EP2572182A2 - Anordnung zum messen der optischen eigenschaften von partikeln einer dispersion - Google Patents
Anordnung zum messen der optischen eigenschaften von partikeln einer dispersionInfo
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Definitions
- the task is in addition to the rapid detection of the individual particles is to measure them as accurately as possible optically.
- lasers are used as light sources for the forward and side scattered light measurements as well as for the fluorescence excitation.
- the laser light is allowed to act on the particles with a very small opening angle (low divergence) or as a parallel light beam.
- the metrological problem consists in the fact that morphologically complex particles, which can often be structured like very flat, flat objects, are achieved by the laser beam at right angles to the particle surface or parallel to the particle surface. This leads, for example, to "correct" measured values of the particle fluorescence in the case of planar illumination and to "erroneous" measured values when the laser light hits the edge of the particle.
- the invention relates to an arrangement which avoids this measurement error.
- the flow cytometric analysis of microscopic particles has great economic importance if it is possible to make the measurements highly precise.
- One of these Applications is the measurement of the DNA content of sperm. If this measurement is accurate enough, the 2 varieties of sperm containing X and Y chromosomes can be sorted with a device downstream of the flow cytometer and used for animal breeding.
- the object of this invention is to find a way that in the previously known Laser-based flow cytometers reduce or completely eliminate the erroneous influence of shape factors on the measurement accuracy. This leads to a significantly increased measurement accuracy.
- the object of the invention is also to combine the high measurement accuracy achieved with the two scattered light parameters. These can not be measured with conventional light sources.
- a device for laser light excitation is proposed, which avoids the influence of form factors. Compared to conventional light sources with the advantage of high numerical aperture excitation, laser excitation allows a much higher density of light energy, resulting in more accurate measurements (better signal-to-noise ratio).
- FIG. 2 is a plan view of a first embodiment of a flow cytometer
- Fig. 5 is a plan view of a third embodiment of a flow cytometer.
- Fig. 6 is a plan view of a fourth embodiment of a flow cytometer.
- Fig. 1 shows in the manner of a schematic vertical section the structure of the Bruvettenteils a flow cytometer and the arrangement of the excitation beam path with the aid of a laser 1 and the measuring beam path with light-collecting optics in shape a converging lens 5, a laser light blocking filter 6 and the photodetector 7.
- the dispersion of the measuring cuvette 3 is fed through a narrow tube 21.
- Particle-free medium 14 is fed to the particle flow, which leads to a centering of the particles when passing the measuring range at 23.
- the morphologically different particles have no preferential orientation. From FIGS. 2 and 4 to 6, the measuring cuvette 3 is in each case in the
- the laser light excitation takes place from two directions, wherein the irradiation direction of the laser light beam 1 is offset from the laser light beam 2 by 90 °.
- the laser light in the form of the two laser light beams 1 and 2 excites the fluorescence from two sides of the cuvette 3.
- a second light collecting optic or converging lens 9 is mounted, which is offset from the first condenser lens 8 by 90 °. This type of detection of the light emanating from each particle further reduces the influence of form factors. Both beam paths for light detection are with high numerical aperture optics in
- Fig. 3 shows an epithelial cell, which may have up to 60 ⁇ diameter in humans. Will this be on the edge? lights, the laser light reaches the nucleus 16 only weakened. If this cell is irradiated flat and angular at the same time, the jetting errors cancel each other out.
- the substance to be measured is located in the sperm head 17, in the middle part 18 is preferably RNA. If such an object is irradiated edgewise, the laser light does not reach all the DNA components uniformly, some of the excitation light is "scattered away", and within the sperm head 17 it absorbs light, with the result that not all DNA components contribute equally Fluorescence be excited.
- FIG. 4 shows the arrangement with laser double excitation in a spatial representation.
- a measuring optics with a converging lens 5 a laser light blocking filter 6 and a photodetector 7 is shown.
- the condenser lens 5 has a high numerical aperture, so that the influence of form factors is avoided on the measurement side. Deviating from this illustrated embodiment can be provided, as in the embodiment of FIG. 2, two laser light beams 1 and 2 each assign their own measuring optics.
- FIG. 5 shows a further embodiment of the measuring apparatus according to the invention: Since the available laser light blocking filters 6, 10, 11 do not completely block the exciting laser light at some wavelengths, an arrangement is provided in FIG. 5 which prevents the respective Laser light beam 1, 2 can go directly into the measuring optics.
- the optical axis of the converging lens 5 with respect to the beam directions of the two excitation laser light beams 1, 2 arranged in the bisector, ie at an angle of 45 ° or 135 °.
- a special shape of the Measuring cuvette 19 with a designated as an inclined surface 20 fifth surface in cross section is provided. This fifth surface allows the attachment of a measuring optics with high numerical aperture, without laser excitation light enters the measuring beam path.
- the parallel alignment of the front surface of the converging lens 5 to the inclined surface 20 ensures that the fluorescent light from the measuring cuvette 19 into the converging lens 5 with low loss.
- FIG. 6 shows a measuring cuvette which is designed essentially like that of FIG. 5 and is therefore likewise designated by 19. Due to their two aligned at an angle of 90 ° to each other, adjacent to the inclined surface 20 surfaces in addition to the converging lens 5, which is associated with the inclined surface 20, the arrangement of two converging lenses 8, 9 are provided at an angle of 90 ° to each other, similar this is shown in Fig. 2. With this arrangement, particularly precise measurement results can be achieved:
- Notch filters 21 and 22 are provided between the measuring cuvette 19 and the converging lenses 8 and 9. They block the unwanted light components and are only permeable to stray light if possible. Since only scattered light components are to be detected, ie light components that are incident at an angle of more than 0 °, the directly incident laser light is blocked with so-called laser stops 24.
- the alignment of the cell within the measuring cuvette 19 can be calculated so that, for example, the measurement results of cells that are unfavorably aligned are not sufficient for further investigation be taken into account, or so that the measurement results of the fluorescent light certain correction factors - depending on the orientation of the measured cell - can be assigned.
- the illustrated embodiments may be provided to direct the light from the measuring cuvette in the direction of the photodetector by an optical element which is designed as a cylinder with a cylindrical reflection surface.
- the cylinder may be designed as a hollow cylinder whose inner surface forms the cylindrical reflection surface, or is designed as a solid, translucent cylinder whose outer surface forms the cylindrical reflection surface.
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Abstract
Bei einer Anordnung zur Messung optischer Eigenschaften von Partikeln einer fließfähigen Dispersion unter Verwendung einer Messküvette, deren zentraler Innenraum von der Dispersion durchflössen und von einem Laserlichtstrahl durchleuchtet wird, schlägt die Erfindung vor, dass der Innenraum der Küvette von zwei Laserlichtstrahlen beleuchtet wird, welche mit einem Versatz von 90° zueinander ausgerichtet sind.
Description
"Anordnung zum Messen der optischen Eigenschaften von Partikeln einer Dispersion"
Beschreibung:
Hintergrund
Die genaue Messung von optischen Eigenschaften einer großen Zahl von Partikeln einer fließfähigen Dispersion - die gasförmig oder flüssig sein kann - hat in der Zytologie und bei technischen Problemstellungen eine große Bedeutung. Mit Hilfe von Durch- flusszytophotometern („Flow Cytometer"), gelingt heute die photometrische und fluoreszenzoptische Analyse von mehreren tausend Partikeln pro Sekunde. Zusätzlich wurden Vorrichtungen vorgestellt, mit denen es möglich ist, gewünschte Partikel oder Zellen aufgrund der vorausgegangenen Messungen online zu sortieren. Eine derartige Anordnung von Durchflusszytometern mit nachgeschalteter Zellsortierung dient z. B. der Trennung von X- und Y-Chromosomen enthaltenden Spermien zur weiteren Verwendung in der Tierzucht.
Siehe zur Zellsortierung z. B. die Veröffentlichung Bessette, P. H. and Daugherty, P. S. (2004), Flow Cytometric Screening of cDNA Expression Libraries for Fluorescent Proteins. Biotechnol- ogy Progress, 20:963967. doi:10.1021 /bp034308g.
Ein von der Anmelderin vertriebenes Gerät zur Zellsortierung ist aus der Praxis unter der Bezeichnung„Particle and Cell Sorter PPCS" bekannt, wobei die Arbeitsweise dieses Gerätes in dem zugehörigen„Manual" beschrieben ist.
Die genaue Messung der optischen Eigenschaften der Partikel ist dann erschwert, wenn diese bezüglich Form und Größe sehr unterschiedlich sind.
Wichtige Einsatzgebiete von Durchflussphotozytometern finden sich zahlreich in der Biotechnologie, Überwachung von Produktionsprozessen, Zellanalyse, Zytopathologie und Immunologie.
Hierbei besteht die Aufgabenstellung neben der schnellen Erfassung der einzelnen Partikel darin, diese möglichst genau optisch zu vermessen. In der Regel werden für die Vorwärts- und Seit- wärtsstreulichtmessungen sowie für die Fluoreszenzanregung Laser als Lichtquellen benutzt. Das Laserlicht lässt man mit sehr geringem Öffnungswinkel (geringe Divergenz) bzw. als parallelen Lichtstrahl auf die Partikel einwirken. Das messtechnische Problem besteht dabei darin, dass morphologisch komplexe Partikel, die oft wie sehr flache, flächige Objekte strukturiert sein können, von dem Laserstrahl rechtwinklig zur Partikelfläche oder parallel zur Partikelfläche erreicht werden. Dies führt zum Beispiel zu„korrekten" Messwerten der Partikelfluoreszenz bei flächiger Anleuchtung und zu„fehlerhaften" Messwerten, wenn das Laserlicht die Kante des Partikels trifft.
Die Erfindung betrifft eine Anordnung, die diesen Messfehler vermeidet.
Stand der Technik
Die durchflußzytometrische Analyse von mikroskopisch kleinen Partikeln hat eine große wirtschaftliche Bedeutung, wenn es gelingt, die Messungen höchst präzise zu gestalten. Eine dieser
Anwendungen ist die Messung des DNS-Gehaltes von Spermien. Gelingt diese Messung genau genug, lassen sich die X- und Y-Chromosomen enthaltenden 2 Sorten von Spermien mit einer dem Durchflusszytophotometer nachgeschalteten Vorrichtung sortieren und für die Tierzüchtung verwenden.
Da der Unterschied des DNS-Gehaltes dieser zwei Spermienar- ten z. B. beim Rind nur 1 ,6% beträgt (Gesamtmenge der DNS pro Zelle: 3,3 pg) kommt es auf eine sehr genaue Messung der Zellen zu deren Unterscheidung an.
Um diese zu gewährleisten, hat es Vorschläge gegeben, die Zel len vor Passieren des die Fluoreszenz anregenden Laserstrahles so zu orientieren, dass diese vorzugsweise von dem Laserstrahl auf ihrer Fläche getroffen werden. Diese Orientierung erreicht man mehr oder weniger nur durch eine flächige bzw. elliptische Austrittsöffnung des Röhrchens, das die Zellsuspension zur Messung hinführt.
Ein anderer Weg zur Vermeidung des„Orientierungsfehlers" wurde dadurch begangen, dass man die Zellen zur Fluoreszenzanregung mit einer besonders großen numerischen Apertur (großer Raumwinkel) beleuchtet. Das gelingt bisher nur mit konventionellen Lichtquellen, z. B. mit Entladungslampen.
Damit wird jede Zelle allseitig gleichmäßig beleuchtet, was den Formfaktor weitgehend ausschaltet.
Dieser Weg der Beleuchtung mit einer großen numerischen Apertur vermindert zwar den Formfaktor-Einfluss, erlaubt aber nicht die Erfassung anderer oft wichtiger Parameter der Zellen wie Vorwärtsstreulicht (Partikelgröße) oder Seitwärtsstreulicht (Homogenitätsfaktor).
Die dieser Erfindung zugrunde liegende Aufgabenstellung besteht darin, einen Weg zu finden, den bei den bisher bekannten
Laser-basierten Durchflußzytophotometern fehlerhaften Einfluss von Formfaktoren auf die Messgenauigkeit zu vermindern oder ganz auszuschließen. Dies führt zu einer deutlich gesteigerten Messgenauigkeit. Aufgabe der Erfindung ist es zudem, die dadurch erreichte hohe Messgenauigkeit mit den beiden Streulichtparametern zu kombinieren. Mit konventionellen Lichtquellen lassen sich diese nicht messen. Erfindungsgemäß wird eine Vorrichtung zur Laserlichtanregung vorgeschlagen, die den Einfluss von Formfaktoren vermeidet. Gegenüber konventionellen Lichtquellen mit dem Vorteil der Anregung mit hoher numerischer A- pertur erlaubt die Laseranregung eine sehr viel höhere Lichtenergiedichte, was zu genaueren Messungen führt (besseres Signal-Rausch-Verhältnis).
Lösung
Der vorliegende Vorschlag wird anhand der rein schematischen Zeichnungen nachfolgend näher erläutert. Dabei zeigt
Fig. 1 einen schematischen Vertikalschnitt durch ein Durch- flusszytometer,
Fig. 2 eine Draufsicht auf ein erstes Ausführungsbeispiel eines Durchflusszytometers,
Fig. 3 Ansichten aus jeweils zwei verschiedenen Richtungen auf zwei unterschiedliche Arten zu messender Zellen,
Fig. 4 eine perspektivische Ansicht auf ein zweites Ausführungsbeispiel,
Fig. 5 eine Draufsicht auf ein drittes Ausführungsbeispiel eines Durchflusszytometers, und
Fig. 6 eine Draufsicht auf ein viertes Ausführungsbeispiel eines Durchflusszytometers.
Fig. 1 zeigt in Art eines schematischen Vertikalschnitts den Aufbau des Küvettenteils eines Durchflusszytometers sowie die Anordnung des Anregungsstrahlenganges mit Hilfe eines Lasers 1 und des Messstrahlenganges mit lichtsammelnder Optik in Form
einer Sammellinse 5, einem Laserlichtsperrfilter 6 und dem Photodetektor 7. Durch ein enges Röhrchen 21 wird die Dispersion der Messküvette 3 zugeführt. Um den Partikelstrom wird partikelfreies Medium 14 zugeführt, das zu einer Zentrierung der Partikel beim Passieren des Messbereichs bei 23 führt. Die morphologisch unterschiedlichen Partikel haben keine Vorzugsorientierung. Aus den Fig. 2 sowie 4 bis 6 ist die Messküvette 3 jeweils in der
Aufsicht oder perspektivisch ersichtlich. Dabei wird deutlich, dass vorschlagsgemäß die Laserlichtanregung aus zwei Richtungen erfolgt, wobei die Einstrahlrichtung des Laserlichtstrahls 1 gegenüber dem Laserlichtstrahl 2 um 90° versetzt ist. Das führt dazu, dass„flache" Partikel von Laser 1 kantig und von Laser 2 flächig beleuchtet werden - oder je nach Orientierung des flächigen Partikels im Flusskanal auch umgekehrt. Da die Partikel jede Orientierung haben können, ist die Summe des Lichtes der beiden Laserlichtstrahlen 1 und 2, die das fluoreszierende Mate- rial erreicht, stets gleich groß.
Bei dem Ausführungsbeispiel der Fig. 2 regt das Laserlicht in Form der beiden Laserlichtstrahlen 1 und 2 die Fluoreszenz von zwei Seiten der Küvette 3 an. Zusätzlich zur Lichtsammeioptik in Form einer ersten Sammellinse 8 ist eine zweite Lichtsammelop- tik bzw. Sammellinse 9 angebracht, die gegenüber der ersten Sammellinse 8 um 90° versetzt ist. Diese Art der Erfassung des von jedem Partikel ausgehenden Lichts vermindert den Einfluss von Formfaktoren noch zusätzlich. Beide Strahlengänge zur Lichterfassung sind mit Optiken hoher numerischer Apertur in
Form der Sammellinsen 8, 9, sowie mit Sperrfiltern 10, 1 1 für das anregende Laserlicht und mit Photodetektoren 7, 12 ausgestattet.
Fig. 3 zeigt eine Epithelzelle, die beim Menschen bis zu 60 μιτι Durchmesser aufweisen kann. Wird diese auf der Kante be-
leuchtet, erreicht das Laserlicht den Zellkern 16 nur abgeschwächt. Wird diese Zelle gleichzeitig flächig und kantig angestrahlt, heben sich die Anstrahlfehler auf.
Noch deutlicher wird dieses Problem bei der Messung von Spermien. Die zu messende Substanz, die DNS, befindet sich im Spermienkopf 17, im Mittelteil 18 befindet sich vorzugsweise RNS. Wird ein solches Objekt„kantig" angestrahlt, erreicht das Laserlicht nicht alle DNS-Anteile gleichmäßig; ein Teil des Anregungslichts wird„weggestreut" und innerhalb des Spermien- kopfes 17 kommt es zur Lichtabsorption mit der Folge, dass nicht alle DNS-Anteile gleichermaßen zur Fluoreszenz angeregt werden.
Fig. 4 zeigt die Anordnung mit Laserdoppelanregung in einer räumlichen Darstellung. Rein beispielhaft ist nur eine Messoptik mit einer Sammellinse 5, einem Laserlichtsperrfilter 6 und einem Photodetektor 7 dargestellt. Die Sammellinse 5 weist eine hohe numerische Apertur auf, so dass auf der Messseite der Einfluss von Formfaktoren vermieden wird. Abweichend von diesem dargestellten Ausführungsbeispiel kann vorgesehen sein, wie beim Ausführungsbeispiel der Fig. 2 beiden Laserlichtstrahlen 1 und 2 jeweils eine eigene Messoptik zuzuordnen.
In Fig. 5 ist eine weitere erfindungsgemäße Ausgestaltung der Messapparatur dargestellt: Da die zur Verfügung stehenden Laserlichtsperrfilter 6, 10, 1 1 bei manchen Wellenlängen das anregende Laserlicht nicht vollständig blockieren, wird in Fig. 5 eine Anordnung vorgesehen, die verhindert, dass der jeweilige Laserlichtstrahl 1 , 2 auf direktem Weg in die Messoptik gelangen kann.
Dazu wird die optische Achse der Sammellinse 5 gegenüber den Strahlrichtungen der beiden Anregungslaserlichtstrahlen 1 , 2 in deren Winkelhalbierender angeordnet, also in einem Winkel von jeweils 45° bzw. 135°. Eine besondere Formgebung der
Messküvette 19 mit einer als Schrägfläche 20 bezeichneten fünften Fläche im Querschnitt ist dafür vorgesehen. Diese fünfte Fläche erlaubt die Anbringung einer Messoptik mit hoher numerischer Apertur, ohne dass Laser-Anregungslicht in den Messstrahlengang gelangt. Die parallele Ausrichtung der Frontfläche der Sammellinse 5 zu der Schrägfläche 20 stellt sicher, dass das Fluoreszenzlicht verlustarm aus der Messküvette 19 in die Sammellinse 5 einstrahlt.
Fig. 6 zeigt eine Messküvette, die im wesentlichen wie die der Fig. 5 ausgestaltet ist und daher ebenfalls mit 19 gekennzeichnet ist. Aufgrund ihrer beiden im Winkel von 90° zueinander ausgerichteten, an die Schrägfläche 20 angrenzenden Flächen kann zusätzlich zu der Sammellinse 5, welche der Schrägfläche 20 zugeordnet ist, auch die Anordnung zweier Sammellinsen 8, 9 im Winkel von 90° zueinander vorgesehen sein, ähnlich wie dies in Fig. 2 dargestellt ist. Mit dieser Anordnung sind besonders präzise Messergebnisse erzielbar:
Mittels der Photodetektoren 7, die den Sammellinsen 8 und 9 nachgeschaltet sind, wird nicht das Fluoreszenzlicht ausgewertet, sondern Vorwärtsstreulicht bzw. negatives Absorptionslicht, welches sich nach dem Auftreffen des Anregungslichts, also der Laserlichtstrahlen 1 und 2, auf die jeweilige Zelle ergibt. Sperrfilter 21 und 22 sind zwischen der Messküvette 19 und den Sammellinsen 8 und 9 vorgesehen. Sie blockieren die unerwünschten Lichtanteile und sind möglichst nur für das Streulicht durchlässig. Da nur Streulichtanteile erfasst werden sollen, also Lichtanteile, die in einem Winkel von mehr als 0° einfallen, wird das direkt einfallende Laserlicht mit so genannten Laserstops 24 blockiert.
Aus den beiden Vorwärtsstreulicht-Signalen kann die Ausrichtung der Zelle innerhalb der Messküvette 19 berechnet werden, so dass beispielsweise die Messergebnisse von Zellen, die unvorteilhaft ausgerichtet sind, für die weitere Untersuchung nicht
berücksichtigt werden, oder so dass den Messergebnissen des Fluoreszenzlichts bestimmten Korrekturfaktoren - je nach Ausrichtung der gemessenen Zelle - zugeordnet werden können.
Mittels der Sammellinse 5 wird bei der Messanordnung gemäß Fig. 6 ausschließlich das von der untersuchten Zelle ausgesandte Fluoreszenzlicht erfasst, da die Laserlichtstrahlen 1 und 2 nicht auf die Sammellinse 5 gerichtet sind. Mit dieser Anordnung wird daher ein besonders reines Messsignal erhalten, welches nicht von Laserlichtanteilen kontaminiert ist. Aus diesem Grund ist rein beispielhaft kein Laserlichtsperrfilter zwischen der Schrägfläche 20 und dem ihr zugeordneten Photodetektor 7 vorgesehen. Abweichend von dieser Darstellung kann an dieser Stelle jedoch ein Laserlichtsperrfilter 6 wie in Fig. 5 vorgesehen sein, um unerwünschte Streulichtanteile auszuschließen.
Abweichend von den dargestellten Ausführungsbeispielen kann vorgesehen sein, das Licht von der Messküvette in Richtung zum Photodetektor durch ein optisches Element zu leiten, welches als Zylinder mit einer zylindrischen Reflexionsfläche ausgestaltet ist. Dabei kann der Zylinder als Hohlzylinder ausgestaltet sein, dessen innere Oberfläche die zylindrische Reflexionsfläche bildet, oder als massiver, lichtdurchlässiger Zylinder ausgestaltet ist, dessen äußere Oberfläche die zylindrische Reflexionsfläche bildet.
Claims
Anordnung zur Messung optischer Eigenschaften von Partikeln einer fließfähigen Dispersion
unter Verwendung einer Messküvette, deren zentraler Innenraum von der Dispersion durchflössen und von einem Laserlichtstrahl durchleuchtet wird,
wobei das aus der Messküvette ausgetretene Licht auf einen lichtempfindlichen, als Photodetektor bezeichneten Sensor geführt wird,
dadurch gekennzeichnet,
dass der Innenraum der Küvette (3, 19) von zwei Laserlichtstrahlen (1 , 2) beleuchtet wird,
welche mit einem Versatz von 90° zueinander ausgerichtet sind.
Anordnung nach Anspruch 1 ,
dadurch gekennzeichnet,
dass ein gemeinsamer Laser vorgesehen ist, dessen Strahl mit optischen Mitteln aufgeteilt ist, derart, dass die beiden Laserstrahlen (1 , 2) von dem selben Laser erzeugt sind.
Anordnung nach Anspruch 1 oder 2,
dadurch gekennzeichnet,
dass beide Laserstrahlen (1 , 2) die gleiche Strahlenenergie und Strahlengeometrie aufweisen.
Anordnung nach Anspruch 3,
dadurch gekennzeichnet,
dass eine Sammellinse (5, 8, 9) mit hoher numerischer Apertur zwischen der Messküvette (3, 19) und dem Photodetektor (7) angeordnet ist.
5. Anordnung nach Anspruch 4,
dadurch gekennzeichnet,
dass zwei Sammellinsen (8, 9) mit hoher numerischer
Apertur jeweils zwischen der Messküvette (19) und einem Photodetektor (7) angeordnet sind,
wobei die optischen Achsen der beiden Sammellinsen (8, 9) um 90° zueinander versetzt sind.
Anordnung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet,
dass der Querschnitt der Messküvette (19) eine Schrägfläche (20) aufweist, die in einem von 90° abweichenden Winkel zu jeder der beiden Einstrahlrichtungen der Laserstrahlen (1 , 2) ausgerichtet ist.
Anordnung nach Anspruch 6,
dadurch gekennzeichnet,
dass die Schrägfläche (20) im Winkel von 45° zu jedem der beiden Laserstrahlen (1 , 2) ausgerichtet ist.
Anordnung nach Anspruch 6 oder 7,
dadurch gekennzeichnet,
dass die Frontfläche der Sammellinse (5) parallel zu der Schrägfläche (20) verläuft
Anordnung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet,
dass in direkter Richtung der beiden Laserstrahlen (1 , 2) Sammellinsen (8, 9) zwischen der Messküvette (3, 19) und dem Photodetektor (7) angeordnet sind, welche zur Erfassung der Vorwärtsstreulichts bzw. negativen Absorptionslichtes ausgestaltet sind.
Anordnung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet,
dass zwischen der Messküvette (3, 19) und dem Photodetektor (7) ein Lasersperrfilter (6, 10, 1 1 ) angeordnet ist, welcher das Licht der anregenden Laserstrahlen (1 , 2)
sperrend ausgestaltet ist.
Anordnung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet,
dass der Partikelmessanordnung eine Vorrichtung zum Sortieren von Partikeln nachgeschaltet ist.
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