ES2233952T3

ES2233952T3 - Uso de absorbentes de co2 para la estabilizacion de reactivos alcalinos secos en ensayos de creatinina.

Info

Publication number: ES2233952T3
Application number: ES96114709T
Authority: ES
Inventors: Amy H. Chu; Wei-Sen Chu; Howard A. Cooper
Original assignee: Bayer AG; Bayer Corp
Current assignee: Bayer AG; Bayer Corp
Priority date: 1995-09-26
Filing date: 1996-09-13
Publication date: 2005-06-16
Anticipated expiration: 2016-09-13
Also published as: EP0766087B1; JPH09178754A; US5610073A; DK0766087T3; EP0766087A3; AU699944B2; CA2184314A1; DE69633896D1; AU6583996A; EP0766087A2; ATE283489T1; DE69633896T2; CA2184314C; PT766087E

Abstract

SE PRESENTA UNA MEJORA EN EL METODO DE DETECCION DE CREATININA EN EL QUE SE PONE EN CONTACTO LA CREATININA, EN UNA SOLUCION ACUOSA, CON UN SISTEMA DE REACTIVOS SECOS DE UN INDICADOR DE CREATININA. EL ENSAYO SE LLEVA A CABO EN UN PH POR ENCIMA DE 11,5, APROXIMADAMENTE, QUE ES MANTENIDO POR UN MATERIAL ALCALINO. LA MEJORA LLEVA CONSIGO EL EMPAQUETADO DEL SISTEMA DE REACTIVOS CON UN MATERIAL CAPAZ DE ABSORBER EL CO{SUB,2} Y, POR LO MENOS, EL VAPOR DE AGUA AMBIENTAL. ESTO INHIBE LA FORMACION DE ACIDO CARBONICO, POR LO QUE SE REDUCE LA NEUTRALIZACION DEL SISTEMA DE REACTIVOS ALCALINOS DURANTE EL ALMACENAMIENTO PARA INCREMENTAR EL PERIODO DE CONSERVACION Y DISMINUIR LA VARIABILIDAD DEL SISTEMA.

Description

Uso de absorbentes de CO2 para la estabilización de reactivos alcalinos secos en ensayos de creatinina.

Antecedentes de la invención

La creatinina es el metabolito final cuando la creatina se convierte en creatina fosfato y se usa como fuente de energía para la contracción muscular. La creatinina producida se filtra por los glomérulos renales y después se excreta con la orina sin reabsorción. La determinación de creatinina en los líquidos corporales es útil para el diagnóstico de enfermedades musculares o distintas enfermedades renales como la nefritis y la insuficiencia renal.

La primera prueba práctica para la determinación de creatinina en orina o suero, conocida como el método Jaffe, incluye la formación de picrato de creatinina de color marrón rojo amarillento mediante la unión de ácido pícrico y creatinina en una solución alcalina. Un procedimiento más reciente para la determinación de creatinina es descrito por Benedict y Behre en J. Biol. Chem., 113:515 (1936) el cual incluye la reacción de ácido 3,5-dinitrobenzoico con creatinina en un medio alcalino. Cada una de estas reacciones requieren un pH alto, es decir mayor de 11,5 y típicamente de 12 a 14, con el fin de deprotonar la creatinina para que el sistema funcione de forma adecuada. Las sustancias básicas fuertes como el álcali y los hidróxidos metálicos alcalinos se usan típicamente para mantener un pH adecuadamente alto en estos sistemas reactivos.

El sistema reactivo de creatinina seco comprende un indicador que forma un producto de reacción coloreado a un pH elevado y un reactivo alcalino para aumentar el pH al nivel deseado. Cuando el reactivo se rehidroliza se puede aplicar a un vehículo absorbente como un papel de filtro o una película porosa. Típicamente, el sistema reactivo se aplica al vehículo en forma de soluciones separadas, acuosa para el álcali y orgánica para el indicador, con evaporación del disolvente para dejar el reactivo seco residual dispersado en el vehículo. Este tipo de sistema se desvela en la patente de solicitud japonesa nº 62-287261 que también desvela el tratamiento de la tira con un polímero derivado del ácido carboxílico soluble en álcalis para inhibir la degradación de la tira por el álcali fuerte.

Hay disponibles dispositivos diagnósticos para la determinación de proteínas, en particular la albúmina sérica humana (HSA), en orina. La determinación de HSA en orina tiene significado clínico para la detección de estadios tempranos de nefropatía que es un estado anormal del riñón. Un alto porcentaje de los individuos que padecen diabetes mellitus dependiente de insulina (IDDM) y diabetes mellitus no dependiente de insulina (NIDDM) secretan eventualmente HSA en niveles superiores al límite alto en la población normal. Este estado de "microalbuminuria" empeora progresivamente y típicamente conduce a nefropatía. Ya que el daño renal en el estado de microalbuminuria se puede controlar o revertir mediante la administración de una terapia apropiada, se reconoce también que la medida de la microalbuminuria es parte del cuidado razonable de la IDDM y la NIDDM.

Otras proteínas unidas de la orina, por ejemplo IgG, alfa-1-microglobulina, proteína de Bence-Jones y N-acetil-b-D-glucosaminidasa, son útiles como marcadores para detectar y diferenciar las formas prerrenales, glomerulares y postrenales de la microalbuminuria. La proteinuria, que se define cuando la concentración de proteínas en orina es superior a 30 mg/L, es el síntoma común de una variedad de diferentes enfermedades renales. De acuerdo con esto, se necesitan por parte de los nefrólogos, diabetólogos y cardiólogos procedimientos de prueba que sean sensibles, específicos y cuantitativos para la determinación de estas proteínas en la orina.

Con el fin de incrementar la sensibilidad y especificidad de los ensayos de proteínas urinarias y minimizar el problema de la alta velocidad de flujo que da como resultado la dilución de la orina, las razones proteína/creatinina se usan en los resultados de los ensayos de proteínas urinarias para normalizar la concentración de la orina. Los análisis típicos de proteínas incluyen inmunoensayos como el radioinmunoensayo, inmunoensayo enzimático, inmunoensayo de fijación en látex y el ensayo inmunoturbidimétrico. Ya que los ensayos de creatinina Jaffe y Benedict-Behre usados comúnmente se realizan a un pH alto, la práctica común en los laboratorios clínicos es realizar los ensayos de proteínas y creatinina por separado y combinar luego los valores obtenidos de estos ensayos para generar la razón proteína a creatinina. Ya que los pacientes con velocidades altas de flujo de orina tienden a tener valores de proteínas artificialmente bajos debido a la dilución de la orina y ya que la creatinina es un buen marcador para la dilución de la orina, el uso de la razón proteína/creatinina elimina el problema de la dilución de la orina y proporciona un reflejo más exacto de la verdadera velocidad de excreción de proteínas.

En la patente de EEUU 5385847 se ha desvelado un dispositivo que permite la determinación de proteínas y creatinina en una sola muestra de orina en un vaso de reacción en el que se ha llevado a cabo un inmunoensayo para la proteína en la zona de primera reacción del vaso seguido de la determinación de creatinina en una zona de segunda reacción que contiene un indicador seco para la determinación de creatinina así como el reactivo básico seco que es necesario para la elevación del pH del medio de reacción cuando los reactivos se rehidratan mediante la introducción de la muestra líquida que se va a probar en la zona de segunda reacción.

El documento EP-546390 describe un sistema para la determinación de creatinina. Este caso no se pronuncia con respecto al material absorbente de CO2.

Tanto si el reactivo de creatinina seco (indicador y material alcalino) está en forma de tira o ubicado en el dispositivo del documento US-PS-5385847, existe un problema de almacenamiento debido a la formación de ácido carbónico de la humedad ambiental y dióxido de carbono en el área del álcali seco que, al final, puede producir su neutralización limitando o destruyendo por lo tanto su capacidad para inducir el pH alto necesario para la determinación de creatinina en el líquido de la prueba. Típicamente, estos dispositivos se han empaquetado con un desecante para reducir la humedad en el sistema para inhibir por lo tanto la formación de ácido carbónico. Ejemplos de estos desecantes incluyen filtros moleculares, gel de sílice, sulfato de sodio, cloruro de magnesio, cloruro de litio y trietilénglicol. El uso de un desecante que sirve simplemente como agente secante no se ha demostrado completamente satisfactorio lo cual nos lleva a buscar una clase más satisfactoria de desecante.

La cal sodada, una mezcla de hidróxido de sodio y óxido de calcio, se describe en el Diccionario Químico Hackh's, 4ª edición, como un absorbente general de gases ácidos. En la Enciclopedia de Tecnología Química Kirk-Othmer, 3ª edición, se describe en las páginas 674-678 del volumen 16 un generador para la producción de oxígeno basado en clorato de sodio. El generador viene equipado con un sistema de filtro que incluye cal sodada para la retirada del CO2 producido de la corriente de oxígeno.

Resumen de la invención

La presente invención se refiere a un procedimiento para la detección de creatinina en el cual se pone en contacto una solución acuosa que contiene creatinina con un sistema de reactivo seco que contiene un indicador para creatinina a un pH superior a 11,5. El pH alto se proporciona mediante un material alcalino seco que se hidrata mediante el fluído acuoso. La presente invención incluye una mejora en el sistema de detección de creatinina que incluye empaquetar el reactivo seco con un material capaz de absorber CO2 y al menos algo del vapor de agua ambiental. El material absorbente de CO2 se proporciona en cantidad suficiente para inhibir sustancialmente la formación de ácido carbónico en el área del sistema de reactivos. Esta inhibición de la producción de ácido carbónico incrementa la vida útil del dispositivo de detección de creatinina mediante la reducción o la eliminación de la neutralización del reactivo álcali mediante el ácido carbónico formado in situ.

También está incluido en el ámbito de la invención un dispositivo de detección de creatinina que contiene el material absorbente de CO2.

Descripción de la invención

Los materiales absorbentes de CO2 para el uso en la presente invención incluyen la cal sodada, Ascarite® (silicato cubierto de hidróxido de sodio), hidróxido de litio, hidróxido de bario, hidróxido de calcio e hidróxido de potasio. Como la presente invención no está basada en ningún mecanismo de acción, se piensa que estos "captadores" de CO2 amplían la vida útil del reactivo de creatinina compitiendo con el álcali contenido en el mismo por el CO2 atmosférico. Esto inhibe la neutralización del álcali mediante la desviación del CO2 y el vapor de agua del reactivo alcalino de creatinina hacia el captador de CO2 previniendo por lo tanto la absorción del CO2 y el vapor de agua por el reactivo de creatinina como se representa mediante el siguiente mecanismo:

CO2 + H_{2}O \rightarrow

H_{2}CO_{3} + reactivo alcalino (es decir 2NaOH o 2KOH) \rightarrow

Na_{2}CO_{3} o K_{2}CO_{3} + 2H_{2}O

ó

CO2 + reactivo alcalino (es decir 2NaOH o 2KOH) \rightarrow

Na_{2}CO_{3} o K_{2}CO_{3} + H_{2}O

Cualquiera de estas dos posibilidades dará como resultado pérdida de alcalinidad mediante el consumo del NaOH o KOH del reactivo alcalino de creatinina.

A la inversa, en el caso de un desecante como la cal sodada que también es capaz de captar CO2, ocurrirán las siguientes reacciones:

1. CO2 + H_{2}O \rightarrow H_{2}CO_{3}.

2. 2H_{2}CO_{3} + 2NaOH + 2KOH \rightarrow Na_{2}CO_{3} + K_{2}CO_{3} + 4H_{2}O.

3. 2Ca(OH)_{2} + Na_{2}CO_{3} + K_{2}CO_{3} \rightarrow 2CaCO_{3} + 2NaOH + 2KOH.

4. CaO + H_{2}O \rightarrow Ca(OH)_{2}.

El CO2 reacciona primero con agua para formar ácido carbónico y posteriormente reacciona con los hidróxidos para formar sales solubles tanto de carbonato de sodio como de potasio. Las sales solubles reaccionan después con el hidróxido de calcio para formar carbonato de calcio insoluble. La rapidez de la retirada de CO2 es directamente proporcional a la velocidad de generación de hidróxidos activos de la reacción 3 y la reacción 4. Además, el material absorbente de CO2 también debería absorber vapor de agua (reacción 1 y reacción 4).

El sistema que contiene el reactivo de creatinina seco, tanto si está en forma de tira de prueba o del dispositivo de cartucho previamente descrito para la determinación de proteínas y creatinina en un solo vaso de prueba, se empaquetará normalmente en una bolsa de papel de aluminio para el cartucho de prueba o en una botella de polipropileno para la tira de prueba para excluir los gases atmosféricos y el vapor de agua. Sin embargo, como cuestión práctica, los materiales empaquetados no forman un sellado perfecto y permiten que algunos gases atmosféricos como el CO2 y el vapor de agua entren en el paquete al final. El uso previo de desecantes puros para absorber la humedad que entra al paquete no ha resultado totalmente exitoso porque un desecante como el gel de sílice o un filtro molecular de 3\ring{A}, 4\ring{A} o 10\ring{A} es más efectivo absorbiendo vapor de agua y no puede prevenir la interacción entre el reactivo alcalino y el CO2 que produce la neutralización del reactivo alcalino. Aunque un filtro molecular de 10\ring{A} también puede absorber CO2, la unión entre el CO2 y el filtro molecular es débil y reversible. Esto contrasta claramente con la cal sodada la cual absorbe CO2 y vapor de agua convirtiéndolos después de forma irreversible en carbonato de calcio. Hemos encontrado que el uso de materiales que absorben CO2 son más adecuados para ampliar la vida útil de los dispositivos de diagnóstico empaquetados para la determinación de creatinina que los desecantes de H_{2}O puros. También es deseable que el absorbente de CO2 tenga alguna capacidad desecante por sí mismo debido a la naturaleza higroscópica del reactivo alcalino. Alternativamente, se puede incluir un desecante separado en el paquete junto con el absorbente de CO2 aunque la mayoría de los materiales que son capaces de absorber CO2 son también lo suficientemente higroscópicos por sí mismos para no ser necesario un desecante separado. No es deseable excederse en el desecado del reactivo que contiene el dispositivo. Esto se puede determinar de la figura 1 cuyos datos indican que se obtuvo más uniformidad en la realización con la cal sodada que con la combinación de cal sodada y filtro molecular. Las posibles razones por las que la combinación de absorbente CO2(en este caso cal sodada) y el filtro molecular no funciona tan bien como la cal sodada por sí sola son:

1.: el filtro molecular (4\ring{A} o 10\ring{A}) también puede absorber CO2 de forma reversible pero con menos capacidad de absorción que la cal sodada o el reactivo alcalino de creatinina. En consecuencia, el CO2 absorbido por el filtro molecular puede "pasar" al reactivo alcalino dando como resultado un descenso de la alcalinidad del reactivo alcalino de creatinina.

2.: la capacidad de absorción de CO2 de la cal sodada se incrementa mediante el incremento de su contenido en agua. El exceso de desecación (es decir una combinación del filtro molecular y la cal sodada) que disminuye el contenido de humedad de la cal sodada puede, por lo tanto, disminuir también su capacidad de absorción de CO2.

En la práctica de la presente invención, el dispositivo de detección de creatinina se empaqueta con el absorbente de humedad de CO2 en un contenedor de barrera para gas y humedad. La cantidad de absorbente no es muy importante ya que cualquier cantidad tenderá a incrementar la vida media del dispositivo. El absorbente de CO2 comprenderá del 25 al 200% de material alcalino sobre una base ponderal.

Por supuesto la cantidad opcional de absorbente de CO2 dependerá del tamaño del paquete en el que el reactivo de creatinina se almacene. Si el paquete es totalmente impermeable al CO2 y la humedad sólo se requerirá el absorbente de CO2 suficiente para retirar cantidades residuales de estos materiales. Como cuestión práctica, se esperaría que el paquete permita alguna fuga limitada de gases ambientales requiriendo por lo tanto el uso de mayores cantidades de absorbente de CO2 para asegurar que el reactivo de creatinina está bien protegido durante toda su vida útil. Los resultados experimentales indican una vida útil aceptable del reactivo alcalino de creatinina con un mínimo de 0,1 g y un máximo de 4 g de absorbente de CO2 presente en el paquete de reactivo que contiene 30 mg del reactivo alcalino. Debido a la naturaleza higroscópica del reactivo alcalino de creatinina seco, puede absorber fácilmente humedad del absorbente de CO2 resultando en detrimento de la acción del agente alcalino. Este fenómeno da mucha importancia al contenido de humedad inicial y limita la cantidad permisible de humedad del absorbente de CO2 a un máximo del 4% (p/p) del absorbente de CO2.

El procedimiento de poner en práctica la presente invención y las ventajas observadas se ilustran mejor con los siguientes ejemplos:

Los ejemplos presentados en la presente memoria descriptiva son sólo ejemplos ilustrativos que no se incluyen en el ámbito de las reivindicaciones.

Ejemplo I. Efecto de la cal sodada sobre la acción del reactivo seco de creatinina

Los cartuchos adecuados para la detección de creatinina se prepararon como sigue:

El reactivo alcalino para creatinina comprende una solución de hidróxido de álcali o una mezcla de material tampón como el fosfato, borato o derivados de guanidina con un hidróxido de álcali. Típicamente, se prepara una mezcla de fosfato de potasio 1M e hidróxido de potasio 2,5M. La mezcla también contiene un aditivo, por ejemplo un monosacárido, disacárido u oligosacárido, para secar el reactivo alcalino en la plataforma del cartucho de polisacárido. Se deposita y se seca un volumen de 15 \muL de reactivo en la plataforma usando un túnel de secado (temperatura de 60ªC) y velocidades de flujo de aire del 75% del máximo durante 15 minutos.

El reactivo DNBA se seca sobre la plataforma del cartucho o se contiene en la cubeta del tampón del dispositivo de prueba. La formulación del reactivo seco DNBA contiene DNBA 1,4M disuelto en LiOH 2,5M con un 2,5% de alcohol de polivinilo soluble en agua para secar el reactivo. Alternativamente, el DNBA se puede disolver con tampón en un intervalo de pH de 6 a 9.

El cartucho de prueba puede contener otros reactivos secos como albúmina sérica humana y anticuerpos para la determinación de la albúmina urinaria como se desvela en la patente de EEUU 5385847 por lo que se puede obtener la razón del analito a la creatinina para normalizar el resultado de la prueba.

Los cartuchos de prueba se ubican en una bolsa de lámina de aluminio sellada que contiene un paquete de cal sodada, es decir cal sodada en una bolsa TYVEK® como desecante.

Incluido en cada uno de los paquetes, estaban la cal sodada (0,25 ó 0,5 g por paquete) o el filtro molecular 10\ring{A} de Multiform Dessicants Inc. (un paquete de 7 g o dos paquetes de 7 g por cartucho). La cal sodada usada fue Sodasorb® de W. R. Grace & Company. Los cartuchos se empaquetaron también con la combinación de 0,25 g o 0,5 g de cal sodada y un solo paquete de 7 g del filtro molecular 10\ring{A}. Réplicas de 5 de los cartuchos se almacenaron a temperatura ambiente o a 60ºC durante 5 días a humedad ambiental. La acción de los cartuchos se evaluó con calibradores de creatinina acuosos (que contienen 150 ó 500 mg/dL de creatinina) con la absorbancia a los 105 segundos de ser usado para calcular la reactividad del cartucho. En base a una curva de calibrado predeterminada para cada lote de cartuchos, la absorbancia se convirtió en unidades clínicas de creatinina usando un algoritmo de conversión. Se calcularon la media y la desviación estándar de las cinco réplicas y se determinó el coeficiente de variación (CV %) mediante la división de la desviación estándar entre la media multiplicado por 100.

Los coeficientes de variación se muestran de forma gráfica en la figura 1. De la figura 1 se puede determinar que comparando la precisión (expresado como porcentaje de CV del reactivo) con diferentes cantidades de filtro molecular, cal sodada, o la combinación de filtro molecular y cal sodada, el porcentaje de CV se mejoró mediante el uso de al menos 0,25 g de cal sodada. Incrementando la cantidad de filtro molecular de 7 g a 14 g empeora la precisión del reactivo de creatinina. Aumentando al doble la concentración de cal sodada o combinando la cal sodada con el filtro molecular no mejora la precisión del reactivo.

Para evaluar la estabilidad del reactivo alcalino de creatinina, los cartuchos reactivos se almacenaron a temperatura ambiente o sometidos a temperaturas de 60ºC durante 5 días. Tanto los cartuchos a temperatura ambiente como los sometidos a alta temperatura se evaluaron con muestras que contienen 150 mg/dL y 500 mg/dL de creatinina. Se pusieron en funcionamiento cinco réplicas por muestra sobre 5 instrumentos DCA 2000® de Bayer Diagnostics. La absorbancia a los 105 segundos se usó para calcular la reactividad de cada cartucho. En base a la curva de calibrado predeterminada para cada lote de cartuchos, la absorbancia se convirtió en unidades clínicas de creatinina usando un algoritmo de conversión. Se calculó la unidad clínica media de las cinco réplicas para cada muestra. La diferencia en las unidades clínicas medias entre los cartuchos a temperatura ambiente y los sometidos a 60ºC durante los cinco días que se empaquetaron con diferentes tipos de desecante se ilustran en la figura 2. Los resultados indican que los cartuchos reactivos empaquetados con cal sodada desecante mostraron la menor diferencia entre los cartuchos a temperatura ambiente y los sometidos a 60ºC, indicando que el reactivo es más estable con cal sodada como desecante. A la inversa, se observó una gran diferencia de estabilidad para los cartuchos reactivos empaquetados con filtro molecular. La combinación de filtro molecular con cal sodada dio como resultado mayor diferencia que sólo con cal sodada.

Ejemplo II

Los cartuchos del tipo descrito anteriormente se empaquetaron con cal sodada (0,1 g/paquete, 0,2 g/paquete o 1 g/paquete), filtro molecular (2 g de 4\ring{A} o 7g de 10\ring{A}), 2 g de gel de sílice o una combinación de filtro molecular y cal sodada. Los cartuchos se almacenaron a temperatura ambiente o a 60ºC durante 5 días. La acción de los cartuchos se evaluó con dos niveles de calibrador de creatinina a 150 y 500 mg/dL de creatinina (figura 3) o tres niveles de calibrador de creatinina a 30, 150 y 500 mg/dL de creatinina (figura 4). Cada una de las cinco réplicas se evaluó respecto a la concentración de creatinina sobre el porcentaje de diferencia entre los cartuchos a temperatura ambiente y los sometidos a alta temperatura calculado de los valores clínicos medios obtenidos. El porcentaje de diferencia medio de los reactivos de creatinina empaquetados con diferentes tipos de desecantes se evaluó con muestras de 150 y 300 mg/dL y se muestra de forma gráfica en la figura 3.

La figura 3 muestra que los cartuchos reactivos empaquetados con 2 g de filtro molecular 4\ring{A} mostraron la peor estabilidad. La diferencia disminuyó de -25% a -13% cambiando el desecante a 7 g de filtro molecular 10\ring{A}. La menor diferencia (menos del 5%) se obtuvo con los cartuchos reactivos empaquetados con 0,1 g de cal sodada. La combinación de 7 g de filtro molecular 10\ring{A} con cal sodada no ofreció ninguna ventaja. De estos datos, se puede concluir que la cal sodada es el mejor desecante para la estabilización del cartucho reactivo.

Los resultados de la figura 4, que muestra las diferencias para las muestras individuales, demuestran que los cartuchos reactivos empaquetados con cal sodada muestran la menor diferencia de estabilidad en los tres niveles del calibrador de creatinina cuando se comparan con los cartuchos empaquetados con gel de sílice o 7 g de filtro molecular 10\ring{A}.

Claims

1. Un procedimiento para la detección de creatinina en el que la creatinina en solución acuosa se pone en contacto con un sistema reactivo seco que comprende un indicador de creatinina a pH superior a 11,5, pH que se mantiene con un material alcalino, caracterizado porque comprende el empaquetamiento del sistema reactivo con un material capaz de absorber CO2 y al menos algo de vapor de agua ambiental en cantidad suficiente para inhibir sustancialmente la formación de ácido carbónico en el área del sistema reactivo para reducir de este modo la neutralización del reactivo alcalino durante el almacenamiento en el que el material absorbente de CO2 está presente en cantidades del 25 al 200% (p/p) del material alcalino.

2. El procedimiento de la reivindicación 1 en el que el sistema de reactivo seco para la detección de creatinina se dispersa en un vehículo absorbente en forma de tira de prueba.

3. El procedimiento de la reivindicación 1 en el que el material absorbente de CO2 se selecciona del grupo que consiste en cal sodada, silicato cubierto de hidróxido de sodio, hidróxido de litio, hidróxido de bario, hidróxido de calcio e hidróxido de potasio.

4. El procedimiento de la reivindicación 3 en el que el material absorbente de CO2 es cal sodada.

5. El procedimiento de la reivindicación 1 en el que el indicador de creatinina es ácido 3,5-dinitrobenzoico y el material alcalino es hidróxido de sodio.

6. Un dispositivo para la detección de creatinina en solución acuosa que comprende un indicador que se proporciona en forma seca para creatinina a pH superior a 11,5 y un material alcalino en el que el dispositivo se empaqueta con un material capaz de absorber CO2 y suficiente vapor de agua en cantidad suficiente para inhibir sustancialmente la formación de ácido carbónico en el área del sistema reactivo en la que el material absorbente de CO2 está presente en cantidades del 25 al 200% (p/p) del material alcalino.

7. El dispositivo de la reivindicación 6 que está en forma de vehículo absorbente en el que se contiene el reactivo seco para la detección de creatinina.

8. El dispositivo de la reivindicación 6 que está en forma de un vaso de reacción que contiene una zona de primera reacción en la que el inmunoensayo se lleva a cabo y una zona de segunda reacción que contiene el sistema reactivo seco.

9. El dispositivo de la reivindicación 6 en el que el material absorbente de CO2 es cal sodada.