ES2207981T3 - Terapia endocrina para el cancer de mama: tratamiento combinado con tamoxifeno mas dibenzofuranos policlorados alquilicos. - Google Patents
Terapia endocrina para el cancer de mama: tratamiento combinado con tamoxifeno mas dibenzofuranos policlorados alquilicos.Info
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Abstract
Productos que contienen un primer compuesto de **fórmula** en la que R1, R3, R6 y R8 o R2, R4, R6 y R8 son individual e independientemente un hidrógeno o un sustituyente seleccionado de cloro, flúor, bromo y un grupo alquilo lineal o ramificado de uno a cuatro carbonos, teniendo dicho compuesto al menos un sustituyente alquilo y al menos dos sustituyentes halógenos; y un segundo compuesto que se selecciona de antiestrógenos de trifenil-etileno, inhibidores de aromatasas, hidrazonas antiestrógenas, benzotiofenos antiestrógenos, y dihidronaftalenos antiestrógenos; como un preparación combinada para uso simultáneo o secuencial para inhibir el crecimiento de un tumor dependiente de estrógenos.
Description
Terapia endocrina para el cáncer de mama:
tratamiento combinado con tamoxifeno más dibenzofuranos
policlorados alquílicos.
Esta invención se refiere a la terapia y
prevención tumoral. Más particularmente, se refiere a métodos y
combinaciones farmacéuticas para inhibir los tumores dependientes
de estrógenos.
Muchos tumores de mama son dependientes de
estrógenos, quiere decir que necesitan estrógenos para su
crecimiento. Durante varios años se han utilizando antiestrógenos en
un tratamiento común y con éxito del cáncer de mama. Los
antiestrógenos son un tipo de compuestos que inhiben a los
estrógenos el que causen una respuesta total en los tejidos diana.
Un compuesto antiestrógeno que se ha utilizado durante años como un
fármaco preventivo y terapéutico en el cáncer de mama es el
tamoxifeno. Se han utilizado mucho también la progesterona y las
progestinas relacionadas para tratar el cáncer de mama en animales
de laboratorio y en seres humanos. Se han descrito en los últimos
años otros muchos compuestos antiestrógenos como posibles
alternativas del tamoxifeno, comprendiendo inhibidores de
aromatasas (Bednarski, patente de E.E.U.U. nº 4.745.109), hidrazonas
antiestrógenas (Morgan, patente de E.E.U.U: Nº 4.732.904) y
benzotiofenos antiestrógenos (Jones, patente de E.E:U:U: nº
4.418.068).
Sin embargo, muchos antiestrógenos no actúan como
estrictos antagonistas, sino más bien actúan como agonistas
parciales sobre el receptor de estrógenos (ER, por sus siglas en
inglés). Se ha visto que esta actividad agonista parcial es una
"espada de doble filo". Mientras que se ha visto que la
actividad agonista parcial produce efectos beneficiosos, tales como
reducir el colesterol del suero y evitar la osteoporosis,
recientemente se ha visto implicada por varios estudios
independientes como promotora de aumentar la formación de tumores
del endometrio. (Las células del endometrio consisten en células
epiteliales del estroma y de la luz, que además de las células del
endometrio de músculo liso, comprenden los principales tipos
celulares del útero). Por ejemplo, los hallazgos del National
Surgical Adjuvant Breast and Bowel Project concluían que "el
riesgo de cáncer de endometrio aumenta después del tratamiento con
tamoxifeno para el cáncer de mama; sin embargo, el beneficio neto
sobrepasa con mucho el riesgo" (Fisher et al. (1994)). Se
confirmó recientemente en un estudio con 87.323 mujeres con cáncer
de mama, así como con otros, la incidencia aumentada de cáncer de
endometrio después de terapia auxiliar con tamoxifeno para cáncer
de mama (Rutqvist et al. (1995), Fornander et al. (1989), Mouridsen
et al. (1988), Ryden et al. (1986)). La actividad agonista parcial
o "similar al estrógeno" del tamoxifeno en el útero humano y
los efectos de tamoxifeno sobre la incidencia aumentada del cáncer
de endometrio está de acuerdo con estudios anteriores en modelos de
animales de laboratorio y cultivos celulares. Por ejemplo, la
hiperplasia uterina inducida por tamoxifeno en la mayoría de los
modelos de animales y crecimiento tumoral en ratones sin sistema
inmune sin timo que llevan tumores de endometrio transplantados que
responden a los estrógenos.
Así, el método del estado anterior de la técnica
que trata tumores de mama dependientes de estrógenos da como
resultado un aumento significativo de la incidencia de tumores de
endometrio. Esta incidencia aumentada de tumores de endometrio se
puede deber a la actividad similar al estrógeno de tamoxifeno en el
útero.
Más recientemente, se ha dirigido otra zona de
investigación a la actividad antiestrógeno de agonistas del receptor
de aril-hidrocarburos (AhR, por sus siglas en
inglés) utilizando
2,3,7,8-tetraclorodibenzo-p-dioxina (TCDD,
por sus siglas en inglés) como un compuesto modelo. El TCDD y los
compuestos relacionados inhiben el crecimiento del tumor de mama en
modelos de roedores y en respuestas inducidas por
17\beta-estradiol (E2) en células cancerígenas de
útero de roedores y de mama de ser humano. Mientras que se demostró
que el TCDD era un antiestrógeno eficaz en cultivo en líneas
cancerígenas de cáncer de mama de ratas, ratones y de seres humanos
MCF-7, se demostró que era demasiado
hepatocarcinógeno para utilizarse como antiestrógeno terapéutico.
Estudios anteriores han demostrado que el TCDD induce respuestas
tóxicas y bioquímicas en la rata; una de tales respuestas
bioquímicas, la instrucción de
aril-hidrocarburo-hidroxilasa (AHH),
por sus siglas en inglés) o actividades de
etoxiresorufin-O-deetilasa (EROD,
por sus siglas en inglés), dependientes de CYPIA1, en el hígado, se
correlacionan con la toxicidad de TCDD.
Se sintetizaron originalmente una serie de
6-alquil-1,3,8-triclorodibenzofuranos
(triCDFs) para investigar sus actividades como antagonistas
parciales de AhR. Los
6-alquil-1,3,8-triCDFs
son de fórmula:
en la que R_{1}, R_{3} y R_{8} son cloro,
R_{6} es un grupo alquilo lineal o ramificado de uno a cuatro
carbonos, R_{2}, R_{4}, R_{7} y R_{9} son hidrógeno, se
utilizó
6-alquil-1,3,8-triclorodibenzofurano
(6-MCDF, por sus siglas en inglés) como un
prototipo para esta serie de
compuestos.
Los estudios iniciales mostraban que el
6-MCDF unido al receptor de Ah era un inductor débil
de CYPIA1 y exhibía una toxicidad mínima. Aún más,
6-MCDF inhibía las respuestas tóxicas inducidas de
TCDD y se caracterizaba como un antagonista del receptor de Ah, (B.
Astroff et al. (1988); M. Harris et al. (1989); R. Bannister et al.
(1989); C. Yao et al. (1989)). Sin embargo, el
6-MCDF no inhibía la actividad antiestrógena
inducida por el TCDD; el 6-MCDF era también un
antiestrógeno en el útero de rata. (B. Astroff y Safe (1991)). En
1988, Astroff y Safe informaron que TCDDy 6-MCDF
causaban una disminución dependiente de la dosis en la unión de
receptor de la progesterona (PR, por sus siglas en inglés) y de ER
nuclear y citosólico en el útero de ratas
Sprague-Dawley hembras de 21 a 25 días de edad. Aún
más, el 6-MCDF era solamente de 300 a 570 veces
menos activo que el TCDD como un compuesto antiestrógeno, pero era
> 157.000 veces menos potente que el TCDD como inductor del
CYPIA1 hepático en los mismos animales (CYPIA1 es un sustituto de la
potencia tóxica). Los estudios posteriores mostraron que el
6-MCDF y compuestos relacionados inhibían la
hipertrofia inducida por E2, la actividad de la peroxidasa, unión
del PR y ER citosólico, y los niveles del receptor de EGF y del
mRNA de c-fos en el útero de la rata. Así, era
aparente que el 6-MCDF era capaz del efecto
beneficioso antiestrógeno sin los efectos secundarios tóxicos del
TCDD.
Se ha investigado la actividad antiestrógena
in vivo de una serie de dibenzofuranos policlorados
sustituidos con alquilo (PCDFs, por sus siglas en inglés) en el
útero de ratas Sprague-Dawley hembras inmaduras (B.
Astroff et al. (1991); R. Dickerson et al. (1995)). Los compuestos
utilizados en este estudio contienen dos, tres, o cuatro
sustituyentes laterales y comprenden: 6-MCDF,
6-etil-1,3,8-triCDF,
6-n-propil-1,3,8-triCDF,
6-i-propil-1,3,8-triCDF,
6-t-butil-1,3,8-triCDF,
8-MCDF (dos sustituyentes laterales);
6-metil-2,3,8-triCDF,
6-metil-2,3,4,8-tetraCDF,
8-metil-1,3,7-triCDF,
y
8-metil-1,2,4,7-tetraCDF
(tres sustituyentes laterales);
8-metil-2,3,7-triCDF,
8-metil-2,3,4,7-tetraCDF
(cuatro sustituyentes laterales). Se investigaron también dos
compuestos adicionales,
8-metil-2,3,7-triclorodibenzo-p-dioxina
y
8-metil-2,3,7-tribromodibenzo-
p-dioxina (cuatro sustituyentes laterales). Todos los
compuestos sustituidos con alquilo inhibían el aumento de peso
húmedo uterino inducido por los estrógenos y la unión de PR y ER
nuclear y citosólico. Se determinaron las relaciones cuantitativas
estructura-actividad antiestrógena utilizando
6-i-propil-1,3,8-triCDF,
6-metil-2,3,4,8-tetraCDF
y
8-metil-2,3,4,7-tetraCDF
como congéneres representativos que contienen dos, tres y cuatro
sustituyentes laterales, respectivamente. Los valores de ED_{50}
(ED_{50} se define como la dosis que produce 50% de respuesta
máxima) para la capacidad antiestrógena eran similares para los
tres compuestos; sin embargo los valores de ED_{50} para la
inducción de la actividad hepática dependiente de CYPIA1 eran 73.600
(estimado), 8,52 y 5,31 mmol/kg para
6-i-propil-1,3,8-triCDF,
6-metil-2,3,4,8-tetraCDF
y
8-metil-2,3,4,7-tetraCDF,
respectivamente. En base a los resultados de estudios anteriores,
se puede utilizar CYPIA1 como un sustituto de la potencia tóxica en
la rata; por tanto, las relaciones ED_{50} elevada (inducción de
CYPIA1)/ ED_{50} (actividad antiestrógena) son indicativas de baja
toxicidad y elevada potencia antiestrógena. La relación era 13.990
- 17.100 para
6-i-propil-1,2,8.tri-CDF,
mientras que las relaciones correspondientes para los compuestos
con tres o cuatro sustituyentes laterales variaba de 0,64 - 3,34.
Estos datos sugerían que los PCDFs con alquilo sustituido en
posiciones alternas 1,3,6,8 eran modelos estructurales útiles para
desarrollar nuevos antiestrógenos mediados por AhR para el
tratamiento de cáncer de mama. Los datos de los efectos
antiestrógenos de alquil-dibenzofuranos sustituidos
de forma alterna 1,3,6,8 o 2,4,6,8 se han presentado en la patente
de E.E.U.U. nº 5.516.790.
Se investigó la actividad antitumoral in
vivo de 6-MCDF, 8-MCDF
(8-metil-1,3,6-triCDF)
y
6-ciclohexil-1,3,8-triCDF
(6-CHDF) en el modelo de tumor de mama de rata DMBA
(McDougal et al., Inhibition of
7,12-dimethylbenz[a]anthracene-induced
rat mammary tumor growth by aryl hydrocarbon receptor agonist.
Cancer Letters 120: 53-63, 1997). En dosis de
5, 10 o 25 mg/kg/semana, 6- y 8-MCDF inhibían de
forma significativa el crecimiento de los tumores de mama, y en la
dosis de 5 mg/kg/semana, se observaba una inhibición del
crecimiento de > 50% para los dos isómeros. Por el contrario,
6-CHDF era inactivo en la dosis de 5 mg/kg/semana,
y las relaciones de estructura-actividad antitumoral
(6-/8-MCDF >> 6-CHDF) se
correlacionaban con los estudios
estructura-capacidad antiestrógena (útero de la
rata) y las afinidades de unión relativa de estos compuestos para
el AhR. La actividad antitumoral de 6- u 8-MCDF en
el mamífero no se acompañaba con cualquier cambio significativo en
las relaciones de peso hígado/cuerpo, morfología del hígado o
inducción de actividad hepática dependiente de CYPIA1, que es uno
de los indicadores más sensibles de exposición a agonistas de AhR.
La RT-PCR y los análisis por inmunotransferencia
(Western blot) del mRNA del tumor de mama y de extractos de
proteína, respectivamente, confirmaban la presencia de la AhR,
sugiriendo que las vías de señalización mediadas por el AhR son
funcionales en los tumores de mama de rata, pero simplemente no
activadas por 6- u 8-MCDF.
Intentando no estar obligado por la teoría, se
cree que la mayoría de los antiestrógenos (es decir, tamoxifeno) y
los alquil-PCDFs funcionan mediante dos mecanismos
diferentes. Se cree que AhR hace disminuir el ER mediante un
mecanismo desconocido (presumiblemente postranscripcional). Se cree
que los alquil-PCDFs trabajan mediante el AhR que
interfiere con el ER. Se cree que el tamoxifeno se une al ER y
bloquea la acción del ER en la mama. Se cree que el
6-MCDF actúa a través del AhR y se une por tanto al
receptor. Se cree que el 6-MCDF es un antagonista de
AhR para las respuestas tóxicas (es decir, inhibe la
toxicidad del TCDD en estudios de co-tratamiento)
pero se cree que actúa como un agonista del receptor de Ah para la
capacidad antiestrógena (es decir, actúa como el TCDD).
El método del estado anterior de la técnica de
tratar los tumores de mama dependientes de estrógenos frecuentemente
implica la administración de tamoxifeno. Tal como se menciona
anteriormente, se ha visto que la terapia con tamoxifeno se asocia
con una incidencia significativamente elevada de formación de
tumores de endometrio en varios ensayos independientes (Fornander
et al. (1989), Rutqvist et al. (1995), Mouridsen et al. (1988),
Ryden et al. (1986), Fisher et al. (1994)). Algunos estudios han
sugerido que se puede reducir la incidencia de formación de tumores
de endometrio con dosis más bajas de tamoxifeno. El ensayo de
Estocolmo demostró un riesgo aproximadamente 6 veces más elevado
para tumores de endometrio con un protocolo de tratamiento de 40
mg/día durante 2 años (Fornander et al. (1989), Rutqvist et al.
(1995)), mientras que los ensayos daneses y del Sur de Suecia
demostraron riesgos de solamente 3,3 y 2,0 veces más elevados,
respectivamente. En los dos últimos experimentos, se administró
tamoxifeno en una dosis de 30 mg/día durante un año. En los ensayos
escoceses y de Manchester (Inglaterra), en los cuales el tamoxifeno
se administró en una dosis de 20 mg/día, no parecía que hubiera
riesgo aumentado de sufrir tumores de endometrio (Stewart et al.
(1989), Stewart (1992), Ribeiro et al. (1992)). Sin embargo, un
tercer estudio con 2843 pacientes demostró un riesgo aumentado 7,5
veces de formación de tumores de endometrio con la misma dosis (20
mg/día) de tamoxifeno (Fisher et al. (1994)). A la vista de los
menores tamaños de población de los estudios anteriores, se deben
interpretar con cuidado los resultados de los ensayos escocés y de
Manchester (Inglaterra). Así, parece claro considerando la mayoría
de los estudios, que la terapia con tamoxifeno da como resultado
unos riesgos significativamente elevados de formación de tumores de
endometrio. Sin embargo, no está actualmente claro considerando los
ensayos existentes, si una reducción en la dosis de tamoxifeno dé
como resultado un riesgo reducido de formación de tumores de
endometrio.
Aunque no existe una clara indicación de que al
reducir la dosis de tamoxifeno se reduce de forma correspondiente
el riesgo de la formación de tumores de endometrio, se debería
tener en cuenta que los ensayos basados en grandes poblaciones no
se han realizado con dosis de tamoxifeno menores de 20 mg/día. Sin
embargo, los datos de los modelos de cultivos celulares y de
animales sí que sugieren que causa un efecto en el útero
relacionado con la dosis para tamoxifeno y esto está de acuerdo con
los principios farmacológicos. Por ejemplo, el tamoxifeno producía
aumentos significativos dependientes de la dosis en el peso húmedo
de úteros de rata, que se correlacionaban con aumentos de la
concentración del fármaco. Por tanto, como consecuencia las
reducciones similares en dosis de tamoxifeno podía dar también como
resultado la disminución en la formación de tumores de
endometrio.
Esta invención utiliza la combinación de un
compuesto antiestrógeno convencional y un
alquil-PCDF (una nueva clase de antiestrógenos
aromátiicos halogenados) para reducir la concentración de los
compuestos antiestrógenos sin reducir la eficacia en la prevención
o tratamiento de cáncer de mama. Merece indicarse, que aunque el
estado anterior de la técnica enseña que los fármacos
antiestrógenos se han utilizado durante al menos una década para
tratar cáncer de mama, no se ha realizado la combinación de
compuestos antiestrógenos y alquil-PCDFs, sugiriendo
en verdad que esta invención no es obvia.
La presente invención proporciona productos que
contienen un primer compuesto de fórmula:
en la que R_{1}, R_{3}, R_{6} y R_{8} o
R_{2}, R_{4}, R_{6} y R_{8} son individual e
independientemente un hidrógeno o un sustituyente seleccionado de
cloro, flúor, bromo y un grupo alquilo lineal o ramificado de uno a
cuatro carbonos, teniendo dicho compuesto al menos un sustituyente
alquilo y al menos dos sustituyentes halógenos;
y
un segundo compuesto que se selecciona de
antiestrógenos de trifenil-etileno, inhibidores de
aromatasas, hidrazonas antiestrógenas, benzotiofenos
antiestrógenos, y dihidronaftalenos antiestrógenos;
como una preparación combinada para uso
simultáneo o secuencial para inhibir el crecimiento de un tumor
dependiente de estrógenos.
Por tanto, la presente invención implica la
administración y uso de PCDFs en combinación con análogos y
derivados de sustratos antiestrógenos esteroideos y no esteroideos.
Los análogos de sustratos antiestrógenos no esteroideos pueden ser,
pero no se limitan, compuestos de trifenil-etileno,
inhibidores de aromatasas, hidrazonas antiestrógenas, benzotiofenos
antiestrógenos, y dihidronaftalenos. Más específicamente, se puede
seleccionar el segundo compuesto de tamoxifeno, toremifeno,
clomifeno, nafoxidina y hidroxitamoxifeno.
El término inhibición en esta invención indica o
una reducción en la tasa de crecimiento tumoral, tamaño tumoral,
volumen tumoral, o incluso la eliminación total de un tumor. Aún
más, puede ser para retrasar la aparición de un tumor o prevenir
completamente la aparición de un tumor (para tratamiento preventivo
de pacientes con elevado riesgo) o recurrencia (después de un
tratamiento anterior de tumores dependientes de estrógenos).
La presente invención proporciona también:
productos que contiene un primer compuesto
seleccionado de:
6-metil-2,3,8-triclorodibenzofurano,
6-metil-2,3,4,8-tetraclorodibenzofurano,
8-metil-1,3,7-triclorodibenzofurano,
8-metil-1,2,4,7-tetraclorodibenzofurano,
8-metil-2,3,7-triclorodibenzofurano,
y
8-metil-2,3,4,7-tetraclorodibenzofurano,
y un segundo compuesto que se selecciona de
antiestrógenos de trifenil-etileno, inhibidores de
aromatasas, hidrazonas antiestrógenas, benzotiofenos
antiestrógenos, y dihidronaftalenos antiestrógenos;
en forma de una preparación combinada para su uso
simultáneo o secuencial para inhibir el crecimiento de un tumor
dependiente de estrógenos;
una combinación farmacéutica para inhibir el
crecimiento de tumores dependientes de estrógenos que comprende un
primer compuesto de fórmula:
en la que R_{1} a R_{4}, R_{6} y R_{8}
son tal como se definen anteriormente y un segundo compuesto que se
selecciona de antiestrógenos de trifenil-etileno,
inhibidores de aromatasas, hidrazonas antiestrógenas, benzotiofenos
antiestrógenos, y
dihidronaftalenos;
una composición farmacéutica para inhibir el
crecimiento de un tumor dependiente de estrógenos que comprende un
primer compuesto seleccionado de:
6-metil-2,3,8-triclorodibenzofurano,
6-metil-2,3,4,8-tetraclorodibenzofurano,
8-metil-1,3,7-triclorodibenzofurano,
8-metil-1,2,4,7-tetraclorodibenzofurano,
8-metil-2,3,7-triclorodibenzofurano,
y
8-metil-2,3,4,7-tetraclorodibenzofurano,
y un segundo compuesto que se selecciona de
antiestrógenos de trifenil-etileno, inhibidores de
aromatasas, hidrazonas antiestrógenas, benzotiofenos
antiestrógenos, y dihidronaftalenos;
uso de un primer compuesto de fórmula:
en la que R_{1} a R_{4}, R_{6} y R_{8}
son tal como se definen anteriormente, para la fabricación de un
medicamento para usarse en combinación con un segundo compuesto que
se selecciona de antiestrógenos de
trifenil-etileno, inhibidores de aromatasas,
hidrazonas antiestrógenas, benzotiofenos antiestrógenos, y
dihidronaftalenos antiestrógenos, para la inhibición de un tumor
dependiente de
estrógenos;
uso de un segundo compuesto que se selecciona de
antiestrógenos de trifenil-etileno, inhibidores de
aromatasas, hidrazonas antiestrógenas, benzotiofenos
antiestrógenos, y dihidronaftalenos antiestrógenos, para la
fabricación de un medicamento para usarse en combinación con un
primer compuesto de fórmula:
en la que R_{1} a R_{4}, R_{6} y R_{8}
son tal como se definen anteriormente, para la inhibición de un
tumor dependiente de
estrógenos:
uso de un primer compuesto seleccionado de:
6-metil-2,3,8-triclorodibenzofurano,
6-metil-2,3,4,8-tetraclorodibenzofurano,
8-metil-1,3,7-triclorodibenzofurano,
8-metil-1,2,4,7-tetraclorodibenzofurano,
8-metil-2,3,7-triclorodibenzofurano,
y
8-metil-2,3,4,7-tetraclorodibenzofurano,
para la fabricación de un medicamento para usarse
en la inhibición de un tumor dependiente de estrógenos en
combinación con un segundo compuesto que se selecciona de
antiestrógenos de trifenil-etileno, inhibidores de
aromatasas, hidrazonas antiestrógenas, benzotiofenos
antiestrógenos, y dihidronaftalenos antiestrógenos y
uso de un segundo compuesto que se selecciona de
antiestrógenos de trifenil- etileno, inhibidores de aromatasas,
hidrazonas antiestrógenas, benzotiofenos antiestrógenos, y
dihidronaftalenos antiestrógenos, para la fabricación de un
medicamento para usarse en la inhibición de un tumor dependiente de
estrógenos en combinación con un primer compuesto seleccionado
de:
6-metil-2,3,8-triclorodibenzofurano,
6-metil-2,3,4,8-tetraclorodibenzofurano,
8-metil-1,3,7-triclorodibenzofurano,
8-metil-1,2,4,7-tetraclorodibenzofurano,
8-metil-2,3,7-triclorodibenzofurano,
y
8-metil-2,3,4,7-tetraclorodibenzofurano,
Esta invención proporciona mejoras significativas
con respecto a la técnica anterior al proporcionar una formulación
de combinación de un derivado de trifenil-etileno y
un alquil-PCDF sustituido en 1,3,6,8 o en 2,4,6,8,
que actúan juntos, por sinergia o adición, para inhibir el
crecimiento de tumores dependientes de estrógenos. El resultado de
este efecto combinado es que se puede reducir la concentración a la
cual son efectivos los derivados de
trifenil-etileno, reduciendo de esta manera el
potencial de inducción de tumores de endometrio. Aún mas. además de
la reducción de la capacidad endocrina de formación de tumores,
debido a la concentración reducida necesaria de
trifenil-etileno, los compuestos
alquil-PCDF sustituidos en 1,3,6,8 actúan como
inhibidores directos de la formación de tumores de endometrio
inducidos por estrógenos.
Otros y más objetos, características y ventajas
serán aparentes y más fácilmente entendidos al leer la siguiente
descripción y al ver las figuras anejas.
La Figura 1 muestra el volumen tumoral y el
efecto del tratamiento con tamoxifeno, MCDF, o
co-tratamiento.
La Figura 2 muestra el volumen tumoral y el
efecto del tratamiento con tamoxifeno.
La Figura 3 muestra el volumen tumoral y el
efecto del tratamiento con MCDF.
La Figura 4 muestra el volumen tumoral y el
efecto del co-tratamiento con tamoxifeno y MCDF.
Las Figuras 5A, 5B y 5C muestran la actividad de
la peroxidasa uterina con tratamiento con tamoxifeno, MCDF y
co-tratamiento.
Las Figuras 6A y 6B muestran los pesos uterinos
con tratamiento con tamoxifeno, MCDP y
co-tratamiento.
Es fácilmente aparente para el experto en la
técnica que se pueden hacer diferentes realizaciones y
modificaciones de la invención descrita en esta solicitud sin
desviarse del alcance y espíritu de la invención.
Una realización específica de la presente
invención es que proporciona una formulación para la inhibición de
tumores dependientes de estrógenos que comprende un
alquil-PCDF sustituido en 1,3,6,8 o en 2,4,6,8
utilizado en combinación con un segundo compuesto que es un
antiestrógeno.
Se entenderá para el experto en la técnica que la
presente invención implica la administración y uso de PCDFs en
combinación con análogos y derivados de sustratos antiestrógenos
esteroides y no esteroides. Los análogos de sustratos
antiestrógenos no esteroides pueden ser, pero no se limitan a,
compuestos de trifenil-etileno, inhibidores de
aromatasas, hidrazonas antiestrógenas, benzotiofenos
antiestrógenos, y dihidronaftalenos. El grupo de compuestos
antiestrógenos de fenil-etileno comprende, pero no
se limita a, tamoxifeno, análogos y derivados de tamoxifeno, y
toremifeno, análogos y derivados de toremifeno. Esto comprende,
pero no se limita a, todos los compuestos, y sus equivalentes, que
se describen, por ejemplo, en las siguientes patentes de E.E.U.U.,
cada una de las cuales se incorpora aquí como referencia en su
totalidad: patente de E.E.U.U nº 5.807.899, concedida a Bohlmann et
al., 15 de septiembre de 1998, patente de E.E.U.U nº 5.750.576,
concedida a De Gregorio el 12 de mayo de 1998, patente de E.E.U.U
nº 4.656.187, concedida a Black et al. el 7 de abril de 1987;
patente de E.E.U.U nº 5.554.628, concedida a Bryant et al., el 10
de septiembre de 1996; patente de E.E.U.U nº 5.604.248, concedida a
Bryant et al. el 18 de febrero de 1997; y patente de E.E.U.U nº
5.691.355, concedidad a Bryant et al. el 25 de noviembre de 1997. El
grupo de compuestos de hidrazonas antiestrógenas comprende, pero no
se limita a, azido-, 4-nitro-,
2,4-dinitrofenil-hidrazonas y todos
los compuestos y sus equivalentes, que se describen, por ejemplo,
en la patente de E.E.U.U nº 4.732.904 concedida a Morgan el 22 de
marzo de 1988. El grupo de benzotiofenos antiestrógenos comprende,
pero no se limita a, raloxifeno, análogos y derivados de raloxifeno
y todos los compuestos, y sus equivalentes, que se describen, por
ejemplo, en la patente de E.E.U.U nº 4.418.068, concedida a Jones
el 29 de noviembre de 1983. El grupo de inhibidores de aromatasas
comprende, pero no se limita a,
4-hidroxiandrostenodiona, (4-OHA),
letrozol, anastrozol y todos los compuestos, y sus equivalentes,
que se describen, por ejemplo, en la patente de E.E.U.U nº
4.745.109, concedida a Bednarski et al. el 17 de mayo de 1988. El
grupo de compuestos de dihidronaftaleno comprende, pero no se
limita a, mesilato de trioxifeno y todos los compuestos, y sus
equivalentes, que se describen, por ejemplo, en la patente de
E.E.U.U nº 4.230.862, concedida a Suarez y Jones el 28 de octubre de
1980.
Otra realización de la presente invención es el
uso de un alquil-PCDF sustituido en 1,3,6,8 o en
2,4,6,8. Los posibles sustituyentes comprenden halógenos, tales
como bromo, cloro, flúor y/o sustituyentes lineales o ramificados,
tales como grupos alquilo de aproximadamente uno a aproximadamente
cinco carbonos. También las posiciones 2,4,6 u 8 y 1,3,6 u 8 pueden
ser ocupadas individual e independientemente por un hidrógeno en
vez de un sustituyente. Los sustituyentes alquilo apropiados
comprenden, pero no se limitan a, grupos metilo, etilo, propilo,
isopropilo (i-propilo), n-butilo,
sec-butilo, o terc-butilo.
Los PCDFs utilizados en la presente invención se
describen, por ejemplo, en la patente de E.E.U.U. nº 5.516.790,
concedida a Stephen Safe el 14 de mayo de 1996. Los PCDFs pueden
comprender, pero no se limitan a, los que tienen la fórmula:
en la que R_{1}, R_{3}, R_{6} y R_{8} o
R_{2}, R_{4}, R_{6} y R_{8} son individual e
independientemente un hidrógeno o un sustituyente seleccionado del
grupo que consiste en cloro, flúor y bromo, y un grupo alquilo
lineal o ramificado de uno a cuatro carbonos, y en la que el
compuesto tiene al menos un sustituyente alquilo y al menos dos
sustituyentes halógenos; más aún, el halógeno puede ser cloro, el
sustituyente alquilo se puede seleccionar de un grupo que consiste
en metilo, etilo y propilo; R_{6} puede ser un sustituyente
alquilo y R_{1}, R_{3}, y R_{8} se pueden seleccionar del
grupo que consiste en cloro, flúor y bromo; aún más R_{8} puede
ser un sustituyente alquilo y R_{1}, R_{3} y R_{6} se pueden
seleccionar del grupo que consiste en cloro, flúor y bromo, el
sustituyente alquilo puede ser metilo; aún más R_{6} puede ser un
alquilo y R_{2}, R_{4} y R_{8} se pueden seleccionar del grupo
que consiste en cloro, flúor y bromo; y, por ejemplo, R_{8} puede
ser un sustituyente alquilo y R_{2}, R_{4} y R_{6} se pueden
seleccionar del grupo que consiste en cloro, flúor y bromo.
Ejemplos de PCDFs pueden comprender, pero no se limitan
a,
6-metil-1,3,8-triclorodibenzofurano,
8-metil-1,3,6-triclorodibenzofurano,
6-i-propil-1,3,8-triclorodibenzofurano,
6-etil-1,3,8-triclorodibenzofurano,
6-propil-1,3,8-triclorodibenzofurano,
y
6-metil-2,3,8-triclorodibenzofurano,
6-metil-2,3,4,8-tetraclorodibenzofurano,
8-metil-1,3,7-triclorodibenzofurano,
8-metil-1,2,4,7-tetraclorodibenzofurano,
8-metil-2,3,7-triclorodibenzofurano,
y
8-metil-2,3,4,7-tetraclorodibenzofurano,
En una realización, los PCDFs que poseen dos
sustituyentes laterales (los sustituyentes "laterales" pueden
estar en las posiciones 2,3,7 u 8 del dibenzofurano) se utilizan en
combinación con un segundo compuesto antiestrógeno. En una
realización preferida, se utiliza 6-MCDF como un
PCDF representativo en combinación con tamoxifeno. En otra
realización preferida, se utiliza
6-i-propil-1,3,8-triCDF en
combinación con tamoxifeno. Se combinan el PCDF y los segundos
compuestos antiestrógenos con una relación en peso esencialmente de
50:1 a 1:50, preferiblemente 25:1 a 1:25, y más preferiblemente 10:1
a 1:10. Las relaciones más preferidas para
alquil-PCDF: antiestrógeno son 1:1 a 1:4 a 4:1
(PCDF: antiestrógeno).
De esta manera, la invención permite a un
paciente con un tumor dependiente de estrógenos ser tratado mediante
la administración al paciente de una cantidad terapéuticamente
efectiva de un PCDF en combinación con un segundo compuesto
antiestrógeno (véase anteriormente). El PCDF y el compuesto
antiestrógeno se administran simultáneamente o secuencialmente. La
administración simultánea de los compuestos es el método preferido
de suministro. Sin embargo, en el caso de un suministro secuencial,
se prefiere que el primer compuesto administrado sea todavía
bioactivo en el momento que se administra el segundo compuesto. En
una realización, el PCDF y los compuestos antiestrógenos se
suministran oralmente. Se pueden administrar también, por ejemplo,
por vía intraperitoneal.
Estos métodos aquí descritos no son de ninguna
manera exhaustivos, y otros métodos apropiados para la aplicación
específica serán aparentes para el experto. Además, se puede
aproximar más la cantidad efectiva de las composiciones por
analogía con compuestos conocidos que ejercen el efecto
deseado.
Los siguientes ejemplos se describen como
ejemplos, y no intentan limitar de ninguna manera el alcance de la
invención.
Se obtuvieron ratas Sprague Dawley hembras y
vírgenes de Harlan (Houston) y se permitió que se aclimataran
durante 10 días, dejándoles el acceso a comida y agua ad
libitum, y se mantuvieron en un régimen de 12 h luz/oscuridad.
Se indujeron tumores de mama en ratas de 50 \pm 3 días mediante
la administración de una sola dosis mediante sonda de 20 mg de DMBA
en 0,5 ml de aceite de maíz. Después de 30 a 75 días, se podían
detectar los tumores mediante el tacto en los conductos de las
glándulas mamarias. Frecuentemente se desarrollaban múltiples
tumores en una sola rata. Cuando el tumor o el mayor de los tumores
llegaba a un pequeño tamaño (50-100 mm^{3}), se
trataban las ratas diariamente mediante sonda solamente con aceite
de maíz (excipiente control), un PCDF, y un segundo compuesto
antiestrógeno, o un co-tratamiento de PCDF y un
segundo compuesto antiestrógeno durante 20 días, y seguidamente se
sacrificaban el día 21. Se medían los tamaños de los tumores con
calibradores, y se calculaban los volúmenes mediante fórmula
(longitud x anchura x profundidad)/6\Pi y se expresaban
como porcentaje del control.
Las dosis del PCDF y del segundo compuesto
antiestrógeno son de manera adecuada lo suficientemente grandes para
conseguir, en combinación, la deseada inhibición de crecimiento del
cáncer. En general, se administra cada uno de los compuestos en una
dosis de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 20 mg/kg/día.
Los compuestos de PCDF administrado son, pero no
se limitan a,
6-metil-1,3,8-triclorodibenzofurano,
8-metil-1,3,6-triclorodibenzofurano,
6-etil-1,3,8-triclorodibenzofurano,
6-propil-1,3,8-triclorodibenzofurano,
y
6-metil-2,3,8-triclorodibenzofurano,
6-metil-2,3,4,8-tetraclorodibenzofurano,
8-metil-1,3,7-triclorodibenzofurano,
8-metil-1,2,4,7-tetraclorodibenzofurano,
8-metil-2,3,7-triclorodibenzofurano,
y
8-metil-2,3,4,7-tetraclorodibenzofurano,
Los segundos compuestos administrados son, pero
no se limitan a, esos, compuestos de
trifenil-etileno (p. ej., tamoxifeno, toremifeno,
clomifeno, nafoxidina), compuestos de hidrazona (p. ej. azido,
4-nitro y
2,4-dinitrofenil-hidrazonas),
benzotiofenos (p. ej. raloxifeno), inhibidores de aromatasas (p.
ej. 4-hidroxiandrostenediona, letrozol, y
anastrozol) y dihidronaftalenos (p. ej. mesilato de
trioxifeno).
Se obtuvieron ratas Sprague Dawley hembras y
vírgenes de Harlan (Houston) y se permitió que se aclimataran
durante 10 días, dejándoles el acceso a comida y agua ad
libitum, y se mantuvieron en un régimen de 12 h luz/oscuridad.
Se indujeron tumores de mama en ratas de 50 \pm 3 días mediante
la administración de una sola dosis mediante sonda de 20 mg de DMBA
en 0,5 ml de aceite de maíz. Después de 30 a 75 días, se podían
detectar los tumores mediante el tacto en los conductos de las
glándulas mamarias. Frecuentemente se desarrollaban múltiples
tumores en una sola rata. Cuando el tumor o el mayor de los tumores
llegaba a un pequeño tamaño (50-100 mm^{3}), se
trataban las ratas diariamente mediante sonda solamente con aceite
de maíz (control del excipiente), 0,4 mg/kg de
6-MCDF, 0,4 mg/kg de tamoxifeno, o un
co-tratamiento de 0,4 mg/kg de
6-MCDF más 0,4 mg/kg de tamoxifeno durante 20 días,
y seguidamente se sacrificaban el día 21. Se medían los tamaños de
los tumores con calibradores, y se calculaban los volúmenes
mediante fórmula (longitud x anchura x profundidad)/6\Pi y
se expresaban como porcentaje del control. Una semana después de la
última inyección, se sacrificaban las ratas mediante asfixia. Se
extraían todos los tumores, se pesaban, y se seccionaban. Se
congelaba una parte en nitrógeno líquido para análisis por PCR, una
parte se colocaba en formalina al 10% para análisis
histopatológico; y la mayor parte se homogeneizaba inmediatamente
para la preparación de fracciones microsomales y citosólicas. Se
perfundían los hígados y se pesaban, y se preparaban citosol y
microsomas, tal como se ha descrito previamente.
Los resultados de este estudio se resumen en la
Tabla 1. A dosis de 0,4 mg/kg/día, tamoxifeno y
6-MCDF por separado inhibían de forma significativa
el volumen tumoral (58,5 y 66,4% de inhibición,
respectivamente).
| % de inhibición | ||
| \underline{tratamiento} | \underline{volumen tumoral} | \underline{peso tumoral} |
| tamoxifeno | 58,5* | disminución no significativa |
| 6-MCDF | 66,4* | disminución no significativa |
| tamoxifeno/6-MCDF | 86,2* | 78,0* |
| * P < 0,05 en comparación con el control sin tratar utilizando ANOVA y el test estadístico de Duncan para | ||
| significancia. |
Los dos fármacos en solitario disminuían también
el peso tumoral; sin embargo, esta respuesta inhibitoria no era
significativa. Por el contrario, había una inhibición significativa
de 86,2 y 78,0% del volumen tumoral y del peso tumoral de mama en
animales cotratados con tamoxifeno más 6-MCDF. Los
resultados indicados en la Tabla 1 muestran claramente que se
bloquea de forma esencial el crecimiento tumoral en los animales
co-tratados con los dos fármacos. Más aún, el
tratamiento con los compuestos solos o en combinación no afectaba a
los pesos corporales o de los órganos o no causaba cambios
aparentes histopatológicos en estos tejidos. La inducción de la
actividad de EROD dependiente de CYPYA1 por compuestos aromáticos
halogenados tóxicos, tal como TCDD, es uno de los indicadores más
sensibles de exposición a estos compuestos y existe una excelente
correlación entre los compuestos tóxicos y las potencias de
inducción de EROD. Los PCDFs sustituidos de forma alterna se
caracterizan por su baja toxicidad y su baja potencia como
inductores de la actividad hepática EROD. Los resultado resumidos
en la Tabla 1 muestran que tamoxifeno, 6-MCDF y
tamoxifeno más 6-MCDF no inducían actividad hepática
de EROD y esto está de acuerdo con la baja toxicidad de
6-MCDF. Estos resultados demuestran claramente que
6-MCDF favorece la actividad antitumoral de
tamoxifeno en modelos de tumor de mama de rata inducido con DMBA,
indicando que el tratamiento combinado de tamoxifeno más
alquil-PCDFs es una nueva terapia endocrina y más
eficaz para el tratamiento de cáncer de mama.
El Ejemplo 3, resumido en la Tabla 2 y Figura 1,
muestra los efectos de 6-MCDF y tamoxifeno, solos o
en combinación en el modelo de tumores de mama inducidos con
DMBA.
Métodos: Se les administró a ratas Sprague Dawley
hembras y vírgenes de edad exacta en la tarde del día 55 20 mg/rat
de 7,12-dimetilbenzo[a]antraceno en un
volumen de 0,5 ml/rata de aceite de maíz (las ratas pesan
aprooximadamente 165 g, dando como resultado 120 mg/kg de DMBA y 3
ml/kg de aceite de maíz). Se trataban las ratas diariamente
mediante sonda solamente con aceite de maíz (excipiente), 0,4 mg/kg
de 6-MCDF, 0,4 mg/kg de tamoxifeno, o un
co-tratamiento de 0,4 mg/kg de
6-MCDF más 0,4 mg/kg de tamoxifeno durante 20 días,
y seguidamente se sacrificaban el día 21.
(Tabla pasa a la página
siguiente)
La Figura 1 muestra el volumen tumoral y el
efecto del tratamiento sobre tumores de mama de 0,4 mg/kg/día de
tamoxifeno, MCDF, o co-tratamiento.
\newpage
El Ejemplo 4, resumido en las Tablas 3, 4 y
Figuras 2, 3 y 4, muestra los efectos de bajas dosis de
6-MCDF y tamoxifeno, solos o en combinación en el
modelo de tumores de mama inducidos con DMBA.
Métodos: Se les administró a ratas Sprague Dawley
hembras y vírgenes de edad exacta en la tarde del día 55 20 mg/rat
de 7,12-dimetilbenzo[a]antaceno en un
volumen de 0,5 ml/rata de aceite de maíz (las ratas pesan
aproximadamente 165 g, dando como resultado 120 mg/kg de DMBA y 3
ml/kg de aceite de maíz). Se trataban las ratas diariamente
mediante sonda solamente con aceite de maíz (excipiente), 0,1, 0,05
y 0,025 mg/kg de 6-MCDF, 0,1, 0,05, 0,025 mg/kg de
tamoxifeno, o un co-tratamiento de 0,1, 0,05 y
0,025 mg/kg de 6-MCDF más 0,1, 0,05 y 0,025 mg/kg
de tamoxifeno durante 20 días, y seguidamente se sacrificaban el día
21.
Las Figuras 2, 3 y 4 muestran el volumen tumoral
y el efecto del tratamiento sobre tumores de mama de 0,1, 0,05 y
0,025 mg/kg/día de tamoxifeno, MCDF, o
co-tratamiento.
(Tabla pasa a la página
siguiente)
El tamoxifeno solo en una dosis de 0,1 mg/kg/día
hacía disminuir de forma significativa el crecimiento tumoral (peso
y volumen), mientras que en dosis menores (0,05 y 0,025 mg/kg/día)
era inactivo. Por el contrario, 6-MCDF era
antitumoral en dosis de 0,1 y 0,05 mg/kg/día, pero inactivo en la
menor dosis ensayada (0,025 mg/kg/día). En estudios de combinación,
se utilizaron dosis equivalentes en peso de tamoxifeno más
6-MCDF para determinar los efectos interactivos
como agentes antitumorales. Los resultados ilustrados en la Tabla 3
y en la Figura 4 mostraban que todas las combinaciones inhibían de
manera significativa el crecimiento de tumores de mama. Y lo más
importante, la combinación en baja dosis de antitumorales
(tamoxifeno más 6-MCDF en 0,025 mg/kg/día de cada
compuesto) utilizaba dosis de los compuestos que son inactivas
individualmente. Los análisis estadísticos de estos datos mostraban
que esta interacción de tamoxifeno (0,025 mg/kg/día) más
6-MCDF (0,025 mg/kg/día) inhibía de forma sinérgica
el crecimiento de los tumores de mama en el modelo de tumores de
rata inducidos con DMBA. Estos resultados demuestran claramente que
6-MCDF favorece la actividad antitumoral de
tamoxifeno en el modelo de tumores de rata inducidos con DMBA,
indicando que el tratamiento combinado con bajas dosis de
tamoxifeno más bajas dosis de 6-MCDF es una terapia
endocrina nueva y más eficaz para el tratamiento del cáncer de mama.
Además estos datos muestran que los dos compuestos bloquean de
forma sinérgica el crecimiento tumoral en el modelo de roedores en
dosis extremadamente bajas. Con la reducción del tamoxifeno a estos
bajos niveles sin reducir la eficacia, dicha invención mantiene los
efectos beneficiosos de tamoxifeno y minimiza los efectos tumorales
de tamoxifeno en el útero.
El Ejemplo 5 muestra los efectos bondadosos de
dosis diarias de tamoxifeno y 6-MCDF en ratas sin
ovarios (ovariectomizadas). Se utiliza la rata ovariectomizadas
como un modelo para la osteroporosis. Los actuales estudios miden
la histomorfometría ósea (Evans et al. (1996) o densidad mineral del
hueso con absorciometría de rayos X (Ezawa (1995)), así como la
longitud del hueso, peso húmedo y peso seco (Takahashi et al.
(1996)). En 1987 se informó que el tamoxifeno actuaba como un
agonista de los estrógenos en el tejido óseo de ratas
ovariectomizadas (Turner et al. (1987)), aunque que el tamoxifeno no
tiene ningún efecto en ratas con el ciclo menstrual (Takahashi et
al. (1996)). Se analizaron los fémures de las ratas tratadas con
tamoxifeno, MCDF, o tamoxifeno + MCDF para determinar la capacidad
antiestrógenos de MCDF específica del tejido.
Métodos: Se ovariectomizaron las ratas a los 97
días de edad. Después de aproximadamente 3 semanas, se alimentaron
las ratas oralmente con aceite de maíz (excipiente), 0,4 mg/kg/día
de tamoxifeno, 0,8 mg/kg/día de 6-MCDF, o
co-tratamiento de 0,4 mg/kg de tamoxifeno más 0,8
mg/kg de 6-MCDF diariamente. Se sacrificaron las
ratas el día 21. Posteriormente se extrajeron los úteros y se
procesaron, los dos fémures, derecho e izquierdo, se extrajeron y se
midió su longitud con calibres. A causa de que no había un
protocolo barato en la bibliografía para soltar todos los músculos
de los huesos, se utilizó un lavado de 4 horas con PBS, pH 2, y se
ablandó el tejido conjuntivo sin afectar visiblemente al hueso. Se
midió el peso húmedo después de que se eliminó el tejido conjuntivo
residual. Se midió el peso seco después de que se secaran los
huesos durante 12 horas a 130ºC.
El Ejemplo 6 muestra los efectos en el útero de
dosis diarias de tamoxifeno y 6-MCDF en ratas
ovariectomizadas.
Métodos: Se ovariectomizaron las ratas a los 97
días de edad y se empezó eltratamiento a los 117 días de edad. Se
alimentaron las ratas oralmente durante 20 días con aceite de maíz
(excipiente), 0,4 mg/kg/día de tamoxifeno, 0,4 mg/kg/día de
6-MCDF, o co-tratamiento de 0,4
mg/kg de tamoxifeno más 0,4 mg/kg de 6-MCDF, con 5
ratas en cada grupo de tratamiento. Se sacrificaron las ratas el
día 21. El 6-MCDF causaba un ligero aumento, pero
significativo, en el peso húmedo del bazo.
(Tabla pasa a la página
siguiente)
El Ejemplo 7 muestra el efecto en el peso
corporal y en el de los órganos del tratamiento con tamoxifeno,
MCDF, y co-tratamiento.
Métodos: El procedimiento de preparar las
soluciones de dosificación es como sigue: el MCDF necesita un suave
calentamiento para disolverse, y el tamoxifeno necesita ser disuelto
en etanol (5% del volumen final) que se adiciona seguidamente al
aceite de maíz. Se separa por evaporación el etanol con una suave
corriente de aire. Primero, el aceite de maíz para la dosis de
tamoxifeno se calienta en un baño María hirviendo, y se deja que se
enfríe. Posteriormente, se pesó el MCDF para MCDF solamente y para
TAM + MCDF y se disolvió en cantidades apropiadas de aceite de maíz
con calentamiento. Para el excipiente de control y para el
excipiente de MCDF se añadió etanol (5% en volumen) y seguidamente
se dejó evaporar. El tamoxifeno para el tratamiento con tamoxifeno
y para TAM + MCDF se disolvió en etanol. Seguidamente se añadió una
parte alícuota al excipiente de aceite de maíz apropiado (el aceite
de maíz precalentado para tamoxifeno, y el aceite de maíz
conteniendo MCDF para TAM + MCDF), y se evaporó el etanol.
El Ejemplo 8 (Tablas 8 y 9 y Figuras 5 y 6)
muestra efectos en el útero de dosis diarias de tamoxifeno y
6-MCDF en ratas ovariectomizadas.
Para la Tabla 8 y la Figura 5, se
ovariectomizaron las ratas en el día 97 de edad. Después de
aproximadamente 3 semanas, se dosificaron oralmente durante 20 días
con aceite de maíz (excipiente), 0,4 mg/kg/día de tamoxifeno, 0,8
mg/kg/día de 6-MCDF, o un
co-tratamiento de 0,4 mg/kg de tamoxifeno más 0,8
mg/kg de 6-MCDF diariamente. Se sacrificaron las
ratas el día 21.
Las Figuras 5A, 5B y 5C muestran la actividad de
la peroxidasa uterina (extractos nucleares) con tratamiento con
tamoxifeno, MCDF y co-tratamiento.
Para la Tabla 9 y las Figuras 6A y 6B, se
alimentaron ratas Sprague-Dawley hembras y vírgenes
de edad exacta en el día 55 por la tarde con 20 mg/rata de
7,12-dimetilbenzo{a]antaceno en un volumen de
0,5 ml/rata de aceite de maíz (las ratas pesan aproximadamente 165
g, dando como resultado 120 mg/kg de DMBA y 3 ml/kg de aceite de
maíz). Se trataron las ratas diariamente mediante sonda con aceite
de maíz (excipiente), 0,4 mg/kg/día de 6-MCDF, 0,4
mg/kg/día de tamoxifeno, o un co-tratamiento de 0,4
mg/kg de 6-MCDF más 0,4 mg/kg de tamoxifeno durante
20 días y seguidamente se sacrificaron las ratas el día 21.
Las Figuras 6A y 6B muestran los pesos de los
úteros con tratamiento con tamoxifeno, MCDF y
co-tratamiento.
1. B. Astroff et al.,
6-Methyl-1,3,8-trichlorodibenzofuran
as a 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin
antagonist inhibition of the induction of rat cytochrome
P-450 isozymes and related monoxygenase activities,
Mol. Pharmacol. 33 (1988) 231-236;
2. B. Astroff et al., Comparative
antiestrogenic activities of
2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin and
6-methyl-1,3,8-trichlorodibenzofuran
in the female rat, Itoxicol. Appl. Pharmacol. 95
(1988) 435-443;
3. B. Astroff et al.,
6-Substituted-1,3,8-trichlorodibenzofurans
as 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin
antagonists in the rat: structure-activity
relationships, Toxicology, 59 (1989)
285-296;
4. B. Astroff et al.,
6-Alkyl-1,3,8-trichlorodibenzofurans
as antiestrogens in female Sprague-Dawley rats,
Toxicology, 69 (1991) 187-197;
5. R. Bannister et al.,
6-Methyl-1,3,8-trichlorodibenzofuran
(MCDF) as a
2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin
antagonist in C57BL/6 mice, Toxicology, 54 (1989)
139-150;
6. R. Dickerson et al., Alkyl
polychlorinated dibenzofurans and related compounds as
antiestrogens en the female rat uterus;
structure-activity studies, Toxicol. Appl.
Pharmacol. 135 (1995) 287-298;
7. G. L. Evans et al., Raloxifene inhibits
bone turnover and prevents further cancellous bone loss in adult
ovariectomized rats with established osteopenia, Endo.
(1996) 137: 4139-4144;
8. I. Ezawa et al., The effect of
ovariectomy on bone metabolism in rats, Bone 17:
1638-1678;
9. Fisher et al., J. Natl. Cancer
Inst. (1994), 86: 527-537;
10. Fornander et al., Lancet
(1989); (1): 117-120;
11. M. Harris et al., Partial antagonism
of
2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin-mediated
induction of aryl hydrocarbon hydroxylase by
6-methyl-1,3,8-trichlorodibenzofuran;
mechanistic studies, Mol. Pharmacol. 35 (1989)
729-735;
12. A. McDougal et al., Inhibition of
7,12-dimethylbenz[a]anthracene-induced
rat mammary tumor growth by aryl hydrocarbon receptor agonista,
Cancer Letters (1997) 120: 53-63;
13. Mouridsen et al., Acta Oncol.
(1998); (27): 699-705;
14. Ribeiroet al., J. Natl. Cancer
Inst. Monogr. (1992); (11): 121-125;
15. Rutqvist et al., J. Natl. Cancer
Inst. (1995); (87): 645-651;
16. Ryden et al., Controlled Clin.
Trials (1986); (7): 290-305;
17. Stewart et al., Lancet
(1989); (1): 375-376;
18. Stewart, J. Natl. Cancer Inst.
Monogr. (1992); (11): 117-120;
19. Takahashi et al., The effect of
tamoxifen on bone metabolism and skeletal growth is different
inovariectomized and intact rats, Calcif Tissue Int. 59:
271-276;
20. R. T. Turner et al., Tamoxifen
prevents the skeletal effects of ovarian hormone deficiency in
rats, J. Bone and Min. Res. 2: 449-456;
21. C. Yao et al.,
2,3,7,8-Tetrachlorodibenzo-p-dioxin-induced
porphyria in genetically inbred mice; partial antagonism and
mechanistic studies, Toxicol. Appl. Pharmacol. 100
(1989) 208-216.
Claims (29)
1. Productos que contienen un primer compuesto de
fórmula:
en la que R_{1}, R_{3}, R_{6} y R_{8} o
R_{2}, R_{4}, R_{6} y R_{8} son individual e
independientemente un hidrógeno o un sustituyente seleccionado de
cloro, flúor, bromo y un grupo alquilo lineal o ramificado de uno a
cuatro carbonos, teniendo dicho compuesto al menos un sustituyente
alquilo y al menos dos sustituyentes halógenos;
y
un segundo compuesto que se selecciona de
antiestrógenos de trifenil-etileno, inhibidores de
aromatasas, hidrazonas antiestrógenas, benzotiofenos
antiestrógenos, y dihidronaftalenos antiestrógenos;
como un preparación combinada para uso simultáneo
o secuencial para inhibir el crecimiento de un tumor dependiente de
estrógenos.
2. Productos según la reivindicación 1, en el que
el segundo compuesto se selecciona de tamoxifeno, toremifeno,
clomifeno, nafoxidina e hidroxitamoxifeno.
3. Productos según la reivindicación 1 ó 2, en el
que el halógeno del primer compuesto es cloro.
4. Productos según la reivindicación 1 ó 2, en el
que dichos sustituyentes halógenos del primer compuesto se
seleccionan de cloro, bromo y flúor.
5. Productos según una cualquiera de las
anteriores reivindicaciones, en los que dichos sustituyentes alquilo
del primer compuesto se seleccionan de metilo, etilo y propilo.
6. Productos según la reivindicación 1 ó 2, en
los que el primer compuesto es
6-metil-1,3,8-triclorodibenzofurano,
8-metil-1,3,6-triclorodibenzofurano
o
6-i-propil-1,3,8-triclorodibenzofurano.
7. Productos según la reivindicación 1 ó 2, en
los que el primer compuesto se selecciona de:
6-etil-1,3,8-triclorodibenzofurano,
6-propil-1,3,8-triclorodibenzofurano.
8. Productos que contiene un primer compuesto
seleccionado de:
6-metil-2,3,8-triclorodibenzofurano,
6-metil-2,3,4,8-tetraclorodibenzofurano,
8-metil-1,3,7-triclorodibenzofurano,
8-metil-1,2,4,7-tetraclorodibenzofurano,
8-metil-2,3,7-triclorodibenzofurano,
y
8-metil-2,3,4,7-tetraclorodibenzofurano,
y un segundo compuesto que se selecciona de
antiestrógenos de trifenil-etileno, inhibidores de
aromatasas, hidrazonas antiestrógenas, benzotiofenos
antiestrógenos, y dihidronaftalenos antiestrógenos;
en forma de una preparación combinada para su uso
simultáneo o secuencial para inhibir el crecimiento de un tumor
dependiente de estrógenos;
\newpage
9. Una combinación farmacéutica para inhibir el
crecimiento de tumores dependientes de estrógenos que comprenden un
primer compuesto de fórmula:
en la que R_{1}, R_{3}, R_{6} y R_{8} o
R_{2}, R_{4}, R_{6} y R_{8} son individual e
independientemente un hidrógeno o un sustituyente seleccionado de
cloro, flúor, bromo y un grupo alquilo lineal o ramificado de uno a
cuatro carbonos, teniendo dicho primer compuesto al menos un
sustituyente alquilo y al menos dos sustituyentes halógenos;
y
un segundo compuesto que se selecciona de
antiestrógenos de trifenil-etileno, inhibidores de
aromatasas, hidrazonas antiestrógenas, benzotiofenos
antiestrógenos, y dihidronaftalenos.
10. La combinación farmacéutica de la
reivindicación 9, en la que el segundo compuesto se selecciona de
tamoxifeno, toremifeno, clomifeno, nafoxidina e
hidroxitamoxifeno.
11. La combinación farmacéutica de la
reivindicación 9 ó 10, en la que el halógeno del primer compuesto
es cloro.
12. La combinación farmacéutica de la
reivindicación 9 ó 10, en la que dichos sustituyentes halógenos del
primer compuesto se seleccionan de cloro, bromo y flúor.
13. La combinación farmacéutica de una cualquiera
de las reivindicaciones 9 a 12, en la que dichos sustituyentes
alquilo del primer compuesto se seleccionan de metilo, etilo y
propilo.
14. La combinación farmacéutica de la
reivindicación 9 ó 10, en la que el primer compuesto es
6-metil-1,3,8-triclorodibenzofurano,
8-metil-1,3,6-triclorodibenzofurano
o
6-i-propil-1,3,8-triclorodibenzofurano.
15. La combinación farmacéutica de la
reivindicación 9 ó 10, en la que el primer compuesto se selecciona
de:
6-etil-1,3,8-triclorodibenzofurano,
6-propil-1,3,8-triclorodibenzofurano.
16. Una composición farmacéutica para inhibir el
crecimiento de un tumor dependiente de estrógenos que comprende un
primer compuesto seleccionado de:
6-metil-2,3,8-triclorodibenzofurano,
6-metil-2,3,4,8-tetraclorodibenzofurano,
8-metil-1,3,7-triclorodibenzofurano,
8-metil-1,2,4,7-tetraclorodibenzofurano,
8-metil-2,3,7-triclorodibenzofurano,
y
8-metil-2,3,4,7-tetraclorodibenzofurano,
y un segundo componente que se selecciona de
antiestrógenos de trifenil-etileno, inhibidores de
aromatasas, hidrazonas antiestrógenas, benzotiofenos
antiestrógenos, y dihidronaftalenos.
17. La combinación farmacéutica de una cualquiera
de las reivindicaciones 9 a 16, en la que la cantidad del primer
compuesto es de 1 a 50 partes en peso y la del segundo compuesto es
de 1 a 50 partes en peso.
18. La combinación farmacéutica de la
reivindicación 17, en la que la cantidad del primer compuesto es de
1 a 10 partes en peso y la del segundo compuesto es de 1 a 10
partes en peso.
19. La combinación farmacéutica de la
reivindicación 17, en la que la cantidad del primer compuesto es de
1 a 4 partes en peso y la del segundo compuesto es de 1 a 4 partes
en peso.
20. Uso de un primer compuesto tal como se define
en la reivindicación 1, para la fabricación de un medicamento para
usarse en combinación con un segundo compuesto tal como se define
en la reivindicación 1, para la inhibición de un tumor dependiente
de estrógenos.
21. Uso de un segundo compuesto tal como se
define en la reivindicación 1, para la fabricación de un
medicamento para usarse en combinación con un primer compuesto tal
como se define en la reivindicación 1, para la inhibición de un
tumor dependiente de estrógenos.
22. Uso según la reivindicación 20 o la 21, en el
que el segundo compuesto se selecciona de tamoxifeno, toremifeno,
clomifeno, nafoxidina e hidroxitamoxifeno.
23. Uso según una cualquiera de las
reivindicaciones 20 a 22, en el que el halógeno del primer
compuesto es cloro.
24. Uso según una cualquiera de las
reivindicaciones 20 a 22, en el que dichos sustituyentes halógenos
del primer compuesto se seleccionan de cloro, bromo y flúor.
25. Uso según una cualquiera de las
reivindicaciones 20 a 24, en el que dichos sustituyentes alquilo del
primer compuesto se seleccionan de metilo, etilo y propilo.
26. Uso según una cualquiera de las
reivindicaciones 20 a 22, en el que el primer compuesto es
6-metil-1,3,8-triclorodibenzofurano,
8-metil-1,3,6-triclorodibenzofurano
o
6-i-propil-1,3,8-triclorodibenzofurano.
27. Uso según una cualquiera de las
reivindicaciones 20 a 24, en el que el primer compuesto se
selecciona de:
6-etil-1,3,8-triclorodibenzofurano,
6-propil-1,3,8-triclorodibenzofurano.
28. Uso de un primer compuesto seleccionado
de:
6-metil-2,3,8-triclorodibenzofurano,
6-metil-2,3,4,8-tetraclorodibenzofurano,
8-metil-1,3,7-triclorodibenzofurano,
8-metil-1,2,4,7-tetraclorodibenzofurano,
8-metil-2,3,7-triclorodibenzofurano,
y
8-metil-2,3,4,7-tetraclorodibenzofurano,
para la fabricación de un medicamento para su uso
para la inhibición de un tumor dependiente de estrógenos en
combinación con un segundo compuesto tal como se define en la
reivindicación 1.
29. Uso de un segundo compuesto tal como se
define en la reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento
para usarse para la inhibición de un tumor dependiente de
estrógenos en combinación con un primer compuesto seleccionado de
:
6-metil-2,3,8-triclorodibenzofurano,
6-metil-2,3,4,8-tetraclorodibenzofurano,
8-metil-1,3,7-triclorodibenzofurano,
8-metil-1,2,4,7-tetraclorodibenzofurano,
8-metil-2,3,7-triclorodibenzofurano,
y
8-metil-2,3,4,7-tetraclorodibenzofurano.
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