ES2234329T3 - Proteinas antisecretoras inducidas por la alimentacion en yema de huevo. - Google Patents
Proteinas antisecretoras inducidas por la alimentacion en yema de huevo.Info
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Abstract
Yema de huevo que tiene un nivel alto de proteína natural antisecretora (NASP), en la que dicha yema de huevo tiene un contenido de NASP que corresponde a al menos 100 unidades FIL/ml, preferentemente al menos 1.000 unidades FIL/ml.
Description
Proteínas antisecretoras inducidas por la
alimentación en yema de huevo.
La presente invención se refiere, en general al
uso de proteínas naturales antisecretoras (NASP) para la
preparación de productos alimentarios y productos farmacéuticos
funcionales enriquecidos con NASP para el tratamiento y profilaxis
de condiciones fisiológicas anormales causadas por niveles
excepcionalmente altos de evacuación de fluido corporal. En
particular, la invención se refiere al uso de yema de huevo que se
ha enriquecido con NASP, para la preparación de tales productos. La
invención también se refiere a productos alimentarios y productos
farmacéuticos preparados de ese modo y a procesos para su
preparación.
En adelante, el término "NASP" se usará para
"proteína natural antisecretora", mientras que el término
"ASP" se usará para "proteína antisecretora" incluido en
proteína natural antisecretora.
De la publicación de la patente sueca número
466.331, se sabe que se puede estimular la formación de un factor
antisecretor o una proteína antisecretora (ASP: también llamada
FIL) añadiendo, a la comida para animales, ciertos azúcares,
aminoácidos y amidas. Los tipos y cantidades de estas sustancias
usadas en la formación de una cantidad que interese de ASP se
determinan por un método descrito en la patente. Brevemente, este
método implica medición de una respuesta de secreción normalizada
en el intestino delgado de ratas. A partir de la patente se hace
evidente que la ASP inducida formada reduce la secreción de fluido
corporal en el intestino. Debido a esto, se pueden evitar o curar
afecciones de diarrea, lo cual significa una producción más segura
de productos animales. En dicha patente, el contenido o cantidad de
proteínas naturales antisecretoras se define por su efecto sobre la
secreción de fluido en el intestino delgado de ratas de laboratorio
que se han provocado con la toxina de cólera. Una unidad de ASP
(unidad FIL) corresponde a una reducción de 50% del flujo de fluido
en el intestino comparado con un testigo sin ASP. Las proteínas
antisecretoras son activas en cantidades extremadamente pequeñas y,
por lo tanto, es más fácil determinarlas por su efecto que por su
masa.
De la solicitud PCT WO97/08202 se conoce la
estructura de ciertas proteínas antisecretoras, y se describen sus
partes activas. Se ha demostrado que una ASP sintética preparada
por ingeniería de recombinación genética o por tecnología de fase
sólida y que tiene estructuras definitivas, tiene una influencia
general de control del flujo de fluido corporal sobre membranas de
células vivas.
De la solicitud PCT WO98/21978 se sabe que se
puede inducir en el cuerpo la formación de ASP mediante el consumo
de cierto tipo de alimentos que tienen actividad enzimática. El
efecto de la inducción y, debido a eso, la formación de ASP varía
según el individuo y sus síntomas y tiene lugar con una fuerza y un
periodo de inducción impredecible hasta el momento. Sin embargo, se
pueden medir después, y se pueden hacer las correcciones necesarias
con la orientación de dichas mediciones.
Mientras que los inventores continuaban
trabajando en la formulación de comida para animales para estimular
la formación de proteínas antisecretoras según la publicación de la
patente sueca nº 466.331, sorprendentemente se ha encontrado que la
habilidad de síntesis y concentración de las proteínas naturales
antisecretoras formadas se distribuye del modo más irregular en el
cuerpo. Se encuentran niveles muy altos de NASP en ciertos órganos,
partes del cuerpo o fluidos corporales y, en particular, en la yema
de huevos de aves. La presente invención se basa en este hecho
sorprendente y, consecuentemente, se refiere al uso de yema de
huevo que se ha enriquecido con respecto a NASP, para la
preparación de productos alimentarios y productos farmacéuticos
enriquecidos con NASP para el tratamiento y profilaxis de
condiciones fisiológicas anormales causadas por evacuación extrema
de fluido corporal. Así, la invención abre posibilidades,
desconocidas hasta el momento, para administrar NASP directamente
en el alimento o en la comida para animales por consumo de la yema
de huevo como tal o en forma de productos alimentarios.
La presente invención se refiere, en general al
uso de proteínas naturales antisecretoras para la preparación de
productos alimentarios y productos farmacéuticos funcionales
enriquecidos con NASP para el tratamiento y profilaxis de
condiciones fisiológicas anormales causadas por evacuación extrema
de fluido corporal y, según un aspecto, se refiere al uso de yema
de huevo que se ha enriquecido con respecto a NASP, para la
preparación de productos alimentarios que tienen un nivel alto de
NASP. Según otro aspecto, la invención se refiere a dicho uso para
la preparación de suministros con propósitos de nutrientes
concretos y productos farmacéuticos que contienen NASP.
Se entiende por "producto alimentario
funcional", en el presente contexto, un producto alimentario que
tiene una función saludable, es decir, que tiene un efecto
beneficioso sobre la salud del ser humano o un animal.
Con la expresión "producto alimentario" se
pretende, en el presente contexto, comparar alimentos para el ser
humano también usados como alimentos para animales. El alimento
puede ser un artículo en forma de productos, cuya preparación
incluye yema de huevo, tales como tortita, tortilla, helado y varios
tipos de pan. La yema de huevo también se puede consumir en forma
de cóctel de huevo o huevos cocidos o pasados por agua. El alimento
también puede estar en forma de pan, galletas, pasta, granos y
cereales, copos o gachas, o mezclado con varias composiciones de
bebida con o sin electrolitos, o una preparación alimentaria que
contiene carne y productos de carne, grasa y productos de grasa o
leche y productos de leche que se han enriquecido con NASP según una
realización de la invención descrita más adelante, según la cual se
ha mezclado NASP con el producto alimentario en una forma más o
menos purificada. La preparación del alimento se puede hacer con
gran flexibilidad aplicando las nociones conocidas por el experto
en la técnica, para cumplir con los requerimientos con respecto a
palatabilidad y variación de comidas.
La yema de huevo proviene de huevos de aves que
se puede usar para consumo humano y animal y se ha enriquecido con
respecto a NASP. Los huevos preferentemente se producen por
gallinas ponedoras pero también se pueden obtener de, por ejemplo,
codorniz y avestruz.
Se entiende por "producto alimentario
enriquecido con NASP" o "producto alimentario que tiene un
nivel alto de NASP" los productos alimentarios que contienen
NASP en una concentración tal que, cuando se consume el producto
alimentario, proporciona en la salud el efecto valioso deseado. Como
se pone en evidencia en el ejemplo 1, particularmente se pueden
medir niveles altos de NASP en huevos. Cuando se consume el
producto enriquecido con NASP se ve que el nivel de ASP en la
sangre excede 0,5 unidades FIL/ml de sangre. La gente sana parece
tener niveles de ASP en la sangre entre 0 y 0,5 unidades FIL/ml de
sangre.
Cuando se estimula la producción de NASP según la
publicación de la patente sueca 466.331, se ha demostrado,
sorprendente e inesperadamente, que se pueden inducir niveles
extremadamente altos de NASP en huevos de aves. En la sangre, el
nivel de NASP, siguiendo tal inducción, normalmente es
0,5-2 unidades FIL/ml de sangre (1 unidad FIL = la
cantidad de NASP que proporciona una inhibición de 50% de
evacuación de fluido en la llamada prueba del asa intestinal en
ratas; se determina el efecto de ASP en ratas en la llamada prueba
del asa intestinal; una sección (asa) del intestino delgado se liga
por medio de una sutura; en el asa se inyecta intravenosamente una
cierta cantidad de toxina de cólera (normalmente 3x10^{-6} g)
conjuntamente con una sustancia de prueba (sustancia antisecretora)
o un tampón/placebo. Como resultado de la acción tóxica se secreta
un fluido en el asa intestinal tras algunas horas. El efecto
antisecretor de la sustancia, expresado en unidades, se calcula a
partir de la razón entre el peso y la longitud del asa afectada
(mg/cm) en animales testigo y de prueba (1 unidad = la cantidad de
sustancia antisecretora que da un 50% de inhibición de la secreción
de fluido en el asa intestinal); comparar la publicación de la
patente sueca nº 466.331 y las referencias 3 y 4 citadas en la
presente memoria). Se pueden desarrollar niveles muy altos de NASP,
preferentemente en la yema de huevo proporcionándole al ave, a
través de la alimentación, combinaciones distintas de aminoácidos,
azúcares y amidas, según la publicación de la patente sueca nº
466.331. Se proporcionan niveles tan altos como desde
aproximadamente 1.000 a aproximadamente 10.000 unidades FIL por ml.
En este contexto, se debería mencionar que el nivel de NASP en yema
de huevo es normalmente, sin la inducción precedente,
aproximadamente 1 unidad FIL/ml; comparar S. Lange et al,
British Poultry Science (1994) 35:615-620.
Según una realización del uso según la invención,
se pueden preparar productos alimentarios enriquecidos con NASP
mezclando NASP como tal con el alimento, habiéndose obtenido el
NASP a partir de yema de huevo enriquecida con NASP en una forma
más o menos purificada.
Así, es posible estimular la formación de NASP en
un ave, como se describe en la publicación de la patente sueca nº
466.331, y después recuperar o concentrar NASP, como también se
describe en dicha patente sueca, a partir de digestión de yema de
huevo en una columna de agarosa y acto seguido eluir esto con una
disolución de alfa-metilglicósido en disolución
salina fisiológica preferentemente tamponada con fosfato. Acto
seguido, el eluente se puede someter a más purificación y
formulación antes de administrarse, por ejemplo en forma de
disolución (dis.).
En este caso, el NASP recuperado o concentrado,
después se puede administrar a animales o humanos, mezclado con una
comida para animales o un alimento, respectivamente, o como
productos más o menos aislados, preparados y formulados como
productos farmacéuticos u otros sanadores. Tales productos
farmacéuticos se preparan de una manera conocida por el experto,
usando excipientes admitidos que incluyen vehículos y diluyentes y
que se formulan como formas sólidas o líquidas dependiendo de la
vía de administración que se pretenda.
Según otra realización del uso según la invención
para la preparación de productos alimentarios enriquecidos con
NASP, se usa la yema de huevo como tal o el huevo completo,
posiblemente de forma procesada, para mezclarlo con el alimento o
comida para animales. Cualquier procesado puede incluir molienda,
lixiviación, extracción, evaporación, ultrafiltración, secado, y
otras operaciones normales para obtener un producto de yema de
huevo enriquecido con NASP, adecuado para propósitos prácticos,
para mezclar con el alimento o comida para animales.
Según la invención, se abren vías novedosas para
lograr los efectos favorables asociados a la toma de NASP. Se puede
usar el efecto de NASP debido a que se puede inducir la
concentración alta de NASP en yema de huevo, sin esperar el tiempo
de retraso causado por la inducción de NASP previamente
conocida.
Así, según un aspecto más la presente invención
se refiere a un proceso para proporcionar yema de huevo a partir de
huevos de aves enriquecida con respecto a NASP, el proceso se
caracteriza por la estimulación de la formación de NASP alimentando
al ave de la que se obtienen los huevos con una comida para animales
inductora de NASP según la publicación de la patente sueca nº
466.331. En particular, el proceso de la invención es aplicable
cuando se alimentan aves gallináceas porque, como se indicó antes,
se ha demostrado, sorprendente e inesperadamente, que se pueden
inducir niveles extremadamente altos de NASP en huevos de dichas
aves. Proporcionando a las gallinas, a través de la alimentación,
distintas combinaciones de aminoácidos, azúcares y amidas, se
pueden desarrollar niveles muy altos (aproximadamente
100-1.000 unidades FIL) de NASP, también como se
indicó antes, preferentemente en la yema de huevo. Debido a esto,
se abre la posibilidad concreta de preparar yema de huevo según la
invención descrita en dicha patente, con niveles extremadamente
altos de NASP. Mezclando tal yema de huevo o sus productos con un
alimento o comida para animales, se puede añadir NASP a seres
humanos o animales en un modo conveniente, seguro y a buen precio.
Así es muy sorprendente y no sabido previamente que se pueden
lograr niveles tan altos de NASP en suministros. Debido a esto, se
puede usar así el efecto de NASP, como se mencionó antes, sin
esperar el tiempo de retraso causado por la inducción de NASP
previamente conocida. También sorprende que NASP mantiene su efecto
incluso cuando se administra oralmente.
Para ciertas condiciones se pueden requerir dosis
altas de NASP. En tales casos, se puede añadir NASP recuperado del
huevo al producto alimentario o se puede preparar NASP para tomarse
en forma de tabletas o suspensiones.
Una realización particularmente preferente
comprende la preparación de polvo de yema de huevo mediante secado
por pulverizado. Tal producto es particularmente muy adecuado en
procesamiento industrial de varios productos alimentarios cuando se
desea lograr el efecto beneficioso de NASP con la toma del producto
alimentario en cuestión. El polvo de yema de huevo permite mezclarse
bien con mucha cantidad de productos diferentes como salchichas y
helado, debido a lo cual será posible lograr una amplia variación
con respecto a estilos de comidas.
El polvo de yema de huevo también es muy adecuado
como intermediario en caso de que se desee preparar un producto
enriquecido o concentrado con NASP por filtración o extracción para
preparación posterior de, por ejemplo, fármacos.
Debido a su peso molecular relativamente bajo,
NASP es comparativamente estable al calor y por lo tanto puede
estar contenido en el alimento antes de prepararlo para el
consumo.
Se ha demostrado que NASP tiene un efecto general
de control sobre el flujo de fluido corporal sobre membranas de
células vivas, debido a lo cual no sólo se pueden aliviar, curar o
evitar condiciones de diarrea sino también la incomodidad debida a
desequilibrio fisiológico o condiciones similares a enfermedades
causadas por evacuación extrema de fluido corporal tales como
inflamaciones, edema, artritis, glaucoma y otras alteraciones
corporales, tales como migrañas, ardores y daños traumáticos en y
sobre el cuerpo. Los productos alimentarios y los productos
farmacéuticos según la invención pueden así usarse para tal
propósito.
La invención se ilustra ahora por medio de los
siguientes ejemplos no limitantes.
Se alimentaron gallinas ponedoras (blanca leghorn
de aproximadamente 32 semanas de edad) con una comida para animales
para gallinas ponedoras compuesta según la publicación de la
patente sueca nº 466.331 y con una comida para animales testigo de
tipo tradicional, 11,4 MJ/kg de comida para animales, 170 g de
proteína bruta por kg de comida para animales. Se recogieron los
huevos tras un periodo de inducción de 2 semanas.
Se recogieron 10 huevos de cada línea, y se
separó manualmente la yema de la clara de estos huevos. Tras diluir
la yema con igual volumen de PBS (disolución salina tamponada con
fosfato) se sometió a una cromatografía de afinidad según un método
descrito antes (I. Lönnroth y S. Lange, Biochimica Biophysica Acta
(1986) 883:138-144). Brevemente, se aplicó yema de
huevo diluida en PBS sobre una columna pequeña que contiene
"Sefarosa 6B" (Pharmacia LKB Biotechnology AB, Sollentuna,
Suecia) habiéndose preequilibrado con PBS. Tras lavarlo con PBS, se
eluyó NASP con
metil-alfa-D-glucósido,
1,0 M en PBS. Tras diálisis frente a PBS la muestra se almacenó a
-20ºC hasta que se hizo la prueba con respecto a NASP según el
modelo de asa intestinal en ratas descrito por Lange (S. Lange, FEMS
Microbiology Letters (1982) 15:239, 242).
| Grupo testigo | Grupo de prueba | |
| Nivel de NASP en yema de | 1,20 | 2,0 (tras dilución 1:100) |
| huevo (unidades FIL/g) | 1,0 (tras dilución 1:1.000) |
Una mujer operada de ostomía, de 42 años de edad,
que tiene un resto de aproximadamente 0,5 m, padecía fuertes
diarreas. Como media, secretaba aproximadamente 1,5 litros de
contenido visceral 4 veces al día. Después de una semana de toma
diaria de helado, preparado con azúcar, nata y yemas de huevo del
ejemplo 1, que corresponde a una toma diaria de 4 g de sustancia
seca de yema de huevo, la frecuencia de defecación descendió a una
vez al día y la cantidad descendió a aproximadamente 350 ml.
Durante tres semanas de tratamiento el peso de la mujer aumentó 3,5
kg. Después de una semana más, comió la misma cantidad de helado
preparado con huevos corrientes según la misma receta. En tres días,
la frecuencia de defecación y la cantidad ascendió a los mismos
valores que antes de la prueba. Después de una semana más, la
prueba se reanudó, y en dos días la defecación disminuyó a los
mismos valores que durante la prueba previa.
Se dividieron cuatro terneros que tienen un peso
vivo de 50 kg en dos grupos, cada grupo contenía dos terneros. A
los terneros del grupo testigo se les suministró nutrientes para
ternero en forma de sustituto de leche comercial. En la línea de
prueba, se incorporó yema de huevo del experimento del ejemplo 1,
correspondiente a la dosis diaria de dos yemas de huevo. La
alimentación continuó durante siete días. Se midió el nivel de ASP
en la sangre antes y después del experimento.
| Nivel de ASP (unidades FIL/ml de plasma) | Grupo testigo | Grupo de prueba |
| Antes del experimento | 0,3 | 0,1 |
| Después del experimento | 0,1 | 0,9 |
La diarrea no es una queja habitual en perros,
particularmente en perros que tienen la posibilidad de elegir por
si mismos, durante los paseos en el campo, su toma de alimento. Un
perro macho de ese tipo pastor alemán de 1,5 años de edad y que
tiene un peso de aproximadamente 40 kg padecía, durante algún
tiempo, fuerte diarrea y acuosa y periódicamente defecación de
sangre. El perro también vomitaba intermitentemente. Se envió al
veterinario y prescribió antibióticos para tomar oralmente en forma
de tabletas durante una semana. Durante este periodo el perro comió
menos cantidades de pienso seco comercial para perros. No se
observó disminución de la diarrea. Tras este tratamiento de
antibiótico al perro se le suministró pienso seco remojado en polvo
de yema de huevo del ejemplo 6 en una cantidad de corresponde a una
yema de huevo al día, durante cuatro días. Después de un día y una
noche el perro tuvo defecación sólida y, después de tres días, se
le consideró perfectamente sano. En ningún momento anterior el
propietario del perro había observado una recuperación tan
rápida.
Mediante la presente invención, completamente
novedosa y previamente desconocida, se proporcionan posibilidades
para administrar NASP con grados de independencia completamente
novedosos, previamente desconocidos. La inducción de NASP descrita
en la solicitud PCT/SE97/01918 (WO 98/21978) puede ser difícil de
mantener durante largo tiempo debido al hecho de que la dieta es más
fácilmente percibida como monótona. Mediante el presente
descubrimiento, se pueden preparar productos alimentarios con alta
palatabilidad y buena aceptación con costes de procesado moderados.
En caso de tratamientos de enfermedad largos o de respuesta débil a
alimentos inductores de NASP, se puede administrar NASP en forma de
suministros que tienen una dosis predeterminada más alta o más baja
adaptada al efecto deseado sobre la calidad de vida o la eficacia
en el resultado físico. En caso de administración que dura largo
tiempo, se puede evitar aversión (repugnancia) a la comida porque
se pueden preparar un gran número de productos que tienen sabor y
estilo de comida variado. Los productos alimentarios se pueden
preparar industrialmente como alimentos semifabricados o comidas
terminadas o como artículos adecuados como materia prima en la
preparación de fármacos o en la fabricación de concentrados de
NASP. El concentrado se puede recuperar a partir de yema de huevo o
preferentemente de polvo de yema de huevo por extracción o
filtrado.
Claims (24)
1. Yema de huevo que tiene un nivel alto de
proteína natural antisecretora (NASP), en la que dicha yema de
huevo tiene un contenido de NASP que corresponde a al menos 100
unidades FIL/ml, preferentemente al menos 1.000 unidades FIL/ml.
2. La yema de huevo de la reivindicación 1, que
tiene un contenido de NASP que corresponde a
1.000-10.000 unidades FIL/ml.
3. La yema de huevo de la reivindicación 1 ó 2,
que proviene de huevos de aves gallináceas.
4. El uso de yema de huevo según cualquiera de
las reivindicaciones 1-3, para la preparación de
productos alimentarios funcionales enriquecidos con NASP.
5. El uso de yema de huevo según cualquiera de
las reivindicaciones 1-3, para la preparación de
productos farmacéuticos para el tratamiento y profilaxis de
condiciones similares a enfermedades causadas por evacuación extrema
de fluido corporal.
6. El uso, según la reivindicación 4 ó 5, de NASP
como tal, recuperado de yema de huevo enriquecida con NASP en forma
pura o concentrada.
7. El uso según la reivindicación 4 ó 5,
caracterizado porque la yema de huevo se usa como tal o en
una forma obtenida por procesado tal como molienda, lixiviación,
extracción, evaporación, filtración con membrana, secado y
operaciones normales similares.
8. El uso según cualquiera de las
reivindicaciones 4-7, caracterizado porque
la yema de huevo se ha obtenido por la alimentación de un ave
productora de huevos con una comida para animales inductora de
NASP.
9. El uso según la reivindicación 8,
caracterizado porque la inducción de NASP se ha efectuado
por incorporación, a la comida para animales, de aminoácidos,
azucares y amidas en cantidades y proporciones tales que se ha
estimulado la formación de NASP.
10. El uso según la reivindicación 8,
caracterizado porque la inducción de NASP se ha efectuado
por incorporación, a la comida para animales, de productos que
tienen actividad enzimática que estimula la formación de NASP.
11. El uso según la reivindicación 10,
caracterizado porque los productos que tienen actividad
enzimática son cereales malteados.
12. Un proceso para proporcionar yema de huevo,
según una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, a
partir de un ave productora de huevos, habiéndose enriquecido la
yema de huevo con respecto a proteínas naturales antisecretoras
(NASP), caracterizado por la alimentación del ave con una
comida para animales inductora de NASP.
13. El proceso de la reivindicación 12,
caracterizado porque el ave es un ave gallinácea.
14. El proceso de la reivindicación 12 ó 13,
caracterizado porque la comida para animales inductora de
NASP contiene aminoácidos, azúcares y amidas en una cantidad tal
que se estimula la formación de NASP.
15. El proceso de la reivindicación 12 ó 13,
caracterizado porque la comida para animales contiene
productos que tienen actividad enzimática que estimula la formación
de NASP.
16. El proceso de la reivindicación 15,
caracterizado porque los productos que tienen actividad
enzimática son cereales malteados.
17. Un producto alimentario que tiene un nivel
alto de proteínas naturales antisecretoras (NASP),
caracterizado porque contiene yema de huevo según cualquiera
de las reivindicaciones 1-3 o NASP de yema de huevo
en una forma más o menos purificada.
18. El producto alimentario de la reivindicación
17, caracterizado porque se ha obtenido el nivel alto de
NASP por incorporación al producto alimentario, cuando se prepara,
de yema de huevo enriquecida con NASP según cualquiera de las
reivindicaciones 1-3 o sus formas procesadas como
fuente de NASP.
19. El producto alimentario según la
reivindicación 17, caracterizado porque se ha obtenido el
nivel alto de NASP añadiendo al producto alimentario, cuando se
prepara, NASP como tal en forma pura o concentrada, obtenido de yema
de huevo enriquecida con NASP según cualquiera de las
reivindicaciones 1-3.
20. El producto alimentario de la reivindicación
17, caracterizado porque consiste en yema de huevo como
tal.
21. El producto alimentario según cualquiera de
las reivindicaciones 17-19, caracterizado
porque consiste en tortita, tortilla, helado, huevos cocidos o
pasados por agua.
22. Productos farmacéuticos para el tratamiento y
profilaxis de condiciones similares a enfermedades causadas por
evacuación extrema de fluido corporal, caracterizados porque
contienen, además de excipientes y adyuvantes tradicionales,
proteínas naturales antisecretoras (NASP) que provienen de yema de
huevo enriquecida con NASP según cualquiera de las reivindicaciones
1-3.
23. Un proceso para preparar un producto
alimentario que tiene un nivel alto de proteínas naturales
antisecretoras (NASP) según cualquiera de las reivindicaciones
17-21, caracterizado por introducir, en el
alimento o comida para animales, yema de huevo enriquecida con NASP
según cualquiera de las reivindicaciones 1-3 o sus
formas procesadas o NASP más o menos purificado obtenido de yema de
huevo.
24. El proceso de la reivindicación 23,
caracterizado porque se han obtenido las formas procesadas
de yema de huevo por molienda, lixiviación, extracción,
evaporación, filtración con membrana, secado y operaciones normales
similares.
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