснований.

Обратите внимание, что в ферментах AHAS существует два участка мутации, которые подвержены мутациям, что способствует значительному развитию устойчивости к различным SU. Они обе происходят на позициях Р 197(At) и W574(At).

В различных вариантах осуществления изобретения, WOSR и другие зимние виды Brassica могут содержать одну подобную мутацию в пластидном(ых) AHASL; в дополнение к одной или больше мутациям в том же или другом пластидном гене AHASL, который может быть выбран на участках, где мутации способны придавать устойчивость к одному или больше ингибитору AHAS, к данным участкам относятся, например, G121(At), A122(At), M124(At), R142(At), V196(At), R199(At), T203(At), A205(At), F206(At), K256(At), M351(At), H352(At), R373(At), D375(At), D376(At), R377(At), M570(At), V571(At), F578(At), S653(At) и G654(At).

Поэтому в некоторых вариантах осуществления изобретения эффективные согласно данному документу WOSR и другие зимние виды Brassica могут содержать одну мутацию SU-HT в пластидном(ых) AHASL. В различных вариантах осуществления изобретения эффективное согласно данному документу растение может содержать более одной устойчивой к гербициду мутации в совокупности пластидных AHASL. В различных вариантах осуществления изобретения они могут содержаться в различных генах AHASL с одной мутацией.

В целом, WOSR или другой эффективный вид Brassica может содержать до одного выразимого пластидного гена AHASL, кодирующего мутацию на позиции P197(At) или W574(At), независимо от того, кодирует ли ген AHASL другую устойчивую к ингибитору AHAS мутацию(и) [т.е. мутации, кроме дополнительной мутации на позиции P197(At) или W574(At)], независимо от того, представлен ли ген одной аллелью, например гетерозиготной, или двумя аллелями, например гомозиготными. Такой WOSR или другой вид Brassica не содержит более одного пластидного гена AHASL, кодирующего мутацию, выбранную из мутаций, которые находятся на позициях P197(At) или W574(At) геноме А.

В случае, когда WOSR или другой зимний вид Brassica содержит выразимый пластидный ген AHASL, который кодирует мутацию на позиции P197(At) или W574(At) в аллели генома A Brassica, отсутствует необходимость в дополнительной мутации в гене AHASL. Подобные варианты осуществления изобретения не включают зимние виды В. oleracea (СС), В. nigra (ВВ), В. carinata (ВВСС) и Raphanobras- 7 030583

sica var. "rabbage" (RRCC), в котором отсутствует геном А Brassica.

Как указано в данном документе, растения, эффективные в различных вариантах осуществления изобретения, содержат один или больше мутантный ген AHASL, где по меньшей мере одна мутация придает гербицидную устойчивость к ферменту AHAS, частью которого является AHAS и таким образом придает гербицидную устойчивость растению, в котором находится. Подобный мутантный ген AHASL называется "геном HT-AHASL". В данном документе также указано, что растения, эффективные в различных вариантах осуществления данного изобретения, как ген HT-AHASL, ген SU-HT-AHASL, т.е., ген HT-AHASL, кодирующий мутацию, выбранную из Р197Х и W574X, при этом мутации Р197Х и W574X называются в данном документе сульфонилмочевина устойчивыми HT мутациями или мутациями "SUHT". Растения, указанные в данном документе, могут содержать только один подобный ген SU-HTAHASL, т.е. ген "моно-SU-HT-AHASL". Указанный ген моно-SU-HT-AHASL может находиться в геноме A Brassica. В соответствии с данным документом ген "моно-SU-HT-AHASL" относится к гену HTAHASL, который кодирует только одну мутацию SU-HT или только одну мутацию SU-HT в аллели указанного гена. Таким образом, ген "моно-SU-HT-AHASL" относится к гену HT-AHASL, который:

(1) кодирует;

(a) кодирует только одну из Р197Х или W574X, а также кодирует их гомозиготным или гемизиготным способом;

(b) кодирует только одну из Р197Х или W574X, а также кодирует ее в одной аллели и кодирует Р197Р дикого типа или остаток W574W, соответственно, в гомологичной аллели;

(c) две различные мутации Р197Х гетерозиготным способом, а остаток W574W дикого типа - гомозиготным;

(d) две различные мутации W574X гетерозиготным способом, а Р197Р дикого типа - гомозиготным;

или

(e) кодирует как (i) одну мутацию Р197Х, так и остаток W574W дикого типа в одной аллели, а также (ii) одну мутацию W574X и остаток Р197Р дикого типа в гомологической аллели; и

(2) дополнительно кодирует другую мутацию(и) НТ в соответствии с определением данного термина в данном документе.

В некоторых вариантах осуществления изобретения ген моно-SU-HT-AHASL не может кодировать другие мутации кроме других HT мутаций.

Понятие "гемизиготный", при использовании в данном документе в отношение закодированной "гемизиготно" мутации AHASL, относится к отношению между соответствующими положениями двух гомологических хромосом в геноме, где одно их двух положений занято (функционирующей) аллелью AHASL, которая содержит аминокислотный остаток (замещение) мутации, а другое местоположение занято либо нефункционирующей аллелью AHASL, либо вообще свободно, например, вторая аллель отсутствует или удалена. Обратите внимание, что гены "моно-SU-HT-AHASL", перечисленные в (1)(b)(1)(е), могут также называться "гетерозиготными-моно-SU-HT-AHASL" генами, т.е. так как они кодируют каждую мутацию SU-HT гетерозиготным способом.

В соответствии с данным документом растения Brassica в различных вариантах осуществления изобретения, могут содержать один гербицидостойкий ген AHASL (HT-AHASL), где только один из генов HT-AHASL растения кодирует сульфонилмочевины гербицидостойкую мутацию (SU-HT), выведенную из Р197Х и W574X, и представляет собой ген моно-SU-HT-AHASL, который может дополнительно кодировать другую мутацию(и) НТ, где указанный ген моно-SU-HT-AHASL расположен в геноме А указанного растения Brassica.

В дополнение к устойчивости к гербицидам, который ингибируют активность AHAS, растения настоящего изобретения могут также иметь устойчивость к гербицидам, действующим на другие физиологические процессы. Например, растения настоящего изобретения могут переносить ингибиторы ацетилСоА карбоксилаза (ACCase), такие как "dims" (например, циклоксидим, сетоксидим, клетодим или тепралоксидим), "fops" (например, клодинафоп, диклофоп, флуазифоп, галоксифоп или хизалофоп) и "dens" (например, пиноксаден); ингибиторы 5-энолпирувилшикимат-3-фосфат синтазы (EPSPS), такие как глифосат; ингибиторы протопорфириноген [IX] оксидазы (PPO), такие как сафлюфенацил; ингибиторы глютамин синтетазы, такие как глюфосинат. В дополнение к данным классам ингибиторов, растения настоящего изобретения могут также быть устойчивыми к гербицидам с другими способами действия, например, регуляторами роста ауксина (например, дикамба), ингибиторами пигмента хлорофилл/каротеноид, разрушителями клеточной оболочки, ингибиторами фотосинтеза, ингибиторами деления клетки, корневыми ингибиторами, выпущенными ингибиторами и их комбинациями. Подобные характеристики устойчивости могут выражаться, например, в качестве мутантных белков ACCase, мутантных белков EPSPS или белков мутантной глутаминсинтетазы; либо в качестве родной, выведенной путем родственного скрещивания или трансгенной арилоксиалканоат диоксигеназы (AAD или DHT), галоарилнитрилов (BXN), 2,2-дихлорпропионовой кислоты дегалогеназы (DEH), дикамбы монооксигеназа (DMO), глифосат-И-ацетилтрансферазы (GAT), глифосат декарбоксилазы (GDC), глифосатоксидоредуктазы (GOX), глутатиона-трансферазы (GST), фосфинотрицин ацетилтрансфазы (PAT или бар) или белки цитохрома Р450 (CYP450), имеющие гербицидопонижающую активность. Зимние виды Brassica можно

- 8 030583

также сочетать с другими характеристиками, включая, в том числе, пестицидные черты, такие как Bt Cry и другие белки с пестицидной активностью к жесткокрылым насекомым, чешуйчатокрылым, нематодам и другим вредителям; питательные или нутрицевтические характеристики, такие как изменённое содержание масла и другие известные в данной области знаний.

Настоящее изобретение также включает потомство растений изобретения, а также семена и клетки гербицидостойких растений данного изобретения. Настоящее изобретение также предоставляет способы производства семян с помощью способов, подробно описанных в данном документе, а также сбора семян гербицидостойких растений. Настоящее изобретение предоставляет семена Brassica, полученные с помощью способов, подробно описанных в данном документе.

Молекулы нуклеиновой кислоты.

Настоящее изобретение также включает молекулы нуклеиновой кислоты, которые кодируют все или часть вышеописанных белков AHASL. Молекулы нуклеиновой кислоты настоящего изобретения могут включать нуклеотидная последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая включает изменённую, или где возможно, неизмененную версию последовательностей, перечисленных в патентных документах в табл. 2, отличающихся тем, что полученная последовательность кодирует белок AHASL, содержащий одно или больше из следующего: аминокислота на позиции 197, кроме пролина, при этом аминокислота на позиции 574 это триптофан; либо аминокислота на позиции 574, кроме триптофана, при этом аминокислота на позиции 197 это пролин.

Настоящее изобретение также включает нуклеиновые кислоты, кодирующие rassica AHASL с одной или более другой HT мутацией. Такие AHASL могут также включать аминокислотные последовательности с одним или больше из следующего: аминокислота на позиции 197, кроме пролина, при этом аминокислота на позиции 574 это триптофан; либо аминокислота на позиции 574, кроме триптофана, при этом аминокислота на позиции 197 это пролин.

Молекула нуклеиновой кислоты настоящего изобретения может быть ДНК, полученной из геномной ДНК или кДНК, или РНК. Молекула нуклеиновой кислоты настоящего изобретения может быть естественного или искусственного происхождения. Молекула нуклеиновой кислоты настоящего изобретения может быть изолированной, рекомбинантной и/или мутировавшей.

Молекулы нуклеиновой кислоты настоящего изобретения может иметь некодирующие последовательности, которые могут быть или не быть транскрибированными. Некодирующие последовательности, которые могут быть включены в молекулы нуклеиновой кислоты настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются, 5' и 3' нетранслируемые области сигналов полиаденилирования и регуляторные последовательности, контролирующие генную экспрессию (например, промоторы). Молекулы нуклеиновой кислоты настоящего изобретения также включают последовательности, кодирующие транзитные пептиды, участки расщепления протеазы, участки ковалентной модификации и т.д. В одном варианте осуществления изобретения, молекулы нуклеиновой кислоты изобретения кодируют последовательность транзитного пептида хлоропласта в дополнение к последовательности, кодирующей фермент AHAS.

В другом варианте осуществления изобретения, молекулы нуклеиновой кислоты способны кодировать AHASL, имеющий по меньшей мере 50, 60, 70, 75, 80, 85, 90, 95% или больше идентичность последовательности для Р197Х или W574X AHASL, как описано выше, где белок, закодированный последовательностью, включает одно или более из следующего: аминокислота на позиции 197 кроме пролина, при этом аминокислота на позиции 574 это триптофан; или аминокислота на позиции 574 кроме триптофана, при этом аминокислота на позиции 197 это пролин.

В соответствии с данным документом "процент (%) идентичности последовательности" определяется как процентное содержание нуклеотидов или аминокислот в подходящей производной последовательности идентичной нуклеотидам или аминокислотам в объектной последовательности (или ее определенной частью), после выравнивания последовательностей и введения пробелов при необходимости достижения максимального процентного уровня идентичности последовательности, генерированной программой BLAST, которая доступна на http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi, при этом параметры поиска выставлены по умолчанию.

Настоящее изобретение также включает молекулы нуклеиновой кислоты, которые скрещиваются с молекулами нуклеиновой кислоты, кодирующей фермент AHAS изобретения, а также молекулы нуклеиновой кислоты, которые скрещиваются с реверсивным комплементом молекул нуклеиновой кислоты, кодирующей фермент AHAS изобретения. В другом варианте осуществления изобретения молекулы нуклеиновой кислоты включают молекулы нуклеиновой кислоты, которые гибридизируются с молекулой нуклеиновой кислоты, кодирующей Р197Х или W574X AHASL, как описано выше, где белок, закодированный последовательностью, включает одно или более из следующего: аминокислоту на позиции 197 кроме пролина, при этом аминокислота на позиции 574 это триптофан; или аминокислоту на позиции 574 кроме триптофана, при этом аминокислота на позиции 197 это пролин. Точность гибридизации можно контролировать температурой, ионной силой, pH а также наличием во время гибридизации или промывки денатурирующих агентов, таких как формамид. К жестким условиям, которые могут использоваться, относятся условия, определённые в Current Protocols in Molecular Biology, Vol. 1, Chap. 2.10, John Wiley & Sons, Publishers (1994) и Sambrook et al., Molecular Cloning, Cold Spring Harbor (1989), кото- 9 030583

рые представлены в данном документе, так как они относятся к обучению жестким условиям.

В одном варианте осуществления изобретения молекулы нуклеиновой кислоты изобретения включают олигонуклеотиды, которые могут использоваться в качестве гибридизационных зондов, праймеров секвенирования и/или праймеров ПЦР. Подобные олигонуклеотиды могут использоваться, например, для определения кодонной последовательности на определённой позиции в молекуле нуклеиновой кислоты, кодирующей фермент AHAS, например, с помощью аллельспецифической ПЦР. Подобные нуклеотиды могут иметь в длину от около 15 до около 30, от около 20 до около 30 или около 20-25 нуклеотидов.

Гербициды.

Гербицидные составы настоящего изобретения включают один или больше гербицид SU, выбранный из группы, включающей амидосульфурон, флупирсульфурон, форамсульфурон, имазосульфурон, йодсульфурон, мезосульфурон, никосульфурон, тифенсульфурон, а также трибенурон, их агрономически приемлемые соли и эфиры, а также их комбинации. В некоторых вариантах осуществления изобретения гербицидный состав не включает ничего кроме значительного количества SU. Дополнительно, гербицидные составы настоящего изобретения могут также содержать A.I., входящую в один или более дополнительных классов AHAS ингибиторных гербицидов, например имидазолинон гербициды и/или один или больше A.I. других классов, например агрономические фунгициды, бактерициды, альгициды, нематоциды, инсектициды и им подобные.

Каждая SU имеет свою рекомендованную дозу 1х. Размеры доз 1х для активных ингредиентов SU, эффективная в данном документе, указаны ниже; они также применимы к солям или их эфирам.

Таблица 3

Гербициды сульфонилмочевины и применяемые дозы

Сульфонилмочевина(ы)	1х (г/га)
Флупирсульфурон	10
Имазосульфурон	25
Тифенсульфурон	30
Трибенурон	30
Амидосульфурон	30
Форам сульфурон	35
Иодсульфурон	10
Мезосульфурон	7,5
Никосульфурон	30
Мезосульфурон + йодсульфурон (5:1 мас/мас)	14,4

Способы предвсходовой или предпосадочной борьбы с сорняками, эффективные в различных вариантах осуществления изобретения, используют >0,5х дозы применяемого SU в течение 30 дней перед прорастанием; в некоторых вариантах осуществления изобретения доза SU может составлять >0,6х, >0,7х, >0,8х, >0,9х, или >1х.

В дополнение, лишь у устойчивых к переноске WOSR отсутствует устойчивость, или является недостаточной, к послевсходовой обработке SU. Способы предвсходовой или предпосадочной борьбы с сорняками, эффективные в различных вариантах осуществления изобретения, используют >0,25х дозы применяемого SU; в некоторых вариантах осуществления изобретения доза SU может составлять >0,3х, >0,4х, >0,5х, >0,6х, >0,7х, >0,8х, >0,9х или >1х.

Селекционные способы для гербицидостойких зимних Brassica также могут применяться с использования данных параметров способа обработки, отличающегося тем, что в непосредственной близости от Brassica или от его места посадки нет сорняков.

Как в предвсходовых, так и послевсходовых способах борьбы с сорняками, способ может использовать дозы 1х SU без значительного повреждения растения; в некоторых вариантах осуществления изобретения применяемая доза SU может превышать 1х; в некоторых вариантах осуществления изобретения такая доза SU может составлять до 4х, однако обычно она составляет около 2,5х или менее, либо около 2х или менее. В случае использования комбинации активных ингредиентов SU, доза гербицида SU составляет, предпочтительно, в пределах от >0,5х до 4х или от 0,25х до 4х. Например, комбинация 5:1 мас./мас. мезосульфурона и йодсульфурона с дозой 1х 18 г/га, при использовании в данном количестве, предоставляет 15 г/га и 3 г/га A.I., соответственно: что приблизительно составляет 2х и 0,3х, а общая доза обработки SU составит около 2.3х.

Гербицидные составы настоящего изобретения включают гербицид, выбранный из группы, вклю- 10 030583

чающей амидосульфурон, флупирсульфурон, форамсульфурон, имазосульфурон, йодсульфурон, мезосульфурон, никосульфурон, тифенсульфурон, а также трибенурон, их агрономически приемлемые соли и эфиры, а также их комбинации и дополнительно другие агрономические A.I., например один или больше имидазолинон, выбранный из группы, включающей имазамокс, имазетапир, имазапир, имазапик, их комбинации и агрономически приемлемые соли и эфиры, которые могут применяться в агрономически допустимых формах. Например, они могут иметь форму готовых к распылению водных растворов, порошков, суспензий; концентрированных или высококонцентрированных водных, масляных или других растворов, суспензий или диспергаторов; эмульсий, масляных диспергаторов, мазей, гранул или иметь другую распространенную форму. Гербицидные составы могут наноситься такими известными в данной области знаний способами, как обрызгивание, пульверизация, распыление, разбрасывание, поливка, обработка семян или введение примеси вместе с семенами. Выбор способов обработки зависит от цели; в любом случае они должны обеспечить наилучшее распределение активных ингредиентов согласно данному изобретению.

В случае, когда необязательный A.I. включает ингибитора AHAS, он может быть выбран из следующих:

(1) имидазолиноны, т.е. имазамокс, имазетапир, имазапир, имазапик, имазакин и имазаметабенз, предпочтительно имазамокс, имазетапир, имазапир и имазапик, предпочтительно имазамокс;

(2) пиримидинилбензоаты, т.е. включающие пиримидинилоксибензоаты (например, биспирибак, пириминобак и пирибензоксим) и пиримидинилтиобензоаты (например, пиритиобак и пирифталид); и

(3) сульфонамиды, т.е. включающие сульфониламинокарбонилтриазолины (например, флукарбоназа и пропоксикарбоназа) и триазолопиримидины (например, клоранзулам, диклозулам, флоразулам, флуметзулам, метозулам и пеноксзулам). Сюда также относятся вышеуказанные агрономически допустимые соли и эфиры, а также их комбинации.

В случае, когда необязательный A.I. включает гербицид из другого класса, к которому обычно восприимчивы зимние виды Brassica, используемый зимний Brassica выбирается из растений, имеющих устойчивость к подобным гербицидам. Подобные дальнейшие характеристики устойчивости могут придаваться растению любым известным в данной области знаний способом, например, с помощью технологии традиционного разведения для получения устойчивости гена путем гибридизации или интрогрессии, а также с помощью мутагенеза, генопластики и/или трансформации. Можно сказать, что такие растения имеют "введенные" характеристики.

К сульфонилмочевина гербицидным активным ингредиентам, эффективным в различных вариантах осуществления изобретения, относятся активные ингредиенты, перечисленные в табл. 4.

Таблица 4

Сульфонилмочевина гербицидные активные ингредиенты

SU A.I.	Примеры соли и эфира	«Другие SU»
амидосульфурон		—
азимсульфурон		другое
бенсульфурон	бенсульфурон-метил	другое
хлоримурон	хлоримурон-этил	другое
хлорсульфурон		другое
циносульфурон		другое
циклосульфамурон		другое
этаметсульфурон	этаметсульфурон-метил	другое
этоксисульфурон		другое
флазасульфурон		другое
флуцетосульфурон		другое
флупирсульфурон	флупирсульфурон-метил-натрий	—
форамсульфурон		—
галосульфурон	галосульфурон-метил	другое
имазосульфурон		—
йодсульфурон	йодсульфурон-метил-натрий	—
мезосульфурон	мезосульфурон-метил	—
метазосульфурон		другое
метсульфурон	метсульфурон-метил	другое

- 11 030583

никосульфурон		—
ортосульфамурон		другое
оксасульфурон		другое
примисульфурон	примисульфурон-метил	другое
пропирисульфурон		другое
просульфурон		другое
пиразосульфурон	пиразо сул ьфурон -этил	другое
римсульфурон		другое
сульфометурон	сульфометурон-метил	другое
сульфосульфурон		другое
ти фен сул ь фур он	тифенсульфурон-метил	—
триасульфурон		другое
трибенурон	трибенурон-метил	—
трифлоксисульфурон	трифлоксисульфурон-натрий	другое
три флусуль фурон	трифлусульфурон-метил	другое
тритосульфурон		другое

В некоторых вариантах осуществления изобретения гербицидный состав, который содержит SU, выбранную из группы, включающей амидосульфурон, флупирсульфурон, форамсульфурон, имазосульфурон, йодсульфурон, мезосульфурон, никосульфурон, тифенсульфурон и трибенурон, их агрономически приемлемые соли и эфиры, а также их комбинации, может дополнительно содержаться SU, обычно не более 50% состава, одного или более другого SU. Как указано в данном документе, "другая SU" относится к SU A.I., перечисленным в пункте "Другое" в табл. 4, в нем также перечислены агрономически приемлемые соли и эфиры, а также их комбинации.

В некоторых вариантах осуществления изобретения гербицидный состав может содержать 50% или менее массы (в %) SU, либо около или менее 45, 40, 35, 30, 25, 20, 15, 10, 5, 3, 2 или 1 мас.%; либо в диапазоне: 0 мас.% или более SU в составе, или либо около или более 1, 2, 3, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40% или 45 мас.%.

В некоторых вариантах осуществления изобретения количество другого SU в гербицидном составе может быть "значительным", т.е. в данном случае менее 50 мас.% SU в составе, например от около 35 мас.% до менее 50 мас.%

В некоторых вариантах осуществления изобретения количество другого SU в гербицидном составе может быть "умеренным", т.е. в данном случае менее 35 мас.% SU в составе, например от около 20 мас.% до менее 35 мас.%

В некоторых вариантах осуществления изобретения количество другого SU в гербицидном составе может быть "небольшим", т.е. в данном случае менее 20 мас.% SU в составе, например от около 10 мас.% до менее 20 мас.%

В некоторых вариантах осуществления изобретения количество другого SU в гербицидном составе может быть "несущественным", т.е. в данном случае менее 10 мас.% SU в составе, например от около 5 мас.% до менее 10 мас.%

В некоторых вариантах осуществления изобретения количество другого SU в гербицидном составе может быть "минимальным", т.е. в данном случае менее 5 мас.% SU в составе, например от около 3 мас.% до менее 5 мас.%

В некоторых вариантах осуществления изобретения количество другого SU в гербицидном составе может быть более, чем "значительным", т.е. в данном случае менее 3 мас.% SU в составе, например от около 1 мас.% до менее 3 мас.%

В некоторых вариантах осуществления изобретения количество другого SU в гербицидном составе может быть не более, чем "ничтожным", т.е. в данном случае около или менее 1 мас.% SU в составе, например от около 1 мас.% до более 0 мас.%

В некоторых вариантах осуществления изобретения количество другого SU в гербицидном составе может быть 0 мас.% или около 0 мас.%, например от около 0,5 мас.% до 0 мас.%.

В вышеперечисленных диапазонах количество другого SU в гербицидном составе, в значении, котором термин "около" недопустим, данный перечень должен читаться без данного термина. В любой другой части описания, в которой используется термин "около", описание должно читаться без указанного термина, в значении, когда термин "около" недопустим.

Дополнительно, A.I. другого гербицидного класса включают ингибиторы ACCase, ингибиторы PPO, ингибиторы EPSPS, ингибиторы глютамин синтетазы, ингибиторы р-гидроксифенилпируватдиокси- 12 030583

геназы (4-HPD). Дополнительно, к A.I. других видов относятся, в том числе, такие фунгициды как стробилурины, например пираклостробин; такие инсектициды как нематоциды, лепидоптерициды, колеоптерициды; моллускициды и другие, известные в данной области знаний.

Гербицидные составы включают гербицид, выбранный из группы, включающей амидосульфурон, флупирсульфурон, форамсульфурон, имазосульфурон, йодсульфурон, мезосульфурон, никосульфурон, тифенсульфурон, а также трибенурон, их агрономически приемлемые соли и эфиры, а также их комбинации и дополнительно другие агрономические A.I., например один или больше имидазолинон, выбранный из группы, включающей имазамокс, имазетапир, имазапир, имазапик, их комбинации и агрономически приемлемые соли и эфиры, которые могут также содержать вспомогательные вещества, которые обычно входят в состав защитных агентов культуры.

К примерам вспомогательных веществ, входящих в состав защитных агентов, относятся инертные вспомогательные вещества, твердые носители, ПАВ (такие как диспергаторы, защитные коллоиды, эмульгаторы, смачивающие агенты и агенты, придающие липкость), органические и неорганические загустители, пенетранты (такие как усиливающие проникновение кремнийорганические ПАВ или кислотные сульфат хелаты, например, СТ-301™ Cheltec, Inc.), антидоты, бактерициды, антифризы, противовспениватели, красители и связывающие вещества. Композиции гербицидных составов, эффективных в данном изобретении, могут быть приготовлены по любому из способов, известных в данной области знаний.

К загустителям (т.е. соединениям, придающим составу измененные свойства текучести, т.е. высокую вязкость в состоянии покоя и низкую вязкость в движении) относятся полисахариды, такие как ксантановая камедь (Kelzan® Kelco), ксантановая смола® 23 (Rhone Poulenc) или вигум (R.T. Vanderbilt), а также органические и неорганические листовые силикаты, такие как Attaclay® (Engelhardt).

К примерам противовспенивателей относятся силиконовые эмульсии (такие как, например, Silikon® SRE, Wacker или Rhodorsil® Rhodia), длинноцепочечные спирты, жирные кислоты, соли жирных кислот, соединения органофлуорина и их смеси.

Бактерициды могут добавляться для стабилизации водных гербицидных составов. Примеры бактерицидов включают бактерициды на основе дихлорофена и бензилового спирта полуформаля (Proxel® ICI или Acticide® RS Thor Chemie и Kathon® МК Rohm & Haas), а также производные изотиазолинона, такие как алкил изотиазолиноны и бензизотиазолиноны (Acticide MBS Thor Chemie).

К примерам антифризов относятся этиленгликоль, пропиленгликоль, мочевина или глицерин.

К примерам красителей относятся представители классов красителей, такие как малорастворимые пигменты и растворимые красители. Некоторые определённые примеры красителей включают красители, известные под названиями Rhodamin В, C.I. Pigment Red 112 и C.I. Solvent Red 1, и также синий пигмент 15:4, синий пигмент 15:3, синий пигмент 15:2, синий пигмент 15:1, синий пигмент 80, желтый пигмент 1, желтый пигмент 13, красный пигмент 112, красный пигмент 48:2, красный пигмент 48:1, красный пигмент 57:1, красный пигмент 53:1, оранжевый пигмент 43, оранжевый пигмент 34, оранжевый пигмент 5, зеленый пигмент 36, зеленый пигмент 7, белый пигмент 6, коричневый пигмент 25, базовый фиолетовый 10, базовый фиолетовый 49, кислотный красный 51, кислотный красный 52, кислотный красный 14, кислотный синий 9, кислотный желтый 23, базовый красный 10, базовый красный 108.

К примерам связывающих веществ относятся поливинилпирролидон, поливинилацетат, поливиниловый спирт и тилоза.

Вспомогательные инертные вещества включают доли минерального масла с точкой кипения от средней до высокой, такие как керосин и дизельное топливо, кроме того каменноугольные масла и масла растительного и животного происхождения, алифатические, циклические и ароматические гидрокарбоны, например, керосин, тетрагидронафталин, алкилированные нафталины и их производные, алкилированные бензолы и их производные, спирты, такие как метанол, этанол, пропанол, бутанол и циклогексанол, кетоны, такие как циклогексанон или сильные полярные растворители, например, амины, такие как N-метилпирролидон и вода.

К подходящим носителям относятся жидкие и твердые носители.

К жидким носителям относятся, например, неводные растворители, такие как циклические и ароматические гидрокарбоны, например, керосин, тетрагидронафталин, алкилированные нафталины и их производные, алкилированные бензолы и их производные, спирты, такие как метанол, этанол, пропанол, бутанол и циклогексанол, кетоны, такие как циклогексанон или сильные полярные растворители, например, амины, такие как N-метилпирролидон и вода.

К твердым носителям относятся, например, минеральные почвы, такие как кремний, кремнегель, силикаты, тальк, каолин, известняк, известь, мел, колода, лёсс, глина, доломит, диатомовая земля, сульфат кальция, сульфат магния и оксид магния, грунтовые синтетические материалы, удобрения, такие как сульфат аммония, фосфат аммония, нитрат аммония и мочевины, а также продукты растительного происхождения, такие как хлебная мука, древесная кора, древесная мука и мука из ореховой скорлупы, целлюлозные порошки или другие твердые носители.

К подходящим ПАВ (адъювантам, смачивающим агентам, агентам, придающим липкость, диспер- 13 030583

гаторам и эмульгаторам) относятся соли щелочных металлов, соли щёлочно-земельных металлов и соли аммония ароматических сульфокислот, например лигносульфоновые кислоты (например, типа Borrespers, Borregaard), фенолсульфокислоты, нафталинсульфокислота (типов Morwet, Akzo Nobel) и дибутил нафталинсульфокислота (типов Nekal, BASF AG) и жирных кислот, алкил- и алкиларилсульфонаты, алкил сульфаты, аурил эфир сульфаты и сульфаты жирных спиртов, соли сульфатных гекса-, гепта- и октадеканолов, а также жирных спиртов гликоль эфиров, конденсаты сульфированного нафталина и его производные с формальдегидом, конденсаты нафталина или нафталинсульфокислот с фенолом и формальдегидом, полиоксиэтиленовый октилфеноловый эфир, этоксилированный изооктил-, октил- или нонилфенол, алкилфенил или трибутилфенил полигликолевый эфир, алкиларил полиэфирные спирты, изотридекиловый спирт, жирный спирт/этиленоксид конденсаты, этоксилированное касторовое масло, полиоксиэтиленовый алкиловые эфиры или полиоксипропиленовые алкиловые эфиры, лауриловый спирт полигликолевый эфир ацетат, сложные эфиры сорбита, лигносульфитные щелоки и белки, денатурированные белки, полисахариды (например, метилцеллюлоза), гидрофобномодифицированный крахмал, поливиниловый спирт (типов Mowiol, Clariant), поликарбоксилаты (BASF AG, Sokalan), полиалкоксилаты, поливиниламины (BASF AG, Lupamine), полиэтиленимин (BASF AG, Lupasol), поливинилпирролидон и их кополимеры.

Порошки, материалы для передачи и пылевидные препараты можно приготовить путем смешивания или одновременного измельчения активных ингредиентов с твердым носителем.

Гранулы, например имеющие оболочку гранулы, пропитанные гранулы и однородные гранулы можно получить путем связывания активных ингредиентов с твердыми носителями.

Водные формы можно получить из концентратов эмульсии, суспензий, паст, смачиваемых порошков или диспергируемых в воде гранул при добавлении воды.

Для получения эмульсий, паст или масляных диспергаторов гербицидные составы включают гербицид, выбранный из группы, включающей амидосульфурон, флупирсульфурон, форамсульфурон, имазосульфурон, йодсульфурон, мезосульфурон, никосульфурон, тифенсульфурон, а также трибенурон, их агрономически приемлемые соли и эфиры, а также их комбинации и дополнительно другие агрономические A.I., например, один или больше имидазолинон, выбранный из группы, включающей имазамокс, имазетапир, имазапир, имазапик, их комбинации и агрономически приемлемые соли и эфиры как таковые, либо растворенные в масле или растворителе, могут гомогенезироваться в воде посредством смачивающего агента, агента, придающего липкость, диспергатора или эмульгатора. В качестве альтернативы, также существует возможность получения концентратов, включающих активное соединение, смачивающий агент, агент, придающий липкость, диспергатор или эмульгатор, при необходимости растворитель или масло, которые подходят для разбавления в воде.

Концентрации гербицида, выбранного из группы, включающей амидосульфурон, флупирсульфурон, форамсульфурон, имазосульфурон, йодсульфурон, мезосульфурон, никосульфурон, тифенсульфурон, а также трибенурон, их агрономически приемлемые соли и эфиры, а также их комбинации и дополнительно другие агрономические A.I., например один или больше имидазолинон, выбранный из группы, включающей имазамокс, имазетапир, имазапир, имазапик, их комбинации и агрономически приемлемые соли и эфиры в готовых формах (составах), могут иметь широкий диапазон значений. Обычно, составы содержат приблизительно от 0,001 до 98 мас.%, в частности от 0,1 до 95 мас.%, по меньшей мере одного активного ингредиента. Активные ингредиенты используются при чистоте от 90 до 100%, предпочтительно от 95 до 100% (согласно спектру ЯМР).

В составе гербицидов, выбранных из группы, включающей амидосульфурон, флупирсульфурон, форамсульфурон, имазосульфурон, йодсульфурон, мезосульфурон, никосульфурон, тифенсульфурон, а также трибенурон, их агрономически приемлемые соли и эфиры, а также их комбинации и дополнительно другие агрономические A.I., например один или больше имидазолинон, выбранный из группы, включающей имазамокс, имазетапир, имазапир, имазапик, их комбинации и агрономически приемлемые соли и эфиры активных ингредиентов, согласно настоящему изобретению, например гербициды, выбранные из группы, включающей амидосульфурон, флупирсульфурон, форамсульфурон, имазосульфурон, йодсульфурон, мезосульфурон, никосульфурон, тифенсульфурон, а также трибенурон, их агрономически приемлемые соли и эфиры, а также их комбинации и дополнительно другие агрономические A.I., например один или больше имидазолинон, выбранный из группы, включающей имазамокс, имазетапир, имазапир, имазапик, их комбинации и агрономически приемлемые соли и эфиры, присутствуют в суспензионном, эмульгированном или растворенном виде. Согласно настоящему изобретению состав может иметь форму водных растворов, порошков, суспензий, высококонцентрированных водных, масляных или других суспензий или диспергаторов, водных эмульсий, водных микроэмульсий, водных суспоэмульсий, масляных диспергаторов, паст, пылевидных препаратов, материалов для расширения или гранул.

Гербициды, выбранные из группы, включающей амидосульфурон, флупирсульфурон, форамсульфурон, имазосульфурон, йодсульфурон, мезосульфурон, никосульфурон, тифенсульфурон, а также трибенурон, их агрономически приемлемые соли и эфиры, а также их комбинации и дополнительно другие агрономические A.I., например один или больше имидазолинон, выбранный из группы, включающей имазамокс, имазетапир, имазапир, имазапик, их комбинации и агрономически приемлемые соли и эфи- 14 030583

ры, которые согласно настоящему изобретению, могут иметь следующие формы.

1. Продукты для разбавления в воде.

A. Растворимые концентраты.

10 мас.ч. активного соединения растворяются в 90 мас.ч. воды или водорастворимом растворителе. В качестве альтернативы могут добавляться смачивающий агент(ы) или другие адъюванты. Активное соединение растворяется при разбавлении с водой. В результате содержание состава с активным ингредиентом составляет 10 мас.%.

B. Диспергируемые концентраты.

20 мас.ч. активного соединения растворяются в 70 мас.ч. циклогексанона с добавлением 10 мас.ч. диспергатора, например поливинилпирролидона. Разбавление водой приводит к дисперсии. Содержание активного соединения составляет 20 мас.%.

C. Эмульгируемые концентраты.

15 мас.ч. активного соединения растворяются в 75 мас.ч. органического растворителя (например, ароматического алкила) с добавлением кальций додецилбензолсульфоната и этоксилата касторового масла (в каждом из случаев 5 мас.ч.). Разбавление водой приводит к эмульсии. Содержание состава с активным ингредиентом составляет 15 мас.%.

D. Эмульсии.

25 мас.ч. активного соединения растворяются в 35 мас.ч. органического растворителя (например, ароматического алкила) с добавлением кальций додецилбензолсульфоната и этоксилата касторового масла (в каждом из случаев 5 мас.ч.). Данная смесь вводится в 30 мас.ч. воды с помощью эмульгатора (Ultraturrax) и становится однородной эмульсией. Разбавление водой приводит к эмульсии. Содержание состава с активным ингредиентом составляет 25 мас.%.

E. Суспензии.

В взболтонном грануляторе 20 мас.ч. активного соединения измельчаются с добавлением 10 мас.ч. диспергатора и смачивающего агента(ов) и 70 мас.ч. воды или органического растворителя для получения высококачественного активного соединения суспензии. Разбавление водой приводит к стабильности суспензии активного соединения. Содержание в активного соединения в составе составляет 20 мас.%.

F. Диспергируемые в воде гранулы и растворимые гранулы.

50 мас.ч. активного соединения перемалываются добавлением 50 мас.ч. диспергатора и смачивающего агента(ов) и становятся диспергируемыми в воде или растворимыми гранулами с помощью технических приспособлений (например, вытеснение, скруббер с брызгалом, псевдоожиженный слой). Разбавление водой приводит к стабильности суспензии или раствора активного соединения. Содержание состава с активным ингредиентом составляет 50 мас.%.

G. Диспергируемые в воде порошки и растворимые порошки.

75 мас. ч. активного соединения перемалываются в роторном статорном измельчителе с добавлением 25 мас.ч. диспергатора, смачивающего агента(ов) и кремнегеля. Разбавление водой приводит к стабильности суспензии или раствора активного соединения. Содержание в активного соединения в составе составляет 75 мас.%.

H. Гели.

В грануляторе 20 мас.ч. активного соединения, 10 мас.ч. диспергатора, 1 мас.ч. гелеобразователя и 70 мас.ч. воды или органического растворителя смешиваются для получения качественной суспензии. Разбавление водой приводит к стабильности суспензии с содержанием активного соединения 20 мас.%.

2. Вещества, используемые в неразбавленном виде.

I. Пылевидные препараты.

5 мас.ч. активного соединения измельчаются и тщательно смешиваются с 95 мас.ч. измельчённого каолина. В результате получается присыпка с содержанием активного соединения 5 мас.%.

J. Гранулы (GR, FG, GG, MG).

0,5 мас.ч. активного соединения измельчаются и смешиваются с 99,5 мас.ч. носителей. К используемым в настоящее время способам относятся вытеснение, сушка распылением или псевдоожиженный слой. В результате получаются гранулы, используемые в неразбавленном виде, с содержанием активного соединения 0,5 мас.%.

K. Растворы ULV (UL).

10 мас.ч. активного соединения растворяются в 90 мас.ч. органического растворителя, например ксилола. В результате получается вещество, используемое в неразбавленном виде, с содержанием активного соединения 10 мас.%.

Водные формы можно получить из концентратов эмульсии, суспензий, паст, смачиваемых порошков или диспергируемых в воде гранул при добавлении воды.

Гербициды, выбранные из группы, включающей амидосульфурон, флупирсульфурон, форамсульфурон, имазосульфурон, йодсульфурон, мезосульфурон, никосульфурон, тифенсульфурон, а также трибенурон, их агрономически приемлемые соли и эфиры, а также их комбинации и дополнительно другие агрономические A.I., например один или больше имидазолинон, выбранный из группы, включающей имазамокс, имазетапир, имазапир, имазапик, их комбинации и агрономически приемлемые соли и эфиры

- 15 030583

или гербицидные составы, могут применяться в предвсходовый, послевсходовый или предпосадочный период или вместе с семенами имидазолинон устойчивого зимнего масличного рапса. Также возможно использование гербицидного состава или активных соединений посредством использования семян, предварительно обработанных гербицидными составами или активными соединениями, сельскохозяйственной культуры.

В другом варианте осуществления изобретения, гербицид, выбранный из группы, включающей амидосульфурон, флупирсульфурон, форамсульфурон, имазосульфурон, йодсульфурон, мезосульфурон, никосульфурон, тифенсульфурон, а также трибенурон, их агрономически приемлемые соли и эфиры, а также их комбинации и дополнительно другие агрономические A.I., например один или больше имидазолинон, выбранный из группы, включающей имазамокс, имазетапир, имазапир, имазапик, их комбинации и агрономически приемлемые соли и эфиры или гербицидные составы, могут наноситься на семена. Обработка семян включает преимущественно всех производителей, известных специалистам данной области знаний (дезинфекция семян, дражирование семян, опудривание семян, замачивание семян, нанесение пленочной оболочки на семена, нанесение многослойной оболочки на семена, покрытие семян коркой, обработка семян жидкостью и удобрение семян солями), основанных на гербицидах, выбранных из группы, включающей амидосульфурон, флупирсульфурон, форамсульфурон, имазосульфурон, йодсульфурон, мезосульфурон, никосульфурон, тифенсульфурон, а также трибенурон, их агрономически приемлемые соли и эфиры, а также их комбинации и дополнительно другие агрономические A.I., например один или больше имидазолинон, выбранный из группы, включающей имазамокс, имазетапир, имазапир, имазапик, их комбинации и агрономически приемлемые соли и эфиры настоящего изобретения или приготовленные из них составы. В данном случае гербицидные составы могут применяться в разбавленном или неразбавленном виде.

Понятие "семена" включает семена всех видов, таких как, например, кукуруза, семена, плоды, клубни, сеянцы и подобные формы. В данном случае, предпочтительно, понятие семена относится к кукурузе и семенам.

Используемые семена могут обозначать семена эффективных вышеупомянутых растений, а также семена трансгенных растений или растений, полученных с помощью традиционных способов разведения.

Для расширения спектра действия гербицид SU A.I., выбранный из группы, включающей амидосульфурон, флупирсульфурон, форамсульфурон, имазосульфурон, йодсульфурон, мезосульфурон, никосульфурон, тифенсульфурон, а также трибенурон, их агрономически приемлемые соли и эфиры, а также их комбинации и дополнительно другие агрономические A.I., например один или больше имидазолинон, выбранный из группы, включающей имазамокс, имазетапир, имазапир, имазапик, их комбинации и агрономически приемлемые соли и эфиры, могут смешиваться с большим количеством представителей других групп гербицидных или регулирующих рост активных соединений и затем использоваться одновременно. К подходящим компонентам для смесей относятся, например, 1,2,4-тиадиазолы, 1,3,4-тиадиазолы, амиды, аминофосфорная кислота и ее производные, аминотриазолы, анилиды, (гет)арилоксиалкановые кислоты и их производные, бензойная кислота и ее производные, бензотиадиазиноны, 2-ароил-1,3циклогексанедионы, 2-гетароил-1,3-циклогексан-дионы, гетарил арил кетоны, бензилизоксазолидиноны, производные мета-CF3 -фенила, карбаматы, хинолинкарбоновая кислота и ее производные, хлорацетанилид, производные циклогексенон оксим эфира, диазины, дихлорпропионовая кислота и ее производные, дигидро бензофураны, дигидрофуран-3-он, динитроанилины, динитрофенолы. дифенилоксиды, дипиридилы, галокарбоновые кислоты и их производные, мочевины, 3 фенилурацилы, имидазолы, имидазолиноны, ^фенил-3,4,5,6-тетрагидрофталимиды, оксадиазолы, оксираны, фенолы, арилокси- и гетарилоксифеноксипропионовые эфиры, фенилуксусная кислота и ее производные, 2-фенилпропионовая кислота и ее производные, пиразолы, фенилпиразолы, пиридазины, никотиновая кислота и ее производные, пиримидил эфиры, сульфонамиды, сульфонилмочевины, триазины, триазиноны, триазолиноны, триазолкарбоксамиды, урацилы, фенил пиразолины и изоксазолины и их производные.

Полезно также использовать гербициды, выбранные из группы, включающей амидосульфурон, флупирсульфурон, форамсульфурон, имазосульфурон, йодсульфурон, мезосульфурон, никосульфурон, тифенсульфурон, а также трибенурон, их агрономически приемлемые соли и эфиры, а также их комбинации и дополнительно другие агрономические A.I., например один или больше имидазолинон, выбранный из группы, включающей имазамокс, имазетапир, имазапир, имазапик, их комбинации и агрономически приемлемые соли и эфиры по отдельности или в комбинации с другими гербицидами, либо в виде смесей с другими защищающими культуры агентами, например, вместе с агентами, контролирующими вредителей, фитопатогенные грибки или бактерии. Представляет интерес смешиваемость с растворами минеральных солей, которые используются для лечения недостатка питательных веществ и микроэлементов. Могут использоваться и другие добавки, например, нефитотоксичные масла и масляные концентраты.

Более того, эффективно использовать гербициды, выбранные из группы, включающей амидосульфурон, флупирсульфурон, форамсульфурон, имазосульфурон, йодсульфурон, мезосульфурон, никосульфурон, тифенсульфурон, а также трибенурон, их агрономически приемлемые соли и эфиры, а также их

- 16 030583

комбинации и дополнительно другие агрономические A.I., например один или больше имидазолинон, выбранный из группы, включающей имазамокс, имазетапир, имазапир, имазапик, их комбинации и агрономически приемлемые соли и эфиры в комбинации с антидотами. Антидоты это химические соединения, предотвращающие или уменьшающие вызванные гербицидом повреждения эффективных растений без значительного влияния на гербицидное действие гербицидов амидосульфурон, флупирсульфурон, форамсульфурон, имазосульфурон, йодсульфурон, мезосульфурон, никосульфурон, тифенсульфурон, а также трибенурон, их агрономически приемлемые соли и эфиры, а также их комбинации и дополнительно другие агрономические A.I., например один или больше имидазолинон, выбранный из группы, включающей имазамокс, имазетапир, имазапир, имазапик, их комбинации и агрономически приемлемые соли и эфиры, направленные на нежелательные растения. Они могут применяться либо перед засевом (например, при удобрении семян, побегов или сеянцев) или в предвсходовый или послевсходовый период эффективных растений. Антидоты и гербициды амидосульфурон, флупирсульфурон, форамсульфурон, имазосульфурон, йодсульфурон, мезосульфурон, никосульфурон, тифенсульфурон, а также трибенурон, их агрономически приемлемые соли и эфиры, а также их комбинации и дополнительно другие агрономические A.I., например один или больше имидазолинон, выбранный из группы, включающей имазамокс, имазетапир, имазапир, имазапик, их комбинации и агрономически приемлемые соли и эфиры, могут использоваться одновременно или по очереди.

К подходящим антидотам относятся, например, (хинолин-8-окси) уксусная кислота, 1-фенил-5галогеналкил-1Н-1,2,4-триазол-3 -карбоновые кислоты, 1 -фенил-4,5-дигидро-5-алкил-1Н-пиразол-3,5дикарбоновые кислоты, 4,5-дигидро-5,5-диарил-3-изоксазол карбоновые кислоты, дихлорацетамиды, альфа оксиминофенилацетонитрилы, ацетофеноноксимы, 4,6-дигалоген-2-фенилпиримидины, N-[[4(аминокарбонил)фенил]сульфонил]-2-бензойные амиды, 1,8-нафтойный ангидрид, 2-гало-4-(галоалкил)5-тиазол карбоновые кислоты, фосфотиоаты и N-алкил-О-фенилкарбаматы и их агрономически допустимые соли и их агрономически допустимые производные, такие как амиды, эфиры, тиоэфиры при наличии кислотной группы.

Способы борьбы с сорняками.

Гербицидостойкие растения настоящего изобретения могут использоваться в сочетании с гербицидом, к которому они устойчивы. Гербициды могут применяться для растений настоящего изобретения с помощью любых известных специалистам способов. Гербициды могут применяться на любом этапе выращивания растений. Например, гербициды могут применяться на предпосадочном, посадочном, предвсходовом, послевсходовом этапе или на нескольких из них.

Гербицидные составы также могут применяться для, например, обработки листьев, обработки почвы, удобрения семян или пропитывания почвы. Гербицид наносится путем обрызгивания, распыления, распространения или любым другим эффективным, известным в данной области, способом.

В одном варианте осуществления изобретения гербициды могут использоваться для контроля за ростом сорняков, которые могут произрастать в непосредственной близости от гербицидостойких растений настоящего изобретения. В вариантах осуществления изобретения гербицид может наноситься на участок, на котором произрастают гербицидостойкие растения данного изобретения в непосредственной близости от сорняков. Гербицид, к которому устойчиво гербицидостойкое растение настоящего изобретения, может наноситься на участок в концентрации, достаточной для уничтожения или замедления роста сорняка. В данной области знаний известны указанные выше концентрации гербицида, достаточные для уничтожения или замедления роста сорняка.

Способы борьбы с сорняками могут также включать выведение зимнего вида Brassica, имеющего устойчивость к гербицидному составу SU. Как указано в данном документе, выведение зимнего вида Brassica, устойчивого к гербицидному составу SU, может происходить следующим образом: лицо выбирает растение, которое будет выращиваться, либо первое лицо выбирает другое лицо, которое определит, какое растение будет выращиваться. Например, производитель Brassica может действовать в качестве семеновода для производства семян, или в качестве хлебороба для производства зерна или другой продукции для рынка. В обоих случаях, производитель Brassica может сам выбирать разновидность Brassica, либо может позволить другому лицу выбрать разновидность растения, либо выращивать разновидность, выбранную третьим лицом и указанную в контрактном соглашении, например, согласно договору об оказании услуг, форвардному контракту или другому соглашению. Все подобные способы выбора производителем выращиваемой разновидности растения представляют собой способ выведения зимнего вида Brassica.

Способы защиты урожая.

Способы посадки, выращивания и обработки зимних видов Brassica гербицидными составами SU согласно различным вариантам осуществления настоящего изобретения, могут обеспечить защиту урожая Brassica, выращиваемого в условиях присутствия сульфонилмочевины (SU) гербицидного состава. К данным способам относится

посадка семян зимнего вида Brassica при наличии гербицидного состава SU; и

выращивание семян в условиях, подходящих для производства зимнего вида Brassica;

где указанное растение Brassica включает по меньшей мере один гербицидостойкий ген AHASL

- 17 030583

(HT-AHASL), где только один из генов HT-AHASL в растении кодирует сульфонилмочевина гербицидостойкую мутацию (SU-HT), выбранную из Р197Х и W574X, и представляет собой ген моно-SU-HTAHASL, который может дополнительно кодировать другую HT мутацию(и), где указанный ген моно-SUHT-AHASL расположен в геноме А указанного Brassica;

где урожай может быть равен или больше урожая дикорастущей разновидности того же зимнего вида Brassica.

К данным способам также относится: посадка семян зимнего вида Brassica; выращивание семян в условиях, подходящих для производства зимнего вида Brassica; и проведение гербицидной обработки растения путем нанесения гербицидного состава, включающего

сульфонилмочевину(ы) (SU), на растение, область в непосредственной близости от него; где Brassica включает по меньшей мере один гербицидостойкий ген AHASL (HT-AHASL), где только один из генов HT-AHASL в растении кодирует сульфонилмочевина гербицидостойкую мутацию (SU-HT), выбранную из Р197Х и W574X, и представляет собой ген моно-SU-HT-AHASL, который может дополнительно кодировать другую HT мутацию(и), где указанный ген моно-SU-HT-AHASL расположен в геноме А указанного Brassica;

где урожай может быть равен или больше урожая дикорастущей разновидности того же зимнего вида Brassica. Гербицидная обработка может представлять собой обработку растения перед цветением.

Способы защиты урожая могут также включать выбор зимнего вида Brassica, имеющего устойчивость к гербицидному составу SU.

К способам защиты урожая также относится сбор семян зимнего вида Brassica. Данные способы могут также контролировать сорняки, произрастающие в непосредственной близости от растений зимнего вида Brassica.

Как указано в данном документе, "защита урожая" также включает, в том числе, небольшой риск потери урожая, уменьшение урожайности или и то и другое. Нанесение гербицидных составов SU на зимний вид Brassica может привести к таким негативным последствиям как, в том числе, смерть; повреждение растения в переходном состоянии; задержка роста; измененное созревание; визуальные симптомы значительного повреждения; уменьшение плотности произрастания (т.е. меньшее количество растений в популяции); и увеличение в пропорции растений, проявляющих замедленное созревание, уменьшение размера (уменьшение биомассы) и/или повреждение после болезни или воздействия насекомых, которое началось в период временного стресса/фазы увядания (т.е. временное гербицидное повреждение SU). Неустойчивые к SU зимние виды Brassica обычно страдают от негативного воздействия в присутствии гербицидных составов; и зимние виды Brassica, устойчивые только к остаточному количеству гербицидов SU могут также страдать от негативного воздействия. Однако зимние виды Brassica настоящего изобретения более устойчивы к воздействию подобных гербицидных составов SU. Таким образом, зимний вид Brassica, выращиваемый из устойчивых к SU растений зимнего вида Brassica данного изобретения, может произвести больший урожай, по сравнению с SU гербицидо восприимчивыми или устойчивыми к остаткам растениями, выращиваемыми в присутствии гербицидных SU составов.

Желание может мотивировать на выбор растения зимнего вида Brassica, имеющего устойчивость к гербицидным составам SU. Например, и без ограничения, производитель Brassica может захотеть: (1) контролировать сорняки Brassica с использованием SU, где нанесение гербицида SU не может произойти без значительного повреждения или потери растения; или (2) избежать или снизить риск постоянного или временного повреждения остатками SU в почве, или избежать или снизить риск с большей вероятностью, чем при использовании Brassica, устойчивого только к остаткам SU; или (3) избежать или снизить риск постоянного или временного повреждения растения остатками SU, присутствующими в баках, повторно использующихся для приготовления или снабжения другой агрономической продукции, или избежать или снизить риск с большей вероятностью, чем при использовании Brassica, устойчивого только к остаткам SU. Выбрав растения зимнего вида Brassica, можно достичь этих целей.

В некоторых вариантах осуществления изобретения производитель возможно захочет иметь контроль над сорняками путем нанесения SU. К сорнякам растения Brassica, которые могут обрабатываться средствами различных вариантов осуществления изобретения, относятся, например, сорняки семейства Brassicaceae, такие как брюква (Brassica tournefortii), пастушья сумка (Capsella bursa-pastoris), индийская горчица (Conringia orientalis), желтушник левкойный (Erysimum cheiranthoides; Treacle mustard), сорняк Бьюкена (Hirschfeldia incana), обычный клоповник (Lepidium virginicum; Virginia pepperweed), мускусный сорняк (Myagrum perfoliatum), неслия метельчатая (Neslia paniculata), редька дикая (Raphanus raphanistrum), редька полевая (Rapistrum rugosum), горчица полевая (Sinapis arvensis; Charlock), индийский гулявник (Sisymbrium orientale), сорняк льна (Sisymbrium sophia; Tansy mustard; Fluxweed) и ярутка полевая (Thlaspi arvense; Field pennycress). Такие сорняки семейства Brassicacea достаточно тяжело поддаются контролю в традиционных культурах Brassica. Выбрав растения зимнего вида Brassica, можно достичь этих целей.

В соответствии с данным документом выбрать растение зимнего вида Brassica, имеющее устойчивость к гербицидному составу SU, может лицо, которое выбирает выращиваемое растение, или первое лицо выбирает другое лицо, которое определит, какое растение будет выращиваться. Например, произ- 18 030583

водитель Brassica может действовать в качестве семеновода для производства семян, или в качестве хлебороба для производства зерна или другой продукции для рынка. В обоих случаях производитель Brassica может сам выбирать разновидность Brassica, либо может позволить другому лицу выбрать разновидность растения, либо выращивать разновидность, выбранную третьим лицом и указанную в контрактном соглашении, например, согласно договору об оказании услуг, форвардному контракту или другому соглашению. Все подобные модели выбора производителем выращиваемой разновидности растения представляют собой способ выбора зимнего вида Brassica.

Растения зимнего вида Brassica настоящего изобретения, произрастающие в почве, содержащей гербициды SU и дополнительно содержащей сульфонамид и/или имидазолинон ингибирующие гербициды AHAS, могут иметь более высокую урожайность по сравнению с растениями зимнего вида Brassica соответствующей дикой изолинии, произрастающими в тех же условиях содержания гербицида. Кроме того, культура, выращиваемая из растений зимнего вида Brassica данного изобретения и обрабатываемая гербицидами SU из распылителей, зараженных гербицидами SU из остатков гербицида в баках, имеет преимущество при защите урожая, по сравнению с растениями зимнего вида Brassica соответствующей дикой изолинии.

Культуры растений зимнего вида Brassica настоящего изобретения могут производить эквивалентное количество урожая при обработке гербицидами SU и при отсутствии обработки гербицидами SU, когда они в противном случае произрастают в подобных условиях. Кроме того, культуры растений зимнего вида Brassica данного изобретения могут достигать равной урожайности, при обработке гербицидами SU из зараженных распылителей, а также при отсутствии обработки гербицидами SU из зараженных распылителей, когда они в противном случае произрастают в подобных условиях.

Культура зимнего вида Brassica содержит кодирующую ген AHASL мутацию на участке P197(At) или W574(At) и расположенную в любом геноме Brassica.

Настоящее изобретение также относится к растениям зимнего вида Brassica, имеющим выразимый пластидный ген AHASL, который кодирует мутацию на участке P197(At) или W574(At), расположенную в любом геноме, например геноме А, В или С Brassica. Это является исключением из вышеописанных вариантов осуществления изобретения, где гербицидостойкий ген AHASL может располагаться только в геноме A Brassica. В тех вариантах осуществления изобретения, где WOSR или другая культура зимнего вида Brassica содержит выразимый пластидный ген AHASL, который кодирует мутацию на участке P197(At) или W574(At), если данная мутация закодирована в геномной аллели В или С Brassica, по меньшей мере одна дополнительная мутация должна быть также закодирована в растении, в том же или другом выразимом пластидном гене AHASL, где данная мутация выбирается из замен на участках: G121(At), A122(At), M124(At), R142(At), V196(At), R199(At), T203(At), A205(At), F206(At), K256(At), M351(At), H352(At), R373(At), D375(At), D376(At), R377(At), M570(At), W511(At), F578(At), S653(At), и G654(At); и предпочтительно на участках A122(At), R199(At), Λ205(Λΐ). S653(At), и G654(At); и более предпочтительно на участке S653(At). Растения зимнего вида данного варианта осуществления изобретения могут использоваться в способах, подробно описанных в данном документе, включая способы контроля сорняков с проведением послевсходовой гербицидной обработки, способы выведения растений и способы, обеспечивающие защиту урожайности.

Настоящее изобретение предоставляет способ борьбы с сорняками культуры зимнего вида Brassica, включающий следующие меры: проведение послевсходовой обработки указанной культуры гербицидостойкого (НТ) растения Brassica путем нанесения гербицидного состава на растение и область непосредственной близости, доза которого составляет от 0,25х до около 4х SU, где указанный гербицидный состав включает SU; и указанное растение (1) включает по меньшей мере один гербицидостойкий ген AHASL (HT-AHASL), один из генов HT-AHASL кодирует сульфонилмочевина устойчивую HT мутацию (SU-HT), выбранную из Р197Х и W574X, по меньшей мере одну дополнительную мутацию, выбранную из G121X, А122Х, М124Х, V196X, R199X, T203X, А205Х, F206X, К256Х, М351Х, Н352Х, R373X, D375X, D376X, R377X, М570Х, V571X, F578X, S653X и G654X; или (2) включает по меньшей мере два гербицидостойких гена AHASL (HT-AHASL), где первый ген HT-AHASL кодирует сульфонилмочевина устойчивую мутацию (SU-HT), выбранную из Р197Х и W574X, а второй ген HT-AHASL кодирует мутацию, выбранную из G121X, А122Х, М124Х, V196X, R199X, Т203Х, А205Х, F206X, К256Х, М351Х, Н352Х, R373X, D375X, D376X, R377X, М570Х, V571X, F578X, S653X и G654X.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный гербицидный состав может включать другие агрономически эффективные формы сульфонилмочевины(н). В некоторых вариантах осуществления изобретения сульфонилмочевина выбирается из группы, включающей амидосульфурон, флупирсульфурон, форамсульфурон, имазосульфурон, йодсульфурон, мезосульфурон, никосульфурон, тифенсульфурон, а также трибенурон, их агрономически приемлемые соли и эфиры и их комбинации. В некоторых вариантах осуществления изобретения гербицидный состав не включает ничего кроме значительного количества SU.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная мутация SU-HT выбирается из Р197А, P197S, P197L и W574L. В некоторых вариантах осуществления изобретения только один из указанных генов кодирует мутацию SU-НТ, выбранную из Р197Х и W574X. В некоторых вариантах осуще- 19 030583

ствления изобретения по меньшей мере одна дополнительная мутация SU-HT выбирается из А122Т, A122Q, A122V, P197L, Р197А, P197S, A205V, R199A, A205V, W574L, S653N, G654E и G654D. В некоторых вариантах осуществления изобретения по меньшей мере одна дополнительная мутация выбирается из А122Т, R199A, A205V, G654E и S653N.

Очевидно, что специалисту будет понятно, что подходящие модификации и адаптации к вышеописанным способам и методам нанесения могут использоваться в рамках изобретения или любого варианта осуществления. После подробного описания изобретения следующие примеры наглядно его проиллюстрируют, в то же время они не расчитаны на ограничение данного изобретения.

Примеры

Ниже указаны особые примеры получения гербицидостойких растений настоящего изобретения.

В соответствии с данным документом "незначительное" повреждение растения приравнивается к повреждениям уровня 5 или менее по шкале PHYTOX 0-100, как будет описано ниже, предпочтительно повреждения уровня 4, 3, 2, 1 или менее. В некоторых вариантах осуществления изобретения "незначительное" повреждение растения может означать временное повреждение, длившееся 5 дней или меньше, предпочтительно 4, 3, 2 или 1 день или меньше.

Ниже приводится расшифровка аббревиатур и акронимов, используемых в данном документе.

ED₅₀ - эффективная доза (т.е. доза, необходимая для получения желаемого эффекта в 50% популяции);

DAT - дней после обработки;

DALT - дней после последней обработки;

DAP - дней после посадки;

GS - стадия роста;

ВВСН - признанный в промышленности стандарт для определения фенологических стадий роста канолы.

Пример 1. Гербицидная устойчивость в устойчивых к ингибитору AHAS линиях растения WOSR по сравнению с восприимчивым (традиционным) к ингибитору AHAS линиями растения WOSR.

Растения устойчивой к ингибитору AHAS линии WOSR, например линия, представляющая образец семян, хранящихся под АТСС №40684, и растения WOSR первой линии, восприимчивые к ингибитору AHAS, высаживаются в 10 см горшки с суглинистой почвой. В каждый горшок высаживается два растения, растения поливаются в поддон и удобряются в соответствии с требованиями. Горшки хранятся рядом друг с другом в теплице, при температуре 12°С в период произрастания. Через три недели после посадки, температуру поднимают до 15-20°С.

В послевсходовый период растения обрабатываются гербицидами посредством распределения через отверстия, а уровень использования воды составляет 200 л/га на стадии роста GS/ ВВСН 12 (2 стадия появления листьев). Гербициды тестируются на различных уровнях. На каждом уровне копируется пять сортов.

Оценка эффективности производится, когда происходит повреждение растения гербицидами по шкале от 0 до 100% по сравнению с необработанными контрольными растениями. В данном случае 0 означает отсутствие повреждений, а 100 - полное разрушение растений. Уровень эффективности оценивается на 20-22 день после обработки (DAT). Результаты эффективности представлены в виде значений

ED50.

Таблица 5

AI	Растения первой линии WOSR, восприимчивые к ингибитору AHAS.	Растения линии WOSR, устойчивые к ингибитору AHAS.
ED50 (г/аи/га)	ED50 (г/аи/га)
Трибенурон метил	2,59	25,88
Флорасулам	1,51	6,53
Флупирсульфурон-метилнатрий	0.58	63316,17
Метсульфурон-метил	0.57	5,06
Тритосульфурон	0.39	42.30
Сульфосульфурон	1.70	2417.06
Пропоксикарбазон-натрий	2.16	67.43
Иодсульфурон мезосульфурон	0.27	11.31
Хлорсульфурон	0.42	2.8
Трисульфурон-метил 500	3.36	41.81

- 20 030583

Пример 2. Гербицидная устойчивость в устойчивых к ингибитору AHAS линиях растения WOSR по сравнению с восприимчивым (традиционным) к ингибитору AHAS линиями растения WOSR.

Растения WOSR с устойчивыми к ингибитору AHAS линиями и растения второй, восприимчивой к ингибитору AHAS, линией высаживаются в 10 см горшки с суглинистой почвой. В каждый горшок высаживается два растения, растения поливаются в поддон и удобряются в соответствии с требованиями. Горшки хранятся рядом друг с другом в теплице при температуре 12°С в период произрастания. Через три недели после посадки температуру поднимают до 15-20°С.

В послевсходовый период растения обрабатываются гербицидами посредством распределения через отверстия, а уровень использования воды составляет 200 л/га на стадии роста GS/ ВВСН 10. Гербициды тестируются на различных уровнях. На каждом уровне копируется двенадцать сортов.

Оценка эффективности производится, когда происходит повреждение растения гербицидами по шкале от 0 до 100% по сравнению с необработанными контрольными растениями. В данном случае 0 означает отсутствие повреждений, а 100 - полное разрушение растений. Уровень эффективности оценивается на 19 день после обработки (DAT). Результаты эффективности представлены в виде значений ED50.

	Таблица 6
Растения второй линии WOSR, восприимчивые к ингибитору AHAS.	Растения линии WOSR, устойчивые к ингибитору AHAS.
АИ	ED50 (г/аи/га)	ED50 (г/аи/га)
Трибенурон метил	0.11	9.11
Флорасулам Флупирсульфурон-метил-	0.28	4.9
натрий	0.79	147.97
Метсульфурон-метил	0.17	2.28
Тритосульфурон	1.76	2.96
Сульфосульфурон	0.01	3.29
Пропоксикарбазон-натрий	0.17	42.07
Иодсульфурон мезосульфурон	0.07	0.62
Хлорсульфурон	0.04	11.2
Трисульфурон-метил 500	0.03	4.48

Пример 3. Повышенная гербицидная устойчивость в растениях с устойчивыми к AHAS линиями по сравнению с устойчивыми к AHAS линиями весеннего масличного рапса (SOSR).

Растения WOSR с устойчивой к ингибитору AHAS линией и растения SOSR с устойчивой к AHAS линией высаживаются на участке рядом друг с другом. В послевсходовый период растения обрабатываются гербицидами посредством распределения через отверстия на стадии роста GS/ ВВСН 12/13. Каждый вид обработки повторяется четыре раза.

Оценка устойчивости культуры производится при появлении симптома PHYTOX, вызванного химическими соединениями, по шкале от 0 до 100%, по сравнению с необработанными контрольными растениями. В данном случае 0 означает отсутствие повреждений, а 100 - полное разрушение растений.

Таблица 7

АИ	Доля продукта (кг/га)	Сорт Культуры	WOSR	SOSR
Культура GS из/в/способ	14/15/В	13/14/В
DAT/DALT/DAP	15/15/37	15/15/37
Оцен. Единица	PHYTOX %	PHYTOX %
Доза АИ (г/га)
Флупирсульфурон-	0.01	5	11	19

- 21 030583

метил-натрий
Тифенсульфуронметил	0.03	15	13	23
Тритосульфурон	0.035	25	43	53
Трибенурон метил	0.03	15	17	25

Пример 4. Гербицидная устойчивость в линиях растения, устойчивых к ингибитору AHAS, по сравнению с линиями растений WOSR, восприимчивыми (традиционными) к ингибитору AHAS.

Растения WOSR с устойчивой к ингибитору AHAS линией и растения WOSR с восприимчивой к ингибитору AHAS линией высаживаются на участке рядом друг с другом. В предвсходовый период растения обрабатываются гербицидами посредством его распределения через отверстия. Каждый вид обработки повторяется четыре раза.

Оценка устойчивости культуры производится при появлении симптома PHYTOX, вызванного химическими соединениями, по шкале от 0 до 100% по сравнению с необработанными контрольными растениями. В данном случае 0 означает отсутствие повреждений, а 100 - полное разрушение растений.

Таблица 8

АИ	Доля продукта (г/га)	Устойчивость /сорт	Линия WOSR, устойчивая к ингибитору AHAS	Линия WOSR, устойчивая к ингибитору AHAS
Культура GS из/в	10/11	11/13
DAT/DALT/DAP	10/10/10	29/29/29
Оцен. Единица	PHYTOX %	PHYTOX %
Доза АИ (г/га)
Пропоксикарбазон	10	7	0	0
Сульфосульфурон	2.5	2	0	0
Флупирсульфуронметил	50	1.8	0	0
Амидосульфурон	20	2.75	0	0

Таблица 9

АИ	Доля продукта (г/га)	Устойчивость /сорт	Линия WOSR, восприимчивая к ингибитору AHAS	Линия WOSR, восприимчивая к ингибитору AHAS
Культура GS из/в	10/11	11/13
DAT/DALT/DAP	10/10/10	29/29/29
Оцен. Единица	PHYTOX %	PHYTOX %
Доза АИ (г/га)
Пропоксикарбазон	10	7	100	100
Сульфосульфурон	2.5	2	99	99
Флупирсульфуронметил	50	1.8	100	100
Амидосульфурон	20	2.75	100	100

Пример 5. Активность AHAS в присутствии гербицидов имидазолинона.

Ферменты AHAS с различными мутациями вступают в реакцию с солями пировиноградной кислоты и обрабатываются водой и серийными растворами с различной концентрацией имазамокса для определения активности AHAS. Реакции длились 45 мин при температуре 37°С и заканчивались при добавлении 20 мкл 5% раствора серной кислоты и нагревании до 60°С в течение 15-30 мин для преобразования

- 22 030583

ацетолактата в ацетоин. Полученный ацетоин выдерживается в течение 15 мин с креатином и нафтилом (комплекс креатин-нафтил) в растворе гидроксида натрия при температуре 60°С для получения окрашенного вещества, используемого для измерения и сравнения с активностью ферментов AHAS. На фиг. 7 показана активность фермента AHAS.

Пример 6. Активность AHAS в присутствии гербицидов сульфонилмочевины.

Ферменты AHAS с различными мутациями вступают в реакцию с солями пировиноградной кислоты и обрабатываются водой и серийными растворами с различной концентрацией хлорсульфурона для определения активности AHAS. Реакции длились 45 мин при температуре 37°С и заканчивались при добавлении 20 мкл 5% раствора серной кислоты и нагревании до 60°С в течение 15-30 мин для преобразования ацетолактата в ацетоин. Полученный ацетоин выдерживается в течение 15 мин с креатином и нафтилом (комплекс креатин-нафтил) в растворе гидроксида натрия при температуре 60°С для получения окрашенного вещества, используемого для измерения и сравнения с активностью ферментов AHAS. На фиг. 8 показана активность фермента AHAS.

В то время как вышеизложенное изобретение было подробно описано в целях разъяснения и понимания, специалист после прочтения данного описания оценит тот факт, что могут быть внесены различные изменения без отклонения в рамках данного изобретения и прилагаемой формулы изобретения. Все патенты и публикации, на которые даны ссылки в данном документе, полностью включены в текст данного документа посредством ссылки.

Список последовательностей

<110> БАСФ АГРОКЕМИКЭЛ ПРОДАКТС Б.Ф.

Вантигем Херве Пфеннинг Маттиас Бремер Хаген Келер Рон

<120> ГЕРБИЦИДОСТОЙКИЕ РАСТЕНИЯ

<130> B248 1360PCT

<140> PCT/IB2011/000704

<141> 2011-03-17

<150> 61/314,901

<151> 2010-03-17

<150> 61/410,802

<151> 2010-11-05

<150> 61/417,132

<151> 2010-11-24

<160> 6

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 1758

<212> ДНК

<213> Brassica napus

<400> 1

actttcatct	cccgctacgc	tcccgacgag	ccccgcaagg	gtgctgatat	cctcgtggaa	60
gccctcgagc	gtcaaggcgt	cgaaaccgtc	ttcgcttatc	ccggaggtgc	ctccatggag	120
atccaccaag	ccttgactcg	ctcctccacc	atccgtaacg	tcctcccccg	tcacgaacaa	180
ggaggagtct	tcgccgccga	gggttacgct	cgttcctccg	gcaaaccggg	aatctgcata	240

- 23 030583

gccacttcgg	gtcccggagc	taccaacctc	gtcagcgggt	tagccgacgc	gatgcttgac	300
agtgttcctc	tcgtcgccat	cacaggacag	gtccctcgcc	ggatgatcgg	tactgacgcg	360
ttccaagaga	cgccaatcgt	tgaggtaacg	aggtctatta	cgaaacataa	ctatctggtg	420
atggatgttg	atgacatacc	taggatcgtt	caagaagcat	tctttctagc	tacttccggt	480
agacccggac	cggttttggt	tgatgttcct	aaggatattc	agcagcagct	tgcgattcct	540
aactgggatc	aacctatgcg	cttgcctggc	tacatgtcta	ggctgcctca	gccaccggaa	600
gtttctcagt	taggccagat	cgttaggttg	atctcggagt	ctaagaggcc	tgttttgtac	660
gttggtggtg	gaagcttgaa	ctcgagtgaa	gaactgggga	gatttgtcga	gcttactggg	720
atccctgttg	cgagtacgtt	gatggggctt	ggctcttatc	cttgtaacga	tgagttgtcc	780
ctgcagatgc	ttggcatgca	cgggactgtg	tatgctaact	acgctgtgga	gcatagtgat	840
ttgttgctgg	cgtttggtgt	taggtttgat	gaccgtgtca	cgggaaagct	cgaggcgttt	900
gcgagcaggg	ctaagattgt	gcacatagac	attgattctg	ctgagattgg	gaagaataag	960
acacctcacg	tgtctgtgtg	tggtgatgta	aagctggctt	tgcaagggat	gaacaaggtt	1020
cttgagaacc	gggcggagga	gctcaagctt	gatttcggtg	tttggaggag	tgagttgagc	1080
gagcagaaac	agaagttccc	gttgagcttc	aaaacgtttg	gagaagccat	tcctccgcag	1140
tacgcgattc	aggtcctaga	cgagctaacc	caagggaagg	caattatcag	tactggtgtt	1200
ggacagcatc	agatgtgggc	ggcgcagttt	tacaagtaca	ggaagccgag	gcagtggctg	1260
tcgtcctcag	gactcggagc	tatgggtttc	ggacttcctg	ctgcgattgg	agcgtctgtg	1320
gcgaaccctg	atgcgattgt	tgtggacatt	gacggtgatg	gaagcttcat	aatgaacgtt	1380
caagagctgg	ccacaatccg	tgtagagaat	cttcctgtga	agatactctt	gttaaacaac	1440
cagcatcttg	ggatggtcat	gcaattggaa	gatcggttct	acaaagctaa	cagagctcac	1500
acttatctcg	gggacccggc	aagggagaac	gagatcttcc	ctaacatgct	gcagtttgca	1560
ggagcttgcg	ggattccagc	tgcgagagtg	acgaagaaag	aagaactccg	agaagctatt	1620
cagacaatgc	tggatacacc	tggaccgtac	ctgttggatg	tcatctgtcc	gcaccaagaa	1680
catgtgttac	cgatgatccc	aagtggtggc	actttcaaag	atgtaataac	cgaaggggat	1740
ggtcgcacta	agtactga					1758

<210> 2

<211> 1758

<212> ДНК

<213> Brassica napus

<400> 2

actttcgtct	cccgctacgc	tcccgacgag	ccccgcaagg	gtgctgatat	cctcgtcgaa	60
gccctcgagc	gtcaaggcgt	cgaaaccgtc	tttgcttatc	ccggaggtgc	ttccatggag	120

- 24 030583

atccaccaag ccttgactcg ctcctccacc atccgtaacg tccttccccg tcacgaacaa 180

ggaggagtct tcgccgccga gggttacgct cgttcctccg gcaaaccggg aatctgcata 240

gccacttcgg gtcccggagc taccaacctc gtcagcgggt tagcagacgc gatgcttgac 300

agtgttcctc ttgtcgccat tacaggacag gtccctcgcc ggatgatcgg tactgacgcc 360

ttccaagaga caccaatcgt tgaggtaacg aggtctatta cgaaacataa ctatttggtg 420

atggatgttg atgacatacc taggatcgtt caagaagctt tctttctagc tacttccggt 480

agacccggac cggttttggt tgatgttcct aaggatattc agcagcagct tgcgattcct 540

aactgggatc aacctatgcg cttacctggc tacatgtcta ggttgcctca gcctccggaa 600

gtttctcagt taggtcagat cgttaggttg atctcggagt ctaagaggcc tgttttgtac 660

gttggtggtg gaagcttgaa ctcgagtgaa gaactgggga gatttgtcga gcttactggg 720

atccccgttg cgagtacttt gatggggctt ggctcttatc cttgtaacga tgagttgtcc 780

ctgcagatgc ttggcatgca cgggactgtg tatgctaact acgctgtgga gcatagtgat 840

ttgttgctgg cgtttggtgt taggtttgat gaccgtgtca cgggaaagct cgaggctttc 900

gctagcaggg ctaaaattgt gcacatagac attgattctg ctgagattgg gaagaataag 960

acacctcacg tgtctgtgtg tggtgatgta aagctggctt tgcaagggat gaacaaggtt 1020

cttgagaacc gggcggagga gctcaagctt gatttcggtg tttggaggag tgagttgagc 1080

gagcagaaac agaagttccc tttgagcttc aaaacgtttg gagaagccat tcctccgcag 1140

tacgcgattc agatcctcga cgagctaacc gaagggaagg caattatcag tactggtgtt 1200

ggacagcatc agatgtgggc ggcgcagttt tacaagtaca ggaagccgag acagtggctg 1260

tcgtcatcag gcctcggagc tatgggtttt ggacttcctg ctgcgattgg agcgtctgtg 1320

gcgaaccctg atgcgattgt tgtggatatt gacggtgatg gaagcttcat aatgaacgtt 1380

caagagctgg ccacaatccg tgtagagaat cttcctgtga agatactctt gttaaacaac 1440

cagcatcttg ggatggtcat gcaatgggaa gatcggttct acaaagctaa cagagctcac 1500

acttatctcg gggacccggc aagggagaac gagatcttcc ctaacatgct gcagtttgca 1560

ggagcttgcg ggattccagc tgcgagagtg acgaagaaag aagaactccg agaagctatt 1620

cagacaatgc tggatacacc aggaccatac ctgttggatg tgatatgtcc gcaccaagaa 1680

catgtgttac cgatgatccc aaatggtggc actttcaaag atgtaataac agaaggggat 1740

ggtcgcacta agtactga 1758

<210> 3

<211> 585

<212> PRT

<213> Brassica napus

<400> 3

- 25 030583

Thr 1

Phe

Ile

Ser

Arg 5

Tyr

Ala

Pro

Asp

Glu 10

Pro

Arg

Lys

Gly

Ala Asp 15

Ile

Leu

Val

Glu

Ala

Leu

Glu

Arg

Gln

Gly

Val

Glu

Thr

Val

Phe

Ala

20

25

30

Tyr

Pro

Gly

Gly

Ala

Ser

Met

Glu

Ile

His

Gln

Ala

Leu

Thr

Arg

Ser

35

40

45

Ser

Thr

Ile

Arg

Asn

Val

Leu

Pro

Arg

His

Glu

Gln

Gly

Gly

Val

Phe

50

55

60

Ala

Ala

Glu

Gly

Tyr

Ala

Arg

Ser

Ser

Gly

Lys

Pro

Gly

Ile

Cys

Ile

65

70

75

80

Ala

Thr

Ser

Gly

Pro

Gly

Ala

Thr

Asn

Leu

Val

Ser

Gly

Leu

Ala

Asp

85

90

95

Ala

Met

Leu

Asp

Ser

Val

Pro

Leu

Val

Ala

Ile

Thr

Gly

Gln

Val

Pro

100

105

110

Arg

Arg

Met

Ile

Gly

Thr

Asp

Ala

Phe

Gln

Glu

Thr

Pro

Ile

Val

Glu

115

120

125

Val

Thr

Arg

Ser

Ile

Thr

Lys

His

Asn

Tyr

Leu

Val

Met

Asp

Val

Asp

130

135

140

Asp

Ile

Pro

Arg

Ile

Val

Gln

Glu

Ala

Phe

Phe

Leu

Ala

Thr

Ser

Gly

145

150

155

160

Arg

Pro

Gly

Pro

Val

Leu

Val

Asp

Val

Pro

Lys

Asp

Ile

Gln

Gln

Gln

165

170

175

Leu

Ala

Ile

Pro

Asn

Trp

Asp

Gln

Pro

Met

Arg

Leu

Pro

Gly

Tyr

Met

180

185

190

Ser

Arg

Leu

Pro

Gln

Pro

Pro

Glu

Val

Ser

Gln

Leu

Gly

Gln

Ile

Val

195

200

205

Arg

Leu

Ile

Ser

Glu

Ser

Lys

Arg

Pro

Val

Leu

Tyr

Val

Gly

Gly

Gly

210

215

220

Ser

Leu

Asn

Ser

Ser

Glu

Glu

Leu

Gly

Arg

Phe

Val

Glu

Leu

Thr

Gly

225

230

235

240

Ile

Pro

Val

Ala

Ser

Thr

Leu

Met

Gly

Leu

Gly

Ser

Tyr

Pro

Cys

Asn

245 250 255

- 26 030583

Asp

Glu

Leu

Ser 260

Leu

Gln

Met

Leu

Gly Met 265

His

Gly

Thr

Val 270

Tyr

Ala

Asn

Tyr

Ala

Val

Glu

His

Ser

Asp

Leu

Leu

Leu

Ala

Phe

Gly

Val

Arg

275

280

285

Phe

Asp

Asp

Arg

Val

Thr

Gly

Lys

Leu

Glu

Ala

Phe

Ala

Ser

Arg

Ala

290

295

300

Lys

Ile

Val

His

Ile

Asp

Ile

Asp

Ser

Ala

Glu

Ile

Gly

Lys

Asn

Lys

305

310

315

320

Thr

Pro

His

Val

Ser

Val

Cys

Gly

Asp

Val

Lys

Leu

Ala

Leu

Gln

Gly

325

330

335

Met

Asn

Lys

Val

Leu

Glu

Asn

Arg

Ala

Glu

Glu

Leu

Lys

Leu

Asp

Phe

340

345

350

Gly

Val

Trp

Arg

Ser

Glu

Leu

Ser

Glu

Gln

Lys

Gln

Lys

Phe

Pro

Leu

355

360

365

Ser

Phe

Lys

Thr

Phe

Gly

Glu

Ala

Ile

Pro

Pro

Gln

Tyr

Ala

Ile

Gln

370

375

380

Val

Leu

Asp

Glu

Leu

Thr

Gln

Gly

Lys

Ala

Ile

Ile

Ser

Thr

Gly

Val

385

390

395

400

Gly

Gln

His

Gln

Met

Trp

Ala

Ala

Gln

Phe

Tyr

Lys

Tyr

Arg

Lys

Pro

405

410

415

Arg

Gln

Trp

Leu

Ser

Ser

Ser

Gly

Leu

Gly

Ala

Met

Gly

Phe

Gly

Leu

420

425

430

Pro

Ala

Ala

Ile

Gly

Ala

Ser

Val

Ala

Asn

Pro

Asp

Ala

Ile

Val

Val

435

440

445

Asp

Ile

Asp

Gly

Asp

Gly

Ser

Phe

Ile

Met

Asn

Val

Gln

Glu

Leu

Ala

450

455

460

Thr

Ile

Arg

Val

Glu

Asn

Leu

Pro

Val

Lys

Ile

Leu

Leu

Leu

Asn

Asn

465

470

475

480

Gln

His

Leu

Gly

Met

Val

Met

Gln

Leu

Glu

Asp

Arg

Phe

Tyr

Lys

Ala

485

490

495

Asn

Arg

Ala

His

Thr

Tyr

Leu

Gly

Asp

Pro

Ala

Arg

Glu

Asn

Glu

Ile

- 27 030583

500

505

510

Phe

Pro

Asn

Met

Leu

Gln

Phe

Ala

Gly

Ala

Cys

Gly

Ile

Pro

Ala

Ala

515

520

525

Arg

Val

Thr

Lys

Lys

Glu

Glu

Leu

Arg

Glu

Ala

Ile

Gln

Thr

Met

Leu

530

535

540

Asp

Thr

Pro

Gly

Pro

Tyr

Leu

Leu

Asp

Val

Ile

Cys

Pro

His

Gln

Glu

545

550

555

560

His

Val

Leu

Pro

Met

Ile

Pro

Ser

Gly

Gly

Thr

Phe

Lys

Asp

Val

Ile

565

570

575

Thr

Glu

Gly

Asp

Gly

Arg

Thr

Lys

Tyr

580

585

<210>

4

<211>

585

<212>

PRT

<213>

Brassica

napus

<400>

4

Thr

Phe

Val

Ser

Arg

Tyr

Ala

Pro

Asp

Glu

Pro

Arg

Lys

Gly

Ala

Asp

1

5

10

15

Ile

Leu

Val

Glu

Ala

Leu

Glu

Arg

Gln

Gly

Val

Glu

Thr

Val

Phe

Ala

20

25

30

Tyr

Pro

Gly

Gly

Ala

Ser

Met

Glu

Ile

His

Gln

Ala

Leu

Thr

Arg

Ser

35

40

45

Ser

Thr

Ile

Arg

Asn

Val

Leu

Pro

Arg

His

Glu

Gln

Gly

Gly

Val

Phe

50

55

60

Ala

Ala

Glu

Gly

Tyr

Ala

Arg

Ser

Ser

Gly

Lys

Pro

Gly

Ile

Cys

Ile

65

70

75

80

Ala

Thr

Ser

Gly

Pro

Gly

Ala

Thr

Asn

Leu

Val

Ser

Gly

Leu

Ala

Asp

85

90

95

Ala

Met

Leu

Asp

Ser

Val

Pro

Leu

Val

Ala

Ile

Thr

Gly

Gln

Val

Pro

100

105

110

Arg

Arg

Met

Ile

Gly

Thr

Asp

Ala

Phe

Gln

Glu

Thr

Pro

Ile

Val

Glu

115

120

125

Val

Thr

Arg

Ser

Ile

Thr

Lys

His

Asn

Tyr

Leu

Val

Met

Asp

Val

Asp

- 28 030583

130

135

140

Asp

Ile

Pro

Arg

Ile

Val

Gln

Glu

Ala

Phe

Phe

Leu

Ala

Thr

Ser

Gly

145

150

155

160

Arg

Pro

Gly

Pro

Val

Leu

Val

Asp

Val

Pro

Lys

Asp

Ile

Gln

Gln

Gln

165

170

175

Leu

Ala

Ile

Pro

Asn

Trp

Asp

Gln

Pro

Met

Arg

Leu

Pro

Gly

Tyr

Met

180

185

190

Ser

Arg

Leu

Pro

Gln

Pro

Pro

Glu

Val

Ser

Gln

Leu

Gly

Gln

Ile

Val

195

200

205

Arg

Leu

Ile

Ser

Glu

Ser

Lys

Arg

Pro

Val

Leu

Tyr

Val

Gly

Gly

Gly

210

215

220

Ser

Leu

Asn

Ser

Ser

Glu

Glu

Leu

Gly

Arg

Phe

Val

Glu

Leu

Thr

Gly

225

230

235

240

Ile

Pro

Val

Ala

Ser

Thr

Leu

Met

Gly

Leu

Gly

Ser

Tyr

Pro

Cys

Asn

245

250

255

Asp

Glu

Leu

Ser

Leu

Gln

Met

Leu

Gly

Met

His

Gly

Thr

Val

Tyr

Ala

260

265

270

Asn

Tyr

Ala

Val

Glu

His

Ser

Asp

Leu

Leu

Leu

Ala

Phe

Gly

Val

Arg

275

280

285

Phe

Asp

Asp

Arg

Val

Thr

Gly

Lys

Leu

Glu

Ala

Phe

Ala

Ser

Arg

Ala

290

295

300

Lys

Ile

Val

His

Ile

Asp

Ile

Asp

Ser

Ala

Glu

Ile

Gly

Lys

Asn

Lys

305

310

315

320

Thr

Pro

His

Val

Ser

Val

Cys

Gly

Asp

Val

Lys

Leu

Ala

Leu

Gln

Gly

325

330

335

Met

Asn

Lys

Val

Leu

Glu

Asn

Arg

Ala

Glu

Glu

Leu

Lys

Leu

Asp

Phe

340

345

350

Gly

Val

Trp

Arg

Ser

Glu

Leu

Ser

Glu

Gln

Lys

Gln

Lys

Phe

Pro

Leu

355

360

365

Ser

Phe

Lys

Thr

Phe

Gly

Glu

Ala

Ile

Pro

Pro

Gln

Tyr

Ala

Ile

Gln

370

375

380

- 29 030583

Ile 385

Leu

Asp

Glu

Leu

Thr 390

Glu Gly Lys

Ala

Ile 395

Ile

Ser

Thr

Gly

Val 400

Gly

Gln

His

Gln

Met

Trp

Ala

Ala

Gln

Phe

Tyr

Lys

Tyr

Arg

Lys

Pro

405

410

415

Arg

Gln

Trp

Leu

Ser

Ser

Ser

Gly

Leu

Gly

Ala

Met

Gly

Phe

Gly

Leu

420

425

430

Pro

Ala

Ala

Ile

Gly

Ala

Ser

Val

Ala

Asn

Pro

Asp

Ala

Ile

Val

Val

435

440

445

Asp

Ile

Asp

Gly

Asp

Gly

Ser

Phe

Ile

Met

Asn

Val

Gln

Glu

Leu

Ala

450

455

460

Thr

Ile

Arg

Val

Glu

Asn

Leu

Pro

Val

Lys

Ile

Leu

Leu

Leu

Asn

Asn

465

470

475

480

Gln

His

Leu

Gly

Met

Val

Met

Gln

Trp

Glu

Asp

Arg

Phe

Tyr

Lys

Ala

485

490

495

Asn

Arg

Ala

His

Thr

Tyr

Leu

Gly

Asp

Pro

Ala

Arg

Glu

Asn

Glu

Ile

500

505

510

Phe

Pro

Asn

Met

Leu

Gln

Phe

Ala

Gly

Ala

Cys

Gly

Ile

Pro

Ala

Ala

515

520

525

Arg

Val

Thr

Lys

Lys

Glu

Glu

Leu

Arg

Glu

Ala

Ile

Gln

Thr

Met

Leu

530

535

540

Asp

Thr

Pro

Gly

Pro

Tyr

Leu

Leu

Asp

Val

Ile

Cys

Pro

His

Gln

Glu

545

550

555

560

His

Val

Leu

Pro

Met

Ile

Pro

Asn

Gly

Gly

Thr

Phe

Lys

Asp

Val

Ile

565

570

575

Thr

Glu

Gly

Asp

Gly

Arg

Thr

Lys

Tyr

580

585

<210> 5

<211> 1959

<212> ДНК <213> Brassica

<400> 5

atggcggcgg	caacatcgtc	ttctccgatc	tccttaaccg	ctaaaccttc	ttccaaatcc	60
cctctaccca	tttccagatt	ctcccttccc	ttctccttaa	ccccacagaa	accctcctcc	120
cgtctccacc	gtccactcgc	catctccgcc	gttctcaact	cacccgtcaa	tgtcgcacct	180

- 30 030583

gaaaaaaccg	acaagatcaa	gactttcatc	tcccgctacg	ctcccgacga	gccccgcaag	240
ggtgctgata	tcctcgtgga	agccctcgag	cgtcaaggcg	tcgaaaccgt	cttcgcttat	300
cccggaggtg	cctccatgga	gatccaccaa	gccttgactc	gctcctccac	catccgtaac	360
gtcctccccc	gtcacgaaca	aggaggagtc	ttcgccgccg	agggttacgc	tcgttcctcc	420
ggcaaaccgg	gaatctgcat	agccacttcg	ggtcccggag	ctaccaacct	cgtcagcggg	480
ttagccgacg	cgatgcttga	cagtgttcct	ctcgtcgcca	tcacaggaca	ggtccctcgc	540
cggatgatcg	gtactgacgc	gttccaagag	acgccaatcg	ttgaggtaac	gaggtctatt	600
acgaaacata	actatctggt	gatggatgtt	gatgacatac	ctaggatcgt	tcaagaagca	660
ttctttctag	ctacttccgg	tagacccgga	ccggttttgg	ttgatgttcc	taaggatatt	720
cagcagcagc	ttgcgattcc	taactgggat	caacctatgc	gcttgcctgg	ctacatgtct	780
aggctgcctc	agccaccgga	agtttctcag	ttaggccaga	tcgttaggtt	gatctcggag	840
tctaagaggc	ctgttttgta	cgttggtggt	ggaagcttga	actcgagtga	agaactgggg	900
agatttgtcg	agcttactgg	gatccctgtt	gcgagtacgt	tgatggggct	tggctcttat	960
ccttgtaacg	atgagttgtc	cctgcagatg	cttggcatgc	acgggactgt	gtatgctaac	1020
tacgctgtgg	agcatagtga	tttgttgctg	gcgtttggtg	ttaggtttga	tgaccgtgtc	1080
acgggaaagc	tcgaggcgtt	tgcgagcagg	gctaagattg	tgcacataga	cattgattct	1140
gctgagattg	ggaagaataa	gacacctcac	gtgtctgtgt	gtggtgatgt	aaagctggct	1200
ttgcaaggga	tgaacaaggt	tcttgagaac	cgggcggagg	agctcaagct	tgatttcggt	1260
gtttggagga	gtgagttgag	cgagcagaaa	cagaagttcc	cgttgagctt	caaaacgttt	1320
ggagaagcca	ttcctccgca	gtacgcgatt	caggtcctag	acgagctaac	ccaagggaag	1380
gcaattatca	gtactggtgt	tggacagcat	cagatgtggg	cggcgcagtt	ttacaagtac	1440
aggaagccga	ggcagtggct	gtcgtcctca	ggactcggag	ctatgggttt	cggacttcct	1500
gctgcgattg	gagcgtctgt	ggcgaaccct	gatgcgattg	ttgtggacat	tgacggtgat	1560
ggaagcttca	taatgaacgt	tcaagagctg	gccacaatcc	gtgtagagaa	tcttcctgtg	1620
aagatactct	tgttaaacaa	ccagcatctt	gggatggtca	tgcaattgga	agatcggttc	1680
tacaaagcta	acagagctca	cacttatctc	ggggacccgg	caagggagaa	cgagatcttc	1740
cctaacatgc	tgcagtttgc	aggagcttgc	gggattccag	ctgcgagagt	gacgaagaaa	1800
gaagaactcc	gagaagctat	tcagacaatg	ctggatacac	ctggaccgta	cctgttggat	1860
gtcatctgtc	cgcaccaaga	acatgtgtta	ccgatgatcc	caagtggtgg	cactttcaaa	1920
gatgtaataa	ccgaagggga	tggtcgcact	aagtactga			1959

<210> 6

- 31 030583

<211> 652

<212> PRT <213> Brassica

<400> 6

Met 1

Ala

Ala

Ala

Thr 5

Ser

Ser

Ser

Pro

Ile 10

Ser

Leu

Thr

Ala

Lys 15

Pro

Ser

Ser

Lys

Ser

Pro

Leu

Pro

Ile

Ser

Arg

Phe

Ser

Leu

Pro

Phe

Ser

20

25

30

Leu

Thr

Pro

Gln

Lys

Pro

Ser

Ser

Arg

Leu

His

Arg

Pro

Leu

Ala

Ile

35

40

45

Ser

Ala

Val

Leu

Asn

Ser

Pro

Val

Asn

Val

Ala

Pro

Glu

Lys

Thr

Asp

50

55

60

Lys

Ile

Lys

Thr

Phe

Ile

Ser

Arg

Tyr

Ala

Pro

Asp

Glu

Pro

Arg

Lys

65

70

75

80

Gly

Ala

Asp

Ile

Leu

Val

Glu

Ala

Leu

Glu

Arg

Gln

Gly

Val

Glu

Thr

85

90

95

Val

Phe

Ala

Tyr

Pro

Gly

Gly

Ala

Ser

Met

Glu

Ile

His

Gln

Ala

Leu

100

105

110

Thr

Arg

Ser

Ser

Thr

Ile

Arg

Asn

Val

Leu

Pro

Arg

His

Glu

Gln

Gly

115

120

125

Gly

Val

Phe

Ala

Ala

Glu

Gly

Tyr

Ala

Arg

Ser

Ser

Gly

Lys

Pro

Gly

130

135

140

Ile

Cys

Ile

Ala

Thr

Ser

Gly

Pro

Gly

Ala

Thr

Asn

Leu

Val

Ser

Gly

145

150

155

160

Leu

Ala

Asp

Ala

Met

Leu

Asp

Ser

Val

Pro

Leu

Val

Ala

Ile

Thr

Gly

165

170

175

Gln

Val

Pro

Arg

Arg

Met

Ile

Gly

Thr

Asp

Ala

Phe

Gln

Glu

Thr

Pro

180

185

190

Ile

Val

Glu

Val

Thr

Arg

Ser

Ile

Thr

Lys

His

Asn

Tyr

Leu

Val

Met

195

200

205

Asp

Val

Asp

Asp

Ile

Pro

Arg

Ile

Val

Gln

Glu

Ala

Phe

Phe

Leu

Ala

210

215

220

Thr

Ser

Gly

Arg

Pro

Gly

Pro

Val

Leu

Val

Asp

Val

Pro

Lys

Asp

Ile

- 32 030583

225 230 235 240

Gln Gln Gln Leu Ala

Ile

Pro

Asn

Trp

Asp 250

Gln

Pro

Met

Arg

Leu 255

Pro

245

Gly

Tyr

Met

Ser

Arg

Leu

Pro

Gln

Pro

Pro

Glu

Val

Ser

Gln

Leu

Gly

260

265

270

Gln

Ile

Val

Arg

Leu

Ile

Ser

Glu

Ser

Lys

Arg

Pro

Val

Leu

Tyr

Val

275

280

285

Gly

Gly

Gly

Ser

Leu

Asn

Ser

Ser

Glu

Glu

Leu

Gly

Arg

Phe

Val

Glu

290

295

300

Leu

Thr

Gly

Ile

Pro

Val

Ala

Ser

Thr

Leu

Met

Gly

Leu

Gly

Ser

Tyr

305

310

315

320

Pro

Cys

Asn

Asp

Glu

Leu

Ser

Leu

Gln

Met

Leu

Gly

Met

His

Gly

Thr

325

330

335

Val

Tyr

Ala

Asn

Tyr

Ala

Val

Glu

His

Ser

Asp

Leu

Leu

Leu

Ala

Phe

340

345

350

Gly

Val

Arg

Phe

Asp

Asp

Arg

Val

Thr

Gly

Lys

Leu

Glu

Ala

Phe

Ala

355

360

365

Ser

Arg

Ala

Lys

Ile

Val

His

Ile

Asp

Ile

Asp

Ser

Ala

Glu

Ile

Gly

370

375

380

Lys

Asn

Lys

Thr

Pro

His

Val

Ser

Val

Cys

Gly

Asp

Val

Lys

Leu

Ala

385

390

395

400

Leu

Gln

Gly

Met

Asn

Lys

Val

Leu

Glu

Asn

Arg

Ala

Glu

Glu

Leu

Lys

405

410

415

Leu

Asp

Phe

Gly

Val

Trp

Arg

Ser

Glu

Leu

Ser

Glu

Gln

Lys

Gln

Lys

420

425

430

Phe

Pro

Leu

Ser

Phe

Lys

Thr

Phe

Gly

Glu

Ala

Ile

Pro

Pro

Gln

Tyr

435

440

445

Ala

Ile

Gln

Val

Leu

Asp

Glu

Leu

Thr

Gln

Gly

Lys

Ala

Ile

Ile

Ser

450

455

460

Thr

Gly

Val

Gly

Gln

His

Gln

Met

Trp

Ala

Ala

Gln

Phe

Tyr

Lys

Tyr

465 470 475 480

- 33 030583

Arg

Lys

Pro

Arg

Gln 485

Trp

Leu

Ser

Ser

Ser Gly Leu Gly Ala Met

Gly

490

495

Phe

Gly

Leu

Pro

Ala

Ala

Ile

Gly

Ala

Ser

Val

Ala

Asn

Pro

Asp

Ala

500

505

510

Ile

Val

Val

Asp

Ile

Asp

Gly

Asp

Gly

Ser

Phe

Ile

Met

Asn

Val

Gln

515

520

525

Glu

Leu

Ala

Thr

Ile

Arg

Val

Glu

Asn

Leu

Pro

Val

Lys

Ile

Leu

Leu

530

535

540

Leu

Asn

Asn

Gln

His

Leu

Gly

Met

Val

Met

Gln

Leu

Glu

Asp

Arg

Phe

545

550

555

560

Tyr

Lys

Ala

Asn

Arg

Ala

His

Thr

Tyr

Leu

Gly

Asp

Pro

Ala

Arg

Glu

565

570

575

Asn

Glu

Ile

Phe

Pro

Asn

Met

Leu

Gln

Phe

Ala

Gly

Ala

Cys

Gly

Ile

580

585

590

Pro

Ala

Ala

Arg

Val

Thr

Lys

Lys

Glu

Glu

Leu

Arg

Glu

Ala

Ile

Gln

595

600

605

Thr

Met

Leu

Asp

Thr

Pro

Gly

Pro

Tyr

Leu

Leu

Asp

Val

Ile

Cys

Pro

610

615

620

His

Gln

Glu

His

Val

Leu

Pro

Met

Ile

Pro

Ser

Gly

Gly

Thr

Phe

Lys

625

630

635

640

Asp

Val

Ile

Thr

Glu

Gly

Asp

Gly

Arg

Thr

Lys

Tyr

645

650

Claims (11)

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. (1) содержит гербицид класса сульфонилмочевин (SU), выбранную из амидосульфурона, флупирсульфурона, форамсульфурона, имазосульфурона, йодсульфурона, мезосульфурона, никосульфурона, тифенсульфурона, а также трибенурона, их агрономически приемлемых солей и эфиров и их комбинаций, а также

   (1) содержит гербицид класса сульфонилмочевин (SU), выбранный из амидосульфурона, флупирсульфурона, форамсульфурона, имазосульфурона, йодсульфурона, мезосульфурона, никосульфурона, тифенсульфурона, а также трибенурона, их агрономически приемлемых солей и эфиров и их комбинаций, а также

   1. Способ борьбы с сорняками в культуре Brassica зимнего вида, включающий проведение предвсходовой обработки, либо предпосадочной обработки в 0-30 день, гербицидостойкого (НТ) растения Brassica зимнего вида указанной культуры посредством нанесения гербицидного состава, содержащего гербицид(ы) класса сульфонилмочевин (SU), на место посадки семян и область, находящуюся в непосредственной близости, при дозе от более 0,5х до около 4х SU, причем:

   (A) указанный гербицидный состав:
2. (2) содержит не более 3 мас.% любого другого гербицида класса сульфонилмочевин (другой SU); и

   (B) указанное растение Brassica зимнего вида содержит гербицидостойкий ген AHASL (HTAHASL), причем указанный ген HT-AHASL кодирует мутацию, вызывающую устойчивость к гербицидам класса сульфонилмочевин (SU-HT), представляющую собой W574L, причем ген HT-AHASL кодиру- 35 030583

   ет только одну мутацию SU-HT или только одну мутацию SU-HT на аллель указанного гена, причем указанный ген HT-AHASL расположен в геноме А указанного растения Brassica, и причем указанное растение Brassica способно переносить указанный гербицидный состав при уровне повреждения не более 5 по шкале PHYTOX 0-100 при оценке по меньшей мере на 21 день после указанной обработки; и причем доза 1х активных ингредиентов SU составляет, как указано ниже в таблице

   Г ербицид класса сульфонилмочевин 1х(г/га) Флупирсульфурон 10 Имазосульфурон 25 Т ифенсульфурон 30 Трибенурон 30 Амидосульфурон 30 Форамсульфурон 35 Йодсульфурон 10 Мезосульфурон 7,5 Никосульфурон 30 Мезосульфурон + йодсульфурон (5:1 мас/мас) 14,4

   причем "другой SU" относится к следующим активным ингредиентам SU, их агрономически приемлемым солям и эфирам, а также их комбинациям_

   другой SU А. И. Примеры соли или эфира азимсульфурон бенсульфурон бенсульфурон-метил хлоримурон хлоримурон-этил хлорсульфурон циносульфурон циклосульфамурон этаметсульфурон этаметсульфурон-метил этоксисульфурон флазасульфурон флуцетосульфурон галосульфурон галосульфурон-метил метазосульфурон метсульфурон метсульфурон-метил ортосульфамурон оксасульфурон примисульфурон примисульфурон-метил пропирисульфурон просульфурон пиразосульфурон пиразосульфурон-этил римсульфурон сульфометурон сульфометурон-метил сульфосульфурон триасульфурон трифлоксисульфурон трифлоксисульфуроннатрий трифлусульфурон трифлусульфурон-метил тритосульфурон

   2. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный ген HT-AHASL:

   (a) кодирует указанную мутацию SU-HT гомозиготным или гемизиготным способом; или

   (b) кодирует указанную мутацию SU-HT в одной аллели и остаток триптофана в гомологичной аллели.

   (2) содержит не более 3 мас.% любого другого гербицида класса сульфонилмочевин (другой SU); и

   (B) указанное растение Brassica зимнего вида содержит гербицидостойкий ген AHASL (HTAHASL), причем указанный ген HT-AHASL кодирует мутацию, вызывающую устойчивость к гербицидам класса сульфонилмочевин (SU-HT), представляющую собой W574L, причем ген HT-AHASL кодирует только одну мутацию SU-HT или только одну мутацию SU-HT на аллель указанного гена и причем указанный ген HT-AHASL расположен в геноме А указанного растения Brassica; и где указанное растение Brassica зимнего вида способно переносить указанную обработку сульфонилмочевиной(ми) (SU) при

   - 34 030583

   уровне повреждения не более 5 по шкале PHYTOX 0-100 при оценке по меньшей мере на 21 день после указанной обработки, и причем доза 1х активных ингредиентов SU составляет, как указано ниже в таблице

   Г ербицид класса сульфонилмочевин 1х (г/га) Флупирсульфурон 10 Имазосульфурон 25 Т ифенсульфурон 30 Трибенурон 30 Амидосульфурон 30 Форамсульфурон 35 Йодсульфурон 10 Мезосульфурон 7,5 Никосульфурон 30 Мезосульфурон + йодсульфурон (5:1 мас/мас) 14,4

   причем "другой SU" относится к следующим активным ингредиентам SU, их агрономически приемлемым солям и эфирам, а также их комбинациям_

   другой SU А. И. Примеры соли или эфира азимсульфурон бенсульфурон бенсульфурон-метил хлоримурон хлоримурон-этил хлорсульфурон циносульфурон циклосульфамурон этаметсульфурон этаметсульфурон-метил этоксисульфурон флазасульфурон флуцетосульфурон галосульфурон метазосульфурон метсульфурон ортосульфамурон оксасульфурон примисульфурон пропирисульфурон просульфурон пиразосульфурон римсульфурон галосульфурон-метил метсульфурон-метил примисульфурон-метил пиразосульфурон-этил сульфометурон сульфометурон-метил сульфосульфурон триасульфурон трифлоксисульфурон трифлоксисульфуроннатрий трифлусульфурон трифлусульфурон-метил тритосульфурон
3. 3. Способ выращивания гербицидостойкого (НТ) растения Brassica зимнего вида, включающий:

   (I) культивирование гербицидостойкого (НТ) растения Brassica зимнего вида в присутствии гербицидного состава, содержащего гербицид(ы) класса сульфонилмочевин (SU), в качестве остатка в почве гербицидного состава SU, нанесенного на предшествующую культуру, при дозе от более 0,5х до около 4х SU, причем

   (A) указанный гербицидный состав:
4. 4. Способ по любому из пп.1-3, отличающийся тем, что указанный гербицидный состав дополнительно содержит один или более имидазалиноновых гербицидов.
5. 5. Способ по п.4, отличающийся тем, что имидазалиноновый гербицид представляет собой имазамокс или его агрономически приемлемую соль или эфир.
6. 6. Способ по любому из пп.1-3, отличающийся тем, что указанный гербицидный состав содержит комбинацию йодсульфуруна и мезосульфурона.
7. 7. Способ по любому из пп.1-6, отличающийся тем, что указанный гербицидный состав содержит по меньшей мере один дополнительный активный ингредиент (А.И.), выбранный из ингибиторов 5энолпирувилшикимат-3-фосфат синтазы (EPSPS), глифосата; ингибиторов глутаминсинтетаза, глюфосината; ингибиторов ацетил-KoA карбоксилазы, димов, фопов или денов (dims, fops или dens); ингибиторов протопорфириноген [IX] оксидазы (PPO), сафлуфенацила; фунгицидов, пираклостробина; или их агрономически приемлемых солей или эфиров; и растение Brassica также устойчиво к указанному(ным) дополнительному(ным) А.И.
8. 8. Способ по любому из пп.1-7, дополнительно включающий сбор семян, произведенных растением Brassica зимнего вида.
9. 9. Способ обработки семян гербицидным составом, содержащим гербицид класса сульфонилмоче- 36 030583

   вин (SU), отличающийся тем, что обрабатывают семена, полученные способом по п.8, a SU выбрана из амидосульфурона, флупирсульфурона, форамсульфурона, имазосульфурона, йодсульфурона, мезосульфурона, никосульфурона, тифенсульфурона, а также трибенурона, их агрономически приемлемых солей и эфиров и их комбинаций, и гербицидный состав содержит не более 3 мас.% любого другого гербицида класса сульфонилмочевин (другой SU).
10. 10. Способ по п.9, отличающийся тем, что указанный гербицидный состав дополнительно содержит имидазолиноновый гербицид.
11. 11. Способ по п.10, отличающийся тем, что указанный имидазолиноновый гербицид включает один или более из следующих гербицидов: имазамокс, имазтапир, имазапир и имазапик.

    >BnAHASLlA_PM2 partial<

    actttcatctcccgctacgctcccgacgagccccgcaagggtgctgatatcctcgtggaagccctcgagcgtcaagg

    cgtcgaaaccgtcttcgcttatcccggaggtgcctccatggagatccaccaagccttgactcgctcctccaccatcc

    gtaacgtcctcccccgtcacgaacaaggaggagtcttcgccgccgagggttacgctcgttcctccggcaaaccggga

    atctgcatagccacttcgggtcccggagctaccaacctcgtcagcgggttagccgacgcgatgcttgacagtgttcc

    tctcgtcgccatcacaggacaggtccctcgccggatgatcggtactgacgcgttccaagagacgccaatcgttgagg

    taacgaggtctattacgaaacataactatctggtgatggatgttgatgacatacctaggatcgttcaagaagcattc

    tttctagctacttccggtagacccggaccggttttggttgatgttcctaaggatattcagcagcagcttgcgattcc

    taactgggatcaacctatgcgcttgcctggctacatgtctaggctgcctcagccaccggaagtttctcagttaggcc

    agatcgttaggttgatctcggagtctaagaggcctgttttgtacgttggtggtggaagcttgaactcgagtgaagaa

    ctggggagatttgtcgagcttactgggatccctgttgcgagtacgttgatggggcttggctcttatccttgtaacga

    tgagttgtccctgcagatgcttggcatgcacgggactgtgtatgctaactacgctgtggagcatagtgatttgttgc

    tggcgtttggtgttaggtttgatgaccgtgtcacgggaaagctcgaggcgtttgcgagcagggctaagattgtgcac

    atagacattgattctgctgagattgggaagaataagacacctcacgtgtctgtgtgtggtgatgtaaagctggcttt

    gcaagggatgaacaaggttcttgagaaccgggcggaggagctcaagcttgatttcggtgtttggaggagtgagttga

    gcgagcagaaacagaagttcccgttgagcttcaaaacgtttggagaagccattcctccgcagtacgcgattcaggtc

    ctagacgagctaacccaagggaaggcaattatcagtactggtgttggacagcatcagatgtgggcggcgcagtttta

    caagtacaggaagccgaggcagtggctgtcgtcctcaggactcggagctatgggtttcggacttcctgctgcgattg

    gagcgtctgtggcgaaccctgatgcgattgttgtggacattgacggtgatggaagcttcataatgaacgttcaagag

    ctggccacaatccgtgtagagaatcttcctgtgaagatactcttgttaaacaaccagcatcttgggatggtcatgca

    attggaagatcggttctacaaagctaacagagctcacacttatctcggggacccggcaagggagaacgagatcttcc

    ctaacatgctgcagtttgcaggagcttgcgggattccagctgcgagagtgacgaagaaagaagaactccgagaagct

    attcagacaatgctggatacacctggaccgtacctgttggatgtcatctgtccgcaccaagaacatgtgttaccgat

    gatcccaagtggtggcactttcaaagatgtaataaccgaaggggatggtcgcactaagtactga