ES2244063T3

ES2244063T3 - Composiciones y metodos para inhibir la descarga de nematoquistes.

Info

Publication number: ES2244063T3
Application number: ES98925037T
Authority: ES
Inventors: Amit Lotan
Original assignee: Nidaria Technology Ltd
Current assignee: Nidaria Technology Ltd
Priority date: 1997-05-29
Filing date: 1998-05-28
Publication date: 2005-12-01
Anticipated expiration: 2018-05-28
Also published as: IL133179A0; AU7707598A; US6338837B1; WO1998053807A1; ATE293964T1; DE69829963T2; AU745348B2; EP0984776A1; DE69829963D1; EP0984776B1

Abstract

Se presentan composiciones para inhibir la liberación de nematocistos o cápsulas polares en forma de una cantidad efectiva de antihistamina, una cantidad efectiva de antihistamina y una cantidad efectiva de al menos un catión o una cantidad efectiva de al menos un catión. Las composiciones pueden tener la forma de ungüentos o pueden añadirse al medio que rodea los nematocistos o cápsulas polares. También se suministran procedimientos para inhibir la liberación de nematocistos o cápsulas polares utilizando las composiciones de la invención.

Description

Composiciones y métodos para inhibir la descarga de nematoquistes.

Esta invención se encuentra en el campo de las composiciones que repelen y previenen la picadura de organismos marinos, tales como la medusa. En particular, se proporcionan composiciones y métodos para inhibir la descarga de la estructura urticante (nematoquiste o cápsula polar).

Los nadadores y buzos en todo el mundo están familiarizados con los organismos urticantes de los 15 océanos tales como la medusa, anémona de mar y coral. Las picaduras de medusa, aunque raramente fatales, son un problema de salud pública mayor. Lotan et al. (1992) Marine Biology 112:237-242; Lotan et al. (1994) Marine Ecology Progress Series 109:59-65. En los meses de 20 verano, se estima que más de 500,00 nadadores y buzos en el área de la Bahía de Chesapeake y 200,000 personas en Florida son picadas por medusas, principalmente por "ortigas marinas", el nombre común de Chrysaora quinquecirrha, Burnett et al. (1992) MMJ 41 (6):509-513. De manera similar, entre los meses de Marzo y Agosto, uno de cuatro bañistas de Florida son picados y más de 10,000 personas requieren tratamiento médico de emergencia por erupciones pruriticas causadas por el contacto con larvas de medusa conocidas como "piojos marinos". Tomchik et al. (1993) JAMA 269 (13):1669-1672.

Los miembros el filo Cnidaria (por ejemplo, la medusa, anémona de mar y coral) y el filo Myxozoa están todos equipados con organelos subcelulares urticantes, conocidos como nematoquistes, cnidoquistes o cápsulas polares. Los nematoquistes se localizan en células especializadas (nematocitos) y consisten de una cápsula que contiene un túbulo condensado con toxinas y filamentos potentes. Cuando los nematoquistes se descargan, el túbulo penetra en su organismo objetivo y libera sus toxinas. Los filamentos arreglados sobre el túbulo mejoran el anclamiento y unión del túbulo del nematoquiste a su objetivo. De este modo, los nematoquistes están implicados en el reconocimiento del objetivo, liberación de la toxina, infección y anclamiento.

Todos los miembros del filo Cnidaria y Myxozoa contienen nematocitos de varios tamaños, formas y tipos. Mariscal, pp. 129-187, "Nematocitos" en COELENTERATE BIOLOGY: REVIEWS AND NEW PERSPECTIVES, eds. Muscatine y Lenhoff (Academic Press, New York, 1974). Esos diferentes tipos de cnidoquistes funcionan en diversos papeles biológicos incluyendo la captura de la presa, liberación de la toxina, reconocimiento, anclamiento, adherencia e infección (véase, por ejemplo, Tardent (1995); Biessays 17 (4): 352-362; Lotan et al (1995) Nature 375:456; Lotan et al (1996) Expt'l Zool. 275:444-451; Lotan et al., pp. 132-144, "Toxicology and ecology and the Mediterranean Jellyfish Rhopilema nomadica" en BIOCHEMICAL ASPECTS OF MARINE PHARMACOLOGY, eds. Lazarovici et al. (Alaken, Inc., Fort Collins, Colorado, 1996); Spaulding (1972) Biol. Bull. 143:440-453; Holstein y Tardent (1984) Science 223:830-833 y Mariscal, supra. De este modo, aunque mejor conocidos por sus capacidades urticantes, los nematocitos también juegan un papel clave en el reconocimiento, anclamiento e infección. Por ejemplo, los parásitos del filo Myxozoa utilizan nematoquistes (cápsulas polares) para reconocer e infectar sus huéspedes. El-Matbouli et al. (1995) J. Fish Biol. 46:919-935 y Yokoyama et al. (1995) Diseases Aquatic Organ. 21:7-11.

El cuerpo principal de las células del nematocito consiste de una cápsula densa, el nematoquiste, dentro de la cual se encuentra un túbulo reversible altamente plegado. La descarga (eversión) de este túbulo es activada por la acumulación de una alta presión hidrostática interna de aproximadamente 150 atmósferas dentro de la cápsula. La eversión del túbulo doblado internamente ocurre dentro de 3 microsegundos a aceleraciones de hasta 40,000 x g, uno de los eventos mecánicos más rápidos en la biología celular.

El nematocito puede ser subdividido en tres compartimientos morfológicos con entidades funcionales diferentes: la luz y pared de la cápsula, el túbulo y los organelos sensoriales. La pared y la luz de la cápsula son los componentes principales implicados en el desarrollo de la fuerza motriz para la descarga del nematocito. La tensión sobre la pared de la cápsula interna durante la descarga del nematoquiste alcanza hasta 375 Mpa. Holstein (1994) Science 265:402-404. La fuerte pared de la cápsula es altamente permeable al agua con un tamaño de poro de 600 Daltons. Dentro de la cápsula nematoquística en reposo, pueden encontrarse concentraciones de hasta 0.5 M de cationes tales como Ca^{++}, Mg^{++} o K^{+}. (Véase, por ejemplo, Tardent, supra; Lubbock et al. (1981) PNAS 78 (6):3624-3628; Godknecht et al. (1988) Marine Biology 100:83- 92; Lubbock y Amos (1981) Nature 290(5806) : 500-501; Weber (1989) Int. J. Biochem 184:465-476; Hidaka (1993) Biol. Bull. 184:97-104 y Gerke (1991) Hydrobiologia 216/217:661-669 para discusiones de los cationes y nematoquistes). Las contrapartes aniónicas están representadas por el ácido poli-y-L-glutámico (PGA) en varios grados de polimerización. Durante la descarga del nematoquiste, ocurre un incremento extremo en la presión osmótica de la cápsula interna debido al influjo de agua. Se ha sugerido que el influjo de agua en la cápsula es mediado por una liberación interna de los cationes, tales como el Ca^{++} en la anémona de mar o K^{+} en la hidra normalmente combinado con PGA. Esta presión osmótica se traduce en la presión hidrostática que causa la erupción y a continuación la evaginación del túbulo de la cápsula nematoquística (descarga). Después de la descarga nematoquística la concentración interna de catión de la cápsula se disuelve en los fluidos circundantes.

El segundo compartimiento del nematoquiste es un túbulo reversible altamente condensado. Este túbulo sirve al papel principal en la función biológica del nematocito; a saber, la interacción o liberación de sustancia del cnidariano o myxozoano en su objetivo. El túbulo, el cual es de 200-850 \mum cuando se alarga, se retuerce más de cien veces alrededor de su eje y se empaca en un diámetro de 3-10 \mum del nematoquiste. Godknecht & Tardent (1988) Marine Biol. 100:83-92. Las barbas huecas, arregladas sobre la superficie interna del túbulo, se vierten durante la descarga y juegan un papel importante en la penetración y anclamiento del túbulo en su presa. Las toxinas, contenidas sobre la superficie externa antes de la descarga, son liberadas a través de las barbas después de que el nematocito se ancle. Lotan et al. (1995), supra.

Los sistemas sensoriales del nematocito son responsables de control de la descarga del nematoquiste. La descarga del nematoquiste requiere estimulación química y mecánica de los organelos sensoriales. En la anémona de mar Aitacia pálida, han sido identificados dos clases de receptores químicos. Un tipo de receptor es activado por azúcares N-acetilados, mientras que el segundo quimiorreceptor es activado por ciertos aminoácidos. Thorington et al. (1988) Biol. Bull. 174:163-171. El sistema sensorial mecánico depende de la activación de los quimiorreceptores. Esos mecanorreceptores, sin embargo, pueden ser ajustados por el organismo, por ejemplo, sintonizándolos a señales de frecuencia únicas emitidas por una presa favorecida.

Ciertas enfermedades de los peces, incluyendo la enfermedad de inestabilidad rotatoria, son causadas por infecciones con parásitos obligados de filo myxozoano. (véase, por ejemplo, para descripciones de myxozoanos, Yokohama et al. (1993) Dis. Aquat. Org. 17:223-228; Yokohama et al. (1995) Dis. Aquat. Org. 21:7-11; Smothers et al. (1994) Science 265:1719- 172; y ElMatbouli et al. (1995) J. Fish Biology 46:919-935). Esos parásitos requieren dos huéspedes, un pez y un anélido acuático. Las etapas de emergencia de cada huésped son infecciosas únicamente para el otro huésped, sin embargo, en cada etapa infecciosa, las cápsulas polares activadas (nematoquistes) liberan un túbulo que penetra o se adhiere al integumento del objetivo. El reconocimiento del huésped es especifico de la especie, indicando que los nematoquistes sirven a un importante papel en el 10 reconocimiento de su huésped (El-Matbouli, supra).

En suma, los nematoquistes proporcionan un método efectivo para liberar una sustancia profundamente en el objetivo. Debido a que los nematoquistes son capaces de penetrar su objetivo de manera eficiente, es difícil removerlos, o tratar después de que la toxina ha penetrado. De manera convencional, las picaduras por nernatoquistes han sido tratadas con antídotos tales como esteroides, sulfato de aluminio/tensoactivo Y antihistaminas. Tomchik, supra. Por ejemplo, Wasuwat (1970) Nature 225:758 describe como los pescadores de Thai utilizan un extracto hecho de hojas de Ipomoea peacaprae como un antídoto para el veneno de la medusa. Cuando el extracto fue analizado, se encontró que era moderadamente antihistamínico. El extracto exhibe el mismo efecto contra el veneno de la medusa como dos antídotos preparados comercialmente que contienen antihistaminas. En Australia, se recomienda el vinagre para el tratamiento de picaduras de la medusa cogre letals. Hartwick et al. (1980) Med. J. Aust. 1:15-20. El vinagre no se recomienda para picaduras por otras especies. Fenner et al. (1993) Med. J. Aust. 158: 498-501.

Puesto que los tratamientos postpicadura para picaduras de nematocitos son con frecuencia 10 insatisfactorios, la búsqueda de formas de prevenir la descarga de los nematoquistes ha estado avanzando. El método más frecuentemente prescrito para prevenir picaduras de medusa es evitar cualquier contacto con los nematoquistes. Tomchik, supra. Sin embargo, en el caso de la larva microscópica, esto con frecuencia significa alejarse de todas las actividades oceánicas durante los meses de alta incidencia, (por ejemplo de Marzo hasta Agosto en la Florida). Por lo tanto, sería útil tener medios para inhibir la descarga nematoquística aún cuando ocurra el contacto.

La solicitud de patente australiana 67563/94 (WO 94/17779) describe preparaciones en forma de hidrodispersión tópica, que se reporta son efectivas para prevenir la descarga nematoquística de acuerdo a lo medido por microscopia electrónica de exploración (SEM). Las formulaciones contienen micropigmentos inorgánicos incorporados en la fase lípida de la hidrodispersión; una sustancia filtrante de UV opcional y esencialmente libre de emulsificantes.

Lubbock (1979) J. Exp. Biol. 83:283-292 describe como los compuestos proteináceos tienden a inducir una respuesta más fuerte que conduce a la descarga del nematoquiste en las anémonas de mar que la de cualquiera de los polisacáridos o lípidos. Los autores pudieron determinar no solo las bases del reconocimiento y especularon que el proceso de la descarga nematoquística compleja. Lubbock y Amos, supra, describen que las cápsulas nematoquísticas aisladas no se descargan en CaCl_{2} 50 mM. Los autores reportan que la inhibición de la descarga nematoquística ocurre únicamente si es utilizado un soluto que no pudiera penetrar rápidamente la pared de la cápsula, por ejemplo polietilen glicol de alto peso molecular. De este modo, el calcio en el ambiente circundante puede estabilizar a los nematoquistes debido a que reduce la diferencia entre la concentración de calcio fuera de la cápsula y dentro de la cápsula. Normalmente, la concentración de calcio dentro de la cápsula nematoquística es de aproximadamente 600 mM. La concentración de calcio normal en el agua marina es de aproximadamente 7 mM, aproximadamente 100 veces menor que dentro de la cápsula. De este modo, incrementar la concentración de calcio fuera de la cápsula a 50 mM reduce la diferencia a alrededor de 10 veces, y puede estar implicada en la inhibición de la descarga nematoquística.

Heeger et al. (1992) Marine Biology 113: 669-678 probaron la capacidad de tres lociones protectoras solares disponibles comercialmente para inhibir la descarga nematoquística de la medusa sobre muestras de piel humana viva. Dos de las tres lociones fueron efectivas para reducir el número de nematoquistes descargados. Los autores concluyeron que los componentes de glicerol y aceite de las lociones podrían enmascarar o suprimir los efectos de los estímulos naturales de la piel, sin embargo, aún la loción que no inhibió la descarga de los nematoquistes contenía esas sustancias. Hartwick et al. (1980) Med. J. Australia 1:15-20 reportan que los remedios para las picaduras comerciales no proporcionan inhibición de la descarga nematoquística.

Thorington et al. Biol. Bull. 174:163-171 (1988) describen dos clases de quimiorreceptores nematoquísticos. Una clase de quimiorreceptores es específica para azúcares N-acetilados, y no es afectada por la antihistaminas. La segunda clase de quimiorreceptores es específica para aminoácidos y es inhibida por antihistaminas. Los autores tienen la hipótesis de que los receptores de azúcar N-acetilado son el evento inicial para la descarga nametoquística y que los receptores afectados por la antihistarnina son probablemente activados solo después de la sima de aminoácidos de la herida punzante creada en la presa por el nematoquiste activado por el azúcar. Por lo tanto, es inesperado que la presente invención haya mostrado que las antihistaminas solas son efectivas para inhibir la descarga nematoquística.

La presente invención proporciona composiciones novedosas que inhiben efectivamente la descarga nematoquística. Las composiciones descritas aquí son extremadamente efectivas para inhibir la descarga nematoquística cuando se aplican tópicamente antes de la exposición a los nernatoquistes. Además, fue sorprendente el descubrimiento del inventor de que colocar antihistaminas y/o cationes en el ambiente acuoso que rodea a los organismos que contienen nematoquistes inhibe efectivamente la descarga nematoquística. De este modo, la presente invención proporciona protección para los nadadores, buzos y pescadores, así como protección contra infecciones facilitadas por los nernatocitos en contextos tales como en granjas de peces donde el ambiente circundante puede ser tratado.

De acuerdo con una modalidad de la presente invención, se proporciona una composición para inhibir la descarga de nematoquistes, que comprende una cantidad efectiva de una antihistamina y al menos de un catión.

De acuerdo con otra modalidad de la presente invención, se proporcionan composiciones para inhibir la descarga de nematoquistes que comprenden una cantidad efectiva de al menos un catión.

Los nematoquistes pueden ser descargados de organismos seleccionados del grupo que consiste de Hidrozoa, Anthozoa, Myxozoa y Schyphoza, preferiblemente del grupo que consiste de Aurelia sp., Pelagia sp., Crysaora sp., Anthoplaura sp., Rhopilema sp., Physalia sp., Cyanea sp., Linuche sp., Catostylus, Carybdea sp., Chironex sp., Stomolophus sp., Rhiozosotma y Corinactis sp.,de manera mas preferible del grupo que consiste de Aurelia Aurita, Corynactic californica, Anthopleura elegantissima, Pelagia Noctiluca, Crysaora quinquecirrha y Anthoplaura sp.

En una modalidad, la antihistamina esta presente en una concentracion de 0.001% hasta 1.0%, de manera preferible de 0.001% hasta 0.2%. La antihistamina puede ser cualquier antihistamina, de manera preferible difenhidramina, cimetidina o tripelamina, de manera mas preferible difenhidramina.

La composición que comprende una antihistamina comprende, además, al menos un catión. El catión puede ser Ca^{++}, Mn^{++}, Co^{++}, Mg^{++}, o Fe^{++} y está presente de manera preferible e una concentracion de 50 mM hasta 1 mM, de manera Preferible de 50 mM hasta 500 mM, de manera mas preferible de 50 mM hasta 200 mM.

En otra modalidad, la composición comprende al menos un cloruro de sal de catión. El catión puede ser Ca^{++}, Mn^{++}, Co^{++} , Mg^{++} o Fe^{++} y de concentración final de cationes desde 200 mM hasta 1 M, de manera preferible desde 200 mM hasta aproximadamente 500 mM y de manera mas preferible 200 mM.

En otra modalidad, las composiciones dentro de la presente invención se incorporan en una base de ungüento.

En una modalidad preferida, la base del ungüento no comprende una glicoproteina, y es un lípido o un polímero de silicón. En otra modalidad más, la base del ungüento comprende, además, un protector solar.

En una modalidad más de la presente invención, se proporcionan métodos pata inhibir la descarga nematoquística que comprende aplicar las composiciones de la invención dentro de la presente invención a la piel de un sujeto antes del contacto con nematoquistes. En otra modalidad, se proporcionan métodos para inhibir la descarga nematoquística en un ambiente que rodea al nematoquiste.

En otra modalidad, se proporciona el uso de antihistaminas y/o cationes para la prevención o inhibición de la descarga de nematoquiste o cápsula polar.

Como será evidente, las características y rasgos característicos preferidos de un aspecto de la invención son aplicables a cualquier otro aspecto de la invención.

La Figura 1 es un diagrama esquemático que muestra tres pasos de la activación de los nematoquistes. Las secreciones químicas de estimuladores de la piel se unen a los sensores. Las señales de los sensores activan la cápsula. Se acumula una alta presión interna en la cápsula y conduce a la expulsión del túbulo.

La figura 2 es un diagrama esquemático que describe como la formulación previene o inhibe la descarga de los nematoquistes. En esta descripción, se aplico un ungüento tópico que contiene la composición de la invención en la piel. Por lo tanto las secreciones de los estimuladores de la piel son reducidas o prevenidas. Esos sensores y el mecanismo de descarga de la cápsula son inactivados químicamente por la composición de la invención.

A través de esta solicitud, se hace referencia a varias publicaciones, patentes y solicitudes de patente publicadas por medio de una cita de identificación.

Como se utilizan aquí, ciertos términos tendrán los significados definidos.

El término "nematoquiste" o "cnidoquiste" o "cápsula polar" se utiliza en el sentido convencional para referirse a las estructuras urticantes subcelulares encontradas en los nematocitos o cnidocitos. Los nematocitos se describen en detalle en Tardent, supra y Mariscal, supra. Esos organelos urticantes son capaces de penetrar, anclarse en, e inyectar una sustancia tal como una toxina en un organismo objetivo. Los términos "nematocito" o "cnidocito" o "cnidoblasto" pretenden referirse a la célula especializada que contiene los nematoquistes. Los ejemplos no limitantes de las clases del filo Cnidaria, que posee cnidocitos, incluye, por ejemplo, a Hydrozoa, Anthozoa, Myxozoa y Scyphozoa. Los ejemplos de medusas incluyen, pero no se limitan a, 15 Aurelia sp., Pelagia sp., Chrysaora sp., Antho-plaura sp., Rhopilema sp., Physalia sp., Cyanea sp., Linuche sp., Catostylus sp., Carybdea sp., Chironex sp., Stomolophus sp., Rhiozostoma sp., Corinactis sp., y similares.

El término "antihistamina" se refiere a la clase general de compuestos que inhiben la unión de la histamina. Existen generalmente dos tipos de receptores de histamina, H_{1} y H_{2}. Los antagonistas de ambos tipos de receptores de histamina son efectivos para hacer disminuir o prevenir la descarga nematoquistica.

El término "catión" se refiere a cualquier ion cargado positivamente. El término "fuente de cationes" se refiere a cualquier sustancia que sea capaz de suministrar iones cargados positivamente. De manera preferible, los cationes son cationes metálicos. De manera aún más preferible, son cationes alcalinos, por ejemplo, Li^{+}, Na^{+} o K^{+}, o cationes alcalinotérreos, por ejemplo, Mg^{2+}, Ca^{2+} y similares. Las fuentes de esos cationes son conocidas por aquellos expertos en la técnica y se encuentran comercialmente disponibles. De manera preferible, la fuente es una sal. Los ejemplos no limitantes incluyen al CaCl_{2}, MgCl_{2} y KCl y similares.

El término "base de ungüento" se refiere a un vehículo para sustancias que se pretende sirvan para aplicarse externamente al cuerpo. De manera general, la base comprenderá el ingrediente principal de una composición aplicada tópicamente.

El término "glicoproteína" se refiere a una proteína conjugada que contiene uno o más residuos de carbohidrato enlazados covalentemente.

El término "cantidad efectiva" se refiere a una cantidad suficiente para efectuar resultados benéficos o deseados. Para los propósitos de esta invención, una cantidad efectiva de una antihistamina y/o un catión, es una cantidad suficiente para inhibir, limitar, reprimir, paliar o prevenir la descarga de los nematoquistes.

El término "concentración final" se refiere a la concentración del ingrediente después de que la composición ha sido preparada incluyendo, por ejemplo, la concentración de la composición después de haber sido colocada en un ambiente acuoso.

El término "ambiente circundante" se refiere al medio acuoso que rodea los organismos marinos urticantes. Éste incluye, por ejemplo, estanques de peces, acuarios, recintos oceánicos y similares.

La presente invención incluye productos químicos que inhiben la descarga nematoquistica. Sin estar obligados a una teoría, se cree que la presente invención actúa para inhibir la descarga interfiriendo con la descarga nematoquística a tres niveles: (1) mediante la reducción de las secreciones de estimuladores de la piel; (2) mediante la acción como un antagonista quimiorreceptor activador de la descarga y (3) mediante la interferencia con la acumulación de presión hidrostática requerida para la descarga.

Las composiciones de la presente invención son efectivas para inhibir la descarga de nematoquistes. La presente invención incluye composiciones que comprenden una cantidad efectiva de antihistamina y una cantidad efectiva de al menos un catión. De manera preferible, la antihistamina es difenhidramina, tripelanamina o cimetidina. Esas antihistaminas se encuentran comercialmente disponibles de varios distribuidores. En una modalidad preferida, se utiliza difenhidramida. La antihistamina se agrega a una concentración final de entre 0.001% y 1%. De manera aun mas preferible, la concentracion es de entre 0.001% y 0.2%. De manera preferible, la concentración de cationes es desde 50 mM hasta 500 mM. De manera aun mas preferible, la concentración es de 50 mM hasta 200 mM.

Las concentraciones mayores de 1 M probablemente también son efectivas. Se cree que concentraciones mayores de la antihistamina o cationes serían efectivas, pero en vista de las consideraciones de costo y cualesquiera efectos laterales potenciales, se prefieren las cantidades especificadas anteriormente.

La presión hidrostática es la fuerza motriz para la descarga nematoquistica. Para generar la presión necesaria, los cationes unidos (Ca^{++}, K^{++}, Mg^{++} NH_{4}^{+}, Na^{+} y/o Co^{++}) son liberados de la cápsula nematoquistica interna. Por ejemplo, la concentración de Ca^{++} en los nematoquistes en reposo internos es de 300-600 mM, este Ca^{++} está unido a la matriz de PGA. La liberación del Ca^{++} durante la descarga nematoquística incrementa la tonicidad de la cápsula interna y transforma la presión osmótica en presión hidrostática. La concentración de cat+ en la célula nematocítica, fuera de la cápsula nematoquistica, y en el agua marina es de 7 mM. Cuando la concentración de Ca^{++} en los fluidos circundantes de la cápsula alcanza 50 mM, la osmolaridad de los nematoquistes se reduce y es menos probable que ocurra la descarga. Debido a que los cationes implicados en la descarga nematoquistica pueden diferir entre especies, la presente invención abarca agregar una mezcla de cationes. De esta manera, la inhibición puede ser efectuada para una gama mas amplia de especies, por ejemplo, en hydras y anemonas de mar. En otro aspecto, se utiliza una cantidad efectiva de un catión únicamente. De manera preferible, los cationes utilizados son Ca^{++}, K^{++}, Na^{++}, Mn^{++}, Co^{++}, Mg^{++} y Fe^{++}. De manera aun mas preferible, ellos son Ca^{++}, K^{++}, y Mg^{++}.

Esos cationes pueden ser obtenidos de varios vendedores comerciales.

En otra modalidad mas, se proporcionan composiciones que comprenden una cantidad efectiva de al menos un cloruro de sal de catión, lo que significa Mn^{++}, Co^{++}, Mg^{++} o Fe^{++}, y de manera preferible un agregado de cloruro de sal de Ca^{++} de catión. La concentración de los cationes es de 200 mM hasta 1 M. De manera mas preferible, la concentración es de 200 mM hasta 500 mM. Es probable que concentraciones mayores de 1 M también sean efectivas.

Al menos un cloruro de sal de catión se incluye en la base del ungüento. Detalles serán dados en la siguiente sección.

La composición descrita aquí puede ser agregada a un ambiente acuoso que circunda al organismo que contiene nematoquistes. Se agrega una cantidad efectiva de la composición al ambiente acuoso que rodea los nematoquistes. Son preferibles las concentraciones descritas anteriormente.

En otro aspecto, las composiciones de la presente invención son formuladas para aplicación tópica. De manera preferible, las formulaciones tópicas que contienen composiciones dentro de la presente invención crean barreras físicas para reducir al mínimo la secreción estimuladora de la piel, y, son por sí mismas, no estimulantes. Las formulaciones deberán ser a prueba de agua para ser útiles para nadadores y buzos. Los compuestos que se unen al Ca^{++}, tales como el citrato de sodio, EDTA, aminoácidos y glicoproteínas generan la descarga de los nematoquistes y, por lo tanto, no deben ser utilizados. Los ejemplos de portadores adecuados incluyen, pero no se limitan a dextran, sulfato de dextran, agarosa, fosfatidil etanolamina, colesterol, palmitato de colesterol, ácido palmítico, ácido oléico, lisolecitina, fosfatidil colina, fosfatidil serina, fosfatidil inositol, escualeno, fenil trimeticona, ácido esteárico, estearato de propilen glicol, petrolato, estearoxitrimetil silano, alcohol estearilico. Otros portadores también son conocidos por aquellos expertos en la técnica. Los polímeros de silicón son los preferidos, puesto que proporcionan buenas barreras, son a prueba de agua, y no estimulan la descarga nematoquistica.

Opcionalmente, las composiciones descritas aquí, pueden contener un protector solar conocido. De manera preferible, los protectores solares contienen al menos un filtro UVA y al menos un filtro UVB. Los productos UVB solubles en aceite, incluyen a los derivados del 3-bencilidencamfor, derivados del ácido 4-aminobenzoico, ésteres de ácido cinámico, derivados de benzofenona, ésteres de ácido bencilidenmalónico. Los filtros UVA solubles en agua incluyen sales del ácido 2-fenilbencimidazol-5-sulfónico, derivados de ácido sulfónico de benzofenonas, y derivados de ácido sulfónico de 3-bencilidencamfor. Las cantidades efectivas de los protectores solares serán conocidas por aquellos expertos en la técnica. De manera preferible, los protectores solares comprenden entre aproximadamente 0.1% y 30% en peso de la preparación total.

Ejemplos Ejemplo 1 Disminución de la descarga nematoquistica utilizando antihistamina en un ambiente acuoso

Para probar inicialmente la inhibición de la descarga nematoquística, se efectuó la siguiente prueba. Es típico del comportamiento de los tentáculos de la medusa o anémona de mar adherirse a, y paralizar los nauplios de Artemia sp recién capturada. La adhesión y subsecuente parálisis es característica de la descarga nematoquística por los tentáculos. Se prepararon pequeños fragmentos de 2 a 3 mm de tentáculos de medusa o anémona de mar y se colocaron en una placa de 12 pozos que contenía agua marina filtrada. Los fragmentos de tentáculos se lavaron cambiando el agua marina filtrada tres veces. Se agregó 1 ml de agua marina filtrada a cada pozo después del lavado final. En 6 de los 12 pozos, se agregó la antihistamina clorhidrato de difenhidramina a una concentración final de 0.02%. Los 6 pozos sin la antihistamina sirvieron como controles. A continuación se agregó la Artemia sp. a cada pozo en un volumen total de 50 y 100 uL de agua marina filtrada. 2 minutos después, se midió el número de Artemias ancladas o paralizadas en cada pozo. Los resultados se muestran en la Tabla 1.

TABLA 1

Agua circundante	Nº de Artemias paralizadas	Nº de Artemias totales
Agua marina + antihistamina	2	10
Agua marina + antihistamina	1	8
Agua marina + antihistamina	2	12
Agua marina + antihistamina	3	14
Agua marina + antihistamina	2	10

TABLA 1 (continuación)

Agua circundante	Nº de Artemias paralizadas	Nº de Artemias totales
Agua marina + antihistamina	1	10
Agua marina sola	8	10
Agua marina sola	9	13
Agua marina sola	9	11
Agua marina sola	7	10
Agua marina sola	9	11
Agua marina sola	8	9

\vskip1.000000\baselineskip

Tomados juntos, esos resultados muestran que 11 de las 64 Artemias fueron paralizadas por nematoquistes cuando se agregó antihistamina a su ambiente. En contraste, fueron paralizadas 50 de 64 Artemias por los nematoquistes cuando no estuvo presente la antihistamina. La difenhidrarnina disminuye significativamente el número de Artemias paralizadas por los nematoquistes.

Ejemplo 2 Inhibición de la descarga nematoquística en piel humana utilizando antihistamina tópicamente

Para probar la capacidad de la antihistaminas para inhibir la descarga nematoquística, se efectuó un ensayo utilizando piel humana como se describe aquí.

1. Preparación de muestras de piel

Se obtuvo piel humana normal (HS) de circuncisión electiva neonatal. La piel fue colocada inmediatamente en solución salina amortiguada con fosfato (PBS), estéril, que contenía antibiótico/antimicótico. El tejido fue inmerso congelado en Tissue-Tek^{MR}. El tejido fue cortado en secciones de 50 \mum utilizando un crióstato. Las secciones fueron unidas a portaobjetos de vidrio recubiertos con polilisina y mantenidos a -70ºC hasta el momento de su uso. Todas los cortes fueron examinados para asegurarse que estuvieran perpendiculares al plano de la epidermis, exponiendo las secciones transversales de la epidermis, dermis y tejido subcutáneo.

2. Inmunoensayo para detectar la descarga nematoquística

Se preparó un anticuerpo policlonal para la toxina nematoquistica, como se describe en Lotan et al. (1996), supra. De manera breve, la fracción de la CLAP (Cromatografía de Líquidos a Presión) que contenía la toxina fosfolipasa A2 de medusa Rhopilema nomadica se aisló e inyectó en conejos como se describe en Vaitukaitis, pp. 45-62. "Production of Antisera with Small Doses of Immunogen: Multiple Intradermal Infections", en METHODS IN ENZYMOLOGY, VOL. 73. Ed. Larson & Vunkis (Academic Press, New York, 1981). Se recolectó el suero de los conejos después de dos inyecciones, y se examinó la presencia de toxina sobre inmunomanchas.

Los portaobjetos preparados y congelados como se describió anteriormente fueron descongelados a temperatura ambiente. Los portaobjetos fueron sumergidos en agua marina durante aproximadamente 10 segundos y a continuación se unieron a tentáculos de medusa o anémonas de mar durante aproximadamente 10 segundos. Los tentáculos fueron desprendidos, los portaobjetos lavados dos veces con PBS, y bloqueados utilizando suero bovino fetal (FBS) al 5%, y 0.1% de Triton X100 en PBS (solución bloqueadora). Todos los pasos de lavado e incubación se condujeron en un agitador inclinado a temperatura ambiente. Los portaobjetos se incubaron en 10 mL de solución bloqueadora que contenía una dilución 1:2,500 del anticuerpo antitoxina durante una hora. Después de la incubación, los portaobjetos fueron lavados cinco veces durante cinco minutos, cada lavado con 100 mL de 0.1% de Triton X100 en PBS (Solución de lavado). Los portaobjetos fueron entonces incubados en 10 mL de solución bloqueadora que contenía un segundo anticuerpo, FITC anticonejo de cabra (marcador Fluorescente) durante 30 minutos. El exceso de PBS fue removido agitando los portaobjetos. Se agregó una gota de glicerol a cada portaobjetos y los portaobjetos fueron cubiertos con un cubreobjetos de vidrio. Los portaobjetos fueron observados bajo un microscopio de luz convencional o bajo un microscopio ultravioleta (UV) a una amplificación de al menos
200x.

3. Inhibición de la descarga nematoquistica en muestras de piel humana

Para verificar la descarga nematoquística, se utilizaron tres tipos de medusas vivas Aurelia Aurita, Pelagia noctiluca y Chrysaora quinquecirrha y dos especies de anémona de mar Anthoplaura elegantissima y Corinactis californica en este experimento.

Se descongelaron cuatro portaobjetos de piel humano congelada a temperatura ambiente. Los dos portaobjetos fueron sumergidos en glicerol (control) y los otros dos fueron sumergidos en el glicerol que contenía 0.2% de difenhidramina. Los portaobjetos fueron colocados verticalmente sobre un disco de vidrio para permitir que el glicerol goteara. Los portaobjetos fueron entonces expuestos a las especies de medusa o anémona de mar anotadas anteriormente y se determinó el número de nematoquistes descargados utilizando un análisis inmunohistoquímico. Sobre los portaobjetos sólo con glicerol, se contabilizaron 135 y hasta 500 nematoquistes por portaobjeto. Sobre el de glicerol más antihistamina (difenhidramina) se contabilizaron de 10 a 52 nematoquistes. Esos resultados demuestran que la antihistamina difenhidramina es efectiva para inhibir la descarga nematoquistica en muestras de piel humana.

Para hacer un paralelismo estrecho con las condiciones naturales, bajo las cuales la medusa pica a los humanos, se efectuaron los experimentos descritos anteriormente en el Acuario de la Bahía de Monterrey con las especies de medusas Chrysaora quinquecirrha y Pelagia noctiluca. Se sumergieron un total de 35 portaobjetos con piel humana en las sustancias de control o prueba y se expusieron a la medusa. Seis portaobjetos no tratados, siete portaobjetos sumergidos en glicerol, y siete sumergidos en glicerol más 0.2% de difenhidramina se expusieron a cada una de las especies de medusa durante aproximadamente 10 a 15 segundos. Los portaobjetos de piel humana expuestos a Chrysaora quinquecirrha mostraron que la difenhidramina disminuye la descarga nematoquistica 2.5-5 veces. En la Pelagia noctiluca se observó una reducción significativa de los nematoquistes descargados. Se observó una disminución de 3 veces en la descarga nematoquistica con Aurelia (N=3 para las pruebas y 3 para cada control), sin embargo, se descargó un bajo número de nematoquistes en el control (menos de 100), conduciendo de este modo, a resultados menos sorprendentes en comparación con los obtenidos con otras especies.

Ejemplo 3 Inhibición de la descarga nematoquistica utilizando antihistamina y cationes

Se descongelaron portaobjetos con piel humana congelada a temperatura ambiente y se sumergieron en glicerol con un contenido de 0.2% de difenhidramina y 10 mM de CaCl_{2}, KCl o MgCl_{2}. Los portaobjetos control se sumergieron únicamente en glicerol. Los portaobjetos se colocaron verticalmente en un disco de vidrio para permitir que el glicerol goteara. El portaobjetos se expuso entonces a la medusa o anémona de mar durante aproximadamente 15 segundos. Se contabilizó el número de nematoquistes que se adhieren a la muestra de piel utilizando el procedimiento descrito en el Ejemplo 2.

Ejemplo 4 Inhibición de la infección por Myxozoan

El reconocimiento del huésped y el anclamiento de los parásitos a sus organismos huésped es efectuado por la descarga nematoquistica. Por ejemplo, reconoce la etapa de la infección de la triactinomixón e infecta peces huéspedes específicos mediante la extrusión de una cápsula polar. Yokoyama, supra. Los filamentos de la cápsula polar penetran la epidermis del pez y se anclan los parásitos a su huésped.

Para prevenir infecciones parásitas, se agregó una concentración final de 0.02% de antihistamina clorhidrato de difenhidramina y 100 mM de un catión, por ejemplo, CaCl_{2}, MgCl_{2} o KCl, al estanque de peces o acuario. El catión se seleccionó en base al catión que normalmente se encuentra en la luz de la cápsula polar. A diferencia de los nematoquistes cnidarianos, los triactinomixones están expuestos al ambiente circundante. Yokoyama, supra han demostrado previamente que la fuerza iónica del ambiente acuoso interfiere con la estructura interna del triactinomixón. De este modo, la presente invención implica prevenir la infección de peces por dos mecanismos: (1) antihistaminas para bloquear el reconocimiento del huésped y (2) cationes para inactivar la cápsula polar.

Se expusieron peces de entre 14 y 21 días de edad que son susceptibles al triactinomixón a un promedio de 10,000 triactinomixones contenidos en el agua durante aproximadamente 1 hora, en un volumen total de 100 mL de agua. En acuarios de prueba, el agua contiene 0.02% de clorhidrato de difenhidramina y 100 mM de KCl, MgCl_{2} o CaCl_{2}. Los acuarios control no tienen antihistamina o catión. El nivel de infección por triactinomixón se determinó por microscopía, o por inmunoensayo de acuerdo a lo descrito en el Ejemplo 2. Pueden ser utilizadas las mismas concentraciones de antihistamina y catión en estanques de peces o acuarios a gran escala.

Ejemplo 5 Inhibición de la descarga nematoquística en piel humana utilizando cationes aplicados tópicamente

Para probar la capacidad de los cationes para inhibir la descarga nematoquística, se efectuó un ensayo utilizando piel humana como se describe aquí.

1. Preparación de las muestras de piel

Se obtuvo piel humana normal (HS) de circuncisión selectiva neonatal. La piel se colocó inmediatamente en solución salina amortiguada con fosfato (PBS) estéril, que contenía antibiótico/antimicótico. El tejido se incrustó congelado en Tissue-Tek^{MR}. El tejido se cortó entonces en secciones de 50 \mum utilizando un crióstato. Las secciones o cortes se unieron a portaobjetos de vidrio recubiertos con polilisina y se 5 mantuvieron a -70ºC hasta el momento de su uso. Todas las secciones o cortes se examinaron para asegurarse que estuvieran perpendiculares al plano de la epidermis, exponiendo las secciones transversales de la epidermis, dermis y tejido subcutáneo.

2. Inmunoensayo para detectar la descarga nematoquística

Se preparó un anticuerpo policlonal específico para la toxina nematoquistica, como se describe en Lotan et al. (1996), supra. De manera breve, la fracción de la CLAP que contenía la toxina fosfolipasa A2 de la medusa Rhopilema nomadica se aisló e inyectó en conejos como se describe en Vaitukaitis, pp. 45-62. "Production of Antisera with Small Doses of Immunogen: Multiple Intradermal Injections", en METHODS IN ENZYMOLOGY, VOL. 73. Ed. Larson & Vunkis (Academic Press, New York, 1981). Se recolectó el suero de los conejos después de dos inyecciones, y se examinó la presencia de toxina sobre inmunomanchas.

Los portaobjetos preparados y congelados como se describió anteriormente fueron descongelados a temperatura ambiente. Los portaobjetos fueron sumergidos en agua marina durante aproximadamente 10 segundos y a continuación se unieron a tentáculos de medusa o anémonas de mar durante aproximadamente 10 segundos. Los tentáculos fueron desprendidos, los portaobjetos lavados dos veces con PBS, y bloqueados utilizando 5% de suero Bovino Fetal (FBS), y 0.1% de Triton X100 en PBS (solución bloqueadora). Todos los pasos de lavado e incubación se condujeron en un agitador inclinado a temperatura ambiente. Los portaobjetos se incubaron en 10 mL de solución bloqueadora que contenía une dilución 1:2,500 del anticuerpo antitoxina durante una hora. Después de la incubación, los portaobjetos fueron lavados cinco veces durante cinco minutos, cada lavado con 100 mL 15 de 0.1% de Triton X100 en PBS (Solución de lavado). Los portaobjetos fueron entonces incubados en 10 mL de solución bloqueadora que contenía un segundo anticuerpo, FITC anticonejo de cabra (Marcador fluorescente) durante 30 minutos. El exceso de PBS fue removido agitando los portaobjetos. Se agregó una gota de glicerol a cada portaobjetos y los portaobjetos fueron cubiertos con un cubreobjetos de vidrio. Los portaobjetos fueron observados bajo un microscopio de luz convencional o bajo un microscopio ultravioleta (UV) a una amplificación de al menos 200x.

3. Inhibición de la descarga nematoquistica en muestras de piel humana A. Inhibición con calcio

Para verificar la descarga nematoquistica sobre muestras de piel humana, se efectuó el experimento descrito aquí en el Acuario de la Bahía de Monterrey con las especies de medusa Chrysaora quinquecirrha.

Veintitrés portaobjetos con piel humana congelados se descongelaron a temperatura ambiente. Siete portaobjetos no tratados, cinco portaobjetos sumergidos en gel de silicón y los portaobjetos restantes sumergidos en gel de silicón con un contenido de 200 mL de CaCl_{2} fueron expuestos a las especies de medusa durante aproximadamente 10 a 15 segundos. Los portaobjetos fueron analizados para determinar el número de nematoquistes descargados utilizando el análisis inmunohistoquimico. Los portaobjetos no tratados tuvieron un promedio de 464 nematoquistes descargados por muestra. Los portaobjetos tratados con gel de silicón antes de la exposición a la medusa, mostraron un promedio de 316 nematoquistes por muestra. Los portaobjetos tratados con gel de silicón que contenían 200 mM de CaCl_{2} mostraron una disminución de 4.7 veces en el número de nematoquistes, un promedio de 59 por portaobjeto, en comparación con los portaobjetos no tratados y aquéllos tratados con gel de silicón únicamente.

B. Inhibición con calcio y magnesio

Para hacer un paralelismo estrecho con las condiciones naturales bajo las cuales la medusa pica a los humanos, se efectuaron los experimentos descritos anteriormente en el Acuario de la Bahía de Monterrey con las especies de medusa Pelagia noctiluca y Chrysaora quinquecirrha.

Treinta portaobjetos con piel humana congelados se descongelaron a temperatura ambiente. Diez portaobjetos no tratados, diez portaobjetos sumergidos en glicerol y diez portaobjetos sumergidos en glicerol con un contenido de 200 mM de CaCl_{2} más 200 mM de MgCl_{2} fueron expuestos a cada una de las especies de medusa durante aproximadamente 10 a 15 segundos. Los portaobjetos fueron analizados para determinar el número de nematoquistes descargados utilizando el análisis inmunohistoquimico. Los portaobjetos no tratados y los portaobjetos tratados únicamente con glicerol antes de la exposición a la medusa, mostraron resultados equivalentes con un promedio de 500 nematoquistes por muestra. Los portaobjetos tratados con glicerol con un contenido de 200 mM de CaCl más 200 mM de
MgCl mostraron una disminución de 5 veces en el número de nematoquistes, un promedio de 100 por portaobjeto, en comparación con los portaobjetos no tratados y aquéllos tratados con glicerol únicamente.

Ejemplo 6 Inhibición de la descarga nematoquistica utilizando cationes sobre sujetos humanos

Tres centímetros cuadrados de la parte interna del brazo izquierdo de un sujeto humano se cubrieron con glicerol que contenía 200 mM de CaCl_{2} más 200 mM de MgCl_{2}. A continuación, el brazo se sumergió en agua marina y después de 5 segundos se expuso a los tentáculos de Chrysaora quinquecirrha (ortiga de mar) durante aproximadamente 10 a 15 segundos. Se repitió el mismo experimento utilizando el brazo derecho cubierto con glicerol únicamente como control. Se expusieron cinco sujetos humanos a Chrysaora quinquecirrha y 5 sujetos adicionales se expusieron a los tentáculos pescadores de Pelagia noctiluca. Se evaluó el grado de daño a la piel en cada sujeto 5 minutos y una horas después de la exposición. Siete de los diez sujetos probados no mostraron daño en la piel sobre el brazo izquierdo, mientras que tres exhibieron daño menor en el brazo izquierdo. Se observó daño de la piel de moderado a severo en el brazo derecho de esos sujetos.

Ejemplo 7 Inhibición de la infección por Myxozoan

Para prevenir infecciones parásitas, se agregó una concentración final de 200 mM de un catión, por ejemplo, CaCl_{2}, MgCl_{2} o KCl, de manera preferible, al menos dos cationes tales como CaCl_{2} o MgCl_{2}, al estanque de peces o acuario. El catión se seleccionó en base al catión que normalmente se encuentra en la luz de la cápsula polar. A diferencia de los nematoquistes cnidarianos, los triactinomixones están expuestos al ambiente circundante. Yokoyama, supra previamente han demostrado que la fuerza fónica del ambiente acuoso interfiere con la estructura interna del triactinomixón. De este modo, la presente invención implica prevenir de la infección de peces por dos mecanismos: (1) antihistaminas para bloquear el reconocimiento del huésped y (2) cationes para inactivar la cápsula polar.

Se expusieron peces de entre 14 y 21 días de edad que son susceptibles al triactinomixón a un promedio de 10,000 triactinomixones contenidos en el agua, durante aproximadamente 1 hora, en un volumen total de 100 mL de agua. En acuarios de prueba, el agua contiene 200 mM de KCl, MgCl_{2} o CaCl_{2}, o de manera preferible 200 mM de CaCl_{2} y MgCl_{2}. Los acuarios control no tienen cationes. El nivel de infección por triactinomixones se determinó por microscopia, o por inmunoensayo como se describe en el Ejemplo 2. Pueden ser utilizadas las mismas concentraciones del catión en estanques para peces o acuarios a gran escala.

Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims

1. Una composición para inhibir la descarga de nematocistos o cápsulas polares, consistiendo la composición de una cantidad efectiva de una antihistamina a una concentración final entre 0.001% y 1.0% y por lo menos un catión metálico, en donde el catión metálico es Ca^{++}, Mn^{++}, Co^{++}, Mg^{++} o Fe^{++}, en un vehículo adecuado para aplicación tópica.

2. La composición según la reivindicación 1 en donde el vehículo consiste en un lípido.

3. La composición según la reivindicación 1 en donde el vehículo consiste en un polímero silicónico.

4. La composición según el la reivindicación 1, incluyendo también un protector contra el sol.

5. La composición de cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que la antihistamina es escogida de entre el grupo consistente de difenhidramina, cimetidina y tripelenamina.

6. La composición según la reivindicación 5 en el cuál la antihistamina es difenhidramina.

7. La composición según cualquiera de las reivindicaciones anteriores , en donde la concentración final de la antihistamina es entre 0.001% y 0.2%.

8. La composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 , que es apropiada para inhibir nematocistos descargados de un organismo marino capaz de producir picadura escogido del filo consistente de Cnidaria y Myxozoa.

9. La composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en donde el catión es Ca^{++}.

10. La composición según cualquiera de reivindicaciones 1 a 7, en donde el catión es Mg^{++}.

10. La composición según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la concentración del catión es de 50 mM a 1 M.

12. La composición según la reivindicación 11, en donde la concentración del catión es de 50 mM a 500 mM.

13. La composición según la reivindicación 12, en donde la concentración del catión es de 50 mM a 200 mM.

14. El uso de una antihistamina en la producción de una composición médica que comprende la antihistamina en un vehículo apropiado para aplicación tópica, para inhibir la infección y los efectos tóxicos de descargas de nematocisto o de cápsula polar por la aplicación de la composición en la piel de un sujeto previo contacto con nematocistos o cápsulas polares, inhibiendo con ello la infección y los efectos tóxicos de la descarga de nematocisto o de cápsula polar.

15. El uso según la reivindicación 14, en el que la composición comprende también un protector de sol.

16. El uso según las reivindicaciones 14 o 15, en el que la antihistamina es escogida entre el grupo consistente de difenhidramina, cimetidina y tripelenamina.

17. El uso según la reivindicación 16 en el cuál la antihistamina es difenhidramina.

18. El uso según la reivindicación 17, en donde la concentración final de la difenhidramina es entre 0.001% y 0.2%.

19. El uso según cualquiera de los reclamos 16 a 18, en el que los nematocistos son descargados de un organismo marino capaz de producir picadura escogido del filo consistente de Cnidaria y Myxozoa.

20. El uso según la reivindicación 19 en el que el organismo marino capaz de producir picadura es escogido del grupo de Cnidaria consistente en la medusa, la anémona de mar y el coral.

21. El uso según cualquiera de las reivindicaciones 14 a 20, donde la composición comprende además por lo menos un catión metálico.

22. El uso según el reclamo 19 donde el catión metálico es Ca^{++}, K^{+}, Na^{+}, Mn^{++}, Co^{++}, Mg^{++} o Fe^{++}.

23. El uso de un catión en la manufactura de una composición médica que comprende un catión Ca^{++}, K^{+}, Na^{+}, Mn^{++}, Co^{++}, Mg^{++} o Fe^{++} en un vehículo adecuado para la aplicación tópica para ser aplicada en la piel de un sujeto previo contacto con nematocistos o cápsulas polares, para prevenir con ello la infección y los efectos tóxicos de la descarga de nematocisto o de cápsula polar.

24. El uso según la reivindicación 23, donde tal composición contiene dos cationes.

25. El uso según la reivindicación 24, donde dichos dos cationes son Ca^{++} y Mg^{++}.

26. El uso según la reivindicación 23, donde la composición comprende también un protector de sol.

27. El uso según cualquiera de las reivindicaciones 23 a 26, en el que el medicamento es adecuado para inhibir nematocistos descargados de un organismo marino capaz de producir picadura escogido del filo consistente de Cnidaria y Myxozoa.

28. El uso según la reivindicación 27 en el que el organismo marino capaz de producir picadura es escogido del grupo Cnidaria consistente en la medusa, la anémona de mar y el coral.

29. El uso de una cantidad efectiva de por lo menos un catión que sea Ca^{++}, K^{+}, Na^{+}, Mn^{++}, Co^{++}, Mg^{++} o Fe^{++} para el tratamiento del medio acuoso que rodea el organismo que posee el nematocisto o que posee la cápsula polar, para inhibir la descarga del nematocisto o de la cápsula polar del organismo.

30. El uso según la reivindicación 29, en donde la concentración final del catión es de 50 mM a 1 M.

31. El uso según la reivindicación , donde los cationes son Ca^{++} y Mg^{++}.

32. El uso de por lo menos un catión a una concentración final de 50 mM a 1 M para el tratamiento del medio acuoso que rodea un parásito Myxozoa para inhibir la descarga de nematocistos o de cápsulas polares de tal parásito.

33. El uso según el reclamo 32, donde por lo menos un catión es un catión metálico.

34. El uso según la reivindicación 33, donde tal catión metálico es Ca^{++}, K^{+}, Na^{+}, Mn^{++}, Co^{++}, Mg^{++} o Fe^{++}.

35. El uso según la reivindicación 32, donde dos cationes son añadidos.

36. El uso según la reivindicación 35, donde tales dos cationes son Ca^{++} y Mg^{++}.

37. Una composición para inhibir la descarga de nematocistos o de cápsulas polares, comprendiendo la composición una cantidad efectiva de por lo menos una sal clorhídrica de un catión escogido del grupo consistente de Mn^{++}, Co^{++}, Mg^{++} o Fe^{++}, donde la concentración final de los cationes es de 200 mM a 1 M y donde la sal clorhídrica es incorporada en una base de ungüento para aplicación tópica.

38. Una composición según la reivindicación 37 incluyendo además una sal clorhídrica del catión Ca^{++}.

39. La composición según la reivindicación 8, en donde la concentración final del catión Ca^{++} es de 50 mM a 500 mM.

40. La composición según la reivindicación 38, en donde la concentración del catión Ca^{++} es de 50 mM a 200 mM.

41. La composición según las reivindicaciones 37 o 38 en donde la base de ungüento comprende un lípido.

42. La composición según la reivindicación 39 en donde la base de ungüento comprende un polímero silicónico.

43. La composición según la reivindicación 37 o 38, comprende también un protector de sol.

44. La composición según la reivindicación 37 o 38, en donde la concentración final de los cationes es de 200 mM a 500 mM.

45. La composición según la reivindicación 42, en donde la concentración final de los cationes es de 200 mM.

46. La composición según las reivindicaciones 37 o 38, comprendiendo una cantidad efectiva de dos cationes.

47. La composición según la reivindicación 46, en donde la concentración final de los cationes es de 200 mM a 1 M.

48. La composición según la reivindicación 45, en donde los cationes son Ca^{++} y Mg^{++}.

49. La composición según la reivindicación 47 en donde la concentración final de los cationes es de 200 mM.