ES2201315T3 - Tratamiento de una enfermedad de la piel inducida por estres mediante antagonistas de hormona liberadora de corticotropina e inhibidores de la desgranulacion de mastocitos de la piel. - Google Patents
Tratamiento de una enfermedad de la piel inducida por estres mediante antagonistas de hormona liberadora de corticotropina e inhibidores de la desgranulacion de mastocitos de la piel.Info
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Abstract
LA PRESENTE INVENCION DESCRIBE UN PROCEDIMIENTO DE REDUCCION O DE REMISION DE ENFERMEDADES EPIDERMICAS ATOPICAS QUE SE ORIGINAN POR EL ESTRES EN UN SUJETO, COMO EL ECZEMA O LA URTICARIA, Y QUE COMPRENDEN LA ADMINISTRACION A UN PACIENTE DE UN AGENTE QUE ANTAGONIZA LA ACTIVACION HORMONAL CRH INDUCIDA POR LOS BASOFILOS/MASTOCITOS EPIDERMICOS. DICHOS AGENTES SE UTILIZAN SOLOS O EN CONJUNTO CON UN SEGUNDO AGENTE QUE INHIBE LA ACTIVACION DE LOS BASOFILOS/MASTOCITO. ESTOS AGENTES COMPRENDEN COMPOSICIONES QUE REDUCEN LA PRODUCCION O LA SECRECION HORMONAL DE CRH, UNA NEUROTENSINA O UNA SOMATOSTINA O UN AGENTE INHIBIDOR DE LA ACCION FISIOLOGICA DE LA HORMONA CRH, UNA NEUROTENSINA O UNA SOMATOSTINA DE LOS BASOFILOS/MASTOCITOS. SE PUEDEN INHIBIR TAMBIEN LOS EFECTOS DE LA HORMONA CRH SOBRE LOS BASOFILOS/MASTOCITOS MEDIANTE ANTAGONISTAS DEL RECEPTOR DE HISTAMINA - 3 Y MEDIANTE INHIBIDORES DE FOSFORILACION DE LA MOESINA DE LOS BASOFILOS/MASTOCITOS.
Description
Tratamiento de una enfermedad de la piel inducida
por estrés mediante antagonistas de la hormona liberadora de
corticotropina e inhibidores de la desgranulación de mastocitos de
la piel.
La invención se refiere en general al tratamiento
de la enfermedad atópica de la piel relacionada con el estrés. En
particular, la invención se refiere a los efectos de la Hormona
Liberadora de Corticotropina ("CRH") sobre mastocitos de la
piel que dan como resultado diversos trastornos de la piel, y al
uso de inhibidores y antagonistas de CRH para tratar tales
estados.
La CRH es un regulador principal del eje
hipotalámico-pituitario-adrenal y
un coordinador principal de la respuesta al estrés. Aunque la
liberación neuroendocrina de CRH da como resultado efectos
antiinflamatorios a través de la activación del eje
hipotalámico-pituitario-adrenal y el
sistema nervioso simpático, una evidencia reciente sugiere que la
CRH también se secreta periféricamente y puede tener acciones
pro-inflamatorias. Se ha localizado CRH
inmunorreactiva (iCRH) en células auxiliares inmunes en la
inflamación aséptica inducida de las articulaciones, en la artritis
por estreptococos, así como en la uveitis experimental. La CRH
puede sintetizarse localmente en sitios inflamatorios según se
evidencia por la presencia de mRNA de CRH en sinovia crónicamente
inflamada en ratas o ser liberada por neuronas simpáticas
post-ganglionares y fibras aferentes sensoriales. La
inmunocitoquímica también ha verificado la presencia de iCRH en
tejidos humanos que sufren procesos inflamatorios.
Tanto la iCRH como el mRNA de CRH se han
demostrado en bazo y timo de rata y ratón, así como en leucocitos
de sangre periférica humana, mientras que la estimulación
mitogénica de linfocitos T humanos da como resultado la síntesis de
CRH. Sin embargo, existe una discrepancia entre la abundancia de
iCRH y la escasez de su mRNA en sitios inflamatorios de la fase
aguda inicial de la inflamación. La demostración de la
inmunorreactividad similar a CRH en el cuerno dorsal de la médula
espinal y los ganglios radiculares dorsales, así como en cuerpos
celulares de nervios simpáticos y en nervios simpáticos, apoya la
hipótesis de que la mayoría de la iCRH en la inflamación inicial es
de origen de células nerviosas en lugar de células inmunes. Para
los propósitos de la presente invención, es importante que la CRH y
el mRNA de receptor de CRH se hayan identificado en piel humana
(Slominski y otros, FEBS Letts., 374:113 (1995)). Acciones
inflamatorias como la administración sistémica de
anti-suero de CRH de conejo suprimían tanto la
cantidad de exudado como la acumulación de células inflamatorias en
la inflamación inducida (Karalis y otros, Science, 254:
421(1991)), así como la gravedad de la uveitis inducida
experimentalmente. Por otra parte, cuando este antisuero se
administraba antes del estrés psicológico agudo, bloqueaba la
activación resultante de mastocitos de la dura (Theoharides y
otros, Endocrinol. 136:5745 (1995). Análoga a la notable
aparición de iCRH, existe una activación y una proliferación de
mastocitos en sitios de inflamación.
Las mastocitos están situadas en el área
perivascular cerca de los nervios periféricos y, cuando son
activadas por estimulación nerviosa o neuropéptidos sensores,
secretan potentes mediadores vasoactivos y proinflamatorios
incluyendo histamina, citoquinas, prostanoides y proteasas. De
hecho, el factor de necrosis tumoral (TNF) liberado de mastocitos
de la piel induce tanto vasodilatación como expresión de la
molécula 1 de adhesión endotelial, mientras que la activación de
mastocitos de la piel por sustancia P (SP) conduce a la
infiltración de granulocitos.
Estudios previos usaban hidroxizina sola para el
tratamiento de trastornos tales como prurito o urticaria, véase
Koblenzer, Dermatologic Clinics, 14(3), Julio de 1996,
447-455; Tauberg y otros, Anesthesia Progress,
30(6), 1983, 199-200).
A la luz de estos antecedentes, un objetivo de
esta invención es descubrir si la iCRH puede estar implicada en la
patofisiología de ciertos estados de la piel que son exacerbados
por el estrés, tales como eczema y urticaria. La CRH podría
interactuar con los sistemas inmunitario y nervioso y contribuir a
la inflamación, posiblemente a través de la activación de
mastocitos. Tal relación funcional entre CRH central, iCRH,
neuronas y mastocitos podía ser importante en la fisiología normal,
en el contexto de reacciones de hipersensibilidad, y en síndromes
neuroinmunoendocrinos o inflamatorios. Un objetivo más de esta
invención era probar esta hipótesis examinando la capacidad de la
CRH y el estrés para activar mastocitos de la piel. Un objetivo
adicional de esta invención es proporcionar tratamientos que
bloqueen o inhiban los efectos de la CRH sobre trastornos de la piel
relacionados con mastocitos .
Estos objetivos se han alcanzado mediante el
descubrimiento de que la CRH provoca la activación de mastocitos
de la piel y la vasodilatación de la piel, un efecto que es
reproducido por el estrés psicológico agudo debido a la
inmovilización.
La invención se refiere a un antagonista de la
activación de mastocitos de la piel por CRH para usar en la
reducción o el bloqueo de la enfermedad atópica de la piel en un
sujeto, en donde dicho antagonista es un inhibidor competitivo o no
competitivo de la unión de CRH a receptores de CRH de mastocitos
de la piel o un anticuerpo anti-CRH.
Estas modalidades de la invención ser harán
evidentes mediante referencia a la memoria descriptiva y las
reivindicaciones adjuntas.
Esta invención se basa en el presente
descubrimiento de que trastornos de la piel relacionados con el
estrés, tales como eczema y urticaria en un sujeto humano, pueden
tratarse administrando al sujeto un antagonista de las acciones
fisiológicas de la CRH sobre mastocitos de la piel. El término
"antagonista" se usa aquí para incluir agentes que inhiben o
bloquean la síntesis o la liberación de CRH de fuentes tisulares o
que reducen los efectos fisiológicos de la CRH como un activador de
la desgranulación de mastocitos de la piel.
Los antagonistas de CRH mencionados previamente
incluyen composiciones que reducen directamente o indirectamente la
liberación de CRH de neuronas u otras fuentes o inhiben las
acciones de CRH sobre mastocitos de la piel. Tales antagonistas
incluyen un anticuerpo anti-CRH o un análogo
estructural de CRH, que incluye sustituciones y derivación de
aminoácidos. Los antagonistas pueden ser agentes que bloquean la
actividad de CRH sobre receptores de mastocitos de la piel, tales
como anticuerpos anti-receptor de CRH. Los
antagonistas pueden ser compuestos que bloquean o antagonizan las
acciones de sustancias bioquímicas que median o promueven acciones
de la CRH, tales como anticuerpo anti-neurotensina
("NT") o un antagonista de receptor de NT. El antagonista
puede ser un agente que inhibe la activación de mastocitos de la
piel, tal como bicromona (por ejemplo, cromolina (cromoglicato
disódico)), un flavonoide (kaempferol), otros compuestos que
estimulan la fosforilación de la moesina de mastocitos de 78 kDa,
una piperazina (por ejemplo, hidroxizina), o un agonista de receptor
de histamina-3
(N^{\mu}-metilhistamina, Calbiochem/Novabiochem.
La Jolla. CA).
Según se apunta previamente, la inhibición del
efecto de CRH en el desarrollo de trastornos atópicos de la piel
puede alcanzarse tratando a un sujeto con un antagonista de la
producción o la liberación de CRH de neuronas y otros sitios de
origen, inhibiendo la unión de CRH a receptores de CRH de
mastocitos, e inhibiendo la acción o las acciones fisiológicas de
CRH sobre mastocitos (por ejemplo, mediante un antisuero para NT o
un anticuerpo anti-receptor de NT administrado
parenteralmente o tópicamente). Aunque el solicitante no necesita
limitarse a una teoría particular del mecanismo de acción, es
probable que el anticuerpo anti-CRH, uniéndose a
CRH, y un anticuerpo anti-receptor de CRH o un
bloqueador del receptor de CRH, bloqueando la unión de CRH a su
receptor o receptores fisiológicos sobre mastocitos de la piel,
inhiba o bloquee de ese modo la activación por CRH de mastocitos de
la piel.
Se espera que otros antagonistas de CRH tengan
los mismos efectos beneficiosos que el anticuerpo
anti-CRH, y por lo tanto están dentro del alcance de
esta invención. Ejemplos incluyen un antagonista de receptor de CRH
tal como el análogo peptídico de CRH D-Phe^{12},
Nle^{32}, ^{21}, Ala^{38}hCRH
(12-41)NH2 (Neurocrine Biochemicals, Inc., Nº
de catálogo 1P-36-41, MW 3474,1) y
el análogo de CRH no peptídico de Pfizer
CP-154.526-1, que competirán con CRH
para la unión al receptor o los receptores de CRH sobre mastocitos.
Otros ejemplos incluyen inhibidores de la secreción de CRH tales
como agentes que activan los receptores de
histamina-3.
Puede prepararse suero policlonal
anti-CRH mediante la inmunización sistemática de
conejos con CRH recombinante (rCRH) disponible comercialmente (Sigma
Chem. Co., St. Louis, Mo), de acuerdo con Karalis y otros,
Science, 254: 421 (1991) u obtenerse de Phoenix
Pharmaceuticals, California. Un anti-suero de
receptor de NT de conejo puede adquirirse de Sanofi Research,
Toulouse, Francia, que también es la fuente del antagonista de
receptor de NT no peptídico SR 48692.
Anticuerpos policlonales o monoclonales
anti-CRH y anti-NT u otros
inhibidores pueden administrarse parenteralmente, oralmente,
sublingualmente, tópicamente o transdérmicamente a sujetos en un
portador farmacéuticamente aceptable tal como los descritos en
Remington's Pharmaceutical Sciences. Mack Publishing Co., Easton,
PA, 1988. Para uso parenteral, pueden usarse concentraciones de
aproximadamente 0,1 a 10 mg de proteína/ml para sueros
anti-CRH y anti-NT, y a una
concentración de 1 a 1000 nM para el antagonista de receptor de NT
SR 48692 o antagonistas de receptor de CRH mostrados previamente.
Cromolyn (Fisons, Inc.) en un vehículo farmacéuticamente aceptable
puede administrarse a pacientes en dos cápsulas de 100 mg antes de
las comidas y al acostarse. También pueden usarse inyecciones
transdérmicas o parches. Los médicos expertos en esta técnica, sin
experimentación excesiva, seleccionarán los inhibidores apropiados y
las dosificaciones y las rutas de administración apropiadas para el
cuadro clínico particular.
Aunque la activación de mastocitos de la piel
puede determinarse histológicamente mediante microscopía óptica o
electrónica, o mediante extravasación de colorante, según se
describe más adelante, también puede determinarse ensayando sangre
periférica mediante métodos habituales con respecto a la aparición
de productos de activación tales como histamina, su metabolito
N-metilhistamina o la enzima proteolítica triptasa
según se describe en Roznecki y otros, Ann. Neurol. 37: 63
(1995).
El cDNA de receptor de CRH se ha clonado a partir
de una variedad de especies y órganos de animales. Perris y otros,
PNAS USA, 92: 2968 (1995). Los receptores de CRH varían en
tamaño de 415 a 431 residuos de aminoácido con 68% de homología
entre moléculas de roedor y ser humano. El tipo exacto de células
de la piel que expresan receptores de CRH, por lo tanto, puede
determinarse mediante hibridación in situ y PCR con transcriptasa
inversa (Slominski y otros, FEBS Letts. 374:113 (1995)).
Los ejemplos que siguen se diseñan para
ejemplificar la invención y no pretenden limitar el alcance de la
invención, que se describe en la memoria descriptiva y las
reivindicaciones adjuntas.
Los siguientes materiales y métodos se emplearon
en los ejemplos descritos más adelante.
1. Para experimentos de extravasación, ratas
Sprague/Dawley macho, que pesaban cada una aproximadamente 350 g
(Taconic Farms, Germantown, NY), se anestesiaron con una sola
inyección intraperitoneal de 0,5 ml de cetamina y 0,5 ml de xilazina
(20 mg/ml de cada una) y a continuación se inyectaron
intravenosamente con 0,1 ml de azul de Evan al 1% 60 minutos antes
del tratamiento.
2. Fármacos probados mediante inyección
intradérmica en un volumen de 0,1 ml incluyen: a) 0,1 \mug/ml del
secretagogo específico para mastocitos, compuesto 48/80 (C48/80),
b) sustancia P (Sigma) 10^{-5} M, c) diversas concentraciones de
CRH (Sigma, St. Louis), d) el antagonista de receptor de CRH
[D-Phe^{12}\cdotNle^{21,38}\cdotAla^{32}]rCRH(12-41),
e) la forma de ácido libre inactiva de CRH recombinante/humana (r/h
CRH-OH), ambas obtenidas de Neurocrine Biosciences,
CA, f) somatostatina (factor inhibidor de liberación de
somatotropina, SRIF Bachem, CA), g) difenilhidramina (Sigma), h)
terfenadina (Sigma), i) hidroxizina (UCB, Bélgica) y j) el antisuero
para la porción de 78 kDa del receptor de Factor de Necrosis
Tumoral (Harland Serolab. Ltd., Crawley Down, Sussex, Inglaterra),
en solución salina normal usando una jeringa de tuberculina.
3. La solución de pretratamiento, cuando era
apropiada, se extrajo en primer lugar en la jeringa seguido por CRH
de la que se separaba mediante una burbuja de aire. La solución de
pretratamiento se inyectó en primer lugar y se dejó permanecer en la
piel durante 1 minuto; la aguja se cambió a continuación, la
burbuja de aire se expulsó y se inyectó CRH y se dejó permanecer en
la piel durante 5 minutos. El animal se sacrificó a continuación
mediante asfixia en vapor de CO_{2} y se decapitó; la piel se
retiró, se le dio la vuelta y se fotografió.
4. En otras ratas, la piel se retiró rápidamente
al final del período de inyección y se fijó para formaldehído al 4%
para microscopía óptica (Theoharides y otros, Int. Arch. Allergy
Immunol. 102: 352 (1993)). El tejido se congeló y se cortaron
secciones delgadas (7 \mu) usando un criostato (Jung CM 3000,
Leica, Luc. Deerfield, IL). Las secciones se tiñeron con azul de
toluidina acidificado (pH < 2,5) (Sigma, St. Louis) y todas las
mastocitos se contaron, mediante dos investigadores diferentes
ignorantes de las condiciones experimentales, con 400 aumentos
usando un microscopio Nikon invertido de Diaphot (Don Santo,
MA).
5. Para el agotamiento de nervios sensoriales que
contienen neuropéptidos, una camada entera de ratas fue inyectada
con capsaicina a los dos días de nacimiento y los machos se usaron
cinco semanas más tarde según se describe previamente (Dimitriaou y
otros, Neuroscience 44: 97 (1991). La eficacia de este
procedimiento se confirmó mediante inmunocitoquímica (Dimitriaou,
1991, previamente), que mostraba que no existían células positivas
a la sustancia P o procesos nerviosos en la piel de ratas tratadas
con capsaicina.
La CRH inducía incrementos marcados en la
permeabilidad vascular de la piel, según se evidenciaba por
extravasación de colorante, un efecto que era más pronunciado que el
obtenido por una concentración equimolar del secretagogo de
mastocitos C48/80 o SP (Tabla 1).
El efecto de la CRH sobre la activación de
mastocitos de la piel se confirmó mediante una evidencia
morfológica de secreción según se juzgaba por la extrusión del
contenido de gránulos y la pérdida de tinción celular en las
muestras de piel del sitio de inyección. La activación se observó
en aproximadamente 45% de las mastocitos en sitios de piel tratados
con CRH 10^{-4} M (3 ratas, n \approx 841), en comparación con
28% (3 ratas, n = 750) (p < 0,05) de las mastocitos de los
sitios de control (Tabla 1).
La observación ultraestructural de mastocitos de
sitios inyectados con CRH tenía un signo obvio de activación según
se evidenciaba por la pérdida del contenido denso electrónico de
gránulos secretores de mastocitos . El efecto de la CRH tanto sobre
la vasodilatación como sobre la activación de mastocitos dependía
de la dosis de 10^{-4} M - 10^{-8} M (Tabla 1).
El antagonista del receptor de CRH peptídico
[D-Phe^{12}\cdotNle^{21,38}\cdotAla^{32}]rCRH(12-41)
no bloqueaba el efecto de la CRH, sino que a 10^{-4} M imitaba
(25% de activación) el efecto de la CRH aunque era menos potente
según se medía tanto mediante extravasación de plasma como
desgranulación de mastocitos (Tabla 1). Este antagonista (10^{-4}
M) no podía inhibir la extravasación de colorante aun cuando se
usara CRH a 10^{-6} M (Tabla 3):
El análogo de ácido libre inactivo de CRH, r/h
CRH-OH, sin embargo, no producía un efecto
significativo sobre la desgranulación de mastocitos (Tabla 1),
sugiriendo que estas acciones pro-inflamatorias de
la CRH están mediadas por receptores de membrana específicos que
reconocen la parte C-terminal amidada de la CRH
natural.
La somatotropina es una hormona polipeptídica
anti-secretora general. El pretratamiento del sitio
de inyección con somatostatina (10^{-4} M) antes de inyectar CRH
(10^{-4} M) daba como resultado más extravasación de colorante
que la CRH sola (Tabla 2). De hecho, la somatostatina sola
provocaba una extravasación de fluido significativa que era tan
fuerte como la que se observaba con la CRH y todavía era evidente a
10^{-12} M (Tabla 4).
Mientras que el pretratamiento con el antagonista
de receptor de histamina-1 difenhidramina
(10^{-4} M) suprimía la extravasación de plasma a concentraciones
inferiores (< 10^{-8} M) de CRH, este efecto sólo era
parcialmente inhibido a concentraciones superiores (> 10^{-6}
M) de CRH (Tabla 2). El pretratamiento con el antagonista de
receptor de H-1 piperidínico no sedante terfenadina
(10^{-4} M) reducía el efecto de la CRH ligeramente (Tabla 2),
mientras que el pretratamiento con el antagonista de receptor de
histamina-1 piperazínico hidroxizina (10^{-4} M) y
la doxepina antidepresiva tricíclica (10^{-4} M) bloqueaban
totalmente el efecto de la CRH (Tabla 2). Estos resultados sugieren
que la liberación por mastocitos de histamina es un mecanismo
primario por el que la CRH induce la extravasación de plasma.
En animales que se habían tratado neonatalmente
con capsaicina para destruir terminaciones nerviosas sensoriales
que contienen neuropéptidos, la activación de mastocitos por CRH
(10^{-4} M) estaba inalterada, indicando que su acción no se debía
a neuropéptidos tales como la Sustancia P.
Para determinar si la CRH afecta a las mastocitos
directamente, los efectos de la CRH sobre mastocitos peritoneales
y pleurales de rata purificadas se compararon con los efectos de
C48/80 y Sustancia P. La CRH era en gran parte ineficaz sobre
mastocitos peritoneales, pero inducía la liberación de histamina
de mastocitos pleurales de una manera dependiente de la dosis que,
como la Sustancia P, requería la ausencia de iones calcio
extracelulares (Tabla 5). La comparación de estos datos con los de
la Tabla 1 muestra que las mastocitos de la piel son
sustancialmente más sensibles a los efectos de la desgranulación de
CRH que las mastocitos peritoneales y pleurales.
El estrés psicológico agudo debido a la
inmovilización de los animales de prueba también activaba las
mastocitos de la piel, un efecto bloqueado por el tratamiento con
antisuero para CRH.
Se identificaron terminaciones nerviosas
positivas a CRH ocasionales en piel humana usando un
anti-suero de CRH policlonal. Se sabe que la piel
humana expresa mRNA para CRH y receptor de CRH (Slominski, 1995,
previamente). Adicionalmente, se observó con la reacción en cadena
de la polimerasa que mastocitos humanas desarrolladas en cultivo
contenían mensaje para el receptor (Webster y otros, Endocrin.
Soc. Abs. 77: 669 (1995)).
Estos resultados demuestran claramente que la CRH
induce la activación de mastocitos de la piel de rata que da como
resultado una extravasación de fluido. Muestran además que esta
activación se debe a un efecto diferente de la CRH sobre mastocitos
sin ninguna implicación de neuropéptidos al menos sensoriales. Se
concluye que el mastocito de la piel es una diana de la iCRH. La
presente hipótesis es que la CRH liberada de nervios aferentes
sensoriales periféricos y/o simpáticos postganglionares actúa sobre
las mastocitos locales y otras células residentes para provocar
respuestas pro- inflamatorias. Los mediadores inflamatorios
liberados podían además estimular las mastocitos , reclutar células
inmunitarias en circulación para el sitio inflamatorio, activar
células auxiliares inmunitarias locales y actuar sobre las
terminaciones nerviosas para liberar más péptidos inflamatorios.
Esto podría ser de particular importancia en estados inflamatorios
activados por estrés agudo, tales como urticaria o eczema, en los
que la activación del sistema simpático y la secreción local de CRH
podría conducir a la desgranulación de mastocitos y a la
iniciación de un nuevo episodio o una exacerbación de una enfermedad
crónica.
Los presentes resultados pueden ayudar a explicar
la patofisiología de ciertos trastornos neuroinflamatorios, tales
como el eczema, el prurito y la urticaria, que son exacerbados por
el estrés. Antagonistas de receptor de CRH no peptídicos u otras
moléculas que podrían interferir con la desgranulación de
mastocitos de la piel inducida por CRH serán útiles para el
tratamiento de tales estados.
| Activación de mastocitos de la piel por CRH | ||||
| Condiciones (n = 3 ratas) | Extravasación de colorante | Desgranulación de mastocitos * | ||
| (intensidad de color) | (% del total) | |||
| Mastocitos | Mastocitos | % del total | ||
| totales | desgranuladas | desgranulado | ||
| Solución salina normal | - | 750 | 206 | 28 |
| C48/80 (0,5 \mug/ml) | +++ | 841 | 375 | 45 |
| CRH-\alpha (10^{-4} M) | + | 112 | 28 | 25 |
| CRH-OH (10^{-4}M) | - | 144 | 13 | 9 |
| CRH (10^{-4} M) | ++++ | 902 | 426 | 49^{\NAK} |
| CRH (10^{-5} M) | +++ | 915 | 327 | 37 |
| CRH (10^{-6} M) | ++ | 810 | 331 | 42 |
| CRH (10^{-7} M) | ++ | 1008 | 329 | 37 |
| CRH (10^{-8} M) | ++ | 790 | 254 | 32 |
| CRH (10^{-9} M) | +- | 725 | 202 | 28 |
| CRH (10^{-10} M) | \pm | 880 | 239 | 26 |
| * Se examinaron 3 secciones de cada uno de cuatro bloques de cada rata | ||||
| ^{\NAK} p < 0,05 en comparación con solución salina normal o CRH-OH, una forma inactiva de CRH. |
| Efecto de fármacos sobre la activación de | |
| mastocitos de la piel por CRH* | |
| Condiciones (n = 3) | Extravasación de colorante (intensidad de color) |
| Solución salina normal | - |
| C48/80 (0,5 \mug/ml) | +++ |
| CRH | +++ |
| Bloqueador del receptor de TNF + CRH | +++ |
TABLA 2
(continuación)
| Efecto de fármacos sobre la activación de | |
| mastocitos de la piel por CRH* | |
| Condiciones (n = 3) | Extravasación de colorante (intensidad de color) |
| Difenhidramina (10^{-4} M) + CRH | + |
| Doxepina (10^{-4} M) + CRH | - |
| Hidroxizina (10^{-4} M) + CRH | - |
| Terfenadina (10^{-4} M) + CRH | ++ |
| Somatostatina (10^{-4} M) + CRH | ++++ |
| * usada a 10-4 M | |
| \fint pretratamiento con fármaco durante 5 minutos. |
| Efecto de CRH\alpha sobre mastocitos de la piel* | |
| Concentración de CRH\alpha | Extravasación de colorante |
| 10^{-4} M | +++ |
| 10^{-5} M | ++ |
| 10^{-6} M | ++ |
| 10^{-7} M | \pm |
| 10^{-8} M | - |
| 10^{-9} M | - |
| 10^{-10} M | - |
| *n = 3 ratas |
| Efecto de la Somatostatina sobre mastocitos de la piel* | |
| Somatostatina, Concentración | Extravasación de colorante |
| 10^{-4} M | +++ |
| 10^{-5} M | ++ |
| 10^{-6} M | ++ |
| 10^{-7} M | ++ |
| 10^{-8} M | + |
| 10^{-9} M | \pm |
| 10^{-10} M | \pm |
| *n = 3 ratas |
| Efecto de CRH sobre mastocitos purificadas | ||||
| Condiciones | Liberación de Histamina (% del total) | |||
| Pleural | Peritoneal | |||
| + Calcio | - Calcio | + Calcio | - Calcio | |
| Solución de Locke | 2,205 | 4,478 | 2,0 | 4,9 |
| C48/80 (10^{-4} M) | 86,045 | 67,12 | NP | NP |
| C48/80 (10^{-5} M) | 75,552 | 61,059 | NP | NP |
| C48/80 (10^{-6} M) | 47,537 | 45,203 | 64,2 | NP |
| SP (10^{-4} M) | 49,346 | 54,591 | NP | NP |
| SP (10^{-5} M) | 22,919 | 28,871 | NP | 39,5 |
| SP (10^{-6} M) | 2,088 | 8,538 | NP | NP |
| CRH (10^{-4} M) | 22,06 | 34,244 | 6,3 | 25,5 |
| CRH (10^{-5} M) | 2,102 | 8,579 | 1,9 | 6,9 |
| CRH (10^{-6} M) | 1,411 | 4,253 | 2,0 | 4,9 |
| NP = no probado |
Claims (16)
1. Un antagonista de la activación de mastocitos
de la piel por hormona liberadora de corticotropina (CRH) para usar
en la reducción o el bloqueo de una enfermedad atópica de la piel
en un sujeto, en donde dicho antagonista es un inhibidor competitivo
o no competitivo de la unión de CRH a receptores de CRH de
mastocitos de la piel o un anticuerpo anti-CRH.
2. El antagonista de acuerdo con la
reivindicación 1, que reduce la producción o la liberación de CRH
en la piel de dicho sujeto.
3. El antagonista de acuerdo con una cualquiera
de las reivindicaciones 1 a 2, que es un inhibidor de la acción de
neurotensina sobre mastocitos de la piel.
4. El antagonista de acuerdo con la
reivindicación 3, que reduce la producción o la liberación de
neurotensina en la piel de dicho sujeto.
5. El antagonista de acuerdo con la
reivindicación 1, que es un inhibidor de la producción de
somatostatina o la acción de somatostatina sobre mastocitos de la
piel.
6. Una composición que comprende el antagonista
de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 y un
compuesto adicional que es un inhibidor de la desgranulación de
mastocitos o un antagonista de un receptor de histamina para usar
en la reducción o el bloqueo de una enfermedad atópica de la piel
en un sujeto.
7. La composición de acuerdo con la
reivindicación 6, en la que dicho compuesto adicional es un
antagonista del receptor de histamina-3.
8. La composición de acuerdo con la
reivindicación 6, en la que dicho compuesto adicional es un
compuesto de piperazina.
9. La composición de acuerdo con la
reivindicación 6, en la que dicho compuesto de piperazina es
hidroxizina o un análogo de la misma.
10. La composición de acuerdo con la
reivindicación 6, en la que dicho compuesto adicional es un agente
que estimula la fosforilación de al menos un residuo de serina o
treonina en moesina de mastocitos de la piel.
11. La composición de acuerdo con la
reivindicación 10, en la que dicho agente es una bicromona.
12. La composición de acuerdo con la
reivindicación 11, en la que dicha bicromona es cromolina o un
análogo de la misma.
13. La composición de acuerdo con la
reivindicación 10, en la que dicho agente es una flavonoide.
14. La composición de acuerdo con la
reivindicación 13, en la que dicho flavonoide es kaempferol.
15. Una composición para usar en la reducción o
el bloqueo de una enfermedad atópica de la piel, que comprende un
antagonista de CRH de acuerdo con una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 5 en un portador farmacéuticamente
aceptable.
16. La composición de acuerdo con la
reivindicación 15, que comprende además un compuesto adicional de
acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 14.
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