ES2199474T3 - Composicion farmaceutica que comprende (+)-efedrina y un antagonista del receptor h1. - Google Patents

Abstract

Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de (+)-efedrina, un antagonista receptor de H1 y un soporte farmacéuticamente aceptable, en la que la relación de (+)-efedrina a a (-)-efedrina es 80:20 o mayor.

Description

Composición farmacéutica que comprende (+)-efedrina y un antagonista del receptor H_{1}.

Campo de la invención

La presente invención se dirige a composiciones farmacéuticas que contienen (+)-efedrina y un antagonista receptor de H_{1}. Las presentes composiciones de (+)-efedrina se pueden usar como descongestivos, supresores de apetito y para tratar otras situaciones tratadas típicamente con fármacos sinpatomiméticos. Las composiciones farmacéuticas de esta invención están sustancialmente exentas de (-)-efedrina. Como resultado, las presentes composiciones tienen reducidos efectos laterales adversos o indeseables. Efectos laterales que se evitan con la presente invención incluyen el estímulo del sistema nervioso central y el sistema cardiovascular, y el aumento del estímulo del sistema nervioso central cuando se combina con un antagonista receptor de H_{1}, por ejemplo, una antihistamina.

Antecedente de la invención

Los fármacos simpatomiméticos están relacionados estructural y farmacológicamente con la anfetamina. Generalmente actúan uniéndose o activando a receptores adrenérgicos \alpha y \beta que dan como resultado constricción vascular, disminución del flujo sanguíneo y disminución de la secreción de fluidos a los tejidos circundantes. El enlace de receptor de este tipo generalmente disminuye la cantidad de mucosa segregada a las fosas nasales. Por lo tanto, los fármacos simpatomiméticos se usan para tratar la congestión nasal, las alergias y los resfriados. Además, los fármacos simpatomiméticos pueden afectar a la actividad del sistema nervioso central, y se usan como supresores del apetito; también se conocen como agentes midriáticos, lo que quiere dar a entender que dilatan la pupila.

Compuestos que tienen la misma composición atómica y conectividad pero son imágenes especulares uno de otros son enantiómeros. Los prefijos d y l, o (+)o(-), identifican la dirección en la que un enantiómero hace rotar el plano de polarización de la luz. El enantiómero d o (+) es dextrorrotatorio. Recíprocamente, el enantiómero l o (-) es levorrotatorio. Una mezcla de enantiómeros (+) y (-) se denomina mezcla racémica. Según se usa aquí, el término ``enantiómero'' quiere dar a entender un enantiómero sencillo que está sustancialmente exento del enantiómero opuesto y/o de cualquier otro estereoisómero. También, según se usa aquí, la expresión ``sustancialmente exento de'' quiere dar a entender que la relación de enantiómero (+) a enantiómero (-) es al menos 80:20, por ejemplo 85:15 y, preferiblemente, 90:10, más preferiblemente 95:5 y, todavía más preferiblemente, 99:1 o mayor.

Un sistema alternativo de clasificación para estereoisómeros usa los prefijos (S) y (R), que se basa en la configuración estructural del centro de quiral en lugar de basarse en la actividad óptica del compuesto.

Alfa-[1-(metilamino)etil]benceno-metanol es una molécula con dos centros de quiral. Como tal, este compuesto tiene cuatro estereoisómeros, que se presentan como dos pares de enantiómeros. Un par de enantiómeros se denomina ``eritro'', el otro par se denomina ``treo''. Los enantiómeros eritro de alfa-[1-(metilamino)etil]benceno-metanol se denominan (+)-efedrina y (-)-efedrina.

Se conocen algunos compuestos simpatomiméticos. Por ejemplo, (+)-pseudoefedrina es un compuesto simpatomimético que se vende como descongestivo. Sin embargo, (+)-pseudoefedrina se puede convertir fácilmente en el fármaco psicoactivo S-metamfetamina, por reducción del grupo hidroxilo a hidrógeno. Por lo tanto, este descongestivo usado comúnmente tiene algunas características indeseables.

Se ha usado (-)-efedrina y su mezcla racémica de (-) y (+)-efedrina para tratar la congestión nasal. Sin embargo, la (-)-efedrina y la mezcla racémica de (-) y (+)-efedrina estimulan el sistema nervioso central. 95 AMERICAN HOSPITAL FORMULATORY SERVICE 815. Por consiguiente, existe necesidad de un descongestivo nasal que tenga los efectos beneficiosos descongestivos de (+)-pseudoefedrina y (-)-efedrina, sin sus características indeseables ni sus efectos laterales adversos.

Sumario de la invención

La invención perfila una composición farmacéutica que incluye una cantidad terapéuticamente eficaz de (+)-efedrina, un antagonista receptor de H_{1} y un soporte farmacéuticamente aceptable, en donde la composición está sustancialmente exenta de (-)-efedrina, por ejemplo, en donde la relación de (+)-efedrina a (-)-efedrina es mayor que 90:10, tal como 95:5 o 99:1. En un aspecto, la presente composición no induce en un paciente un efecto lateral adverso que se induce por la administración de otra composición, tal como una mezcla racémica, que incluye cantidades sustanciales de (-)-efedrina. Según la invención, el efecto lateral adverso se reduce, se hace más suave o se evita esencialmente. Los efectos laterales adversos incluyen el estímulo del sistema cardiovascular (por ejemplo presión sanguínea elevada), estimulación del sistema nervioso central, y una interacción con otro fármaco tal como un antagonista receptor de H_{1} como triprolidina.

En Biol. Pharm. Bull. Vol. 19 Nº 11, 1996, páginas 1423-1428 se describen efectos cronotrópicos de isómeros ópticos de efedrina y metilefedrina en aurículas sanas aisladas de ratas y en la evaluación in vitro de acciones directas sobre beta-1-adrenorreceptores (XP 002100765).

En JPN. J. Pharmacol. Vol. 25 Nº 4, 1975, páginas 473-475 se describen diferencias en el efecto de los isómeros de efedrina sobre la presión sanguínea en ratas (XP 002100767).

En Life Sci, Vol. 30, Nº 21, 1982, páginas 1817-1826 se describen efectos termógenos de efedrina y congéneres en ratones y ratas.

En Life Sci, Vol. 7, Nº 11, páginas 665-670 se describe la actividad anoréxica de los isómeros de efedrina (XP 002100850).

Ninguno de los documentos anteriores describe una composición farmacéutica con (+)-efedrina y un antagonista receptor de H_{1} como ingredientes activos o el uso farmacéutico de la presente invención.

La composición que se describe se puede formular en concentraciones y unidades de dosificación tales que entre 1 y 6 unidades de dosificación comprendan una cantidad de efedrina suficiente para reducir uno o más efectos fisiológicos de histamina, para reducir la congestión nasal o bronquial, para suprimir el apetito, para reducir los síntomas del trastorno de hiperactividad con déficit de atención, o para activar un receptor adrenérgico, o la respuesta fisiológica mediada por receptor adrenérgico.

Una realización de la invención es la composición farmacéutica que se ha descrito, envasada con instrucciones para la autoadministración de la composición para al menos una de las siguientes actividades farmacológicas: reducir la congestión nasal o bronquial, suprimir el apetito y reducir los síntomas del trastorno de hiperactividad con déficit de atención. Otras indicaciones que son apropiadas para tratamiento con las composiciones descritas incluyen las que se tratan típicamente con fármacos simpatomiméticos.

La invención también perfila la preparación de composiciones farmacéuticas para tratar las situaciones anteriormente descritas mediante administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende (+)-efedrina, un antagonista receptor de H_{1}, y un soporte farmacéuticamente aceptable, estando la composición sustancialmente exenta de (-)-efedrina. Las composiciones de este tipo tienen ventajas que incluyen estar caracterizadas por una reducción sustancial del número y/o severidad de uno o más efectos laterales adversos relacionados con la administración de una composición que incluye (-)-efedrina, típicamente una mezcla racémica de enantiómeros
(+) y (-).

Por lo tanto, la invención es una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de (+)-efedrina, un antagonista receptor de H_{1} y un soporte farmacéuticamente aceptable, en donde la relación de (+)-efedrina a (-)-efedrina es 80:20 o mayor.

Se prefiere una composición farmacéutica en donde dicho antagonista receptor de H_{1} es triprolidina.

El antagonista receptor de H_{1} se selecciona, por ejemplo, de loratadina, descarboetoxiloratadina, fexofenadina, norastemizol, terfenadina y ebastina, y es preferiblemente triprolidina. El método se puede poner en práctica formulando un antagonista receptor de H_{1} con (+)-efedrina para coadministración simultánea o administrando dosificaciones separadas de un antagonista receptor de H_{1} antes, durante, o después de administrar la (+)-efedrina. Por ejemplo, las dosificaciones separadas se pueden envasar juntas o segregadas en dos mitades de una cápsula o píldora.

Hasta hace poco tiempo, los fármacos simpatomiméticos se vendían frecuentemente como mezclas racémicas porque la purificación de un estereoisómero era costosa y requería mucho tiempo. Alternativamente, un estereoisómero, que se puede aislar fácilmente de la naturaleza, se comercializa sin ensayar si un estereoisómero relacionado puede tener o no una mayor eficacia y unos efectos laterales más suaves. Sin embargo, según la presente invención, un estereoisómero puede interactuar más selectivamente que otro con los receptores implicados en la acción simpatomimética. El aislamiento y el uso del estereoisómero más selectivo puede reducir, por lo tanto, no sólo la dosificación requerida, sino uno o más efectos laterales no deseados.

El nivel de destreza en esta técnica es tal que no se podía razonablemente predecir la especificidad del enlace receptor y subsiguientemente los efectos farmacológicos de un enantiómero puro aun cuando se tuviera la siguiente información: 1) la especificidad del enlace receptor y subsiguientes efectos farmacológicos del otro enantiómero; 2) la especificidad del enlace receptor y subsiguientes efectos farmacológicos de la mezcla racémica; o 3) la especificidad del enlace receptor y subsiguientes efectos farmacológicos de la mezcla racémica y del otro enantiómero.

Otros aspectos y ventajas de la invención se describen en las siguientes descripción, ejemplos y reivindicaciones anejas.

Breve descripción de los dibujos

La Figura 1 es un gráfico de barras que muestra los efectos locomotores estimulantes de dosis-respuesta de (+)-efedrina y (-)-efedrina, y d-anfetamina en el pico del tiempo de respuesta. Cada panel muestra la distancia horizontal media (cm/10 minutos) recorrida después de la administración de solución salina (barras blancas) o de dosis (barras sombreadas) del compuesto de prueba durante el período de tiempo de 30 minutos en el que ocurrieron los efectos pico estimulantes. El error típico (E.T.) de la respuesta de cada dosificación se indica con una barra de error. Se estimaron los efectos estimulantes máximos a partir de la función logística del pico que se ajusta a los datos. Los valores ED_{50} proporcionados se refieren a la dosificación que da como resultado 1/2 del efecto estimulante máximo según se interpola de la recta de regresión de la rama ascendente de la curva dosis-efecto.

La Figura 2 es un gráfico de barras que muestra los efectos locomotores depresores de dosis-respuesta de (+)-efedrina, (-)-efedrina, (+)-pseudoefedrina y (-)-fenilefrina. Cada panel muestra la distancia horizontal media (cm/10 minutos) recorrida después de la administración de solución salina (barras blancas) o de dosis (barras sombreadas) del compuesto de prueba durante el período de tiempo de 30 minutos en el que ocurrieron los efectos pico depresores. El error típico (E.T.) de la respuesta de cada dosificación se indica con una barra de error. Los valores ID_{50} se refieren a la dosificación que da como resultado 1/2 del efecto depresor máximo según se interpola de la recta de regresión de la rama descendente de la curva dosis-efecto, considerando que cero cm/10 minutos es la depresión máxima.

La Figura 3 representa los efectos interactivos de (-) y (+)-efedrina con la antihistamina triprolidina. En el panel de la izquierda se proporciona la distancia horizontal media recorrida como función de (-)-efedrina a los 20 minutos después del tratamiento con triprolidina (0 a 25 mg/kg). El error típico (E.T.) de la respuesta de cada dosificación se indica con una barra de error. En el panel de la derecha se proporciona la distancia horizontal media recorrida como función de (+)-efedrina a los 20 minutos después del tratamiento con triprolidina (0,01 a 1 mg/kg). Las líneas horizontales de trazos indican la distancia horizontal media recorrida por el grupo de control que solamente recibió inyecciones de suero salino.

La Figura 4 representa los efectos interactivos de (+)-pseudoefedrina con la antihistamina triprolidina. Se proporciona la distancia horizontal media recorrida como función de la dosificación de (+)-pseudoefedrina a los 20 minutos después del pretratamiento con triprolidina (0,01 a 1 mg/kg). Las líneas horizontales de trazos indican la distancia horizontal media recorrida por el grupo de control que solamente recibió inyecciones de suero salino. El error típico (E.T.) de la respuesta de cada dosificación se indica con una barra de error.

La Figura 5 muestra el cambio en porcentaje en la presión en los conductos aéreos nasales como porcentaje del control y como porcentaje de los niveles de post-histamina asociados con (+)-efedrina, (-)-efedrina, (-)-fenilefrina y (+)-pseudoefedrina. El error típico (E.T.) de la respuesta de cada dosificación se indica con una barra de error.

La Figura 6 muestra el cambio en porcentaje en la presión en los conductos aéreos nasales después de ``una dosis de 75%'' de (+)-efedrina, (-)-efedrina, (-)-fenilefrina y (+)-pseudoefedrina. La dosis de ``75%'' es 75% de la dosis que se ha encontrado que aumenta la presión sanguínea arterial media en 10%.

Descripción detallada de la invención

La presente invención se dirige a una composición farmacéutica de (+)-efedrina, un antagonista receptor de H_{1}, y un soporte farmacéuticamente aceptable, donde la composición farmacéutica está sustancialmente exenta de (-)-efedrina. La composición farmacéutica incluye (+)-efedrina en una dosificación terapéutica adecuada para tratar la congestión nasal o bronquial, la obesidad, el trastorno de hiperactividad con déficit de atención (ADHD), así como para actuar como supresor de apetito y para tratar otras situaciones típicamente tratadas con fármacos simpatomiméticos.

Ambas(+) y (-)-efedrinas son eritroestereoisómeros de \alpha-[1-(metilamino)etil]benceno-metanol. La estructura de las aminas libres de (+)-efedrina y (-)-efedrina es como sigue:

Efedrina

1

\hskip5cm

(1S. 2R)-(+)-,

\hskip1,5cm

(1R. 2S)-(-)-,

\hskip4,7cm

CAS nº 321-98-2

\hskip1cm

CAS nº 299-42-3

La expresión ``sustancialmente exenta'' de (-)-efedrina, según se usa aquí, quiere dar a entender que la composición farmacéutica contiene al menos 80% de (+)-efedrina y 20% o menos de (-)-efedrina, referido al porcentaje en peso de (+)-efedrina a (-)-efedrina. En una realización preferida ``sustancialmente exenta'' de (-)-efedrina quiere dar a entender que la composición contiene al menos 90% de (+)-efedrina y 10% o menos de (-)-efedrina. En una realización más preferida ``sustancialmente exenta'' de (-)-efedrina quiere dar a entender que la composición contiene al menos 95% de (+)-efedrina y 5% o menos de (-)-efedrina del porcentaje en peso de (+)-efedrina y (-)-efedrina. Todavía más preferida es una realización en donde la composición farmacéutica contiene 99% de (+)-efedrina referido al porcentaje en peso de (+)-efedrina y (-)-efedrina.

Según la presente invención, la presente composición de (+)-efedrina y un antagonista receptor de H_{1} está sustancialmente exenta de los efectos laterales adversos relacionados con la administración (-)-efedrina. Efectos laterales asociados con la administración de (-)-efedrina incluyen estimulación del sistema nervioso central, estimulación del sistema cardiovascular e interacciones de fármacos. Interacciones de fármacos de este tipo incluyen el aumento del estímulo del sistema nervioso central cuando se administra (-)-efedrina con otros fármacos, tales como un antagonista receptor de H_{1} (por ejemplo una antihistamina). La administración de las presentes composiciones de (+)-efedrina reduce o evita los efectos laterales de este tipo. También se cree que la administración de (+)-efedrina sustancialmente exenta de (-)-efedrina produciría menos efectos laterales con relación a la administración de mezclas racémicas de (+) y (-)-efedrina.

Así, según la presente invención, la (+)-efedrina no interactúa con otros fármacos tales como los antagonistas receptores de H_{1}, que incluyen las antihistaminas. En particular, la coadministración de (+)-efedrina con la antihistamina triprolidina no da origen a estímulo ni depresión significativa alguna del sistema nervioso central. Debido a la ausencia de interacción de fármacos de este tipo, se pueden incorporar a las presentes composiciones ingredientes activos suplementarios, tales como antihistaminas y descongestivos adicionales. La cantidad de antihistamina presente en la composición farmacéutica dependerá de la antihistamina particular usada.

Antihistaminas que se pueden incorporar en las presentes composiciones incluyen, por ejemplo, alquilaminas, aminoalquiléteres, etilendiaminas, piperazinas y antihistaminas tricíclicas. Antihistaminas de alquilamina incluyen acrivastina, bamipina, bromfeniramina, clorfeniramina, dimetindeno, Metron S, feniramina, pirrobutamina, tenaldina, tolpropamina y triprolidina. Antihistaminas de aminoalquiléter incluyen bietanautina, bromodifenhidramina, carbinoxamina, clemastina, difenhidramina, difenilpiralina, doxilamina, embramina, medrilamina, moxatina, p- metildifenhidramina, orfenadrina, feniltoloxamina y setastina. Histaminas de etilendiamina incluyen aloclamida, cloropiramina, cloroten, histapirrodina, metafurileno, metafenileno, metapirileno, pirilamina, talastine, tenildiamina, hidrocloruro de tonzilamina, tripelenamina y zolamina. Antihistaminas de piperazina incluyen cetizina, clorciclizina, cinarizina, clocinizina e hidroxizina. Antihistaminas tricíclicas incluyen ahistan, azatadina, clorbenzepan, ciproheptadina, deptropina, etimemazina, fenetazina, descarboetoxi-loratadina, cloruro de N-hidroxietilprometazina, isoprometazina, isotipendil, loratadina, mequitazina, prometazina y metilsulfato de tiazinamium. Otras antihistaminas contempladas por la presente invención incluyen antazolina, norastemizol, azelastina, cetoxima, clemizol, astemizol, clobenztropina, ebastina, emedastina, epinastina, fexofenadina, lebocabastina, mebhidrolina, fenindamina, terfenadina y tritocualina.

Antihistaminas preferidas incluyen: acrivastina; bromdifeniramina; clorfeniramina; descarboetoxiloratadina; difenhidramina; loratadina; norastemizol; terfenadina; carboxilato de terfenadina; y triprolidina.

Se puede preparar (+)-efedrina por procedimientos conocidos u obtenerse comercialmente. Métodos para separar los estereoisómeros presentes en una mezcla racémica son bien conocidos para un técnico experimentado. La presente invención también proporciona sales farmacéuticamente aceptables de (+)-efedrina. Por ejemplo, la (+)-efedrina puede ser suministrada como hidrocloruro, bitartrato, tanato, sulfato, estearato, citrato o cualquier otra sal farmacéuticamente aceptable. Métodos de fabricar sales farmacéuticas de (+)-efedrina de este tipo están fácilmente disponibles para un experto normal en la técnica.

Según se usa aquí, ``soporte farmacéuticamente aceptable'' incluye cualquiera y todos los disolventes, medios de dispersión, revestimientos, agentes antibacteriales y antifúngicos, agentes isotónicos y retardadores de absorción y edulcorantes. Se pueden preparar soportes farmacéuticamente aceptables a partir de una amplia gama de materiales que incluyen pero no se limitan a diluyentes, ligantes y adhesivos, lubricantes, desintegrantes, agentes colorantes, agentes esponjantes, agentes saborizantes, agentes edulcorantes y materiales misceláneos tales como tampones y absorbentes que se pueden necesitar para preparar una composición terapéutica particular. El uso de medios y agentes de este tipo con sustancias farmacéuticamente activas es bien conocido en la técnica. Con los datos actuales, a excepción de que un medio o agente convencional sea incompatible con el ingrediente activo, se contempla su uso en las composiciones terapéuticas. También se pueden incorporar ingredientes activos suplementarios a las composiciones.

La presente invención contempla, además, un método de usar composiciones de (+)-efedrina para la preparación de productos farmacéuticos para tratar resfriados, congestión nasal, congestión bronquial, alergias, y obesidad, así como para proporcionar supresión de apetito y para tratar otras situaciones típicamente tratadas con fármacos simpatomiméticos. Así, en una realización la presente invención se dirige a la preparación de composiciones farmacéuticas para aliviar la congestión nasal y bronquial con una cantidad terapéuticamente eficaz de (+)-efedrina, en donde la (+)-efedrina está sustancialmente exenta de (-)-efedrina. La administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de (+)-efedrina que está sustancialmente exenta de (-)-efedrina reduce muchos de los efectos laterales que se observan con la administración de una composición que incluye (-)-efedrina. Efectos laterales de este tipo incluyen el estímulo del sistema nervioso central, el estímulo del sistema cardiovascular y las interacciones de fármacos que incluyen el aumento del estímulo del sistema nervioso central y del sistema cardiovascular cuando se administra con otros fármacos, por ejemplo un antagonista receptor de H_{1}.

Según la presente invención, una cantidad terapéuticamente eficaz de (+)- efedrina es una cantidad suficiente para aliviar uno o más síntomas de una situación que se puede tratar por un fármaco simpatomimético. En una realización, dicha cantidad es una cantidad de (+)-efedrina suficiente para enlazar o activar un receptor adrenérgico, por ejemplo, un receptor adrenérgico \alpha o \beta. Cuando se administra en tal cantidad, la (+)-efedrina, por ejemplo, puede estimular una respuesta mediada por receptor adrenérgico. Cuando la situación es una congestión nasal, la cantidad terapéuticamente eficaz es la cantidad necesaria para reducir la congestión nasal. Cuando la congestión bronquial es la situación, la cantidad terapéuticamente eficaz es la cantidad necesaria para reducir la congestión bronquial o para proporcionar una broncodilatación. Cuando la situación es la inflamación o la reacción alérgica, la cantidad terapéuticamente eficaz es la cantidad necesaria para contrarrestar los efectos fisiológicos de la histamina. Preferiblemente, dicha cantidad terapéuticamente eficaz también produce efectos laterales menores o más suaves que los observados con la administración de (-)-efedrina, o una mezcla racémica de (+) y (-)-efedrina. El técnico experto puede determinar fácilmente las cantidades terapéuticamente eficaces necesarias para tratar estas situaciones, particularmente a la luz de las enseñanzas que aquí se proporcionan.

Las composiciones farmacéuticas de la presente invención contienen (+)-efedrina en una cantidad terapéuticamente eficaz que es suficiente para proporcionar descongestión, broncodilatación, suprimir el apetito, antagonizar los efectos de la histamina, o tratar los trastornos de la hiperactividad con déficit de atención, al tiempo que tiene menores o más suaves efectos laterales que los que tendrían dosis similares de (-)-efedrina o de una mezcla racémica de (+) y (-)-efedrina. Dicha cantidad terapéuticamente eficaz sería de aproximadamente 0,1 microgramos (\mug) a aproximadamente 50 miligramos (mg) por kilogramo de peso corporal y, preferiblemente, aproximadamente 1 \mug a aproximadamente 10 mg por kg de peso corporal. Más preferiblemente, la dosificación puede oscilar de aproximadamente 10 \mug a aproximadamente 5 mg por kg de peso corporal. Incluso más preferiblemente, la dosificación puede oscilar de aproximadamente 50 \mug a aproximadamente 500 \mug por kg de peso corporal. Las dosificaciones se pueden determinar fácilmente por un experto normal en la técnica y se pueden formular fácilmente en las composiciones farmacéuticas objeto de la presente. Por ejemplo, un experto en la técnica puede determinar una cantidad terapéuticamente eficaz de las presentes composiciones determinando la cantidad de (+)-efedrina suficiente para enlazar o activar un receptor adrenérgico \alpha. Las enseñanzas de la presente invención, incluidas las metodologías y los datos que se proporcionan a continuación (Ejemplos 1-3), guían adicionalmente al experto en la técnica para formular apropiadamente composiciones con una cantidad terapéuticamente eficaz de (+)-efedrina. Las propiedades de supresión de apetito de las composiciones que se describen se pueden demostrar, por ejemplo, mediante uso en modelos animales conocidos para los expertos en la técnica, tales como los que se describen en J. L. Zelger y E. Carlini, 12 PHARMACOLOGY, BICHEMISTRY & BEHAVIOR 701-05 (1980).

La (+)-efedrina objeto se puede administrar por cualquier vía conveniente. Por ejemplo, la (+)-efedrina se puede inhalar, ingerir, aplicar tópicamente o inyectar parenteralmente. La (+)-efedrina objeto se puede incorporar en crema, solución, o suspensión para administración tópica. Preferiblemente, la (+)-efedrina se inhala o se administra oralmente o tópicamente.

La presente invención se explicará ahora adicionalmente con los siguientes ejemplos. Sin embargo, la presente invención no se debería considerar como limitada por ellos. A menos que se indique lo contrario, todas las partes, porcentajes y similares están en peso.

Ejemplo 1 Estudios de enlaces de receptor adrenérgico \alpha y adrenérgico \beta

Muchos procesos fisiológicos están mediados por el enlace de compuestos químicos a receptores \alpha_{1}, \alpha_{2} y \beta. Por ejemplo, muchos compuestos que reducen la congestión nasal se unen a receptores \alpha_{1} y \alpha_{2} y algunos reducen la congestión bronquial uniéndose a receptores \beta. Por consiguiente, un compuesto que se une a receptores \alpha_{1}, \alpha_{2} y/o \beta puede ser un eficaz descongestivo nasal o bronquial.

Más específicamente, los receptores adrenérgicos \alpha_{2}, concentrados sobre arteriolas precapilares de la mucosa nasal, inducen vasoconstricción arteriolar cuando son activados por un compuesto simpatomimético. Dicha vasoconstricción disminuye el flujo sanguíneo a través de aquellos vasos y reduce el exceso de fluido extracelular asociado con la congestión nasal y con la nariz moqueante. Por otra parte, los receptores adrenérgicos \alpha_{1} se concentran sobre las vénulas postcapilares en la mucosa nasal. El enlace con receptores \alpha_{1} induce venoconstricción, que también reduce la congestión nasal.

Los compuestos que se unen a receptores \beta_{2} también pueden ayudar a aliviar los síntomas de la congestión nasal porque el enlace con el receptor \beta_{2} se relaciona con el aumento de la broncodilatación y la disminución de la resistencia del conducto de aire.

El enlace de (+)-efedrina con receptores \alpha_{1}, \alpha_{2} y \beta_{2} se comparó con el de (+)-pseudoefedrina, (-)-fenilefrina y (-)-efedrina. La (+)-pseudoefedrina es un conocido descongestivo que se vende bajo la marca registrada SUDAFED® (Warner-LambertCo., Morris Plains, NJ). También es conocido que (-)-fenilefrina (NEOSYNEPHRINE®, Sanofi, East Hanover, NJ) es un descongestivo.

Métodos Preparaciones de Membrana Receptores pulmonares alfa-1 y beta-2

Se separaron los pulmones de perros mestizos de los conductos aéreos cartilaginosos y de los vasos sanguíneos principales, se pesaron, se trocearon y se colocaron en 10 volúmenes de hielo tamponado con sacarosa (50 mM Tris-HCl, pH 7,4, 1 nM EGTA, sacarosa 0,32 M). El tejido se homogeneizó entonces en un homogeneizador de tejido Polytron, tipo PT10/35, tamaño 89/PTA 20S, (Kinematica, Westbury, NY). El homogeneizado se filtró a través de dos capas de tela filtrante de queseros y el filtrado se trató tres veces usando un homogeneizador de 55 ml de Con-Torque Potter (Eberbach Corporation, Ann Arbor, MI). El filtrado tratado se centrifugó a 1000 x g durante 15 minutos a 4ºC. El líquido sobrenadante se re-centrifugó a 30.000 x g durante 30 minutos a 4ºC y el granulado resultante se lavó y se resuspendió en 10 volúmenes de tampón Tris (50 mM Tris HCl, pH 7,4, 1 mM EGTA) y se incubó a 37ºC durante 30 minutos en un baño de agua agitado. La suspensión se centrifugó a 4ºC a 30.000 x g durante 30 minutos y el granulado resultante se lavó en 10 volúmenes de tampón Tris para un total de tres centrifugaciones y lavados adicionales. El granulado final se resuspendió en 0,5 volumen de 50 mM Tris HCl, pH 7,4, 1 mM EGTA, 25 mM MgCl2. Se determinó la concentración de proteínas por el método de Lowry y se ajustó la suspensión final a 10 mg de proteína/ml, se tomó la parte alícuota y se almacenó a -90ºC. También se prepararon partículas para receptores \beta_{2} usando idéntico procedimiento excepto que la concentración de proteína final se ajustó a 0,1 mg/ml.

Receptores cerebrales alfa-2

Se recogieron membranas de perros mestizos del córtex frontal canino y se prepararon como se describe anteriormente con respecto a los pulmones, excepto que la concentración de proteína de membrana final se ajustó a 0,5 mg/ml.

Ensayos de enlace Enlace alfa-1, ^{3}H-Prazocin

Se incubaron preparaciones de membrana pulmonar canina (500 \mug de proteína/100 \mul) con ^{3}H-Prazocin (77,9 Ci/mmol) durante 60 minutos a 25ºC en un volumen final de 0,25 ml de tampón (50 mM Tris-HCl, 1 mM EGTA, pH 7,4). Se determinó el enlace no específico para cada punto de concentración en incubaciones separadas usando 10 \muM de fentolamina. Cada punto experimental se determinó por triplicado. La concentración final de ^{3}H-Prazocin fue 0,7-1,1 nM en estudios de competencia y entre 0,1 y 10 nM en experimentos de saturación. Todas las incubaciones de ensayo de enlaces se terminaron por dilución rápida con 2 ml de lavado en frío con tampón de hielo (50 mM Tris-HCl, pH 7,4) y filtración a través de filtros quemados FP-100 Whatman GF/B (Biomedical Research & Developmente Lab. Gaithersburg, MD) usando un recolector Brandel de receptor-enlace. Los filtros se lavaron dos veces más con 4 ml de tampón de lavado y luego se añadieron a 6 ml de Cytoscint (ICN, Costa Mesa CA) para conteo por escintilación líquida (Barnes y otros, 23 MOL. PHARMACOL. 570-75 (1983)). En todos los experimentos, se enlazó menos de 17% del radioligando añadido y el enlace específico fue aproximadamente 65-70% del enlace total.

Enlace alfa-2, p-^{125}yodoclonidina

Se incubaron membranas cerebrales caninas (50 \mug de proteína/100 \mul) con p-yodoclonidina (2200 Ci/mmol) durante 120 minutos a 25ºC en un volumen final de 0,25 ml. Se determinó el enlace no específico en incubaciones separadas en presencia de 10 \muM de fentolamina. La concentración final de p-yodoclonidina fue 44-45 pM en estudios de competencia y entre 50 pM y 10 nM en experimentos de saturación. Se separaron la p-^{125}yodoclonidina enlazada y libre y se cuantificó la enlazada como se describe a continuación para los ensayos ICYP. Una media de 6% de radioligando estaba enlazada, y el enlace específico fue de aproximadamente 91% del enlace total.

Enlace beta-2, ^{125}yodocyanopindolol (^{125} ICYP)

Se incubaron membranas pulmonares caninas (10 \mug de proteína/100 \mul) con ^{125}ICYP (2200 Ci/mmol) durante 110 minutos a 30ºC en un volumen final de 0,25 ml. Se determinó el enlace no específico en incubaciones separadas en presencia de 2 \muM d,l-propranolol. Cada punto experimental se determinó por triplicado. La concentración final de ^{125}ICYP fue 8-12 pM en estudios de competencia y entre 2 y 200 pM en experimentos de saturación. Las incubaciones se terminaron como se describe anteriormente para los ensayos \alpha_{1}. Se colocaron filtros en tubos de polietileno y el ligando enlazado se determinó por espectrometría gamma (Sano y otros, 52 LIFE SCIENCES 1063-70 (1993)). Una media de 27% de radioligando estaba enlazada y el enlace específico fue de aproximadamente 90% del enlace total.

Todos los datos se analizaron con ayuda de programas de ajuste no lineal de curvas por microordenador (PRISM 2.0, Graphard Software, San Diego CA).

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Resultados

Se evaluaron los receptores residentes en cada una de las tres preparaciones de membranas por análisis de saturación normalizado después de la adición de concentraciones crecientes del radioligando apropiado. En el caso de los ensayos \alpha_{1} y \beta_{2}, el análisis matemático fue coherente con el ajuste de un punto. El análisis del receptor \alpha_{2} se ajustó mejor como de dos puntos, uno de alta y otro de baja afinidad.

Se ajustó el radioligando añadido para ensayos subsiguientes de desplazamiento de \alpha_{2} para evaluar solamente el receptor de afinidad alta. Se evaluaron con epinefrina las contribuciones de los enlaces de p-yodoclonidina a receptores de imidazolina en los ensayos de desplazamiento de \alpha_{2}. La epinefrina desplazó fácilmente toda la p-yodoclonidina enlazada, lo que indica que, a las concentraciones empleadas, la p-yodoclonidina marcó pocos receptores de imidazolina si es que marcó alguno. De modo similar, con el ensayo de \beta_{2}, se evaluaron con el antagonista selectivo de \beta_{1} atenolol, las contribuciones de los enlaces de ICYP a los puntos \beta_{1}. Atenelol fue muy ineficaz para desplazar ICYP de las membranas pulmonares, lo que indica lo que indica poco enlace \beta_{1} si hubo algo con el ensayo. Todos los análisis subsiguientes con desplazamiento por compuestos de prueba individuales usaron el K_{d} determinado a partir de análisis de saturación puesto que generalmente se considera una estimación más fiable de la verdadera constante de equilibrio de disociación.

La Tabla 1 proporciona las características de enlace de los receptores \alpha_{1} en la preparación de membrana para prazocin. K_{d} es la constante de equilibrio de disociación aparente para prazocin. B_{max} es el número de puntos de enlace de receptor \alpha_{1} para prazocin en esta preparación de membrana expresado como femtomoles por mg de proteína.

TABLA 1

Características del enlace de receptor \alpha_{1} (membranas pulmonares caninas)
Medida	Sumario
Análisis Scatchard
K_{d}	0,84 nM
B_{max}	55
Análisis de saturación
K_{d}	0,73 nM
B_{max}	53

La Tabla 2 proporciona las características de enlace de los receptores \alpha_{2} en la preparación de membrana para p-yodoclonidina. K_{d} es la constante de equilibrio de disociación aparente para p-yodoclonidina. B_{max} es el número de puntos de enlace de receptor \alpha_{2} para p-yodoclonidina en esta preparación de membrana expresado como femtomoles por mg de proteína. Se ha de señalar que los datos de dos puntos del análisis de saturación son más fiables que el análisis de Scratchard porque el análisis de Scratchard supone un sólo punto. Con el fin de obtener ambos valores a partir de las representaciones gráficas de Scratchard, los puntos en la zona de transición se dividieron arbitrariamente y se asignaron a representaciones gráficas de alta y baja afinidad.

TABLA 2

Características del enlace de receptor \alpha_{2} (membranas de córtex cerebral canino)
Medida	Sumario
Análisis Scatchard
K_{d \; 1} (alta afinidad)	0,15 nM
K_{d \; 2} (baja afinidad)	0,87 nM
B_{max \; 1} (alta afinidad)	67
B_{max \; 2} (baja afinidad)	120

TABLA 2 (continuación)

Características del enlace de receptor \alpha_{2} (membranas de córtex cerebral canino)
Medida	Sumario
Análisis de saturación
K_{d \; 1} (alta afinidad)	0,15 nM
K_{d \; 2} (baja afinidad)	3,01 nM
B_{max \; 1} (alta afinidad)	57
B_{max \; 2} (baja afinidad)	73

La Tabla 3 proporciona las características de enlace de los receptores \beta_{2} en la preparación de membrana para ^{125}yodocianopidolol (ICYP). K_{d} es la constante de equilibrio de disociación aparente YCIP. B_{max} es el número de puntos de enlace de receptor \beta_{2} para YCIP en esta preparación de membrana expresado como femtomoles por mg de proteína.

TABLA 3

Características del enlace de receptor \beta_{2} (membranas pulmonares caninas)
Medida	Serie 1	Serie 2	Sumario
Análisis Scatchard
K_{d}	9,9 pM	7,8 pM	8,9 pM
B_{max}	150	139	145
Análisis de Saturación
K_{d}	9,6 pM	9,3 pM	9,5 pM
B_{max}	149	142	146

La Tabla 4 a continuación muestra la concentración (\muM) del fármaco de ensayo requerida para inhibir 50% de los enlaces específicos de prazocin, p-yodoclonidina o ICYP (IC_{50}). También se proporcionan los cocientes de las constantes de disociación aparentes (K_{i}) y se calcularon para cada compuesto basados en el cociente K_{i} = IC_{50}/1+I/K_{d} (donde I es la concentración del trazador añadido y K_{d} es la constante de equilibrio de disociación determinada empíricamente para la población de receptor usando los valores de análisis de saturación). Se proporciona K_{i} entre receptores para cada compuesto a fin de expresar la preferencia relativa de cada uno para el receptor en cuestión. Por ejemplo, los cocientes cerca de 1 indican poca preferencia del compuesto para uno u otro receptor. Cocientes más altos indican preferencia para el receptor en el denominador y números menores que 1 indican preferencia para el receptor en el numerador. Los datos que se muestran en la Tabla 4 son los datos de media para IC_{50} y K_{i} recogidos para varias muestras de prueba para cada compuesto.

TABLA 4

	Alfa-1	Alfa-2	Beta-2	Cociente K_{i}
Fármacos	IC_{50}	K_{i}	IC_{50}	K_{i}	IC_{50}	K_{i}	\alpha1/\alpha2	\alpha1/\beta2	\beta1/\alpha2
(+)-pseudo-efedrina	691	299	28	21	502	220	14,2	1,35	10,5
(-)-fenil-efedrina	7	3	0,02	0,02	10	5	200	0,60	333,3
(-)-efedrina	109	47	0,77	0,59	12	5	79,7	9,40	8,47
(+)-efedrina	92	40	31	24	1361	614	1,67	0,07	25,6

Ejemplo 2 Efecto de (+)-efedrina sobre el sistema nervioso central

Muchas sustancias simpatomiméticas estimulan el sistema nervioso central, que es una de las razones por las que muchos descongestivos tienen efectos laterales indeseables como el insomnio. La siguiente prueba muestra el grado de estímulo del sistema nervioso central para (+)-efedrina con relación a (+)-pseudoefedrina, (-)-fenilefrina y (-)-efedrina y un control, (+)-anfetamina.

Más aun, a menudo se venden descongestivos en combinación con otros ingredientes activos (por ejemplo, Claritin-D® fabricado por Schering, Kenilworth, NJ y Seldane-D® fabricado por Hoechst Marion Roussel, Kansas City, MO). En los productos que contienen dos o más ingredientes activos, las interacciones entre los ingredientes activos son indeseables. En este ejemplo, también se observó el grado de interacción de la (+)-efedrina con una conocida histamina, triprolidina, y se comparó con todas las interacciones mencionadas entre triprolidina y (+)-pseudoefedrina, (-)-fenilefrina y (-)-efedrina.

Métodos Animales

Se usaron en este estudio ratones macho Webster-Suizo (HSD ND, Harian Sprague Dawley, Houston, TX), de 2-3 meses de edad. Cada grupo de dosis constaba de 8 ratones (el número total de ratones implicados fue 1.764). Los ratones se alojaron de 2 a 4 por jaula en jaulas de policarbonato transparente de 30,4 x 22,9 x 15,2 cm con comida y agua disponible a voluntad durante una semana al menos antes de la prueba de actividad locomotora. La colonia se mantuvo a 23\pm1ºC, en un ciclo normal de luz-oscuridad que comienza a las 07,00 h. Todas las pruebas tuvieron lugar durante la porción de luz del ciclo luz-oscuridad.

Aparato

Se midió la actividad locomotora (movimiento hacia adelante) usando un sistema óptico normalizado de comprobación de actividad (Modelo KXYZCM), Omnitecs electronics, Columbus, OH. La actividad se comprobó en cuarenta cámaras acrílicas trasparentes de 40,5 x 40,5 x 30,5 cm que se alojaron en conjuntos de dos dentro de cámaras de atenuación de sonido más grandes. Se espació un panel de 16 rayos de luz infrarroja y sus correspondientes fotodetectores a distancias de 2 cm a lo largo de los lados y a 2,4 cm sobre el suelo de cada cámara de actividad. Una lámpara incandescente de 7,5 W sobre cada cámara proporcionaba iluminación tenue por medio de un reostato ajustado al 20% del total del máximo de la escala. Los ventiladores daban un nivel de ruido ambiental de 80 dB dentro de la cámara.

Fármacos

Se obtuvieron (+)-pseudoefedrina, (-)-fenilefrina, (-)-efedrina, (+)-efedrina y (+)-anfetamina de Sigma Chemical Company (St. Louis, MO). Se obtuvo hidrocloruro de triprolidina de Research Biochemicals International, (Natick, MA). Todos los compuestos se disolvieron en suero salino del 0,9% y se inyectaron por vía i.p. en un volumen de 10 ml/kg de peso corporal.

Procedimiento Efectos locomotores estimulantes

En estos estudios se colocaron ratones en cámaras de prueba de actividad inmediatamente después de la inyección de suero salino o de dosificarles uno de los compuestos de la prueba que oscilaba de 0,1 mg/kg a 250 mg/kg. Se usó (+)-anfetamina como control positivo. Se registró la distancia horizontal total recorrida (cm) a intervalos de 10 minutos durante una sesión de 2 horas. Se asignaron grupos separados de 8 ratones a cada grupo de dosis o suero salino y la prueba de dosis-efecto se prolongó para cada compuesto hasta que se pudieron estimar los efectos estimulantes o depresores máximos. Se probó un grupo de control separado en paralelo con cada compuesto.

Para los compuestos con efectos estimulantes significativos, se estimaron la potencia y la eficacia durante un período de tiempo de 30 minutos en los que se observaron efectos estimulantes máximos a la dosis más baja. Usando la Tabla-Curva 2D v2.03 (Jandel Scientific, San Rafael, CA) se ajustó la distancia total media ponderada recorrida (cm/10 minutos) para este período a una función pico logística de 3 parámetros del log_{10} de la dosis (con la constante ajustada a la media del grupo del suero salino), y el máximo efecto estimado para la curva resultante. Se estimó ED_{50} (dosis que produce ½ de la actividad estimulante máxima) a partir de una regresión lineal frente al log_{10} de la dosis de la porción ascendente de la curva dosis-efecto. La eficacia estimulante era el efecto de pico del compuesto (cm/10 min) según se estima a partir de la función del pico logístico, menos la distancia media de control recorrida (cm/10 min), y se expresaba para cada compuesto estimulante como cociente con respecto al efecto estimulante determinado para (+)-anfetamina.

Efectos locomotores depresivos

Se estimaron la potencia y la eficacia de los compuestos durante un período de tiempo de 30 minutos en los que se produjo la depresión máxima a la dosis más baja. Se ajustó la distancia total media ponderada recorrida (cm/10 minutos) para este período a una función lineal del log_{10} de la dosis de la porción descendente de la curva dosis-efecto. ID_{50} era la dosis que producía ½ de la actividad depresiva máxima, en la que la depresión máxima = 0 cm/30 minutos. La eficacia era el cociente del efecto depresivo máximo a la depresión máxima posible para cada compuesto (distancia total media ponderada del grupo de control menos la distancia total media más baja, expresada como cociente con respecto a la distancia total del grupo de control).

Estudios de interacción de antihistamina H_{1}

Se determinó el potencial de cada compuesto para interactuar con antihistaminas H_{1} probando si una conocida antihistamina H_{1}, triprolidina, producía un cambio en los efectos estimulantes o depresivos observados para cada compuesto simpatomimético. Se usó triprolidina como ejemplo de la clase de antihistaminas H_{1}. Se inyectó triprolidina (a 0,01, 0,1, 1,0, o 25 mg/kg) o suero salino 20 minutos antes de administrar una de las tres dosis de cada compuesto simpatomimético. Inmediatamente después se colocaron los ratones en el aparato de prueba de actividad durante una sesión de 2 horas. Las dosis del compuesto de prueba se seleccionaron a partir de la porción ascendente o descendente de la curva dosis-efecto determinada a partir de los estudios de compuesto solo. Se probaron 8 ratones para cada combinación triprolidina/simpatomimético.

Análisis estadístico

Los datos del transcurso del tiempo para cada compuesto se consideraron por análisis de varianza de 2 factores con la dosis como espacio entre grupos y el tiempo como factor dentro de grupos. Los datos de dosis-efecto se consideraron por análisis de varianza de 1 factor y se llevaron a cabo comparaciones individuales planificadas entre cada dosis y el grupo de control de suero salino. Se consideraron estudios de interacción por análisis de varianza de 2 factores con las dosis de pretratamiento y de prueba como factores.

Se llevaron a cabo análisis de varianza de 2 factores sobre la distancia horizontal recorrida usando la dosis como factor entre sujetos y el tiempo como factor dentro de los sujetos. Solamente la (+)-anfetamina exhibió un efecto significativo de dosis y tiempo, con una interacción de dosis y tiempo (todos los Fs > 2,7; todos los valores p < 0,01).

Resultados

Los efectos de los compuestos probados sobre la actividad locomotora se sumarizan en la Tabla 5.

(Tabla 5 pasa a página siguiente)

TABLA 5

		Estímulo	Depresión
Compuesto	Intervalo^{1}	Eficacia^{2}	Potencia^{3}	Tiempo^{4}	Eficacia^{5}	Potencia^{6}	Tiempo^{7}
(+)-pseudoefedrina	1-100	0,21	12,6	40-70	0,58	72,4	10-40
(-)-fenilefrina	0,1-10	0	-^{8}	60-90	0,77	2,3	0-30
(-)-efedrina	0,5-250	0,80	38,2	50-80	0,45	7,4	10-40
(+)-efedrina	1-250	0,25	84,9	50-80	0,85	4,4	10-40
1 Intervalo de dosis ensayado (mg/kg)
2 Cociente del efecto estimulante máximo del compuesto de prueba con respecto al máximo efecto de la
(+)-anfetamina.
3 Dosis que da como resultado ½ del efecto estimulante máximo (ED_{50}) en mg/kg i.p.
4 Período de 30 min después de la inyección en el que ocurrió el máximo efecto estimulante.
5 Cociente del efecto depresivo máximo con respecto al máximo efecto posible (actividad locomotora cero).
6 Dosis que da como resultado ½ del efecto depresivo máximo (ID_{50}) en mg/kg i.p.
7 Período de 30 min después de la inyección en el que ocurrió el máximo efecto depresivo.
8 ``-'' valor no calculado.

Efectos locomotores estimulantes Transcurso del tiempo

Los ratones a los que se había inyectado (+)-anfetamina (control) mostraron un aumento dependiente del tiempo y de la dosis en la distancia recorrida dentro de los 10 minutos siguientes a la inyección. Los efectos pico estimulantes ocurrieron durante los primeros 30 minutos después de 2,5 mg/kg y continuaron durante al menos 60 minutos. El ED_{50} para (+)-anfetamina fue 1,3 mg/kg.

Después de la (-)-efedrina se hicieron evidentes aumentos en la actividad locomotora de más lento establecimiento y de más larga duración dependientes de la dosis. La (-)-efedrina dio como resultado una locomoción aumentada dentro de los 40 minutos después de 50 a 100 mg/kg, con efectos pico que ocurren a los 50 a 80 minutos después de la inyección y que disminuyen a continuación. Se hizo evidente un pequeño aumento en la actividad locomotora después de 100 mg/kg de (+)-efedrina, aunque la mayoría de las dosis de este compuesto quedaron sin efecto o deprimieron la actividad locomotora. La Figura 1 sumariza estos resultados, ilustrando que la (-)-efedrina tenía un efecto estimulante mayor que la (+)-efedrina sobre el sistema nervioso central. Se hicieron evidentes unos efectos estimulantes escasos o nulos dentro de 2 horas después de administrar (+)-pseudoefedrina.

La potencia de estos compuestos sobre los efectos locomotores estimulantes se han sumarizado anteriormente en la Tabla 5.

Efectos locomotores depresivos Transcurso del tiempo

El tratamiento con (+)-pseudoefedrina, y en menor grado, (+)-efedrina, dio como resultado cierta depresión locomotora dependiente de la dosis dentro de los 10 a 20 minutos después de la invención. (Figura 2, Tabla 5). Estos efectos duraron de 20 minutos a 2 horas o más, dependiendo de la dosis y del compuesto.

Eficacia/potencia depresiva

La potencia y la eficacia para los efectos locomotores depresivos de estos compuestos también se han sumarizado en la Tabla 5 anterior. La Figura 2 muestra las relaciones dosis-respuesta para los efectos locomotores depresivos de los simpatomiméticos para el período de tiempo en el que se observaron en primer lugar los máximos efectos depresivos como función de la dosis. El máximo efecto depresivo se estimó como la diferencia entre la media del grupo de control y la media del grupo de dosis con la actividad locomotora más baja. Se admitió que el máximo efecto posible era equivalente a la media del grupo de control.

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Interacciones de triprolidina Triprolidina sola

Cuando se inyectan inmediatamente antes de la prueba, las dosis de triprolidina de 0,25 a 25 mg/kg no afectaron a la distancia horizontal durante el período de prueba de 2 horas. Se observó depresión de locomoción dependiente de la dosis después de 50 y 100 mg/kg de triprolidina, que comienzan dentro de los 10 minutos después de la inyección y que duran de 30 a 40 minutos. Un análisis varianza de 1 factor sobre la distancia media/10 minutos por separado durante el período de 0-30 minutos después de la inyección sugirió un efecto principal de la dosis significativo donde F(8,102)=7,7, p < 0,001, aunque las comparaciones individuales de los grupos de dosis con el de control en este análisis demostraron que los efectos significativos de la triprolidina estaban restringidos a las dosis de 50 y 100 mg/kg
(ps < 0,1).

Interacciones de triprolidina

Las Figuras 3 y 4 muestran que el pretratamiento de triprolidina estimula a los ratones tratados con (+)-pseudoefedrina y (-)-efedrina. No se observa estímulo del sistema nervioso central de este tipo en ratones pretratados con triprolina y luego tratados con (+)-efedrina. El estímulo del sistema nervioso central responde a la dosis. Después del pretratamiento con 0,01, 0,1, ó 1,0 mg/kg de triprolidina, se observó un movimiento horizontal aumentado en los ratones que recibieron (+)-pseudoefedrina y (-)-efedrina, pero no (+)-efedrina. Así, no hay interacción de fármacos evidente entre (+)-efedrina y una antihistamina tal como triprolidina. Terapias de combinación que incluyen coadministración de descongestivos y antihistaminas son una parte significativa del mercado de las vías respiratoria superiores, de modo que la ausencia de interacción de fármacos es comercialmente y terapéuticamente útil.

Conclusión

La (+)-efedrina produce menos estímulo del sistema nervioso central y tiene menos potencia en la depresión que la (-)-efedrina. Más aun, combinar triprolidina y (+)-efedrina no dio origen a interacciones negativas de fármacos tales como estímulo o depresión del sistema nervioso central. Por lo tanto, la (+)-efedrina no parece que interactue con receptores de histamina H_{1}, y se puede usar en combinación con otros fármacos, particularmente antihistamina H_{1} tales como triprolidina.

Ejemplo 3 Actividad descongestiva de (+)-efedrina

Se llevó a cabo un estudio comparando la actividad descongestiva de (+)- efedrina, (+)-pseudoefedrina, (-)-fenilefrina y (-)-efedrina en ratas normales y preparadas con histamina a diversas dosificaciones.

Protocolo experimental

El método usado estaba basado en el reseñado por Lung para la medición de la resistencia de los conductos aéreos nasales, 104 ACTA OTOLARYNGOL (Estocolmo) 526 (1987). Se anestesiaron intraperitonealmente ratas Sprague Dawley (intervalo de peso 247-365) con pentobarbital sódico (50 mg/kg). Se colocaron las ratas en una manta calefactora, en un canal en forma de V, con el dorso hacia abajo. Se llevó a cabo una traqueotomía y se posicionó una cánula traqueal, se fijó y se dejó abierta al aire ambiente. Se colocó una cánula en la parte superior de la tráquea y se la hizo avanzar hasta que se alojó en la abertura nasal posterior. Se inyectó solución salina normal (0,5 ml) en la cánula nasal para confirmar la posición así como para humedecer la mucosa nasal. Después de que se confirmó la canulación nasal, se fijó la cánula en su sitio con una sutura colocada alrededor de la tráquea. Se expelió el exceso de fluido del conducto aéreo nasal con una pequeña corriente de aire (2-3 segundos) a través de la cánula nasal. Adicionalmente, en los estudios que correlacionan los cambios de presión sanguínea con los cambios en la presión de los conductos aéreos nasales, se posicionó una cánula en la arteria carótida interna (PE.50) y se conectó a una registradora Grass multicanal (Grass Instruments, Quincy, MA) usando un transductor de presión (Isotec®, Quest Medical, Allan, TX).

Se midió la presión en el conducto aéreo nasal usando un transductor de presión (Validyne Engineering, Northridge, CA) con una membrana en el intervalo de 2,5 cm de H_{2}O conectada a una registradora multicanal (Grass Instruments, Quincy, MA). Se hizo pasar aire a través de un medidor de caudal de medida directa en la conducción (Gilmont Instruments, Barrington, IL) conectado a la cánula de la abertura nasal. Se midió la presión en la conducción con un caudal constante de aire (150 ml/min). Se inyectaron fármacos directamente en la vena yugular usando una aguja de calibre 30. Todas las inyecciones fueron de un volumen constante de 0,1 ml. En los grupos los grupos preparados para congestión se consiguió la congestión mediante administración intranasal de histamina (50 nM, 0,02 ml/aplicación). Se expelió histamina después de 2 minutos con una pequeña corriente de aire por la cánula nasal y se inyectaron directamente en la vena yugular subsiguientes dosis de fármaco enantiómero. La dosificación elegida para cada fármaco fue la cantidad necesaria para aumentar en un 10% la presión arterial media (PAM) del animal; esta dosificación servía como dosis ``100%'' para los estudios iniciales del conducto aéreo nasal. En la Tabla 6 se proporciona la dosis que produce un aumento del 10% en PAM para los fármacos. Se observó una suave ansiedad en perros a los que se había dado una dosificación oral de 15 mg. Se calculó la dosificación requerida para ratas ajustando proporcionalmente la dosificación para perros determinada experimentalmente para tener en cuenta el menor peso de las ratas. Estas dosificaciones absolutas para ratas se proporcionan en la Tabla 6.

TABLA 6 Dosificación de enantiómero

Nombre del fármaco	Perro (\mug/kg)^{a}	Rata (\mug)^{b}
(+)-pseudoefedrina	200	60
(-)-fenilefrina	10	3-5
(-)-efedrina	100	30
(+)-efedrina	200	60
^{a} Dosificación determinada experimentalmente requerida para aumentar PAM el 10%.
^{b} Calculada a partir de la dosificación de perro disminuyendo proporcionalmente la dosificación
para tener en cuenta el menor peso de la rata.

Por lo tanto, se puede administrar aproximadamente el doble de (+)-efedrina, con relación a (-)-efedrina, antes de que se observe un aumento del 10% en la presión sanguínea.

Se realizaron dos investigaciones en ratas.

Investigación 1

Se hizo una comparación del efecto de los diferentes enantiómeros sobre la resistencia de los conductos aéreos nasales antes y después de la congestión de histamina. La cantidad de fármaco requerida para subir la presión arterial media en un 10% se eligió como ``dosis 100%'' para estos estudios descongestivos. Véase la Tabla 6. Se obtuvieron los cambios de control en la resistencia de los conductos aéreos nasales registrando la resistencia de los conductos aéreos nasales antes y después de esta dosis 100%. Se inyectó la dosis 100% en la vena yugular de un grupo de ratas de prueba dos minutos después de que se produjera la congestión de los conductos aéreos nasales por introducción de 0,02 ml/aplicación de histamina 50 mM en el conducto aéreo nasal. Se aumentó así la resistencia del conducto aéreo nasal después de la preparación con histamina y se observó el efecto de administrar un enantiómero sobre la resistencia de los conductos aéreos nasales inducida por histamina.

Investigación 2

Se hizo una comparación del efecto de varias dosis de cada enantiómero sobre la resistencia de los conductos aéreos nasales para determinar la dosis eficaz de enantiómero. Las dosificaciones probadas fueron 75%, 50%, 25%, 10% y 5% de la dosificación de enantiómero ``100%'' requerida para aumentar la presión arterial media en un 10%. Se obtuvieron los cambios en la resistencia del conducto aéreo nasal comparando la resistencia de los conductos aéreos nasales antes de la inyección de enantiómero con la disminución de la resistencia del conducto aéreo nasal después de la inyección del enantiómero en la vena yugular. Se probaron cinco ratas en cada dosis para cada uno de los enantiómeros.

Investigación 3

Se probó una dosis de 75% de enantiómero (Tabla 7) después del tratamiento con histamina 50 mM (0,02 ml/
aplicación).

TABLA 7

Fármaco	Dosificación de 75% (\mug/kg i.v.)
(+)-pseudoefedrina	150
(-)-efedrina	75
(-)-fenilefrina	7,5
(+)-efedrina	150

Se comprobó la presión sanguínea. Se evaluaron los efectos sobre la resistencia de los conductos aéreos y sobre la presión sanguínea de los ocho enantiómeros a la dosis de 75% antes y después de la histamina en cinco ratas para cada enantiómero y cada situación de histamina.

Resultados

Investigación 1

La Figura 5 sumariza la disminución de la resistencia del conducto aéreo nasal que sigue a cada enantiómero antes y después de la congestión nasal inducida por histamina. Cada fármaco dio origen una disminución significativa en la presión del conducto aéreo nasal con relación al control, en ratas no preparadas con histamina (Tabla 8). Aun cuando el control para (-)-fenilefrina era significativamente diferente de los otros controles, esta diferencia en los niveles del control no se tradujo en una diferencia producida por la administración del fármaco. Las ratas tratadas con (+)-efedrina mostraron una reducción en la resistencia al paso por el conducto aéreo significativamente mayor de la que mostraron las ratas con (-)-efedrina.

TABLA 8

Fármaco	Control*	Post-Fármaco*	% Cambio	Valor p \ddagger
(+)-efedrina	8 \pm 0,6	7 \pm 0,9	21,4 \pm 5,4	0,008
(+)-pseudoefedrina	9 \pm 0,5	7 \pm 0,9	21,4 \pm 5,4	0,015
(-)-fenilefrina	5 \pm 0,2	4 \pm 0,2	21,4 \pm 5,4	0,010
(-)-efedrina	7 \pm 0,8	6 \pm 0,5	21,4 \pm 5,4	0,034
* en mm de H_{2}O \hskip1cm \ddagger prueba t pareada

En ratas preparadas con histamina, la administración de cada uno de los fármacos mostró de nuevo una disminución significativa en la presión del conducto nasal. Los resultados están expresados en la Tabla 9 y se sumarizan en la
Figura 5.

TABLA 9

Fármaco	Control*	prueba t	Post-Histamina	prueba t	Post-Fármaco	Cambio %
		valor p		valor p
(+)-efedrina	8,0 \pm 0,6	0,01	10,2 \pm 0,5	0,002	8,2 \pm 0,3	-19,4 \pm 2,1
(+)-pseudoefedrina	6,6 \pm 0,5	0,1	9,3 \pm 1,8	0,001	6,1 \pm 1,5	-36,7 \pm 2,7
(-)-fenilefrina	7,5 \pm 0,2	0,04	13,2 \pm 2,1	0,05	10,5 \pm 2,1	-22,3 \pm 8,5
(-)-efedrina	6,7 \pm 0,8	0,06	8,2 \pm 0,7	0,007	6,4 \pm 0,6	-21,8 \pm 3,5
* mm de agua

Estos resultados indican que los tres enantiómeros probados producen una disminución significativa en la presión del conducto aéreo nasal en las ratas tanto en las no preparadas con histamina como en las preparadas con histamina. Por lo tanto todos los enantiómeros son descongestivos eficaces (Figura 5).

Investigación 2

La Tabla 10 sumariza la presión media del conducto aéreo nasal a diferentes dosificaciones de enantiómero que comprenden 5%, 10%, 25% y 50% de la dosis que produjo un cambio del 10% en la presión arterial media en reposo (la dosis ``100%''). También se proporciona el error típico de la media.

TABLA 10 Disminución media de la presión en el conducto aéreo nasal con dosificaciones variables de enantiómero*

Fármaco	5%	10%	25%	50%
(+)-efedrina	-2,6 \pm 1,0	3,0 \pm 1,0	-0,1 \pm 1,4	-1,0 \pm 3,3
(+)-pseudoefedrina	-3,8 \pm 2,8	-6,8 \pm 3,6	-13,5 \pm 4,3	-16,1 \pm 2,4
(-)-fenilefrina	-1,6 \pm 0,9	-4,8 \pm 0,8	-12,1 \pm 2,3	-5,2 \pm 1,6
(-)-efedrina	-1,0 \pm 0,8	-2,5 \pm 1,5	-3,6 \pm 1,9	-1,9 \pm 2,0
* porcentaje de enantiómero que aumentó un 10% la presión media arterial canina en reposo.

Investigación 3

A dosis del 75%, (+)- y (-)-efedrina produjeron aproximadamente el mismo efecto de eficacia sobre la descongestión normal del conducto aéreo, aunque la (-)-efedrina produjo un aumento ligeramente mayor (pero significativo) de la presión sanguínea que la (+)-efedrina. Estos resultados se expresan en las Figuras 6 y 7.

Claims (14)

1. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de (+)-efedrina, un antagonista receptor de H_{1} y un soporte farmacéuticamente aceptable, en la que la relación de (+)-efedrina a (-)-efedrina es 80:20 o mayor.

2. La composición farmacéutica de la reivindicación 1, en la que la relación de (+)-efedrina a (-)-efedrina es mayor que 90:10.

3. La composición farmacéutica de la reivindicación 2, en la que la relación de (+)-efedrina a (-)-efedrina es mayor que 95:5.

4. La composición farmacéutica de la reivindicación 3, en la que la relación de (+)-efedrina a (-)-efedrina es mayor que 99:1.

5. Una composición farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la que dicho antagonista receptor de H_{1} es triprolidina.

6. La composición farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, que comprende, además, un fármaco seleccionado de loratadina, descarboetoxi-loratadina, fexofenadina, norastemizol, terfenadina o ebastina.

7. Uso de la composición de la reivindicación 1 para la preparación de una composición farmacéutica para suprimir el apetito.

8. Uso de la composición de la reivindicación 1 para la preparación de una composición farmacéutica que reduce la congestión nasal o bronquial.

9. Uso de la composición de la reivindicación 1 para la preparación de una composición farmacéutica para tratar el trastorno de hiperactividad con déficit de atención.

10. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 7 a 9, en el que la relación de (+)-efedrina a (-)-efedrina es mayor que 90:10.

11. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 7 a 9, en el que la relación de (+)-efedrina a (-)-efedrina es mayor que 95:5.

12. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 7 a 9, en el que la relación de (+)-efedrina a (-)-efedrina es mayor que 99:1.

13. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 7 a 12, en el que dicho antagonista receptor de H_{1} es triprolidina.

14. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 7 a 13, en el que la combinación comprende, además, un fármaco seleccionado de loratadina, descarboetoxi-loratadina, fexofenadina, norastemizol, terfenadina o ebastina.