ES2205239T3

ES2205239T3 - Compuestos mimeticos de g-csf no peptidicos.

Info

Publication number: ES2205239T3
Application number: ES97928663T
Authority: ES
Inventors: Juan I. Luengo; James A. Chan; Ann L. Breen
Original assignee: SmithKline Beecham Corp
Current assignee: SmithKline Beecham Corp
Priority date: 1996-05-22
Filing date: 1997-05-22
Publication date: 2004-05-01
Anticipated expiration: 2017-05-22
Also published as: EP0920314A1; EP0920314A4; DE69724438T2; AU722453B2; NZ332823A; WO1997044033A1; AU3286597A; IL127065A0; DE69724438D1; BR9709326A; TR199802401T2; CZ376798A3; NO985406D0; NO985406L; JP2000512629A; ATE247959T1; US5981551A; PL330148A1; KR20000015881A; CA2255731A1

Abstract

LA INVENCION SE REFIERE A MIMETICOS NO PEPTIDICOS DEL G-CSF. TRATA IGUALMENTE DE LOS 2,5 - DIIMINO - 3A, 6A - DIARIL 1, 2, 3, 3A, 4, 5, 6, 6A - OCTAHIDROIMIDAZO [4,5 - D] IMIDAZOLES SUSTITUIDOS, COMPOSICIONES FARMACEUTICAS QUE CONTIENEN ESTOS COMPUESTOS Y PROCEDIMIENTOS PARA EL USO DE LOS MISMOS COMO MIMETICOS DEL G-CSF. PERTENECEN TAMBIEN A LA INVENCION NUEVOS PROCEDIMIENTOS UTILIZADOS PARA LA PREPARACION DE ESTOS COMPUESTOS.

Description

Compuestos miméticos de G-CSF no peptídicos.

Antecedentes de la invención

El factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSF) es una glicoproteína secretada por macrófagos, fibroblastos, y células endoteliales identificada originalmente por su capacidad para estimular la supervivencia, proliferación y diferenciación in vitro de granulocitos predominantemente neutrófilos procedentes de progenitores de la médula ósea. Nicola, N.A., Annu. Rev. Biochem., (1989) 58: 45. La capacidad de G-CSF para regular la granulopoyesis in vivo está soportada por estudios en animales y clínicos, que han demostrado un aumento reversible en los niveles circulantes de neutrófilos en respuesta a la administración de G-CSF recombinante. Gabrilove, J.L., et al., N. Enql. J. Med. (1988) 318:1414. G-CSF tiene efectos pleiotrópicos sobre los neutrófilos maduros, aumentado su supervivencia y estimulando la activación funcional, con inclusión de la inducción de la fosfatasa alcalina de los neutrófilos (Sato. N. et al., J. Cell. Physiol. (1988) 37:272) y de los receptores Fc de IgA de afinidad alta (Weisbart, R. H. et al., Nature (Lond.) (1988) 332:647, iniciación del estallido respiratorio (Nathan, C.F. Blood (1989) 73:301) y quimiotaxis incrementada (Wang, J.M., Blood (1988) 72:1456). Los efectos de G-CSF se han observado también en células hematopoyéticas que no tienen relación con el linaje de los granulocitos, por ejemplo, estimulación de la proliferación en la diferenciación monocítica in vitro de ciertas células leucémicas mieloides (Geissler, K., J. Immunol. (1989) 143:140) y la proliferación in vitro de ciertos precursores hematopoyéticos multipotenciales (Ferrero, D., Blood (1989) 73:402)

La administración de G-CSF recombinante a pacientes que padecen neutropenia debida a diversas causas indicó que G-CSF es beneficioso como adyuvante en quimioterapia y en trasplante de médula ósea (Morstyn, G., et al., Trends Pharmacol. Sci 10, (1989) 154-159). La actividad de G-CSF se asocia también con la movilización de células tronco (stem) hematopoyéticas desde la médula a la sangre periférica. (Véase el artículo de revisión, Good Review article Haylock et al., Blood 89:2233-2258, 1997).

Sería deseable disponer de compuestos que permitan el tratamiento de la neutropenia para aumentar la producción de leucocitos por actuar como compuestos miméticos de G-CSF.

Como se describe en esta memoria, se ha descubierto inesperadamente que ciertos compuestos no peptídicos son eficaces como compuestos miméticos de G-CSF.

Como se describe en esta memoria, se ha descubierto inesperadamente que ciertos 2,5-diimino-3a,6a-diaril-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazoles seleccionados son eficaces como compuestos miméticos de
G-CSF.

Sumario de la invención

Esta invención se refiere a compuestos de fórmula (1):

1

en la cual R^{1}, R^{2}, R^{3} y R^{4} son independientemente arilo,

donde arilo es un grupo aromático C_{3}-C_{12} cíclico o policíclico, que contiene opcionalmente uno o más heteroátomos, con la condición de que cuando C es 3 el anillo aromático contiene al menos dos heteroátomos, y cuando C es 4 el anillo aromático contiene al menos un heteroátomo, y sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo constituido por: C(O)NR^{6}R^{7} y NR^{6}R^{7}, ariloxi, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, alquilo, arilo C_{6}-C_{12}, alcoxi, aciloxi, arilo C_{6}-C_{12} sustituido, amino, N-acilamino, nitro, ciano, halógeno, hidroxi, -C(O)OR^{6},

\hbox{-S(O) _{n} }

R^{5}, -OH protegido y alquilo sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo constituido por: alcoxi, aciloxi, arilo C_{6}-C_{12}, arilo C_{6}-C_{12} sustituido, amino, N-acilamino, oxo, hidroxi, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, -C(O)OR^{6}, -S(O)_{n}R^{7}, ariloxi, nitro, ciano, halógeno y -OH protegido,

donde

R^{6} es hidrógeno

n es 0-2,

R^{7} es hidrógeno o alquilo, y

R^{5} es hidrógeno, cicloalquilo, arilo C_{6}-C_{12}, cicloalquilo sustituido, arilo C_{6}-C_{12} sustituido, alquilo o alquilo sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo constituido por: alcoxi, aciloxi, ariloxi, amino, N-acilamino, oxo, hidroxi, -C(O)OR^{6}, -S(O)_{n}R^{7}, nitro, ciano, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, halógeno, arilo C_{6}-C_{12}, arilo C_{6}-C_{12} sustituido y -OH protegido, donde R^{6} es hidrógeno o alquilo, n es 0-2 y R^{7} es hidrógeno o alquilo; y sus sales, hidratos, solvatos y ésteres farmacéuticamente aceptables.

La presente invención se refiere también al descubrimiento de que los compuestos de fórmula (I) son activos como compuestos miméticos de G-CSF.

La invención proporciona también el uso de un compuesto de fórmula (I) en la fabricación de un medicamento para uso en el tratamiento de la neutropenia, con inclusión de neutropenia inducida por quimioterapia y trasplante de médula ósea y en movilización de las células tronco de la sangre periférica y otras condiciones con producción reducida de leucocitos en mamíferos, con inclusión de seres humanos.

La invención proporciona también el uso de un compuesto de fórmula (I) en la fabricación de un medicamento para uso en el tratamiento de infecciones bacterianas y fúngicas en mamíferos, con inclusión de seres humanos.

En un aspecto adicional de la invención, se proporcionan nuevos procedimientos útiles en la preparación de los compuestos miméticos de G-CSF de la presente invención.

Se incluyen en la presente invención composiciones farmacéuticas que comprenden un vehículo farmacéutico y compuestos útiles en los métodos de la invención.

Se incluyen también en la presente invención métodos de co-administración de los compuestos miméticos de G-CSF de la presente invención con ingredientes activos adicionales.

La invención también se refiere al descubrimiento de que ciertos compuestos no peptídicos son eficaces como compuestos miméticos de G-CSF.

Descripción detallada de la invención

Los compuestos de esta invención que actúan como compuestos miméticos de G-CSF tienen la fórmula (I) siguiente:

2

en la cual R^{1}, R^{2}, R^{3} y R^{4} son independientemente arilo,

\hbox{-S(O) _{n} }

donde

R^{6} es hidrógeno o alquilo,

n es 0-2,

R^{7} es hidrógeno o alquilo y

R^{5} es hidrógeno, cicloalquilo, arilo C_{6}-C_{12}, cicloalquilo sustituido, arilo C_{6}-C_{12} sustituido, alquilo o alquilo sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo constituido por: alcoxi, aciloxi, ariloxi, amino, N-acilamino, oxo, hidroxi, -C(O)OR^{6}, -S(O)_{n}R^{7}, nitro, ciano, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, halógeno, arilo C_{6}-C_{12}, arilo C_{6}-C_{12} sustituido y-OH protegido, donde R^{6} es hidrógeno o alquilo, n es 0-2 y R^{7} es hidrógeno o alquilo; y sus sales, hidratos, solvatos y ésteres farmacéuticamente aceptables.

Entre los compuestos de fórmula I de la presente invención se prefieren aquellos en los cuales arilo es: arilo C_{5}-C_{12}, que contiene opcionalmente uno o dos heteroátomos, y sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo constituido por: -O-arilo C_{6}-C_{12}, -(CH_{2})_{m}OH, arilo C_{6}-C_{12}, alquilo C_{1}-C_{4}, -O-alquilo C_{1}-C_{4}, amino, nitro, ciano, N-acilamino, trifluorometilo, cicloalquilo C_{3-7}, halógeno, -(CH_{2})_{p}COOH, -S(O)_{n}R^{7} y -OH protegido, donde m es 0-4, p es 0-3, n es 0-2 y R^{7} es hidrógeno o alquilo C_{1-4}; y sus sales, hidratos, solvatos y ésteres farmacéuticamente aceptables.

Entre los compuestos de la presente invención se prefieren particularmente aquellos en los cuales R^{1} y R^{2} son independientemente fenilo, naftilo, furilo, tienilo, piridilo, indolilo o quinolilo, todos los cuales no están sustituidos o están sustituidos con un sustituyente seleccionado del grupo constituido por: halógeno, alquilo C_{1-5}, cicloalquilo C_{3-7}, y -O-alquilo C_{1-4};

R^{3} y R^{4} son independientemente fenilo, naftilo, tienilo, piridilo, quinolilo, bencimidazolilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, tiazolilo o imidazolilo, todos los cuales no están sustituidos o están sustituidos con uno o dos sustituyentes seleccionados del grupo constituido por: halógeno, amino, ciano, N-acilamino, alquilo C_{1-3}, -O-alquilo C_{1-3}, nitro, -CO_{2}H y CF_{3}; y sus sales, hidratos, solvatos y ésteres farmacéuticamente aceptables.

Se prefieren particularmente entre los compuestos de la presente invención aquellos en los cuales R^{1} y R^{2} son independientemente fenilo, furilo, tienilo o piridilo, todos los cuales no están sustituidos o están sustituidos con un sustituyente seleccionado del grupo constituido por: halógeno, alquilo C_{1-5}, cicloalquilo C_{3-6}, y -O-alquilo C_{1-3};

R^{3} y R^{4} son independientemente piridilo, bencimidazolilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, tiazolilo o imidazolilo, todos los cuales no están sustituidos o están sustituidos con uno o dos sustituyentes seleccionados del grupo constituido por: halógeno, amino, ciano, N-acilamino, alquilo C_{1-3}, -O-alquilo C_{1-3}, nitro, -CO_{2}H y CF_{3}; y sus sales, hidratos, solvatos y ésteres farmacéuticamente aceptables.

Los compuestos más preferidos de la presente invención son aquellos en los que R^{1} y R^{2} son 2-piridilo, los cuales están independientemente sustituidos o no sustituidos con alquilo C_{1-3}; y

R^{3} y R^{4} son 2-benzimidazolilo, los cuales están independientemente sustituidos o no sustituidos con alquilo C_{1-3}, con la condición de que R^{3} y R^{4} no están ambos sustituidos.

Entre los compuestos de la presente invención se prefieren:

2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a-4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a-(2-piridil)-6a-fenil-1,2,3-3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

5-[2-bencimidazolilimino]-2-[(4-metil-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidro-
imidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato),

5-(2-bencimidazolilimino)-2-[(5-metil-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidro-
imidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato),

2,5-bis[(l-metil-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis-(trifluoroacetato),

5-[2-bencimidazolilimino]-2-[(5,6-dimetil-2-bencimidazolil)-imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo-[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato),

2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-difenil-1,2,3,3a,4,5,6-6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-bis(2-furil)-1,2,3,3a,-4,5,6,6a-bis(2-piridil)octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-bis(3-metoxifenil)-1,2,-3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-bis(4-metilfenil)-1,2,3-3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-bis(4-fluorofenil)-1,2,-3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-bis(6-metil-2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a-(4-piridil)-6a-fenil-1,2,3-3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[(5-metil-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[(5-nitro-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[(5-cloro-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[(4-metil-2-tiazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,-3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[2-benzoxazolilimino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,-4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[(4-metil-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

5-(2-bencimidazolilimino)-2-[(5-fluoro-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidro-
imidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato),

2,5-bis[(5-fluoro-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis-(trifluoroacetato),

5-(2-bencimidazolilimino)-2-[(1-metil-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidro-
imidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato),

5-[2-bencimidazolilimino]-2-[(4-metil-2-tiazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato),

2,5-bis[5-bromo-4-metil-2-tiazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

5-[2-bencimidazolilimino]-2-[(5-cloro-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidro-
imidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato),

2,5-bis[(5,6-dimetil-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis-(trifluoroacetato),

2,5-bis[5-carboxi-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato),

5-[2-bencimidazolilimino]-2-[2-benzoxazolilimino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato),

2,5-bis[2-benzotiazolilimino-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,-4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

5-[2-bencimidazolilimino]-2-[2-benzotiazolilimino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato),

5-[(2-bencimidazolilimino)]-2-[(5-carboxi-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis (trifluoroacetato),

2,5-bis[(5-yodo-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidro-imidazo[4,5-d]imidazol, sal bis (trifluoroacetato), y

5-[2-bencimidazolilimino]-2-[(5-yodo-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidro-
imidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato).

2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-bis(4-bromofenil)-1,2,3-3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-bis(4-trifluorometilfenil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a-(3-clorofenil)-6a-fenil-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a-(2-clorofenil)-6a-fenil-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

5-(2-bencimidazolilimino)-2-[(5-metil-2-bencimidazolil)-imino]-6a-fenil-3a-(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato),

2,5-bis[(1-metil-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-difenil-1,2,-3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[(1-metil-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(4-metil-fenil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, y

2,5-bis [(1-metil-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(4-bromo-fenil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol.

Por la expresión "hidroxi protegido" u "-OH protegido" tal como se utiliza en esta memoria, se entienden los grupos -OH alcohólicos o carboxílicos que pueden estar protegidos por grupos bloqueantes convencionales en la técnica como se describe en "Protective Groups in Organic Synthesis", por Theodora W. Greene, Wiley-Interscience, 1981, Nueva York.

Por la expresión "arilo C_{5}-C_{12}" tal como se utiliza en esta memoria, a no ser que se defina de otro modo se entiende un grupo C_{5}-C_{12} aromático policíclico que contiene opcionalmente uno o dos heteroátomos.

Por la expresión "arilo C_{6}-C_{12}" tal como se utiliza en esta memoria, a no ser que se defina de otro modo, se entiende fenilo, naftilo, 3,4-metilenodioxifenilo, piridilo, o bifenilo.

Por el término "sustituido" tal como se utiliza en esta memoria, a no ser que se defina de otro modo, se entiende que el resto químico en cuestión tiene uno o más sustituyentes seleccionados del grupo constituido por: hidroxialquilo, alcoxi, aciloxi, alquilo, amino, N-acilamino, hidroxi, -(CH_{2})_{g}C(O)OR^{6}, -S(O)_{n}R^{7}, nitro, ciano, halógeno, trifluorometilo y -OH protegido, donde g es 0-6, R^{6} es hidrógeno o alquilo, n es 0-2, y R^{7} es hidrógeno o alquilo.

Por el término "alcoxi" tal como se utiliza en esta memoria, se entiende -O-alquilo, donde alquilo es como se describe en esta memoria, con inclusión de -OCH_{3} y -OC(CH_{3})_{2}CH_{3}.

El término "cicloalquilo" tal como se utiliza en esta memoria, debe entenderse, a no ser que se defina de otro modo, como un grupo C_{3}-C_{12} no aromático, insaturado o saturado, cíclico o policíclico.

Ejemplos de sustituyentes cicloalquilo y cicloalquilo sustituido tal como se utilizan en esta memoria incluyen: ciclohexilo, 4-hidroxi-ciclohexilo, 2-etilciclohexilo, propil-4-metoxiciclohexilo, 4-metoxiciclohexilo, 4-carboxiciclohexilo y ciclopentilo.

Por el término "aciloxi" tal como se utiliza en esta memoria, se entiende -OC(O)alquilo, donde alquilo es como se describe en esta memoria. Ejemplos de sustituyentes aciloxi tal como se utilizan en esta memoria incluyen: -OC(O)CH_{3}, -OC(O)CH(CH_{3})_{2} y -OC(O)(CH_{2})_{3}CH_{3}.

Por el término "N-acilamino" tal como se utiliza en esta memoria se entiende -N(H)C(O)alquilo, donde alquilo es como se describe en esta memoria. Ejemplos de sustituyentes N-acilamino tal como se utilizan en esta memoria incluyen: -N(H)C(O)CH_{3}; -N(H)C(O)CH(CH_{3})_{2} y -N(H)C(O)(CH_{2})_{3}CH_{3}.

Por el término "ariloxi" tal como se utiliza en esta memoria se entiende -O-arilo C_{6}-C_{12} donde arilo C_{6}-C_{12} es fenilo, naftilo, 3,4-metilenodioxifenilo, piridilo o bifenilo sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo constituido por: alquilo, hidroxialquilo, alcoxi, trifluorometilo, aciloxi, amino, N-acilamino, hidroxi, -(CH_{2})_{g}C(O)OR^{6}, -S(O)_{n}R^{7}, nitro, ciano, halógeno y -OH protegido, donde g es 0-6, R^{6} es hidrógeno o alquilo, n es 0-2 y R^{7} es hidrógeno o alquilo. Ejemplos de sustituyentes ariloxi tal como se utilizan en esta memoria incluyen: fenoxi, 4-fluorofeniloxi y bifeniloxi.

Por el término "heteroátomo" tal como se utiliza en esta memoria se entiende oxígeno, nitrógeno o azufre.

Por el término "halógeno" tal como se utiliza en esta memoria se entiende un sustituyente seleccionado de bromuro, yoduro, cloruro y fluoruro.

Por el término "alquilo" y sus derivados, y en todas las cadenas de carbono que se utilizan en esta memoria, se entiende una cadena hidrocarbonada lineal o ramificada, saturada o insaturada, que tiene 1-12 átomos de carbono. Ejemplos de sustituyentes alquilo tal como se utilizan en esta memoria incluyen: -CH_{3}, -CH_{2}-CH_{3}, -CH_{2}-CH_{2}-CH_{3}, -CH(CH_{3})_{2}, -C(CH_{3})_{3}, -(CH_{2})_{3}-CH_{3}, -CH_{2}-CH(CH_{3})_{2} y -CH(CH_{3})-CH_{2}-CH_{3}, -CH=CH_{2}.

Por el término "tratamiento" y sus derivados tal como se utilizan en esta memoria, se entiende terapia profiláctica o terapéutica.

Por la frase "movilizar células tronco de la sangre periférica" tal como se utiliza en esta memoria, se entiende la movilización de células tronco hematopoyéticas desde la médula hacia la sangre periférica.

Por la frase "ligando bifuncional no peptídico" tal como se utiliza en esta memoria, se entiende un ligando que puede activar el receptor de G-CSF uniéndose a dos sitios no adyacentes.

Por la frase "no peptídico" tal como se utiliza en esta memoria, se entiende una proteína o un péptido que no está compuesto fundamentalmente de aminoácidos naturales.

Por el término "fundamentalmente" tal como se utiliza en esta memoria, se entiende menos de 60% en peso del residuo aminoácido natural.

Todas las publicaciones, incluidas pero no limitadas a patentes y a solicitudes de patentes, citadas en esta memoria descriptiva se incorporan a esta por referencia como si cada publicación individual se indicara específicamente e individualmente para incorporase por referencia a esta memoria como si se indicara completamente.

Los compuestos de fórmula (I) se incluyen en las composiciones farmacéuticas de la invención y se utilizan en los métodos de la invención. En los casos en que está presente un grupo -COOH u -OH, se pueden emplear ésteres farmacéuticamente aceptables, por ejemplo metilo, etilo, pivaloiloximetilo, y análogos para -COOH, y acetato, maleato y análogos para -OH, y aquellos ésteres conocidos en la técnica para modificar las características de solubilidad o hidrólisis para uso como formulaciones de liberación sostenida o formulaciones profármaco.

Por el término "co-administración" y sus derivados tal como se utilizan en esta memoria, se entiende la administración simultánea o cualquier modalidad de administración secuencial separada de un compuesto mimético de G-CSF como se describe en esta memoria, y uno o más ingredientes activos adicionales, tales como agentes antibacterianos, agentes antifúngicos así como agentes conocidos para tratar la neutropenia, con inclusión de neutropenia inducida por quimioterapia y trasplante de médula ósea y en la movilización de células tronco de la sangre periférica y otras condiciones con producción deprimida de leucocitos. Preferiblemente, si la administración no es simultánea, los compuestos se administran en una proximidad estrecha en el tiempo unos con respecto a otros. Adicionalmente, no importa si los compuestos se administran en la misma forma de dosificación, p.ej. un compuesto puede administrarse tópicamente y otros compuestos se pueden administrar por vía oral.

Los nuevos compuestos de fórmula (I) se preparan como se muestra en el Esquema I a continuación, con la condición de que los sustituyentes "R" no incluyen ningún sustituyente tal que haga inoperante el procedimiento del Esquema I. Las 1,2-dicetonas de fórmula (2) son comercialmente asequibles o se preparan a partir de aril-aldehídos por condensación benzoínica de acuerdo con el procedimiento descrito en Ide et al (Organic Reactions vol. IV, 269) seguido por oxidación de \alpha-hidroxi-cetonas intermedias como ha sido publicado por Mancuso et al. (J. Org. Chem. 1979, 44, 4148). Los derivados de guanidina de fórmula (3) son comercialmente asequibles o se pueden preparar fácilmente a partir de o-fenilenodiaminas comercialmente asequibles siguiendo el procedimiento de King et al (J. Chem. Soco 1948, 1366).

Esquema (I)

Preparación de compuestos de fórmula (I)

Los compuestos de fórmula (I)

3

en la cual R^{1}, R^{2}, R^{3} y R^{4} son como se describe en la fórmula (I) anterior; se preparan por tratamiento de una 1,2-dicetona de fórmula (2)

4

en la cual R^{1} y R^{2} son como se describe en la fórmula (I) con uno o más derivados de guanidina de fórmula (3)

5

en la cual R^{5} es R^{3} o R^{4}, tal que cuando se utiliza más de un derivado de guanidina de fórmula (3), R^{5} no es el mismo sustituyente. La reacción se lleva a cabo en un disolvente tal como benceno o piridina a reflujo con separación azeotrópica de agua utilizando un aparato Dean-Stark o, alternativamente, en presencia de un catalizador básico (tal como hidróxido de sodio) en un disolvente prótico adecuado (tal como metanol, etanol o agua).

Las sales, los hidratos y los solvatos farmacéuticamente aceptables se forman en caso apropiado por métodos bien conocidos por los expertos en la técnica.

Debido a que los compuestos farmacéuticamente activos de la presente invención son activos como compuestos miméticos de G-CSF, los mismos exhiben utilidad terapéutica en el tratamiento de infecciones bacterianas, infecciones fúngicas, neutropenia, con inclusión de neutropenia inducida por quimioterapia y trasplante de médula ósea y en la movilización de células tronco de la sangre periférica y otras condiciones con producción deprimida de leucocitos.

En la determinación de la potencia como compuestos miméticos de G-CSF, se emplearon los ensayos siguientes:

Ensayo de luciferasa

Los compuestos de la presente invención se ensayaron respecto a potencia como compuestos miméticos del receptor de G-CSF en un ensayo de luciferasa tal como el descrito en Lamb, et al., Nucleic Acids Research 23: 3283-3289 (1995) y Seidel et al ., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92:3041-3045 (1995) empleando células NFS60 en sustitución de las células HepG2 utilizadas en dicho ensayo. Las células NFS60 (Holmes, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82: 6687-6691 (1985)) se emplearon en sustitución de las células HepG2 en el ensayo Lamb debido a que las células NSF60 expresan receptores de G-CSF endógenos que se ajustan estrechamente al patrón de activación STAT (transductores de señal y activadores de la transcripción) observado en las células primarias de múrido y células de la médula ósea humana.

Algunos de los compuestos más preferidos de esta invención también eran activos en un ensayo CFU-G, un ejemplo del cual se describe en King AG, Talmadge J., Badger AM, Pelus LM. La regulación de la producción de actividad estimuladora de colonias a partir de células estromáticas de médula ósea por el péptido hematorregulador, HP-5. Exp. Hematol. 20: 223-228, 1992.

Los compuestos farmacéuticamente activos comprendidos dentro del alcance de esta invención son útiles como compuestos miméticos de G-CSF en mamíferos, con inclusión de seres humanos, que se encuentran en necesidad del mismo.

Los compuestos de los ejemplos 1, 2, 4-8, 13, 15-18, 20, 25, 26, 30, 32b, 34, 35, 37 y 39 mostraron activación por encima de 150% del testigo entre el intervalo de concentración de 1 a 32 \muM en el ensayo de luciferasa.

Los compuestos de los ejemplos 3, 9-12, 14, 19, 21-24, 27-29, 31, 32a, 33, 36, 38 y 40 aunque no muestran una activación por encima de 150% del testigo entre el intervalo de concentración de 1 a 32 \muM, se cree que muestran activación por encima de 150% del testigo a > 32 \muM en el ensayo de luciferasa.

La presente invención proporciona por consiguiente un método de tratamiento de infecciones bacterianas, infecciones fúngicas, neutropenia, con inclusión de neutropenia inducida por quimioterapia y trasplante de médula ósea y en la movilización de células tronco de sangre periférica y otras condiciones con producción deprimida de leucocitos, que comprende administrar un compuesto de fórmula (I):

6

en la cual R^{1}, R^{2}, R^{3} y R^{4} son independientemente arilo,

\hbox{-S(O) _{n} }

R^{5}, -OH protegido y alquilo sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo constituido por: alcoxi, aciloxi, arilo C_{6}-C_{12}, arilo C_{6}-C_{12} sustituido, amino, N-acilamino, oxo, hidroxi, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, -C(O)OR^{6}, -S(O)_{n}R^{7}, ariloxi, nitro, ciano, halógeno y-OH protegido,

donde

R^{6} es hidrógeno o alquilo,

n es 0-2,

R^{7} es hidrógeno o alquilo y

R^{5} es hidrógeno, cicloalquilo, arilo C_{6}-C_{12}, cicloalquilo sustituido, arilo C_{6}-C_{12} sustituido, alquilo o alquilo sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo constituido por: alcoxi, aciloxi, ariloxi, amino, N-acilamino, oxo, hidroxi, -C(O)OR^{6}, -S(O)_{n}R^{7}, nitro, ciano, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, halógeno, arilo C_{6}-C_{12}, arilo C_{6}-C_{12} sustituido y-OH protegido, donde R^{6} es hidrógeno o alquilo, n es 0-2 y R^{7} es hidrógeno o alquilo; y

sus sales, hidratos, solvatos y ésteres farmacéuticamente aceptables en una cantidad eficaz para aumentar la producción de leucocitos. Los compuestos de fórmula (I) proporcionan también un método de tratamiento de los estados de enfermedad indicados anteriormente debido a su capacidad demostrada para actuar como compuestos miméticos de G-CSF. El fármaco se puede administrar a un paciente que se encuentra en necesidad de ello por cualquier vía de administración convencional, con inclusión, pero sin carácter limitante, intravenosa, intramuscular, oral, subcutánea, intradérmica, y parenteral.

Los compuestos farmacéuticamente activos de la presente invención se incorporan en formas de administración convenientes tales como cápsulas, comprimidos o preparaciones inyectables. Se emplean vehículos farmacéuticos sólidos o líquidos. Los vehículos sólidos incluyen almidón, lactosa, sulfato cálcico dihidratado, terra alba, sacarosa, talco, gelatina, agar, pectina, acacia, estearato de magnesio y ácido esteárico. Los vehículos líquidos incluyen jarabe, aceite de cacahuete, aceite de oliva, suero fisiológico y agua. De manera similar, el vehículo o diluyente puede incluir cualquier material de liberación prolongada, tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo, solo o con una cera. La cantidad de vehículo sólido varía ampliamente pero preferiblemente, será de aproximadamente 25 mg a aproximadamente 1 g por dosis unitaria. Cuando se usa un vehículo líquido, la preparación estará en la forma de un jarabe, elixir, emulsión, cápsula de gelatina blanda, líquido inyectable estéril tal como una ampolla, o una suspensión líquida acuosa o no acuosa.

Las preparaciones farmacéuticas se hacen siguiendo técnicas convencionales de un químico farmacéutico que incluyen mezclar, granular y comprimir, cuando sea necesario, para formas de comprimido, o mezclar, rellenar y disolver los ingredientes, según sea apropiado, para dar los productos orales o parenterales deseados.

Las dosis de los compuestos farmacéuticamente activos de la presente invención en una dosis unitaria farmacéutica como se ha descrito anteriormente será una cantidad eficaz, no tóxica seleccionada preferiblemente del intervalo de 0,001-100 mg/kg de compuesto activo, preferiblemente 0,001-50 mg/kg. Cuando se trata a un humano, que necesita un compuesto mimético de G-CSF, la dosis seleccionada se administra preferiblemente de 1-6 veces al día oralmente o parenteralmente. Las formas preferidas de administración parenteral incluyen tópicamente, rectalmente, transdérmicamente, por inyección y continuamente por infusión. Las dosis unitarias orales para administración humana contienen preferiblemente de 0,05 a 3.500 mg de compuesto activo. Se prefiere la administración oral, que usa dosis más bajas. La administración parenteral, a altas dosis, sin embargo, se puede usar también cuando sea seguro y conveniente para el paciente.

Las dosis óptimas a administrar se pueden determinar fácilmente por los expertos en la técnica, y variarán con el compuesto mimético de G-CSF particular de que se trate, la concentración de la preparación, el modo de administración, y el avance de la condición de enfermedad. Factores adicionales que dependen del paciente particular que se esté tratando darán como resultado una necesidad de ajustar las dosis, con inclusión de la edad, el peso y la dieta del paciente y el tiempo de administración.

El método de esta invención para inducir actividad mimética de G-CSF en mamíferos, con inclusión de los seres humanos, comprende administrar a un individuo que se encuentra en necesidad de dicha actividad, una cantidad eficaz como compuesto mimético de G-CSF de un compuesto farmacéuticamente activo de la presente invención.

La invención proporciona también el uso de un compuesto de fórmula (I) en la fabricación de un medicamento para uso como compuesto mimético de G-CSF.

La invención proporciona también el uso de un compuesto de fórmula (I) en la fabricación de un medicamento para uso en terapia.

La invención proporciona también el uso de un compuesto de fórmula (I) en la fabricación de un medicamento para uso en el aumento de la producción de leucocitos.

La invención proporciona también el uso de un compuesto de fórmula (I) en la fabricación de un medicamento para uso en el tratamiento de infecciones bacterianas y fúngicas.

La invención proporciona también una composición farmacéutica para uso como compuesto mimético de G-CSF que comprende un compuesto de fórmula I y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

La invención proporciona también una composición farmacéutica para uso en el tratamiento de la neutropenia, que comprende un compuesto de fórmula I y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

La invención proporciona también una composición farmacéutica para uso en el aumento de la producción de leucocitos, que comprende un compuesto de fórmula I y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

La invención proporciona también una composición farmacéutica para uso en el tratamiento de infecciones bacterianas, que comprende un compuesto de fórmula I y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

La invención proporciona también una composición farmacéutica para uso en el tratamiento de infecciones fúngicas, que comprende un compuesto de fórmula I y un vehículo farmacéuticamente aceptable

La invención proporciona también un procedimiento para preparar una composición farmacéutica que contiene un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable y un compuesto de fórmula I, que comprende poner el compuesto de fórmula I en asociación con el vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

No son de esperar efectos toxicológicos inaceptables cuando los compuestos de la invención se administran de acuerdo con la presente invención.

Adicionalmente, los compuestos farmacéuticamente activos de la presente invención se pueden co-administrar con ingredientes activos adicionales, tales como otros compuestos conocidos para tratar infecciones bacterianas, infecciones fúngicas, neutropenia, con inclusión de neutropenia inducida por quimioterapia y trasplante de médula ósea y en la movilización de células tronco de la sangre periférica y otras condiciones con producción deprimida de leucocitos, o compuestos conocidos como útiles cuando se emplean en combinación con un compuesto mimético de G-CSF.

Sin mayor detalle, se cree que un experto en la técnica puede utilizar la presente invención en su máxima extensión empleando la descripción que antecede. Por consiguiente, los ejemplos siguientes deben considerarse como meramente ilustrativos y no como limitantes del alcance de la presente invención en modo alguno.

Detalles experimentales Ejemplo 1 Preparación de 2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-bis [2-piridil]-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol (Compuesto 1)

7

Una mezcla de 2,2'-piridilo (15,8 g, 74,4 milimoles) y 2-guanidinobencimidazol (19,5 g, 111,7 milimoles) en metanol (440 ml) se trató con una solución de hidróxido de sodio (2,97 g, 74,4 milimoles) en 74 ml y la mezcla resultante se dejó en reposo a la temperatura ambiente durante 4 días. El material cristalino se filtró y se secó a vacío para dar 21,1 g del compuesto del título como cristales blanquecinos (72%). P.f.: 305-307ºC (descomposición); resonancia magnética nuclear del protón (^{1}H NMR, del inglés Nuclear Magnetic Resonance) (300 MHz, d_{6}-DMSO) \delta 11,5 (br s, NH, 2H), 10,0 (br s, NH, 2H), 8,6 (br s, NH, 2H), 8,38 (d, J = 4,2 Hz, 2H), 7,55 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 7,29 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,27-7,21 (m, 4H), 7,14 (br s, 2H), 6,98 (dd, J = 5,8, 3,2 Hz, 4H); espectroscopía de masas con ionización por pulverización electrónica [MS (ESI), del inglés Mass Spectroscopy (Electrospray Ionization)] m/z 527 [M + H]^{+}. Análisis, calculado para C_{28}H_{22}N_{12}\cdot2/3H_{2}O: C, 62,44; H, 4,37; N, 31,21; encontrado: C, 62,72; H, 4,08; N, 30,86.

Ejemplo 2 Preparación de 2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-difenil-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol (Compuesto 2)

8

Una mezcla de bencilo (1,05 g, 5,0 milimoles) y 2-guanidinobencimidazol (1,57 g, 9,0 milimoles) en benceno (25 ml) se calentó a reflujo en piridina (10 ml) durante 1 h. Después de evaporar la mayor parte de la piridina a presión reducida, el residuo se trató con tolueno caliente y el precipitado resultante se separó por filtración. El precipitado se disolvió luego en agua:ácido acético 9:1 (30 ml); la solución se filtró y el filtrado se neutralizó a pH 7 con tampón de fosfato. Se formó un precipitado; que se recogió luego y se trituró con agua para proporcionar el compuesto del título (0,42 g, 16%). ^{1}H NMR (300 MHz, d_{6}-DMSO) \delta 11,5 (br s, NH, 2H), 10,0 (br s, NH, 2H), 8,6 (br s, NH, 2H), 7,28-7,10 (m, 14H), 6,97 (dd, J = 6,0, 3,0 Hz, 4H); MS (ESI) m/z 525 [M + H]^{+}. Análisis, calculado para C_{30}H_{24}N_{10}\cdot1/2CH_{3}CO_{2}H\cdot3/4H_{2}0: C, 65,37; H, 4,88; N, 24,65. Encontrado: C, 65,36; H, 4,79; N, 24,48.

Ejemplo 3 Preparación de 2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-bis(2-furil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-bis(2-piridil)octahidroimidazo[4,5-d]imidazol

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 1, se trataron 2,2'-furilo (1,91 g, 10 milimoles) y 2-guanidinobencimidazol (2,10 g, 12,0 milimoles) en metanol (60 ml) con una solución de hidróxido de sodio (400 mg, 10 milimoles) en 10 ml de agua. El precipitado negro se separó por filtración, se disolvió en 30 ml de ácido acético al 10% y se filtró. El filtrado se neutralizó con hidróxido de sodio acuoso. El compuesto del título precipitó como un sólido gris (105 mg, rendimiento 10%), p.f.: 222-225ºC (descomposición); MS (ESI) m/z 505 [M + H]^{+}.

Ejemplo 4 Preparación de 2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-bis (3-metoxifenil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 1, se trataron 3,3'-dimetoxibencilo (1,0 g, 3,69 milimoles) y 2-guanidinobencimidazol (540 mg, 3,08 milimoles) en metanol (40 ml) con una solución de hidróxido de sodio (200 mg, 5 milimoles) en 5 ml de agua. El compuesto del título se aisló como cristales de color amarillo pálido (655 mg, rendimiento 73%). P.f.: 276-278ºC (descomposición); MS (ESI) m/z 585 [M + H]^{+}.

Ejemplo 5 Preparación de 2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-bis(4-metilfenil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 1, se trataron 4,4'-dimetildibencilo (1,91 g, 12 milimoles) y 2-guanidinobencimidazol (2,10 g, 10 milimoles) en metanol (60 ml) con una solución de hidróxido de sodio (400 mg, 10 milimoles) en 10 ml de agua. El sólido de color anaranjado se filtró, se disolvió en 40 ml de ácido acético al 10% y se filtró. El filtrado se neutralizó luego con hidróxido de sodio acuoso para dar el compuesto del título que precipito como un sólido amarillo pálido (185 mg, rendimiento 7%). P.f.: 245-248ºC (descomposición); MS (ESI) m/z = 553 [M + H]^{+}.

Ejemplo 6 Preparación de 2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-bis(4fluorofenil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imdazol

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 1, se trataron 4,4'-difluorobencilo (1,0 g, 4,06 milimoles) y 2-guanidinobencimidazol (0,6 g, 3,4 milimoles) en metanol (40 ml) con una solución de hidróxido de sodio (200 mg, 5 milimoles) en 5 ml de agua. El compuesto del título se aisló como cristales de color amarillo pálido (750 mg, rendimiento 79%). MS (ESI) m/z 561 [M + H]^{+}.

Ejemplo 7 Preparación de 2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-bis(6-metil-2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]-imidazol

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 1, se trataron 6,6'-dimetil-2,2'-piridilo (100 mg, 0,41 milimoles) y 2-guanidinobencimidazol (60 mg, 0,35 milimoles) en metanol (5 ml) con una solución de hidróxido de sodio (20 mg, 0,55 milimoles) en 0,5 ml de agua. El compuesto del título se aisló como cristales de color amarillo pálido (55 mg, rendimiento 28%). MS (ESI) m/z 555 [M + H]^{+}.

Ejemplo 8 Preparación de 2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a-(2-piridil)-6a-fenil-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 1, se trataron 1-fenil-2-(2-piridinil)etanodiona (800 mg, 3,79 milimoles) y 2-guanidinobencimidazol (560 mg, 3,15 milimoles) en metanol (20 ml) con una solución de hidróxido de sodio (40 mg, 1,0 milimoles) en 1 ml de agua. El compuesto del título se aisló como cristales de color amarillo pálido (160 mg, rendimiento 20%) .^{1}H NMR (300 MHz, d_{6}-DMSO) \delta 12,0 (br s, NH, 1H), 11,5 (br s, NH, 2H), 10,0 (br s, NH, 1H), 8,6 (br s, NH, 1H), 8,41 (m, 2H), 7,55 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 7,30-7,10 (m, 8H), 6,98 (dd, J = 6,0, 3,1 Hz, 4H); MS (ESI) m/z 526 [M + H]^{+}.

Ejemplo 9 Preparación de 2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a-(4-piridil)-6a-fenil-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 1, se trataron 1-fenil-2-(4-piridinil)etanodiona (500 mg, 2,42 milimoles) y 2-guanidinobencimidazol (1,0 mg, 6,0 milimoles) en metanol (10 ml) con una solución de hidróxido de sodio (40 mg, 1,0 milimoles) en 1 ml de agua. El compuesto del título se aisló como cristales de color amarillo pálido (45 mg, 3% de rendimiento). ^{1}H NMR (300 MHz, d_{6}-DMSO) \delta 11,5 (br s, NH, 1H), 11,0 (br s, NH, 1H), 10,0 (br s, NH, 1H), 8,6 (br s, NH, 1H), 8,4 (m, 2H), 7,4-6,8 (m, 15H); MS (ESI) m/z 526 [M + H]^{+}.

Ejemplo 10 Preparación de 2,5-bis[(5-metil-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4, 5-d]imidazol

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 1, se trataron 2,2'-piridilo (603 mg, 2,84 milimoles) y 5-metil-2-guanidinobencimidazol (489 mg, 2,58 milimoles) en metanol (17 ml) con una solución de hidróxido de sodio (113,6 mg, 2,84 milimoles) en 2,8 ml de agua. El compuesto del título se aisló como un polvo gris (450 mg, rendimiento 63%); p.f.: 290-291ºC (descomposición); 1H NMR (300 MHz, d_{6}-DMSO) \delta 11,3 (br s, NH, 2H), 10,0 (br s, NH, 2H), 8,5 (br s, NH, 2H), 8,32 (d, J = 4,2 Hz; 2H), 7,54 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 7,31 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,16 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,16-7,09 (m, 2H), 7,09 (s, 2H), 7,14 (br s, 2H), 6,86 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 2,34 (s, 6H); MS (ESI) m/z 555 [M + H]^{+}.

Ejemplo 11 Preparación de 2,5-bis[(5-nitro-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4, 5d]imidazol

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 1, se trataron 2,2'-piridilo (245 mg, 1,15 milimoles) y 5-nitro-2-guanidinobencimidazol (254 mg, 1,15 milimoles) en metanol (6,9 ml) con una solución de hidróxido de sodio (46 mg, 1,15 milimoles) en 1,1 ml de agua. El compuesto del título se aisló como cristales anaranjados (182 mg, 51%); p.f.: 340-350ºC (descomposición); MS (ESI) m/z 617 [M + H]^{+}.

Ejemplo 12 Preparación de 2,5-bis[5-cloro-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 1, se trataron 2,2'-piridilo (352 mg, 1,66 milimoles) y 5-metil-2-guanidinobencimidazol (350 mg, 1,66 milimoles) en metanol (10 ml) con una solución de hidróxido de sodio (66,4 mg, 1,66 milimoles) en 2,5 ml de agua. El compuesto del título se aisló como un sólido pardusco (247 mg, 50%). MS (ESI) m/z 596 [M + H]^{+}.

Ejemplo 13 Preparación de 2,5-bis[(4-metil-2-tiazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 1, se trataron 2,2'-piridilo (1,06 g, 5,0 milimoles) e hidrocloruro de 4-metiltiazol-2-ilguanidina (1,35 g, 7,0 milimoles) en metanol (30 ml) con una solución de hidróxido de sodio (450 mg, 11,25 milimoles) en 7,5 ml de agua. El precipitado se filtró, se disolvió en 30 ml de ácido acético al 10% y se filtró; el filtrado se neutralizó luego con hidróxido de sodio acuoso. El compuesto del título precipitó como un sólido de color canela (265 mg, rendimiento 16%); p.f.: > 300ºC (descomposición); MS (ESI) m/z 489 [M + H]^{+}.

Ejemplo 14 Preparación de 2,5-bis[2-benzoxazolilimino]-3a,6a-bis-(2-piridil)-1,2,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4.5-d]-imidazol

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 1, se trataron 2,2'-piridilo (301 mg, 1,42 milimoles) y 2-guanidinobenzoxazol (250 mg, 1,42 milimoles) en etanol (12 ml) con una solución de hidróxido de sodio (56,7 mg, 1,42 milimoles) en 2 ml de agua. El compuesto del título se aisló como un sólido pardusco (151 mg, 40%). ^{1}H NMR (300 MHz, d_{6}-DMSO) \delta 10,28 (s, NH, 4H), 8,36 (d, J = 4,6 Hz, 2H), 7,57 (td, J = 7,8, 1,8 Hz, 2H), 7,47 (d, J = 7,8 Hz, 2), 7,39 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,30 (d, J = 4,6 Hz, 2H), 7,19 (dt, J = 7,7, 1,3 Hz, 2H), 7,167,10 (m, 4H); MS(ESI) m/z 529 [M+H]^{+}.

Ejemplo 15 Preparación de 2,5-bis[(4-metil-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4, 5-d]imidazol

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 1, se trataron 2,2'-piridilo (1,87 g, 8,83 milimoles) y 4-metil-2-guanidinobencimidazol (2,0 g, 10,5 milimoles) en metanol (63 ml) con una solución de hidróxido de sodio (420 mg, 10,5 milimoles) en 6 ml de agua. El compuesto del título se aisló como cristales blancos (1,9 g, 65%). MS (ESI) m/z 555 [M+H]^{+}.

Ejemplo 16 Preparación de 5-[2-bencimidazolilimino]-2-[(4-metil-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6, 6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato)

Una mezcla de 2,2'-piridilo (135 mg, 0,636 milimoles), 2-guanidinobencimidazol (92,8 mg, 0,530 milimoles) y 4-metil-2-guanidinobencimidazol (100 mg, 0,530 milimoles) en metanol (3 ml) se trató con una solución de hidróxido de sodio (38 mg, 0,95 milimoles) en 0,5 ml de agua, y la mezcla resultante se dejó en reposo a la temperatura ambiente durante 2 días. El material cristalino se filtró y se purificó por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC, del inglés High Performance Liquid Chromatography) preparativa en fase inversa (Rainin Dynamax, columna 5 \muM C18: 21,4 mm x 25 cm, elución con gradiente de acetonitrilo-agua que contenía 0,1% de ácido trifluoroacético) para dar el compuesto del título como un polvo blanco (100 mg, 25%). MS(ESI) m/z 541 [M+H]^{+}.

Ejemplo 17 Preparación de 5-(2-bencimidazolilimino)-2-[(5-metil-2bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato)

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 16, excepto que se empleó 5-metil-2-guanidinobencimidazol en sustitución de 4-metil-2-guanidinobencimidazol, se preparó el compuesto del título (88 mg, 11%). ^{1}H NMR (300 MHz, d_{6}-DMSO) \delta 13,0 (br s, NH, 4H), 9,8 (br s, NH, 4H), 8,39 (d, J = 4,3 Hz, 2H), 7,64 (td, J = 7,8, 1,7 Hz, 2H), 7,57 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,49-7,46 (m, 2H), 7,38-7,33 (m, 3H), 7,27 (s, ^{1}H), 7,21-7,13 (m, 3H), 2,44 (s, 3H); MS(ESI) m/z 541

\hbox{[M+H] ^{+} .}

Ejemplo 18 Preparación de 2,5-bis[(1-metil-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4, 5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato)

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 1, se trataron 2,2'-piridilo (187 mg, 0,88 milimoles) y 1-metil-2-guanidinobencimidazol (0,20 g, 1,57 milimoles) en metanol (6 ml) con una solución de hidróxido de sodio (60 mg, 1,5 milimoles) en 0,6 ml de agua. El material cristalino se separó por filtración y se purificó por HPLC preparativa en fase inversa (Rainin Dynamax, columna 5 \muM C18: 21,4 mm x 25 cm, elución con gradiente de acetonitrilo-agua que contenía 0,1% de ácido trifluoroacético) para dar el compuesto del título como un polvo blanco (200 mg, 48%). lH NMR (300 MHz, d_{6}-DMSO) \delta 9,9 (br s, NH, 4H), 8,41 (d, J = 4,5 Hz, 2H), 7,68-7,62 (m, 4H), 7,54 (d, J = 7,7 Hz, 2H), 7,55-7,50 (m, 2H), 7,39-7,36 (m, 4H), 7,20 (ddd, J = 7,3, 4,9, 1,0 Hz, 2H), 3,78 (s, 6H); MS(ESI) m/z 555

\hbox{[M+H] ^{+} .}

Ejemplo 19 Preparación de 5-(2-bencimidazolilimino)-2-[(5-fluoro-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6, 6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato)

Una mezcla de 2,2'-piridilo (345 mg, 1,6 milimoles), 2-guanidinobencimidazol (181 mg, 1,036 milimoles) y 5-fluoro-2-guanidinobencimidazol (250 mg, 1,036 milimoles) en metanol (3 ml) se trató con una solución de hidróxido de sodio (60 mg, 1,5 milimoles) en 0,5 ml de agua y la mezcla resultante se dejó en reposo a la temperatura ambiente durante 2 días. El material cristalino se separó por filtración y se purificó por HPLC preparativa en fase inversa (Rainin Dynamax, columna 5 \muM C18: 21,4 mm x 25 cm, elución con gradiente de acetonitrilo-agua que contenía 0,1% de ácido trifluoroacético) para dar el compuesto del título como un polvo blanco (92 mg, 12%); ^{1}H-NMR (300 MHz, d_{6}-DMSO) \delta 13,2 (br s, NH, 2H), 9,8 (br s, NH, 4H), 8,40 (d, J = 4,2 Hz, 2H), 7,64 (td, J = 7,6, 1,2 Hz, 2H), 7,55 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 7,49-7,43 (m, 3H), 7,34-7,30 (m, 3H), 7,19 (dd, J = 7,0, 5,0 Hz, 2H); MS(ESI) m/z 545 [M+H]^{+}.

Ejemplo 20 Preparación de 2,5-bis[(5-fluoro-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4, 5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato)

Una mezcla de 2,2'-piridilo (262 mg, 1,2 milimoles) y 5-fluoro-2-guanidinobencimidazol (200 mg, 1,04 milimoles) en metanol (3 ml) se trató con una solución de hidróxido de sodio (60 mg, 1,5 milimoles) en 0,6 ml de agua. El material cristalino se separó por filtración y se purificó por HPLC preparativa en fase inversa (Rainin Dynamax columna 5 \muM C18: 21,4 mm x 25 cm, elución con gradiente de acetonitrilo-agua que contenía 0,1% de ácido trifluoracético) para dar el compuesto del título como un polvo blanco (147 mg, 37%). ^{1}H NMR (300 MHz, d_{6}-DMSO) 6 13,0 (br s, NH, 2H), 9,9 (br s, NH, 4H), 8,39 (d, J = 4,6 Hz, 2H), 7,64 (td, J = 7,7, 1,6 Hz, 2H), 7,52 (d, J = 7,8 Hz, 2), 7,45-7,41 (m, 2H), 7,32-7,28 (m,2H), 7,21-7,16 (m, 2H), 7,15-7,11 (m, 2H); MS(ESI) m/z 563 [M+H]^{+}.

Ejemplo 21 Preparación de 5-(2-bencimidazolilimino)-2-[(1-metil-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6, 6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato)

Una mezcla de 2,2'-piridilo (265 mg, 1,25 milimoles), 2-guanidinobencimidazol (231 mg, 1,32 milimoles) y 1-metil-2-guanidinobencimidazol (350 mg, 1,59 milimoles) en metanol (3 ml) se trató con una solución de hidróxido de sodio (95 mg, 2,4 milimoles) en 0,5 ml de agua y la mezcla resultante se dejó en reposo a la temperatura ambiente durante 2 días. El material cristalino se separó por filtración y se purificó por HPLC preparativa en fase inversa (Rainin Dynamax, columna 5 \muM C18: 21,4 mm x 25 cm, elución con gradiente de acetonitrilo-agua que contenía 0,1% de ácido trifluoroacético) para dar el compuesto del título como un polvo blanco (125 mg, 14%). ^{1}H NMR (300 MHz, d_{6}-DMSO) \delta 13,2 (br s, NH, 2H), 9,9 (br s, NH, 4H), 8,40 (d, J = 4,3 Hz, 2H), 7,68-7,62 (m, 3H), 7,57 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,50-7,47 (m, 3H), 7,38-7,30 (m, 4H), 7,20 (ddd, J = 7,3, 5,3, 1,0 Hz, 2H), 3,78 (s, 3H); MS(ESI) m/z 541 [M+H]^{+}.

Ejemplo 22 Preparación de 5-[2-bencimidazolilimino]-2-[(4-metil-2-tiazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato)

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 19, excepto que se empleó 4-metiltiazol-2-ilguanidina en sustitución de 5-fluoro-2-guanidinobencimidazol, se preparó el compuesto del título (63 mg, 7%). MS(ESI) m/z 510 [M+H]^{+}.

Ejemplo 23 Preparación de 2,5-bis[(5-bromo-4-metil-2-tiazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 1, se trataron 2,2'-piridilo (215 mg, 1,016 milimoles) y 5-bromo-4-metil-2-guanidinobencimidazol (200 mg, 0,847 milimoles) en metanol (3 ml) con una solución de hidróxido de sodio (51 mg, 1,27 milimoles) en 0,5 ml de agua. El compuesto del título se aisló en forma de cristales blancos (50 mg, 18%). MS (ESI) m/z 647 [M+H]^{+}.

Ejemplo 24 Preparación de 5-[2-bencimidazolilimino]-2-[(5-cloro-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil}-1,2,3,3a,4,5,6, 6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis (trifluoroacetato)

Una mezcla de 2,2'-piridilo (242 mg, 1,14 milimoles), 2-guanidinobencimidazol (166 mg, 0,95 milimoles) y 5-cloro-2-guanidinobencimidazol (200 mg, 0,95 milimoles) en metanol (3 ml) se trató con una solución de hidróxido de sodio (57 mg, 1,42 milimoles) en 0,5 ml de agua y la mezcla resultante se dejó en reposo a la temperatura ambiente durante 2 días. El material cristalino se separó por filtración y se purificó por HPLC preparativa en fase inversa (Rainin Dynamax, columna 5 \muM C18: 21,4 mm x 25 cm, elución con gradiente de acetonitrilo-agua que contenía 0,1% de ácido trifluoroacético) para dar el compuesto del título como un polvo blanco (173 mg, 23%). MS(ESI) m/z 562
[M+H]^{+}.

Ejemplo 25 Preparación de 2,5-bis[(5,6-dimetil-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil}-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis (trifluoroacetato)

Una mezcla de 2,2'-piridilo (254 mg, 1,2 milimoles) y 5,6-dimetil-2-guanidinobencimidazol (203 mg, 1,0 milimoles) en metanol (3 ml) se trató con una solución de hidróxido de sodio (60 mg, 1,5 milimoles) en 0,6 ml de agua. El material cristalino se separó por filtración y se purificó por HPLC preparativa en fase inversa (Rainin Dynamax, columna 5 \muM C18: 21,4 mm x 25 cm, elución con gradiente de acetonitrilo-agua que contenía 0,1% de ácido trifluoroacético) para dar el compuesto del título como un polvo blanco (170 mg, 42%). MS(ESI) m/z 583 [M+H]^{+}.

Ejemplo 26 Preparación de 5-[2-bencimidazolilimino]-2-[(5,6-dimetil-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4, 5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato)

Una mezcla de 2,2'-piridilo (254 mg, 1,2 milimoles), 2-guanidinobencimidazol (175 mg, 1,0 milimol) y 5,6-dimetil-2-guanidinobencimidazol (203 mg, 1,0 milimol) en metanol (3 ml) se trató con una solución de hidróxido de sodio (60 mg, 1,5 milimoles) en 0,5 ml de agua y la mezcla resultante se dejó en reposo a la temperatura ambiente durante 2 días. El material cristalino se separó por filtración y se purificó por HPLC preparativa en fase inversa (Rainin Dynamax, columna 5 \muM C18: 21,4 mm x 25 cm, elución con gradiente de acetonitrilo-agua que contenía 0,1% de ácido trifluoroacético) para dar el compuesto del título como un polvo blanco (96 mg, 12%). ^{1}H NMR (300 MHz, d_{6}-DMSO) \delta 13,1 (br s, NH, 2H), 12,9 (br s, NH, 2H), 9,9 (br s, NH, 2H), 9,8 (br s, NH, 2H), 8,39 (d, J = 4,3 Hz, 2H), 7,64 (td, J = 7,9, 1,5 Hz, 2H), 7,58 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 7,48 (dd, J = 6,0, 3,2 Hz, 2H), 7,34-7,31 (m, 2H), 7,25 (s, 2H), 7,19 (dd, J = 7,0, 5,0 Hz, 2H), 2,33 (s, 6H); MS (ESI) m/z 555 [M+H]^{+}.

Ejemplo 27 Preparación de 2,5-bis[(5-carboxi-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato)

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 25, excepto que se empleó 4-carboxi-2-guanidinobencimidazol en sustitución de 5,6-dimetil-2-guanidinobencimidazol, se preparó el compuesto del título después de purificación por HPLC preparativa en fase inversa (42 mg, 10%). MS(ESI) m/z 615 [M+H]^{+}.

Ejemplo 28 Preparación de 5-[2-bencimidazolilimino)-2-[2-benzoxazolilimino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidro- imidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato)

Una mezcla de 2,2'-piridilo (143 mg, 0,68 milimoles), 2guanidinobencimidazol (100 mg, 0,56 milimoles) y 2-guanidinobenzoxazol (100 mg, 0,56 milimoles) en metanol (3 ml) se trató con una solución de hidróxido de sodio (34 mg, 0,85 milimoles) en 0,5 ml de agua y la mezcla resultante se dejó en reposo a la temperatura ambiente durante 2 días. El material cristalino se separó por filtración y se purificó por HPLC preparativa en fase inversa (Rainin Dynamax, columna 5 \muM C18: 21,4 mm x 25 cm, elución con gradiente de acetonitrilo-agua que contenía 0,1% de ácido trifluoroacético) para dar el compuesto del título como un polvo blanco (42 mg, 10%). MS(ESI) m/z 528
[M+H]^{+}.

Ejemplo 29 Preparación de 2.5-bis[2-benzotiazolilimino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol

Una mezcla de 2,2'-piridilo (212 mg, 1,0 milimol) y 2-guanidinobenzotiazol (403 mg, 2,2 milimoles) en metanol (10 ml) se trató con una solución de hidróxido de sodio (30 mg, 0,75 milimoles) en 0,3 ml de agua. El compuesto del título se obtuvo como un polvo cristalino (407 mg, 73%). ^{1}H NMR (300 MHz, d_{6}-DMSO) \delta 10,3 (br s, NH, 2H), 8,38 (d, J = 4,0 Hz, 2H), 7,94 (s, J = 7,8, 2H), 7,64 (m, 4H), 7,41 (m, 4H), 7,30 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 7,18 (dd, J = 7,5, 4,9 Hz, 2H); MS(ESI) m/z 561 [M+H]^{+}.

Ejemplo 30 Preparación de 5-[2-bencimidazolilimino]-2-[2-benzotiazolilimino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidro- imidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato)

Una mezcla de 2,2'-piridilo (255 mg, 1,2 milimoles), 2-guanidinobencimidazol (175,2 mg, 1,0 milimoles) y 2-guanidinobenzotiazol (192 mg, 1,0 milimoles) en metanol (10 ml) se trató con una solución de hidróxido de sodio (40 mg, 1,0 milimoles) en 0,4 ml de agua, y la mezcla resultante se dejó en reposo a la temperatura ambiente durante 2 días. El material cristalino se filtró y se purificó por HPLC preparativa en fase inversa (Rainin Dynamax, columna 5 \muM C18: 21,4 mm x 25 cm, elución con gradiente de acetonitrilo-agua que contenía 0,1% de ácido trifluoroacético) para dar el compuesto del título como un polvo blanco (30 mg, 4%)\cdot^{1}H NMR (300 MHz, d_{6}-DMSO) \delta 13,0 (br s, NH, 2H), 9,8 (br s, NH, 2H), 8,40 (d, J = 4,0 Hz, 2H), 7,83 (d, J = 7,7 Hz, H), 7,55 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 7,54 (d, J = 7,7 Hz, ^{1}H) 7,50-7,38 (m, 4H), 7,38-7,25 (m, 3H), 7,23-7,15(m, H) MS(ESI) m/z 544 [M+H]^{+}.

Ejemplo 31 Preparación de 5-[(2-bencimidazolilimino)]-2-[(5-carboxi-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5, 6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato)

Una mezcla de 2,2'-piridilo (508 mg, 2,4 milimoles), 2-guanidinobencimidazol (350 mg, 2,0 milimoles) y 5-carboxi-2guanidinobencimidazol (428 mg, 2,0 milimoles) en metanol (6 mi) se trató con una solución de hidróxido de sodio (120 mg, 3,0 milimoles) en 0,8 ml de agua y la mezcla resultante se dejó en reposo a temperatura ambiente durante 2 días. Se obtuvo un total de 490 mg de un material cristalino, una porción del cual (250 mg) se purificó por HPLC preparativa en fase inversa (Rainin Dynamax, columna 5 \muM C18:21,4 mm x 25 cm, elución con gradiente de acetonitrilo-agua que contenía 0,1% de ácido trifluoroacético) para dar el compuesto del título como un polvo blanco (50 mg, 6%). MS(ESI) m/z 571 [M+H]^{+}.

Ejemplo 32 Preparación de 2,5-bis[(5-yodo-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato) y 5-[2-bencimidazolilimino]-2-[(5-yodo-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato)

Una solución de 2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol (2,0 g, 3,8 milimoles) en una mezcla de 35 ml de N,N-dimetil-formamida, 3,5 ml de ácido acético y 3,5 ml se trató con N-yodosuccinimida (1,71 g, 7,6 milimoles) y la mezcla resultante se agitó durante 3 días a la temperatura ambiente. Se evaporó el disolvente y el residuo se repartió entre acetato de etilo y agua; la capa acuosa se neutralizó con solución de bicarbonato de sodio y se extrajo con acetato de etilo dos veces. Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con agua, con salmuera, y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. El disolvente se evaporó a presión reducida para dar un material sólido (3,2 g); una porción del mismo (1,0 g) se purificó por HPLC preparativa en fase inversa (Rainin Dynamax, columna 5 \muM C18: 21,4 mm x 25 cm, elución con gradiente de acetonitrilo-agua que contenía 0,1% de ácido trifluoroacético) para dar los compuestos del título como polvos blancos. Derivado 5-yodo (12,5 mg, 1%): ^{1}H NMR (300 MHz, d_{6}-DMSO) \delta 13,0 (br s, NH, 2H), 10,0 (br s, NH, 2H), 8,39 (d, J = 4,7 Hz, 2H), 7,64 (t, J = 5,9 Hz, 2H), 7,40-7,60 (m, 4H), 7,32 (m, 2H), 6,98 (dd, J = 4,6, 3,2 Hz, 2H); MS(ESI} m/z 653 [M+H]^{+}. Derivado 5,5'-diyodo (62,5 mg, 12%): ^{1}H NMR (300 MHz, d_{6}-DMSO) \delta 9,9 (br s, NH, 2H), 8,40 (d, J = 4,5 Hz, 2H), 7,74 (s, 2H), 7,62 (t, J = 5,9, 1,7 Hz, 2H), 7,45-7,56 (m, 4H), 7,28 (d, 2H), 7,19 (m, 3H); MS(ESI) m/z 779 [M+H]^{+}.

Ejemplo 33 Preparación de 2,5-bis[2-benzimidazolilimino]-3a,6a-bis(4-bromofenil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 1, se trataron 4,4'-dibromobencilo (4,42 g, 12 milimoles) y 2-guanidinobencimidazol (1,75 g, 10 milimoles) en metanol (100 ml) con una solución de hidróxido de sodio (400 mg, 10 milimoles) en 10 ml de agua. El compuesto del título se aisló en forma de cristales de color amarillos pálido (800 mg, rendimiento 24%).P.f: 274-278ºC (descomposición); MS (ESI) m/z 683 [M+H]^{+}.

Ejemplo 34 Preparación de 2,5-bis[2-benzimidazolilimino]-3a,6a-bis(4-trifluorometilfenil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 1, se trataron 4,4'-trifluorometilbencilo (0,253 g, 0,73 milimoles) y 2-guanidinobencimidazol (0,154 g, 0,88 milimoles) en metanol (10 ml) con una solución de hidróxido de sodio (35,2 mg, 0,88 milimoles) en 1 ml de agua. El compuesto del título se aisló en forma de cristales de color amarillo pálido (180 mg, rendimiento 62%). MS (ESI) m/z 661 [M+H]^{+}.

Ejemplo 35 Preparación de 2,5-bis[2-benzimidazolilimino]-3a-(3-clorofenil)-6a-fenil-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 1, se trataron 1-(3-clorofenil)-2-feniletanodiona (0,25 g, 1,0 milimoles) y 2-guanidinobencimidazol (0,215 g, 1,2 milimoles) en metanol (12 ml) con una solución de hidróxido de sodio (48 mg, 1,2 milimoles) en 1,2 ml de agua. El compuesto del título se aisló en forma de cristales de color amarillo claro (130 mg, rendimiento 39%). MS (ESI) m/z 559 [M+H]^{+}.

Ejemplo 36 Preparación de 2,5-bis[2-benzimidazolilimino]-3a-(2-clorofenil)-6a-fenil-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 1, se trataron 1-(2-clorofenil)-2-feniletanodiona (0,25 g, 1,0 milimoles) y 2-guanidinobencimidazol (0,215 g, 1,2 milimoles) en metanol (12 ml) con una solución de hidróxido de sodio (48 mg, 1,2 milimoles) en 1,2 ml de agua. El compuesto del título se aisló en forma de cristales de color amarillo claro (130 mg, rendimiento 39%). MS (ESI) m/z 559 [M+H]^{+}.

Ejemplo 37 Preparación de 5-[(2-bencimidazolilimino)]-2-[(5-metil-2-bencimidazolil)imino]-3a-(2-piridil)-6a-fenil-1,2,3,3a,4,5, 6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato)

Una mezcla de 2-fenil-1-(2-piridil)etanodiona (253 mg, 1,2 milimoles), 2-guanidinobencimidazol (175 mg, 1,0 milimoles) y 5-metil-2-guanidinobencimidazol (189 mg, 1,0 mmoles) en metanol (6 ml) se trató con una solución de hidróxido de sodio (40 mg, 0,95 milimoles) en 1,0 ml de agua y la mezcla resultante se dejó en reposo a temperatura ambiente durante 2 días. El material cristalino se filtró y se purificó por HPLC preparativa en fase inversa (Rainin Dynamax, columna 5 mM C18:21,4 mm x 25 cm, elución con gradiente de acetonitrilo-agua que contenía 0,1% de ácido trifluoroacético) para dar el compuesto del título como un polvo blanco (20 mg, 5%). MS(ESI) m/z 540

\hbox{[M+H] ^{+} .}

Ejemplo 38 Preparación de 2,5-bis[(1-metil-2-benzimidazolil)imino]-3a,6a-difenil-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol

Se trataron una solución de bencilo (210 mg, 1,0 mmol) y 1-metil-2-guanidinobencimidazol (207 g, 1,1 milimoles) en etanol (5 ml) con hidróxido de sodio (40 mg, 1,0 milimoles) en 0,8 ml de agua y la mezcla resultante se puso a reflujo durante 2 horas. El compuesto del título precipitó y se aisló como un polvo de color amarillo claro (125 mg, rendimiento 41%). MS (ESI) m/z 553 [M+H]^{+}.

Ejemplo 39 Preparación de 2,5-bis[(1-metil-2-benzimidazolil)imino]-3a,6a-bis(4-metilfenil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol

Se trataron una solución de 4,4'-dimetilbencilo (238 mg, 1,0 mmol) y 1-metil-2-guanidinobencimidazol (207 g, 1,1 milimoles) en etanol (5 ml) con hidróxido de sodio (40 mg, 1,0 milimoles) en 0,8 ml de agua y la mezcla resultante se puso a reflujo durante 2 horas. El compuesto del título precipitó y se aisló como un polvo de color amarillo claro (50 mg, rendimiento 16%). MS (ESI) m/z 581 [M+H]^{+}.

Ejemplo 40 Preparación de 2,5-bis[(1-metil-2-benzimidazolil)imino]-3a,6a-bis(4-bromofenil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol

Se trataron una solución de 4,4'-dibromobencilo (368 mg, 1,0 mmol) y 1-metil-2-guanidinobencimidazol (207 g, 1,1 milimoles) en etanol (5 ml) con hidróxido de sodio (40 mg, 1,0 milimoles) en 0,8 ml de agua y la mezcla resultante se puso a reflujo durante 2 horas. El compuesto del título precipitó y se aisló como un polvo de color amarillo claro (320 mg, rendimiento 82%). MS (ESI) m/z 711 [M+H]^{+}.

\newpage

Ejemplo 41 Composición de cápsulas

Se produce una forma de dosificación oral para administrar un agonista de la presente invención del receptor G-CSF llenando una cápsula de gelatina dura estándar de dos piezas con los ingredientes en las proporciones que se muestran en la Tabla I a continuación.

TABLA I

Ingredientes	Cantidades
2,5-Bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-	25 mg
octahidroimidazo-4,5-d]imidazol (Compuesto 1)
Lactosa	55 mg
Talco	16 mg
Estearato de magnesio	4 mg

Ejemplo 42 Composición inyectable por vía parenteral

Se produce una forma inyectable para administrar un agonista de la presente invención del receptor G-CSF por agitación de 1,5% en peso de 2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-difenil-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol (Compuesto 2) en 10% en volumen de propilenglicol en agua.

Ejemplo 43 Composición de tabletas

La sacarosa, el sulfato de calcio dihidratado, y un agonista de la presente invención del receptor G-CSF, como se muestra en la Tabla II a continuación, se mezclan y se granulan en las proporciones indicadas con una solución de gelatina al 10%. Los gránulos húmedos se tamizan, se secan, se mezclan con el almidón, talco y ácido esteárico, se tamizan y se comprimen en una tableta.

TABLA II

Ingredientes	Cantidades
2,5-Bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-	20 mg
octahidroimidazo-[4,5-d]imidazol (Compuesto 1)
Sulfato de calcio dihidratado	30 mg
Sacarosa	4 mg
Almidón	2 mg
Talco	1 mg
Acido esteárico	0,5 mg

Si bien las realizaciones preferidas de la invención se ilustran por lo que antecede, debe entenderse que la invención no se limita a las instrucciones precisas descritas en esta memoria, y que se reserva el derecho a todas las modificaciones que queden dentro del alcance de las reivindicaciones siguientes.

Claims

1. Un compuesto de la fórmula (1):

9

en la cual R^{1}, R^{2}, R^{3} y R^{4} son independientemente arilo,

\hbox{-S(O) _{n} }

donde

R^{6} es hidrógeno o alquilo,

n es 0-2,

R^{7} es hidrógeno o alquilo y

R^{5} es hidrógeno, cicloalquilo, arilo C_{6}-C_{12}, cicloalquilo sustituido, arilo C_{6}-C_{12} sustituido, alquilo o alquilo sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo constituido por: alcoxi, aciloxi, ariloxi, amino, N-acilamino, oxo, hidroxi, -C(O)OR^{6}, -S(O)_{n}R^{7}, nitro, ciano, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, halógeno, arilo C_{6}-C_{12}, arilo C_{6}-C_{12} sustituido y -OH protegido, donde R^{6} es hidrógeno o alquilo, n es 0-2 y R^{7} es hidrógeno o alquilo; y sus sales, hidratos, solvatos y ésteres farmacéuticamente aceptables, donde

por la expresión "arilo C_{6}-C_{12}" tal como se utiliza en esta memoria se entiende fenilo, naftilo, 3,4-metilenodioxifenilo, piridilo, o bifenilo;

por el término "sustituido" tal como se utiliza en esta memoria se entiende que el resto químico en cuestión tiene uno o más sustituyentes seleccionados del grupo constituido por: hidroxialquilo, alcoxi, aciloxi, alquilo, amino, N-acilamino, hidroxi, -(CH_{2})_{g}C(O)OR^{6}, -S(O)_{n}R^{7}, nitro, ciano, halógeno, trifluorometilo y -OH protegido, donde g es 0-6, R^{6} es hidrógeno o alquilo, n es 0-2, y R^{7} es hidrógeno o alquilo;

por el término "alcoxi" tal como se utiliza en esta memoria se entiende -O-alquilo, donde alquilo es como se describe en esta memoria, con inclusión de-OCH_{3} y -OC(CH_{3})_{2}-CH_{3};

por el término "cicloalquilo" tal como se utiliza en esta memoria se entiende un grupo C_{3}-C_{12} no aromático, insaturado o saturado, cíclico o policíclico;

por el término "aciloxi" tal como se utiliza en esta memoria se entiende -OC(O)alquilo, donde alquilo es como se describe en esta memoria;

por el término "N-acilamino" tal como se utiliza en esta memoria se entiende -N(H)C(O)alquilo, donde alquilo es como se describe en esta memoria;

por el término "ariloxi" tal como se utiliza en esta memoria se entiende -O-arilo C_{6}-C_{12} donde arilo C_{6}-C_{12} es fenilo, naftilo, 3,4-metilenodioxifenilo, piridilo o bifenilo sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo constituido por: alquilo, hidroxialquilo, alcoxi, trifluorometilo, aciloxi, amino, N-acilamino, hidroxi, -(CH_{2})_{g}C(O)OR^{6}, -S(O)_{n}R^{7}, nitro, ciano, halógeno y -OH protegido, donde g es 0-6, R^{6} es hidrógeno o alquilo, n es 0-2 y R^{7} es hidrógeno o alquilo;

por el término "heteroátomo" tal como se utiliza en esta memoria se entiende oxígeno, nitrógeno o azufre;

\newpage

por el término "halógeno" tal como se utiliza en esta memoria se entiende un sustituyente seleccionado de bromuro, yoduro, cloruro y fluoruro;

por el término "alquilo" y sus derivados, y en todas las cadenas de carbono que se utilizan en esta memoria, se entiende una cadena hidrocarbonada lineal o ramificada, saturada o insaturada, que tiene 1-12 átomos de carbono.

2. Un compuesto de la reivindicación 1, en el cual R^{1} y R^{2} son independientemente fenilo, furilo, tienilo o piridilo, todos los cuales no están sustituidos o están sustituidos con un sustituyente seleccionado del grupo constituido por: halógeno, alquilo C_{1-5}, cicloalquilo C_{3-6} y -O-alquilo C_{1-3};

3. Un compuesto de la reinvidicación 1, en el que R^{1} y R^{2} son 2-piridilo, los cuales están ambos sustituidos o no sustituidos independientemente con alquilo C_{1-3}; y

R^{3} y R^{4} son 2-benzimidazolilo, los cuales están ambos sustituidos o no sustituidos independientemente con alquilo C_{1-3}, con la condición de que R^{3} y R^{4} no están ambos sustituidos.

4. El compuesto de la reivindicación 1, seleccionado de:

2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-bis(2-piridil)1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a(2-piridil)-6a-fenil-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

5-[2-bencimidazolilimino]-2-[(4-metil-2-bencimidazolil}-imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato),

5-[2-bencimidazolilimino]-2-[(5-metil-2-bencimidazolil)-imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidro-
imidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato),

2,5-bis[(1-metil-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis-(trifluoroacetato}, y

5-[2-bencimidazolilimino]-2-[(5,6-dimetil-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,2a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato),

2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-difenil-1,2,3,3a,4,5,-6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-bis(2-furil)-1,2,3,3a,-4,5,6,6a-bis-2-piridil)octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-bis(4-metilfenil)-1,2,-3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a-(4-piridil)-6a-fenil-1,2,-3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[(4-metil-2-tiazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[2-benzoxazolilimino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,-3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

5-(2-bencimidazolilimino)-2-[(l-metil-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidro-
imidazo[4,5-d]imidazol,

5-[2-bencimidazolilimino]-2-[(5-cloro-2-bencimidazolil)-imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidro-
imidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato),

2,5-bis[(5,6-dimetil-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato),

2,5-bis[5-carboxi-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis-(trifluoroacetato),

5-[2-bencimidazolilimino]-2-[2-benzoxazolilimino]-3a,6a-bis-(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato),

5-[2-bencimidazolilimino]-2-[2-benzotiazolilimino]-3a,6a-bis-(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato),

5-[(2-bencimidazolilimino)]-2-[(5-carboxi-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato),

2,5-bis[(5-yodo-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(tri-fluoroacetato), y

5-[2-bencimidazolilimino]-2-[(5-yodo-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato),

2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a,6a-bis(4-bromofenil)-1,2,3,3a,-4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

2,5-bis[2-bencimidazolilimino]-3a-(2-clorofenil)-6a-fenil-1,2,3,3a,4,5,6, 6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol,

5-(2-bencimidazolilimino)-2-[(5-metil-2-bencimidazolil)imino]-6a-fenil-3a-(2-piridil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, sal bis(trifluoroacetato),

2,5-bis[(1-metil-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(4-metilfe-nil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol, y

2,5-bis[(1-metil-2-bencimidazolil)imino]-3a,6a-bis(4-bromofe-nil)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahidroimidazo[4,5-d]imidazol.

o una de sus sales, hidratos o solvatos farmacéuticamente aceptables.

5. Una composición farmacéutica que comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable y un compuesto de la reivindicación 1.

6. Un procedimiento para la preparación de un compuesto de fórmula (I)

10

en la cual R^{1}, R^{2}, R^{3} Y R^{4} son como se describe en la reivindicación 1; que comprende:

hacer reaccionar una 1,2-dicetona de fórmula (2)

11

en la cual R^{1} y R^{2} son como se describe en la reivindicación 1, con uno o más derivados de guanidina de fórmula (3)

12

en la cual R^{5} es R^{3} o R^{4}, de tal manera que cuando se utiliza más de un derivado de guanidina de fórmula (3), R^{5} no tiene que ser el mismo sustituyente, en un disolvente a reflujo con separación azeotrópica de agua,

y después de ello formar opcionalmente una sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptable de aquél.

7. Un procedimiento para la preparación de un compuesto de fórmula (I)

13

hacer reaccionar una 1,2-dicetona de fórmula (2)

14

15

en la cual R^{5} es R^{3} o R^{4}, de tal manera que cuando se utiliza más de un derivado de guanidina de fórmula (3), R^{5} no tiene que ser el mismo sustituyente, en presencia de un catalizador básico en un disolvente prótico adecuado,

y formar opcionalmente después de ello una sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptable de aquél.

8. Uso de un compuesto de fórmula (I) en la fabricación de un medicamento para uso en el tratamiento de
neutropenia.

9. Un compuesto de fórmula (I) para uso como una sustancia terapéutica activa.

10. Uso de un compuesto de fórmula (I) en la fabricación de un medicamento para uso en el tratamiento de infecciones bacterianas y fúngicas.

11. Un procedimiento para preparar una composición farmacéutica que contiene un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable y una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula (I) como se describe en la reivindicación 1, y sus sales, hidratos, solvatos y ésteres farmacéuticamente aceptables, cuyo procedimiento comprende poner el compuesto de la fórmula (I) en asociación con el vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.