ES2228046T3 - Agente anticatarral que contiene isomalta como principio activo. - Google Patents

Abstract

El uso de una mezcla de alcoholes de azúcar que con tiene la 1, 6-GPS (6-O-á-D-glucopiranosil-D-sorbita) y la 1, 1- GPM (1-O-á-D-glucopiranosil-D-manita) como principio activo terapéutico en alimentos, medicamentos y productos sabrosos.

Description

Agente anticatarral que contiene isomalta como principio activo.

La presente invención se refiere al uso de una mezcla de alcoholes de azúcar que son la 6-O-\alpha-D-glucopiranosil-D-sorbita (1,6-GPS) y la 1-O-\alpha-D-glucopiranosil-D-manita (1,1-GPM) para productos farmacéuticos, alimentarios y bebidas, dicha mezcla actúa como principio activo terapéutico, en especial estimulante del sistema inmunológico y/o antibacteriano, en especial en combinación con el cinc así como a productos que contienen estas sustancias.

El resfriado es una enfermedad muy propagada y que provoca dolores desagradables. Los resfriados se deben a microorganismos, por ejemplo bacterias del tipo Staphylococcus aureus, o a virus, como son los rinovirus, que dentro del organismo afectado se alojan principalmente en la cavidad nasal, faríngea o de la garganta, de modo que por lo general pueden combatirse directamente con los principios activos. Las formas de presentación idóneas de los principios activos farmacológicos son por ejemplo las pastillas de chupar, las gomas de mascar o los comprimidos. Tales formas de presentación se caracterizan por ser formulaciones sólidas que se disuelven lentamente en la cavidad nasal o faríngea y por impedir la multiplicación y propagación de los microorganismos que se encuentran en las zonas superficiales o bien en las mucosas.

El cinc ya es conocido como sustancia farmacéuticamente activa para combatir los microorganismos que provocan resfriados. En un estudio realizado sobre rinovirus se ha puesto de manifiesto que los efectos antivíricos dependen directamente de la cantidad de iones Zn^{2+} no ligados (Merluzzi y col. en: Research Communications in Chemical Pathology and Pharmacology, vol. 66, 3, 425-440, 1989). Los iones de cinc libres, es decir que no forman parte de un complejo, se consideran actualmente agentes farmacológicos que reducen notablemente los síntomas de las enfermedades catarrales tanto en su duración como en su intensidad (Mossad y col. en: Annals of Internal Medicine, vol. 125, 2, 81-87, 1996 y Godfrey y col. en: Alternative Therapies, vol. 2, 6, 63-72, 1996. Un requisito fundamental del efecto terapéutico observado en el cinc es la necesidad de tomar a intervalos regulares por ejemplo cada 1,5 ó 2 horas, a ser posible de forma ininterrumpida desde el principio de la aparición de los síntomas, el vehículo farmacéutico que contiene los iones de cinc, por ejemplo una pastilla de chupar, y dejar que se deshaga en la boca. El motivo de ello estriba en que los iones de cinc actúan de forma tópica en la cavidad bucal, nasal y faríngea.

Sin embargo, este tipo de aplicación continua del principio activo a la cavidad bucal conlleva una serie de inconvenientes considerables, ya que en la gran mayoría de los casos el vehículo farmacéutico contiene mono- o disacáridos que favorecen la formación de caries. Por esta razón es ventajoso utilizar en lugar de azúcar, que favorece la caries, otros sucedáneos de azúcar que preserven los dientes. La sorbita y la manita ya son conocidas en calidad de sucedáneos de azúcar que puede utilizarse en preparados provistos de cinc. Sin embargo, el uso de la sorbita y de la manita tiene el inconveniente de que se disuelven rápidamente en la cavidad bucal y faríngea, de modo que no siempre hay garantías de que los iones de cinc actúen durante el período de tiempo necesario, que debe ser continuo y lo más prolongado posible. Por otro lado, ya es conocido por ejemplo por las patentes US-5 409 095 y 5 002 970 que la sorbita y también la manita poseen propiedades complejantes de metales y forman complejos también con el cinc. También se conoce por los artículos de Godfrey y col. en: The Journal of International Medical Research 20, 234-246, 1992 y Zarembo y col. en: Journal of Pharmaceutical Sciences, vol. 81, 2, 128-130, 1992, que la manita y la sorbita actúan formando complejos con el cinc y además que las pastillas de chupar provistas de manita, sorbita y sales de cinc despliegan por tanto una eficacia claramente menor en lo que respecta a la reducción temporal y a la disminución de los síntomas del resfriado (Smith y col. en: Antimicrobial Agents and Chemotherapy 33, 5, 646-648, 1989. Los complejos de cinc que forman la manita y la sorbita convierten al cinc en una forma farmacéuticamente inactiva.

El problema técnico, que constituye el trasfondo de la presente invención, consiste en desarrollar un producto que aporte una estimulación general de las defensas inmunológicas y un alivio y una eliminación de las enfermedades del resfriado y al mismo tiempo sea acariógeno y de poder calorífico reducido y garantice una liberación continua y eficiente del principio activo.

Según la presente invención se resuelve el problema planteado con el uso en calidad de principio activo de una mezcla de alcoholes del azúcar, la 1,6-GPS y la 1,1-GPM, en medicamentos, productos alimentarios y bebidas, en especial en calidad de estimulante inmunológico y/o de principio activo antimicrobiano. Ahora se ha puesto de manifiesto de modo sorprendente que una mezcla de la 1,6-GPS y la 1,1-GPM, en especial una mezcla aproximadamente equimolar de ambos alcoholes del azúcar que contenga un 43-57% en peso de la 1,1-GPM y un 57-43% en peso de la 1,6-GPS (porcentajes referidos a la sustancia seca), que se denomina también isomalta, isomaltulosa hidrogenada o Palatinit®, despliega efectos antimicrobianos, aparte de que tiene un poder calorífico reducido y es acariógena, posee una excelente aptitud para el procesado y se disuelve con mayor lentitud que la sorbita, de modo que permite una liberación prolongada del principio activo. Se ha puesto de manifiesto además que tal mezcla de la 1,6-GPS y la 1,1-GPM posee un efecto estimulante inmunológico y aumenta la inmunidad y la resistencia intrínseca corporal y celular frente a las infecciones.

En una forma de ejecución especialmente ventajosa de la presente invención, la mezcla de los alcoholes del azúcar, la 1,6-GPS y la 1,1-GPM, contiene además la 1,1-GPS (1-O-\alpha-D-glucopiranosil-D-sorbita) y eventualmente pequeñas cantidades de mono-, di- y oligosacáridos hidrogenados, xilita, eritrita, maltita, jarabes de glucosa y almidón hidrogenados, lactita y polidextrosa. Las mezclas de alcoholes de azúcar que pueden utilizarse según la invención son conocidas por ejemplo por el documento EP-0 625 578 B1, que en lo que respecta a tales mezclas de alcoholes de azúcar y a su obtención se incorporan como referencia al contenido publicado de esta invención. La invención se refiere en especial a las mezclas ya citadas de alcoholes del azúcar, dichas mezclas pueden contener por ejemplo del 10 al 50% en peso de la 1,6-GPS, del 0,5 al 20% en peso de la 1,1-GPS y del 30 al 70% en peso de la 1,1-GPM (porcentajes referidos a la sustancia seca). En otra forma preferida de ejecución, las mezclas mencionadas de alcoholes del azúcar contienen del 5 al 10% en peso de la 1,6-GPS, del 30 al 40% en peso de la 1,1-GPS y del 45 al 60% en peso de la 1,1-GPM (porcentajes referidos a la sustancia seca).

En relación con la presente invención se entiende por un producto farmacéutico un agente que favorece y restablece principalmente la salud de un organismo humano o animal, que puede ser de índole tanto profiláctica como incluso curativa y que comprende un principio activo terapéutico que provoca este efecto. En el contexto de la presente invención, el principio activo terapéutico puede servir también para la curación de enfermedades y trastornos de funciones del organismo así como para su profilaxis.

En el contexto de la presente invención se entiende por un producto alimentario un producto destinado principalmente a la nutrición del organismo humano o animal, por ejemplo un yogurt, mermelada, confitura, incluidos los llamados "functional foods", mientras que se entiende por producto sabroso (GenuBmittel) fundamentalmente cualquier producto que posea un sabor agradable, por ejemplo una goma de mascar, un caramelo, un pastilla dulce y blanda, un chocolate, una producto de bollería, una galleta, una barrita de goma o productos similares. Tanto los productos alimentarios como "sabrosos" mencionados pueden denominarse también productos farmacéuticos en base a su contenido de principios activos terapéuticos, por ejemplo la 1,1-GPM y la 1,6-GPS, con preferencia en combinación con el cinc.

Tal como se ha mencionado, la mezcla de alcoholes del azúcar empleada según la invención, en especial junto con el cinc, actúa como principio activo antimicrobiano o bien como mezcla de principios activos, es decir, la mezcla posee las propiedades de un principio activo antimicrobiano que se definen a continuación. En el contexto de la presente invención se entiende por principio activo antimicrobiano un principio activo que actúa contra bacterias, a saber tanto contra las bacterias gram-positivas como las gram-negativas, protozoos, virus, bacteriófagos, retrovirus, viroides, levaduras, algas, hongos y/o microorganismos similares, dicha acción se traduce en una inhibición del crecimiento y/o de la multiplicación y/o en una acción letal sobre dichos microorganismos, es decir, que es microbioestático y/o bactericida. Este efecto se despliega, sobre todo en el caso de usarse el principio activo de la invención en pastillas de chupas, con preferencia en la cavidad bucal y faríngea.

La mezcla de alcoholes del azúcar que se emplea según la invención posee, en especial junto con el cinc, un efecto estimulante inmunológico, es decir que mejora en especial las defensas intrínsecas del organismo contra factores anormales y ajenos al organismo, en especial parásitos, o contra infecciones bacterianas y víricas provocadas por patógenos, incluidos los gérmenes que provocan las enfermedades del tracto respiratorio y gastrointestinal, y actúa también contra la formación de tumores. El efecto inmunoestimulante se caracteriza en especial por la generación y vertido de sustancias inmunorreactivas. Este efecto se despliega con preferencia debido al producto tragado, es decir, el producto de la invención que se halla en el tracto gastrointestinal.

En una forma especialmente preferida de ejecución de la presente invención está prevista la combinación de las mezclas de alcoholes del azúcar, que contienen la 1,6-GPS y la 1,1-GPM a utilizar según la invención, con el cinc, en especial con sales inorgánicas u orgánicas del cinc, por ejemplo el gluconato de cinc o el acetato de cinc. Se ha puesto de manifiesto de modo sorprendente que, aunque la sorbita y la manita formen complejos con el cinc, como ya es sabido por la bibliografía técnica y por lo tanto los productos que contienen sorbita o manita y una parte de cinc no tengan función alguna estimulante inmunológica o eliminadora del resfriado o si la tienen sea menor, las mezclas de alcoholes del azúcar, que se utilizan según la invención y que contienen la 1,6-GPS y la 1,1-GPM disueltas y que contienen además cinc, presentan un comportamiento complejante similar al observado en productos basados en mezclas de sacarosa/glucosa y, por lo tanto, los iones de cinc están presentes en su mayor parte en una forma no complejada y por consiguiente pueden desplegar su función antimicrobiana e inmunoestimulante. Este hallazgo debe considerarse sorprendente entre otras razones porque los alcoholes disacáridos, la 1,6-GPS y la 1,1-GPM, son derivados de la sorbita y de la manita, respectivamente, que según sería de esperar formarían en gran parte complejos con el cinc. La invención se refiere además al uso de una mezcla de los alcoholes del azúcar ya mencionados y de iones de cinc como principio activo antimicrobiano o bien como combinación de principios activos antimicrobianos, en especial en forma de producto anticatarral así como estimulante inmunológico.

En el contexto de la presente invención se entiende por iones de cinc libres o no complejados aquellos iones de cinc que en solución acuosa forman únicamente complejos acuosos lábiles, como los que pueda generar cualquier ion en medio acuosa en forma de una esfera de solvatación. Los iones de cinc libres o no complejados no se hallan, pues, asociados a otras sustancias formando un complejo.

En una forma de ejecución preferida de la presente invención, la porción de cinc dentro de la mezcla de alcoholes del azúcar se sitúa entre 0,5 y 10 mg de cinc por cada g de alcohol de azúcar, con preferencia entre 1 y 5 mg de cinc por cada g de alcohol de azúcar. La presente invención se refiere además al uso de las mezclas de alcoholes del azúcar ya mencionadas, en especial a las mezclas de 1,1-GPM y de 1,6-GPS, con preferencia en combinación con el cinc y/o la 1,1-GPS, para la fabricación de un medicamento que tenga una acción inmunoestimulante y/o antimicrobiana.

La presente invención se refiere, pues, a productos en especial medicamentos, productos alimentarios y bebidas, que contienen las mezclas de alcoholes de azúcar ya mencionadas, en especial mezclas de alcoholes de azúcar que contengan la 1,1-GPM y la 1,6-GPS, en combinación con el cinc, en especial con sales orgánicas o inorgánicas del cinc. En una forma especialmente preferida de ejecución de la invención, la proporción ponderal de los alcoholes de azúcar, la 1,1-GPM y la 1,6-GPS, existentes dentro del producto se sitúa en torno a 1:1, es decir, que la mezcla de alcoholes de azúcar existente en el producto y formada por la 1,1-GPM y la 1,6-GPS es la isomalta. Sin embargo, según la invención está previsto además que la mezcla de alcoholes de azúcar esté constituida por la 1,1-GPM, la 1,6-GPS y la 1,1-GPS o bien que contenga una mezcla de estos alcoholes de azúcar, eventualmente junto con cantidades menores de otros alcoholes de azúcar y otros oligosacáridos.

Los productos de la invención pueden estar presentes en formas de aplicación oral, por ejemplo pastillas, tabletas, comprimidos, zumos, grageas, caramelos duros y blandos o en forma de suspensiones, pulverizadores, mezclas para inhalar, etcétera.

El uso de la presente invención o bien los productos de la invención se caracterizan, pues, por una estructura que preserva en especial los dientes y está constituida por una mezcla de alcoholes de azúcar a emplear según la invención, a saber la 1,1-GPM y la 1,6-GPS, eventualmente en combinación con la 1,1-GPS, en la que los iones de cinc^{2+} eventualmente presentes no resultan inhibidos por la formación de complejos en su acción contra los microorganismos que provocan las enfermedades de tipo resfriado, como son los rinovirus, ni en su acción inmunoestimulante. Los productos de la invención, en especial en su presentación como productos anticatarrales, o bien el uso según la invención se caracterizan además por su escasa velocidad de solución si se compara con la de productos conocidos, de modo que el principio activo se libera durante un período de tiempo prolongado en el lugar deseado y puede de este modo actuar en él. Finalmente, las mezclas de alcoholes de azúcar a emplear según la invención son bajas en calorías, además son apropiadas para los diabéticos y permiten la fabricación de productos de buena estabilidad al almacenaje, de modo que pueden envasarse en envases menos caros. Por su mejor estabilidad al almacenaje, por ejemplo con respecto a productos azucarados, los productos de la invención son también idóneos para el uso en zonas tropicales y húmedas, que a menudo son zonas con escasez de cinc y alto riesgo de infección.

En otra forma de ejecución, la invención se refiere también a los usos ya mencionados y a los productos provistos de cinc, ya mencionados, siendo la mezcla de alcoholes del azúcar una mezcla enriquecida en la 1,6-GPS o una mezcla enriquecida en la 1,1-GPM, tal como se describe en el documento DE 195 32 396 C2. Una mezcla enriquecida en la 1,6-GPS puede contener la 1,6-GPS y la 1,1-GPM en una proporción comprendida entre 57:43% en peso y 99:1% en peso (porcentajes referidos a la sustancia seca). Una mezcla enriquecida en la 1,1-GPM puede contener por ejemplo la 1,6-GPS y la 1,1-GPM en una proporción comprendida entre 1:99% en peso y 43:57% en peso (porcentajes referidos a la sustancia seca). Gracias a la variación de las proporciones ponderales de los alcoholes del azúcar entre sí que permite la invención es posible ajustar las velocidades de disolución de los productos fabricados a los valores deseados. Según la aplicación deseada y el principio activo a aplicar puede ajustarse una proporción determinada de las mezclas de alcoholes del azúcar entre sí, de modo que puede lograrse prácticamente cualquier velocidad de disolución que se desee y, por tanto, cualquier velocidad de liberación de los componentes farmacológicamente activos, en especial del cinc. Esto se basa en el hecho de que las cinéticas de disolución de los alcoholes del azúcar, la 1,6-GPS, la 1,1-GPM y la 1,1-GPS, difieren notablemente entre sí. Por ejemplo, la 1,1-GPM se caracteriza por una velocidad de disolución netamente inferior a la de la 1,6-GPS o de otras sustancias que se toman también en consideración para esta aplicación. En los casos en los que se desee una rápida liberación del principio activo, en especial del cinc, se utilizan mezclas enriquecidas en la 1,6-GPS porque tienen mayor velocidad de disolución, mientras que en los casos en los que interesa una liberación temporalmente retardada del producto farmacéutico, entonces se utilizan ante todo las mezclas enriquecidas en la 1,1-GPM.

En una forma preferida de ejecución, la invención se refiere, pues, al uso de una mezcla de alcoholes del azúcar que contiene por lo menos un 98% en peso de la 1,6-GPS y de la 1,1-GPM, en la que del 75 al 85% en peso es de la 1,6-GPS y del 25 al 15% en peso es de la 1,1-GPM, dicha mezcla se denomina Isomalt GS. En la mezcla de alcoholes de azúcar pueden estar presentes además pequeñas cantidades de manita y sorbita, por ejemplo en cada caso \leq del 0,5% en peso.

En otra forma preferida de ejecución puede preverse una mezcla de alcoholes del azúcar que contenga más del 90% en peso de la 1,1-GPM y de la 1,6-GPS, porcentaje referido a la cantidad total de la mezcla, en ella está prevista como cantidad máxima de manita un 3% en peso y de sorbita un 6% en peso. Esta mezcla de isomalta se denomina Isomalt HC.

En otra forma preferida de ejecución puede preverse una mezcla de alcoholes del azúcar que contenga más del 95% en peso de la 1,6-GPS y de la 1,1-GPM, del que del 43 al 57% en peso corresponden a la 1,6-GPS. En esta forma de ejecución está prevista una cantidad máxima de manita del 1% en peso y de sorbita del 2% en peso. Esta isomalta se denomina Isomalt HB.

Finalmente, en otra forma preferida de ejecución puede preverse una mezcla de alcoholes del azúcar que contenga más del 98% en peso de la 1,6-GPS y de la 1,1-GPM, del que del 75 al 85% en peso corresponden a la 1,1-GPM y del 25 al 15% en peso son de la 1,6-GPS. En esta forma de ejecución está prevista una cantidad máxima de manita del 0,5% en peso y de sorbita del 0,5% en peso. Esta isomalta se denomina Isomalt GS.

Las mezclas recién citadas de alcoholes de azúcar pueden utilizarse de forma ventajosa en el uso previsto según la invención y en los productos farmacéuticos previstos según la invención, en los que con preferencia especial no se utiliza ningún otro edulcorante, azúcar ni sucedáneo de azúcar.

En una forma de ejecución especialmente preferida de la invención está previsto que los productos de la invención o bien la mezcla de alcoholes de azúcar a utilizar según la invención y compuesta por la 1,1-GPM y la 1,6-GPS contenga además edulcorantes intensos, como el acesulfamo-K, el aspartamo, el ciclamato, la glicirricina, el neotamo, la neohesperidina DHC, la esteviosida, la sucralosa, la taumatina, la sacarina, etcétera. Los productos de la invención o bien la mezcla de alcoholes de azúcar, compuesta por la 1,1-GPM y la 1,6-GPS, a utilizar según la invención contienen además de forma ventajosa saborizantes y aromas, por ejemplo aroma de limón o de menta. Los productos de la invención o bien la mezcla de alcoholes de azúcar, compuesta por la 1,1-GPM y la 1,6-GPS, a utilizar según la invención pueden contener también ácidos compatibles con los alimentos, por ejemplo el ácido ascórbico, el ácido málico o el ácido glucónico y, como lubricantes, ácidos grasos o sus sales, por ejemplo el estearato magnésico o el estearato sódico. Finalmente puede preverse que en los productos de la invención o en la mezcla de alcoholes del azúcar, compuesta por la 1,1-GPM y la 1,6-GPS, a utilizar según la invención estén presentes colorantes y/o "explosivos", por ejemplo almidones modificados, polivinilpirrolidona (PVP) o carboximetilcelulosa. Tal mezcla se denomina Isomalt GS.

Según la invención, en una forma preferida de ejecución, además de los alcoholes de azúcar, la 1,1-GPM y la 1,6-GPS, previstos según la invención, pueden incluirse también en los productos o en los usos las enzimas, coenzimas, sales minerales, vitaminas, antibióticos, nicotina, cafeína, eucalipto, codeína, fenacetina, paracetamol, acetilaminofenoles, ácido acetilsalicílico, mentol u otros principios activos farmacológicos (véase Smit, M.B.H. y Feldmann, W. "Over-the-counter sold medications" (medicamentos vendidos sin receta médica); "A critical review of clinical trials between 1950 y 1991", en JAMA 269, 2258-2263, 1993). Los principios activos farmacéuticos, en especial el cinc, deben preverse en una cantidad tal que produzcan el efecto farmacológico deseado.

En una forma preferida de ejecución, la invención prevé además que los alimentos, medicamentos o productos sabrosos que contienen la 1,1-GPM y la 1,6-GPS, y en especial también el cinc, así como eventualmente la 1,1-GPS y otras sustancias activas ya mencionadas estén completa o fundamentalmente exentos de azúcar, es decir, que estén exentos de sacarosa y/o fructosa y/o glucosa. Se entiende por la expresión "fundamentalmente exentos de azúcar" que contienen como máximo un 10% en peso, con preferencia como máximo un 5% en peso y con preferencia especial como máximo un 1% en peso de azúcar (porcentaje referido al peso total del producto).

En la forma preferida de ejecución, los productos de la invención se caracterizan por su ausencia de azúcar, porque preservan los dientes, no generan caries y tampoco fomentan la formación de matrices de placa. A diferencia de los productos fáciles de digerir que contienen glucosa, los productos de la invención son idóneos para diabéticos, porque las enzimas del intestino delgado disgregan la isomalta de modo lento e incompleto, con lo cual el nivel de glucosa en la sangre apenas aumenta o no aumenta en absoluto. El índice glucémico y la respuesta insulínica son, por lo tanto, bajos. Por otro lado, la isomalta que llega al intestino grueso sufre fermentación y se descompone en ácidos grasos de cadena corta, contrarrestando los taponamientos que a menudo sufren las personas de edad avanzada.

Otras formas de ejecución ventajosas de la invención se definen en las reivindicaciones secundarias.

La invención se ilustra con más detalle mediante los ejemplos y las figuras que acompañan.

En la figura 1 se representa la influencia de la isomalta y de la sal de cinc y de sustancias comparativas en el crecimiento del Staphylococcus aureus y

en la figura 2 se representa el comportamiento de extinción del Staphylococcus aureus en una solución de isomalta al 60% (80 partes de la 1,6-GPS y 20 partes de la 1,1-GPM).

Ejemplos Ejemplo 1 Efecto antibacteriano de la isomalta

Se cultiva el Staphylococcus aureus a 37ºC en un medio CASO que aparte de la glucosa (del 5%), que actúa como fuente de carbono, contiene además isomalta (0,58 M). El crecimiento de los cultivos bacterianos en el matraz agitado se compara después de 16 h con una muestra de control (medio CASO sin isomalta) sobre la base de la densidad óptica (OD_{578}). En todos los ensayos realizados se observa que el crecimiento de los cultivos cultivados en isomalta se inhibe en más del 50%. A título comparativo, el crecimiento en cantidades equimolares de sorbita (0,58 M) se reduce en un 75% (ver figura 1, muestras 1, 2 y 5).

Se detecta además un efecto antibacteriano en una solución enriquecida hasta el 60% en la 1,6-GPS (80/20 partes de 1,6-GPS/1,1-GPM) (ver figura 2 para el comportamiento de extinción del Staphylococcus aureus).

La solución muy concentrada del isomalta (hasta el 60%) se contamina con 1000 gérmenes de diversas bacterias (Staphyloccus aureus y Streptococcus pneumoniae) y se toman muestras en diversos momentos temporales. Los gérmenes que sobreviven en la solución se hacen visibles por filtración sobre un filtro (0,45 \mum) e incubación del filtro en suelos de cultivo selectivos de agar. Se pone de manifiesto que ya al cabo de 30 min se reduce considerablemente el número de gérmenes y después de un día (1140 min) ya no se detecta la presencia de las bacterias.

Ejemplo 2 Efecto antibacteriano del cinc/isomalta

Los caramelos duros de isomalta, a los que se ha incorporado por mezcla el gluconato de cinc o el acetato de cinc (2,5 mg de cinc por g de isomalta), se disuelven al 20% en medio CASO (p/v) y se inoculan con un cultivo reciente de Staphylococcus aureus. Se determina el crecimiento de las bacterias a 37ºC en un matraz agitado después de 16 h sobre la base de la densidad óptica (OD_{578}) y se compara con una muestra de control (medio CASO sin caramelo duro). Ni la combinación de isomalta-gluconato de cinc ni la de isomalta-acetato de cinc permiten el crecimiento bacteriano. En todos los cultivos se miden densidades ópticas de 0,0 (ver figura 1, muestras 3 y 4).

Ejemplo 3 Determinación de los iones Zn libres en las soluciones de azúcar, alcoholes de azúcar y caramelos duros

Se mezclan 10 ml de una solución de gluconato (2 g de gluconato de cinc en 250 ml de agua desmineralizada) y 10 ml de solución de poliol (1,0 g de azúcar o alcoholes de azúcar disueltos en 25 ml de agua desmineralizada) y 2 ml de tampón acetato (pH = 6,0) y se mantienen a 35ºC en una cubeta.

A continuación se añade una solución 1 molar de NaHCO_{3} en cantidades más pequeñas y se determina la turbidez con un nefelómetro (fotómetro de turbidez).

En la tabla se recogen y cotejan la isomalta, la sacarosa, la glucosa, los caramelos duros de isomalta, el gluconato de cinc empleado como fuente de cinc y dos productos comerciales, en cada caso la cantidad de iones Zn equivale a 26 mg en 50 ml de solución.

Los iones de cinc libres y su fracción porcentual (con respecto a la cantidad total) indican que en presencia de isomalta (incluso en los caramelos duros) está presente una cantidad relativamente grande de iones cinc si se compara con otros polioles.

TABLA Determinación nefelométrica de iones Zn libres en presencia de polioles (producto comercial A: caramelo duro de jarabe de sacarosa y glucosa con gluconato de cinc incorporado; producto comercial B: caramelo duro de jarabe de sacarosa y glucosa con gluconato de cinc y aroma de limón incorporados)

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Ejemplo 4 Actividad antirrinovírica de los preparados de isomalta y cinc Materiales de partida y procedimiento de ensayo

En lo tocante a su posible actividad antivírica se ensayan cuatro concentraciones distintas de cinc (0,125 mM, 0,1 mM, 0,075 mM y 0,05 mM) en forma de gluconato de cinc y acetato de cinc junto con 5 mg/ml de isomalta (mezcla equimolar de la 1,1-GPM y de la 1,6-GPS). De cada una de las cuatro concentraciones se realizan tres pruebas idénticas con 3 serotipos de distintos rinovirus así como un control en el que se incluye el EDTA (en una cantidad equimolar a la de la sal de cinc). Otros controles abarcan la isomalta sin la sal de cinc y cada una de las concentraciones de la sal de cinc sin isomalta.

Se ensaya la acción de los preparados mencionados sobre los rinovirus en células HeLa (obtenidas de la ATCC Rockwille, MD, nº de catálogo CRL-1958). La línea celular HeLa se cultiva en medio Eagle modificado de Dulbecco (DMEM), complementado con suero fetal bovino (concentración final: 5%) y sulfato de gentamicina (concentración final: 50 \mug/ml). Los cultivos celulares se incuban a 37ºC en una atmósfera húmeda que contiene un 5% de CO_{2}. En presencia del virus se reduce la temperatura de incubación a 33ºC.

Las cepas de rinovirus se cultivan en células HeLa y se determinan las TCID_{50} (valoración con una infecciosidad de cultivo en tejido del 50%) en una serie de diluciones.

Se cosechan las células con un tratamiento de tripsina, se cuentan y se siembran en cada hoyo de una placa de microvaloración de 96 hoyos en una concentración de 25.000 células por hoyo. Después de la inoculación se incuban las placas durante una noche a 37ºC en una atmósfera húmeda con un 5% de CO_{2} y al día siguiente se retira el medio de las células y se sustituye por 175 \mul de 1,143 x la concentración de la combinación de correspondiente sustancia a ensayar. Se incuban las placas a 37ºC durante una hora en una atmósfera húmeda que contiene un 5% de CO_{2}.

Después de esta incubación y con el fin de evaluar la actividad antivírica se introducen en los hoyos en cada caso 25 \mul de una solución DMEM con 100 TCID_{50} del virus correspondiente. Se toman 6 hoyos de cada placa para los controles de virus (no se les añade el preparado de cinc-isomalta) y otros 6 hoyos como control de células (sin preparado de cinc-isomalta y sin virus). A continuación se incuban las placas a 33ºC en una atmósfera húmeda que contiene un 5% de CO_{2} y se analiza con un microscopio el efecto citopatógeno.

Resultados

Se determina la actividad antivírica como reducción del efecto citopatógeno de los rinovirus en las células HeLa. Las determinaciones se realizan con el microscopio o bien aplicando ensayos colorimétricos. La determinación se realiza en un momento en el que los controles de virus (sin adición de preparados de cinc-isomalta) presentan toda la sintomática de un efecto citopatógeno vírico. Para el rinovirus de tipo 7 se realiza la evaluación de la actividad antivírica tres días después de la infección y para los tipos de suero 1 A y 2 se realiza cuatro días después de la infección. Los controles celulares (células HeLa sin virus) no muestran síntomas en absoluto de una infección vírica, mientras que los controles víricos (células HeLa con virus pero sin preparado de cinc-isomalta) presentan toda la sintomática de una infección vírica.

La infección vírica de los cultivos de tejido HeLa conduce a modificaciones histológicas de las células. Estas pueden observarse a nivel microscópico por ejemplo por alteración de la forma de las células y por desorción de superficies. En efecto, en el curso de una infección vírica las células pueden resultar destruidas y/o despegadas del sustrato en el que estaban fijadas. La presencia de la sintomática de una infección vírica se analiza actualmente con microscopio y también con técnicas colorimétricas. Para el análisis colorimétrico se aprovecha el hecho de que las células infectadas se despegan del sustrato y se eliminan por lavado (lixiviación). En cambio, en el análisis colorimétrico los hoyos que tienen células protegidas contra la infección vírica presentan una capa celular de color más oscuro que los hoyos que contienen células no protegidas, porque en el último caso existen menos células que pueden contribuir a dar coloración a la capa celular.

Contra el rinovirus del tipo 1 A se observa efecto antivírico cuando se aplica una concentración 0,1 mM de gluconato sódico en combinación con la isomalta. Se consigue también un efecto antivírico contra el rinovirus del tipo 1 A cuando se aplica una concentración 0,1 mM de acetato de cinc en combinación con isomalta y una concentración de 0,075 mM de gluconato de cinc en combinación con isomalta. Sin embargo estas actividades son menores que las logradas con una concentración 0,1 mM de gluconato de cinc en combinación con isomalta.

Contra el rinovirus de tipo 2 se consigue un efecto antivírico con una concentración 0,1 mM de acetato de cinc junto con la isomalta así como con una concentración 0,1 mM de gluconato de cinc junto con isomalta y también, en cada caso en un grado menor, con una concentración de 0,075 mM de gluconato de cinc junto con isomalta y con una concentración 0,1 mM de gluconato de cinc sin isomalta.

Contra el rinovirus del tipo 7 se observa también un efecto antivírico con concentraciones de 0,05, 0,075 y 0,1 mM de acetato de cinc o 0,05 mM de gluconato de cinc junto con isomalta, cuya intensidad corresponde aproximadamente al efecto de una concentración 0,075 mM de gluconato de cinc junto con isomalta contra el rinovirus 2.

Las actividades antivíricas contra el rinovirus de tipo 1 A y 2 pueden suprimirse con la adición de cantidades equimolares de EDTA. Esto confirma la "hipótesis de los iones libres" que se ha discutido en la introducción. El acetato de cinc y el gluconato de cinc solos proporcionan un efecto antivírico relativamente poco acusado con una concentración 0,1 mM de gluconato de cinc (sin isomalta). La protección conseguida con una concentración 0,1 mM de gluconato de cinc es significativamente menor que la protección conseguida con una concentración de 0,1 mM de acetato de cinc o de gluconato de cinc en cada caso junto con isomalta.

Los datos ponen de manifiesto que los preparados farmacéuticos que contienen isomalta y gluconato de cinc o acetato de cinc proporcionan una mejor protección contra las infecciones rinovíricas que los preparados de cinc solos.

Claims (20)

1. El uso de una mezcla de alcoholes de azúcar que contiene la 1,6-GPS (6-O-\alpha-D-glucopiranosil-D-sorbita) y la 1,1-GPM (1-O-\alpha-D-glucopiranosil-D-manita) como principio activo terapéutico en alimentos, medicamentos y productos sabrosos.

2. Uso según la reivindicación 1, en el que el principio activo terapéutico es un principio activo antimicrobiano.

3. Uso según la reivindicación 1, en el que el principio activo terapéutico es un estimulante inmunológico.

4. Uso según una de las reivindicaciones anteriores, en el que la 1,6-GPS y la 1,1-GPM están presentes en la mezcla de alcoholes de azúcar en cantidades aproximadamente equimolares.

5. Uso según una de las reivindicaciones de 1 a 3, en el que la mezcla de alcoholes de azúcar es una mezcla enriquecida en la 1,6-GPS o en la 1,1-GPM.

6. Uso según la reivindicación 5, en la que la mezcla de alcoholes de azúcar contiene del 75 al 85% en peso de la 1,6-GPS y del 25 al 15% en peso de la 1,1-GPM.

7. Uso según la reivindicación 5, en el que la mezcla de alcoholes de azúcar contiene del 75 al 85% en peso de la 1,1-GPM y del 25 al 15% en peso de la 1,6-GPS.

8. Uso según una de las reivindicaciones de 1 a 3 ó de 5 a 7, en el que la mezcla de alcoholes de azúcar contiene además la 1,1-GPS (1-O-\alpha-D-glucopiranosil-D-sorbita).

9. Uso según una de las reivindicaciones anteriores, en la que la mezcla de alcoholes de azúcar contiene además cinc.

10. Uso según una de las reivindicaciones anteriores, en el que el cinc está presente en forma de una sal de cinc orgánica o inorgánica.

11. Uso según una de las reivindicaciones anteriores, en el que la sal de cinc es el gluconato de cinc o el acetato de cinc.

12. Uso según una de las reivindicaciones anteriores, en el que la mezcla de alcoholes de azúcar contiene además colorantes, aromas, saborizantes, ácidos comestibles o pequeñas cantidades de otros alcoholes de azúcar.

13. Uso según una de las reivindicaciones anteriores en el que el alimento, el producto sabroso o el medicamento es un caramelo duro, un caramelo blando, un comprimido, una gragea, una pastilla o una goma de mascar.

14. Medicamento para el consumo humano o animal que contiene la 1,1-GPM y la 1,6-GPS así como de 0,5 a 10 mg de cinc por cada gramo de alcoholes de azúcar.

15. Medicamento según la reivindicación 14, en el que el medicamento contiene además la 1,1-GPS.

16. Medicamento según una de las reivindicaciones 14 ó 15, en el que el medicamento contiene la 1,1-GPM y la 1,6-GPS en cantidades aproximadamente equimolares.

17. Medicamento según una de las reivindicaciones 14 ó 15, que contiene la 1,1-GPM y la 1,6-GPS en forma de mezclas enriquecidas en la 1,1-GPM o en la 1,6-GPS.

18. Medicamento según la reivindicación 17, que contiene del 75 al 85% en peso de la 1,1-GPM y del 25 al 15% en peso de la 1,6-GPS.

19. Medicamento según las reivindicaciones 14 ó 15, que contiene del 15 al 25% en peso de la 1,1-GPM y del 75 al 85% en peso de la 1,6-GPS.

20. Medicamento según una de las reivindicaciones de 14 a 19, en el que el cinc está presente en forma de una sal inorgánica u orgánica.