ES2199098T3 - Procedimiento para la obtencion y uso de peptidos de efecto antibiotico para el tratamiento de enfermedades infecciosas. - Google Patents
Procedimiento para la obtencion y uso de peptidos de efecto antibiotico para el tratamiento de enfermedades infecciosas.Info
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Abstract
Péptido con la secuencia de aminoácidos NH2-YIVYKIRSADKRSKALK-COOH (SEC. ID Nº 5) así como - los derivados amidados, acetilados, sulfatados, fosforilados, glicosilados, oxidados, - péptidos que se obtuvieron por el intercambio conservador de aminoácidos, - péptidos que se obtuvieron mediante la supresión de no más del 10% de los aminoácidos del péptido de SEC. ID Nº 5, y - fragmentos del péptido de SEC. ID Nº 5, con la condición de que los derivados, fragmentos y péptidos presenten un efecto antimicrobiano de al menos el 50% del efecto antimicrobiano del péptido de SEC. ID Nº 5.
Description
Procedimiento para la obtención y uso de
péptidos de efecto antibiótico para el tratamiento de enfermedades
infecciosas.
La invención se refiere a péptidos antibióticos,
a procedimientos para su preparación así como a su uso.
Se sabe que péptidos que existen de forma
natural pueden tener efecto antibiótico. Así, el documento WO
97/35877 describe la existencia y la purificación de péptidos
antibióticos de leche de vaca.
Sorprendentemente, se halló ahora que también
pueden obtenerse péptidos de efecto antibiótico a partir de
extracto de placenta humana y de extracto de timo bovino.
Para esto, los extractos de tejido mencionados
se purificaron por cromatografía y se examinaron las fracciones
obtenidas en cuanto a su actividad antimicrobiana, efectuando el
ensayo de inhibición de difusión radial. Sorprendentemente, se
constató que en las fracciones están contenidas sustancias que
inhiben fuertemente el crecimiento de bacterias. Mediante otros
procedimientos de separación por cromatografía, pudieron
concentrarse las sustancias activas, purificarlas hasta
homogeneidad y esclarecerse su estructura.
Sorprendentemente, los péptidos purificados
surten efecto tanto sobre bacterias Gram-positivas
como Bacillus subtilis, Micrococcus luteus y Staphylococcus
carnosus, como sobre bacterias Gram-negativas
como Escherichia coli y Pseudomonas fluorescens, inhibiendo
fuertemente su crecimiento. La propiedad moduladora del crecimiento
de péptidos purificados sobre microorganismos fue detectada por
primera vez durante el desarrollo del procedimiento aquí
presentado.
Por lo tanto, la presente invención se refiere a
nuevos péptidos de efecto antimicrobiano, a su preparación, a
medicamentos que contienen estos péptidos así como a preparaciones
que contienen estos péptidos y a su uso.
La presente invención se refiere a un péptido
con la secuencia de aminoácidos 5.
- 1.
- R_{1}-WQKMVTAVASALSSRYH-R_{2}
- 2.
- R_{1}-GKVKVGVNGFGRIGRLVTRAAFNSGKVDIVA-R_{2}
- 3.
- R_{1}-VCVLAHHFGKEFTPPVQAAYQKVVAGVANALAHKYH-R_{2}
- 4.
- R_{1}-KAGAHLKGGAKRVIISAPS-R_{2}
- 5.
- NH_{2}-YIVYKIRSADKRSKALK-COOH
- 6.
- R_{1}-KAASKKAPSKASPNPRSGTRRSP-R_{2}
- 7.
- R_{1}-KAASKKAPSKASPNPRSGTRRSPRIATTAASAATAAASAAATTPRAKGKAKH-R_{2}
- 8.
- R_{1}-CAIHAKRVTIMPKDIQLARRIRGERA-R_{2}
- 9.
- R_{1}-LSKGLIKLVSKHRAQVIYTRNTKGGDAPAAG-R_{2}
- 10.
- R_{1}-QQKQQKGRGMGGAGRGVFGGRGRGGIPGTGRGQPEKKPG-R_{2}
- 11.
- R_{1}-LKSLVSKGTLVQTKGTGASGSFKLNKKAATGEAKPKGKKAGAAKPKKAAGAAKKPKK-R_{2}
- 12.
- R_{1}-SSGEEVVIPQKKGKKAATTPAKKMVVSPTKKVAVATPAKKAVVTPGKKAAAMPAKKTVTPA KAVVTPGKKGATPGKAVVATSGKKGAATPGKGAKNGKNAKKED-R_{2},
así como los derivados amidados,
acetilados, sulfatados, fosforilados, glicosilados, oxidados y,
además, fragmentos con propiedades antimicrobianas, que se deriven
de la secuencia de aminoácidos con efecto
antimicrobiano.
Los otros péptidos de las secuencias de
aminoácidos 1 a 4 y 6 a 12 están expuestos como ejemplos
comparativos y no son objeto de la invención. R_{1} es NH_{2},
R_{2} es COOH.
Además de los derivados mencionados, los
péptidos también pueden presentar D-aminoácidos en
lugar de los L-aminoácidos naturales, lo que
retarda la degradación por proteasas.
El objeto de la invención también son péptidos
en los que se han cambiado aminoácidos individuales por otros, en
particular, mediante los llamados intercambios conservadores dentro
de los grupos conocidos de los aminoácidos ácidos, básicos,
neutros, hidrófobos, aromáticos e hidrófilos. Ejemplos de esto son
los cambios de serina por alanina o alanina por serina, de
isoleucina por leucina o de leucina por isoleucina, etc.
Como fragmentos, en particular, entran en
consideración péptidos acortados en forma N-terminal
o C-terminal, pero también péptidos, en los que
están suprimidos aminoácidos individuales, pero no más del 10% de
los aminoácidos. Estos fragmentos son objeto de la invención,
siempre y cuando presenten propiedades antimicrobianas. Propiedades
antimicrobianas del fragmento significa que el fragmento tiene al
menos el 50% de la actividad del péptido original, es decir, que se
necesita un máximo del doble de la concentración de inhibición. Como
microorganismos de ensayo se usan Staphylococcus aureus o
Escherichia coli, según contra que microorganismo presente el
péptido más eficacia. Las bacterias se caracterizan de la siguiente
manera:
Staphylococcus aureus: cocos
Gram-positivos, ATCC 25923
Escherichia coli: bacilos
Gram-negativos, ATCC 25922
La concentración mínima de inhibición fue
determinada según las recomendaciones (M7-A3)
editadas por la
NCCLS (National Committee for Clinical Laboratory Standards, Comisión Nacional de Patrones para el Laboratorio Clínico), análogamente al ejemplo 4.
NCCLS (National Committee for Clinical Laboratory Standards, Comisión Nacional de Patrones para el Laboratorio Clínico), análogamente al ejemplo 4.
Los péptidos conforme a la invención pueden
prepararse de forma pura y biológicamente activa, por aislamiento a
partir de extractos de tejidos humanos o animales, por proteólisis a
partir de proteínas precursoras correspondientes, por síntesis
química y biotecnológica.
En el caso del péptido conforme a la invención,
se trata de un fragmento de una proteína precursora más grande, a
saber, un proteolípido mitocondrial.
Los péptidos conforme a la invención son
apropiados para el tratamiento de enfermedades debidas a
colonizaciones microbianas viciosas, como infecciones,
inflamaciones, tumores de inducción microbiana, enfermedades
degenerativas de origen microbiano, enfermedades diarreicas,
cólicos, alteraciones de la flora bucal, intestinal y vaginal,
caries. La colonización microbiana viciosa puede deberse, por
ejemplo, a bacterias, hongos, levaduras, protistas, virus,
micoplasmas, filarias y/o plasmodios. Pueden usarse tanto en
enfermedades agudas, como en enfermedades crónicas.
La preparación medicamentosa contiene los
péptidos conforme a la invención y/o una sal fisiológicamente
aceptable de los péptidos. La forma y la composición del
medicamento que contiene el péptido dependen de la forma de
administración. Preferentemente, se usan preparaciones galénicas y
se seleccionan formas de administración en las que los péptidos
lleguen al sitio de acción en forma no degradada. Las preparaciones
medicamentosas pueden contener coadyuvantes usuales en farmacia
que, por ejemplo, contribuyan a la solubilidad, a la estabilidad o
a la esterilidad del medicamento o aumenten el grado de eficacia de
la absorción por el cuerpo. Los péptidos pueden administrarse de
forma parenteral, intranasal, oral o por inhalación.
Preferentemente, los péptidos se formulan para obtener un preparado
inyectable, o bien, como solución, o bien como liofilizado para
disolver inmediatamente antes del uso.
La dosis de péptidos que se ha de administrar,
depende de la indicación y del uso de determinados derivados.
Preferentemente, los péptidos conforme a la invención se administran
en cantidades de 0,1 a 100 mg/kg de peso corporal.
Los péptidos conforme a la invención también
pueden usarse como aditivos para alimentos. Pueden usarse como
coadyuvantes en la preparación de alimentos, en particular, en
alimentos que se preparan mediante fermentación y otros procesos
bacterianos. Los preparados conforme a la invención son conservantes
naturales.
Los siguientes ejemplos explicarán la invención
en mayor detalle, siendo sólo conforme a la invención los ejemplos
que se refieren al péptido 5, con la SEC. ID 5. Los ejemplos
restantes sirven como ejemplos comparativos.
Se homogeneizó placenta humana con tampón de
extracción (ácido acético 1,0 M, ácido ascórbico 20 mM, EDTA 1 mM,
pH: 2,45) con hielo, y se agitó durante la noche a 4ºC, para la
extracción. Se centrifugó el homogeneizado extraído y se filtró el
sobrenadante. El filtrado obtenido se filtró por ultrafiltración
(membrana 50 kDa PS) y, a continuación, se llevó el infiltrado a un
intercambiador de cationes, y se eluyó en etapas, en dependencia
del valor de pH. Los péptidos/proteínas contenidos en los eluatos,
se siguieron dividiendo mediante cromatografía de fase inversa.
Para la purificación de péptidos antimicrobianos
de extracto de placenta, pueden combinarse distintos procedimientos
de separación por HPLC, para lograr una preparación lo más pura
posible, mediante una separación óptima, y desprender componentes
inactivos indeseados. Se examinan las respectivas muestras que se
forman después de cada paso de separación, en cuanto a su actividad
antimicrobiana contra Escherichia coli, mediante el ensayo
de difusión radial (véase el ejemplo 3). Para la purificación es
necesaria la combinación de al menos dos pasos de cromatografía de
fase inversa, y el uso de una separación por HPLC de intercambio
catiónico. En el bioensayo debería usarse la respectiva muestra con
bajo contenido de sales, para obtener, en lo posible, un resultado
óptimo de examen.
El primer paso de separación fue realizado con
la ayuda de una columna polimérica Fineline RPC (20 x 15,5 cm, 15
\mum, Pharmacia Biotech, Freiburg, Alemania).
Tampón A: HCl 10 mM; tampón B: HCl 10
mM/acetonitrilo al 80%/agua bidestilada al 20%; gradiente:
0-50% de B, en 60 minutos; flujo: 400 ml/min;
detección: a 280 nm.
El cromatograma está representado en la figura
1a. Las barras indican la actividad antimicrobiana de las fracciones
obtenidas.
Recromatografiado de las fracciones 19 y 20, con
una columna de gel YMC C8-C18 (47 x 300 mm, 15
\mum, 300 \ring{A}, Waters Milford, MA).
Tampón A: HCl 10 mM; tampón B: HCl 10
mM/acetonitrilo al 80%/agua bidestilada al 20%; gradiente:
20-70% de B, en 37,5 minutos; flujo: 40 ml/min;
detección: a 280 nm.
El cromatograma está representado en la figura
1b. Las barras indican la actividad antimicrobiana de las fracciones
obtenidas.
Recromatografiado de la fracción 23 del paso de
separación precedente, mediante una HPLC de intercambio
catiónico.
Columna: Parcosil Pepkat, 4 x 50 mm, 5 \mum,
300 \ring{A}, Biotek, Heidelberg, Alemania.
Tampón A: tampón de fosfato de sodio 10 mM, pH:
7,2; tampón B: tampón A con NaCl 1 M. Gradiente:
0-60% de B, en 60 minutos; flujo: 0,75 ml/min;
detección: a 214 nm.
Las fracciones obtenidas se desalificaron
individualmente en un paso de cromatografía de fase inversa, antes
de conducirlas al ensayo de actividad antimicrobiana. El
cromatograma está representado en la figura 1c. Las barras indican
la actividad antimicrobiana de las fracciones obtenidas.
Mediante espectrometría de masas y secuenciación
de aminoácidos, se identificaron los siguientes péptidos:
Las fracciones 5 + 6 contenían el péptido puro
de acción antimicrobiana
hHEM-g-130-146, con
la secuencia de aminoácidos: WQKMVTAVASALSSRYH, Sec ID Nº 1.
La fracción 13 contenía el péptido puro de
acción antimicrobiana hGAPDH-1-31,
con la secuencia de aminoácidos: GKVKVGVNGFGRIGRLVTRAAFNSGKVDIVA,
Sec ID Nº 2.
Se homogeneizó timo de ternera con tampón de
extracción (ácido acético 1,0 M, ácido ascórbico 10 mM, EDTA 0,5
mM) con hielo, y se agitó durante la noche a 4ºC para la extracción.
Se centrifugó el homogeneizado extraído y se filtró el
sobrenadante. El filtrado obtenido se filtró por ultrafiltración
(membrana 50 kDa PS) y, a continuación, se llevó el infiltrado a un
intercambiador de cationes, y se eluyó en etapas, en dependencia
del valor de pH. Los péptidos/proteínas contenidos en los eluidos se
siguieron separando mediante cromatografía de fase inversa.
Para la purificación de péptidos antimicrobianos
de extracto de timo, pueden combinarse distintos procedimientos de
separación por HPLC, para lograr una preparación lo más pura
posible, mediante una separación óptima, y desprender componentes
inactivos indeseados. Se examinan las respectivas muestras que se
forman después de cada paso de separación, en cuanto a su actividad
antimicrobiana contra Escherichia coli, mediante el ensayo
de inhibición de difusión radial (véase el ejemplo 2). Para la
purificación, es recomendable la combinación de al menos dos pasos
de cromatografía de fase inversa, y el uso de una separación por
HPLC de intercambio catiónico. En el bioensayo debería usarse la
respectiva muestra con bajo contenido de sales, para obtener, en lo
posible, un resultado óptimo de examen.
El primer paso de separación fue realizado con
la ayuda de una columna de fase inversa RP C15 (10 x 15 cm, 15
\mum, Pharmacia Biotech, Freiburg, Alemania). Tampón A: HCl 10 mM;
tampón B: HCl 10 mM/acetonitrilo al 80%/agua bidestilada al 20%;
gradiente: 1% de B/min, 60 minutos; flujo: 130 ml/min; detección: a
280 nm.
El cromatograma está representado en la figura 2
(recolección por pH IV). Las barras indican la actividad
antimicrobiana de las fracciones obtenidas.
Recromatografiado de la fracción 8, con una
columna YMC C18 (47 x 300 mm, 15 \mum, 300 \ring{A}, Waters
Milford, MA, EEUU). Tampón A: HCl 10 mM; tampón B: HCl 10
mM/acetonitrilo al 80%/agua bidestilada al 20%; gradiente:
10-60% de B, en 50 min; flujo: 40 ml/min; detección:
a 280 nm. El cromatograma está representado en la figura 2 (1ª
cromatografía). Las barras indican la actividad antimicrobiana de
las fracciones obtenidas.
Recromatografiado de las fracciones 10 y 11, con
una columna YMC C18 (47 x 300 mm, 15 \mum, 300 \ring{A}, Waters,
Milford, MA, EEUU). Tampón A: metanol al 20% en HCl 10 mM; tampón
B: metanol en HCl 10 mM; gradiente: 10-50% de B, en
57 min; flujo: 30 ml/min; detección: a 280 nm. El cromatograma está
representado en la figura 2 (2ª cromatografía). Las barras indican
la actividad antimicrobiana de las fracciones obtenidas.
Recromatografiado de las fracciones 1 y 2 del
paso de separación precedente, con ayuda de un intercambiador de
cationes.
Columna: Biotek Prepkat, 10 x 125 mm, 7 \mum,
1000 \ring{A}, Biotek, Heidelberg, Alemania.
Tampón A: tampón de dihidrogenofosfato de
potasio 50 mM, pH: 3,0; tampón B: tampón A con KCl 1,5 M;
Gradiente: 10-60% de B, en 50
min; flujo: 2 ml/min; detección: a 230 nm.
El cromatograma está representado en la figura 2
(3ª cromatografía). Las fracciones obtenidas fueron desalificadas
de forma individual, en un paso de cromatografía de fase inversa,
antes de que fueran conducidas al ensayo de actividad
antimicrobiana. Las barras indican la actividad antimicrobiana de
las fracciones obtenidas.
Recromatografiado de las fracciones 25 y 26, con
una columna RP C15 (10 x 250 mm, 15 \mum, 120 \ring{A},
Pharmacia Biotech, Freiburg, Alemania). Tampón A: TFA al 0,1%;
tampón B: acetonitrilo al 80% en TFA al 0,085%; gradiente:
20-50% de B, en 60 min; flujo: 1,8 ml/min;
detección: a 214 nm. El cromatograma está representado en la figura
2 (4ª cromatografía). Las barras indican la actividad antimicrobiana
de las fracciones obtenidas.
Recromatografiado de la fracción 32 del paso de
separación precedente, con la ayuda de un intercambiador de
cationes.
Columna: Parcosil Pepkat, 4 x 50 mm, 5 \mum,
300 \ring{A}, Biotek, Heidelberg, Alemania.
Tampón A: tampón de fosfato de sodio 10 mM, pH:
7,2; tampón B: tampón A con NaCl 1 M;
Gradiente: 0-60% de B, en 60
minutos; flujo: 0,75 ml/min; detección: a 214 nm.
La fracciones obtenidas se desalificaron de
forma individual en un paso de cromatografía de fase inversa, antes
de que fueran conducidas al ensayo de actividad antimicrobiana. El
cromatograma está representado en la figura 2 (5ª cromatografía).
Las barras indican la actividad antimicrobiana de las fracciones
obtenidas.
Recromatografiado de la fracción 5, con una
columna Vydac RP C18 (4,6 x 250 mm, 5 \mum, 100 \ring{A},
Hesperia, CA, EEUU). Tampón A: TFA al 0,1%; tampón B: acetonitrilo
al 80% en TFA al 0,085%; gradiente: 20-50% de B, en
60 min; flujo: 0,75 ml/min; detección: a 214 nm. El cromatograma
está representado en la figura 2 (6ª cromatografía). Las barras
indican la actividad antimicrobiana de las fracciones obtenidas.
Se identificó el siguiente péptido mediante
espectrometría de masas y secuenciación de aminoácidos:
La fracción 12 contenía el péptido puro de
acción antimicrobiana 5, con la secuencia de aminoácidos:
YIVYKIRSADKRSKALK, Sec ID Nº 5.
En el ensayo de inhibición de difusión radial,
se examina el efecto antimicrobiano de soluciones muestra, que aquí
son fracciones de HPLC, sobre bacterias suspendidas en agarosa, que
aquí son E. coli. Para ello, se liofilizaron las fracciones
de HPLC, y se incorporaron a agua bidestilada. Para ensayar su
actividad antimicrobiana, se procedió de la siguiente manera: al
medio incubado a 37ºC (300 mg/l de Tryptic Soy Broth, agarosa
NuSieve GTG al 0.8% (p/v), Tween 20 al 0,02% (v/v), en tampón de
fosfato de sodio 10 mM, pH: 7,2), se añadió una suspensión de
bacterias (en medio LB) que presentaba una densidad óptica de 1,0, a
una longitud de onda de 600 nm. Después de enfriar la solución de
agarosa en placas de Petri y de solidificar a 4ºC, se punzonaron de
forma estéril cavidades con un diámetro de 3 mm en la agarosa
sólida. En las cavidades se colocaron 10 \mul de solución muestra
y se incubaron las placas equipadas a 37ºC, durante 16 h. Para
valorar la actividad antimicrobiana de las muestras, se midieron
los halos de inhibición que se formaron. Existe una correlación
lineal entre el logaritmo de la concentración de antibiótico y los
radios de los halos de inhibición. Para comparar la actividad
antimicrobiana de diferentes fracciones, se convirtieron por cálculo
los halos de inhibición en unidades, conforme al trabajo de Lehrer
(Lehrer y col., J Immun Methods, vol 137, pág. 167, 1991). Aquí una
unidad corresponde a un halo de inhibición de un radio de 0,1
mm.
Se examinó la actividad antimicrobiana de los
péptidos conforme a la invención, efectuando la determinación de la
concentración mínima de agente inhibidor (MIC), contra diversos
gérmenes, como bacterias Gram-positivas y
Gram-negativas, y levaduras. La concentración mínima
de agente inhibidor denomina la concentración de péptidos que es
necesaria como concentración mínima, para inhibir completamente el
crecimiento de microorganismos, después de un período de incubación
de 18 \pm 2 h. Se realizó esta cuantificación de la actividad
antimicrobiana con péptidos obtenidos por síntesis química
(secuencias peptídicas 1 - 5), contra microorganismos no patógenos,
así como contra agentes patógenos para el ser humano. Las
concentraciones mínimas de inhibición están indicadas en la
siguiente tabla, en [\mug/ml]:
| Péptidos | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 10 |
| Bacilus subtilis ATCC 6051 | 100 | 7,8 | 62,5 | 62,5 | 1,95 | 25 | 3,9 | nd | 20 |
| Micrococcus luteus ATCC 9341 | 200 | 31,25 | 31,25 | 200 | 6,25 | 50 | 25 | 31,25 | 18,75 |
| Staphylococcus aureus ATTC 25923 | 200 | nd | nd | > 200 | 25 | 100 | 25 | 100 | 200 |
| Staphylococcus carnosus TM 300 | 100 | 12,5 | 40 | 50 | 6,25 | 25 | 15,6 | 12,5 | 37,5 |
| Escherichia coli ATTC 25922 | 200 | nd | nd | > 200 | 6,25 | 50 | 12,5 | > 200 | 100 |
| Escherichia coli BL21 (DE3) | 100 | 7,8 | 62,5 | 100 | 1,95 | 6,2 | 3,9 | > 250 | 9,4 |
| Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763 | 100 | 100 | 50 | 100 | 3,125 | 31,3 | 25 | > 250 | 25 |
| Salmonella typhimurium ATCC 13311 | nd | nd | nd | nd | 10 | nd | nd | nd | Nd |
| Pseudomonas aeruginosa, aislada en la clínica | > 200 | 31,25 | > 200 | nd | 62,5 | nd | nd | nd | Nd |
| Klebsiella pneumoniae ATCC 10031 | 300 | nd | nd | > 300 | 150 | 75 | 18,75 | 100 | 25 |
| Mycobacterium ranae ATCC 110 | nd | nd | nd | nd | 30 | nd | nd | nd | Nd |
| nd = no determinado |
Los péptidos conforme a la invención inhiben
eficazmente, tanto el crecimiento de bacterias
Gram-positivas y Gram-negativas,
como de levaduras. También destruyen eficazmente agentes patógenos
humanos, como Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium
y Klebsiella pneumoniae. Los ensayos de cinética del efecto
dieron por resultado que ya después de 2h de incubación se producía
la destrucción completa de los gérmenes (véase la figura 3).
<210> 5
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 17
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> de mamífero
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 5
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Tyr Ile Val Tyr Lys Ile Arg Ser Ala Asp Lys
Arg Ser Lys Ala Leu Lys}
Claims (10)
1. Péptido con la secuencia de
aminoácidos
- NH_{2}-YIVYKIRSADKRSKALK-COOH (SEC. ID Nº 5)
así
como
- -
- los derivados amidados, acetilados, sulfatados, fosforilados, glicosilados, oxidados,
- -
- péptidos que se obtuvieron por el intercambio conservador de aminoácidos,
- -
- péptidos que se obtuvieron mediante la supresión de no más del 10% de los aminoácidos del péptido de SEC. ID Nº 5, y
- -
- fragmentos del péptido de SEC. ID Nº 5,
con la condición de que los
derivados, fragmentos y péptidos presenten un efecto antimicrobiano
de al menos el 50% del efecto antimicrobiano del péptido de SEC. ID
Nº
5.
2. Procedimiento para la preparación de
los péptidos según la reivindicación 1 mediante la purificación de
extractos de tejidos humanos o animales, o a partir de líquidos
corporales humanos o animales, por proteólisis a partir de
proteínas precursoras correspondientes por expresión en organismos
procarióticos o eucarióticos y por síntesis química.
3. Medicamento que como principio activo
contiene al menos un péptido según la reivindicación 1, junto con
coadyuvantes y aditivos usuales en farmacia.
4. Alimento que contiene péptidos según
la reivindicación 1, junto con nutrientes y aditivos.
5. Uso de los péptidos según la
reivindicación 1 en forma pura para la preparación de un medicamento
antibiótico para el tratamiento de enfermedades de origen
microbiano.
6. Uso de los péptidos según la
reivindicación 5 en forma apropiada preparada para infusiones,
pomadas, comprimidos, aerosoles, cápsulas de "liberación
lenta" y preparaciones similares.
7. Uso de los péptidos según la
reivindicación 1 para la preparación de un medicamento para el
tratamiento de enfermedades del organismo humano que comprometen el
tracto gastrointestinal, las vías respiratorias y el tracto
urogenital y/o para el tratamiento de enfermedades del organismo
humano que comprometen el integumento y sus glándulas anejas.
8. Uso de los péptidos según la
reivindicación 1 para la preparación de un medicamento para el
tratamiento de enfermedades debidas a la colonización microbiana
viciosa, originada por bacterias, hongos, levaduras, protistas,
virus, micoplasmas, filarias y/o plasmodios.
9. Uso según la reivindicación 8,
caracterizado porque las colonizaciones microbianas viciosas
son infecciones, inflamaciones, tumores de inducción microbiana,
enfermedades degenerativas de origen microbiano, enfermedades
diarreicas, cólicos, alteraciones de la flora bucal, intestinal y
vaginal y/o caries.
10. Uso de los péptidos según la
reivindicación 1 como conservante de alimentos humanos y animales
y/o como coadyuvante en procesos industriales de fermentación, en
particular, en la fabricación de cerveza, en la producción de
yogur, etc., para modificar la flora bacteriana presente.
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