ES2219060T3 - Utilizacion de diltiazem para el tratamiento de patologias de la retina. - Google Patents

Utilizacion de diltiazem para el tratamiento de patologias de la retina.

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ES2219060T3 ES99946279T ES99946279T ES2219060T3 ES 2219060 T3 ES2219060 T3 ES 2219060T3 ES 99946279 T ES99946279 T ES 99946279T ES 99946279 T ES99946279 T ES 99946279T ES 2219060 T3 ES2219060 T3 ES 2219060T3
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Abstract

Utilización de diltiazem (D-cis-enantiómero), del L- cis-enantiómero, y de sus sales farmacéuticamente aceptables, para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento de las patologías asociadas a la degeneración de los fotorreceptores de la retina.

Description

Utilización de diltiazem para el tratamiento de patalogías de la retina.
La presente invención tiene por objeto la utilización de un compuesto que bloquea los canales cálcicos y/o canales activados por la guanosina monofosfato cíclica 3'5' (cGMP) en el marco del tratamiento de las patologías de la retina debidas a la degeneración de los fotorreceptores, en el hombre y en el animal, tales como la retinitis pigmentosa u otras patologías que afectan de forma parecida los fotorreceptores, en particular la degeneración macular unida a la edad.
La retinitis pigmentosa designa un conjunto de esas enfermedades degenerativas de los fotorreceptores (Berson, 1996) que llevan a la ceguera.
Se han puesto en evidencia numerosas mutaciones que afectan diferentes proteínas de los bastoncillos y que son susceptibles de estar en el origen de esta enfermedad. Entre estas mutaciones, se pueden citar las que afectan a los genes de las proteínas implicadas en la cascada de la fototransducción, tales como la rodopsina, la transducina, la fosfodiesterasa, la arrestina, o proteínas estructurales, como la periferina.
Se lleva estudiando el ratón rd (retinal degeneration) desde hace más de 70 años como modelo de la retinitis pigmentosa (Farber y Coll., 1994) puesto que el proceso de degeneración retiniana es similar al observado en la retina pigmentosa, produciéndose tras la muerte de los bastoncillos de la retina, y de manera inexplicable la pérdida de los conos de dicha retina. Además, la mutación causante ha sido localizada en el gen codificante para la subunidad \beta de la cGMP-fosfodiesterasa (PDE) (Bowes y Coll., 1990), como en ciertas familias afectadas por la enfermedad (Mc Laughlin y Coll., 1993).
La PDE es activada durante la cascada de la fototransducción por la cadena á de la transducina, siendo esta última activada a su vez por la rodopsina que es estimulada por la luz. La PDE activada hidroliza el cGMP, reduciendo así la concentración de cGMP y por lo tanto el número de canales cGMP-dependientes abiertos, siendo la consecuencia final la disminución de la conductancia en los cationes del tipo Na^{+} y Ca^{2+} de ahí una reducción de la corriente de despolarización de los fotorreceptores en la oscuridad. En el ratón rd, Farber y Lolley (1974) han demostrado que un aumento anormal de la concentración de cGMP precede a la degeneración de los fotorreceptores. Se ha establecido en consecuencia la toxicidad del cGMP a alta concentración en los fotorreceptores normales (Lolley y Farber, 1977; Ulshafer y Coll., 1980).
Actualmente se están investigando en los ratones rd algunas aproximaciones terapéuticas destinadas a prevenir la pérdida de los fotorreceptores. Se ha descrito así que la terapia génica in-vivo permite retardar la muerte de los fotorreceptores durante seis semanas después de aplicar una inyección subretiniana de un adenovirus recombinante de replicación defectuosa que contiene el ADNc que codifica la PDE murina (Bennet y Coll., 1996). El transplante de fotorreceptores (Gourras y Coll., 1994, Silverman y Coll., 1989) ha sido descrito como una técnica que permite preservar los fotorreceptores de los conos (Mohand-Said y coll.; 1997). La interpretación de este efecto en tanto que mecanismo paracrino está en correlación con el aumento de la supervivencia de los fotorreceptores observada en cocultivo con unos fotorreceptores sanos (Mohand-said y coll., 1998) o después de la aplicación in vivo o in vitro de factores tróficos tales como los factores de crecimiento fibroblásticos o neuronales (La Vail y coll., 1998)
Sin embargo, ningún tratamiento de las enfermedades de la retina debidas a la degeneración de los fotorreceptores, está actualmente disponible, salvo la prescripción de vitamina A para la retina pigmentosa (Berson, 1996)
La presente invención tiene precisamente como objetivo proporcionar unas composiciones farmacéuticas utilizables en el marco del tratamiento de las enfermedades de la retina, en el hombre o en el animal, debidas a una degeneración de los fotorreceptores.
En efecto, la presente invención parte de la puesta en evidencia por parte de los inventores del hecho de que los compuestos que bloquean los canales cálcicos y/o cMGP-dependientes, tales como el clorhidrato de diltiazem, permiten no sólo ralentizar la degeneración de los bastoncillos y de los conos en el ratón rd, sino también preservar la capacidad de las células retinianas para responder a los estímulos luminosos.
La invención tiene por objeto la utilización de diltiazem (D-cis-enatiómero), del L-cis-enantiómero, de sus metabolitos y de sus sales farmacéuticamente aceptables, para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento de las patologías asociadas a la degeneración de los fotorreceptores de la retina, en particular al tratamiento de la retinitis pigmentosa, o de las patologías que afectan de manera parecida los fotorreceptores, tal como la degeneración macular unida a la edad.
La invención se refiere más particularmente a la utilización mencionada más arriba de diltiazem de fórmula
1
así como sus sales de adición a los ácidos farmacéuticamente aceptables, en particular el malato o el clorhidrato de diltiazem.
La invención tiene también por objeto la utilización mencionada más arriba del L-cis enantiómero de diltiazem, o el racemato de diltiazem, así como sus sales de adición a los ácidos farmacéuticamente aceptables, en particular el clorhidrato del isómero cis(-) con la fórmula siguiente:
2
De manera ventajosa los compuestos que bloquean los canales cálcicos y/o cGMP-dependientes mencionados más arriba son utilizados para la preparación de composiciones farmacéuticas que se presentan en su forma administrable por cualquier vía, en particular por vía oral, intramuscular, intravenosa, intraocular, o en forma de colirio.
Preferentemente las composiciones farmacéuticas de la invención comprenden, en forma unitaria, de 0,1 a aproximadamente 100 mg de un compuesto que bloquea los canales cálcicos y/o cGMP-dependientes, tal como se ha definido anteriormente, en asociación con un vehículo farmacéuticamente aceptable.
La invención será ilustrada mejor con ayuda de las figuras 1 a 3 siguientes.
La figura 1 ilustra la supervivencia de los bastoncillos al 25º día y al 36º día postnatal en los ratones rd tratados con el clorhidrato de diltiazem. Se han empezado a administrar las inyecciones de clorhidrato de diltiazem el 9º día postnatal que corresponde al periodo de aparición de los primeros signos de degeneración de los bastoncillos. Las dosis de clorhidrato de diltiazem (2,5 mg/ml en una solución fisiológica) han sido aumentadas gradualmente partiendo de 50 \mul al día hasta 100 \mul dos veces al día siguiendo el crecimiento del animal. Puesto que los electrorretinogramas (ERG) han sido medidos antes del sacrificio de los animales, la última inyección ha sido administrada 48 horas antes de la medición fisiológica. Después de fijar las retinas, los bastoncillos han sido marcados por unos anticuerpos antirodopsina (rho-4D2) (Hicks and Molday, 1986) y su número ha sido estimado por estereología sobre las retinas puestas de plano utilizando un procedimiento de muestreo aleatorio (Mohand-Said y coll., 1998). Únicamente las retinas rectas han sido tomadas en consideración con el fin de obtener unos resultados independientes. El tratamiento con clorhidrato de diltiazem ha aumentado en los animales tratados, con respecto a los ratones rd de control, un 86% la supervivencia de los bastoncillos al 25º día, y un 148% al 36º día. Inyecciones repetidas de, únicamente, solución fisiológica no han afectado de manera significativa a la supervivencia de los bastoncillos (7416\pm 1291, s.e.m., n=5) con respecto a los animales no tratados (7648\pm 774, s.e.m., n=4). Estas observaciones muestran por lo tanto que el tratamiento de los ratones rd con clorhidrato de diltiazem induce una supervivencia de los bastoncillos.
La figura 2 ilustra la supervivencia de los conos al 25º día y al 36º día postnatal en los ratones rd tratados con el clorhidrato de diltiazem. El número de conos ha sido estimado indirectamente tras coloración de los núcleos con el DAPI (4',6-diamino-2-fenilindol) sobre unas secciones de retinas. Para obtener este número, el número de bastoncillos inmunomarcados ha sido sustraído del número de núcleos de fotorreceptores marcados con DAP\hat{I}. El tratamiento con clorhidrato de diltiazem ha aumentado un 109% la supervivencia de los conos al 25º día, y un 144% al 36º día en los animales tratados con respecto a los ratones rd de control.
La figura 3 ilustra el hecho de que la supervivencia de los fotorreceptores viene acompañada de mejoras fisiológicas en los ratones rd tratados con clorhidrato de diltiazem. Esta demostración ha sido realizada midiendo los ERG en los ratones rd tratados y los ratones rd de control. En unos ratones rd no tratados, las amplitudes de las ondas a y b de los ERG disminuyen regularmente a partir del 12º día postnatal hasta su extinción al 24º día postnatal. Por el contrario, todos los animales tratados presentan unas señales ERG al 25º día postnatal (n=7). Al 36º día postnatal, 4 animales de 10 presentan unas señales ERG que pueden ser medidas en los dos ojos. Estas observaciones muestran que el tratamiento con clorhidrato de diltiazem no solo permite a los bastoncillos sobrevivir sino que protege también las funciones visuales de la retina.
Leyendas de las figuras
- Figura 1: estimación del número de bastoncillos en unas retinas enteras de ratones rd de 25 días y de 36 días tratados con clorhidrato de diltiazem, con respecto a los ratones rd de control no tratados.
- Figura 2: estimación del número de conos y de bastoncillos en unas secciones de retinas de ratones rd de 25 días y de 36 días tratados con clorhidrato de diltiazem, con respecto a los ratones rd de control no tratados.
- Figura 3: efecto del clorhidrato de diltiazem sobre el ERG medido en los ratones rd. A) representación de los registros de ERG medidos en los ratones rd tratados y de control al 25º y 36º días postnatal. B) Efecto del clorhidrato de diltiazem sobre la onda b del ERG; la curva que corresponde a la medición de la amplitud de la onda b en función del tiempo en los ratones rd de control está representada con ayuda de pequeños círculos huecos, mientras que la que corresponde a esta misma medición en los ratones rd tratados con el clorhidrato de diltiazem está representada con ayuda de pequeños cuadrados negros.
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Claims (5)

1. Utilización de diltiazem (D-cis-enantiómero), del L-cis-enantiómero, y de sus sales farmacéuticamente aceptables, para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento de las patologías asociadas a la degeneración de los fotorreceptores de la retina.
2. Utilización de diltiazem (D-cis-enantiómero), del L-cis-enantiómero, y de sus sales farmacéuticamente aceptables, para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento de la retinitis pigmentosa, o de las patologías que afectan de forma similar a los fotorreceptores, tal como la degeneración macular unida a la edad.
3. Utilización según la reivindicación 1 ó 2, de diltiazem de fórmula
1
así como de sus sales de adición a los ácidos farmacéuticamente aceptables, en particular el malato o el clorhidrato de diltiazem.
4. Utilización según la reivindicación 1 ó 2, del L-cis enantiómero, o del racemato así como sus sales de adición a los ácidos farmacéuticamente aceptables.
5. Utilización según una de las reivindicaciones 1 a 4, para la preparación de un medicamento que se presenta en una forma administrable por vía oral, intramuscular, intravenosa, intraocular, o en forma de colirio.
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