EP2691074A1 - Composition a base de camellia japonica et polygonum hydropiper pour protection de la peau - Google Patents

Composition a base de camellia japonica et polygonum hydropiper pour protection de la peau

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Publication number
EP2691074A1
EP2691074A1 EP12720228.1A EP12720228A EP2691074A1 EP 2691074 A1 EP2691074 A1 EP 2691074A1 EP 12720228 A EP12720228 A EP 12720228A EP 2691074 A1 EP2691074 A1 EP 2691074A1
Authority
EP
European Patent Office
Prior art keywords
extract
camellia japonica
skin
composition according
polygonum hydropiper
Prior art date
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Withdrawn
Application number
EP12720228.1A
Other languages
German (de)
English (en)
Inventor
Nadine Leconte
Jacques Leclere
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Societe de Recherche Cosmetique SARL
Original Assignee
Laboratoire Nuxe SA
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Filing date
Publication date
Application filed by Laboratoire Nuxe SA filed Critical Laboratoire Nuxe SA
Publication of EP2691074A1 publication Critical patent/EP2691074A1/fr
Withdrawn legal-status Critical Current

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    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations

Definitions

  • the present invention relates to a novel cosmetic and / or dermatological composition intended to ensure the protec ⁇ of the epidermis, and more particularly a composition containing extract of Camellia japonica having a protective effect on the skin, particularly an effect prevention and treatment of stretch marks.
  • the skin is a real organ comprising a plurality of integrated layers, from super ficial ⁇ layer, the epidermis, to the deeper layers, the dermis and hypodermis, each has specific properties enabling the whole to react and adapt to the conditions of his environment.
  • the epidermis composed mainly of keratinocytes (90% of epidermal cells), melanocytes (2 to 3% of epidermal cells) and Langerhans cells, has a variable thickness depending on the different parts of the body. Since it constitutes the outer layer of the skin, the epidermis plays a fundamental role in ensuring the protection and maintenance of good trophicity. This is why many compositions have been developed to protect and improve its functions, including strengthening its elasticity and firmness.
  • the dermis thicker, solid, rich in nerves, blood vessels and sweat glands, consists mainly of collagen, elastin and proteoglycans. These three types of molecules are synthesized by dermal fibroblasts. Collagen fibers, which repre ⁇ tent 70% of the dry weight of the dermis, ensure the mechanical strength and texture of the skin, elastin is responsible for the elasticity, and proteoglycans play a major role structure and hydration of the skin. Other cells such as macrophages and leucocytes are also present in the dermis layer.
  • the hypodermis which is the deepest layer of skin, contains lipid-producing fat cells so that the subcutaneous tissue makes a fat layer that protects muscles, bones, and internal organs from shock.
  • the skin, and each of its constituent layers, can suffer damage caused by internal or external causes, for example aging and excessive stretching.
  • the aging of the skin is manifested by signs such as the formation of more or less deep and extensive wrinkles, in addition to a loss of elasticity and thinning.
  • the appearance of the first wrinkles is a phenomenon that can be aggravated by physical or chemical aggression from pollution, exposure to ultraviolet rays or lifestyles that accelerate skin aging.
  • MMP-1 collagenase fibroblast
  • MMP-2 gelatinase A
  • MMP-9 gelatinase B
  • MMP-9 gelatinases
  • MMP-9 gelatinases
  • MMP-9 stromelysin-1
  • MMP-7 matrilysin
  • striae distensae or striae atrophicae which are small ridges or chippers ⁇ rures elongated, often in length between about 5 and 15 cm, due to an atrophy of the cutaneous network which does not withstand significant distensions to which the skin can be subjected under particular conditions.
  • This skin condition is mainly found in pregnant women in the abdomen, but it can also occur in obese people in the case of rapid weight gain. It has long been considered as caused by a mechanical effect causing the distention of the skin, but it is now estimated that it may also be due to hyperfunctioning of the adrenal glands (Cushing's syndrome).
  • Treatment with corticosteroids may result in the formation of stretch marks by disrupting the biosynthesis of dermal fibroblasts, resulting in a decrease in collagen, elastin and proteoglycan formation, partial inhibition of hyaluronic acid synthesis, and chondroitin sulfate, as well as impaired protein production.
  • the formation of stretch marks is generally accompanied by a phenomenon ⁇ flam matory. These effects result in rupture of the conjunctive tissue.
  • Stretch marks can affect relatively large areas of the skin, appearing as purplish-red streaks that evolve over time to a lighter color. They provide an unsightly effect that can have negative psychological consequences in some subjects and it is therefore important to be able to develop treatments that can prevent, mask or eliminate them.
  • patent application WO 0019974 describes the use of soy peptides and tripeptides consisting of glycine, histidine and lysine for the prevention and treatment of stretch marks on the skin.
  • US Pat. No. 7,429,386 describes the treatment of stretch marks by local administration of botulinum toxin intradermally.
  • FR-A-2 848 116 discloses a cosmetic and / or dermatological composition based on Siegesbeckia extract acting as an inhibitor of matrix metalloproteinases, in combination with lipopeptides for the treatment and prevention of wrinkles and loss of elasticity of the skin.
  • the application WO-A-2007/144518 describes the use of a mimosa seed extract, in particular from the Acacia dealbata, Acacia farnesiana or Acacia decurrens species, which has the effect of strongly promoting the synthesis of collagens.
  • Camellia japonica commonly known as camellia, is a plant of the family Theaceae native to East and Southeast Asia, including Japan, Korea and China, in the form of a shrub that can reach 6 to 7 m.
  • Camellia japonica is well known for the quality and beauty of its red or pink flowers.
  • the seeds of Camellia japonica have been used for their anti-inflammatory activity, and the flowers for their haemostatic effect in the treatment of hematemesis.
  • Studies have shown the presence of saponins in fruits and seeds, triterpenoids in the roots, and flavonol glycosides in the leaves, exhibiting antioxidant properties, as described by K. Onodera et al., Biosc.
  • Patent FR 2815862 describes an anti-aging composition combining an extract of Camellia (for example C. sinensis) and a carotenoid such as - and ⁇ -carotene and lycopene. This association would have potentiated effects of stimulation of collagen synthesis, but no experimental results are provided.
  • Polygonum hydropiper commonly known as water pepper, is a plant of the family of polygonaceae rich in tannins and flavonic derivatives. It also contains an essential oil and sesquiterpene aldehydes which give it its burning flavor justifying its common name of water pepper. It has been described as having hemostatic, diuretic and hypotensive activity. Polygonum hydropiper root extracts would have activity against fertility, as written by S.K. Garg et al., J. Reprod. Fert. 29, 521-423 (1972). The antibacterial activity and hydrating effect of Polygonum hydropiper (or Persicaria hydropiper) was also mentioned by Kim Jung Eun et al., Korean J. Microbiology and Biotechnology, vol. 38, pp. 112-115 (2010).
  • compositions of the invention are distinguished in that they comprise an extract of a plant of the species Camellia japonica in association with an extract of a plant of the species Polygonum hydropiper in an amount effective to provide a protection of the epidermis against the signs of skin aging and against stretch marks, as well as acceptable carriers and excipients in dermatology and cosmetology.
  • the present invention therefore relates to a new cosmetic and / or dermatological composition based on Camellia japonica, and more particularly based on Camellia japonica extract, in association with extracts of Polygonum hydropiper.
  • Such a composition has excellent properties used in cosmetics and dermatology for the protection of the skin, not only against the signs of skin aging but also against stretch marks.
  • the present invention also relates to a topical composition based on the combination of an extract of Camellia japonica and an extract of Polygonum hydropiper for the prevention and treatment of signs of skin aging and stretch marks.
  • the present invention also relates to a non-therapeutic cosmetic method for preventing and combating the signs of skin aging and stretch marks on the skin, comprising applying to the areas of the skin concerned a topical composition containing an effective amount of the combination of extract of Camellia japonica and Polygonum hydropiper extract according to the present invention.
  • the invention also relates to a pharmaceutical composition based on an extract of Camellia japonica and an extract of Polygonum hydropiper for the protection of the epidermis and more particularly the prevention and treatment of stretch marks.
  • compositions according to the present invention distin ⁇ Guent in that they comprise an extract of Camellia japonica in combination with an extract from Polygonum hydropiper in an amount effective to provide skin protection, as well as carriers and excipients acceptable in dermatology and in cosmetology.
  • topical compositions of the invention based on extracts of Camellia japonica and extract of Polygonum hydropiper can be advantageously used in dermatology and cosmetology for the treatment or prevention of signs of skin aging and stretch marks.
  • the tests carried out by the applicant have shown that among the various parts of the plant, it is preferable to use the aerial parts and in particular the leaves.
  • the species Camellia japonica is readily available and leaf conservation does not usually raise technical difficulties.
  • the extracts of Camellia japonica used in the compositions according to the present invention are preferably obtained in the form of an aqueous extract from the aerial parts of the plant previously dried, crushed to a fine powder that is left to macerate in water for about 12 to 14 hours.
  • the extract that can be used in the invention is obtained by maceration from crushed and reduced Camellia japonica leaves into a powder which is left to macerate in water in a powder / water ratio of 40% by weight.
  • the product is then decanted, expressed and filtered.
  • the aqueous extract of Camellia japonica is in the form of a yellow to amber liquid, with a characteristic odor, soluble in water and in ethanol, characterized by:
  • the amount of polyphenols per 100 g of extract is between 0.0085 and 0.0425.
  • the invention is obtained from the aerial parts of the plant, preferably in the form of aqueous extracts after maceration of the previously dried and milled plant.
  • the tips (leaves and stems) or the leaves of Polygonum hydropiper which are dried, crushed and reduced to powder, are used. which is macerated in water, the powder / water ratio being 40%, about 24 hours. After decantation, expression and filtration, the filtrate is atomized and the powder obtained is diluted to 50% with maltodextrin.
  • the aqueous extract of Polygonum hydropiper is in the form of a beige-to-brown powder of characteristic odor, soluble in water, characterized by: pH (1% solution) between 4.9 - 6, 9
  • the extracts used in the compositions of the invention are in the range of 0.05 to 2.0% for Polygonum hydropiper and 0.1 to 10.0% for Camellia japonica based on the total weight of the composition. .
  • the extracts may be blended to be incorporated into the composition and the amount of mixture used is generally between 0, 1 and 12% by weight relative to the total weight of the compo sition ⁇ .
  • the extracts of Camellia japonica leaves and the extracts of Polygonum hydropiper included in the compositions according to the present invention have shown, in vitro tests, protective effects of the epidermis, and more particularly:
  • the tests were carried out using samples assayed at 0.5% Polygonum piper extract, 5% Camellia japonica, and a combination of the two extracts on human fibroblasts cultured epidermis and reconstituting ⁇ killed (Skinethic ®).
  • MMP1 metalloproteinases 1
  • MMP2 metalloproteinases 2
  • MMP9 metalloproteinases 9
  • compositions according to the invention may contain, in addition to an extract of Camellia japonica leaves and an extract of Polygonum hydropiper, secondary active agents which advantageously complement their activity, and which are compatible, that is to say, not capable of reacting on each other. others or to mask or limit their respective effects. More particularly, the secondary active agents may be chosen from a mimosa seed extract and a marigold extract that favorably affect the stimulation of neoformed collagens, Centella asiatica, monomethylsilanol, proline, or butter. of Shea.
  • composition according to the invention may comprise, for example, between 0.1 and 2% by weight of Polygonum piper extract, between 0.1 and 6% by weight of Camellia japonica extract, and, where appropriate, between 1 and and 5% by weight of mimosa seed extract and / or between 2 and 6% by weight of Centella asiatica, and / or between 0.5 and 2% by weight of monomethylsilanol and proline relative to the total weight of the composition.
  • these concentrations are respecti vely ⁇ 0.2 to 1% by weight of extract of Polygonum hydropiper, 1 to 6% by weight of extract of Camellia japonica, 2 to 5% by weight of extract of mimosa seeds and between 3 and 5% by weight of Centella asiatica relative to the total weight of the composition.
  • compositions of the invention may comprise between 0.1% and 10% by weight of Camellia japonica leaf extract, as defined above, relative to the total weight of the composition, and preferably between 1 and 6% by weight.
  • concentration of Polygonum hydropiper extract is generally between 0.05 and 2.0%, and preferably between 0.1 and 1.0%.
  • each component in the composition may be made according to the utili zation ⁇ envisaged.
  • lower doses in the form of milk or cream dosed at about 1 to 6% (total of the two components), are preferably used, while spot treatment may require higher doses, for example for example a serum dosed between 6 and 12%, where, preferably, the doses of extracts of Camellia japonica and Polygonum hydropiper are higher.
  • topical compositions can be used advantageously in dermatology and cosmetology for the treatment or prevention of signs of skin aging as well as for the prevention and treatment of stretch marks.
  • Camellia japonica extract and Polygonum hydropiper extract according to the present invention supplemented if necessary with extracts of mimosa seeds and extracts of Centella asiatica as indicated above, used under normal conditions of use for 20 to 30 consecutive days, to treat stretch marks, demonstrated excellent skin tolerance.
  • compositions according to the present invention may be presented in the pharmaceutical forms classi ⁇ cally used for topical application, that is to say in the form of lotion, gel, emulsion (especially cream or milk), mask, ointment, nanocapsules, liposomes or transdermal patches, containing compatible and pharmaceutically acceptable excipients and common carriers. They are preferably used in the form of creams, milk serum and lotion.
  • Topical administration are prepared by the usual techniques, and for example, in the case of a cream, by dispersion of a fatty phase in an aqueous phase to obtain an oil-in-water emulsion, or conversely to prepare a water-in-oil emulsion.
  • creams it is preferred to use lamellar structure emulsions containing little or no ethoxylated products.
  • an aqueous extract preferably a hydroglycolic extract.
  • the topical compositions according to the invention may comprise excipients suitable for external topical administration, in particular dermatologically and cosmetologically acceptable excipients.
  • excipients suitable for formulation are well known to those skilled in the art and include in particular penetrating agents such as ethoxydiglycol, phytantriol, octyl dodecanol and escin; thickeners such as natural gums and synthetic polymers; emollients and surfactants such as cetearyl octanoate, isopropyl myristate, cetearyl isononanoate, dimethicone, cyclomethicone, polyglyceryl 3-diisostearate, hydrogenated polyisobutene, cetyl alcohol, cetyl palmitate, cetyl phosphate; emulsifiers; the conser ⁇ vados such as phenoxyethanol, methyl paraben (methylparaben), ethyl para-hydroxybenzoate (eth
  • moisturizing agents such as propylene glycol, glycerine, butylene glycol, sodium salt of pyrrolidone carboxylic acid (PCA sodium), and also antioxidant vitamins such as vitamin E, for example tocopherol acetate or tocotrienol, vitamin C, natural polyphenols.
  • PCA sodium pyrrolidone carboxylic acid
  • antioxidant vitamins such as vitamin E, for example tocopherol acetate or tocotrienol, vitamin C, natural polyphenols.
  • skin conditioning agents such as nylon and boron nitride to the composition, as well as agents for protecting against ultraviolet rays, and for example hydrophilic or lipophilic UV-A and UV-B sunscreens.
  • benzophenone or a benzophenone derivative such as 2-hydroxy-4-methoxy-benzophenone (Eusolex® 4360), or a cinnamic acid ester and more particularly octyl methoxymethylate (Eusolex® 2292) 2-ethylhexyl methoxycinnamate (Parsol MCX®), or a cyano- ⁇ , ⁇ -diphenylacrylate such as octocrylene (Eusolex® OCR), 4-methylbenzylidene camphor (Eusolex 6300®), and dibenzoylmethane derivatives such as 4-isopropyl dibenzoylmethane (Eusolex 8020), t-butyl-methoxy dibenzoylmethane (Parsol 1789®), and 4-methoxy-dibenzoylmethane. It is also possible to use anti-ultraviolet screen pigments, such as, for example, titanium dioxide, zinc
  • an anti-stretch mark milk having the following weight composition is prepared.
  • the extract of Camellia japonica used in the compo sition ⁇ above is an aqueous extract obtained by treating crushed leaves and powdered.
  • the extract of Polygonum hydropiper is a dry extract.
  • the fatty phase A is heated to 70-75 ° C while the aqueous phase B is heated to 75 ° C, then the two phases are thoroughly mixed with stirring.
  • the extracts and perfumes are added to the mixture at a temperature of 40 ° C and the pH is adjusted to 6.2 by adding potassium hydroxide or citric acid.
  • Example 2 The milk having the composition indicated above can be used in application on stretch marks, one to two times per day.
  • Example 2 The milk having the composition indicated above can be used in application on stretch marks, one to two times per day.
  • a firming lotion having the following weight composition is prepared.
  • Centella asiatica extract 5 Centella asiatica extract 5 00
  • Camellia japonica extract 3 00
  • Levulinic acid and sodium levulinate 0, 60
  • the lotion is prepared by making the polymer gel in water, neutralizing and adding the rest of the components cold.
  • a firming cream having the following weight composition is prepared.
  • phase A The hydrogenated lecithin is hydrated in water at 75 ° C and then the other ingredients of phase A are added and mixed.
  • Phase B previously homogenized under a cooled turbine, is added at 78 ° C., then the other phases are successively added at 40 ° C., the mixture is mixed and cooled progressively.
  • the cream having the composition indicated above is used in application on the face, once a day at bedtime for a period of 1 to 3 months.
  • the fibroblast cultures were established in the usual manner, the fibroblasts having been seeded in 6-well plates at the rate of 10 5 cells per ml, and then incubation for 24 hours.
  • Lot 2 treatment with Polygonum hydropiper 0.5%
  • Lot 3 treatment with Camellia japonica 5%
  • Lot 4 treatment with the combination Polygonum hydropiper 0.5% + Camellia japonica 5%.
  • the cell viability was determined by the Formazan blue reduction test (MTT test).
  • MTT test Formazan blue reduction test
  • the wells containing them are emptied and the cell mat is rinsed with the culture medium.
  • 200 ⁇ l of a solution of MTT (3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide) at 5 mg / ml are dispensed into all wells and the plates are incubated. at 37 ° C for 3 hours.
  • the wells are again emptied by inversion, and the cellular mat is fixed for 1 minute with 200 ⁇ l of formo-calcium solution.
  • the cells are then lysed and the Formazan blue crystals are dissolved with 200 ⁇ l of dimethylsulfoxide.
  • the optical density (OD) of the plates is read, after homogenization of the staining by stirring, using a spectrophotometer at 570 nm, thus making it possible to know the relative quantity of living and metabolically active cells.
  • optical density (OD) after 24 hours of contact is shown in the table below.
  • Keratinocytes of human origin were inoculated on 0.5 cm 2 polycarbonate filters in a defined medium (modified MCDB 153) and supplemented. The cells have been cultured for 14 days at the air / liquid interface, the culture medium being changed every two days. The epidermis thus formed were used in the study from the 17th day of culture.
  • the test was performed in duplicate for each experimental time of 6 and 24 hours.
  • MDA malondialdehyde
  • the experimental protocol is the same as that of Example 4 above, with the exception of the constitution of the batches, each test being performed in duplicate after 24 hours of contact of the extracts studied with the reconstituted epidermis.
  • Lot 2 positive control epidermis treated with hypoxanthine / xanthine oxidase.
  • Lot 3 epidermis treated with vitamin E + hypoxanthine / xanthine oxidase.
  • Camellia japonica 5% Camellia japonica 5%.
  • HXO Camellia + hypoxanthine / xanthine oxidase
  • the cell homogenates are resuspended in:
  • the MDA is assayed by fluorescence measurement, after separation of the MDA-TBA complex by HPLC chromatography, using a Jasco 821-FI detector with excitation at 515 nm and emission at 553 nm, with eluent methanol: water (40:60 v / v), the pH being adjusted to 8.3 by 1M KOH.
  • Protein assay is performed according to the Bradford method. The increase in absorbance at 595 nm is propor ⁇ tional to the protein concentration determined using a Unicam 8625 spectrophotometer.
  • HXO hypoxanthine / xanthine oxidase
  • MMP1, MMP2 and MMP9 on human fibroblasts in culture.
  • the fibroblast cultures are identical to those of Example 4 above.
  • the four batches used are the same as in Example 4.
  • the test was conducted in triplicate after 24 hours of contact of the products studied with human fibroblasts in culture.
  • the MMP2 assay was performed by the ELISA kit at the level of the culture medium. The results are summarized in the table below.
  • the invention was made on the same human fibroblasts in culture as those of Example 4 above.
  • the test was conducted in triplicate after 24 hours of contact of the products studied with human fibroblasts in culture, in the presence of substrate N-succinyl triananine paranothroanilide (SANA).
  • SANA substrate N-succinyl triananine paranothroanilide
  • the fibroblasts were seeded in multiwell plates at 10 5 cells per well. They were then incubated with 2% FCS and RMPI for 24 hours, then the FCS was replaced by 0.2% BSA and the cells were incubated for 24 hours in the presence of the products studied. At the end of treatment, the cells were scraped off and the enzymes were extracted from the cell pellet using 0.1% Triton X-100 in Tris-HCl buffer at pH 8, Brij 0, 1% and 20%. ⁇ of a solution of SANA (125 mM) in N-ethyl pyrrolidone. The reaction was initiated at 37 ° C. and stopped by addition of 50 ⁇ l of acetic acid. The results are summarized in the table below.

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Abstract

L'invention concerne une composition utilisable en dermatologie et/ou en cosmétique La composition comprend une quantité efficace d'un extrait de Camellia japonica et d'un extrait de Polygonum hydropiper, en association. Application aux compositions cosmétiques et dermato- logiques destinées au traitement ou à la prévention des signes du vieillissement cutané et des vergetures.

Description

COMPOSITION A BASE DE CAMELLIA JAPONICA ET POLYGONUM HYDROPIPER POUR LA PROTECTION DE LA PEAU
La présente invention concerne une nouvelle composition cosmétique et/ou dermatologique destinée à assurer la protec¬ tion de l'épiderme, et plus particulièrement une composition à base d'extrait de Camellia japonica présentant un effet de protection de la peau, plus particulièrement un effet de prévention et de traitement des vergetures.
La peau constitue un véritable organe comprenant plusieurs couches intégrées, allant de la couche super¬ ficielle, l'épiderme, jusqu'aux couches plus profondes, le derme et l'hypoderme, et chacune possède des propriétés spécifiques permettant à l'ensemble de réagir et de s'adapter aux conditions de son environnement.
L'épiderme, principalement composé de kératinocytes (90% des cellules épidermiques ) , de mélanocytes (2 à 3% des cellules épidermiques) et des cellules de Langerhans, a une épaisseur variable selon les différentes parties du corps. Etant donné qu'il constitue la couche externe de la peau, l'épiderme joue un rôle fondamental pour assurer la protection et le maintien d'une bonne trophicité. C'est pourquoi de nombreuses compositions ont été mises au point afin de le protéger et d'améliorer ses fonctions, et notamment de renforcer son élasticité et sa fermeté.
Le derme, plus épais, solide, riche en nerfs, en vaisseaux sanguins et en glandes sudoripares, se compose principalement de collagène, d'élastine et de protéoglycanes . Ces trois types de molécules sont synthétisés par les fibroblastes dermiques. Les fibres de collagène, qui représen¬ tent 70% du poids sec du derme, assurent la résistance mécanique et la texture de la peau, l'élastine est responsable de l'élasticité, et les protéoglycanes jouent un rôle majeur de structure et d'hydratation de la peau. D'autres cellules comme les macrophages et les leucocytes sont également présentes dans la couche du derme. L'hypoderme, qui est la couche la plus profonde de la peau, contient les adipocytes qui produisent des lipides pour que le tissu sous-cutané fabrique une couche grasse protégeant les muscles, les os et les organes internes contre les chocs.
La peau, et chacune de ses couches constitutives, peut subir des dégradations provoquées par des causes internes ou externes, par exemple le vieillissement et des étirements excessifs .
Le vieillissement de la peau se manifeste par des signes tels que la formation de rides plus ou moins profondes et étendues, outre une perte d'élasticité et un amincissement. L'apparition des premières rides est un phénomène qui peut être aggravé par des agressions physiques ou chimiques provenant de la pollution, de l'exposition aux rayons ultra- violets ou des modes de vie qui accélèrent le vieillissement cutané .
Un équilibre entre dégradation et synthèse tissulaire existe chez les sujets normaux. Ainsi, la matrice extra¬ cellulaire peut être dégradée par des métallo-protéinases qui se répartissent essentiellement en trois groupes principaux qui sont les collagénases , les gélatinases et stromelysines . Par exemple, la fibroblaste collagénase (MMP-1) fait partie des collagénases, la gélatinase A (MMP-2) et la gélatinase B (MMP-9) sont des gélatinases, et la stromelysine-1 (MMP-3) et la matrilysine (MMP-7) sont des stromelysines. Un excès de métallo-protéinases entraîne une dégradation de biomolécules telles que collagène, protéoglycanne et gélatine, qui peut avoir des conséquences néfastes sur le tissu épidermique. Aussi, de nombreuses études ont été consacrées aux propriétés inhibitrices des métallo-protéinases de diverses substances.
Outre le vieillissement, une autre cause de dégradation de la peau est la formation de vergetures, ou striae distensae ou striae atrophicae, qui sont des petites stries ou déchi¬ rures de forme allongée, de longueur souvent comprise entre 5 et 15 cm environ, dues à une atrophie du réseau cutané qui résiste mal à des distensions importantes auxquelles la peau peut être soumises dans des conditions particulières.
Cette affection de la peau se rencontre principalement chez les femmes enceintes, au niveau de l'abdomen, mais elle peut aussi apparaître chez des personnes obèses dans le cas de prise de poids rapide. Elle a longtemps été considérée comme provoquée par un effet mécanique provoquant la distension de la peau, mais on estime aujourd'hui qu'elle peut aussi être due à un hyperfonctionnement des glandes surrénales (syndrome de Cushing) . Un traitement par des corticoïdes peut avoir pour effet secondaire la formation de vergetures en perturbant la biosynthèse des fibroblastes dermiques, entraînant une diminution de la formation de collagène, d'élastine et de protéoglycanes , une inhibition partielle de la synthèse de l'acide hyaluronique et du chondroitine sulfate, ainsi qu'une altération de la production de protéines. La formation des vergetures s'accompagne généralement d'un phénomène inflam¬ matoire. Ces effets ont pour conséquence une rupture du tissu conj onctif .
Les vergetures peuvent affecter des zones relativement étendues de la peau, se présentant sous forme de stries de couleur rouge violacée qui évolue avec le temps vers une couleur plus claire. Elles procurent un effet inesthétique qui peut avoir des conséquences psychologiques néfastes chez certains sujets et il est donc important de pouvoir mettre au point des traitements susceptibles de les prévenir, de les masquer ou de les éliminer.
On propose parfois le traitement des vergetures au moyen d'un laser mais les résultats sont souvent peu satisfaisants. Divers traitements de nature essentiellement cosmétique, agissant sur l'épiderme, ont aussi été utilisés, afin de masquer les vergetures, par exemple au moyen de compositions à base de silicium organique, d'acides aminés tels que la proline, des huiles polyinsaturées et insaponifiables , des vitamines à action antiradicalaire, des dérivés de Centella asiatica, ou encore des dérivés d'acide rétinoïque tels que la trétinoïne, etc. Ces traitements permettent au mieux d'atténuer les effets disgracieux des vergetures mais ne les font pas disparaître.
Ainsi, la demande de brevet WO 0019974 décrit l'utili- sation de peptides de soja et de tripeptides constitués de glycine, histidine et lysine, pour la prévention et le traitement des vergetures de la peau. Le brevet US 7429386 décrit le traitement des vergetures par administration locale de toxine botulique par voie intradermique.
De nombreux extraits végétaux ont été proposés dans des compositions cosmétiques et dermatologiques susceptibles de procurer des effets utiles dans diverses applications.
Par exemple, le brevet FR-A-2 848 116 décrit une composition cosmétique et/ou dermatologique à base d'extrait de Siegesbeckia agissant comme inhibiteur de métallo- protéinases matricielles, en association avec des lipopeptides pour le traitement et la prévention des rides et de la perte d'élasticité de la peau. La demande WO-A-2007/144518 décrit l'utilisation d'un extrait de graines de mimosa, provenant en particulier des espèces Acacia dealbata, Acacia farnesiana ou Acacia decurrens, qui a pour effet de favoriser fortement la synthèse des collagènes.
Dans le cas du traitement des vergetures, il est souhaitable de disposer de plantes susceptibles d'avoir une activité générale sur les radicaux libres, sur la protection de la matrice extra-cellulaire (les métalloprotéinases ) et sur la protection de l'élastine (effet anti-élastasique) . Une telle activité peut en effet annihiler une des principales causes de la formation des vergetures rappelées ci-dessus tout en renforçant l'élasticité et la fermeté de la peau.
Camellia japonica, communément dénommé camélia, est une plante de la famille des théaceaes originaire de l'Asie de l'est et du sud-est, notamment le Japon, la Corée et la Chine, se présentant sous forme d'un arbuste pouvant atteindre 6 à 7 m. Parmi les nombreuses espèces du genre Camellia, Camellia japonica est bien connue pour la qualité et la beauté de ses fleurs de couleur rouge ou rose. En médecine traditionnelle chinoise, les graines de Camellia japonica ont été utilisées pour leur activité anti-inflammatoire, et les fleurs pour leur effet hémostatique dans le traitement de 1 ' hématémèse . Des études ont montré la présence de saponines dans les fruits et les graines, de triterpénoïdes dans les racines, et de glucosides de flavonol dans les feuilles, présentant des propriétés anti-oxydantes, comme décrit par K. Onodera et al., Biosc. Biotech. Biochem. 70, 1995-1998 (2006) . La plante est également riche en polyphénols et contient une essence aromatique. L'activité anti-herpétique de feuilles de Camellia japonica est décrite dans US 5.411.733. Le brevet FR 2815862 décrit une composition anti-âge associant un extrait de Camellia (par ex. C. sinensis) et un caroténoïde tel que l' - et le β-carotène et le lycopène. Cette association aurait des effets potentialisés de stimulation de la synthèse du colla- gène, mais aucun résultat expérimental n'est fourni.
Polygonum hydropiper, communément dénommé poivre d'eau, est une plante de la famille des polygonacées riche en tanins et dérivés flavoniques. Elle contient aussi une huile essentielle et des aldéhydes sesquiterpéniques qui lui confèrent sa saveur brûlante justifiant sa dénomination commune de poivre d'eau. Elle a été décrite comme ayant une activité hémostatique, diurétique et hypotenseur. Des extraits de racine de Polygonum hydropiper auraient une activité contre la fertilité, comme écrit par S.K. Garg et al., J. Reprod. Fert. 29, 521-423 (1972). L'activité antibactérienne et l'effet hydratant de Polygonum hydropiper (ou Persicaria hydropiper) ont aussi été mentionnés par Kim Jung Eun et al., Korean J. Microbiology and Biotechnology, vol. 38, pp. 112-115 (2010) .
Young Heui Kim et al., "J. Cosmetic Science" vol. 58, pp. 19-33 (2007) décrit l'effet antiradicalaire, anti-élastase et anti-MMP de plusieurs plantes provenant de l'île de Jeju au sud de la Corée, dont Camellia japonica (feuilles) et Persicaria hydropiper (plante entière), qui inhibent l'exprès- sion de MMP-1 dans des cellules de fibroblastes et pourraient donc être des actifs potentiels de compositions anti-âge. Toutefois, l'association de ces deux substances n'est pas suggérée, non plus que leurs effets dans le traitement des vergetures.
Bien que de nombreuses compositions dermatologiques et cosmétiques aient été proposées, il existe toujours un besoin de pouvoir disposer de nouvelles compositions topiques alternatives permettant de protéger la peau en luttant efficacement contre les signes du vieillissement cutané et contre les vergetures, et notamment des compositions topiques à base d'extraits végétaux appropriés provenant plus particu¬ lièrement de plantes connues pour leurs propriétés favorables à une telle activité.
Les études effectuées par la demanderesse ont montré qu'il est possible de protéger l'épiderme et d'agir effica¬ cement contre les signes du vieillissement cutané et contre les vergetures, en utilisant des compositions topiques à base d'extraits d'une plante de l'espèce Camellia japonica, additionnées d'extraits d'une plante de l'espèce Polygonum hydropiper. En effet, les études ont montré que les extraits de Camellia japonica possèdent une action efficace contre les rides de vieillissement cutané et contre les vergetures, tant préventive que curative, et que cette action se trouve potentialisée par l'addition d'extraits végétaux provenant de Polygonum hydropiper.
Les compositions de l'invention se distinguent en ce qu'elles comprennent un extrait d'une plante de l'espèce Camellia japonica en association avec un extrait d'une plante de l'espèce Polygonum hydropiper en une quantité efficace pour procurer une protection de l'épiderme contre les signes du vieillissement cutané et contre les vergetures, ainsi que des supports et excipients acceptables en dermatologie et en cosmétologie .
La présente invention a donc pour objet une nouvelle composition cosmétique et/ou dermatologique à base de Camellia japonica, et plus particulièrement à base d'extrait de Camellia japonica, en association avec des extraits de Polygonum hydropiper.
Une telle composition présente d'excellentes propriétés utilisables en cosmétique et en dermatologie pour la protection de la peau, non seulement contre les signes du vieillissement cutané mais aussi contre les vergetures.
La présente invention a également pour objet une composition topique à base de l'association d'un extrait de Camellia japonica et d'un extrait de Polygonum hydropiper pour la prévention et le traitement des signes du vieillissement cutané et des vergetures.
La présente invention a encore pour objet un procédé cosmétique non thérapeutique pour prévenir et combattre les signes du vieillissement cutané et les vergetures de la peau, consistant à appliquer sur les zones de la peau concernées une composition topique contenant une quantité efficace de l'association d'extrait de Camellia japonica et d'extrait de Polygonum hydropiper selon la présente invention.
L'invention a également pour objet une composition pharmaceutique à base d'un extrait de Camellia japonica et d'un extrait de Polygonum hydropiper pour la protection de l'épiderme et plus particulièrement la prévention et le traitement des vergetures.
Les compositions suivant la présente invention se distin¬ guent en ce qu'elles comprennent un extrait de Camellia japonica en association avec un extrait de Polygonum hydropiper en une quantité efficace pour procurer une protection de la peau, ainsi que des supports et excipients acceptables en dermatologie et en cosmétologie.
Ainsi, les compositions topiques de l'invention à base d'extraits de Camellia japonica et d'extrait de Polygonum hydropiper peuvent être utilisées avantageusement en dermatologie et en cosmétologie pour le traitement ou la prévention des signes du vieillissement cutané et des vergetures . Les essais effectués par la demanderesse ont montré que, parmi les diverses parties de la plante, il est préférable d'utiliser les parties aériennes et en particulier les feuilles. L'espèce Camellia japonica est facilement disponible et la conservation des feuilles ne soulève généralement pas de difficulté technique.
Les extraits de Camellia japonica utilisés dans les compositions suivant la présente invention sont de préférence obtenus sous forme d'extrait aqueux provenant des parties aériennes de la plante préalablement séchées, broyées en poudre fine que l'on laisse macérer dans de l'eau pendant environ 12 à 14 heures.
Suivant une forme avantageuse de réalisation, l'extrait utilisable dans l'invention est obtenu par macération à partir de feuilles de Camellia japonica broyées et réduites en poudre laissée macérer dans de l'eau dans un rapport poudre/eau de 40% en poids. Le produit est ensuite décanté, exprimé puis filtré .
L'extrait aqueux de Camellia japonica se présente sous la forme d'un liquide de couleur jaune à ambré, d'odeur caractéristique, soluble dans l'eau et dans l'éthanol, se caractérisant par :
pH compris entre 3,4 - 4,0
densité 0,990 - 1,050
indice de réfraction 1,325 - 1,345
matière sèche (%) 0,5 - 2,5
polyphénols (%/matière sèche) 1,7
La quantité de polyphénols pour 100 g d'extrait est comprise entre 0,0085 et 0,0425.
Les extraits de Polygonum hydropiper utilisés dans
1 ' invention sont obtenus à partir des parties aériennes de la plante, de préférence sous forme d'extraits aqueux après macération de la plante préalablement séchée et broyée. Suivant une forme préférentielle de réalisation, on utilise les sommités (feuilles et tiges) ou les feuilles de Polygonum hydropiper, qui sont séchées, broyées et réduites en poudre que l'on fait macérer dans l'eau, le rapport poudre / eau étant de 40%, environ 24 heures. Après décantation, expression et filtration, le filtrat est atomisé et la poudre obtenue est diluée à 50% avec de la maltodextrine .
L'extrait aqueux de Polygonum hydropiper se présente sous la forme d'une poudre de couleur beige à brun, d'odeur caractéristique, soluble dans l'eau, se caractérisant par : pH (solution 1%) entre 4,9 - 6,9
densité 0,990 - 1,050
indice de réfraction 1,325 - 1,345
matière sèche (%) 0,5 - 2,5
acide gallique (HPLC) présence
polyphénols (%/matière sèche) 4,4
Les extraits utilisés dans les compositions de 1 ' inven- tion sont de l'ordre de 0,05 à 2,0% pour le Polygonum hydropiper et 0,1 à 10,0% pour Camellia japonica par rapport au poids total de la composition. Les extraits peuvent être mélangés pour être incorporés dans la composition et la quantité de mélange utilisée est généralement comprise entre 0, 1 et 12% en poids par rapport au poids total de la compo¬ sition.
Les extraits de feuilles de Camellia japonica et les extraits de Polygonum hydropiper inclus dans les compositions suivant la présente invention ont montré dans des tests in vitro des effets de protection de l'épiderme, et plus particulièrement :
- une activité sur les métalloprotéinases montrant un effet protecteur et régénérant sur le collagène et l'élas- tine ;
- une activité anti-élastase significative, impliquant une protection de l'élastine assurant une plus grande fermeté de la peau et une protection contre les vergetures ;
- un effet anti-radicalaire important assurant une protection efficace des cellules contre les effets de stress.
Les tests ont été effectués en utilisant des échantillons dosés à 0,5% d'extrait de Polygonum piper, 5% de Camellia japonica, et une association des deux extraits, sur des fibroblastes humains en culture et sur des épidermes reconsti¬ tués (Skinethic®) .
Les résultats, détaillés ci-après, ont mis en évidence l'effet protecteur sans effet secondaire néfaste, et en particulier :
- un effet significatif, potentialisé par l'association des deux extraits, sur l'expression des métalloprotéinases 1 (MMP1), 2 (MMP2) et 9 (MMP9) permettant de stimuler la régénération du collagène et de l'élastine ;
- un effet important de réduction de l'élastase au niveau des fibroblastes humains en culture, avec une potentialisation de l'effet par l'association des deux extraits, montrant l'effet de protection contre les vergetures ;
- un effet anti-radicalaire aussi bien dans des conditions physiologiques que dans des conditions d'induction par 1 ' hypoxanthine / xanthine oxydase, montrant l'efficacité sur la protection des cellules cutanées sous l'effet du stress qui est un facteur déclenchant de la formation des vergetures.
Les résultats sont explicités dans les exemples ci-après et démontrent la potentialisation des effets de chacun des composants puisque, à dose équivalente, les résultats procu¬ rés par l'association sont supérieurs à la moyenne des résultats des deux composants.
Les compositions selon l'invention peuvent contenir, outre un extrait de feuilles de Camellia japonica et un extrait de Polygonum hydropiper, des actifs secondaires complétant avantageusement leur activité, et compatibles, c'est-à-dire non susceptibles de réagir les uns sur les autres ou de masquer ou limiter leurs effets respectifs. Plus particulièrement, les actifs secondaires peuvent être choisis parmi un extrait de graines de mimosa et un extrait de graines de souci agissant favorablement sur la stimulation des collagènes néoformés, de la Centella asiatica, du monométhyl- silanol, de la proline, ou encore du beurre de Karité. La composition selon l'invention peut comprendre par exemple entre 0,1 et 2% en poids d'extrait de Polygonum piper, entre 0,1 et 6% en poids d'extrait de Camellia japonica, et, le cas échéant, entre 1 et 5% en poids d'extrait de graines de mimosa et/ou entre 2 et 6% en poids de Centella asiatica, et/ou entre 0,5 et 2% en poids de monométhylsilanol et de proline par rapport au poids total de la composition. Suivant une forme préférentielle, ces concentrations sont respecti¬ vement de 0,2 à 1% en poids d'extrait de Polygonum hydropiper, 1 à 6% en poids d'extrait de Camellia japonica, 2 à 5% en poids d'extrait de graines de mimosa et entre 3 et 5% en poids de Centella asiatica par rapport au poids total de la composition .
Comme indiqué ci-dessus, les compositions de l'invention peuvent comprendre entre 0,1% et 10% en poids d'extrait de feuilles de Camellia japonica, tel que défini ci-dessus, par rapport au poids total de la composition, et de préférence entre 1 et 6% en poids. La concentration en extrait de Polygonum hydropiper est comprise généralement entre 0,05 et 2,0%, et de préférence entre 0,1 et 1,0%.
Le choix de la concentration en chacun des composants dans la composition peut être fait en fonction de l'utili¬ sation envisagée. Pour un traitement protecteur prolongé, on utilise de préférence des doses plus faibles, sous forme de lait ou de crème dosée à environ 1 à 6% (total des deux composants), tandis qu'un traitement ponctuel peut nécessiter des doses plus élevées, par exemple un sérum dosé entre 6 et 12%, où, de préférence, les doses d'extraits de Camellia japonica et de Polygonum hydropiper sont plus élevées.
Ainsi, ces compositions topiques peuvent être utilisées avantageusement en dermatologie et en cosmétologie pour le traitement ou la prévention des signes du vieillissement cutané ainsi que pour la prévention et le traitement des vergetures .
L'association d'extrait de Camellia japonica, d'extrait de Polygonum hydropiper suivant la présente invention, complétée le cas échéant par des extraits de graines de mimosa et des extraits de Centella asiatica comme indiqué ci-dessus, utilisée dans des conditions normales d'emploi pendant 20 à 30 jours consécutifs, pour traiter des vergetures, a démontré une excellente tolérance cutanée.
Les compositions conformes à la présente invention peuvent être présentées sous les formes galéniques classi¬ quement utilisées pour une application topique, c'est-à-dire sous forme de lotion, gel, émulsion (en particulier crème ou lait) , masque, pommade, nanocapsules , liposomes ou encore des patches transdermiques, contenant des excipients et supports usuels compatibles et pharmaceutiquement acceptables. Elles sont utilisées de préférence sous forme de crèmes, lait sérum et lotion.
Ces formes d'administration par voie topique sont préparées par les techniques usuelles, et par exemple, dans le cas d'une crème, par dispersion d'une phase grasse dans une phase aqueuse pour obtenir une émulsion huile dans eau, ou inversement pour préparer une émulsion eau dans huile. Dans le cas de crèmes, on préfère utiliser des émulsions à structure lamellaire contenant peu de produits éthoxylés ou n'en contenant pas du tout.
Dans le cas des nanocapsules et des liposomes, il peut être avantageux d'utiliser un extrait aqueux de préférence à un extrait hydroglycolique .
Les compositions topiques selon l'invention peuvent comprendre des excipients appropriés pour une administration topique externe, en particulier des excipients acceptables sur le plan dermatologique et cosmétologique . Ces excipients appropriés pour la formulation sont bien connus de l'homme du métier et comprennent en particulier des agents de pénétration tels que 1 ' éthoxydiglycol , le phytantriol, 1 ' octyl dodécanol et l'escine ; les épaississants tels que les gommes naturelles et les polymères de synthèse ; les émollients et les tensio- actifs tels que 1 ' octanoate de cétéaryle, le myristate d ' isopropyle, 1 ' isononanoate de cétéaryle, la diméthicone, la cyclométhicone, le 3-diisostéarate de polyglycéryle, le poly- isobutène hydrogéné, l'alcool cétylique, le palmitate cétyli- que, le phosphate cétylique ; les émulsifiants ; les conser¬ vateurs tels que le phénoxyéthanol , le parahydroxybenzoate de méthyle (méthylparaben) , le parahydroxybenzoate d'éthyle (éthylparaben) et le Phenonip® associant du phénoxyéthanol et des parahydroxybenzoates ; les colorants ; les parfums ; etc.
D'autres ingrédients peuvent être utilisés dans les compositions : les agents hydratants tels que le propylène glycol, la glycérine, le butylène glycol, le sel de sodium de l'acide pyrrolidone carboxylique (sodium PCA) , et également les vitamines antioxydantes telles que la vitamine E, par exemple l'acétate de tocophérol ou le tocotriénol, la vitamine C, les polyphénols naturels. On peut également ajouter à la composition des agents conditionneurs de la peau tels que le nylon et le nitrure de bore, ainsi que des agents de protection contre les rayons ultraviolets, et par exemple des filtres solaires UV-A et UV-B hydrophiles ou lipophiles, choisis parmi la benzophénone ou un dérivé de benzophénone tel que la 2-hydroxy-4-méthoxy-benzophénone (Eusolex® 4360), ou un ester d'acide cinnamique et plus particulièrement le méthoxy- cinnamate d'octyle (Eusolex® 2292), le méthoxycinnamate d ' éthyl-2-hexyle (Parsol MCX®) , ou encore un cyano-β , β- diphénylacrylate tel que 1 ' octocrylène (Eusolex® OCR), le 4- méthylbenzylidène camphre (Eusolex 6300®) , et des dérivés du dibenzoylméthane tels que le 4-isopropyl dibenzoylméthane (Eusolex 8020), le t-butyl-méthoxy dibenzoylméthane (Parsol 1789®), et le 4-méthoxy-dibenzoylméthane . On peut aussi utiliser des pigments formant écran anti-ultraviolet, comme par exemple le dioxyde de titane, l'oxyde de zinc, l'oxyde de zirconium ou encore l'oxyde d'aluminium.
Les exemples suivants illustrent l'invention plus en détail sans en limiter la portée. Dans tous les exemples de compositions qui suivent, les parties sont exprimées en poids, sauf indication contraire. Exemple 1
Suivant les techniques classiques, on prépare un lait anti-vergeture ayant la composition pondérale suivante.
Phase A
Huile d'amandes douces 2,00
Beurre de karité 2,00
Octyldodécanol 2,00
PEG 6/32 stéarate 5,00
Capryl/caprique triglycérides 5,00
Tocophérol 0,50
Ester glycérique de Vitamine F 1,00
Undécylénate de glycéryle 0,50
Phase B
Eau déminéralisée qsp 100,00
Pentylène glycol 5,00
Acide anisique 0,10
Monométhylsilanol 1,00
Hydroxyproline 0,50
Gomme xanthane 0,50
Extrait de Camellia japonica 5,00
Extrait de Centella asiatica 5,00
Extrait de Polygonum hydropiper (sec) 0,50
Parfums 0,50
L'extrait de Camellia japonica utilisé dans la compo¬ sition ci-dessus est un extrait aqueux obtenu par traitement de feuilles broyées et réduites en poudre. L'extrait de Polygonum hydropiper est un extrait sec.
La phase grasse A est chauffée à 70-75°C tandis que la phase aqueuse B est chauffée à 75°C, puis les deux phases sont mélangées soigneusement sous agitation. Les extraits et les parfums sont ajoutés au mélange à la température de 40 °C et le pH est ajusté à 6,2 par addition de potasse ou d'acide citrique .
Le lait ayant la composition indiquée ci-dessus peut être utilisé en application sur les vergetures, une à deux fois par j our . Exemple 2
Suivant les techniques classiques, on prépare une lotion raffermissante ayant la composition pondérale suivante.
Eau déminéralisée qsp 100,00
Carboxy vinyl polymère 0,20
Pentylène glycol 5, 00
Butylène glycol-1,3 2,50
Extrait de Centella asiatica 5, 00
Extrait de Camellia japonica 3, 00
Extrait de Polygonum hydropiper 0,20
Proline 1,00
Amandate de polyglycéryl-10 2,50
Acide levulinique et levulinate de sodium 0, 60
Parfums 0,10
La lotion est préparée en réalisant le gel de polymère dans l'eau, en neutralisant et en ajoutant le reste des composants à froid.
Exemple 3
Suivant une technique usuelle, on prépare une crème raffermissante ayant la composition pondérale suivante.
Phase A
Eau déminéralisée qsp 100,00
Tetrasodium glutamate diacétate (sol) 0,10
Pentylène glycol 5,00
Gomme de sclerotium et gomme xanthane 0,20
Alcools Ci2-Ci6 et acide palmitique
et lécithine hydrogénée 5,00
Phase B
Tocophérol 0,50
Capryl/caprique triglycérides 5,00
Squalane 8,00
Octyl dodécanol 5,00
Alcool béhénylique 2,00
Ethyl hexyl glycérine 0,30
Palmitoyl proline 1,00 Phase C
Eau déminéralisée 10,00
Matrixyl 3000 1,00
Monométhylsilanol 2,00
Madécassoside 0,20
Extrait de Polygonum hydropiper 0,50
Extrait de Camellia japonica 5,00
Sodium PCA 1,00
Phase D
Silicate de magnésium 0,50
Phase E
Parfums 0,10
La lécithine hydrogénée est hydratée dans l'eau à 75°C puis les autres ingrédients de la phase A sont ajoutés et mélangés. La phase B, préalablement homogénéisée sous turbine refroidie, est ajoutée à 78°C, puis les autres phases sont ajoutées successivement à 40°C, l'ensemble est mélangé et refroidi progressivement.
La crème ayant la composition indiquée ci-dessus est utilisée en application sur le visage, une fois par jour au coucher pendant une période de 1 à 3 mois.
Exemple 4
L'étude in vitro des effets des extraits de Camellia japonica et de Polygonum hydropiper utilisés dans la présente invention sur la protection de l'épiderme a été faite sur des fibroblastes humains en culture et sur des épidermes recons¬ titués (Skinethic®) , comme indiqué plus haut.
Les cultures de fibroblastes ont été établies de manière usuelle, les fibroblastes ayant été ensemencés dans des plaques 6 puits à raison de 105 cellules par ml, puis incubation pendant 24 heures.
Quatre lots de fibroblastes ont été constitués pour les tests .
Lot 1 : témoin ne recevant aucun produit
Lot 2 : traitement par Polygonum hydropiper 0,5% Lot 3 : traitement par Camellia japonica 5%
Lot 4 : traitement par l'association Polygonum hydropiper 0,5% + Camellia japonica 5%.
Etude de la viabilité cellulaire :
Après 24 heures d'incubation des cellules de fibro- blastes, la viabilité cellulaire a été déterminée par le test de réduction au bleu de Formazan (test MTT) . Après incubation des cellules de chaque lot, les puits les contenant sont vidés et le tapis cellulaire est rincé avec le milieu de culture. On distribue dans tous les puits 200 μΐ d'une solution de MTT (bromure de 3- (4, 5-diméthylthiazol-2-yl) -2, 5-diphényltétrazo- lium) à 5 mg/ml, et les plaques sont incubées à 37°C pendant 3 heures. Les puits sont à nouveau vidés par retournement, et le tapis cellulaire est fixé pendant 1 minute par 200 μΐ de solution de formo-calcium. Les cellules sont ensuite lysées et les cristaux de bleu de Formazan sont dissous par 200 μΐ de diméthylsulfoxyde . La densité optique (DO) des plaques est lue, après homogénéisation de la coloration par agitation, au moyen d'un spectrophotomètre à 570 nm, permettant ainsi de connaître la quantité relative de cellules vivantes et actives métaboliquement .
La densité optique (DO) après 24 heures de contact est indiquée dans le tableau ci-dessous.
La viabilité cellulaire a aussi été contrôlée au moyen des mêmes lots 1 à 4 sur un modèle in vitro d'épidermes reconstitués (Skinethic®) .
Des kératinocytes d'origine humaine ont été ensemencés sur des filtres en polycarbonate de 0,5 cm2 dans un milieu défini (MCDB 153 modifié) et supplémenté. Les cellules ont été cultivées pendant 14 jours à l'interface air/liquide, le milieu de culture étant changé tous les deux jours. Les épidermes ainsi formés ont été utilisés dans l'étude à partir du 17ème jour de culture.
L'essai a été effectué en duplicate pour chaque temps expérimental de 6 et 24 heures.
La viabilité cellulaire a été testée par réaction colorimétrique au sel de tetrazolium (MTT) . La couleur est notée après incubation de 30 minutes à température ambiante. Une couleur bleue - pourpre démontre la viabilité des cellules de 1 ' épiderme .
Les produits testés (lots 1, 3 et 4 ci-dessus) ont été déposés à raison de 10 μΐ / cm2 sur les épidermes reconstitués pendant 24 heures. Les résultats sont indiqués au tableau ci- après .
La viabilité cellulaire a aussi été contrôlée par examen histologique . Les épidermes reconstitués sont fixés dans une solution à 10% de formaldéhyde et inclus dans des blocs de paraffine. Des coupes verticales de 4 ym ont été colorées à 1 ' hématoxyline / éosine et photographiées sous microscope optique .
L'essai a montré que l'extrait de Camellia japonica (5%) et l'association des extraits de Camellia japonica (5%) et de Polygonum hydropiper (0,5%) suivant l'invention, déposés à raison de 10 μΐ/cm2, sur des épidermes reconstitués traités pendant 24 heures, comparativement à des épidermes témoins, n'ont induit aucune toxicité. Après coloration HES, les images histologiques des épidermes traités sont similaires à celles des épidermes témoins. Ces résultats mettent en évidence l'absence de cyto- toxicité des extraits utilisés dans l'invention.
Exemple 5
L'étude de l'effet antiradicalaire de l'association d'extraits suivant la présente invention a été faite sur un modèle in vitro d'épidermes reconstitués (Skinethic®) .
L'activité antiradicalaire a été mise en évidence par dosage du malondialdéhyde (MDA) après son induction par 1 ' hypoxanthine / xanthine oxydase. Le MDA est en effet l'un des marqueurs essentiels de la cytotoxicité par les processus oxydatifs et le stress, et peut donc renseigner sur l'activité antiradicalaire d'une substance donnée (indice de lipoperoxy- dation) .
Le protocole expérimental est le même que celui de l'Exemple 4 ci-dessus, à l'exception de la constitution des lots, chaque essai étant réalisé en duplicate après 24 heures de contact des extraits étudiés avec l'épiderme reconstitué.
Lot 1 : épiderme témoin ne recevant aucun produit
Lot 2 : épiderme témoin positif traité par l'hypoxan- thine/xanthine oxydase.
Lot 3 : épiderme traité par la vitamine E + hypoxan- thine/xanthine oxydase.
Lot 4 : épiderme traité par Camellia japonica 5%
Lot 5 : épiderme traité par Polygonum hydropiper 0,5% +
Camellia japonica 5%.
Lot 6 : épiderme traité par Camellia japonica 5% + hypo- xanthine/xanthine oxydase (HXO)
Lot 7 : épiderme traité par Polygonum hydropiper 0,5% +
Camellia + hypoxanthine/xanthine oxydase (HXO) .
Après 24 heures de traitement des épidermes reconstitués, les homogénats cellulaires sont remis en suspension dans :
250 μΐ de tampon Tris 50 mM, pH 8, contenant NaCl 0,1M et
EDTA 20 mM.
25 μΐ de SDS à 7% 300 μΐ de HC1 0, IN
38 μΐ d'acide phosphotungstique à 1% dans l'eau
300 μΐ d'acide thiobarbiturique à 0,67% dans l'eau
Après 1 heure d'incubation dans l'obscurité à 50°C puis refroidissement dans l'eau glacée, 300 μΐ de n-butanol sont ajoutés dans chaque tube. Les tubes sont centrifugés à 10000 g à 0°C pendant 10 minutes. La phase supérieure est récupérée pour le dosage du MDA.
Le MDA est dosé par mesure de la fluorescence, après séparation du complexe MDA-TBA par chromatographie HPLC, au moyen d'un détecteur Jasco 821-FI avec une excitation à 515 nm et une émission à 553 nm, avec un éluant méthanol : eau (40:60 v/v) , le pH étant ajusté à 8,3 par KOH 1M.
Le dosage des protéines est réalisé selon la méthode de Bradford. L'augmentation de l'absorbance à 595 nm est propor¬ tionnelle à la concentration des protéines déterminées à l'aide d'un spectrophotomètre Unicam 8625.
Lipoperoxydation physiologique :
Les résultats sont regroupés dans le tableau ci-après.
Ces résultats montrent une protection significative des extraits de l'invention, notamment de l'association d'extraits, vis-à-vis de la lipoperoxydation physiologique. Lipoperoxydation provoquée :
Les résultats sont regroupés dans le tableau ci-après. Substance MDA (μΜ/mg protéine) variation MDA (%)
Témoin 669 ± 33 -
HXO 950 ± 46 +42
Vitamine E + HXO 598 ± 55 -37
C. japonica 5% + HXO 765 ± 61 -19
P. hydropiper 0,5% + 680 ± 50 -28
C. japonica 5% + HXO
HXO = hypoxanthine/xanthine oxydase
Ces résultats montrent une protection significative des extraits de l'invention, et plus particulièrement de l'asso- dation d'extraits, vis-à-vis de la lipoperoxydation provoquée par 1 ' hypoxanthine/xanthine oxydase.
Ces résultats démontrent l'effet antiradicalaire des extraits de la présente invention. La comparaison des résultats obtenus avec Camellia japonica avec ou sans Poly- gonum hydropiper montre que l'association potentialise l'effet antiradicalaire .
Exemple 6
L'évaluation de l'activité des extraits de l'invention sur la régénération cutanée a été faite par étude de la matrice extracellulaire et dosage des métalloprotéinases
(MMP1, MMP2 et MMP9) sur des fibroblastes humains en culture.
Les cultures de fibroblastes sont identiques à celles de l'Exemple 4 ci-dessus. Les quatre lots utilisés sont les mêmes que dans l'Exemple 4.
L'essai a été conduit en triplicate après 24 heures de contact des produits étudiés avec les fibroblastes humains en culture .
Le dosage de la MMP1 a été réalisé par le kit ELISA au niveau du milieu de culture. Les résultats sont regroupés dans le tableau ci-dessous. Substance concentration MMP1
(pg/ml)
Témoin 135,4 ± 9,2 -
P. hydropiper 0,5% 112,3 ± 10,0 -17
C. japonica 5% 105, 9 ± 11,7 -22
P. hydropiper 0,5% 98,7 ± 8,5 -27
+ C. japonica 5%
Ces résultats montrent que les deux extraits de Camellia japonica et de Polygonum hydropiper diminuent significa- tivement l'expression de la métalloprotéinase 1 (MMP1) et que cet effet est potentialisé dans l'association.
Le dosage de la MMP2 a été réalisé par le kit ELISA au niveau du milieu de culture. Les résultats sont regroupés dans le tableau ci-dessous.
Ces résultats montrent que les deux extraits de Camellia japonica et de Polygonum hydropiper diminuent significa- tivement l'expression de la métalloprotéinase 2 (MMP2) et que cet effet est potentialisé dans l'association puisque chaque extrait provoque une diminution très proche (-18 et -20% respectivement) tandis que l'association procure une plus forte diminution (-24%) .
Les résultats du dosage de la MMP9, réalisé par le kit ELISA au niveau du milieu de culture, sont regroupés dans le tableau ci-dessous. Substance concentration MMP9
(pg/ml)
Témoin 97, 8 ± 7,3 -
P. hydropiper 0,5% 82, 6 ± 5, 0 -16
C. japonica 5% 83, 0 ± 6, 1 -15
P. hydropiper 0,5% 75, 0 ± 8, 0 -23
+ C. japonica 5%
Ces résultats montrent que les deux extraits de Camellia japonica et de Polygonum hydropiper diminuent significa- tivement l'expression de la métalloprotéinase 9 (MMP9) et que cet effet est potentialisé dans l'association puisque chaque extrait isolément provoque une diminution très proche (-15 et -16% respectivement) tandis que l'association procure une diminution (-23%) significativement plus importante.
Exemple 7
L'évaluation de l'activité anti-élastase des extraits de
1 ' invention a été faite sur les mêmes fibroblastes humains en culture que ceux de l'Exemple 4 ci-dessus.
L'essai a été conduit en triplicate après 24 heures de contact des produits étudiés avec les fibroblastes humains en culture, en présence de substrat N-succinyl trialanine para- nitro-anilide (SANA) . Les quatre lots utilisés sont les mêmes que dans l'Exemple 4 mais du SANA a été ajouté aux lots 1 à 4.
Les fibroblastes ont été ensemencés dans des plaques multipuits à raison de 105 cellules par puits. Ils ont ensuite été incubés avec 2% de SVF et RMPI pendant 24 heures, puis le SVF a été remplacé par 0,2% de BSA et les cellules ont été incubées pendant 24 heures en présence des produits étudiés. En fin de traitement, les cellules ont été récupérées par grattage et les enzymes ont été extraites du culot cellulaire en utilisant 0,1% de Triton X-100 dans un tampon Tris-HCL à pH 8, Brij 35 0, 1% et 20 μΐ d'une solution de SANA (125mM) dans la N-éthyl pyrrolidone. La réaction a été initiée à 37°C et stoppée par ajout de 50 μΐ d'acide acétique. Les résultats sont regroupés dans le tableau ci-après.
Ces résultats montrent que les extraits de Camellia japonica et de Polygonum hydropiper inhibent significativement l'activité de l'élastase au niveau des fibroblastes humains en culture et que cet effet est potentialisé dans l'association des extraits.

Claims

REVENDICATIONS
1. Composition cosmétique et/ou dermatologique pour application topique, destinée à assurer la protection de la peau, caractérisée en ce qu'elle comprend une quantité efficace d'un extrait de Camellia japonica et d'un extrait de Polygonum hydropiper.
2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que l'extrait de Camellia japonica est obtenu à partir des feuilles de la plante.
3. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que l'extrait de Polygonum hydropiper est obtenu à partir des parties aériennes de la plante.
4. Composition selon l'une quelconque des revendica¬ tions 2 et 3, caractérisée en ce que l'extrait est sous forme d'extrait aqueux.
5. Composition selon la revendication 4, caractérisée en ce que l'extrait est obtenu par macération à partir de feuilles de Camellia japonica et de Polygonum hydropiper réduites en poudre.
6. Composition selon l'une quelconque des revendica- tions précédentes, caractérisée en ce que l'extrait de
Camellia japonica est un liquide se caractérisant par :
pH compris entre 3,4 - 4,0
densité 0,990 - 1,050
indice de réfraction 1,325 - 1,345
matière sèche (%) 0,5 - 2,5
polyphénols (%/matière sèche) 1,7
7. Composition selon l'une quelconque des revendica¬ tions précédentes, caractérisée en ce que l'extrait de Polygonum hydropiper est une poudre se caractérisant par : pH (solution 1%) entre 4,9 - 6,9
densité 0,990 - 1,050
indice de réfraction 1,325 - 1,345
matière sèche (%) 0,5 - 2,5
acide gallique (HPLC) présence polyphénols (%/matière sèche) 4,4
8. Composition selon l'une quelconque des revendica¬ tions précédentes, caractérisée en ce qu'elle comprend de 0,1 à 2,0% d'extrait de Polygonum hydropiper et de 0,1 à 10,0% d'extrait de Camellia japonica par rapport au poids total de la composition
9. Composition selon l'une quelconque des revendica¬ tions 1 à 7, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre un ou plusieurs actifs secondaires choisis parmi un extrait de graines de mimosa, un extrait de graines de souci, un extrait de Centella asiatica, du monométhylsilanol , de la proline et du beurre de Karité.
10. Composition selon la revendication 9, caractérisée en ce qu'elle comprend entre 0,05 et 2% en poids d'extrait de Polygonum hydropiper, entre 0,1 et 6% en poids d'extrait de Camellia japonica, entre 1 et 5% en poids d'extrait de graines de mimosa et/ou entre 2 et 6% en poids de Centella asiatica, et/ou entre 0,5 et 2% en poids de monométhylsilanol et de proline par rapport au poids total de la composition.
11. Procédé cosmétique non thérapeutique pour combattre les signes du vieillissement cutané et les vergetures de la peau, consistant à appliquer sur les zones de la peau concernées une composition contenant une quantité efficace de la composition topique selon l'une quelconque des revendi- cations 1 à 10.
12. Composition comprenant un extrait de Camellia japonica et un extrait de Polygonum hydropiper pour utili¬ sation dans le traitement des vergetures de la peau.
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