EA036122B1

EA036122B1 - Ингибитор jak

Info

Publication number: EA036122B1
Application number: EA201791576A
Authority: EA
Inventors: Хао У; Вэйвэй Мао; Лили Фань; Чарльз З. Дин; Шухуэй Чэнь; Фэй Ван; Гуопин Ху; Цзян Ли
Original assignee: Уси Форчун Фармасьютикал Ко., Лтд
Priority date: 2015-01-20
Filing date: 2016-01-19
Publication date: 2020-09-30
Also published as: MX380276B; KR20170101309A; HUE064003T2; AU2016208906B2; MX2017009449A; EA201791576A1; PL3248980T3; US10617690B2; CA2979425A1; EP3248980B1; CN108349977B; ES2962330T3; WO2016116025A1; EP3248980A1; AU2016208906A1; US20170360794A1; CN108349977A; TW201627309A; TWI690531B; EP3248980C0

Abstract

В изобретении предложены соединения формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соли и их применение для получения лекарственных средств для лечения заболеваний, связанных с JAK.

Description

Область техники

Настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) или фармацевтически приемлемым солям указанных соединений и их применению для получения лекарственных средств для лечения заболеваний, связанных с JAK.

Уровень техники

JAK принадлежит к семейству тирозинкиназ, участвующих в воспалении, аутоиммунных заболеваниях, пролиферативных заболеваниях, отторжении трансплантата, заболеваниях, связанных с нарушением обновления хряща, ахондрогенезе и/или заболеваниях, связанных с гиперсекрецией IL6. В настоящем изобретении также предложены соединение, способ получения соединения и композиция, содержащая соединение, а также способ предотвращения и/или лечения воспаления, аутоиммунных заболеваний, пролиферативных заболеваний, отторжения трансплантата, заболеваний, связанных с нарушением обновления хряща, ахондрогенеза и/или заболеваний, связанных с гиперсекрецией IL6, путем введения соединения согласно настоящему изобретению.

Янус-киназа (JAK) представляет собой цитоплазматическую тирозинкиназу, передающую цитокиновый сигнал от мембранного рецептора к транскрипционному фактору STAT. В уровне техники описаны четыре члена семейства JAK, включая JAK1, JAK2, JAK3 и TYK2. Когда цитокин объединяется со своим рецептором, члены семейства JAK аутофосфорилируются и/или трансфосфорилирируются друг с другом, затем фосфорилируются STAT и поступают в ядро для регуляции транскрипции. Клеточный сигнальный путь JAK-STAT распространяется на интерферон, большинство интерлейкинов, множество цитокинов и эндокринные факторы, такие как ЕРО, ТРО, GH, OSM, LIF, CNTF, GM-CSF и PRL (Vain chenker W. и т.д. (2008)).

Объединенное исследование генетических моделей и микромолекулярного ингибитора JAK раскрывает терапевтическую эффективность нескольких JAK. Согласно генетическим исследованиям мыши и человека JAK3 является мишенью для иммуносупрессии (O'SheaJ. etc. (2004)). Ингибитор JAK3 ус пешно применяли в клинических исследованиях и первоначально использовали при отторжении при трансплантации органов, а затем указанный ингибитор также применяли при других симптомах иммунного воспаления, таких как ревматоидный артрит (РА), псориаз и болезнь Крона (http://clinicaltrials.gov/). TYK2 является потенциальной мишенью иммуновоспалительного заболевания, что подтверждается генетическим исследованием человека и исследованиями, включающими нокаут у мыши (Levy D. и Loomis С. (2007)). JAK1 является новой мишенью в области иммуновоспалительного заболевания. JAK1 гетеродимеризуется с другими JAK для передачи провоспалительного сигнала, инициированного цитокинами. Следовательно, ожидают, что JAK1 и/или другие JAK будут терапевтически полезными при ряде воспалительных заболеваний и других заболеваний, вызванных передачей сигнала, опосредованной JAK.

Тофацитиниб был разработан Pfizer, связанными патентами являются WO 02/096909, US 7301023 и WO 2015087201, и данный препарат успешно поступил на рынок в Америке 7 ноября 2012 г. с фирменным названием Xeljanz® для лечения ревматоидного артрита и болезни Крона.

Патенты, относящиеся к филготинибу, включают US 8808764 и WO 2009047514A1, и филготиниб является селективным ингибитором Jk1, разработанным Galapagos Company и используемым для лечения ревматоидного артрита и болезни Крона, и в настоящее время он находится на II фазе клинических исследований. Сообщалось, что активность в отношении Jak1 IC50=0 нМ, Jak2 IC50=28 нМ.

Сущность изобретения

В настоящем изобретении предложено соединение формулы (I) или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения

где кольцо А выбрано из 5-12-членного гетероциклоалкила или 5-12-членного гетероциклоалкила, замещенного аминогруппой, C_1-3αлкилом или C_1-3гетероалкилом, замещенным аминогруппой;

R₁ выбран из Н, C_1-6aлкила, C_1-6гетероaлкила, ^^циклоалкила, 3-6-членного гетероциклоалкила, 6членного арила, 5-6-членного гетероарила или C_1-6алкила, C_1-6гетероαлкила, ^^циклоалкила, 3-6- 1 036122 членного гетероциклоалкила, 6-членного арила или 5-6-членного гетероарила, каждый из которых замещен галогеном, цианогруппой, гидроксильной группой, С_1-3алкилом или С_1-3гетероалкилом, замещенным галогеном, цианогруппой, гидроксильной группой;

L выбран из одинарной связи, -С(=О)О-, С_1-6ацила или необязательно замещенного амино, аминоС_1-6ацила, С_1-6ациламинометилена и амино-С_1-6ацилметилена;

R₂ выбран из Н, С_1-3алкила и 3-6-членного циклоалкила;

структурное звено может быть заменено и гетеро указывает на присутствие О, S или N, количество которых выбрано из 1, 2 или 3.

Согласно варианту реализации настоящего изобретения заместители указанного 5-10-членного гетероциклоалкила, 5-6-членного гетероарила, С_1-6алкила, С_1-6гетероалкила, С_3-6циклоалкила, 3-6-членного гетероциклоалкила, 5-6-членного арила, 5-6-членного гетероарила, амино, аминоацила, ациламинометилена, аминоацилметилена, С_1-3алкила и 3-6-членного кольца выбраны из галогена, циано, гидрокси, амино или необязательно выбраны из галогенированного, гидроксилированного и/или аммонизированного: С_1-3алкила и С_1-3гетероалкила.

Согласно варианту реализации настоящего изобретения количество указанных заместителей выбрано из 1, 2, 3, 4 или 5.

Согласно варианту реализации настоящего изобретения указанный заместитель выбран из F, Cl, Br, I, ОН, NH₂, CN, Me, этила, н-пропила, изопропила, циклопропила и трифторметила.

Согласно варианту реализации настоящего изобретения кольцо A выбрано из необязательно замещенного пиперидила, пиперазинила, морфолинила, пирролидинила, оксазолила и 7-12-членного гетероциклила с 1-2 гетероатомами.

Согласно варианту реализации настоящего изобретения кольцо А выбрано из необязательно заме щенного

каждый из которых необязательно замещен аминогруппой, С_1-3алкилом или С_1-3гетероалкилом, замещенным аминогруппой.

Согласно варианту реализации настоящего изобретения R1 выбран из H, С_1-4алкила, С_1-2алкил-О-С_1-2алкил-, С_1-2алкил^-С_1-2алкил-, С_4-5циклоалкила, 6-членного арила или 5-6-членного гетероарила, каждый из которых необязательно замещен С_1-6алкилом, С_1-6гетероалкилом, С_3-6циклоалкилом, 3-6-членным гетероциклоалкилом, 6-членным арилом, 5-6-членным гетероарилом, замещенным галогеном, цианогруппой, гидроксильной группой, С_1-3алкилом или С_1-3гетероалкилом, замещенным галогеном, цианогруппой или гидроксильной группой.

Согласно варианту реализации настоящего изобретения R1 и N в L образуют 4-5-членное кольцо.

Согласно варианту реализации настоящего изобретения R1-L- выбран из Me,

каждый из которых необязательно замещен С_1-6алкилом, С_1-6гетероалкилом, С_3-6циклоалкилом, 3-6членным гетероциклоалкилом, 6-членным арилом, 5-6-членным гетероарилом, замещенным галогеном, цианогруппой, гидроксильной группой, С_1-3алкилом или С_1-3гетероалкилом, замещенным галогеном, цианогруппой, гидроксильной группой.

Согласно варианту реализации настоящего изобретения R2 выбран из H, метила, этила или циклопропила.

- 2 036122

Соединение по настоящему изобретению выбрано из

- 3 036122

В соответствии с настоящим изобретением также предложено применение соединения формулы (I) для получения лекарственных средств для лечения заболеваний, связанных с JAK.

Определения

Если не указано иное, следующие термины и выражения, используемые в контексте, имеют следующие значения. Определенный термин или выражение не следует считать неопределенными или неясными, если отсутствует конкретное определение, и их следует понимать в соответствии с общепринятыми значениями. Когда используется фирменное наименование, оно предназначено для обозначения соответствующего товара или его активных ингредиентов.

C1.12 выбран из Ci, C2, C3, C4, C5, C₆, C7, C₈, C9, C10, C11 и C12; C3-12 выбран из C3, C4, C5, C₆, C7, C₈, C9, C10, C11 и C12.

C_1-12алкил или гетероалкил, ^-^циклическая группа или гетероциклический алкил, Ci—палкил или гетероалкил, замещенный ^-^циклическим алкилом или гетероциклическим алкилом, включает, но не ограничивается ими:

C₁—₁₂алкил, C₁-₁₂алкиламино, ^^ди^-^алкил^мино, ^-^алкокси, ^-^алкилацил, ^-^алкоксикарбонил, ^-^алкилсульфонил, C₁-₁₂алкилсульфинил, Оз-пциклоалкил, ^-^циклический алкиламино, ^-^гетероциклический алкиламино, ^-^циклический алкокси, ^-^циклический алкилацил, Оз-одиилический алкоксикарбонил, ^-^циклический алкилсульфонил, ^-^циклический алкилсульфинил, 5-12членный арил или гетероарил, 5-12-членный аралкил или гетероаралкил;

метил, этил, н-пропил, изопропил, -CH₂C(CH₃)(CH₃)(OH), циклопропил, циклобутил, пропилметилен, циклопропилацил, бензилокси, трифторметил, аминометил, гидроксиметил, метоксил, формил, метоксикарбонил, мезил, метилсульфинил, этоксил, этаноил, этилсульфонил, этоксикарбонил, диметиламино, диэтиламино, диэтиламинокарбонил и диэтиламинокарбонил;

N(CH3)2, NH(CH3), -CH2CF3, -СН2СН2СН3, -CH2CH2F, CH2CH2S(=O)2CH3, -CH2CH2CN,

-CH2CH(OH)(CH3)2, -CH2CH(F)(CH)2, -CH2CH2F, -CH2CF3, -CH2CH2CF3, -CH2CH2NH2, -CH2CH2OH, -CH2CH2OCH3, -CH2CH2CH2OCH3, -CH2CH2N(CH3)2, -S(=O)2CH3, -CH2CH2S(O)2CH3; и фенил, тиазолил, бифенил, нафтил, циклопентил, фурил, 3-пирролин, пирролидил, 1,3-диоксолан, пиразолил, 2-пиразолинил, пиразолидинил, имидазолил, оксазол, тиазолил, 1,2,3-имидазолил, 1,2,3триазолил, 1,2,4-триазолил, 1,3,4-тиадиазол, 4Н-пиранил, пиридил, пиперидил, 1,4-диоксан, морфолинил, пиридазинил, пиримидил, пиразинил, пиперазинил, 1,3,5-тритиан, 1,3,5-триазинил, бензофурил, бензотиофенил, индолил, бензимидазолил, бензотиазолил, пуринил, хинолил, изохинолил, циннолин или хиноксалинил.

Термин фармацевтически приемлемый, используемый в настоящем документе, предназначен для описания соединений, материалов, комбинаций и/или состава, которые могут контактировать с тканью человека и животных без чрезмерной токсичности, раздражения и аллергических реакций или других проблем или осложнений в рамках здравого медицинского суждения, которые соотносят с отношением разумной пользы/риска.

Термин фармацевтически приемлемая соль относится к соли соединения согласно настоящему изобретению, которую получают из соединения с конкретным заместителем, обнаруженным в настоящем изобретении, с относительно нетоксичной кислотой или щелочью. Когда соединение согласно настоящему изобретению содержит относительно кислую функциональную группу, соль присоединения основания можно получить путем приведения в контакт достаточного количества щелочи с нейтральной формой соединения указанного типа в чистом растворе или в подходящем инертном растворителе. Фармацевтически приемлемая соль присоединения основания включает соль натрия, соль калия, соль кальция, соль аммония, органическую аминосоль или соль магния или аналогичную соль. Когда соединение согласно настоящему изобретению содержит относительно щелочную функциональную группу, соль присоединения кислоты можно получить путем приведения в контакт достаточного количества кислоты с нейтральной формой соединения указанного типа в чистом растворе или в подходящем инертном растворителе. Примеры фармацевтически приемлемой соли присоединения кислоты включают соли неорганических кислот, которые включают, например, хлористоводородную кислоту, бромистоводородную кислоту, азотную кислоту, угольную кислоту, бикарбонат, фосфорную кислоту, гидрофосфат, дигидро

- 4 036122 фосфат, серную кислоту, гидросульфат, йодистоводородную кислоту, фосфористую кислоту и т.д.; и соль органической кислоты, где указанная соль органической кислоты включает уксусную кислоту, пропионовую кислоту, изомасляную кислоту, малеиновую кислоту, малоновую кислоту, бензойную кислоту, янтарную кислоту, субериновую кислоту, фумаровую кислоту, молочную кислоту, миндальную кислоту, фталевую кислоту, бензолсульфоновую кислоту, пара-толуолсульфоновую кислоту, лимонную кислоту, винную кислоту, метансульфоновую кислоту и другие подобные кислоты; и дополнительно включают соли аминокислоты (такой как аргинин) и соли глюкуроновой кислоты и других органических кислот (Berge et al., Pharmaceutical Salts, Journal of Pharmaceutical Science 66: 1-19(1977)). Конкретное соединение согласно настоящему изобретению содержит щелочную и кислотную функциональную группу для превращения в любую соль присоединения основания или кислоты.

Предпочтительно, соль приводят в контакт с щелочью или кислотой традиционным способом, а затем исходное соединение отделяют, в результате чего получают нейтральную форму соединения. Исходная форма соединения отличается от форм их различных солей некоторыми физическими свойствами, например, отличается растворимостью в полярном растворителе.

Используемая в настоящем документе фармацевтически приемлемая соль относится к производным соединения согласно настоящему изобретению, где исходное соединение модифицировано путем присоединения кислоты или основания с образованием соли. Примеры фармацевтически приемлемой соли включают, но не ограничиваются ими: соль неорганической кислоты или соль органической кислоты и основной группы, например, амина и щелочного металла, или органическую соль кислоты, например, карбоновой кислоты и т.д. Фармацевтически приемлемая соль включает обычную нетоксичную соль или четвертичную аммониевую соль исходного соединения, такую как соли, образованные нетоксичной неорганической кислотой или органической кислотой. Обычная нетоксичная соль включает, но не ограничивается ими, соли, полученные из неорганической кислоты или органической кислоты, где указанная неорганическая кислота или органическая кислота выбрана из 2-ацетоксибензойной кислоты, 2гидроксиэтилсульфоновой кислоты, уксусной кислоты, аскорбиновой кислоты, бензолсульфоновой кислоты, бензойной кислоты, бикарбоната, угольной кислоты, лимонной кислоты, этилендиаминтетрауксусной кислоты, этандисульфоновой кислоты, этансульфоновой кислоты, фумаровой кислоты, глюкогептозы, глюконовой кислоты, глутаминовой кислоты, гликолевой кислоты, бромистоводородной кислоты, хлористоводородной кислоты, гидройодида, гидроксила, гидроксинафтоата, изэтионовой кислоты, молочной кислоты, лактина, додецилсульфоната, малеиновой кислоты, яблочной кислоты, миндальной кислоты, метансульфоновой кислоты, азотной кислоты, щавелевой кислоты, памовой кислоты, пантотеновой кислоты, фенилуксусной кислоты, фосфорной кислоты, полигалактуроновой кислоты, пропионовой кислоты, салициловой кислоты, стеариновой кислоты, этилиденовой кислоты, янтарной кислоты, сульфаминовой кислоты, сульфаниловой кислоты, серной кислоты, танина, винной кислоты и паратолуолсульфоновой кислоты.

Фармацевтически приемлемая соль согласно настоящему изобретению может быть синтезирована из исходного соединения, содержащего кислоту или основную группу, посредством обычного химического процесса. Как правило, получение соли происходит следующим образом: соединения в форме свободной кислоты или свободной щелочной форме подвергают взаимодействию со стехиометрическим количеством соответствующей щелочи или кислоты в воде или органическом растворителе или их смесью с получением соли. Как правило, предпочтительными являются простой эфир, этилацетат, этанол, изопропанол или ацетонитрил и другие неводные среды.

В дополнение к соли соединение, предлагаемое в настоящем изобретении, также имеет форму пролекарства. Пролекарство описанного в настоящем документе соединения может быть легко превращено в соединение согласно настоящему изобретению путем прохождения химических изменений в физиологических условиях. Кроме того, пролекарство может быть превращено в соединение согласно настоящему изобретению химическим или биохимическим способом in vivo.

Некоторые соединения согласно настоящему изобретению могут существовать в несольватированной форме или сольватированной форме, включая гидратную форму. В целом, несольватированная форма эквивалентна сольватированной форме, и обе они входят в объем настоящего изобретения. Некоторые соединения согласно настоящему изобретению могут иметь асимметричный углерод (оптический центр) или двойную связь. Рацемат, диастереоизомер, геометрический изомер и одиночный изомер входят в объем настоящего изобретения.

Графическое представление рацемата и индивидуального возможного стереоизомера; и рацемической смеси, неравномерной смеси энантиомеров или чистого энантиомера соединения содержится в Maehr, J. CHem. Ed. 1985, 62:114-120. 1985, 62: 114-120. Если не указано иное, абсолютная конфигурация стереоскопического центра показана клиновидной связью и пунктирной линией. Когда соединение, как описано в настоящем документе, содержит олефиновую двойную связь или другой геометрически асимметричный центр, если не указано иное, оно включает геометрические изомеры Е и Z. Аналогичным образом, все таутомерные формы входят в объем настоящего изобретения.

Соединение согласно настоящему изобретению может иметь конкретные геометрические изомеры или стереоизомеры. Настоящее изобретение охватывает все указанные соединения, включая цис- и

- 5 036122 транс-изомеры, (-)- и (+)- парный энантиомер, (R)- и (+)-энантиомер. диастереоизомер, (D)-u3OMep, (L)изомер и их рацемическую смесь и другие смеси, такие как смесь, обогащенная энантиомерами или диастереомерами, где все указанные смеси входят в объем настоящего изобретения. Другой асимметричный углерод может существовать в заместителях, например, алкиле. Все указанные изомеры и их смеси входят в объем настоящего изобретения.

(R)- и (Ь)-Изомеры и D- и L-изомеры с оптической активностью могут быть получены с помощью хирального синтеза, хирального реагента или других традиционных технологий. Энантиомер конкретного соединения согласно настоящему изобретению может быть получен с помощью асимметричного синтеза или дериватизацией с помощью хирального вспомогательного агента, где полученную смесь диастереомеров разделяют и вспомогательную группу удаляют с получением требуемого чистого энантиомера. Альтернативно, молекула с щелочной функциональной группой (такой как амино) или кислотной функциональной группой (такой как карбоксил) может образовывать диастереоизомерную соль с соответствующей кислотой и щелочью с оптической активностью, затем разделение диастереоизомера проводят способом разделения, хорошо известным в данной области, и затем извлекают чистый энантиомер. Кроме того, разделение энантиомера и диастереоизомера проводят с помощью хроматографии, в которой используют хиральную неподвижную фазу, и необязательно объединенной с химическим методом дериватизации (например, карбамат может быть получен из аминов).

Соединение согласно настоящему изобретению может включать атомный изотоп на одном или более атомах соединения в неприродном соотношении. Например, соединение может быть помечено радиоизотопом, таким как тритий (³H), йод-125 (¹²⁵I) или C-14 (¹⁴C). Все изотопные варианты соединения согласно настоящему изобретению независимо от наличия радиоактивности входят в объем настоящего изобретения.

Термин фармацевтически приемлемый носитель представляет собой любой агент или средуноситель, который может доставлять эффективное количество настоящего активного соединения, не ухудшая его биологическую активность, и не является токсичным или не проявляет какого-либо побочного эффекта для хозяина или пациента. Типичные носители включают воду, масло, растительное и минеральное, основу для крема, основу для лосьона, основу для мази и т.д. Указанные материалы включают суспендирующий агент, агент, придающий липкость, усилитель проникновения через кожу и т.д. Их составы хорошо известны специалистам в области косметики или области медицинских средств для местного введения. Другие сведения о носителе см. в Remington: The Science and Practice of Phaemacy, 21th Ed., Lippincott, Williams & Wilkins (2005), которая включена в настоящую заявку посредством ссылки.

Термин вспомогательное вещество, в целом, относится к носителю, разбавителю и/или среде, необходимым для получения эффективной медицинской композиции.

В отношении лекарственного средства или фармакологического активного агента, термин эффективное количество или терапевтически эффективное количество относится к количеству лекарственного средства, которое является достаточным для достижения ожидаемого эффекта без токсичности. В отношении перорального состава согласно настоящему изобретению эффективное количество активного агента в композиции относится к количеству, необходимому для достижения ожидаемого эффекта в комбинации с другим активным агентом в композиции. Эффективное количество изменяется в зависимости от каждого индивидуума и зависит от возраста и общего состояния субъекта, а также зависит от конкретного активного агента. Надлежащее эффективное количество в отдельном случае может быть определено с помощью традиционных испытаний специалистами в данной области.

Термин активный ингредиент, терапевтический агент, активное вещество или активный агент относится к химическому веществу, которое может эффективно лечить целевые нарушения, заболевания или состояния.

Термин замещенный относится к любому одному или более атомам водорода на конкретном атоме, замещенным заместителем или несколькими заместителями, включая тяжелый водород и варианты водорода, при условии, что валентное состояние конкретного атома является нормальным, а замещенное соединение является стабильным. Когда заместителем является кетогруппа (то есть =O), это означает, что заменены два атома водорода. Замена кетоном не будет происходить на ариле. Термин необязательно замещенный означает, что он может быть заменен и не может быть заменен. Если не указано иное, вид и количество заместителей могут быть необязательными, если они могут быть реализованы химически.

Когда любая величина (например, R) появляется более одного раза на соединении, ее определение в каждом случае является независимым. Следовательно, например, если группа заменена на 0-2 R, то группа может быть необязательно заменена двумя R максимум, a R в каждом случае имеет независимое значение. Кроме того, комбинация заместителя и/или его вариантов допускается только при условии, что в результате указанной комбинации можно получить стабильное соединение.

Когда связи заместителя могут быть поперечно связаны с двумя атомами на кольце, заместитель может быть связан с любым атомом на кольце. Когда отсутствует указание, через какой атом иллюстрированный заместитель связан с соединением, включенным в общую формулу химической структуры, заместитель может быть связан с любым атомом. Комбинация заместителя и/или его варианта допуска- 6 036122 ется только при условии, что в результате указанной комбинации можно получить стабильное соединение.

Например, структурное звено ОО? или ОО указывает, что оно может быть замещено в любом положении циклогексила или циклодиена.

Заместитель алкила и гетероалкила обычно называют арильным заместителем, и они могут быть выбраны, но не ограничиваются одной или более из следующих групп: -R', OR', =O, =NR', =N-OR', -NR'R'', -SR', галоген, -SiR'R''R', OC(O)R', -C(O)R', -CO2R', -CONR'R'', -OC(O)NR'R'', -NR''C(O)R', NR'C(O)NR''R''', -NRC(O)2R', -NR'''''-C(NR'R''R''')=NR'''', NR''''C(NR'R'')=NR''', -S(O)R', -S(O)2R', -S(O)2NR'R'', NRSO2R', -CN, -NO2, -N₃, -CH(Ph)₂ и фтор(С1-С₄)алкил, количество указанных заместителей составляет от 0 до (2m'+1), где m' представляет собой общее количество атомов углерода в указанных группах. R', R'', R''', R'''' и R''''' независимо выбраны из водорода, замещенного или незамещенного гетероалкила, замещенного или незамещенного арила (такого как арил, замещенный 1-3 галогенами), замещенного или незамещенного алкила, алкокси, сульфоалкокси или аралкила. Когда соединение согласно настоящему изобретению включает более одного R, например, каждый R выбран независимо так же, как каждая группа, когда содержится более одного R', R'', R''', R'''' и R'''''. Когда R' и R'' присоединены к одному и тому же атому азота, они могут объединяться с атомом азота с образованием 5-, 6- или 7членного кольца. Например, -NR'R включат, но не ограничивается ими, 1-пирролидил и 4-морфолинил. Согласно обсуждению вышеприведенного заместителя, специалистам в данной области будет понятно, что термин арил включает группу, образованную атомом углерода, связанным с неводородной группой, такой как галогеналкил (такой как -CF3 и -CH2CF3) и ацил (такой как -С(О)СН₃, -C(O)CF₃, -C(O)CH₂CH₃ и т.д.).

Аналогично заместителю алкила, заместитель арила и гетероарильный заместитель, в целом, называют арильным заместителем, который выбирают из, например, -R', -OR', -NR'R'', -SR', -галогена, -SiR'R''R''', OC(O)R', -C(O)R', -CO2R', -CONR'R'', -OC(O)NR'R'', -NR''C(O)R', NR' C(O)NR''R''', -NR''C(O)2R', -NR'''''-C(NR'R''R''')=NR'''', NR'''' C(NR'R'')=NR', -S(O)R', -S(O)2R', -S(O)2NR'R'', NRSO2R', -CN, -NO2, -N₃, -CH(Ph)₂, фтор^-Оалкокси и фтор^-Оалкила и т.д., количество указанного заместителя составляет от 0 до общего количества открытой валентности на ароматическом кольце; где R', R'', R''', R'''' и R''''' независимо выбраны из водорода, замещенного или незамещенного алкила, замещенного или незамещенного гетероалкила, замещенного или незамещенного арила и замещенного или незамещенного гетероарила. Когда соединение согласно настоящему изобретению включает более одного R, например, каждый R выбран независимо так же, как каждая группа, когда содержится более одного R', R'', R''', R'''' и R'''''.

Два заместителя на соседних атомах арила или гетероарила могут быть необязательно замещены заместителем с общей формулой -T-C(O)-(CRR')q-U-, где Т и U независимо выбраны из -NR, -О-, CRR'или одинарной связи и q представляет собой целое число от 0 до 3. Альтернативно, два заместителя на соседних атомах арила или гетероарила могут быть необязательно замещены заместителем с общей формулой -A(CH₂)rB-, где A и B независимо выбраны из -CRR'-, -О-, -NR-, -S-, -S(O)-, -S(O)₂-, -S(O)₂NR'- или одинарной связи и r представляет собой целое число от 1 до 4. Необязательно, одинарная связь на новом сформированном кольце может быть заменена двойной связью. Альтернативно, два заместителя на соседнем атоме арила или героарила могут быть необязательно замещены заместителем с общей формулой -A(CH₂)rB-, где s и d независимо выбраны из целого числа от 0 до 3 и X представляет собой -О-, -NR', -S-, -S(O)-, -S(O)₂- или -S(O)₂NR'-. Заместители R, R', R'' и R''' независимо выбраны из водорода и замещенного или незамещенного (С-Оалкила.

Если не указано иное, термин гало- или галоген сам или как часть другого заместителя представляет собой атом фтора, хлора, брома или йода. Кроме того, термин галогеналкил включает моногалогенированный алкил и полигалогенированный алкил. Например, термин галоген^-Оалкил включает, но не ограничивается ими, трифторметил, 2,2,2-трифторэтил, 4-хлорбутил, 3-бромпропил и т.д.

Примеры галогеналкила включают, но не ограничиваются ими: трифторметил, трихлорметил, пентафторэтил и пентахлорэтил. Алкокси представляет собой указанный выше алкил, содержащий определенное количество атомов углерода, связанных кислородным мостиком. С^Алкокси включает C1, C₂, C₃, C₄, C₅ и С₆алкоксил. Примеры алкокси включают, но не ограничиваются ими: метокси, этокси, нпропокси, изопропокси, н-бутокси, втор-бутокси, трет-бутокси, н-пентилокси и S-пентилокси. Циклоалкил включает насыщенную циклическую группу, такую как циклопропил, циклобутил или циклопентил. 3-7 циклоалкил включает C₃, C₄, C₅, C₆ и C₇ циклоалкил. Алкенил включает линейную или разветвленную углеводородную цепь, где одна или более двойных связей углерод-углерод, таких как винил и пропенил, присутствуют в любом стабильном месте на цепи.

Термин гало- или галоген означает фтор, хлор, бром и йод.

Если не указано иное, термин гетеро означает гетероатом или гетерорадикал (т.е. радикал, содержащий гетероатомы), включая атомы, отличные от углерода (C) и водорода (H), и содержащий их радикал, например, включая кислород (О), азот (N), серу (S), кремний (Si), германий (Ge), алюминий (Al), бор (B), -O-, -S-, =O, =S, -C(=O)O-, -C(=O)-, -C(=S)-, -S(=O), -S(=O)₂-, и необязательно замещенный

- 7 036122

-C(=O)N(H)-, -N(H)-, -C(=NH)-, -S(=O)2N(H)- или -S(=O)N(H)-.

Если не указано иное, кольцо относится к замещенному или незамещенному циклоалкилу, гетероциклоалкилу, циклоалкенилу, гетероциклоалкенилу, циклоалкинилу, гетероциклоалкинилу, арилу или гетероарилу. Так называемое кольцо включает одно кольцо, связанное кольцо, спирокольцо и конденсированное кольцо или мостиковое кольцо. Количество атомов в кольце обычно определяется как количество членов колец, например, 5-7-членное кольцо относится к окружной компоновке 5-7 атомов. Если не указано иное, кольцо необязательно содержит 1~3 гетероатома. Следовательно, термин 5-7-членное кольцо включает, например, фенилпиридин и пиперидинил; и, с другой стороны, термин 5-7-членное гетероциклическое алкильное кольцо включает пиридил и пиперидинил, но не включает фенил. Термин кольцо также включает кольцевую систему, содержащую по меньшей мере одно кольцо, причем каждое кольцо независимо соответствует вышеупомянутому определению.

Если не указано иное, термин гетероциклическое или гетероцикл означает стабильное моноциклическое кольцо, бициклическое кольцо или трицикл, содержащее гетероатом или гетероатомную группу, которое может быть насыщенными, частично ненасыщенными или ненасыщенными (ароматическими), и которое содержит атомы углерода и 1, 2, 3 или 4 кольцевых гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, где любой из указанных гетероциклов может быть конденсирован с бензольным кольцом с образованием бициклического кольца. Гетероатомы азота и серы могут быть необязательно окислены (то есть NO и S(O)). Атом азота может быть замещенным или незамещенным (то есть N или NR, где R представляет собой H или другой заместитель, уже определенный в настоящем документе). Гетероциклическое кольцо может быть присоединено к боковым группам любого гетероатома или атома углерода с образованием стабильной структуры. Если полученное соединение является стабильным, гетероциклы, описанные в настоящем документе, могут подвергаться замещениям в положениях углерода или азота. Атом азота на гетероцикле необязательно кватернизирован. В предпочтительном варианте реализации, когда общее количество атомов S и O в гетероцикле превышает 1, указанные гетероатомы не смежны друг с другом. В другом предпочтительном варианте реализации общее количество атомов S и O в гетероцикле не превышает 1. Используемый в настоящем документе термин ароматический гетероцикл или гетероарил означает стабильное 5-членное моноциклическое кольцо или бициклическое кольцо, 6-членное моноциклическое кольцо или бициклическое кольцо, 7-членное моноциклическое кольцо или бициклическое кольцо или ароматический цикл, содержащий 7, 8, 9 или 10-членный бициклический гетероциклил, который содержит атомы углерода и 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из N, O и S. Атом азота может быть замещенным или незамещенным (то есть N или NR, где R представляет собой H или другой заместитель, уже определенный в настоящем документе). Гетероатомы азота или серы могут быть необязательно окислены (то есть NO и S(O)). Следует отметить, что общее количество атомов S и O в ароматическом гетероцикле не превышает 1. Мостиковое кольцо также включено в определение гетероцикла. Мостиковое кольцо образуется, когда один или несколько атомов (то есть C, O, N или S) связаны с двумя несмежными атомами углерода или атомами азота. Предпочтительные мостиковые кольца включают, но не ограничиваются ими, один атом углерода, два атома углерода, один атом азота, два атома азота и одну группу углерод-азот. Следует отметить, что один мостик всегда превращает моноциклическое кольцо в трициклическое кольцо. В мостиковом кольце заместители на кольце могут также появляться на мостике.

Примеры гетероциклических соединений включают, но не ограничиваются ими, акридинил, азоцин, бензимидазолил, бензофуранил, бензотиолфуранил, бензотиолфенил, бензоксазолил, бензоксазолинил, бензотиазолил, бензотриазолил, бензотетразолил, бензизоксазолил, бензизотиазолил, бензимидазолинил, карбазолил, 4aH-карбазолил, карболинил, хроманил, хромен, циннолинил декагидрохинолил, 2H,6H1,5,2-дитиазинил, дигидрофуроЦД-^тетрагидрофуранил, фурил, фуразанил, имидазолидинил, имидазолинил, имидазолил, Ш-индазолил, индол-алкенил, дигидроиндолил, индолизинил, индолил, ЗН-индолил, изотиноил, изобензофуранил, пиран, изоиндолил, изоиндолинил, изоиндолил, индолил, изохинолил, изотиазолил, изоксазолил, метилендиоксифенил, морфолинил, нафтиридинил, октагидроизохинолинил, оксадиазолил, 1,2,3-оксадиазолил, 1,2,4-оксадиазолил, 1,2,5-оксадиазолил, 1,3,4-оксадиазолил, оксазолидинил, оксазолил, изоксазолил, оксиндолил, пиримидинил, фенантридинил, фенантролинил, феназин, фенотиазин, бензоксантин, феноксазинил, фталазинил, пиперазинил, пиперидинил, пиперидон, 4пиперидон, пиперонил, птеридинил, пуринил, пиранил, пиразинил, пиразолидинил, пиразолинил, пиразолил, пиридазинил, пиридоксазолы, пиридиндимидазолы, пиридоксиазолы, пиридил, пиримидинил, пирролидил, пирролинил, 2Н-пирролил, пирролил, пиразолил, хиназолинил, хинолил, 4Н-хинолизинил, хиноксалинил, хинуклидинил, тетрагидрофуранил, тетрагидроизохинолил, тетрагидрохинолил, тетразолил, 6Н-1,2,5-тиадиазинил, 1,2,3-тиадиазолил, 1,2,4-тиадиазолил, 1,2,5-тиадиазинил, 1,3,4-тиадиазинил, тиантренил, тиазолил, изотиазолилтиенил, тиенил, тиенооксазолил, тиенотиазолил, тиеноимидазолил, тиенил, триазинил, 1,2,3-триазолил, 1,2,4-триазолил, 1,2,5-триазолил, 1,3,4-триазолил и ксантенил. Примеры дополнительно включают конденсированное кольцо и спирокольцо.

Если не указано иное, термин алкил или зависимое понятие (такое как алкил, алкенил, алкинил, фенил и т.д.) сам или в составе другого заместителя представляет собой атомные группы углеводородов или их комбинацию в виде линейной цепи, разветвленной цепи или кольца, он может быть полностью

- 8 036122 насыщенным или ненасыщенным на одном или нескольких членах, может быть однозамещенным, дизамещенным или полизамещенным, может быть моновалентным (например, метилом), двухвалентным (например, метиленом) или многовалентным (например, метин) и может включать двухвалентную или многовалентную атомную группу с атомами углерода в определенном количестве (например, C₁-C₁₀, который представляет собой от 1 до 10 атомов углерода). Алкил включает, но не ограничивается ими, алифатический углеводородный радикал и арильный углеводородный радикал. Алифатический углеводородный радикал включает формы цепи и кольца и, в частности, включает, но не ограничивается ими, алкил, алкенил, алкинил, и арильный углеводородный радикал включает, но не ограничивается ими, 612-членный арильный углеводородный радикал, такой как бензол, нафталин и т.д. В некоторых в вариантах реализации термин алкил обозначает атомную группу с линейной цепью и разветвленной цепью или их комбинацию, он может быть полностью насыщенным или ненасыщенным на одном или нескольких членах и может включать двухвалентную или многовалентную атомную группу Примеры насыщенного углеводородного радикала включают, но не ограничиваются ими, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил, изобутил, втор-бутил, изобутил, циклогексил, (циклогексил)метил, циклопропилметил и н-амил, н-гексил, н-гептил, н-октил и т.д., и их гомологи или изомеры. Ненасыщенный алкил имеет одну или более двойных связей или тройных связей, их примеры включают, но не ограничиваются ими, винил, 2-пропенил, бутенил, кротил, 2-изопентенил, 2-(бутадиенил), 2-,4-пентадиенил, 3-(1,4пентадиенил), ацетил, 1- и 3-пропинил, 3-бутинелен и их высшие гомологи или изомеры.

Если не указано иное, термин гетероалкил или зависимое понятие (такое как гетероалкил, гетероалкенил, гетероалкинил, гетероарил и т.д.) сам или в сочетании с другим термином представляет собой стабильную углеводородную группу или их комбинацию с линейной цепью, разветвленной цепью или в форме кольца, которая образована конкретным количеством атомов углерода и по меньшей мере одним гетероатомом. В некоторых вариантах реализации термин гетероалкил сам или в сочетании с другим термином представляет собой стабильный углеводородный радикал или их комбинацию с линейной цепью, разветвленной цепью или в форме кольца, которая образована определенным количеством атомов углерода и по меньшей мере одним гетероатомом. В конкретном варианте реализации гетероатом выбран из В, О, N и S, где атомы азота и серы необязательно окислены, и гетероатом азота может быть необязательно кватернизирован. Гетероатомы В, О, N и S могут находиться в любом внутреннем положении гетероалкила (включая положение, в котором алкил присоединен к остальной части молекулы). Примеры включают, но не ограничиваются ими, -СН₂-СН₂-О-СНз, -CH₂-CH₂-NH-CH₃, -CH₂-CH₂-N(CH₃)-CH₃, -CH₂-S-CH₂-CH₃, -CH2-CH2, -S(O)-CH₃, -CH₂-CH₂-S(O)₂-CH₃, -СН=СН-О-СН₃, -CH₂-CH=N-OCH₃ и -CH=CH-n(CH₃)-CH₃. He более двух гетероатомов могут быть соединены непрерывно, например -CH2-NH-OCH3.

Термин алкокси, алкиламино и алкилсульфанил (или сульфоалкокси) являются традиционными выражениями, которые относятся к алкильной группе, связанной с остальной частью молекулы через атом кислорода, аминогруппу или атом серы.

Если не указано иное, термин циклоалкил, гетероциклический алкил или зависимое понятие (такое как арил, гетероарил, циклоалкил, гетероциклоалкил, циклоалкенил, гетероциклоалкенил, циклоалкинил, гетероциклогексинил и т.д.) сам или в сочетании с другими терминами соответственно представляет собой циклизованный алкил и гетероалкил. Кроме того, в отношении гетероалкила или гетероциклоалкила (такого как гетероалкил и гетероциклоалкил), гетероатом может занимать положение, в котором гетероцикл присоединяется к остальной части молекулы. Примеры циклоалкила включают, но не ограничиваются ими, циклопентил, циклогексил, 1-циклогексенил, 3-циклогексенил, циклогептил и т.д. Неограничивающие примеры гетероциклила включают 1-(1,2,5,6-тетрагидропиридин), 1-пиперидил, 2-пиперидил, 3-пиперидил, 4-морфолинил, тетрагидрофуран-2-ил, тетрагидрофуран индол-3-ил, тиофан2-ил, тиофан-3-ил, 1-пиперазинил и 2-пиперазинил.

Если не указано иное, термин арил относится к полиненасыщенному ароматическому заместителю, который может быть монозамещенным, бизамещенным или полизамещенным и может быть моновалентным, двухвалентным или многовалентным и может быть моноциклическим или полициклическим (например, от моноциклического до трициклического, где по меньшей мере одно кольцо является ароматическим), и они конденсированы вместе или соединены посредством ковалентной связи. Термин гетероарил относится к арилу (или кольцу), содержащему 1-4 гетероатома. В иллюстративном примере гетероатом выбран из В, N, О и S, где атом азота и серы необязательно окислен и атом азота необязательно кватернизирован. Гетероарил может быть связан с другими частями молекулы через гетероатом. Неограничивающие примеры арила и гетероарила включают 1-нафтил, 2-нафтил, 4-бифенил, 1-пиррил, 2пиррил, 3-пиррил, 3-пиразолил, 2-имидазолил, 4-имидазолил, пиразинил, 2-оксазолил, 4-оксазолил, 2бензил-4-оксазолил, 5-оксазолил, 3-изоксазолил, 4-изоксазолил, 5-изоксазолил, 2-тиазолил, 4-тиазолил, 5-тиазолил, 2-фурил, 3-фурил, 2-тиенил, 3-тиенил, 2-пиридил, 3-пиридил, 4-пиридил, 2-пиримидил, 4пиримидил, 5-бензотиазолил, пуринил, 2-бензимидазолил, 5-индолил, 1-изохинолил, 5-изохинолил, 2хиноксалинил, 5-хиноксалинил, 3-хинолил и 6-хинолил. Заместитель любого указанного выше арильного и гетероарильного кольца выбран из приемлемого заместителя, указанного ниже.

Для удобства, когда арил используется вместе с другими терминами (такими как арилокси, арилтио

- 9 036122 и аралкил), он включает арильное и гетероарильное кольцо, как определено выше. Таким образом, термин аралкил включает атомные группы с арилом, присоединенные к алкилу (например, бензил, фенэтил, пиридилметил и т.д.), и включает алкилы с атомом углерода (например, метилен), уже замещенные, например, атомом кислорода, например, феноксиметил, 2-пиридин кислород метил, 3-(1нафтокси)пропил и т.д.

Термин уходящая группа относится к функциональной группе или атому, который может быть заменен другой функциональной группой или атомом посредством замещения (например, нуклеофильного замещения).

Например, типичная уходящая группа включает трифлат; хлор, бром и йод; сульфонат, такой как метансульфонат, толуолсульфонат, п-бромбензолсульфонат, п-толуолсульфонат; ацилокси, такой как ацетоксил и трифторацетил.

Термин защитная группа включает, но не ограничивается ими, аминозащитную группу, гидроксизащитную группу или сульфгидрильную защитную группу. Термин аминозащитная группа относится к защитной группе, которая подходит для предотвращения побочной реакции по азоту аминогруппы. Типичная аминозащитная группа включает, но не ограничивается ими: формил, ацил, такой как цепь алканоила (например, ацетил, трихлорацетил и трифторацетил); алкоксикарбонил, например, третбутилоксикарбонил (Boc); арилметоксикарбонил, например, карбобензокси (Cbz) и 9флуоренилметоксикарбонил (Fmoc); арилметил, например, бензил (Bn), трифенилметил (Tr), 1,1-ди-(4'метоксифенил)метил; силил, например, триметилсилил (TMC) и трет-бутилдиметилсилил (TBS). Термин гидроксизащитная группа относится к защитной группе, которая подходит для предотвращения побочной реакции гидроксила. Типичная гидроксизащитная группа включает, но не ограничивается ими, алкил, такой как метил, этил и трет-бутил; ацил, такой как алканацил (такой как ацетил); арилметил, такой как бензил (Bn), п-метоксибензил (РМВ), 9-флуоренилметил (Fm) и дифенилметил (бензгидрил, DPM); силил, такой как триметилсилил (TMC) и трет-бутилдиметилсилил (TBS).

Соединение согласно настоящему изобретению может быть получено с помощью множества методов синтеза, известных специалистам в данной области техники, включая подробные варианты реализации, перечисленные ниже, варианты реализации, образованные комбинацией указанных подробных вариантов реализации и других способов химического синтеза, и эквивалентную замену, известную специалистам в данной области техники. Предпочтительные варианты реализации включают, но не ограничиваются ими, варианты реализации настоящего изобретения.

Растворитель, используемый в настоящем изобретении, является коммерчески доступным. Следующие сокращения используются в настоящем изобретении: вод. представляет собой воду; HATU представляет собой O-(7-азабензотриαзол-1-ил)-N,N',N',N'-тетраметилмочевины гексафторфосфат; EDC представляет собой гидрохлорид №(3-диметиламинопропил)-Ы'-этилкарбодиимида; m-CPBA представляет собой 3-хлорпероксибензойную кислоту; экв. представляет собой эквивалентную массу и эквивалент; CDI представляет собой карбонилдиимидазол; ДХМ представляет собой дихлорметан; PE представляет собой петролейный эфир; DIAD представляет собой диизопропиловый эфир азо-дикарбоновой кислоты; ДМФА представляет собой N.N-диметилформамид; ДМСО представляет собой диметилсульфоксид; EtOAc представляет собой этилацетат; EtOH представляет собой этиловый спирт; MeOH представляет собой метиловый спирт; CBz представляет собой карбобензокси, который представляет собой аминозащитную группу; BOC представляет третичный бутилкарбонил, который представляет собой аминозащитную группу; HOAc представляет собой уксусную кислоту; NaCNBH₃ представляет собой цианоборгидрид натрия; к.т. представляет собой комнатную температуру; O/N представляет собой ночь; ТГФ представляет собой тетрагидрофуран; Boc₂O представляет собой ди-трет-бутилдикарбонат; TFA представляет собой трифторуксусную кислоту; DIPEA представляет собой диизопропилэтиламин; SOC12 представляет собой тионилхлорид; CS2 представляет собой дисульфид углерода; TsOH представляет собой п-толуолсульфоновую кислоту; NFSI представляет собой №фтор-№(бензолсульфонил)бензсульфамид; NCS представляет собой 1-хлорпирролидин-2,5-дикетон; n-Bu₄NF представляет собой фтортетрабутиламмоний; iPrOH представляет собой 2-пропиловый спирт; mp представляет собой температуру плавления; LDA представляет собой диизопропиламид лития; ТСХ представляет тонкослойную хроматографию; MS ESI представляет собой масс-спектр с ионизацией электрораспылением; ДХМ представляет собой дихлорметан; ЖХМС представляет собой жидкостную хроматографию-массспектрометрию; SFC представляет собой сверхкритическую флюидную хроматографию; ДМФА представляет собой КХ-диметилформамид; HOBt представляет собой 1-гидроксибензотриазол и EDCI представляет гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида.

Соединение названо вручную или с помощью программного обеспечения ChemDraw®, а для коммерчески доступного соединения используется наименование, указанное в каталоге поставщика.

- 10 036122

Подробное описание

Чтобы более подробно проиллюстрировать настоящее изобретение, представлены следующие варианты реализации, но при этом объем настоящего изобретения ими не ограничивается.

Синтез ключевого промежуточного соединения 1, промежуточного соединения 2 и промежуточного соединения 3

Стадия 1.

Соляную кислоту/диоксан (10 M, 200 мл) по каплям добавляли в раствор (50 мл) этил 1-Bocпиперидил-3-карбоксилата (50 г, 194,30 ммоль) в ДХМ при 0°C, затем реакционный раствор нагревали до 25°C и перемешивали в течение 2ч. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением гидрохлорида этилпиперидил-3-карбоксилата, который представлял собой желтое твердое вещество (42,63 г, неочищенный продукт). Указанный продукт непосредственно использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Значение C₈H₁₅NO₂[M+H]+ 158 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 158.

Стадия 2.

Гидрохлорид этилпиперидил-3-карбоксилата (40,00 г, 206,54 ммоль) растворяли в смешанном растворителе ледяной уксусной кислоты (400 мл) и воды (200 мл), и водный раствор (200 мл) нитрита натрия (28,50 г, 413,08 ммоль) по каплям добавляли (30 мин) при 0°C. После добавления по каплям водного раствора указанную смесь перемешивали и подвергали взаимодействию в течение 1 ч при 0°C. После чего реакционный раствор нагревали до 25°C и затем снова перемешивали в течение 1 ч. ТСХ (петролейный эфир:этилацетат=5:1) показала, что исходные вещества полностью прореагировали. Реагенты гасили водой и затем экстрагировали с использованием этилацетата (100 млх2). Объединенные органические фазы промывали насыщенным раствором гидрокарбоната натрия (100 млх3) и насыщенным солевым раствором (100 млх2), соответственно, сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остатки очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=5:1) с получением этилового эфира 1-нитрозопиперидил-3карбоновой кислоты, которая представляла собой бесцветное маслянистое вещество (31,00 г, выход составил 80,60%). Значение C₈H₁₄N₂O₃ [М+Н]+ 187 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 187.

Стадия 3.

Этил-1-нитрозопиперидил-3-карбоксилат (10,00 г, 53,70 ммоль) и цинковую пыль (17,56 г, 268,50 ммоль) растворяли в метаноле (80 мл) и охлаждали до -5°C, и затем ледяную уксусную кислоту (80 мл) добавляли по каплям. Полученную смесь перемешивали в течение 30 мин при 0°C, затем нагревали до 25°C и перемешивали со взаимодействием в течение 2 ч. ТСХ показала завершение реакции. Твердые вещества отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остатки доводили насыщенным раствором гидрокарбоната натрия до рН 7-8 и водную фазу млх экстрагировали смесью дихлорметан/метанол (5:1) (100 млх3). Объединенные органические фазы промывали насыщенным раствором хлорида натрия (50 млх3), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением этилового эфира 1-аминопиперидил-3-карбоновой кислоты, которая представляла собой светло-коричневое маслянистое вещество (6,50 г, неочищенный продукт). Указанный продукт непосредственно использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Значение C₈H₁₆N₂O₂ [M+H]+ 173 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 173.

Стадия 4.

Этил-1-аминопиперидил-3-карбоксилат (6,50 г, 37,74 ммоль) и 4-хлор-7-тозил-7Н-пирроло[2,3d]пиримидин (12,78 г, 41,51 ммоль) растворяли в ДХМ (60 мл). Триэтиламин (11,46 г, 113,22 ммоль) добавляли в указанный выше раствор при 25°C. Смешанный раствор перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 10 ч при 25°C. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь концентрировали досуха при пониженном давлении. Остатки выливали в воду (100 мл) и водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (100 млх2). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (50 млх2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали досуха при пониженном давлении. Остатки очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (дихлорметан:этилацетат=1:0 до 2:1) с получением этилового эфира 1-((7-тозил-7Нпирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)пиперидил-3-карбоновой кислоты, которая представляла собой белое вспененное твердое вещество (5,60 г, где выход составил 33,47%). Остатки очищали с помощью

- 11 036122 колоночной хроматографии на силикагеле (дихлорметандихлорметан:этилацетат=1:0 до 2:1) с получением этилового эфира 1-((7-р-тозил-7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)пиперидил-3-карбоновой кислоты, которая представляла собой белое вспененное твердое вещество (5,60 г, выход составил

33,47%). Значение C₂₁H₂₅N₅O₄S [M+H]+ 444 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 444.

Стадия 5.

Этил-1-[[7-(тозил)пирроло[2,3-0]пиримидин-4-ил]амино]пиперидил-3-карбоксилат (2,00 г, 4,51 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (30 мл), и NaH (60%, 270,80 мг, 6,77 ммоль) добавляли партиями при 0°C, затем указанную смесь нагревали до 28°C и перемешивали в течение 30 мин. После чего реакционную систему охлаждали до 0°C, и по каплям добавляли метилйодид (960,22 мг, 6,77 ммоль); затем реакционную систему нагревали до 28°C и перемешивали со взаимодействием в течение 2 ч при той же температуре. ЖХМС и ТСХ показали, что реакция была завершена. Реакционный раствор гасили водой (5 мл) и водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (20 млх3). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (15 млх2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали досуха при пониженном давлении. Остатки очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=5:1, 3:1) с получением этил-1[метил-[7-(тозил)пирроло[2,3-0]пиримидин-4-ил]амино]пиперидил-3-карбоксилата, который представлял собой белое вспененное твердое вещество (900,00 мг, где выход составил 41,43%). Значение C₂₂H₂₇N₅O₄S [M+H]+ 458, рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 458.

Стадия 6.

Этил-1 - [метил- [7-(тозил)пирроло [2,3-d] пиримидин-4-ил] амино] пиперидил-3 -карбоксилат (900,00 мг, 1,97 ммоль) растворяли в смешанном растворителе метанола (8 мл), ТГФ (8 мл) и воды (4 мл) и добавляли гидроксид натрия (315,20 мг, 7,88 ммоль), затем указанную смесь нагревали до 70°C и перемешивали в течение 1 ч. ТСХ показала завершение реакции. Растворитель концентрировали досуха при пониженном давлении и остатки доводили с помощью 2 М соляной кислоты (4 мл) до рН 3-4.

Водную фазу подвергали концентрированию под вакуумом с получением 1-[метил(7Н-пирроло[2,3d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил-3-карбоновой кислоты, которая представляла собой белое твердое вещество (650,00 мг, неочищенный продукт). Указанный продукт непосредственно использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Значение C₁₃H₁₇N₅O₂ [M+H]+ 276 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 276.

Вариант реализации 1.

1-((7Н-Пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)^-(2,2,2-трифторэтил)пиперидил-3-формамид

Стадия 1.

Промежуточное соединение 1 (270,00 мг, 608,77 мкмоль) растворяли в смешанном растворителе тетрагидрофурана (5 мл) и воды (3 мл), моногидрат гидроксида лития (51,09 мг, 1,22 ммоль) добавляли партиями при 25°C и перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 5 ч при 25°C. ЖХМС и ТСХ показали, что реакция была завершена. Реакционный раствор концентрировали досуха при пониженном давлении и водную фазу доводили с помощью 2 М HCl (3 мл) до рН 2-3 и экстрагировали этилацетатом (10 млх2). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 1((7-тозил-7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)пиперидил-3-карбоновой кислоты, которая представляла собой желтое маслянистое вещество (200,00 мг, неочищенный продукт). Значение C₁₉H₂₁N₅O₄S [M+H]+ 416 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 416.

Стадия 2.

1-((7-Тозил-7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)пиперидил-3-карбоновую кислоту (200,00 мг, 481,38 мкмоль) растворяли в ДМФА (10 мл) и затем HOBt (130,09 мг, 962,76 мкмоль), EDCI (184,56 мг, 962,76 мкмоль), триэтиламин (292,27 мг, 2,89 ммоль) и 2,2,2-трифторэтиламин (95,36 мг, 962,76 мкмоль) добавляли при 0°C. Указанную смесь нагревали до 25°C и перемешивали в течение 10 ч. ЖХМС показала завершение реакции. Реакционный раствор выливали в воду (30 мл) и водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (15 млх2). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (10 млх2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остатки очищали с помощью преп-ТСХ (этилацетат:петролейный эфир=1:10) с получением 1((7-тозил-7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)^-(2,2,2-трифторэтил)пиперидил-3-формамида, ко- 12 036122 торый представлял собой желтое маслянистое вещество (40,00 мг, выход составил 16,74%). Значение

C₂₁H₂₃F₃N₆O₃S [M+H]⁺ 497 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 497.

Стадия 3.

1-((7-Тозил-7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)^-(2,2,2-трифторэтил)пиперидил-3-формамид (40,00 мг, 80,56 мкмоль) растворяли в MeOH (3 мл) и воде (3 мл), карбонат калия (22,27 мг, 161,12 мкмоль) добавляли при 25°C и затем реакционный раствор нагревали до 70°C и перемешивали в течение 2 ч. ЖХМС показала завершение реакции. Смесь охлаждали до 25°C и концентрировали досуха при пониженном давлении. Водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (10 млх2). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остатки очищали с помощью преп-ТСХ (дихлорметан:метанол=10:1) с получением WX01: 1-((7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)-№(2,2,2трифторэтил)пиперидил-3-формамида (7,00 мг, выход составил 25,38%). 1Н ЯМР (400 МГц, MeOD-d₄) δ=8,11 (br. s., 1H), 6,51-7,23 (m, 2H), 3,96 (br. s, 2H), 2,53-3,26 (m, 5H), 1,38-2,05 (m, 4H), 6,74 (s, 1H), 4,644,72 (m, 1H), 4,44-4,59 (m, 2H), 3,77-3,84 (m, 1H), 3,66 (dd, J=5,02, 13,30 Гц, 1Н), 3,18-3,28 (m, 3H), 1,25 (t, J=7,40 Гц, 3H). Значение C₁₄H₁₇F₃N₆O [M+H]⁺ 343 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 343.

Вариант реализации 2.

№Метил-1-(метил(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)-(2,2,2-трифторэтил)пиперидил-3формамид

Стадия 1.

1-((7-Тозил-7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)^-(2,2,2-трифторэтил)пиперидил-3-формамид (60,00 мг, 120,84 мкмоль) растворяли в ТГФ (5 мл) и NaH (60%, 5,30 мг, 132,50 мкмоль) добавляли партиями при 0°C; затем указанную смесь перемешивали в течение 1 ч при 0°C, по каплям добавляли метилйодид (1,05 г, 7,40 ммоль). Реакционный раствор нагревали до 20°C и перемешивали в течение 2 ч. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 0°C, добавляли воду (10 мл) и перемешивали в течение 20 мин, затем водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (10 млх2). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (10 млх2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали досуха при пониженном давлении с получением N-метил-1 - [метил- [7-(тозил)-7Н-пирроло [2,3-d] пиримидин-4-ил] амино] -N-(2,2,2-трифторэтил)пиперидил-3-формамида, который представлял собой желтое маслянистое вещество (50,00 мг, неочищенный продукт). Значение C₂₃H₂₇F₃N₆O₃S [М+Н]⁺ 525 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 525.

Стадия 2.

N-Метил-1 - [метил- [7-(тозил)-7Н-пирроло [2,3 -d] пиримидин-4-ил] амино] -№(2,2,2-трифторэтил)пиперидил-3-формамид (50,00 мг, 95,32 мкмоль) растворяли в смешанном растворителе метанола (3 мл) и воды (3 мл), добавляли карбонат калия (39,52 мг, 285,96 мкмоль) и затем указанную смесь нагревали до 80°C и перемешивали в течение 5 ч. ЖХМС показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 25°C и концентрировали досуха при пониженном давлении. Остатки очищали с помощью преп-ВЭЖХ с получением WX02: №метил-1-(метил(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)-(2,2,2-трифторэтил)пиперидил-3-формамида (11,00 мг, выход составил 31,16%). 1H ЯМР (400 МГц, MeOD-d₄) δ=8,11 (br. s., 1H), 7,04-7,11 (m, 2H), 3,94-4,39 (m, 2H), 3,22 (s, 6H), 2,84-3,13 (m, 5H), 1,93 (br. s., 3H), 1,38-1,58 (m, 1H). Значение C₁₆H₂₁F₃N₆O [M+H]⁺ 371 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 371.

Вариант реализации 3.

- 13 036122

1-((7Н-Пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)-Н-(цианометил)пиперидил-3-формамид

WXO3

Стадия 1.

Промежуточное соединение 1 (1,32 г, 2,98 ммоль) растворяли в смешанном растворителе тетрагидрофурана (10 мл) и воды (10 мл) и добавляли гидроксид натрия (238,40 мг, 5,96 ммоль). Реакционный раствор нагревали до 70°C и перемешивали в течение 10 ч. ЖХМС показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 20°C и растворитель концентрировали досуха при пониженном давлении. Остатки нейтрализовали с помощью 2 М HCl до значения рН, составляющего 2-3, и затем концентрировали при пониженном давлении с получением 1-(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил-амино)пиперидил-3карбоновой кислоты, которая представляла собой серое маслянистое вещество (2,00 г, неочищенный продукт). Указанный продукт непосредственно использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Значение C₁₂H₁₅N₅O₂ [M+H]+ 262 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 262.

Стадия 2.

1-(7Н-Пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил-амино)пиперидил-3-карбоновую кислоту (520,00 мг, 1,99 ммоль) растворяли в ДМФА (15 мл), и HOBt (537,78 мг, 3,98 ммоль), EDCI (762,97 мг, 3,98 ммоль), гидрохлорид 2-глициннитрила (220,98 мг, 2,39 ммоль) и триэтиламин (1,01 г, 9,95 ммоль) добавляли при 0°C. Реакционный раствор перемешивали в течение 10 ч при 25°C. ЖХМС показала завершение реакции. Остатки выливали в воду (20 мл) и перемешивали в течение 20 мин. Водную фазу экстрагировали дихлорметаном и метанолом (10:1, 15 млх3). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (20 млх2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остатки очищали с помощью преп-ВЭЖХ (NH3-H2O) с получением WX03: №(цианометил)-1(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил-амино)пиперидил-3-формамида (56,27 мг, выход составил 9,45%). ¹H ЯМР (400 МГц, MeOD-d4) δ=8,21 (br. s., 1H), 7,16 (br. s., 1H), 6,72 (br. s., 1H), 4,15-4,28 (m, 2H), 2,66-3,26 (m, 5H), 1,84 (d, J=6,8 Гц, 4Н). Значение C₁₄H₁₇N₇O [M+H]+ 300 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 300.

Вариант реализации 4.

1-(Метил(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)-Н-(2,2,-трифторэтил)пиперидил-3-формамид

Стадия 1.

Промежуточное соединение 3 (650,00 мг, 2,36 ммоль) растворяли в ДМФА (15 мл) и добавляли HOBt (637,77 мг, 4,72 ммоль), EDCI (904,82 мг, 4,72 ммоль), 2,2,2-трифторэтиламин (467,52 мг, 4,72 ммоль) и триэтиламин (1,43 мг, 14,16 ммоль), реакционный раствор перемешивали в течение 10 ч при 25°C. ЖХМС показала завершение реакции. Указанную смесь выливали в воду (50 мл) и водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (20 млх3). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (15 мл), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали досуха при пониженном давлении. Остатки очищали с помощью преп-ВЭЖХ (NH3.H2O) с получением WX04: 1-[метил(7H)пирроло-[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]-N-2,2,2-трифторэтил)пиперидил-3-формамида (270,00 мг, выход составил 32,11%). 1H ЯМР (400 МГц, MeOD-d₄) δ=8,11 (s, 1H), 7,00-7,10 (m, 2H), 3,75-4,00 (m, 2H), 3,21 (s, 3H), 3,01 (d, J=7,3 Гц, 2H), 2,85-2,96 (m, 3H), 1,85-2,02 (m, 3H), 1,37-1,58 (m, 1H). Значение C₁₅H₁₉F₃N₆O [M+H]+ 357 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 357.

Вариант реализации 5.

WXflS WXM

- 14 036122 (R и S) 1-(Метил(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)-Щ2,2,2-трифторэтил)пиперидил-3формамид

- [Метил(7Н-пирроло [2,3^]пиримидин-4-ил)амино] -N-(2,2,2-трифторэтил)пиперидил-3 -формамид (140,00 мг, 392,87 мкмоль) разделяли с помощью хиральной колонки с получением WX05: (R или S)-1[метил(7Н пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино]-Щ2,2,2-трифторэтил)пиперидил-3-формамида (68,00 мг, выход составил 48,57% и WX06: (S или R)-1-[метил(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]-N(2,2,2-трифторэтил)пиперидил-3-формамида (53,00 мг, выход составил 37,86%).

Условия разделения SFC: колонка: хиральная колонка AS-H, подвижная фаза: А: сверхкритический CO₂, В: 20% EtOH (0,1% NH₃.H₂O), А:В=50:50, скорость потока: 60 мл/мин, температура колонки: 38°C, длина волны: 220 нм, давление струи: 100 Бар, температура сопла: 60°C, температура испарения: 20°C, температура кондиционирования: 25°C.

WX05: (R или S)-1-[метил(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]-N-(2,2,2-трифторэтил)пиперидил-3-формамид, время удерживания: 3,268 мин. ¹H ЯМР (400 МГц, MeOD-d₄) 8,11 (s, 1H), 7,06 (s, 2H), 3,76-3,98 (m, 2H), 3,21 (s, 3H), 2,83-3,07 (m, 5H), 1,84-2,02 (m, 3H), 1,39-1,55 (m, 1H). Значение C₁₅H₁₉F₃N₆O [M+H]⁺ 357, вычисленное с использованием MS ESI, составило 357.

WX06: (S или R)-1-[метил(7H пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино]-№-(2,2,2-трифторэтил)пиперидил-3-формамид, время удерживания: 3,991 мин. ¹H ЯМР (400 МГц, MeOD-d₄) δ=8,11 (s, 1H), 7,06 (br. s., 2H), 3,75-3,99 (m, 2H), 3,21 (s, 3H), 2,82-3,07 (m, 5H), 1,82-2,04 (m, 3H), 1,47 (d, J=12,0 Гц, 1Н). Значение C₁₅H₁₉F₃N₆O [M+H]⁺ 357 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 357.

Вариант реализации 6.

(№(Цианометил)-1-(метил(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)пиперидил-3-формамид

Стадия 1.

Промежуточное соединение 3 (550,00 мг, 2,00 ммоль) растворяли в ДМФА (15 мл) и добавляли HOBt (540,48 мг, 4,00 ммоль), EDCI (766,80 мг, 4,0 ммоль), гидрохлорид 2-глициннитрила (370,12 мг, 4,0 ммоль) и триэтиламин (1,21 мг, 12,0 ммоль). Указанную смесь перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 10 ч при 25°C. ЖХМС показала завершение реакции. Указанную смесь выливали в воду (50 мл), водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (15 млх4), объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (20 млх2), сушили безводным сульфатом натрия и фильтровали и концентрировали досуха при пониженном давлении. Остатки очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа (NH3.H2O) с получением WX07: У-(цианометил)-1-[метил(7Н-пирроло[2,3б]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил-3-формамида (170,00 мг, выход составил 26,74%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=8,43 (br. s., 1H), 8,31 (br. s., 1H), 7,18 (br. s., 1H), 6,87-7,07 (m, 1H), 6,59 (br. s., 1H), 4,114,40 (m, 3H), 3,32-3,47 (m, 1H), 3,39 (br. s., 3H), 3,22 (br. s., 1H), 2,74-3,14 (m, 7H), 1,95 (d, J=15,9 Гц, 2Н), 1,74 (d, J=12,5 Гц, 1Н), 1,55 (d, J=12,7 Гц, 1Н). Значение C₁₅H₁₉N₇O [M+H]+ 314 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 314.

- 15 036122

Вариант реализации 7.

(R и S) формамид (№(Цианометил)-1-(метил(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)пиперидил-3-

№(Цианометил-1-[метил(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил)-3-формамид (170,00 мг, 542,51 мкмоль) разделяли с помощью колонки для хирального разделения с получением WX08: (R или S)-N-(цианометил)-1-[метил(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил)-3-формамида (68,00 мг, выход составил 40,00%) и WX09: (S или R)-N-(цианометил)-1-[метил(7Н пирроло[2,3^]пиримидин-4ил)амино]пиперидил)-3-формамида (64,00 мг, выход составил 37,65%).

Условия разделения SFC: разделительная колонка: AS-H, подвижная фаза: А: сверхкритический CO₂, В:30% MeOH (0,1% NH₃H₂O), А:В=50:50, скорость потока: 50 мл/мин температура колонки: 38°C длина волны: 220 нм давление струи: 100 Бар, температура сопла: 60°C, температура испарения: 20°C, температура кондиционирования: 25°C.

WX08: (R или S)-N-(цианометuл-1-[метил(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил)-3формамид, время удерживания: 5,659 мин. ¹H ЯМР (400 МГц, MeOD-d₄) δ=8,11 (s, 1H), 6,97-7,13 (m, 2H), 4,12 (d, J=5,0 Гц, 2Н), 3,21 (s, 3H), 2,79-3,07 (m, 5H), 1,80-2,03 (m, 3H), 1,38-1,55 (m, 1H). Значение C₁₅H₁₉N₇O [M+H]+ 314 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 314.

WX09: (S или R)-N-(цианометuл-1-[метил(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил)-3формамид, время удерживания: 6,872 мин. 1Н ЯМР (400 МГц, MeOD-d₄) δ=8,11 (s, 1H), 6,96-7,12 (m, 2H), 4,03-4,20 (m, 2H), 3,21 (s, 3H), 2,76-3,09 (m, 5H), 1,84-2,01 (m, 3H), 1,39-1,56 (m, 1H). Значение C₁₅H₁₉N₇O [M+H]+ 314 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 314.

Вариант реализации 8.

⁰

WX10

Этил-1-(метил(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)пиперидил-3-карбоксилат

Стадия 1 __ ГЧ ТТ

Промеж, сосдин. 2 ---------------I II

W ^Ν Η

WX10

Стадия 1.

Карбонат калия (90,62 мг, 655,68 мкмоль) добавляли в этанольный раствор (10,00 мл) промежуточного соединения 2 (100,00 мг, 218,56 мкмоль) при 25°C в защитной атмосфере азота. Указанную смесь перемешивали в течение 16 ч при 25°C. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь концентрировали при пониженном давлении при 40°C. Остатки разбавляли водой (10 мл). Водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (50 млх2). Объединенные органические фазы промывали насыщенным водным солевым раствором (20 млх2), сушили безводным сульфатом натрия и фильтровали, и растворитель концентрировали при пониженном давлении. Остатки очищали с использованием ВЭЖХ препаративного типа (щелочной метод) с получением WX10: Этил-1-[метuл(7H-пирроло[2,3d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил-3-карбоксилата (30,00 мг, 98,89 мкмоль, выход составил 45,25%, и чистота составила 100%). 1H ЯМР (400 МГц, метанол^) δ=8,13 (s, 1H), 7,06 (d, J=16,8 Гц, 2Н), 4,14 (q, J=6,9 Гц, 2Н), 3,23 (s, 3H), 3,15 (d, J=6,8 Гц, 1H), 2,94 (br. s., 4Н), 2,12 (d, J=13,3 Гц, 1H), 1,92 (br. s., 2Н), 1,41 (br. s., 1H), 1,26 (t, J=6,9 Гц, 3H), 1,00 (br. s., 1H). Значение C₁₅H₂₁N₅O₂ [M+H]⁺ 304 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 304.

- 16 036122

Вариант реализации 9.

1-[Метил(7Н-пирроло[2,3-0]пиримидин-4-иламино]пиперидил)-3-формамид

Стадия 1.

Этил-1-[метил-[7-(тозил)пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил]амино]пиперидил-3-карбоксилат (470,00 мг, 1,09 ммоль) и триэтиламин (166,10 мг, 1,64 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (20,00 мл). Изопропилхлорформиат (134,11 мг, 1,09 ммоль, 1,00 экв.) добавляли по каплям в указанную выше систему растворителей при 0°C. Указанную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. ТСХ (петролейный эфир:этилацетат=1:1) показала завершение реакции. Указанную смесь непосредственно использовали в следующей реакции. Указанную выше смесь охлаждали до 0°C снова и добавляли водный раствор аммиака (383,56 мг, 10,94 ммоль). Наконец полученную смесь перемешивали в течение 16 ч при 25°C. Указанную смесь разбавляли водой (10 мл). Водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (50 млх3). Объединенные органические фазы промывали насыщенным водным солевым раствором (20 млх2), сушили безводным сульфатом натрия и фильтровали и концентрировали досуха при пониженном давлении с получением 1-[метил-[7-(тозил)пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил]амино]пиперидил)-3-формамида (470,00 мг, неочищенный продукт), который представлял собой желтое твердое вещество, и непосредственно использовали на следующей реакции без дополнительной очистки.

Стадия 2.

- [Метил-[7-(тозил)пирроло [2,3-d] пиримидин-4 -ил] амино] пиперидил)-3 -формамид (70,00 мг, 163,36 мкмоль) растворяли в смешанном растворителе тетрагидрофурана (5,00 мл) и метанола (5,00 мл) и добавляли водный раствор (2,50 мл) гидроксида натрия (13,07 мг, 326,72 мкмоль). Указанную смесь перемешивали со взаимодействием в течение 2 ч при 100°C. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 25°C и растворитель концентрировали при пониженном давлении при 40°C. Остатки доводили с помощью разбавленной соляной кислоты до рН 8-9. Остатки очищали с использованием ВЭЖХ препаративного типа (щелочной метод) с получением WX11: 1-[метил(7H-пирроло[2,3d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил)-3-формамида (30,00 мг, выход составил 66,94%). 1H ЯМР (400 МГц, метанол^) δ=8,12 (s, 1H), 7,07 (s, 2Н), 3,23 (s, 3H), 3,10-281 (m, 5Н), 2,03-187 (m, 3H), 1,54-141 (m, 1H). Значение C₁₃H₁₈N₆O [M+H]+ 275 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 275.

Вариант реализации 10.

2-Циано-К-(1-(метил(7Н-пирроло[2,3-0]пиримидин-4-ил)амино)пиперидил-3-ацетамид.

WX12 получали с использованием способа получения, аналогичного варианту реализации 6, и неочищенный продукт очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа с получением WX12: 2-циано-Х(1-(7Н-пирроло[2,3-б]пиримидин-4-ил)амино)пиперидил-3-ацетамида 1Н ЯМР (400 МГц, метанол-б₄) δ=8,13 (s, 1H), 7,09 (br. s., 1H), 7,05 (d, J=3,5 Гц, 1H), 4,24-408 (m, 1H), 3,22 (s, 3H), 3,15 (d, J=5,5 Гц, 1H), 3,06-2,83 (m, 2Н), 2,68 (t, J=10,0 Гц, 1H), 2,05 (d, J=11,5 Гц, 1H), 1,99-1,85 (m, 2Н), 1,32-1,18 (m, 1Н). Значение C₁₅H₁₉N₇O [M+H]+ 314 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 314.

- 17 036122

Вариант реализации 11.

3,3,3-Трифторэтил-№( 1 -(метил(7Н-пирроло [2,3^]пиримидин-4-ил)амино)пиперидил-3 -)пропилкарбоксамид.

WX13 получали с использованием способа получения, аналогичного варианту реализации 6, и неочищенный продукт очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа с получением WX13: 3,3,3трифторэтил^-(1-(метил(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)пиперидил-3-)пропилкарбоксамида. 1H MR (400 МГц, метанол^) δ=8,13 (s, 1H), 7,12-704 (m, 2H), 4,21 (t, J=11,2 Гц, 1H), 3,22 (s, 3H), 3,15 (d, J=10,5 Гц, 1H), 2,97-2,83 (m, 2H), 2,67 (t, J=9,9 Гц, 1H), 2,04 (d, J=11,8 Гц, 1H), 1,98-1,84 (m, 2H), 1,32-1,19 (m, 1H). Значение C₁₅H₁₉F₃N₆O [M+H]+ 357 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 357.

Вариант реализации 12.

^(Цианометил)-1 -(метил( 1 Н-пиррол[2,3-Ь]пиридил-4-)амино)пиперидил-3 -формамид

Стадия 1.

4-Хлор-1Н-пиррол[2,3-Ь]пиридин (20,00 г, 131,08 ммоль) растворяли в дихлорметане (400 мл) и добавляли Et₃N (39,79 г, 393,24 ммоль); позднее добавляли DMAP (1,60 г, 13,11 ммоль) и охлаждали до 0°C, п-толуолсульфонилхлорид (27,49 г, 144,19 ммоль) добавляли партиями и непрерывно перемешивали в течение 4 ч при указанной температуре, затем нагревали до 25°C и перемешивали в течение 12 ч. ЖХМС показала, что исходные вещества полностью прореагировали и целевой продукт был обнаружен. Воду (100 мл) добавляли для гашения, водную фазу экстрагировали дихлорметаном (100 млх3), органические слои объединяли и промывали насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением коричневого твердого вещества, и неочищенный продукт перекристаллизовывали (этилацетат: петролейный эфир=10 мл:200 мл) с получением неочищенного продукта 4-хлор-1-(тозил)пиррол[2,3-Ь]пиридина (18,90 г). Указанный продукт непосредственно использовали на следующей реакции без дополнительной очистки. Значение C₁₄HnClN₂O₂S₅ [M+H]+ 307,0 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 306,9.

Стадия 2.

4-Хлор-1-(тозил)пиррол[2,3-Ь]пиридил (5,9 г, 19,2 ммоль) и 1-аминопиперидил-3-этилформиат (3,00 г, 17,42) (со ссылкой на способ для ключевого промежуточного соединения) растворяли в безводном толуоле (40 мл) и добавляли Cs₂CO₃ (11,35 г, 34,84 ммоль), три раза замещали N₂, затем добавляли Pd₂(dba)₃ (1,60 г, 1,74 ммоль) и Xantphos (2,02 г, 3,48 ммоль), три раза замещали N₂. Указанную смесь подвергали взаимодействию с обратным холодильником в течение 3 ч при 120°C, и ЖХ-МС показала образование продукта. Время реакции было продлено, исходные вещества больше не расходовались, и в то же время образовывались побочные продукты с большой молекулярной массой. Указанную смесь разбавляли этилацетатом, фильтровали и фильтрат концентрировали, разделяли с помощью колонки (петролейный эфир:этилацетат=5:1) с получением светло-красного 1-[[1-(толилсульфонил)пиррол[2,3Ь]пиридин-4-]амино]пиперидил-3-этилформиата (800,00 мг, выход составил 10,38%). Значение C₂₂H₂₆N₄O₄S [M+H]+ 443,1 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 443,1.

Стадия 3.

1-[[1-(Толилсульфонил)пиррол[2,3-Ъ]пиридил-4-]амино]пиперидил-3-этилформиат (543,00 мг, 1,23 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл), и NaH (54,00 мг, 1,35 ммоль) добавляли партиями при 0°C, и перемешивали в течение 0,5 ч при 25°C. Затем указанную смесь снова охлаждали до 0°C, добавля

- 18 036122 ли CH₃I (174,17 мг, 1,23 ммоль, 1,00 экв.), и затем перемешивали со взаимодействием в течение 1 ч при 25°C. ЖХ-МС показала, что исходные вещества больше не реагировали, затем добавляли воду (10 мл) для гашения и экстрагировали этилацетатом (10 млх3). Органические слои объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (10 млх2), сушили безводным Na₂SO₄, затем фильтровали, концентрировали и разделяли с помощью колонки с силикагелем (100-200 меш силикагель, петролейный эфир:этилацетат=5:1-3:1) с получением желтого маслянистого 1-[метил-[1-(тозил)пиррол[2,3-Ь]пиридин4-ил-]амино]пиперидил-3-этилформиата (204,00 мг, выход составил 35,60%). Значение C₂₃H₂₈N₄O₄S [М+Н]+ 457,1 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 457,1.

Стадия 4.

1-[Метил-[1-(тозил)пиррол[2,3-Ь]пиридил-4-]амино]пиперидил-3-этилформиат (204,00 мг, 446,82 мкмоль) растворяли в смешанном растворителе Н2О (4 мл) и CH3OH (4 мл) и добавляли NaOH (71,5 мг, 1797,28 мкмоль) и перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 13 ч при 80°C. ЖХ-МС показала, что исходные вещества полностью прореагировали, затем растворитель удаляли с помощью перегонки при пониженном давлении, и HCl (2 М) добавляли для доведения рН до нейтрального, и затем светло-коричневый неочищенный продукт (122 мг) ^метил-^-Стозил^ирролР^-^пиридил^]амино]пиперидил-3-формиат получали после концентрирования при пониженном давлении. Указанный продукт непосредственно использовали на следующей реакции без дополнительной очистки. Значение Ci₄Hi₈N₄O₂ [M+H]+ 274,9 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 274,9.

Стадия 5.

1-[Метил-[1-(тозил)пиррол[2,3-Ь]пиридил-4-]амино]пиперидил-3-формиат (61,00 мг, 222,37 мкмоль) растворяли в ДМФА (4 мл) и добавляли HOBt (72,12 мг, 533,68 мкмоль) и EDCI (102,2 мг, 533,68 мкмоль) и перемешивали со взаимодействием в течение 30 мин при 25°C, затем добавляли 2глициннитрилгидрохлорид (24,69 мг, 266,84) и Et3N (90,01 мг, 889,47 мкмоль) и непрерывно перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 18 ч при 25°C. ЖХ-МС показала, что исходные вещества полностью прореагировали, и была обнаружена целевая молекулярная масса. Проводили разделение ВЭЖХ препаративного типа (щелочной метод) с получением WX14: №(цианометил)-1-(метил(1Нпиррол[2,3-Ь]пиридил-4-)амино)пиперидил-3-формамида (19,2 мг, выход составил 27,6%). 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) 6=11,27 (br. s., 1H), 8,66 (t, J=5,3 Гц, 1H), 7,85 (d, J=5,8 Гц, 1H), 7,10 (br. s., 1H), 6,87 (br. s., 1H), 6,23 (d, J=5,3 Гц, 1H), 4,08 (d, J=5,5 Гц, 2H), 3,00 (s, 3H), 2,91-2,62 (m, 6H), 1,79 (br. s., 2H), 1,38 (m, 1H). Значение C_i6H₂₀N₆O [M+H]+ 313 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 313.

Вариант реализации 13.

№(2,2,2-Трифторэтил)-1 -(метил( 1 Н-пиррол[2,3^]пиридин-4-ил)амино)пиперидил-3 -формамид.

WX15 получали с использованием способа получения, аналогичного варианту реализации 12, и неочищенный продукт очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа с получением WX15: N-(2,2,2трифторэтил)-1-(метил(1Н-пиррол[2,3^]пиридин-4-ил)амино)пиперидил-3-формамида. 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 6=11,27 (br. s., 1H), 8,66 (t, J=5,3 Гц, 1Н), 7,85 (d, J=5,8 Гц, 1H), 7,10 (br. s., 1H), 6,87 (br. s., 1H), 6,23 (d, J=5,3 Гц, 1Н), 4,08 (d, J=5,5 Гц, 2H), 3,00 (s, 3H), 2,91-2,62 (m, 6H), 1,79 (br. s., 2H), 1,38 (m, 1H). Значение C_i6H₂₀N₆O [M+H]+ 313 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 313.

Вариант реализации 14.

^(Цианоэтил)-1 -(метил( 1 H-nuppon[2,3-d]nupugun-4-)aMUHo)nunepugun-3 -формамид.

WX16 получали с использованием способа получения, аналогичного варианту реализации 12, и неочищенный продукт очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа с получением WX16: N(цианоэтил)-1-(метил(Ш-пиррол[2,3^]пиридил-4-)амино)пиперидил-3-формамида (32,30 мг, выход составил 35,0%). 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d,) 6=8,12 (s, 1H), 7,12-702 (m, 2H), 3,42 (t, J=6,4 Гц, 2H), 3,22

- 19 036122 (s, 3H), 3,08-2,99 (m, 2H), 2,98-2,79 (m, 3H), 2,70-2,62 (m, 2H), 2,30-2,22 (m, 1H), 2,03-1,86 (m, 3H), 1,58l,42 (m, 1H), 1,28-1,05 (m, 1H). Значение C₁₆H₂₁N₇O [M+H]+ 328,1 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 328,1.

Вариант реализации 15.

WX17 №(2,2,2-Трифторэтил)-2-(1-(метил(7-тозил-7Н-пиррол[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)пиперидил-3ацетамид

Стадия 1.

Промежуточное соединение 2 (1,65 г, 3,61 ммоль) растворяли в С₂Н₅ОН (40 мл) и защищали с помощью N₂, затем NaBH4 (546,27 мг, 14,44 ммоль) добавляли при 0°C, и затем перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 16 ч при 25°C. ЖХ-МС показала, что исходные вещества полностью прореагировали, и была обнаружена целевая молекулярная масса. Воду (5 мл) добавляли для гашения, затем указанную смесь экстрагировали этилацетатом (10 млх3). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением желтой вязкой жидкости (1-(метил(7-тозил-7Н-пиррол[2,3-Ъ]пиримидин4-)амино)пиперидин-3-ил) метанола (1,29 г, неочищенный продукт), которую не разделяли и непосредственно использовали на следующей стадии. Значение C₂₀H₂₅N₅O₃S [М+Н]+ 416 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило b416.

Стадия 2.

(1-(метил(7-тозил-7Н-пиррол[2,3-b]пиримидин-4-)амино)пиперидил-3-ил) метанол (967,50 мг, 2,33 ммоль) и Et₃N (706,85 мг, 6,99 ммоль) растворяли в CH₂Cl₂ (30,00 мл), и DMAP (28,45 мг, 232,87 мкмоль, 0,1 экв.) и пара-толуолсульфонилхлорид (1,864 г, 9,76 ммоль, 4,2 экв.) добавляли в атмосфере N₂ при 0°C, затем систему перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 6 ч при 25°C. ЖХ-МС показала завершение реакции и воду (20 мл) добавляли для гашения. Затем водную фазу экстрагировали с использованием АсОЕТ (10 млх3) и органические фазы объединяли, последовательно промывали HCl (2 М, 10 мл) и насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Разделение с помощью колонки с силикагелем (100-200 меш силикагель, петролейный эфир:этилацетат=3/1, 1/1) проводили с получением белого п-(1-(метил(7-тозил-7Н-пиррол[2,3-Ъ] пиримидин-4-)амино)пиперидин-3-ил)метилбензолсульфоната (993,00 мг, где выход составил 74,73%). Значение C₃₃H₄₆N₆O₅S₂ [М+Н]+ 470 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 470.

Стадия 3.

(1-(Метил(7-тозил-7Н-пиррол[2,3-b]пиримидин-4-)амино)пиперидин-3-ил)метилбензолсульфонат (943,00 мг, 1,66 ммоль) растворяли в смешанном растворителе ДМФА (30,00 мл) и H₂O (10,00 мл) и добавляли KCN (440,00 мг, 6,76 ммоль) и перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 6 ч при 80°C. ЖХ-МС показала, что исходные вещества полностью прореагировали и была обнаружена целевая молекулярная масса. AcOEt (5 мл) добавляли для разбавления и указанную смесь перемешивали, затем этилацетат (10 млх3) использовали для экстракции. Органические слои объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (10 млх3), сушили безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Разделение с помощью колонки с силикагелем (100-200 меш силикагель, петролейный эфир:этилацетат=3/1, 1/1) проводили с получением светло-коричневого вязкого вещества 2-(1-(метил(7тозил-7Н-пирролпиримидин-4-)амино)пиперидин-3-ил) ацетонитрила (665,00 мг, где выход составил 94,37%). Значение C₂₁H₂₄N₆O₂S [M+H]+ 425 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 425.

Стадия 4.

HCl (12,0 мл, 72,18 ммоль, 237,53 экв.) добавляли к 2-(1-(метил(7-тозил-7Н-пиррол[2,3b]пиримидин-4-)амино)пиперидин-3-ил)ацетонитрилу (129,00 мг, 303,87 мкмоль) и указанную смесь охлаждали до комнатной температуры после перемешивания с обратным холодильником в течение 15 ч

- 20 036122 при 100°C, затем добавляли NaOH (24 мг, 600 мкмоль) и указанную смесь непрерывно перемешивали в течение 4 ч при 100°C. ЖХ-МС показала, что исходные вещества полностью прореагировали и была обнаружена целевая молекулярная масса. Реакционный раствор концентрировали и разделяли с помощью ВЭЖХ препаративного типа (щелочной метод) с получением 2-(1-(метил(7-тозил-7Н-пиррол[2,3b]пиримидин-4-)амино)пиперидил-3-) уксусной кислоты (90,00 мг, выход составил 97,04%). Значение C₁₄H₁₉N₅O₂ [M+H]⁺ 290 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 290.

Стадия 5.

2-(1-(Метил(7-тозил-7Н-пиррол[2,3-b]пиримидин-4-)амино)пиперидин-3-ил) уксусную кислоту (45,50 мг, 157,26 мкмоль) растворяли в ДМФА (4,00 мл), и добавляли HOBt (85,00 мг, 629,04 мкмоль, 4,00 экв.) и EDCI (212,79 мг, 1,11 ммоль, 4,00 экв.) и перемешивали со взаимодействием в течение 30 мин при 25°C, затем добавляли 2,2,2-трифторэтиламин (46,73 мг, 471,78 мкмоль, 3,00 экв.) и Et₃N (63,65 мг, 629,04 мкмоль, 4,00 экв.) и непрерывно перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 12 ч при указанной температуре. ЖХ-МС показала, что исходные вещества полностью прореагировали и была обнаружена целевая молекулярная масса. Указанную смесь фильтровали и разделяли с помощью ВЭЖХ препаративного типа (щелочной метод) с получением WX017: №(2,2,2-трифторметил)-2-(1(метил(7-тозил-7Н-пиррол[2,3-b]пиримидин-4-)амино)пиперидин-3-ил)ацетамида (7,40 мг, выход составил 14,37%). 1H ЯМР (400 МГц, метанол^) δ=8,11 (s, 1H), 7,11-7,03 (m, 2H), 4,65 (br. s., 1H), 4,02-3,76 (m, 2H), 3,20 (s, 3H), 3,01-2,80 (m, 3H), 2,62 (t, J=10,5 Гц, 1H), 2,41 (dd, J=3,5, 7,5 Гц, 1H), 2,26-2,16 (m, 2H), 1,99-1,77 (m, 3H), 1,12-0,93 (m, 1H). Значение C₁₆H₂₁F₃N₆O [M+H]⁺ 371 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 371.

Вариант реализации 16.

№(Цианометил)-2-( 1 -(метил(7 -тозил-7Н-пиррол[2,3 -b] пиримидин-4-)амино)пиперидил-3 -)ацетамид.

WX18 получали с использованием способа получения, аналогичного варианту реализации 15, и неочищенный продукт очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа с получением WX18 (4,20 мг, выход составил 7,82%).¹Н ЯМР (400 МГц, метанол^₄) δ=8,11 (s, 1H), 7,15-7,03 (m, 2H), 4,14 (d, J=4,0 Гц, 2Н), 3,21 (s, 3H), 3,01-2,79 (m, 3H), 2,68-2,53 (m, 1H), 2,48-2,53 (m, 2Н), 2,34-2,28 (m, 1H), 2,22 (d, J=6,0 Гц, 2Н), 1,94-182 (m, 3H). Значение C₁₆H₂₁N₇O [M+H]⁺ 328 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 328.

Вариант реализации 17.

3,3,3-Трифтор-N-((1-(метил(7H-пиррол[2,3-d]пиримидин-4-)амино)пиперидил-3-)метил)пропионамид

Стадия 1.

Промежуточное соединение 3 (1,15 г, 2,67 ммоль) и изопропилхлорформиат (327,57 мг, 2,67 ммоль, 1.00 экв.) растворяли в ТГФ (30 мл), Et₃N (811,42 мг, 8,02 ммоль, 3,00 экв.) добавляли по каплям при температуре ниже 10°C, затем указанную смесь перемешивали со взаимодействием в течение 1 ч при 25°C, затем охлаждали до 10°C, добавляли NH3-H2O (3,75 г, 26,76 ммоль, 10,01 экв.) и затем непрерывно перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 7 ч при 25°C. ЖХ-МС показала, что исходные вещества полностью прореагировали и была обнаружена целевая молекулярная масса. Ледяную воду (10 мл) добавляли и перемешивали в течение 30 мин, и затем этилацетат (20 млх3) использовали для экстракции; органические слои объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали, и разделяли с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (100-200 меш силикагель, этилацетат) с получением белого твердого 1-[[1(толилсульфонил)пиррол[2,3-b]пиридин-4-]амино]пиперидил)-3-формамида (568,00 мг, выход составил 49,65%). Значение C₂₀H₂₄N₆O₃S [M+H]⁺ 429 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 429.

- 21 036122

Стадия 2.

1-[[1-(Толилсульфонил)пиррол[2,3-Ь]пиридин-4-]амино]пиперидил)-3-формамид (569,9 мг, 1,33 ммоль) суспендировали в ТГФ (20 мл), добавляли LiAlH₄ (807,58 мг, 21,28 ммоль) при 0°C, затем нагревали и кипятили с обратным холодильником в течение 24 ч при 70°C. ЖХ-МС показала завершение реакции. Воду (0,8 мл), раствор NaOH (0,8 мл 10%) и воду (2,4 мл) добавляли последовательно при 0°C и перемешивали в течение 15 мин. Указанную смесь фильтровали, концентрировали, разделяли с помощью препаративной ТСХ (CH₂Cl₂:CH₃OH=10:1) с получением белого твердого №(3-аминометил)пиперидил-1-)^метил^Н-пирролРЗ-Цпиримидин^-амина (147,00 мг, выход составил 42,45%). Значение C₁₃H₂₀N₆[М+Н]+ 261,1 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 261,1.

Стадия 3.

3,3,3-Трифторпропионат (57,74 мг, 450,94 мкмоль, 2,00 экв.) растворяли в ДМФА (4 мл), затем добавляли HOBt (121,86 мг, 901,88 мкмоль, 4,00 экв.) и EDCI (172,89 мг, 901,88 мкмоль, 4,00 экв.) и перемешивали со взаимодействием в течение 30 мин при 25°C; затем добавляли N-(3аминометил^иперидил-^-Н-метил^Н-пирролР^-^пиримидин^-амин (58,70 мг, 225,47 мкмоль, 1,00 экв.) и Et₃N (182,52 мг, 1,80 ммоль, 8,00 экв.). Указанную смесь непрерывно перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 12 ч при 25°C. ЖХ-МС показала завершение реакции. Затем указанную смесь фильтровали, концентрировали при пониженном давлении и фильтрат разделяли с помощью ВЭЖХ препаративного типа (щелочной метод) с получением WX19: 3,3,3-трифтор-Н-((1-(метил(7Нпиррол[2,3^]пиримидин-4-)амино)пиперидил-3-)метил)пропионамида (7,4 мг, выход составил 8,8%). 1H ЯМР (400 МГц, метанол^) δ=8,09 (s, 1H), 7,02 (s, 2H), 3,23-3,16 (m, 4H), 3,16-3,06 (m, 3H), 3,01-2,75 (m, 3H), 2,57 (t, J=10,5 Гц, 1H), 2,21-2,02 (m, 1H), 1,94-172 (m, 3H), 1,47-1,12 (m, 1H), 1,09-0,84 (m, 1Н). Значение Ci₆H_2iF₃N₆O [M+H]+ 371 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 371.

Вариант реализации 18.

о

Ν ΤΛ w ^Ν Η

WX20

N-(Цианометил)-1-(метил(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино)пиперидил-4-формамид

Стадия 1.

Этиловый эфир пиперидил-4-карбоновой кислоты (9,00 г, 57,25 ммоль) растворяли в смеси уксусной кислоты (30 мл) и воды (30 мл) и охлаждали до 0°C, затем водный раствор (30 мл) нитрита натрия (7,90 г, 114,50 ммоль) по каплям добавляли в защитной атмосфере азота. После полного добавления по каплям водного раствора реакционный раствор перемешивали в течение 30 мин при 0°C, и затем перемешивали в течение 2 ч при 25°C. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь экстрагировали с использованием этилацетата (100 млх2), объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (20 млх2), сушили безводным сульфатом натрия и фильтровали и концентрировали досуха при пониженном давлении и при 70°C с удалением части уксусной кислоты. Остатки растворяли в этилацетате (100 мл) и воде (50 мл), и доводили с помощью NaOH (2 М) до рН 8-9. Указанную смесь экстрагировали с использованием этилацетата (100 млх2), объединенные органические фазы промывали насыщенным водным солевым раствором (20 млх2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением этилового эфира 1-нитрозопиперидил-4карбоновой кислоты (10,60 г, неочищенный продукт), который представлял собой желтое маслянистое вещество, и непосредственно использовали в следующей реакции без дополнительной очистки. Значение C₈H₁₄N₂O₃ [M+H]+ 187 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 187.

Стадия 2.

Этиловый эфир 1-нитрозопиперидил-4-карбоновой кислоты (10,60 г, 58,04 ммоль) растворяли в метаноле (80 мл) и охлаждали до -10°C, затем цинковую пыль (17,68 г, 270,39 ммоль) добавляли в защитной атмосфере азота. Уксусную кислоту (32,47 г, 540,79 ммоль, 10,00 экв.) по каплям добавляли в указанный выше раствор в течение 30 мин при -10°C. Указанную смесь перемешивали в течение 30 мин при

- 22 036122

-10°C и затем перемешивали в течение 2 ч при 0°C. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь фильтровали и промывали метанолом (50 мл) и водой (50 мл), соответственно. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении при 70°C. Остатки растворяли в смеси дихлорметан:метанол (5:1, 100 мл), и доводили с помощью NaOH (2 М) до рН 8-9. Указанную смесь фильтровали через диатомит и промывали смешанным раствором дихлорметана и метанола (5:1). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением этилового эфира 1-аминопиперидил-4-карбоновой кислоты (9,80 г, неочищенный продукт), который представлял собой светло-коричневое маслянистое вещество, и непосредственно использовали на следующей реакции без дополнительной очистки. Значение C₈H₁₆N₂O₂ [М+Н]+ 173 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 173.

Стадия 3.

Смесь этилового эфира 1-аминопиперидил-4-карбоновой кислоты (9,80 г, 48,37 ммоль, 1,00 экв.) и 4-хлор-7-(тозил)пирроло[2,3Д]пиримидина (16,37 г, 53,21 ммоль, 1,10 экв.) растворяли в диоксане (100 мл) и триэтиламин (14,68 г, 145,11 ммоль, 3,00 экв.) добавляли в защитной атмосфере азота, затем указанную смесь перемешивали в течение 12 ч при 110°C. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 25°C и концентрировали при пониженном давлении при 60°C, затем остатки выливали в воду (50 мл). Водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (100 млх3). Объединенные органические фазы промывали насыщенным водным солевым раствором (20 млх3), сушили безводным сульфатом натрия и фильтровали, и сушили в вакууме. Остатки очищали с помощью хроматографии на силикагеле (100-200 меш силикагель, петролейный эфир:этилацетат=5:1-1:1) с получением этилового эфира 1-[[7-(тозил)пирроло[2,3Д]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил-4-карбоновой кислоты (9,50 г, выход составил 44,28%), который представлял собой бледно-желтое твердое вещество. Значение C₂₁H₂₅N₅O₄S [M+H]+ 444 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 444.

Стадия 4.

Этиловый эфир 1-[[7-(тозил)пирроло[2,3Д]пиримидин-4-ил) амино]пиперидил-4-карбоновой кислоты (8,80 г, 19,84 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (150 мл) и затем гидрид натрия (1,19 г, 29,76 ммоль) добавляли партиями при 0°C в защитной атмосфере азота. Указанную смесь перемешивали в течение 30 мин при 25°C и охлаждали до 0°C, по каплям добавляли метилйодид (4,22 г, 29,76 ммоль, 1,50 экв.) и перемешивали со взаимодействием в течение 2 ч при 25°C. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 0°C и воду (20 мл) добавляли для гашения. Водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (100 млх2), объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остатки очищали с помощью хроматографии на силикагеле (100-200 меш силикагель, петролейный эфир:этилацетат=3:1-2:1) с получением этилового эфира 1-[метил-[7(тозил)пирроло[2,3Д]пиримидин-4-ил]амино]пиперидил-4-карбоновой кислоты (4,10 г, выход составил 45,17%), который представлял собой бледно-желтое твердое вещество. Значение C₂₂H₂₇N₅O₄S [M+H]+ 458 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 458.

Стадия 5.

Этиловый эфир 1-[метил-[7-(тозил)пирроло[2,3Д]пиримидин-4-ил]амино]пиперидил-4-карбоновой кислоты (500,00 мг, 1,09 ммоль) растворяли в смешанном растворителе тетрагидрофурана (10 мл) и метанола (10 мл) и добавляли водный раствор (5 мл) гидроксида натрия (87,20 мг, 2,18 ммоль). Указанную смесь перемешивали в течение 30 мин при 100°C. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 25°C и затем концентрировали при пониженном давлении при 50°C. Остатки нейтрализовали с помощью водного раствора разбавленный соляной кислоты и концентрировали при пониженном давлении с получением 1-[метил(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил-4-карбоновой кислоты (400,00 мг, неочищенный продукт), которая представляла собой светло-коричневое твердое вещество, и которую непосредственно использовали в следующей реакции. Значение Ci₃Hi₇N₅O₂ [M+H]+ 276 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 276.

Стадия 6.

1-[Метил(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил-4-карбоновую кислоту (150,00 мг, 544,84 мкмоль) растворяли в ДМФА (4 мл) при 25°C и добавляли HOBt (88,34 мг, 653,81 мкмоль) и EDCI (125,34 мг, 653,81 мкмоль). Указанную смесь перемешивали в течение 30 мин при 25°C, затем добавляли 2-аминоацетонитрил (60,50 мг, 653,81 мкмоль, 1,20 экв.) и триэтиламин (220,53 мг, 2,18 ммоль, 4,00 экв.), и непрерывно перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 12 ч при указанной температуре. ЖХ-МС показала завершение реакции. Указанную смесь концентрировали при пониженном давлении, затем остатки очищали с помощью ВЭЖХ щелочного типа с получением WX20 (35 мг, 25%). 1H ЯМР (400 МГц, метанол^) δ=8,12 (s, 1H), 7,14 (d, J=3,5 Гц, 1H), 7,09 (d, J=3,5 Гц, 1Н), 4,19 (s, 2H), 3,22 (s, 3H), 3,05-2,96 (m, 4H), 2,30 (d, J=12,0 Гц, 1Н), 2,16-2,04 (m, 2H), 2,01-1,91 (m, 2H). Значение C₁₅H₁₉N₇O [M+H]+ 314 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 314.

- 23 036122

Вариант реализации 19.

WX21 получали с использованием способа получения, аналогичного варианту реализации 18, и неочищенный продукт очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа с получением WX21. ¹Н ЯМР (400 МГц, метанол-d^ δ=8,08 (s, 1H), 7,13 (d, J=33 Гц, 1H), 6,93 (br. s., 1H), 4,62 (br. s., 1H), 4,18 (s, 2H), 3,23 (d, J=93 Гц, 2H), 2,68 (br. s., 2H), 2,34 (br. s., 1H), 2,10-1,98 (m, 2H), 1,97-1,89 (m, 2H). Значение Q4H17N7O [M+H]+ 300 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 300.

Вариант реализации 20.

WX22 получали с использованием способа получения, аналогичного варианту реализации 18, и неочищенный продукт очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа с получением WX22. ¹Н ЯМР (400 МГц, метанол^) δ=8,08 (s, 1H), 7,12 (d, J=33 Гц, 1H), 6,94 (br. s., 1H), 3,94 (q, J=93 Гц, 2Н), 3,23 (d, J=10,0 Гц, 2Н), 2,68 (t, J=102 Гц, 2Н), 2,41-2,29 (m, 1H), 2,10-1,98 (m, 2H), 1,96-1,87 (m, 2H). Значение C₁₄H₁₇F₃N₆O [M+H]⁺ 343 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 343.

Вариант реализации 21.

WX23 получали с использованием способа получения, аналогичного варианту реализации 18, и неочищенный продукт очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа с получением WX23. ¹H ЯМР (400 МГц, метанол^) δ=8,12 (s, 1H), 7,14 (d, J=3,5 Гц, 1H), 7,08 (d, J=3,3 Гц, 1Н), 3,95 (q, J=9,5 Гц, 2H), 3,21(s, 3H), 3,05-2,95 (m, 4H), 2,32 (d, J=12,5 Гц, 1Н), 2,17-2,05 (m, 2H), 1,94 (d, J=11,8 Гц, 2Н). Значение C₁₅H₁₉F₃N₆O [M+H]⁺ 357 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 357.

Вариант реализации 22.

WX24 получали с использованием способа получения, аналогичного варианту реализации 18, и неочищенный продукт очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа с получением WX24. ¹Н ЯМР (400 МГц, метанол^) δ=8,12 (s, 1H), 7,12-709 (m, 1H), 7,09-7,06 (m, 1H), 3,84-3,69 (m, 1H), 3,26-3,13 (m, 5H), 3,12-3,02 (m, 2H), 2,98 (br. s., 2H), 2,04 (d, J=11,3 Гц, 2H), 1,95-1,80 (m, 2H). Значение C15H19F3N6O [M+H]⁺3557 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 357.

- 24 036122

Вариант реализации 23.

2-Циано^-(1-(метил(7Н-пирроло[2,3^]пиримвдин-4-ил)амино)пипервдин-4-ил)ацетамвд

Стадия 1.

Этиловый эфир 1 - [метил- [7-(тозил)пирроло [2,3-d] пиримидин-4-ил] амино]пиперидил-4-карбоновой кислоты (3,50 г, 7,65 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (20 мл) при 25°C и добавляли водный раствор (20 мл) моногидрата гидроксида лития (481,47 мг, 11,47 ммоль), указанную смесь перемешивали в течение 3 ч при 25°C. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь концентрировали при пониженном давлении при 40°C. Остатки подкисляли водным раствором разбавленной соляной кислоты до рН 4-5. Водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (100 млх2). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 1-[метил-[7(тозил)пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил]амино]пиперидил-4-карбоновой кислоты (3,10 г, выход составил 94,35%), которая представляла собой бледно-желтое твердое вещество. Значение C₂₀H₂₃N₅O₄S [М+Н]+ 430 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 430.

Стадия 2.

1-[Метил-[7-(тозил)пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил]амино]пиперидил-4-карбоновую кислоту (2,00 г, 4,66 ммоль) и триэтиламин (706,82 мг, 6,99 ммоль) растворяли в толуоле (100 мл) и перемешивали в течение 0,5 ч, и затем добавляли [азидо(фенокси)фосфорил]оксибензолсульфоновую кислоту (1,28 г, 4,66 ммоль) при 25°C в защитной атмосфере азота и перемешивали в течение 30 мин при 25°C, и затем нагревали до 110°C и перемешивали в течение 2 ч. ЖХ-МС показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 25°C и добавляли трет-бутиловый спирт (7,70 г, 103,89 ммоль). Указанную смесь перемешивали в течение 12 ч при 110°C. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 25°C и затем концентрировали при пониженном давлении и при 50°C. Остатки разбавляли водой (30 мл). Водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (100 млх2), объединенные органические фазы промывали насыщенным водным солевым раствором (20 млх2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остатки очищали с помощью хроматографии на силикагеле (100-200 меш силикагель, петролейный эфир:этилацетат=4:1-2:1) с получением N-[1- [метил- [7-(тозил)пирроло [2,3-d] пиримидин-4-ил] амино] -4-пиперидинил] -трет-бутилкарбамата (950,00 мг, выход составил 40,46%), который представлял собой бледно-желтое твердое вещество. Значение C₂₄H₃₂N₆O₄S [M+H]+ 501 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 501.

Стадия 3.

№[1-Метил-[7-(тозил)пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил]амино]-4-пиперидинил]трет-бутилкарбамат (500,00 мг, 998,78 мкмоль) растворяли в дихлорметане (500,00 мг, 998,78 мкмоль) и затем трифторуксусную кислоту (500,00 мг, 998,78 мкмоль) добавляли по каплям. Указанную смесь перемешивали в течение 30 мин при 25°C. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь концентрировали досуха при пониженном давлении при 40°C. Полученные остатки растворяли в воде (10 мл) и подщелачивали твердым бикарбонатом натрия до рН 9, и водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (50 млх3). Объединенные органические фазы промывали насыщенным водным солевым раствором (20 мл), сушили безводным сульфатом натрия и фильтровали и концентрировали досуха при пониженном давлении с получением 1-(метил[7-(тозил-7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил]пиперидил-4-амина (400 мг, 56%), который представлял собой светло-коричневое твердое вещество и который непосредственно использовали в следующей реакции. Значение C₁₉H₂₄N₆O₂S [M+H]+ 401 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 401.

- 25 036122

Стадия 4.

1-(Метил[7-(тозил-7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил]пиперидил-4-амин (400,00 мг, 998,75 мкмоль) растворяли в смешанном растворителе тетрагидрофурана (10,00 мл) и метанола (10,00 мл) и добавляли водный раствор (5 мл) гидроксида натрия (79,90 мг, 2,00 ммоль). Указанную смесь перемешивали в течение 1 ч при 100°C. ЖХ-МС показала завершение реакции. Указанную смесь концентрировали при пониженном давлении при 40°C, остатки растворяли в воде (10 мл) и доводили с помощью водного раствора разбавленный соляной кислоты до рН 9, и концентрировали при пониженном давлении с получением 1(метил(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино)пиперидил-4-амина (300 мг, неочищенный продукт), который представлял собой светло-коричневое твердое вещество и который непосредственно использовали в следующей реакции. Значение C₁₂H₁₈N₆ [M+H]+ 247 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 247.

Стадия 5.

2-Цианоуксусную кислоту (49,73 мг, 584,63 мкмоль), HOBt (78,99 мг, 584,63 мкмоль) и EDCI (112,07 мг, 584,63 мкмоль) растворяли в ДМФА (4,00 мл). Указанную смесь перемешивали в течение 30 мин при 25°C, и затем добавляли 1-(метил(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)пиперидил-4-амин (120,00 мг, 487,19 мкмоль) и триэтиламин (98,60 мг, 974,38 мкмоль), и затем указанную смесь перемешивали в течение 24 ч при 25°C. ЖХ-МС показала завершение реакции, указанную смесь концентрировали досуха при пониженном давлении и при температуре ниже 70°C; и полученные остатки очищали с помощью ВЭЖХ щелочного типа с получением WX25 (25 мг, 35%). ¹H ЯМР (400 МГц, метанол^₄) δ=8,12 (s, 1H), 7,11 (d, J=3,5 Гц, 1H), 7,07 (d, J=3,3 Гц, 1H), 3,75 (br. s., 1H), 3,23 (s, 3H), 3,13-3,04 (m, 2Н), 2,99 (br. s., 2Н), 2,06 (d, J=10,0 Гц, 2Н), 1,96-1,81 (m, 2Н). Значение C₁₅H₁₉N₇O [M+H]+ 314 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 314.

Вариант реализации 24.

№(Цианометил)-6-метил-1-(метил(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)пиперидил-3-формамид

Стадия 1.

PtO₂ (3,00 г) добавляли к метанольному раствору (200 мл) метил-6-метилпиридин-3-карбоксилата (18,00 г, 119,08 ммоль) и затем добавляли воду (10 мл) и соляную кислоту (20 мл); в атмосфере H2 (50 psi) реакционный раствор нагревали до 50°C и перемешивали в течение 15 ч. ТСХ показала, что реагенты были полностью израсходованы; затем твердое вещество фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении, остатки растворяли в толуоле (100 мл), затем растворитель толуол сушили вращением с получением метил-6-метилпиперидил-3-карбоксилата, который представлял собой желтое маслянистое вещество (18,00 г, выход составил 96,15%). Значение C₈H₁₅NO₂ [M+H]+ 157 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 157.

Стадия 2.

Метил-6-метилпиперидил-3-карбоксилат (25,00 г, 159,02 ммоль) растворяли в воде (50 мл) и ледяной уксусной кислоте (100 мл), и водный раствор (50 мл) нитрита натрия (21,95 г, 318,05 ммоль) медленно добавляли при 0°C; реакционный раствор перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре, разбавляли этилацетатом (100 мл) и водой (50 мл), и затем разделяли; водный слой экстрагировали с использованием этилацетата (100 млх2), объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали с помощью колонки с силикагелем (петролейный эфир:этилацетат=10:1), с получением метил-6-метил-1-нитрозо-пиперидил-3-карбоксилата, который представлял собой желтое маслянистое вещество (20,00 г, выход составил 67,54%). Значение C₈H₁₄N₂O₃[M+H]+ 187 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 187.

Стадия 3.

Метил-6-метил-1-нитрозо-пиперидил-3-карбоксилат (21,00 г, 112,78 ммоль) и цинковую пыль

- 26 036122 (36,87 г, 563,90 ммоль) растворяли в водном метанольнорм растворе (1100 мл) и медленно по каплям добавляли ледяную уксусную кислоту (100 мл) при 0°C, где внутреннюю температуру поддерживали ниже 5°C, затем указанную смесь перемешивали в течение 1 ч при 0°C. После чего растворитель концентрировали при пониженном давлении, и затем реакционный раствор доводили с помощью насыщенного раствора бикарбоната натрия до рН 7, и затем экстрагировали с использованием этилацетата (200 млх3). Объединенные органические слои сушили и концентрировали с получением метил-1-амино-6метилпиперидил-3-карбоксилата, который представлял собой желтое маслянистое вещество (18,00 г, выход составил 92,67%). Значение C₈H₁₆N₂O₂ [M+H]+ 173 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 173

Стадия 4.

Метил-1-амино-6-метилпиперидил-3-карбоксилат (15,00 г, 46,16 ммоль) и 4-хлор-7(тозил)пирроло[2,3-б]пиримидин (20,00 г, 64,99 ммоль) растворяли в растворе диоксана (200 мл) и добавляли твердый карбонат цезия (15,04 г, 46,16 ммоль) в защитной атмосфере азота при 20°C; реакционный раствор нагревали до 110°C и перемешивали в течение 20 ч. Указанную смесь охлаждали до 20°C и растворитель концентрировали досуха при пониженном давлении. Остатки очищали с помощью хроматографии на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=1:1) с получением метил-6-метил-1-[[7(тозил)пирроло[2,3-б]пиримидин-4-ил]амино]пиперидил-3-карбоксилата (3,50 г, выход составил 17,10%), который представлял собой белое твердое вещество. Значение C₂₁H₂₅N₅O₄S [M+H]+ 444 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 444.

Стадия 5.

NaH (288,80 7,22 ммоль) добавляли в ТГФ (50 мл) раствор метил-6-метил-1-[[7-(тозил)пирроло[2,3б]пиримидин-4-ил]амино]пиперидил-3-карбоксилата (1,60 г, 3,61 ммоль) в защитной атмосфере азота при 0°C; указанную смесь перемешивали в течение 20 мин при 0°C, и по каплям добавляли MeI (1,02 г, 7,22 ммоль), и затем перемешивали в течение 1 ч при 20°C. ЖХМС показала завершение реакции. Реакционный раствор выливали в смешанный раствор ДХМ (50 мл) и воды (50 мл), и затем отстаивали для разделения слоев. Водную фазу экстрагировали с использованием ДХМ (50 млх3). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали досуха при пониженном давлении. Остатки очищали с помощью хроматографии на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат==10/1-1/1) с получением метил-6-метил-1[метил-[7-(тозил)пирроло[2,3-б]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил-3-карбоксилата (1,50 г, выход составил 90,81%), который представлял собой желтое твердое вещество. Значение C₂₂H₂₇N₅O₄S [M+H]+ 458 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 458.

Стадия 6.

NaOH (656,00 мг, 16,40 ммоль) добавляли в смешанный раствор ТГФ (20 мл) и воды (10 мл) и метил-6-метил-1 - [метил- [7-(тозил)пирроло [2,3-d] пиримидин-4-ил)амино] пиперидил-3 -карбоксилата (1,50 г, 3,28 ммоль) при 20°C; и реакционный раствор нагревали до 60°C и перемешивали в течение 15 ч. Добавляли MeOH (10 мл) и затем указанную смесь нагревали до 80°C и перемешивали в течение 3 ч. ЖХМС показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 20°C, доводили с помощью HCl (6 М) до рН 7, и затем концентрировали при пониженном давлении с получением 6-метил-1-[метил-(7Нпирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил-3-карбоновой кислоты (1,80 г, неочищенный продукт), которая представляла собой белое твердое вещество. Значение C₁₄H₁₉N₅O₂ [M+H]+ 290 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 290.

Стадия 7.

EDCI (331,28 мг, 1,73 ммоль) и HOBt (233,51 мг, 1,73 ммоль) добавляли в раствор ДМФА (5 мл) и 6метил-1 - [метил-(7Н-пирроло [2,3-d] пиримидин-4-ил)амино] пиперидил-3 -карбоновой кислоты (250,00 мг, 864,07 мкмоль). Указанную смесь перемешивали в течение 5 мин при 20°C, затем добавляли 2аминоацетонитрил (72,67 мг, 1,30 ммоль) и TEA (437,18 мг, 4,32 ммоль), и указанную смесь перемешивали в течение 15 ч при 20°C. ЖХМС показала завершение реакции. Указанную смесь фильтровали и очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа (кислые условия: 0,1% TFA) с получением WX26: N(цианометил)-6-метил- 1-[метил(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил-3-формамида (61,95 мг, выход составил 21,90%). 1H ЯМР (400 МГц, метанол^) δ=8,48 (s, 1H), 7,47 (d, J=3,6 Гц, 1H), 7,01 (d, J=3,6 Гц, 1H), 4,25-4,35 (m, 2H), 3,59 (s, 3H), 3,17-3,24 (m, 1H), 3,09-3,16 (m, 1H), 2,99-3,08 (m, 1H), 2,95 (br. s., 1H), 2,04-2,14 (m, 1H), 1,78-1,96 (m, 2Н), 1,45-1,59 (m, 1H), 0,99 (d, J=6,4 Гц, 3H). Значение C₁₆H₂₁N₇O [M+H]+ 328 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 328.

Вариант реализации 25.

WX27

- 27 036122

6-Метил-1-(метил(7Н-пиррол[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)-№(2,2,2-трифторэтил)пиперидил-3формамид

Стадия 1.

EDCI (331,28 мг, 1,73 ммоль) и HOBt (233,51 мг, 1,73 ммоль) добавляли в раствор ДМФА (5 мл) и 6метил-1-[метил-(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил-3-карбоновой кислоты (250,00 мг, 864,07 мкмоль), указанную смесь перемешивали в течение 5 мин при 20°C, и затем добавляли 2,2,2трифторацетонитрил (128,38 мг, 1,30 ммоль) и TEA (437,18 мг, 4,32 ммоль); указанную смесь перемешивали в течение 15 ч при 20°C. ЖХМС показала завершение реакции. Указанную смесь фильтровали и очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа (кислые условия: 0,l% TFA) с получением WX27: 6метил-1-(метил(7Н-пиррол[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)-№(2,2,2-трифторэтил)пиперидил-3-формамида (81,80 мг, выход составил 25,56%). ¹H ЯМР (400 МГц, метанолЛ₄) δ=8,88 (br. s., 1H), 8,46 (s, 1H), 7,45 (d, J=3,6 Гц, 1H), 6,99 (d, J=3,6 Гц, 1H), 4,10-4,27 (m, 1H), 3,86-4,02 (m, 1H), 3,58 (s, 3H), 3,09-3,21 (m, 2Н), 2,98-3,08 (m, 1H), 2,96 (br. s., 1H), 2,10 (d, J=13,6 Гц, 1H), 1,76-1,97 (m, 2Н), 1,42-1,57 (m, 1H), 0,98 (d, J=6,0 Гц, 3H). Значение C₁₄H₁₉F₃N₆O [M+H]⁺ 345 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 345.

Вариант реализации 26.

2-Метил-7-(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)-1,7-диазабицикло[3.2.1]октан-6-он

WX28

Стадия 1.

NaOH (270,00 мг, 6,75 ммоль) добавляли в смешанный раствор ТГФ (20 мл) и воды (10 мл) и метил6-метил-1-[метил-[7-(тозил)пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил-3-карбоксилата (600,00 мг, 1,35 ммоль) при 20°C; и реакционный раствор нагревали до 60°C и перемешивали в течение 2 ч. Затем добавляли MeOH (10 мл), нагревали до 80°C и перемешивали в течение 2 ч. ЖХМС показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 20°C, доводили с помощью HCl (6 М) до рН 7, и затем концентрировали в вакууме с получением 6-метил-1-[метил-(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-иламино)пиперидил-3-карбоновой кислоты (600,00 мг, неочищенный продукт), которая представляла собой белое твердое вещество. Значение C₁₃H₁₇N₅O₂ [M+H]⁺ 276 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 276.

Стадия 2.

HATU (513,77 мг, 1,35 ммоль) добавляли в раствор ДМФА (5 мл) и 6-метил-1-(7Н-пирроло[2,3d]пиримидин-4-ил-амино)пиперидил-3-карбоновой кислоты при 20°C; реакционный раствор перемешивали в течение 5 мин, и затем добавляли 2-аминоацетонитрил (56,82 мг, 1,01 ммоль) и TEA (341,82 мг, 3,38 ммоль), и перемешивали в течение 1 ч при 20°C. ЖХМС показала, что исходное сырье было полностью израсходовано. Указанную смесь выливали в ДХМ (50 мл) и воду (10 мл), органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (50 млх3), затем органический слой сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа (щелочные условия: 0,1%NH₃.H₂O) с получением WX28: 2-метил-7-(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)-1,7-диазабицикло[3.2.1]октан-6-она (12,30 мг, выход составил 7,08%). ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ=8,50 (s, 1H), 7,39-7,46 (m, 1H), 6,676,74 (m, 1H), 5,78 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 3,81 (dd, J=4,0 11,2 Гц, 1H), 2,20 (t, J=1,2 Гц, 1H), 1,96 (dd, J=3,2, 6,0 Гц, 2Н), 1,59-1,82 (m, 2H), 1,47 (q, J=1,2 Гц, 1H), 0,96 (t, J=1,2 Гц, 1Н), 0,64 (d, J=6,8 Гц, 3H). Значение C₁₃H₁₅N₅O [M+H]⁺ 257 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 257.

- 28 036122

Вариант реализации 27.

WX29

1-(1-(Метил(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)-3-пиперидинил)пирролидин-2-он

Стадия 1.

трет-Бутил-Н-(1-нитрозо-3-пиперидинил)карбамат (5,00 г, 21,81 ммоль) и цинковую пыль (7,13 г, 109,05 ммоль) растворяли в безводном метаноле (30 мл), по каплям добавляли ледяную уксусную кислоту (30 мл) при -10°C; затем ледяную уксусную кислоту по каплям добавляли в течение 1 ч, указанную смесь перемешивали в течение 30 мин при -10°C, и затем нагревали до 25°C и перемешивали в течение 2 ч. ТСХ показала завершение реакции. Твердые вещества отфильтровывали и остатки концентрировали при пониженном давлении, затем добавляли воду (5 мл) и водную фазу доводили с помощью насыщенного раствора бикарбоната натрия (100 мл) до рН 8-9, затем экстрагировали дихлорметаном:метанолом (5/1; 50 млх3). Объединенные органические фазы промывали насыщенным водным солевым раствором (50 мл), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением трет-бутил^-(1-амино-3-пиперидинил)карбамата (1,80 г, неочищенный продукт), который представлял собой светло-коричневое маслянистое вещество и который непосредственно использовали в следующей реакции без дополнительной очистки. Значение C₁₀H₂₁N₃O₂ [М+Н]+ 216 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 216.

Стадия 2.

трет-Бутил^-(1-амино-3-пиперидинил)карбамат (1,80 г, 8,36 ммоль) и 4-хлор-7(тозил)пирроло[2,3^]пиримидин (2,83 г, 9,20 ммоль) растворяли в растворе дихлорметана (20 мл), и добавляли триэтиламин (2,54 г, 25,08 ммоль), затем реакционный раствор нагревали до 60°C и перемешивали в течение 10 ч. ЖХМС показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 25°C и растворитель концентрировали досуха при пониженном давлении. Остатки выливали в воду (20 мл), водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (30 млх3), объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (15 млх2), сушили безводным сульфатом натрия и фильтровали и концентрировали в вакууме. Остатки очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (дихлорметан/этилацетат=5:1/3:1) с получением трет-бутил-Щ1-[[7-(тозил)пирроло[2,3^]пиримидин-4ил)амино]-3-пиперидил]карбамата, который представлял собой желтое вспененное твердое вещество (1,83 г, выход составил 43,18%). Значение C₂₃H₃₀N₆O₄S [M+H]+ 487 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 487.

Стадия 3.

Раствор трет-бутил-N-[1-[[7-(тозил)пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]-3-пиперидил]карбамата (1,80 г, 3,70 ммоль) (25 мл) по каплям добавляли к суспензии тетрагидрофурана (25 мл) с растворенным гидридом натрия (60%, 162,80 мг, 4,07 ммоль) при 0°C. Указанную смесь перемешивали в течение 30 мин в защитной атмосфере азота при 0°C, затем по каплям добавляли метилйодид (577,70 мг, 4,07 ммоль). После полного добавления по каплям метилйодида реакционный раствор нагревали до нормальной температуры и перемешивали в течение 1 ч. ЖХМС показала завершение реакции. Указанную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония (10 мл) и экстрагировали с использованием этилацетата (30 млх2). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (15 мл), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остатки очищали с помощью хроматографии на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=3:1) с получением трет-бутил-N[1-[метил-[7-(тозил)пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил]амино]-3-пиперидинил]карбамата (900,00 мг, выход составил 48,59%), который представлял собой светлое вспененное твердое вещество. Значение C₂₄H₃₂N₆O₄S [M+H]+ 501 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 501.

Стадия 4.

Соляную кислоту/диоксан (20 мл) добавляли в раствор ДХМ (5 мл) и трет-бутил-Н-[1-[метил-[7(тозил)пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил]амино]-3-пиперидинил]карбамата (900,00 мг, 1,80 ммоль) при 0°C,

- 29 036122 затем указанную смесь нагревали до 30°C и перемешивали в течение 1 ч. Твердое вещество образовалось и ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением Х-метил-Х-[7-(тозил)-7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил]амино]пиперидил-3-амина гидрохлорида (900,00 мг, неочищенный продукт), который представлял собой светло-коричневое твердое вещество. Указанный продукт непосредственно использовали на следующей стадии без очистки. Значение C₁₉H₂₄N₆O₂S [M+H]+ 401, рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 401.

Стадия 5.

№Метил-№[7-(тозил)-7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил]амино]пиперидил-3-амина гидрохлорид (400 мг, 0,9 ммоль) и метил-4-оксомасляную кислоту (159,43 мг, 1,37 ммоль) растворяли в безводном метаноле (10 мл), и ацетоксиборгидрид натрия (388,03 мг, 1,83 ммоль) добавляли партиями при нормальной температуре. Реакционный раствор перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 10 ч при 28°C. ЖХ-МС показала образование нового продукта. Избыточный растворитель сушили вращением, остатки выливали в воду (10 мл) и насыщенный раствор бикарбоната натрия (10 мл), и водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (30 млх2). Объединенные органические фазы промывали насыщенным водным солевым раствором (10 мл), сушили безводным сульфатом натрия и фильтровали и концентрировали в вакууме с получением метил-4-[[1-[метил-[7-(тозил)пирроло[2,3-б]пиримидин-4ил]амино]-3-пиперидинил]амино]бутирата (600,00 мг, неочищенный продукт), который представлял собой желтое маслянистое вещество, и который непосредственно использовали на следующей реакции без дополнительной очистки. Значение C₂₄H₃₂N₆O₄S [M+H]+ 501 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 501.

Стадия 6.

N-Метилпирролидоновый (20 мл) раствор метил-4-[[1-[метил-[7-(тозил)пирроло[2,3-б]пиримидин4-ил]амино]-3-пиперидинил]амино]бутирата (1,00 г, 2,00 ммоль) нагревали до 140°C и перемешивали в течение 5 ч. ЖХМС показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 30°C, и выливали в воду (50 мл) и водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (20 млх3). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (10 млх2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остатки очищали с помощью хроматографии на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=3:1-1:1) с получением 1-[1-[метил-[7-(тозил)пирроло[2,3б]пиримидин-4-ил]амино]-3-пиперидинил]пирролид-2-она (385,00 мг, выход составил 36,97%), который представлял собой желтое твердое вещество. Значение C₂₃H₂₈N₆O₃S [M+H]+ 469 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 469.

Стадия 7.

1-[1- [Метил- [7-(тозил)пирроло [2,3-d] пиримидин-4-ил] амино]-3 -пиперидинил] пирролид-2-он (100,00 мг, 213,42 мкмоль) растворяли в смешанном растворе MeOH (3 мл) и воды (3 мл) и добавляли карбонат калия (88,49 мг, 640,26 мкмоль), затем указанную смесь нагревали до 80°C и перемешивали в течение 2 ч. ЖХМС показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 30°C и концентрировали досуха при пониженном давлении. Остатки выливали в воду (5 мл) и водную фазу экстрагировали дихлорметаном: метанолом (5:1, 10 млх3). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (10 млх2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остатки очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа (NH3.H2O) с получением WX29: 1-[1-[метил(7Нпирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино]-3-пиперидинил]пирролид-2-она (28,00 мг, выход составил 41,73%). ¹H ЯМР (400 МГц, MeOD-d4) δ=8,07-8,13 (m, 1H), 7,03-7,10 (m, 2H), 4,28-4,46 (m, 1H), 3,44-3,56 (m, 2H), 3,22 (s, 3H), 2,81-3,07 (m, 4H), 2,30-2,42 (m, 2H), 1,77-2,09 (m, 5H), 1,45-1,62 (m, 1H). Значение C₁₆H₂₂N₆O [M+H]+ 315 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 315.

Вариант реализации 28.

СМ HN—/

N О

[I J ) ^Ν ί

WX30 №(Цианометил)-1-[метил(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино]пирролидил-3-формамид

- 30 036122

Стадия 1.

1-трет-Бутилоксикарбонилпиррол-З-карбоновую кислоту (5,00 г, 23,23 ммоль) и триэтиламин (2,82 27,88 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (100 мл), затем этилхлорформиат (2,77 г, 25,55 ммоль) добавляли по каплям в защитной атмосфере азота при 0°C; затем реакционный раствор перемешивали в течение 1 ч при 0°C, добавляли этанольный раствор (25 мл) DMAP (56,76 мг, 464,60 мкмоль), затем реакционную смесь нагревали до 30°C и перемешивали в течение 10 ч. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь выливали в воду (50 мл) и водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (50 млхЗ). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (50 млх3), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением этилового эфира 1-трет-бутилоксикарбонил-пиррол-3-карбоновой кислоты, который представлял собой бесцветное маслянистое вещество (5,50 г, неочищенный продукт). Указанный продукт непосредственно использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Значение Ci₂H₂iNO₄[M+H]+ 244 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 244.

Стадия 2.

Соляную кислоту/диоксан (30 мл) медленно добавляли в растворе дихлорметана (10 мл) и этилового эфира 1-трет-бутилоксикарбонил-пиррол-3-карбоновой кислоты (5,50 г, 22,61 ммоль), и реакционный раствор перемешивали в течение 3 ч при нормальной температуре. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением гидрохлорида этилпирролидил-3-карбоксилата (4,00 г, неочищенный продукт), который представлял собой светлокоричневое маслянистое вещество. Указанный продукт непосредственно использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Значение C₇Hi₃NO₂ [M+H]+ 144 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 144.

Стадия З.

Гидрохлорид этилпиперидил-3-карбоксилата (4,00 г, 22,27 ммоль) растворяли в ледяной уксусной кислоте (30 мл) и воде (10 мл), и водный раствор (20 мл) нитрита натрия (3,07 г, 44,54 ммоль) по каплям добавляли в течение 30 мин при 0°C. В течение этого периода температуру поддерживали ниже 0°C. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при 0°C, затем нагревали до 30°C и непрерывно перемешивали в течение 1 ч. ТСХ (РЕ: этилацетат=5:1) показала, что исходные вещества были полностью израсходованы. Реакционный раствор выливали в воду (30 мл), и затем экстрагировали с использованием этилацетата (50 млхЗ). Объединенные органические фазы промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия (20 млхЗ) и насыщенным солевым раствором (20 млх2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остатки очищали с использованием колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=3:1) с получением этилового эфира 1-нитрозо-пирролидил-З-карбоновой кислоты, который представлял собой светло-коричневое маслянистое вещество (2,40 г, выход составил 59,45%). Значение C₇Hi₂N₂O₃ [M+H]+ 173 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 173.

Стадия 4.

Этиловый эфир 1-нитрозо-пирролидил-З-карбоновой кислоты (2,40 г, 13,94 ммоль) и цинковую пыль (4,56 г, 69,70 ммоль) растворяли в безводном растворе метанола (15 мл), затем реакционный раствор охлаждали до -10°C, и ледяную уксусную кислоту (15 мл) медленно добавляли по каплям в течение 30 мин. Реакционный раствор перемешивали в течение 30 мин при -10°C, нагревали до 30°C и перемешивали в течение 1 ч. ТСХ показала завершение реакции. Твердое вещество отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт растворяли в воде (10 мл), водную фазу нейтрализовали насыщенным твердым бикарбонатом натрия до рН 7-8, и экстрагировали дихлорметаном: метанолом (5:1, 200 млх2). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (50 млх2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением этилового эфира 1-аминопирролидил-Зкарбоновой кислоты (1,60 г, неочищенный продукт), который представлял собой светло-желтое маслянистое вещество. Указанный продукт непосредственно использовали на следующей стадии без очистки. Значение C₇H₁₄N₂O₂ [M+H]+ 159 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 159.

Стадия 5.

Этиловый эфир 1-аминопирролидил-З-карбоновой кислоты (1,60 г, 10,11 ммоль) и 4-хлор-7(тозил)пирроло[2,3д]пиримидин (3,42 г, 11,12 ммоль) растворяли в растворе дихлорметана (20 мл), и добавляли триэтиламин (3,07 г, 30,33 ммоль), затем реакционный раствор нагревали до 60°C и перемешивали в течение 10 ч. ЖХМС показала завершение реакции. Растворитель сушили вращением, остатки выливали в воду (20 мл) и водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (20 млхЗ). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (15 млх2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали досуха при пониженном давлении. Остатки очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (дихлорметан:этилацетат=5:1-3:1) с получением этилового эфира 1-((7-тозил-7Н-пирроло[2,3д]пиримидин-4-ил)амино)пиперидил-3-карбоновой кислоты, который представлял собой желтое твердое вещество (1,00 г, выход составил 22,11%). Значение

- 31 036122

C₂₀H₂₃N5O4S [М+Н]+ 430 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 430.

Стадия 6.

Этиловый эфир 1-((7-тозил-7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)пиперидил-3-карбоновой кислоты (1,00 г, 2,33 ммоль) по каплям добавляли к суспензии тетрагидрофурана (15 мл) и NaH (60%, 112,00 мг, 2,80 ммоль) в защитной атмосфере азота при 0°C в течение 30 мин, затем реакционный раствор перемешивали в течение 1 ч при 0°C, и добавляли метилйодид (396,86 мг, 2,80 ммоль). Реакционный раствор нагревали до 25°C и перемешивали в течение 1 ч. ТСХ показала завершение реакции. Реакционный раствор гасили насыщенным раствором хлорида аммония (10 мл) и водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (30 млх2). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остатки очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=5/1-3/1) с получением этилового эфира 1-(метил-1-(7-тозил-7Н-пирроло[2,3d]пиримидин-4-ил)амино)пиперидил-3-карбоновой кислоты, который представлял собой светло-желтое вспененное твердое вещество (220,00 мг, выход составил 17,67%). Значение C₂₁H₂₅N₅O₄S [M+H]+ 444 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 444.

Стадия 7.

Этиловый эфир 1-(метил-1-(7-тозил-7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)пиперидил-3карбоновой кислоты (220,00 мг, 496,03 мкмоль) растворяли в смешанном растворе тетрагидрофурана (5 мл) и воды (2 мл), добавляли гидроксид натрия (79,36 мг, 1,98 ммоль), и затем реакционный раствор нагревали до 60°C и перемешивали в течение 10 ч. ЖХМС показала завершение реакции. Реакционный раствор охлаждали до 25°C и концентрировали при пониженном давлении. Водную фазу доводили с помощью 2 М HCl (3 мл) до рН 5-6, и водную фазу концентрировали в вакууме с получением 1-[метил(7Нпирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино]пирролидил-3-карбоновой кислоты (65,00 мг, неочищенный продукт), которая представляла собой желтое твердое вещество. Значение C₁₂H₁₅N₅O₂ [M+H]+ 262 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 262.

Стадия 8.

HOBt (84,04 мг, 621,95 мкмоль), EDCI (119,23 мг, 621,95 мкмоль), 2-глициннитрил гидрохлорид (38,51 мг, 298,54 мкмоль) и триэтиламин (151,04 мг, 1,49 ммоль) добавляли в раствор ДМФА (10 мл) и 1[метил(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино]пирролидил-3-карбоновой кислоты (65,00 мг, 248,78 мкмоль), и реакционный раствор перемешивали в течение 10 ч при нормальной температуре. ЖХМС показала завершение реакции. Указанную смесь выливали в воду (10 мл) и водную фазу экстрагировали дихлорметаном: метанолом (5/1, 30 млх4). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (15 мл), сушили безводным сульфатом натрия, и затем органические фазы концентрировали. Остатки очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа (NH3.H2O) с получением WX30: N(цианометил)-1-[метил(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино]пирролидил-3-формамида (34,00 мг, выход составил 44,93%). ¹H ЯМР (400 МГц, MeOD-d₄) 8,09 (s, 1H), 7,04 (d, J=3,5 Гц, 1H), 6,90 (br. s., 1H), 4,11-4,27 (m, 2H), 3,00-3,27 (m, 8H), 2,18 (br. s., 2H). Значение C₁₄H₁₇N₇O [M+H]⁺ 300 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 300.

Вариант реализации 29.

WX31

1-[Метил(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино]^-(2,2,2-трифторэтил)пирролидил-3-формамид

WX31 получали с использованием способа получения, аналогичного варианту реализации 28, и неочищенный продукт очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа с получением WX31 (56,00 мг, выход составил 62,47%). 1H ЯМР (400 МГц, MeOD-d4) 8,09 (s, 1H), 7,03 (d, J=3,3 Гц, 1H), 6,91 (br. s., 1H), 3,81-4,04 (m, 2H), 3,03-3,27 (m, 8H), 2,01-2,32 (m, 2H). Значение С_мН^з^О [M+H]⁺ 343 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 343.

Вариант реализации 30.

WX32 WX33

- 32 036122 (R и S) 1-[Метил(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино]-М-(2,2,2-трифторэтил)пирролидил-3формамид

1-[Метил(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино]-М-(2,2,2-трифторэтил)пирролидил-3-формамид (2,00 г, 5,84 ммоль) разделяли с помощью хиральной колонки с получением WX32: (R или S)-1-[метил(7Нпирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино]-М-(2,2,2-трифторэтил)пирролидил-3-формамида (890,00 мг, выход составил 44,52%) и WX33: (S или R)-1-[метил(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]-N-(2,2,2трифторэтил)пирролидил-3-формамида (835,00 мг, выход составил 41,78%).

Условия разделения SFC.

Колонка: AD(250x30 мм, 5 мкм) хиральная колонка, подвижная фаза: А: сверхкритический СО₂, В: 20% MeOH (0,1% NH₃H₂O), А:В=80:20, скорость потока: 60 мл/мин температура колонки: 38°C, длина волны: 220 нм, давление струи: 100 Бар, температура сопла: 60°C, температура испарения: 20°C, температура кондиционирования: 25°C.

WX32: (R или S)-N-(цианометил)-1-[метил(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил-3формамид, время удерживания: 5,136 мин. 1H ЯМР (400 МГц, MeOD-d₄)=8,09 (s, 1H), 7,03 (d, J=3,3 Гц, 1H), 6,76-6,99 (m, 1H), 3,83-4,03 (m, 2H), 3,00-3,27 (m, 8H), 2,19 (br. s., 2H). Значение C₁₄H₁₇F₃N₆O [M+H]+ 343 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 343.

WX33: (S или R)-N-(цианометил)-1-[метил(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил-3формамид, время удерживания: 5,634 мин. 1H ЯМР (400 МГц, MeOD-d₄) δ=8,09 (s, 1H), 7,03 (d, J=3,3 Гц, 1H), 6,89 (br. s., 1H), 3,85-4,02 (m, 2H), 3,02-3,26 (m, 8H), 2,18 (br. s., 2H). Значение C14H17F3N6O [M+H]+ 343 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 343.

Вариант реализации 31.

3-(4-(Метил(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)-1,4-диазепан-1-ил)-3-карбонилпропионитрил

Стадия 1.

трет-Бутиловый эфир 1,4-диазепан-1-карбоновой кислоты (10,00 г, 49,93 ммоль) растворяли в уксусной кислоте (25 мл) и воде (15 мл) и охлаждали до 0°C, затем водный раствор (10 мл) нитрита натрия (6,89 г, 99,86 ммоль) по каплям добавляли в течение 30 мин, и в то же время температуру поддерживали ниже 0°C. Указанную смесь нагревали до комнатной температуры естественным образом и перемешивали в течение 1,5 ч до того, как ТСХ показала, что исходные вещества были полностью израсходованы (петролейный эфир:этилацетат=3:1, Rf=0,45). Этилацетат (2x100 мл) добавляли для экстракции. Органические фазы нейтрализовали с помощью твердого бикарбоната натрия, промывали водой и солевым водным раствором, сушили безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением трет-бутилового эфира 4-нитрозо-1,4-диазепан-1-карбоновой кислоты (7,00 г, неочищенный продукт), который представлял собой светло-коричневое маслянистое вещество и который непосредственно использовали на следующей стадии. Значение C₁₀H₁₉N₃O₃ [М+Н]+ 230, рассчитывали с использо- 33 036122 ванием MS ESI и оно составило 230.

Стадия 2.

4-Нитрозо-1,4-диазепан-1-трет-бутилформиат (5,68 г, 24,77 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (100 мл) и алюмогидрид лития (1,88 г, 49,55 ммоль) добавляли партиями в защитной атмосфере азота при 0°C, и перемешивали в течение 30 мин при 0°C. Затем указанную смесь нагревали до 70°C и перемешивали в течение 2 ч. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 0°C и последовательно добавляли воду (0,88 мл), 15% раствор гидроксид натрия (1,88 мл) и воды (1,88x3 мл). Указанную смесь перемешивали в течение 20 мин, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением третбутилового эфира 4-амино-1,4-диазепан-1-карбоновой кислоты (4,00 г, неочищенного), который представлял собой желтое маслянистое вещество и который непосредственно использовали на следующей стадии. Значение CioH2iN3O2 [М+Н]+ 216 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 216.

Стадия 3.

Триэтиламин (3,76 г, 37,16 ммоль) добавляли в раствор диоксана (100 мл) и трет-бутилового эфира 4-амино-1,4-диазепан-1-карбоновой кислоты (4,00 г, 18,58 ммоль) и 4-хлор-7-(тозил)пирроло[2,3d]пиримидина при 25°C. Указанную смесь перемешивали в течение 5 ч при 110°C. ЖХ-МС показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 25°C и концентрировали досуха при пониженном давлении. Остатки очищали с помощью хроматографии на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=3:1-1:1) с получением трет-бутилового эфира 4-[[7-(тозил)пирроло[2,3Д]пиримидин-4ил]амино]-1,4-диазепан-1-карбоновой кислоты (1,70 г, выход составил 18,80%), который представлял собой желтое твердое вещество. Значение C₂₃H₃₀N₆O₄S [M+H]+ 487 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 487.

Стадия 4.

трет-Бутиловый эфир 4-[[7-(тозил)пирроло[2,3Д]пиримидин-4-ил]амино]-1,4-диазепан-1карбоновой кислоты (800,00 мг, 1,64 ммоль, 1,00 экв.) растворяли в тетрагидрофуране (50 мл) и охлаждали до 0°C, и гидрид натрия (118,37 мг, 4,93 ммоль, 3,00 экв.) добавляли партиями в защитной атмосфере азота. Указанную смесь перемешивали в течение 30 мин при 25°C. Затем метилйодид (8,40 г, 59,18 ммоль, 36,09 экв.) по каплям добавляли при 0°C. Указанную смесь перемешивали в течение 2 ч при 25°C. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 0°C, и воду добавляли для гашения указанной смеси. Водную фазу экстрагировали с использованием смеси дихлорметан: метанол (10:1,100 млх3), объединенные органические фазы промывали насыщенным водным солевым раствором (200 млх2), сушили безводным сульфатом натрия фильтровали и концентрировали в вакууме с получением трет-бутилового эфира 4-[метил-[7-(тозил)пирроло [2,3Д]пиримидин-4-ил]амино] -1,4-диазепан-1 карбоновой кислоты (800,00 мг, 1,60 ммоль, выход составил 97,44%), который представлял собой желтое твердое вещество, и который непосредственно использовали в следующей реакции без дополнительной очистки. Значение C₂₄H₃₂N₆O₄S [M+H]+ 501 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 501.

Стадия 5.

трет-Бутиловый эфир 4-[метил-[7-(тозил)пирроло[2,3Д] пиримидин-4-ил]амино]-1,4-диазепан-1карбоновой кислоты (400,00 мг, 799,03 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл) и метаноле (10 мл) и водный раствор (5 мл) гидроксида натрия (191,77 мг, 4,79 ммоль) добавляли при 25°C. Указанную смесь перемешивали в течение 2 ч при 70°C. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 25°C и концентрировали досуха при пониженном давлении. Остатки экстрагировали с использованием смеси дихлорметан: метанол (10:1, 100 млх3), объединенные органические фазы промывали насыщенным водным солевым раствором (20 млх2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением трет-бутилового эфира 4-[метил(7Hпирроло[2,3Д]пиримидин-4-ил)амино]-1,4-диазепан-1-карбоновой кислоты (270,00 мг, неочищенный продукт), который представлял собой желтое твердое вещество и который непосредственно использовали в следующей реакции без дополнительной очистки. Значение C₁₇H₂₆N₆O₂ [M+H]+ 347 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 347.

Стадия 6.

Трифторуксусную кислоту (10 мл) добавляли партиями к раствору дихлорметана (10 мл) и третбутилового эфира 4-[метил(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]-1,4-диазепан-1-карбоновой кислоты (270,00 мг, 779,38 мкмоль) при 0°C. Указанную смесь перемешивали в течение 30 мин при 25°C. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением N-(1,4-азациклогептан-1-ил)-N-метил-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-амина (180,00 мг, неочищенный продукт), который представлял собой желтое твердое вещество и который непосредственно использовали в следующей реакции без дополнительной очистки. Значение C₁₂H₁₈N₆ [M+H]+ 247 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 247.

Стадия 7.

Раствор ДМФА (3 мл) и 2-цианоуксусной кислоты (43,94 мг, 516,62 мкмоль), HOBt (93,07 мг, 688,82 мкмоль) и EDCI (132,05 мг, 688,82 мкмоль) перемешивали в течение 30 мин при 25°C, затем добавляли раствор ДМФА (3 мл) и N-(1,4-азациклогептан-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-амина

- 34 036122 (80,00 мг, 344,41 мкмоль) и триэтиламина (174,25 мг, 1,72 ммоль). Указанную смесь перемешивали в течение 12 ч при 25°C. ЖХ-МС показала завершение реакции. Указанную смесь концентрировали при пониженном давлении и остатки очищали щелочной ВЭЖХ препаративного типа с получением WX34 (10,00 мг, выход составил 9,70%). 1H ЯМР (400 МГц, метанол^) δ=8,14 (br. s., 1Н),7,18 (br. s., 1H), 6,83 (br. s., 1H), 3,78-3,70 (m, 2H), 3,69-3,61 (m, 2Н), 3,28-3,04 (m, 4Н), 2,18 (s, 1H), 2,07 (br. s., 1H), 1,34-129 (m, 2Н). Значение C₁₅H₁₉N₇O [M+H]+ 314 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 314.

Вариант реализации 32.

L-(4-((7H-Пирроло [2,3 ^]пиримидин-4-ил)амино)диазепан-1 -ил)-3,3,3-трифтортрифторпропан-1 -он.

WX35 получали с использованием способа получения, аналогичного варианту реализации 31, и неочищенный продукт очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа с получением WX35. 1Н ЯМР (400 МГц, метанол^) δ=8,39-8,35 (m, 1H), 7,29-7,25 (m, 1H), 6,70-6,65 (m, 1H), 5,13 (dd, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 4,78-4,71 (m, 1H), 4,34 (dd, J=4,8, 15,3 Гц, 1Н), 4,06-4,01 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,88 (s, 1H), 3,84 (d, J=3,8 Гц, 1Н), 3,81-3,75 (m, 1H), 3,72-3,66 (m, 1H), 3,60-3,49 (m, 2H), 2,60-244 (m, 1H), 2,26-2,15 (m, 1H). Значение C₁₄H₁₇F₃N₆O [M+H]+ 343 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 343.

Вариант реализации 33.

3,3,3-Трифтор-1 -(4-метил(7H-пирроло [2,3-б]пиримидин-4-ил)амино)диазепан-1 -ил)пропан-1 -он.

WX36 получали с использованием способа получения, аналогичного варианту реализации 31, и неочищенный продукт очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа с получением WX36. ¹H ЯМР (400 МГц, метанол-б₄) δ=8,33-8,29 (m, 1H), 7,44-7,40 (m, 1H), 6,85-6,82 (m, 1H), 4,32-4,14 (m, 1H), 3,85-3,70 (m, 3H), 3,58 (d, J=7,0 Гц, 3H), 3,31-3,25 (m, 1H), 3,16-2,97 (m, 2H), 2,34-2,08 (m, 2H). Значение C₁₅H₁₉F₃N₆O [M+H]+ 357 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 357.

Вариант реализации 34.

К-(Цианометил)-3-метил-1-(метил(7Н-пирроло[2,3-0]пиримидин-4-ил)пиперидил-3-формамид

Стадия 1.

Тетрагидрофуран (150 мл) добавляли в круглую колбу с пламенной сушкой в атмосфере аргона и охлаждали до -78°C, и затем добавляли диизопропиламин (6,13 г, 60,62 ммоль, 1,20 экв.), и затем нбутиллитий (2,5 М, 24,25 мл, 1,20 экв.) по каплям добавляли в течение 30 мин. Указанную смесь перемешивали в течение 0,5 ч при 0°C. Раствор тетрагидрофурана (150 мл) и этилового эфира третбутилоксикарбонил-3-пиперидилкарбоновой кислоты (13,00 г, 50,52 ммоль, 1,00 экв.) по каплям добавляли в указанный выше раствор при -78°C в течение 30 мин; указанный реагент перемешивали в течение 1,5 ч при -78°C, и затем по каплям добавляли метилйодид (31,94 г, 224,81 ммоль, 4,45 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при той же температуре, и затем медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 12 ч. ТСХ показала завершение реакции. Реакционную смесь гасили насыщенным хлоридом аммония (50 мл) и экстрагировали с использованием этилацетата (200

- 35 036122 млх2). Объединенную органическую экстракционную жидкость промывали насыщенным раствором хлорида аммония (50 мл) и солевым водным раствором (50 мл), сушили и концентрировали сульфатом натрия с получением неочищенного соединения этилового эфира 1-трет-бутилоксикарбонил-З-метил-Зпиперидилкарбоновой кислоты (15 г, неочищенный продукт), который непосредственно использовали на следующей реакции без дополнительной очистки. Значение C₁₄H₂₅NO₄ [M+H]+ 272, рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 272.

Стадия 2.

Трифторуксусную кислоту (25 мл) добавляли партиями к раствору дихлорметана и этилового эфира 1-трет-бутилоксикарбонил-З-метил-З-пиперидилкарбоновой кислоты ((13,70 г, 50,49 ммоль, 1,00 экв.) при 0°C. Указанную смесь перемешивали в течение 30 мин при 25°C. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением этил-3-метилпиперидил-3карбоксилата (9 г, неочищенный продукт), который представлял собой желтое маслянистое вещество и который непосредственно использовали на следующей реакции без дополнительной очистки. Значение C₉H₁₇NO₂ [M+H]+ 172 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 172.

Стадия 3.

Этил-3-метилпиперидил-3-карбоксилат (8,60 г, 50,22 ммоль, 1,00 экв.) растворяли в уксусной кислоте (30 мл) и воде (30 мл), и водный раствор (30 мл) нитрита натрия (6,93 г, 100,44 ммоль, 2,00 экв.) по каплям добавляли при 0°C. Водный раствор по каплям добавляли в течение 10 мин. В ходе указанного периода температуру поддерживали ниже 0°C. Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры (25°C) и перемешивали в течение 3 ч при 25°C. ТСХ (петролейный эфир:этилацетат=1:1) показала, что исходные вещества были полностью израсходованы. Лед медленно добавляли в реакционный раствор для гашения и затем этилацетат (100 млхЗ) использовали для экстракции. Объединенные органические фазы разбавляли водой (100 мл), нейтрализовывали карбонатом натрия, промывали водой (100 млх2) и насыщенным солевым раствором (20 млх2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остатки очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (100200 меш силикагель, петролейный эфир:этилацетат=5:1-3:1) с получением этил-З-метил-1-нитрозопиперидил-3-карбоксилата (3,10 г, 15,48 ммоль, выход составил 30,83%), который представлял собой желтое маслянистое вещество. Значение C₉Hi₆N₂O3 [М+Н]+ 201 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 201.

Стадия 4.

Цинк (5,06 г, 77,41 ммоль, 5,00 экв.) добавляли в метанольный раствор (50 мл) этил-З-метил-1нитрозо-пиперидил-З-карбоксилата (3,10 г, 15,48 ммоль, 1,00 экв.) при 0°C. Указанную смесь перемешивали в течение 5 мин при 0°C. Затем уксусную кислоту (15 мл) по каплям добавляли и в то же время температуру поддерживали ниже 0°C. После добавления уксусной кислоты указанную смесь перемешивали в течение З ч при 25°C. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь фильтровали и фильтрат разбавляли водой (100 мл) и дихлорметаном (100 мл), охлаждали до 0°C, и подщелачивали твердым карбонатом натрия до рН 8-9; затем органические фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дихлорметаном: метанолом (10:1, 100 млхЗ); объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением этил-1-амино-З-метилпиперидил-З-карбоксилата (2,80 г, выход составил 97,12%), который представлял собой светло-коричневое маслянистое вещество. Значение C₉Hi₈N₂O₂ [M+H]+ 187 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 187.

Стадия 5.

Этил-1-амино-З-метилпиперидил-З-карбоксилат (2,80 г, 15,03 ммоль, 1,00 экв.) и 4-хлор-7(тозил)пирроло[2,3Д]пиримидин (4,86 г, 15,79 ммоль, 1,05 экв.) растворяли в диоксане (30 мл) и добавляли триэтиламин (2,28 г, 22,55 ммоль, 1,50 экв.). Указанную смесь перемешивали в течение 5 ч при 110°C. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 25°C. Указанную смесь разбавляли водой (20 мл), водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (100 млх2), органические фазы объединяли и последовательно промывали водой (30 млх2) и насыщенным солевым водным раствором (20 мл), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остатки очищали с помощью хроматографии на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=5:1-1:1) с получением этил-З -метил-1-[[7-(тозил)пирроло [2,3 -d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил-З -карбоксилата (1,10 г, 2,40 ммоль, выход составил 15,96%), который представлял собой желтое твердое вещество. Значение C₂₂H₂₇N₅O₄S [M+H]+ 458 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 458.

Стадия 6.

Гидрид натрия (124,80 мг, 3,12 ммоль, 1,30 экв.) добавляли партиями к раствору тетрагидрофурана и (30 мл) 3-метил-1-[[7-(тозил)пирроло[2,3Д]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил-3-карбоксилата (1,10 г, 2,40 ммоль, 1,00 экв.) в защитной атмосфере азота при 0°C. Указанную смесь перемешивали в течение 30 мин при 25°C, затем снова охлаждали до 0°C и добавляли метилйодид (511,87 мг, 3,61 ммоль, 1,50 экв.). Указанную смесь перемешивали в течение 2,5 ч при 25°C. ТСХ показала завершение реакции. Воду (10 мл) добавляли для гашения реакционного раствора. Водную фазу экстрагировали с использованием эти

- З6 036122 лацетата (50 млх2), объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остатки очищали с помощью хроматографии на силикагеле (100-200 меш силикагель, петролейный эфир:этилацетат=3:1-1:1) с получением метилового эфира 3-метил-1-[метил-[7-(тозил)пирроло[2,3d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил-3-карбоновой кислоты (1,00 г, 2,12 ммоль, где выход составил 88,36%), который представлял собой желтое твердое вещество. Значение C₂₃H₂₉N₅O₄S [M+H]+ 472 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 472.

Стадия 7.

Этиловый эфир 3-метил-1-[метил-[7-(тозил)пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил]амино]пиперидил-3карбоновой кислоты (1,00 г, 2,12 ммоль, 1,00 экв.) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл) и метаноле (10 мл) при 25°C, и добавляли водный раствор (5 мл) гидроксида натрия (848,00 мг, 21,20 ммоль, 10,00 экв.). Затем указанную смесь нагревали до 100°C и перемешивали в течение 5 ч. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 25°C и концентрировали при пониженном давлении. Остатки подкисляли разбавленной HCl (водный раствор) до рН 5-6, и затем концентрировали при пониженном давлении с получением 3-метил-1-[метил(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)ил-амино]пиперидил-3карбоновой кислоты (600,00 мг, неочищенный продукт), которая представляла собой желтое твердое вещество и которую непосредственно использовали в следующей реакции без дополнительной очистки. Значение C₁₄H₁₉N₅O₂ [M+H]+ 290 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 290.

Стадия 8.

3-Метил-1-[метил(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)ил-амино]пиперидил-3-карбоновую кислоту (300,00 мг, 1,04 ммоль, 1,00 экв.), HOBt (281,05 мг, 2,08 ммоль, 2,00 экв.) и EDCI (398,74 мг, 2,08 ммоль, 2,00 экв.) растворяли в ДМФА (4 мл) и перемешивали в течение 30 мин при 25°C, затем последовательно добавляли 2-аминоацетонитрил (192,46 мг, 2,08 ммоль, 2,00 экв.) и триэтиламин (420,95 мг, 4,16 ммоль, 4,00 экв.). Указанную смесь перемешивали в течение 12 ч при 25°C. ЖХ-МС показала завершение реакции. Указанную смесь разбавляли водой (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 млх3). Объединенные органические фазы промывали насыщенным водным солевым раствором (20 млх2), сушили безводным сульфатом натрия и фильтровали, и растворитель концентрировали при пониженном давлении. Остатки очищали с использованием щелочной ВЭЖХ препаративного типа с получением WX37:N(цианометил)-3-метил-1-[метил(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-ил)амино]пиперидил-3-формамида (130,00 мг, 397,09 мкмоль, выход составил 38,18%). Значение C₁₆H₂₁N₇O [M+H]+ 328 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 328, ¹H ЯМР (400 МГц, метанол-dj δ=8,18 (br. s., 1H), 7,11 (d, J=3,3 Гц, 1H), 6,71 (d, J=2,8 Гц, 1H), 4,25 (d, J=17,3 Гц, 1H), 3,93 (br. s., 1H), 3,29 (br. s., 3H), 2,99-2,80 (m, 4H), 2,24 (d, J=11,5 Гц, 1H), 2,03 (s, 1H), 1,75 (d, J=12,3 Гц, 1H), 1,19 (s, 4H). Значение C^H^O [M+H]+ 328 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 328.

Вариант реализации 35.

WX3S

3-Метил-1-(метил(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2,2-трифторэтил)пиперидил-3формамид.

WX38 получали с использованием способа получения, аналогичного варианту реализации 34, и неочищенный продукт очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа с получением WX38. 1H ЯМР (400 МГц, метанол-dj δ=8,15 (s, 1H), 7,08 (d, J=3,3 Гц, 1H), 6,73 (br. s., 1H), 4,25-4,12 (m, 1H), 3,50 (br. s., 1H), 3,30 (s, 3H), 2,97-2,80 (m, 4Н), 2,23 (d, J=12,5 Гц, 1H), 2,12-1,98 (m, 1H), 1,74 (d, J=13,1 Гц, 1H), 1,19 (br. s., 4H). Значение C₁₆H₂₁F₃N₆O [M+H]+ 371 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 371.

Вариант реализации 36.

WX39

- 37 036122

Х-(Цианоэтил)-4-(метил(7Н-пирроло[2,3-0]пиримидин-4-ил)амино)морфолин-2-форма.мид

WXW

Стадия 1.

4-(трет-Бутилоксикарбонил)морфолин-2-карбоновую кислоту (7,30 г, 31,57 ммоль) растворяли в смешанном растворителе дихлорметана (150,00 мл) и метанола (10,00 мл), и затем раствор гексана и TMSCHN2 (2 М, 23,68 мл) по каплям добавляли в защитной атмосфере азота при 0°C. Реакционную смесь перемешивали в течение 0,5 ч при 25°C. ТСХ (петролейный эфир:этилацетат=1:1) показала, что исходные вещества полностью прореагировали. Насыщенный раствор хлорида аммония (20 мл) добавляли для гашения, затем дихлорметан использовали для экстракции (100 млх2), объединенные органические фазы промывали насыщенным водным солевым раствором (20 мл), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением метилового эфира 4(трет-бутилоксикарбонил)морфолин-2-карбоновой кислоты (8,00 г, неочищенный продукт), который представлял собой светло-коричневое твердое вещество и который непосредственно использовали в следующей реакции без дополнительной очистки, дихлорметан Значение C11H₁₉NO₅ [M+H]⁺ 246 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 246.

Стадия 2.

Раствор диоксана (4 М, 32,62 мл) и соляной кислоты по каплям добавляли к раствору дихлорметана (100,00 мл) и метилового эфира и 4-(трет-бутилоксикарбонил)морфолин-2-карбоновой кислоты (8,00 г, 32,62 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали в течение 0,5 ч при 25°C. ТСХ (петролейный эфир:этилацетат=3:1) показала, что исходные вещества были полностью израсходованы. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении с получением метилового эфира морфолин-2карбоновой кислоты (6,00, неочищенный продукт), который представлял собой белое твердое вещество и который непосредственно использовали в следующей реакции без дополнительной очистки. Значение C6H11NO3 [М+Н]⁺ 146 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 146.

Стадия 3.

Метиловый эфир морфолин-2-карбоновой кислоты (5,70 г, 31,38 ммоль) растворяли в уксусной кислоте (50,00 мл) и воде (50,00 мл) и водный раствор (50,00 мл) нитрита натрия (4,33 62,77 ммоль) по каплям добавляли в указанный выше раствор при 0°C. Указанную смесь перемешивали в течение 30 мин при 0°C и затем перемешивали в течение 2 ч при 25°C. ТСХ показала завершение реакции. Воду (30 мл) добавляли для гашения реакции. Водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (100 млх2).

Объединенные органические фазы промывали насыщенным водным солевым раствором (20 млх2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме при 70°C для удаления части уксусной кислоты. Остатки растворяли в смешанном растворе этилацетата (100 мл) и воды (50 мл), и подщелачивали твердым гидрокарбонатом натрия до рН 8-9. Указанную смесь экстрагировали с использованием этилацетата (100 млх2), объединенные органические фазы промывали насыщенным водным солевым раствором (20 млх2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением метилового эфира 4-нитрозо-морфолин-2-карбоновой кислоты (5,40 г, выход составил 97,83%), который представлял собой светло-коричневое твердое вещество. Значение C₆H₁₀N₂O₄ [М+Н]⁺ 175 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 175.

Стадия 4.

Метиловый эфир 4-нитрозо-морфолин-2-карбоновой кислоты (4,40 г, 25,27 ммоль) растворяли в метаноле (50,00 мл) и охлаждали до -10°C, затем цинк (8,26 г, 126,33 ммоль) добавляли в указанный раствор в защитной атмосфере азота, и уксусную кислоту (15,17 г, 252,66 ммоль) по каплям добавляли при температуре от -10°C до 0°C. Указанную смесь перемешивали в течение 60 мин при 0°C и затем перемешивали в течение 4 ч при 25°C. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь фильтровали и промывали метанолом (1000 мл). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении при 70°C. Остатки разделяли в дихлорметане: метаноле (10:1, 400 мл) и подщелачивали до рН 8-9. Указанную смесь фильтровали с помощью диатомита и промывали дихлорметаном: метанолом (10:1). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением метилового эфира 4-аминоморфолин-2-карбоновой кислоты (5,30 г, неочищенный продукт), который представлял собой желтое маслянистое вещество и который непосредственно использовали на следующей реакции без дополнительной очистки. Значение C₆H₁₂N₂O₃ [М+Н]⁺ 161 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 161.

- 38 036122

Стадия 5.

Метиловый эфир 4-аминоморфолин-2-карбоновой кислоты (4,30 г, 26,85 ммоль) и 4-хлор-7(тозил)пирроло[2,3^]пиримидин (8,26 г, 26,85 ммоль) растворяли в диоксане (100,00 мл) и триэтиламин (8,15 г, 80,55 ммоль) добавляли в защитной атмосфере азота. Указанную выше смесь перемешивали в течение 24 ч при 110°C. ТСХ показала отсутствие прогресса реакции. Указанную смесь охлаждали до 25 °C и затем концентрировали при пониженном давлении при 50°C. Остатки разбавляли водой (50 мл), водную фазу экстрагировали этилацетатом (100 млх3), объединенные органические фазы промывали насыщенным водным солевым раствором (20 млх2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остатки очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (100-200 меш силикагель, петролейный эфир:этилацетат: дихлорметан=5:1:0,5-1:1:1) с получением метилового эфира 4-[[7-(тозил)пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил]амино]морфолин-2-карбоновой кислоты (3,80 г, 7,93 ммоль, выход составил 29,52%), который представлял собой желтое твердое вещество. Значение C₁₉H₂₁N₅O₅S [M+H]+ 432, рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 432.

Стадия 6.

Метиловый эфир 4-[[7-(тозил)пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил] амино]морфолин-2-карбоновой кислоты (3,80 г, 8,81 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (100,00 мл) и гидрид натрия (422,80 мг, 10,57 ммоль, 1,20 экв.) добавляли партиями в защитной атмосфере азота при 0°C. Реакционный раствор перемешивали в течение 60 мин при 0°C, затем по каплям добавляли метилйодид (7,17 г, 50,48 ммоль) при 0°C и непрерывно перемешивали в течение 4 ч при 25°C. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 0°C и воду (20 мл) добавляли для гашения. Водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (100 млх2), объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остатки очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (100-200 меш силикагель, петролейный эфир:этилацетат=3:1-1:1) с получением метилового эфира 4-[метил-[7(тозил)пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил]амино]морфолин-2-карбоновой кислоты (140,00 мг, выход составил 3,39%), который представлял собой желтое твердое вещество. Значение C₂₀H₂₃N₅O₅S [М+Н]⁺ 446 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 446.

Стадия 7.

Водный раствор (2,50 мл) гидроксида натрия (50,28 мг, 1,26 ммоль) добавляли в смешанной раствор тетрагидрофурана (5,00 мл) и метанола (5,00 мл) и метилового эфира 4-[метил-[7-(тозил)пирроло[2,3d]пиримидин-4-ил]амино]морфолин-2-карбоновой кислоты (140,00 мг, 314,26 мкмоль). Указанную смесь перемешивали в течение 2 ч при 100°C. ЖХ-МС показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 25 °C и затем концентрировали при пониженном давлении при 50°C. Остатки нейтрализовали с помощью водного раствора разбавленной соляной кислоты и концентрировали при пониженном давлении с получением 4-[метил(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]морфолин-2-муравьиной кислоты (120 мг, неочищенный продукт), которая представляла собой желтое твердое вещество и которую непосредственно использовали в следующей реакции без дополнительной очистки. Значение C₁₂H₁₅N₅O₃[М+Н]⁺ 278 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 278.

Стадия 8.

4-[Метил(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]морфолин-2-муравьиную кислоту (45,00 мг, 162,29 мкмоль), HOBt (43,86 мг, 324,58 мкмоль) и EDCI (62,22 мг, 324,58 мкмоль) растворяли в ДМФА (4,00 мл). Указанную смесь перемешивали в течение 30 мин при 25°C, затем добавляли 2аминоацетонитрил (30,03 мг, 324,58 мкмоль) и триэтиламин (65,69 мг, 649,16 мкмоль), и затем указанную смесь перемешивали в течение 12 ч при 25°C. ЖХ-МС показала завершение реакции. Указанную смесь разбавляли водой (5 мл). Водную фазу экстрагировали дихлорметаном: метанолом (5:1, 20 млх3), объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остатки очищали с помощью ВЭЖХ щелочного типа с получением WX39 (20,00 мг, выход составил 39,08%). 1H ЯМР (400 МГц, метанол^) δ=8,16 (s, 1H), 7,15-7,06 (m, 2Н), 4,63 (br. s., 1H), 4,47 (dd, J=2,8, 10,0 Гц, 1H), 4,24-413 (m, 3H), 4,05 (t, J=10,5 Гц, 1H), 3,29-3,18 (m, 5Н), 3,00-2,84 (m, 2Н). Значение C₁₄H₁₇N₇O₂ [M+H]⁺ 316 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 316.

Вариант реализации 37.

WX40

4-((7H-Пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2,2-трифторэтил)морфолин-2-формамид.

WX40 получали с использованием способа получения, аналогичного варианту реализации 36, и неочищенный продукт очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа с получением WX40. 1Н ЯМР (400

- 39 036122

МГц, метанол^) δ=8,13 (s, 1H), 7,14 (d, J=3,3 Гц, 1H), 6,86 (br. s., 1H), 4,63 (s, 1H), 4,39 (dd, J=2,4, 10,4

Гц, 1H), 4,12 (d, J=11,5 Гц, 1H), 4,02-3,88 (m, 3H), 3,41 (d, J=7,8 Гц, 1H), 3,07 (d, J=10,8 Гц, 1H), 2,92-2,82 (m, 1H), 2,66 (d, J=16,1 Гц, 1Н). Значение C₁₃H₁₅F₃N₆O₂ [M+H]+ 345 рассчитывали с использованием MS

ESI и оно составило 345.

Вариант реализации 38.

4-(Метил(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2,2-трифторэтил)морфолин-2-формамид.

WX41 получали с использованием способа получения, аналогичного варианту реализации 36, и неочищенный продукт очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа с получением WX41. ¹Н ЯМР (400 МГц, метанол^) δ=8,16 (s, 1H), 7,11 (br. s., 2H), 4,63 (br. s., 1H), 4,47 (dd, J=2,8, 10,0 Гц, 1H), 4,21-4,14 (m, 1H), 4,05 (t, J=10,4 Гц, 1Н), 3,94 (d, J=9,3 Гц, 2Н), 3,26-3,15 (m, 5H), 2,99-2,84 (m, 2H). Значение C₁₄H₁₇F₃N₆O₂ [M+H]+ 359 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 359.

Вариант реализации 39

№(Метоксиметил)-1-[метил-(7Н-пиррол[2,3^]пиримидин-4-]амино]пиперидил-3-формамид

Стадия 1.

1-[Метил-[7-(тозил)пиррол[2,3^]пиримидин-4-]амино]пиперидил-3-муравьиную кислоту (672,75 мг, 1,57 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (30,00 мл) и добавляли триэтиламин (474,98 мг, 4,69 ммоль) и изопропилхлорформиат (191,75 мг, 1,56 ммоль) в защитной атмосфере азота, затем указанную смесь перемешивали со взаимодействием в течение 2 ч. ТСХ показала, что исходные вещества полностью прореагировали и образовалось промежуточное соединение. Добавляли NH3.H2O (548,41 мг, 15,65 ммоль) и непрерывно перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 12 ч. ТСХ показала, что исходные вещества полностью прореагировали. Воду (10 мл) и этилацетат (10 млх3) добавляли для экстракции. Органические слои объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (10 млх1), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и проводили перегонку при пониженном давлении с удалением растворителя, получали серое твердое вещество, дополнительно очищали с помощью преп. ТСХ (ДХМ: MeOH=20:1) с получением 1-[метил-[7-(тозил)пиррол[2,3^]пиримидин-4-]амино]пиперидил)-3формамида (590,00 мг, 76,92%). Значение C₂₀H₂₄N₆O₃S [M+H]+ 429,16 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 429.

Стадия 2.

1-[Метил-[7-(тозил)пиррол[2,3^]пиримидин-4-]амино]пиперидил)-3-формамид (195,00 мг, 456,12 мкмоль) растворяли в ДМФА (2 мл), последовательно добавляли K₂CO₃ (157,60 мг, 1,14 ммоль), KI (37,86 мг, 228,06 мкмоль) и хлорметилметилсульфид (65 мг, 684 мкмоль), нагревали до 80°C и перемешивали в течение 12 ч. ТСХ показала, что исходные вещества полностью прореагировали. Воду (15 мл) и этилацетат (10 млх3) добавляли для экстракции. Органические слои объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (10 млх1), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и проводили перегонку при пониженном давлении с удалением растворителя, с получением серого твердого вещества и разделяли твердое вещество с помощью преп. ТСХ (петролейный эфир:этилацетат=1:1) с получением 1[метил-[7-(тозил)пиррол[2,3^]пиримидин-4-]амино]-Н-[(метилмеркапто)метил]пиперидил-3-формамида (75,00 мг, 33,72%). Значение C₂₂H₂₈N₆O₃S₂ [M+H]+ 489,17 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 489.

- 40 036122

Стадия 3.

- [Метил-[7-(тозил)пиррол[2,3 -б]пиримидин-4-] амино] -N-[(метилмеркапто)метил] пиперидил-3 -формамид (121,00 мг, 248,13 мкмоль) разделяли в дихлорметане ДХМ (10,00 мл) и партиями добавляли mCPBA (100,75 мг, 496,27 мкмоль, 2,00 экв.), и затем перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 12 ч при 25°C. ТСХ показала, что исходные вещества полностью прореагировали, и ЖХ-МС показала образование продукта. Насыщенный тиосульфат натрия (5 млх3) добавляли для гашения остаточного mCPBA и дихлорметан (10 млх3) использовали для экстракции, затем органические слои объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (10 млх1), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и проводили перегонку при пониженном давлении с удалением растворителя, с получением серого твердого вещества и разделяли с помощью препаративной ТСХ (ДХМ: MeOH=10:1) с получением бледно-желтого вязкого вещества 1-[метил-[7-(тозил)пиррол[2,3-б]пиримидин-4-]амино]-Ы[(метилсульфонил)метил]пиперидил-3-формамида (88,00 мг, 68,25%). Вязкое вещество растворяли в метаноле и нагревали с получением №(метоксиметил)1-[метил-[7-(тозил)пиррол[2,3-б]пиримидин-4]амино]пиперидил)-3-формамида. Растворитель удаляли и указанный продукт непосредственно использовали на следующей реакции без дополнительной очистки. Значение C₂₂H₂₈N₆O₄S [М+Н]+ 473,19 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 473.

Стадия 4.

№(Метоксиметил)-1-[метил-[7-(тозил)пиррол[2,3-б]пиримидин-4-]амино]пиперидил)-3-формамид (80,00 мг, 169,29 мкмоль) растворяли в метаноле (2,00 мл), добавляли NaOH (1 M, 508 мкл) и перемешивали со взаимодействием в течение 24 ч при 25°C. ТСХ показала, что исходные вещества полностью прореагировали, и ЖХ-МС показала образование продукта. Добавляли воду (10 мл), указанную смесь фильтровали и указанный продукт промывали смешанным растворителем (ДХМ: MeOH=5:1) и концентрировали с получением белого твердого, и препаративную ВЭЖХ (щелочной метод) применяли с получением WX42: №(метоксиметил)1-[метил-(7Н-пиррол[2,3-б]пиримидин-4-]амино]пиперидил)-3формамида (13,40 мг, 24,86%). Значение C₁₅H₂₂N₆O₂ [M+H]+ 319,18 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 319. '11 ЯМР (400 МГц, метанол-04) δ=8,13 (s, 1H), 7,08 (s, 2Н), 4,53-4,61 (m, 2Н), 3,28 (s, 3H), 3,23 (s, 3H), 2,99-3,09 (m, 2Н), 2,74-2,98 (m, 3H), 1,83-2,06 (m, 3H), 1,40-1,61 (m, 1Н).

Вариант реализации 40.

1-[Метил-[7Н-пиррол[2,3-б]пиримидин-4-]амино]-Ы-(метилтиометил)пиперидил-3-формамид

Стадия 1.

- [Метил- [7-(тозил)пиррол[2,3-б]пиримидин-4-] амино] -Ы-[(метилмеркапто)метил] пиперидил-3 -формамид растворяли в смешанном растворителе MeOH (5,00 мл) и H2O (2,00 мл), добавляли NaOH (16,95 мг, 423,63 мкмоль), и перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 12 ч при 25°C. ТСХ показала, что исходные вещества полностью прореагировали. ЖХ-МС показала образование продукта. HCl (1 Мх10 мл) добавляли с доведением до рН 7-8, затем указанную смесь концентрировали до 5 мл и разделяли с помощью препаративной ВЭЖХ (щелочной метод) с получением WX43: 1-[метил-[7Н-пиррол[2,3б]пиримидин-4-амино]-Ы-(метилтиометил)пиперидил-3-формамида (9,30 мг, 9,85%). Значение C₁₅H₂₂N₆OS [M+H]+ 334,16 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 335, 1Н ЯМР (400 МГц, метанол^) δ=8,12 (s, 1H), 7,08 (s, 2H), 4,33-4,17 (m, 2Н), 3,23 (s, 3H), 3,08-2,79 (m, 5Н), 2,12 (s, 3H), 2,01-1,86 (m, 3H), 1,50 (d, J=10,0 Гц, 1H).

Вариант реализации 41.

- 41 036122

2-[1-[Мети.л[711-11ирро.л[2,3-0]11иримиди11-4-]ами1ю]-3-11И11ериди.л]а11ето11итри.л

Стадия 1.

2-[1-[Метил[7-(тозил)пиррол[2,3^]пиримидин-4-]амино]-3-пиперидил]ацетонитрил растворяли в смешанном растворителе ТГФ (90,00 мкл)/Н₂О (180,00 мкл)/MeOH (180,00 мкл), добавляли NaOH (26,91 мг, 672,75 мкмоль) и перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 12 ч при 25°C. ЖХ-МС показала завершение реакции. Перемешивание останавливали и указанную смесь концентрировали при пониженном давлении с удалением органического растворителя, доводили с помощью HCl (1 Мх5 мл) до рН 7-8 и разделяли с помощью препаративной ВЭЖХ (щелочной метод) с получением WX44: 2-[1[метил[7Н-пиррол[2,3^]пиримидин-4-]амино]-3-пиперидил]ацетонитрила (30,00 мг, 48,55%). Значение C₁₄H₁₈N₆ [M+H]+ 271,16 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 271. ¹Н-ЯМР (400 МГц, метанол^) δ=8,16-8,10 (m, 1H), 7,08 (d, J=3,3 Гц, 1Н),7,03 (d, J=3,3 Гц, 1H), 3,21 (s, 3H), 3,03 (d, J=7,3 Гц, 1H), 2,97-2,79 (m, 2H), 2,67 (t, J=10,5 Гц, 1H), 2,53-2,41 (m, 2H), 2,33-2,19 (m, 1H), 2,04-1,81 (m, 3H), 1,211,00 (m, 1H).

Вариант реализации 42.

2-Циано-№((метил(7Н-пиррол[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)пиперидин-3-ил)метил)ацетамид

Стадия 1.

2-Цианоуксусную кислоту (158,14 мг, 1,86 ммоль) растворяли в ДМФА (4 мл), добавляли HOBt (502,41 мг, 3,72 ммоль) и EDCI (712,78 мг, 3,72 ммоль) и перемешивали со взаимодействием в течение 30 мин при 25°C. добавляли №[3-(аминометил)пиперидин-1-ил]-№метил-7Н-пиррол [2,3^]пиримидин-4амин (134,68 мг, 903,53 мкмоль), затем добавляли Et₃N (752,49 мг, 7,44 ммоль) и указанную смесь перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 12 ч при 25°C. ТСХ показала, что исходные вещества полностью прореагировали и ЖХ-МС показала образование продукта. Перемешивание останавливали и указанную смесь концентрировали при пониженном давлении с удалением ДМФА и разделяли с помощью препаративной ВЭЖХ (щелочной метод) с получением WX45: 2-циано-№((метил(7Н-пиррол[2,3d]пиримидин-4-ил) амино)пиперидин-3-ил)метил)ацетамида (7,70 мг, 6,27%). Значение C₁₆H₂₁N₇O [M+H]⁺ 328,18 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 328, ¹Н ЯМР (400 МГц, метанолd4) δ=8,11 (s, 1H), 7,05 (s, 2H), 3,21 (s, 3H), 3,20-3,09 (m, 2Н), 3,03-2,82 (m, 3Н), 2,65-2,48 (m, 2Н), 2,222,04 (m, 1H), 1,97-1,79 (m, 3H), 1,31-1,18 (m, 1H), 1,08-0,88 (m, 1Н).

Вариант реализации 43

- 42 036122

1-[Метил(7Н-пиррол[2,3^]пиримидин-4-)амино]-№-(2,2,3,3,3-пентафторпропенил)пиперидил-3формамид

Стадия 1.

Промежуточное соединение 3 (99,50 мг, 361,41 мкмоль) растворяли в ДМФА (5,00 мл), добавляли HOBt (146,50 мг, 1,08 ммоль) и EDCI (207,85 мг, 1,08 ммоль) и перемешивали в течение 30 мин при 25°C. Добавляли 2,2,3,3,3-пентафторпропиламин (134,68 мг, 903,53 мкмоль) и триэтиламин (219,43 мг, 2,17 ммоль) и указанную смесь перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 18 ч при 25°C. ЖХМС показала, что исходные вещества полностью прореагировали и что образовался продукт. Перемешивание останавливали, указанную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали до 5 мл и разделяли с помощью препаративной ВЭЖХ (щелочной метод) с получением WX46: 1-[метил(7Н-пиррол[2,3d]пиримидин-4-)амино]-N-(2,2,3,3,3-пентафторпропил)пиперидил-3-формамида (49,70 мг, 33,84%). Значение C₁₆H₁₉F₅N₆O [M+H]+ 407,15 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 407. ¹Н ЯМР (400 МГц, метанол^) δ=8,13 (s, 1Н), 7,08 (t, J=3,4 Гц, 2Н), 4,09-3,80 (m, 2H), 3,22 (s, 3H), 3,08-2,83 (m, 5H), 2,01-1,85 (m,3H), 1,58-1,40 (m, 1H).

Вариант реализации 44.

1-[Метил(711-11иррол[23-0]|1иримиди11-4-)ами11о]-Х-(2,2-дифторэтил)|1И11еридил-3-формамид

Стадия 1.

Промежуточное соединение 3 (76,00 мг, 276,05 мкмоль) растворяли в ДМФА (4,00 мл), добавляли HOBt (111,90 мг, 828,15 мкмоль) и EDCI (158,76 мг, 828,15 мкмоль) и перемешивали в течение 30 мин при 25°C. Добавляли 2,2-дифторэтиламин (55,94 мг, 690,13 мкмоль) и триэтиламин (223,47 мг, 2,21 ммоль) и указанную смесь перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 18 ч при 25°C. ЖХМС показала, что исходные вещества полностью прореагировали и что образовался продукт. Перемешивание останавливали, указанную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали и разделяли с помощью препаративной ВЭЖХ (щелочной метод) с получением WX47: 1-[метил(71-пиррол[2,3d]пиримидин-4-)амино]-N-(2,2-дифторэтил)пиперидил-3-формамида (42,82 мг, 45,85%). Значение C₁₅H₂₀F₂N₆O [M+H]⁺ 339,17 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 339. ¹Н ЯМР (400 МГц, метанол^) δ=8,12 (s, 1H), 7,11-7,02 (m,2H), 6,06-5,67 (m, 1H), 3,66-3,45 (m, 2H), 3,22 (s, 3H), 3,092,98 (m, 2H), 2,96-2,84 (m, 3H), 2,05-1,83 (m, 3H), 1,58-1,39 (m, 1H).

Вариант реализации 45.

- 43 036122

5-[[7Н-Пиррол[2,3^]пиримидин-4-]амино]гексагидропирроло[3,4-е]пиррол-2(Ш)-трет-бутилформиат

2 3 4 WX48

Стадия 1.

Гексагидропирроло[3,4-с]пиррол-2(1Н)-трет-бутилформиата (1,50 г, 7,07 ммоль) растворяли в уксусной кислоте (10,00 мл) и воде (10,00 мл), охлаждали до 0°C, раствор H₂O (10,00 мл) и NaNO₂ (1,22 г, 17,68 ммоль) по каплям добавляли в течение 30 мин при 0°C и указанную смесь непрерывно перемешивали в течение 2 ч при 0°C. ТСХ (ДХМ: MeOH=10:1) показала, что исходные вещества полностью прореагировали. Перемешивание останавливали и указанную смесь доводили с помощью твердого карбоната натрия до рН 8-9, и затем экстрагировали смешанным растворителем (ДХМ: MeOH=10:1, 15 млх3); органические слои объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (25 млх1), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением серо-белого твердого 5-нитрозогексагидропирроло[3,4-с]пиррол-2(1Н)-трет-бутилформиата (1,27 г, неочищенный продукт). 1Н ЯМР (400 МГц, метанол-^) δ=4,57-4,43 (m, 1H),4,25 (dd, J=4,9, 12,7 Гц, 1H), 3,85 (dd, J=7,8, 15,3 Гц, 1H), 3,65 (dd, J=5,3, 11,8 Гц, 2Н), 3,49 (dd, J=4,9, 15,4 Гц, 1H), 3,31-3,21 (m, 2H), 3,18-2,99 (m, 2H), 1,48 (s, 9H).

Стадия 2.

5-Нитрозогексагидропирроло[3,4-с]пиррол-2(1Н)-трет-бутилформиат (150,00 мг, 621,66 мкмоль) растворяли в метаноле (5,00 мл) и добавляли цинковую пыль (609,76 мг, 9,32 ммоль). Температуру контролировали между -10 и 5°C с защитной атмосферой азота, и по каплям добавляли АсОН (3,99 г, 66,44 ммоль), затем указанную смесь непрерывно перемешивали со взаимодействием в течение 1 ч. ТСХ (ДХМ: MeOH=10:1) показала, что исходные вещества полностью прореагировали. Перемешивание останавливали, указанную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали, полученное твердое вещество растворяли в смешанном растворителе ^ХМ^еО^ЮЯ, 10 мл) с удалением твердого вещества, и затем фильтрат концентрировали с получением 5-аминогексагидропирроло[3,4-с]пиррол-2(1Н)-третбутилформиата (150,00 мг, неочищенный продукт), который непосредственно использовали на следующей реакции без дополнительной очистки. Значение Ci₈H₂₇N₃O₄S [M+23]+ 404,17 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 404.

Стадия 3.

4-Хлор-7-(тозил)пиррол[2,3^]пиримидин (169,00 мг, 549,13 мкмоль) и 5-аминогексагидропирроло[3,4-с]пиррол-2(1Н)-трет-бутилформиат (149,78 мг, 658,96 мкмоль) растворяли в ДХМ (6,40 мл), добавляли триэтиламин (278,13 мг, 2,75 ммоль) и перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 16 ч при 25°C. ЖХ-МС показала завершение реакции. Перемешивание останавливали и добавляли воду (10 мл), затем указанную смесь экстрагировали ДХМ (5 млх3) и органические слои объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (25 млх1), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении и разделяли с помощью ТСХ препаративного типа (SiO₂, РЕ: ЕА=1:1) с получением бледно-желтого твердого вещества 5-[[7-(тозил)пиррол[2,3d]пиримидин-4-]амино]гексагидропирроло[3,4-с]пиррол-2(1Н)-трет-бутилформиата (161,80 мг, 59,10%). Значение C₂₄H₃₀N₆O₄S [M+H]+ 499,20 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 499.

Стадия 4.

5-[[7-(Тозил)пиррол[2,3^]пиримидин-4-]амино]гексагидропирроло[3,4-с]пиррол-2(1Н)-трет-бутилформиат (161,80 мг, 324,51 мкмоль) растворяли в H₂O: MeOH (10 мл, 1:1), добавляли NaOH (38,94 мг, 973,53 мкмоль) и перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 12 ч при 15°C. ЖХ-МС показала завершение реакции. Перемешивание останавливали и указанную смесь концентрировали при пониженном давлении, затем метанол удаляли, и рН доводили до 8-9 соляной кислотой (1 М). Затем указанную смесь разделяли с помощью препаративной ВЭЖХ (НСООН) с получением WX48: 5-[[7Hпиррол[2,3^]пиримидин-4-]амино]гексагидропирроло[3,4-с]пиррол-2(1Н)-трет-бутилформиата (2,20 мг, 1,97%). Значение C_i7H₂₄N₆O₂ [M+H]+ 345,20 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 345, 1H ЯМР (400 МГц, метанолЛ₄) δ=8,16 (br. s., 1H), 7,26 (br. s., 1H), 6,80 (br. s., 1H), 3,62 (br. s., 2H), 3,46 (d, J=11,3 Гц, 2H), 3,02 (br. s., 4H), 2,17 (s,2H), 1,52 (s, 9H).

Вариант реализации 46.

WX43 WX50

- 44 036122 (3S или формамид

3R)-1- [ Метил(711-ι 1иррол[ 2,3-d| пиримидин-4-)амино] -N-(2,2-дифторэтил)пиперидил-3 -

Стадия 1.

Промежуточное соединение 3 (600,00 мг, 2,18 ммоль) растворяли в ДМФА (30,00 мл), добавляли HOBt (441,71 3,27 ммоль) и EDCI (626,68 мг, 3,27 ммоль) и перемешивали в течение 30 мин при 25°C. Добавляли 2,2-дифторэтиламин (176,66 мг, 2,18 мкмоль) и триэтиламин (661,59 мг, 6,54 ммоль) и указанную смесь перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 12 ч при 25°C. ЖХ-МС показала завершение реакции. Перемешивание останавливали, затем указанную смесь концентрировали при пониженном давлении с удалением ДМФА и разделяли с помощью ВЭЖХ (щелочной метод) с получением 1-[метил(7Н-пиррол[2,3^]пиримидин-4-)амино]-№(2,2-дифторэтил)пиперидил-3-формамида (210,00 мг, 28,13%). Значение C₁₅H₂₀F₂N₆O [M+H]⁺ 339,17 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 339.

Стадия 2.

1-[Метил(7Н-пиррол[2,3^]пиримидин-4-)амино]-№(2,2-дифторэтил)пиперидил-3-формамид (соединение 2) (210,00 мг) разделяли с использованием сверхкритической хроматографии.

Условия разделения SFC:

колонка: AD (250x30 мм,5 мкм) хиральная колонка, подвижная фаза: А: сверхкритический СО₂, В:30% MeOH (0,1% NH3H2O), А:В=70:30, скорость потока: 80 мл/мин, температура колонки: 38°C, длина волны: 220 нм, давление струи: 100 Бар, температура сопла: 60°C, температура испарения: 20°C, температура кондиционирования: 25°C.

WX49: (3R или 3S)-1-[метил(7Н-пиррол[2,3-d]пиримидин-4-)амино]-N-(2,2-дифторэтил)пиперидил3-формамид (156,80 мг, 69,64%), время удерживания: 5,77 мин. Значение C₁₅H₂₀F₂N₆O [M+H]⁺ 339,17 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 339. 1H ЯМР (400 МГц, метанол^₄) δ=8,17-8,06 (m, 1H), 7,14-7,01 (m, 2H), 6,06-5,67 (m, 1H), 3,60-3,47 (m, 2H), 3,22 (s, 3H), 3,10-2,98 (m, 2H), 2,97-2,85 (m, 3H), 2,02-1,84 (m, 3H), 1,57-1,40 (m, 1H).

WX50: (3S или 3R)-1-[метил(7Н-пиррол[2,3-d]пиримидин-4-)амино]-N-(2,2-дифторэтил)пиперидил3-формамид (71,30 мг, 31,75%), время удерживания: 6,55 мин. Значение C₁₅H₂₀F₂N₆O [M+H]⁺ 339,17 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 339. 1H ЯМР (400 МГц, метанол^₄) δ=8,13 (s, 1H), 7,15-6,97 (m, 2H), 6,12-5,64 (m, 1H), 3,61-3,47 (m, 2H), 3,22 (s, 3H), 3,07-2,97 (m, 2H), 2,97-2,81 (m, 3H), 2,02-1,84 (m, 3H), 1,57-1,39 (m, 1H).

Вариант реализации 47.

(3S или 3R)-1-[Метил(7Н-пиррол[2,3-d]пиримидин-4-)амино]-N-(2,2,3,3,3-пентафторпропил)пиперидил-3 -формамид

Стадия 1.

Промежуточное соединение 3 (1,20 г, 4,36 ммоль) растворяли в ДМФА (20,00 мл), добавляли HOBt (1,77 г, 13,08 ммоль) и EDCI (2,51 г, 13,08 ммоль) и перемешивали в течение 30 мин при 25°C. Добавляли 2,2,3,3,3-пентафторпропиламид (1,62 г, 10,90 ммоль) и Et₃N (2,65 г, 26,15 ммоль) и указанную смесь перемешивали с обеспечением взаимодействия в течение 12 ч при 25°C. ЖХ-МС показала, что исходные вещества полностью прореагировали и что образовался продукт. Перемешивание останавливали, затем указанную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали до 5 мл и разделяли с помощью препаративной ВЭЖХ (щелочной) с получением 1-[метил(7Н-пиррол[2,3^]пиримидин-4-)амино]-№(2,2,3,3,3пентафторпропил)пиперидил-3-формамида (800,00 мг, 43,77%). Значение C₁₆H₁₉F₅N₆O [M+H]⁺ 407,15

- 45 036122 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 407.

Стадия 2. (1-[Метил(7Н-пиррол[2,3^]пиримидин-4-)амино]-Щ2,2,3,3,3-пентафторпропил)пиперидил-3-формамид (800,00 мг) разделяли с помощью сверхкритической хроматографии.

Условия разделения SFC:

колонка: AD (250x30 мм, 10 мкм) хиральная колонка, подвижная фаза: А: сверхкритический СО₂, В:40% MeOH (0,1% NH₃H₂O), А:В=60:40, скорость потока: 70 мл/мин, температура колонки: 38°C, длина волны: 220 нм, давление струи: 100 Бар, температура сопла: 60°C, температура испарения: 20°C, температура кондиционирования: 25°C.

WX51: (3R или 3S)-1-[метил(7Н-пиррол[2,3-d]пиримидин-4-)амино]-N-(2,2,3,3,3-пентафторпропил)пиперидил-3-формамид (401,50 мг, 46,90%), время удерживания: 5,77 мин. Значение C₁₆H₁₉F₅N₆O [M+H]+ 407,15 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 407. ¹Н ЯМР (400 МГц, метанолd4) δ=8,13 (s, 1H), 7,13-7,02 (m, 2H), 4,11-3,80 (m, 2H), 3,23 (s, 3H), 3,08-2,84 (m, 5H), 2,06-1,83 (m, 3H), 1,49 (d, J=11,5 Гц, 1H).

WX52: (3S или 3R)-1-[метил(7Н-пиррол[2,3-d]пиримидин-4-)амино]-N-(2,2,3,3,3-пентафторпропил)пиперидил-3-формамид (395,60 мг, 46,06%), время удерживания: 6,89 мин. Значение C₁₆H₁₉F₅N₆O [M+H]⁺ 407,15 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 407. ¹H ЯМР (400 МГц, метанолd₄) δ=8,13 (s, 1H), 7,08 (s, 2H), 4,14-3,81 (m, 2H), 3,23 (s, 3H), 3,11-2,76 (m, 5H), 2,07-1,84 (m, 3H), 1,63-141 (m, 1H).

Вариант реализации 48.

- [Метил(7Н-пирроло [2,3^]пиримидин-4-ил)амино] -N- [3 -(трифторметил)фенил] пиперидил-3 формамид

Стадия 1.

EDCI (174,08 мг, 908,08 мкмоль) добавляли в раствор пиридина (5,00 мл) и промежуточного соединения 3 (100,00 мг, 363,23 мкмоль), и добавляли затем 3-(трифторметил)фениламин (64,38 мг, 399,55 мкмоль) при 0°C. Указанную смесь нагревали до 25°C и перемешивали в течение 10 ч при 25°C. ЖХ-МС показала завершение реакции. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остатки разбавляли водой (10 мл) и экстрагировали дихлорметаном: метанолом (15 млх2, 5/1). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении с получением остатков. Остатки очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа (щелочные условия) с получением WX53: 1-[метил(7Н-пирроло[2,3d]пиримидин-4-ил)амино]-N-[3-(трифторметил) фенил]пиперидил-3-формамида (50,00 мг, выход составил 32,90%). 1H ЯМР (400 МГц, MeOD-d₄) δ=8,11 (s, 1H), 8,02 (br. s., 1H), 7,73 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 7,46 (t, J=7,9 Гц, 1Н), 7,35 (d, J=7,5 Гц, 1Н), 7,09 (d, J=5,3 Гц, 2H), 3,22 (s, 3H), 2,88-3,16 (m, 5H), 1,88-2,09 (m, 3H), 1,40-1,66 (m, 1H). Значение C₂₀H₂₁F₃N₆O [M+H]⁺ 419 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 419.

Вариант реализации 49.

- 46 036122 (3-Г идроксиазетидин-1 -ил)-[1-[метил(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил)амино)-3-пиперидинил)кетон

3 4 WX54

Стадия 1.

2-(Хлорметил)этиленоксид (5,05 г, 54,58 ммоль) по каплям добавляли к метанольному раствору (55 мл) бензгидриламина (10,00 г, 54,58 ммоль) в защитной атмосфере азота при 0°C, затем реакционный раствор нагревали до 28°C и перемешивали в течение 10 ч. ЖХМС показала завершение реакции. Указанную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением 1-(бензиламинопиридин)-3хлорпропил-2-ола (15,00 г, неочищенный продукт), который представлял собой желтую жидкость и который непосредственно использовали на следующей стадии. Затем, DIEA (7,03 г, 54,39 ммоль) добавляли к этанольному раствору (100 мл) 1-(бензиламинопиридин)-3-хлорпропил-2-ола (15,00 г, 54,39 ммоль); реакционный раствор нагревали до 90°C и перемешивали в течение 10 ч. ЖХМС показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 25°C и концентрировали при пониженном давлении. Концентрат перекристаллизовывали с помощью ацетона и петролейного эфира с получением 1бензгидрилазетан-3-ола (7,10 г, выход составил 51,82%) который представлял собой белое твердое вещество. Значение C₁₆H₁₇NO [M+H]+ 240 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 240.

Стадия 2.

Pd-C (10%, 500 мг) добавляли в метанольный раствор (15 мл) 1-бензгидрилазетан-3-ола (1,00 г, 4,18 ммоль) в защитной атмосфере азота. Реакционный раствор многократно замещали водородом и затем перемешивали в течение 10 ч в защитной атмосфере водорода (15 psi) при 30°C. ТСХ показала завершение реакции. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали с получением азетидин-3-ола, который представлял собой бесцветное маслянистое вещество (600,00 мг, неочищенный продукт). Значение C₃H₇NO[M+H]⁺74 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 74.

Стадия 3.

HOBt (122,70 мг, 908,08 мкмоль), EDCI (174,08 мг, 908,08 мкмоль) и TEA (220,53 мг, 2,18 мкмоль) добавляли к промежуточному соединению 3 (100,00 мг, 363,23 мкмоль) и растворе ДМФА (10 мл) и азетидин-3-ола (26,5 мг, 365 мкмоль). Указанную смесь перемешивали в течение 10 ч при нормальной температуре. ЖХМС показала завершение реакции. Указанную смесь выливали в воду (20 мл). Водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (15 млх3). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали и остатки очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа (щелочные условия) с получением WX54: (3-гидроксиазетидин-1 -ил)-[1-[метил(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил) амино)-3пиперидинил)кетона (5,00 мг, выход составил 3,75%). ¹H ЯМР (400 МГц, MeOD-d₄) δ=8,14 (s, 1H), 7,007,22 (m, 2H), 4,35-4,61 (m, 2H), 3,91-4,21 (m, 2H), 3,51-3,78 (m, 2H), 3,21-3,27 (m, 2H), 2,84-3,01 (m, 5H), 1,84-2,03 (m, 3H), 1,36-1,51 (m, 1H). Значение C₁₆H₂₂N₆O₂ [M+H]+ 331 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 331.

Вариант реализации 50.

WX5S

-[5-(7Н-Пирроло [2,3-d] пиримидин-4-иламино)гексагидро -1 Н-пирроло [3,4-с]пиридин-2-ил] 3 оксопропаннитрил

Стадия 1.

Водный раствор (10,00 мл) нитрита натрия (420,00 мг, 6,09 мкмоль) по каплям добавляли к смешанному раствору уксусной кислоты (10,00 мл) и воды (10,00 мл) и эфира трет-бутилгексагидро-1Нпирроло[3,4-с]пиридин-2(3Н)-карбоновой кислоты (800,00 мг, 3,04 мкмоль) при 0°C. После добавления раствора нитрита натрия указанную смесь нагревали до 25°C и перемешивали в течение 2 ч. ТСХ пока- 47 036122 зала, что исходные вещества были израсходованы. Реакционный раствор разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (30 млх2). Объединенные органические слои доводили насыщенным бикарбонатом натрия до рН 8-9, промывали солевым раствором (10 млх2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением эфира трет-бутил-5нитрозогексагидро-1Н-пирроло[3,4-с]пиридин-2(3H)-карбоновой кислоты (650,00 мг, неочищенный продукт), который представлял собой желтое маслянистое вещество. Указанный продукт непосредственно использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Значение C₁₂H₂iN₃O₃ [М+Н]+ 256 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 256.

Стадия 2.

Уксусную кислоту (5,00 мл) по каплям добавляли к метанольному раствору (10,00 мл) эфира третбутил^-нитрозогексагидро-Ш-пирроло^Д-Цпиридин^ЗЩ-карбоновой кислоты (650,00 мг, 2,55 мкмоль) и цинковой пыли (833,72 мг, 12,75 мкмоль) при температуре от -5 до -10°. После добавления уксусной кислоты указанную смесь медленно нагревали до 25°C и перемешивали в течение 2 ч. ТСХ показала, что исходные вещества были полностью израсходованы. Твердое вещество отфильтровывали, затем указанную смесь фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением эфира mрет-бутил-5-аминогексагидро-1Н-пирроло[3,4-с]nиридин-2(3H)-карбоновой кислоты (620,00 мг, неочищенный продукт), который представлял собой белое твердое вещество. Указанный продукт непосредственно использовали на следующей стадии без очистки. Значение C₁₂H₂₃N₃O₂ [М+Н]+ 242 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 242.

Стадия З.

Раствор дихлорметана (15,00 мл) и эфира трет-бутил-5-аминогексагидро-1Н-пирроло[3,4Цпиридин^ЗЩ-карбоновой кислоты (620,00 мг, 2,06 мкмоль), 4-хлор-7-(тозил)пирроло[2,3d]пиримидина (633,12 мг, 2,06 мкмоль) и триэтиламина (1,25 г, 12,36 ммоль) нагревали до 50°С и перемешивали в течение 10 ч при 50°C. ЖХ-МС показала завершение реакции. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением остатков. Остатки очищали с помощью колоночной хроматографии (петролейный эфир:этилацетат=5/1-2/1) с получением эфира трет-бутил-5-(7(тозил)пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил]аминогексагидро-1Н-пирроло[3,4-с]пиридин-2(3H)-карбоновой кислоты (270,00 мг, выход составил 20,97%), который представлял собой белое твердое вещество. Значение C₂₅H₃₂N₆O₄S [M+H]+ 513 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 513.

Стадия 4.

Гидрохлорид диоксана (4 М, 5,00 мл) добавляли к раствору ДХМ (3,00 мл) и эфира трет-бутил-5-(7(тозил)пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил] аминогексагидро-Ш-пирроло^Д-Цпиридин^ЗЩ-карбоновой кислоты (270,00 мг, 526,71 мкмоль), и указанную смесь перемешивали в течение 2 ч при нормальной температуре. ЖХ-МС показала, что исходное сырье было полностью израсходовано. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением №гексагидро-1Н-пирроло[3,4-с]пиридин5(6Н)-ил-7-(тозил)7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-амина (340,00 мг, неочищенный продукт), который представлял собой светло-коричневое твердое вещество и который непосредственно использовали на следующей стадии без очистки. Значение C₂₀H₂₄N₆O₂S [M+H]+ 413 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 413.

Стадия 5.

Карбонат калия (284,79 мг, 2,06 мкмоль) добавляли в раствор метанола (5,00 мл) и воды (1,00 мл) и Nгексагидро-1Н-пирроло[3,4-с]пиридин-5(6Н)-ил-7-(тозил)7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-амина (170,00 мг, 412,11 мкмоль). Указанную смесь нагревали до 70°C и перемешивали в течение 2 ч. ТСХ показала, что исходные вещества были израсходованы. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением №гексагидро-1Н-пирроло[3,4-с]пиридин-5(6Н)-ил-7-(тозил)7Н-пирроло[2,3d]пиримидин-4-амина (50,00 мг, неочищенный продукт), который представлял собой светло-коричневое твердое вещество и который непосредственно использовали на следующей стадии без очистки. Значение Ci₃Hi₈N₆ [M+H]+ 259 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 259.

Стадия 6.

HOBt (65,38 мг, 483,90 мкмоль) и EDCI (92,76 мг, 483,90 мкмоль) добавляли в раствор ДМФА (5,00 мл) и №гексагидро-1Н-пирроло[3,4-с]пиридин-5(6Н)-ил-7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-амина при 0°C. После чего указанную смесь перемешивали в течение 10 мин при 0°C, и затем добавляли 2цианоуксусную кислоту (18,11 мг, 212,92 мкмоль) и триэтиламин (117,52 мг, 1,16 ммоль). Указанную смесь перемешивали в течение 10 ч при 25°C. ЖХ-МС показала завершение реакции. Реакционную смесь выливали в ледяную воду (5 мл), и затем экстрагировали с использованием смеси дихлорметан: метанол (20 млхЗ). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении с получением остатков. Остатки очищали с помощью ВЭЖХ препаративного типа (щелочной метод) с получением WX55: 3-[5-(7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4-иламино)гексагидро -1Н-пирроло[3,4-с]пиридин-2-ил]3оксопропаннитрила (5,00 мг, выход составил 7,52%). ¹H ЯМР (400 МГц, MeOD-d₄) δ=8,07 (d, J=6,0 Гц, 1H), 7,10 (t, J=3,0 Гц, 1H), 6,82 (br. s., 1H), 3,40-4,13 (m, 5H), 1,67-3,24 (m, 9H). Значение C₁₆H₁₉N₇O [M+H]+ 326 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 326.

- 48 036122

Вариант реализации 51

N-(3,3-Дифторциклобутил)-1 - [метил(7Н-пирроло [2,3-0]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил)-3 -формамид

Стадия 1.

Эфир этил-1-[метил-[7-(тозил)пиррол[2,3^]пиримидин-4-ил]амино]пиперидил-3-карбоновой кислоты (130,00 мг, 284,13 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (5 мл) и метаноле (5 мл) и добавляли раствор (2,5 мл) гидроксида натрия (22,73 мг, 568,26 мкмоль). Затем указанную смесь нагревали до 100°C и перемешивали в течение 2 ч. ЖХ-МС показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до 25°C и затем концентрировали при пониженном давлении при 50°C. Остатки нейтрализовали с помощью разбавленной HCl (водный раствор) и концентрировали при пониженном давлении с получением 1 -[метил(7H-пирроло[2,3-б]пиримидин-4-ил)иламино]пиперидил-3 -карбоновой кислоты (неочищенный продукт), которая представляла собой желтое твердое вещество и которую непосредственно использовали на следующей стадии. Значение C₁₃H₁₇N₅O₂ [M+H]+ 276, рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 276.

Стадия 2.

1-[Метил(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил-3-карбоновую кислоту (78,00 мг, 283,32 мкмоль), HOBt (76,56 мг, 566,64 мкмоль) и EDCI (108,62 мг, 566,64 мкмоль) растворяли в ДМФА (3,5 мл), перемешивали в течение 35 мин при 25°C и затем добавляли 3,3-дифторциклобутанамин (81,35 мг, 566,63 мкмоль) и триэтиламин (114,68 мг, 1,13 ммоль). Указанную смесь перемешивали в течение 12 ч при 25°C. ЖХ-МС показала завершение реакции. Указанную смесь разбавляли водой (5 мл) и экстрагировали дихлорметаном:метанолом (5:1, 50 млх3). Объединенные органические фазы промывали насыщенным водным солевым раствором (20 мл), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали досуха при пониженном давлении. Остатки очищали с использованием препаративной ВЭЖХ (щелочной метод) с получением WX56: №(3,3-диФторцикло6утил)-1-[(7Н-пирроло[2,3d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидил)-3-формамида (50,00 мг, выход составил 48,43%). Значение C₁₇H₂₂F₂N₆O [M+H]+ 365 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 365. 1H ЯМР (400 МГц, метанолЧ) δ=8,12 (s, 1H), 7,07 (s, 2Н), 4,16-4,06 (m, 1H), 3,22 (s, 3H), 3,05-2,82 (m, 6Н), 2,61-2,44 (m, 2Н), 1,92 (br. s., 2Н), 1,56-1,41 (m, 1Н). Значение C₁₇H₂₂F₂N₆O [M+H]+ 365 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 365.

Вариант реализации 52

N-Метил-N-[3-[5-трифторметил-1H-имидазол-2-ил]-1-пиперидинил]-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин4-амин

Стадия 1.

1-[Метил-[7-(тозил)пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил]амин]пиперидил-3-карбоксилат (800,00 мг, 1,75 ммоль) растворяли в сухом дихлорметане (20,00 мл) и раствор толуола и DIBAL-H (1 М, 1,93 мл) по каплям добавляли при -78°C и указанную смесь перемешивали в течение 30 мин при -78°C. Когда ТСХ показала, что исходные вещества были израсходованы, насыщенный раствор хлорида аммония (2,0 мл) добавляли для гашения, затем желеобразное вещество фильтровали и удаляли с помощью диатомита, и указанную смесь промывали дихлорметаном. После разделения органических фаз водную фазу экстрагировали дихлорметаном (50 мл). Объединенные органические фазы промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили сульфатом натрия и концентрировали с получением твердого вещества, остат- 49 036122 ки очищали с помощью хроматографии на силикагеле (100-200 меш силикагель, петролейный эфир:этилацетат=4:1 2:1), с получением 1-[метил-[7-(тозил)пиррол[2,3^]пиримидин-4-ил]амино]пиперидил-3-формальдегида (530,00 мг, выход составил 69,58%), который представлял собой бледно-желтое твердое вещество. Значение C₂₀H₂₃N₅O₃S [М+Н]+ 414 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 414.

Стадия 2.

3,3-Дибром-1,1,1-трифторпропан-2-он (215,36 мг, 798,08 мкмоль) добавляли к метанольному раствору 1-[метил-[7-(тозил)пиррол[2,3-б]пиримидин-4-ил]амино]пиперидил-3-формальдегида (300,00 мг, 725,53 мкмоль); указанную смесь перемешивали в течение 24 ч при 25°C, добавляли воду (20 мл) для разбавления и экстрагировали этилацетатом (50 млх3). Объединенные органические фазы промывали насыщенным водным солевым раствором (20 млх2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали досуха при пониженном давлении. Остатки очищали с помощью ТСХ (петролейный эфир:этилацетат=1:1) с получением №метил-7-р(тозил)-Щ3-[5-трифторметил-Ш-имидазол-2-ил]-1пиперидинил]-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-амина (230,00 мг, выход составил 58,58%). Значение C₂₃H₂₄F₃N₇O₂S [M+H]⁺ 520 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 520.

Стадия 3.

N-Метил-7 -р(тозил)-М - [3 -[5-трифторметил-111-имидазол-2-ил] -1 -пиперидинил] -7Н-пирроло [2,3d]пиримидин-4-амин (115,00 мг, 221,35 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (5 мл) и метаноле (5 мл), и добавляли водный раствор (2,5 мл) гидроксида натрия (88,54 мг, 2,21 ммоль). Затем указанную смесь нагревали до 40°C и перемешивали в течение 2 ч. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь охлаждали до температуры ниже 30°C и концентрировали при пониженном давлении с удалением тетрагидрофурана. Остатки разбавляли водой (10 мл) и экстрагировали дихлорметаном/метанолом (10:1, 50 млх2). Объединенные органические фазы промывали насыщенным водным солевым раствором (20 млх2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали досуха при пониженном давлении. Остатки очищали с помощью щелочной препаративной ВЭЖХ с получением WX57: N-метилN-[3-[5-трифторметил-1H-имидазол-2-ил]-1-пиперидинил]-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-амина (40,00 мг, выход составил 49,46%).

Значение C₁₆H₁₈F₃N₇ [M+H]⁺ 366 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 366. 1H ЯМР (400 МГц, метанол^) δ=8,13 (s, 1H), 7,48 (br. s., 1H), 7,12 (d, J=15,6 Гц, 2Н), 3,40 (d, J=11,5 Гц, 2Н), 3,26 (br. s., 3H), 3,19 (br. s., 1Н), 3,14-3,07 (m, 1Н), 3,02 (br. s., 2Н), 2,13 (d, J=12,5 Гц, 1Н), 2,07-1,94 (m, 2Н), 1,68-1,56 (m, 1Н). Значение C₁₆H₁₈F₃N₇ [M+H]⁺ 366 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 366.

Вариант реализации 53.

WX5S

1-[Циклопропил(7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]-N-(2,2,2-трифторэтил)пиперидил-3формамид

Стадия 1.

Этил-1-[[7-(тозил)пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил]амино]пиперидил-3-карбоксилат (501,18 мг, 1,13 ммоль) и бромциклопропан (1,00 г, 8,26 ммоль) растворяли в ДМФА (10,00 мл) и добавляли карбонат калия (780,89 мг, 5,65 ммоль) и йодид калия (18,76 мг, 113,00 мкмоль). Указанную смесь перемешивали в течение 48 ч при 50°C.

ЖХ-МС показала, что 9% исходных веществ остались, и было определено 6% целевых продуктов. Добавляли еще одну порцию бромциклопропана (5,00 г, 41,33 ммоль) и указанную смесь нагревали до 100°C и перемешивали в течение 2 ч. ЖХ-МС показала, что 12% исходных веществ остались и было определено 40% целевых продуктов. В реакционный раствор добавляли воду (10 мл) для гашения при 25°C и реакционный раствор экстрагировали с использованием этилацетата (100 млх2). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (20 млх2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остатки очищали с помощью препаративной ТСХ (диоксид кремния, петролейный эфир:этилацетат=3:1) с получением этил-1[циклогексил-[7-(тозил)пирроло[2,3^]пиримидин-4-ил]амино]пиперидил-3-карбоксилата (50,00 мг, выход составил 6,86%), который представлял собой бледно-желтое масло. Значение C₂₄H₂₉N₅O₄S [M+H]⁺484 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 484.

- 50 036122

Стадия 2.

Этил-1-[циклопропил-[7-(тозил)пиррол[2,3^]пиримидин-4-ил]амино]пиперидил-3-карбоксилат (50,00 мг, 103,40 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (5 мл) и метаноле (5 мл), и добавляли раствор (2,5 мл) гидроксида натрия (8,27 мг, 206,80 мкмоль). Затем указанную смесь нагревали до 100°C и перемешивали в течение 1 ч. ЖХ-МС показала завершение реакции. Указанную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остатки нейтрализовали с помощью разбавляли HCl (2 М, 20 капель) с получением 1[циклопропил-pH-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил]амино]пиперидил-3-карбоновой кислоты (80,00 мг, неочищенный продукт), которую непосредственно использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Значение C₁₅H₁₉N₅O₂ [M+H]+ 302 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 302.

Стадия 3.

- [Циклопропил- pH-пирроло [2,3-d] пиримидин-4-ил] амино]пиперидил-3 -карбоновую кислоту (50,00 мг, 165,93 мкмоль), HOBt (44,84 мг, 331,86 мкмоль) и EDCI (63,62 мг, 331,86 мкмоль) растворяли в ДМФА (4 мл), перемешивали в течение 30 мин при 25°C и затем последовательно добавляли 2,2,2трифторэтиламин (24,65 мг, 248,89 мкмоль) и триэтиламин (50,37 мг, 497,79 мкмоль). Указанную смесь перемешивали в течение 16 ч при 25°C. ЖХ-МС показала завершение реакции. К указанной смеси добавляли воду (10 мл) для гашения и экстрагировали этилацетатом (50 млх2). Объединенные органические фазы промывали насыщенным водным солевым раствором (20 млх2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и сушили при пониженном давлении. Остатки очищали с помощью щелочной препаративной ВЭЖХ с получением WX58: 1-[циклопропил(7Н-пирроло[2,3d]пиримидин-4-ил)амино]-N-(2,2,2-трифторэтил)пиперидил-3-формамида (20,00 мг, выход составил 31,52%). Значение C₁₇H₂₁F₃N₆O [M+H]+ 383 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 383.

Вариант реализации 54.

о

WXM

3-(7H-Пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2,2-трифторэтил)-3-азаспиро[5,5]ундекан-9формамид

Стадия 1.

Раствор соляной кислоты/диоксана (4 М, 2,30 мл) добавляли к раствору дихлорметана (10 мл) и этилового эфира 3-трет-бутилоксикарбонил-3-азаспиро[5,5]ундекан-9-карбоновой кислоты (300,00 мг, 921,83 мкмоль). Указанную смесь перемешивали в течение 0,5 ч при 25°C. ТСХ показала завершение реакции. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении с получением этилового эфира 3-азаспиро[5,5]ундекан-9-карбоновой кислоты (300,00 мг, неочищенный продукт), который представлял собой бледно-желтое твердое вещество и который непосредственно использовали в следующей реакции без дополнительной очистки. Значение C₁₃H₂₃NO₂ [M+H]+ 226 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 226.

Стадия 2.

Этиловый эфир 3-азаспиро[5,5]ундекан-9-карбоновой кислоты (300,00 мг, 1,15 ммоль) растворяли в уксусной кислоте (10,00 мл) и воде (5,00 мл), и водный раствор (5,00 мл) нитрита натрия (158,14 мг, 2,29 ммоль) по каплям добавляли в указанный выше раствор при 0°C. Указанную смесь перемешивали в течение 2 ч при 25°C. ТСХ показала завершение реакции. К указанной смеси добавляли воду (5 мл) для гашения. Водную фазу экстрагировали с использованием этилацетата (50 млх2) и объединенные органические фазы промывали насыщенным водным солевым раствором (20 мл), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остатки растворяли в воде (10 мл) и подщелачивали твердым гидрокарбонатом натрия до рН 9, и затем экстрагировали с использованием этилацетата (50 млх2); объединенные органические фазы промывали насыщенным водным солевым раствором (20 мл), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 3-нитрозо-3-азаспиро[5,5]ундекан-9-этилформиата (200,00 мг, неочищенный продукт), который представлял собой бледно-желтое масло. Значение C₁₃H₂₂N₂O₃ [М+Н]+ 225 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 255.

- 51 036122

Стадия 3.

3-Нитрозо-3-азаспиро[5,5]ундекан-9-этилформиат (200,00 мг, 786,41 растворяли в метаноле (5,00 мл) и охлаждали до -10°C, цинк (257,12 мг, 3,93 ммоль) добавляли в раствор в защитной атмосфере азота и уксусную кислоту (472,24 мг, 7,86 ммоль) по каплям добавляли при -10-0°C. Указанную смесь перемешивали в течение 30 мин при 0°C и затем перемешивали в течение 1,5 ч при 25°C. ТСХ показала завершение реакции. Указанную смесь фильтровали и промывали метанолом (30 мл). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и при 70°C. Остатки растворяли в дихлорметане:метаноле (10:1 20 мл) и подщелачивали твердым гидрокарбонатом натрия до рН 8-9. Указанную смесь фильтровали с помощью диатомита и промывали дихлорметаном: метанолом (10:1 50 мл). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 3-амино-3-азаспиро[5,5]ундекан-9-этилформиата (200,00 мг, неочищенный продукт), который представлял собой желтое маслянистое вещество и который непосредственно использовали на следующей стадии. Значение C13H₂₄N₂O₂ [М+Н]+ 241 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 241.

Стадия 4.

3-Амино-3-азаспиро[5,5]ундекан-9-этилформиат (200,00 мг, 832,15 мкмоль) растворяли в диоксане (10,00 мл) и добавляли триэтиламин (421,03 мг, 4,16 ммоль) и 4-хлор-7-(тозил)пирроло[2,3-О]пиримидин (256,10 мг, 832,15 мкмоль); затем указанную выше смесь перемешивали в течение 16 ч в защитной атмосфере азота при 110°C. ЖХ-МС показала, что 60% 4-хлор-7-(тозил)пирроло[2,3-О]пиримидина осталось и более не превращалось. К указанной смеси добавляли воду (10,00 мл) для гашения при 25°C и экстрагировали с использованием этилацетата (50 млх2). Объединенные органические фазы промывали насыщенным водным солевым раствором (20 мл), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остатки очищали с помощью препаративной ТСХ (силикагель, петролейный эфир:этилацетат=1:1) с получением 3-[[7-(тозил)пирроло[2,3-О]пиримидин-4-ил]амино]-3азаспиро[5,5]ундекан-9-этилформиата (35,00 мг, выход составил 6,58%), который представлял собой бледно-желтое твердое вещество. Значение C₂₆H33N5O₄S[M+H]⁺ 512 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 512.

Стадия 5.

Водный раствор (1 мл) гидроксида натрия (5,47 мг, 136,82 мкмоль) добавляли к смешанному раствору тетрагидрофурана (2,00 мл) и метанола (2,00 мл) и 3-[[7-(тозил)пирроло[2,3-О]пиримидин-4ил]амино]-3-азаспиро[5,5]ундекан-9-этилформиата (35,00 мг, 68,41 мкмоль). Указанную смесь перемешивали в течение 1 ч при 100°C. ЖХ-МС показала завершение реакции. Указанную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остатки нейтрализовали с помощью разбавленной соляной кислотой (2 М, 20 капель) и концентрировали при пониженном давлении с получением 3-((7Н-пирроло[2,3d]пиримидин-4-ил]амино]-3-азаспиро[5,5]ундекан-9-муравьиной кислоты (30,00 мг, неочищенный продукт), которая представляла собой бледно-желтое твердое вещество и которую непосредственно использовали в следующей реакции без дополнительной очистки. Значение C17H23N5O2 [M+H]+ 330 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 330.

Стадия 6.

3-((7H-Пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил]амино]-3-азаспиро[5,5]ундекан-9-муравьиную кислоту (30,00 мг, 91,07 мкмоль), HOBt (36,92 мг, 273,22 мкмоль) и EDCI (52,38 мг, 273,22 мкмоль) растворяли в ДМФА (2,00 мл); затем указанную смесь перемешивали в течение 30 мин при 20°C, добавляли 2,2,2трифторэтиламин (18,04 мг, 182,15 мкмоль) и триэтиламин (36,86 мг, 364,30 мкмоль); и полученную смесь непрерывно перемешивали в течение 16 ч при 20°C. ЖХ-МС показала завершение реакции. Указанную смесь разбавляли водой (5 мл) и экстрагировали смешанным раствором дихлорметана и метанола (10:1, 30 млх2), и объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остатки очищали с помощью ВЭЖХ щелочного типа с получением WX59: 3-(7Н-пирроло[2,3d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2,2-трифторэтил)-3-азаспиро[5,5]ундекан-9-формамида (10,00 мг, выход составил 26,75%). Значение C19H₂5F₃N₆O [M+H]+ 411 рассчитывали с использованием MS ESI и оно составило 411, 1Н ЯМР (400 МГц, метанол-ОО δ=8,06 (s, 1H), 7,09 (О J=3,5 Гц, 1H), 6,90 (br. S., 1H), 3,90 (q, J=9,5 Гц, 2Н), 2,90 (br. S., 4H), 2,33-2,18 (m, 2H), 1,85-1,04 (m, 12H).

Исследование активности in vitro в отношении Jak1, Jak2 и Jak3 киназы.

Исследуемый материал.

Рекомбинантные гуманизированные протеазы JAK1, JAK2 и JAK3 были приобретены у Life technology. Пептид LANCE Ultra ULight™-JAK-1 (Tyr1023) и LANCE Eu-W1024 антифосфотирозин (РТ66) были приобретены у PerkinElmer. Envision (PerkinElmer) использовали для считывания планшета.

Метод исследования.

Получали три разведения исследуемого соединения и получали 11 конечных концентраций: от 10 мкМ до 0,17 нм. Каждая концентрация была в двух повторяющихся лунках. Содержание ДМСО в реакции обнаружения составило 1%.

- 52 036122

Ферментативная реакция JAK1.

нМ JAK1 протеинкиназы, 50 нМ пептида LANCE Ultra ULight™-JAK-1 (Tyr1023), 38 мкМ АТФ, 50 мМ HEPES (рН 7,5), 10 мМ MgCl₂, 1 мМ EGTA, 2 мМ DTT и 0,01% BRIJ-35. Планшет обнаружения представлял собой белый планшет Proxiplate 384-Plus (PerkinElmer), реакцию проводили в течение 90 мин при комнатной температуре и реакционная система составляла 10 мкл.

Ферментативная реакция JAK2.

0,02 нМ JAK2 протеинкиназа, 50 нМ LANCE Ultra ULight™-JAK-1 (Tyr1023) пептид, 12 мкМ АТФ, 50 мМ HEPES (рН 7,5), 10 мМ MgCl₂, 1 мМ EGTA, 2 мМ DTT и 0,01% BRIJ-35. Планшет обнаружения представлял собой белый планшет Proxiplate 384-Plus (PerkinElmer), реакцию проводили в течение 60 мин при комнатной температуре и реакционная система составляла 10 мкл.

Ферментативная реакция JAK3.

0,05 нМ протеинкиназа, 50 нМ LANCE Ultra ULight™-JAK-1 (Tyr1023) пептид, 4 мкМ АТФ, 50 мМ HEPES (рН 7,5), 10 мМ MgCl2, 1 мМ EGTA, 2 мМ DTT и 0,01% BRIJ-35. Планшет обнаружения представлял собой белый планшет Proxiplate 384-Plus (PerkinElmer), реакцию проводили в течение 90 мин при комнатной температуре и реакционная система составляла 10 мкл.

Реакция обнаружения.

В реакционный планшет добавляли 10 мкл детектирующего реагента, причем конечная концентрация LANCE Eu-W1024 Антифосфотирозин (РТ66) составляла 2 нМ, конечная концентрация EDTA составляла 10 мМ, инкубацию проводили в течение 60 мин при комнатной температуре и планшет был считан на Envision.

Анализ данных.

Показания преобразовали в коэффициент подавления, как следует из уравнения: (%)=(минотношение)/(макс-мин)х100%. Данные IC50 были обнаружены с помощью подбора 4 параметрической кривой (модель 205 в XLFIT5, iDBS), см. табл. 1.

Вариант реализации	Соединение ID	JAKI	JAK2	JAK3
1	WX01	А	В	В
2	WX02	В	С	В
3	WX03	А	В	в
4	WX04	А	в	в
5	WX05	А	в	А
5	WX06	С	D	D
6	WX07	А	В	А
7	WX08	А	А	А
7	WX09	С	D	D
8	WX10	В	С	В
9	WX11	С	С	С
10	WX12	С	D	С
11	WX13	С	D	С
12	WX14	В	С	С
13	WX15	В	С	С
14	WX16	В	С	С
15	WX17	С	D	С
16	WX18	С	D	С

- 53 036122

17	WX19	С	D	С
18	WX20	в	С	В
19	WX21	в	D	С
20	WX22	с	D	С
21	WX23	в	С	В
22	WX24	в	С	С
23	WX25	в	С	С
24	WX26	с	D	С
25	WX27	с	D	С
26	WX28	D	D	D
27	WX29	D	D	С
28	WX30	А	В	В
29	WX31	А	В	В
30	WX32	А	А	В
30	WX33	В	С	В
31	WX34	С	С	С
32	WX35	D	D	D
33	WX36	С	D	D
34	WX37	D	D	D
35	WX38	D	D	D
36	WX39	В	С	С
37	WX40	В	D	D

- 54 036122

38	WX41	В	С	С
39	WX42	В	С	В
40	WX43	А	В	В
41	WX44	В	С	С
42	WX45	В	С	С
43	WX46	А	В	В
44	WX47	А	В	А
45	WX48	D	D	D
46	WX49	А	А	А
46	WX50	С	D	С
47	WX51	D	D	D
47	WX52	А	В	В
48	WX53	В	С	С
49	WX54	С	С	С
50	WX55	С	D	D
51	WX56	А	D	В
52	WX57	В	В	В
53	WX58	В	С	С
54	WX59	С	D	D

Л<10нМ; 10<B<10 нМ; 100<C<1000 нМ; D>1000 нМ.

Исследование фармакокинетики (ФК).

Исследуемое соединение растворяли и получали прозрачный раствор, который вводили самцам мышей DBA/1, соответственно, путем инъекции в хвостовую вену и через желудочный зонд (голодание в течение ночи, возраст 7-8 недель). После введения исследуемого соединения кровь, соответственно, собирали из нижнечелюстной вены от группы внутривенной инъекционной через 0,083, 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 8 и 24 ч и от группы желудочного зонда через 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 8 и 24 ч, и кровь центрифугировали для получения плазмы. Метод ЖХ-МС/МС был модифицирован для определения концентрации лекарственного средства в плазме, и программное обеспечение для исследования фармакокинетики WinNonlin™ Version 6.3 использовали для расчета соответствующих параметров фармакокинетики с использованием некомпартментной модели на основе линейного логарифмического трапециидального метода.

Таблица 2-1

- 55 036122

ППКо-пДнМ.ч)	2480
Биодо ступность (%)^а	32,9

Таблица 2-2

Результат исследования ФК WX07 у крыс

Параметры ФК	Среднее
Т1/₂(ч)	1,18
Vd_ss(ji/Kr)	1,76
Cl (мл/мин/кг)	31,8
Стах(нМ)	3253
Ттах(ч)	0,333
ППКо-кы(нМ.ч)	5678
ППКо-пДнМ.ч)	5749
Биодоступность (%)^а	68,6

Таблица 3-1

Результат исследования ФК WX05 у мышей

Параметры ФК	Среднее ВВ
Т1/₂(ч)	0,515
VdssCn/Kr)	0,959
Cl (мл/мин/кг)	57,2
Стах(нМ)	1227
Ттах(ч)	0,250
ППКо-1а₅<нМ.ч)	664
ППКо-тфнМ.ч)	667
Биодоступность (%)^а	27,0

Таблица 3-2

Результат исследования ФК WX05 у крыс

Параметры ФК	Среднее
Т1/₂(ч)	1,53
Vdss(n/Kr)	1,49
Cl (мл/мин/кг)	13,1
Стах(нМ)	3687
Ттах(ч)	1,00
ППКо-кы(нМ.ч)	11243
ППКо-тфнМ.ч)	11513
Биодоступность (%)^а	64,4

- 56 036122

Таблица 4-1

Результат исследования ФК WX08 у мышей

Параметры ФК	Среднее ВВ
Т1/₂(ч)	0,623
Уск(л/кг)	0,619
С1 (мл/мин/кг)	26,7
Стах(нМ)	2443
Ттах(ч)	0,25
ППКо-1а51(нМ.ч)	3002
ППКо-тфнМ.ч)	3030
Биодо ступно сть(%)^а	50,7

Таблица 4-2

Результат исследования ФК WX08 у крыс

Параметры ФК	Среднее
Т 1/₂(ч)	0,949
Уск(л/кг)	1,51
С1 (мл/мин/кг)	27,1
Сшах(нМ)	2460
Ттах(ч)	0,5
ППКо-1а51(нМ.ч)	6356
ППКо-тфнМ.ч)	6498
Биодо ступно сть(%)^а	61

Соединения WX07, WX05 и WX08 согласно настоящему изобретению обладают превосходной биологической пероральной доступностью и более высокое доступное количество как у мышей, так и у крыс, что преимущественно для эффективности in vivo.

Исследование фармакокинетики в модели артрита, индуцированного адъювантом, у крыс.

Терапевтический эффект соединения согласно настоящему изобретению для лечения артрита подтверждается моделью артрита, индуцированного адъювантом, у крыс.

После того как самок крыс Льюиса, от 160 до 180 г, подвернули действию наркоза изофлюраном, осуществляли подкожную инъекцию 0,1 мл жидкой суспензии микобактерий туберкулеза в левую заднюю ногу. Крыс классифицировали через 13 дней после введения, и соответствующее исследуемое соединение вводили, например, в дозировке 1, 3 и 10 мг/кг исследуемого соединения WX07 и, соответственно, вводили крысам контрольное соединение тофацитиниб. Тофацитиниб и соединение согласно настоящему изобретению WX07 растворяли в смешанном растворителе ДМСО/PEG400/Н₂О, который перорально давали самкам крыс Льюиса (в каждой дозированной группе было 10 исследуемых животных). Кроме того, крысам, соответственно, давали 1, 3 и 10 мг/кг исследуемых соединений WX08 и контрольное соединение филготиниб. Филготиниб и соединение WX08 согласно настоящему изобретению растворяли в смешанном растворителе ДМСО/PEG400/Н₂О, который перорально давали самкам крыс Льюиса (в каждой дозированной группе было 10 исследуемых животных), а вес крыс составлял от 160 до 170 г. Крыс подвергали лечению в течение двух последовательных недель, наблюдали состояние крыс, регистрировали состояние набухания объема стопы и проводили сортировку. Исследование показало, что соединение WX07 согласно настоящему изобретению демонстрирует хорошее соотношение дозаэффект и ингибирующую активность в отношении артрита, эквивалентную тофацитинибу, и WX08 демонстрирует хорошее соотношение доза-эффект и показало более эффективную ингибирующую активность в отношении артрита, чем филготиниб.

- 57 036122

Таблица 5-1

Соединение	Доза (мг/кг)	ПИК (%)
Тофацитиниб	1	19,8
3	41,6
10	49,2
Соединение WX07	1	1,5
3	20,4
10	44,7
Соединение WX08	1	13,6
3	33,4
10	49,2
Филготиниб	3	7,9

Исследование фармакокинетики в модели артрита, вызванной коллагеном, у мышей.

Эффект соединения согласно настоящему изобретению для лечения артрита был подтвержден моделью артрита, индуцированного коллагеном, у мышей.

Были выбраны самцы мышей линии DBA/1, подкожную инъекцию эмульсии коллагена и полного адъюванта Фрейнда проводили у основания хвоста на 0-й день и на 21-й день, мышей классифицировали примерно на 29-й день, тофацитиниб (15 мг/кг), фитолиниб (15 мг/кг) и соединения согласно настоящему изобретению WX04 (15 мг/кг, 30 мг/кг), WX05 (15 мг/кг), WX07 (15 мг/кг) и WX (15 мг/кг) растворяли в ДМСО/PEG400/Н₂О [5/20/75 (об./об./об.)], который перорально вводили мышам CIA (для Shanghai Slac Laboratory Animal Co., Ltd. в каждой дозированной группе было 10 исследуемых животных), мышей подвергали лечению в течение двух последовательных недель, массу мышей регистрировали в течение указанного периода, была проведена клиническая оценка воспаления суставов мышей, и результат показал, что соединения согласно настоящему изобретению WX04, WX05, WX07 и WX08 обладают очевидным терапевтическим эффектом в отношении ревматоидного артрита у мышей.

Таблица 5-2

Соединение	Доза (мг/кг)	ППК (%)
Группа контрольного	0	0%
растворителя
Тофацитиниб	15	34
Филготиниб	15	39,9
Соединение WX04	15	29
30	27
Соединение WX05	15	31
Соединение WX06	15	30,3
Соединение WX07	15	52,2

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение формулы (I) или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения

где кольцо А выбрано из 5-12-членного гетероциклоалкила или 5-12-членного гетероциклоалкила, замещенного аминогруппой, С_1-3алкилом или C_1-3гетероалкилом, замещенным аминогруппой;

R₁ выбран из Н, С_1-6алкила, С_1-6гетероалкила, С_3-6циклоалкила, 3-6-членного гетероциклоалкила, 6членного арила, 5-6-членного гетероарила или С_1-6алкила, С_1-6гетероалкила, С_3-6циклоалкила, 3-6членного гетероциклоалкила, 6-членного арила или 5-6-членного гетероарила, каждый из которых замещен галогеном, цианогруппой, гидроксильной группой, С_1-3алкилом, циклопропилом, трифторметилом или С_1-3гетероалкилом, замещенным галогеном, цианогруппой, гидроксильной группой;

L выбран из одинарной связи, -С(=О)О-, С_1-6ацила, амино, амино С_1-6ацила, С_1-6ациламинометилена или амино С_1-6ацилметилена;

R₂ выбран из Н, С_1-3алкила или 3-6-членного циклоалкила;

___ _________ структурное звено n' ^l может быть заменено °· и гетеро указывает на присутствие О, S или N, количество которых выбрано из 1, 2 или 3.
2. Соединение формулы (I) по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где количество заместителей указанного 5-12-членного гетероциклоалкила, 5-6-членного гетероарила, С_1-6алкила, С_1-6гетероалкила, С_3-6циклоалкила, 3-6-членного гетероциклоалкила, 6-членного арила, 5-6-членного гетероарила, амино, амино-С_1-6ацила, С_1-6ациламинометилена, амино-С_1-6ацилметилена, С_1-3алкила и 3-6членного кольца выбрано из 1, 2, 3, 4 или 5 и кольцо А выбрано из 5-12-членного гетероциклоалкила или 5-12-членного гетероциклоалкила, замещенного амино, метилом, этилом, н-пропилом, изопропилом, циклопропилом или С_1-3гетероалкилом, замещенным аминогруппой;

R₁ выбран из Н, С_1-6алкила, С_1-6гетероалкила, С_3-6циклоалкила, 3-6-членного гетероциклоалкила, 6членного арила, 5-6-членного гетероарила или С_1-6алкила, С_1-6гетероалкила, С_3-6циклоалкила, 3-6членного гетероциклоалкила, 6-членного арила, 5-6-членного гетероарила, каждый из которых замещен F, Cl, Br, I, цианогруппой, гидроксильной группой, метилом, этилом, н-пропилом, изопропилом, циклопропилом, трифторметилом или С_1-3гетероалкилом, замещенным F, Cl, Br, I, цианогруппой или гидроксильной группой.
3. Соединение формулы (I) по п.1 или 2 или его фармацевтически приемлемая соль, где кольцо А выбрано из пиперидила, пиперазинила, морфолинила, пирролидинила, оксазолинила и 7-12-членной гетероциклильной группы с 1-2 гетероатомами, каждый из которых необязательно замещен аминогруппой, С_1-3алкилом или С_1-3гетероалкилом, замещенным аминогруппой.
4. Соединение формулы (I) по п.3 или его фармацевтически приемлемая соль, где кольцо А выбрано из

каждый из которых необязательно замещен аминогруппой, С_1-3алкилом или С_1-3гетероалкилом, замещенным аминогруппой.
5. Соединение формулы (I) по п.1 или 2 или его фармацевтически приемлемая соль, где R₁ выбран из H, С_1-4алкила, С_1-2алкил-О-С_1-2алкил-, С_1-2алкил^-С_1-2алкила, С_4-5циклоалкила, 6-членного арила, 5-6членного гетероарила или С_1-4алкила, С_1-2алкил-О-С_1-2алкила, С_1-2алкил^-С_1-2алкила, С_4-5циклоалкила, 6членного арила, 5-6-членного гетероарила, замещенного галогеном, цианогруппой, гидроксильной группой, С_1-3алкилом или С_1-3гетероалкилом, замещенным галогеном, цианогруппой или гидроксильной группой.
6. Соединение формулы (I) по п.1 или 2 или его фармацевтически приемлемая соль, где R2 выбран из H, метила, этила или циклопропила.

- 59 036122
7. Соединение по п.1, где указанное соединение выбрано из

- 60 036122
8. Применение соединения по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для лечения заболевания, связанного с JAK.