ES2239010T3 - Extractos de chrysanthemum matricaire (tanacetum parthenium) utilizados contra los trastornos inflamatorios. - Google Patents

Abstract

Utilización de un extracto de Chrysanthemum parthenium matricaire para la preparación de una composición tópica destinada al tratamiento y prevención de los trastornos inflamatorios y desórdenes relacionados.

Description

Extractos de Chysanthemum Matricaire (Tanacetum parthenium) utilizados contra los trastornos inflamatorios.

Campo de la invención

La presente invención se refiere al tratamiento tópico y a la prevención de los trastornos inflamatorios y desórdenes relacionados utilizando extractos de Chrysanthemum matricaire (Tanacetum parthenium).

Antecedentes de la técnica anterior

Se conoce desde la Edad Media que el Tanacetum parthenium una planta comúnmente conocida como Chrysanthemum matricaire, presenta propiedades médicas significativas cuando se administra por vía oral, utilizada como un febrífugo general, de ahí su nombre común. Muchos han aislado extractos de la planta que han sido utilizados oralmente para el tratamiento de las migrañas, artritis y trastornos bronquiales (ver, Johnson et al., patente US nº 4.758.433, que describe el tratamiento de una multiplicidad de enfermedades mediante la administración oral, por inhalación, inyección o supositorios del extracto y ver el documento WO 94 06800, que discute un extracto de Chrysanthemum parthenium matricaire que contiene partenolide).

Los extractos de Chrysanthemum parthenium matricaire contienen muchos componentes. Aunque no todos los componentes han sido aislados y caracterizados, los componentes conocidos de un extracto de Chrysanthemum parthenium matricaire contienen un número significativo de componentes biológicamente activos. Hasta la fecha, los constituyentes químicos de un extracto completo de Chrysanthemum parthenium matricaire son los siguientes: epigenin-7-glucósido, epigenin-7-glucorónido, 1-\beta-hidroxiarbusculina, 6-hidroxikaempferol-3,7-4'-trimetiléter (Tanetina), 6-hidroxikaempferol-3,7-dimetiléter, 8-\beta-reinosina, 10-epicanina, ácido ascórbico, beta-caroteno, calcio, cromo, crisantemolido, crisantemonina, crisarteno-A, crisarten-C, crisoeriol-7-glucurónido, cobalto, cosmosiina, epoxiartemorina, luteolin-7-glucósido, luteolin-7-glucoronido, mangnoliolido, partenolide, quercetagentin-3,7,3'-trimetiléter, quercetagetin-3,7-dimetiléter, reinosina, tanapartina, tanapartin-1\alpha,4\alpha-epóxido, tanapartin-1\beta,4\beta-epóxido, \beta-costunolido, 3-\beta-hidroxi-partenolide, y 3,7,3'-trimetoxiquercetagetina. El papel específico que juega cada uno de dichos compuestos componentes en la actividad biológica del Chrysanthemum parthenium matricaire es desconocido hasta la fecha. Sin embargo, se conoce alguna información sobre las reacciones alérgicas al extracto. Se cree que muchas de tales reacciones alérgicas son debidas a las \gamma-lactonas \alpha-insaturadas tales como el partenolide. (Véase, Arch. Dermatol. Forsch. 251(3):235-44 (1975); Arch. Dermatol. Forsch. 255(2):111-21 (1976); Contact Dermatitis, 38(4):207-8 (1988); Am. J. Contact Dermatol. 9(1):49-50 (1998); Br. J. Dermatol, 132(4):543-47 (1995).

A pesar de la existencia de procedimientos orales para la utilización de los extractos de Chrysanthemum parthenium matricaire, no existen procedimientos definidos para la utilización tópica de tales extractos en el tratamiento o la prevención de los trastornos inflamatorios y desórdenes relacionados. Además, no existen conocimientos que describan la utilización de un extracto de Chrysanthemum parthenium matricaire que no contenga las \gamma-lactonas \alpha-insaturadas que producen alergias. Estos son los dos ámbitos a los que se refiere la presente invención.

Sumario de la invención

La presente invención se refiere a la utilización de un extracto de Chrysanthemum parthenium matricaire para a la preparación de una composición tópica destinada al tratamiento o la prevención de los trastornos inflamatorios y desórdenes relacionadas. La utilización de la presente invención incluye la utilización en los casos en los que los trastornos inflamatorios y desórdenes relacionados están relacionados con la piel. Además, la presente invención incluye la utilización de un extracto de Chrysanthemum parthenium matricaire en la que dicho extracto está sustancialmente libre de \gamma-lactonas \alpha-insaturadas. Además, la presente invención incluye la utilización de un extracto de Chrysanthemum parthenium matricaire destinado al tratamiento y la prevención de los trastornos inflamatorios y desórdenes relacionados de la piel en el que dicho extracto está sustancialmente libre de lactona \alpha-insaturada.

Descripción detallada de la invención

La presente invención incluye la utilización de un extracto de Chrysanthemum parthenium matricaire para la preparación de una composición tópica destinada al tratamiento y la prevención de los trastornos inflamatorios y desórdenes relacionados.

Los trastornos inflamatorios y desórdenes relacionados que se pueden tratar o prevenir mediante la utilización tópica de las composiciones de la presente invención incluyen, sin limitarse a ellos, los siguientes: artritis, bronquitis, dermatitis de contacto, dermatitis atópica, soriasis, dermatitis seborreica, eczema, dermatitis alérgica, erupciones polimórficas ligeras, dermatosis inflamatoria, foliculitis, alopecia, hiedra venenosa, mordeduras de insectos, inflamación del acné, irritaciones inducidas por factores extrínsecos que incluyen, pero sin ser limitante, productos químicos, trauma, polucionantes (tales como el humo de cigarrillo) y la exposición al sol, trastornos secundarios producidos por la inflamación que incluyen, pero sin ser limitante, sorosis, hiperqueratosis, pruritos, hiperpigmentación postinflamatoria, cicatrización y semejantes. Preferiblemente, los trastornos inflamatorios y desórdenes relacionados que se pueden tratar o prevenir utilizando los procedimientos de la presente invención son artritis, dermatosis inflamatoria, dermatitis de contacto, dermatitis alérgica, dermatitis atópica, erupciones polimórficas ligeras, irritación, que incluye eritema inducido por factores extrínsecos, inflamación del acné, soriasis, dermatitis seborreica, eczema, yedra venenosa, mordeduras de insectos, foliculitis, alopecia y desórdenes secundarios y semejantes.

Chrysanthemum parthenium matricaire es una planta perteneciente a la familia de las Asteraceas/Compuestas que técnicamente se conoce como Tanacetum parthenium, Altamisa, Crisantemo, Leucantemun o Pyrethrum parthenium.

Con el término "cantidad efectiva" se hace referencia al porcentaje en peso del extracto de Chrysanthemum parthenium matricaire en la composición tópica que se necesita para el tratamiento de un trastorno inflamatorio o desorden relacionado en un paciente. Preferentemente la cantidad efectiva está comprendida aproximadamente entre el 0,0005 y aproximadamente el 20% en peso de la composición. Más preferentemente, la concentración debe ser inferior a aproximadamente el 10% en peso de la composición tópica. Todavía más preferentemente está comprendida aproximadamente entre el 0,001% y aproximadamente el 10% y el más preferente entre aproximadamente el 0,01% y el 2%.

Con el termino "paciente" se hace referencia a un mamífero que está siendo tratado profilácticamente debido a un desorden inflamatorio y/o a un desorden inflamatorio con síntomas visibles. Preferiblemente el paciente es un ser humano.

Además, la invención incluye la utilización de una composición que contiene un extracto de Chrysanthemum parthenium matricaire destinada a tratar y prevenir los trastornos inflamatorios y los desórdenes de la piel relacionados.

Con los términos, trastorno inflamatorio y condición relacionada, Chrysanthemum parthenium matricaire, cantidad efectiva y paciente se hace referencia al significado anteriormente mencionado. El término "piel" incluye todas las superficies de un paciente, tales como el cuero expuesto o las superficies recubiertas por pelo.

La presente invención también incluye la utilización de un extracto de Chrysanthemum parthenium matricaire en el que dicho extracto está privado de \gamma-lactonas \alpha-insaturadas.

Con el término, trastorno inflamatorio y desorden relacionado, feverfew, cantidad efectiva y paciente se hace referencia al significado anteriormente mencionado. Con el término "sustancialmente libre de \gamma-lactona \alpha-insaturada", se hace referencia a un extracto de Chrysanthemum parthenium matricaire con un contenido en peso de la \gamma-lactona \alpha-insaturada que se encuentra en los extractos de Chrysanthemum parthenium matricaire inferior a aproximadamente 0,2% en peso. Dichas \gamma-lactonas \alpha-insaturadas incluyen, pero sin ser limitante, el partenolide (\gamma-lactona de ácido ([1\alphaR-(1a R*,4E,7a S*,10a S*,10b R*)]2,3,4,7,7a,8,10a,10b-octahidro-1a, 5-dimetil-8-4,5\alpha-epoxi-6\beta-hidroxi-germacra-1(10),11(13)-dien-12-oico), 3-\beta-hidroxi-partenolide, costunolide, 3-\beta-costunolido, artemorina, 8-\alpha-hidroxi-estafiatina, crisantemolide, magnoliolido, tanapartina, tanaparti-1\alpha,4\alpha-epóxido, tanapartin-1\beta,4\beta-epóxido, chrisantemonina y otros sesquiterpenos. Preferiblemente, el extracto de Chrysanthemum parthenium matricaire presenta un contenido en peso de \gamma-lactona \alpha-insaturada inferior a aproximadamente 0,2. Preferentemente la \gamma-lactona \alpha-insaturada es partenolide. El procedimiento para preparar dicho extracto libre de partenolide se describe en la solicitud de una patente italiana (M199A0Q1244, solicitada el 3 de Junio de 1999) que se incorpora como referencia en la presente solicitud.

Debido a que las \gamma-lactonas \alpha-insaturadas son responsables de algunas de las reacciones alérgicas al extracto de Chrysanthemum parthenium matricaire, las composiciones tópicas preparadas a partir de extractos libres de \gamma-lactona \alpha-insaturada se espera que sean no-irritantes.

La presente invención también incluye la utilización de un extracto de Chrysanthemum parthenium matricaire destinado al tratamiento de los trastornos inflamatorios y desórdenes relacionados de la piel en la que dicho extracto está sustancialmente libre de \gamma-lactona \alpha-insaturada.

Con los términos trastornos inflamatorios y desórdenes relacionados, Chrysanthemum parthenium matricaire, cantidad efectiva, paciente, piel y libre de \gamma-lactona \alpha-insaturada se hace referencia al significado anteriormente mencionado.

Además de los extractos de Chrysanthemum parthenium matricaire, se pueden incluir otras sustancias, tales como agentes biológicamente activos, excipientes farmacéuticos y agentes cosméticos en las composiciones tópicas de la presente invención.

Los agentes biológicamente activos pueden incluir, pero no quedan limitados, compuestos flavonoides/flavonas que incluyen, pero sin ser limitante, tanetina, 3,7,3'-trimetoxyquercetagetina, apigenina y sus derivados. Cuando se encuentran presentes compuestos flavonoides/flavonas, se encuentran presentes en concentraciones comprendidas aproximadamente entre el 0,001% y aproximadamente el 0,5% preferentemente, aproximadamente entre el 0,005% y el 0,2% con base en el peso de la composición tópica.

Los agentes biológicamente activos adicionales incluyen, pero sin ser limitante, filtros solares, angentes antiarruga/antienvejecimiento, agentes antihongo, agentes antibióticos, agentes antiacné y agentes antisoriosis, agentes decolorantes, donde dichos agentes se pueden utilizar siempre y cuando sean físicamente y químicamente compatibles con otros componentes de la composición tópica.

Las composiciones de la presente invención pueden incluir componentes activos en la piel adicionales. Los componentes activos pueden ser, pero sin quedar limitados, compuestos vitamínicos. Agentes clarificadores de la piel (ácido kojico, ácido ascórbico y derivados de los mismos tales como el ascorbílpalmitato y semejantes); agentes antioxidantes tales como el tocoferol y ésteres; quelantes de los metales, retinoides y derivados, agentes humectantes, ácidos hidroxílicos tales como el ácido salicílico, filtros solares tales como el ocrilmetoxicinamato, oxibenzona, avobenzona y semejantes, bloqueadores del sol tales como el óxido de titanio y óxido de zinc y protectores de la piel. Se pueden utilizar mezclas de los componentes activos en la piel anteriores.

Los filtros solares que se pueden utilizar en las composiciones de la presente invención pueden incluir, pero sin ser limitante, filtros solares inorgánicos u orgánicos, tales como octilmetoxicinamato y otros compuestos de cinamato, dióxido de titanio, óxido de zinc y semejantes.

Los agentes antiarruga/antienvejecimiento pueden incluir, pero sin queda limitados, retinoides (por ejemplo, ácido retinoico, retinol, retinal, retinilacetato y retinilpalmitato) \alpha-hidroxiácidos, azúcares de galactosa (p. ej. melibiosa y lactosa), antioxidantes, que incluyen, pero sin ser limitante, antioxidantes solubles en agua tales como los compuestos de sulfidrilo y sus derivados (por ejemplo, metabisulfito sódico y N-acetil-cisteina, acetil-cisteína), ácido lipoico y ácido dihidrolipoico, resveratrol, lactoferina, ácido ascórbico y derivados del ácido ascórbico (por ejemplo, palmitato de ascorbilo y polipéptido de ascorbilo). Los antioxidantes liposolubles adecuados para la utilización en las composiciones de la presente invención incluyen, pero sin ser limitante, tocoferoles (por ejemplo, tocoferil acetato, \alpha-tocoferol), tocotrienoles y ubiquinona. Los extractos naturales que contienen antioxidantes adecuados para la utilización en las composiciones de la presente invención incluyen, pero sin ser limitante, extractos que contienen flavonoides, compuestos fenólicos, flavonas, flavononas, isoflavonoides, mono, di- y tri-terpenos, esteroles y sus derivados. Los ejemplos de dichos extractos naturales incluyen las semillas de uva, el té verde, la corteza de pino, los extractos de propolis y los extractos de las legumbres y semejantes.

Los agentes antihongo incluyen, pero sin ser limitante, miconazol, econazol, cetoconazol, itraconazol, fluconazol, bifoconazol, terconazol, butoconazol, tioconazol, oxiconazol, sulconazol, saperconazol, clotrimazol, ácido undecilénico, haloprogin, butenafina, tolnaftato, nistatina, ciclopirox olamina, terbinafina, amorolfina, naftifina, elubiol, griseofulvina y sus sales farmacéuticamente aceptables.

Los antibióticos (o agentes antisépticos) incluyen, pero sin quedar limitados, mupirocina, sulfato de neomicina, bacitracina, polimixina B, l-afloxacina, tetraciclinas (clorhidrato de clortetraciclina, clorhidrato de oxitetraciclina y clorhidrato de tetrahciclina), fosfato de clindamicina, sulfato de gentamicina, cloruro de benzalconio, cloruro de bencetonio, hexilresorcinol, cloruro de metilbencetonio, fenol, compuestos de amonio cuaternario, tricloruro de carbono, triclosano, aceite del árbol del té, peróxido de benzoilo y sus sales farmacéuticamente aceptables.

Los ingredientes para el acné incluyen, pero sin ser limitante, agentes que normalizan la diferenciación de la epidermis (p. ej. los retinoides), agentes queratolíticos (p. ej. ácido salicílico y \alpha-hidroxi-ácidos), peróxido de benzoilo, antibióticos y compuestos o extractos de plantas que regulan el sebo.

Los agentes antisoriosis incluyen, pero sin ser limitante, corticoesteroides (p. ej., dipropionato de betametasona, valerato de betametasona, propionato de clobetasol, diacetato de diflorasona, propionato de holobetasol, amcinonido, desoximetasona, fluocinonido, acetónido de fluocinolona, halcinonido, acetato de triamcinolona, hidrocortisona, valerato de hidrocortisona, butirato de hidrocortisona, dipropionato de aclometasona, flurandrenolide, furoato de mometasona, acetato de metilprednisolona), vitamina D y sus análogos (p. ej., calcipotrieno), retinoides (p. ej., Tazaroteno) y antralina.

Los agentes cosméticos que se pueden utilizar en las composiciones de la presente invención pueden incluir, pero sin ser limitante, aquellos agentes que evitan la irritación potencial de la piel, tales como los emolientes, vitaminas y antioxidantes (p. ej., vitamina E) y extractos de hiervas (p. ej., aloe vera). Además, los agentes cosméticos pueden incluir humectantes, antioxidantes/conservantes, extractos de plantas, sabores, fragancias, agentes tensoactivos y semejantes. Los ejemplos de humectantes incluyen glicerol, sorbitol, propilenglicol, etilenglicol, 1,3-butilenglicol, polipropilenglicol, xilitol, maltitol, lactitol, proteína de avena, alantoína, MEA acetamida, ácido hialurónico y semejantes. Se pueden utilizar solos o en combinación.

Los agentes cosméticos también pueden incluir sustancias que enmascaran los síntomas de los trastornos inflamatorios y desórdenes relacionados; tales sustancias incluyen, pero sin quedan limitadas, pigmentos, colorantes y otros aditivos (p. ej., sílice, talco, óxido de zinc, óxido de titanio, polvos de arcilla). Los excipientes farmacéuticos incluyen, sin quedar limitados, agentes que modifican el pH tales como los agentes modificantes del pH, disolventes orgánicos (p. ej., propilenglicol, glicerol, etc.), alcohol cetílico, caolín, talco, óxido de zinc, óxido de titanio, almidón de maíz, gluconato sódico, aceites (p. ej., aceite mineral), ceteareth-20, ceteth-2, detergentes y emulsionantes, espesantes, (o aglomerantes), perfume, antioxidantes, conservantes y agua.

Los aglomerantes o espesantes se pueden utilizar en las composiciones de la presente invención para dar cuerpo y estabilidad física a las composiciones. Los aglomerantes o espesantes adecuados para la utilización en las composiciones de la presente invención incluyen derivados de la celulosa tales como las sales alcalinometálicas de la carboximetil celulosa, metil celulosa, hidroxietil celulosa y carboximetilhidroxietil celulosa sódica, alginatos alcalinometálicos tales como alginato sódico, alginato de propilenglicol, gomas tales como carragenano, goma de xantano, goma de tragacanto, goma de caraya y goma arábiga y aglomerantes sintéticos tales como el alcohol polivinílico, acrilato polisódico y polivinilpirrolidona. Los espesantes tales como las gomas naturales y los polímeros sintéticos, así como también los agentes colorantes y fragancias también son frecuentemente incluidos en tales composiciones.

Los ejemplos de preservantes que se pueden utilizar en las composiciones de la presente invención incluyen, sin ser limitante, ácido salicílico, clorhidrato de clorhexidina, fenoxietanol, benzoato sódico, metil para-hidroxibenzoato, etil para-hidroxibenzoato, propil para-hidroxibenzoato, butil para-hidroxibenzoato, etil para-hidroxibenzoato y semejantes.

Los ejemplos de sabores y fragancias que se pueden utilizar en las composiciones de la presente invención incluyen, pero sin ser limitante, mentol, anetole, carvona, eugenol, limoneno, ocimeno, n-decilalcohol, citronelol, \alpha-terpineol, metil salicilato, metil acetato, citronelil acetato, cineole, linalool, etil linalool, vanilina, timol, aceite de menta verde, aceite de menta, aceite de limón, aceite de naranja, aceite de salvia, aceite de romero, aceite de canela, aceite de pimiento, aceite de hoja de canela, aceite de perilla, aceite de gualteria, aceite de clavo, aceite de eucalipto y semejantes.

Las composiciones de la presente invención se pueden preparar en múltiples formas destinadas a la aplicación tópica a un paciente. Por ejemplo, las composiciones pueden ser aplicadas en un gel, crema, ungüento, champú, acondicionador del cuero cabelludo, líquido, rociado líquido, preparación para pintar/frotar, aerosol, polvo o vendaje adhesivo. Además, la composición se puede impregnar en vendajes, aliños de hidrocoloide, parches destinados al tratamientos o productos de paño, tales como paños para bebés o paños faciales.

Las composiciones de la presente invención pueden estar en forma de emulsiones, tales como cremas, lociones y semejantes. Tales composiciones pueden presentar más de una fase y pueden incluir agentes tensoactivos que permiten la preparación de emulsiones multifásicas.

Los ejemplos de agentes tensoactivos que se pueden utilizar en las composiciones de la presente invención incluyen los alquilsulfatos sódicos, p. ej., laurilsulfato sódico y miristilsulfato sódico, N-acilsarcosinatos sódicos, p. ej., N-laurilsarcosinato sódico y N-miristoilsarcosinato sódico, dodecilbencensulfonato sódico, sulfato de monoglicérido de ácido graso de coco hidrogenado sódico, lauril sulfoacetato sódico y N-acil glutamatos, p. ej., N-plamitoil glutamato, sal sódica de N-metilaciltaurina, sal sódica de N-metilacilalanina, \alpha-olefinsulfonato sódico y dioctilsulfosuccinato sódico; N-alquilaminogliceroles, p. ej., N-laurildiaminoetilglicerol y N-miristildiaminoetilglicerol, N-alquil-N-carboximetilamonio betaína y 2-alquil-1-hidoxietilimidazolinobetaina sódica; polioxietilenalquiléter, polioxietilenalquilariléter, polioxietilenlanolin alcohol, éster de ácido polioxietilengliceril monoalifatico, éster de ácido polioxietilensorbitol alifático, éster de ácido polioxietileno alifático, ésteres de ácidos alifáticos superiores y glicerol, éster de ácido alifático sorbitano; agentes tesoactivos de tipo plurónico y ésteres de ácido alifático polioxietilensorbitano tales como el polioxietilensorbitanmonooleato y polioxietilensorbitanmonolaurato. Los tensoactivos de tipo emulsionante conocidos por los expertos en la materia también deben ser utilizados en las composiciones de la presente invención.

Otro ingrediente importante de la presente invención es un vehículo dermatológicamente aceptable. Dicho vehículo adecuado es adecuado para la utilización tópica. No solamente es compatible con los ingredientes activos descritos en la presente solicitud, sino que tampoco introduce toxicidad alguna o problemas de toxicidad. Un vehículo efectivo y seguro comprende aproximadamente entre el 50% y aproximadamente el 99% en peso de las composiciones de la presente invención, más preferentemente aproximadamente entre el 75% y aproximadamente el 99% de las composiciones y más preferentemente aproximadamente entre el 85% y aproximadamente el 95% en peso de las composiciones.

La elección de que excipiente farmacéutico o agente biológico, o agente cosmético se utiliza está frecuentemente controlado o afectado por el tipo de trastorno inflamatorio o desorden relacionado que se ha de tratar. Por ejemplo, si las composiciones de la presente invención se utilizasen para el tratamiento de una inflamación de la piel asociada con "pie de atleta", "picor de slip" o erupción de pañal, el talco sería el excipiente farmacéutico preferido y los agentes antihongo serían los agentes biológicos preferidos. Si las composiciones de la presente invención se destinaran a utilizarse para el tratamiento del eczema del cuero cabelludo, los excipientes farmacéuticamente preferidos serían emulsionantes y aceites.

El trastorno dermatitis de contacto se puede tratar aplicando una composición tópica que comprende un extracto de Chrysanthemum parthenium matricaire en el que dicho extracto contiene un 1% de Chrysanthemum parthenium matricaire que está sustancialmente libre de partenolide, es decir, la concentración de partenolide es < 0,1%. Debido a la extremadamente baja concentración de partenolide en tal extracto de Chrysanthemum parthenium matricaire, una composición tópica preparada a partir de dicho extracto no será irritante.

Los siguientes ejemplos ilustran, pero no limitan el alcance de la presente invención. Solamente pretenden sugerir un procedimiento destinado a la práctica de la invención. Los expertos en el tratamiento y prevención de los trastornos inflamatorios y desórdenes relacionados así como en otras especialidades pueden encontrar otros procedimientos para preparar la presente invención. Sin embargo, dichos procedimientos se considera que están dentro del alcance de la presente invención.

Ejemplo 1 Preparación de Chrysanthemum parthenium matricaire sustancialmente libre de partenolide

Dos kilogramos de Tanacetum parthenium se extraen a entre 50 y 60ºC con 20 l de 70% metanol acuoso. El extracto se concentra al vacío hasta aproximadamente 1 litro y se diluye con un volumen igual de metanol. La disolución resultante se extrae con 3 x 2 litros de n-hexano. El extracto de hexano se evapora hasta sequedad al vacío para producir 30 g de residuo (extracto H). La disolución de agua metanol se extrae a continuación con 2 x 0,5 litros de cloruro de metileno. La fase orgánica se evapora hasta la sequedad al vacío para producir 70 g de residuo (extracto DCM). La fase de agua metanol (extracto HM) se aparta. El extracto DCM se disuelve en 0,6 l de 90% metanol y se trata con agitación con 0,6 l de resina básica fuerte (Relite 2A) durante tres a cuatro horas. La suspensión se filtra al vacío y se lava la resina con aproximadamente 2 l de 90% metanol. La disolución metanólica, que contiene el partenolide y sus congéneres se retira. La resina básica se trata con agitación durante una hora con 0,6 l de metanol que contiene 65 ml de ácido clorhídrico concentrado. La resina se filtra al vacío y se lava todavía más con 2,5 l de metanol. El filtrado y el lavado se combinan, se concentran al vacío hasta aproximadamente 200 ml y se extrae 3 x 200 ml de acetato de etilo. El extracto resultante (E.A.), que contiene los compuestos de flavona tanetina y congéneres, se evapora al vacío hasta la sequedad, para obtener aproximadamente 4 g de residuo. Los residuos de los extractos H y E.A. se combinan con el extracto HM. La disolución resultante se evapora al vacío hasta la sequedad y el residuo sólido se seca al vacío a 50ºC hasta un peso constante. Se obtienen aproximadamente 490 g de extracto de T. parthenium despartenolizado que demuestra por análisis HPLC, (columna Zorbax SB C18; eluyente H_{2}O + 0,01% TFA; B:MeCN + 0,01% TFA; gradiente A:B:90%-10%:10%-90%; flujo 1 ml/min), un contenido en partenolide inferior al 0,07%.

Ejemplo 2 Inmunomodulación de los leucocitos de la sangre periférica

La capacidad del Chrysanthemum parthenium matricaire y del Chrysanthemum parthenium matricaire libre de partenolide para afectar las respuestas inflamatorias se ilustró mediante su capacidad para reducir la producción de las funciones de los linfocitos de la siguiente forma. El Chrysanthemum parthenium matricaire ("FFW") utilizado en estos experimentos se obtuvo comercialmente de Indena S.p.A. El Chrysanthemum parthenium matricaire libre de partenolide ("PFFW") se obtuvo utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 1.

Se recogieron leucocitos humanos de pacientes sanos varones mediante leucoaferesis y se ajustó su densidad a 1x10^{6} células/ml en medio de cultivo de linfocitos (LGM-2, Clonetics Corporation, San Diego, CA) libre de suero. Los PBLs se estimularon con 10 \mug/ml de PHA en presencia o ausencia de la muestra a ensayar. Tras una incubación de 48 horas a 37ºC con 5% CO_{2}, el sobrenadante se recoge y se valora su contenido en citocinas utilizando un equipo colorimétrico de ensayo ELISA. La proliferación se determinó utilizando alamarBlue^{TM} (Alamar Biosciences, Sacramento, CA) tras 96 horas.

Ensayo de inhibición de liberación de IL y citosina (IC_{50} \mug/ml)

1

(en la que NE = no efectivo; NT = no ensayado; FFW = Chrysanthemum parthenium matricaire; PFFW = Chrysanthemum parthenium matricaire sustancialmente libre de partenolide; IL = interleucina (citocina); IFN = interferon; TNF = factor de necrosis tisular; GM-CSF = factor estimulador de granulocitos y macrófagos).

Con base en lo anterior, se puede observar que el Chrysanthemum parthenium matricaire sustancialmente libre de partenolide fue capaz de modular la activación de los linfocitos.

Ejemplo 3 Evaluación de la línea celular de macrófago RAW 264

Se estimularon células Raw 264 de macrófago murino durante 24 horas mediante 1 \mug/ml de LPS y 10 U/ml de IFN\gamma en presencia o ausencia de los productos a ensayar.

Los nitritos, productos finales estables del óxido nítrico, se ensayaron mediante la reacción de Griess y se valoraron los niveles de PGE2 mediante ELISA. Los resultados se expresan como el porcentaje de inhibición de la producción de mediadores de la inflamación en comparación con un cultivo control estimulado. La viabilidad celular se comprobó mediante el ensayo de reducción de MTT.

Macrófagos murinos RAW 264 estimulados mediante LPS e IFN\gamma (% de inhibición)

	PGE_{2}	Producción de NO
0,001% -FFW	33,0	16,1
0,01% -FFW	78,0	58,4
0,1% -FFW	98,0	99,9

FFW = Chrysanthemum parthenium matricaire, PGE_{2} = prostaglandina E_{2}, NO = óxido nítrico.

Macrófagos murinos RAW 264 estimulados mediante LPS e IFN\gamma IC_{50} \mug/ml

Material de ensayo	Óxido Nítrico	PGE_{2}	LD_{50}
FFW	69	40	680
FLAV	89,0	4,0	250
PFFW	370	71	740

FFW = Chrysanthemum parthenium matricaire con 0,7% partenolide; PFFW = Chrysanthemum parthenium matricaire privado de partenolide con menos del 0,1% partenolide; FLAV = Chrysanthemum parthenium matricaire con 3% de partenolide y 26% flavonoides (donde los flavonoides individuales son tanetina y 3,7,3'-trimetoxiquercetagetina que comprende el 7% y el 22% de la composición de flavonoide respectivamente); PGE_{2} = prostaglandina E_{2}; NO =
óxido nítrico.

Con base en lo anterior, se puede observar que el PFFW es capaz de regular por disminución una respuesta inmune.

Ejemplo 4 Evaluación en epidermis reconstituida

Se valoró el efecto de Chrysanthemum parthenium matricaire sustancialmente libre de partenolide sobre la liberación PGE_{2} a partir de equivalentes de epidermis humana. Se adquirieron equivalentes de epidermis (EPI 200 HCF) de MatTek Corporation. Una vez recibidos, se incubaron los equivalentes de epidermis durante 24 horas a 37ºC en un medio de mantenimiento sin hidrocortisona. Se pretrataron los equivalentes de epidermis durante 2 horas con 50 \mul del producto a ensayar, se lavaron y se añadió PMA (1 \mug/ml) al medio de cultivo. Los equivalentes se incubaron durante 24 horas a 37ºC en medio de mantenimiento, se recogieron los sobrenadantes del cultivo y se valoró PGE_{2} mediante ELISA. La viabilidad se valoró mediante el ensayo MTT.

2

Por consiguiente, se puede observar que tanto el extracto de Chrysanthemum parthenium matricaire como PFFW regulan por disminución la producción de PGE_{2}.

Ejemplo 5 Inhibición de la hipersensibilidad al contacto por Oxazolona

Los experimentos siguientes se realizaron para ensayar el efecto de Chrysanthemum parthenium matricaire sustancialmente libre de partenolide en un ensayo de hipersensibilidad por contacto. En dicho ensayo, se evaluaron las composiciones de la presente invención contra la hidrocortisona, un esteroide del que se conoce que inhibe la hipersensibilidad por contacto. Ratones albinos macho, de 7 a 9 semanas de edad, fueron inducidos en el abdomen rasurado con 50 \mul de 3% oxazolona en acetona/aceite de maíz (día 0). El día 5, se aplicó un volumen de 20 \mul de 2% oxazolona en acetona a la oreja dorsal izquierda del ratón. Los compuestos a ensayar se aplicaron en la oreja izquierda (20 \mul) 1 hora tras el estímulo con oxazolona en un vehículo de 70% etanol/30% propilenglicol. No se trató la oreja derecha. Se sacrificaron los ratones por inhalación de CO_{2} a las 24 horas tras el tratamiento con oxazolona, se extrajeron las orejas derecha izquierda, se tomaron biopsias de 7 mm de cada oreja y se pesaron. Se calculo la diferencia entre los pesos de las biopsias de las orejas derecha e izquierda. Los efectos antiinflamatorios de los compuestos se muestran como una inhibición del incremento del peso de las orejas.

Estudio de la hipersensibilidad por contacto con oxazolona (% de inhibición)

Material de ensayo	Estudio 1	Estudio 2	Estudio 3
Hidrocortisona 0,1%	96,9	87,6	91,0
FFW 0,03%	75,4	NT	NT
FFW 0,1%	89,9	64,5	NT
FFW 0,3%	91,9	NT	NT
FFW 1,0%	94,6	NT	NT
PFFW 0,1%	NT	54,7	NT
Partenolide 1,0%	NT	NT	11
NT = no ensayado

Por consiguiente, se puede observar que FFW y PFFW inhiben efectivamente la reacción a oxazolona.

Ejemplo 6 Modelo de inhibición de edema de oreja de ratón

Los experimentos siguientes se realizaron para ensayar el efecto de Chrysanthemum parthenium matricaire sustancialmente libre de partenolide en un ensayo de edema inducido por éster de forbol (TPA). En este ensayo, las composiciones de la presente invención se valoraron contra cortisona y dexametasona, esteroides de los que se conoce que son eficaces en este modelo. Se utilizaron ratones albinos CD-1 de 7 a 9 semanas de edad. Se produjo una disolución de 0,005% (peso/volumen) TPA en acetona. Se aplicó un volumen de 20 \mul de dicha disolución de TPA a la oreja dorsal izquierda del ratón. Se aplicaron inmediatamente tras el TPA a la oreja izquierda los compuestos a ensayar (20 \mul) en un vehículo de 70% etanol/propilenglicol. No se trató la oreja derecha. Los ratones se sacrificaron mediante inhalación de CO_{2} (5,5 horas tras el TPA), se extrajeron las orejas derecha e izquierda y se extrajo y pesó una biopsia de 7 mm de cada oreja. Se calcularon las diferencias entre los pesos de las biopsias de las orejas derecha e izquierda. Los efectos antiinflamatorios de los compuestos se demuestran por la inhibición del incremento en el peso de las orejas.

Material de ensayo	Estudio 1	Estudio 2
Hidrocortisona 0,1%	96,9	-
Dexametasona 0,1%	-	97,2
FFW 0,1%	-	14,7

(Continuación)

Material de ensayo	Estudio 1	Estudio 2
FFW 1%	75,1	-
PFFW 0,1%	-	58,6

Ejemplo 7 Inhibición del edema de oreja inducido por ácido araquidónico

En este modelo in vivo se comparó la capacidad del Chrysanthemum parthenium matricaire para reducir el edema producido por ácido araquidónico con tepoxalin, un conocido inhibidor de la ciclooxigenasa/lipoxigenasa. Se utilizaron ratones CD-1 machos, albinos, de 7 a 9 semanas de edad. Se produjo una disolución del 20% (peso/volumen) de ácido araquidónico (AA) en acetona. Se aplicó un volumen de 20 \mul de AA a la oreja dorsal izquierda del ratón. Los compuestos a ensayar (20 \mul) se aplicaron inmediatamente tras el AA a la oreja izquierda en un vehículo de 70% etanol/30% propilenglicol. La oreja derecha no se trató. Los ratones se sacrificaron mediante inhalación de CO_{2} 1 hora tras el AA, se extrajeron las orejas derecha e izquierda, se extrajeron biopsias de 7 mm de cada oreja y se pesaron. Se calculó la diferencia entre los pesos de las biopsias de las orejas derecha e izquierda. Los efectos antiinflamatorios de los compuestos se demuestran como la inhibición del incremento en el peso de las orejas.

Inhibición del edema de oreja inducido por ácido araquidónico

Material de ensayo	% de inhibición
0,1% Tepoxalin	10,84
1,0% Tepoxalin	42,38
2,0% Tepoxalin	61,06
0,1% FFW	NE
0,3% FFW	23,86
1,0% FFW	38,73

Ejemplo 8 Prevención de la inflamación producida por trauma tras la aplicación tópica de Chrysanthemum parthenium matricaire libre de partenolide a sujetos humanos

Se valoró la capacidad de Chrysanthemum parthenium matricaire sustancialmente libre de partenolide (PFFW) para evitar la inflamación de la piel en un estudio humano controlado que implica 10 voluntarios. En dicho estudio, Chrysanthemum parthenium matricaire libre de partenolide se ensayó al 0,1% y 1% y se comparó con su vehículo e hidrocortisona también al 0,1% y 1%. El producto a ensayar se aplicó en el lado ventral del antebrazo dos veces al día durante 2 días consecutivos. Se indujo eritema mediante 10 fricciones sucesivas del stratum corneum. Se realizaron mediciones de cromometro antes de las fricciones y a las 0,5, 1, 1,5 y 2 horas tras la fricción. El Índice Colorimétrico de Eritema (CEI) se calculó para cada punto de tiempo. Para un período total de 2 horas y en comparación con el vehículo, se obtuvieron las siguientes reducciones del eritema;

Material de ensayo	Reducción de eritema (%)
0,1% hidrocortisona	10
1% hidrocortisona	19
0,1% PFFW	22
1% PFFW	35

Estos resultados demuestran que el Chrysanthemum parthenium matricaire sustancialmente libre de partenolide es efectivo para evitar la inflamación producida por trauma en los seres humanos y presenta una actividad comparable a concentraciones iguales de hidrocortisona.

Ejemplo 9 Prevención de la inflamación producida por UVB tras la aplicación tópica de Chrysanthemum parthenium matricaire sustancialmente libre de partenolide a sujetos humanos

Se valoró la capacidad del Chrysanthemum parthenium matricaire libre de partenolide (PFFW) para evitar la inflamación de la piel en un estudio humano controlado que implicó 10 voluntarios. En este estudio, se ensayó PFFW al 0,1 y 1% y se comparó con su vehículo y con hidrocortisona al 0,1 y 1%. Los productos a ensayar se aplicaron en 5 lugares diferentes del antebrazo "volar" dos veces al día durante 2 días consecutivos (2 mg/cm^{2}). Se expusieron los lugares a 2MED UVB. Se realizaron mediciones de cromometro antes de la irradiación y a 18, 24, 42 y 48 horas tras la irradiación. Se calculó el Índice Colorimétrico de Eritema (CEI) para cada punto de tiempo. Se obtuvieron las siguientes reducciones de eritema.

Material de ensayo	Reducción de eritema (%)
0,1% hidrocortisona	2,5
1% hidrocortisona	5,7
0,1% PFFW	-3,5
1% PFFW	24,9

Estos resultados demuestran que el Chrysanthemum parthenium matricaire libre de partenolide es efectivo en evitar la inflamación inducida por UV en los seres humanos.

Ejemplo 10 Tratamiento de la inflamación inducida por trauma tras la aplicación tópica de Chrysanthemum parthenium matricaire sustancialmente libre de partenolide a sujetos humano

Se valoró la capacidad del Chrysanthemum parthenium matricaire sustancialmente libre de partenolide (PFFW) para evitar la inflamación de la piel en un estudio humano controlado que implicó 10 voluntarios. En dicho estudio, se ensayó PFFW al 0,1 y 1% y se comparó con su vehículo y con hidrocortisona también al 0,1 y 1%. Se indujo eritema mediante 10 fricciones sucesivas del striatum corneum. Los productos a ensayar se aplicaron a la zona ventral del antebrazo durante 2 horas, inmediatamente tras la fricción y a 0,5, 1, 1,5 y 2 horas tras la fricción. Se calculó el Índice Colorimétrico de Eritema (CEI) para cada punto de tiempo. Para el período total de 2 horas, y en comparación con el vehículo, se obtuvieron las siguientes reducciones de eritema:

Material de ensayo	Reducción de eritema (%)
0,1% hidrocortisona	-3
1% hidrocortisona	14
0,1 PFFW	-35
1% PFFW	13

Estos resultados demuestran que las dosis superiores de Chrysanthemum parthenium matricaire sustancialmente libres de partenolide son moderadamente efectivas en evitar la inflamación inducida por trauma en los seres humanos y presenta una actividad comparable a la de concentraciones iguales de hidrocortisona.

Ejemplo 11 Tratamiento de la inflamación inducida por UVB tras la aplicación tópica de Chrysanthemum parthenium matricaire libre de partenolide a sujetos humanos

Se valoró la capacidad de Chrysanthemum parthenium matricaire sustancialmente libre de partenolide (PFFW) para el tratamiento de la inflamación de la piel en un estudio humano controlado que implicó 10 voluntarios. En este estudio, se ensayó PFFW al 0,1 y 1% y se comparó con su vehículo e hidrocortisona también al 0,1 y 1%. Se irradiaron diez voluntarios jóvenes con luz 2MED UV en cinco puntos diferentes del antebrazo "volar" El producto a ensayar se aplicó (2 mg/cm^{2}) en el lugar irradiado inmediatamente tras la irradiación, y 5 y 8 horas más tarde. Las calificaciones de eritema se midieron antes de la irradiación y 1, 4, 7 y 24 horas más tarde. Se obtuvieron las siguientes reducciones en eritema:

Material de ensayo	Reducción de eritema (%)
0,1% hidrocortisona	3,2
1% hidrocortisona	17,7
0,1% PFFW	8,6
1% PFFW	18,7

Estos resultados demuestran que el Chrysanthemum parthenium matricaire libre de partenolide es efectivo para el tratamiento de la inflamación inducida por UV en los seres humanos.

El ejemplo 12 ilustra una composición destinada al cuidado de la piel según la presente invención. Las composiciones se pueden procesar de forma convencional. Son adecuadas para utilización cosmética. En particular, las composiciones son adecuadas en aplicaciones destinadas a evitar y tratar los trastornos inflamatorios y desórdenes relacionados, tales como, pero sin ser limitante, los trastornos de dermatitis de contacto, edema, inflamación inducida por trauma e inflamación inducida por UVB y por consiguiente también para aplicación a la piel sana para evitar o retrasar la inflamación de la misma.

Ejemplo 12

Este ejemplo ilustra una composición de aceite-en-agua que incorpora una composición de la presente invención

Ingredientes	% Peso/Peso
Glicerina, u.s.p. 99,5%	2,00
Alantoina	0,55
Dimeticona	1,25
Propilenglicol	4,00
Chrysanthemum parthenium matricaire
libre de partenolide	1,00
Hexilenglicol	2,00
Cloruro de diestearildiamonio	5,00
Alcohol cetílico	2,50
Petrolatum, u.s.p.	4,00
Palmitato de isopropilo	3,00
Penilenglicol	4,00
Alcohol bencílico	0,60
Agua pura, u.s.p.	70,1

Claims (10)

1. Utilización de un extracto de Chrysanthemum parthenium matricaire para la preparación de una composición tópica destinada al tratamiento y prevención de los trastornos inflamatorios y desórdenes relacionados.

2. Utilización según la reivindicación 1, en la que dicho trastorno inflamatorio o desorden relacionado es un trastorno o desorden relacionado de la piel.

3. Utilización según la reivindicación 1, en la que dicho extracto está sustancialmente libre de \gamma-lactona \alpha-insaturada.

4. Utilización según la reivindicación 1, en la que dicho extracto está sustancialmente libre de \gamma-lactona \alpha-insaturada y dicho trastorno inflamatorio o desorden relacionado es un trastorno o desorden relacionado de la piel.

5. Utilización según la reivindicación 3, en la que dicha \gamma-lactona \alpha-insaturada es partenolide.

6. Utilización según la reivindicación 3, en la que dicha cantidad efectiva de dicho extracto está comprendida aproximadamente entre aproximadamente 0,005% y aproximadamente 10%.

7. Utilización según la reivindicación 6, en la que dicho extracto presenta una concentración de partenolide comprendida entre aproximadamente 0% y aproximadamente 0,2%.

8. Utilización según la reivindicación 4, en la que dicho extracto comprende además compuestos flavonoides.

9. Composición tópica útil para el tratamiento y prevención de los trastornos inflamatorios o desórdenes relacionados, que comprende una cantidad efectiva de un extracto de Chrysanthemum parthenium matricaire y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

10. Composición según la reivindicación 8, en la que dicho extracto está sustancialmente libre de \gamma-lactona \alpha-insaturada.