ES2115060T5 - Microparticulas, procedimiento para su produccion, asi como la utilizacion de estas para finalidades de diagnostico. - Google Patents
Microparticulas, procedimiento para su produccion, asi como la utilizacion de estas para finalidades de diagnostico.Info
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Abstract
LA INVENCION SE REFIERE A MEDIOS DE CONTRASTE PARA SU UTILIZACION EN DIAGNOSTICO ULTRASONICO, CONSISTIENDO LOS MEDIOS DE CONTRASTE EN MICROPARTICULAS QUE CONTIENEN GAS CON UNA ENVUELTA ELABORADA A BASE DE ACRILATOS POLICIANO O POLIESTERES DE ALFA-, BETA-, O GAMMA SE REFIERE TAMBIEN A UN PROCEDIMIENTO PARA LA ELABORACION DE TALES MEDIOS DE CONTRASTE.
Description
Microparticulas, procedimientos para su
producción, así como la utilización de estas para finalidades de
diagnóstico.
El invento concierne al objeto caracterizado en
las reivindicaciones, es decir a agentes de contraste especiales
para el diagnóstico por ultrasonidos a partir de micropartículas
que contienen gas, cuya envoltura está constituida por
poli(ciano-acrilatos) o poli(ésteres de
ácidos \alpha-, \beta- o
\gamma-hidroxi-carboxílicos), así
como a las micropartículas obtenibles con el procedimiento.
Las micropartículas obtenibles con el
procedimiento conforme al invento, se designan seguidamente las
partículas conformes al invento o las micropartículas conformes al
invento.
Es sabido que mediante inyección periférica de
soluciones que contienen finas burbujas de gas, se pueden conseguir
contrastes cardíacos de ecos (Roelandt, J. Ultrasound Med. Biol.
8:471-492, 1982). Estas burbujas de gas se obtienen
en soluciones fisiológicamente compatibles, p. ej. por
sacudimiento, por otro modo de agitar o por adición de dióxido de
carbono. Sin embargo, éstas no están normalizadas en lo referente a
su tamaño y a su número, y se pueden reproducir sólo de manera
deficiente e insuficiente. Por regla general, tampoco están
estabilizadas, por lo que su vida útil es pequeña. Sus diámetros
medios están situados la mayor parte de las veces por encima del
tamaño de los eritrocitos, de manera tal que no es posible ningún
paso por los capilares pulmonares con subsiguiente contraste de
órganos tales como el lado izquierdo del corazón, el hígado, los
riñones o el bazo. Además de ello, no son adecuadas para
cuantificaciones, puesto que el eco de ultrasonidos, generado por
ellas, se compone de varios procesos, que no pueden ser separados
unos de otros, tales como formación de las burbujas, coalescencia y
descomposición. Así, p. ej. no es posible, con ayuda de este agente
de contraste por ultrasonidos, obtener informaciones acerca de los
tiempos de tránsito a través de la medición de la evolución del
contraste en el miocardio. Para ello, se necesitan agentes de
contraste cuyos cuerpos dispersantes presenten una suficiente
estabilidad.
En el documento de patente europea
EP-0.131.540 se describe la estabilización de las
burbujas de gas mediante azúcares. Con ello se mejoran ciertamente
la reproducibilidad y la homogeneidad del efecto de contraste, pero
estas burbujas no soportan un paso por los pulmones. En los
documentos EP-0.122.624 y 0.123.235 se describe que
el efecto estabilizador de las burbujas de gas, que presentan los
azúcares, azúcar-alcoholes y sales, es mejorado por
la adición de sustancias tensioactivas. Se establece con estos
agentes de contraste por ultrasonidos una facilidad de paso por los
capilares pulmonares y la posibilidad de reproducir la rama
vascular arterial y diferentes órganos, tales como el hígado o el
bazo. Sin embargo, en este caso el efecto de contraste está
limitado al lumen vascular, puesto que las burbujas no son
recibidas por las células tisulares.
Ninguno de los agentes de contraste por
ultrasonidos, que se han descrito, permanece inalterado durante un
prolongado período de tiempo dentro del cuerpo. No son posibles de
realizar con estos agentes ni una reproducción de órganos con
suficiente intensidad de señal mediante enriquecimiento selectivo
después de su administración i.v. (por vía intravenosa), ni
cuantificaciones.
Una encapsulación de gases, tales como por
ejemplo aire, en calidad de agentes de contraste por ultrasonidos,
se describe en el documento EP 0.224.934. El material de las
paredes, utilizado en este caso, consta de una proteína,
especialmente albúmina de suero humano con las conocidas propiedades
alergénicas, a las cuales se pueden agregar los efectos citotóxicos
causados por una desnaturalización.
En el documento de patente publicada EP 0.327.490
se describen micropartículas que contienen gas para el diagnóstico
por ultrasonidos, a base de materiales sintéticos biológicamente
degradables. Estos agentes presentan una vida útil in vivo
suficiente, y después de aplicación por vía intravenosa son
enriquecidos intracelularmente en el sistema reticuloendotelial
(RES, de Retikuloendoteliales System)
y por consiguiente también en el hígado o el bazo. En este documento
se reivindican ciertamente, entre otros, también
poli(ciano-acrilatos) o ácidos \alpha-,
\beta- o
\gamma-hidroxi-carboxílicos como
apropiados materiales de envoltura, pero las partículas conformes
al invento se diferencian de las divulgadas en el documento EP
0.327.490 por el hecho de que la densidad específica de las
partículas es < 0,7 g/cm^{3}.
La menor densidad de las partículas conformes al
invento resulta por lo tanto de que éstas, a igualdad de tamaño,
contienen más cantidad de gas. Puesto que la intensidad del eco de
ultrasonidos, generado por dispersión y reflexión en una burbuja de
gas, es función de la sexta potencia del radio de un núcleo de gas,
las partículas conformes al invento constituyen por consiguiente
agentes de contraste por ultrasonidos considerablemente más
eficaces que los agentes divulgados en el documento EP
0.327.490.
Este aumento del volumen gaseoso es conseguido
conforme al invento mediante una disminución del espesor de pared.
Sorprendentemente, las partículas conformes al invento, a pesar del
menor espesor de pared, son todavía lo suficientemente estables
como para soportar también el paso por los pulmones.
Las nuevas partículas de "paredes delgadas"
se pueden producir mediando utilización del procedimiento conforme
al invento. El tamaño de partículas, exigido en atención a la
capacidad de pasar por los capilares, es de < 10 \mum. Se
prefieren partículas con un diámetro medio de 0,2 a 2 \mum. Este
requisito es cumplido también en el caso de utilizarse el
procedimiento conforme al invento.
La densidad específica de las partículas
producidas según el procedimiento conforme al invento es de 0,05
g/cm^{3} a 0,7 g/cm^{3}, a partir de este valor se calcula un
espesor medio de pared de las partículas de 10 a 50 nm.
Una comparación de las partículas de
poli(ciano-acrilato) seleccionadas a modo de
ejemplo, producidas según el Ejemplo 9 del presente invento, con las
partículas producidas según el Ejemplo 2 del documento
EP-0.327.490, arroja los valores recopilados en la
Tabla 1.
A partir del peso específico de las partículas
conformes al invento, producidas según el Ejemplo 9, que es de 0,15
g/cm^{3}, se calcula un espesor medio de pared menor casi en un
factor de 10 y un volumen de gas mayor en aproximadamente 60%.
Estos valores están en buena concordancia con los
resultados obtenidos a partir de radiografías en microscopio
electrónico de retículo [véanse la Figura 1 (micropartículas
conformes al invento producidas según el Ejemplo 9) y la Figura 2
(micropartículas producidas según el documento EP 0.327.490 /
Ejemplo 2)].
Sorprendentemente, en el caso de las partículas
conformes al invento se observa al realizar investigaciones por
ultrasonidos, más allá de la amplificación de la señal debida a la
dispersión, un aumento adicional del contraste mediante las
partículas, puesto que éstas son excitadas, por irradiación de
ultrasonidos con una presión sonora apropiada y una frecuencia
adecuada, a emitir señales autónomas.
En virtud de este fenómeno observado
inesperadamente, se establece por primera vez un nuevo sector de
aplicaciones para el agente conforme al invento en la diagnosis de
tumores en las zonas del hígado y del bazo. Así, con una técnica de
Doppler codificado en cuanto al color, después de administración
venosa periférica de las micropartículas conformes al invento, el
tejido sano aparece coloreado, mientras que las regiones con
tumores se manifiestan menos o nada codificadas en cuanto al
color.
Además, en virtud de las ventajosas propiedades
descritas de las partículas - mayor volumen gaseoso más señales
autónomas de ultrasonidos - ya con un número considerablemente
menor de partículas se pueden conseguir buenos contrastes. Como
consecuencia de esta efectividad acrecentada, son necesarias también
sólo pequeñas cantidades (en el margen de los microgramos (\mug))
de una sustancia polímera para obtener un buen contraste de
ultrasonidos, con lo cual se aumenta la distancia de seguridad
farmacológica.
Así, en un típico experimento con animales,
concretamente perros Beagle, ya 25 \mug de las partículas
producidas conformes al invento según el Ejemplo 9 por kilogramo
(kg) de peso corporal (KGW de Körpergewicht) proporcionan un
contraste homogéneo y óptimo de los ventrículos izquierdos de los
corazones (Figura 3/derecha). Con las partículas del documento EP
0.327.490 (producidas según el Ejemplo 2) se podía conseguir un
contraste comparable tan sólo con una dosificación de 2 mg/kg de
KGW (Figura 3/izquierda).
Se representan en la Figura 4 los efectos de
contraste de las partículas aquí divulgadas (Ejemplo 9) y en la
Figura 5 los efectos de las partículas descritas en el documento EP
0.327.490 (Ejemplo 2) después de instilación en la base. Las
partículas del documento EP 0.327.490 se administraron en una
dosificación de aproximadamente 3 mg/ml, y las partículas conformes
al invento en una dosificación de 0,04 mg/ml. Se reconoce que, a
pesar de la concentración claramente menor, se consigue un efecto
de contraste considerablemente mejor.
Otro aspecto del invento concierne a
procedimientos para la producción de las micropartículas conformes
al invento. Para la producción de micropartículas a base de
poli(ciano-acrilato) se procede dispersando
con un mezclador de rotor y estator un
ciano-acrilato monómero en una solución acuosa
ácida, saturada con un gas, la cual contiene eventualmente por lo
menos una sustancia tensioactiva, separando las partículas
obtenidas después de haber dispersado durante 5 minutos hasta 3
horas, lavándolas eventualmente con agua, a continuación
recogiéndolas en un medio de suspensión farmacéuticamente aceptable
y liofilizándolas (secándolas por congelación), siendo movida
enérgicamente la suspensión de modo ventajoso durante la
congelación. Preferiblemente, se emplean como
ciano-acrilato el éster butílico, y como gas aire,
nitrógeno, oxígeno, gases nobles o dióxido de carbono. En lugar del
mezclador de rotor y estator se pueden utilizar también aparatos
comparables (tal como p. ej. un
disolvedor-agitador), que permitan una enérgica
dispersión de la mezcla. Como sustancia tensioactiva se
utiliza(n) preferiblemente una (o varias) sustancia(s)
tomada(s) entre el grupo de los polisorbatos, octil- o
nonil-fenoles, ésteres glicerólicos de Macrogoles o
Cetomacrogoles, o Poloxameros® o sus mezclas. El valor del pH de la
solución acuosa saturada con gas está situado preferiblemente entre
1,8 y 4,5; para el ajuste del valor del pH se adecuan especialmente
los ácidos clorhídrico y fosfórico. La separación de las partículas
se efectúa mediante centrifugación o flotación. Como medio de
suspensión se adecua agua para finalidades de inyección,
eventualmente con una adición de cloruro de sodio y/o glucosa y/o
manitol y/o lactosa, que eventualmente contiene de modo adicional
todavía una sustancia tensioactiva, tal como p. ej. tomada entre el
grupo de los polisorbatos, octil- o nonil-fenoles,
ésteres glicerólicos de Macrogoles o Cetomacrogoles, o sustancias
tomadas entre el grupo de los Poloxameros® o sus mezclas y/o un
alcohol plurivalente.
Para la producción de las micropartículas a base
de poliésteres, se procede disolviendo un poli(éster de un ácido
\alpha-, \beta- o
\gamma-hidroxi-carboxílico),
eventualmente en común con un emulsionante dispersable en agua, en
un disolvente inocuo para la salud, y añadiendo esta solución,
mediando dispersión con un disolvedor-agitador o
con una barra sonora, a un líquido que contiene gas, que si el
emulsionante no se hubiera añadido ya en común con el poliéster,
contiene un emulsionante dispersable en agua, separando las
partículas obtenidas después de haber dispersado durante un período
de tiempo de 30 minutos hasta 2 horas, lavándolas eventualmente con
agua, a continuación recogiéndolas en un medio de suspensión
farmacéuticamente aceptable y liofilizándolas.
Conforme al invento, se prefieren los polímeros
del ácido láctico o del ácido glicólico así como sus copolímeros.
Como disolvente inocuo se utiliza preferiblemente alcohol etílico
caliente. Como líquido que contiene gas, se utiliza preferiblemente
agua o glicerol al 87%, los gases preferidos son aire, nitrógeno,
oxígeno, gases nobles o dióxido de carbono. Como emulsionante
dispersable en agua se han de mencionar
fosfatidil-colina o
palmitato-estearato de sacarosa 15 así como sus
mezclas. Como medio de suspensión farmacéuticamente aceptable se
adecuan los mismos medios que se utilizan en el caso de las
partículas a base de un
poli(ciano-acrilato).
El secado por congelación (la liofilización) de
las micropartículas conformes al invento se efectúa ventajosamente
mediando adición de sustancias, que protejan a las partículas
durante la liofilización con respecto de la destrucción y/o la
aglomeración (los denominados agentes crioprotectores). Como agentes
crioprotectores se pueden añadir a la suspensión ventajosamente
biopolímeros (p. ej. albúmina, gelatina tratada en autoclave,
oxi-poligelatina, polisuccinato de gelatina,
polipéptidos reticulados), sustancias macromoleculares sintéticas
(por ejemplo Povidone, poli(alcohol vinílico)), azúcares (p.
ej. sacarosa, lactosa, trehalosa, rafinosa),
azúcar-alcoholes (p. ej. manitol, sorbitol) o
mezclas de estas sustancias coadyuvantes farmacéuticas en una
concentración de 1% a 15%. La adición conforme al invento de los
agentes crioprotectores se efectúa o bien al medio de producción,
por recogida de las micropartículas después de la separación por
flotación en la solución del agente crioprotector o por adición a
la suspensión inmediatamente antes de la liofilización.
Sorprendentemente, se descubrió que puede ser
ventajoso añadir adicionalmente al agente crioprotector una
sustancia que optimice la liofilización, tomada entre el grupo de
los polioles (p. ej. glicerol, propilenglicol) o DMSO en una
concentración de 0,1 a 3%.
La liofilización se efectúa ventajosamente
impidiendo una flotación de las micropartículas conformes al
invento al realizar la congelación. Para ello es ventajoso enfriar
previamente la suspensión de las micropartículas conformes al
invento, congelarla con una velocidad de congelación de 2º Kelvin
por minuto o más, y liofilizarla.
Otra ventaja esencial de los procedimientos de
producción conformes al invento, en comparación con los métodos
divulgados en el documento EP-0.327.490, consiste
en que las partículas llenas de gas se pueden producir sin
utilización de un disolvente o una sustancia coadyuvante, de
carácter orgánico y peligroso desde puntos de vista sanitarios y
ecológicos, en una única etapa de procedimiento.
La producción del preparado inyectable, presto
para el uso, de las partículas conformes al invento, se efectúa
volviendo a suspender el material liofilizado en un medio de
suspensión farmacéuticamente aceptable tal como p. ej. agua p. i.
(para inyecciones) soluciones acuosas de una o varias sales
inorgánicas, tales como soluciones fisiológicas de electrólitos y
soluciones tamponadoras tales como p. ej. la solución de Tyrode,
soluciones acuosas de monosacáridos o disacáridos tales como
glucosa o lactosa, azúcar-alcoholes tales como
manitol, que eventualmente contienen adicionalmente todavía una
sustancia tensioactiva, p. ej. tomada entre el grupo de los
polisorbatos, octil- o nonil-fenoles, ésteres
glicerólicos de Macrogoles o Cetomacrogoles o bien sustancias
tomadas entre el grupo de los Poloxameros o sus mezclas y/o de un
alcohol plurivalente fisiológicamente compatible tal como glicerol,
pero preferiblemente en un agua apropiada para finalidades de
inyección. La concentración global de las sustancias disueltas
eventualmente, es de 0 - 15 por ciento en peso.
\newpage
Un procedimiento alternativo para la producción
de los preparados inyectables, prestos para el uso, consiste en que
en el procedimiento conforme al invento - para la producción de las
micropartículas - se prescinde de la liofilización final. Con el
fin de aumentar la seguridad de la aplicación, se puede llevar a
cabo una filtración de la suspensión inmediatamente antes de
efectuar la inyección. Esto se realiza ventajosamente mediante un
filtro colocado entre la jeringa y la cánula, el cual sirve para
retener los agregados que eventualmente aparezcan en el caso de
errores de manipulación, pero dejar pasar las partículas que no se
hayan agregado. Como materiales de filtración se adecuan en
principio los filtros de membranas usuales en el comercio. Al
efectuar la elección de los filtros se manifestó sin embargo
sorprendentemente que los mejores resultados se consiguen con
membranas de capas múltiples, especiales, a base de microfilamentos
de polipropileno. Se manifiestan como especialmente ventajosos los
filtros con un margen absoluto de retención de 10-20
\mum. Estos filtros están en situación de retener incluso
pequeños agregados de partículas con un tamaño situado p. ej. entre
5 y 10 \mum, pero son indeseados en el caso de una aplicación por
vía intravenosa.
La concentración del agente de contraste presto
para el uso se puede ajustar en el margen de 0,1 a 20 mg,
preferiblemente de 2 a 6 mg de partículas/ml del medio de
suspensión. La dosis inyectada es dependiente de la aplicación
deseada y, p. ej. en la sonografía por Doppler de color al efectuar
la investigación de los vasos, está situada en el margen de 1 a
500, preferiblemente entre 10 y 100 \mug de partículas/kg de peso
corporal, y en el caso de la investigación del hígado y del bazo en
el margen de 50 a 1.000, pero preferiblemente entre 200 y 600
\mug/kg de peso corporal.
El invento se explica mediante los siguientes
Ejemplos:
Se dispersan 0,4 ml del éster butílico de ácido
cianoacrílico en 60 ml de HCl de pH 2, 0, que contiene 1% del
Poloxamer 407, con un mezclador de rotor y estator durante 5
minutos. Las micropartículas que tienen un tamaño promedio de 2
\mum son separadas por centrifugación y recogidas en 300 ml de
una solución acuosa de 1% del Poloxamer y 5% de glucosa. La
determinación de la densidad arroja un peso específico de 0,2 g/
cm^{3}.
Se procede como en el Ejemplo 1, teniendo el
ácido clorhídrico un valor del pH de 2,5 y siendo reemplazado el
Poloxamer 407 por Octoxynol - 9. Las micropartículas poseen un
tamaño promedio de aproximadamente 0,9 \mum y un peso específico
de 0,2 g/cm^{3}. Éstas son recogidas en 300 ml de una solución al
5% de manitol, que contiene 0,1% de Polysorbat 20.
Se procede como en el Ejemplo 1, teniendo el
ácido clorhídrico un valor del pH de 3,0 y siendo reemplazado el
Poloxamer 407 por el Cetomacrogol 1200. El tamaño promedio de
partículas es de 1,5 \mum, y su peso específico de 0,3 g/cm^{3}.
Éstas son recogidas en 300 ml de una solución al 5% de manitol que
contiene 0,1% de Cetomacrogol 1200 y 5% de Povidone.
Se procede como en el Ejemplo 1, siendo
reemplazado el Poloxamer 407 por 5% de Polysorbat 40. El tamaño
promedio de las micropartículas es de 1,0 \mum, y su peso
específico de 0,4 g/cm^{3}. Éstas son recogidas en 300 ml de una
solución al 5% de manitol, que contiene 1% de
hidroxi-estearato de
Macrogol-glicerol.
Se procede como en el Ejemplo 1, siendo
reemplazado el Poloxamer 407 por 5% de
hidroxi-estearato de
Macrogol-glicerol. Las partículas tienen en promedio
un tamaño de 0,9 \mum y poseen un peso específico de 0,3
g/cm^{3}. Éstas son recogidas en 300 ml de una solución al 5% de
manitol, que contiene 1% de hidroxi-estearato de
Macrogol-glicerol y 10% de
propilen-glicol.
Se procede como en el Ejemplo 1, siendo
reemplazado el éster butílico de ácido
ciano-acrílico por el éster etílico de ácido
ciano-acrílico. Las micropartículas tienen un
tamaño promedio de 1,5 \mum y un peso específico de 0,2
g/cm^{3}. Éstas son recogidas en 300 ml de una solución acuosa de
1% de Poloxamer 407 y 5% de glucosa.
Se procede como en el Ejemplo 1, siendo
reemplazado el éster butílico de ácido
ciano-acrílico por el éster isopropílico de ácido
ciano-acrílico. Las micropartículas tienen un
tamaño promedio de 1,3 \mum y un peso específico de 0,2
g/cm^{3}. Éstas son recogidas en 300 ml de una solución acuosa de
1% de Poloxamer 407, 5% de manitol y 10% de propilenglicol.
Se dispersan con un
disolvedor-mezclador durante 120 minutos 3 ml del
éster butílico de ácido ciano-acrílico en 300 ml de
HCl de pH 2,0, que contiene 1% de Poloxamer 407. Las
micropartículas con un tamaño promedio de 2 \mum y un peso
específico de 0,1 g/cm^{3} se separan por flotación y se recogen
en 5 l de una solución al 5% de manitol, que contiene 1% de
Poloxamer 407 y 10% de propilenglicol.
Se procede como en el Ejemplo 8, siendo
reemplazado el Poloxamer 407 por Octoxynol - 9 y siendo ajustado el
valor del pH a 2,5. El tamaño promedio de las micropartículas es de
0,8 \mum y su peso específico de 0,15 g/cm^{3}. Éstas son
recogidas en 5 l de una solución al 0,9% de cloruro de sodio, que
contiene 0,1% de Cetomacrogol 1200.
Se procede como en el Ejemplo 8, siendo
reemplazado el Poloxamer 407 por Cetomacrogol 1200. El tamaño
promedio de las micropartículas es de 1,8 \mum, Y su peso
específico de 0,4 g/cm^{3}. Éstas son recogidas en 5 l de una
solución al 5% de glucosa, que contiene 0,2% de Cetomacrogol
1200.
Se procede como en el Ejemplo 8, siendo
reemplazado el Poloxamer 407 por 5% de Polysorbat 60. El tamaño
promedio de las micropartículas es de 1,0 \mum y su peso
específico de 0,4 g/cm^{3}. Éstas son recogidas en 5 l de una
solución al 5% de manitol, que contiene 1% de Poloxamer 407 y 10%
de propilenglicol.
Las partículas producidas en los Ejemplos 8, 9,
10 u 11 son recogidas, en lugar de en las soluciones allí
indicadas, en cada caso en 5 l de una solución al 5% de manitol,
que contiene 0,1% de Cetomacrogol 1200 y 5% de Povidone, congeladas
en porciones de 15 ml mediando enérgico sacudimiento y liofilizadas.
Antes de su utilización, el material liofilizado se vuelve a
suspender con agua para finalidades de inyección y eventualmente se
filtra.
Las partículas producidas en los Ejemplos 8, 9,
10 u 11 son recogidas, en lugar de en las soluciones allí
indicadas, en cada caso en 5 l de una solución al 10% de lactosa,
que contiene 0,1% de Cetomacrogol 1200, congeladas en porciones de
15 ml mediando enérgico sacudimiento y liofilizadas. Antes de su
utilización, el material liofilizado se vuelve a suspender con agua
para finalidades de inyección y eventualmente se filtra.
Se dispersa 1,0 g de lecitina de soja hidrogenada
en 200 ml de glicerol con un disolvedor-mezclador.
A la dispersión se le añaden, gota a gota después de 60 min, 2,0 g
de poli-L-lactida (peso molecular
medio 1.100) disuelta en 10 ml de etanol hirviendo. Se sigue
dispersando durante 60 min. Las micropartículas resultantes se
centrifugan a 1.000 rpm, el material sobrenadante se recoge en 50
ml de agua, se centrifuga de nuevo (a 1.000 rpm) y el material
sobrenadante se recoge en una solución al 5% de manitol. Esta
suspensión se subdivide en porciones de 10 ml y se liofiliza. El
material liofilizado, antes de su utilización, se vuelve a
suspender con agua para finalidades de inyección.
Se dispersa 1,0 g de
palmitato-estearato de sacarosa (HLB 15) en 200 ml
de glicerol con un disolvedor-mezclador. A la
dispersión se le añade gota a gota, después de 30 min, 1,0 g de
poli-L-lactida (peso molecular medio
1.100) disuelta en 10 ml de etanol hirviendo. Se sigue dispersando
durante 60 min. Las micropartículas resultantes tienen un tamaño
promedio de 2 \mum. Éstas se centrifugan durante 30 min a 1.000
rpm, el material sobrenadante se recoge en 50 ml de agua, se
centrifuga de nuevo (a 1.000 rpm), y el material sobrenadante se
recoge en 50 ml de una solución al 5% de manitol. Esta suspensión se
subdivide en porciones de 10 ml y se liofiliza. El material
liofilizado, antes de su utilización, se vuelve a suspender con
agua para finalidades de inyección.
A un perro (de 12,5 kg, con anestesia por
inhalación) se le inyectan micropartículas producidas según el
Ejemplo 8 (250 \mug/ml) en una dosis de 25 \mug/kg de peso
corporal por vía venosa periférica con una velocidad de 2 ml/min.
En la mitad izquierda del corazón se pone de manifiesto, al efectuar
la investigación por ultrasonidos, una amplificación fuerte y
largamente persistente de las señales en la imagen B.
Se repite el Ejemplo 15 con las partículas
producidas en los Ejemplos 1 - 7 ó 9 -14. También en estos casos se
ponen de manifiesto unas amplificaciones fuertes y largamente
persistentes de las señales en la mitad izquierda del corazón.
A un perro (de 11 kg, con anestesia por
inhalación) se le inyectan micropartículas producidas según el
Ejemplo 8 (250 \mug/ml) en una dosis de 300 \mug/kg de peso
corporal por vía venosa periférica con una velocidad de 0,1 ml/s.
Después de 10 min, el hígado se representa homogéneamente durante un
período de tiempo suficientemente largo para la investigación al
realizar la investigación por Doppler de color.
Se repite el Ejemplo 17 con las partículas
producidas en los Ejemplos 1 - 7 ó 9 -14. También en este caso el
hígado se representa homogéneamente de modo codificado en cuanto al
color.
Las micropartículas producidas según el Ejemplo 8
se mezclan con suero canino a razón de 1+1 y se incuban a 37ºC.
Todavía después de 4 horas la suspensión, que con anterioridad era
turbia, es ahora totalmente transparente, y mediante cromatografía
de gases (GC) se encuentra casi el 100% de la cantidad de butanol
que es de esperar teóricamente.
Se dispersan con un
disolvedor-mezclador durante 90 min 3 ml de éster
butílico de ácido ciano-acrílico en 300 ml de HCl
de pH 2,5, que contiene 1% de Nonoxynol. Las micropartículas con un
tamaño promedio de 1,4 \mum son separadas por flotación,
recogidas en 100 ml de agua y luego mezcladas con 5% de albúmina. A
continuación, mediando ligero movimiento, se congela en porciones de
5 ml y se liofiliza.
Se dispersan con un
disolvedor-mezclador durante 90 min 3 ml de éster
butílico de ácido ciano-acrílico en 300 ml de HCl
de pH 2,5, que contiene 1% de Octoxynol. Las micropartículas con un
tamaño promedio de 1,4 \mum son separadas por flotación,
recogidas en 100 ml de una solución de gelatina al 5% tratada en
autoclave, ajustada a pH 5,0 con HCl/NaOH, y a continuación,
mediando ligero movimiento, se congelan en porciones de 5 ml así
como se liofilizan.
Se dispersan con un
disolvedor-mezclador durante 90 min 3 ml de éster
butílico de ácido ciano-acrílico en 300 ml de HCl
de pH 2,5, que contiene 1% de Octoxynol y 5% de Povidone. Las
micropartículas con un tamaño promedio de 1,4 \mum son separadas
por flotación, recogidas en una solución al 5% de Povidone y
envasadas en porciones de 5 ml. A continuación, la suspensión
envasada se atempera durante una hora a 0ºC y luego se congela así
como se liofiliza.
Se dispersan con un
disolvedor-mezclador durante 90 min 3 ml de éster
butílico de ácido ciano-acrílico en 300 ml de HCl
de pH 2,5, que contiene 1% de Octoxynol. Las micropartículas con un
tamaño promedio de 1,4 \mum son separadas por flotación,
recogidas en 300 ml de agua, mezcladas con 0,1% de glicerol y 10%
de lactosa, y después de congelación son liofilizadas.
Claims (14)
1. Procedimiento para la producción de
micropartículas, caracterizado porque se dispersa un
ciano-acrilato monómero en una solución acuosa
ácida, saturada con un gas, que eventualmente contiene dispersada
por lo menos una sustancia tensioactiva, las partículas obtenidas
después de haber dispersado durante 5 minutos hasta 3 horas, son
separadas, eventualmente lavadas con agua, a continuación recogidas
en un medio de suspensión farmacéuticamente aceptable, y
liofilizadas.
2. Procedimiento para la producción de
micropartículas, caracterizado porque se disuelve un
poli(éster de un ácido \alpha-, \beta- o
\gamma-hidroxi-carboxílico),
eventualmente en común con un emulsionante dispersable en agua, en
un disolvente inocuo para la salud y esta solución se añade,
mediando dispersión, a un líquido que contiene gas, que si el
emulsionante no se hubiera añadido ya en común con el poliéster,
contiene un emulsionante dispersable en agua, las partículas
obtenidas después de haber dispersado durante 30 minutos hasta 2
horas, son separadas, eventualmente lavadas con agua, a continuación
recogidas en un medio de suspensión farmacéuticamente aceptable, y
liofilizadas.
3. Micropartículas obtenibles según el
procedimiento mencionado en la reivindicación 1.
4. Micropartículas obtenibles según el
procedimiento mencionado en la reivindicación 2.
5. Procedimiento para la producción de
micropartículas según la reivindicación 1, caracterizado
porque el valor del pH de la solución acuosa está situado entre 1,8
y 4,5.
6. Procedimiento para la producción de
micropartículas según la reivindicación 5, caracterizado
porque para el ajuste del valor del pH se utiliza ácido clorhídrico
o fosfórico.
7. Procedimiento para la producción de
micropartículas según la reivindicación 1, caracterizado
porque como sustancias tensioactivas se utilizan polisorbatos,
octil- o nonil-fenoles, ésteres glicerólicos de
Macrogoles o Cetomacrogoles, o sustancias tomadas del grupo de los
Poloxameros®.
8. Procedimiento para la producción de
micropartículas según la reivindicación 2, caracterizado
porque como emulsionante(s) dispersable(s) en agua se
utiliza(n) fosfatidil-colina o
palmitato-estearato de sacarosa 15 o sus
mezclas.
9. Procedimiento para la producción de
micropartículas según la reivindicación 2, caracterizado
porque como disolvente inocuo para la salud para los poliésteres se
utiliza un alcohol inferior, preferiblemente alcohol etílico.
10. Procedimiento para la producción de
micropartículas según la reivindicación 2, caracterizado
porque como líquido que contiene gas se utiliza agua o glicerol al
87%.
11. Procedimiento para la producción de
micropartículas según las reivindicaciones 1 ó 2,
caracterizado porque como medio de suspensión se utiliza
agua destinada a finalidades de inyección, eventualmente con una
adición de cloruro de sodio y/o glucosa y/o manitol y/o lactosa,
que eventualmente contiene adicionalmente todavía una sustancia
tensioactiva según la reivindicación 7 y/o un alcohol
plurivalente.
12. Agentes de contraste por ultrasonidos,
caracterizados porque las micropartículas según las
reivindicaciones 1 ó 2 se vuelven a suspender en un medio de
suspensión farmacéuticamente aceptable.
13. Agentes de contraste por ultrasonidos según
la reivindicación 12, caracterizados porque como medio para
suspensión farmacéuticamente aceptable se utiliza agua destinada a
finalidades de inyección, que eventualmente contiene una adición de
cloruro de sodio, glucosa, manitol y/o lactosa y eventualmente
contiene de modo adicional todavía una sustancia tensioactiva según
la reivindicación 7 y/o un alcohol plurivalente.
14. Agentes de contraste por ultrasonidos, que se
pueden preparar según el procedimiento descrito en las
reivindicaciones 1 y 2, caracterizados porque se prescinde
de una liofilización final.
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