ES2237763T3 - Procedimiento y medio para la determinacion del ioduro. - Google Patents
Procedimiento y medio para la determinacion del ioduro.Info
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Abstract
LA INVENCION TRATA DE UN PROCEDIMIENTO Y UN MEDIO PARA LA DETERMINACION DE YODURO EN SOLUCIONES ACUOSAS, EN PARTICULAR EN LA ORINA. EL METODO SE CARACTERIZA PORQUE LA SOLUCION DE PRUEBA SE MEZCLA CON UN CROMOGENO Y UNA SOLUCION DE PERACIDO Y LA REACCION CROMATICA SE EVALUA VISUAL O FOTOMETRICAMENTE. EN EL CASO DE LA DETERMINACION DE YODURO EN ORINA LA PRUEBA SE TRATA PREVIAMENTE CON AYUDA DE UN CARBON ACTIVO PURIFICADO.
Description
Procedimiento y medio para la determinación del
ioduro.
La invención se refiere a procedimientos y medios
para el análisis semicuantitativo de ioduro en soluciones acuosas,
preferentemente en orina.
El análisis del ioduro en la orina desempeña un
papel importante en el diagnóstico clínico para controlar el
funcionamiento de la tiroides. Asimismo, el análisis del ioduro en
los alimentos y piensos adquiere cada vez más importancia. Hasta
ahora no se han descrito métodos rápidos que permitan su utilización
rutinaria para el análisis del ioduro en la orina.
En la mayoría de los procedimientos conocidos se
procede a un tratamiento previo de la orina con un ácido fuerte o
mediante incineración a altas temperaturas. A continuación se
analiza el ioduro midiendo la reducción de los iones de cerio (IV) a
iones de cerio (III) por el efecto catalítico del ioduro (reacción
de Sandell-Kolthoff). El tratamiento previo con
ácidos fuertes (clorato de potasio en ácido perclórico al 70%) o la
incineración en seco de la orina con carbonato de potasio sirve para
eliminar las sustancias que pueden influir sobre los iones de cerio
durante la reducción. Durante esta operación se generan vapores
tóxicos de ácido perclórico y, como es sabido, los percloratos así
formados son explosivos.
En Anal. Chim. Acta 282, 87 (1993) se describe un
procedimiento para el análisis de ioduro con cloropromacina y
peróxido de hidrógeno que, sin embargo, resulta altamente
susceptible a muchas sustancias presentes en la orina, así como en
alimentos y piensos. Además, en DE-A 37 43 224 se
describe un procedimiento para analizar perácidos en el que se añade
un cromógeno y ioduro a la solución de ensayo. Sin embargo, un
técnico en la materia no puede deducir de dicha publicación que esta
reacción se pueda utilizar para demostrar la presencia de
ioduro.
La tarea de la invención consiste en ofrecer una
prueba sencilla y rápida para determinar la presencia de ioduro, con
la cual incluso el personal no formado pueda determinar
semicuantitativamente y cuantitativamente incluso cantidades
reducidas de ioduro en soluciones acuosas sin necesidad de
tratamientos previos y sin generar sustancias tóxicas.
La invención tiene por objeto un procedimiento
para el análisis semicuantitativo del ioduro en la orina, que se
caracteriza porque la muestra de orina se trata previamente con la
ayuda de un carbón activo depurado y, a continuación, la solución de
ensayo se mezcla con un cromógeno y una solución de perácido, de
modo que la reacción cromática se evalúa por medios visuales o
fotométricos. Resulta conveniente que el carbón activo depurado se
encuentre en una columna de extracción.
Otro objeto de la invención consiste en los
medios, es decir, las composiciones reactivas para determinar la
presencia de ioduro en la orina, que contienen un cromógeno, una
solución de perácido y una columna de extracción provista de un
carbón activo.
Se ha observado que el procedimiento
correspondiente a la invención resulta menos susceptible a
perturbaciones y puede efectuarse con mucha más rapidez que los
procedimientos conocidos para determinar la presencia de iodo en la
orina. Es posible detectar concentraciones de ioduro de hasta 6
\mug/dl junto con una alta concentración de matriz aniónica. En
las soluciones acuosas sin matriz orgánica, el umbral de detección
de ioduro es de 0,2 \mug/dl.
En el procedimiento descrito en la presente
invención se pueden utilizar todos los cromógenos conocidos por la
literatura especializada que se oxidan en presencia de perácidos con
ioduro como catalizador. Preferentemente, se utilizan aminas
aromáticas, como son o- y p-fenilendiamina,
bencidina y los derivados de bencidina, en particular la
tetrametilbencidina. La concentración del cromógeno debe oscilar
entre 1 y 5 mM, y preferentemente será aproximadamente de 2,5
mM.
Como soluciones de perácidos pueden utilizarse,
por ejemplo, soluciones acuosas de ácido peracético, ácido
perpriónico, ácido perbutírico, ácido perbenzoico, etc.,
utilizándose preferentemente una solución acuosa de ácido
peracético. La concentración de esta solución debe oscilar entre el
1% y el 5%, y preferentemente será aproximadamente del 2,5%.
El medio descrito en la invención puede estar
formado por dos soluciones, una solución de perácido y una solución
de un cromógeno, o bien, junto con la solución de perácido, el
cromógeno puede estar mezclado con un ácido orgánico, formando una
matriz absorbente impregnada con dicha mezcla.
Como matriz absorbente pueden utilizarse todas
aquellas matrices que suelen utilizarse para dichas pruebas rápidas.
Lo más común es utilizar papel filtro, aunque también pueden
emplearse otros productos absorbentes de celulosa, fibra de vidrio o
plástico. Los soportes absorbentes, que preferentemente serán de
papel filtro, se impregnan de la forma conocida con las soluciones
que contienen el cromógeno y, en su caso, otros reactivos
necesarios. Los papeles impregnados y secados pueden cortarse en
zonas cuadradas o rectangulares que pueden pegarse o adherirse, de
forma conocida, sobre películas de plástico o tiras de papel o
metal.
Asimismo, los soportes absorbentes pueden
colocarse sobre una cinta de plástico incluso antes de la
impregnación en forma de tiras, y cortarse perpendicularmente a lo
largo de la tira para formar varillas manejables, después de la
impregnación.
A fin de que la reacción tenga lugar en un
intervalo de pH óptimo, la solución de cromógeno contiene igualmente
depresores. Si el análisis de ioduro se realiza con la ayuda de una
matriz impregnada con las sustancias necesarias, resulta conveniente
la presencia de depresores.
Pueden utilizarse como depresores aquellos que
presenten un pH entre 3 y 7 y no perturben la reacción de detección.
La concentración de depresores que debe utilizarse depende del pH de
la solución de ensayo y de los ácidos o bases libres que ésta pueda
contener. Como depresores se pueden utilizar sales comunes, como
citratos, fosfatos, boratos, etc. Preferentemente se utilizan ácidos
orgánicos sólidos, como ácido cítrico, ácido malónico, ácido
succínico y sus sales, en particular ácido cítrico. Pueden
emplearse, en lugar de soluciones de depresores listos para su uso,
concentrados comerciales de depresores.
En caso de utilizarse tetrametilbencidina como
cromógeno, el valor cromático más intenso se alcanza con un pH en
torno a 4. También pueden utilizarse soluciones de depresores con un
pH de hasta 7, si bien se obtienen unos umbrales de detección algo
peores.
Para determinar la presencia de ioduro en la
orina es importante que la solución de ensayo se trate previamente
con la ayuda de carbonos activos, en particular con un carbón activo
depurado. En vista de que las sustancias sulfurosas que contienen
los carbones activos comerciales ejercen una influencia negativa
sobre las reacciones cromáticas, generalmente es necesario
depurarlos. Para ello se trata el carbón activo con un ácido
clorhídrico 1 N, y a continuación se realiza su acondicionamiento
con la solución de depresores utilizada para el análisis.
Puesto que el carbón activo se envasa
preferentemente en una columna, el tamaño de los poros de éste debe
situarse entre 50 y 150 \mum. Si se emplean poros más pequeños se
limita la permeabilidad para soluciones acuosas, si se utilizan
poros más grandes se reducen las propiedades de absorción del carbón
activo. La columna de extracción contiene entre 0,1 y 0,4 g,
preferentemente 0,2 g de carbón activo para un análisis. Por
supuesto, el análisis puede efectuarse mediante el llamado método
por lotes.
Para determinar la presencia de ioduro en la
orina con ayuda de una columna de extracción que contiene carbón
activo, la muestra de orina diluida con la solución de depresores se
vierte en la columna acondicionada, desechándose después. A
continuación, la muestra de orina que se desea analizar se depura
con ayuda de la columna y se traslada a una copa graduada o a una
cubeta. Tras este tratamiento previo, la muestra de orina se mezcla
con la solución de cromógeno y, a continuación, con la solución de
perácido, y se evalúa la reacción cromática tras un tiempo
predeterminado, por ejemplo, de un minuto mediante una escala
cromática o por medios fotométricos. El margen de detección de
ioduro con el procedimiento descrito en la invención se sitúa entre
6 y 100 \mug/dl de ioduro. En el análisis de ioduro con ayuda de
un soporte absorbente, el margen de detección es de 20 a 200
\mug/dl de ioduro.
El tratamiento previo de la muestra con carbón
activo puede suprimirse, por ejemplo, si el análisis de ioduro se
realiza en agua mineral, agua marina, sal común, etc. En aquellos
casos en que debe retirarse una matriz por provocar alteraciones o
en ausencia de sustancias que tienen un color propio y que, por
ende, dificultan la evaluación fotométrica o visual, por ejemplo con
determinados alimentos y piensos como la leche, es necesario el
tratamiento previo de la muestra.
Se disuelven 600 mg de tetrametilbencidina en
1000 ml de etanol (2,5 mM).
La solución de depresores lista para su uso (pH
4) contiene 11,7 g de ácido cítrico, 4,4 g de hidróxido de sodio y
1,6 g de cloruro de hidrógeno en 1000 ml de agua.
La solución de perácido contiene 2,5 g de ácido
peracético en 100 ml de agua.
En una columna de extracción con 0,2 g de carbón
activo se añaden sucesivamente ácido clorhídrico 1 N y la solución
de depresores mencionada en el ejemplo 1. Se vierten 2 ml de la
muestra de orina disuelta en una solución de depresores (1 ml de
orina, 4 ml de solución de depresores) y se desecha. A continuación
se vierten en la columna otros 2 ml de la muestra disuelta de orina
y se trasladan a una copa
graduada.
graduada.
La muestra de orina se mezcla con 200 \mul de
una solución de tetrametilbencidina a 2,5 mM, y a continuación con
una gota de una solución de ácido peracético al 2,5%. Dependiendo de
la concentración de ioduro se producirá una reacción cromática entre
verde y azul, que se compara transcurrido un minuto con una escala
cromática.
Para la evaluación fotométrica, la solución se
vierte en una cubeta de 10 mm y el máximo de absorción se mide a 646
nm.
En una mezcla formada por 500 ml de etanol y 100
ml de agua se disuelven agitando sucesivamente 1,5 g de
tetrametilbencidina y 2,5 g de ácido
cítrico.
cítrico.
Se impregna con la solución que contiene los
cromógenos una tira de papel de 6 mm de ancho pegada sobre un
soporte de película blanca de PVC de 8 cm de ancho (cantidad a
aplicar: 1 ml de solución por metro de papel). Una vez seca, la
película se corta en tiras de 6 mm de ancho (varillas de
prueba).
En la muestra de orina preparada según el ejemplo
2a) se añade una gota de una solución de ácido peracético al 2,5% y
se agita. La varilla de prueba se sumerge inmediatamente durante
aproximadamente un segundo. Se elimina la solución sobrante. Tras
otros 10 segundos se realiza una comparación con una escala
cromática. Mediante las distintas tonalidades de azul de la zona de
reacción se distinguen las siguientes concentraciones de ioduro: 20,
50, 100, 200
\mug/dl.
\mug/dl.
Claims (2)
1. Procedimiento semicuantitativo para determinar
la presencia de ioduro en la orina en concentraciones de hasta 200
\mug/dl de ioduro, que se caracteriza porque la solución de
muestra se trata previamente con ayuda de un carbón activo depurado
y, a continuación, se mezcla con un cromógeno y una solución de
perecido, de modo que la reacción cromática se evalúa por medios
visuales o fotométricos.
2. El procedimiento descrito en la reivindicación
1, que se caracteriza porque para determinar la presencia de
ioduro en la orina, la muestra se trata previamente con ayuda de una
columna de extracción que contiene un carbón activo depurado.
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