ES2255654T3 - Derivados de la 2-oxadiazolcromona. - Google Patents

Derivados de la 2-oxadiazolcromona.

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ES2255654T3 ES03026103T ES03026103T ES2255654T3 ES 2255654 T3 ES2255654 T3 ES 2255654T3 ES 03026103 T ES03026103 T ES 03026103T ES 03026103 T ES03026103 T ES 03026103T ES 2255654 T3 ES2255654 T3 ES 2255654T3
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Abstract

Compuestos de la fórmula I en la que R significa A, X significa H, -OH, -OA, fenoxi, Ar, -O-CO-A, SO3H, SO3A, -OSO3H, -OSO3A, -OSO2A, SO2A, Hal, COOH, COOA, CONH2, NHSO2A, COA, CHO o SO2NH2, dos restos X significan conjuntamente también metilendioxi o etilendioxi, R1 significa H, A, -OH, -OA o Hal, dos restos R1 significan conjuntamente también metilendioxi o etilendioxi, Y significa CH o N, Ar significa fenilo insubstituido o substituido una, dos o tres veces por A, A significa alquilo no ramificado o ramificado con 1 a 10 átomos de carbono, pudiendo estar reemplazados de 1 a 7 átomos de H por F, Hal significa F, Cl, Br o I, n significa 1, 2, 3 o 4, m significa 1, 2, 3, 4 o 5, así como sus derivados, solvatos y estereoisómeros empleables farmacéuticamente, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones.

Description

Derivados de la 2-oxadiazolcromona.
Antecedentes de la invención
La invención tenía como cometido encontrar compuestos con valiosas propiedades, especialmente aquellos que pudiesen ser empleados para la fabricación de medicamentos.
La presente invención se refiere a compuestos, que inhiben, regulan y/o modulan la transducción de las señales de la tirosina quinasa, a composiciones que contienen estos compuestos, así como a procedimientos para su empleo para el tratamiento de enfermedades condicionadas por la tirosina quinasa y padecimientos tales como cáncer, crecimiento de tumores, arteriosclerosis, degeneración de la mácula debida a la edad, retinopatía diabética, enfermedades inflamatorias y similares en los mamíferos.
Las tirosina quinasas están constituidas por una clase de enzimas que catalizan la transmisión del fosfato, situado en el extremo, del trifosfato de adenosina en restos de tirosina en los substratos de proteína. Se supone que la tirosina quinasa juega un papel esencial en diversas funciones celulares a través de la fosforilación del substrato, en el caso de la transducción de las señales. Aún cuando no está claro, todavía, el mecanismo exacto de la transducción de las señales, se ha observado que las tirosina quinasas representan factores importantes en la proliferación celular, en la carcinogénesis y en la diferenciación celular.
Las tirosina quinasas pueden subdividirse en tirosina quinasas receptoras y en tirosina quinasas citosólicas. Las tirosina quinasas receptoras presentan una parte extracelular, una parte transmembranal y una parte intracelular, mientras que las tirosina quinasas citosólicas son, exclusivamente, intracelulares.
Las tirosina quinasas receptoras están constituidas por una pluralidad de receptores transmembranales con actividad biológica variable. De este modo se han identificado, aproximadamente, 20 subfamilias diferentes de tirosina quinasas receptoras. Una subfamilia de las tirosina quinasas, que porta la denominación subfamilia HER, está constituida por EGFR, HER2, HER3 y HER4. A los ligandos de esta subfamilia receptora pertenecen el factor de crecimiento epitelial, el TGF-\alpha, la anfiregulina, el HB-EGF, betacelulina y la herregulina. La subfamilia de la insulina, a la que pertenecen la INS-R, la IGF-IR e la IR-R, representa otra subfamilia de estas tirosina quinasas receptoras. La subfamilia PDGF contiene los receptores PDGF-\alpha y PDGF-\beta, el CSFIR, el c-kit y la FLK-Ii. Además, existe la familia FLK, que está constituida por el receptor del dominio de la inserto quinasa (KDR), la hepatoquinasa-1 fetal (FLK-1), la hepatoquinasa-4 fetal (FLK-4) y la fms-tirosina quinasa-1 (flt-1). Las familias PDGF y FLK se tratan usualmente de manera conjunta debido a la similitud que existe entre ambos grupos. Para un tratamiento exacto de las tirosina quinasas receptoras puede verse el trabajo de Plowman et al., DN & P 7 (6):334-339, 1994.
Las tirosina quinasas citosólicas están constituidas, igualmente, por una pluralidad de subfamilias, entre las cuales se encuentran las Src, Frk, Btk, Csk, Abl, Zap70, Fes/Fps, Fak, Jak, Ack y LIMK. Cada una de estas subfamilias está subdividida, además, en diversos receptores. De este modo, por ejemplo, la subfamilia Src representa una de las subfamilias mayores. Ésta contiene las Src, Yes, Fyn, Lyn, Lck, Blk, Hck, Fgr e Yrk. La subfamilia enzimática Src ha sido relacionada con la oncogénesis. Para un tratamiento más exacto de las tirosina quinasas citosólicas puede verse el trabajo de Bolen Oncogene, 8:2025-2031 (1993).
Tanto las tirosina quinasas receptoras, como también las tirosina quinasas citosólicas participan en las vías de transmisión de las señales de las células, que conducen a diversos estados de padecimiento, entre ellos el cáncer, la psoriasis y las reacciones hiperinmunes.
Se ha propuesto, que juegan un papel en la angiogénesis diversas tirosina quinasas receptoras así como los factores de crecimiento relacionados con las mismas, aún cuando algunas de ellas pudrían favorecer indirectamente la angiogénesis (Mustonen y Alitalo, J. Cell. Biol. 129:895-898, 1995). Una de estas tirosina quinasas receptoras es la hepatoquinasa 1 fetal, denominada también FLK-1. El análogo humano de la FLK-1 es el receptor, que contiene dominios de inserción de quinasa, KDR que se conoce, también, bajo la denominación de receptor del factor de crecimiento celular endotélico vascular 2 o bien VEGFR-2, puesto que enlaza al VEGF con una afinidad elevada. Finalmente también se ha denominado NYK a la versión múrida de este receptor (Oelrichs et al., Oncogene 8(1):11-15, 1993). El VEGF y el KDR representan un par ligando-receptor, que juega un papel esencial en la proliferación de las células endotélicas vasculares y en la formación y en la renovación de los vasos sanguíneos, que se denominan vasculogénesis o bien angiogénesis.
La angiogénesis se caracteriza por una actividad extraordinariamente intensa del factor de crecimiento endotélico vascular (VEGF). El VEGF está constituido, propiamente dicho, por una familia de ligandos (Klagsburn y D'Amore, Cytokine & Growth Factor Reviews 7:259-270, 1996). El VEGF enlaza con el receptor de la tirosina quinasa KDR transmembranal, de elevada afinidad y las fms-tirosina quinasas-1 emparentadas, que se conocen, también, bajo la denominación Flt-1 o receptor del factor de crecimiento celular endotélico vascular 1 (VEGFR-1). Se desprende de los ensayos Knockout de cultivo celular y genéticos, que cada receptor contribuye a diversos aspectos de la angiogénesis. El KDR provoca la función mitógena del VEGF, mientras que el Flt-1 parece que modula funciones no mitógenas, como las que están relacionadas con la adhesión celular. Así pues, una inhibición del KDR modula el nivel de la actividad mitógena del VEGF. En realidad se ha observado, que el crecimiento tumoral está influenciado por el efecto antiangiogénico de los antagonistas del receptor del VEGF (Kim et al., Nature 362, páginas 841-844, 1993).
Así pues, lo tumores sólidos pueden tratarse con inhibidores de la tirosina, puesto que estos tumores dependen de la angiogénesis para la formación de los vasos sanguíneos, necesarios para el favorecimiento de su crecimiento. A estos tumores sólidos pertenecen las leucemias monocíticas, el carcinoma cerebral, urogenital, del sistema linfático, del estómago, de la laringe y pulmonar, entre ellos el adenocarcinoma pulmonar y el carcinoma pulmonar microcelular. Otros ejemplos corresponden a carcinomas, en los que se observa una sobreexpresión de la activación de la oncogénesis activada por el Raf (por ejemplo K-ras, erb-B). A éstos carcinomas pertenecen el carcinoma de páncreas y de mama. Así pues, los productos inhibidores de estas tirosina quinasas son adecuados para la prevención y el tratamiento de las enfermedades proliferantes, que están condicionadas por estos enzimas.
La actividad angiogénica del VEGF no está limitada a los tumores. El VEGF es responsable de la actividad angiogénica producida en la retina, o bien en las proximidades de la retina, en el caso de la retinopatía diabética. Este crecimiento vascular en la retina conduce a un debilitamiento de la agudeza visual y, finalmente, a la ceguera. Los niveles de VEGF-mRNA y -proteína en el ojo son aumentados por dolencias tales como la oclusión venosa en la retina en el caso de los primates, así como por un nivel reducido de pO_{2} en el caso del ratón, que conducen a la neoplasia vascular. Los anticuerpos monoclonales anti-VEGF, inyectados intraocularmente, o los inmunoconjugados del receptor del VEGF, inhiben la neoplasia vascular en el ojo tanto en el modelo con primates como también en el modelo con animales roedores. Independientemente del motivo de la inducción del VEGF en el caso de la retinopatía diabética de los seres humanos, la inhibición del VEGF ocular es adecuada para el tratamiento de esta enfermedad.
La expresión del VEGF está también fuertemente acrecentada en las regiones hipóxicas de tumores animales y humanos junto a zonas necróticas. El VEGF es regulado al alza además por medio de la expresión de los oncogenes ras, raf, src y del mutante p53 (que son significativos, todos ellos, en la lucha contra el cáncer). Los anticuerpos monoclonales anti-VEGF inhiben el crecimiento de tumores humanos en el caso del ratón desnudo. Aún cuando las mismas células tumorales expresan todavía el VEGF en cultivo, los anticuerpos reducen su velocidad de división celular. De este modo el VEGF, procedente de tumores, no actúa como factor mitógeno autocrino. Así pues, el VEGF contribuye al crecimiento de los tumores in vivo, dado que favorece la angiogénesis por medio de su actividad quimiotáxica y mitogénica paracrina de las células endotélicas vasculares. Estos anticuerpos monoclonales inhiben también el crecimiento de los carcinomas de colon humanos, que están vascularizados, de manera típica, con menor intensidad en el caso de los ratones carentes de timo y reducen el número de los tumores que se forman a partir de las células inoculadas.
La expresión de un constructo de Flk-1, Flt-1, que enlaza al VEGF, que es, el homólogo acortado del receptor de KDR-múrido, para la eliminación de los dominios citoplasmáticos de la tirosina quinasa, sin embargo con conservación de un anclaje con la membrana, detiene, en virus, prácticamente el crecimiento de un glioblastoma transplantable en el ratón, probablemente debido al mecanismo negativo dominante de la formación de heterodímero con receptores del VEGF de las celula endotélicas, ransmembranales.
Las células madre embrionarias, que se desarrollan en el ratón desnudo usualmente en forma de tumores sólidos, no forman, tumores detectables en el caso del Knock-out de ambos alelos del VEGF. A partir de estos datos aparece, conjuntamente, el papel del VEGF en el crecimiento de los tumores sólidos. La inhibición del KDR o bien del
Flt-1 participa en la angiogénesis patológica y estos receptores son adecuados para el tratamiento de enfermedades en las que la angiogénesis represente una parte del conjunto de la patología, por ejemplo inflamación, vascularización diabética de la retina así como diversas formas de cáncer, puesto que se sabe que el crecimiento tumoral depende de la angiogénesis (Weidner et al., N. Engl. J. Med., 324, páginas 1-8, 1991).
En el caso de la antipoyetina 1 (Ang1), que es un ligando para la tirosina quinasa receptora TIE-2, específica del endotelio, se trata de un nuevo factor angiogénico (Davis et al, Cell. 1996, 87:1161-1169; Partanen et al, Mol. Cell Biol., 12:1698-1707 (1992); US-Patent Nr.5,521,073; 5,879,672; 5,877,020; y 6,030,831). El acrónimo TIE significa "tirosina quinasa con dominios con homología Ig y EGF". La TIE se utiliza para la identificación de una clase de tirosina quinasas receptoras, que, se expresan, exclusivamente, en las células endotélicas vasculares y células hemopoyéticas primigenias. Las quinasas receptoras TIE se caracterizan, de manera típica, por la presencia de un dominio similar al EGF y por un dominio similar a la inmunoglobulina (IG), que están constituidos por unidades plegadas extracelulares, que están estabilizadas por medio de enlaces de puentes de disulfuro entre las cadenas (Partanen et al Curr. Topics Microbiol. Immunol., 1999, 237:159-172). En contra de lo que ocurre con el VEGF, que ejerce su función durante los estadios primigenios en el desarrollo vascular, la Ang1 y su receptor TIE-2 actúan durante los estadios postrimeros en el desarrollo vascular, es decir durante la transformación vascular (transformación se refiere a la formación de un lumen vascular) y la maduración (Yancopoulos et al, Cell, 1998, 93:661-664; Peters, K.G., Circ. Res., 1998, 83(3):342-3; Suri et al, Cell 87, 1171-1180 (1996)).
Por lo tanto era de esperar que una inhibición del TIE-2 debería interrumpir la transformación y la maduración de un nuevo sistema vascular iniciado por angiogénesis y, de este modo, el proceso de angiogénesis. Además la inhibición de los puntos de enlace de los dominios de la quinasa del VEGFR-2 bloquearía la fosforilación de los restos de tirosina y serviría para interrumpir la iniciación de la angiogénesis. Por lo tanto puede suponerse que la inhibición del
TIE-2 y/o del VEGFR-2 impediría la angiogénesis tumoral y servirían para ralentizar o para eliminar por completo el crecimiento tumoral.
Por lo tanto, podría ponerse a disposición un tratamiento del cáncer y de otras enfermedades relacionadas con una angiogénesis desproporcionada.
La presente invención se dirige a procedimientos para la regulación, la modulación o la inhibición del TIE-2 para la profilaxis y/o para el tratamiento de enfermedades en relación con una actividad TIE-2 no regulada o perturbada. Especialmente los compuestos según la invención pueden emplearse también para el tratamiento de ciertas formas de cáncer.
Además, los compuestos según la invención pueden emplearse para poner a disposición efectos adicionales o sinérgicos en el caso de ciertas quimioterapias contra el cáncer existentes, y/o pueden emplearse para restablecer la actividad de ciertas quimioterapias e irradiaciones contra el cáncer existentes.
La presente invención se refiere, además, a los compuestos como inhibidores de las Raf-quinasas.
La fosforilación de las proteínas es un procedimiento fundamental para la regulación de la función celular. El efecto coordinado tanto de las proteína quinasas como también de las fosfatasas controla el grado de fosforilación y, como consecuencia, la actividad específica de la proteína objetivo. Uno de los papeles preponderantes de la fosforilación de las proteínas consiste en la transducción de señales, cuando se amplifican señales extracelulares y se propagan por medio de una cascada de episodios de fosforilación y de desfosforilación de las proteínas, por ejemplo por vía p21^{ras}/raf.
El gen p21^{ras} ha sido descubierto como un oncogen del virus del sarcoma de rata de Harvey y de Kirsten
(H-Ras o bien K-Ras). En el caso de los seres humanos se relacionaron mutaciones características en el gen Ras celular (c-Ras) con muchos tipos diferentes de cáncer. Se ha demostrado que estos alelos mutantes, que activan de manera constituyente el Ras, transforman células en cultivo, tal como por ejemplo la línea celular múrida NIH 3T3.
El oncogen p21^{ras} es un importante factor que contribuye al desarrollo y a la progresión de los carcinomas sólidos humanos y está mutado en el 30% de todos los carcinomas humanos (Bolton et al. (1994) Ann. Rep. Med. Chem., 29, 165-74; Bos. (1989) Cancer Res., 49, 4682-9). En su forma normal, no mutada, la proteína Ras es un elemento clave de la cascada de transducción de las señales, que está controlada por medio de los receptores del factor de crecimiento en casi todos los tejidos (Avruch et al. (1994) Trends Biochem. Sci., 19, 279-83).
Desde el punto de vista bioquímico, la Ras es una proteína enlazante del nucleótido guanina, y la ciclación entre una forma activada enlazada con GTP y una forma pasiva enlazada con GDP está controlada estrictamente por la actividad GTPasa del Ras endógeno y por otras proteínas reguladoras. El producto genético Ras se enlaza sobre el trifosfato de guanina (GTP) y el difosfato de guanina (GDP) e hidroliza GTP para dar GDP. El Ras es activo en estado enlazado con GTP. En el mutante Ras en células cancerosas está debilitada la actividad GTPasa endógena y por lo tanto la proteína suministra señales de crecimiento constructivas en los efectores "Downstream" (aguas abajo), tal como por ejemplo en el enzima Ras-quinasa. Esto conduce al crecimiento de tipo tumoral de las células, que portan estos mutantes (Magnuson et al. (1994) Semin. Cancer Biol., 5, 247-53). El proto-oncogen Ras necesita un proto-oncogen C-Raf-1 funcionalmente intacto para llevar a cabo la transducción de las señales de crecimiento y de diferenciación iniciadas en eucariotas superiores mediante tirosina-quinasas receptoras y no receptoras.
El Ras activado es necesario para la activación del proto-oncogen C-Raf-1, sin embargo han sido caracterizadas entre tanto perfectamente las etapas bioquímicas a través de las cuales el Ras activa la Raf-1-proteína-(Ser/Thr)-quinasa. Se ha observado que la inhibición del efecto del Ras activo mediante inhibición de la vía para las señales de la Raf-quinasa por medio de la administración de anticuerpos desactivadores contra la Raf-quinasa o por medio de coexpresión de Raf-quinasa negativamente dominante o MEK (MAPKK) negativamente dominante, conduce al substrato de la Raf-quinasa, a la reversión de las células transformadas para dar fenotipos de crecimiento normales, véase: Daum et al. (1994) Trends Biochem. Sci., 19, 474-80; Fridman et al. (1994) J Biol. Chem., 269, 30105-8. Kolch et al (1991) Nature, 349, 426-28) y la conferencia Weinstein-Oppenheimer et al. Pharm. & Therap. (2000),
88, 229-279.
De manera similar se relacionó la inhibición de la Raf-quinasa (mediante oligodesoxinucleótidos antisentido) in vitro e in vivo con la inhibición del crecimiento de una serie de diversos tipos de tumores humanos (Monia et al., Nat. Med. 1996, 2, 668-75).
Las proteína-quinasas específicas de Raf-serina y de treonina son enzimas citosólicos, que estimulan el crecimiento celular de una serie de diversos sistemas celulares (Rapp, U.R., et al. (1988) in The Oncogene Handbook; T. Curran, E.P. Reddy y A. Skalka (editor) Elsevier Science Publishers; Niederlande, p. 213-253; Rapp, U.R., et al. (1988) Cold Spring Harbor Sym. Quant. Biol. 53:173-184; Rapp, U.R., et al. (1990) Inv Curr. Top. Microbiol. Immunol. Potter y Melchers (editor), Berlin, Springer-Verlag 166:129-139).
Se han caracterizado tres isómeros:
C-Raf (Raf-1) (Bonner, T.I., et al. (1986) Nucleic Acids Res. 14:1009-1015). A-Raf (Beck, T.W., et al. (1987) Nucleic Acids Res. 15:595-609), y B-Raf (Qkawa, S., et al. (1998) Mol. Cell. Biol. 8:2651-2654; Sithanandam, G. et al. (1990) Oncogene:1775). Estos enzimas se diferencian por su expresión en diversos tejidos. El Raf-1 se expresa en todos los órganos y en todas las líneas celulares, que han sido investigadas, y A-Raf y B-Raf se expresan en el tejido urogenital o bien en el tejido cerebral (Storm, S.M. (1990) Oncogene 5:345-351).
Los genes Raf son proto-oncogenes. Éstos pueden iniciar la transformación maligna de células, cuando se expresan en formas específicamente modificadas. Las modificaciones genéticas, que conducen a la activación oncógena, generan una proteína quinasa constitutiva activa mediante la eliminación o la interferencia con un dominio regulador negativo N-terminal de la proteína (Heidecker, G., et al. (1990) Mol. Cell. Biol. 10:2503-2512; Rapp, U.R., et al. (1987) en Oncogenes and Cancer; S. A. Aaronson, J. Bishop, T. Sugimura, M. Terada, K. Toyoshima y P. K. Vogt (editor) Japan Scientific Press, Tokio). La microinyección en células NIH 3T3 de versiones de la proteína Raf activadas de manera oncógena, pero no del tipo salvaje, preparada con vectores de expresión de Escherichia coli conduce a la transformación morfológica y estimula la síntesis del DNA (Rapp, U.R., et al. (1987) en Oncogenes and Cancer; S. A. Aaronson, J. Bishop, T. Sugimura, M. Terada, K. Toyoshima, y P. K. Vogt (editor) Japan Scientific Press, Tokio; Smith, M. R., et al. (1990) Mol. Cell. Biol. 10:3828-3833).
Por lo tanto, el Raf-1 activado es un activador intracelular del crecimiento celular. La Raf-1-proteína-serina-quinasa es un candidato para ser efector "Downstream" (aguas abajo) de la transducción mitógena de señales, puesto que los Raf-oncogenes se encuentran con la detención del crecimiento que resulta de un bloqueo de la actividad Ras celular debido a una mutación celular (células Ras-revertantes) o microinyección de anticuerpos anti-Ras (Rapp, U.R., et al. (1988) en The Oncogene Handbook, T. Curran, E.P. Reddy y A. Skalka (editor), Elsevier Science Publishers; Niederlande, p. 213-253; Smith, M. R., et al. (1986) Nature (Londres) 320:540-543).
La función C-Raf es necesaria para la transformación provocada por una serie de diversos oncogenes enlazados con la membrana y para la estimulación del crecimiento por medio de mitogenes contenidos en sueros (Smith, M.R., et al. (1986) Nature (Londres) 320:540-543). La actividad de la Raf-1-proteína-serina-quinasa está regulada mediante mitogenes a través de la fosforilación (Morrison, D.K., et al. (1989) Cell 58:648-657), que provoca, también, la distribución subcelular (Olah, Z., et al. (1991) Exp. Brain Res. 84:403; Rapp, U.R., et al. (1988) Cold Spring Harbor Sym. Quant. Biol. 53:173-184. A los factores del crecimiento activados con Raf-1-pertenecen el factor del crecimiento procedente de los trombocitos (PDGF) (Morrison, D.K., et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:8855-8859), el factor estimulante de las colonias (Baccarini, M., et al. (1990) EMBO J. 9:3649-3657), la insulina (Blackshear, P.J., et al. (1990) J. Biol. Chem. 265:12115-12118), el factor de crecimiento epidérmico (EGF) (Morrison, R.K., et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:8855-8859), la interleuquina-2 (Turner, B.C., et al. (1991) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:1227) y la interleuquina-3 y el factor de crecimiento de colonias de granulocitos-macrófagos (Carroll, M.P., et al. (1990) J. Biol. Chem. 265:19812-19817).
Después del tratamiento de las células con mitogenes, se transloca la Raf-1-proteína-serina-quinasa activada transiente en la zona perinuclear y en el núcleo (Olah, Z., et al. (1991) Exp. Brain Res. 84:403; Rapp, U.R., et al. (1988) Cold Spring Habor Sym. Quant. Biol. 53:173-184). Las células, que contienen Raf activado, están modificadas en su cuadro de expresión genética (Heidecker, G., et al. (1989) en Genes and signal transduction in multistage carcinogenesis, N. Colburn (editor), Marcel Dekker, Inc., New York, p. 339-374) y Raf-oncogenes activate transcription from Ap-1/PEA3-dependent promoters in transient transfection assays (Jamal, S., et al. (1990) Science 344:463-466; Kaibuchi, K., et al. (1989) J. Biol. Chem. 264:20855-20858; Wasylyk, C., et al. (1989) Mol. Cell. Biol.
9:2247-2250).
Existen al menos dos vías independientes para la activación de Raf-1 mediante mitogenes extracelulares: una, que contiene la proteína quinasa C(KC), y una segunda que se inicia por medio de proteína-tirosina-quinasa (Blackshear, P.J., et al. (1990) J. Biol. Chem. 265:12131-12134; Kovacina, K.S., et al. (1990) J. Biol. Chem. 265:12115-12118; Morrison, D.K., et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:8855-8859; Siegel, J.N., et al. (1990) J. Biol. Chem. 265:18472-18480; Turner, B.C., et al. (1991) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:1227). En cualquier caso, la activación conserva la Raf-1-proteína-fosforilación. La Raf-1-fosforilación puede ser una serie de cascadas de quinasa, que se amplifica mediante autofosforilación, o puede estar provocada completamente mediante autofosforilación, que se inicia mediante el enlace de un posible ligando de activación sobre el dominio Raf-1-regulador, de manera análoga a la de la activación de la PKC por medio de diacilglicerol (Nishizuka, Y. (1986) Science 233:305-312).
Uno de los mecanismos principales, mediante los cuales se provoca la regulación celular, consiste en la transducción de las señales extracelulares a través de la membrana, que a su vez modulan vías bioquímicas en la célula. La fosforilación de las proteínas representa un desarrollo a través del cual se propagan señales intracelulares desde una molécula a otra molécula, lo cual finalmente da como resultado una respuesta celular. Estas cascadas de transducción de señales están altamente reguladas y frecuentemente se solapan, como se desprende por la presencia de muchas proteína-quinasas así como también de fosfatasas. La fosforilación de las proteínas se produce preponderantemente en los restos de serina, de treonina o de tirosina, y las proteína quinasas han sido clasificadas, por lo tanto, según su especificidad del punto de fosforilación, es decir en serina-/treonina-quinasas y tirosina-quinasas. Puesto que la fosforilación es un procedimiento de este tipo, ampliamente extendido en las células y puesto que los fenotipos celulares son influenciados en gran parte por la actividad de esta vía, se supone actualmente que un número de estados patógenos y/o de enfermedades se debe bien a una activación discrepante o bien a mutaciones funcionales en los componentes moleculares de cascadas de quinasa. Como consecuencia se ha prestado una elevada consideración a la caracterización de estas proteínas y compuestos, que son capaces de modular su actividad (véase el artículo general: Weinstein-Oppenheimer et al. Pharma. &. Therap., 2000, 88, 229-279).
La proteína quinasa PKB (denominada también AKT y RAC-PK) es un miembro de la familia AKT/PKB de las serina-/treonina-quinasas, y se ha observado que participan en una serie diversa de vías de señal en la malignidad humana (Nicholson et al., Cell. Signal., 2002, 14, 381-395). La PKB, así como otros miembros de la familia AKT/PKB está localizada en el citosol de células no estimuladas y se transloca, tras la estimulación, hasta la membrana celular. La translocación de la PKB puede activarse por medio de varios ligandos, con inclusión del factor de crecimiento procedente de los trombocitos, del factor de crecimiento epidérmico, del factor de crecimiento, básico, de fibroblastos, por estrés celular, tal como por ejemplo por choque térmico y por hiperosmolaridad e incluso por insulina (Bos, Trends Biochem. Sci., 1995, 20, 441-442), y otros estudios han demostrado que esta activación transcurre a través de la PI3-quinasa, que es sensible a la Wortmannina (Franke et al., Science, 1997, 275, 665-668). Tan pronto como se localizase PKB en la membrana plasmática, se indicaría que interviene en varias funciones en la célula, con inclusión de la apoptosis, en el efecto metabólico de la insulina, en la inducción de la diferenciación y/o de la proliferación, en la síntesis de proteínas y en las respuestas al estrés (Alessi y Cohen, Curr. Opin. Genet. Dev., 1998, 8, 55-62; Downward, Curr. Opin. Cell Biol., 1998, 10, 262-267).
La PKB fue clonada en 1991 por tres grupos independientes (Bellacosa et al., Science, 1991, 254, 274-277; Coffer y Woodgett, Eur. J. Biochem., 1991, 201, 475-481; Jones et al., Cell Regul., 1991, 2, 1001- 1009), sin embargo su relación con el carcinoma humano primario de estómago fue reconocida ya en 1987 (Staal et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U S A, 1987, 84, 5034-5037). La secuenciación de PKB\alpha permite reconocer en los dominios de quinasa una homología con respecto a la PKA- isozima (aproximadamente un 68%) y con relación a la PKC-isozima (aproximadamente un 73%) (Jones et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 1991, 88, 4171-5), un hecho que condujo a su cambio de nombre en PKB. Existen tres isoformas celulares de PKB y dos variantes de engarce (PKB\alpha, \beta, \gamma, \beta_{1}, \gamma_{1}; Brazil et al. Trends in Bio Sci, 2001, 26, 657-663). Se ha encontrado que la PKB\alpha se amplifica o se sobreexpresa en el caso de adenocarcinomas de estómago y en una línea celular de cáncer de mama (Staal et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 1987, 84, 5034-7; Jones et al., Cell Regul., 1991, 2, 1001-9). La PKB\beta se amplifica o se sobreexpresa en el 3% del cáncer de mama (Bellacosa et al., Int. J. Cancer, 1995 64, 280-5), en el 12% del cáncer de páncreas (Cheng et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 1996, 93, 3636-41) y en el 15% del cáncer de ovario (Bellacosa et al., Int. J. Cancer, 1995, 64, 280-5; Cheng et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 1992, 89, 9267-71).
La PKB\gamma se sobreexpresa en el cáncer de mama deficiente de receptor de estrógeno y en las líneas celulares de próstata independientes de andrógeno (Nakatani et al., J. Biol. Chem. 1999, 274, 21528-32).
Se ha propuesto que la PKB es un gen que participa en la reordenación cromosómica en la banda de los cromosomas 14q32. Esta posición es conocida porque está sometida a la reordenación en el caso de malignidades humanas de las células T, tal como por ejemplo en el caso de las leucemias prolinfocíticas y de las leucemias de procedencia mixta en la edad infantil (Staal et al., Genomics, 1988, 2, 96-98).
La PKB juega también un papel para impedir la "muerte celular programada" o la apoptosis por fosforilación inhibidora de ASK-1, Bad, Caspase9 y FKHR (véase una recopilación de Nicholson et al., Cell Signaling 2001, 14, 281-395). Se ha demostrado que la PKB proporciona una señal de supervivencia a las células (véase una recopilación de Lawlor et al., J. of Cell Science 2001, 114, 2903-2910), para protegerlas frente a un número de agentes, con inclusión de la irradiación UV (Dudek et al., Science, 1997, 275, 661-665), eliminación de IGF1 a partir de células neuronales, disolución de la matriz extracelular, estrés y choque térmico (Alessi y Cohen, Curr. Opin. Genet. Dev., 1998, 5, 55-62).
La fosfatasa dual-específica PTEN (Phosphatase and Tensin homologue deleted on Chromosome Ten [fosfatasa y homólogo de tensina delecionado en el cromosoma diez]) aumenta el nivel de Ptdlns(3, 4, 5)P_{3} en la célula mediante desfosforilación de Ptdlns(3, 4, 5)P_{3}. La Ptdlns(3, 4, 5)P_{3} se enlaza en los dominios PH (dominios con homología de Pleckstrina) de PKB. Este enlace representa una etapa fundamental para la translocación de la membrana y para la activación de la PKB. El PTEN es un gen supresor de tumores mutado en una gran fracción de líneas celulares de glioblastoma y de melanoma, de carcinomas de próstata avanzados y de carcinomas endometriales. Además está delecionado en > 80% de los pacientes con considerables padecimientos tales como por ejemplo el síndrome de Cowden, el síndrome de Lhermitte-Duclos y en el síndrome de Bannayan-Zonana. Los pacientes presentan varias características similares, con inclusión de tumores múltiples benignos (harmatomas) y una susceptibilidad acrecentada para las malignidades de mama y de las glándulas tiroideas (Di Cristofano et al., Cell, 2000, 100, 387-390).
Las líneas celulares derivadas de ratones PTEN^{+/-} heterocigóticos (los ratones PTEN^{+/-} heterocigóticos no son capaces de sobrevivir) presentan un nivel acrecentado en Ptdlns(3, 4, 5)P_{3}, que va acompañado de una actividad PKB acrecentada, con una sensibilidad simultáneamente disminuida contra la apoptosis (Di Christofano et al. Nat. Genet. 1998, 19, 348-355; Stambolic et al., Cell, 1998, 95, 29-39, Myers et al., Proc. Natl. Acad. Si. U.S.A., 1998, 96
13513-13518).
La PKB es también capaz de promocionar la progresión del ciclo celular mediante inhibición del inhibidor del ciclo p21 (Zhou et al., Nat. Cell Biol., 2002, 3, 245-252).
Estos descubrimientos pudieron explicar la sobreexpresión de la PKB, que se observa en las células tumorales, que posibilita la supervivencia preferente y la proliferación de carcinomas por impedimento de la progresión normal hacia la apoptosis.
Actualmente no existe ningún producto terapéutico conocido que inhiba de manera eficaz la actividad de la PKB. Por lo tanto existe todavía una necesidad, reconocida desde hace mucho tiempo, de agentes adicionales que sean capaces, a modo de productos quimioterapéuticos, de inhibir de manera eficaz la función de la PKB para la activación de las proteínas proapoptóticas en todos los tipos de cáncer.
La identificación de pequeños compuestos, que inhiban, regulen y/o modulen específicamente la transducción de las señales de las tirosina quinasas, especialmente de la TIE-2 y/o de la Raf-quinasas es, por lo tanto, deseable y constituye un objeto de la presente invención.
Se ha encontrado que los compuestos de la fórmula I y sus sales tienen propiedades farmacológicas muy valiosas con una buena tolerancia. Especialmente presentan propiedades inhibidoras de la tirosina quinasa y especialmente de la TIE-2.
Los compuestos según la invención son adecuados, además, como aditivos para artículos comestibles, para el tratamiento de enfermedades y/o de malfunciones, que se caracterizan por condiciones de estrés oxidantes, así como a modo de aditivos para artículos comestibles, además en formulaciones cosméticas y como agentes protectores contra el sol.
Sumario de la invención
La invención se refiere a compuestos de la fórmula I
1
en la que
R {}\hskip0,55cmsignifica A, 2
X
significa H, -OH, -OA, fenoxi, Ar, -O-CO-A, SO_{3}H, SO_{3}A, -OSO_{3}H, -OSO_{3}A, -OSO_{2}A, SO_{2}A, Hal, COOH, COOA, CONH_{2}, NHSO_{2}A, COA, CHO o SO_{2}NH_{2},
dos restos X significan conjuntamente también metilendioxi o etilendioxi,
R^{1}
significa H, A, -OH, -OA o Hal,
dos restos R^{1} significan conjuntamente también metilendioxi o etilendioxi,
Y
significa CH o N,
Ar
significa fenilo insubstituido o substituido una, dos o tres veces por A,
A
significa alquilo no ramificado o ramificado con 1 a 10 átomos de carbono, pudiendo estar reemplazados de 1 a 7 átomos de H por F,
Hal
significa F, Cl, Br o I,
n
significa 1, 2, 3 o 4,
m
significa 1, 2, 3, 4 o 5,
así como sus derivados, solvatos y estereoisómeros empleables farmacéuticamente, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones.
El objeto de la invención está constituido por los compuestos de la fórmula I y sus sales así como por un procedimiento para la obtención de los compuestos de la fórmula I según las reivindicaciones 1 a 4 así como sus derivados, solvatos o estereoisómeros farmacéuticamente empleables, caracterizado porque
a) en primer lugar se hace reaccionar un compuesto de la fórmula II
3
en la que
X y n tienen el significado indicado en la reivindicación 1,
con un compuesto de la fórmula III
4
en la que
A significa alquilo con 1, 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono,
para dar un compuesto de la fórmula IV
5
en la que
X y n tienen el significado indicado en la reivindicación 1, y
A significa alquilo con 1, 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono,
\vskip1.000000\baselineskip
b) a continuación se hidroliza el éster IV para dar el ácido carboxílico V
6
donde
X y n tienen el significado indicado en la reivindicación 1,
\vskip1.000000\baselineskip
c) a continuación se transforma el ácido carboxílico V en el correspondiente cloruro de acilo VI
7 
\newpage
donde
X y n tienen el significado indicado en la reivindicación 1,
y a continuación se hace reaccionar bien el compuesto de la fórmula VI con un compuesto de la fórmula VII
8
en la que
R tiene el significado indicado en la reivindicación 1,
para dar un compuesto de la fórmula I,
o bien se hace reaccionar el compuesto de la fórmula V con un compuesto de la fórmula VII,
en la que R tiene el significado indicado en la reivindicación 1,
en una reacción en un solo recipiente, con dos etapas, para dar un compuesto de la fórmula I,
y/o
\vskip1.000000\baselineskip
d) se transforma una base o un ácido de la fórmula I en una de sus sales.
El objeto de la invención está constituido también por las formas ópticamente activas (estereoisómeros), por los enantiómeros, los racematos, los diastereómeros así como los hidratos y solvatos de estos compuestos. Se entenderán por solvatos de los compuestos las adiciones de moléculas de disolventes inertes sobre los compuestos, que se formen debido a su fuerza de atracción mutua. Los solvatos son, por ejemplo, monohidratos o dihidratos o alcoholatos.
Se entenderán por derivados farmacéuticamente empleables por ejemplo las sales de los compuestos según la invención así como también los compuestos denominados profármaco.
Se entenderán por derivados profármaco compuestos de la fórmula I modificados por ejemplo con grupos alquilo o con grupos acilo, con azúcares o con oligopéptidos, que se disocien rápidamente en el organismo para dar los compuestos activos según la invención.
A éstos pertenecen también los derivados polímeros biodegradables de los compuestos según la invención, como los que se han descrito por ejemplo en la publicación Int. J. Pharm. 115, 61-67 (1995).
El objeto de la invención son también mezclas de los compuestos según la invención de la fórmula I, por ejemplo mezclas de dos diastereómeros por ejemplo en la proporción 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:10, 1:100 o 1:1000.
De manera especialmente preferente se trata en este caso de mezclas de compuestos estereoisómeros.
Se cumple para todos los restos, que se presenten varias veces, por ejemplo A, que sus significados son independientes entre sí.
A significa alquilo, no está ramificado (es lineal) o está ramificado, y tiene 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 átomos de carbono. Preferentemente A significa metilo, además etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec.-butilo o terc.-butilo, además también pentilo, 1-, 2- o 3-metilbutilo, 1,1-, 1,2- o 2,2-dimetilpropilo, 1-etilpropilo, hexilo, 1-, 2-, 3- o 4-metilpentilo, 1,1-, 1,2-, 1,3-, 2,2-, 2,3- o 3,3-dimetilbutilo, 1- o 2-etilbutilo, 1-etil-1-metilpropilo, 1-etil-2-metilpropilo, 1,1,2- o 1,2,2-trimetilpropilo, de una manera más preferente por ejemplo triflúormetilo.
De forma muy especialmente preferente, A significa alquilo con 1, 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono, preferentemente significa metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec.-butilo, terc.-butilo, pentilo, hexilo, triflúormetilo, pentaflúoretilo o 1,1,1-triflúoretilo.
OA significa alcoxi y preferentemente es, por ejemplo, metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi, triflúormetoxi o ciclopentoxi.
Preferentemente -COA (acilo) significa acetilo, propionilo, además también butirilo, pentanoilo, hexanoilo o por ejemplo benzoilo.
Preferentemente Hal significa F, Cl o Br, así como también I.
Preferentemente X significa -OH, -OA, fenoxi o -O-CO-A, especialmente OH u OA, de forma muy especialmente preferente OH.
Preferentemente R significa A o 9 de forma especialmente preferente significa alquilfenilo, de forma muy especialmente preferente significa terc.-butilfenilo.
Los compuestos de la fórmula I pueden presentarse en diversas formas estereoisómeras. La fórmula I abarca todas estas formas.
Por lo tanto constituyen el objeto de la invención especialmente aquellos compuestos de la fórmula I, en los cuales al menos uno de los restos citados tenga uno de los significados preferentes indicados anteriormente. Algunos grupos preferentes de compuestos pueden expresarse por medio de las fórmulas parciales Ia hasta Id siguientes, que corresponden a la fórmula I y en las que los restos no designados con mayor detalle tienen el significado indicado en el caso de la fórmula I, en las que, sin embargo
en Ia \hskip0,8cm X
significa H, -OH, -OA,
\quad
dos restos X significan conjuntamente también metilendioxi o etilendioxi;
en Ib \hskip0,8cm R \hskip0,4cm significa A 10
X
significa H, -OH, -OA,
\quad
dos restos X significan conjuntamente también metilendioxi o etilendioxi;
en Ic \hskip0,8cm R \hskip0,4cm significa A, 11
X
significa H, -OH o -OA,
Y
significa N,
R^{1}
significa A,
A
significa alquilo no ramificado o ramificado con 1 a 6 átomos de carbono,
n
significa 1, 2, 3 o 4,
m
significa 1, 2, 3 o 4;
en Id \hskip0,8cm R \hskip0,4cm significa 12
X
significa H, -OH o -OA,
R^{1}
significa A,
A
significa alquilo no ramificado o ramificado con 1 a 6 átomos de carbono,
n
significa 1, 2, 3 o 4,
m
significa 1, 2, 3 o 4,
así como sus derivados, solvatos o estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones.
El objeto de la invención está constituido, especialmente, por los compuestos de la fórmula I siguientes
6-hidroxi-2-[3-(4-terc.-butilfenil)-[1,2,4]-oxadiazol-5-il]-cromona,
7-hidroxi-2-[3-(4-terc.-butilfenil)-[1,2,4]-oxadiazol-5-il]-cromona,
así como por sus derivados, solvatos y estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones.
Los compuestos de la fórmula I y también los productos de partida para su obtención se preparan, por lo demás, según procedimientos en sí conocidos, como los que han sido descritos en la literatura (por ejemplo en los manuales tal como Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, Georg-Thieme-Verlag, Stuttgart) y, concretamente, bajo condiciones de reacción que sean conocidas y adecuadas para las reacciones citadas. En este caso pueden emplearse también variantes en sí conocidas, no descritas aquí con mayor detalle.
En caso deseado, los productos de partida pueden formarse in situ, de manera que no se aíslan de la mezcla de la reacción sino que se hacen reaccionar inmediatamente a continuación para dar los compuestos de la fórmula I.
Los compuestos de partida de las fórmulas II y III son conocidos por regla general. Sin embargo, cuando éstos sean nuevos, podrán prepararse según procedimientos en sí conocidos.
Los compuestos de la fórmula I pueden obtenerse preferentemente por reacción de los compuestos de la fórmula II con los compuestos de la fórmula III en primer lugar para dar compuestos de la fórmula IV.
La reacción se lleva a cabo según métodos que son conocidos por el técnico en la materia. En primer lugar se lleva a cabo la reacción en un alcohol adecuado en presencia de un alcoholato de metal alcalino o de metal alcalinotérreo, por ejemplo en etanol/metanolato de sodio o metanol/metanolato de potasio. Básicamente pueden emplearse también los disolventes inertes siguientes.
Como disolventes inertes son adecuados, por ejemplo, los hidrocarburos tales como el hexano, el éter de petróleo, el benceno, el tolueno o el xileno, los hidrocarburos clorados tales como el tricloroetileno, el 1,2-dicloroetano, el tetracloruro de carbono, el cloroformo o el diclorometano; los alcoholes tales como el metanol, el etanol, el isopropanol, el n-propanol, el n-butanol o el terc.-butanol; los éteres tales como el dietiléter, el diisopropiléter, el tetrahidrofurano (THF) o el dioxano; los glicoléteres tales como el etilenglicol monometil- o -monoetiléter (metilglicol o etilglicol), el etilenglicoldimetiléter (diglimo), las cetonas, tales como la acetona o la butanona; las amidas tales como la acetamida, la dimetilacetamida o la dimetilformamida (DMF); los nitrilos tal como el acetonitrilo; los sulfóxidos tal como el dimetilsulfóxido (DMSO); el sulfuro de carbono; los ácidos carboxílicos tales como el ácido fórmico o el ácido acético; los nitrocompuestos tales como el nitrometano o el nitrobenceno; ésteres tales como el acetato de etilo o mezclas de los disolventes citados.
El tiempo de la reacción se encuentra, según las condiciones empleadas, entre algunos minutos y 14 días, la temperatura de la reacción está comprendida entre aproximadamente -30º y 140º, normalmente entre -10º y 90º, especialmente entre aproximadamente 0º y aproximadamente 70º.
La ciclación del compuesto de la fórmula IV se lleva a cabo mediante catálisis ácida, por adición de ácidos minerales adecuados, tales como, por ejemplo, el ácido clorhídrico, el ácido fosfórico o el ácido sulfúrico.
El tiempo de la reacción y la temperatura son, preferentemente, como se han indicado anteriormente.
Los ésteres de la fórmula IV pueden saponificarse por ejemplo con ácido acético y/o con HCl o con NaOH o con KOH en agua, en agua-THF o en agua-dioxano a temperaturas comprendidas entre 0 y 100º, para dar los ácidos carboxílicos de la fórmula V.
Los compuestos de la fórmula V se hacen reaccionar según los métodos usuales, por ejemplo con cloruro de oxalilo en un disolvente inerte para dar los correspondientes cloruros de acilo de la fórmula VI.
El disolvente inerte, el tiempo de la reacción y la temperatura son, preferentemente, como se han indicado anteriormente.
La reacción de los compuestos de la fórmula VI con los compuestos de la fórmula VII para dar los compuestos de la fórmula I se lleva a cabo bajo condiciones catalizadas con bases, en un disolvente inerte, tal como es conocido por el técnico en la materia.
El disolvente inerte, el tiempo de la reacción y la temperatura son, preferentemente, como se han indicado anteriormente.
Como bases son adecuadas las bases inorgánicas y orgánicas, tal como por ejemplo la piridina.
La reacción de los compuestos de la fórmula V con los compuestos de la fórmula VII para dar los compuestos de la fórmula I se lleva a cabo en una reacción en un solo recipiente, en dos etapas.
En primer lugar se transforma el compuesto de la fórmula V en un anhídrido mixto adecuado, por ejemplo con cloroformiato de isobutilo.
La reacción se lleva a cabo bajo condiciones catalizadas mediante bases en un disolvente inerte, como es conocido por el técnico en la materia.
El disolvente inerte, el tiempo de la reacción y la temperatura son, preferentemente, como se ha indicado anteriormente.
Como bases son adecuadas las bases inorgánicas u orgánicas, tales como, por ejemplo, la piridina o la trietilamina.
A continuación se lleva a cabo la reacción con el compuesto de la fórmula VII en un disolvente inerte.
El disolvente inerte, el tiempo de la reacción y la temperatura son, preferentemente, como se han indicado anteriormente.
Una base de la fórmula I puede transformarse con un ácido en la sal correspondiente de adición de ácido, por ejemplo mediante reacción de cantidades equivalentes de la base y del ácido en un disolvente inerte tal como el etanol y, a continuación, concentración por evaporación. Para esta reacción entran en consideración especialmente ácidos que proporcionen sales fisiológicamente aceptables. De este modo pueden emplearse ácidos inorgánicos, por ejemplo el ácido sulfúrico, el ácido nítrico, los ácidos hidrácidos halogenados tales como el ácido clorhídrico o el ácido bromhídrico, los ácidos fosfóricos, tal como el ácido ortofosfórico, el ácido sulfamínico, además los ácidos orgánicos, especialmente los ácidos carboxílicos, sulfónicos o sulfúricos alifáticos, alicíclicos, aralifáticos, aromáticos o heterocíclicos, monobásicos o polibásicos, por ejemplo el ácido fórmico, el ácido acético, el ácido propiónico, el ácido piválico, el ácido dietilacético, el ácido malónico, el ácido succínico, el ácido pimélico, el ácido fumárico, el ácido maleico, el ácido láctico, el ácido tartárico, el ácido málico, el ácido cítrico, el ácido glucónico, el ácido ascórbico, el ácido nicotínico, el ácido isonicotínico, el ácido metanosulfónico o el ácido etanosulfónico, el ácido etanodisulfónico, el ácido 2-hidroxietanosulfónico, el ácido bencenosulfónico, el ácido p-toluenosulfónico, los ácidos naftalin-mono- y -disulfónicos, el ácido laurilsulfúrico. Pueden emplearse sales con ácidos que no sean fisiológicamente aceptables, por ejemplo picratos, para el aislamiento y/o la purificación de los compuestos de la fórmula I.
Por otro lado pueden transformarse los compuestos de la fórmula I con bases (por ejemplo con hidróxido o carbonato de sodio o de potasio) en la correspondiente sal metálica, especialmente de metal alcalino o de metal alcalinotérreo o en la correspondiente sal de amonio.
También pueden emplearse bases orgánicas fisiológicamente aceptables, tal como, por ejemplo, la etanolamina.
Los compuestos según la invención de la fórmula I pueden ser quirales debido a su estructura molecular y pueden presentar, por lo tanto, en diversas formas enantiómeras. Éstos pueden presentarse por lo tanto en forma racémica o en forma ópticamente activa.
Puesto que la actividad farmacéutica de los racematos o bien de los estereoisómeros de los compuestos según la invención puede ser variable, puede ser deseable emplear enantiómeros. En estos casos pueden separarse el producto final o ya los productos intermedios en compuestos enantiómeros por medio de medidas químicas o físicas conocidas por el técnico en la materia o pueden emplearse ya como tales en la síntesis.
En el caso de las aminas racémicas se formarán los diastereómeros a partir de la mezcla mediante reacción con un agente separador ópticamente activo. Como agentes separadores son adecuados, por ejemplo, ácidos ópticamente activos, tales como las formas R y S del ácido tartárico, del ácido diacetiltartárico, del ácido dibenzoiltartárico, el ácido mandélico, del ácido málico, del ácido láctico, de aminoácidos N-protegidos adecuadamente (por ejemplo
N-benzoilprolina o N-bencenosulfonilprolina) o lo diversos ácidos alcanforsulfónicos ópticamente activos. También es ventajosa una separación de los enantiómeros por cromatografía con ayuda de un agente separador ópticamente activo (por ejemplo dinitrobenzoilfenilglicina, triacetato de celulosa u otros derivados de hidratos de carbono o polímeros de metacrilato derivatizados de manera quiral, fijados sobre gel de sílice). Como eluyentes son adecuados, en este caso, las mezclas de disolventes acuosos o alcohólicos, tal como por ejemplo hexano/isopropanol/acetonitrilo, por ejemplo en la proporción de 82:15:3.
El objeto de la invención es, además, el empleo de compuestos de la fórmula I y/o de sus sales fisiológicamente aceptables para la fabricación de un medicamento (preparación farmacéutica), especialmente por vía no química. En este caso pueden llevarse a una forma de dosificación adecuada junto con, al menos, un excipiente o producto auxiliar sólido, líquido y/o semilíquido y, en caso dado, en combinación con uno o varios productos activos adicionales. El objeto de la invención está constituido también por medicamentos, que contienen, al menos, un compuesto de la fórmula I y/o sus derivados, solvatos y estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones, así como en caso dado excipientes y/o productos auxiliares.
Estas preparaciones pueden emplearse como medicamentos en la medicina humana o veterinaria. Como excipientes entran en consideración substancias orgánicas o inorgánicas, que sean adecuadas para la aplicación enteral (por ejemplo oral), parenteral o tópica y que no reaccionen con los nuevos compuestos, por ejemplo el agua, los aceites vegetales, los alcoholes bencílicos, los alquilenglicoles, los polietilenglicoles, el triacetato de glicerina, la gelatina, los hidratos de carbono tales como la lactosa o los almidones, el estearato de magnesio, el talco, la vaselina. Para la aplicación oral sirven, especialmente, las tabletas, la píldoras, la grageas, las cápsulas, los polvos, los granulados, los jarabes, los jugos o las gotas, para la aplicación rectal los supositorios, para la aplicación parenteral las soluciones, preferentemente las soluciones oleaginosas o acuosas, además las suspensiones, las emulsiones o los implantes, para la aplicación tópica los ungüentos, las cremas o los polvos o también en forma de pulverizador nasal. Los nuevos compuestos pueden también liofilizarse y los liofilizados obtenidos pueden emplearse, por ejemplo, para la obtención de preparados inyectables. Las preparaciones indicadas pueden estar esterilizadas y/o pueden contener productos auxiliares tales como lubrificantes, agentes para la conservación, agentes estabilizantes y/o humectantes, emulsionantes, sales para influir sobre la presión osmótica, substancias tampón, colorantes, mejoradores del sabor y/o otros productos activos adicionales, por ejemplo una o varias vitaminas.
El objeto de la invención está constituido, además, por medicamentos que contienen, al menos, un compuesto de la fórmula I y/o un derivado, solvato o estereoisómero farmacéuticamente empleable con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones, y al menos otro producto activo para medicamentos.
El objeto de la invención está constituido también por un estuche (kit), constituido por envases separados de
(a)
una cantidad activa de un compuesto de la fórmula I y/o de sus derivados, solvatos y estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones, y
(b)
una cantidad activa de otro producto activo para medicamentos.
El estuche contiene recipientes adecuados, tales como cajitas o cajas de cartón, botellas, bolsas o ampollas individuales. El estuche puede contener por ejemplo ampollas separadas en las cuales esté presente respectivamente una cantidad activa de un compuesto de la fórmula I y/o de sus derivados, solvatos o estereoisómeros farmacéuticamente aceptables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones,
y una cantidad activa de otro producto activo para medicamentos disuelto o en forma liofilizada.
Empleo Detalles
I.
Los compuestos presentes son adecuados como productos activos farmacéuticos para mamíferos, especialmente para los seres humanos, en el caso del tratamiento de enfermedades dependientes de la tirosina quinasa. A estas enfermedades pertenecen la proliferación de las células tumorales, la neoplasia vascular patológica (o angiogénesis), que favorece el crecimiento de los tumores sólidos, la neoplasia vascular en el ojo (retinopatía diabética, degeneración de la mácula dependiente de la edad y similares) así como inflamaciones (psoriasis, artritis reumatoide y
similares).
La presente invención abarca el empleo de los compuestos según una o varias de las reivindicaciones 1 a 5 y/o sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la profilaxis del cáncer en un mamífero, que requiera un tratamiento de este tipo, administrándose en este procedimiento al mamífero una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto de la fórmula I. Los carcinomas preferentes para el tratamiento proceden del grupo formado por el carcinoma cerebral, el carcinoma del tracto urogenital, el carcinoma del sistema linfático, el carcinoma del estómago, el carcinoma de la faringe y el carcinoma pulmonar. Otro grupo de formas preferentes de cáncer son la leucemia monocítica, el adenocarcinoma pulmonar, el carcinoma pulmonar microcelular, el cáncer de páncreas, el glioblastoma y el carcinoma de mama.
Del mismo modo abarca el empleo de los compuestos según una o varias de las reivindicaciones 1 a 5 y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la profilaxis de una enfermedad, en la que participa la angiogénesis, administrándose en este procedimiento a un mamífero, que requiere un tratamiento de este tipo, una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto de la fórmula I. Una enfermedad de este tipo, en la que participa la angiogénesis, es una enfermedad ocular, tal como la vascularización de la retina, la retinopatía diabética, la degeneración de la mácula en función de la edad y similares.
El empleo de compuestos según una o varias de las reivindicaciones 1 a 5 y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la profilaxis de enfermedades inflamatorias, administrándose en este procedimiento a un mamífero, que requiera un tratamiento de este tipo, una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto de la fórmula I, cae igualmente bajo el ámbito de la presente invención. A tales enfermedades inflamatorias pertenecen, por ejemplo, la artritis reumatoide, la psoriasis, la dermatitis por contacto, el tipo tardío de la reacción de hipersensibilidad y similares.
Igualmente, queda abarcado empleo de compuestos según una o varias de las reivindicaciones 1 a 5 y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la profilaxis de una enfermedad dependiente de la tirosina quinasa o bien de un padecimiento dependiente de la tirosina quinasa en un mamífero, administrándose en este procedimiento a un mamífero enfermo, que requiera un tratamiento de este tipo, una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto de la fórmula I. La cantidad terapéutica depende de la enfermedad correspondiente y puede determinarse por el técnico en la materia sin un gran esfuerzo.
La presente invención abarca también el empleo de los compuestos según una o varias de las reivindicaciones 1 a 5 y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la profilaxis de la vascularización de la retina, administrándose en este procedimiento a un mamífero, que requiera un tratamiento de este tipo, una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto de la fórmula I. Los procedimientos para el tratamiento o la profilaxis de las enfermedades oculares tales como las retinopatías diabéticas y la degeneración de la mácula dependiente de la edad constituyen igualmente una parte integrante de la invención. El empleo para el tratamiento o la profilaxis de enfermedades inflamatorias, tales como la artritis reumatoide, la psoriasis, la dermatitis por contacto y los tipos tardíos de la reacción de hipersensibilidad, así como el tratamiento o la profilaxis de patologías óseas del grupo de los osteosarcomas, osteoartritis y raquitis, quedan abarcados por el ámbito de la presente invención.
La expresión "enfermedades o padecimientos dependientes de la tirosina quinasa" se refiere a los estados patológicos que dependen de la actividad de una o varias tirosina quinasas. Las tirosina quinasas participan bien directamente o bien indirectamente en las vías de transducción de las señales de diversas actividades celulares, entre las cuales se encuentra la proliferación, la adhesión y la migración así como la diferenciación. A las enfermedades, que están asociadas con la actividad de la tirosina quinasa pertenecen la proliferación de las células tumorales, la neoplasia vascular patológica, que favorece el crecimiento de los tumores sólidos, la neoplasia vascular en el ojo (retinopatía diabética, degeneración de la mácula en función de la edad y similares) así como inflamaciones (psoriasis, artritis reumatoide y similares).
Los compuestos según la invención pueden administrarse a los pacientes para el tratamiento de cáncer. Los compuestos presentes inhiben la angiogénesis tumoral e influyen de este modo sobre el crecimiento de los tumores (J. Rak et al. Cancer Research, 55:4575-4580, 1995). Las propiedades inhibidoras de la angiogénesis de los compuestos presentes son adecuadas también para el tratamiento de determinadas formas de ceguera, que están relacionadas con la neoplasia vascular de la retina. Los compuestos divulgados son adecuados también para el tratamiento de determinadas patologías óseas tales como el osteosarcoma, la osteoartritis y la raquitis, que se conocen también bajo la denominación de osteomalacia oncógena (Hasegawa et al., Skeletal Radiol. 28, p. 41-45,1999; Gerber et al., Nature Medicine, tomo 5, Nr. 6, p. 623-628, Junio 1999). Puesto que el VEGF favorece directamente la resorción ósea osteoclástica debido al KDR/Flk-1 expresado en osteoclastos maduros (FEBS Let. 473:161-164 (2000); Endocrinology, 141:1667 (2000)), los compuestos según la invención son adecuados para el tratamiento y la profilaxis de dolencias, que estén relacionadas con la resorción ósea, tal como la osteoporosis y el Morbus Paget.
Los compuestos reivindicados pueden emplearse, también, para reducir o para prevenir deterioros tisulares, que se presentan tras episodios isquémicos cerebrales, tal como la apoplejía, dado que reducen los edemas cerebrales, los deterioros tisulares y los traumatismos de reperfusión debidos a la isquemia (Drug News Perspect 11:265-270 (1998); J. Clin. Invest. 104:1613-1620 (1999)).
Los compuestos según la invención pueden administrarse también junto con otros productos terapéuticos perfectamente conocidos, que se elegirán según su adecuación correspondiente a la dolencia a ser tratada. De este modo, por ejemplo, en el caso de padecimientos óseos serían convenientes combinaciones que contuviesen bisfosfonatos de acción antiresorptiva, tal como el alendronato y el risedronato, los bloqueadores de la integrina (como se definen más adelante) tales como los antagonistas de av\beta3, los estrógenos conjugados, empleados en la hormonoterapia, tales como Prempro®, Premarin® y Endometrion®; moduladores selectivos de los receptores de los estrógenos (SERMs) tales como el Raloxifen, el Droloxifen, el CP-336,156 (Pfizer) y el Lasofoxifen, el inhibidor de la catepsina-K y el inhibidor de la bomba de protones ATP.
La presente invención es adecuada para la combinación con agentes anticancerosos conocidos. A estos agentes anticancerosos, conocidos, pertenecen los siguientes: moduladores de los receptores de los estrógenos, moduladores de los receptores de los andrógenos, moduladores de los receptores de los retinoides, citotóxicos, agentes antiproliferantes, inhibidores de la prenil-proteínatransferasa, inhibidores de la HMG-CoA-reductasa, inhibidores de la
HIV-proteasa, inhibidores de la transcriptasa reversa así como otros inhibidores de la angiogénesis. Los compuestos presentes son adecuados especialmente para el empleo conjunto con radioterapia. Los efectos sinérgicos de la inhibición del VEGF en combinación con radioterapia han sido descritos en el sector especializado (véase la publicación
WO 00/61186).
La expresión "moduladores de los receptores de los estrógenos" se refiere a compuestos que perturban el enlace de los estrógenos sobre el receptor, o lo inhiben y concretamente independientemente del modo en que esto se produzca. A los moduladores de los receptores de los estrógenos pertenecen, por ejemplo, el Tamoxifen, el Raloxifen, el Idoxifen, el LY353381, el LY 117081, el Toremifen, el Fulvestrant, el propanoato de 4-[7-(2,2-dimetil-1-oxopropoxi-4-metil-2-[4-[2-(1-piperidinil)etoxi]fenil]-2H-1-benzopiran-3-il]fenil-2,2-dimetilo, la 4,4'-dihidroxibenzofenon-2,4-dinitrofenilhidrazona y el SH646, lo cual, sin embargo, no significa ninguna limitación.
La expresión "moduladores de los receptores de los andrógenos" se refiere a los compuestos que perturban el enlace de los andrógenos sobre el receptor, o lo inhiben, y concretamente independientemente del modo en que esto se produzca. A los moduladores de los receptores de los andrógenos pertenecen, por ejemplo, la finasterida y otros inhibidores de la 5\alpha-reductasa, la nilutamida, la flutamida, la bicalutamida, el liarozol y el abirateron-acetato.
La expresión "moduladores de los receptores de los retinoides" se refiere a los compuestos que perturban el enlace de los retinoides sobre el receptor, o lo inhiben y, concretamente, independientemente del modo en que esto se produzca. A tales moduladores de los receptores de los retinoides pertenecen, por ejemplo, el bexaroten, la tretinoína, el ácido 13-cis-retinoico, el ácido 9-cis-retinoico, la \alpha-diflúormetilornitina, el ILX23-7553, la trans-N-(4'-hidroxifenil)retinamida y la N-4-carboxifenilretinamina.
La expresión "citotóxicos" se refiere a compuestos que conducen, en primer lugar, a la muerte celular por acción directa sobre la función celular o que inhiben la miosis celular o la perturban, entre éstos se encuentran los agentes de alquilación, los factores de necrósis tumoral, los agentes de intercalación, los inhibidores de la microtubulina y los inhibidores de la topoisomerasa.
A los citotóxicos pertenecen, por ejemplo, el tirapazimina, el sertenef, la cachectina, la ifosfamida, la tasonermina, la lonidamina, el carboplatino, la altretamina, la prednimustina, la dibromodulcita, la ranimustina, la fotemustina, el nedaplatino, el oxaliplatino, la temozolomida, el heptaplatino, la estramustina, el improsulfan-tosilato, la trofosfamida, la nimustina, el dibrospidium-cloruro, la pumitepa, el lobaplatino, el satraplatino, la profiromicina, el cisplatino, el irofulveno, la dexifosfamida, el cis-aminodicloro(2-metilpiridina)platino, la bencilguanina, la glufosfamida, el GPX100, el tetracloruro de (trans,trans,trans)-bis-mu-(hexan-1,6-diamino)-mu-[diaminoplatino(II)]bis[diamino(cloro)platino(II)], la diarizidinilespermina, el arsentrióxido, la 1-(11-dodecilamino-10-hidroxiundecil)-3,7-dimetilxantina, la zorubicina, la idarubicina, la daunorubicina, el bisantreno, la mitoxantrona, la pirarubicina, la pinafida, la valrubicina, la amrubicina, la antineoplastona, la 3'-desamino-3'-morfolino-13-desoxo-10-hidroxicarminomicina, la annamicina, la galarubicina, el elinafido, el MEN10755 y la 4-desmetoxi-3-desamino-3-aziridinil-4-metilsulfonildaunorubicina (véase la publicación WO 00/50032), lo cual sin embargo no significa ninguna limitación.
A los inhibidores de la microtubulina pertenecen, por ejemplo, el paclitaxel, el sulfato de vindesina, la 3',4'-dideshidro-4'-desoxi-8'-norvincaleucoblastina, el docetaxol, la rizoxina, la dolastatina, el mivobulin-isetionato, la auristatina, la cemadotina, el RPR109881, el BMS184476, la vinflunina, la criptoficina, la 2,3,4,5,6-pentaflúor-N-(3-flúor-4-metoxifenil)bencenosulfonamida, la anhidrovinblastina, la N,N-dimetil-L-valil-L-valil-N-metil-L-valil-L-prolil-L-prolin-t-butilamida, el TDX258 y el BMS188797.
Los inhibidores de la topoisomerasa son, por ejemplo, el topotecan, la hicaptamina, el irinotecan, el rubitecan, la 6-etoxipropionil-3',4'-O-exo-bencilidencartreusina, la 9-metoxi-N,N-dimetil-5-nitropirazolo[3,4,5-kl]acridin-2-(6H)propanoamina, la 1-amino-9-etil-5-flúor-2,3-dihidro-9-hidroxi-4-metil-1H,12H-benzo[de]pirano[3',4':b,7]indolizino[1,2b]quinolin-10,13(9H,15H)-diona, el lurtotecan, la 7-[2-(N-isopropilamino)etil]-(20S)camptotecina, el BNP1350, el BNPI1100, el BN80915, el BN80942, el etoposid-fosfato, la teniposida, el sobuzoxano, el 2'-dimetilamino-2'-desoxi-etoposid, el GL331, la N-[2-(dimetilamino)etil]-9-hidroxi-5,6-dimetil-6H-pirido[4,3-b]carbazol-1-carboxamida, la asulacrina, la (5a,5aB,8aa,9b)-9-[2-[N-[2-(dimetilamino)etil]-N-metilamino]etil]-5-[4-hidroxi-3,5-dimetoxifenil]-5,5a,6,8,8a,9-hexohidrofuro(3',4':6,7)nafto(2,3-d)-1,3-dioxol-6-ona, el 2,3-(metilendioxi)-5-metil-7-hidroxi-8-metoxibenzo[c]- fenantridinio, la 6,9-bis[(2-aminoetil)amino]benzo[g]isoquinolin-5,10-diona, la 5-(3-aminopropilamino)-7,10-dihidroxi-2-(2-hidroxietilaminometil)-6H-pirazolo-[4,5,1-de]acridin-6-ona, la N-[1-[2(dietilamino)etilamino]-7-metoxi-9-oxo-9H-tioxanten-4-ilmetil]formamida, la N-(2-(dimetilamino)-etil)acridin-4-carboxamida, la 6-[[2-(dime-
tilamino)etil]amino]-3-hidroxi-7H-indeno[2,1-c]quinolin-7-ona y la dimesna.
A los "agentes antiproliferantes" pertenecen oligonucleótidos RNA y DNA antisentido tales como G3139,
ODN698, RVASKRAS, GEM231 y INX3001, así como antimetabolitos tales como Enocitabin, Carmofur, Tegafur, Pentostatin, Doxifluridin, Trimetrexat, Fludarabin, Capecitabin, Galocitabin, Cytarabin-octosfato, Fosteabin-hidrato de sodio, Raltitrexed, Paltitrexid, Emitefur, Tiazofurin, Decitabin, Nolatrexed, Pemetrexed, Nelzarabin, 2'-desoxi-2'-metilidencitidina, 2'-flúormetilen-2'-desoxicitidina, N-[5-(2,3-dihidrobenzofuril)- sulfonil]-N'-(3,4-diclorofenil)urea, N6-[4-desoxi-4-[N2-[2(E),4(E)-tetradecadienoil] -glicilamino]-L-glicero-B-L-manoheptopiranosil]adenina, Aplidin, Ecteinascidin, Troxacitabine, ácido 4-[2-amino-4-oxo-4,6,7,8-tetrahidro-3H-pirimidino[5,4-b][1,4]tiazin-6-il-(S)-etil]-2,5-tienoil-L-glutamínico, Aminopterin, 5-Flurouracil, Alanosin, acetato de 11-acetil-8-(carbamoiloxime-
til)-4-formil-6-metoxi-14-oxa-1,11-diazatetraciclo(7.4.1.0.0)-tetradeca-2,4,6-trien-9-ilo, Swainsonin, Lometrexol,
Dexrazoxan, Methioninase, 2'-cian-2'-desoxi-N4-palmitoil-1-B-D-arabinofuranosilcitosina y 3-aminopiridin-2-carboxaldehído-tiosemicarbazona. Los "agentes antiproliferantes" comprenden, también, otros anticuerpos monoclonales contra los factores del crecimiento diferentes de los que se han indicado ya entre los "inhibidores de la angiogénesis", tal como el Trastuzumab, así como supresores de tumores, como el p53, que pueden ser secretados mediante transferencia genética recombinante a través de virus (véase por ejemplo la patente norteamericana US Nr. 6,069,134).
Preferentemente las tirosina quinasas están constituidas por TIE-2. Es especialmente preferente el empleo de los compuestos según la invención para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades que son influenciadas mediante la inhibición del TIE-2 mediante los compuestos según la reivindicación 1.
Es especialmente preferente el empleo para el tratamiento de una enfermedad en la que la enfermedad sea un tumor sólido.
El tumor sólido se elegirá preferentemente entre el grupo formado por el tumor cerebral, el tumor del tracto urogenital, el tumor del sistema linfático, el tumor de estómago, el tumor de laringe y el tumor pulmonar.
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El tumor sólido se elegirá además preferentemente entre el grupo de las leucemias monocíticas, el adenocarcinoma pulmonar, el carcinoma pulmonar microcelular, el cáncer de páncreas, el glioblastoma y el carcinoma de mama.
Además, se ha encontrado que los compuestos de la fórmula I, que se describen en general como derivados de cromenona, son inhibidores del enzima Raf-quinasa. Puesto que el enzima es un efector "aguas abajo (Downstream)" de p21^{ras}, los inhibidores se han revelado en composiciones farmacéuticas útiles para el empleo en medicina humana o veterinaria, cuando esté indicada la inhibición de la vía de la Raf-quinasa, por ejemplo en el tratamiento de tumores y/o en el crecimiento tipo canceroso proporcionado por la Raf-quinasa. Los compuestos son útiles especialmente para el tratamiento de los carcinomas sólidos en el caso de los seres humanos y de los animales, por ejemplo en el caso del cáncer múrido, puesto que la progresión de este cáncer depende de la cascada de transducción de señales de la proteína Ras y, por lo tanto, responde al tratamiento mediante interrupción de la cascada, es decir mediante inhibición de la Raf-quinasa. Por lo tanto el compuesto de la fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se administrará para el tratamiento de enfermedades que sean transmitidas por la vía de la Raf-quinasa, especialmente el cáncer, con inclusión de los carcinomas sólidos, tales como por ejemplo los carcinomas (por ejemplo pulmonares, del páncreas, de la glándula tiroides, de la vejiga urinaria o del colon), enfermedades mieloicas (por ejemplo leucemia mieloica) o adenoma (por ejemplo adenoma de colon villoso), angiogénesis patológicas y migración celular metastática. Los compuestos son útiles además para el tratamiento de las inflamaciones crónicas dependientes de la activación del complemento (Niculescu et al. (2002) Immunol. Res.,
24:191-199) e inmunodeficiencia inducida HIV-1 (Human Immunodeficiency Virus Typ 1) (Popik et al. (1998) J Virol, 72: 6406-6413).
Se ha encontrado, sorprendentemente, que los compuestos, derivados, según la invención, pueden interactuar con vías de señales, especialmente con las vías de señales aquí descritas y, preferentemente, con la vía de señales de la Raf-quinasa. Los derivados de la cromenona, según la invención, presentan preferentemente una actividad biológica ventajosa, que puede demostrarse fácilmente por medio de ensayos basados en enzimas, por ejemplo ensayos tales como los que se han descrito aquí. En tales ensayos, basados en enzimas, los derivados de la cromenona según la invención muestran y provocan preferentemente un efecto inhibidor, que usualmente se documenta por medio de los valores y IC_{50} en una escala adecuada, preferentemente en la escala micromolar y, preferentemente, en la escala nanomolar.
Tal como se ha indicado aquí, estas vías de señales son importantes para diversas enfermedades. Por lo tanto los derivados de la cromenona son útiles en la profilaxis y/o en el tratamiento de enfermedades que dependan de las citadas vías de señales por interacción con una o varias de las vías de señales citadas.
El objeto de la presente invención está constituido por lo tanto, por compuestos según la invención como promotores o como inhibidores, preferentemente, inhibidores de las vías de señales descritas en este caso. El objeto preferente de la invención está constituido, por lo tanto, por compuestos según la invención como promotores o como inhibidores, preferentemente como inhibidores de la vía de la Raf-quinasa. Un objeto preferente de la invención está constituido, por lo tanto, por lo derivados según la invención como promotores o como inhibidores, preferentemente como inhibidores de la Raf-quinasa. Un objeto todavía más preferente de la invención está constituido por los compuestos según la invención como promotores o como inhibidores, preferentemente como inhibidores de una o varias Raf-quinasas, elegidas entre el grupo constituido por A-Raf, B-Raf y C-Raf-1. Un objeto especialmente preferente de la invención está constituido por los compuestos según la invención como promotores o como inhibidores, especialmente como inhibidores de C-Raf-1.
Otro objeto de la presente invención consiste en el empleo de uno o varios compuestos según la invención para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades, preferentemente de las enfermedades aquí descritas, que sean provocadas, transmitidas y/o propagadas por las Raf-quinasas y, especialmente, las enfermedades que sean provocadas, transmitidas y/o propagadas por las Raf-quinasas elegidas del grupo formado por A-Raf, B-Raf y C-Raf-1. Usualmente, las enfermedades aquí consideradas se subdividen en dos grupos, en enfermedades hiperproliferantes y en enfermedades no hiperproliferantes. En este contexto, se considerarán como enfermedades de tipo no canceroso la psoriasis, la artritis, las inflamaciones, la endometriosis, la cicatrización, la próstatahiperplasia benigna, las enfermedades inmunológicas, las enfermedades autoinmunes y las enfermedades de inmunodeficiencia, entre las cuales son consideradas usualmente como enfermedades no hiperproliferantes la artritis, la inflamación, las enfermedades inmunológicas, las enfermedades autoinmunes y las enfermedades de inmunodeficiencia. En este contexto, son consideradas como enfermedades de tipo canceroso el cáncer cerebral, el cáncer pulmonar, el cáncer del epitelio plano, el cáncer de vejiga urinaria, el cáncer de estómago, el cáncer de páncreas, el cáncer hepático, el cáncer renal, el cáncer colorrectal, el cáncer de mama encefálico, el cáncer de cuello, el cáncer de esófago, el cáncer ginecológico, el cáncer de tiroides, los linfomas, las leucemias crónicas y las leucemias agudas, que son considerados en su totalidad usualmente como enfermedades hiperproliferantes. Especialmente el crecimiento celular de tipo canceroso y, especialmente, el crecimiento celular tipo canceroso transmitido por la Raf-quinasa es una enfermedad que representa el objetivo de la presente invención. Así pues el objeto de la presente invención está constituido por los compuestos según la invención como medicamentos y/o como productos activos para medicamentos en el tratamiento y/o la profilaxis de las enfermedades citadas y el empleo de los compuestos según la invención para la fabricación de un producto farmacéutico para el tratamiento y/o la profilaxis de las enfermedades citadas así como también un procedimiento para el tratamiento de las enfermedades citadas que comprende la administración de uno o varios compuestos según la invención a un paciente que necesite una administración de este tipo.
Como medida comparativa se encontró, además, que los compuestos de la fórmula I actúan como malos inhibidores de PKB. Este efecto puede demostrarse por ejemplo mediante un procedimiento que ha sido descrito por Alessi et al, EMBO L. 1996, 15, 6541-6551.
Puede demostrarse que los compuestos según la invención presentan in vivo un efecto antiproliferante. Los compuestos según la invención se administran a un paciente con una enfermedad hiperproliferante, por ejemplo para la inhibición del crecimiento tumoral, para reducir la inflamación que conlleva la enfermedad linfoproliferante, para inhibir el rechazo de transplantes o el deterioro neurológico debido a la reparación tisular, etc. Los compuestos presentes son útiles para fines profilácticos o terapéuticos. Tal como se emplea aquí, la expresión "tratamiento" se empleará como referencia tanto para impedir enfermedades como también para el tratamiento de las dolencias preexistentes. Se consigue impedir la proliferación mediante la administración de los compuestos según la invención antes del desarrollo de la enfermedad evidente, por ejemplo para impedir el crecimiento tumoral, para impedir el crecimiento metastático, para conseguir la reducción de la restenosis, que conlleva la cirugía cardiovascular. Como alternativa se administrarán al paciente los compuestos para el tratamiento de enfermedades perseverantes mediante la estabilización o la mejoría de los síntomas clínicos.
Los compuestos según la invención pueden administrarse a los mamíferos, preferentemente a los seres humanos, bien solos o, preferentemente, en combinación con excipientes farmacéuticamente aceptables o con agentes extendedores, en caso dado con productos auxiliares conocidos tales como alumbre, en una composición farmacéutica tal como es usual en la práctica farmacéutica. Los compuestos pueden administrarse por vía oral o parenteral, entre éstas por vía de administración intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, subcutánea, rectal o tópica.
En el caso de la aplicación oral de un compuesto quimioterapéutico, según la invención, puede administrarse el compuesto seleccionado, por ejemplo, en forma de tabletas o de cápsulas o como solución o suspensión acuosa. En el caso de las tabletas orales, pertenecen a los excipientes usualmente empleados, la lactosa y el almidón de maíz, y se añaden, usualmente, agentes lubrificantes tal como el estearato de magnesio. En el caso de la administración oral en forma de cápsulas, pertenecen a los agentes extendedores adecuados la lactosa y el almidón de maíz seco. Cuando se requieran suspensiones acuosas para la aplicación oral, se combinará el producto activo con emulsionantes y agentes para la suspensión. En caso deseado pueden añadirse determinados edulcorantes y/o aromatizantes. Para el empleo intramuscular, intraperitoneal, subcutáneo e intravenoso se preparan soluciones estériles usuales del producto activo, y el valor del pH de las soluciones debería ajustarse y tamponarse de manea adecuada. En el empleo intravenoso debería ajustarse la concentración total de substancias disueltas de tal manera que el preparado sea
isotónico.
La dosis exacta para el paciente correspondiente depende, sin embargo, de una serie de factores, por ejemplo de la actividad del compuesto empleado correspondiente, de la edad, del peso corporal, del estado general de salud, del sexo, de la ingesta, del momento y de la vía de administración, de la velocidad de liberación, del tipo de administración, de la forma del medicamento a ser administrada, de la combinación de medicamentos y de la gravedad de la enfermedad, contra la cual se emplea la terapia. La dosis terapéuticamente activa correspondiente para cada paciente puede determinarse fácilmente por medio de ensayos de rutina, por ejemplo por parte del médico, que aconseje o bien que acompañe este tratamiento terapéutico.
Las substancias según la invención se administran por regla general, preferentemente en dosis comprendidas entre aproximadamente 1 y 500 mg, especialmente entre 5 y 100 mg por unidad de dosificación. La dosis diaria se encuentra comprendida preferentemente entre aproximadamente 0,02 y 10 mg/kg de peso corporal.
El huésped o paciente puede pertenecer a cualquier especie de los mamíferos, por ejemplo una especie de primate, especialmente los seres humanos; animales roedores, con inclusión de los ratones, ratas y hámsteres; conejos, caballos, vacas, perros, gatos, etc. Son interesantes los modelos animales para los ensayos experimentales, encontrándose a disposición un modelo para el tratamiento de una enfermedad de los seres humanos.
La susceptibilidad de una célula determinada frente al tratamiento con los compuestos según la invención puede determinarse por medio de ensayos in vitro. De manera típica se combina un cultivo de células con un compuesto según la invención a diversas concentraciones durante un período de tiempo suficiente para posibilitar que el agente activo induzca la muerte celular o que inhiba la migración, usualmente entre aproximadamente una hora y una
semana.
Para la identificación de los inhibidores de la quinasa se dispone de diversos sistemas analíticos. En el caso del análisis de la proximidad el centelleo (Scintillation-Proximity-Assay) (Sorg et al, J. of Biomolecular Screening, 2002, 7, 11-19) y del ensayo de placa instantánea (FlashPlate-Assay) se mide la fosforilación radioactiva de una proteína o de un péptido como substrato con \gammaATP. Cuando esté presente un compuesto inhibidor no podrá detectarse una señal radioactiva o únicamente podrá detectarse una señal radioactiva disminuida. Además son útiles, como procedimientos de ensayo las tecnologías de transferencia de energía por resonancia de fluorescencia resuelta en tiempo homogéneo (HTR-FRET) y las tecnologías de polarización de la fluorescencia (FP) (Homogeneous Time-resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer (Sills et al., J. of Biomolecular Screening, 2002,
191-214)).
Ensayos
Los compuestos según la invención, descritos en los ejemplos, se verificaron en los ensayos descritos más adelante y se encontró que presentaban un efecto inhibidor de la quinasa. Otros análisis son conocidos por la literatura y pueden ser llevados a cabo por el técnico en la materia fácilmente (véase por ejemplo Dhanabal et al., Cancer Res. 59:189-197; Xin et al:, J. Biol. Chem. 274:9116-9121; Sheu et al., Anticancer Res. 18:4435-4441; Ausprunk et al., Dev. Biol. 38:237-248; Gimbrone et al., J. Natl. Cancer Inst. 52:413-427; Nicosia et al., In Vitro 18:538- 549). VEGF-Rezeptorkinase-Assay.
La actividad de la quinasa receptora del VEGF se determina mediante incorporación de fosfato marcado radioactivamente en 4:1 ácido poliglutámico/substrato de tirosina (pEY). El producto pEY fosforilado se fija a una membrana filtrante y el constructo, formado por el fosfato marcado radioactivamente, se determina cuantitativamente mediante el cómputo de la escintilación.
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Materiales Quinasa receptra del VEGF
Se clonaron los dominios de tirosina quinasa intracelulares del KDR humano (Terman, B. I. et al. Oncogene (1991) tomo 6, p. 1677-1683.) y Flt-1 (Shibuya, M. et al. Oncogene (1990) tomo 5, p. 519-524) como proteínas de fusión genética (GST) de glutatión-S-transferasa. Esto se llevó a cabo por clonación de los dominios del citoplasma de la KDR-quinasa como fusión acorde con la pauta de lectura en el extremo carboxi del gen GST. Las proteínas de fusión de los dominios de quinasa GST recombinantes, solubles, se expresaron en células de insectos Spodoptera frugiperda (Sf21) (Invitrogen) con empleo de un vector de expresión de baculovirus (pAcG2T, Pharmingen).
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Tampón para lisis
50 mM de Tris pH 7,4, 0,5 M de NaCl, 5 mM de DTT, 1 mM de EDTA, 0,5% de Triton X-100, 10% de glicerina, respectivamente 10 mg/ml de leupeptina, de pepstatina y de aprotinina así como 1 mM de fluoruro de fenilmetilsulfonilo (todos ellos de Sigma).
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Tampón para el lavado
50 mM de Tris pH 7,4, 0,5 M de NaC1, 5 mM de DTT, 1 mM de EDTA, 0,05% de Triton X-100, 10% de glicerina, respectivamente 10 mg/ml de leupeptina, de pepstatina y de aprotinina así como 1 mM de fluoruro de fenimetilsulfonilo.
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Tampón para diálisis
50 mM de Tris pH 7,4, 0,5 M de NaC1, 5 mM de DTT, 1 mM de EDTA, 0,05% de Triton X-100, 50% de glicerina, respectivamente 10 mg/ml de leupeptina, de pepstatina y de aprotinina así como 1 mM de fluoruro de fenilmetilsulfonilo.
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Tampón de reacción 10x
200 mM de Tris, pH 7,4, 1,0 M de NaCl, 50 mM de MnCl_{2}, 10 mM de DTT y 5 mg/ml de albúmina de suero de vaca [bovine serum albumin = BSA] (Sigma).
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Tampón para la dilución de los enzimas
50 mM de Tris, pH 7,4, 0,1 M de NaCl, 1 mM de DTT, 10% de glicerina, 100 mg/ml de BSA.
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Substrato 10x
750 \mug/ml de poli(ácido glutámico/tirosina; 4:1) (Sigma).
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Solución para la detención
30% de ácido tricloroacético, 0,2 M de pirofosfato de sodio (ambos de la firma Fisher).
Solución para el lavado
15% de ácido tricloroacético, 0,2 M de pirofosfato de sodio.
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Placas filtrantes
Millipore #MAFC NOB, GF/C placas de fibra de vidrio con 96 pocillos.
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Procedimiento A
Purificación de las proteínas
1. Las células Sf21 se infectaron con el virus recombinante a una m.o.i. (multiplicidad de la infección) de 5 partículas de virus/célula y se cultivaron durante 48 horas a 27ºC.
2. Todas las etapas se llevaron a cabo a 40ºC. Las células infectadas se separaron mediante centrifugación a 1.000xg y se lisaron durante 30 minutos a 40ºC con 1/10 de volumen de tampón para lisis y a continuación se centrifugaron durante 1 hora a 100.000xg. El sobrenadante se vertió entonces sobre un glutatión-sefarosa-ácido (Pharmacia) equilibrado con tampón para lisis y se lavó con 5 volúmenes del mismo tampón y a continuación con 5 volúmenes de tampón para el lavado. La proteína GST-KDR recombinante se eluyó con tampón para lavado/10 mM de glutationa reducida (Sigma) y se dializó contra tampón para diálisis.
Procedimiento B
Ensayo con la quinasa receptra del VEGF
1. Ensayo con 5 \mul de inhibidor o de controles combinados en 50% de DMSO.
2. Combinación con 35 \mul de la mezcla de la reacción, que contenía 5 \mul de 10x tampón de reacción, 5 \mul de
25 mM de ATP/10 \muCi[^{33} P]ATP (Amersham) y 5 \mul 10x de substrato.
3. Inicio de la reacción por adición de 10 \mul de KDR (25 nM) en el tampón para la dilución de los enzimas.
4. Mezcla e incubación durante 15 minutos a temperatura ambiente.
5. Detención de la reacción por adición de 50 \mul de solución para la detención.
6. Incubación durante 15 minutos a 4ºC.
7. Transferencia de alícuotas de 90 \mul a placas filtrantes.
8. Filtración por succión y 3 lavados con solución para lavado.
9. Adición de 30 \mul de cóctel para escintilación, obturación de la placa y cómputo en un contador de escintilaciones del tipo Wallac Microbeta.
Ensayo de mitogénesis en células endotélicas de las venas del cordón umbilical humano
La expresión de los receptores de VEGF, que transmiten las reacciones mitógenas hasta el factor de crecimiento, está limitada en su mayor parte a las células endotélicas vasculares. Células endotélicas de venas del cordón umbilical humano cultivadas (HUVECs) proliferan como reacción al tratamiento con VEGF y pueden emplearse como sistema de ensayo para la determinación cuantitativa de las acciones de los inhibidores de la quinasa KDR sobre la estimulación del VEGF. En el ensayo descrito se tratan capas unicelulares de HUVECs en reposo durante 2 horas como paso previo a la adición del VEGF o del factor de crecimiento del fibroblasto básico "basic fibroblast growth factor" (bFGF) con el constituyente o con el compuesto de ensayo. La reacción mitógena sobre VEGF o bFGF se determina con ayuda de la medida de la incorporación de [^{3}H]timidina en el DNA celular.
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Materiales HUVECs
Se adquieren, en la firma Clonetics Corp, HUVECs liofilizados como aislados de cultivo primario. Las células se mantienen en medio de crecimiento endotélico (Endothelial Growth Medium = EGM; Clonetics) y se emplean para el ensayo de la mitogenidad en los pasajes 3º a 7º.
Placas de cultivo
Placas de cultivo tisular de poliestireno con 96 pocillos NUNCLON (NUNC # 167008).
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Medio de ensayo
Medio de Dulbecco modificado según Eagle con 1 g/ml de glucosa (DMEM con bajo contenido en glucosa; Mediatech) plus 10% (v/v) de suero de vaca fetal (Clonetics).
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Compuestos de ensayo
Se lleva a cabo una serie de diluciones con las soluciones madre de trabajo de los compuestos de ensayo con dimetilsulfóxido al 100% (DMSO) hasta que sus concentraciones sean 400 veces mayores que la concentración final deseada. Las últimas diluciones (concentración 1x) se preparan inmediatamente antes de la adición a las células con medio de ensayo.
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Factores de crecimiento 10x
Se preparan, con el medio de ensayo soluciones del VEGF 165 humano (500 ng/ml; R&D Systems) y bFGF
(10 ng/ml; R&D Systems).
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10x [^{3}H]-timidina
Se diluye la [metil-^{3}H]-timidina (20 Ci/mmol; Dupont-NEN) con medio DMEM con bajo contenido en glucosa hasta 80 \muCi/ml.
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Medio para el crecimiento celular
Solución salina compensada de Hank (Mediatech) con 1 mg/ml de albúmina de suero de vaca (Boehringer-
Mannheim).
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Solución para la lisis celular
NaOH 1 N, 2% (p/v) de Na_{2}CO_{3}.
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Procedimiento 1
Capas monocelulares de HUVEC, mantenidas en EGM se cultivan por tratamiento con tripsina y se sobreinoculan con una densidad de 4.000 células por 100 \mul por medio de ensayo por pocillo en placas de 96 pocillos. El crecimiento de las células se detiene al cabo de 24 horas a 37ºC en una atmósfera húmeda que contiene un 5%
de CO_{2}.
Procedimiento 2
Se reemplaza el medio para la detención del crecimiento por 100 \mul de medio en ensayo, que contiene o bien el constituyente (0,25% [v/v] DMSO) o bien la concentración final deseada del compuesto de ensayo. Todas las determinaciones se repiten tres veces. Las células se incuban a continuación durante 2 horas a 37ºC/5% de CO_{2} de manera que los compuestos de ensayo puedan penetrar en las células.
Procedimiento 3
Después de un tratamiento previo durante 2 horas, las células se estimulan mediante la adición de 10 \mul de medio de ensayo, solución de VEGF 10x o solución de pFGF 10x por pocillo. Las células se incuban a continuación a 37ºC/5% de CO_{2}.
Procedimiento 4
Al cabo de 24 horas en presencia de los factores de crecimiento se combina con 10x [^{3}H]-timidina (10 \mul/po-
cillo).
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Procedimiento 5
Al cabo de tres días desde la combinación con la [^{3}H]-timidina se separa el medio mediante filtración por succión y las células se lavan dos veces con medio para el lavado celular (400 \mul/pocillo, a continuación 200 \mul/pocillo). Las células modificadas, desarrolladas, se solubilizan a continuación mediante adición de solución para la lisis celular
(100 \mul/pocillo) y calentamiento durante 30 minutos a 37ºC. Los lisados celulares se transfieren a tubitos de escintilación de 7 ml de vidrio, que contienen 150 \mul de agua. Se combinan con el cóctel de escintilación (5 ml/tubito), y se determina la radioactividad asociada con las células mediante espectroscopia líquida por escintilación.
Según estos ensayos, los compuestos de la fórmula I representan inhibidores del VEGF y por lo tanto son adecuados para inhibir la angiogénesis, tal como en el tratamiento de las enfermedades oculares, por ejemplo retinopatías diabéticas y para el tratamiento de carcinomas, por ejemplo tumores sólidos. Los compuestos presentes inhiben la mitogénesis estimulada por el VEGF de células endotélicas vasculares humanas cultivadas con valores HK50 de 0,01 hasta 5,0 \muM. Estos compuestos también son selectivos en comparación con las tirosina quinasas emparentadas (por ejemplo FGFR1 así como la familia Src; para la relación entre las quinasas Scr y las quinasas VEGFR véase la publicación de Eliceiri et al., Molecular Cell, tomo 4, páginas 915-924, Diciembre 1999).
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II.
El objeto de la invención está constituido, además, por el empleo de los compuestos según una o varias de las reivindicaciones 1 a 4 y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades y/o de malfunciones, que se caractericen por condiciones de estrés oxidantes, en un mamífero, que requiera un tratamiento de este tipo, administrándose por vía oral al mamífero, que requiera un tratamiento de este tipo, una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto según la reivindicación 1.
Las enfermedades y/o malfunciones están constituidas especialmente por pérdidas de memoria y por enfermedades neurodegenerativas.
Los compuestos según la invención encuentran por lo tanto aplicación para la neuroprotección.
El empleo de isoquercetina y de ácido ascórbico para los fines correspondientes está descrito en la publicación WO 00/54754.
El objeto de la invención está constituido, además, por el empleo de los compuestos según la invención y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables como aditivos para agentes comestibles.
El objeto de la invención está constituido, además, por una composición, que contiene ácido ascórbico, ascorbato o un derivado del ácido ascórbico y al menos un compuesto según la invención y/o su sal y solvato fisiológicamente aceptables.
III.
Los compuestos según la invención presentan propiedades antioxidantes como derivados flavonoides.
El empleo de los derivados de ectoína con agentes antioxidantes para la protección de las proteínas del estrés en la piel en formulaciones tópicas está descrito por ejemplo en la publicación WO 01/72263.
El objeto de la invención está constituido, por lo tanto, por el empleo de los compuestos según la invención y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables en formulaciones cosméticas, preferentemente en forma de formulación tópica.
El objeto de la invención está constituido, además, por el empleo de los compuestos según la invención y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables para la protección de las proteínas del estrés de la piel, preferentemente en forma de formulación tópica.
La obtención de la composición tópica se lleva a cabo llevándose hasta una forma de formulación adecuada al menos uno de los compuestos, empleados según la invención, en caso dado con productos auxiliares y/o excipientes. Los productos auxiliares y excipientes proceden del grupo de los excipientes, de los productos para la conservación y otros productos auxiliares usuales.
Las composiciones tópicas a base de al menos un compuesto, empleado según la invención, se empleará externamente sobre la piel o sobre los anexos de la piel.
Como formas de aplicación pueden citarse, por ejemplo, soluciones, suspensiones, emulsiones, pastas, ungüentos, geles, cremas, lociones, polvos, jabones, preparados de limpieza que contengan tensioactivos, aceites y nebulizados. Además de uno o varios compuestos, empleados según la invención, se añadirán a las preparaciones todos los tipos deseados de excipientes, de productos auxiliares y, en caso dado, de otros productos activos.
Los productos auxiliares preferentes proceden del grupo de los agentes para la conservación, los antioxidantes, los estabilizantes, los solubilizantes, las vitaminas, los colorantes y los mejoradores del sabor. Los ungüentos, las pastas, las cremas y los geles pueden contener, además de uno o varios compuestos, empleados según la invención, los excipientes usuales, por ejemplo grasas animales y vegetales, ceras, parafinas, almidones, tragacanto, derivados de la celulosa, polietilenglicoles, siliconas, bentonitas, ácido silícico, talco y óxido de cinc o mezclas de estos
productos.
Los polvos y los nebulizados pueden contener, además de uno o varios compuestos, empleados según la invención, los excipientes usuales, por ejemplo lactosa, talco, ácido silícico, hidróxido de aluminio, silicato de calcio y polvo de poliamida o mezclas de estos productos. Los nebulizados pueden contener, adicionalmente, los agentes propulsores usuales, por ejemplo hidrocarburos clorofluorados, propano/butano o dimetiléter.
Las soluciones y las emulsiones pueden contener además de uno o varios compuestos, empleados según la invención, los excipientes usuales, tales como disolventes, solubilizantes y emulsionantes, por ejemplo agua, etanol, isopropanol, carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bencílico, benzoato de bencilo, propilenglicol, 1,3-butilglicol, aceites, especialmente aceites de semillas de algodón, aceite de cacahuete, aceite de granos de maíz, aceite de oliva, aceite de ricino y aceite de sésamo, ésteres de ácidos grasos de glicerina, polietilenglicoles y ésteres de ácidos grasos del sorbitan o mezclas de estos productos.
Las suspensiones pueden contener además de uno o varios compuestos, empleados según la invención, los excipientes usuales tales como diluyentes líquidos, tales como por ejemplo agua, etanol o propilenglicol, agentes para la suspensión, por ejemplo alcoholes isoestearílicos etoxilados, ésteres de sorbita de óxido de polietileno y ésteres de sorbitan de óxidos de polioxietileno, celulosa microcristalina, metahidróxido de aluminio, bentonita, agar-agar y tragacanto o mezclas de estos productos.
Los jabones pueden contener, además de uno o varios compuestos, empleados según la invención, los excipientes usuales tales como sales alcalinas de ácidos grasos, sales de semiésteres de ácidos grasos, hidrolizados de proteína de ácidos grasos, isotionatos, lanolina, alcoholes grasos, aceites vegetales, extractos vegetales, glicerina, azúcares o mezclas de estos productos.
Los productos de limpieza, que contienen tensioactivos, pueden contener, además de uno o varios compuestos, empleados según la invención, los excipientes usuales, tales como sales de sulfatos de alcoholes grasos, étersulfatos de alcoholes grasos, semiésteres del ácido sulfosuccínico, hidrolizados de proteína de ácidos grasos, isotionatos, derivados de imidazolinio, taurato de metilo, sarcosinatos, étersulfatos de amidas de ácidos grasos, alquilamidobetaínas, alcoholes grasos, glicéridos de ácidos grasos, dietanolamidas de ácidos grasos, aceites vegetales y sintéticos, derivados de la lanolina, ésteres de glicerina de ácidos grasos, etoxilados o mezclas de estos productos.
Los aceites para el rostro y corporales pueden contener, además de uno o varios compuestos, empleados según la invención, los excipientes usuales, tales como aceites sintéticos, tales como ésteres de ácidos grasos, alcoholes grasos, aceites de silicona, aceites naturales, tales como aceites vegetales y extractos oleaginosos vegetales, aceites de parafina, aceites de lanolina y mezclas de estos productos.
Además las formas de aplicación cosméticas típicas son también barras para labios, barras para el cuidado de los labios, máscaras, preparados para línea de ojos, sombra de párpados, coloretes, maquillaje en polvo, en emulsión y a la cera así como preparados protectores contra el sol, para antes del baño de sol y para después del baño de sol.
Al menos un compuesto, empleado según la invención, está presente en la composición tópica en una cantidad de, preferentemente, 0,0001 hasta 50% en peso, de forma especialmente preferente desde 0,001 hasta 10% en peso, de forma especialmente preferente desde 0,1 hasta 1% en peso, referido a la composición.
Análisis para el ensayo de las propiedades captadoras de radicales o bien del efecto antioxidante
El ensayo sirve para detectar las propiedades antioxidantes, o captadoras de radicales, de una substancia o de un extracto. Para determinar esta propiedad, se deja reaccionar la substancia con el radical estable DPPH^{*} (hidrato de 2,2-difenil-1-picrilhidrazilo) en solución etanólica. La reducción del DPPH^{*} se sigue por medio de la disminución de la extinción del radical a las longitudes de onda características. En su forma en estado de radical, el DPPH^{*} absorbe a 515 nm, por reducción debida a un antioxidante (AOX) disminuye la extinción. Para cada antioxidante se ensayan concentraciones diferentes (expresado como la proporción en moles de antioxidante/moles de DPPH^{*}). La disminución de la extinción a 515 nm se determina al cabo de 1 segundo, de 2 minutos, de 10 minutos y a continuación cada 10 minutos, hasta que la extinción permanezca constante. La concentración inicial exacta del DPPH^{*} se determina con ayuda del coeficiente de extinción. Para cada concentración de antioxidante se determina la concentración remanente de DPPH^{*} como porcentaje de la concentración inicial y se representa frente a la proporción molar de antioxidante con DPPH^{*}. La actividad contra los radicales se define como la proporción del antioxidante que reduzca la concentración del DPPH al 50 por ciento de la cantidad inicial (concentración eficaz = EC_{50}). Cuanto menor sea este valor tanto mayor será la actividad contra los radicales. El comportamiento a la reacción de los antioxidantes individuales es muy variable. Puede distinguirse entre substancias de reacción rápida, media y lenta, pudiéndose encontrar entre 30 segundos y 12 horas el momento en que se alcance el estado de reposo (steady-state).
En lo que antecede y a continuación, todas las temperaturas se indican en ºC. En los ejemplos siguientes, "elaboración usual" significa: en caso necesario, se añade agua, en caso necesario se ajusta a valores de pH, comprendidos entre 2 y 10, según constitución del producto final, se extrae con acetato de etilo o con diclorometano, se separa, se seca la fase orgánica sobre sulfato sódico, se concentra por evaporación, y se purifica mediante cromatografía sobre gel de sílice y/o mediante cristalización. Valores Rf sobre gel de sílice; eluyente; acetato de etilo/metanol ).9:1.
Espectrometría de masas (MS): El (ionización por choque electrónico) M^{+}
FAB (bombardeo atómico rápido -Fast Atom Bombardement-) (M+H)^{+}
ESI (ionización con electrospray) (M+H)^{+} (cuando no se diga otra cosa)
Ejemplo 1
Obtención de la 6-hidroxi-2-[3-(4-terc.-butilfenil)-[1,2,4]-oxadiazol-5-il]-cromona
1.1 Se disuelven 3,25 de sodio, en porciones, bajo agitación, en 300 ml de etanol. A continuación se añade, gota a gota, una solución de 4,3 g de la 2,5-dihidroxiacetofenona y 15,5 ml de oxalato de dietilo en 25 ml de etanol. A continuación se calienta la mezcla de la reacción durante 3 horas a 80ºC. Se refrigera a temperatura ambiente y se añaden, gota a gota, 10 ml de HCl al 32%. Se calienta durante 30 minutos a 90ºC, se refrigera, y se elimina el disolvente. Tras elaboración usual se obtienen 5,9 g de la 6-hidroxi-2-etoxicarbonil-cromona ("AA").
1.2 Se calienta una solución de 2,0 g de "AA" en 30 ml de acetato de etilo y 20 ml de HCl al 32% bajo reflujo. Se refrigera, se vierte sobre hielo, se separa por filtración y se recristaliza en etanol.
Se obtienen 1,5 g de la cromona del ácido 6-hidroxi-2-carboxílico ("AB").
1.3 Se añaden a una solución de 150 mg de "AB" en 10 ml de THF, bajo atmósfera de nitrógeno y a -10ºC, 0,51 ml de trietilamina y 0,14 ml de cloroformiato de isobutilo. Se agita durante otra hora más y a continuación se añade una solución de 280 mg de la 4-terc.-butilbenzamidoxima en THF. Se agita durante 30 minutos a temperatura ambiente, durante 90 minutos bajo reflujo, se elabora de manera usual y se obtienen 123 g de la 6-hidroxi-2-[3-(4-terc.-butilfenil)-[1,2,4]-oxadiazol-5-il]-cromona; EI MS (m/z) 362 (M^{+}), 347 (M-Me^{+})
UV-vis (^{i}PrOH): \lambda_{max} (Abs): 359 (0,12), 262,50 (1,02), 203,50 (1,08)
De manera análoga se obtiene el compuesto constituido por la 7-hidroxi-2-[3-(4-terc.-butilfenil)-[1,2,4]-oxadiazol-5-il]-cromona.
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Ejemplo 2
Se manera análoga a la del ejemplo 1 se obtiene, mediante reacción de "AB" con la 2-piridinamidoxima, el compuesto constituido por la 6-hidroxi-2-[3-(piridin-2-il)-[1,2,4]-oxadiazol-5-il]-cromona.
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Ensayo farmacológico
El compuesto constituido por la 6-hidroxi-2-[3-(4-terc.-butilfenil)-[1,2,4]-oxadiazol-5-il]-cromona es un mal inhibidor de PKB a escala micromolar (IC_{50} = > 30 \mumol) y es un buen inhibidor de Tie2 (IC_{50} = > 10 \mumol).
Los ejemplos siguientes se refieren a preparaciones farmacéuticas:
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Ejemplo A
Viales para inyección
Se ajusta una disolución de 100 g de un producto activo de la fórmula I y 5 g de hidrógenofosfato disódico en 3 litros de agua bidestilada a pH 6,5 con ácido clorhídrico 2 n, se filtra en medio estéril, se envasa en viales para inyección, se liofiliza bajo condiciones estériles, y se cierran en medio estéril. Cada vial para inyección contiene 5 mg de producto activo.
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Ejemplo B
Supositorios
Se funde una mezcla de 20 g de un producto activo de la fórmula I con 100 g de lecitina de soja y 1.400 g de manteca de cacao, se vierte en moldes, y se deja enfriar. Cada supositorio contiene 20 mg de producto activo.
Ejemplo C
Solución
Se prepara una disolución a partir de 1 g de un producto activo de la fórmula I, 9,38 g de NaH_{2}PO_{4}. 2 H_{2}O,
28,48 g de Na_{2}HPO_{4} . 12 H_{2}O, y 0,1 g de cloruro de benzalconio en 940 ml de agua bidestilada. Se ajusta a pH 6,8, se enrasa a 1 litro, y se esteriliza mediante irradiación. Esta disolución puede ser empleada en forma de colirio.
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Ejemplo D
Ungüento
Se mezcla 500 mg de un producto activo de la fórmula I con 99,5 g de vaselina bajo condiciones asépticas.
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Ejemplo E
Tabletas
Se prensa, de manera usual, una mezcla de 1 kg de un producto activo de la fórmula I, 4 kg de lactosa, 1,2 kg de almidón de patata, 0,2 kg de talco y 0,1 kg de estearato de magnesio, para dar tabletas, de tal manera, que cada tableta contenga 10 mg de producto activo.
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Ejemplo F
Grageas
Se prensan tabletas de manera análoga a la del ejemplo E, y a continuación se recubren, de manera usual, con un revestimiento de sacarosa, almidón de patata, talco, tragacanto y colorante.
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Ejemplo G
Cápsulas
Se cargan 2 kg de producto activo de la fórmula I, de manera usual, en cápsulas de gelatina dura, de tal manera, que cada cápsula contenga 20 mg de producto activo.
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Ejemplo H
Ampollas
Se filtra de manera estéril, una solución de 1 kg de producto activo de la fórmula I en 60 litros de agua bidestilada, se envasa en ampollas, se liofiliza bajo condiciones estériles y se cierran de manera estéril. Cada ampolla contiene
10 mg de producto activo.

Claims (32)

1. Compuestos de la fórmula I
13
en la que
R {}\hskip0,55cmsignifica A, 14
X
significa H, -OH, -OA, fenoxi, Ar, -O-CO-A, SO_{3}H, SO_{3}A, -OSO_{3}H, -OSO_{3}A, -OSO_{2}A, SO_{2}A, Hal, COOH, COOA, CONH_{2}, NHSO_{2}A, COA, CHO o SO_{2}NH_{2},
dos restos X significan conjuntamente también metilendioxi o etilendioxi,
R^{1}
significa H, A, -OH, -OA o Hal,
dos restos R^{1} significan conjuntamente también metilendioxi o etilendioxi,
Y
significa CH o N,
Ar
significa fenilo insubstituido o substituido una, dos o tres veces por A,
A
significa alquilo no ramificado o ramificado con 1 a 10 átomos de carbono, pudiendo estar reemplazados de 1 a 7 átomos de H por F,
Hal
significa F, Cl, Br o I,
n
significa 1, 2, 3 o 4,
m
significa 1, 2, 3, 4 o 5,
así como sus derivados, solvatos y estereoisómeros empleables farmacéuticamente, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones.
2. Compuestos según la reivindicación 1,
en los que
X
significa H, -OH, -OA,
dos restos X significan conjuntamente también metilendioxi o etilendioxi, así como sus derivados, solvatos y estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones.
3. Compuestos según las reivindicaciones 1 o 2,
en los que
R {}\hskip0,55cmsignifica A o 15
X
significa H, -OH, -OA,
significando dos restos X conjuntamente también metilendioxi o etilendioxi; así como sus derivados, solvatos y estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones.
4. Compuestos según la reivindicación 1, de acuerdo con la reivindicación 1,
en los que
R {}\hskip0,55cmsignifica A, 16
X
significa H, -OH o -OA,
Y
significa N,
R^{1}
significa A,
A
significa alquilo no ramificado o ramificado con 1 a 6 átomos de carbono,
n
significa 1, 2, 3 o 4,
m
significa 1, 2, 3 o 4,
así como sus derivados, solvatos y estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones.
5. Compuestos según la reivindicación 1, de acuerdo con la reivindicación 1,
donde
R {}\hskip0,55cmsignifica 17
X
significa H, -OH o -OA,
R^{1}
significa A,
A
significa alquilo no ramificado o ramificado con 1 a 6 átomos de carbono,
n
significa 1, 2, 3 o 4,
m
significa 1, 2, 3 o 4,
así como sus derivados, solvatos y estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones.
6. Compuestos según la reivindicación 1, elegidos entre el grupo formado por
6-hidroxi-2-[3-(4-terc.-butilfenil)-[1,2,4]-oxadiazol-5-il]-cromona,
7-hidroxi-2-[3-(4-terc.-butilfenil)-[1,2,4]-oxadiazol-5-il]-cromona,
6-hidroxi-2-[3-(piridin-2-il)-[1,2,4]-oxadiazol-5-il]-cromona,
así como por sus derivados, solvatos y estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones.
7. Procedimiento para la obtención de los compuestos de la fórmula I, según las reivindicaciones 1 a 6, así como sus derivados, solvatos y estereoisómeros farmacéuticamente empleables, caracterizado porque
a) en primer lugar se hace reaccionar un compuesto de la fórmula II
18
en la que
X y n tienen el significado indicado en la reivindicación 1,
con un compuesto de la fórmula III
19
en la que
A significa alquilo con 1, 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono,
para dar un compuesto de la fórmula IV
20
en la que
n tiene el significado indicado en la reivindicación 1, y
A significa alquilo con 1, 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono,
b) a continuación se hidroliza el éster IV para dar el ácido carboxílico V
21
donde
X y n tienen el significado indicado en la reivindicación 1,
c) a continuación se transforma el ácido carboxílico V en el correspondiente cloruro de acilo VI
22
donde
X y n tienen el significado indicado en la reivindicación 1,
y a continuación se hace reaccionar bien el compuesto de la fórmula VI con un compuesto de la fórmula VII
\vskip1.000000\baselineskip
23
en la que
R tiene el significado indicado en la reivindicación 1,
para dar un compuesto de la fórmula I,
o bien se hace reaccionar el compuesto de la fórmula V con un compuesto de la fórmula VII,
en la que R tiene el significado indicado en la reivindicación 1,
en una reacción en un solo recipiente, con dos etapas, para dar un compuesto de la fórmula I,
y/o
d) se transforma una base o un ácido de la fórmula I en una de sus sales.
8. Compuestos de la fórmula I según una o varias de las reivindicaciones 1 a 6 como inhibidores de la tirosina quinasa.
9. Medicamentos, que contienen al menos un compuesto de la fórmula I según una o varias de las reivindicaciones 1 a 6 y/o sus derivados, solvatos y estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones, así como en caso dado excipientes y/o productos auxiliares.
10. Empleo de los compuestos según una o varias de las reivindicaciones 1 a 6 y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de tumores sólidos en un mamífero, que requiera un tratamiento de este tipo, administrándose al mamífero una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto según la reivindicación 1.
11. Empleo según la reivindicación 10, en el que el tumor sólido procede del grupo formado por tumor cerebral, tumor del tracto urogenital, tumor del sistema linfático, tumor de estómago, tumor de faringe y tumor pulmonar.
12. Empleo según la reivindicación 10, en el que el tumor sólido procede del grupo formado por las leucemias monocíticas, el adenocarcinoma pulmonar, el carcinoma pulmonar microcelular, el cáncer de páncreas, el glioblastoma y el carcinoma de mama.
13. Empleo de los compuestos según una o varias de las reivindicaciones 1 a 6 y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad, que participa en la angiogénesis en un mamífero, que requiere un tratamiento de este tipo, administrándose al mamífero, que requiere un tratamiento de este tipo, una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto según la reivindicación 1.
14. Empleo según la reivindicación 13, en el que la enfermedad está constituida por una enfermedad ocular.
15. Empleo de los compuestos según una o varias de las reivindicaciones 1 a 6 y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de la vascularización de la retina en un mamífero, que requiera un tratamiento de este tipo, administrándose al mamífero, que requiera un tratamiento de este tipo, una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto según la reivindicación 1.
16. Empleo de los compuestos según una o varias de las reivindicaciones 1 a 6 y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de la retinopatía diabética en un mamífero, que requiera un tratamiento de este tipo, administrándose al mamífero, que requiera un tratamiento de este tipo, una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto según la reivindicación 1.
17. Empleo de los compuestos según una o varias de las reivindicaciones 1 a 6 y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de la degeneración de la mácula dependiente de la edad en un mamífero, que requiera un tratamiento de este tipo, administrándose al mamífero, que requiera un tratamiento de este tipo, una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto según la reivin-
dicación 1.
18. Empleo de los compuestos según una o varias de las reivindicaciones 1 a 6 y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades inflamatorias en un mamífero, que requiera un tratamiento de este tipo, administrándose al mamífero, que requiera un tratamiento de este tipo, una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto según la reivindicación 1.
19. Empleo de los compuestos según una o varias de las reivindicaciones 1 a 6 y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades inflamatorias, procediendo la enfermedad inflamatoria del grupo formado por la artritis reumatoide, la psoriasis, la dermatitis por contacto y el tipo tardío de la reacción de hipersensibilidad.
20. Empleo de los compuestos según una o varias de las reivindicaciones 1 a 6 y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad dependiente de la tirosina quinasa o bien de un padecimiento dependiente de la tirosina quinasa en un mamífero, que requiera un tratamiento de este tipo, administrándose al mamífero, que requiera un tratamiento de este tipo, una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto según la reivindicación 1.
21. Empleo de los compuestos según una o varias de las reivindicaciones 1 a 6 y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de patologías óseas en un mamífero, que requiera un tratamiento de este tipo, procediendo las patologías óseas del grupo formado por el osteosarcoma, la osteoartritis y la raquitis, caracterizado porque se administra una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto según la reivindicación 1.
22. Medicamento que contiene al menos un compuesto de la fórmula I según una o varias de las reivindicaciones 1 a 6 y/o de sus derivados, solvatos y estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones, y al menos otro producto activo para medicamentos.
23. Estuche (kit), constituido por envases separados de
(a)
una cantidad activa de un compuesto de la fórmula I según una o varias de las reivindicaciones 1 a 6 y/o de sus derivados, solvatos y estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones, y
(b)
una cantidad activa de otro producto activo para medicamentos.
24. Empleo de los compuestos según una o varias de las reivindicaciones 1 a 6 y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de tumores sólidos en un mamífero, que requiera un tratamiento de este tipo, caracterizado porque se administra una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto según la reivindicación 1, en combinación con un compuesto del grupo formado por 1) modulador del receptor de estrógenos, 2) modulador del receptor de andrógenos, 3) modulador del receptor retinoide, 4) citotóxicos, 5) agentes antiproliferantes, 6) inhibidores de la fenil-proteínatransferasa, 7) inhibidores de la HMG-CoA-reductasa, 8) inhibidores de la HIV-proteasa, 9) inhibidores de la transcriptasa reversa así como 10) otros inhibidores de la angiogénesis.
25. Empleo de los compuestos según una o varias de las reivindicaciones 1 a 6 y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de tumores sólidos en un mamífero, que requiera un tratamiento de este tipo, caracterizado porque se administra una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto según la reivindicación 1, en combinación con un radioterapia y con un compuesto del grupo formado por 1) modulador del receptor de estrógenos, 2) modulador del receptor de andrógenos, 3) modulador del receptor retinoide, 4) citotóxicos, 5) agentes antiproliferantes, 6) inhibidores de la fenil-proteínatransferasa, 7) inhibidores de la HMG-CoA-reductasa, 8) inhibidores de la HIV-proteasa, 9) inhibidores de la transcriptasa reversa así como 10) otros inhibidores de la angiogénesis.
26. Empleo de los compuestos según una o varias de las reivindicaciones 1 a 6 y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades y/o de malfunciones, que se caractericen por condiciones de estrés oxidantes, en un mamífero, que requiera un tratamiento de este tipo administrándose por vía oral al mamífero, que requiera un tratamiento de este tipo, una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto según la reivindicación 1.
27. Empleo según la reivindicación 26, en el que las enfermedades y/o las malfunciones están constituidas por pérdidas de memoria y por enfermedades neurodegenerativas.
28. Empleo de los compuestos según una o varias de las reivindicaciones 1 a 6 y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables en forma de aditivos para artículos comestibles.
29. Empleo de los compuestos según una o varias de las reivindicaciones 1 a 6 y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables en formulaciones cosméticas.
30. Empleo según la reivindicación 29 para la protección de las proteínas del estrés de la piel.
31. Empleo según las reivindicaciones 29 o 30 en forma de una composición tópica.
32. Empleo según las reivindicaciones 29, 30 o 31, caracterizado porque se presenta al menos un compuesto empleado en una composición tópica en una cantidad desde un 0,0001 hasta un 50% en peso, referido a la composición.
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Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0011903D0 (en) * 2000-05-18 2000-07-05 Astrazeneca Ab Combination chemotherapy
WO2006071035A1 (en) * 2004-12-31 2006-07-06 Lg Life Sciences, Ltd. Novel ([1,3]thiazolo[5,4-b]pyridin-2-yl)-2-carboxamide derivatives
US8168662B1 (en) 2006-11-06 2012-05-01 Poniard Pharmaceuticals, Inc. Use of picoplatin to treat colorectal cancer
US8178564B2 (en) * 2006-11-06 2012-05-15 Poniard Pharmaceuticals, Inc. Use of picoplatin to treat colorectal cancer
US8168661B2 (en) * 2006-11-06 2012-05-01 Poniard Pharmaceuticals, Inc. Use of picoplatin to treat colorectal cancer
US8173686B2 (en) 2006-11-06 2012-05-08 Poniard Pharmaceuticals, Inc. Use of picoplatin to treat colorectal cancer
US20110033528A1 (en) * 2009-08-05 2011-02-10 Poniard Pharmaceuticals, Inc. Stabilized picoplatin oral dosage form
TW200916094A (en) * 2007-06-27 2009-04-16 Poniard Pharmaceuticals Inc Stabilized picoplatin dosage form
US20100260832A1 (en) * 2007-06-27 2010-10-14 Poniard Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy for ovarian cancer
TW200920347A (en) * 2007-07-16 2009-05-16 Poniard Pharmaceuticals Inc Oral formulations for picoplatin
AU2009210654A1 (en) * 2008-02-08 2009-08-13 Poniard Pharmaceuticals, Inc. Use of picoplatin and bevacizumab to treat colorectal cancer
US10174012B2 (en) 2014-11-04 2019-01-08 The University Of Kansas LKB1-AMPK activators for therapeutic use in polycystic kidney disease
CN107216315B (zh) * 2017-07-05 2020-03-17 盐城师范学院 黄酮咪唑类化合物及其制备方法
WO2020221074A1 (zh) * 2019-04-30 2020-11-05 南京海璞医药科技有限公司 一种含稠环的化合物、其应用及含其的药物组合物
CN113563321A (zh) * 2021-07-26 2021-10-29 江西科技师范大学 一种色酮联噁二唑化合物及其制备方法和应用

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR347F (es) * 1968-12-19 1971-03-31
GB1447479A (en) * 1972-12-15 1976-08-25 Fisons Ltd Chromone carboxamido tetrazoles
GB1447480A (en) * 1972-12-15 1976-08-25 Fisons Ltd Chromone and thiachromone carboxamide tetrazoles
JPH0753725B2 (ja) * 1987-10-08 1995-06-07 富山化学工業株式会社 ４ｈ―１―ベンゾピラン―４―オン誘導体およびその塩、それらの製造法並びにそれらを含有する抗炎症剤
RU2156250C2 (ru) * 1995-04-24 2000-09-20 Новартис Аг Производные хромона, способ их получения и фармацевтическая композиция
CA2182932A1 (en) * 1995-08-10 1997-02-11 Koju Watanabe Chromone derivative, process for preparing same and pharmaceutical composition
DE60023920T2 (de) * 1999-08-27 2006-07-20 Sugen, Inc., South San Francisco Phosphatmimetika und Verfahren zur Behandlung mit Phosphataseinhibitoren HIBITOREN
US7041685B2 (en) * 2001-06-08 2006-05-09 Cytovia, Inc. Substituted 3-aryl-5-aryl-[1,2,4]-oxadiazoles and analogs as activators of caspases and inducers of apoptosis and the use thereof

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